Α晶型高乌甲素及其制备方法.pdf

本发明公开了α晶型高乌甲素及其制备方法，使用Cu-Kα辐射，其以2θ角度表示的X-射线粉末衍射在9.6±0.2°，10.2±0.2°，16.5±0.2°，16.9±0.2°，19.0±0.2°，19.3±0.2°处有特征峰。本发明α晶型高乌甲素具有较高的纯度和较好的收率，其纯度在99.7%以上，单个杂质含量在0.1%以下，制备方法工艺简单，操作方便，条件温和，不需要特殊的反应条件，适合规模化生产。

权利要求书
1.  α晶型高乌甲素，其特征在于：使用Cu-Kα辐射，其以2θ角度表示的X-射线粉末衍射在9.6±0.2°，10.2±0.2°，16.5±0.2°，16.9±0.2°，19.0±0.2°，19.3±0.2°处有特征峰。

2.  α晶型高乌甲素，其特征在于：使用Cu-Kα辐射，其以2θ角度表示的X-射线粉末衍射在9.6±0.2°，10.2±0.2°，12.3±0.2°，13.7±0.2°，16.5±0.2°，16.9±0.2°，19.0±0.2°，  19.3±0.2°，25.4±0.2°处有特征峰。

3.  α晶型高乌甲素，其特征在于：使用Cu-Kα辐射，其以2θ角度表示的X-射线粉末衍射在5.6±0.2°，6.0±0.2°，9.4±0.2°，9.6±0.2°，10.2±0.2°，11.2±0.2°，12.0±0.2°，12.3±0.2°，13.7±0.2°，15.2±0.2°， 16.5±0.2°，16.9±0.2°，17.4±0.2°，18.2±0.2°，19.0±0.2°，19.3±0.2°，19.8±0.2°，20.5±0.2°，21.5±0.2°，22.4±0.2°，24.1±0.2°，25.1±0.2°，25.4±0.2°，25.9±0.2°，26.4±0.2°，27.0±0.2°，29.2±0.2°，29.6±0.2°，31.1±0.2°，42.0±0.2°处有特征峰。

4.  根据权利要求3所述的α晶型高乌甲素，其特征在于：α晶型高乌甲素使用Cu-Kα辐射，其以2θ角度表示的X-射线粉末衍射具有如图1所示的图谱。

5.  根据权利要求1-3任意之一所述α晶型高乌甲素，其特征在于：所述α晶型高乌甲素的差示扫描量热分析检测结果显示在231土2℃处有尖锐的熔解吸热峰。

6.  权利要求1-3任意之一所述α晶型高乌甲素的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）将高乌甲素粗品加入到乙腈和其他溶剂的混合液中，加热溶解；
（2）将步骤（1）所得有机溶剂溶液降温至析晶温度，自然析晶；
（3）过滤，干燥，得晶体形式的α晶型高乌甲素；
所述其他溶剂选自C1-5的饱和直链或支链醇、酯、酮、醚及C4-6的环醚中的一种或多种。

7.  根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：其他溶剂选自甲醇、乙醇、异丙醇、乙酸乙酯、乙酸异丙酯、丙酮、异丙醚、甲基叔丁基醚、四氢呋喃中的一种或多种。

8.  根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：乙腈与其他溶剂的体积比为1: 0. 1-10。

9.  根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：所述析晶温度为0-20℃，析晶时间为1-12h。

10.  权利要求1-3所述α晶型高乌甲素在制备高纯度α晶型高乌甲素中的用途，其特征在于：将10g高乌甲素无定型粗品加热溶于体积比为1:0.5的250ml乙腈-乙醇溶液，降温析晶，抽滤，干燥，得到高纯度的α晶型高乌甲素，其中，所述高纯度是指其HPLC纯度在99.7%以上，单个杂质含量在0.1%以下。

说明书α晶型高乌甲素及其制备方法
技术领域
本发明涉及稳定的α晶型高乌甲素及其制备方法，属于医药化工技术领域。
背景技术
高乌甲素（Lappaconitine），其化学名称为（1α，14α，16β）-20-乙基-1，14，16-三甲氧乌头烷-4，8，9三醇-4-2-（乙酰氨基）苯甲酸酯，具有式                                                所示的化学结构，在我国作为非成瘾性镇痛药生产使用。高乌甲素具有强效镇痛作用，镇痛效果相当于吗啡，其镇痛作用是普通镇痛药氨基比林的7倍，与杜冷丁相当，且镇痛效果维持时间更长，更是曲马多的替代品种。临床证明高乌甲素局部麻醉作用等同于可卡因，作用持久；高乌甲素神经传导阻滞作用是可卡因的5.25倍，是普鲁卡因的13倍，且高乌甲素浸润麻醉作用远远强于普鲁卡因和可卡因。同时高乌甲素还具有高度安全性，无成瘾性、致突变和致癌作用，对免疫系统也无蓄积、刺激，变态反应以及毒性作用等临床优势。经临床应用证明，在规定的用法与用量范围内，使用高乌甲素无一例中毒病例发生。临床还证实高乌甲素对各种发热有显著的解热作用，其解热作用优于氨基比林，降温作用等同于阿司匹林等西药。
晶型(crystalline forms, polymorphs)是指结晶物质晶格内分子的排列形式。同一药物由于药物晶型的不同，其物理、化学（溶解度、熔点、溶出度、生物有效性等方面）性质可能会有显著不同，直接影响药物的质量与药效，因此药物晶型研究也是新药研究中的重要内容之一。目前还没有高乌甲素晶型研究与高乌甲素晶型专利的有关报道。

发明内容
发明人经过大量试验研究，发现了一种高乌甲素稳定的晶体形式α，本发明基于此发现而完成。
本发明实现过程：
  本发明提供α晶型高乌甲素，使用Cu-Kα辐射，其以2θ角度表示的X-射线粉末衍射在9.6±0.2°，10.2±0.2°，16.5±0.2°，16.9±0.2°，19.0±0.2°，19.3±0.2°处有特征峰。
  进一步地，所述α晶型高乌甲素，使用Cu-Kα辐射，其以2θ角度表示的X-射线粉末衍射在9.6±0.2°，10.2±0.2°，12.3±0.2°，13.7±0.2°，16.5±0.2°，16.9±0.2°，19.0±0.2°，19.3±0.2°，25.4±0.2°处有特征峰。
更进一步地，所述α晶型高乌甲素，使用Cu-Kα辐射，其以2θ角度表示的X-射线粉末衍射在5.6±0.2°，6.0±0.2°，9.4±0.2°，9.6±0.2°，10.2±0.2°，11.2±0.2°，12.0±0.2°，12.3±0.2°，13.7±0.2°，15.2±0.2°， 16.5±0.2°，16.9±0.2°，17.4±0.2°，18.2±0.2°，19.0±0.2°，19.3±0.2°，19.8±0.2°，20.5±0.2°，21.5±0.2°，22.4±0.2°，24.1±0.2°，25.1±0.2°，25.4±0.2°，25.9±0.2°，26.4±0.2°，27.0±0.2°，29.2±0.2°，29.6±0.2°，31.1±0.2°，42.0±0.2°处有特征峰。
在一个具体实施例中，所述α晶型高乌甲素，使用Cu-Kα辐射，其以2θ角度表示的X-射线粉末衍射具有如图1和2所示的图谱和数据。
本发明中，α晶型高乌甲素在以2θ角度表示的X-射线粉末衍射特征峰中，“±0.2°”表示特征峰位置所允许的合理测量误差范围。
本发明所述的α晶型高乌甲素的差示扫描量热分析（DSC）检测结果显示在220-240℃范围内有吸收峰；更具体地，在231土2℃处有尖锐的熔解吸热峰；在一个实施例中，所述α晶型高乌甲素具有如图3所示的DSC图谱。
本发明还提供了一种制备α晶型高乌甲素的方法，该方法包括以下步骤：
（1）将高乌甲素粗品加入到乙腈和其他溶剂的混合液中，加热溶解；
（2）将步骤（1）所得有机溶剂溶液降温至析晶温度，自然析晶；
（3）过滤，干燥，得晶体形式的高乌甲素晶型α。
其中所述其他溶剂选自C1-5的饱和直链或支链醇、酯、酮、醚及C4-6的环醚中的一种或多种；优选甲醇、乙醇、异丙醇、乙酸乙酯、乙酸异丙酯、丙酮、异丙醚、甲基叔丁基醚、四氢呋喃中的一种或多种；更优选乙醇、乙酸乙酯、丙酮、四氢呋喃中的一种或多种。乙腈与其他溶剂的体积比为1: 0. 1-10，优选1 : 0.1-2.0，更优选1 : 0.5-1.0。析晶温度为0-20℃，优选0-10℃，更优选0-5℃；析晶时间为1-12h，优选1-3h。
上述步骤(1)中加热溶解的温度为能使固体溶解的温度，优选60℃至回流温度，更优选80℃至回流温度；在一个实施例中加热溶解的温度为回流温度。
本发明还提供α晶型高乌甲素在制备高纯度高乌甲素中的用途，该用途可以通过如下方法实现：将10g高乌甲素无定型粗品加热溶于250ml乙腈-乙醇溶液(V乙腈：V乙醇=1:0.5)，降温析晶，抽滤，干燥，得到高纯度的高乌甲素；其中，所述“高纯度”是指其HPLC纯度在99.7%以上，单个杂质含量在0.1%以下。
本发明提供的α晶型高乌甲素具有较高的纯度和较好的收率，其纯度在99.7%以上，单个杂质含量在0.1%以下，且其方法工艺简单，操作方便，条件温和，不需要特殊的反应条件，因此适合规模化生产。
附图说明
图1为α晶型高乌甲素的X-射线粉末衍射图谱；
图2为α晶型高乌甲素的X-射线粉末衍射数据；
图3为α晶型高乌甲素的DSC图谱。
具体实施例
下面结合具体实施例对本发明作进一步阐述。这些实施例仅是出于解释说明的目的，而不限制本发明的范围和实质。
本发明实施例中所使用的试剂和采用的方法都为本领域的常规试剂和常规的操作方法。在下文中，如果未特别说明，本发明所用材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然尽可能详细描述。实施例所用高乌甲素无定型粗品为实施例1制得或与其相同（似）的方法制得。
本发明所用的测试仪器：
（1）X-射线粉末衍射仪
仪器型号：Thermo X’TRA 型X射线粉末衍射分析仪
测试方法：根据中国药典2010版二部（附录IX F X射线粉末衍射法）将研细后的样品(l00mg)填在玻璃板凹槽里，用载玻片将其平面与玻璃面挂齐平后，将样品置于Thermo X’TRA 型X射线粉末衍射分析仪中，使用40kV 40mA的铜X-射线源，扫描范围为2～45° (2θ)，扫描速度8° /分钟，扫描时间6分钟。扫描误差通常为土0.2°(2θ)。
（2）差示扫描量热仪
仪器型号：METTLER TGA/DSCI。
测试方法：根据JY/T014-1996热分析方法通则，将重3.10mg的样品置于具有小针孔的密闭铝盘中，在50℃下保持平衡，然后以10℃/min的扫描速率加热至350℃。干燥氮气被用作吹扫气体。
实施例1：无定型高乌甲素粗品的制备
    根据有关文献CN1088919A的报道，考虑到提取过程中的能耗、污染、反应温度和操作简便等，我们制备的工艺过程如下：
取干燥经粉碎的高乌头根0.25kg至于2.5L圆底烧瓶中，加入乙醇0.850L（85%浓度）浸泡12h，加热回流24h后过滤离心(2500r/min，10min)，上清液经减压蒸馏浓缩至有结晶出现，回收乙醇，静置24h析晶完全后，抽滤所得固体再经过乙醇重结晶，过滤，然后用五氧化二磷作为干燥剂，在干燥器中干燥除水。最后得到无定型高乌甲素粗品3.059g，产率为0.61%。
实施例2：高乌甲素晶型α的制备
将5.0g无定型高乌甲素粗品加入到100ml乙腈和50ml乙醇混合溶剂中，加热至溶解，缓慢降温至0~5℃析晶2h，抽滤，50℃真空干燥，得到4.l g白色高乌甲素晶型α，收率约82%，HLPC纯度99.8%；经测定，其X-射线粉末衍射图谱如图1所示，其DSC图谱如图3所示。
实施例3：高乌甲素晶型α的制备
将5.0g无定型高乌甲素粗品加入到100ml乙腈和20ml丙酮中，加热至溶解，缓慢降温至0~5℃析晶1h，抽滤，50℃真空干燥，得到3.6g白色高乌甲素晶型α，收率72%，HLPC纯度99.7%；经测定，其X-射线粉末衍射图谱与图1基本一致，其DSC图谱与图3基本一致。
实施例4：高乌甲素晶型α的制备
    将5.0g无定型高乌甲素粗品加入到100ml乙腈和20ml甲醇的混合溶剂中，加热溶解，缓慢降温至0~5℃析晶1h，抽滤，50℃真空干燥，得到3.8g白色高乌甲素晶型α，收率76%，HLPC纯度99.8%；经测定，其X-射线粉末衍射图谱与图1基本一致，其DSC图谱与图3基本一致。
实施例5：高乌甲素晶型α的制备
    将5.0g高乌甲素粗品加入到150ml乙腈和50ml异丙醇中，加热至回流溶解，缓慢降温至0~5℃析晶1h，抽滤，50℃真空干燥，得到3.4g白色高乌甲素晶型α，收率68%，HLPC纯度99.8%；经测定，其X-射线粉末衍射图谱与图1基本一致，其DSC图谱与图3基本一致。
实施例6：高乌甲素晶型α的制备
将5.0g高乌甲素粗品加入到150ml乙腈和50ml乙酸乙酯中，加热溶解，缓慢降温至0~5℃析晶1h，抽滤，50℃真空干燥，得到3.0g白色高乌甲素晶型α，收率65%，HLPC纯度99.9%；经测定，其X-射线粉末衍射图谱与图1基本一致，其DSC图谱与图3基本一致。
实施例7：稳定性试验
     尽管无定形药物在大多数场合都较晶型药物有更高的溶解度和溶出速率，但影响无定形药物临床使用的主要因素是它们的加工稳定性和贮存稳定性问题。另外，在生产过程中，某些无定形粒子的松密度较小，表面自由能高，也容易造成凝聚、流动性差、弹性变形性强等一系列制剂问题。因此，晶型药物在制剂稳定性方面更具优势。
     申请人对高乌甲素晶型α在不同条件下的稳定性进行考察，具体的稳定性考察的方法可以参照中国药典2010版第二部附录XIX 的方法；纯度检测用HPLC法，可以参照中国药典2010版第二部附录V D的方法；晶型的检测同实施例的方法。
取实施例2、实施例3制备的高乌甲素晶型α各一份，放置在45℃/ 湿度75%条件下30天，考察其稳定性，结果见表1。

以上数据表明，本发明得到的高乌甲素晶型α在通常条件下其纯度和晶型均具有良好的稳定性。
实施例8：溶解性试验
   药物的溶解性直接影响药物制剂的溶出和口服生物利用度，为考察高乌甲素晶型α的溶解性，发明人对其在不同条件的溶解性（水中）进行考察，

试验结果表明，无定形高乌甲素与α晶型高乌甲素在水中的溶解度均随温度的升高而升高，相同的温度下，α晶型高乌甲素的水溶性优于无定形高乌甲素，这为α晶型高乌甲素用于制备溶出良好的药物制剂奠定了良好基础。