干态赫金格尔细菌培养基的制备工艺 本发明涉及一种细菌培养基的制备工艺,特别是一种干态赫金格尔培养基的制备工艺。
赫金格尔培养基是广泛应用于实验室的细菌培养基,尤其在鼠疫杆菌的分离、培养、鉴定中已被列为常规使用。鼠疫自然疫源地的考察、动物流行病学的调查、动物(尤其是鼠类)鼠疫杆菌的检索多在野外进行,而现场制做培养基又麻烦又不方便,甚至要将整个实验室搬往现场。
本发明的目的是提供一种耐贮藏保存、携带方便、使用简单,可在现场启封应用的干态赫金格尔细菌培养基的制备工艺。
本发明的目的按下述方案实现:
干态赫金格尔细菌培养基的制备工艺,以动物血为主要原料,制备工艺包括配制消化汤→调整pH值→浓缩→干燥→研磨→计量包装→保存启用,其中配制消化汤是将一定量的动物血经过胰酶作用,然后按其氨基氮的实际量换算成稀释倍数,再加入一定量的水(H2O)、食盐(NaCl)、磷酸氢钠(Na2HPO4)、琼脂粉混合加热溶化;上述调整pH值为7.8-8.5。
本发明的制备工艺具有原料来源广、生产制做容易,所得固体产品适用面广、产品保质期长、方便实用,特别适用于野外、山区工作及偏辟地区的鼠疫监测和流行病学调查,对防止鼠类及其它动物间的鼠疫病的流行和预防人间鼠疫病的发生,保护人类健康,有着极大的社会意义。
实施例:
制备工艺如下:
1、配制消化汤
按赫金格尔培养基的原配方,以猪血代替牛肉经胰酶37℃消化制成消化汤,按氨基氮的实际用量计算稀释倍数,按100ml蒸馏水稀释后地消化汤中加入NaCl:0.5g,Na2HPO4:0.1g,琼脂粉:2.2g,混合热溶;
2、调整pH值
将上述消化汤加NaOH调整pH值在7.8-8.8;
3、浓缩
已调好pH值的液体消化汤在80℃恒湿水浴箱内加热浓缩到液体成胶胨状;
4、干燥
移入65-75℃恒湿干燥箱内烘干;
5、研磨
细致的研取全部烘干物,置于乳钵内研磨成粉,使其细度达到80-100目;
6、计量包装
按250克或500克真空塑料包装,或安瓿包装。
应用情况:
一、干态培养基鼠疫EV菌生长状况鉴定见下表。 培养基种类 界限值 (细菌生长个数) 平均值 ( x) 标准差 (s) 标准误 (s x) 平均值有意义范围 ( x±s) 原赫金格尔 81-117 98.4 8.8 1.33 89.92-106.88 干态赫金格尔 82-116 97.6 8.4 1.32 89.2-106.00
t=0.17<2.021 P>0.05
二、本发明工艺所制干态培养基在银川西部贺兰山麓连续两年鼠疫源地的调查实践中应用,效果良好,还可以加入NaN3、龙胆紫、Na2SO3、胆盐及血清和溶血素等杆菌、营养的添加剂,可抑制杂菌的生长,促进鼠疫杆菌的生长和鉴定。
三、本发明的干态培养基制成5年后,在盐池县沙漠山区鼠疫检索工作中应用,得到了非常满意的实验效果。