一种药用来那度胺半水合物晶体的制备方法.pdf

本发明涉及一种从来那度胺粗品出发，重结晶制备药用来那度胺半水合物晶体的方法。采用混合溶剂和水进行重结晶，通过控制降温速率和水的量可以很好的得到用于符合制剂要求的半水合结晶产物；所述的混合溶剂体系是甲醇、1，4-二氧六环，N,N-二甲基甲酰胺、乙腈、乙醇、N-甲基吡咯烷酮、异丙醇、丙酮、乙醚、二氯甲烷等两组分和多组分的混合溶剂。

权利要求书
1.  一种重结晶制备药用来那度胺半水合物晶体的方法，其特征在于，所述的方法步骤为；
(1)将一定量的来那度胺粗品化合物用混合溶剂加热溶解，
(2)加热溶解完毕后停止加热，待温度降温至第一温度时，加入预热好的活性炭，在该第一温度下继续搅拌0.5～2小时，随后除去活性炭得到溶液；
(3)继续降温至室温，并往步骤(2)获得的所述溶液中加入一定量的水，继续搅拌20～60min；
(4)通过重结晶的方法制备来那度胺半水合物晶体；
所述的加热溶解的方法优选为油浴加热至80℃；
所述的第一温度为40-50℃；
所述的第二温度为-10-0℃。

2.  根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的步骤(4)为：
①将步骤(3)所得的溶液降温至第二温度下冷却析晶15～20小时，可得到来那度胺的半水合结晶产物，对所获得的来那度胺的半水合结晶产物用乙酸乙酯洗涤去除杂质即得。
或②将步骤(3)所得的溶液减压浓缩至除去大部分的溶剂并有来那度胺的半水合结晶产物析出，停止浓缩并加入乙酸乙酯洗涤析出物，室温搅拌24小时，过滤、干燥即得。

3.  根据权利要求1或2任一所述的方法，其特征在于，来那度胺和混合溶剂的总量的比例为每1克来那度胺粗产物溶解于5～50ml溶剂中；优选为每1克来那度胺粗产物溶解于10～30ml溶剂中；最优选为每1克来那度胺粗产物溶解于20ml溶剂中。

4.  根据权利要求1-3任一所述的方法，其特征在于，所述的活性炭的量与来那度胺粗品的量的比例为1：1～10(wt)，优选为1：5(wt)。

5.  根据权利要求1-4任一所述的方法，其特征在于，所述的水与来那度胺粗品的量的比例为1：3～15(wt)。

6.  根据权利要求1-5任一所述的方法，其特征在于，所述的混合溶剂体系是甲醇、1，4-二氧六环，N,N-二甲基甲酰胺、乙腈、乙醇、N-甲基吡咯烷酮、异丙醇、丙酮、乙醚、二氯甲烷等两组分和多组分的混合溶剂。

7.  根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的混合溶剂优选为如下组合：
(1)二甲基亚砜(DMSO)和丙酮(Actone)的1：1(v/v)混合溶剂；
(2)N-甲基吡咯烷酮(NMP)、乙腈(CH3CN)、四氢呋喃(THF)的1.85：1：1(v/v/v)混合溶剂；
(3)N,N-二甲基乙酰胺(DMA)和乙醇(EtOH)的1：1.5(v/v)混合溶剂；
(4)异丙醇(i-PrOH)；
(5)1，4-二氧六环、甲醇(MeOH)和二氯甲烷的3：1：1(v/v/v)混合溶剂；
(6)N,N-二甲基甲酰胺(DMF)和无水乙醚的1：1(v/v)混合溶剂；
(7)1，4-二氧六环(Dioxane)和甲醇(MeOH)的2：1(v/v)混合溶剂。

8.  根据权利要求1-7所述的方法制备获得的来那度胺半水合物晶体，其特征在于，所述晶体的纯度高于99％。

说明书一种药用来那度胺半水合物晶体的制备方法
技术领域
本发明涉及一种药用来那度胺半水合物晶体的制备方法。
背景技术
来那度胺(Lenalidomide/Revlimid，药品名：来拉度胺，别名：雷利度胺)主要用于治疗骨髓增生异常综合征，是沙利度胺的类似物，但比沙利度胺的副作用更小，且不引起新生儿畸形。
美国食品药品管理局(FDA)批准了美国细胞基因公司的来那度胺(Lenalidomide/Revlimid)。revlimid为口服制剂，Revlimid(Lenalidomide)是由celgene公司研发的用于治疗致死性血液疾病以及癌症的药物。该品是用于治疗孕吐曾引起数以千计的婴儿出生缺陷沙利度胺(thalidomide)的加强版，具有抗癌潜力。2005年9月，FDA肿瘤药物顾问委员会建议以Revlimid用于治疗输液依赖型贫血症。10月，欧洲药品管理局接受了Revlimid的上市申请。Celgene公司计划在2006年第一季度分别向美国FDA和欧洲药品管理局提交本品用于治疗复发型难治性多发性骨髓瘤的补充新药申请。
来那度胺用于制剂的原料晶型复杂，现批准的制剂晶型为其半水合结晶化合物。celgene公司的专利WO2005/023192A2中公开了在水中加热可以实现晶型的转换，但是该方法需对温度进行严格控制，操作麻烦，且1克粗品需要100mL的水溶剂，导致溶剂量的大大增加，不利于提高釜的使用效率。

半水合3-(7-氨基-3-氧代-1H-异吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮。
针对现有技术中水溶剂用量大的问题和操作工艺繁琐的问题，本发明人进行了改进，做了大量的实验后发现，采用混合溶剂和水重结晶、混合溶剂和水溶解后减压浓缩析晶可以很好的制得来那度胺的半水合结晶产物，该工艺可以将原来的产物纯化和晶型制备的两道工序简化成在一次实验中即可完成，得到所需药用来那度胺半水合物晶体。减少了操作步骤，简化了操作工艺，节约能源。
发明内容
本发明涉及一种从来那度胺粗品出发，所述来那度胺粗品是反应后得到的不含结晶水的产物，重结晶制备药用来那度胺半水合物晶体的方法。
所述的方法采用混合溶剂和水进行重结晶，通过控制降温速率和水的量可以很好的得到用于符合制剂要求的半水合结晶产物；所述的混合溶剂体系是甲醇、1，4-二氧六环，N,N-二甲基甲酰胺、乙腈、乙醇、N-甲基吡咯烷酮、异丙醇、丙酮、乙醚、二氯甲烷等两组分和多组分的混合溶剂。
本发明所述的重结晶制备药用来那度胺半水合物晶体的方法步骤为；
(1).将一定量的来那度胺粗品化合物用混合溶剂加热溶解，
(2).加热溶解完毕后停止加热，待温度降温至第一温度时，加入预热好的活性炭，在该第一温度下继续搅拌0.5～2小时，随后除去活性炭得到溶液；
(3).继续降温至室温，并往步骤(2)获得的所述溶液中加入一定量的水，继续搅拌20～60min；
随后，通过重结晶的方法制备来那度胺半水合物晶体。
所述的重结晶法为：
①将步骤(3)所得的溶液降温至第二温度下冷却析晶15～20小时，可得到来那度胺的半水合结晶产物，对所获得的来那度胺的半水合结晶产物用乙酸乙酯洗涤去除杂质；
或②将步骤(3)所得的溶液减压浓缩至除去大部分的溶剂并有来那度胺的半水合结晶产物析出，停止浓缩并加入乙酸乙酯洗涤析出物，室温搅拌24小时，过滤、干燥即可得；
所述的来那度胺和混合溶剂的总量的比例为每1克来那度胺粗产物溶解于5～50ml溶剂中；优选为每1克来那度胺粗产物溶解于10～30ml溶剂中；最优选为每1克来那度胺粗产物溶解于20ml溶剂中；
所述的活性炭的量与来那度胺粗品的量的比例为1：1～10(wt)，优选为1：5(wt)；
所述的水的量与来那度胺粗品的量的比例为1：3～15(wt)；
所述的加热溶解的方法优选为油浴加热至80℃；
所述的第一温度为40-50℃；
所述的第二温度为-10-0℃；
所述的混合溶剂优选为：
(1)二甲基亚砜(DMSO)和丙酮(Actone)的1：1(v/v)混合溶剂；
(2)N-甲基吡咯烷酮(NMP)、乙腈(CH3CN)、四氢呋喃(THF)的1.85：1：1(v/v/v)混合溶剂；
(3)N,N-二甲基乙酰胺(DMA)和乙醇(EtOH)的1：1.5(v/v)混合溶剂；
(4)异丙醇(i-PrOH)；
(5)1，4-二氧六环、甲醇(MeOH)和二氯甲烷的3：1：1(v/v/v)混合溶剂；
(6)N,N-二甲基甲酰胺(DMF)和无水乙醚的1：1(v/v)混合溶剂
(7)1，4-二氧六环(Dioxane)和甲醇(MeOH)的2：1(v/v)混合溶剂；。
附图说明
图1，以二甲基亚砜和丙酮作为有机溶剂加水后冷却析晶所得的半水合结晶的来那度胺TGA图谱。
图2，以N-甲基吡咯烷酮、乙腈和四氢呋喃作为有机溶剂加水后冷却析晶所得的半水合结晶的来那度胺TGA图谱。
图3，以N,N-二甲基乙酰胺和乙醇作为有机溶剂加水后冷却析晶所得的半水合结晶的来那度胺TGA图谱。
图4，以1，4-二氧六环和甲醇作为有机溶剂加水后减压过滤所得的半水合结晶的来那度胺TGA图谱。
图5，以N-甲基吡咯烷酮、乙腈、四氢呋喃作为有机溶剂加水后冷却析晶所得的半水合结晶的来那度胺的X-粉末衍射图。
图6，以N,N-二甲基乙酰胺和乙醇作为有机溶剂加水后冷却析晶所得的半水合结晶的来那度胺的X-粉末衍射图。
图7，以1，4-二氧六环、甲醇、二氯甲烷和水重结晶的来那度胺的X-粉末衍射图。
图8，以1，4-二氧六环、甲醇作为有机溶剂加水后减压过滤所得的半水合结晶的来那度胺的HPLC纯度验证图。
具体实施方式
实施例1，以二甲基亚砜和丙酮作为有机溶剂加水后冷却重结晶；
将来那度胺的粗产物85.8g加入3L的圆底烧瓶中，加入二甲基亚砜(DMSO)858mL和丙酮(Actone)858mL的混合溶剂，置于80℃油浴中加热搅拌至全部溶解，来那度胺的粗产物全部溶解后停止加热，当溶 液温度下降至40-50℃之间时，加入17.2g(5：1wt)活性炭，继续放入油浴锅中加热搅拌1小时，过滤除去活性炭。
取母液，在室温搅拌的条件下向母液中加入21mL(4.1：1wt)蒸馏水，继续搅拌30min让溶液温度降至室温(20-25℃)，将得到的溶液置于0-5℃的环境中冷却析晶15小时。15小时后过滤、干燥即可得到半水合结晶的来那度胺71.9g，收率80.6％。所得的半水合结晶的来那度胺TGA图见附图1。
实施例2，以N-甲基吡咯烷酮、乙腈和四氢呋喃作为有机溶剂加水后冷却重结晶；
将来那度胺的粗产物68.4g加入3L的圆底烧瓶中，加入N-甲基吡咯烷酮(NMP)1260mL、乙腈(CH3CN)684mL、四氢呋喃(THF)684mL的混合溶剂，置于80℃油浴中加热搅拌至全部溶解，来那度胺的粗产物全部溶解后停止加热，当溶液温度下降至40-50℃之间时，加入13.7g活性炭(5：1wt)，继续放入油浴锅中加热搅拌1小时，过滤除去活性炭。
取母液，在室温搅拌的条件下向母液中加入22mL(3.1：1wt)蒸馏水，继续搅拌30min让溶液温度降至室温(20-25℃)，将得到的溶液置于-10-0℃的冰箱中冷却析晶15小时。15h后过滤、干燥即可得到半水合结晶的来那度胺58.7g，收率83.2％。所得的半水合结晶的来那度胺TGA图见附图2，X-粉末衍射图见附图5，经对比，该衍射图和WO2005/023192A2中所记载的来那度胺半水和结晶标准品的X-粉末衍射图一致。
实施例3，以N,N-二甲基乙酰胺和乙醇作为有机溶剂加水后冷却重结晶；
将来那度胺的粗产物72.8g加入3L的圆底烧瓶中，加入N,N-二甲基乙酰胺(DMA)583mL和乙醇(EtOH)874mL的混合溶剂，置于80℃油浴中加热搅拌至全部溶解，来那度胺的粗产物全部溶解后停止加热，当溶液温度下降至40-50℃之间时，加入13.7g(5.3：1wt)活性炭，继续放入油浴锅中加热搅拌1小时，过滤除去活性炭。
取母液，在室温搅拌的条件下向母液中加入5mL(14.6：1wt)蒸馏水，继续搅拌30min让溶液温度降至室温(20-25℃)，继续向反应液中滴加无水乙醚至溶液刚好变浑浊，再将得到的溶液置于-5-0℃的环境中冷却析晶15小时。15小时后过滤、干燥即可得到半水合结晶的来那度胺59.2g，收率78.6％。所得的半水合结晶的来那度胺TGA图见附图3，X-粉末衍射图见附图6，经对比，该衍射图和WO2005/023192A2中所记载的来那度胺半水和结晶标准品的X-粉末衍射图一致。
实施例4，以1，4-二氧六环和甲醇作为有机溶剂加水后减压过滤重结晶；
将来那度胺的粗产物35.8g加入2L的圆底烧瓶中，加入1，4-二氧六环(Dioxane)716mL和甲醇(MeOH)358mL的混合溶剂，置于80℃油浴中加热搅拌至全部溶解，来那度胺的粗产物全部溶解后停止加热，当溶液温度下降至40-50℃之间时，加入7.2g(5：1wt)活性炭，继续放入油浴锅中加热搅拌1小时，过滤除去活性炭。
取母液，在室温搅拌的条件下向母液中加入10mL(3.6：1wt)蒸馏水，继续搅拌30min让溶液温度降至室温(20-25℃)。减压浓缩除去溶剂(温度25-30℃)，浓缩除去约950mL溶剂后，停止浓缩(此时已有大量的化合物析出)，向浓缩瓶中补加200mL乙酸乙酯(EtOAc)可以通过乙酸乙酯洗涤除去产物的其他杂质，室温(20-25℃)搅拌24小时，过滤、干燥得31.6g来那度胺的半水合结晶化合物，收率86％，目标晶型的HPLC纯度达到99.89％(HPLC图见附图8)，所得的半水合结晶的来那度胺TGA图见附图4。
实施例5，以异丙醇作为有机溶剂加水后冷却重结晶；
在以甲醇为溶剂还原氢化合成来那度胺的实验过程中(反应式如下，反应底物52.7g)，当反应结束后 首先减压除去甲醇，然后用330mLDMF加热溶解产物，过滤取母液备用。

向得到的母液中加入480mL异丙醇(i-PrOH)、活性炭18g(2.5：1wt)，于80℃油浴中加热搅拌1小时至来那度胺的粗产物全部溶解，过滤，待母液冷却至室温后(20-25℃)，加入10mL蒸馏水，搅拌5min后置于0-5℃的环境中冷却析晶15小时，过滤、干燥得43.9g半水合结晶的来那度胺的类白色固体，收率89.2％。
实施例6，以1，4-二氧六环、甲醇和二氯甲烷为混合溶剂加水重结晶；
将来那度胺的粗产物41.2g加入2L的圆底烧瓶中，加入618mL1，4-二氧六环(Dioxane)和206mL甲醇(MeOH)的混合溶剂，置于80℃油浴中加热搅拌至全部溶解，当溶液温度下降至40-50℃之间时，加入41.2g(1：1wt)活性炭，继续加热搅拌1小时，过滤除去活性炭。待温度下降至45℃后慢慢加入206mL二氯甲烷和4克蒸馏水(10.3：1wt)，搅拌5min后置于0-5℃的环境下冷却析晶15小时，过滤、干燥得38.3g半水合结晶的来那度胺的类白色固体，收率90％，得到产物晶型的X-粉末衍射图见附图7，经对比，该衍射图和WO2005/023192A2中所记载的来那度胺半水和结晶标准品的X-粉末衍射图一致。
实施例7，以N，N-二甲基甲酰胺和乙醚为混合溶剂加水重结晶；
将来那度胺的粗产物52.4g加入1L的圆底烧瓶中，加入365mLN,N-二甲基甲酰胺(DMF)置于80℃油浴中加热搅拌至全部溶解，当溶液温度下降至40-50℃之间时，加入5.3g(10：1wt)活性炭，继续加热搅拌1小时，过滤除去活性炭。待滤液温度冷却至45℃后加入365mL无水乙醚和4克蒸馏水(13.1：1wt)，置于10-20℃的温度下冷却析晶20小时过滤、干燥得50.4克半水合结晶的来那度胺的类白色固体，收率93％。
需要说明的是，上述实施例仅用于帮助本领域技术人员理解本发明的实质，而非对本发明具体的保护范围的限定。