一种具有补血升白功效的药物组合物.pdf

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1、(10)申请公布号 CN 102626462 A (43)申请公布日 2012.08.08 CN 102626462 A *CN102626462A* (21)申请号 201110225325.6 (22)申请日 2011.08.08 A61K 36/804(2006.01) A61P 7/06(2006.01) A61P 7/00(2006.01) (71)申请人 李延忠 地址 130012 吉林省长春市高新区创举街 155 号 (72)发明人 李延忠 仲崇琳 杨美林 许康 (54) 发明名称 一种具有补血升白功效的药物组合物 (57) 摘要 本发明涉及一种具有补血升白功效的药物组 合物， 。

2、属于一种中药， 是由下列重量份数比的原 料药制成的 ： 黄芪 266 294 份、 当归 161 178 份、 党参266 294 份、 白术 161 178 份、 女贞子 209231份、 熟地黄209231份、 酸枣仁161 178 份、 枳壳 161 178 份。本发明功能主治 ： 补 肾健脾， 益气养阴。 用于白细胞减少症属气阴两虚 者。证见神疲乏力、 面色少华、 心悸、 五心烦热、 失 眠、 自汗、 盗汗、 咽痛、 口糜等， 伴外周血液白细胞 减少， 舌质淡， 苔薄白， 脉细数。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 15 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (1。

3、2)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 15 页 1/1 页 2 1. 一种具有补血升白功效的药物组合物， 其特征在于是由下列重量份数比的原料药制 成的 ： 黄芪 266 294 份、 当归 161 178 份、 党参 266 294 份、 白术 161 178 份、 女贞子 209 231 份、 熟地黄 209 231 份、 酸枣仁 161 178 份、 枳壳 161 178 份。 2. 根据权利要求 1 所述的一种具有补血升白功效的药物组合物， 其特征在于是由下列 重量份数比的原料药制成的 ： 黄芪 280 份、 当归 170 份、 党参 280 份、 白术 170 份、 女贞子 2。

4、20 份、 熟地黄 220 份、 酸枣 仁 170 份、 枳壳 170 份。 3. 如权利要求 1 或 2 所述的具有补血升白功效的药物组合物， 其特征在于包括下列步 骤 ： 以上八味， 加 6 10 倍药材水煎煮 2 3 次， 每次 1 2 小时， 合并煎液， 滤过， 离心除 去沉淀物， 浓缩至 80 85时测相对密度为 1.25 1.35 的清膏， 减压干燥 (80 )。 4. 如权利要求 1 或 2 所述的具有补血升白功效的药物组合物， 其特征在于包括下列步 骤 ： 以上八味， 加 6 10 倍药材水煎煮 2 3 次， 每次 1 2 小时， 合并煎液， 滤过， 离心除 去沉淀物， 浓缩至。

5、 80 85时测相对密度为 1.25 1.35 的清膏， 取清膏加入糊精适量， 减压干燥 (80 )， 粉碎成细粉， 制成颗粒 1000 份。 5. 如权利要求 4 所述的具有补血升白功效的药物组合物， 其特征在于包括下列步骤 ： 以上八味， 加水煎煮三次， 每次1.5小时， 加水量分别为8、 6、 6倍， 合并煎液， 滤过， 离心 除去沉淀物， 浓缩至相对密度为 1.25 1.35(80测 ) 的清膏， 取清膏加入糊精适量， 减压 干燥 (80 )， 粉碎成细粉， 制成颗粒 1000 份。 权 利 要 求 书 CN 102626462 A 2 1/15 页 3 一种具有补血升白功效的药物组合。

6、物 技术领域 0001 本发明属于一种中药， 尤其是指能补血升白的药物组合物。 背景技术 0002 中医学认为 ： 本病属 “虚劳” 、“血虚” 范畴。其病因病机特点是 ： 多由先天禀赋不 足 ； 后天脾胃虚弱， 生化气源， 中气不足或各种药物损伤， 放化疗损伤， 或久病不愈， 或思虑 过度， 暗耗阴血， 导致血液亏虚， 脏腑百脉失养而发病。针对其病因病机， 确立了补肾健脾， 益气养阴之治法。 0003 近年来， 有关白细胞减少症的中医药治疗报道颇多， 均取得了较好的疗效。 对于其 病因、 病机的认识及治则大致相同， 多以气血亏虚为主， 治以补气生血， 填精生髓， 健脾补肾 等法。 发明内容 。

7、0004 本发明提供一种补血升白的药物组合物， 用于白细胞减少症属气阴两虚者。证见 神疲乏力、 面色少华、 心悸、 五心烦热、 失眠、 自汗、 盗汗、 咽痛、 口糜等， 伴外周血液白细胞减 少， 舌质淡， 苔薄白， 脉细数。 0005 本方主要用于白细胞减少症属气阴两虚者。 0006 白细胞减少症是西医病名， 根据其临床表现， 可归属于中医 “虚劳” 、“血虚” 等范 畴。 灵枢决气 篇 ：“中焦受气取汁， 变化而赤， 是谓血” 。就指出血液化生的物质基础是 水谷精微， 所以有脾胃是 “气血生化之源” 的说法。 难经二十二难 ：“血主濡之” 。即概 括而言血之作用。全身各部分 ( 内脏、 五官。

8、、 九窍、 四肢、 百骸 ) 无一不是在血的濡养作用 下发挥其生理功能的，景岳全书血证 说 “凡为口窍之灵， 为四肢之用， 为筋骨之和柔， 为 肌肉之丰盛， 以及滋脏腑， 安神魂， 润颜色， 充营卫， 津液得以通行， 二阴得以调畅， 凡形质所 在， 无非血之用也。故 “凡血亏之处， 则必随所在而各见其偏废之病” 。 灵枢营卫生会 说 ：“血者， 神气也。 ” 指出了血液与神志活动的密切关系，灵枢平人绝谷 篇又说 ：“血脉 和利， 精神乃居。 ” 指出血液供给充足， 精神活动正常。 素问通评虚实论 云 “精气夺则 虚” 则是对 “虚” 以概括和定义。 素问宣明五气 篇 ：“五劳所伤， 久视伤血，。

9、 久卧伤气， 久 坐伤肉， 久立伤骨， 久行伤筋。 ” 指出劳倦内伤为虚劳的重要起因之一。 诸病源候论 专列 “虚劳病诸侯” ， 用五劳、 六极、 七伤来概括虚劳的病因。 证治汇补虚损 ：“虚者， 血气之空 虚也 ； 损者， 脏腑之损坏也。 ” 指出了虚劳由血、 气之紊乱， 可进一步导致形质之损伤。 杂病 源流犀虚损痨源流 ：“其所以致损者有四， 曰气虚， 曰血虚， 曰阳虚， 曰阴虚。阳气阴血， 精 又为血本， 不离气血， 不外水火， 水火得正气则为精为气， 水火失其和则为寒为热， 此虚损之 大概。 ” 又说 ：“气虚者， 肺脾二经虚也 ； 血虚者， 心肝二经虚也 ； 而阳虚阴虚， 者又 皆属。

10、于肾。 ” 医述 引 医学六要 ：“血证有四， 曰虚， 曰瘀， 曰热， 曰寒。治法有五， 曰补， 曰 下， 曰破， 曰凉， 曰温。虚者法宜补之” 。 景岳全书 新方八略 更详论其治 ：“凡气虚者 宜补其上， 人参、 黄芪之属是也 ； 精虚者宜补其下， 熟地、 枸杞子之属是也 ； 阴虚者宜补 说 明 书 CN 102626462 A 3 2/15 页 4 而兼清， 门冬、 芍药、 生地之属是也 ； 此固阴阳之治辨也。其有气因精而虚者， 自当补精以化 气 ； 精因气而虚者， 自当补气以生精。善补阴者， 必于阳中求阴， 则阴得阳升而泉源不竭。 0007 名医别录 载黄芪 “补丈夫虚损， 五劳赢瘦。止。

11、渴， 腹痛， 泻痢， 益气，” 。 日 华子本草 谓黄芪 ：“助气， 壮筋骨， 长肉， 补血，血崩， 带下” 。 珍珠囊 ：“黄芪甘温纯 阳， 其用有五 ： 诸虚不足， 一也 ； 益元气， 二也 ； 壮脾胃， 三也 ； 去肌热， 四也 ； 排脓止痛， 活血 生血， 内托阴疽， 为疮家圣药， 五也。 ” 日华子本草 云当归 ：“破恶血， 养新血， 及主癓癖， 肠 胃冷” 。 本草纲目 载当归 ：“治头痛、 心腹诸痛， 润肠胃、 筋骨、 皮肤， 治痈疽， 排脓止痛， 和 血补血” 。 本草从新 载党参 ：“主补中益气， 和脾胃， 除烦渴， 中气微弱， 用以调补， 甚为平 妥。 ” 本草正义 云党参。

12、 ：“力能补脾养胃， 润肺生津， 健运中气， 本与人参不甚相远， 其尤可 贵者， 则健脾运而不燥， 滋胃阴而不湿， 润肺而不犯寒凉， 养血而不偏滋腻， 鼓舞清阳， 振动 中气， 而无刚燥之弊” 。 珍珠囊 云白术 ：“除湿益气， 补中补阳， 消痰逐水， 生津止渴， 止泄 痢， 消足胫湿肿，” 。 神农本草经 载女贞子 ：“味苦平， 主补中， 安五脏， 养精神， 除百 病。 ” 珍珠囊 谓熟地 ：“主补血气， 滋肾水， 益真阴。 ” 本草纲目 曰熟地 ：“填骨髓， 长肌 肉， 生精血， 补五脏， 内伤不足， 通血脉， 利耳目， 黑须发。 ” 名医别录 中载酸枣仁 “久泄， 虚 汗烦渴， 补中， 。

13、益肝气， 坚筋骨， 助阴气。 ” 本草纲目 ：“酸枣实味酸性收， 故主肝病， 寒热结 气、 酸痹、 久泄、 脐下满痛之证。其仁甘而润， 故熟用疗胆虚不得眠， 烦渴虚汗之证。 ” 0008 本发明药物组分的用量也是经过发明人进行大量摸索总结得出的， 各组分用量为 在下述重量范围内都具有较好疗效 ： 0009 黄芪 266 294 份、 当归 161 178 份、 党参 266 294 份、 白术 161 178 份、 女 贞子 209 231 份、 熟地黄 209 231 份、 酸枣仁 161 178 份、 枳壳 161 178 份。 0010 优选为 ： 0011 黄芪 280 份、 当归 1。

14、70 份、 党参 280 份、 白术 170 份、 女贞子 220 份、 熟地黄 220 份、 酸枣仁 170 份、 枳壳 170 份。 0012 本发明药物可以采用中药制剂的常规方法制备成任何常规内服制剂。 优选的本发 明药物活性组分的制备方法如下 ： 0013 以上八味， 加 6 10 倍药材水煎煮 2 3 次， 每次 1 2 小时， 合并煎液， 滤过， 离 心除去沉淀物， 浓缩至8085时测相对密度为1.251.35的清膏， 减压干燥(80)。 0014 本发明药物的活性组分可以加入制备不同剂型时所需的各种常规辅料， 如崩解 剂、 润滑剂、 粘合剂等以常规的中药制剂方法制备成任何一种常用。

15、口服剂型， 如颗粒剂、 丸 剂、 散剂、 片剂、 胶囊剂、 口服液等。 0015 本发明颗粒剂的制备方法是 ： 0016 以上八味， 加 6 10 倍药材水煎煮 2 3 次， 每次 1 2 小时， 合并煎液， 滤过， 离 心除去沉淀物， 浓缩至 80 85时测相对密度为 1.25 1.35 的清膏， 取清膏加入糊精 适量， 减压干燥 (80 )， 粉碎成细粉， 制成颗粒 1000 份。 0017 优选地， 本发明药物活性组分的制备方法如下 ： 0018 以上八味， 加水煎煮三次， 每次1.5小时， 加水量分别为8、 6、 6倍， 合并煎液， 滤过， 离心除去沉淀物， 浓缩至相对密度为 1.25。

16、 1.35(80测 ) 的清膏， 取清膏加入糊精适量， 减压干燥 (80 )， 粉碎成细粉， 制成颗粒 1000 份。 0019 本发明功能主治 ： 补肾健脾， 益气养阴。用于白细胞减少症属气阴两虚者。证见 说 明 书 CN 102626462 A 4 3/15 页 5 神疲乏力、 面色少华、 心悸、 五心烦热、 失眠、 自汗、 盗汗、 咽痛、 口糜等， 伴外周血液白细胞减 少， 舌质淡， 苔薄白， 脉细数。 0020 本发明的优点在于 ： 是积吉林省中医药科学院与长春中医学院、 吉林省肿瘤医院 诸位教授 20 余年临床经验总结得出的有效方剂， 具有补肾健脾， 益气养阴的功效， 用于白 细胞减。

17、少症属气阴两虚者。经临床实践应用 10 余年， 疗效确切， 作为有效治疗白细胞减少 症的良药， 给广大的患者带来了福音， 解除了患者的病痛， 深受广大医患的好评。 0021 该药物成人服用量一次 15g， 一日 2 次， 相当于每日服用生药量为 50.4g。 具体实施方式 0022 下面通过有关具体药效学试验对本发明作进一步的阐述。 0023 本发明药物， 以下简称芪归参补血颗粒， 每 g 含生药 1.68g。 0024 实验材料 0025 1、 实验动物 ： 0026 (1)昆明种小鼠， 体重2021g， 雌雄各半， 购于长春高新医学实验动物研究中心。 0027 (2)Wistar 大鼠 ：。

18、 购于长春高新医学实验动物研究中心。 0028 2、 实验药物 ： 0029 (1) 芪归参补血颗粒， 规格 ： 15g/ 袋， 由吉林省中医药科学院提供。用时以蒸馏水 配成相应浓度的混悬液， 供灌胃给药。 0030 (2) 阿胶补血颗粒， 山东东阿阿胶股份有限公司生产， 规格 ： 4 克 / 袋。 0031 (3)环磷酰胺， 由上海华联制药有限公司生产。 用时以生理盐水配成所需浓度供灌 胃给药。 0032 (4) 白细胞稀释液。 0033 (5) 血小板稀释液。 0034 (7) 苦味酸 - 甲醛液固定。 0035 (8)3的醋酸溶液 0036 (9)2， 4- 二硝基氯苯 (DNCB) 0。

19、037 (10) 印度墨汁生理盐水 0038 3、 实验仪器 0039 (1) 显微镜 ： XSZ-300F。 0040 (2) 细胞数板。 0041 (3) 实物显微镜。 0042 (4)60Co 辐射 ： 长春应用化学研究所钴源室。 0043 (5) 微量电子天秤 ： 日本岛津 AEG-220。 0044 (6) 分光光度计 ： 7550 型。上海分析仪器厂。 0045 (7) 动物自主活动仪 ： XZC-4 型， 黑龙江牡丹江中化仪器厂。 0046 一、 补气养血作用的实验观察 0047 ( 一 ) 对环磷酰胺血虚证模型小鼠外周血白细胞数量的影响 0048 实验方法 0049 1、 实验。

20、动物及分组 ： 说 明 书 CN 102626462 A 5 4/15 页 6 0050 取小鼠 60 只， 雌雄各半， 体重 24 25g， 随机分为六组 ： 空白对照组、 模型组、 阿胶 补血颗粒对照组、 芪归参补血颗粒高、 中、 低剂量组。共 6 组， 每组 10 只。 0051 2、 给药方法、 途径及剂量 0052 受试动物经灌胃给药， 给药剂量分别为芪归参补血颗粒高剂量组 ： 9gkg-1体 重 (45 20mlkg-1体重 )、 中剂量组 ： 6gkg-1体重 (30 20mlkg-1体重 )、 低 剂量组 ： 3gkg-1体重 (15 20mlkg-1体重 )， 阿胶补血颗粒对。

21、照组 ： 3gkg-1体重 (15 20mlkg-1体重 )。空白对照组， 环磷酰胺模型组给同体积蒸馏水 (20mlkg-1体 重 )。每天给药一次， 连续灌胃给药 10 天。 0053 3、 血虚证模型的复制 0054 于给药第五天， 除空白对照组外， 其余各组动物均灌胃给予环磷酰胺 50mg kg-1体 重， 连续五天。 0055 4、 观察指标 0056 外周血白细胞计数， 分别于给药第 5 天 ( 即模型前 ) 和第 10 天 ( 模型后 ) 给药后 1 小时经小鼠眶静脉取血， 进行白细胞 (WBC)、 血小板 (PIT) 计数。 0057 方法， 经眶静脉取血 20ul， 加入盛有白。

22、细胞稀释液 (0.38ml) 的试管中， 轻轻混匀。 在显微镜下用计数板进行白细胞计数， 将镜下4个大方格内数得的白细胞数50为白细胞 数 /mm3。血小板， 眶静脉取血 20ul， 加入盛有血小板稀释液 (0.38ml) 的试管中， 镜下计数 血小板数。 0058 5、 统计学处理 0059 分别计算各组动物模型前后白细胞、 血小板数量的平均值， 数据以均数加减标准 差表示， 组间差异的显著性检验用 t- 检验。结果见表 1。 0060 实验结果 0061 由表 1 结果可见， 模型前各组动物白细胞和血小板计数表明均在正常范围， 组间 无显著性差异， 模型各组小鼠连续给予环磷酰胺 5 天后，。

23、 外周血白细胞和血小板计数明显 低于模型前 (P 0.01)， 表明试验剂量的环磷酰胺可造成血细胞减少。 0062 本试验观察中药芪归参补血颗粒对环磷酰胺血虚证模型的影响， 结果表明， 芪归 参补血颗粒高剂量和中剂量给药组动物白细胞和血小板计数明显高于同期模型组， 低剂量 组也有一定的升高趋势， 阳性对照药 ( 阿胶补血颗粒 ) 给药组动物的白细胞和血小板计数 也明显高于模型组。但仍低于同期空白对照组， 提示芪归参补血颗粒对环磷酰胺血虚证动 物模型外周血白细胞和血小板减少有一定的改善作用。 说 明 书 CN 102626462 A 6 5/15 页 7 0063 0064 ( 二 ) 芪归参补。

24、血颗粒对 60Co 照射血虚证模型小鼠外周血白细胞、 血小板数量的 影响 说 明 书 CN 102626462 A 7 6/15 页 8 0065 实验方法 0066 1、 实验动物及分组 ： 0067 取小鼠 60 只， 雌雄各半， 随机分为六组 ： 空白对照组， 模型组， 阿胶补血颗粒对照 组， 芪归参补血颗粒高、 中、 低剂量组。共 6 组， 每组 10 只。 0068 2、 60Co 照射血虚证模型的复制 0069 除对照组外， 其它 5 组小鼠放入钴源室中， 辐射剂量 5Gy 的 60Co。 0070 3、 给药方法、 途径及剂量 0071 受试动物于辐射当天开始经灌胃给药， 给药剂。

25、量分别为芪归参补血颗粒高剂量 组 ： 9gkg-1体重 (45 20mlkg-1体重 )、 中剂量组 ： 6gkg-1体重 (30 20mlkg-1 体重 )、 低剂量组 ： 3gkg-1体重 (15 20mlkg-1体重 )， 阿胶补血颗粒对照组 ： 3gkg-1 体重 (15 20mlkg-1体重 ) ； 空白对照组给同体积蒸馏水 (20mlkg-1体重 )。每天给 药一次， 连续灌胃给药 10 天。 0072 4、 观察指标 0073 于实验后第10天给药后1小时经小鼠眶静脉取血， 镜下计数盘计算白细胞(WBC)、 血小板 (PLT) 数量。 0074 5、 统计学处理 0075 分别计。

26、算各组动物白细胞、 血小板数量的平均数值， 数据以均数加减标准差表示， 组间差异的显著性检验用 t- 检验。结果见表 2。 0076 说 明 书 CN 102626462 A 8 7/15 页 9 0077 实验结果 0078 从表 2 数据中可以看出， 与空白对照组比较， 60Co 辐射的模型损伤小鼠白细胞 (WBC)、 血小板 (PLT) 总数明显降低 (P 0.001)， 表明 60Co 辐射对动物的造血系统有明显 的抑制作用， 表现为外周血白细胞、 血小板数目明显减少。 0079 本项实验观察了阳性对照药阿胶补血颗粒和受试药物芪归参补血颗粒对动物 60Co 照射血虚证动物模型的影响， 。

27、结果表明， 辐射后动物连续 10 天给予不同剂量的芪归参补血 颗粒， 芪归参补血颗粒高剂量组和中剂量组动物的白细胞、 血小板数量明显高于模型组 (P 0.001， 0.05)， 提示芪归参补血颗粒对 60Co 照射血虚证动物白细胞、 血小板恢复有明显的 促进作用。与阳性对照药比较无显著性差异。 说 明 书 CN 102626462 A 9 8/15 页 10 0080 二、 补肾生髓作用的实验观察 0081 ( 一 ) 芪归参补血颗粒对环磷酰胺血虚证模型小鼠骨髓有核细胞数量的影响 0082 实验方法 0083 1、 实验动物及分组 ： 0084 取小鼠 60 只， 雌雄各半， 随机分为六组 ：。

28、 空白对照组， 环磷酰胺模型组， 阿胶补血 颗粒对照组， 芪归参补血颗粒高、 中、 低剂量组。共 6 组， 每组 10 只。 0085 2、 给药方法、 途径及剂量 0086 受试动物经灌胃给药， 给药剂量分别为芪归参补血颗粒高剂量组 ： 9gkg-1体 重 (45 20mlkg-1体重 )、 中剂量组 ： 6gkg-1体重 (30 20mlkg-1体重 )、 低 剂量组 ： 3gkg-1体重 (15 20mlkg-1体重 )， 阿胶补血颗粒对照组 ： 3gkg-1体重 (15 20mlkg-1体重 ) ； 空白对照组、 环磷酰胺模型组给同体积蒸馏水 (20mlkg-1体 重 )。每天给药一次。

29、， 连续灌胃给药 10 天。 0087 3、 血虚证模型的复制 0088 于给药第五天， 除空白对照组外其余各组均经灌胃给予环磷酰胺 50mg kg-1体重， 连续五天。 0089 4、 观察指标 0090 骨髓有核细胞计数法计算骨髓有核细胞数。 0091 取小鼠脱椎处死， 手术剥离取出小鼠一侧股骨， 剥离去肌肉， 剪断两头， 用 3的醋 酸液10ml冲洗股骨髓内细胞， 在显微镜下用计数板将镜下4个大方格内数得的骨髓有核细 胞数 2.5104。为一根股骨中的骨髓有核细胞数。 0092 5、 统计学处理 0093 分别计算各组动物骨髓有核细胞数的平均数值， 数据以均数加减标准差表示， 组 间差异。

30、的显著性检验用 t- 检验， 结果见表 3。 0094 实验结果 0095 与对照组比较， 血虚模型组动物骨髓有核细胞数量明显减少(P0.001)。 表明实 验剂量的环磷酰胺对动物骨髓造血功能有明显的抑制。与模型组比较， 芪归参补血颗粒高 剂量组动物的骨髓有核细胞数量明显增加， 中剂量组和低剂量组骨髓有核细胞数量也有明 显的升高趋势， 但统计学处理未见显著性差异。阳性对照组 ( 阿胶补血颗粒 ) 动物骨髓有 核细胞计数也明显高于模型组， 与芪归参补血颗粒比较未见显著性差异。结果见表 3。 0096 表 -3 芪归参补血颗粒对血虚证模型动物骨髓有核细胞数量的影响 0097 说 明 书 CN 10。

31、2626462 A 10 9/15 页 11 0098 ( 二 ) 芪归参补血颗粒对 60Co 照射血虚证模型造血干细胞 CUF-S 及脾重系数的影 响 0099 实验方法 0100 1、 实验动物及分组 ： 0101 取小鼠 10 只， 雌雄各半， 随机分为六组 ： 空白对照组， 模型组， 阿胶补血颗粒、 芪归 参补血颗粒高、 中、 低剂量组。共 6 组， 每组 10 只。 0102 2、 60Co 照射血虚证模型的复制 0103 除对照组外， 其它 5 组小鼠给予 6Gy 的 60Co 的辐射。 0104 3、 给药方法、 途径及剂量 0105 受试动物于辐射当天开始经灌胃给药， 给药剂量。

32、分别为芪归参补血颗粒高剂量 组 ： 9gkg-1体重 (45 20mlkg-1体重 )、 中剂量组 ： 6gkg-1体重 (30 20mlkg-1 体重 )、 低剂量组 ： 3gkg-1体重 (15 20mlkg-1体重 )， 阿胶补血颗粒对照组 ： 3gkg-1 体重 (15 20mlkg-1体重 ) ； 空白对照组、 环磷酰胺模型组给同体积蒸馏水 (20mlkg-1 体重 )。 0106 每天给药一次， 连续灌胃给药 10 天。给药期结束后， 称量体重， 处死小鼠， 摘取脾 脏， 电子天秤称取脾脏重量， 计算动物脾脏系数。 0107 然后将脾脏用苦味酸-甲醛液固定脾脏24小时， 实物显微镜。

33、下计算脾脏表面的圆 形小结数， 即造血集落数 (CFU-S)。 0108 4、 数据的统计学处理 0109 分别计算各组动物脾脏系数和脾表面 CFU-S 的平均数量， 数据以均数加减标准差 表示， 组间差异的显著性检验用 t- 检验， 结果见表 4。 0110 实验结果 0111 当动物的骨髓造血功能受损后， 脾脏可代偿性髓外造血， 这是由于动物脾脏还保 留具有造血功能的间质细胞。 本试验观察了芪归参补血颗粒对 60Co照射动物骨髓抑制模型 髓外造血功能的影响。 0112 ( 一 ) 芪归参补血颗粒对 60Co 照射血虚证模型造血干细胞 CUF-S 的影响 0113 结果表明， 与对照组比较，。

34、 血虚模型组脾造血集落数明显增加 (P 0.001)， 提 示经 60Co 照射血虚证模型动物在骨髓造血功能受损后， 髓外造血功能有所加强， 与模型组 比较， 芪归参补血颗粒高剂量组和中剂量组及阳性对照组动物脾造血集落数明显增加 (P 说 明 书 CN 102626462 A 11 10/15 页 12 0.05， 0.01)， 表明芪归参补血颗粒对动物骨髓外造血功能有一定促进作用， 结果见表 4。 0114 表 -4 芪归参补血颗粒对 60Co 照射血虚证模型造血干细胞 CUF-S 的影响 0115 0116 与模型组比较 ： *P 0.05， *P 0.01. 0117 ( 二 ) 芪归参。

35、补血颗粒对 60Co 照射血虚证模型脾重系数的影响 0118 各组动物脾重系数的比较表明， 对照组与模型组脾脏系数未见显著性差异， 给药 组中芪归参补血颗粒高剂量组及阳性对照药阿胶补血颗粒组动物脾脏系数与模型组比较 有明显增加 (P 0.05)， 芪归参补血颗粒中剂量和低剂量与模型组比较未见显著性差异。 提示芪归参补血颗粒对血虚证模型动物的髓外造血功能可能有一定的促进作用。 结果见表 5。 0119 表 -5 芪归参补血颗粒对小鼠脾脏指数的影响 0120 0121 与模型组比较 ： *P 0.05， *P 0.01. 0122 三、 芪归参补血颗粒扶正固本作用的实验观察。 0123 ( 一 )。

36、 对环磷酰胺血虚证模型小鼠单核 - 巨噬细胞系统吞噬功能的影响 0124 实验方法 0125 1、 实验动物及分组 ： 0126 取小鼠 60 只， 雌雄各半， 随机分为六组 ： 空白对照组， 模型组， 阿胶补血颗粒对照 组， 芪归参补血颗粒高、 中、 低剂量组。共 6 组， 每组 10 只。 说 明 书 CN 102626462 A 12 11/15 页 13 0127 2、 血虚证模型的复制 0128 除空白对照组外， 其余 5 组于给药第 5 天开始经灌胃给予环磷酰胺 50mg/kg， 连续 五天。 0129 3、 给药方法、 途径及剂量 0130 受试动物经灌胃给药， 给药剂量分别为芪。

37、归参补血颗粒高剂量组 ： 9gkg-1体 重 (45 20mlkg-1体重 )、 中剂量组 ： 6gkg-1体重 (30 20mlkg-1体重 )、 低 剂量组 ： 3gkg-1体重 (15 20mlkg-1体重 )， 阿胶补血颗粒对照组 ： 3gkg-1体重 (15 20mlkg-1体重 ) ； 空白对照组、 环磷酰胺模型组给同体积蒸馏水 (20mlkg-1体 重 )。每天给药一次， 连续灌胃给药 10 天。 0131 4、 观察指标 0132 于实验后第 10 天给药后 1 小时经小鼠尾静脉注射 1 5 稀释的印度墨汁生理盐 水溶液 10ml/kg。并分别与注射后 1min、 5min 用。

38、吸管 ( 预先用肝素溶液湿润 ) 分别从眶后 静脉取血 20ul。溶于 2ml0.1的 Na2CO3溶液中摇匀。 0133 准备好 7550 分光光度计， 波长选定 675nm， 0.1的 Na2CO3调零。测量各样本光密 度 (OD)， 并计算吞噬指数 K。 0134 5、 统计学处理 0135 分别计算吞噬指数 K 的平均数值， 数据以均数加减标准差表示， 组间差异的显著 性检验用 t- 检验。结果见表 6。 0136 实验结果 0137 结果表明， 与对照组比较， 模型组动物的吞噬指数明显降低， 提示环磷酰胺对动物 单核 - 巨噬细胞系统吞噬功能有明显的抑制作用。与模型组比较， 芪归参补。

39、血颗粒高剂量 组和中剂量组动物的吞噬指数明显升高， 表明芪归参补血颗粒对动物单核 - 巨噬细胞系统 吞噬功能有明显的改善作用。 0138 表-6芪归参补血颗粒对环磷酰胺小鼠单核巨噬细胞系统吞噬功能的影响 0139 0140 与模型组比较 ： *P 0.05， *P 0.01. 0141 ( 二 ) 对小鼠迟发型超敏反应的影响 ： 0142 实验方法 0143 1、 实验动物及分组 ： 0144 取小鼠 50 只， 体重 20-22g， 雌雄各半， 随机分为 5 组 ： 空白对照组， 阿胶补血颗粒 说 明 书 CN 102626462 A 13 12/15 页 14 对照组， 芪归参补血颗粒高、。

40、 中、 低剂量组。每组 10 只。 0145 2、 给药方法、 途径及剂量 0146 受试动物经灌胃给药， 给药剂量分别为芪归参补血颗粒高剂量组 ： 9gkg-1体 重 (45 20mlkg-1体重 )、 中剂量组 ： 6gkg-1体重 (30 20mlkg-1体重 )、 低 剂量组 ： 3gkg-1体重 (15 20mlkg-1体重 )， 阿胶补血颗粒对照组 ： 3gkg-1体重 (15 20mlkg-1体重 ) ； 空白对照组给同体积蒸馏水 (20mlkg-1体重 )。每天给药一 次， 连续给药 8 天。 0147 3、 致敏方法与观察指标 0148 分别于给药第二天和第五天于小鼠皮下注射。

41、 7的 2， 4- 二硝基氯苯 (DNCB) 丙酮 溶液致敏 2(0.02ml/ 只， 并且于致敏当天给药两次。末次给药前 15 小时于小鼠右耳滴 1 的 DNCB 丙酮溶液 0.03ml/ 只进行攻击。攻击后 1 小时， 将小鼠脱臼处死， 用 9mm 的打孔 器打下两耳片， 微量电子天秤称重， 观察两耳片重量， 以两耳重量差为肿胀度， 结果见表 7。 0149 实验结果 0150 二硝基氯苯 (DNCB) 是小分子的半抗原， 将其涂于皮肤上， 可透过上皮而与角蛋白 及胶原蛋白结合成为完全抗原， 并能刺激 T 淋巴细胞转化为致敏的淋巴细胞， 再分布于皮 肤内， 10 14 日后动物对此类物质便。

42、产生过敏， 再以二硝基氯苯攻击时， 可在攻击部位形 成迟发型变态反应。 0151 本观察结果表明， 与对照组比较， 芪归参补血颗粒高剂量组和中剂量组动物的两 耳片肿胀度明显增加， 表明小鼠被攻击耳局部迟发型变态反应增强。提示芪归参补血颗粒 能增强动物的细胞免疫功能， 结果见表 7。 0152 表 -7 芪归参补血颗粒对小鼠迟发型超敏反应的影响 0153 0154 ( 三 ) 对环磷酰胺血虚证模型小鼠自主活动的影响 0155 实验方法 0156 1、 实验动物及分组 ： 0157 取小鼠 60 只， 雌雄各半， 随机分为六组 ： 空白对照组， 模型组， 阿胶补血颗粒对照 组， 芪归参补血颗粒高、。

43、 中、 低剂量组。共 6 组， 每组 10 只。 0158 2、 血虚证模型的复制 0159 除空白对照组外， 其余 5 组于给药第 5 天开始经灌胃给予环磷酰胺 50mg/kg， 连续 五天。 说 明 书 CN 102626462 A 14 13/15 页 15 0160 3、 给药方法、 途径及剂量 0161 受试动物经灌胃给药， 给药剂量分别为芪归参补血颗粒高剂量组 ： 9gkg-1体 重 (45 20mlkg-1体重 )、 中剂量组 ： 6gkg-1体重 (30 20mlkg-1体重 )、 低 剂量组 ： 3gkg-1体重 (15 20mlkg-1体重 )， 阿胶补血颗粒对照组 ： 3。

44、gkg-1体重 (15 20mlkg-1体重 )。空白对照组， 环磷酰胺模型组给同体积蒸馏水 (20mlkg-1体 重 )。每天给药一次， 连续灌胃给药 10 天。 0162 4、 观察指标 0163 小鼠空腹 16 小时后给药， 末次给药后 1 小时将小鼠放入小动物自主活动仪中， 记 录小鼠 5 分钟内的自主活动次数， 结果见表 8。 0164 5、 统计学处理 0165 分别计算各组动物自主活动的平均数值， 数据以均数加减标准差表示， 组间差异 的显著性检验用 t- 检验。 0166 实验结果 0167 结果表明， 与对照组比较环磷酰胺模型组动物的自主活动次数明显减少 (P 0.001)。。

45、与模型组动物比较， 芪归参补血颗粒 3 个剂量组动物的自主活动次数均明显增 加， 提示芪归参补血颗粒对环磷酰胺模型动物的整体状态有明显的改善作用， 结果见表 8。 0168 表 -8 芪归参补血颗粒对环磷酰胺血虚证模型动物自主活动次数的影响 0169 0170 ( 四 ) 对环磷酰胺血虚证模型小鼠生存能力的影响 ： 0171 实验方法 0172 1、 实验动物及分组 ： 0173 取小鼠 60 只， 雌雄各半， 随机分为六组 ： 空白对照组， 模型组， 阿胶补血颗粒对照 组， 芪归参补血颗粒高、 中、 低剂量组。共 6 组， 每组 10 只。 0174 2、 血虚证模型的复制 0175 除空白。

46、对照组外， 其余 5 组于给药第 5 天开始经灌胃给予环磷酰胺 50mg/kg， 连续 给药五天。 0176 3、 给药方法、 途径及剂量 0177 受试动物经灌胃给药， 给药剂量分别为芪归参补血颗粒高剂量组 ： 9gkg-1体 重 (45 20mlkg-1体重 )、 中剂量组 ： 6gkg-1体重 (30 20mlkg-1体重 )、 低 说 明 书 CN 102626462 A 15 14/15 页 16 剂量组 ： 3gkg-1体重 (15 20mlkg-1体重 )， 阿胶补血颗粒对照组 ： 3gkg-1体重 (15 20mlkg-1体重 )。空白对照组， 环磷酰胺模型组给同体积蒸馏水 (。

47、20mlkg-1体 重 )。每天给药一次， 连续灌胃给药 10 天。 0178 4、 观察指标 0179 小鼠空腹 16 小时后给药， 末次给药后 1 小时将小鼠放入水深 35cm， 水温 152 水中游泳， 记录小鼠在水中存活时间， 结果见表 9。 0180 5、 统计学处理 0181 分别计算各组动物在水中存活时间的平均数值， 数据以均数加减标准差表示， 组 间差异的显著性检验用 t- 检验。 0182 实验结果 0183 结果表明， 动物经注射一定剂量的环磷酰胺后， 机体的整体状态明显下降， 表现为 在水中游泳持续时间明显缩短。与模型组动物比较， 芪归参补血颗粒高剂量组和阳性对照 组动物的水中存活时间明显长于模型组， 表明该制剂对血虚证模型动物功能状态有一定的 改善作用。中剂量组和低剂量组与模型组比较未见显著性差异。 0184 表 -9 芪归参补血颗粒对环磷酰胺虚证模型动物水中游泳存活时间影响 0185 0186 小结 0187 实验观察了动物在受试量芪归参补血颗粒 (3gkg-1、 6gkg-1、 。