一种草腐食用菌固体菌种的培养基以及固体菌种的制备方法 【技术领域】
本发明涉及一种食用菌的固体菌种，尤其涉及一种草腐食用菌固体菌种的培养基以及固体菌种的制备方法，具体适用于草腐食用菌的菌种培养。
背景技术
草腐食用菌包括双孢蘑菇、巴西蘑菇、草菇、鸡腿菇、褐蘑菇等食用菌。长期以来，草腐食用菌多使用麦粒、谷粒等固体颗粒作为菌种培养基，所制得的生产、栽培用的菌种被称为麦粒菌种，虽然麦粒菌种具有萌发快、生长点多和生长势强等优点，但是其制作工艺繁琐、费工费时，灭菌要求高、菌种污染较难控制，最严重的是菌种易发生吐黄水的老化现象，从而造成保存期较短，一般为35～45天。
【发明内容】
本发明的目的是克服现有技术中存在的制作工艺繁琐、灭菌要求高、菌种易老化以及保存期较短的缺陷与问题，提供一种工艺简单、灭菌要求低、菌种难老化，且保存期较长的一种草腐食用菌固体菌种的培养基以及固体菌种的制备方法。
为实现以上目的，本发明的技术解决方案是：一种草腐食用菌固体菌种的培养基，该培养基的组分及其重量份比例为：泥炭土68～78，棉籽壳10～15，麸皮10～15，石膏1～2，蔗糖1～2并加入石灰调整培养基的pH值为6.5～7.0。
所述培养基的组分及其重量份比例为：泥炭土73，棉籽壳15，麸皮10，石膏1，蔗糖1并加入石灰调整培养基的pH值为7.0。
一种采用所述培养基的草腐食用菌固体菌种的制备方法，其特征在于按如下步骤进行：
(1)备料：按生产量备足原料，并将泥炭土过筛以去除直径大于1cm的杂物，要求麸皮新鲜、无霉变，棉籽壳不结块成团；
(2)配制：按培养基的组分及其重量份比例将泥炭土、棉籽壳、麸皮、石膏与蔗糖混匀，并加入水，原料与水的重量比为1∶1.2～1∶1.3，加水后对原料进行混合翻拌以使原料吸水均匀，同时加入石灰以调整pH值，使得配制出的培养基的pH值为6.5～7.0；
(3)分装：用菌种袋对上述制得的培养基进行分装，每袋装培养基0.25kg，要求分装后的菌种袋饱满、松紧适宜，并在菌种袋上加盖塑料套圈封口，对菌种袋接触时注意轻拿轻放以防菌种袋破损而造成菌种污染；
(4)灭菌：对上述制得的菌种袋进行高温灭菌，灭菌温度为121℃～123℃，时间为2.5小时，灭菌结束后将菌种袋放入室内进行自然冷却以备用；
(5)接种：在超净工作台或接种箱内打开上述灭菌后的菌种袋的封口盖，对制得的培养基进行无菌接种；在制作原种时，每袋接入的母种用量为1cm见方小块；在制作生产种时，每袋接入的原种用量为15ml；
(6)培养：把接种后的菌种袋放于25℃的暗室内培养菌丝，如接入的为母种，则5天后定植吃料，如接入的为原种，则3天后定植吃料；培养菌丝7天后可清污去杂，培养菌丝25～30天后菌丝满袋，菌种成熟，即制得所述的固体菌种。
所述分装步骤中所用的菌种袋为单层高压聚丙烯菌种袋。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
1.由于本发明一种草腐食用菌固体菌种的培养基以及固体菌种的制备方法中所使用的原料只包括泥炭土、棉籽壳、麸皮、石膏与蔗糖，以及调整pH值的石灰，因此在制作本发明时，不需要浸泡或蒸煮，而一般的麦粒菌种在制作时必须对麦粒进行浸泡或蒸煮，否则麦粒难以达到适宜的含水量，且在浸泡、蒸煮时要把握好火候，稍有不慎则导致失败，此外，麦粒菌种的盛装容器一般为玻璃瓶，体积重量大，使用不便，且其所用的菌种袋要求为双层袋，工序烦琐、费工费时，而本发明用的是单层菌种袋。因此本发明工艺简单、操作方便、省工省时。
2.由于本发明一种草腐食用菌固体菌种的培养基以及固体菌种的制备方法中所使用的原料只包括泥炭土、棉籽壳、麸皮、石膏与蔗糖，以及调整pH值的石灰，而一般的麦粒菌种所使用的原料的营养极其丰富，极易引起污染，因此对麦粒菌种地灭菌时间长，一般在4个小时以上，而本发明的灭菌时间一般为2.5个小时，因此本发明的灭菌要求低、不易污染。
3.由于本发明一种草腐食用菌固体菌种的培养基以及固体菌种的制备方法所制得的固体菌种保存期为60～70天，而一般的麦粒菌种易老化，在菌丝培养30天后即会发生吐黄水现象，因此本发明的保存期较长。
4.由于本发明一种草腐食用菌固体菌种的培养基以及固体菌种的制备方法中所使用的主要原料为泥炭土，泥炭土经多年自然发酵而成，腐熟度好，持水力强，肥力适宜，此外我国泥炭土资源丰富，价格便宜，泥炭土售价为250～300元/m3，折合为0.25～0.30元/升，每升原料可制作固体菌种2瓶，而同样容积的麦粒菌种的原料成本为0.40～0.50元，因而，采用泥炭土为主料制作固体菌种，其原料成本比麦粒菌种降低约40％，加之由于泥炭土无须预处理便可直接使用，进而使制作工艺简化、生产所需的水、电、人工等费用减少，故本发明制作的菌种比麦粒菌种至少降低生产成本50％，因此本发明节省成本。
【具体实施方式】
以下结合具体实施方式对本发明进行详细描述：
本发明的一种草腐食用菌固体菌种的培养基，该培养基的组分及其重量份比例为：泥炭土68～78，棉籽壳10～15，麸皮10～15，石膏1～2，蔗糖1～2并加入石灰调整培养基的pH值为6.5～7.0。
所述培养基的组分及其重量份比例为：泥炭土73，棉籽壳15，麸皮10，石膏1，蔗糖1并加入石灰调整培养基的pH值为7.0。
上述培养基的组成成分及作用说明如下：
泥炭土：作为本发明固体菌种中的主料，它经多年自然发酵而成，腐熟度好，持水力强；肥力适宜，含有高量有机质，如中国吉林省的泥炭土有机质平均含量为65.4％，川西北高原为57.5％，泥炭土中氮的含量也相当丰富，东北地区泥炭土含氮量平均为1.5～2.0％，最高可达2.5％，此外，泥炭土中磷的含量也高于矿物质土体，约0.29～0.33％，非常适合于作为草腐菌类，如双孢蘑菇、草菇、巴西蘑菇等的出菇覆土材料。
棉籽壳：颗粒性好，能增强培养料的透气性，以利菌丝生长。
麸皮：为培养料提供维生素和氮源。
蔗糖：为培养料提供速效碳源。
石膏：为培养料补充钙元素。
石灰：为培养料补充钙元素和调整pH值。
本发明进而提出了一种采用所述培养基的草腐食用菌固体菌种的制备方法，该方法依次包括以下步骤：
(1)备料：按生产量备足原料，并将泥炭土过筛以去除直径大于1cm的杂物，要求麸皮新鲜、无霉变，棉籽壳不结块成团；
(2)配制：按培养基的组分及其重量份比例将泥炭土、棉籽壳、麸皮、石膏与蔗糖混匀，并加入水，原料与水的重量比为1∶1.2～1∶1.3，加水后对原料进行混合翻拌以使原料吸水均匀，同时加入石灰以调整pH值，使得配制出的培养基的pH值为6.5～7.0；
(3)分装：用菌种袋对上述制得的培养基进行分装，每袋装培养基0.25kg，要求分装后的菌种袋饱满、松紧适宜，并在菌种袋上加盖塑料套圈封口，对菌种袋接触时注意轻拿轻放以防菌种袋破损而造成菌种污染；
(4)灭菌：对上述制得的菌种袋进行高温灭菌，灭菌温度为121℃～123℃，时间为2.5小时，灭菌结束后将菌种袋放入室内进行自然冷却以备用；
(5)接种：在超净工作台或接种箱内打开上述灭菌后的菌种袋的封口盖，对制得的培养基进行无菌接种；在制作原种时，每袋接入的母种用量为1cm见方小块；在制作生产种时，每袋接入的原种用量为15ml；
(6)培养：把接种后的菌袋放于25℃的暗室内培养菌丝，如接入的为母种，则5天后定植吃料，如接入的为原种，则3天后定植吃料；培养菌丝7天后可清污去杂，培养菌丝25～30天后菌丝满袋，菌种成熟，即制得所述的固体菌种。
所述分装步骤中所用的菌种袋为单层高压聚丙烯菌种袋。
如在培养基中接入的为母种，则培养长满菌丝即得原种，也称为二级种。
如在培养基中接入的为原种，则培养长满菌丝即得栽培种，也称为三级种、生产种或栽培种。
实施例1：
一种草腐食用菌的固体菌种的培养基，该培养基的组分及其重量份比例为：泥炭土68，棉籽壳15，麸皮15，石膏1，蔗糖1并加入石灰调整培养基的pH值为7.0。
一种采用所述培养基的草腐食用菌固体菌种的制备方法，该制作方法按如下步骤进行：
(1)备料：按生产量备足原料，并将泥炭土过筛以去除直径大于1cm的杂物，要求麸皮新鲜、无霉变，棉籽壳不结块成团；
(2)配制：按培养基的组分及其重量份比例将泥炭土、棉籽壳、麸皮、石膏与蔗糖混匀，并加入水，原料与水的重量比为1∶1.2～1∶1.3，加水后对原料进行混合翻拌以使原料吸水均匀，同时加入石灰以调整pH值，使得配制出的培养基的pH值为7.0；
(3)分装：用菌种袋对上述制得的培养基进行分装，每袋装培养基0.25kg，要求分装后的菌种袋饱满、松紧适宜，并在菌种袋上加盖塑料套圈封口，对菌种袋接触时注意轻拿轻放以防菌种袋破损而造成菌种污染；
(4)灭菌：对上述制得的菌种袋进行高温灭菌，灭菌温度为121℃～123℃，时间为2.5小时，灭菌结束后将菌种袋放入室内进行自然冷却以备用；
(5)接种：在超净工作台或接种箱内打开上述灭菌后的菌种袋的封口盖，对菌种袋内的培养基进行无菌接种，接入的为母种，每袋接入的母种用量为1cm见方小块。
(6)培养：把接种后的菌袋放于25℃的暗室内培养菌丝，5天后定植吃料，培养菌丝7天后可清污去杂，培养菌丝25～30天后菌丝满袋，菌种成熟，即制得所述的固体菌种。
实施例2：
一种草腐食用菌的固体菌种的培养基，该培养基的组分及其重量份比例为：泥炭土78，棉籽壳10，麸皮10，石膏1，蔗糖1并加入石灰调整培养基的pH值为6.8。
一种采用所述培养基的草腐食用菌固体菌种的制备方法，该制作方法按如下步骤进行：
(1)备料：按生产量备足原料，并将泥炭土过筛以去除直径大于1cm的杂物，要求麸皮新鲜、无霉变，棉籽壳不结块成团；
(2)配制：按培养基的组分及其重量份比例将泥炭土、棉籽壳、麸皮、石膏与蔗糖混匀，并加入水，原料与水的重量比为1∶1.2～1∶1.3，加水后对原料进行混合翻拌以使原料吸水均匀，同时加入石灰以调整pH值，使得配制出的培养基的pH值为6.8；
(3)分装：用菌种袋对上述制得的培养基进行分装，每袋装培养基0.25kg，要求分装后的菌种袋饱满、松紧适宜，并在菌种袋上加盖塑料套圈封口，对菌种袋接触时注意轻拿轻放以防菌种袋破损而造成菌种污染；
(4)灭菌：对上述制得的菌种袋进行高温灭菌，灭菌温度为121℃～123℃，时间为2.5小时，灭菌结束后将菌种袋放入室内进行自然冷却以备用；
(5)接种：在超净工作台或接种箱内打开上述灭菌后的菌种袋的封口盖，对菌种袋内的培养基进行无菌接种，接入的为原种，每袋接入的原种用量为15ml。
(6)培养：把接种后的菌袋放于25℃的暗室内培养菌丝，3天后定植吃料，培养菌丝7天后可清污去杂，培养菌丝25～30天后菌丝满袋，菌种成熟，即制得所述的固体菌种。
实施例3：
一种草腐食用菌的固体菌种的培养基，该培养基的组分及其重量份比例为：泥炭土72，棉籽壳12，麸皮13，石膏1，蔗糖2并加入石灰调整培养基的pH值为6.5。
一种采用所述培养基的草腐食用菌固体菌种的制备方法，该制作方法按如下步骤进行：
(1)备料：按生产量备足原料，并将泥炭土过筛以去除直径大于1cm的杂物，要求麸皮新鲜、无霉变，棉籽壳不结块成团；
(2)配制：按培养基的组分及其重量份比例将泥炭土、棉籽壳、麸皮、石膏与蔗糖混匀，并加入水，原料与水的重量比为1∶1.2～1∶1.3，加水后对原料进行混合翻拌以使原料吸水均匀，同时加入石灰以调整pH值，使得配制出的培养基的pH值为6.5；
(3)分装：用菌种袋对上述制得的培养基进行分装，每袋装培养基0.25kg，要求分装后的菌种袋饱满、松紧适宜，并在菌种袋上加盖塑料套圈封口，对菌种袋接触时注意轻拿轻放以防菌种袋破损而造成菌种污染；
(4)灭菌：对上述制得的菌种袋进行高温灭菌，灭菌温度为121℃～123℃，时间为2.5小时，灭菌结束后将菌种袋放入室内进行自然冷却以备用；
(5)接种：在超净工作台或接种箱内打开上述灭菌后的菌种袋的封口盖，对菌种袋内的培养基进行无菌接种，接入的为母种，每袋接入的母种用量为1cm见方小块。
(6)培养：把接种后的菌袋放于25℃的暗室内培养菌丝，5天后定植吃料，培养菌丝7天后可清污去杂，培养菌丝25～30天后菌丝满袋，菌种成熟，即制得所述的固体菌种。
实施例4：
一种草腐食用菌的固体菌种的培养基，该培养基的组分及其重量份比例为：泥炭土73，棉籽壳15，麸皮10，石膏1，蔗糖1并加入石灰调整培养基的pH值为7.0。
一种采用所述培养基的草腐食用菌固体菌种的制备方法，该制作方法按如下步骤进行：
(1)备料：按生产量备足原料，并将泥炭土过筛以去除直径大于1cm的杂物，要求麸皮新鲜、无霉变，棉籽壳不结块成团；
(2)配制：按培养基的组分及其重量份比例将泥炭土、棉籽壳、麸皮、石膏与蔗糖混匀，并加入水，原料与水的重量比为1∶1.2～1∶1.3，加水后对原料进行混合翻拌以使原料吸水均匀，同时加入石灰以调整pH值，使得配制出的培养基的pH值为7.0；
(3)分装：用菌种袋对上述制得的培养基进行分装，每袋装培养基0.25kg，要求分装后的菌种袋饱满、松紧适宜，并在菌种袋上加盖塑料套圈封口，对菌种袋接触时注意轻拿轻放以防菌种袋破损而造成菌种污染；
(4)灭菌：对上述制得的菌种袋进行高温灭菌，灭菌温度为121℃～123℃，时间为2.5小时，灭菌结束后将菌种袋放入室内进行自然冷却以备用；
(5)接种：在超净工作台或接种箱内打开上述灭菌后的菌种袋的封口盖，对菌种袋内的培养基进行无菌接种，接入的为原种，每袋接入的原种用量为15ml；
(6)培养：把接种后的菌袋放于25℃的暗室内培养菌丝，3天后定植吃料，培养菌丝7天后可清污去杂，培养菌丝25～30天后菌丝满袋，菌种成熟，即制得所述的固体菌种。
本发明一种草腐食用菌固体菌种的培养基以及固体菌种的制备方法适于各种草腐食用菌如双孢蘑菇、草菇、鸡腿菇、褐蘑菇、巴西蘑菇即姬松茸等食用菌的培养。
一般的麦粒菌种在菌丝培养30天后即吐黄水，表明其菌丝易衰老，不耐储藏，而采用本发明制作方法制得的固体菌种未见吐黄水现象发生，其菌种保质期可达60～70天，而且其播种后菌丝萌发、定植方面无明显差异，子实体都能正常形成，其产品质量、产量相当，经试验5个标准筐，每筐面积为0.205m2，结果产巴西蘑菇鲜重9.18Kg，折合单产计算为：9.18Kg÷(0.205m2/筐×5筐)＝8.95Kg/m2，产品质量指标无异常。
下表为以巴西蘑菇为例来比较各种栽培菌种的应用情况：
四种巴西蘑菇栽培种应用情况比较