一种高纯度的他唑巴坦钠化合物 【发明领域】
本发明涉及一种高纯度的他唑巴坦钠化合物的精制方法，属于医药技术领域。
背景技术
他唑巴坦钠(Tazobac tam Sod i um)，化学名称为：3a-甲基-7-氧代-3b-(1H-1，2，3，-三唑-1-亚甲基)-4-硫杂-1-氮杂双环[3.2.0]庚烷-2a-羧酸钠-4，4-二氧化物，分子式：C10H11N4NaO5S，分子量：322.27，结构式为：
是继克拉维酸(clavulanic acid)、舒巴坦(sulbactam)之后应用于临床的β-内酰胺酶抑制剂，由日本大鹏药业公司开发，它与哌拉西林的复合制剂于1992年由美国Cyanamid公司的Lederle子公司首先在法国上市，并于1993年先后在英、德、瑞士及美国上市。本品对多种酶型的抑制作用强于舒巴坦，相当于克拉维酸，但稳定性要优于后者，临床用于治疗全身性和局部感染及败血症等。
他唑巴坦钠是目前临床应用效果最好的b-内酰胺酶抑制剂之一，目前国内外对其合成及临床应用的研究一直十分活跃，随着有机合成水平的不断提高，它的合成路线及其工艺不断得到完善。他唑巴坦钠的合成根据所采用的原料不同，主要有三条合成路线，分别以舒巴坦，青霉素G钾盐，和6-氨基青霉烷酸(6-APA)为起始原料。(1)以舒巴坦为原料经叠氮化、保护、环合和脱保护合成他唑巴坦钠，这条路线主要存在以下两个缺点：①原料价格高，舒巴坦是以6-APA为原料，经重氮化、氧化，氢解、脱溴等几步反应制得的，收率仅为40％多，市场上以原料药形式出售，价格较高，②甲基的直接叠氮化反应难于发生，产率很低，是制约本合成路线的关键所在，邻位的硫已被完全氧化且甲基上没有其它取代基的情况下，叠氮化反应是非常困难的；(2)MicetichR.G和MaitiS.N等人1986年报道了以青霉素G钾盐为原料合成他唑巴坦钠的合成路线，这条合成路线除前四步反应外，其余步骤与以6-APA为原料的合成路线完全吻合。此路线优点在于青霉素G钾盐相对于6-氨基青霉烷酸价格便宜的多，缺点在于它同样使用了危险易爆的物质和在亲核取代反应中生成了六元环异构化副产物，总收率与前法相当。(3)以6-氨基青霉烷酸(6-APA)为原料合成他唑巴坦钠的研究最为活跃，HallT.W.等人提出以6-氨基青霉烷酸法制得他唑巴坦钠，目前国外工业化生产他唑巴坦钠的工艺路线大多以其为起始原料。
现有技术合成他唑巴坦钠的方法所得到的他唑巴坦钠原料，普遍存在纯度不高问题，导致了制剂稳定性大幅下降，影响了其临床应用。他唑巴坦钠原料药的纯度问题是影响该药物安全性和临床应用的突出问题之一。
【发明内容】
本发明的目的是提供一种他唑巴坦钠化合物的精制方法，提高了其纯度，改善了产品制剂质量。
为了实现上述发明目的，本发明技术方案如下：
本发明一方面提供了一种他唑巴坦钠化合物的精制方法，该方法包括以下步骤：
a.首先将他唑巴坦钠粗品溶于水，将其水溶液的pH值调节为酸性，收集溶液中析出的固体；
b.将步骤a得到的固体用与其相溶的有机溶剂溶解后，制得待精制溶液；
c.将待精制溶液置于大孔吸附树脂内，洗脱剂洗脱纯化，收集洗脱液；
d.调节步骤c得到的洗脱液pH值为中性，收集析出的固体，得到他唑巴坦钠精制品。
优选地，在所述的步骤a中，采用选自盐酸、硫酸、硝酸、枸橼酸、醋酸、硼酸和磷酸中的一种或者几种将他唑巴坦钠水溶液的pH值调节到1.0-4.0，搅拌，过滤，收集该溶液中析出的固体，并用纯水洗涤析出的固体。
更优选地，将他唑巴坦钠水溶液的pH值调节为2.0-3.0。
优选地，在所述的步骤b中，与步骤a得到的固体相溶的有机溶剂选自二氯甲烷、乙醇、甲醇、三氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、石油醚中的一种或两种以上的混合溶剂，。
更优选地，与步骤a得到的固体相溶的有机溶剂为二氯甲烷和甲醇的混合物，二者体积比为3∶2。
优选地，在所述的步骤c中，所述的大孔吸附树脂为苯乙烯型大孔吸附树脂，优选D101型大孔吸附树脂或AB-8型大孔吸附树脂。
优选地，在所述的步骤c中，所述的洗脱剂选自三氯甲烷、二氯甲烷、乙醇、异丙醇、叔丁醇、乙酸乙酯、丙酮和石油醚中的一种或几种。
优选地，在所述的步骤c中，所述的洗脱剂为二氯甲烷和乙酸乙酯的混合物，并且二者的体积比为1∶2。
优选地，在所述的步骤d中，采用氢氧化钠、碳酸氢钠、碳酸钠、醋酸钠、异辛酸钠、磷酸氢二钠和枸橼酸钠中地一种或几种调节步骤c得到的洗脱液的pH值为5.0-8.0，优选为5.5-6.5。
优选地，其中在所述的步骤d中：将析出的固体，离心机离心，收集离心后的固体并用异丙醇洗涤，50-60℃真空干燥4-6小时，得到他唑巴坦钠精制品。
本发明的有益效果在于：上述本发明方法得到的他唑巴坦钠化合物精制品，纯度达到99.0％以上，特别是能够达到99.8％以上。与现有他唑巴坦钠化合物制备方法相比，本发明方法，可以制得高纯度的精制品，纯度达99.8％以上，而且收率超过90％。本发明方法还可以获得一种高纯度的他唑巴坦钠，从而可以提高其相应制剂稳定性和临床用药效果。本发明方法简单、易于操作，适于大规模工业化生产。
本发明所述的他唑巴坦钠化合物的纯度的检测方法为：
色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-磷酸二氢钾溶液(0.03mol/L)-氢氧化四丁基铵溶液(10％)(190∶795∶15)(用磷酸调pH值为4.0)为流动相，检测波长为230nm，理论板数按他唑巴坦峰计算应不低于3500；拖尾因子应不大于1.5，重复进样，其相对标准差(RSD)应小于2.0％。
取本品适量，用流动相溶解并制成每1ml中含1.0mg的溶液，作为供试品溶液；量取适量，用流动相制成每1ml中含50μg的溶液，作为对照溶液。取供试品溶液与对照溶液各20μl分别进样，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，量取各杂质峰面积的和，不得大于对照溶液主成分峰的峰面积(4.0％)。
【具体实施方式】
以下通过具体实施方式进一步解释或说明本发明内容，但实施例不应被理解为对本发明保护范围的限制。
以下实施例所用D101大孔树脂和AB-8大孔树脂购自蚌埠市辽源新材料有限公司。HPLC检测他唑巴坦钠粗品的纯度为95.5％。
实施例1
他唑巴坦钠的精制
(1)将100g他唑巴坦钠粗品溶于1500ml水，加入0.01mol/L的硫酸溶液调节pH值为2.0，搅拌析出不溶物，过滤，经纯化水洗涤后得到固体；
(2)将步骤(1)所得固体用二氯甲烷和甲醇(体积比3∶2)的混合物1000ml溶解，加入填有D101大孔树脂的柱子通过，再用二氯甲烷和乙酸乙酯(体积比1∶2)混合物500ml作为洗脱剂洗脱纯化，收集洗脱液；
(3)将步骤(2)所得洗脱液用5％异辛酸钠溶液调节pH值为5.5，析出固体，离心机离心10min，用500ml乙酸乙酯洗涤，50℃真空干燥6小时，得精制品93.1g，收率93.1％，HPLC检测纯度为99.95％。
实施例2
他唑巴坦钠的精制
(1)将100g他唑巴坦钠粗品溶于1500ml水，加入0.05mol/L的盐酸溶液调节pH值为3.0，搅拌析出不溶物，过滤，经纯化水洗涤后得到固体；
(2)将步骤(1)所得固体用二氯甲烷和甲醇(体积比3∶2)的混合物1000ml溶解，加入填有AB-8大孔吸附树脂的柱子通过，再用二氯甲烷和乙酸乙酯(体积比1∶2)混合物500ml作为洗脱剂洗脱纯化，收集洗脱液；
(3)将步骤(2)所得洗脱液用5％碳酸氢钠溶液调节pH值为6.5，析出固体，离心机离心20min，用500ml乙酸乙酯洗涤，60℃真空干燥4小时，得精制品92.2g，收率92.2％，HPLC检测纯度为99.92％。
实施例3他唑巴坦钠的精制
(1)将100g他唑巴坦钠粗品溶于1500ml水，加入0.1mol/L的磷酸溶液调节pH值为4.0，搅拌析出不溶物，过滤，经纯化水洗涤后得到固体；
(2)将步骤(1)所得固体用二氯甲烷和甲醇(体积比3∶2)的混合物1000ml溶解，加入填有AB-8大孔吸附树脂的柱子通过，再用二氯甲烷和乙酸乙酯(体积比1∶2)混合物600ml作为洗脱剂洗脱纯化，收集洗脱液；
(3)将步骤(2)所得洗脱液用0.01mol/L醋酸钠溶液调节pH值为8.0，析出固体，离心机离心10min，用500ml乙酸乙酯洗涤，55℃真空干燥5小时，得精制品91.7g，收率91.7％，HPLC检测纯度为99.91％。
实施例4他唑巴坦钠的精制
(1)将100g他唑巴坦钠粗品溶于1500ml水，加入0.5mol/L的枸橼酸溶液调节pH值为1.0，搅拌析出不溶物，过滤，经纯化水洗涤后得到固体；
(2)将步骤(1)所得固体用二氯甲烷和甲醇(体积比3∶2)的混合物1000ml溶解，加入填有D101大孔吸附树脂的柱子通过，再用二氯甲烷和乙酸乙酯(体积比1∶2)混合物500ml作为洗脱剂洗脱纯化，收集洗脱液；
(3)将步骤(2)所得洗脱液用1mol/L枸橼酸钠溶液调节pH值为5.0，析出固体，离心机离心20min，用500ml乙酸乙酯洗涤，60℃真空干燥5小时，得精制品93.3g，收率93.3％，HPLC检测纯度为99.95％。
实施例5他唑巴坦钠的精制
(1)将100g他唑巴坦钠粗品溶于1500ml水，加入1％的醋酸溶液调节pH值为2.5，搅拌析出不溶物，过滤，经纯化水洗涤后得到固体；
(2)将步骤(1)所得固体用二氯甲烷和甲醇(体积比3∶2)的混合物1000ml溶解，加入填有D101大孔吸附树脂的柱子通过，再用二氯甲烷和乙酸乙酯(体积比1∶2)混合物500ml作为洗脱剂洗脱纯化，收集洗脱液；
(3)将步骤(2)所得洗脱液用2％枸橼酸钠溶液调节pH值为6.0，析出固体，离心机离心10min，用500ml乙酸乙酯洗涤，60℃真空干燥4小时，得精制品94.3g，收率94.3％，HPLC检测纯度为99.88％。
应当理解，这些实施例仅仅是对本发明优选方案的说明，而并不以任何方式限制本发明的保护范围。本领域技术人员在本发明所公开内容的教导下，在不背离本发明精神和主旨的前提下，可以对本发明进行适当的修饰和改进，这些都将落入本发明的范围之内。