一种吡嗪类衍生物和其制备方法及在制药中的应用.pdf

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摘要
申请专利号:

CN201010217332.7

申请日:

2010.07.05

公开号:

CN102311396A

公开日:

2012.01.11

当前法律状态:

授权

有效性:

有权

法律详情:

授权|||实质审查的生效IPC(主分类):C07D 241/12申请日:20100705|||公开

IPC分类号:

C07D241/12; C07D241/42; C07D241/24; A61K31/4965; A61K31/498; A61K31/497; A61P9/00; A61P25/08; A61P25/16; A61P25/14; A61P25/28; A61P9/10; A61P31/18(

主分类号:

C07D241/12

申请人:

暨南大学

发明人:

王玉强; 孙业伟; 于沛; 杜静; 张高小

地址:

510632 广东省广州市天河区黄埔大道西601号

优先权:

专利代理机构:

北京攀腾专利代理事务所(普通合伙) 11374

代理人:

彭蓉

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内容摘要

本发明涉及一种吡嗪类衍生物,具有如下通式I的结构:本发明也公开了该吡嗪类衍生物的合成方法。此类化合物具有抗氧化作用和溶栓作用,能够治疗因缺血引起的脑中风,也可用于制备治疗由于自由基过量产生和/或血栓形成引起的神经系统疾病,感染性疾病,代谢系统疾病,心、脑血管系统疾病以及退行性老化疾病等的药物。

权利要求书

1: 一种吡嗪类衍生物及其药学上可接受的盐, 所述吡嗪类衍生物具有如下通式 I 的结 构: 其中 : R1 和 R2 各自独立的为氢、 羟基或选自下列取代或未取代的基团 : 氨基, 羧基, 烷 基, 烷氧基, 芳基, 芳杂基, 酯类, 胺类, 氨基甲酸酯和硝酮基团 ; R3 和 R4 各自独立的为氢、 羟基或选自下列取代或未取代的基团 : 氨基, 羧基, 烷基, 烷氧 基, 芳基, 芳杂基, 酯类, 胺类, 氨基甲酸酯和硝酮基团, 或者 R3 和 R4 与其所连接的碳一起形 成取代或未取代的稠合的环 ; R1, R2, R3 和 R4 不能同时为氢, 且不能同时为甲基 ; 当 R1, R2, R3 和 R4 仅其中之一为硝酮基团时, 该硝酮基团不能为叔丁硝酮基团。
2: 根据权利要求 1 所述的吡嗪类衍生物及其药学上可接受的盐, 其中所述 R1 和 R3 各 自独立的为取代或未取代的硝酮基团, 所述 R2 和 R4 为烷基, 其具有如下通式 II 的结构 : 其中, R5 和 R6 各自独立的为取代或未取代的直链烷基、 支链烷基或环烷基。
3: 根据权利要求 2 所述的吡嗪类衍生物及其药学上可接受的盐, 其中所述 R2 和 R4 为 甲基, 所述 R5 和 R6 为叔丁基, 其具有如下式 TN-2 的结构 :
4: 根据权利要求 2 所述的吡嗪类衍生物及其药学上可接受的盐, 其中所述 R2 和 R4 为 甲基, 所述 R5 和 R6 为环己基, 其具有如下式 TN-3 的结构 :
5: 根据权利要求 1 所述的吡嗪类衍生物及其药学上可接受的盐, 其中 R3 和 R4 与其所 连接的碳一起形成取代的稠合的环, 所述环上的取代可以为烷基、 一个或多个硝酮基团。
6: 根据权利要求 5 所述的吡嗪类衍生物及其药学上可接受的盐, 其中所述吡嗪类衍生 物具有如下式 TN-4 或式 TN-5 的结构 : 2
7: 根据权利要求 1 所述的吡嗪类衍生物及其药学上可接受的盐, 其中通过所述 R1 和 / 或 R4 的取代形成具有二聚体或多聚体结构的吡嗪类衍生物。
8: 根据权利要求 7 所述的吡嗪类衍生物及其药学上可接受的盐, 其中通过所述 R4 的取 代形成具有二聚体结构的吡嗪类衍生物, 其具有如下通式 III 的结构 : 其中 : R7、 R8 和 R9 各自独立的为氢或取代或未取代的羟基、 烷基或硝酮基团 ; X 为 C、 O、 N 或 S, 并与其相邻的碳形成烃链、 醚、 氨或巯基连接, 或与其相邻的碳 ( 可氧化成羰基 ) 形 成酮、 酰氧基、 酰胺基等连接。
9: 根据权利要求 8 所述的吡嗪类衍生物及其药学上可接受的盐, 其中 X 为 N-tBu, 从而 所述二聚体结构的吡嗪类衍生物具有以下通式 IV : 并选自下列 TN-6 至 TN-14 化合物之一的结构 : TN-6 : R1, R2, R3, R7, R8, R9 = CH3 ; + TN-7 : R1 = HC = N (O-)tBu, R2, R3, R7, R8, R9 = CH3 ; + TN-8 : R1, R9 = HC = N (O-)tBu, R2, R3, R7, R8 = CH3 ; + TN-9 : R1, R8 = HC = N (O-)tBu, R2, R3, R7, R9 = CH3 ; + TN-10 : R1, R3, R8 = HC = N (O-)tBu, R2, R7, R9 = CH3 ; + TN-11 : R1, R7, R8 = HC = N (O-)tBu, R2, R3, R9 = CH3 ; + TN-12 :: R1, R2, R7, R8 = HC = N (O-)tBu, R3, R9 = CH3 ; + TN-13 : R1, R2, R7, R8 = HC = N (O-)tBu, R3, R9 = CH3 ; + TN-14 : R1, R2, R3, R7, R8, R9 = HC = N (O-)tBu。
10: 根据权利要求 8 所述的吡嗪类衍生物及其药学上可接受的盐, 其中所述吡嗪类衍 生物具有如下式 TN-15 或 TN-16 的结构 :
11: 根据权利要求 1 所述的吡嗪类衍生物及其药学上可接受的盐, 其中所述吡嗪类衍 生物具有如下通式 V 的结构 : 3 其中, R10 为取代或未取代的直链烷基、 支链烷基或环烷基, 也可以是具有生物活性的小 分子化合物如硫辛酸或半胱氨酸的基团。
12: 一种药用组合物, 其包括有效治疗剂量根据权利要求 1-11 之一所述的吡嗪类衍生 物作为药用活性成分, 以及药学上可接受的载体和赋形剂。
13: 制备权利要求 1 所述吡嗪类衍生物的方法, 其包括将吡嗪类起始化合物通过活性 二氧化硒氧化成醛, 所述醛再与相应的羟胺回流 3 小时, 而生成由硝酮基团单取代或多取 代的吡嗪类衍生物。
14: 制备权利要求 1 所述吡嗪类衍生物的方法, 其包括将吡嗪类起始化合物与 NBS 反应 经溴代后与活性化合物反应生成吡嗪类组合物, 其中所述活性化合物包括 :
15: 制备权利要求 8 所述吡嗪类衍生物的方法, 其包括所述吡嗪类衍生物由 3, 6- 二甲 基 -2, 5- 吡嗪二甲醛与叔丁基羟胺反应得到, 或者由 3, 6- 二甲基 -2, 5- 二溴甲基吡嗪与叔 丁基羟胺反应后, 经钨酸钠和过氧化氢氧化得到。
16: 权利要求 1-11 之一所述的吡嗪类衍生物或其组合物在制备治疗包括中风、 脑创 伤、 癫痫、 帕金森症、 亨廷顿氏病、 肌萎缩性 ( 脊髓 ) 侧索硬化、 阿耳茨海默 ( 氏 ) 病、 缺氧缺 血脑损伤、 爱滋病、 痴呆、 多发性硬化症或慢性痛类脑疾病药物中的应用。
17: 权利要求 1-11 之一所述的吡嗪类衍生物或其组合物在制备治疗包括心肺侧流、 呼 吸窘迫综合征、 心脏缺血或再灌注、 中毒性休克综合征、 成人呼吸窘迫综合征、 恶病质、 心肌 炎、 动脉粥样硬化、 冠心病或突发性心脏病类心脏和血管性疾病药物中的应用。
18: 权利要求 1-11 之一所述的吡嗪类衍生物或其组合物在制备治疗包括炎性肠病、 糖 尿病、 类风湿性关节炎、 哮喘、 肝硬变、 异体排斥、 脑脊髓炎、 脑 ( 脊 ) 膜炎、 胰腺炎、 腹膜炎、 血管炎病、 淋巴细胞性脉络丛脑膜炎、 脉络丛脑膜炎、 肾小球肾炎、 全身性红斑狼疮、 胃肠蠕 动紊乱、 肥胖症、 饥饿症、 肝炎或肾衰竭类疾病药物中的应用。
19: 权利要求 1-11 之一所述的吡嗪类衍生物或其组合物在制备治疗包括糖尿病性视 网膜病、 眼色素层炎、 青光眼、 睑炎、 睑板腺囊肿、 过敏性眼病、 角膜溃疡、 角膜炎、 白内障、 老 年性黄斑退行性改变或视神经炎类眼科疾病药物中的应用。
20: 权利要求 1-11 之一所述的吡嗪类衍生物或其组合物在制备治疗癌症药物中的应 用。

说明书


一种吡嗪类衍生物和其制备方法及在制药中的应用

    技术领域 本发明涉及一种吡嗪类化合物, 其制备方法和在制备用于治疗和预防由于自由基 过量产生和 / 或血栓形成引起的神经系统疾病, 心、 脑血管系统疾病以及退行性老化疾病, 代谢系统疾病等的药物中的应用。
     背景技术 氧对人类和动物的生命都非常重要, 作为正常代谢的一部分, 人体产生出多种活 性氧簇自由基 (ROS), 同时人体有多种使 ROS 失去活性的机制。 在正常状态下, ROS 的产生速 率不会超过组织代谢它们的能力, 但是在某些情况下, ROS 会升高到超出这些保护机制的水 平 ( 例如由于辐射、 环境因素、 铁离子负荷过多等 ), 或者当这些机制出现错误时 ( 例如遗传 缺陷 ), ROS 将造成细胞和组织损坏, 导致多种疾病甚至死亡。蛋白质、 脂肪和 DNA 都是 ROS 12 进攻的底物, 每天进入细胞的 10 个氧分子中, 有 1/100 会破坏蛋白质, 1/200 会破坏 DNA, 特别是当人体自然抵抗力低下的时候, 这种对 DNA、 蛋白质和脂质的破坏使得 ROS 变得非常 有害。
     正常情况下, 人类机体本身存在的抗自由基的防御系统能很好的对抗这些自由基 对机体的伤害。 但是病理条件下, 有些损伤性自由基逃脱清除, 这些逃逸的自由基及其产物 直接作用于细胞 DNA、 蛋白质及脂质引起 DNA 损伤和细胞膜脂质过氧化, 这种 ROS 产生的结 果, 专业术语称为氧化应激, 氧化应激可以影响正常的基因表达、 细胞分化以及造成细胞死 亡。现在氧化应激被认为是很多疾病的起因。
     大脑动脉粥样硬化和血栓栓子的形成可以诱发脑中风, 在发达国家, 脑血管疾病 已经成为继心脏病和肿瘤后的第三大死因, 65 岁老年人中有 5%受到脑中风的困扰。在美 国, 每年有超过 50 万人饱受中风的折磨, 70-85%的脑中风属于缺血性脑中风, 其死亡率为 15-33%。 现有的治疗急性缺血性脑中风的方法包括细胞保护和溶栓, 细胞保护力图保护在 缺血再灌注期间的细胞死亡, 溶栓主要是在疾病初期应用溶栓药保持血管畅通。尽管人们 做了大量的努力, 脑中风仍然是医学界最具破坏性的疾病之一, 现有的脑中风治疗效果不 理想的其中一个原因是还没有一个药物同时具有确切的溶栓和细胞保护作用。
     帕金森氏病 (PD) 是一种临床表现为静止性震颤、 肌强直、 运动减少和姿势步态异 常的疾病。目前已知本病的主要病变是黑质 - 纹状体变性, 导致多巴胺的生成减少, 引起上 述临床表现。但是引起黑质变性的原因至今尚未清楚。目前多数研究认为氧化应急在帕金 森氏病的发病过程中起重要作用。
     研究发现有许多化学物质都具有清除自由基的能力。 其中硝酮类化合物是具有强 的抗氧化活性和体内生物活性的一类化合物。 硝酮类化合物可以与自由基反应生成的最终 产物包括羟胺衍生物、 醛类、 胺类及氮氧自由基化合物。
     苯基叔丁基硝酮 (PBN) 可以与自由基反应生成氮氧自由基 : 氮氧自由基可以直接 与自由基反应从而去除自由基, 也可以氧化还原性金属从而抑制 Fenton 反应和金属催化 的 Haber-Weiss 反应。给加速衰老的小鼠每天腹腔注射 PBN, 其寿命延长 33% (Edamatsu
     et al., Biochem.Biophys.Res.Commun.211 : 847, 1995)。当 24 月大的大鼠每天腹腔注射 32mg/kg PBN, 连续给药 9.5 月, 大鼠大脑中两个负责认知功能的重要区域 ( 大脑皮层及苍 白球 ) 的脂质过氧化反应被减少, 同时老年大鼠的认知能力被提高。更重要的是, 实验进行 32 个月以后, 11 只注射 PBN 的大鼠中有 7 只仍然活着 (Sack et al., Neurosci.Lett.205 : 181, 1996)。遗憾的是 PBN 至今仍然未能开发成一个药物, 还只是作为科研工具。
     川芎嗪 (TMP) 是从中药川芎当中提取的活性成分, 川芎嗪具有清除自由基和抗凝 溶栓的作用。其注射液临床上已经用来治疗心脑血管疾病。但是, 川芎嗪的抗氧化作用微 弱, 生物利用度低, 临床上需要多次给药才能达到有效浓度。
     目前脑中风的治疗还没有特效药, 已经上市的为数不多的药物都因为疗效不佳或 毒副作用大而很难满足要求。治疗缺血性脑中风的药物必须具有两方面的功能 : 溶栓或 / 和保护神经细胞。 发明内容 本发明的目的在于提供一种吡嗪衍生物及其药学上可接受的盐, 该类化合物具有 较强的清除自由基能力和抗凝溶栓能力, 具有很强的神经保护能力。
     本发明的目的还在于提供所述吡嗪衍生物的制备方法。
     本发明的目的还在于提供所述吡嗪衍生物及其药用组合物在治疗疾病和制备相 应药物中的应用。
     在一方面, 本发明所提供的吡嗪衍生物具有下面的结构 ( 通式 I) 或者为其药学上 可接受的盐 :
     其中, R1 和 R2 各自独立的为氢、 羟基或选自下列取代或未取代的基团 : 氨基, 羧基, 烷基, 烷氧基, 芳基, 芳杂基, 酯类, 胺类, 氨基甲酸酯和硝酮基团 ;
     R3 和 R4 各自独立的为氢、 羟基或选自下列取代或未取代的基团 : 氨基, 羧基, 烷基, 烷氧基, 芳基, 芳杂基, 酯类, 胺类, 氨基甲酸酯和硝酮基团, 或者 R3 和 R4 与其所连接的碳一 起形成取代或未取代的稠合的环 ;
     R1, R2, R3 和 R4 不能同时为氢, 且不能同时为甲基 ;
     当 R1, R2, R3 和 R4 仅其中之一为硝酮基团时, 该硝酮基团不能为叔丁硝酮基团。
     根据本发明的一些实施方式, 通式 I 所述的化合物可通过其中 R1 和 / 或 R4 的取代 形成具有二聚体或多聚体结构的吡嗪类衍生物。
     另外, 本发明所提供的吡嗪衍生物及其药学上可接受的盐能够形成一种药用组合 物, 包括有效治疗剂量的吡嗪类衍生物作为药用活性成分, 以及药学上可接受的载体和赋 形剂。
     在另一方面, 本发明所提供的制备所述吡嗪类衍生物的方法, 包括例如将吡嗪类 起始化合物通过活性二氧化硒氧化成醛, 所述醛再与相应的羟胺回流而生成由硝酮基团单 取代或多取代的吡嗪类衍生物。相应的制备方法还包括将吡嗪类起始化合物与 NBS 反应经 溴代后与活性化合物反应生成吡嗪类组合物。
     在又一方面, 本发明所提供的吡嗪衍生物能用于治疗或预防由于 ROS 过量产生或 血栓形成所导致的疾病并能用于制备用于治疗或预防相应疾病的药物。
     本发明与现有技术相比, 具有如下优点 : 本发明提供了一种全新结构的物质, 同时 具有双重作用机理 ( 溶栓或 / 和细胞保护 ), 可以通过血脑屏障而且安全有效的化合物。 这 些化合物是值得开发的治疗和预防由于自由基过量产生和 / 或血栓形成引起的神经系统 疾病, 感染性疾病, 代谢系统疾病, 心、 脑血管系统疾病以及退行性老化疾病等的新药。 附图说明
     图 1 描述根据本发明的一种具体实施方式的化合物 TN-2 的合成方法。
     图 2 描述根据本发明的另一具体实施方式的化合物 TN-2 的合成方法。
     图 3 显示化合物 TN-2 对叔丁基过氧化氢 (t-BHP) 诱导的 PC12 细胞有明显的保护 作用。
     图 4 显示化合物 TN-2 对 MCAo 引起的脑缺血大鼠的保护作用。
     图 5 显示化合物 TN-2 对 MPP+ 诱导的多巴胺神经元损伤的保护作用。 具体实施方式 定义
     以下阐明本文所用到的各种术语的含义以及范围。
     本文所用的术语 “烷基” 是指未被取代的或被取代的直链、 支链或环形的多至 15 个碳原子的烷基碳链。 直链烷基包括如甲基、 乙基、 正丙基、 正丁基、 正戊基、 正己基、 正庚基 和正辛基。支链烷基包括如异丙基、 仲丁基、 异丁基、 叔丁基、 新戊基。环状烷基 ( “环烷基” ) 包括如环丙基、 环丁基、 环戊基和环己基。烷基可被一个或多个取代基取代。上述取代基的 非限定性例子包括 NH2、 NO2、 N(CH3)2、 ONO2、 F、 C1、 Br、 I、 OH、 OCH3、 CO2H、 CO2CH3、 CN、 芳基和杂 芳基。术语 “烷基” 也指未取代或取代的直链、 支链或环状的含有多至 15 个碳原子的在链 上含有至少一个杂原子 ( 例如氮、 氧或硫 ) 的烷基。上述直链烷基包括, 例如, CH2CH2OCH3、 CH2CH2N(CH3)2 和 CH2CH2SCH3。 支 链 基 团 包 括, 例 如, CH2CH(OCH3)CH3、 CH2CH(N(CH3)2)CH3 和 CH2CH(OCH3)CH3。 上 述 环 状 基 团 包 括, 例 如 六 员 环 CH(CH2CH2)2O、 CH(CH2CH2)2NCH3 和 CH(CH2CH2)2S 及相应的五员环等。上述烷基可被一个或多个取代基取代。上述取代基的非 限定性例子包括 NH2、 NO2、 N(CH3)2、 ONO2、 F、 Cl、 Br、 I、 OH、 OCH3、 CO2H、 CO2CH3、 CN、 芳基和杂芳 基。
     本文所用的术语 “芳基” 是指未被取代的或取代的芳香化合物、 碳环基团和杂芳 基。芳基或者是单环或者是多环稠合化合物。例如, 苯基是单环芳基。萘基是具有多环稠 合的芳基的例子。芳基可以被一个或多个取代基取代, 取代基的非限制性的例子包括 NH2、 NO2、 N(CH3)2、 ONO2、 F、 Cl、 Br、 I、 OH、 OCH3、 CO2H、 CO2CH3、 CN、 芳基和杂芳基。
     杂芳基涉及到取代的或非取代的单环或多环的基团, 环内至少包括一个杂原子, 譬如氮、 氧以及硫。 举例来说, 典型的杂环基团包括一个或多个氮原子譬如四唑基、 吡咯基、 吡啶基 ( 如 4- 吡啶基, 3- 吡啶基, 2- 吡啶基等 )、 哒嗪基、 吲哚基、 喹啉基 ( 如 2- 喹啉基, 3- 喹啉基等 )、 咪唑基、 异喹啉基, 吡唑基、 吡嗪基、 嘧啶基、 吡啶酮基或哒嗪基 ; 典型的含一 个氧原子的杂环基团包括 2- 呋喃基, 3- 呋喃基或苯并呋喃基 ; 典型的硫杂原子基团包括噻
     吩基、 苯并噻吩基 ; 典型的混合杂原子基团包括呋吖基、 噁唑基、 异噁唑基、 噻唑基和吩噻噁 基。杂环基团能被一个或多个取代基取代。这些取代基包括 NH2、 NO2、 O- 烷基、 NH- 烷基、 N( 烷基 )2、 NHC(O)- 烷基、 ONO2、 F、 Cl、 Br、 I、 OH、 OCF3、 OSO2CH3、 CO2H、 CO2- 烷基、 CN 以及芳 基和多芳基。这些情况同时包括环内杂原子被氧化, 譬如形成 N- 氧化物、 酮或砜。
     本文使用的术语 “药学上可接受的” 指的是在化合物如盐或赋形剂中不具有不能 接受的毒性。药学上可接受的盐包括无机阴离子, 例如氯离子、 溴离子、 碘离子、 硫酸根、 亚硫酸根、 硝酸根、 亚硝酸根、 磷酸根、 磷酸氢根等。有机阴离子包括乙酸根、 丙酸根、 肉桂 酸根、 苯甲磺酸根、 柠檬酸根、 乳酸根、 葡萄糖酸根等。药学上可接受的赋形剂在后文有 描述, 参见 E.W.Martin, in Remington’ s Pharmaceutical Sciences Mack Publishing th Company(1995), Philadelphia, PA, 19 ed。
     化合物、 制备、 用途及剂量
     在一方面, 本发明所提供的吡嗪衍生物及其药学上可接受的盐, 其中吡嗪衍生物 具有通式 I 的结构 :
     其中, R1 和 R2 各自独立的为氢、 羟基或选自下列取代或未取代的基团 : 氨基, 羧基, 烷基, 烷氧基, 芳基, 芳杂基, 酯类, 胺类, 氨基甲酸酯和硝酮基团 ;
     R3 和 R4 各自独立的为氢、 羟基或选自下列取代或未取代的基团 : 氨基, 羧基, 烷基, 烷氧基, 芳基, 芳杂基, 酯类, 胺类, 氨基甲酸酯和硝酮基团, 或者 R3 和 R4 与其所连接的碳一 起形成取代或未取代的稠合的环 ;
     R1, R2, R3 和 R4 不能同时为氢, 且不能同时为甲基 ;
     当 R1, R2, R3 和 R4 仅其中之一为硝酮基团时, 该硝酮基团不能为叔丁硝酮基团。
     根据一些具体实施方式, 通式 I 中的 R1 和 R3 各自独立的为取代或未取代的硝酮基 团, 所述 R2 和 R4 为烷基, 其具有如下通式 II 的结构 :
     其中, R5 和 R6 各自独立的为取代或未取代的直链烷基、 支链烷基或环烷基。
     优选地, 通式 II 中的 R2 和 R4 为甲基, R5 和 R6 为叔丁基, 从而其具有如下式 TN-2 的结构 :
     优选地, 通式 II 中的 R2 和 R4 为甲基, 所述 R5 和 R6 为环己基, 其具有如下式 TN-3 的结构 :
     另外, 根据不同的实施方式, 通式 I 所示的化合物中, R3 和 R4 与其所连接的碳一起 形成取代的稠合的环, 所述环上的取代可以为烷基、 一个或多个硝酮基团。 在具体的实施方 式中, 本发明的吡嗪类衍生物具有如下式 TN-4 或式 TN-5 的结构 :
     还有, 根据不同的实施方式, 通式 I 所示的化合物中, 通过所述 R4 的取代形成具有 二聚体结构的吡嗪类衍生物, 其具有如下通式 III 的结构 :其中 : R7、 R8 和 R9 各自独立的为氢或取代或未取代的羟基、 烷基或硝酮基团 ; X为 C、 O、 N 或 S, 并与其相邻的碳形成烃链、 醚、 氨或巯基连接, 或与其相邻的碳 ( 可氧化成羰基 ) 形成酮、 酰氧基、 酰胺基等连接。
     根据一些具体的实施方式, 上述具有二聚体结构的吡嗪类衍生物包括例如其中 X 为 N-tBu, 从而具有以下通式 IV :
     并选自下列 TN-6 至 TN-14 化合物之一的结构 : TN-6 : R1, R2, R3, R7, R8, R9 = CH3 ; + TN-7 : R1 = HC = N (O-)tBu, R2, R3, R7, R8, R9 = CH3 ;TN-8 : R1, R9 = HC = N+(O-)tBu, R2, R3, R7, R8 = CH3 ; +
     TN-9 : R1, R8 = HC = N (O-)tBu, R2, R3, R7, R9 = CH3 ; +
     TN-10 : R1, R3, R8 = HC = N (O-)tBu, R2, R7, R9 = CH3 ; +
     TN-11 : R1, R7, R8 = HC = N (O-)tBu, R2, R3, R9 = CH3 ; +
     TN-12 :: R1, R2, R7, R8 = HC = N (O-)tBu, R3, R9 = CH3 ; +
     TN-13 : R1, R2, R7, R8 = HC = N (O-)tBu, R3, R9 = CH3 ; +
     TN-14 : R1, R2, R3, R7, R8, R9 = HC = N (O-)tBu。
     根据另外的具体的实施方式, 上述具有二聚体结构的吡嗪类衍生物具有如下式 TN-15 或 TN-16 的结构 :
     再有, 根据不同的实施方案, 通式 I 所述的吡嗪类衍生物具有如下通式 V 的结构 :其中, R10 为取代或未取代的直链烷基、 支链烷基或环烷基, 也可以是具有生物活性 的小分子化合物如硫辛酸或半胱氨酸等基团。
     进一步, 本发明所提供的吡嗪衍生物及其药学上可接受的盐能够形成一种药用组 合物, 包括有效治疗剂量的吡嗪类衍生物作为药用活性成分, 以及药学上可接受的载体和 赋形剂。
     在另一方面, 制备所述吡嗪类衍生物的方法, 根据不同的实施方式例如包括将吡 嗪类起始化合物通过活性二氧化硒氧化成醛, 所述醛再与相应的羟胺回流 3 小时, 而生成 由硝酮基团单取代或多取代的吡嗪类衍生物。
     根据其它的实施方式, 制备所述吡嗪类衍生物的方法, 还包括将吡嗪类起始化合 物与 NBS 反应经溴代后与活性化合物反应生成吡嗪类组合物, 其中所述活性化合物包括 :
     根据另外的实施方式, 制备所述吡嗪类衍生物的方法, 还包括所述吡嗪类衍生物 由 3, 6- 二甲基 -2, 5- 吡嗪二甲醛与叔丁基羟胺反应得到, 或者由 3, 6- 二甲基 -2, 5- 二溴 甲基吡嗪与叔丁基羟胺反应后, 经钨酸钠和过氧化氢氧化得到。
     本发明中涉及的新化合物包括吡嗪的硝酮衍生物和吡嗪衍生物与生物活性化合 物的组合物, 它们都是具有抗血栓活性的抗氧化剂, 一方面它们可以清除人血液和组织中 ·的自由基包括超氧阴离子 (O2 )、 过氧硝酸根 (ONOO ) 和羟自由基 (·OH), 另一方面能够溶 解血管中的血栓, 因此, 它们可用于预防和治疗自由基过量和或血栓形成引起的疾病, 这些
     疾病包括但不限于神经系统疾病如缺血缺氧性脑损伤、 中风、 脑外伤、 老年痴呆症、 癫痫、 帕 金森氏病、 亨廷顿氏病、 肌萎缩侧索硬化症, 艾滋病痴呆症、 多发性硬化症、 慢性疼痛、 阴茎 异常勃起、 囊性纤维化、 精神分裂症、 抑郁症、 经前期综合征、 焦虑、 成瘾和偏头痛等 ; 还包括 心血管疾病如心脏侧流、 缺血 - 再灌注损伤、 缺血 - 再灌注、 中毒性休克症候群、 成人呼吸窘 迫症候群、 恶病质、 心肌炎、 动脉粥样硬化、 冠心病心脏疾病和心脏病发作等 ; 还包括炎症感 染性疾病如发炎性肠道疾病、 糖尿病、 类风湿关节炎、 哮喘、 肝硬化、 异体排斥反应、 脑脊髓 炎、 脑膜炎、 胰腺炎、 腹膜炎、 血管炎、 淋巴细胞性脉络丛脑膜炎、 肾小球肾炎、 系统性红斑狼 疮、 胃肠运动功能紊乱、 肥胖、 饮食过量、 肝炎和肾功能衰竭 ; 还包括眼科疾病, 如糖尿病视 网膜病变、 葡萄膜炎、 青光眼、 眼睑炎、 霰粒肿、 过敏性眼病、 角膜溃疡、 角膜炎、 白内障、 老年 黄斑变性和视神经炎 ; 这些新的化合物也可用于预防、 治疗癌症, 如成神经细胞瘤。
     本发明涉及吡嗪衍生物的硝酮衍生物和其与具有生物活性化合物的组合物, 可以 一种药学可接受的盐或药物复合物的形式对病人给药。 某个复合物需与适当载体或赋形剂 混合形成药物组合物从而保证达到有效治疗剂量。 “有效治疗剂量” 是指硝酮衍生物和耦合 物达到治疗效果 ( 抑制自由基过量, 降低因为中风、 心脏病突发或感染性疾病造成的细胞 损伤等 ) 所必须的剂量。 本发明涉及的化合物可以制成多种剂型, 包括固体剂型, 半固体剂型, 液体制剂 和气雾剂 (Remington’ s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company(1995), th Philadelphia, PA, 19 ed)。这几类剂型中的具体剂型包括片剂、 丸剂、 糖锭剂、 颗粒剂、 凝 胶剂、 膏剂、 溶液剂、 栓剂、 注射剂、 吸入剂以及喷雾剂。这些剂型既能用于局部或全身给药 又能用于速释或缓续给药, 此类药物的给药方式有很多种, 除了上述方式, 还有口腔给药、 面颊给药、 直肠给药、 腹膜给药、 腹膜内给药、 皮表给药、 皮下给药和气管内给药等。
     当吡嗪衍生物的硝酮衍生物和其与具有生物活性化合物的组合物注射给药时, 可以用水溶性或脂溶性的溶剂将此类化合物配制成溶液剂, 悬浊剂和乳剂。脂溶性溶剂 具体包括植物油及类似油类, 合成脂肪酸甘油酯, 高级脂肪酸酯以及乙二醇酯 (proylene glycol)。这类化合物更易溶于 Hank’ s 溶液, Ringer’ s 溶液或者生理盐水。
     当吡嗪衍生物的硝酮衍生物和其与具有生物活性化合物的组合物口服给药时, 可以采用常用技术将其与药学可接受的赋形剂制成复合物。这些赋形剂可以将这些化 合物制成多种可以被病人剂型, 如片剂、 丸剂、 混悬剂、 凝胶剂等。口服制剂的配制有多 种方法, 如先把化合物和固体赋形剂混匀, 充分研磨混合物, 添加适当的辅料, 加工处理 成颗粒。可以用于制成口服剂型的辅料包括 : 糖类如乳糖、 蔗糖、 甘露醇或山梨醇 ; 纤 维素类如玉米淀粉、 小麦淀粉、 马铃薯淀粉、 明胶、 西黄薯胶、 甲基纤维素、 羟甲基纤维素 (hydroxyproylmethyl-cellulose)、 羧甲基纤维素纳、 聚乙烯吡咯酮等。
     本发明涉及的化合物也可以制成喷雾剂, 此种剂型是通过一个加压器和一个喷雾 器或者一个干粉吸入装置而实现的。可以用作喷射器里合适的喷射剂如二氯二氟甲烷、 氟 三氯甲烷、 二氯四氟乙烷、 二氧化碳和二甲醚等。 气雾剂给药的剂量可以通过喷射器的阀门 来调节。
     本发明涉及的各种剂型都关系到所涉及化合物的有效治疗剂量。 该类化合物的有 效治疗剂量取决于接受治疗的病人。在决定适宜的剂量时, 病人的体重、 病情、 服药方式以 及处方医师的主观判断因素都要纳入考虑。 治疗有效量应该由有能力和丰富经验的处方医
     师决定。 实施例 实施例 1、 TN-2 的合成 ( 图 1)
     向 500mL 三 颈 瓶 中 加 入 200mL 甲 醇, 加 入 3, 6- 二 甲 基 -2, 5- 吡 嗪 二 甲 醛 2.0g(0.012mol), 然后加入 4.3g(0.048mol) 的叔丁基羟胺, 加热回流 3h。柱层析分离 ( 乙 酸乙酯 100 % ), 得到淡黄色的固体化合物 TN-21.0g。产率 26.8 %, mp : 198-201 ℃ .1H NMR(CDCl 3) : 1.61(s , 18H) , 2.48(s , 3H) , 2.50(s , 3H) , 7.83(s , 2H) ; ESI-MS : 307[M+H] +, 329[M+Na]+ ; Anal.(C12H19N3O)C.H.N ; found C 62.52%, H 8.73%, N 18.19% ; requires : C, 65.13 ; H, 8.65 ; N, 18.99。
     实施例 2、 TN-2 的合成 ( 图 2)
     将 2, 5- 二叔丁胺甲基 -3, 6- 二甲基吡嗪 5.6g(0.02mol) 加入到 250mL 圆底烧瓶 中, 加入适量的甲醇, 加入 1.64g(0.005mol)Na2WO4·2H2O, 30% H2O2 10mL, 室温搅拌 2h。过 滤, 蒸除甲醇, 加入饱和的 Na2S2O3, 乙酸乙酯萃取, 蒸除大部分乙酸乙酯。 经柱层析分离 ( 乙 酸乙酯 100% ), 得到白色的固体 TN-21.97g, 产率 32%, 检测数据同上。
     实施例 3、 TN-4 的合成
     250mL 的三颈瓶中加入 2- 甲基喹喔啉 2.88g(0.02mol), 20mg 过氧化苯甲酰, 加入 80mL CCl4, 70℃回流 10h。冷却过滤, 得到 2- 溴甲基喹喔啉的粗品, 化合物不经分离, 加入 过量的叔丁基胺, 室温搅拌 3h。得到 5- 叔丁胺甲基喹喔啉 1.25mg, 产率 29.1%。
     向上述得到的 670mg(0.006mol) 化合物中加入 60mL 甲醇, Na2WO4·2H2O 0.18g, 30% H2O21.75mL, 室温反应 2.5h。柱层析分离 ( 乙酸乙酯∶石油醚= 4 ∶ 1) 得到淡黄色 化 合 物 TN-3, 460mg, 产 率 35.9 %。1HNMR(CDCl3) : 1.70(s, 9H), 7.77(m, 2H), 8.03(m, 2H), Anal.(C13H15N3O)C.H.N ; found C 67.80%, H 8.14(s, 1H), 10.49(s, 1H) ; ESI-MS : 230[M+H]+ ; 6.90%, N 17.86% ; requires : C, 68.10 ; H, 6.59 ; N, 18.33。
     实施例 4、 TN-5 的合成 在 250mL 的三颈瓶中加入 5- 甲基喹喔啉 2.88g(0.02mol), 20mg 过氧化苯甲酰, 加入 80mL CCl4, 70℃回流 10h。冷却过滤, 得到 5- 溴甲基喹喔啉的粗品, 化合物不经分离, 加 入过量的叔丁基胺, 室温搅拌 3h。得到 5- 叔丁胺甲基喹喔啉 670mg, 产率 15.6%。
     向上述得到的 670mg(0.003mol) 化合物中加入 60mL 甲醇, Na2WO4·2H2O 0.1g, 30% H2O2 3.5mL, 室温反应 2.5h。柱层析分离 ( 乙酸乙酯∶石油醚= 2 ∶ 1) 得到淡黄色化合物 TN-4, 154mg, 产率 21.5%。1HNMR(CDCl3) : 1.69(s, 9H), 7.83(dd, 1H), 8.10(dd, 1H), 8.80(d, + 1H), 8.87(d, 1H), 9.19(s, 1H), 9.96(dd, 1H) ; ESI-MS : 230[M+H] ; Anal.(C13H15N3O)C.H.N ; found C 68.04%, H 6.95%, N 18.0% ; requires : C, 68.10 ; H, 6.59 ; N, 18.33。
     实施例 5、 TN-6 的合成
     在 250mL 的圆底烧瓶中加入 4.28g(0.02mol) 的 3, 5, 6- 三甲基 -2- 溴甲基吡嗪, 逐滴加入适量的叔丁基胺, 室温搅拌 12h, 过滤, 滤液蒸干, 粗品经柱层析分离 ( 石油醚∶ 乙 酸 乙 酯 = 5 ∶ 1) 得 白 色 的 粉 末 固 体 1.57g, 产 率 25 %。1HNMR(CDCl3) : 1.25(s, 9H),
     2.30(s, 6H), 2.35(s, 6H), 2.39(s, 6H), 3.86(s, 4H) ; ESI-MS : 342[M+H]+, 364[M+Na]+ ; Anal. (C12H19N3O)C.H.N ; found C62.52%, H 8.73%, N 18.19% ; requires : C, 65.13 ; H, 8.65 ; N, 18.99。
     实施例 6、 TN-7 的合成
     向实施例 5 中的得到的化合物 TN-6 0.682g(0.002mol) 中加入 100mL1, 4- 二氧六 环, 加入活性二氧化硒 330mg(0.003mol), 加热 107℃回流 3h, 用 2, 4- 二硝基苯肼显色为淡 黄色。冷却到室温, 蒸除 1, 4- 二氧六环, 柱层析分离 ( 石油醚∶乙酸乙酯= 2 ∶ 1)。得到 固体 237.8mg。产率 33.5%。
     向 100mL 乙 醇 中 加 入 上 述 得 到 的 237.8mg 固 体, 叔 丁 基 羟 胺 0.12g, 84 ℃ 回 流 3h, 冷却至室温。蒸除乙醇, 逐层析分离 ( 石油醚∶乙酸乙酯= 5 ∶ 1), 得到淡黄色固体 + + 183.5mg, 产率 64.3%。ESI-MS : 427[M+H] , 449[M+Na] 。
     实施例 7、 TN-15 的合成
     将 3.04g(0.02mol) 的 2- 羟甲基 -3, 5, 6- 三甲基吡嗪溶于适量的 THF 中, 加入 2g NaOH(0.05mol), 室温搅拌下加入 3, 5, 6- 三甲基 -2- 溴甲基吡嗪 5.35g(0.025mol)。过滤, 滤液蒸干, 粗品经柱层析分离 ( 石油醚∶乙酸乙酯= 3 ∶ 1) 得白色的粉末固体 4.8g, 产率 + + 84%。ESI-MS : 287[M+H] , 309[M+Na] 。
     实施例 8、 TN-16 的合成
     将 3.32g(0.02mol) 的 3, 5, 6- 三甲基吡嗪 -2- 甲酸溶于适量的 THF 中, 加入 6.90g K2CO3(0.05mol), 室温搅拌下加入 3, 5, 6- 三甲基 -2- 溴甲基吡嗪 5.35g(0.025mol)。过滤, 滤液蒸干, 粗品经柱层析分离 ( 石油醚∶乙酸乙酯= 3 ∶ 1) 得白色的粉末固体 4.5g, 产率 + + 323[M+Na] 。 75%。ESI-MS : 301[M+H] ,
     实施例 9、 TN-17 的合成
     将 4.88g(0.02mol) 生物素溶解于 100ml DMF 中。搅拌下滴加 2.9ml(0.02mol) 三 乙胺和 3, 5, 6- 三甲基 -2- 溴甲基吡嗪 5.35g(0.025mol)。 室温搅拌 5h。 TLC 检测反应结束。 加入 80ml 水稀释溶液, 用 (100ml×2) 三氯甲烷萃取, 合并有机相, 用 (100ml×2) 水洗, 无 水 Na2SO4 干燥。经柱层析分离。得白色的粉末固体 5.2g, 产率 68.8%。ESI-MS : 379[M+H]+, 401[M+Na]+。
     实施例 10、 TBN 对大鼠脑细胞保护作用实验 ( 图 3)
     将 PC12 细胞接种于强吸附的 96 孔板上, 每孔 90μL, 置 37℃, 5% CO2 培养箱中培 养 36h。36h 后加入四个浓度梯度的各药物。置 37℃, 5% CO2 培养箱中孵育半个小时后, 换 为无血清培养基, 在除去对照组 (Control) 的各孔中加入 10μL 的 t-BHP(t-BHP 终浓度是
     200μM)。 然后放于培养箱中培养 24 小时。 细胞培养 24 小时后, 每孔中加入 15μL MTT(5mg/ mL), 放于培养箱中培养 4h, 然后每孔加入 150μL 的 DMSO, 继续孵育至少半小时以确保晶体 完全溶解。酶标仪 570nm 测吸光度 A 值。结果表明 TN-2 对 t-BHP 诱导的细胞损伤有显著 的保护作用, 其作用强度显著高于 TMP, ( 图 3)。图 3 说明, 与 t-BHP 组相比 *P < 0.05, 有 显著性差异。
     实施例 11、 TN-2 对 MCAO 引起的脑缺血大鼠的保护作用实验 ( 图 4)
     将体重为 260-300g 的大鼠 (SD 雌性大鼠 ) 用 10%的水合氯醛按 400mg/kg 的剂 量腹腔注射麻醉抑或用 3.5 %氟烷吸入麻醉。在 MCAO( 大脑中动脉阻塞缺血模型 ) 入口 用尼龙线阻塞而致脑缺血。缺血 1h 后, 分别静脉注射给予 EDA(63mg/kg), TBN(80mg/kg), TN-2(65mg/kg) 和生理盐水 ( 对照组 )。每组大鼠 6 只。缺血 2h 后, 去除尼龙线阻塞, 再灌 注 24h。取出脑组织, 离去小脑。PBS 溶液中冲洗干净, 放入 -20℃冰箱中冷冻片刻, 将脑组 织均匀的切成厚约 2mm 的薄片, 立刻置于 0.5%的红四氮唑染料 (TTC) 溶液中。37℃孵育 30min。 评价脑梗死的程度。 结果表明 TN-2 对大鼠脑中风有显著的治疗作用 ( 图 4)。 图中, 数据经单尾 t 检验。* 表示与对照相比。药物剂量 : TBN(80mg/kg) ; 依达拉奉 (Edaravone) (63mg/kg)。各药物为等摩尔浓度。 实施例 12、 TN-2 对 MPP+ 诱导的多巴胺神经元损伤的保护作用实验 ( 图 6)
     多巴胺神经元培养 5d 后, 加入 L-Deprenyl, TMP, TN-2, 浓度梯度为 500μM, 50μM, + + 5μM。2 小时后在除去对照组 (Control) 的各孔中加入 MPP (MPP 终浓度是 10μM)。图 5 结果表明 TN-2 对 MPP+ 诱导的细胞损伤有显著的保护作用。
     等效性说明
     上述对本发明的具体描述清晰说明了此新化合物对过量自由基引发的疾病如神 经系统疾病, 心血管疾病, 炎症和癌症的治疗或预防提供了独特的方法。 尽管具体的实施例 已经在这里详细说明, 这仅作为本发明目的实例说明, 而不限制下述权利要求书对本发明 权利要求的范围。特别指出, 发明者经过审慎考虑, 本发明不同的取代、 改变和修饰都不偏 离本发明权利要求所定义的内涵和外延。
    

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1、10申请公布号CN102311396A43申请公布日20120111CN102311396ACN102311396A21申请号201010217332722申请日20100705C07D241/12200601C07D241/42200601C07D241/24200601A61K31/4965200601A61K31/498200601A61K31/497200601A61P9/00200601A61P25/08200601A61P25/16200601A61P25/14200601A61P25/28200601A61P9/10200601A61P31/18200601A61P25/0020。

2、0601A61P25/04200601A61P11/00200601A61P1/00200601A61P3/10200601A61P19/02200601A61P29/00200601A61P11/06200601A61P1/16200601A61P37/06200601A61P1/18200601A61P13/12200601A61P37/02200601A61P3/04200601A61P27/02200601A61P27/06200601A61P27/14200601A61P27/12200601A61P35/00200601A61P43/0020060171申请人暨南大学地址51063。

3、2广东省广州市天河区黄埔大道西601号72发明人王玉强孙业伟于沛杜静张高小74专利代理机构北京攀腾专利代理事务所普通合伙11374代理人彭蓉54发明名称一种吡嗪类衍生物和其制备方法及在制药中的应用57摘要本发明涉及一种吡嗪类衍生物,具有如下通式I的结构本发明也公开了该吡嗪类衍生物的合成方法。此类化合物具有抗氧化作用和溶栓作用,能够治疗因缺血引起的脑中风,也可用于制备治疗由于自由基过量产生和/或血栓形成引起的神经系统疾病,感染性疾病,代谢系统疾病,心、脑血管系统疾病以及退行性老化疾病等的药物。51INTCL19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书3页说明书11页附图2页CN10。

4、2311397A1/3页21一种吡嗪类衍生物及其药学上可接受的盐,所述吡嗪类衍生物具有如下通式I的结构其中R1和R2各自独立的为氢、羟基或选自下列取代或未取代的基团氨基,羧基,烷基,烷氧基,芳基,芳杂基,酯类,胺类,氨基甲酸酯和硝酮基团;R3和R4各自独立的为氢、羟基或选自下列取代或未取代的基团氨基,羧基,烷基,烷氧基,芳基,芳杂基,酯类,胺类,氨基甲酸酯和硝酮基团,或者R3和R4与其所连接的碳一起形成取代或未取代的稠合的环;R1,R2,R3和R4不能同时为氢,且不能同时为甲基;当R1,R2,R3和R4仅其中之一为硝酮基团时,该硝酮基团不能为叔丁硝酮基团。2根据权利要求1所述的吡嗪类衍生物及其。

5、药学上可接受的盐,其中所述R1和R3各自独立的为取代或未取代的硝酮基团,所述R2和R4为烷基,其具有如下通式II的结构其中,R5和R6各自独立的为取代或未取代的直链烷基、支链烷基或环烷基。3根据权利要求2所述的吡嗪类衍生物及其药学上可接受的盐,其中所述R2和R4为甲基,所述R5和R6为叔丁基,其具有如下式TN2的结构4根据权利要求2所述的吡嗪类衍生物及其药学上可接受的盐,其中所述R2和R4为甲基,所述R5和R6为环己基,其具有如下式TN3的结构5根据权利要求1所述的吡嗪类衍生物及其药学上可接受的盐,其中R3和R4与其所连接的碳一起形成取代的稠合的环,所述环上的取代可以为烷基、一个或多个硝酮基团。

6、。6根据权利要求5所述的吡嗪类衍生物及其药学上可接受的盐,其中所述吡嗪类衍生物具有如下式TN4或式TN5的结构权利要求书CN102311396ACN102311397A2/3页37根据权利要求1所述的吡嗪类衍生物及其药学上可接受的盐,其中通过所述R1和/或R4的取代形成具有二聚体或多聚体结构的吡嗪类衍生物。8根据权利要求7所述的吡嗪类衍生物及其药学上可接受的盐,其中通过所述R4的取代形成具有二聚体结构的吡嗪类衍生物,其具有如下通式III的结构其中R7、R8和R9各自独立的为氢或取代或未取代的羟基、烷基或硝酮基团;X为C、O、N或S,并与其相邻的碳形成烃链、醚、氨或巯基连接,或与其相邻的碳可氧化。

7、成羰基形成酮、酰氧基、酰胺基等连接。9根据权利要求8所述的吡嗪类衍生物及其药学上可接受的盐,其中X为NTBU,从而所述二聚体结构的吡嗪类衍生物具有以下通式IV并选自下列TN6至TN14化合物之一的结构TN6R1,R2,R3,R7,R8,R9CH3;TN7R1HCNOTBU,R2,R3,R7,R8,R9CH3;TN8R1,R9HCNOTBU,R2,R3,R7,R8CH3;TN9R1,R8HCNOTBU,R2,R3,R7,R9CH3;TN10R1,R3,R8HCNOTBU,R2,R7,R9CH3;TN11R1,R7,R8HCNOTBU,R2,R3,R9CH3;TN12R1,R2,R7,R8HCNO。

8、TBU,R3,R9CH3;TN13R1,R2,R7,R8HCNOTBU,R3,R9CH3;TN14R1,R2,R3,R7,R8,R9HCNOTBU。10根据权利要求8所述的吡嗪类衍生物及其药学上可接受的盐,其中所述吡嗪类衍生物具有如下式TN15或TN16的结构11根据权利要求1所述的吡嗪类衍生物及其药学上可接受的盐,其中所述吡嗪类衍生物具有如下通式V的结构权利要求书CN102311396ACN102311397A3/3页4其中,R10为取代或未取代的直链烷基、支链烷基或环烷基,也可以是具有生物活性的小分子化合物如硫辛酸或半胱氨酸的基团。12一种药用组合物,其包括有效治疗剂量根据权利要求111之。

9、一所述的吡嗪类衍生物作为药用活性成分,以及药学上可接受的载体和赋形剂。13制备权利要求1所述吡嗪类衍生物的方法,其包括将吡嗪类起始化合物通过活性二氧化硒氧化成醛,所述醛再与相应的羟胺回流3小时,而生成由硝酮基团单取代或多取代的吡嗪类衍生物。14制备权利要求1所述吡嗪类衍生物的方法,其包括将吡嗪类起始化合物与NBS反应经溴代后与活性化合物反应生成吡嗪类组合物,其中所述活性化合物包括15制备权利要求8所述吡嗪类衍生物的方法,其包括所述吡嗪类衍生物由3,6二甲基2,5吡嗪二甲醛与叔丁基羟胺反应得到,或者由3,6二甲基2,5二溴甲基吡嗪与叔丁基羟胺反应后,经钨酸钠和过氧化氢氧化得到。16权利要求111。

10、之一所述的吡嗪类衍生物或其组合物在制备治疗包括中风、脑创伤、癫痫、帕金森症、亨廷顿氏病、肌萎缩性脊髓侧索硬化、阿耳茨海默氏病、缺氧缺血脑损伤、爱滋病、痴呆、多发性硬化症或慢性痛类脑疾病药物中的应用。17权利要求111之一所述的吡嗪类衍生物或其组合物在制备治疗包括心肺侧流、呼吸窘迫综合征、心脏缺血或再灌注、中毒性休克综合征、成人呼吸窘迫综合征、恶病质、心肌炎、动脉粥样硬化、冠心病或突发性心脏病类心脏和血管性疾病药物中的应用。18权利要求111之一所述的吡嗪类衍生物或其组合物在制备治疗包括炎性肠病、糖尿病、类风湿性关节炎、哮喘、肝硬变、异体排斥、脑脊髓炎、脑脊膜炎、胰腺炎、腹膜炎、血管炎病、淋巴细。

11、胞性脉络丛脑膜炎、脉络丛脑膜炎、肾小球肾炎、全身性红斑狼疮、胃肠蠕动紊乱、肥胖症、饥饿症、肝炎或肾衰竭类疾病药物中的应用。19权利要求111之一所述的吡嗪类衍生物或其组合物在制备治疗包括糖尿病性视网膜病、眼色素层炎、青光眼、睑炎、睑板腺囊肿、过敏性眼病、角膜溃疡、角膜炎、白内障、老年性黄斑退行性改变或视神经炎类眼科疾病药物中的应用。20权利要求111之一所述的吡嗪类衍生物或其组合物在制备治疗癌症药物中的应用。权利要求书CN102311396ACN102311397A1/11页5一种吡嗪类衍生物和其制备方法及在制药中的应用技术领域0001本发明涉及一种吡嗪类化合物,其制备方法和在制备用于治疗和预。

12、防由于自由基过量产生和/或血栓形成引起的神经系统疾病,心、脑血管系统疾病以及退行性老化疾病,代谢系统疾病等的药物中的应用。背景技术0002氧对人类和动物的生命都非常重要,作为正常代谢的一部分,人体产生出多种活性氧簇自由基ROS,同时人体有多种使ROS失去活性的机制。在正常状态下,ROS的产生速率不会超过组织代谢它们的能力,但是在某些情况下,ROS会升高到超出这些保护机制的水平例如由于辐射、环境因素、铁离子负荷过多等,或者当这些机制出现错误时例如遗传缺陷,ROS将造成细胞和组织损坏,导致多种疾病甚至死亡。蛋白质、脂肪和DNA都是ROS进攻的底物,每天进入细胞的1012个氧分子中,有1/100会破。

13、坏蛋白质,1/200会破坏DNA,特别是当人体自然抵抗力低下的时候,这种对DNA、蛋白质和脂质的破坏使得ROS变得非常有害。0003正常情况下,人类机体本身存在的抗自由基的防御系统能很好的对抗这些自由基对机体的伤害。但是病理条件下,有些损伤性自由基逃脱清除,这些逃逸的自由基及其产物直接作用于细胞DNA、蛋白质及脂质引起DNA损伤和细胞膜脂质过氧化,这种ROS产生的结果,专业术语称为氧化应激,氧化应激可以影响正常的基因表达、细胞分化以及造成细胞死亡。现在氧化应激被认为是很多疾病的起因。0004大脑动脉粥样硬化和血栓栓子的形成可以诱发脑中风,在发达国家,脑血管疾病已经成为继心脏病和肿瘤后的第三大死。

14、因,65岁老年人中有5受到脑中风的困扰。在美国,每年有超过50万人饱受中风的折磨,7085的脑中风属于缺血性脑中风,其死亡率为1533。现有的治疗急性缺血性脑中风的方法包括细胞保护和溶栓,细胞保护力图保护在缺血再灌注期间的细胞死亡,溶栓主要是在疾病初期应用溶栓药保持血管畅通。尽管人们做了大量的努力,脑中风仍然是医学界最具破坏性的疾病之一,现有的脑中风治疗效果不理想的其中一个原因是还没有一个药物同时具有确切的溶栓和细胞保护作用。0005帕金森氏病PD是一种临床表现为静止性震颤、肌强直、运动减少和姿势步态异常的疾病。目前已知本病的主要病变是黑质纹状体变性,导致多巴胺的生成减少,引起上述临床表现。但。

15、是引起黑质变性的原因至今尚未清楚。目前多数研究认为氧化应急在帕金森氏病的发病过程中起重要作用。0006研究发现有许多化学物质都具有清除自由基的能力。其中硝酮类化合物是具有强的抗氧化活性和体内生物活性的一类化合物。硝酮类化合物可以与自由基反应生成的最终产物包括羟胺衍生物、醛类、胺类及氮氧自由基化合物。0007苯基叔丁基硝酮PBN可以与自由基反应生成氮氧自由基氮氧自由基可以直接与自由基反应从而去除自由基,也可以氧化还原性金属从而抑制FENTON反应和金属催化的HABERWEISS反应。给加速衰老的小鼠每天腹腔注射PBN,其寿命延长33EDAMATSU说明书CN102311396ACN1023113。

16、97A2/11页6ETAL,BIOCHEMBIOPHYSRESCOMMUN211847,1995。当24月大的大鼠每天腹腔注射32MG/KGPBN,连续给药95月,大鼠大脑中两个负责认知功能的重要区域大脑皮层及苍白球的脂质过氧化反应被减少,同时老年大鼠的认知能力被提高。更重要的是,实验进行32个月以后,11只注射PBN的大鼠中有7只仍然活着SACKETAL,NEUROSCILETT205181,1996。遗憾的是PBN至今仍然未能开发成一个药物,还只是作为科研工具。0008川芎嗪TMP是从中药川芎当中提取的活性成分,川芎嗪具有清除自由基和抗凝溶栓的作用。其注射液临床上已经用来治疗心脑血管疾病。。

17、但是,川芎嗪的抗氧化作用微弱,生物利用度低,临床上需要多次给药才能达到有效浓度。0009目前脑中风的治疗还没有特效药,已经上市的为数不多的药物都因为疗效不佳或毒副作用大而很难满足要求。治疗缺血性脑中风的药物必须具有两方面的功能溶栓或/和保护神经细胞。发明内容0010本发明的目的在于提供一种吡嗪衍生物及其药学上可接受的盐,该类化合物具有较强的清除自由基能力和抗凝溶栓能力,具有很强的神经保护能力。0011本发明的目的还在于提供所述吡嗪衍生物的制备方法。0012本发明的目的还在于提供所述吡嗪衍生物及其药用组合物在治疗疾病和制备相应药物中的应用。0013在一方面,本发明所提供的吡嗪衍生物具有下面的结构。

18、通式I或者为其药学上可接受的盐00140015其中,R1和R2各自独立的为氢、羟基或选自下列取代或未取代的基团氨基,羧基,烷基,烷氧基,芳基,芳杂基,酯类,胺类,氨基甲酸酯和硝酮基团;0016R3和R4各自独立的为氢、羟基或选自下列取代或未取代的基团氨基,羧基,烷基,烷氧基,芳基,芳杂基,酯类,胺类,氨基甲酸酯和硝酮基团,或者R3和R4与其所连接的碳一起形成取代或未取代的稠合的环;0017R1,R2,R3和R4不能同时为氢,且不能同时为甲基;0018当R1,R2,R3和R4仅其中之一为硝酮基团时,该硝酮基团不能为叔丁硝酮基团。0019根据本发明的一些实施方式,通式I所述的化合物可通过其中R1和。

19、/或R4的取代形成具有二聚体或多聚体结构的吡嗪类衍生物。0020另外,本发明所提供的吡嗪衍生物及其药学上可接受的盐能够形成一种药用组合物,包括有效治疗剂量的吡嗪类衍生物作为药用活性成分,以及药学上可接受的载体和赋形剂。0021在另一方面,本发明所提供的制备所述吡嗪类衍生物的方法,包括例如将吡嗪类起始化合物通过活性二氧化硒氧化成醛,所述醛再与相应的羟胺回流而生成由硝酮基团单取代或多取代的吡嗪类衍生物。相应的制备方法还包括将吡嗪类起始化合物与NBS反应经溴代后与活性化合物反应生成吡嗪类组合物。说明书CN102311396ACN102311397A3/11页70022在又一方面,本发明所提供的吡嗪衍。

20、生物能用于治疗或预防由于ROS过量产生或血栓形成所导致的疾病并能用于制备用于治疗或预防相应疾病的药物。0023本发明与现有技术相比,具有如下优点本发明提供了一种全新结构的物质,同时具有双重作用机理溶栓或/和细胞保护,可以通过血脑屏障而且安全有效的化合物。这些化合物是值得开发的治疗和预防由于自由基过量产生和/或血栓形成引起的神经系统疾病,感染性疾病,代谢系统疾病,心、脑血管系统疾病以及退行性老化疾病等的新药。附图说明0024图1描述根据本发明的一种具体实施方式的化合物TN2的合成方法。0025图2描述根据本发明的另一具体实施方式的化合物TN2的合成方法。0026图3显示化合物TN2对叔丁基过氧化。

21、氢TBHP诱导的PC12细胞有明显的保护作用。0027图4显示化合物TN2对MCAO引起的脑缺血大鼠的保护作用。0028图5显示化合物TN2对MPP诱导的多巴胺神经元损伤的保护作用。具体实施方式0029定义0030以下阐明本文所用到的各种术语的含义以及范围。0031本文所用的术语“烷基”是指未被取代的或被取代的直链、支链或环形的多至15个碳原子的烷基碳链。直链烷基包括如甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基、正庚基和正辛基。支链烷基包括如异丙基、仲丁基、异丁基、叔丁基、新戊基。环状烷基“环烷基”包括如环丙基、环丁基、环戊基和环己基。烷基可被一个或多个取代基取代。上述取代基的非限定性例子包括。

22、NH2、NO2、NCH32、ONO2、F、C1、BR、I、OH、OCH3、CO2H、CO2CH3、CN、芳基和杂芳基。术语“烷基”也指未取代或取代的直链、支链或环状的含有多至15个碳原子的在链上含有至少一个杂原子例如氮、氧或硫的烷基。上述直链烷基包括,例如,CH2CH2OCH3、CH2CH2NCH32和CH2CH2SCH3。支链基团包括,例如,CH2CHOCH3CH3、CH2CHNCH32CH3和CH2CHOCH3CH3。上述环状基团包括,例如六员环CHCH2CH22O、CHCH2CH22NCH3和CHCH2CH22S及相应的五员环等。上述烷基可被一个或多个取代基取代。上述取代基的非限定性例子。

23、包括NH2、NO2、NCH32、ONO2、F、CL、BR、I、OH、OCH3、CO2H、CO2CH3、CN、芳基和杂芳基。0032本文所用的术语“芳基”是指未被取代的或取代的芳香化合物、碳环基团和杂芳基。芳基或者是单环或者是多环稠合化合物。例如,苯基是单环芳基。萘基是具有多环稠合的芳基的例子。芳基可以被一个或多个取代基取代,取代基的非限制性的例子包括NH2、NO2、NCH32、ONO2、F、CL、BR、I、OH、OCH3、CO2H、CO2CH3、CN、芳基和杂芳基。0033杂芳基涉及到取代的或非取代的单环或多环的基团,环内至少包括一个杂原子,譬如氮、氧以及硫。举例来说,典型的杂环基团包括一个或。

24、多个氮原子譬如四唑基、吡咯基、吡啶基如4吡啶基,3吡啶基,2吡啶基等、哒嗪基、吲哚基、喹啉基如2喹啉基,3喹啉基等、咪唑基、异喹啉基,吡唑基、吡嗪基、嘧啶基、吡啶酮基或哒嗪基;典型的含一个氧原子的杂环基团包括2呋喃基,3呋喃基或苯并呋喃基;典型的硫杂原子基团包括噻说明书CN102311396ACN102311397A4/11页8吩基、苯并噻吩基;典型的混合杂原子基团包括呋吖基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基和吩噻噁基。杂环基团能被一个或多个取代基取代。这些取代基包括NH2、NO2、O烷基、NH烷基、N烷基2、NHCO烷基、ONO2、F、CL、BR、I、OH、OCF3、OSO2CH3、CO2H、CO2。

25、烷基、CN以及芳基和多芳基。这些情况同时包括环内杂原子被氧化,譬如形成N氧化物、酮或砜。0034本文使用的术语“药学上可接受的”指的是在化合物如盐或赋形剂中不具有不能接受的毒性。药学上可接受的盐包括无机阴离子,例如氯离子、溴离子、碘离子、硫酸根、亚硫酸根、硝酸根、亚硝酸根、磷酸根、磷酸氢根等。有机阴离子包括乙酸根、丙酸根、肉桂酸根、苯甲磺酸根、柠檬酸根、乳酸根、葡萄糖酸根等。药学上可接受的赋形剂在后文有描述,参见EWMARTIN,INREMINGTONSPHARMACEUTICALSCIENCESMACKPUBLISHINGCOMPANY1995,PHILADELPHIA,PA,19THED。。

26、0035化合物、制备、用途及剂量0036在一方面,本发明所提供的吡嗪衍生物及其药学上可接受的盐,其中吡嗪衍生物具有通式I的结构00370038其中,R1和R2各自独立的为氢、羟基或选自下列取代或未取代的基团氨基,羧基,烷基,烷氧基,芳基,芳杂基,酯类,胺类,氨基甲酸酯和硝酮基团;0039R3和R4各自独立的为氢、羟基或选自下列取代或未取代的基团氨基,羧基,烷基,烷氧基,芳基,芳杂基,酯类,胺类,氨基甲酸酯和硝酮基团,或者R3和R4与其所连接的碳一起形成取代或未取代的稠合的环;0040R1,R2,R3和R4不能同时为氢,且不能同时为甲基;0041当R1,R2,R3和R4仅其中之一为硝酮基团时,该。

27、硝酮基团不能为叔丁硝酮基团。0042根据一些具体实施方式,通式I中的R1和R3各自独立的为取代或未取代的硝酮基团,所述R2和R4为烷基,其具有如下通式II的结构00430044其中,R5和R6各自独立的为取代或未取代的直链烷基、支链烷基或环烷基。0045优选地,通式II中的R2和R4为甲基,R5和R6为叔丁基,从而其具有如下式TN2的结构0046说明书CN102311396ACN102311397A5/11页90047优选地,通式II中的R2和R4为甲基,所述R5和R6为环己基,其具有如下式TN3的结构00480049另外,根据不同的实施方式,通式I所示的化合物中,R3和R4与其所连接的碳一起。

28、形成取代的稠合的环,所述环上的取代可以为烷基、一个或多个硝酮基团。在具体的实施方式中,本发明的吡嗪类衍生物具有如下式TN4或式TN5的结构00500051还有,根据不同的实施方式,通式I所示的化合物中,通过所述R4的取代形成具有二聚体结构的吡嗪类衍生物,其具有如下通式III的结构00520053其中R7、R8和R9各自独立的为氢或取代或未取代的羟基、烷基或硝酮基团;X为C、O、N或S,并与其相邻的碳形成烃链、醚、氨或巯基连接,或与其相邻的碳可氧化成羰基形成酮、酰氧基、酰胺基等连接。0054根据一些具体的实施方式,上述具有二聚体结构的吡嗪类衍生物包括例如其中X为NTBU,从而具有以下通式IV00。

29、550056并选自下列TN6至TN14化合物之一的结构0057TN6R1,R2,R3,R7,R8,R9CH3;0058TN7R1HCNOTBU,R2,R3,R7,R8,R9CH3;说明书CN102311396ACN102311397A6/11页100059TN8R1,R9HCNOTBU,R2,R3,R7,R8CH3;0060TN9R1,R8HCNOTBU,R2,R3,R7,R9CH3;0061TN10R1,R3,R8HCNOTBU,R2,R7,R9CH3;0062TN11R1,R7,R8HCNOTBU,R2,R3,R9CH3;0063TN12R1,R2,R7,R8HCNOTBU,R3,R9CH。

30、3;0064TN13R1,R2,R7,R8HCNOTBU,R3,R9CH3;0065TN14R1,R2,R3,R7,R8,R9HCNOTBU。0066根据另外的具体的实施方式,上述具有二聚体结构的吡嗪类衍生物具有如下式TN15或TN16的结构00670068再有,根据不同的实施方案,通式I所述的吡嗪类衍生物具有如下通式V的结构00690070其中,R10为取代或未取代的直链烷基、支链烷基或环烷基,也可以是具有生物活性的小分子化合物如硫辛酸或半胱氨酸等基团。0071进一步,本发明所提供的吡嗪衍生物及其药学上可接受的盐能够形成一种药用组合物,包括有效治疗剂量的吡嗪类衍生物作为药用活性成分,以及药学。

31、上可接受的载体和赋形剂。0072在另一方面,制备所述吡嗪类衍生物的方法,根据不同的实施方式例如包括将吡嗪类起始化合物通过活性二氧化硒氧化成醛,所述醛再与相应的羟胺回流3小时,而生成由硝酮基团单取代或多取代的吡嗪类衍生物。0073根据其它的实施方式,制备所述吡嗪类衍生物的方法,还包括将吡嗪类起始化合物与NBS反应经溴代后与活性化合物反应生成吡嗪类组合物,其中所述活性化合物包括00740075根据另外的实施方式,制备所述吡嗪类衍生物的方法,还包括所述吡嗪类衍生物由3,6二甲基2,5吡嗪二甲醛与叔丁基羟胺反应得到,或者由3,6二甲基2,5二溴甲基吡嗪与叔丁基羟胺反应后,经钨酸钠和过氧化氢氧化得到。0。

32、076本发明中涉及的新化合物包括吡嗪的硝酮衍生物和吡嗪衍生物与生物活性化合物的组合物,它们都是具有抗血栓活性的抗氧化剂,一方面它们可以清除人血液和组织中的自由基包括超氧阴离子O2、过氧硝酸根ONOO和羟自由基OH,另一方面能够溶解血管中的血栓,因此,它们可用于预防和治疗自由基过量和或血栓形成引起的疾病,这些说明书CN102311396ACN102311397A7/11页11疾病包括但不限于神经系统疾病如缺血缺氧性脑损伤、中风、脑外伤、老年痴呆症、癫痫、帕金森氏病、亨廷顿氏病、肌萎缩侧索硬化症,艾滋病痴呆症、多发性硬化症、慢性疼痛、阴茎异常勃起、囊性纤维化、精神分裂症、抑郁症、经前期综合征、焦虑。

33、、成瘾和偏头痛等;还包括心血管疾病如心脏侧流、缺血再灌注损伤、缺血再灌注、中毒性休克症候群、成人呼吸窘迫症候群、恶病质、心肌炎、动脉粥样硬化、冠心病心脏疾病和心脏病发作等;还包括炎症感染性疾病如发炎性肠道疾病、糖尿病、类风湿关节炎、哮喘、肝硬化、异体排斥反应、脑脊髓炎、脑膜炎、胰腺炎、腹膜炎、血管炎、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎、肾小球肾炎、系统性红斑狼疮、胃肠运动功能紊乱、肥胖、饮食过量、肝炎和肾功能衰竭;还包括眼科疾病,如糖尿病视网膜病变、葡萄膜炎、青光眼、眼睑炎、霰粒肿、过敏性眼病、角膜溃疡、角膜炎、白内障、老年黄斑变性和视神经炎;这些新的化合物也可用于预防、治疗癌症,如成神经细胞瘤。0077。

34、本发明涉及吡嗪衍生物的硝酮衍生物和其与具有生物活性化合物的组合物,可以一种药学可接受的盐或药物复合物的形式对病人给药。某个复合物需与适当载体或赋形剂混合形成药物组合物从而保证达到有效治疗剂量。“有效治疗剂量”是指硝酮衍生物和耦合物达到治疗效果抑制自由基过量,降低因为中风、心脏病突发或感染性疾病造成的细胞损伤等所必须的剂量。0078本发明涉及的化合物可以制成多种剂型,包括固体剂型,半固体剂型,液体制剂和气雾剂REMINGTONSPHARMACEUTICALSCIENCES,MACKPUBLISHINGCOMPANY1995,PHILADELPHIA,PA,19THED。这几类剂型中的具体剂型包括。

35、片剂、丸剂、糖锭剂、颗粒剂、凝胶剂、膏剂、溶液剂、栓剂、注射剂、吸入剂以及喷雾剂。这些剂型既能用于局部或全身给药又能用于速释或缓续给药,此类药物的给药方式有很多种,除了上述方式,还有口腔给药、面颊给药、直肠给药、腹膜给药、腹膜内给药、皮表给药、皮下给药和气管内给药等。0079当吡嗪衍生物的硝酮衍生物和其与具有生物活性化合物的组合物注射给药时,可以用水溶性或脂溶性的溶剂将此类化合物配制成溶液剂,悬浊剂和乳剂。脂溶性溶剂具体包括植物油及类似油类,合成脂肪酸甘油酯,高级脂肪酸酯以及乙二醇酯PROYLENEGLYCOL。这类化合物更易溶于HANKS溶液,RINGERS溶液或者生理盐水。0080当吡嗪衍。

36、生物的硝酮衍生物和其与具有生物活性化合物的组合物口服给药时,可以采用常用技术将其与药学可接受的赋形剂制成复合物。这些赋形剂可以将这些化合物制成多种可以被病人剂型,如片剂、丸剂、混悬剂、凝胶剂等。口服制剂的配制有多种方法,如先把化合物和固体赋形剂混匀,充分研磨混合物,添加适当的辅料,加工处理成颗粒。可以用于制成口服剂型的辅料包括糖类如乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨醇;纤维素类如玉米淀粉、小麦淀粉、马铃薯淀粉、明胶、西黄薯胶、甲基纤维素、羟甲基纤维素HYDROXYPROYLMETHYLCELLULOSE、羧甲基纤维素纳、聚乙烯吡咯酮等。0081本发明涉及的化合物也可以制成喷雾剂,此种剂型是通过一个加压器。

37、和一个喷雾器或者一个干粉吸入装置而实现的。可以用作喷射器里合适的喷射剂如二氯二氟甲烷、氟三氯甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳和二甲醚等。气雾剂给药的剂量可以通过喷射器的阀门来调节。0082本发明涉及的各种剂型都关系到所涉及化合物的有效治疗剂量。该类化合物的有效治疗剂量取决于接受治疗的病人。在决定适宜的剂量时,病人的体重、病情、服药方式以及处方医师的主观判断因素都要纳入考虑。治疗有效量应该由有能力和丰富经验的处方医说明书CN102311396ACN102311397A8/11页12师决定。实施例0083实施例1、TN2的合成图10084向500ML三颈瓶中加入200ML甲醇,加入3,6二甲基2,5吡。

38、嗪二甲醛20G0012MOL,然后加入43G0048MOL的叔丁基羟胺,加热回流3H。柱层析分离乙酸乙酯100,得到淡黄色的固体化合物TN210G。产率268,MP1982011HNMRCDCL3161S,18H,248S,3H,250S,3H,783S,2H;ESIMS307MH,329MNA;ANALC12H19N3OCHN;FOUNDC6252,H873,N1819;REQUIRESC,6513;H,865;N,1899。00850086实施例2、TN2的合成图20087将2,5二叔丁胺甲基3,6二甲基吡嗪56G002MOL加入到250ML圆底烧瓶中,加入适量的甲醇,加入164G0005。

39、MOLNA2WO42H2O,30H2O210ML,室温搅拌2H。过滤,蒸除甲醇,加入饱和的NA2S2O3,乙酸乙酯萃取,蒸除大部分乙酸乙酯。经柱层析分离乙酸乙酯100,得到白色的固体TN2197G,产率32,检测数据同上。0088实施例3、TN4的合成0089250ML的三颈瓶中加入2甲基喹喔啉288G002MOL,20MG过氧化苯甲酰,加入80MLCCL4,70回流10H。冷却过滤,得到2溴甲基喹喔啉的粗品,化合物不经分离,加入过量的叔丁基胺,室温搅拌3H。得到5叔丁胺甲基喹喔啉125MG,产率291。0090向上述得到的670MG0006MOL化合物中加入60ML甲醇,NA2WO42H2O。

40、018G,30H2O2175ML,室温反应25H。柱层析分离乙酸乙酯石油醚41得到淡黄色化合物TN3,460MG,产率359。1HNMRCDCL3170S,9H,777M,2H,803M,2H,814S,1H,1049S,1H;ESIMS230MH;ANALC13H15N3OCHN;FOUNDC6780,H690,N1786;REQUIRESC,6810;H,659;N,1833。00910092实施例4、TN5的合成0093在250ML的三颈瓶中加入5甲基喹喔啉288G002MOL,20MG过氧化苯甲酰,加说明书CN102311396ACN102311397A9/11页13入80MLCCL4。

41、,70回流10H。冷却过滤,得到5溴甲基喹喔啉的粗品,化合物不经分离,加入过量的叔丁基胺,室温搅拌3H。得到5叔丁胺甲基喹喔啉670MG,产率156。0094向上述得到的670MG0003MOL化合物中加入60ML甲醇,NA2WO42H2O01G,30H2O235ML,室温反应25H。柱层析分离乙酸乙酯石油醚21得到淡黄色化合物TN4,154MG,产率215。1HNMRCDCL3169S,9H,783DD,1H,810DD,1H,880D,1H,887D,1H,919S,1H,996DD,1H;ESIMS230MH;ANALC13H15N3OCHN;FOUNDC6804,H695,N180;R。

42、EQUIRESC,6810;H,659;N,1833。00950096实施例5、TN6的合成0097在250ML的圆底烧瓶中加入428G002MOL的3,5,6三甲基2溴甲基吡嗪,逐滴加入适量的叔丁基胺,室温搅拌12H,过滤,滤液蒸干,粗品经柱层析分离石油醚乙酸乙酯51得白色的粉末固体157G,产率25。1HNMRCDCL3125S,9H,230S,6H,235S,6H,239S,6H,386S,4H;ESIMS342MH,364MNA;ANALC12H19N3OCHN;FOUNDC6252,H873,N1819;REQUIRESC,6513;H,865;N,1899。00980099实施例6。

43、、TN7的合成0100向实施例5中的得到的化合物TN60682G0002MOL中加入100ML1,4二氧六环,加入活性二氧化硒330MG0003MOL,加热107回流3H,用2,4二硝基苯肼显色为淡黄色。冷却到室温,蒸除1,4二氧六环,柱层析分离石油醚乙酸乙酯21。得到固体2378MG。产率335。0101向100ML乙醇中加入上述得到的2378MG固体,叔丁基羟胺012G,84回流3H,冷却至室温。蒸除乙醇,逐层析分离石油醚乙酸乙酯51,得到淡黄色固体1835MG,产率643。ESIMS427MH,449MNA。0102说明书CN102311396ACN102311397A10/11页140。

44、103实施例7、TN15的合成0104将304G002MOL的2羟甲基3,5,6三甲基吡嗪溶于适量的THF中,加入2GNAOH005MOL,室温搅拌下加入3,5,6三甲基2溴甲基吡嗪535G0025MOL。过滤,滤液蒸干,粗品经柱层析分离石油醚乙酸乙酯31得白色的粉末固体48G,产率84。ESIMS287MH,309MNA。01050106实施例8、TN16的合成0107将332G002MOL的3,5,6三甲基吡嗪2甲酸溶于适量的THF中,加入690GK2CO3005MOL,室温搅拌下加入3,5,6三甲基2溴甲基吡嗪535G0025MOL。过滤,滤液蒸干,粗品经柱层析分离石油醚乙酸乙酯31得白。

45、色的粉末固体45G,产率75。ESIMS301MH,323MNA。01080109实施例9、TN17的合成0110将488G002MOL生物素溶解于100MLDMF中。搅拌下滴加29ML002MOL三乙胺和3,5,6三甲基2溴甲基吡嗪535G0025MOL。室温搅拌5H。TLC检测反应结束。加入80ML水稀释溶液,用100ML2三氯甲烷萃取,合并有机相,用100ML2水洗,无水NA2SO4干燥。经柱层析分离。得白色的粉末固体52G,产率688。ESIMS379MH,401MNA。01110112实施例10、TBN对大鼠脑细胞保护作用实验图30113将PC12细胞接种于强吸附的96孔板上,每孔9。

46、0L,置37,5CO2培养箱中培养36H。36H后加入四个浓度梯度的各药物。置37,5CO2培养箱中孵育半个小时后,换为无血清培养基,在除去对照组CONTROL的各孔中加入10L的TBHPTBHP终浓度是说明书CN102311396ACN102311397A11/11页15200M。然后放于培养箱中培养24小时。细胞培养24小时后,每孔中加入15LMTT5MG/ML,放于培养箱中培养4H,然后每孔加入150L的DMSO,继续孵育至少半小时以确保晶体完全溶解。酶标仪570NM测吸光度A值。结果表明TN2对TBHP诱导的细胞损伤有显著的保护作用,其作用强度显著高于TMP,图3。图3说明,与TBHP。

47、组相比P005,有显著性差异。0114实施例11、TN2对MCAO引起的脑缺血大鼠的保护作用实验图40115将体重为260300G的大鼠SD雌性大鼠用10的水合氯醛按400MG/KG的剂量腹腔注射麻醉抑或用35氟烷吸入麻醉。在MCAO大脑中动脉阻塞缺血模型入口用尼龙线阻塞而致脑缺血。缺血1H后,分别静脉注射给予EDA63MG/KG,TBN80MG/KG,TN265MG/KG和生理盐水对照组。每组大鼠6只。缺血2H后,去除尼龙线阻塞,再灌注24H。取出脑组织,离去小脑。PBS溶液中冲洗干净,放入20冰箱中冷冻片刻,将脑组织均匀的切成厚约2MM的薄片,立刻置于05的红四氮唑染料TTC溶液中。37孵。

48、育30MIN。评价脑梗死的程度。结果表明TN2对大鼠脑中风有显著的治疗作用图4。图中,数据经单尾T检验。表示与对照相比。药物剂量TBN80MG/KG;依达拉奉EDARAVONE63MG/KG。各药物为等摩尔浓度。0116实施例12、TN2对MPP诱导的多巴胺神经元损伤的保护作用实验图60117多巴胺神经元培养5D后,加入LDEPRENYL,TMP,TN2,浓度梯度为500M,50M,5M。2小时后在除去对照组CONTROL的各孔中加入MPPMPP终浓度是10M。图5结果表明TN2对MPP诱导的细胞损伤有显著的保护作用。0118等效性说明0119上述对本发明的具体描述清晰说明了此新化合物对过量自由基引发的疾病如神经系统疾病,心血管疾病,炎症和癌症的治疗或预防提供了独特的方法。尽管具体的实施例已经在这里详细说明,这仅作为本发明目的实例说明,而不限制下述权利要求书对本发明权利要求的范围。特别指出,发明者经过审慎考虑,本发明不同的取代、改变和修饰都不偏离本发明权利要求所定义的内涵和外延。说明书CN102311396ACN102311397A1/2页16图1图2图3说明书附图CN102311396ACN102311397A2/2页17图4图5说明书附图CN102311396A。

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