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1、(10)申请公布号 CN 102919563 A (43)申请公布日 2013.02.13 CN 102919563 A *CN102919563A* (21)申请号 201110404232.X (22)申请日 2011.12.07 201110373627.8 2011.11.22 CN A23K 1/18(2006.01) (71)申请人 中国农业科学院植物保护研究所 地址 100193 北京市海淀区圆明园西路 2 号 (72)发明人 江幸福 罗礼智 张蕾 (74)专利代理机构 北京海虹嘉诚知识产权代理 有限公司 11129 代理人 张涛 (54) 发明名称 一种二点委夜蛾 （Athet。
2、is lepigone） 的人工 饲料其制备方法与应用 (57) 摘要 本 发 明 “一 种 二 点 委 夜 蛾 (Athetis lepigone) 的人工饲料其制备方法与应用” ， 属于 昆虫饲养技术。本发明提供的二点委夜蛾的人工 饲料， 由下列重量份的组分组成 ： 全麦粉 40 45 份 ； 玉米粉 80 100 份 ； 黄豆粉 60 70 份 ； 酵母 粉 55 65 份 ； 蔗糖 30 33 份 ； 抗坏血酸 3 5 份 ； 氢氧化钾34份 ； 甲醛15份， 乙酸4.5 6 份 ； 琼脂 10 15 份 ； 山梨酸 1 2 份 ； 对羟基 苯甲酸甲脂 1 2 份 ； 维生素液 9 1。
3、1 份 ； 蒸馏 水 650 700 份。本发明基于该人工饲料的配方 进一步提供了饲料的制备方法和该饲料在饲养二 点委夜蛾上的应用方法即饲养方法。用该饲料饲 养的二点委夜蛾平均蛹重达 75.77mg， 幼虫存活 率为 91.7， 化蛹率和羽化率均为 100， 平均单 雌产卵 305.3 粒。 (66)本国优先权数据 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 5 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 5 页 1/1 页 2 1. 一种二点委夜蛾 (Athetis lepigone) 的人工饲料， 由下列重量份的组分组成 ： 全麦 粉。
4、 40 45 份 ； 玉米粉 80 100 份 ； 黄豆粉 60 70 份 ； 酵母粉 55 65 份 ； 蔗糖 30 33 份 ； 抗坏血酸 3 5 份 ； 氢氧化钾 3 4 份 ； 甲醛 1 5 份， 乙酸 4.5 6 份 ； 琼脂 10 15 份 ； 山梨酸 1 2 份 ； 对羟基苯甲酸甲脂 1 2 份 ； 维生素液 9 11 份 ； 蒸馏水 650 700 份。 2. 根据权利要求 1 所述的人工饲料， 所述维生素液的各组分及其占维生素液总量的重 量百分含量为 ： 烟酸 ： 5.5 ； 泛酸钙 ： 5.5 ； 核黄素 ： 2.8 ； 维生素 B1 ： 1.4 ； 维生素 B6 ： 1.。
5、4 ； 叶酸 ： 1.4 ； D- 生物素 1.1 ； 水 ： 81。 3. 权利要求 1 或 2 所述的人工饲料的制备方法， 步骤如下 ： (1) 按重量份比例预备各种原料， (2)全麦粉、 玉米粉、 黄豆粉和酵母粉于120下在干燥箱中灭菌2小时， 加入蔗糖并搅 拌均匀 ； (3) 将量好的蒸馏水分作三部分， 一部分蒸馏水煮沸后， 加入到搅拌均匀的全麦粉、 玉 米粉、 黄豆粉、 酵母粉和蔗糖中得组分 A ； 另一部分蒸馏水中常温加入琼脂、 山梨酸、 对羟基 苯甲酸甲脂， 温火熬制 10 分钟， 作为组分 B， 第三部分蒸馏水用于溶解氢氧化钾溶液 ； (4)将组分A倒入组分B中， 搅拌均匀， 。
6、作为组分C ； 将维生素液， 作为组分D加入组分C 中， 并依次加入甲醛溶液、 乙酸溶液、 抗坏血酸和已溶解好的氢氧化钾溶液 ； 搅拌均匀且冷 却凝固后存放在 4冰箱中。 4. 一种饲养二点委夜蛾 (Athetis lepigone) 的方法， 步骤进行 ： (1) 初孵幼虫化蛹 ： 将权利要求 1 或 2 所述的二点委夜蛾人工饲料切成小块， 放入消毒 后细胞培养板中， 将初孵幼虫单头放入细胞培养板中， 将细胞培养板置于温度 25 27， 相对湿度为 60 -70， 光周期为 ： L14-D10 的环境中直至初孵幼虫化蛹 ； (2) 羽化 ： 将蛹从细胞培养板中捡出， 放入底部铺有厚度为 1 。
7、3cm 的土层的养虫箱 中， 置于温度 25 27， 相对湿度为 60 -70， 光周期为 ： L14-D10 的环境条件下饲养至 成虫羽化 ； (3) 羽化 - 产卵 ： 羽化后以 5的蜂蜜水饲养， 并于次日放入谷杆或吸水纸供其产卵 ； (4) 卵 - 初孵幼虫 ： 将产有二点委夜蛾卵的谷杆或吸水纸取出， 放入装有天然饲料的 瓶中， 并盖上厚卫生纸和纱布保湿， 然后置于温度 25 27， 相对湿度为 60 -70， 光周 期为 ： L14-D10 的环境下饲养直至幼虫孵化。 5.根据权利要求4所述的饲养二点委夜蛾(Athetis lepigone)的方法， 步骤(4)中幼 虫孵化后， 将所述。
8、幼虫按照步骤 (1)、 (2)、 (3)、 (4) 的操作以进行继代饲养。 6. 根据权利要求 4 6 任一所述的饲养二点委夜蛾的方法， 所述天然饲料指玉米苗。 权 利 要 求 书 CN 102919563 A 2 1/5 页 3 一种二点委夜蛾 （Athetis lepigone） 的人工饲料其制备方 法与应用 技术领域 0001 本发明涉及昆虫饲养技术， 具体涉及二点委夜蛾的人工饲料， 其制备方法及采用 该饲料的饲养二点委夜蛾的方法。 背景技术 0002 二点委夜蛾 Athetis lepigone( 1860) 属于鳞翅目 Lepidoptera， 夜蛾 科 Noctuidae， 是近年。
9、来我国夏玉米上发现的一种新的害虫， 自 2005 年在河北省首次报道 以来， 目前已蔓延到河北、 山东、 河南、 山西、 江苏、 安徽 6 省发生危害。其发生危害呈现出范 围广、 蔓延速度快、 暴发成灾明显、 田间虫口密度高和世代重叠严重等显著特点， 严重威胁 我国夏玉米的安全生产， 并对花生和大豆等农作物构成危害。国外广泛分布于欧洲和亚洲 的多个国家， 据统计， 在欧洲就有 19 个国家和地区有该虫的分布， 在亚洲的日本、 朝鲜、 蒙 古和俄罗斯中东部也有分布。尽管该虫在欧洲有进一步扩大分布的趋势， 但其对当地农作 物的危害程度与损失均未见报道， 该虫的生物学、 生态学、 发生规律与防治措施。
10、等研究基本 处于空白。 0003 目前， 国内对二点委夜蛾的研究主要集中在田间发生危害特征的调查以及防治技 术的田间试验等， 而对其生物学、 生态学特性也缺乏研究。因此， 迫切需要在实验室内开展 二点委夜蛾的系统研究， 而开展这些研究的一个重要前提是要建立二点委夜蛾的室内种 群， 研制其人工饲料及关键饲养技术， 实现试虫的大规模、 长期、 继代饲养是开展生物学、 生 态学研究以及药效试验等综合防治技术研究的重要基础。 0004 目前， 国内外对二点委夜蛾人工饲料的研制还属于空白， 因此， 本发明的技术内容 具有原创性、 紧迫性和必要性。 发明内容 0005 本发明根据上述领域的空白的需求， 提。
11、供一种配方简单， 适宜二点委夜蛾室内饲 养的人工饲料， 从而实现标准虫源的大规模、 长期、 继代饲养， 满足室内科学研究的需要。 同 时提供该人工饲料的制备方法和二点委夜蛾的饲养方法。 0006 一种二点委夜蛾 (Athetis lepigone) 的人工饲料， 由下列重量份的组分组成 ： 0007 全麦粉 40 45 份 ； 玉米粉 80 100 份 ； 黄豆粉 60 70 份 ； 酵母粉 55 65 份 ； 蔗糖 30 33 份 ； 抗坏血酸 3 5 份 ； 氢氧化钾 3 4 份 ； 甲醛 1 5 份， 乙酸 4.5 6 份 ； 琼脂 10 15 份 ； 山梨酸 1 2 份 ； 对羟基苯甲。
12、酸甲脂 1 2 份 ； 维生素液 9 11 份 ； 蒸馏 水 650 700 份。 0008 所述维生素液的各组分及其占维生素液总量的重量百分含量为 ： 0009 烟酸 ： 5.5； 泛酸钙 ： 5.5； 核黄素 ： 2.8； 维生素 B1 ： 1.4； 维生素 B6 ： 1.4； 叶酸 ： 1.4 ； D- 生物素 1.1 ； 水 ： 81。 0010 上述二点委夜蛾人工饲料的制备方法， 步骤如下 ： 说 明 书 CN 102919563 A 3 2/5 页 4 0011 (1) 按比例预备饲料原料， 0012 (2)全麦粉、 玉米粉、 黄豆粉和酵母粉于120下在干燥箱中灭菌2小时， 加入蔗。
13、糖 并搅拌均匀 ； 0013 (3) 将量好的蒸馏水分作三部分， 一部分蒸馏水煮沸后， 加入到搅拌均匀的全麦 粉、 玉米粉、 黄豆粉、 酵母粉和蔗糖中得组分 A ； 另一部分蒸馏水中常温加入琼脂、 山梨酸、 对羟基苯甲酸甲脂， 温火熬制 10 分钟， 作为组分 B， 第三部分蒸馏水用于溶解氢氧化钾溶 液 ； 0014 (4) 将组分 A 倒入组分 B 中， 搅拌均匀， 作为组分 C ； 将维生素液， 作为组分 D 加入 组分 C 中， 并依次加入甲醛溶液、 乙酸溶液、 抗坏血酸和已溶解好的氢氧化钾溶液 ； 搅拌均 匀且冷却凝固后存放在 4冰箱中。 0015 一种饲养二点委夜蛾的方法， 步骤进行。
14、 ： 0016 (1) 初孵幼虫化蛹 ： 将上述人工饲料切成小块， 放入消毒后细胞培养板中， 将初孵 幼虫单头放入细胞培养板中， 将细胞培养板置于温度2527， 相对湿度为60-70， 光 周期为 ： L14-D10 的环境中直至初孵幼虫化蛹 ； 0017 (2) 羽化 ： 将蛹从细胞培养板中捡出， 放入底部铺有厚度为 1 3cm 的土层的养虫 箱中， 置于温度 25 27， 相对湿度为 60 -70， 光周期为 ： L14-D10 的环境条件下饲养 至成虫羽化 ； 0018 (3)羽化-产卵 ： 羽化后以5的蜂蜜水饲养， 并于次日放入谷杆或吸水纸供其产 卵 ； 0019 (4) 卵 - 初孵。
15、幼虫 ： 将产有二点委夜蛾卵的谷杆或吸水纸取出， 放入装有天然饲 料的瓶中， 并盖上厚卫生纸和纱布保湿， 然后置于温度 25 27， 相对湿度为 60 -70， 光周期为 ： L14-D10 的环境下饲养直至幼虫孵化。 0020 幼虫孵化后， 按照步骤 (1)、 (2)、 (3)、 (4) 的操作以进行继代饲养。 0021 所述天然饲料指玉米苗。 0022 有益效果 0023 本发明提供一种专门用于二点委夜蛾人工饲养的饲料配方， 采用的原材料均为常 见的营养物质， 易于获取， 成本低廉， 储藏方便， 保质期较长 (12 个月 )， 由于该饲料的防腐 效果 较好， 整个世代无须更换饲料， 经济、。
16、 合算， 且饲养效果优于二点委夜蛾所嗜好的天然 饲料玉米苗， 为实现二点委夜蛾的大规模、 长期、 继代饲养提供了技术基础， 对于开展二点 委夜蛾的生物学、 生态学研究以及药效试验等综合防治技术的研究具有重大的意义。 0024 本饲料的适应性强， 二点委夜蛾幼虫喜食， 且生长发育正常， 饲养效果优于天然饲 料 ( 玉米苗 )。在温度 261， 相对湿度为 60 -70， 光周期为 L14:D10 的环境条件下 饲养， 二点委夜蛾蛹重、 幼虫发育历期、 幼虫存活率、 化蛹率、 羽化率、 成虫产卵量等生物学 指标与对照 ( 玉米苗饲养 ) 相比， 均优于或相当于用天然饲料玉米苗饲养的 ( 见试验列表。
17、 1)， 因此， 可满足二点委夜蛾整个世代及跨世代的营养需求。 0025 采用本发明的饲料配方及饲养方法饲养二点委夜蛾， 首次成功建立了二点委夜蛾 的室内种群， 克服了室内用天然饲料饲养效果差， 且因季节变化， 天然饲料短缺导致二点委 夜蛾无法全年继代饲养的难题， 实现了标准虫源的大批量、 周年、 继代饲养。 说 明 书 CN 102919563 A 4 3/5 页 5 具体实施方式 0026 以下结合实施例对本发明做进一步的详细说明 ： 0027 实施例 1 人工饲料的配制 0028 全麦粉 44.6g ； 玉米粉 89.4g ； 黄豆粉 67.0g ； 酵母粉 60.3g ； 蔗糖 33.。
18、5g ； 抗坏血酸 4.2g ； 氢氧化钾 2.5g ； 甲醛 1.0ml ； 乙酸 4.5ml ； 琼脂 11.2g ； 山梨酸 1.3g ； 对羟基苯甲酸甲 脂 1.3g ； 维生素液 10g ； 蒸馏水 670g。 0029 维生素液的配方 ： 0030 烟 酸 ： 0.55g ； 泛 酸 钙 ： 0.55g ； 核 黄 素 ： 0.28g ； 维 生 素 B1 ： 0.14g ； 维 生 素 B6 ： 0.14g ； 叶酸 ： 0.14g ； D- 生物素 0.11g ； 水 8.1g 0031 饲料配制方法 ： 0032 1、 按比例称取各组分备用， 将称取好的已灭菌的全麦粉、 玉米。
19、粉、 黄豆粉和酵母粉 放入锅中， 并搅拌均匀， 作为组分 A ； 0033 2、 将蒸馏水分作两部分， 1/2 左右的蒸馏水煮沸后加入组分 A 中 ； 另外 1/2 左右的 蒸馏水中溶解已按比例称取好的琼脂、 山梨酸、 对羟基苯甲酸甲脂， 温火熬制 10 分钟， 作为 组分 B ； 0034 3、 将组分 A 倒入组分 B 中， 搅拌均匀， 作为组分 C ； 0035 4、 按比例将泛酸钙、 核黄素、 维生素 B1、 维生素 B6、 叶酸、 D- 生物素放入烧杯中， 加 入蒸馏水溶解得到维生素液， 作为组分 D ； 0036 5、 将组分 D 加入组分 C 中， 并依次加入已配好的氢氧化钾溶液。
20、、 甲醛溶液、 乙酸溶 液和抗 坏血酸 ； 0037 6、 所述饲料搅拌均匀后， 需倒入保鲜盒中， 完全冷却凝固后存放在 4冰箱中。 0038 实施例 2 人工饲料的配制 0039 全麦粉40g ； 玉米粉100g ； 黄豆粉60g ； 酵母粉55g ； 蔗糖33g ； 抗坏血酸4g ； 氢氧化 钾 3g ； 甲醛 3ml， 乙酸 5ml ； 琼脂 10g ； 山梨酸 2g ； 对羟基苯甲酸甲脂 1g ； 维生素液 9g ； 蒸馏 水 650g。 0040 其它同实施例 1 0041 实施例 3 人工饲料的配制 0042 全麦粉 45g ； 玉米粉 80g ； 黄豆粉 70g ； 酵母粉 65。
21、g ； 蔗糖 30g ； 抗坏血酸 3g ； 氢氧化 钾 4g ； 甲醛 5ml， 乙酸 6ml ； 琼脂 15g ； 山梨酸 1g ； 对羟基苯甲酸甲脂 2g ； 维生素液 11g ； 蒸馏 水 700g。 0043 其它同实施例 1 0044 实施例 4. 二点委夜蛾的饲养方法 0045 在饲养过程中注意 ： 必须严格保持养虫室内及各种饲养器具及工具的消毒， 做到 无菌操作， 严防昆虫病原菌的传播与蔓延。 0046 具体按以下步骤进行 ： 0047 (1) 初孵幼虫 - 化蛹 ： 将人工饲料切成小块， 放入消毒后的 12 孔细胞培养板中， 将初孵幼虫单头放入板中， 至于养虫室内饲养， 直至。
22、化蛹， 所述养虫室内的环境条件为温度 261， 相对湿度为 60 -70， 光周期为 L14:D10 ； 0048 (2)化蛹-羽化 ： 将蛹从12孔板中捡出， 放入底部铺有2cm左右土层的养虫箱中， 说 明 书 CN 102919563 A 5 4/5 页 6 置于步骤 (1) 中相同环境条件下的养虫室内饲养， 直至成虫羽化 ； 0049 (3) 羽化 - 产卵 ： 羽化后饲以 5的蜂蜜水补充营养， 并于第 2 天放入谷杆 ( 或吸 水纸 ) 供其产卵 ； 0050 (4) 卵 - 初孵幼虫 ： 将产有二点委夜蛾卵的谷杆 ( 或吸水纸 ) 取出， 放入装有少 量天然饲料的瓶中， 并盖上厚卫生。
23、纸和纱布保湿， 然后置于步骤 (1) 中相同环境条件下的 养虫室内发育， 直至幼虫孵化。至此完成一个世代的饲养。 0051 (5) 幼虫孵化后， 继续按上述步骤 (1)、 (2)、 (3)、 (4) 循环操作完成继代饲养， 不断 提供所需虫源， 直至饲养结束。 0052 实施例 5 ： 人工饲料与天然饲料玉米叶的效果对比试验 0053 试验材料与方法 ： 0054 供试虫源 ： 虫源来自河北省馆陶县 (115.4E， 36.5NO) 玉米田中采集的二点委夜蛾 幼虫， 经室内人工饲料饲养羽化的成虫产下的二点委夜蛾卵。( 本实验室有保存， 可自申请 日起二十年内向公众发放用于验证试验 ) 0055。
24、 供试饲料 ： 0056 天然饲料 ： 玉米苗， 取在中国农业科学院植物保护研究所温室内种植的玉米苗。 0057 人工饲料 ： 实施例 1， 2， 3 制得的饲料。 0058 试验方法 ： 试虫饲养方法参照实施例 4 所述方法， 每处理 3 次重复， 每重复供试幼 虫 24 头， 饲养过程中记录幼虫的发育历期、 存活率、 蛹重、 化蛹率、 蛹历期、 羽化率、 产卵量、 产卵前期。 本试验于2010年8月-10月在中国农业科学院植物保护研究所实验室内完成。 0059 数据统计 ： 0060 实验数据分析采用美国 SPSS Inc 公司的 SPSS 软件 ( 版本为 SPSS 16.0 for W。
25、indows)， 分析方法为t测验。 文中数据均以平均值标准差(MeanSD)表示， P0.05， P 0.01 分别被认为差异显著和极显著。 0061 试验结果 ： 0062 具体试验结果见表 1。本发明的饲料饲养的二点委夜蛾平均蛹重达 75.77mg， 幼虫 平均存活率为 91.7， 化蛹率为 100， 羽化率为 100， 平均单雌产卵 305.3 粒， 与天然饲 料 ( 玉米苗 ) 相比， 二点委夜蛾在人工饲料上的幼虫存活率、 蛹重和平均产卵量显著提高， 幼虫发育历期和蛹历期显著缩短， 而化蛹率、 羽化率和产卵前期等指标无显著差异。 0063 可见本发明的饲料饲养二点委夜蛾的效果优于天然饲料。 而且该饲料的防腐效果 较好， 完成一个世代， 中间只需加一次饲料， 而饲料的制作不受季节的限制， 可实现大规模、 周年、 继代饲养二点委夜蛾标准虫源的目的。 0064 表 1 用人工饲料和天然饲料饲养二点委夜蛾的效果对比 0065 0066 说 明 书 CN 102919563 A 6 5/5 页 7 0067 * 表示 0.05 水平上 t 测验差异显著 ； * 表示 0.01 水平上 t 测验差异显著。 说 明 书 CN 102919563 A 7 。