含1，2，4噁二唑杂环Α，Β不饱和酮类化合物.pdf

摘要
申请专利号：	CN201010215382.1	申请日：	2010.07.02
公开号：	CN101891697A	公开日：	2010.11.24
当前法律状态：	授权	有效性：	有权
法律详情：	授权\|\|\|实质审查的生效IPC(主分类):C07D 271/06申请日:20100702\|\|\|公开
IPC分类号：	C07D271/06; A61K31/4245; A61P35/02	主分类号：	C07D271/06
申请人：	山东大学
发明人：	赵桂森; 杨新美; 李红彩; 李婷; 刘古月; 张林娜
地址：	250100 山东省济南市历城区山大南路27号
优先权：
专利代理机构：	济南金迪知识产权代理有限公司 37219	代理人：	周慰曾
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内容摘要

本发明涉及含1，2，4-噁二唑杂环α，β-不饱和酮类化合物，结构如通式5，其中，R1为氢、甲基或氯；R2为甲基、氯或溴；R3为甲基或乙基；R4为对-三氟甲基，邻-甲基或对-硝基；R5为氢或甲基。本发明还提供该化合物的制备方法及应用。本发明化合物对HL-60细胞的半数生长抑制浓度≤2.0μM，活性显著提高，可用于制备抗白血病药物。

权利要求书

1.具有通式5结构的化合物，其中，R¹为氢、甲基或氯；R²为甲基、氯或溴；R³为甲基或乙基；R⁴为4-三氟甲基、4-硝基或2-甲基；R⁵为氢或甲基。2.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，是下列之一：5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(4-三氟甲基苯基)-1，2，4-噁二唑(5a)、5-[3-氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(4-三氟甲基苯基)-1，2，4-噁二唑(5b)、5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚甲基]-3-(2-甲基苯基)-1，2，4-噁二唑(5d)、5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(2-甲基苯基)-1，2，4-噁二唑(5e)、5-[2，3-二氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(2-甲基苯基)-1，2，4-噁二唑(5f)、5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚甲基]-3-(4-硝基苯基)-1，2，4-噁二唑(5g)、5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(4-硝基苯基)-1，2，4-噁二唑(5i)或5-[2，3-二氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(4-硝基苯基)-1，2，4-噁二唑(5j)。3.权利要求1或2所述的化合物在制备抗白血病药物中的应用。

说明书

含1，2，4-噁二唑杂环α，β-不饱和酮类化合物

技术领域

本发明涉及有机化合物及医药应用领域，尤其涉及含1，2，4-噁二唑杂环α，β-不饱和酮类化合物及其抗肿瘤活性。

背景技术

恶性肿瘤是当今世界上威胁人类健康的主要疾病之一，随着肿瘤生物学的发展，为抗肿瘤药物的研究开发提供了新的分子生物学基础。大多数肿瘤细胞高表达谷胱甘肽转移酶(glutathione S-transferases，GSTs)，GSTs是广泛存在于真核生物中的多功能蛋白超家族，通常被分为细胞溶质家族、线粒体家族和膜结合微粒体家族，参见：Hayes，J.D.；Flanagan，J.U.；Jowsey，I.R.Glutathione transferases.Annu.Rev.Pharmacol.Toxicol.2005，45，51-88。哺乳动物细胞溶质GSTs可分为七个亚型：Alpha(α)、Mu(μ)、Pi(π)、Sigma(σ)、Omega(ω)、Theta(θ)和Zeta(ξ)。在许多耐药的肿瘤细胞中发现三种高表达的GSTs(α、μ、π)，其中，谷胱甘肽转移酶Pi(GST P1-1)是与肿瘤最密切相关的同工酶，在人结肠癌、胃癌、胰腺癌、子宫颈癌、乳腺癌以及淋巴瘤和黑素瘤中都发现了高表达的GST P1-1。

作为II相代谢酶，GST P1-1的基本功能是保护细胞大分子免受活性亲电底物的进攻，尤其是催化还原型谷胱甘肽(glutathione，GSH)与多种内源性和外源性亲电化合物(包括多种化疗药物)结合形成复合物，这些复合物活性小、水溶性大、易于被III相代谢酶代谢失活，参见：Shen，H.；Kauvar，L.；Tew，K.D.Importance of glutathione and associated enzymes in drugresponse.Oncol.Res.1997，9，295-302。当GSTP1-1表达增加或活性增强时，抗肿瘤药物的排泄也随之增加，从而诱发耐药性的发生，cAMP-依赖的蛋白激酶(PKA)和蛋白激酶C(PKC)分别以GSH-依赖和不依赖的方式磷酸化GST P1-1，增强其代谢活性，加剧GST P1-1诱导的耐药性。

活性氧在细胞增值、凋亡中发挥着重要的调节作用。GST P1-1通过消耗细胞内活性氧，使细胞免于活性氧诱导的细胞凋亡，参见：a)Zhou，L.；Jing，Y.；Styblo，M.；Chen，Z.；Waxman，S.Glutathione-S-transferase pi inhibits As₂O₃-induced apoptosis in lymphoma cells：involvement of hydrogen peroxide catabolism.Blood2005，105，1198-1203。b)Yin，Z.；Ivanov，V.N.；Habelhah，H.；Tew，K.；Ronai，Z.Glutathione S-transferase p elicits protection against H₂O₂-induced cell death via coordinated regulation of stress kinases.Cancer Res.2000，60，4053-4057。近期研究表明，GST P1-1是内源性的c-Jun氮末端激酶(JNK，c-junN-terminal kinase)抑制剂，通过蛋白-蛋白相互作用与JNK结合，使细胞免于应激性凋亡。JNK是有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK，mitogen-activated protein kinase)家族的一员，其在细胞的存活和凋亡通路中起着关键作用，参见：a)Wang，T.；Arifoglu，P.；Ronai，Z.；Tew，K.D.Glutathione S-transferase P1-1(GSTP 1-1)inhibits c-Jun N-terminal kinase(JNK 1)signaling through interaction with the C terminus.J.Biol.Chem.2001，276，20999-21003。b)Zhao，G.；Wang，X.Advance in antitumor agents targeting glutathione S-transferase.Curr.Med.Chem.2006，13，1461-1471。

GST P1-1一方面作为II相代谢酶，另一方面作为细胞信号传导通路的内源性调节因子，与凋亡通路中重要的激酶及相关因子相互作用抑制其激活，从而阻断细胞凋亡通路。

依他尼酸(Ethacrynic acid，简写EA，式I)是被发现的第一个GSTs抑制剂，用EA

处理细胞能够引起细胞溶质及线粒体内的GSH完全耗竭、诱导活性氧自由基产生和线粒体的融合、促进与MAPK通路激活相关的肿瘤细胞凋亡(参见：Bowes，T.J.；Gupta，R.S.Induction of mitochondrial fusion by cysteine-alkylators ethacrynic acid and N-ethylmaleimide.J.Cell Physiol.2005，202，796-804。但EA的利尿、耳毒性等毒副作用，限制了其临床应用。以依他尼酸为先导化合物，保留化合物中α，β-不饱和酮基团，对其结构进行修饰，以生物电子等排体1，2，4-噁二唑环替代化合物结构中的羧酸基，所得化合物对GST P1-1抑制活性以及对人急性早幼粒白血病细胞株(HL-60)生长抑制作用均有不同程度的提高，参见：a)Yang，X.；Liu，G.；Li，H.；Zhang，Y.；Song，D.；Li，C.；Wang，R.；Liu，B.；Liang，W.；Jing，Y.；Zhao，G.；Novel oxadiazole analogues derived from ethacrynic acid：design，synthesis，and structure-activity relationships in inhibiting the activity of glutathione S-transferase P1-1and cancer cell proliferation.J.Med.Chem.2010，53，1015-1022；b)CN101108832中国专利200710015199.5“五元杂环化合物、制备方法及应用”。通过进一步的结构改造，可获得新的抗肿瘤候选药物。

发明内容

本发明的任务在于提供一种含1，2，4-噁二唑杂环的α，β-不饱和酮类化合物；本发明的另一任务在于提供该化合物的制备及应用。

发明综述

依他尼酸(EA)为α，β-不饱和酮类化合物，是有效的GST P1-1抑制剂，在高浓度具有抑制肿瘤细胞生长活性，参见：Aizawa，S.；Ookawa，K.；Kudo，T.；Asano，J.；Hayakari，M.；Tsuchida，S.Characterization of cell death induced by ethacrynic acid in a human colon cancer cell line DLD-1and suppression by N-acetyl-L-cysteine.Cancer Sci.2003，94，886-893.。以EA为先导物，对其结构进行修饰，保留结构中α，β-不饱和酮基团，设计合成的五元杂环类化合物，对HL-60细胞的生长抑制作用有所提高(参见本申请人在先中国专利CN101108832“五元杂环化合物、制备方法及应用”)。为进一步提高化合物的抗肿瘤活性，本发明设计合成了结构不同于现有技术的含1，2，4-噁二唑杂环α，β-不饱和酮类化合物(式5)，其创新点是在噁二唑杂环上引入不同取代基，活性实验结果表明，本发明的大部分化合物对HL-60细胞的生长抑制作用又提高了10倍以上。

发明详述

一、含1，2，4-噁二唑α，β-不饱和酮类化合物

本发明的含1，2，4-噁二唑α，β-不饱和酮类化合物，具有通式5的结构：

其中，R¹为氢、甲基或氯；R²为甲基、氯或溴；R³为甲基或乙基；R⁴为对-三氟甲基、对-硝基或邻-甲基；R⁵为氢或甲基。

其中，优选的化合物是下列之一：

5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(4-三氟甲基苯基)-1，2，4-噁二唑(5a)、

5-[3-氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(4-三氟甲基苯基)-1，2，4-噁二唑(5b)、

5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚甲基]-3-(2-甲基苯基)-1，2，4-噁二唑(5d)、

5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(2-甲基苯基)-1，2，4-噁二唑(5e)、

5-[2，3-二氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(2-甲基苯基)-1，2，4-噁二唑(5f)、

5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚甲基]-3-(4-硝基苯基)-1，2，4-噁二唑(5g)、

5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(4-硝基苯基)-1，2，4-噁二唑(5i)或

5-[2，3-二氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(4-硝基苯基)-1，2，4-噁二唑(5j)。

上述优选的8个化合物名称后的括号中为其对应的代号，为了叙述方便，所述括号中的代号在本说明书以下内容中将被直接使用。

上述优选化合物中，5f、5j是R¹及R²均为氯，R³为乙基，R⁴为2-甲基或4-硝基，R⁵为氢的化合物。

上述优选化合物中，5a、5d、5e、5g、5i是R¹及R²均为甲基，R³为甲基或乙基，R⁴为4-三氟甲基，2-甲基或4-硝基，R⁵为氢的化合物。

上述优选化合物中，5b是R¹为氢，R²为氯，R³为乙基，R⁴为4-三氟甲基，R⁵为氢的化合物。

二、合成路线

上述通式5的含1，2，4-噁二唑α，β-不饱和酮类化合物，合成路线如下：

上式中，试剂与反应条件：i.盐酸羟胺，无水碳酸钾，甲醇；ii.SOCl₂，甲苯，50-60℃，5.5h；iii.吡啶，-2～0℃；rt，1h；90℃，2.5h。

三、制备方法

本发明通式5的含1，2，4-噁二唑α，β-不饱和酮类化合物的制备方法，步骤如下：

1)取代胺肟(2)的制备

将盐酸羟胺加入到无水甲醇中，每一毫摩尔的盐酸羟胺加0.8mL的无水甲醇，再加入无水碳酸钾，室温反应至无气泡生成时，加入取代苯甲腈(1)。盐酸羟胺、无水碳酸钾、取代苯甲腈的摩尔比为5∶5∶1。回流反应4-7h，趁热过滤，滤饼用无水甲醇洗涤，合并洗液和滤液，减压蒸除溶剂，柱层析分离得取代胺肟(2)，洗脱体系为石油醚/丙酮3∶1体积比。

2)2-[2，3-二取代-4-(2-亚甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]酰氯(4)的制备

将2-[2，3-二取代-4-(2-亚甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]羧酸(3)加入到无水甲苯中，每一毫摩尔的2-[2，3-二取代-4-(2-亚甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]羧酸(3)用5mL无水甲苯溶解，向反应器中加入二氯亚砜，2-[2，3-二取代-4-(2-亚甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]羧酸(3)与氯化亚砜的摩尔比为1∶5，室温搅拌1h后升温至50-60℃，反应5.5h，除去过量的二氯亚砜，冷却，得中间体化合物2-[2，3-二取代-4-(2-亚甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]酰氯(4)的甲苯溶液，直接用于下一步反应。

3)通式5的化合物5-[2，3-二取代-4-(2-亚甲基-1-氧-烷基)苯氧亚烷基]-3-取代-1，2，4-噁二唑的制备

将步骤1)制得的取代胺肟溶于吡啶中，将反应器置于冰浴中，在此条件下，将步骤2)制得的2-[2，3-二取代-4-(2-亚甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]酰氯(4)的甲苯溶液缓慢滴于胺肟的吡啶溶液中，2-[2，3-二取代-4-(2-亚甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]酰氯(4)与取代胺肟的摩尔比为1∶2，滴毕室温搅拌1h后，缓慢升温至90℃，反应2.5h，冷却，减压蒸除溶剂，柱层析纯化，洗脱体系为石油醚/丙酮10∶1体积比。

优选的，步骤1)中所述的取代苯甲腈为4-三氟甲基苯甲腈、2-甲基苯甲腈或4-硝基苯甲腈。

优选的，步骤2)中2-[2，3-二取代-4-(2-亚甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]羧酸(3)为2-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧基]丙酸，结构式如下：

优选的，步骤3)中所述的向反应器中滴加2-[2，3-二取代-4-(2-亚甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]酰氯(4)的甲苯溶液时的温度为-2～0℃。

四、应用

本发明的含1，2，4-噁二唑α，β-不饱和酮类化合物对人急性早幼粒白血病细胞株(HL-60)生长抑制活性显著提高，用于制备抗白血病药物。

与现有技术相比本发明的优良效果：

本发明设计合成了结构不同的含1，2，4-噁二唑杂环α，β-不饱和酮类化合物，其创新点是在噁二唑杂环上引入不同取代基，活性实验结果表明，本发明的含1，2，4-噁二唑α，β-不饱和酮类化合物对HL-60细胞的生长抑制活性显著增强，本发明的大部分化合物对HL-60细胞的生长抑制作用又提高了10倍以上，对HL-60细胞的半数生长抑制浓度IC₅₀≤2.0μM(化合物5c，5h，5k除外)。其中，化合物5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(4-三氟甲基苯基)-1，2，4-噁二唑(5a)、5-[3-氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(4-三氟甲基苯基)-1，2，4-噁二唑(5b)、5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚甲基]-3-(2-甲基苯基)-1，2，4-噁二唑(5d)、5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(2-甲基苯基)-1，2，4-噁二唑(5e)、5-[2，3-二氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(2-甲基苯基)-1，2，4-噁二唑(5f)、5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚甲基]-3-(4-硝基苯基)-1，2，4-噁二唑(5g)、5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(4-硝基苯基)-1，2，4-噁二唑(5i)、5-[2，3-二氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(4-硝基苯基)-1，2，4-噁二唑(5j)对HL-60细胞的半数生长抑制浓度(IC₅₀)分别为1.5μM、2.0μM、2.0μM、2.0μM、1.6μM、1.5μM、1.7μM和1.3μM，半数抑制浓度≤2.0μM，对HL-60细胞生长抑制活性提高了10倍以上。

具体实施方式

下面结合实施例进一步描述本发明，以利更深入理解本发明及其优点和效果，但所述实施例仅用于说明本发明而不是限制本发明。

实施例1.

1)取代苯甲酰胺肟化合物(2)的制备

将盐酸羟胺3.48g(50mmol)，无水碳酸钾6.90g(50mmol)置于100mL圆底烧瓶中，加入无水甲醇40mL，室温反应至无气泡生成时，加入对取代苯甲腈(5c)1.71g(10mmol)。缓慢升温至65℃，反应4-7h，趁热过滤，滤饼用无水甲醇洗涤，合并洗液和滤液，旋蒸除去溶剂，干燥，柱层析分离即得中间体取代苯甲酰胺肟，洗脱系统为石油醚/丙酮3∶1体积比。

取代苯甲腈分别选用4-三氟甲基苯甲腈、2-甲基苯甲腈或4-硝基苯甲腈，分别得到以下取代苯甲酰胺肟化合物(2)：

2a：4-三氟甲基苯甲酰胺肟，白色固体，收率86.0％，mp：94.7～95.3℃。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：9.92(s，1H，＝NOH)，7.89(d，2H，J＝7.80Hz，Ar-H)，7.74(d，2H，J＝8.40Hz，Ar-H)，5.98(s，2H，NH₂).

2b：2-甲基苯甲酰胺肟，白色固体，收率86％，mp：127～130℃。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：9.30(s，1H，＝NOH)，7.27(m，2H，Ar-H)，7.19(m，2H，Ar-H)，5.71(s，2H，NH₂)，2.35(s，3H，CH₃)。

2c：4-硝基苯甲酰胺肟，黄色固体，收率52.3％，mp：116～118℃。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：10.13(s，1H，＝NOH)，8.23(d，2H，J＝9.00Hz，Ar-H)，7.94(d，2H，J＝9.00Hz，Ar-H)，6.07(s，2H，NH₂)。

2)2-[2，3-二取代-4-(2-亚甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]酰氯(4)的制备

将2-[2，3-二取代-4-(2-亚甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]羧酸(3)2mmol置于100mL的圆底烧瓶中，加入无水甲苯10mL，氯化亚砜0.74mL(10mmol)，室温搅拌1h后升温至50-60℃，反应5.5h，用吸收装置除去过量的二氯亚砜，冷却，得中间体2-[2，3-二取代-4-(2-亚甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]酰氯(4)的甲苯溶液，直接用于下一步反应。

2-[2，3-二取代-4-(2-亚甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]羧酸(3)分别选用[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧基]乙酸；[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧基]乙酸；2-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧基]丙酸；[3-氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧基]乙酸；[3-氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧基]乙酸；[2，3-二氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧基]乙酸，分别得到以下化合物4：

4a：[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧基]乙酰氯；

4b：[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧基]乙酰氯；

4c：2-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧基]丙酰氯；

4d：[3-氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧基]乙酰氯；

4e：[3-氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧基]乙酰氯；

4f：[2，3-二氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧基]乙酰氯。

3)目标化合物5-[2，3-二取代-4-(2-亚甲基-1-氧-烷基)苯氧亚烷基]-3-取代-1，2，4-噁二唑(5)的制备

将步骤1)的产物取代苯甲酰胺肟(2)(4mmol)置于50mL圆底烧瓶中，加入吡啶4mL溶解，将反应器置于冰浴中，此温度下将步骤2)的产物2-[2，3-二取代-4-(2-亚甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]酰氯(2mmol)的甲苯溶液缓慢滴入反应器中，滴毕，室温搅拌1h后，缓慢升温至90℃，反应2.5h，冷却，减压蒸除溶剂，用柱层析纯化(石油醚∶丙酮＝10∶1体积比)，得目标产物(5)。

取代苯甲酰胺肟2a、2b、2c与2-[2，3-二取代-4-(2-亚甲基-1-氧代-烷基)苯氧基]酰氯4a、4b、4c、4d、4e、4f的不同组合，分别得到以下化合物5：

5a：5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(4-三氟甲基苯基)-1，2，4-噁二唑，白色固体，收率67.4％，mp：88～91℃。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ(ppm)：8.25(d，J＝8.40Hz，2H，Ar-H)，7.97(d，J＝8.40Hz，2H，Ar-H)，7.08(d，J＝9.00Hz，1H，Ar-H)，7.03(d，J＝8.40Hz，1H，Ar-H)，5.95(s，1H，＝CH)，5.48(s，1H，＝CH)，5.68(s，2H，OCH₂)，3.38(q，2H，J＝7.20Hz，CH₃CH₂)，2.21(s，3H，Ar-CH₃)，2.13(s，3H，Ar-CH₃)，1.06(t，J＝7.20Hz，3H，CH₃).IR(KBr，cm^-1)：υ_CH：2974.20，2925.48；υ_C＝O：1643.46；υ_C＝C：1623.87，1591.52，1579.01；δ_CH：1329.78，υ_C-O：1268.26，γ_＝CH2：1115.14，1068.24，852.26，759.60.HRMS(ESI)m/z forC₂₃H₂₂F₃N₂O₃[M+H]⁺：calculated 431.1577found 431.1592.

5b：5-[3-氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(4-三氟甲基苯基)-1，2，4-噁二唑，白色固体，收率36.6％，mp：56～58℃。¹H-NMR(CDCl₃-d₃)δ(ppm)：8.24(d，J＝8.40Hz，2H，Ar-H)，7.77(d，J＝8.40Hz，2H，Ar-H)，7.28(d，J＝8.40Hz，1H，Ar-H)，7.10(d，J＝2.40Hz，1H，Ar-H)，6.97(dd，J₁＝8.40Hz，J₂＝2.40Hz，1H，Ar-H)，5.93(s，1H，＝CH)，5.60(s，1H，＝CH)，5.40(s，2H，OCH₂)，2.47(q，2H，J＝7.20Hz，CH₃CH₂)，1.14(t，J＝7.20Hz，3H，CH3₎.IR(KBr，cm^-1)：υ_＝CH：3090.22；υ_CH：2975.40，2940.18，2878.45；υ_C＝O：1650.76；υ_C＝C：1599.99；δ_CH：1323.28，υ_C-O：1228.39，γ_＝CH2：1136.84，1064.43，850.85，716.77.HRMS(ESI)m/z forC₂₁H₁₇ClF₃N₂O₃[M+H]⁺：calculated 437.0874 found 437.0892.

5c：5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚乙基]-3-(4-三氟甲基苯基)-1，2，4-噁二唑，收率15.3％，低温下为白色固体，室温下无色油状液体。¹H-NMR(CDCl₃-d₃)δ(ppm)：8.21(d，J＝7.80Hz，2H，Ar-H)，7.75(d，J＝7.80Hz，2H，Ar-H)，7.01(d，J＝8.40Hz，1H，Ar-H)，6.75(d，J＝8.40Hz，1H，Ar-H)，5.91(s，1H，＝CH)，5.66(q，J＝6.60Hz，1H，CH)，5.54(s，1H，＝CH)，2.25(s，3H，Ar-CH₃)，2.18(d，J＝7.20Hz，3H，CH₃)，2.02(s，3H，Ar-CH₃)，1.91(s，3H，CH₃).HRMS(ESI)m/z for C₂₃H₂₂F₃N₂O₃[M+H]⁺：calculated 431.1593 found431.1577.

5d：5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚甲基]-3-(2-甲基苯基)-1，2，4-噁二唑，白色固体，收率48.7％，mp：75～76℃。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ(ppm)：7.93(d，J＝7.80Hz，1H，Ar-H)，7.49(t，J₁＝7.20Hz，J₂＝7.80Hz，1H，Ar-H)，7.40(m，2H，Ar-H)，7.11(d，J＝8.40Hz，1H，Ar-H)，7.04(d，J＝8.40Hz，1H，Ar-H)，6.03(s，1H，＝CH)，5.47(s，1H，＝CH)，5.66(s，2H，OCH₂)，2.55(s，3H，Ar-CH₃)，2.20(s，3H，Ar-CH₃)，2.12(s，3H，Ar-CH₃)，1.95(s，3H，CH₃).IR(KBr，cm^-1)：υ_CH：2976.18，2958.90，2924.36，2866.66；υ_C＝O；1645.79；υ_C＝C：1627.10，1603.54，1590.13，1577.87；δ_CH：1484.66，1451.87，1353.40；υ_C-O：1274.73，1263.90；γ_＝CH2：1119.65，1097.87，937.07，794.75，784.05，743.95.HRMS(ESI)m/z for C₂₂H₂₃N₂O₃[M+H]⁺：calculated 363.1703 found 363.1719.

5e：5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(2-甲基苯基)-1，2，4-噁二唑，白色固体，收率74.2％，mp：54～57℃。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ(ppm)：7.93(d，J＝7.20Hz，1H，Ar-H)，7.49(t，J₁＝7.20Hz，J₂＝7.80Hz，1H，Ar-H)，7.41(m，2H，Ar-H)，7.09(d，J＝8.40Hz，1H，Ar-H)，7.04(d，J＝7.80Hz，1H，Ar-H)，5.95(s，1H，＝CH)，5.48(s，1H，＝CH)，5.66(s，2H，OCH₂)，2.55(s，3H，Ar-CH₃)，2.38(q，J＝7.20Hz，2H，CH₂)，2.20(s，3H，Ar-CH₃)，2.13(s，3H，Ar-CH₃)，1.06(t，J＝7.20Hz，3H，CH₃).IR(KBr，cm^-1)：υ_＝CH：3100.96；υ_CH；2960.08，2932.81，2876.82；υ_C＝O ：1647.89；υ_C＝C：1623.28，1603.13，1578.07；δ_CH：1484.62，1452.39，1353.38；υ_C-O：1274.65，1264.32；γ_＝CH2：1118.71，1095.89，937.77，892.62，795.46，783.54，743.83.HRMS(ESI)m/z for C₂₃H₂₅N₂O₃[M+H]⁺：calculated 377.1860 found 377.1876.

5f：5-[2，3-二氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(2-甲基苯基)-1，2，4-噁二唑，白色固体，收率62.5％，mp：68～70℃。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ(ppm)：7.92(d，J＝6.60Hz，1H，Ar-H)，7.50(m，1H，Ar-H)，7.42(m，4H，Ar-H)，6.09(s，1H，＝CH)，5.59(s，1H，＝CH)，5.85(s，2H，OCH₂)，2.54(s，3H，Ar-CH₃)，2.38(q，J＝7.80Hz，2H，CH₂)，1.08(t，J＝7.80Hz，3H，CH₃).IR(KBr，cm^-1)：υ_＝CH：3079.69；υ_CH：2971.50，2935.01，2876.77；υ_C＝O：1667.21；υ_C＝C：1618.99，1583.24，1559.11；δ_CH：1467.06，1383.55，1346.61；υ_C-O：1286.88，1263.39；γ_＝CH2：1045.23，1028.22，909.59，809.55，796.41，743.99.HRMS(ESI)m/z for C₂₁H₁₉Cl₂N₂O₃[M+H]⁺：calculated 417.0767found 417.0789.

5g：5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚甲基]-3-(4-硝基苯基)-1，2，4-噁二唑，白色固体，收率14.8％，mp：162～164℃。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ(ppm)：8.30(d，4H，Ar-H)，7.06(d，2H，Ar-H)，6.03(s，1H，＝CH)，5.47(s，1H，＝CH)，5.69(s，2H，OCH₂)，2.25(s，3H，Ar-CH₃)，2.21(s，3H，Ar-CH₃)，2.14(s，3H，CH₃).IR(KBr，cm^-1)：υ_＝CH：3100.68；υ_CH：2924.33，2853.38；υ_C＝O：1640.56；υ_C＝C：1612.80，1592.40，1580.81，1531.39，1522.66；δ_CH：1477.38，1451.41，1419.13；υ_NO2：1350.86；υ_C-O ：1265.01；γ_＝CH2：1125.03，1097.64，1013.51，863.32，853.49，798.93，721.88.HRMS(ESI)m/z for C₂₁H₂₀N₃O₅[M+H]⁺：calculated 394.1397 found 394.1412.

5h：5-[3-氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚甲基]-3-(4-硝基苯基)-1，2，4-噁二唑，黄色固体，收率31.7％，mp：101～102℃。¹H-NMR(CDCl₃-d₃)δ(ppm)：8.37(d，J＝9.00Hz，2H，Ar-H)，8.31(d，J＝9.00Hz，2H，Ar-H)，7.29(d，J＝8.40Hz，1H，Ar-H)，7.10(d，J＝2.40Hz，1H，Ar-H)，6.98(dd，J₁＝8.40Hz，J₂＝2.40Hz，1H，Ar-H)，5.99(s，1H，＝CH)，5.59(s，1H，＝CH)，5.41(s，2H，OCH₂)，2.04(s，3H，CH₃).IR(KBr，cm^-1)：υ_＝CH：3102.53；υ_CH：2981.86，2917.80，2863.77；υ_C＝O：1664.95；υ_C＝C：1597.69，1532.74，1562.58，1520.77，1522.66；δ_CH：1489.25，1447.60，1419.81；υ_NO2：1336.60；υ_C-O：1290.49；γ_＝CH2：1106.91，1071.79，1056.98，866.31，854.08，801.45，724.17.HRMS(ESI)m/z for C₁₉H₁₅ClN₃O₅[M+H]⁺：calculated400.0695 found 400.0713.

5i：5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(4-硝基苯基)-1，2，4-噁二唑，白色固体，收率39.6％，mp：117～118℃。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ(ppm)：8.43(d，J＝8.40Hz，2H，Ar-H)，8.30(d，J＝8.40Hz，2H，Ar-H)，7.10(d，J＝8.40Hz，1H，Ar-H)，7.03(d，J＝8.40Hz，1H，Ar-H)，5.95(s，1H，＝CH)，5.48(s，1H，＝CH)，5.70(s，2H，OCH₂)，2.38(q，J＝7.80Hz，2H，CH₂)，2.22(s，3H，Ar-CH₃)，2.13(s，3H，Ar-CH₃)，1.06(t，J＝7.80Hz，3H，CH₃).IR(KBr，cm^-1)：υ_＝CH：3103.43；υ_CH：2967.47，2926.60，2875.14；υ_C＝O：1657.67；υ_C＝C：1611.34，1584.88，1534.11，1520.87；δ_CH：1483.43，1446.98，1415.69；υ_NO2：1348.84，1336.62；υ_C-O：1261.58；γ_＝CH2：1126.20，1110.62，1090.73，869.06，853.46，798.54，721.88.HRMS(ESI)m/z forC₂₂H₂₂N₃O₅[M+H]⁺：calculated 408.0554 found 408.1571.

5j：5-[2，3-二氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(4-硝基苯基)-1，2，4-噁二唑，白色固体，收率16.9％，mp：151～152℃。¹H-NMR(DMSO-d₆)δ(ppm)：8.43(d，J＝8.40Hz，2H，Ar-H)，8.29(d，J＝8.40Hz，2H，Ar-H)，7.42(m，2H，Ar-H)，6.09(s，1H，＝CH)，5.59(s，1H，＝CH)，5.88(s，2H，OCH₂)，2.38(q，J＝7.20Hz，2H，CH₂)，1.08(t，J＝7.20Hz，3H，CH₃).IR(KBr，cm^-1)：υ_＝CH：3100.52；υ_CH：2967.86，2937.94；υ_C＝O：1660.22；υ_C＝C：1610.70，1587.06，1534.70，1520.01；δ_CH：1471.45，1445.27，1415.36；υ_NO2：1343.94；υ_C-O：1302.62，1290.06；γ_＝CH2：1077.44，1008.46，853.41，722.86.HRMS(ESI)m/z for C₂₀H₁₆Cl₂N₃O₅[M+H]⁺：calculated448.0462found 448.0483.

5k：5-[3-甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚甲基]-3-(4-硝基苯基)-1，2，4-噁二唑，淡黄色固体，收率21.1％，mp：110～112℃。¹H-NMR(CDCl₃-d₃)δ：8.36(d，J＝9.00Hz，2H，Ar-H)，8.30(d，J＝9.00Hz，2H，Ar-H)，7.29(d，J＝9.00Hz，1H，Ar-H)，6.90(d，J＝2.40Hz，1H，Ar-H)，6.83(m，J₁＝9.00Hz，J₂＝2.40Hz，1H，Ar-H)，5.93(s，1H，＝CH)，5.55(s，1H，＝CH)，5.41(s，2H，OCH₂)，2.34(s，3H，Ar-CH₃)，2.04(s，3H，CH₃C).IR(KBr，cm^-1)：υ_＝CH：3104.79；υ_CH：2929.38，2856.64；υ_C＝O：1631.97；υ_C＝C：1608.22，1596.00，1568.80，1529.34，1521.64，1516.31；δ_CH：1445.92，1414.32；υ_NO2：1336.16；υ_C-O：1245.79；γ_＝CH2：1130.89，1070.15，864.78，853.13，724.55.HRMS(ESI)m/z for C₂₀H₁₈N₃O₅[M+H]⁺：calculated 380.1241 found 380.1258.

实施例2.化合物GST P1-1抑制活性测试及对HL-60细胞的生长抑制测定

GST P1-1抑制活性测定方法：参见CN1706789“α，β-不饱和酮类化合物及其制备方法及其抑制GSTπ活性”200510043573.3，说明书第11页实施例5。

HL-60细胞生长抑制活性测定方法：参见CN101108832“五元杂环化合物、制备方法及应用”，200710015199.5，说明书第3页。人急性早幼粒白血病细胞株(HL-60)

表1.化合物抑制GST P1-1活性及抑制HL-60细胞生长活性测定数据

实验结果显示，本发明的1，2，4-噁二唑α，β-不饱和酮类化合物大部分对HL-60细胞的半数生长抑制浓度≤2.0μM，活性进一步提高。其中，EA～5k依次代表化合物如下：

EA：[2，3-二氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧基]乙酸；

5a：5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(4-三氟甲基苯基)-1，2，4-噁二唑；

5b：5-[3-氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(4-三氟甲基苯基)-1，2，4-噁二唑；

5c：5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚乙基]-3-(4-三氟甲基苯基)-1，2，4-噁二唑；

5d：5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚甲基]-3-(2-甲基苯基)-1，2，4-噁二唑；

5e：5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(2-甲基苯基)-1，2，4-噁二唑；

5f：5-[2，3-二氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(2-甲基苯基)-1，2，4-噁二唑；

5g：5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚甲基]-3-(4-硝基苯基)-1，2，4-噁二唑；

5h：5-[3-氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚甲基]-3-(4-硝基苯基)-1，2，4-噁二唑；

5i：5-[2，3-二甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(4-硝基苯基)-1，2，4-噁二唑；

5j：5-[2，3-二氯-4-(2-亚甲基-1-氧-丁基)苯氧亚甲基]-3-(4-硝基苯基)-1，2，4-噁二唑；

5k：5-[3-甲基-4-(2-亚甲基-1-氧-丙基)苯氧亚甲基]-3-(4-硝基苯基)-1，2，4-噁二唑。