用于治疗通过编码角质化包膜成熟缺陷发生的疾病或病症的局部用药物或化妆品组合物.pdf

包含甘油、烟酰胺和齿缘墨角藻的提取物的组合、涉及包含它们的局部用药物或化妆品组合物、其制备方法及其在预防和/或治疗通过编码角质化包膜成熟缺陷发生的疾病或病症中的药物应用及其作为皮肤护理剂、皮肤屏障恢复剂和增湿剂的化妆品应用。

权利要求书组合，包含甘油、烟酰胺和齿缘墨角藻的提取物。
权利要求1的组合，其中齿缘墨角藻的提取物是二醇提取物，其中当齿缘墨角藻的二醇提取物是甘油提取物时，该提取物包含所述组合的部分或总量的甘油。
权利要求2的组合，其中齿缘墨角藻的二醇提取物是甘油提取物。
权利要求3的组合，其中所述二醇提取物包含该组合的总量的甘油。
权利要求3的组合，其中所述二醇提取物包含该组合的部分量的甘油。
权利要求2‑5任一项的组合，其中甘油、烟酰胺和齿缘墨角藻的二醇提取物的重量比(重量/重量/重量)为1.5:1:0.1－1.5:1:0.5。
权利要求6的组合，其中甘油、烟酰胺和齿缘墨角藻的二醇提取物的重量比(重量/重量/重量)为1.5:1.0:0.2。
局部用药物或化妆品组合物，包含有效量的如权利要求1‑7任一项中所定义的组合与一种或多种适合的局部用药学或化妆品可接受的赋形剂或载体。
权利要求8的局部用药物或化妆品组合物，其中局部用药学或化妆品可接受的赋形剂或载体选自皮肤屏障恢复剂、吸水剂、软化剂、乳化剂、增稠剂、保湿剂、pH‑调节剂、抗氧化剂、防腐剂、媒介物及其混合物。
权利要求8‑9任一项的局部用药物或化妆品组合物，为乳剂。
权利要求8‑9任一项的局部用药物或化妆品组合物，为表面活性剂基质。
权利要求8‑11任一项中所定义的局部用药物组合物，用于预防和/或治疗通过编码角质化包膜成熟缺陷发生的疾病或病症，其中所述疾病或病症选自皮肤干燥病、银屑病、层板状鱼鳞病、皮肤衰老、接触性皮炎和特应性皮炎。
用于权利要求12的应用的组合物，其中所述疾病或病症是皮肤干燥病。
权利要求8‑11任一项中所定义的局部用化妆品组合物作为皮肤护理剂的应用，其中所述皮肤护理包括改善至少一种下列症状：粗糙、片状、脱水、紧密、皲裂和缺乏弹性。
权利要求14的应用，其中所述皮肤护理剂是皮肤屏障恢复剂。
权利要求15的应用，其中所述皮肤屏障恢复剂是增湿剂。

说明书用于治疗通过编码角质化包膜成熟缺陷发生的疾病或病症的局部用药物或化妆品组合物
本发明涉及药学和化妆品领域，特别地，本发明涉及活性成分的组合、包含它们的局部用组合物及其在预防和/或治疗通过编码角质化包膜成熟缺陷发生的疾病或病症中的药物应用及其作为皮肤护理剂、皮肤屏障恢复剂和增湿剂的化妆品应用。
背景技术
角质层(SC)是表皮的最外层。其包含末端分化的角质形成细胞(keratinocyte)(角质层细胞(corneocyte))和包围它们的细胞间脂质。角质层细胞上衬有15nm厚的通过异构肽和二硫键交联的蛋白质层，称作编码角质化包膜(CE)。部分ω‑羟基神经酰胺类(ω‑OH Cer)被转移至编码角质化包膜(CE)外表面，在那里它与外皮蛋白和CE的其他成分通过转谷氨酰胺酶1活性共价结合。产生的ω‑OH Cer单层形成角化的脂质包膜(CLE)。这种结构产生了对角质层细胞的抵抗性和疏水性。CE是包膜角质层细胞的薄和刚性不溶性结构，并且是用于维持SC中的屏障功能的最重要的结构之一。
CE通过复杂过程形成。在表皮角质形成细胞的末端分化称作角化成熟的过程中，最初的事件之一是CE前体蛋白的表达。这些CE前体蛋白包括外皮蛋白、兜甲蛋白和小分子富含脯氨酸的蛋白质等，通过转谷氨酰胺酶交联。另一个重要的事件是通过与脂质主要是ω‑羟基神经酰胺类的共价结合将疏水性获取至CE成分的外细胞表面。
据报道了存在下列不同类型的编码角质化包膜：多边形的刚性编码角质化包膜角质层细胞(CEr)或成熟CEr；和不规则形状的脆性编码角质化包膜角质层细胞(CEf)或不成熟CEf。不成熟CEf的特征在于高外皮蛋白抗原性和低疏水性。不成熟CEf一般仅在SC的较深层中发现，而SC上层主要由成熟CEr组成，这表明编码角质化包膜的合适的成熟过程。
在一些包括银屑病、特应性皮炎、层板状鱼鳞病、接触性皮炎、皮肤衰老和皮肤干燥病的皮肤疾病或病症中，已经鉴定或已经预先推定了不成熟CEf不仅出现在SC的较深层中，而且出现在SC外层中。SC外层中存在这些不成熟CEf与屏障功能差(或角化不全)相关，这表明角质层细胞异常和/或不完全成熟、和/或转谷氨酰胺酶活性降低、和/或角质层细胞包膜交联事件减少、和/或经表皮水份丢失(TEWL)增加。
特别地，干燥病(或干性皮肤)是在侵袭各种皮肤类型和年龄的人和身体的不同区域的一般群体中高发生率的常见的皮肤病或病症。其临床特征在于皮肤粗糙、有鳞屑和瘙痒。皮肤显示裂痕倾向，导致极度干性皮肤情况中的深度裂缝。当SC的含水量低于10%时，认为是干性皮肤。尽管这一过程的病理生理学是复杂的，但正常表皮分化的破坏是主要病原学之一。这种紊乱产生了脆性角质层细胞包膜(CEf)和刚性角质层细胞包膜(CEr)水平的改变，其中CEf占优势且含水量不平衡，从而损害了屏障功能，引导SC的细胞间脂质和蛋白质含量减少。
因此，已经证实CE、其组成蛋白及其转谷氨酰胺酶介导的成熟过程的作用是良好皮肤条件所必需的。因此，角质层解链作用(corneodesmolysis)即负责调节皮肤表面上的角质层细胞脱落的酶介导的角质层细胞间连接结构降解在如上所述的障碍或病症中减少。角质层解链作用减少是因SC蛋白酶的水平和活性降低与SC的浅层中角化粒糖蛋白（corneodesmosomal glycoprotein）水平升高导致。
治疗上述举出的皮肤疾病或病症主要基于外用抗炎药包括皮质类固醇，在所述皮肤疾病或病症中在伴随角化不全例如与干性皮肤转变的疾病或病症的SC外层上观察到不成熟CEf。这些活性剂的缺点涉及其盐皮质激素效应及其对人表皮角质形成细胞和成纤维细胞的抗增殖活性，从而提供真皮和表皮厚度的降低。皮质类固醇治疗的另一个不期望的效应在于其对局部菌丛的效应，从而引起皮炎、酒渣鼻、毛囊炎（foliculitis）、瘙痒和痤疮出疹。
一种可选的治疗方法在于使用促进SC的角质层细胞的CE成熟的活性成分，其与恢复皮肤屏障功能相关。特别地，欧洲专利申请EP1374832公开了皮肤护理化妆品，其包含有效量的增湿剂、抗氧化剂和无机盐，它们具有促进CE成熟以改善粗糙皮肤的效力。
除此之外，欧洲专利申请EP 1618867还公开了皮肤护理化妆品组合物在打破干性皮肤周期中的应用，该组合物包含增湿剂优选甘油、维生素优选烟酰胺。
从本领域中已知的内容衍生出对提供在角质层细胞成熟和皮肤屏障功能恢复中的更有效的促进剂仍然存在需求。
发明概述
发明人已经发现甘油、烟酰胺和齿缘墨角藻（Fucus Serratus）的提取物的组合因协同作用而促进了高于可以预计的SC的角质层细胞的CE成熟。
本领域中已知甘油参与角质层细胞成熟过程，从而促进保留在SC内的残留转谷氨酰胺酶活性活化(参见A.V.Rawlings等人“Moisturizer technology versus clinical performance”.Dermatologic Therapy,2004,vol.17,pp.49‑56)。还已知烟酰胺(烟酰胺、维生素B3或维生素PP)增加一些CE前体蛋白的合成，所述CE前体蛋白包括外皮蛋白、聚丝蛋白和角蛋白1，从而在人角质形成细胞中产生神经酰胺类和转谷酰胺酶活性增加。这些蛋白质的量的改善与一些脂质重新合成（novo synthesis）的增加一起促进角质形成细胞分化并且恢复皮肤屏障功能(参见N.Kitamura等人“effect of niacinamide on the differentiation of human keratinocyte”,Journal of Dermatological Science,1996,vol.12,pp.202)。同样，还报道藻类提取物（包括齿缘墨角藻的提取物）改善了皮肤屏障功能，这是因转谷酰胺酶活性增加促进角质层细胞成熟所致。然而，既没有表明这三种成分的组合，也没有表明其在促进SC的角质层细胞的CE成熟中的协同作用。
因此，本发明的一个方面涉及甘油、烟酰胺和齿缘墨角藻的提取物的组合。正如实施例2中所示例的，对于本发明活性成分的组合显示的在角质层细胞成熟中的促进作用高于单独的甘油和烟酰胺的混合物以及齿缘墨角藻的提取物的促进作用并且还高于其组合的预计的作用。
本发明的另一个方面涉及局部用药物或化妆品组合物，其包含有效量的如上述所定义的组合与一种或多种适合的局部药学或化妆品可接受的赋形剂或载体。
本发明的另一个方面涉及如上述所定义的药物组合物，其用于预防和/或治疗通过编码角质化包膜成熟缺陷发生的疾病或病症，其中所述疾病或病症选自皮肤干燥病、银屑病、层板状鱼鳞病、皮肤衰老、接触性皮炎和特应性皮炎。
最终，本发明的另一个方面涉及如上述所定义的化妆品组合物作为皮肤护理剂的应用，其中所述皮肤护理包括改善至少一种下列症状：粗糙、片状（flakiness）、脱水、紧密、皲裂和缺乏弹性。
发明详述
除非另有所述，否则本文所用的所有术语应按照其本领域中公知的一般含义理解。作为用于本申请中的一些术语的其他更具体的定义在下文中举出，且除非另外举出的定义提供更宽泛的定义，否则预以一律适用于本说明书和权利要求的上下文。
术语“重量比”是指促进角质层细胞成熟所需的甘油、烟酰胺和齿缘墨角藻的提取物的重量关系。
术语“重量百分比(%)”是指组合或组合物的每种成分占总重量的百分比。
组合的"有效量"是指在其施用后提供治疗或化妆品效应的活性成分的量。
术语“药学可接受的”是指适用于制备具有医疗应用的组合物的制药技术的赋形剂或载体。
本文可互换使用的术语“化妆品可接受的”或“皮肤病学可接受的”是指适用于接触人体皮肤而没有过度毒性、不相容性、不稳定性、过敏反应等的赋形剂或载体。
本文可互换使用的术语“吸水剂”或“增湿剂”或“补水剂”是指增加皮肤含水量并且有助于保持其柔软和平滑的材料。
术语“皮肤屏障恢复剂”是指其组成和/或结构与皮肤屏障类似、使得其缺陷修复的材料。
术语“软化”剂是指使皮肤软化和平滑以校正皮肤干燥和脱屑、从而使皮肤表面润滑、促进皮肤水分保持和改变产品结构的材料。
术语“保湿”剂是指通过吸收或吸附从周围环境中吸引水分子、从而防止皮肤失去水分的吸湿性材料。
本文可互换使用的术语“增稠剂”或“稠化剂”或“粘度剂”是指增加其粘度而基本上不改变其其他特性的材料。
本文可互换使用的术语“乳化剂”（“emulsifying agent”）或“乳化剂”（“emulsifier”）是指减小表面张力、从而通过改变界面张力促进不易混溶的液体的直接混合物形成的材料。乳化剂通过增加其动力学稳定性使乳剂稳定。
术语“表面活性剂”是指降低液体表面张力和两种液体之间的界面张力、使得其更易于扩散的材料。表面活性剂具有吸引水分子的亲水头和排斥水的疏水尾且同时使其自身连接污物中的油脂。这些相反的力释放了污物并且使其混悬于水中，从而在表面活性剂溶于水时具有将其从表面例如人体皮肤、纺织品和其他固体上除去的能力。
术语“抗氧化剂”是指减缓或防止其他分子氧化的材料。抗氧化剂包括自由基清除剂和还原剂。
术语“pH‑调节”剂是指可以用于将终产品的pH调整至期望水平而不影响溶液稳定性的酸或碱。
术语"防腐剂"是指预防或减少或减缓微生物生长的材料，条件是不影响溶液的稳定性。
本文可互换使用的术语“表面活性剂基质”或“表面活性剂系统”是指表面活性剂、优选阴离子型和两性表面活性剂的掺合物，它倾向于形成为等向性、具有低粘度的球形胶束，或倾向于形成为各向异性、具有较高粘度的六角形和片层相的液晶相。优选球形胶束用于制备香波和沐浴露或洗面液。
术语"亲水性"溶剂是指能够生成氢键、从而使其更易溶于水和其他极性溶剂的溶剂。
术语"亲脂性"溶剂是指几乎不具有或没有形成氢键能力、从而使它们溶于脂肪、油、脂质和其他非极性溶剂的非极性溶剂。
本文可互换使用的术语“二醇”或“邻位二醇”或“1,2‑二醇类”是指脂族有机化合物，其中两个羟基(OH)连接相邻碳原子。
术语齿缘墨角藻的“提取物”是指涉及通过用适合的方式从藻类中取出活性成分得到的藻类浓缩制品的常规含义。这种活性成分可以获自藻类的不同部分。用于取出活性成分的适合的方式包括，例如使用有机溶剂、微波或超临界流体萃取。有时将活性成分以不同形式掺入食品、药物或化妆品组合物，所述不同形式包括纯或半纯的成分、固体或液体提取物或固体藻类物质。藻类提取物不仅包含一种、而且包含多种成分，其中的许多是活性成分。通常，有益效果来源于许多这些活性化合物的组合，不过，在一些情况中，存在一种特定化合物，其主要负责大部分活性。
如上所述，本发明的一个方面涉及组合，其包含甘油、烟酰胺和齿缘墨角藻的提取物。
正如实施例2中所示例的，甘油、烟酰胺和齿缘墨角藻的提取物的组合具有促进角质层细胞成熟的协同作用，从而使得SC外层中不成熟CEf的数量减少。
齿缘墨角藻的提取物选自水溶性或脂溶性提取物。亲水性或亲脂性溶剂的应用相应地使得可以从藻类中提取活性化合物，它们有效地促进SC的角质层细胞成熟。适合于制备本发明齿缘墨角藻的提取物的亲水性溶剂包括二醇类。适合的二醇类的实例选自乙二醇、丙二醇、丁二醇、二甘醇、四甲撑二醇或1,2,3‑丙三醇(甘油)。
适合于制备本发明齿缘墨角藻的提取物的亲脂性溶剂选自辛酸/癸酸甘油三酯、包括葵花籽油、矿物油、动物脂肪、其级分和混合物的植物油。
在一个优选的实施方案中，齿缘墨角藻的提取物是二醇提取物，其中当齿缘墨角藻的二醇提取物是甘油提取物时，该提取物包含所述组合的部分或总量的甘油。
在另一个优选的实施方案中，齿缘墨角藻的二醇提取物是甘油提取物。当齿缘墨角藻的甘油提取物用于本发明的组合时，该提取物包含所述组合的部分或总量的甘油。
在一个优选的实施方案中，当二醇提取物是甘油提取物时，该提取物包含所述组合的总量的甘油。在另一个实施方案中，当二醇提取物是甘油提取物时，该提取物包含所述组合的部分量的甘油(参见实施例1)。
在一个优选的实施方案中，甘油、烟酰胺和齿缘墨角藻的二醇提取物的重量比为1.5:1:0.1－1.5:1:0.5。在另一个优选的实施方案中，活性成分的重量比为1.5:1:0.2－1.5:1:0.4。优选所举出的比例为1.5:1.0:0.2。正如在实施例中所示的，尤其是使用本发明的活性成分组合得到了作为角化成熟过程的成熟的促进剂的良好活性。
该方面还可以按照甘油、烟酰胺和齿缘墨角藻的二醇提取物在本发明组合中的重量百分比配制。
因此，活性成分的重量百分比包含如下范围：
50‑57.7%重量的甘油；
33.3‑38.4%重量的烟酰胺；和
3.8‑16.6%重量的齿缘墨角藻的甘油提取物；
其活性成分总和为100%。
在一个优选的实施方案中，上述举出的重量百分比是：
55.5%重量的甘油；
37.0%重量的烟酰胺；和
7.4%重量的齿缘墨角藻的甘油提取物。
在一个具体的实施方案中，甘油与烟酰胺的重量比可变。特别地，该重量比为1.5:1－10:1。优选举出的比例为2.8:1－10:1。
本发明的组合可以是局部用药物或化妆品组合物形式。因此，本发明的局部用药物或化妆品组合物包含有效量的如上述所定义的组合与一种或多种适合的局部用药学或化妆品可接受的赋形剂或载体。
在一个具体的实施方案中，所述局部用组合物是包含有效量的如上述所定义的组合与一种或多种适合的局部用药学可接受的赋形剂或载体的药物组合物。
在另一个具体的实施方案中，所述局部用组合物是包含有效量的如上述所定义的组合与一种或多种适合的局部用化妆品可接受的赋形剂或载体的化妆品组合物。
上述定义的局部用组合物包含用于局部给药的适合的赋形剂或载体，其可以是药物或化妆品赋形剂，包括但不限于修复皮肤屏障功能剂、吸水剂、软化剂、乳化剂、增稠剂、保湿剂、pH‑调节剂、抗氧化剂、防腐剂、媒介物或其混合物。所用的赋形剂或载体可以对皮肤具有亲和力、充分耐受、稳定和以足量用于提供期望的稠度和易于施用。
适合的皮肤屏障恢复剂的实例包括但不限于神经酰胺类、胆固醇、脂肪酸类和这些脂质的前体，包括脑苷脂类，鞘氨基醇基质，例如植物鞘氨醇或鞘氨醇，或磷脂类，包括磷脂酰胆碱，和促进表皮脂质样脲、右泛醇和α‑羟酸类包括乳酸等合成的试剂。优选神经酰胺类选自神经酰胺1、神经酰胺3和神经酰胺6II。皮肤屏障恢复剂在本发明组合物中的量为0.05－10%。
适合的局部吸水剂的实例包括但不限于胶原蛋白、胶原蛋白氨基酸、聚二甲基硅氧烷醇、甘氨酸、透明质酸、透明质酸二甲基硅烷醇酯、硬脂酸镁、麦芽糖醇、麦芽糖、吡咯烷酮羧酸(PCA)、PCA锰、PCA钠、甘露糖醇、海藻糖、三乳精（trilactin）、葡萄糖、谷氨酸、水解刺云实（caesalpinia spinosa）胶、刺云实胶、桃（prunus persica）提取物、野樱（prunus serotina）提取物、狭叶松果菊（echinaceaangustifolia）提取物、紫锥花（Echinacea purpurea）提取物、甲基葡萄糖醚、水解小麦蛋白、赤藓醇、硬脂酰谷氨酸铝、乙酰甲硫氨酸铜或双十三烷基二聚体二亚油酸酯。优选吸水剂选自葡萄糖、甘氨酸、赖氨酸、谷氨酸、水解刺云实胶、刺云实胶、PCA钠及其混合物。吸水剂在本发明组合物中的量为0.1－15%。
适合的局部软化剂的实例包括但不限于羟基硬脂酸辛酯、羊毛脂、辛酸/癸酸甘油三酯、棕榈酸鲸蜡酯、辛基十二烷醇、鲸蜡醇、异硬脂酸异丙酯、双月桂酸甘油酯、肉豆蔻酸异丙酯、棕榈醇、二甲硅油、角鲨烷、星油藤(plukenetia volubilis）种子油、牛油树果（butyrospermumparkii）黄油、椰油酸蔗糖酯或其混合物。优选软化剂选自二甲硅油、角鲨烷、星油藤种子油、牛油树果黄油、辛酸/癸酸甘油三酯、辛基十二烷醇或其混合物。软化剂在本发明组合物中的量为10－30%。
适合的乳化剂的实例包括但不限于甘油三油酸酯、油酸甘油酯、乙酰化蔗糖二硬脂酸酯、三油酸山梨坦、聚氧乙烯单硬脂酸酯、甘油单油酸酯、蔗糖二硬脂酸酯、聚乙二醇单硬脂酸酯、辛基苯氧基聚(乙烯氧基)乙醇、deacylerin penta‑isostearate、倍半油酸山梨坦、羟基化羊毛脂、卵磷脂、羊毛脂、二异硬脂酸三甘油酯、聚氧乙烯油基醚、硬脂酰‑2‑乳酰乳酸钙（calcium stearoyl‑2‑lactylate）、月桂酰乳酰乳酸钠（sodium lauroyl lactylate）、硬脂酰乳酰乳酸钠（sodium stearoyl lactylate）、鲸蜡糖苷、甲基葡糖苷倍半硬脂酸酯、棕榈山梨坦（sorbitan monopalmitate）、甲氧基聚乙二醇‑22/十二烷基乙二醇共聚物、聚乙二醇‑45/十二烷基乙二醇共聚物、聚乙二醇400二硬脂酸酯和硬脂酸甘油酯、小烛树（candelilla）/希蒙得木（jojoba）/米糠聚甘油基‑3酯类、鲸蜡磷酸酯、鲸蜡磷酸钾或其混合物。优选乳化剂选自油酸甘油酯、卵磷脂、月桂酰乳酰乳酸钠、硬脂酰乳酰乳酸钠、硬脂酸甘油酯、小烛树/希蒙得木/米糠聚甘油基‑3酯类及其混合物。乳化剂在本发明组合物中的量为0.5－10%。
适合的表面活性剂的实例包括但不限于非离子型、离子型(阴离子型或阳离子型)或两性离子型(或两性，其中表面活性剂的头包含两个带相反电荷的基团)表面活性剂。阴离子型表面活性剂的实例包括但不限于基于硫酸根、磺酸根或羧酸根阴离子的那些，例如全氟辛酸根(PFOA或PFO)、烷基苯磺酸根、皂、脂肪酸盐或烷基硫酸盐例如全氟辛磺酸根(PFOS)、十二烷硫酸钠(SDS)、十二烷基硫酸铵或月桂基醚硫酸钠(SLES)。阳离子型表面活性剂的实例包括但不限于基于季铵阳离子的那些，例如或烷基三甲铵，包括溴化鲸蜡基三甲铵(CTAB)a.k.a.，或溴化十六烷基三甲铵、西吡氯铵(CPC)、聚乙氧基化牛油胺(POEA)、苯扎氯铵(BAC)或苄索氯铵(BZT)。两性离子型表面活性剂的实例包括但不限于十二烷基甜菜碱、椰油酰胺丙基甜菜碱或椰油基两性甘氨酸盐。非离子型表面活性剂的实例包括但不限于烷基聚(环氧乙烷)、烷基苯酚聚(环氧乙烷)、聚(环氧乙烷)共聚物、聚(环氧丙烷)(商业上称作伯洛沙姆或Poloxamines)、烷基聚葡萄糖苷包括辛基葡萄糖苷和癸基麦芽糖苷、脂肪醇类包括鲸蜡醇和油醇、椰油酰胺MEA、椰油酰胺DEA或聚山梨醇酯类包括吐温20、吐温80或氧化十二烷基二甲胺。优选表面活性剂起泡和对皮肤温和，包括聚山梨醇酯20或40、椰油基葡萄糖苷、月桂基葡萄糖苷、癸基葡萄糖苷、月桂醇硫酸酯盐例如铵、钠、镁、MEA、三乙胺(TEA)或月桂醇硫酸酯mipa盐、椰油酰氨基丙基甜菜碱或烷基磺基琥珀酸钠。表面活性剂在本发明组合物中的量为0.5－10%。
适合的局部保湿剂的实例包括但不限于甘油、双甘油、乙基己基甘油、葡萄糖、蜂蜜、乳酸、聚乙二醇、丙二醇、山梨醇、蔗糖或海藻糖(threalose)。优选保湿剂选自甘油、双甘油、乙基己基甘油及其混合物。保湿剂在本发明组合物中的量为0.5－10%。
适合的局部pH‑调节剂的实例包括但不限于乙酸、乳酸、柠檬酸、乙醇胺、甲酸、草酸、氢氧化钾、氢氧化钠、三乙醇胺或其混合物。优选pH‑调节剂选自三乙醇胺、氢氧化钠、乳酸和柠檬酸。pH‑调节剂在本发明组合物中的量为0.01－1%。
适合的抗氧化剂的实例包括但不限于自由基清除剂或还原剂，例如乙酰半胱氨酸、抗坏血酸、抗坏血酸棕榈酸酯、丁化羟基甲苯、绿茶提取物、咖啡酸、半胱氨酸、生育酚、泛醌、没食子酸丙酯、丁化羟基甲苯(BHT)及其混合物。优选抗氧化剂选自抗坏血酸棕榈酸酯和生育酚。抗氧化剂在本发明组合物中的量为0.001－0.25%。
适合的防腐剂的实例包括但不限于苯甲酸、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸甲酯、山梨酸、山梨酸钾、苯甲酸钠、苯氧乙醇、三氯生或其混合物。优选防腐剂选自山梨酸钾、苯甲酸钠和苯氧乙醇。防腐剂在本发明组合物中的量为0.1－3%。
适合的粘度剂的实例包括但不限于纤维素或其衍生物，例如羟丙基甲基纤维素、聚乙二醇、微晶纤维素、鲸蜡硬脂醇、藻酸盐、支链多糖类、烟雾硅胶（fumed silica）、黄原胶、卡波姆和聚丙烯酸酯类。优选粘度剂选自微晶纤维素、鲸蜡硬脂醇、纤维素、黄原胶和卡波姆。粘度剂在本发明组合物中的量为0.5－10%。
上述举出的组合物包括媒介物。媒介物的实例包括但不限于水、丙二醇、丁二醇、乙醇、异丙醇或硅氧烷。优选所述媒介物是水。
另外，本发明的组合物可以包含其他成分，例如香料、着色剂和本领域已知用于局部用制剂的其他成分。
可以将本发明的局部用组合物配制成几种形式，包括但不限于溶液、气雾剂和非气雾剂的喷雾剂、剃毛霜、粉末、摩丝、洗剂、凝胶、棒状物、软膏剂、糊剂、霜剂、香波、沐浴露、浴液或洗面液。
优选将所用的局部用组合物配制成乳剂。乳剂是包含至少两个不混溶相的分散系统，一相作为液滴分散于另一相中。包括上述举出的乳化剂以改善稳定性。当水是分散相且油是分散介质时，该乳剂称作油包水型乳剂(w/o)。当油作为液滴分散于水相时，该乳剂称作水包油型乳剂(o/w)。本领域已知的其他类型的乳剂是多层乳剂，例如水包油包水性乳剂(w/o/w)；GELTRAP乳剂，其中内部水相胶凝化且被油相覆盖；和SWOP乳剂，也称作反转乳剂。所用的乳剂优选是水包油型乳剂。优选用于本发明意义上的乳剂与霜剂和洗剂相容。
优选将所用的另一种局部用组合物配制成“表面活性剂基质”。表面活性剂基质是至少两种表面活性剂的掺合物。表面活性剂通常用于清洁产品，破坏染色剂和将污物保持在水溶液中以防止其重新沉积在表面上。表面活性剂分散通常不溶于水的污物，从而将其可分散于水中并且可用洗涤水除去。包括上述举出的表面活性剂是为了降低表面张力。优选用于本发明意义上的表面活性剂基质与香波、沐浴露和身体洗液或洗面液相容。
可以根据本领域众所周知的方法制备本发明的局部用化妆品组合物。适合的赋形剂和/或载体及其用量易于由本领域技术人员根据所制备的制剂的类型确定。
本发明的局部用药物组合物可以用于局部施用于皮肤，以促进角质层细胞成熟。因此，本发明的另一个方面是如上述所定义的局部用药物组合物，用于预防和/或治疗通过编码角质化包膜成熟缺陷发生的疾病或病症，其中所述疾病或病症选自皮肤干燥病、银屑病、层板状鱼鳞病、皮肤衰老、接触性皮炎和特应性皮炎。还可以将该方面描述为如上述所定义的局部用药物组合物在制备预防和/或治疗通过编码角质化包膜成熟缺陷发生的疾病或病症的药物中的应用，其中所述疾病或病症选自皮肤干燥病、银屑病、层板状鱼鳞病、皮肤衰老、接触性皮炎和特应性皮炎。还涉及用于预防和/或治疗患有或倾向于患有通过编码角质化包膜成熟缺陷发生的疾病或病症的哺乳动物的方法，其中所述疾病或病症选自皮肤干燥病、银屑病、层板状鱼鳞病、皮肤衰老、接触性皮炎和特应性皮炎，该方法包括对所述哺乳动物给予有效量的本发明局部用药物组合物。因此，本发明的组合在编码角质化包膜成熟中的促进作用如实施例2的结果中所示。
上述举出的通过SC上层中不成熟CEf表象发生的皮肤障碍或病症伴随SC中成熟CEf数量的减少。这些病症与表皮分化中的缺陷相关。特别地，皮肤外层中不成熟CEf的表象表示表皮分化的最终步骤（即编码角质化包膜成熟）的不完全或改变(参见A.V.Rawlings.“Trends instratum corneum research and the management of dry skinconditions”.International Journal of Cosmetic Science.2003,vol.25,pp.63‑95；A.V.Rawlings.“Stratum corneummoisturization at the molecular level:an update in relation to the dry skin cycle”,The Journal of Investigative Dermatology,2005,vol.124,pp.1099‑1110；Hirao T.等人“A novel non‑invas iveevaluation method of cornified envelope maturation in the stratumcorneum provides a new ins ight for skin care cosmet ics”.IFSCCMagazine,2003,vol.6,pp.103；HalzleE."Effects of dermatitis,stripping and steroids on the morphology of corneocytes.A newbioassay",The journal of investigate dermatology,1977,vol.68(6),pp.350‑6；Jane Fore‑Pliger."The epidermal skin barrier:Implications for the Wound Care Practitioner,Part I",Advancesin Skin Wound Care,2004,vol.17,pp.417；和Contet‑Audonneau JL,"Ahistological study of human wrinkle structures:comparisonbetween sun‑exposed areas of the face,with or without wrinklesand sun‑protected area s",The Bri tish journal of dermatology,1999,vol.140(6),pp.1038‑47)。
因此，在一个优选的实施方案中，提供了如上述所定义的用于预防和/或治疗皮肤干燥病(干性皮肤)的局部用药物组合物。
本发明的化妆品组合物可以用于护理皮肤。因此，本发明的另一个方面在于如上述所定义的局部用化妆品组合物在皮肤护理中的应用。在一个优选的实施方案中，本发明的化妆品组合物用于皮肤护理，其中皮肤护理包括改善至少一种下列症状：粗糙、片状、脱水、紧密、皲裂和缺乏弹性。
在本发明的另一个方面中，如上述所定义的化妆品组合物用作皮肤护理剂，其中包括改善至少一种下列症状：粗糙、片状、脱水、紧密、皲裂和缺乏弹性。
将本发明的局部用化妆品组合物设计为施用于身体以改善其外观或美化、保护、调理、清洁、着色或防护皮肤、指甲或毛发(参见Academicpress Dictionary of Science and Technology,1992,pp.531；Aterminological Dictionary of the Pharmaceutical Sciences.2007,pp.190)。因此，上述化妆品组合物辅助性地用于非医疗应用。
在一个优选的实施方案中，本发明的局部用化妆品组合物是增湿剂。在另一个优选的实施方案中，本发明的局部用化妆品组合物是皮肤护理剂。在另一个优选的实施方案中，本发明的局部用化妆品组合物是安抚剂。因此，本发明的另一个部分是如上述所定义的局部用化妆品组合物作为安抚剂的应用。所述的安抚剂适合于缓和、镇静、构成、缓解、平静、安顿、静止或安定皮肤。
在一个优选的实施方案中，本发明的化妆品组合物可以用于局部施用于皮肤以恢复皮肤屏障功能。
因此，提供了如上述所定义的局部用化妆品组合物作为皮肤屏障恢复剂的应用。
已经报道，在SC的外层中出现较少的疏水性不成熟CEf与皮肤屏障功能改变相关，这是因这些不成熟CEf的获得浅表位置所致(参见T.Hirao,等人“Identification of immature cornified envelopes in the barrier‑impaired epidermis by characterization of theirhydrophobicity and ant igenicity of the components”,Experimental Dermatology,2001,Vol.10,pp.35‑44)。这种表皮结构的改变伴随经表皮水份丢失(TEWL)水平增加。TEWL是每小时和每平方厘米皮肤蒸发的水量，且该参数用于鉴定皮肤屏障状态。TEWL增加意味着因缺乏屏障物质而存在一定水平的屏障损害，作为结果，皮肤因湿度缺失而脱水。
包含本发明组合的局部用化妆品组合物促进了不成熟CEf的编码角质化包膜成熟，降低了TEWL水平和恢复了皮肤脂质屏障。因此，上述参数的重建促成了皮肤屏障功能恢复。
在一个优选的实施方案中，上述化妆品组合物用作增湿剂。已知成熟角质层细胞因其高度疏水性和刚性而具有保水能力，这是因存在成熟编码角质化包膜和存在位于角质层细胞内部的天然保湿因子(NMF)所致。NMF是由于角化成熟过程中丝聚合蛋白降解导致的水溶性和/或水可分散性分子的混合物，允许将水保留入成熟角质层细胞。
已知当编码角质化包膜成熟改变时，SC的含水量和角质层细胞内部NMF的量减少。在本发明的组合物中存在增湿剂和本发明组合在促进CEf编码角质化包膜成熟中的协同作用使得可以恢复皮肤屏障功能和重建适合的皮肤水化水平。
本发明的化妆品组合物可以用作皮肤护理剂，其中皮肤护理包括改善至少一种下列症状：粗糙、片状、脱水、紧密、皲裂和缺乏弹性。这些症状一般由微生物和其他易于穿透皮肤导致刺激、过敏反应和炎症的物质或一些环境条件包括湿度、温度、年中的时间(季节变化)和皮肤含湿量(水化水平)导致。除此之外，这些症状还可能与选自皮肤干燥病、银屑病、层板状鱼鳞病、皮肤衰老、接触性皮炎和特应性皮炎的疾病或病症相关。
在本说明书和权利要求上下文中，措词"包括（或包含）"和该措词的变化形式不预以排除其他技术特征、添加剂、成分或步骤。本发明另外的目的、优点和特征在考察了本说明书时对本领域技术人员而言显而易见或可以通过实施本发明学习到。下列实施例作为示例提供，但它们不预以限定本发明。此外，本发明覆盖本文所述的具体和优选实施方案的所有可能的组合。
实施例
下列缩写用于如下实施例：
PEG:聚乙二醇
EDTA:乙二胺四铵（ethylene diamine tetra ammonium）
将MatTek公司提供的组织的技术说明书概述如下：
I.细胞:
类型:正常人表皮角质形成细胞(NHEK)
衍生自:新生儿‑包皮组织
II.培养基:
基础培养基:Dulbecco改进Eagle培养基(DMEM)
生长因子/激素:表皮生长因子、胰岛素、氢化可的松和其他表皮分化专利品刺激剂
血清:无
抗生素:庆大霉素5μg/ml(10%标准庆大霉素水平)
抗真菌剂:两性霉素B0.25μg/ml
pH值指示剂:酚红
III.组织:
试剂盒:标准试剂盒(EPI‑200)由24个各自8mm直径的单个组织组成
底物:使用化学修饰的胶原蛋白包被的8mm ID细胞培养嵌入物
培养:在空气液体界面
组织学:8‑12个细胞层(基础、多刺的和颗粒层)
角质层:10‑15层(基于透射电子显微镜检查(TEM))
实验时间:可以持续培养至多3周，具有正常表皮形态的良好保留。必须每隔一天给培养物进料5.0ml长效维持培养基(EPI‑100‑LLMM)、标准维持培养基(EPI‑100‑MM)或新维持培养基(EPI‑100‑NMM)。将细胞培养嵌入物置于6‑孔培养板中的顶部培养物助稳器(MEL‑STND)或洗涤器
(EPI‑WSHR)，以使用5.0ml。
实施例1:局部用水包油型乳剂
1.1.乳剂的组成如下：

*它相当于0.25%的纯齿缘墨角藻的藻类和0.25%的甘油。
**“q.s.p”是指“根据需要”。
1.2.水包油型乳剂的制备方法如下：
A.相的制备：
相0:在80°C预加热的辅助反应器中，加入成分(01)、(02)、(03)、(04)、(05)、(06)、(07)、(08)和(09)。维持搅拌至全部成分完全熔化。
相1:在80°C预加热的其他反应器中，通过高速搅拌至总体匀化将成分(11)分散于成分(10)中。然后向得到的分散体中依次加入成分(12)、(13)、(14)和(15)，维持搅拌条件在80°C。
相3:在辅助接收器中，通过高速搅拌将成分(32)溶于成分(31)中，直到得到澄清溶液为止。
相6:在辅助接收器中，通过高速搅拌将成分(62)溶于成分(61)中，直到得到澄清溶液为止。
B.水包油型乳剂的制备方法：
步骤1.在80°C预加热的反应器中，通过中速搅拌以维持温度向上述得到的相(1)中分散成分(21)，直到得到含水的均匀的凝胶为止。
步骤2.在75‑80°C与搅拌下向步骤1中得到的含水的均匀的凝胶中缓慢加入上述得到的相(0)。然后将由此得到的乳剂在10min过程中以3000rpm匀化。匀化时间完成后，通过中速搅拌将该乳剂冷却至35°C。
步骤3.在40°C向上述步骤2得到的乳剂中加入相(3)。将得到的乳剂匀化5分钟，在低于40°C的温度依次加入相(4)和(5)。5分钟后，适量加入相(6)以得到最终的pH5.5，并且将其匀化。
实施例2.协同作用研究
测试甘油、烟酰胺和齿缘墨角藻的甘油提取物的组合在施用于使用组织系统培养物的体外模型后对成熟级角质层的编码角质化包膜的协同作用。所述的组织系统具有与人皮肤类似的形态和生长特征，因为由基底层、棘层、粒层和角质层形成并且具有有丝分裂的和代谢活性。因此，包含来源于人体组织(NHEK)的正常角质形成细胞，所述人体组织已经被培养形成了人表皮的高度分化的多层模型和SC中的角质层细胞。
本协同作用试验基于对外皮蛋白的抗原性降低及其成熟过程中成熟CEr疏水性增加。
2.1.样品的制备
恰好在使用前，用磷酸缓冲盐水(PBS)制备甘油和烟酰胺按照1.2/1比例(重量/体积)的溶液(溶液1)、齿缘墨角藻的甘油提取物溶液(溶液2)及甘油、烟酰胺和齿缘墨角藻的甘油提取物按照1.2/1/0.22比例(重量/体积)的溶液(溶液3)。
施用于表面的活性成分的终浓度如下：
活性成分浓度(重量/体积)浓度(重量/重量)甘油1.19%1.5%烟酰胺1%1%齿缘墨角藻在甘油(1:1)中的提取物0.22%0.25%
2.1.1.溶液1的制备
通过将烟酰胺以2%w/v的浓度溶于PBS并且用PBS按照1:2的比例稀释稀释上述得到的溶液进行制备溶液1的过程。
然后将1ml上述得到的烟酰胺在PBS中的溶液与1ml甘油的混合物局部施用于表面。
2.1.2.溶液3的制备
通过将1ml溶液1溶于1ml齿缘墨角藻的提取物并且用PBS按照1:2的比例稀释上述得到的溶液进行制备溶液3的过程。
然后得到的活性成分溶液局部施用于表面。
2.2.组织系统的制备
将在37°C在预热培养基中的6‑孔培养板的组织在具有湿度的气氛中在37°C和5%CO2温育过夜。温育时间完成后，取出培养物的培养基并且用新鲜培养基替换。
2.3.温育的组织中皮肤干燥病的诱导
本试验需要对组织系统诱导皮肤干燥病。为了达到这一效果，将0.3g硅胶加入到2.2.节中得到的组织中。添加后，将该组织在没有湿度的气氛中在37°C和5%CO2并且在具有硅胶的接受器的存在下温育24小时。
2.4.试验设计
根据如下实验设计，分别将溶液1、2和3施用于至少5个组织：

*根据2.3.节诱导的干性皮肤。
2.5.生物学方法
将在组织中诱导的干性皮肤分别与溶液1(组3)、2(组4)和3(组5)一起温育24小时。温育时间完成后，通过将胶带（adhesivetape）施加于每组的组织表面上得到SC样品。
切下每条胶带并且加入包含2%十二烷基硫酸盐（docecylsulphate）、20mM二硫苏糖醇、5mM乙二胺四铵盐(EDTA)和0.1M tris HCl(pH8.5)的提取溶液。将细胞在100°C煮沸10分钟，此后将该溶液离心至4000g进行10分钟。恢复得到的沉淀并且反复进行提取过程至3次。将上述得到的细胞重新混悬于缓冲溶液。将这些混悬液铺展在载玻片表面上并且用丙酮在冷却温度下固定(‑30°C,10分钟)。
另外根据上述举出的方法得到空白组1和2的细胞混悬液。
2.6.结果分析
分析包括测定SC浅层上成熟CEr和不成熟CEf相对于的系统的百分比。因此，通过用抗外皮蛋白抗体染色，然后添加用FITC标记的抗兔免疫球蛋白评价SC浅层上角质层细胞的抗原性等级；通过用尼罗红染色评价疏水性等级，尼罗红是用于胞内脂质小滴的选择性荧光染料。
上述举出的染色在组1‑6(2.4.节)的2.5.节中得到的细胞切片上进行。使用荧光显微镜观察由此得到的样品。
将使用尼罗红染色为阳性的成熟CEr视觉化为红色细胞，而对用FITC外皮蛋白染色为阳性的不成熟CEf视觉化为绿色细胞。
将在SC中检测的CEr和CEf的数量和百分比概述如下：
组1:正常皮肤空白
组织N细胞n CErn CEf%CEr%CEf1123104.518.584.7615.242109.59415.585.6514.353117.510215.586.8413.164136.511422.583.4416.565111941784.7115.29培养基119.50101.7017.8085.0814.92标准误差4.893.731.300.560.56
组2:干性皮肤空白
组织N细胞n CErn°CEf%CEr%CEf1113.52786.523.6776.332107.52582.522.8977.113113239020.1179.894106.52383.521.4478.5651351611911.8588.15培养基115.1022.8092.3019.9980.01标准误差5.171.856.802.122.12
组3:用溶液1(甘油和烟酰胺)治疗的干性皮肤
组织N°细胞n°CErn°CEf%CEr%CEf1118427635.5964.412104337131.7368.273103327131.0768.934117298824.7975.215119407933.6166.39培养基112.2035.2077.0031.3668.64标准误差3.572.483.151.821.82
组4:用溶液2(齿缘墨角藻的甘油提取物)治疗的干性皮肤
组织N°细胞n°CErn CEf%CEr%CEf1104337131.7368.272120388231.6768.333133439032.3367.674136538338.9761.035115437237.3962.61培养基121.6042.0079.6034.4265.58标准误差5.893.323.591.561.56
组5:用溶液3(甘油、烟酰胺和齿缘墨角藻的甘油提取物)治疗的干性皮肤
组织N°细胞n°CErn°CEf%CEr%CEf1106792774.5325.4721221022083.6116.393121903174.3825.624100821882.0018.005108842477.7822.22培养基111.4087.4024.0078.4621.54标准误差4.334.072.351.891.89
根据对照组1和2中所示的成熟CEr与不成熟CEf之比，建立正常皮肤和干性皮肤中CEr和CEf的参比值。因此，正常皮肤的参比值为约85%的成熟CEr和约15%的不成熟CEf；而干性皮肤的参比值为约20%的成熟CEr和约80%的不成熟CEf。
总之，组3、4和5中得到的结果如下：
组溶液%成熟CEr%不成熟CEf3131.36(1.82)68.64(1.82)4234.42(1.56)65.58(1.56)5378.46(1.89)21.54(1.89)
括号内的值表示标准误差(E.E.M)。
正如在上述概括的结果中观察到的，其中加入了溶液3的组5的成熟CEr百分比(78.46%)高于组3和组4的成熟CEr百分比之和(65.78%；31.36%+34.42%=65.78%)。因此，证实了甘油、烟酰胺和齿缘墨角藻的甘油提取物(溶液3)的组合在促进干性皮肤SC中编码角质化包膜成熟的协同作用。
本申请中举出的现有技术参考文献
1.EP1374832
2.EP1618867
3.A.V.Rawlings等人“Moisturizer technology versus clinicalperformance”.Dermatologic Therapy,2004,vol.17,pp.49‑56.
4.N.Kitamura等人“effect of niacinamide on thedifferentiation of human kerat inocyte”,Journal of Dermatological Science,1996,vol.12,pp.202.
5.A.V.Rawlings.“Trends in stratum corneum research and the management of dry skin conditions”.Internat ional Journal of Cosmetic Science.2003,vol.25,pp.63‑95.
6.A.V.Rawlings.“Stratum corneum moisturization at the molecular level:an update in relat ion to the dry skin cycle”,The Journal of Investigative Dermatology,2005,vol.124,pp.1099‑1110.
7.Hirao T.等人“A novel non‑invasive evaluation method of cornified envelope maturation in the stratum corneum provides anew insight for skin care cosmet ics”.IFSCC Magazine,2003,vol.6,pp.103.
8.Halzle E."Effects of dermatitis,stripping and steroids on the morphology of corneocytes.A new bioassay",The journal of investigate dermatology,1977,vol.68(6),pp.350‑6.
9.Jane Fore‑Pliger."The epidermal skin barrier:Implications for the Wound Care Practitioner,Part I",Advancesin Skin Wound Care,2004,vol.17,pp.417.
10.Contet‑Audonneau JL,"A histological study of humanwrinkle structures:comparison between sun‑exposed areas of the face,with or without wrinkles and sun‑protected areas",The British journal of dermatology,1999,vol.140(6),pp.1038‑47.
11.Academic press Dict ionary of Science and Technology,1992,pp.531.
12.A terminological Dict ionary of the Pharmaceutical Sciences.First edition,2007,pp.190.
13.T.Hirao,等人“Identification of immature cornifiedenvelopes in the barrier‑impaired epidermis by characterization of their hydrophobicity and antigenici ty of the components”.Experimental Dermatology,2001,Vol.10,pp.35‑44.