分离的苛养木杆菌GUM操纵子， 分离的其核酸分子及它们的用途 本发明得到了FAPESP的资助。
【技术领域】
本发明涉及到苛养木杆菌(Xylella fastidiosa)的操纵子的分离。尤其是其涉及到这样的一个操纵子的分离，其包括九个基因，分别表示为xfgum B，C，D，E，F，H，J，K及M。同样作为本发明一部分的是这九个基因的每一个的分离的核酸分子。同样作为本发明一部分的是含有可操作连接至启动子的该操纵子或一个或多个组分(component)基因的表达载体，含有该操纵子或一个或多个所述基因的重组细胞，这些基因的表达产物，及其各自不同的用途。
背景技术
黄原胶是一种由致植物病细菌野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris(Ielpi等，1981，FEBS Lett.130：253-256)产生地外多糖(下文称＂EPS＂)，野油菜黄单胞菌中这种胞外多糖的生物合成由一簇共12个基因，gumB-gumM(Becker等，1998，Appl Microbiol Biotechnol，50：145-152；Vojnov等，1998，Microbiology 144：487-493)所控制。其由聚合五糖重复单元所组成，该五糖单元是在多聚异戊烯醇磷酸酯载体上依次增加葡萄糖-1-磷酸，葡萄糖，甘露糖，葡萄糖醛酸，及甘露糖而成(Ielpi等，1993，J.Bacteriol.175：2490-2500)。五糖重复单元还有不同程度的O-乙酰化及丙酮酸化(Ielpi等，1993，J.Bacteriol.175：2490-2500)。
使用一簇携带gumB及gumC的基因进行转化，在缺陷型突变体中恢复了黄原胶的产生，这表明gumB及gumC都涉及到黄原胶跨细菌细胞膜的迁移(Vojnov等，1998，Microbiology 144：487-493)。
有两组基因涉及到黄原胶的生物合成：一组是基因xpsIII，xps IV及xpsVI，它们分别负责合成UDP-葡萄糖，UDP-葡萄糖醛酸及GDP-甘露糖(Harding等，J.Bacteriol 169：2854-2861(1987)；Harding等，J.Gen Micobiol139：447-457(1993)；Hotte等，1999；Poplin等J.Bacteriol 174：191-199(1992)，1992)，另一组是基因gum或xpsI，其编码的酶参与了连接至多聚异戊烯醇磷酸酯的五糖的聚合及EPS向胞外介质中的分泌(Ielpi等，1992；出处同上Ielpi等，1993出处同上)。
野油菜黄单胞菌的gum基因集中在一个大约长16Kb的操纵子(GUM操纵子)中，含有12个基因，它们是gumB，C，D，E，F，G，H，I，J，K，L及M。gumD基因编码葡糖基转移酶I，其负责使UDP-葡萄糖的葡萄糖-1-磷酸转移至polyprenol磷酸盐载体上，以形成脂-单糖。GumM基因编码葡糖基转移酶II，其催化增加第二个葡萄糖残基以形成脂-二糖。GumH基因编码葡糖基转移酶III，其催化增加第一个甘露糖残基以形成脂-三糖。GumK基因编码葡糖基转移酶IV，其催化增加一个葡萄糖醛酸残基以形成脂-四糖。GumI基因编码葡糖基转移酶V，其催化增加另一个甘露糖残基以形成脂-五糖。GumF基因编码乙酰转移酶I，其催化内部甘露糖残基的乙酰化。GumG编码乙酰转移酶II，其催化外部甘露糖残基的乙酰化。最后，gumL编码丙酮酸缩酮转移酶(pyruvate ketal transferase)，其催化外部甘露糖残基的丙酮酸化。GumB，C及E涉及到EPS通过细菌细胞膜的聚合及分泌，而gumJ被认为参与了与EPS聚合及分泌平行的一个阶段(Ielpi等，1992出处同上；Ielpi等，1993出处同上)。
黄原胶因为其作为含水溶液的增粘剂而具有广泛的商业用途。其应用于食品及非食品工业，还可作为悬浮液，乳液及泡沫的稳定剂。在黄原胶生物合成途径中有缺陷的黄单胞菌(Xanthomonas)突变株已经表明可以合成并聚合具有不同结构，类似的流变学特性及不同的粘性的黄原胶(Hassler和Doherty，1990，Biotechnical Prog 6：182-187)。乙酰化及丙酮酸化可影响黄原胶的粘性特征。丙酮酸的存在增加粘性而乙酸降低粘性(Hassler和Doherty，出处同上)。从黄原胶侧链中减少糖残基同样可以影响粘性。与野生型黄原胶相比，缺乏末端甘露糖的聚合物(聚四体)是很弱的增粘剂。相比较来说，同时缺乏末端甘露糖及葡萄糖醛酸的聚合物(聚三体)是很好的增粘剂(Hassler和Doherty，出处同上)。一种非乙酰化四体和一种乙酰化四体，它们都缺乏侧链末端甘露糖残基，前一种在内部甘露糖残基上还缺乏乙酸基团，它们与野生型相比，前一种表现出较高粘性而后一种表现出较低粘性(Levy等，1996，Biopolymers 38：251-272)。较高粘性与较低粘性的主要构象差别是开放螺旋骨架数量的增加及侧链可塑性高粘度的增加(Levy等，1996，Biopolymers 38：251-272)。
黄原胶也可作为药物稳定剂使用，以提高药物的吸收，延缓药物的释放，还可用于控释制剂中(Talukdar等，1996，J Pharm Sci 185：537-540)。与黄原胶混合的α-环糊精减少了直肠粘膜中以及肝脏的吗啡的一过性代谢(first-pass metabolism)，且表现出阿片样物质的表观直肠生物可利用性提高了大约4倍(Kondo等，1996，Biol Pharm Bull 19：280-286)。黄原胶藻酸盐已被用于对酶的胶囊化。黄原胶藻酸盐球体在最佳条件下重复使用20次后仍显示出最大尿素酶活性的75％(Elcin，1995，Biomaterials 16：1157-1161)的活性。
使用水溶性食用纤维，黄原胶及刺槐豆多糖(locust bean gum)制备的持续释放型水凝胶栓剂已显示出比商品栓剂更长时间的持续的药物释放。平均滞留时间较长，在血浆浓度对时间的曲线下的面积未减少。组织病理学研究显示出水凝胶栓剂对直肠粘膜的良好的生物安全性。这些结果表明，使用黄原胶和刺槐豆多糖制备的IMC水凝胶栓剂是一种实用的直肠试剂，它具有延长的效果且副作用减小(Watanabe等，1993，Bio Pharm Bull 16：391-394)。
用黄原胶制备的水凝胶中，强地松龙(prednisolone)的表观释放速率随着黄原胶浓度的增加而减少，表明药物分子的扩散主要受控于基质中三维网状结构的密度。这些结果显示，药物释放不仅受控于网状结构的密度，同时也受控于水凝胶的显微粘性(Watanabe等，1992，Chem Pharm Bull 40：459-462)。新霉素-呋喃唑酮-黄原胶复合体已被显示可以增加药物抗微生物的活性(Dumitriu等，1993，J.Biomater 7：256-276)。
黄原胶还显示可以缓解糖尿病。黄原胶给药糖尿病患者后降低了空腹和进食后的血清葡萄糖，也降低了空腹时的血浆总胆固醇水平。黄原胶还倾向于降低空腹和进食后胃泌素及胃抑制多肽(GIP)的水平，总甘油三酯和VLDL甘油三酯的空腹水平，以及VLDL及LDL中的胆固醇空腹水平。患者在吃了黄原胶松饼后有一种很饱的感觉而没有严重的消化症状(Osilesi等，1985，Am J Clin Nutr 42：597-603)。
几种因素与致植物病细菌的致病性相关，包括胞外酶的生产，外多糖的生产，毒素和植物生长素以及介导特定植物病原体相互作用的因子的生产(Agrios，1988，Plant Pathology，3rd edition，Academic Press；Alippi，1992，Agronomie 12：115-122)。几种细菌的致病性中，EPS的作用均为已知。其与以下相关(i)因为木质管闭塞导致的细胞死亡，(ii)粘液损害以及(iii)辅助植物/病原体相互作用以及植物组织中细菌的生长。
几个研究组已经调查了黄单胞菌的致病性中黄原胶的作用。尽管很长一段时间以来人们认为黄原胶对于致病性是很关键的，许多人并未成功证明该EPS与致病性之间有一个直接的联系(Kamoun and Kado，1990，J.Bacteriol172：5165-5172)。最近以来，已经证明了黄原胶生物合成后期阶段gum D的删除(Chou等，1997，Biochem Biophys Res.Commun 233：265-269)或改变(Katzen等，1998，J.Bacteriol 180：1607-1617)减少了花椰菜中导致黑腐病的毒力及降低了黄单胞菌对植物体的进攻性。尽管苛养木杆菌感染柑橘树的症状已为公知，例如，叶子clorosis，营养缺陷的症状，果实体积的减小，等(DeNegri，1990，Com.Tec.No.82，Ext.Rural，Cats，Compinas；Malavolta等，1990，Cordeiropolis，v.11，n.1，p.15-18)，细菌致病的机理尚不清楚。细菌感染有赖于昆虫载体例如Oncometopia facialis，Acrogonia terminalis及Dilobopterus costalimai(Gravena等，1997，＂Os vetores de X lellafastidiosa In：Clorose Variegada do Citros＂)。这些昆虫，当以木质养料为食时，将细菌引入其容易滋长的木质管(Lopes等，1996，＂Xvlella fastidiosa＂，FitopathologinBrasileira，Brasilia v.2 1，Suplemento p.343；Roberto等，1996，FitopatologiaBrasileira，Brasilia v.21，n.4，p.517-18)。由XfGUM操纵子合成的EPS，为本发明的一个特征，可能直接涉及到在柑橘树中导致柑桔属斑驳Clorosis的致病性及其他植物例如咖啡及葡萄植物中的其他疾病。
发明简述
本发明部分涉及大约12710个核苷酸的核酸分子，其编码XfGUM操纵子的成员，包括xfgumB，xfgumC，xfgumD，xfgumE，xfgumF，xfgumH，xfgumJ，xfgumK及xfgumM的基因，本发明涉及该操纵子以及由此编码的蛋白的用途。上述物质可被用于例如控制柑橘树疾病如柑桔斑驳Clorosis(CVC)及其它植物中的细菌导致的疾病。由XfGUM操纵子编码的酶所产生的EPS可以导致由木质管闭塞所引起的疾病或者通过细菌感染，粘附及扩散机制所导致的疾病；然而申请人并不局限于上述任一理论。本发明也涉及到XfGUM操纵子的组分在生产外多糖方面的应用，这种新多糖和该多糖的结构变体的工业应用和/或药物用途，所用宿主为苛养木杆菌或其他细菌。
本发明的基础是许多不曾预料及令人惊奇的发现。一个发现是一种长为12710个核苷酸的DNA序列存在于致植物病细菌苛养木杆菌的基因组中。而此前黄原胶操纵子仅在野油菜黄单胞菌中发现。另一个发现是XfGUM操纵子缺少基因gumI，gumG及gumL，它们分别编码葡糖基转移酶V，乙酰转移酶II及丙酮酸缩酮转移酶。这些基因的缺乏表明XfGUM操纵子编码的酶对由四聚体单位所组成的外多糖的合成是必需的，所述四聚体单位含有葡萄糖，葡萄糖，甘露糖及葡萄糖醛酸。因为编码乙酰转移酶II及丙酮酸缩酮转移酶的基因缺乏，所以产生的四糖并没有丙酮酸化，且正如黄单胞菌中所证明的，其甘露糖是部分乙酰化的。这些结果表明XfGUM编码的酶可以产生具有新的流变学及化学特性的新多糖。
本发明包括但并不限于，(a)含有编码糖基转移酶I，糖基转移酶II，糖基转移酶III，糖基转移酶IV及乙酰转移酶I的XfGUM操纵子的结构区及调控区的核苷酸序列，以及下文称GUMB，GUMC，GUME和GUMJ的蛋白；(b)上述核苷酸序列在细胞中的表达；(c)分离的酶，蛋白及其活性形式，以及其突变体，片段及融合蛋白；(d)由GUM样操纵子编码的酶和/或蛋白在筛选方法中的用途，所述方法用以鉴定控制苛养木杆菌和/或相关的生物所致的疾病的化合物；(e)改造细菌宿主以表达由XfGUM所编码的酶和/或蛋白；及(f)表达由XfGUM编码的酶和/或蛋白的改造宿主在制备用于工业和/或医疗目的以及用于动物包括人的外多糖方面的应用。
附图的简要说明
图1A-1I显示了本发明蛋白的推导的氨基酸序列与野油菜黄单胞菌的同源蛋白的氨基酸序列的比较；
图2提出了一种使用本发明组分的生物合成途径。
优选技术方案的详细说明
本发明涉及苛养木杆菌基因组的大约12710个核苷酸的核酸分子，其编码的XfGUM操纵子包括基因xfgumB，xfgumC，xfgumD，xfgumE，xfgumF，xfgumH，xfgumJ，xfgumK及xfgumM，本发明还涉及该操纵子作为DNA和其编码的蛋白在控制柑橘树疾病柑桔斑驳Clorosis(CVC)或由其它植物如栎树及葡萄中的细菌导致的相关疾病方面的作用。
下列定义以消除任何可能于说明书及权利要求书中产生的概念不清楚。
本发明所使用的“相似性”是指核苷酸序列的同一性，假如经过总体对比后，较小序列的70％的核苷酸与其他序列的相应核苷酸是同一的，那么可以说该序列与所述序列具有70％的同一性。总体对比可以通过动态程序的方式来完成(Thompson JD等(1997)，Nucleic Acids Res.25，4876-4882引用本文作为参考)。这就保证了算数上的最佳对比，其为所有核苷酸之间的匹配与不匹配确定了数值，也为不同长度的插入或缺失的罚分确定了数值。常用的数值为：1.9是匹配，0是不匹配，15是出现了缺口，6.66是该缺口的延伸。
实施例1
使用标准技术包括使用限制性酶BamHI消化DNA从来自总苛养木杆菌的DNA制备粘粒文库。大约为35-45千碱基对的片段被选为最相关片段。制备杂交图谱以选择不重叠的粘粒，挑选以后，使用识别的鸟枪法对其进行测序。选定与黄单胞菌(Xanthomonas spp)序列类似的一个粘粒。大约12710个核苷酸的片段被分离且作进一步研究。
实施例2
对实施例1中的分离的核苷酸作进一步的研究包括将12710个核苷酸的片段与已知的野油菜黄单胞菌的GUM操纵子进行比较。该已知操纵子已被描述含有12个基因；然而本发明所揭示的操纵子却显示只含有9个基因，也就是说，其含有的基因与gumB，C，D，E，F，H，J，K及M具有一定的同源性，然而并未发现与gumG，I或L同源的序列。
为了区别这两组基因，做为本发明一部分的那些基因本文以下称“xfgum”基因，该操纵子称为“XfGUM”。
xfgumB，C，D，E，F，H，J，K及M的核苷酸序列分别列于SEQ ID NO：1-9。完整的XfGUM操纵子列于SEQ ID NO：10。
xfgum基因所编码的推导的氨基酸序列由序列SEQ ID NO：11-19所述。已将其与野油菜黄单胞菌的相应的氨基酸序列进行了比较。图1A-1I显示同源性分析，其中使用的缩写“GUMBXf，GUMCXf”等对应于本发明所述的蛋白，而“GUMBXc，GUMCXc”等对应于野油菜黄单胞菌的蛋白。
实施例3
根据苛养木杆菌序列与野油菜黄单胞菌序列的同源性，得出有关编码蛋白的功能的结论，并推测出苛养木杆菌合成黄原胶样产物的机理，见图2。具体地讲，xfgumD编码糖基转移酶I类似物，其涉及到通过UDP-葡萄糖上的葡萄糖-I-磷酸转移至异戊二烯醇载体上加入第一个葡萄糖残基，结果产生脂质单糖。该合成第二步涉及通过由xfgumM编码的糖基转移酶II类似物添加另一个葡萄糖残基，结果产生脂质二糖。随后，认为由xfgumH所编码的糖基转移酶III类似物添加一个甘露糖残基以形成三糖，通过由xfgumK所编码的糖基转移酶IV类似物添加一个葡萄糖醛酸残基以形成四糖。xfgumF基因编码乙酰转移酶I类似物，其如上所述催化甘露糖残基的乙酰化。由xfgumB，C及E所编码的蛋白显示涉及通过细菌细胞膜的黄原胶样EPS的分泌，而由xfgumJ所编码的蛋白表现出涉及黄原胶样EPS的聚合及分泌。
正如上所述，XfGUM操纵子缺乏对应于黄单胞菌基因GUMG，I及L的组分，它们编码乙酰转移酶II，葡糖基转移酶V，及丙酮酸转移酶。这表明由苛养木杆菌所产生的EPS由葡萄糖-葡萄糖-甘露糖-葡萄糖醛酸四聚体单位组成，其中这些四聚体并未丙酮酸化但已全部或部分乙酰化。
Hassler等，Biotechnol Proj.6：182-187(1990)，及Levy等，Biopolymers38：251-272(1996)，都表明了黄单胞菌突变株黄原胶生物合成途径(一步或多个步骤缺陷)可合成黄原胶的结构变体，该变体具有的化学特性与其他的黄原胶结构变体及标准的黄原胶不同。乙酰化及丙酮酸化都已知可以影响黄原胶的粘性特征。丙酮酸基增加了粘度而乙酰基降低了粘度。更进一步，末端甘露糖缺失时，粘度降低。缺乏侧链末端甘露糖的非乙酰化的四聚体具有较高的粘度。上述发现表明本文所述的EPS具有与先前鉴定的黄原胶不同的特性。
上述说明，包括实施例，描述了本发明的特征。这些包括编码本文所述任一及所有xfgum蛋白(包括GUMxfB，C，D，E，F，H，J，K及M)的分离的核酸分子，以及所述蛋白本身。尤其优选，包括SEQ ID NO：1-9所示的核苷酸序列或由SEQ ID NO：1-9所示的核苷酸序列组成的分离的核酸分子，以及与这些核酸分子不同、但从遗传密码的简并性角度来看、仍编码具有SEQ ID NO：11-19所示氨基酸序列的蛋白的核酸分子。
本发明分离的核酸分子包含在表达载体中，所述核酸分子可操作地连接至启动子上。根据本发明这一特征，本文所描述及要求保护的多个核酸分子可以包括在表达载体中。本文描述了9个核酸分子家族，这些家族核酸分子的任意及全部组合都可以成为该表达载体的一部分。换句话讲，2，3，4，5，6，7，及8种该核酸分子的组合可以是这些载体的一部分，这些表达载体也可以包括所述9种核酸分子，或仅包括一种核酸分子。
同样作为本发明一部分的是重组细胞，例如重组原核细胞株及重组真核细胞系，其已被一个或多个本发明的分离的核酸分子或重组表达载体转化或转染。
如本文所述，同样作为本发明一部分的是分离的XfGUM操纵子。优选的实施方案是SEQ ID NO：10所示的序列；然而，可以理解上述遗传密码的简并性同样也适用于此。更进一步，有关操纵子以及本文所述的所有核酸分子，优选密码子使用原则适用于应用这些核酸分子转化或转染的细胞。
如前所述，同样作为本发明的特征的是由分离的核酸分子编码的蛋白。该蛋白如前所述具有酶的活性。更进一步，其可以用作免疫原以产生抗体，不管是单克隆抗体还是多克隆抗体，其都可如以下所述进行应用。更进一步，这些蛋白可以以不同的重组形式产生(包括融合蛋白)，以活性形式产生，该活性形式的蛋白包含的氨基酸序列小于所述蛋白全部的氨基酸序列。例如，已知酶含有不同的结构功能域，包括一个或多个活性位点，所述活性位点是本发明的一部分，其含有本发明蛋白的小于全部的氨基酸序列。
如前所述，本发明的蛋白可用于制备黄原胶类似分子，例如图2所示的，即：[葡萄糖-葡萄糖-甘露糖-葡萄糖醛酸]n。其中n是一个从1至约5000的整数，优选从约300至大约5000，最优选是大约1500-3000。
上述结构可被乙酰化；然而，正如前所述，当使用做为本发明一部分的酶制备所述结构时，所产生的四糖结构不同于已知的黄原胶，区别在于其并未完全乙酰化或丙酮酸化，该化合物可以经过胞内或胞外途径进行聚合。
对XfGUM操纵子的分离和鉴定可使本领域技术人员确定何种物质可用作该操纵子的全部或其各组分的抑制剂或激活剂。如前所述，本发明所述的黄原胶类似产品具有不同的工业用途，找到其激活剂和/或拮抗剂可使本领域技术人员能在适当的条件下(例如在实验室培养苛养木杆菌时或在转化或转染产生黄原胶类似化合物的细胞时)提高该物质的产量。“在本领域中”期望抑制或拮抗苛养木杆菌，本发明的操纵子和分离的核酸分子可使技术人员找到用于抑制该种生物的物质。
本发明的其它方面对于本领域技术人员来说是清楚的且不需要详细描述。本发明所用术语和表达并不构成对本说明书的限制，且这些术语和表达的应用并不意味着排除本文所示和所描述的所有特征的任何等同物或其部分，可以认为在本发明范围内的各种修改都是可能的。
序列表
序列表
<110>保罗，阿鲁达(Arruda，Paulo)
菲利普R，达西尔瓦(daSilva，Felipe Rodrigues)
埃德森L，肯伯(Kemper，Edson Luis)
安德烈，维托雷(Vettore，Andre)
阿迪尔森，莱特(Leite，Adilson)
马西奥J，达西尔瓦(daSilva，Marcio Jose)
<120>分离的苛养木杆菌GUM操纵子，分离的其核酸分子及它们的用途
<130>FAPESP 201-P
<140>PCT/IB01/01004
<141>2000-05-09
<160>19
<210>1
<211>654
<212>DNA
<213>苛养木杆菌(Xylella fastidiosa〕
<400>1
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caagccagtc gtaatgacag tcgtatcact gcttttggtg cgttcctgcg tcgcaccagt 1140
ctggatgagt taccacaaat cttcaatgta cttggcggca gtatgtcgat tgttggcccg 1200
cgtcctcatg cggcgcagca caacagttat tacgagaaat tgatccagca ttacatgcaa 1260
cgccattacg tcaaaccagg gattactggg tgggcgcagg tcaacggttt tcgtggtgaa 1320
acacaagaat taaggacaat gaaaaagcgt attcagtacg atcttgatta catccggcgc 1380
tggtcattgt ggttcgattt tcgaattatt gttttgactt tagtacgtgt acttggtcag 1440
aaaaatgctt attga 1455
<210>4
<211>1275
<212>DNA
<213>苛养木杆菌(Xylella fastidiosa〕
<400>4
atgctgatgc gtatgagaaa gatcaccaaa gagcattcac ggaatcttct tgttggaata 60
gtgctgtttt ttggagtggc ttataacttt ccgttagcca tgattaacgc caaagttttt 120
acggtgactc cagtgatgac ttatgcagtg gagttggtaa tttattttgc ctgcttcata 180
ctcggattat ctgcattgga tcgcaagcgc gttgtgcttg tgatgagtgg tcttgggttt 240
ctcgttgcat tgacgttgct acggtttctg atgagtttgg attttgatcc aaaattcttc 300
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ctgcgtctat tcatgggcat gagtattttt attacttttg ttgctgtttt cgagttgatg 420
atgcctgatg tttatggtga cattgccaat ccgaaaagtt atttcgtgaa ttctcgtggt 480
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tggatgagtg tttccgagtt aattttatcg atcgcaatga tcttattttt aattgtcgct 720
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<211>1072
<212>DNA
<213>苛养木杆菌(Xylella fastidiosa〕
<400>5
gtgattcatg aaaaaaagta tgtgccagta cgaggaggga cattagcaca ctctccggga 60
tctttatcag ttgggcgtga tgcacgtatt gatgcggcga agggactagg tatttttctg 120
gtagtacttg gtcatgctaa agggcttcca gaatggtggg ttgtgctgat ttacagtttc 180
cacgtgccgt tgttttttct gttatctggt tgggctgctg gcacgaatat gcgtcagtct 240
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<210>6
<211>1143
<212>DNA
<213>苛养木杆菌(Xylella fastidiosa〕
<400>6
atgaaagtgg tgcatgttgt tcgtcaattt catccgtcaa ttggtgggat ggaggatgtg 60
gtcttcaata ttgcgatgca gctgcatttg catgctggaa tcgatgttga tgtcgtgacg 120
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<212>DNA
<213>苛养木杆菌(Xylella fastidiosa〕
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<212>DNA
<213>苛养木杆菌(Xylella fastidiosa〕
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<213>苛养木杆菌(Xylella fastidiosa〕
<400>9
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<213>苛养木杆菌(Xylella fastidiosa〕
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aaaacaccat aacctcgaaa aaaccataca ccgccccgat caccagcgat tatctcctca 60
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cagaaaccaa ggaaacaaca acacggcaag taaaatcata ttcgcttttc ttgttttcgg 6300
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catcccccaa cgcaaatcct tcgcaccaat atgacgggta agcaaccaat agatataacc 6660
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gcagaatcca gactgacgca tattcgtgcc agcagcccaa ccagataaca gaaaaaacaa 6780
cggcacgtgg aaactgtaaa tcagcacaac ccaccattct ggaagccctt tagcatgacc 6840
aagtactacc agaaaaatac ctagtccctt cgccgcatca atacgtgcat cacgcccaac 6900
tgataaagat cccggagagt gtgctaatgt ccctcctcgt actggcacat actttttttc 6960
atgaatcacg acacacctcc ttgtgctatc actctcgctt ctacaagatt cttttttgca 7020
gccaatacct taggcgagca attccaaaga cagccacacg taaaccacca caacgcagac 7080
gttttaatcg aaaaataact atttgatacc aaaagactca atgcaaatgc gaatatggcc 7140
atgtttttaa atccccgccc ctcatgactt tgcatgtcga aaagaaatga ataagccaac 7200
aaaaaaacaa gtacagtgat aactgactgt gacgcgatga aataagcaat accactatca 7260
aaataacgat aggacgactg aacatccaag ccaaaccacg aatccaaggg caagtgagcc 7320
agtgaataca cactgaaaaa agtcctgctc agaatcgtat ccttgtcata tgcatgaata 7380
ccattcacct gaactatgaa ccatccaccg agtaacaccg aaaaaaataa caaaaacgca 7440
aaacgctgat caaaacgttt aagaaatggt gcaagcaata ccattaatat gcatgtacca 7500
gtcgccaaac ggccatctga agcgacaatt aaaaataaga tcattgcgat cgataaaatt 7560
aactcggaaa cactcatcca acgccagaaa accaacacaa ttgcagcaaa aaagataatg 7620
taatttccca tcgtcaccgg ttcaatgaac acagaagatg cacgtggtaa attcgaacca 7680
gcaaagaagt tacgctcatc cggacgcgtg gcactaagat acaaactact cccttcattc 7740
cagaaaccgt ctgcgctagc accacgagaa ttcacgaaat aacttttcgg attggcaatg 7800
tcaccataaa catcaggcat catcaactcg aaaacagcaa caaaagtaat aaaaatactc 7860
atgcccatga atagacgcag caaagatcca cggtaggctg caccgagtat cagaaaagcg 7920
aatggaatca gcgcatccct gaagaatttt ggatcaaaat ccaaactcat cagaaaccgt 7980
agcaacgtca atgcaacgag aaacccaaga ccactcatca caagcacaac gcgcttgcga 8040
tccaatgcag ataatccgag tatgaagcag gcaaaataaa ttaccaactc cactgcataa 8100
gtcatcactg gagtcaccgt aaaaactttg gcgttaatca tggctaacgg aaagttataa 8160
gccactccaa aaaacagcac tattccaaca agaagattcc gtgaatgctc tttggtgatc 8220
tttctcatac gcatcagcat ggaaactctc ctgacacagc catgcatgga ctgaaacatc 8280
taagatcaat aagcattttt ctgaccaagt acacgtacta aagtcaaaac aataattcga 8340
aaatcgaacc acaatgacca gcgccggatg taatcaagat cgtactgaat acgctttttc 8400
attgtcctta attcttgtgt ttcaccacga aaaccgttga cctgcgccca cccagtaatc 8460
cctggtttga cgtaatggcg ttgcatgtaa tgctggatca atttctcgta ataactgttg 8520
tgctgcgccg catgaggacg cgggccaaca atcgacatac tgccgccaag tacattgaag 8580
atttgtggta actcatccag actggtgcga cgcaggaacg caccaaaagc agtgatacga 8640
ctgtcattac gactggcttg cttcagatgc tgactttgat cgtcatgcac ccgcatcgaa 8700
cgaaatttga gcacataaaa ctcacgccca ttcaagccat ggcggcgttg ccggaacaat 8760
accggacctg gggaactgaa cttgatacca atcccaatga tgattaacaa cggccacagc 8820
aacagcaatg caatcatggc cagcacttta tcctggattg tcttggcaac aaaaaagtag 8880
ttatctcgat caacaccgcc ctgacgaaga ttaatgacag gcacatgacc aatttgttca 8940
cccgactgat tgagtgtgcc aaagtcgaat aaatcaggaa taagttttac attgatcgga 9000
taacgctcca atttcttcaa caacgtctta atataatcac gctcaccaag aggcatcgaa 9060
atccatactt gctcaacgtg atttttttct aaaaaatcga acaatctatc cggcgtccca 9120
agagacggaa gacgcctcac atattcagat acagagacat cgtaggaagt actgaaatac 9180
ccaatcaatt gcatccctgt ccatgtatta cgattcagat aatggtgaat tttcatcaca 9240
ggatgacgca gcccaaccac aacaatacgt tggacatcca caccacgcat atgcaaccag 9300
ttgagtagac tacgaagcgc tacacgcgca ctcaacaagg tagagagcgc accaaggaac 9360
cagaaagtaa tccataacca ggagacagga tgtcccaatt gaacaatcag tgtatgcaac 9420
gaaaacaaga taaatacacc acagaacgca ctactaagta ctaacagctc ccgcgccaga 9480
gcacgcccac gccaactgcg atacaacggg aaaaaagaaa aacaaatcac cgaatacagt 9540
aacgtgttac caatcgcaat acgatatggg accattaaca tccaagtacc aaacaacaat 9600
ctgtaaatca ttacaccaga gagcaccacc attgttagat caaaaacacg aagtattaga 9660
tcagcggcag cagaatattt cgacaataac cgcggtgaag aagcaatatc agtaacactg 9720
ttcagatctg ccagaagcat tgatagaact cctcacatat cctgggcagc gcatattgtg 9780
ggaggaacaa gcgcgcacca ccagacaacg ttggtttcgt tcaccagcat ttgccaccat 9840
gcatcaatcc ctaacaaacg ccggcacttt acttaaaagg aatctgacca ccaagcatca 9900
gaactaaatc aatgaaaacc gcctgctaca cttcactcaa tacaactgcc tttattccac 9960
gctcatcacg tttatccgct tcgctccatg catggaataa cgcaccatcg caaccgtcaa 10020
acccaaaaag acaccaaaaa ttccacccaa tatcgtgttc attaacaaat tcggcgaaat 10080
tgggcggctc ggaatatctg ccgcatccac taccgtcaca ttgttactac caacatcgcc 10140
aagcacacta atttccttat aacgttgcaa caacgcatca taaagttggc gatctgtttc 10200
agcctcacgc tcgagtaggt tataacgaat aagacgcgtt ttcagatcca actcatcctt 10260
ctccaacact gcaatacggt cattcaatag attctcctga cgtaatgtag cttcatactg 10320
agacttcaac gattgcctaa tattcaatac ctcagcattg atttgcttag tattttcttt 10380
gattcttgct ttcaaccgtt gcatctccgg atactcaggt ttaaacatgg ataatttctg 10440
ctgatattca ttgaccatat tcgcctgctc ggtacgcaaa gactgtacca acaggttaga 10500
caacacttga gggatactca gaccatcacc aatactggcc tgacgccaag aggcttcggc 10560
cctaatccgc tcattctgtg cggaggccag caacgcatta agatcactca ggttctgtgc 10620
agagagtgat ggtttttcgt cacccacaga aacaatcttt tcatcagtgg aatacgcaac 10680
cacattcctt tctgacttat ccaccttgat acgcaattgt tctaagcgtc cagcaagata 10740
cttcattgca aatgagaagg catttgaacg acgctgctga ttattttcaa tgaacatctt 10800
ggcgtaggca ttagcaacct tcgccgataa ggtgggatca tgagaatcaa aatgcacata 10860
gaccagcctc gaattgagga tcggttcgat ctttaaactg ttcaacatca tttctatcaa 10920
tgcactctcg atagctgtgt tacgagtatt aactggaaga ttttgtacct ttgacaatac 10980
tttatcgacg agtggtttca acatcggctc tcgatccaag ttcatcttac gaatgactgc 11040
acgcgctaac gaacgactct gtaataactg atattgagtt tgatagaaat cacgatcaag 11100
cggcgactct acagggatca aattatcgac attcatcacc ttaggcacat cacgctcaat 11160
ctgtaacgtg gcagtggcac gaaacttttg aggaagcagc aacgagacac caagggctag 11220
cgaagttgcg ccgatggcaa caccaataat cagccaatat tgactgacca acacacgtaa 11280
ataatcaaga agattcagac ccaatggttc tgaggagtga aacaaagcgg aagaagtttg 11340
attgggataa tccatagtta tcgatacgcg cgccagacca taacgaaggg ggtaatttca 11400
acaagagtgc gcaaaaacaa gcgcatgtcg gaacggtaaa caacaacgag atcaccagga 11460
tagatctcag gatcaggatc cttaccacgc tcgatacgtg ccaaatcaaa gcgcgccaac 11520
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atacctttag cctgagcaat cacttgctgc aatgtcaggt tgctaccgat caatggatag 11640
ctccccggct cggtcactgc accagtcacg gtaacacggc gtgcattcgc ttcttggata 11700
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tccaactcag ccgcaccttt attggataca tcaatgcttc ctaacaatgg cagggtaata 11820
cgcccagtgt tgtccacacg gacctgacgc tccagatcat cgacttggaa taccttgatc 11880
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tcaggtaccg ggagagaaga ggccagagaa tgcggtgcag tattgcaagc catcagaata 12000
accgtacaca ttaaggacaa actcactagt cccgttaatt tcatacgcga tgacatgaac 12060
ctcttgtagg gaaaaatcga gtaatggctc gccatatcgt cccgatgcaa atagaaacgg 12120
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actgtgaaat aaatagcaat acacgccttt ctcaatgaga aagatcgcaa caatcacggc 12540
attcagcaac taaacatcat actttctgaa acacacatat aaaaaagcgt gctttaatat 12600
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gcccatagaa gaaaactagc gtttatcaaa ccacactgat taatacgact 12710
<210>11
<211>218
<212>PRT
<213>苛养木杆菌(Xylella fastidiosa〕
<400>11
Met Cys Thr Val Ile Leu Met Ala Cys Asn Thr Ala Pro His Ser Leu
1 5 10 15
Ala Ser Ser Leu Pro Val Pro Asp Ala Leu Leu Phe Pro Gln Val Gln
20 25 30
Pro Glu Tyr Lys Val Ser Pro Gly Asp Leu Leu Leu Ile Lys Val Phe
35 40 45
Gln Val Asp Asp Leu Glu Arg Gln Val Arg Val Asp Asn Thr Gly Arg
50 55 60 65
Ile Thr Leu Pro Leu Leu Gly Ser Ile Asp Val Ser Asn Lys Gly Ala
70 75 80
Ala Glu Leu Glu Thr Leu Ile Ala Asn Arg Tyr Arg Ser Gly Tyr Leu
85 90 95
Gln Asn Pro Gln Val Ser Val Phe Ile Gln Glu Ala Asn Ala Arg Arg
100 105 110
Val Thr Val Thr Gly Ala Val Thr Glu Pro Gly Ser Tyr Pro Leu Ile
115 120 125
Gly Ser Asn Leu Thr Leu Gln Gln Val Ile Ala Gln Ala Lys Gly Ile
130 135 140 145
Asn Thr Leu Ala Ser Leu Gln Asn Val Val Val Phe Arg Thr Val Lys
150 155 160
Gly Gln Lys Met Leu Ala Arg Phe Asp Leu Ala Arg Ile Glu Arg Gly
165 170 175
Lys Asp Pro Asp Pro Glu Ile Tyr Pro Gly Asp Leu Val Val Val Tyr
180 185 190
Arg Ser Asp Met Arg Leu Phe Leu Arg Thr Leu Val Glu Ile Thr Pro
195 200 205
Phe Val Met Val Trp Arg Ala Tyr Arg
210 215
<210>12
<211>467
<212>PRT
<213>苛养木杆菌(Xylella fastidiosa〕
<400>12
Met Asp Tyr Pro Asn Gln Thr Ser Ser Ala Leu Phe His Ser Ser Glu
1 5 10 15
Pro Leu Gly Leu Asn Leu Leu Asp Tyr Leu Arg Val Leu Val Ser Gln
20 25 30
Tyr Trp Leu Ile Ile Gly Val Ala Ile Gly Ala Thr Ser Leu Ala Leu
35 40 45
Gly Val Ser Leu Leu Leu Pro Gln Lys Phe Arg Ala Thr Ala Thr Leu
50 55 60
Gln Ile Glu Arg Asp Val Pro Lys Val Met Asn Val Asp Asn Leu Ile
65 70 75 80
Pro Val Glu Ser Pro Leu Asp Arg Asp Phe Tyr Gln Thr Gln Tyr Gln
85 90 95
Leu Leu Gln Ser Arg Ser Leu Ala Arg Ala Val Ile Arg Lys Met Asn
100 105 110
Leu Asp Arg Glu Pro Met Leu Lys Pro Leu Val Asp Lys Val Leu Ser
115 120 125
Lys Val Gln Asn Leu Pro Val Asn Thr Arg Asn Thr Ala Ile Glu Ser
130 135 140
Ala Leu Ile Glu Met Met Leu Asn Ser Leu Lys Ile Glu Pro Ile Leu
145 150 155 160
Asn Ser Arg Leu Val Tyr Val His Phe Asp Ser His Asp Pro Thr Leu
165 170 175
Ser Ala Lys Val Ala Asn Ala Tyr Ala Lys Met Phe Ile Glu Asn Asn
180 185 190
Gln Gln Arg Arg Ser Asn Ala Phe Ser Phe Ala Met Lys Tyr Leu Ala
195 200 205
Gly Arg Leu Glu Gln Leu Arg Ile Lys Val Asp Lys Ser Glu Arg Asn
210 215 220
Val Val Ala Tyr Ser Thr Asp Glu Lys Ile Val Ser Val Gly Asp Glu
225 230 235 240
Lys Pro Ser Leu Ser Ala Gln Asn Leu Ser Asp Leu Asn Ala Leu Leu
245 250 255
Ala Ser Ala Gln Asn Glu Arg Ile Arg Ala Glu Ala Ser Trp Arg Gln
260 265 270
Ala Ser Ile Gly Asp Gly Leu Ser Ile Pro Gln Val Leu Ser Asn Leu
275 280 285
Leu Val Gln Ser Leu Arg Thr Glu Gln Ala Asn Met Val Asn Glu Tyr
290 295 300
Gln Gln Lys Leu Ser Met Phe Lys Pro Glu Tyr Pro Glu Met Gln Arg
305 310 315 320
Leu Lys Ala Arg Ile Lys Glu Asn Thr Lys Gln Ile Asn Ala Glu Val
325 330 335
Leu Asn Ile Arg Gln Ser Leu Lys Ser Gln Tyr Glu Ala Thr Leu Arg
340 345 350
Gln Glu Asn Leu Leu Asn Asp Arg Ile Ala Val Leu Glu Lys Asp Glu
355 360 365
Leu Asp Leu Lys Thr Arg Leu Ile Arg Tyr Asn Leu Leu Glu Arg Glu
370 375 380
Ala Glu Thr Asp Arg Gln Leu Tyr Asp Ala Leu Leu Gln Arg Tyr Lys
385 390 395 400
Glu Ile Ser Val Leu Gly Asp Val Gly Ser Asn Asn Val Thr Val Val
405 410 415
Asp Ala Ala Asp Ile Pro Ser Arg Pro Ile Ser Pro Asn Leu Leu Met
420 425 430
Asn Thr Ile Leu Gly Gly Ile Phe Gly Val Phe Leu Gly Leu Thr Val
435 440 445
Ala Met Val Arg Tyr Ser Met His Gly Ala Lys Arg Ile Asn Val Met
450 455 460
Ser Val Glu
465
<210>13
<211>482 494
<212>PRT
<213>苛养木杆菌(Xylella fastidiosa〕
<400>13
Met Leu Leu Ala Asp Leu Asn Ser Val Thr Asp Ile Ala Ser Ser Pro
1 5 10 15
Arg Leu Leu Ser Lys Tyr Ser Ala Ala Ala Asp Leu Ile Leu Arg Val
20 25 30
Phe Asp Leu Thr Met Val Val Leu Ser Gly Val Met Ile Tyr Arg Leu
35 40 45
Leu Phe Gly Thr Trp Met Leu Met Val Pro Tyr Arg Ile Ala Ile Gly
50 55 60
Asn Thr Leu Leu Tyr Ser Val Ile Cys Phe Ser Phe Phe Pro Leu Tyr
65 70 75 80
Arg Ser Trp Arg Gly Arg Ala Leu Ala Arg Glu Leu Leu Val Leu Ser
85 90 95
Ser Ala Phe Cys Gly Val Phe Ile Leu Phe Ser Leu His Thr Leu Ile
100 105 110
Val Gln Leu Gly His Pro Val Ser Trp Leu Trp Ile Thr Phe Trp Phe
115 120 125
Leu Gly Ala Leu Ser Thr Leu Leu Ser Ala Arg Val Ala Leu Arg Ser
130 135 140
Leu Leu Asn Trp Leu His Met Arg Gly Val Asp Val Gln Arg Ile Val
145 150 155 160
Val Val Gly Leu Arg His Pro Val Met Lys Ile His His Tyr Leu Asn
165 170 175
Arg Asn Thr Trp Thr Gly Met Gln Leu Ile Gly Tyr Phe Ser Thr Ser
180 185 190
Tyr Asp Val Ser Val Ser Glu Tyr Val Arg Arg Leu Pro Ser Leu Gly
195 200 205
Thr Pro Asp Arg Leu Phe Asp Phe Leu Glu Lys Asn His Val Glu Gln
210 215 220
Val Trp Ile Ser Met Pro Leu Gly Glu Arg Asp Tyr Ile Lys Thr Leu
225 230 235 240
Leu Lys Lys Leu Glu Arg Tyr Pro Ile Asn Val Lys Leu Ile Pro Asp
245 250 255
Leu Phe Asp Phe Gly Thr Leu Asn Gln Ser Gly Glu Gln Ile Gly His
260 265 270
Val Pro Val Ile Asn Leu Arg Gln Gly Gly Val Asp Arg Asp Asn Tyr
275 280 285
Phe Phe Val Ala Lys Thr Ile Gln Asp Lys Val Leu Ala Met Ile Ala
290 295 300
Leu Leu Leu Leu Trp Pro Leu Leu Ile Ile Ile Gly Ile Gly Ile Lys
305 310 315 320
Phe Ser Ser Pro Gly Pro Val Leu Phe Arg Gln Arg Arg His Gly Leu
325 330 335
Asn Gly Arg Glu Phe Tyr Val Leu Lys Phe Arg Ser Met Arg Val His
340 345 350
Asp Asp Gln Ser Gln His Leu Lys Gln Ala Ser Arg Asn Asp Ser Arg
355 360 375
Ile Thr Ala Phe Gly Ala Phe Leu Arg Arg Thr Ser Leu Asp Glu Leu
380 385 390
Pro Gln Ile Phe Asn Val Leu Gly Gly Ser Met Ser Ile Val Gly Pro
395 400 405 410
Arg Pro His Ala Ala Gln His Asn Ser Tyr Tyr Glu Lys Leu Ile Gln
415 420 425
His Tyr Met Gln Arg His Tyr Val Lys Pro Gly Ile Thr Gly Trp Ala
430 435 440
Gln Val Asn Gly Phe Arg Gly Glu Thr Gln Glu Leu Arg Thr Met Lys
445 450 455
Lys Arg Ile Gln Tyr Asp Leu Asp Tyr Ile Arg Arg Trp Ser Leu Trp
460 465 470
Phe Asp Phe Arg Ile Ile Val Leu Thr Leu Val Arg Val Leu Gly Gln
475 480 485 490
Lys Asn Ala Tyr
<210>14
<211>424
<212>PRT
<213>苛养木杆菌(Xylella fastidiosa〕
<400>14
Met Leu Met Arg Met Arg Lys Ile Thr Lys Glu His Ser Arg Asn Leu
1 5 10 15
Leu Val Gly Ile Val Leu Phe Phe Gly Val Ala Tyr Asn Phe Pro Leu
20 25 30
Ala Met Ile Asn Ala Lys Val Phe Thr Val Thr Pro Val Met Thr Tyr
35 40 45
Ala Val Glu Leu Val Ile Tyr Phe Ala Cys Phe Ile Leu Gly Leu Ser
50 55 60
Ala Leu Asp Arg Lys Arg Val Val Leu Val Met Ser Gly Leu Gly Phe
65 70 75 80
Leu Val Ala Leu Thr Leu Leu Arg Phe Leu Met Ser Leu Asp Phe Asp
85 90 95
Pro Lys Phe Phe Arg Asp Ala Leu Ile Pro Phe Ala Phe Leu Ile Leu
100 105 110
Gly Ala Ala Tyr Arg Gly Ser Leu Leu Arg Leu Phe Met Gly Met Ser
115 120 125
Ile Phe Ile Thr Phe Val Ala Val Phe Glu Leu Met Met Pro Asp Val
130 135 140
Tyr Gly Asp Ile Ala Asn Pro Lys Ser Tyr Phe Val Asn Ser Arg Gly
145 150 155 160
Ala Ser Ala Asp Gly Phe Trp Asn Glu Gly Ser Ser Leu Tyr Leu Ser
165 170 175
Ala Thr Arg Pro Asp Glu Arg Asn Phe Phe Ala Gly Ser Asn Leu Pro
180 185 190
Arg Ala Ser Ser Val Phe Ile Glu Pro Val Thr Met Gly Asn Tyr Ile
195 200 205
Ile Phe Phe Ala Ala Ile Val Leu Val Phe Trp Arg Trp Met Ser Val
210 215 220
Ser Glu Leu Ile Leu Ser Ile Ala Met Ile Leu Phe Leu Ile Val Ala
225 230 235 240
Ser Asp Gly Arg Leu Ala Thr Gly Thr Cys Ile Leu Met Val Leu Leu
245 250 255
Ala Pro Phe Leu Lys Arg Phe Asp Gln Arg Phe Ala Phe Leu Leu Phe
260 265 270
Phe Ser Val Leu Leu Gly Gly Trp Phe Ile Val Gln Val Asn Gly Ile
275 280 285
His Ala Tyr Asp Lys Asp Thr Ile Leu Ser Arg Thr Phe Phe Ser Val
290 295 300
Tyr Ser Leu Ala His Leu Pro Leu Asp Ser Trp Phe Gly Leu Asp Val
305 310 315 320
Gln Ser Ser Tyr Arg Tyr Phe Asp Ser Gly Ile Ala Tyr Phe Ile Ala
325 330 335
Ser Gln Ser Val Ile Thr Val Leu Val Phe Leu Leu Ala Tyr Ser Phe
340 345 350
Leu Phe Asp Met Gln Ser His Glu Gly Arg Gly Phe Lys Asn Met Ala
355 360 365
Ile Phe Ala Phe Ala Leu Ser Leu Leu Val Ser Asn Ser Tyr Phe Ser
370 375 380
Ile Lys Thr Ser Ala Leu Trp Trp Phe Thr Cys Gly Cys Leu Trp Asn
385 390 395 400
Cys Ser Pro Lys Val Leu Ala Ala Lys Lys Asn Leu Val Glu Ala Arg
405 410 415
Val Ile Ala Gln Gly Gly Val Ser
420
<210>15
<211>372 363
<212>PRT
<213>苛养木杆菌(Xylella fastidiosa〕
<400>15
Met Ile His Glu Lys Lys Tyr Val Pro Val Arg Gly Gly Thr Leu Ala
1 5 10 15
His Ser Pro Gly Ser Leu Ser Val Gly Arg Asp Ala Arg Ile Asp Ala
20 25 30
Ala Lys Gly Leu Gly Ile Phe Leu Val Val Leu Gly His Ala Lys Gly
35 40 45
Leu Pro Glu Trp Trp Val Val Leu Ile Tyr Ser Phe His Val Pro Leu
50 55 60
Phe Phe Leu Leu Ser Gly Trp Ala Ala Gly Thr Asn Met Arg Gln Ser
65 70 75 80
Gly Phe Cys Glu Cys Leu Leu His Leu Met Arg Thr Leu Leu Val Pro
85 90 95
Tyr Val Phe Phe Phe Phe Val Gly Tyr Ile Tyr Trp Leu Leu Thr Arg
100 105 110
His Ile Gly Ala Lys Asp Leu Arg Trp Gly Met His Pro Trp Trp Glu
115 120 125
Pro Leu Asn Gly Leu Leu Met Gly Gly Gly Thr Ala Leu Tyr Val His
130 135 140
Pro Ser Leu Trp Phe Leu Pro Ala Leu Phe Val Thr Lys Leu Thr Tyr
145 150 155 160
Gln Met Leu Ser Lys Tyr Val Ser Leu Glu Arg Leu Val Leu Phe Gly
165 170 175
Gly Ile Phe Ser Trp Val Trp Val Gly Phe Phe Pro Gly Phe Gly Val
180 185 190
Arg Phe Pro Phe Ala Leu Asp Glu Leu Pro Ile Ala Phe Leu Phe Phe
195 200 205
Val Phe Gly Val Met Gly Arg Arg Thr Ser Trp Leu Arg Leu Leu Pro
210 215 220
Lys Thr Arg Lys Ala Asn Met Ile Leu Leu Ala Val Leu Leu Phe Pro
225 230 235 240
Trp Phe Leu Leu Ala Leu Cys Asn Glu Lys Val Asp Met Asn Met Leu
245 250 255
Ile Phe Gly Asn Ser Pro Phe Val Phe His Val Ser Ala Leu Leu Gly
260 265 270
Val Ala Ile Val Leu Cys Ala Ala Ala Leu Val Glu Gln Trp Ser Leu
275 280 285
Val Gln Trp Ala Gly Arg Asn Thr Leu Leu Ile Leu Cys Thr His Thr
290 295 300
Leu Val Phe Phe Val Leu Phe Gly Val Leu Ser Leu Leu Gly Gly Thr
305 310 315 320
Ser Gly Leu Ile Leu Ala Leu Leu Phe Ser Ala Ile Thr Leu Cys Phe
325 330 335
Ile Pro Ile Phe Arg Trp Ile Leu Met Arg Trp Ile Pro Trp Ser Leu
340 345 350
Gly Ala Cys Ser Tyr Met Arg Ser Arg Ser Ser
355 360
<210>16
<211>380
<212>PRT
<213>苛养木杆菌(Xylella fastidiosa〕
<400>16
Met Lys Val Val His Val Val Arg Gln Phe His Pro Ser Ile Gly Gly
1 5 10 15
Met Glu Asp Val Val Phe Asn Ile Ala Met Gln Leu His Leu His Ala
20 25 30
Gly Ile Asp Val Asp Val Val Thr Leu Asn Arg Val Phe Thr Gln Ser
35 40 45
Asp Val Leu Leu Pro Cys Thr Asp Lys Tyr Gln Gly Val Ser Ile Gln
50 55 60
Arg Ile Gly Tyr Arg Gly Ser Ser Arg Tyr Pro Leu Ala Pro Trp Val
65 70 75 80
Leu Arg Met Leu Asp Lys Ala Asp Val Ile His Val His Gly Ile Asp
85 90 95
Phe Phe Tyr Asp Phe Leu Ala Leu Thr Arg Val Leu His Gly Lys Pro
100 105 110
Met Val Val Ser Thr His Gly Gly Phe Phe His Thr Asp Tyr Ala Ser
115 120 125
Arg Leu Lys Leu Leu Trp Phe Asn Thr Leu Thr Arg Leu Ser Ala Leu
130 135 140
Ala Tyr Ala Arg Ile Ile Ala Ser Ser Glu Ser Asp Gly Ala Leu Phe
145 150 155 160
Ser Lys Ile Val Ala Pro Ser Arg Leu Arg Val Ile Glu Asn Gly Val
165 170 175
Asp Val Glu Lys Tyr Ala Arg Cys Gly Ala Ser Glu Ala Gly Arg Thr
180 185 190
Leu Leu Tyr Phe Gly Arg Trp Ser Met Asn Lys Gly Leu Leu Glu Thr
195 200 205
Leu Gln Leu Leu Ala Val Leu Tyr Val Leu Asp Pro Arg Trp Arg Leu
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