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1、(10)申请公布号 CN 102221527 A (43)申请公布日 2011.10.19 CN 102221527 A *CN102221527A* (21)申请号 201110063748.2 (22)申请日 2011.03.17 G01N 21/31(2006.01) C12Q 1/42(2006.01) (71)申请人 河南农业大学 地址 450002 河南省郑州市农业路 63 号河 南农业大学牧医工程学院 (72)发明人 韩立强 庞坤 (54) 发明名称 一种乳澄清剂的制备方法及其应用 (57) 摘要 本发明公开了一种乳澄清剂的制备方法及其 应用， 该方法是 ： 将重量份数为 40-。
2、50 份的 0.1 当 量氢氧化钠、 40-50 份的亲脂性溶剂、 80-100 份的 溶解剂、 40-50 份的表面活性剂放入搅拌机中均 匀混合， 制得乳澄清剂， 取试管加入苯酚标准溶液 或牛奶制品， 其次在试管中加入 4-6ml 的碳酸盐 缓冲液， 然后在试管中加入0.05-0.2ml的2， 6-二 氯醌氯亚胺溶液和1-3 滴的 CuSO4溶液， 再在试管 中加入4-6ml制备好的澄清剂， 在36-38的水浴 锅中加热 4-6min， 最后在 655nm 的强光下检测乳 制品的吸光度， 完成乳制品碱性磷酸酶活性的检 测。本发明方便快捷， 简单， 工作效率极高。 (51)Int.Cl. (1。
3、9)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 3 页 CN 102221538 A1/1 页 2 1. 一种乳澄清剂的制备方法及其应用， 其特征在于， 该方法首先制备乳澄清剂， 其次利 用制备的乳澄清剂对乳制品的碱性磷酸酶活性进行检测， 具体方法是 ： 首先， 将重量份数为 40-50 份的 0.1 当量氢氧化钠、 40-50 份的亲脂性溶剂、 80-100 份 的溶解剂、 40-50 份的表面活性剂放入搅拌机中慢慢搅拌， 使其均匀混合， 稳定后， 即制得乳 澄清剂 ； 然后， (1) 首先取试管加入苯酚标准溶液或牛奶制品 ； (2) 其次在试管中加入 4。
4、-6ml 的 碳酸盐缓冲液 ； (3) 然后在试管中加入 0.05-0.2ml 的 2， 6- 二氯醌氯亚胺溶液和 1-3 滴的 CuSO4溶液， 混合均匀 ； (4)再在试管中加入4-6ml制备好的澄清剂， 混合均匀， 在36-38的 水浴锅中加热4-6min ； (5)最后在655nm的强光下检测乳制品的吸光度， 即完成乳制品碱性 磷酸酶活性的检测。 2. 如权利要求 1 所述的一种乳澄清剂的制备方法及其应用， 其特征在于 ： 所述亲脂性 溶剂为 2- 丁酮。 3. 如权利要求 1 所述的一种乳澄清剂的制备方法及其应用， 其特征在于 ： 所述溶解剂 为聚乙二醇辛基苯基醚。 4. 如权利要求。
5、 1 所述的一种乳澄清剂的制备方法及其应用， 其特征在于 ： 所述表面活 性剂为 1十二烷基硫酸钠溶液。 权 利 要 求 书 CN 102221527 A CN 102221538 A1/3 页 3 一种乳澄清剂的制备方法及其应用 技术领域 0001 本发明涉及一种澄清剂的制备方法， 特别涉及一种乳澄清剂的制备方法及其应 用。 背景技术 0002 在乳制品碱性磷酸酶的检测中， 由于牛奶等乳制品成分复杂， 含有乳蛋白、 乳脂肪 与乳糖等物质， 因此具有很高的黏度与密度， 呈现一种乳白色的悬浊液， 国标法检测碱性磷 酸酶 ( 生鲜牛乳及其制品中碱性磷酸酶活度的测定方法 NY/T 801-2004)。
6、， 采用碱性磷酸酶 催化生成苯酚与 2， 6- 二氯醌氯亚胺溶液反应生成蓝色物质， 在 655nm 有强烈光吸收， 而要 对其进行吸光度检测， 就需要加入正丁醇萃取， 还有离心分层、 过滤等过程， 然后在 655nm 的强烈光下进行比色， 这种方法虽有正丁醇萃取， 但在检测过程中， 由于易与乳脂肪反应发 生乳化， 所以需要离心分层、 过滤等步骤才能把上清液分离出来， 同时需要离心机等设备， 离心与过滤等步骤， 这种方法反应速度慢， 条件高， 时间长。 发明内容 0003 为了克服上述现有技术存在的缺陷， 本发明提供一种乳澄清剂的制备方法及其应 用， 本发明方法特别是采用亲脂性溶剂和表面活性剂来。
7、溶解乳制品胶体的成分， 降低牛奶 等乳制品黏度， 使其变得澄清透明， 去除了乳制品中蛋白与脂肪的影响， 减小了在可见光区 的吸收值， 可以直接进行分光光度计检测， 本发明方法简单， 能直接从乳制品中检测碱性磷 酸酶。 0004 本发明方法首先制备乳澄清剂， 其次利用制备的乳澄清剂对乳制品的碱性磷酸酶 活性进行检测。 0005 制备乳澄清剂的具体方法是 ： 将重量份数为 40-50 份的 0.1 当量氢氧化钠、 40-50 份的亲脂性溶剂、 80-100 份的溶解剂、 40-50 份的表面活性剂放入搅拌机中慢慢搅拌， 使其 均匀混合， 稳定后， 即制得乳澄清剂。 0006 所述亲脂性溶剂为 2-。
8、 丁酮， 稳定， 易溶于水。 0007 所述溶解剂为聚乙二醇辛基苯基醚 (TritonX-100)， 有活性作用。 0008 所述表面活性剂为 1十二烷基硫酸钠溶液 (SDS)。 0009 检测乳制品碱性磷酸酶活性的具体方法是 ： (1) 首先取试管加入苯酚标准溶 液或牛奶制品 ； (2) 其次在试管中加入 4-6ml 的碳酸盐缓冲液 ； (3) 然后在试管中加入 0.05-0.2ml的2， 6-二氯醌氯亚胺溶液和1-3滴的CuSO4溶液， 混合均匀 ； (4)再在试管中加 入4-6ml制备好的澄清剂， 混合均匀， 在36-38的水浴锅中加热4-6min ； (5)最后在655nm 的强光下检。
9、测乳制品的吸光度， 即完成乳制品碱性磷酸酶活性的检测。 0010 本发明方法能够降低乳制品的黏度与稳定性， 快速使其颜色澄清透明， 从而实现 乳制品中碱性磷酸酶的快速检测， 本发明制备的乳澄清剂还可以在其他类似牛奶物质的检 测中发挥作用。 说 明 书 CN 102221527 A CN 102221538 A2/3 页 4 0011 本发明的有益效果是 ： 采用本发明的乳澄清剂， 可以直接破坏乳制品中的蛋白质 胶粒， 溶解乳脂肪， 使乳制品溶液澄清透明， 与国标法相比， 采用本发明方法检测乳制品的 碱性磷酸酶含量， 方便快捷， 简单， 不用采用离心机等设备， 不用过滤等步骤， 节约时间约 20。
10、-30 分钟， 极大提高了工作效率。 具体实施方式 ： 0012 为了使本发明的技术手段、 创作特征与达成目的易于明白理解， 以下结合具体实 施例进一步阐述本发明 0013 实施例 1. 0014 将 40KG 的 0.1 当量氢氧化钠、 40KG 的 2- 丁酮、 80KG 的 TritonX-100、 40KG 的 1 十二烷基硫酸钠溶液 (SDS) 放入搅拌机中慢慢搅拌， 使其均匀混合， 稳定后， 即制得乳澄清 剂。 0015 (1) 首先取试管加入苯酚标准溶液 ； (2) 其次在试管中加入 4ml 的碳酸盐缓冲液 ； (3) 然后在试管中加入 0.05ml 的 2， 6- 二氯醌氯亚胺。
11、溶液和 1 滴的 CuSO4溶液， 混合均匀 ； (4) 再在试管中加入 4ml 制备好的澄清剂， 混合均匀， 在 36的水浴锅中加热 4min ； (5) 最 后在 655nm 的强光下检测乳制品的吸光度， 即完成乳制品碱性磷酸酶活性的检测。 0016 实施例 2. 0017 将 50KG 的 0.1 当量氢氧化钠、 50KG 的 2- 丁酮、 100KG 的 TritonX-100、 50KG 的 1 十二烷基硫酸钠溶液 (SDS) 放入搅拌机中慢慢搅拌， 使其均匀混合， 稳定后， 即制得乳澄清 剂。 0018 (1) 首先取试管加入苯酚标准溶液 ； (2) 其次在试管中加入 5ml 的碳。
12、酸盐缓冲液 ； (3) 然后在试管中加入 0.1ml 的 2， 6- 二氯醌氯亚胺溶液和 2 滴的 CuSO4溶液， 混合均匀 ； (4) 再在试管中加入 5ml 制备好的澄清剂， 混合均匀， 在 37的水浴锅中加热 5min ； (5) 最 后在 655nm 的强光下检测乳制品的吸光度， 即完成乳制品碱性磷酸酶活性的检测。 0019 实施例 3. 0020 将 45KG 的 0.1 当量氢氧化钠、 45KG 的 2- 丁酮、 90KG 的 TritonX-100、 45KG 的 1 十二烷基硫酸钠溶液 (SDS) 放入搅拌机中慢慢搅拌， 使其均匀混合， 稳定后， 即制得乳澄清 剂。 0021。
13、 (1) 首先取试管加入苯酚标准溶液 ； (2) 其次在试管中加入 6ml 的碳酸盐缓冲液 ； (3) 然后在试管中加入 0.2ml 的 2， 6- 二氯醌氯亚胺溶液和 3 滴的 CuSO4溶液， 混合均匀 ； (4) 再在试管中加入 6ml 制备好的澄清剂， 混合均匀， 在 38的水浴锅中加热 6min ； (5) 最 后在 655nm 的强光下检测乳制品的吸光度， 即完成乳制品碱性磷酸酶活性的检测。 0022 实施例 4. 0023 将 42KG 的 0.1 当量氢氧化钠、 42KG 的 2- 丁酮、 84KG 的 TritonX-100、 42KG 的 1 十二烷基硫酸钠溶液 (SDS)。
14、 放入搅拌机中慢慢搅拌， 使其均匀混合， 稳定后， 即制得乳澄清 剂。 0024 (1) 首先取试管加入苯酚标准溶液 ； (2) 其次在试管中加入 4.5ml 的碳酸盐缓冲 液 ； (3) 然后在试管中加入 0.08ml 的 2， 6- 二氯醌氯亚胺溶液和 2 滴的 CuSO4溶液， 混合均 匀 ； (4) 再在试管中加入 4.5ml 制备好的澄清剂， 混合均匀， 在 36的水浴锅中加热 5min ； 说 明 书 CN 102221527 A CN 102221538 A3/3 页 5 (5) 最后在 655nm 的强光下检测乳制品的吸光度， 即完成乳制品碱性磷酸酶活性的检测。 0025 实施。
15、例 5. 0026 将 46KG 的 0.1 当量氢氧化钠、 46KG 的 2- 丁酮、 92KG 的 TritonX-100、 46KG 的 1 十二烷基硫酸钠溶液 (SDS) 放入搅拌机中慢慢搅拌， 使其均匀混合， 稳定后， 即制得乳澄清 剂。 0027 (1) 首先取试管加入苯酚标准溶液 ； (2) 其次在试管中加入 5.5ml 的碳酸盐缓冲 液 ； (3) 然后在试管中加入 0.15ml 的 2， 6- 二氯醌氯亚胺溶液和 3 滴的 CuSO4溶液， 混合均 匀 ； (4) 再在试管中加入 5.5ml 制备好的澄清剂， 混合均匀， 在 37的水浴锅中加热 6min ； (5) 最后在 。
16、655nm 的强光下检测乳制品的吸光度， 即完成乳制品碱性磷酸酶活性的检测。 0028 实施例 6. 0029 将 48KG 的 0.1 当量氢氧化钠、 48KG 的 2- 丁酮、 96KG 的 TritonX-100、 48KG 的 1 十二烷基硫酸钠溶液 (SDS) 放入搅拌机中慢慢搅拌， 使其均匀混合， 稳定后， 即制得乳澄清 剂。 0030 (1) 首先取试管加入苯酚标准溶液 ； (2) 其次在试管中加入 6ml 的碳酸盐缓冲液 ； (3)然后在试管中加入0.2ml的2， 6-二氯醌氯亚胺溶液和2滴的CuSO4溶液， 混合均匀 ； (4) 再在试管中加入 5.5ml 制备好的澄清剂， 混合均匀， 在 37的水浴锅中加热 6min ； (5) 最后 在 655nm 的强光下检测乳制品的吸光度， 即完成乳制品碱性磷酸酶活性的检测。 0031 以上显示和描述了本发明的基本原理、 主要特征和本发明的优点。本行业的技术 人员应该了解， 本发明不受上述实施例的限制， 上述实施例和说明书中描述的只是说明本 发明的原理， 在不脱离本发明精神和范围的前提下本发明还会有各种变化和改进， 这些变 化和改进都落入要求保护的本发明范围内。 本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其 等同物界定。 说 明 书 CN 102221527 A 。