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1、(10)申请公布号 CN 102301971 A (43)申请公布日 2012.01.04 CN 102301971 A *CN102301971A* (21)申请号 201110223358.7 (22)申请日 2011.08.05 A01K 61/00(2006.01) (71)申请人 青岛农业大学 地址 266109 山东省青岛市城阳区长城路 700 号 (72)发明人 王春德 李继强 刘保忠 李建立 王文琪 杜厚宽 (74)专利代理机构 青岛海昊知识产权事务所有 限公司 37201 代理人 张中南 (54) 发明名称 紫海杂交扇贝新品种的培育方法 (57) 摘要 本发明涉及一种紫海杂交。
2、扇贝新品种的培育 方法。首先利用紫扇贝卵子和海湾扇贝精子受精 建立多个紫海杂交子一代家系， 根据各杂交家系 的表现型选择优良杂交家系， 然后从优良杂交家 系中选择雌雄同体的优良个体， 促熟后分别自体 受精建立多个自交家系 ； 第二年从上述自交家系 中再选择优良家系， 然后从优良家系中进一步选 择雌雄同体的优良个体继续进行自交、 选择 ； 这 样按同样的方法连续自交三代以上， 即获得稳定 遗传且生长快、 个体大、 温度耐受范围广的紫海杂 交扇贝新品种。本发明同样也可采用群体培育的 方法实现。鉴于本发明的紫海杂交新品种同时具 有海湾扇贝和紫扇贝的优良特点， 因此实现了在 青岛和大连等北方海域养殖，。
3、 产量比海湾扇贝提 高 30以上。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 2 页 说明书 4 页 CN 102301972 A1/2 页 2 1. 一种紫海杂交扇贝新品种的家系培育方法， 其特征在于首先利用紫扇贝卵子和海 湾扇贝精子受精建立多个紫海杂交子一代家系， 根据各杂交家系的表现型选择优良杂交家 系， 然后从优良杂交家系中选择雌雄同体的优良个体， 促熟后分别自体受精建立多个自交 家系 ； 第二年从上述自交家系中再选择优良家系， 然后从优良家系中进一步选择雌雄同体 的优良个体继续进行自交、 选择 ； 这样按同样的方法连续自交三代以上。
4、， 即获得稳定遗传且 生长快、 个体大、 温度耐受范围广的紫海杂交扇贝新品种。 2. 一种紫海杂交扇贝新品种的家系培育方法， 具体操作步骤如下 ： 1） 紫海杂交一代家系的培育 ： 选择壳高 5 厘米以上的紫扇贝和海湾扇贝各 50 个， 在 1 月初纳入育苗室水体内， 蓄养密度为 100 个 / m3， 选择从 10开始培育亲贝 ； 每天分 6 次投 喂浓度为 200-300 万细胞 / 毫升的三角褐指藻和扁藻等单胞藻类， 每次投喂 15 升 / m3， 每 天换水三分之一， 每 6 天倒一次池， 用空气压缩机连续充气 ； 在 10培育 10 天性腺开始膨 大后开始升温， 每天提高 0.5， 。
5、待升到 17时性腺接近成熟， 逐渐增加饵料的投喂量直到 扇贝达到性成熟 ； 挑选性腺发育成熟的紫扇贝和海湾扇贝阴干刺激 30 分钟， 并且将单个扇 贝置于预先加入 23海水的 2 升塑料烧杯中， 分别收集紫扇贝的卵子和海湾扇贝的精子 ； 收集的精液在显微镜下立即观察， 若混有卵子则弃掉 ； 收集的卵子放置 20 分钟以后在显微 镜下观察， 若已受精发育则弃掉 ； 将获得的紫扇贝卵子和海湾扇贝的精子授精， 将受精卵置 于黑暗环境下孵化， 然后按照常规方法进行幼虫培育、 苗种中间培育和养成， 即获得紫海杂 交子一代家系 ； 2） 紫海杂交子一代亲贝的选择和促熟 ： 从上述培育的若干紫海杂交子一代家。
6、系中根据 家系的平均表型选择优良家系， 然后从优良家系中选择个体大且雌雄同体的扇贝在 1 月份 纳入育苗室， 按照上述步骤进行性腺促熟， 成熟后即可进行自交纯化 ； 3） 自交纯化 ： 选取成熟的雌雄同体的紫海杂交子一代亲贝， 阴干刺激 30 分钟， 将单个 扇贝置于预先加入 23海水的 2 升塑料烧杯中使其产卵排精 ； 搅拌使来自同一个扇贝的精 卵混合均匀， 再按照常规方法进行幼虫培育、 苗种中间培育和养成， 即获得多个紫海杂交子 一代扇贝的自交家系 ； 收获时测量每个家系的平均壳高、 壳长、 壳宽和总体重， 根据各家系 所有个体的表现选择优良家系 ； 从选择的优良家系中选择多个个体大且雌雄。
7、同体的扇贝作 为下一年自交选育的亲贝， 用于品种培育 ； 4） 品种培育 ： 将以上选择的个体大且雌雄同体的扇贝作为亲贝按照以上方法连续自交 三代以上， 直到大部分个体表现均优良且一致， 即获得遗传稳定的紫海杂交新品种。 3. 一种紫海杂交扇贝新品种的群体培育方法， 其特征在于首先利用紫扇贝卵子和海湾 扇贝精子受精建立紫海杂交子一代群体， 然后从杂交群体中选择雌雄同体的优良个体， 促 熟后单独产卵排精并自体受精， 受精卵孵化后将幼虫合在一起构成自交群体 ； 第二年从上 述自交群体中再选择雌雄同体的优良个体继续进行自交、 选择 ； 这样按同样的方法连续自 交三代以上， 即获得稳定遗传且生长快、 。
8、个体大、 温度耐受范围广的紫海杂交扇贝新品种。 4. 一种紫海杂交扇贝新品种的群体培育的方法， 其特征在于具体操作步骤如下 ： 1） 紫海杂交一代群体的培育 ： 选择壳高 5 厘米以上的紫扇贝和海湾扇贝各 50 个， 在 1 月初纳入育苗室水体内， 蓄养密度为 100 个 / m3， 选择从 10开始培育亲贝 ； 每天分 6 次投 喂浓度为 200-300 万细胞 / 毫升的三角褐指藻和扁藻等单胞藻类， 每次投喂 15 升 / m3， 每 天换水三分之一， 每 6 天倒一次池， 用空气压缩机连续充气 ； 在 10培育 10 天性腺开始膨 权 利 要 求 书 CN 102301971 A CN 。
9、102301972 A2/2 页 3 大后开始升温， 每天提高 0.5， 待升到 17时性腺接近成熟， 逐渐增加饵料的投喂量直到 扇贝达到性成熟 ； 挑选性腺发育成熟的紫扇贝和海湾扇贝阴干刺激 30 分钟， 并且将单个扇 贝置于预先加入 23海水的 2 升塑料烧杯中， 分别收集紫扇贝的卵子和海湾扇贝的精子 ； 收集的精液在显微镜下立即观察， 若混有卵子则弃掉 ； 收集的卵子放置 20 分钟以后在显微 镜下观察， 若已受精发育则弃掉 ； 将获得的来自多个紫扇贝的卵子和多个来自海湾扇贝的 精子授精， 将受精卵置于黑暗环境下孵化， 然后按照常规方法进行幼虫培育、 苗种中间培育 和养成， 即获得紫海杂。
10、交群体 ； 2） 紫海杂交子一代亲贝的选择和促熟 ： 从上述培育的紫海杂交子一代群体中选择个体 大且雌雄同体的扇贝在 1 月份纳入育苗室， 按照上述步骤进行性腺促熟， 成熟后即可进行 自交纯化 ； 3） 自交纯化 ： 选取成熟的雌雄同体的紫海杂交子一代亲贝， 阴干刺激 30 分钟， 将单个 扇贝置于预先加入 23海水的 2 升塑料烧杯中使其产卵排精 ； 搅拌使来自同一个扇贝的精 卵混合均匀， 受精卵孵化后将幼虫合在一起构成自交群体 , 按照常规方法进行幼虫培育、 苗种中间培育和养成， 即获得紫海杂交子一代扇贝的自交群体 ； 收获时选择雌雄同体的优 良个体作为下一年自交选育的亲贝， 用于品种培育。
11、 ； 4） 品种培育 ： 将以上选择的个体大且雌雄同体的扇贝作为亲贝按照以上方法连续自交 三代以上， 直到大部分个体表现均优良且一致， 即获得遗传稳定的紫海杂交新品种。 权 利 要 求 书 CN 102301971 A CN 102301972 A1/4 页 4 紫海杂交扇贝新品种的培育方法 技术领域 0001 本发明属于贝类水产养殖的育种技术， 尤其是涉及一种紫海杂交扇贝新品种的培 育方法。 背景技术 0002 海湾扇贝 (Argopecten irradians irradians) 原产于美国大西洋沿岸， 于 1982 年引入我国。海湾扇贝生长速度快， 温度适应范围广， 抗逆性强， 非常。
12、适合我国北方海域的 养殖， 目前产量和养殖面积占我国扇贝养殖的 50以上。由于引进后长期近交， 海湾扇贝 在养殖过程中种质退化严重， 表现为商品贝规格越来越小， 育苗养殖过程中死亡率较高， 例 如 2007 年海湾扇贝亲贝死亡率高达约 70， 因此扇贝养殖业迫切需要对海湾扇贝进行遗 传改良， 其中杂交育种是最有效的方法之一。 0003 发明人自 2007 年首次从秘鲁引进了紫扇贝 (Argopecten purpuratus)。紫扇贝 是原产于南太平洋的一种速生型中型扇贝， 与海湾扇贝都属于 Argopecten 属， 染色体数相 同， 且都是雌雄同体， 但二者在个体大小、 生长和温度适应性等。
13、方面性状互补， 因此发明人 又通过将紫扇贝卵子和海湾扇贝精子进行种间杂交， 培育紫海杂交扇贝子一代。紫海杂交 扇贝子一代生长较快， 个体较大 ( 王春德等， 2009. 紫扇贝与海湾扇贝种间杂交的研究。海 洋科学， 33(10) ： 84-87 ； Chunde Wang 等， 2011.Introduction of the Peruvian scallop and its hybridization with the bay scallop in China， Aquaculture， 2011， 310 ： 380-387)。大部分个体不产生可育的卵子和精子， 但少部分为可育的雌雄同体个。
14、体。 0004 进一步研究表明， 紫海杂交子一代虽然具有较大的杂种优势， 但在生产推广上仍 然存在以下缺点和障碍。 1)由于杂交子一代遗传不稳定， 后代生长性状出现分离， 因而需要 每年用紫扇贝和海湾扇贝制种， 较为繁琐 ； 2) 由于引进的紫扇贝的温度适应范围较窄， 难 以在同一海域度夏和越冬， 且在我国海域生长缓慢， 因此获得用于培育杂交子一代的紫扇 贝亲贝较为相当困难。3) 由于海湾扇贝和紫扇贝都是雌雄同体的扇贝， 同时排放精子和卵 子， 精或卵容易受到同种的卵或精的污染， 不易进行种间杂交， 而导致所获得的商品苗种中 真正的杂交后代的比例大大降低， 使产量的提高幅度大大受限。 0005。
15、 显然， 由于需要同时培育两种亲贝且不易实现两种雌雄同体扇贝间的杂交， 因而 推广存在着较大的困难。产业上迫切需要培育一种稳定遗传、 易于培育且性状优良的新品 种。 发明内容 0006 本发明的目的是提供一种紫海杂交扇贝新品种的培育方法， 以弥补现有技术的不 足。 0007 本发明的构思利用了如下特点 ： 1) 首先在亲贝促熟方面摒弃了传统的海湾扇贝 从 4开始培育， 而且产卵前需要提高到 19的常规方法， 通过研究杂交子一代扇贝的温 度适应特性， 专门选择了从 10开始培育杂交子一代亲贝， 到产卵前逐渐提高到 17 ； 2) 说 明 书 CN 102301971 A CN 102301972。
16、 A2/4 页 5 紫海杂交子一代中有少量个体为雌雄同体且自交可育 ； 3) 紫海杂交扇贝子一代的自交后 代中约 25的个体外型与杂交子一代亲本相似， 且其体重比同期的海湾扇贝提高 96.5 ； 最后 4) 选择杂交后代中的雌雄同体个体进行连续自交， 可迅速纯化种系， 获得稳定遗传的 新品种。 0008 本发明是采用以下技术方案 ： 首先利用紫扇贝卵子和海湾扇贝精子受精建立多 个紫海杂交子一代家系， 根据各杂交家系的表现型选择优良杂交家系， 然后从优良杂交家 系中选择雌雄同体的优良个体， 促熟后分别自体受精建立多个自交家系 ； 第二年从上述自 交家系中再选择优良家系， 然后从优良家系中进一步选。
17、择雌雄同体的优良个体继续进行自 交、 选择 ； 这样按同样的方法连续自交三代以上， 即获得稳定遗传且生长快、 个体大、 温度耐 受范围广的紫海杂交扇贝新品种。 0009 本发明也可首先利用紫扇贝卵子和海湾扇贝精子受精建立紫海杂交子一代群体， 然后从杂交群体中选择雌雄同体的优良个体， 促熟后单独产卵排精并自体受精， 受精卵孵 化后将幼虫合在一起构成自交群体 ； 第二年从上述自交群体中再选择雌雄同体的优良个体 继续进行自交、 选择 ； 这样按同样的方法连续自交三代以上， 即获得稳定遗传且生长快、 个 体大、 温度耐受范围广的紫海杂交扇贝新品种。 0010 本发明具有以下有益效果 ： 所获得紫海杂交。
18、新品种同时具有海湾扇贝和紫扇贝的 特点， 生长快、 个体大、 温度耐受范围广。本发明的紫海杂交扇贝新品种可以在青岛和大连 等北方海域养殖， 产量比海湾扇贝提高 30以上。 具体实施方式 0011 本发明可采用家系培育方法， 具体操作步骤如下 ： 0012 1. 紫海杂交一代家系的培育 ： 选择壳高 5 厘米以上的紫扇贝和海湾扇贝各 50 个， 在 1 月初纳入育苗室水体内， 蓄养密度为 100 个 /m3， 选择从 10开始培育亲贝。每天分 6 次投喂浓度为 200-300 万细胞 / 毫升的三角褐指藻和扁藻等单胞藻类， 每次投喂 15 升 /m3， 每天换水三分之一， 每 6 天倒一次池， 。
19、用空气压缩机连续充气。在 10培育 10 天性腺开始 膨大后开始升温， 每天提高 0.5， 待升到 17时性腺接近成熟， 逐渐增加饵料的投喂量直 到扇贝达到性成熟。挑选性腺发育成熟的紫扇贝和海湾扇贝阴干刺激 30 分钟， 并且将单 个扇贝置于预先加入 23海水的 2 升塑料烧杯中， 分别收集紫扇贝的卵子和海湾扇贝的精 子。收集的精液在显微镜下立即观察， 若混有卵子则弃掉。收集的卵子放置 20 分钟以后在 显微镜下观察， 若已受精发育则弃掉。 将获得的紫扇贝卵子和海湾扇贝的精子授精， 将受精 卵置于黑暗环境下孵化， 然后按照常规方法进行幼虫培育、 苗种中间培育和养成， 即获得紫 海杂交子一代家系。
20、。 0013 2. 紫海杂交子一代亲贝的选择和促熟 ： 从上述培育的若干紫海杂交子一代家系 中根据家系的平均表型选择优良家系， 然后从优良家系中选择个体大且雌雄同体的扇贝在 1 月份纳入育苗室， 按照上述步骤进行性腺促熟， 成熟后即可进行自交纯化。 0014 3. 自交纯化 ： 选取成熟的雌雄同体的紫海杂交子一代亲贝， 阴干刺激 30 分钟， 将 单个扇贝置于预先加入23海水的2升塑料烧杯中使其产卵排精。 搅拌使来自同一个扇贝 的精卵混合均匀， 再按照常规方法进行幼虫培育、 苗种中间培育和养成， 即获得多个紫海杂 交子一代扇贝的自交家系 ； 收获时测量每个家系的平均壳高、 壳长、 壳宽和总体重。
21、， 根据各 说 明 书 CN 102301971 A CN 102301972 A3/4 页 6 家系所有个体的表现选择优良家系。 从选择的优良家系中选择多个个体大且雌雄同体的扇 贝作为下一年自交选育的亲贝， 用于品种培育。 0015 4. 品种培育 ： 将以上选择的个体大且雌雄同体的扇贝作为亲贝按照以上方法连 续自交三代以上， 直到大部分个体表现均优良且一致， 即获得遗传稳定的紫海杂交新品种。 0016 本发明也可采用群体培育的方法， 具体操作步骤如下 ： 0017 1. 紫海杂交一代群体的培育 ： 选择壳高 5 厘米以上的紫扇贝和海湾扇贝各 50 个， 在 1 月初纳入育苗室水体内， 蓄养。
22、密度为 100 个 /m3， 选择从 10开始培育亲贝。每天分 6 次投喂浓度为 200-300 万细胞 / 毫升的三角褐指藻和扁藻等单胞藻类， 每次投喂 15 升 /m3， 每天换水三分之一， 每 6 天倒一次池， 用空气压缩机连续充气。在 10培育 10 天性腺开始 膨大后开始升温， 每天提高 0.5， 待升到 17时性腺接近成熟， 逐渐增加饵料的投喂量直 到扇贝达到性成熟。挑选性腺发育成熟的紫扇贝和海湾扇贝阴干刺激 30 分钟， 并且将单 个扇贝置于预先加入 23海水的 2 升塑料烧杯中， 分别收集紫扇贝的卵子和海湾扇贝的精 子。收集的精液在显微镜下立即观察， 若混有卵子则弃掉。收集的卵。
23、子放置 20 分钟以后在 显微镜下观察， 若已受精发育则弃掉。将获得的来自多个紫扇贝的卵子和多个来自海湾扇 贝的精子授精， 将受精卵置于黑暗环境下孵化， 然后按照常规方法进行幼虫培育、 苗种中间 培育和养成， 即获得紫海杂交群体。 0018 2. 紫海杂交子一代亲贝的选择和促熟 ： 从上述培育的紫海杂交子一代群体中选 择个体大且雌雄同体的扇贝在 1 月份纳入育苗室， 按照上述步骤进行性腺促熟， 成熟后即 可进行自交纯化。 0019 3. 自交纯化 ： 选取成熟的雌雄同体的紫海杂交子一代亲贝， 阴干刺激 30 分钟， 将 单个扇贝置于预先加入23海水的2升塑料烧杯中使其产卵排精。 搅拌使来自同一。
24、个扇贝 的精卵混合均匀， 受精卵孵化后将幼虫合在一起构成自交群体， 按照常规方法进行幼虫培 育、 苗种中间培育和养成， 即获得紫海杂交子一代扇贝的自交群体 ； 收获时选择雌雄同体的 优良个体作为下一年自交选育的亲贝， 用于品种培育 ； 0020 4. 品种培育 ： 将以上选择的个体大且雌雄同体的扇贝作为亲贝按照以上方法连 续自交三代以上， 直到大部分个体表现均优良且一致， 即获得遗传稳定的紫海杂交新品种。 0021 实施例 1 0022 从 2009 年培育的紫海杂交子一代家系中选择优良家系， 从中选择个体较大且雌 雄同体的个体， 在2010年1月份纳入育苗室中， 用以上方法对亲贝促熟， 用自。
25、交家系的方法 培育后代， 到十一月上旬所获得的自交子二代中有约 25的个体 ( 类 F1 子二代 ) 壳色与 其亲本相同， 但个体比同期培育的海湾扇贝群体壳高大约 31.5， 体重大 96.5， 柱重大 183.6； 所获得的自交子二代中有约 75的个体 ( 类海湾子二代 ) 壳色与海湾扇贝相似， 但个体比同期培育的海湾扇贝群体壳高大约 13.5， 体重大 36.6， 柱重大 99.3。结果 如表 1 所示。 0023 表 1 紫海杂交子二代与同期海湾扇贝大小的比较 (n 30) 0024 类 F1 子二代 类海湾子二代 海湾扇贝 壳高 59.006.01 50.952.82 44.885.0。
26、5 说 明 书 CN 102301971 A CN 102301972 A4/4 页 7 壳长 61.556.70 53.563.14 47.405.91 壳宽 24.161.98 21.861.31 20.072.55 总重 34.3910.29 23.913.65 17.505.84 软体重 12.553.96 9.621.78 6.882.65 柱重 4.311.79 3.030.73 1.520.74 0025 本发明已经于 2011 年， 从 2010 年培育的紫海杂交子二代中选择个体较大且雌雄 同体的个体， 用自交的方法培育后代家系， 受精率和孵化率分别为 92.2和 86.4， 并培 育出大量的自交子三代。 说 明 书 CN 102301971 A 。