唑烷酮-乙烯基稠合的-苯衍生物 【发明领域】
本发明涉及用于治疗和/或预防自身免疫性疾病和/或炎性疾病、心血管疾病、神经退行性疾病、细菌或病毒感染、肾脏疾病、小血板聚集、癌症、移植排斥或肺损伤的式(I)所示唑烷酮(azolidinone)-乙烯基稠合的-苯衍生物。本发明具体涉及用于调节主要是抑制磷酸肌醇-3’OH激酶家族(PI3K)特别是PI3Kγ的活性或功能的取代的唑烷酮(azolidinone)-乙烯基稠合的-苯衍生物。
背景技术
细胞的胞浆膜可以看作是一个巨大的第二信使的贮库，这些第二信使可以参与到各种信号传导通路中。就磷脂信号传导通路中效应器酶的功能和调节而言，这些酶从膜磷脂库产生第二信使(I类PI3激酶，如PI3Kγ))是双重特异性的激酶，这意味着它们既表现磷脂激酶的活性(磷酸肌醇的磷酸化)又表现蛋白激酶的活性，能够使其它蛋白质底物磷酸化，包括作为分子内调节机制的自身磷酸化。这些磷脂信号的酶对各种细胞外信号如生长因子、有丝分裂原、整联蛋白(细胞-细胞相互作用)激素、细胞因子、病毒和神经递质(如在以下图1中所示的)起反应而被激活，也受其它信号分子如小分子的GTP酶、激酶或磷酸酯酶的细胞内交叉调节(串话(cross-talk)，其中原发的信号能激活某些平行地通路，它们在第二个步骤中通过细胞内的信号传递事件把信号传递给PI3K)而被激活。
肌醇磷脂(磷酸肌醇)细胞内信号通路开始于信号分子(细胞外配体、刺激、受体二聚化、由异源受体(如受体酪氨酸激酶)产生的转激活)与整合在胞浆膜中的G-蛋白偶联的跨膜受体的结合。PI3K将膜磷脂PIP(4，5)2转化为PIP(3，4，5)3，后者继而可进一步被5’-特异性的磷酸肌醇磷酸酶转化为另一种3’-磷酸化的形式，因此PI3K的酶催化活性直接或间接地导致两种3’-磷酸肌醇亚型的产生，它们的功能是在细胞内信号传导中起第二信使的作用(Vanhaesebroeck B，et al.，Trends Biochem Sci.22(7)p.267-72(1977)；Leslie NR，et al.，Chem.Rev.101(8)p.2365-80(2001)；Katso R.et al.Annu Rev Cell Dev Biol.17 p.615-75(2001)；Toker A.et al.，Cell Mol Life Sci.59(5)p.761-79(2002)。多个PI3K同工型按它们的催化亚单位、被相应的调节亚单位的调节作用、表达形式和信号传导-特异性的功能分类(p110α、β、δ和γ)，进行这种酶催化反应(Vanhaesebroeck B.ExpCell Res.25(1)p.239-54(1999)；Kasto R，et al.，Annu Rev Cell Dev Biol.17 p.615-75(2001))。
进化保守的同工型p110α和β是普遍表达的，而δ和γ则特定地在造血细胞系统、平滑肌细胞、肌细胞和内皮细胞中表达(Vanhaesebroeck B et al.Trends Biochem.Sci.22(7)p.267-72(1997)。它们的表达也可以可诱导的方式受到调节，这取决于细胞的-、组织的类型和刺激以及疾病的情况。目前，基于序列同源性、结构、结合方式、激活模式和体外的底物取向，已经鉴定了八种哺乳动物PI3K，划分成三大类(I、II、III类)。I类PI3K能使磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酰肌醇-4-磷酸(PIP)、磷脂酰肌醇-4，5-二磷酸(PIP2)磷酸化，分别产生磷脂酰肌醇-3-磷酸(PIP)、磷脂酰肌醇-3，4-二磷酸和磷脂酰肌醇-3，4，5-三磷酸。II类PI3K使PI和磷脂酰肌醇-4-磷酸磷酸化。III类PI3K只能使得PI磷酸化(VanhaesebroeckB et al.，Exp Cell Res.25(1)p.239-54(1999)；Vanhaesebroeck B，Trends Biochem Sci.22(7)p.267-72(1997)；Leslie NR et al.，Chem.Rev.101(8)p.2365-80(2001))。G-蛋白偶联的受体通过小分子GTP酶如Gβγ和Ras介导磷酸肌醇3’OH-激酶激活，因此PI3K信号传导在建立和协调细胞极性和细胞骨架的动态组织(二者合起来对细胞运动提供驱动力)中起核心作用。
流程1
如流程1所说明的，磷酸肌醇3-激酶(PI3K)参与磷脂酰肌醇(PtdIns)在肌醇环的第三碳上的磷酸化。PtdIns磷酸化为3，4，5-三磷酸(PtdIns(3，4，5)P3)、PtdIns(3，4)P2和PtdIns(3)P，对各种信号传导通路起第二信使的作用，这些信号传导通路包括那些对于细胞增殖、细胞分化、细胞生长、细胞体积、细胞存活、凋亡、粘合、细胞运动、细胞迁移、趋化性、侵袭、细胞骨架重排、细胞形状改变、小泡运输和代谢通路(Katso et al.，Annu RevCell Dev Biol.17 p.615-75(2001)；Stein RC，Mol Med Today 6(9)p.347-57(2000))。趋化性—细胞向化学诱引剂(也称为趋化因子)浓度梯度的定向运动与许多重要的疾病有关，这些疾病如炎症/自身免疫、神经变性、血管形成、侵袭/转移和伤口愈合(Wyman NP etal.，Immunol Today 21(6)p.260-4(2000)；Hirsh et al.，Science 287(5455)p.1049-53(2000)；Hirsh et al.，FASEB J 15(11)p.2019-21(2001)；Gerard C et al.，Nat Immunol.2(2)p.108-15(2001))。
使用遗传学方法和药理学工具的最新进展向我们提供了对信号和分子通路的深入了解，这些通路介导对化学诱引剂的趋化性。激活的G-蛋白偶合的受体PI3-激酶(与这些磷酸化信号产物的产生有关)最初被鉴定为与病毒的癌基因蛋白和生长因子受体酪氨酸激酶有关的活性，后者使磷脂酰肌醇(PI)和它的在肌醇环的3’-羟基磷酸化的衍生物磷酸化(Panayotou et al.，Trends Cell Biol.2 p.358-60(1992)。但是，更新的生物化学研究揭示，I类PI3激酶(如IB类同工型PI3Kγ)是双重-特异性的激酶，这意味着它们显示脂质激酶(磷酸肌醇的磷酸化)以及蛋白激酶的活性，能够磷酸化其它蛋白质底物，包括作为分子内调节机制的自磷酸化。
因此，相信PI3-激酶参与了一些细胞应答，包括细胞生长、分化和凋亡(Parker et al.，Current Biology，5 p.577-99(1995)；Yao et al.，Science，267 p.2003-05(1995))。PI3-激酶看来还参与了白细胞激活的许多方面。已经表明，一种p85-相关的PI3-激酶活性与CD28的胞浆结构域在物理上相关，后者在T-细胞应答抗原的激活中是重要的协同刺激分子(Pages et al.，Nature，369 p.327-29(1994)；Rudd，Immunity，4 p.527-34(1996))。T细胞通过CD28的激活降低由抗原激活的阈值，提高增殖反应的幅度和时程。这些作用与包括白介素-2(IL2)(一种重要的T细胞生长因子)在内的一些基因的转录增加相关联(Fraseret al.，Science，251 p.313-16(1991))。CD28的突变(使它能更长时间地与PI3-激酶相互作用)导致不能引发IL2的产生，这提示PI3-激酶在T-细胞激活中的关键作用。PI3Kγ已经被鉴定为JNK活性的Gβγ依赖性调节的介体，而Gβγ是杂三聚G蛋白的亚单位(J.Biol.Chem.，273(5)p.2505-8(1998))。PI3K在其中起必要作用的细胞过程包括凋亡的抑制、肌动蛋白骨架的再组织、心肌细胞生长、由胰岛素产生的糖元合成酶刺激、TNFα-介导的中性粒细胞活化和超氧化物产生、以及白细胞迁移并粘合到内皮细胞上。最近，Immunity16(3)p.441-51(2002)中描述了p.441-51(2002))PI3K通过各种G(i)-偶联的受体转递炎性信号，它对肥大细胞功能、白细胞的刺激、免疫学的中心(作用)包括例如细胞因子、趋化因子、腺苷、抗体、整连蛋白、聚集因子、生长因子、病毒或激素(Lawlor MA et al.，J.Cell Sci.114(Pt 16)p.2903-10(2001)；Laffargue M.et al.，Immunity 16(3)P.441-51(2002)；和Stephens L.et al.，Curr.Opinion Cell Biol.14(2)p.203-13(2002))。
针对酶家族各个成员的特异性抑制剂为译解每种酶的功能提供了无价的工具。两种化合物，LY294002和渥曼青霉素(见后)已经广泛用作PI3-激酶抑制剂。这些化合物是非特异性的PI3K抑制剂，因为它们不能区分I类PI3-激酶的四个成员。例如，渥曼青霉素对各个I类PI3激酶的IC50值在1-10nM的范围内。同样，LY294002对这些PI3-激酶的IC50值约为15-20μM(Fruman et al.，An.Rev.Biochem.67，p.481-507(1998))，对CK2蛋白激酶和对一些磷脂酶的抑制活性也在5-10μM。渥曼青霉素是一种真菌代谢物，通过共价结合到该酶的催化结构域而不可逆地抑制PI3K活性。PI3K活性被渥曼青霉素抑制，消除了随后的细胞对细胞外因子的应答。例如，中性粒细胞通过刺激PI3K和合成PtdIns(3，4，5)P3应答趋化因子fMet-Leu-Phe(fMLP)。该合成与入侵微生物破坏中性粒细胞所涉及的呼吸器破裂的激活相关。用渥曼青霉素处理中性粒细胞阻止了fMLP-诱导的呼吸器破裂应答(Thelenet al.PNAS 91 p.4960-64(1994))。的确，这些使用渥曼青霉素的实验以及其它实验证据表明，在造血细胞谱系中，特别是在中性粒细胞、单核细胞和其它类型的白细胞中的PI3K活性和许多与急性和慢性炎症有关的非记忆性免疫应答有关。
LY294002 渥曼青霉素
基于用渥曼青霉素的研究，有证据表明，通过G-蛋白偶联受体的白细胞信号传导的某些方面也需要PI3-激酶功能(Thelen et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，91 p.4960-64(1994))。而且，已经证明，渥曼青霉素和LY294002阻断中性粒细胞迁移和超氧化物释放。然而，由于这些化合物不能区分PI3K的各个同工型，哪一个或哪几个具体的PI3K同工型参与了这些现象仍然不清楚。
具有必需的苯并咪唑基团的唑烷酮-乙烯基苯衍生物在WO 02/051490中有描述。据说这类化合物能抑制端粒酶并据称可用于治疗癌症。
【发明内容】
本发明涉及式(I)所示唑烷酮-乙烯基稠合的-苯衍生物
其中，A、X、Y、Z、n、R1和R2将会在下面详细叙述，及其药学上可接受的盐在制备治疗和/或预防以下疾病的药物组合物的应用，这些疾病是：自身免疫性疾病和/或炎性疾病、心血管疾病、神经退行性疾病、细菌或病毒感染、肾脏疾病、血小板聚集、癌症、移植并发症、移植物排斥或肺损伤。本发明化合物是磷酸肌醇3-激酶(PI3K)的抑制剂，特别是磷酸肌醇-激酶γ(PI3Kγ)的抑制剂。
【具体实施方式】
已经发现，本发明化合物是磷酸肌醇3-激酶(PI3K)，特别是磷酸肌醇3-激酶γ(PI3Kγ)的调节剂。当磷酸肌醇3-激酶(PI3K)被本发明化合物抑制时，PI3K就不能发挥其酶促生物学和/或药理学效应。本发明化合物因此可用于治疗和预防自身免疫性疾病和/或炎性疾病、心血管疾病、神经退行性疾病、细菌或病毒感染、肾脏疾病、血小板聚集、癌症、移植并发症、移植物排斥或肺损伤。
以下各段提供构成本发明化合物的各种化学基团的定义，它们要在整个说明书和权利要求书中统一使用，除非另行表述的定义提供了更为广泛的限定。
“C1-C6-烷基”指具有1-6个碳原子的单价烷基基团。该术语可用甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、正己基等来举例说明。
“芳基”指具有单环(如苯基)或多稠环(如萘基)的6-14个碳原子的不饱和芳族碳环基团。优选的芳基包括苯基、萘基、菲基等。
“C1-C6-烷基芳基”指具有芳基取代基的C1-C6-烷基，包括苄基、苯乙基等。
“杂芳基”指单环杂芳族或双环或三环稠环杂芳族基团。杂芳基的具体例子包括任选地取代的吡啶基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、吡唑基、1，2，3-三唑基、1，2，4-三唑基、1，2，3-噁二唑基、1，2，4-噁二唑基、1，2，5-噁二唑基、1，3，4-噁二唑基、1，3，4-三嗪基、1，2，3-三嗪基、苯并呋喃基、[2，3-二氢]苯并呋喃基、异苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并三唑基、异苯并噻吩基、吲哚基、异吲哚基、3H-吲哚基、苯并咪唑基、咪唑并[1，2-a]吡啶基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹嗪基、喹唑啉基、2，3-二氮杂萘基、喹喔啉基、噌啉基、1，5-二氮杂萘基、吡啶并[3，4-b]吡啶基、吡啶并[3，2-b]吡啶基、吡啶并[4，3-b]吡啶基、喹啉基、异喹啉基、四唑基、5，6，7，8-四氢喹啉基、5，6，7，8-四氢异喹啉基、嘌呤基、喋啶基、咔唑基、呫吨基或苯并喹啉基。
“C1-C6-烷基杂芳基”指具有杂芳基取代基的C1-C6-烷基，包括2-呋喃基甲基、2-噻吩基甲基、2-(1H-吲哚-3-基)乙基等。
“C2-C6-烯基”指优选具有2-6个碳原子并具有至少1-2个烯基不饱和键的烯基基团。优选的烯基包括乙烯基(-CH＝CH2)、n-2-丙烯基(烯丙基，-CH2CH＝CH2)等。
“C2-C6-烯基芳基”指具有芳基取代基的C2-C6-烯基，包括2-苯基乙烯基等。
“C2-C6-烯基杂芳基”指具有杂芳基取代基的C2-C6-烯基，包括2-(3-吡啶基)乙烯基等。
“C2-C6-炔基”指优选具有2-6个碳原子并具有至少1-2个炔基不饱和键的炔基基团。优选的炔基包括乙炔基(-CH≡CH)、丙炔基(-CH2C≡CH)等。
“C2-C6-炔基芳基”指具有芳基取代基的C2-C6炔基，包括苯基乙炔基等。
“C2-C6-炔基杂芳基”指具有杂芳基取代基的C2-C6炔基，包括2-噻吩基乙炔基等。
“C3-C8-环烷基”指具有单环(如环己基)或多稠环(如降冰片基)的3-8个碳原子的饱和碳环基团。优选的环烷基包括环戊基、环己基、降冰片基等。
“杂环烷基”指上述定义的C3-C8环烷基，其中最多3个碳原子被选自O、S、NR的杂原子取代，R定义为氢或甲基。优选的杂环烷基包括吡咯烷、哌啶、哌嗪、1-甲基哌嗪、吗啉等。
“C1-C6-烷基环烷基”指具有环烷基取代基的C1-C6-烷基，包括环己基甲基、环戊基丙基等。
“C1-C6-烷基杂环烷基”指具有杂环烷基取代基的C1-C6-烷基，包括2-(1-吡咯烷基)乙基、4-吗啉基甲基、(1-甲基-4-哌啶基)甲基等。
“羧基”指基团-C(O)OH。
“C1-C6-烷基羧基”指具有羧基取代基的C1-C6-烷基，包括2-羧基乙基等。
“酰基”指基团-C(O)R，其中R包括“C1-C6-烷基”、“芳基”、“杂芳基”、“C1-C6-烷基芳基”或“C1-C6-烷基杂芳基”。
“C1-C6-烷基酰基”指具有酰基取代基的C1-C6-烷基，包括2-乙酰基乙基等。
“芳基酰基”指具有酰基取代基的芳基，包括2-乙酰基苯基等。
“杂芳基酰基”指具有酰基取代基的杂芳基，包括2-乙酰基吡啶基等。
“C3-C8(杂)环烷基酰基“指具有酰基取代基的3-8元环烷基或杂环烷基。
“酰氧基”指基团-OC(O)R，其中R包括H、“C1-C6-烷基”、“C2-C6-烯基”、“C2-C6-炔基”、“C3-C8-环烷基”、“杂环烷基”、“芳基”、“杂芳基”、“C1-C6-烷基芳基”或“C1-C6-烷基杂芳基”、“C2-C6-烯基芳基”、“C2-C6-烯基杂芳基”、“C2-C6-炔基芳基”、“C2-C6-炔基杂芳基”、“C1-C6-烷基环烷基”、“C1-C6-烷基杂环烷基”。
“C1-C6-烷基酰氧基”指具有酰氧基取代基的C1-C6-烷基，包括2-(乙酰氧基)乙基等。
“烷氧基”指基团-O-R，其中R包括“C1-C6-烷基”或“芳基”或“杂芳基”或“C1-C6-烷基芳基”或“C1-C6-烷基杂芳基”。优选的烷氧基包括例如甲氧基、乙氧基、苯氧基等。
“C1-C6-烷基烷氧基”指具有烷氧基取代基的C1-C6-烷基，包括2-乙氧基乙基等。
“烷氧基羰基”指基团-C(O)OR，其中R包括H、“C1-C6-烷基”、或“芳基”或“杂芳基”或“C1-C6-烷基芳基”或“C1-C6-烷基杂芳基”。
“C1-C6烷基烷氧基羰基”指具有烷氧基羰基取代基的C1-C6-烷基，包括2-(苄氧基羰基)乙基等。
“氨基羰基”指基团-C(O)NRR’，其中R、R’独立地包括氢或C1-C6-烷基或芳基或杂芳基或“C1-C6-烷基芳基”或“C1-C6-烷基杂芳基”。
“C1-C6-烷基氨基羰基”指具有氨基羰基取代基的C1-C6-烷基，包括2-(二甲基氨基羰基)乙基等。
“酰基氨基”指基团-NRC(O)R’，其中每个R、R’独立地是氢、“C1-C6-烷基”、“C2-C6-烯基”、“C2-C6-炔基”、“C3-C8-环烷基”、“杂环烷基”、“芳基”、“杂芳基”、“C1-C6-烷基芳基”、“C1-C6-烷基杂芳基”、“C2-C6-烯基芳基”、“C2-C6-烯基杂芳基”、“C2-C6-炔基芳基”、“C2-C6-炔基杂芳基”、“C1-C6-烷基环烷基”、“C1-C6-烷基杂环烷基”。
“C1-C6-烷基酰基氨基”指具有酰基氨基取代基的C1-C6-烷基，包括2-(丙酰基氨基)乙基等。
“脲基”指基团-NRC(O)NR’R”，其中R、R’、R”独立地是氢、“C1-C6烷基”、“C2-C6-烯基”、“C2-C6-炔基”、“C3-C8-环烷基”、“杂环烷基”、“芳基”、“杂芳基”、“C1-C6-烷基芳基”或“C1-C6-烷基杂芳基”、“C2-C6-烯基芳基”、“C2-C6-烯基杂芳基”、“C2-C6-炔基芳基”、“C2-C6-炔基杂芳基”、“C1-C6-烷基环烷基”、“C1-C6-烷基杂环烷基”，以及其中R’和R”和与它们连接的氮原子一起可任选地形成3-8元杂环烷基环。
“C1-C6-烷基脲基”指具有脲基取代基的C1-C6-烷基，包括2-(N’-甲基脲基)乙基等。
“氨基甲酸酯”指基团-NRC(O)OR’，其中R、R’独立地是氢、“C1-C6-烷基”、“C2-C6-烯基”、“C2-C6-炔基”、“C3-C8-环烷基”、“杂环烷基”、“芳基”、“杂芳基”、“C1-C6-烷基芳基”或“C1-C6-烷基杂芳基”、“C2-C6-烯基芳基”、“C2-C6-烯基杂芳基”、“C2-C6-炔基芳基”、“C2-C6-炔基杂芳基”、“C1-C6-烷基环烷基”、“C1-C6-烷基杂环烷基”。
“氨基”指基团-NRR’，其中R、R’独立地是氢或“C1-C6-烷基”、“芳基”、“杂芳基”或“C1-C6-烷基芳基”或“C1-C6-烷基杂芳基”或“环烷基”或“杂环烷基”，以及其中R’和R”和与它们连接的氮原子一起可任选地形成3-8元杂环烷基环。
“C1-C6-烷基氨基”指具有氨基取代基的C1-C6-烷基，包括2-(1-吡咯烷基)乙基等。
“铵”指带正电荷的基团-N+RR’R”，其中R、R’、R”独立地是“C1-C6-烷基”或“C1-C6-烷基芳基”或“C1-C6-烷基杂芳基”或“环烷基”或“杂环烷基”，以及R和R’和与它们连接的氮原子一起可任选地形成3-8元杂环烷基环。
“C1-C6-烷基铵”指具有铵取代基的C1-C6-烷基，包括2-(1-吡咯烷基)乙基等。
“卤素”指氟、氯、溴、碘原子。
“磺酰氧基”指基团-OSO2R，其中R选自H、“C1-C6-烷基”、被卤素取代的“C1-C6-烷基”如-OSO2CF3、“C2-C6-烯基”、“C2-C6-炔基”、“C3-C8-环烷基”、“杂环烷基”、“芳基”、“杂芳基”、“C1-C6-烷基芳基”、“C1-C6-烷基杂芳基”、“C2-C6-烯基芳基”、“C2-C6-烯基杂芳基”、“C2-C6-炔基芳基”、“C2-C6-炔基杂芳基”、“C1-C6-烷基环烷基”、“C1-C6-烷基杂环烷基”。
“C1-C6-烷基磺酰氧基”指具有磺酰氧基取代基的C1-C6-烷基，包括2-(甲基磺酰氧基)乙基等。
“磺酰基”指基团-SO2R，其中R选自H、“芳基”、“杂芳基”、“C1-C6-烷基”、被卤素取代的“C1-C6-烷基”如-SO2CF3、“C2-C6-烯基”、“C2-C6-炔基”、“C3-C8-环烷基”、“杂环烷基”、“芳基”、“杂芳基”、“C1-C6-烷基芳基”、“C1-C6-烷基杂芳基”、“C2-C6-烯基芳基”、“C2-C6-烯基杂芳基”、“C2-C6-炔基芳基”、“C2-C6-炔基杂芳基”、“C1-C6-烷基环烷基”、“C1-C6-烷基杂环烷基”。
“C1-C6-烷基磺酰基”指具有磺酰基取代基的C1-C6-烷基，包括2-(甲基磺酰基)乙基等。
“亚磺酰基”指基团-S(O)R，其中R选自H、“C1-C6-烷基”、被卤素取代的“C1-C6-烷基”如-SOCF3、“C2-C6烯基”、“C2-C6-炔基”、“C3-C8-环烷基”、“杂环烷基”、“芳基”、“杂芳基”、“C1-C6-烷基芳基”、“C1-C6-烷基杂芳基”、“C2-C6-烯基芳基”、“C2-C6-烯基杂芳基”、“C2-C6-炔基芳基”、“C2-C6-炔基杂芳基”、“C1-C6-烷基环烷基”、“C1-C6-烷基杂环烷基”。
“C1-C6-烷基亚磺酰基”指具有亚磺酰基取代基的C1-C6-烷基，包括2-(甲基亚磺酰基)乙基等。
“硫烷基”指基团-SR，其中R选自H、“C1-C6-烷基”、被卤素取代的“C1-C6-烷基”如-SOCF3、“C2-C6-烯基”、“C2-C6-炔基”、“C3-C8-环烷基”、“杂环烷基”、“芳基”、“杂芳基”、“C1-C6-烷基芳基”、“C1-C6-烷基杂芳基”、“C2-C6-烯基芳基”、“C2-C6-烯基杂芳基”、“C2-C6-炔基芳基”、“C2-C6-炔基杂芳基”、“C1-C6-烷基环烷基”、“C1-C6-烷基杂环烷基”。优选的硫烷基包括甲基硫烷基、乙基硫烷基等。
“C1-C6-烷基硫烷基”指具有硫烷基取代基的C1-C6-烷基，包括2-(乙基硫烷基)乙基等。
“磺酰基氨基”指基团-NRSO2R’，其中各个R、R’独立地包括H、“C1-C6-烷基”、“C2-C6-烯基”、“C2-C6-炔基”、“C3-C8-环烷基”、“杂环烷基”、“芳基”、“杂芳基”、“C1-C6-烷基芳基”、“C1-C6-烷基杂芳基”、“C2-C6-烯基芳基”、“C2-C6-烯基杂芳基”、“C2-C6-炔基芳基”、“C2-C6-炔基杂芳基”、“C1-C6-烷基环烷基”、“C1-C6-烷基杂环烷基”。
“C1-C6-烷基磺酰基氨基”指具有磺酰基氨基取代基的C1-C6-烷基，包括2-(乙基磺酰基氨基)乙基等。
“氨基磺酰基”指基团-SO2NRR’，其中各个R、R’独立地选自H、“C1-C6-烷基”、“C2-C6-烯基”、“C2-C6-炔基”、“C3-C8-环烷基”、“杂环烷基”、“芳基”、“杂芳基”、“C1-C6-烷基芳基”、“C1-C6-烷基杂芳基”、“C2-C6-烯基芳基”、“C2-C6-烯基杂芳基”、“C2-C6-炔基芳基”、“C2-C6-炔基杂芳基”、“C1-C6-烷基环烷基”、“C1-C6-烷基杂环烷基”。
“C1-C6-烷基氨基磺酰基”指具有氨基磺酰基取代基的C1-C6-烷基，包括2-(环己基氨基磺酰基)乙基等。
“取代的或未取代的”：除非用各个取代基的定义另行限定，上面所述的基团，如“烷基”、“烯基”、“炔基”、“芳基”和“杂芳基”等基团可任选地被1-5个选自以下基团的取代基取代：“C1-C6-烷基”、“C2-C6-烯基”、“C2-C6-炔基”、“环烷基”、“杂环烷基”、“C1-C6-烷基芳基”、“C1-C6-烷基杂芳基”、“C1-C6-烷基环烷基”、“C1-C6-烷基杂环烷基”、“氨基”、“铵”、“酰基”、“酰氧基”、“酰基氨基”、“氨基羰基”、“烷氧基羰基”、“脲基”、“芳基”、“氨基甲酸酯”、“杂芳基”、“亚磺酰基”、“磺酰基”、“烷氧基”、“硫烷基”、“卤素”、“羧基”、三卤甲基、氰基、羟基、巯基、硝基、等等。或者，所述的取代也可以包含其中相邻取代基发生环化的情况，特别是当涉及邻近的官能取代基时，因此形成如内酰胺、内酯、环状酸酐，还有通过闭环形成的缩醛、硫缩醛、醛缩胺作为例如保护基的情况。
“药学上可接受的阳离子盐或复合物”被用来定义这样的盐：碱金属盐(如钠和钾)、碱土金属盐(如钙或镁)、铝盐、铵盐和与有机胺形成的盐，这些有机胺如甲胺、二甲胺、三甲胺、乙胺、三乙胺、吗啉、N-Me-D-葡糖胺、N，N’-二(苯基甲基)-1，2-乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、乙二胺、N-甲基吗啉、哌啶、苄托品(N，N’-二苄基乙二胺)、胆碱、乙二胺、麦格鲁明(N-甲基葡糖胺)、苯乙苄胺(N-苄基苯乙胺)、二乙胺、哌嗪、三丁醇胺(2-氨基-2-羟基甲基-1，3-丙二醇)、普鲁卡因以及式-NRR’R”所示的胺，其中R、R’、R”独立地是氢、烷基或苄基。特别优选的盐是钠盐和钾盐。
“药学上可接受的盐或复合物”指如下定义的本发明化合物的盐或复合物，它们保留了所需的生物学活性。这些盐的例子包括但不限于与无机酸(如盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、硝酸等)形成的酸加成盐；与有机酸(如乙酸、草酸、酒石酸、琥珀酸、苹果酸、富马酸、马来酸、抗坏血酸、苯甲酸、单宁酸、4，4’-亚甲基双(3-羟基-2-萘酸)、海藻酸、聚谷氨酸、萘磺酸、萘二磺酸、和聚半乳糖醛酸)形成的酸加成盐。所述的化合物也可以本领域已知的药学上可接受的季盐给药，特别包括式-NRR’R”+Z-所示季铵盐，其中R、R’、R”独立地是氢、烷基或苄基、C1-C6-烷基、C2-C6-烯基、C2-C6-炔基、C1-C6-烷基芳基、C1-C6-烷基杂芳基、环烷基、杂环烷基，Z是抗衡离子，包括氯离子、溴离子、碘离子、-O-烷基离子、对甲苯磺酸离子、甲磺酸离子、磺酸离子、磷酸离子、或羧酸离子(如苯甲酸、琥珀酸、乙酸、乙醇酸、马来酸、苹果酸、富马酸、柠檬酸、酒石酸、抗坏血酸、肉桂酸、扁桃酸和二苯基乙酸离子)。
“药学活性衍生物”指任何化合物，当它们被给予接受者时能够直接或间接提供在此揭示的活性。
“对映体过量“(ee)指通过不对称合成，即涉及非外消旋的起始材料和/或试剂或包含至少一个对映选择性步骤的合成得到的产物，其中一个对映体的超量至少为52％ee。
本发明的通式(I)还包含其互变异构体、其几何异构体、其光学活性形式如对映体、非对映体及其外消旋体形式、以及其药学上可接受的盐。本发明优选的药学上可接受的盐是与药学上可接受的酸形成的酸加成盐，如盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐或硫酸氢盐、磷酸盐或磷酸氢盐、乙酸盐、苯甲酸盐、琥珀酸盐、富马酸盐、马来酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、葡糖酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐和对甲苯磺酸盐。
本发明的化合物可以E/Z异构体混合物得到或以基本上纯的E-异构体或Z-异构体得到。E/Z异构现象优选指将苯基与唑烷酮部分连接起来的乙烯基。在一个具体的实施方案中，式(I)化合物是Z-异构体。
本发明的第一方面包括式(I)化合物
以及其几何异构体、其对映体、非对映体及其外消旋体形式的光学活性形式、以及药学上可接受的盐和药学活性衍生物在制备治疗和/或预防自身免疫性疾病和/或炎性疾病、心血管疾病、神经退行性疾病、细菌或病毒感染、肾脏疾病、血小板聚集、癌症、排斥反应引起的移植并发症、移植物排斥或肺损伤等的药物上的应用。
在一个优选的实施方案中，这些化合物可用来治疗和/或预防自身免疫性疾病或炎性疾病如多发性硬化症、牛皮癣、类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮、炎性肠道疾病、肺部炎症、血栓形成或脑感染/炎症(如脑膜炎或脑炎)。
在另一个优选的实施方案中，这些化合物可用于治疗和/或预防神经退行性疾病，包括多发性硬化症、阿尔兹海默氏病、亨廷顿氏病、CNS创伤、中风或局部缺血性疾病。
在本发明特别优选的实施方案中，这些化合物可用于治疗和/或预防心血管疾病，如动脉硬化、心脏肥大、心肌细胞功能不全、血压升高或血管收缩。
在本发明的另一个特别优选的实施方案中，这些化合物可用于治疗和/或预防慢性阻塞性肺部疾病、过敏性休克纤维病变、牛皮癣、变态反应性疾病、哮喘、中风或局部缺血性疾病、局部缺血-再灌注、血小板聚集/活化、骨骼肌萎缩/肥大、癌组织中白细胞聚集、血管生成、侵袭性转移、特别是黑色素瘤、卡波济肉瘤、急性和慢性细菌和病毒感染、脓毒症、排斥反应引起的移植并发症、移植物排斥、肾小球硬化症、肾小球肾炎、进行性肾纤维病变、肺部或普通的肺气道炎症中内皮和上皮损伤。
式(I)中的取代基定义如下：
A是未取代的或取代的5-8元杂环基团或未取代的或取代的碳环基团。
所述的碳环基团可与未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的杂芳基、未取代的或取代的环烷基、或未取代的或取代的杂环烷基稠合。
这样的杂环或碳环基团包括芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基，包括苯基、菲基、环戊基、环己基、降冰片基、吡咯烷、哌啶、哌嗪、1-甲基哌嗪、吗啉、吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、吡唑基、1，2，3-三唑基、1，2，4-三唑基、1，2，3-噁二唑基、1，2，4-噁二唑基、1，2，5-噁二唑基、1，3，4-噁二唑基、1，3，4-三嗪基、1，2，3-三嗪基、苯并呋喃基、[2，3-二氢]苯并呋喃基、异苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并三唑基、异苯并噻吩基、吲哚基、异吲哚基、3H-吲哚基、苯并咪唑基、咪唑并[1，2-a]吡啶基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹嗪基、喹唑啉基、2，3-二氮杂萘基、喹喔啉基、噌啉基、1，5-二氮杂萘基、吡啶并[3，4-b]吡啶基、吡啶并[3，2-b]吡啶基、吡啶并[4，3-b]吡啶基、喹啉基、异喹啉基、四唑基、5，6，7，8-四氢喹啉基、5，6，7，8-四氢异喹啉基、嘌呤基、喋啶基、咔唑基、呫吨基或苯并喹啉基。
杂环或碳环基团A的其他例子包括未取代的或取代的间二氧杂环戊烯基、未取代的或取代的二氧杂环己烯基、未取代的或取代的二氢呋喃、未取代的或取代的(二氢)呋喃基、未取代的或取代的(二氢)噁嗪基、未取代的或取代的噁嗪酰基、未取代的或取代的吡啶基、未取代的或取代的异噁唑基、未取代的或取代的噁唑基、未取代的或取代的(二氢)萘基、未取代的或取代的嘧啶基、未取代的或取代的三唑基、未取代的或取代的咪唑基、未取代的或取代的吡嗪基、未取代的或取代的噻唑基、未取代的或取代的噻二唑基、未取代的或取代的噁二唑基。
X是S、O、或NH，优选S。
Y1和Y2各自独立地是S、O、或-NH，优选O。
Z是S、O，优选O。
R1选自H、CN、羧基、酰基、C1-C6-烷氧基、卤素、羟基、酰氧基、未取代的或取代的C1-C6-烷基羧基、未取代的或取代的C1-C6-烷基酰氧基、未取代的或取代的C1-C6-烷基烷氧基、烷氧基羰基、未取代的或取代的C1-C6-烷基烷氧基羰基、氨基羰基、未取代的或取代的C1-C6-烷基氨基羰基、酰基氨基、未取代的或取代的C1-C6-烷基酰基氨基、脲基、未取代的或取代的C1-C6-烷基脲基、氨基、未取代的或取代的C1-C6-烷基氨基、铵、磺酰氧基、未取代的或取代的C1-C6-烷基磺酰氧基、磺酰基、未取代的或取代的C1-C6-烷基磺酰基、亚磺酰基、未取代的或取代的C1-C6-烷基亚磺酰基、硫烷基、未取代的或取代的C1-C6-烷基硫烷基、磺酰基氨基、未取代的或取代的C1-C6-烷基磺酰基氨基或氨基甲酸酯。在一个具体的实施方案中R1是H。
R2选自H、卤素、酰基、氨基、未取代的或取代的C1-C6-烷基、未取代的或取代的C2-C6-烯基、未取代的或取代的C2-C6-炔基、未取代的或取代的C1-C6-烷基羧基、未取代的或取代的C1-C6-烷基酰基、未取代的或取代的C1-C6-烷基烷氧基羰基、未取代的或取代的C1-C6-烷基氨基羰基、未取代的或取代的C1-C6-烷基酰氧基、未取代的或取代的C1-C6-烷基酰基氨基、未取代的或取代的C1-C6-烷基脲基、未取代的或取代的C1-C6-烷基氨基甲酸酯、未取代的或取代的C1-C6-烷基氨基、未取代的或取代的C1-C6-烷基烷氧基、未取代的或取代的C1-C6-烷基硫烷基、未取代的或取代的C1-C6-烷基亚磺酰基、未取代的或取代的C1-C6-烷基磺酰基、未取代的或取代的C1-C6-烷基磺酰基氨基芳基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8-环烷基或杂环烷基、未取代的或取代的C1-C6-烷基芳基、未取代的或取代的C2-C6-烯基芳基、未取代的或取代的C2-C6-炔基芳基、羧基、氰基、羟基、C1-C6-烷氧基、硝基、酰基氨基、脲基、磺酰基氨基、硫烷基或磺酰基。
n是整数0、1或2，优选n是0或1。最优选n是0。
按照本发明的一个具体的实施方案，R1和R2都是H。
在本发明的再一个具体实施方案中，X是S，Y1和Y2都是0，R1和R2如上定义，n是0。
本发明的再一个特别优选的方面涉及式(Ia)、(Ib)、(Ic)和(Id)的噻唑烷二酮-乙烯基稠合的-苯衍生物在制备治疗和/或预防以下疾病的药物中的应用，这些疾病是：自身免疫性疾病和/或炎性疾病、心血管疾病、神经退行性疾病、细菌或病毒感染、肾脏疾病、血小板聚集、癌症、移植并发症、移植物排斥或肺损伤：
式(Ia)中，R1、R2、Y1、Z和n如上定义。
式(Ia)中G是未取代的或取代的C1-C5-亚烷基(如亚甲基、亚乙基、亚丙基等)或未取代的或取代的C1-C5-亚烯基(如次甲基(-CH＝)、-CH＝CH-基、亚丙烯基等)。
式(Ia)中W和V各自独立地选自O、S、-NR3，其中R3是H或未取代的或取代的C1-C6烷基，m和o各自独立地是0或1；o是1-4的整数，q是0-4的整数。
更优选的式(Ia)化合物是其中G是C1-C4亚烷基，因此得到式(Ib)的化合物(即p＝1、2、3或4，优选1或2)。
式(Ib)的一个特别亚组是具有式(Ic)的化合物，其中W、R1、Y1如上定义；特别是R1可以是未取代的或取代的C1-C4-烷基或未取代的或取代的C2-C6-烯基、羧基、氰基、C1-C4-烷氧基、硝基、酰基氨基、脲基。
式(Ia)的另一个特别亚组是这样的化合物，其中V、W、Y1都是0，因此提供了式(Id)所示的化合物。
在式(Ia)、(Ib)或(Id)的一个优选实施例中，n是0，m是1，p是1或2，o是0，q是1，R1和R2如上定义。
在式(Ia)、(Ib)或(Id)的另一个具体实施方案中，m是1，n是0，p是1或2，q是0，o是1，R1和R2如上定义，更优选R1是卤素或氢原子。
在式(Ia)、(Ib)或(Id)的又一个具体实施方案中，p是1或2，q是0，m是0，n是1，R1和R2如上定义。
本发明化合物适用于调节，主要是抑制磷酸肌醇3-激酶(PI3K)，特别是磷酸肌醇3-激酶(PI3Kγ)的活性。因此相信本发明的化合物也特别可用于治疗和/或预防由PI3K，特别是由PI3Kγ，介导的失调。所述的治疗涉及磷酸肌醇3-激酶的调节，特别是抑制或向下调节。
下列的化合物不包括在式(I)中：
R1是低级烷基或芳烷基，R2是H或卤素，化合物TE在JP55 045648中作为中间体公开，没有任何生物活性，JA在Journal of Medicinal Chemistry(药物化学杂志)(1998)，41(18)，3515-3529中有描述，在足爪肿胀试验中是无活性的。
本发明化合物特别包括以下的这些：
5-(1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-(1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基亚甲基)-2-硫代-1，3-噻唑烷-4-酮
5-(2，3-二氢-1，4-苯并二噁英-6-基亚甲基)1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-(2，3-二氢-1-苯并呋喃-5-基亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-[(7-甲氧基-1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基)亚甲基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-[(9，10-二氧代-9，10-二氢蒽-2-基)亚甲基]-1，3-噻唑烷-2，4二酮
(5-[(2，2-二氟-1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基)亚甲基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
(5Z)-5-(1，3-二氢-2-苯并呋喃-5-基亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-(1-苯并呋喃-5-基亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-[(4-甲基-3-氧代-3，4-二氢-2H-1，4-苯并噁嗪-6-基)亚甲基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-(1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基亚甲基-2-亚氨基-1，3-噻唑烷-4-酮
5-喹啉-6-基亚甲基-噻唑烷-2，4-二酮
5-喹啉-6-基亚甲基-2-硫代-噻唑烷-4-酮
2-亚氨基-5-喹啉-6-基亚甲基-噻唑烷-4-酮
5-(3-甲基-苯并[d]异噁唑-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
5-(4-苯基-喹唑啉-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
5-(4-二甲基氨基-喹唑啉-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
5-[(4-氨基-喹唑啉-6-基)亚甲基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-[(4-哌啶-1-基喹唑啉-6-基)亚甲基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-[(4-吗啉-4-基喹唑啉-6-基)亚甲基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-{[4-(苄基氨基)喹唑啉-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-{[4-(二乙基氨基)喹唑啉-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-({4-[(吡啶-2-基甲基)氨基]喹唑啉-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-({4-[(吡啶-3-基甲基)氨基]喹唑啉-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
1-{6-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]喹唑啉-4-基}哌啶-3-羧酸乙酯
1-{6-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]喹唑啉-4-基}哌啶-4-羧酸乙酯
1-{6-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]喹唑啉-4-基}-L-脯氨酸叔丁酯
5-{[4-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-{[4-(4-嘧啶-2-基哌嗪-1-基)喹唑啉-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-({4-[4-(4-氟苯基)哌啶-1-基]喹唑啉-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-{[4-(4-苄基哌啶-1-基)喹唑啉-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-({4-[4-(2-苯基乙基)哌啶-1-基]喹唑啉-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-{[4-(4-甲基哌啶-1-基)喹唑啉-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-{[4-(4-羟基哌啶-1-基)喹唑啉-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
1-[6-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)喹唑啉-4-基]-哌啶-4-羧酸
1[6-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)喹唑啉-4-基]-哌啶-3-羧酸
1-[6-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)喹唑啉-4-基]-吡咯烷-2-羧酸
5-(4-甲基氨基-喹唑啉-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
5-(4-甲氧基-喹唑啉-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
2-亚氨基-5-(4-甲基氨基-喹唑啉-6-基亚甲基)-噻唑烷-4-酮
2-亚氨基-5-(4-哌啶基-喹唑啉-6-基亚甲基)-噻唑烷-4-酮
2-亚氨基-5-(4-二甲基氨基-喹唑啉-6-基亚甲基)-噻唑烷-4-酮
5-(2-甲基-2H-苯并三唑-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
5-(3-甲基-3H-苯并三唑-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
5-(3-乙基-3H-苯并咪唑-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
5-{[1-(4苯基丁基)-1H-苯并咪唑-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-[(1-丙-2-炔-1-基-1H-苯并咪唑-6-基)亚甲基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-[(1-{2-[4-(三氟甲基)苯基]乙基}-1H-苯并咪唑-6-基)亚甲基]-1，3噻唑烷-2，4-二酮
5-({1-[2-(4-羟基苯基)乙基]-1H-苯并咪唑-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
4-{6-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1H-苯并咪唑-1-基}环己烷羧酸甲酯
5-({1-[2-(5-甲氧基-1H-吲哚-3-基)乙基]-1H-苯并咪唑-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4二酮
5-({1-[(1-甲基-1H-吡唑-4-基)甲基]-1H-苯并咪唑-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-({1-[2-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]-1H-苯并咪唑-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-({1-[2-(4-苯氧基苯基)乙基]-1H-苯并咪唑-6-基}亚甲基)1，3噻唑烷-2，4-二酮
5-({1-[4-(三氟甲基)苄基]-1H-苯并咪唑-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
4-{6-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1H-苯并咪唑-1-基}环己烷羧酸
5-[(1-异丁基-1H-苯并咪唑-6-基)亚甲基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-({1-[2-(1，3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基)乙基]-1H-苯并咪唑-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-({1-[2-(2-苯氧基苯基)乙基]-1H-苯并咪唑-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-{[1-(3，3-二苯基丙基)-1H-苯并咪唑-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-{[1-(2-甲氧基苄基)-1H-苯并咪唑-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-{[1-(3呋喃基甲基)1H-苯并咪唑-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-[1-(1-丙基-1H-苯并咪唑-6-基)亚甲基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-喹喔啉-6-基亚甲基-噻唑烷-2，4-二酮
5-喹喔啉-6-基亚甲基-2-硫代-噻唑烷-4-酮
2-亚氨基-5-喹喔啉-6-基亚甲基-噻唑烷-4-酮
5-苯并噻唑-6-基亚甲基-噻唑烷-2，4-二酮
5-(3-甲基-苯并呋喃-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
5-(2-溴-3-甲基-苯并呋喃-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
5-(3-溴-苯并呋喃-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
3-[5-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-苯并呋喃-3-基]-丙烯酸乙酯
3-[5-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-苯并呋喃-3-基]-丙烯酸
5-[3-(3-氧代-3-哌啶-1-基-丙烯基)-苯并呋喃-5-基亚甲基]-噻唑烷-2，4-二酮
1-((3-{5[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷5基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}-丙-2-烯酰基)脯氨酸甲酯
1-((3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}-丙-2-烯酰基)D-脯氨酸甲酯
(5-({3-[(3-氧代-3-吡咯烷-1-基丙-1-烯-1-基)-1-苯并呋喃-5-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-({3-[3-吗啉-4-基-3-氧代丙-1-烯-1-基]-1-苯并呋喃-5-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
1-(3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}-丙-2-烯酰基)-L-脯氨酸甲酯
N-环己基-3{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}-N-甲基丙烯酰胺
3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}-N-乙基-N-(2-羟基乙基)丙烯酰胺
N-环丁基-3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}-丙烯酰胺5-({3-[3-氮杂环丁烷-1-基-3-氧代丙-1-烯-1-基]-1-苯并呋喃-5-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-({3-[3-(1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)-3-氧代丙-1-烯-1-基]-1-苯并呋喃-5-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5-({3-[3-氮杂环庚烷-1-基-3-氧代丙-1-烯-1-基]-1-苯并呋喃-5-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}-N-哌啶-1-基丙烯酰胺
3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}-N-(吡啶-3-基甲基)丙烯酰胺
N-环己基-3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}丙烯酰胺5-({3-[3-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-氧代丙-1-烯-1-基]-1-苯并呋喃-5-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
N-环庚基-3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}丙烯酰胺5-({3-[3-(2，5-二氢-1H-吡咯-1-基)-3-氧代丙-1-烯-1-基]-1-苯并呋喃-5-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
N-环戊基-3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}丙烯酰胺
3-[5-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-苯并呋喃-3-基]-丙酸乙酯
3-[5-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-苯并呋喃-3-基]-丙酸
5-[3-(3-氧代-哌啶-1-基-丙基)-苯并呋喃-5-基]亚甲基]-噻唑烷-2，4-二酮
6-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-2，3-二氢-苯并[1，4]噁嗪-4-羧酸叔丁酯
5-(3，4-2H-二氢-苯并[1，4]噁嗪-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
5-(4-苯甲酰基-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
5-(4-乙酰基-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
6-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-苯并[1，4]噁嗪-4-羧酸叔丁酯
[6-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-3-氧代-2，3-二氢-苯并[1，4]噁嗪-4-基]乙酸甲酯N-苄基-2-[6-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-3-氧代-2，3-二氢-苯并[1，4]噁嗪-4-基]-乙酰胺
5-(4-丁基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
5-(4-苄基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
5-(2-氯-苯并呋喃-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
5-(3-氨基-苯并[d]异噁唑-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
5-(3-苯基乙炔基-苯并呋喃-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
5-苯并[1，2，5]噻二唑-5-基亚甲基-噻唑烷-2，4-二酮
5-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基亚甲基-噻唑烷-2，4-二酮
5-(2-甲基-苯并呋喃-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
5-(2-羧甲基-苯并呋喃-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
5-(3-溴-2-氟-2，3-二氢-苯并呋喃-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
5-(2-氟-苯并呋喃-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
本发明的另一个方面在于式(IIa)所示新颖的噻唑烷二酮-乙烯基稠合的-苯衍生物。
A选自：未取代的或取代的间二氧杂环戊烯、未取代的或取代的二噁英、未取代的或取代的二氢呋喃、未取代的或取代的(二氢)呋喃基、未取代的或取代的(二氢)噁嗪基、未取代的或取代的噁嗪酰基、未取代的或取代的吡啶基、未取代的或取代的异噁唑基、未取代的或取代的噁唑基、未取代的或取代的(二氢)萘基、未取代的或取代的嘧啶基、未取代的或取代的三唑基、未取代的或取代的咪唑基、未取代的或取代的吡嗪基、未取代的或取代的噻唑基、未取代的或取代的噻二唑基、未取代的或取代的噁二唑基。
R2选自H、卤素、酰基、氨基、未取代的或取代的C1-C6-烷基、未取代的或取代的C2-C6-烯基、未取代的或取代的C2-C6-炔基、未取代的或取代C1-C6-烷基羧基、未取代的或取代的C1-C6-烷基酰基、未取代的或取代的C1-C6-烷基烷氧基羰基、未取代的或取代的C1-C6-烷基氨基羰基、未取代的或取代的C1-C6-烷基酰氧基、未取代的或取代的C1-C6-烷基酰基氨基、未取代的或取代的C1-C6-烷基脲基、未取代的或取代的C1-C6-烷基氨基甲酸酯、未取代的或取代的C1-C6-烷基氨基、未取代的或取代的C1-C6-烷基烷氧基、未取代的或取代的C1-C6-烷基硫烷基、未取代的或取代的C1-C6-烷基亚磺酰基、未取代的或取代的C1-C6-烷基磺酰基、未取代的或取代的C1-C6-烷基磺酰基氨基芳基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8-环烷基或杂环烷基、未取代的或取代的C1-C6-烷基芳基、未取代的或取代的C2-C6-烯基芳基、未取代的或取代的C2-C6-炔基芳基、羧基、氰基、羟基、C1-C6-烷氧基、硝基、酰基氨基、脲基、磺酰基氨基、硫烷基、或磺酰基。
更具体的式(II)所示新颖的噻唑烷酮-乙烯基稠合的-苯衍生物
以及其几何异构体、其作为对映体、非对映体及其外消旋形式的光学活性形式、以及其药学上可接受的盐和药学活性衍生物，其中Y1、Z、R1、R2如上定义，n是0或1。
在一个具体的实施方案中，R1是未取代的或取代的C1-C6-烷基、未取代的或取代的C1-C6-烷基芳基、未取代的或取代的芳基、未取代的或取代的C3-C8-环烷基或杂环烷基、未取代的或取代的C1-C6-烷基芳基、未取代的或取代的C2-C6-烯基芳基、未取代的或取代的C2-C6-炔基芳基。
在本发明另一个优选的实施方案中，Y1是O。
本发明的再一个方面在于式(III)所示新颖的噻唑烷酮-乙烯基稠合的-苯衍生物
以及其几何异构体、其作为对映体、非对映体及其外消旋形式的光学活性形式、以及其药学上可接受的盐和药学活性衍生物，其中R1和R2如上定义(虚线代表任选地存在双键)。
再一个实施方案包含式(IV)、(V)和(VI)所示化合物；
R1选自氢、卤素、氰基、C1-C6-烷基、C1-C6-烷氧基、酰基、烷氧基羰基，R2如上定义。在一个具体的实施方案中，R2是氨基。
本发明的另一个方面是式(II)、(IIa)、(III)、(IV)、(V)或(VI)的化合物作为药物的用途。
本发明的再一个方面是药物组合物，它含有至少一种式(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)所示噻唑烷酮-乙烯基稠合的-苯衍生物及其药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
本发明的再一个方面是式(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)所示化合物在制备用于预防和/或治疗由PI3激酶特别是PI3激酶γ介导的疾病的药物中的用途。
具体的疾病包括：自身免疫性疾病和/或炎性疾病、心血管疾病、神经退行性疾病、细菌或病毒感染、肾脏疾病、血小板聚集、癌症、由排斥反应引起的移植并发症、移植物排斥或肺损伤。
在一个优选的实施方案中，这些化合物可用来治疗和/或预防自身免疫性疾病或炎性疾病如多发性硬化症、牛皮癣、类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮、炎性肠病、肺部炎症、血栓形成或脑感染/炎症(如脑膜炎或脑炎)。
在另一个优选的实施方案中，这些化合物可用于治疗和/或预防神经退行性疾病，包括多发性硬化症、阿尔兹海默氏病、亨廷顿氏病、CNS外伤、中风或局部缺血性疾病。
在本发明一个特别优选的实施方案中，这些化合物可用于治疗和/或预防心血管疾病，如动脉硬化、心脏肥大、心肌细胞功能不全、血压升高或血管收缩。
在本发明的另一个特别优选的实施方案中，这些化合物可用于治疗和/或预防慢性阻塞性肺部疾病、过敏性休克纤维化、牛皮癣、变态反应性疾病、哮喘、中风或局部缺血性疾病、缺血-再灌注、血小板聚集/活化、骨骼肌萎缩/肥大、癌组织中白细胞聚集、血管生成、侵袭性转移(特别是黑色素瘤)、卡波济肉瘤、急性和慢性细菌和病毒感染、脓毒症、排斥反应引起的移植并发症、移植物排斥、肾小球硬化症、肾小球肾炎、进行性肾纤维化、肺部或普通的肺气道炎症中内皮和上皮损伤。
按照本发明，式(II)、(IIa)、(III)、(IV)、(V)或(VI)所示化合物适用于调节，特别是抑制PI3激酶活性，更特别是抑制PI3激酶γ活性。
本发明的另一个目的是制备式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)或(Id)所示唑烷酮-乙烯基稠合的-苯衍生物的方法，以及制备式(II)、(II-a)、(III)、(IV)、(V)或(VI)所示噻唑烷酮-乙烯基稠合的-苯衍生物的方法。
本发明中示例的唑烷酮-乙烯基稠合的-苯衍生物可用以下的一般方法和程序从容易得到的起始材料进行制备。应该认识到，虽然其中给出了典型的或优选的实验条件(即反应温度、时间、试剂的摩尔数、溶剂等等)，但其它的实验条件也是可以使用的，除非另有说明。最佳反应条件因所用具体试剂或溶剂而异，但这样的条件可被本领域技术人员用常规的优化程序加以确定。
在以下各流程所列示的方法中，R1、R2、G、V、W、Y1、Y2、Z、m、n、o、p和q如上面说明书中所定义。
一般，通式(I)的唑烷酮-乙烯基稠合的-苯衍生物可通过几种合成方法使用溶液相和固相化学方案而获得(Brummond et al.，JOC，64，1723-1726(1999))或通过常规的方法或通过微波辅助技术获得。
流程1
流程2
在第一个步骤中，大约等摩尔量的醛反应物P1(P1a)和化合物2(特别是噻唑烷二酮或绕丹宁P3)在优选弱碱存在下加热，产生式(Ia)所示相应的烯。在该第一个步骤中，P1a可以用前体P1b和P1c代替，以便分别得到最终化合物(Ib)和(Ic)，如以上所说明的。
用以下流程3和4来说明本发明特别优选的工艺，其中式(II)和(III)的化合物可分别用上述相同的反应得到。
流程3
流程4
虽然该步骤可以在不存在溶剂的情况下在某一高得足够使反应混合物至少部分熔融的温度进行，但它优选在惰性溶剂存在下进行。优选的温度范围是约100℃-250℃，特别优选120℃-200℃。上述反应的溶剂的例子包括如二甲氧基甲烷、二甲苯、甲苯、邻氯苯等的溶剂。用于上述反应的合适的弱碱的例子包括弱酸(如(C1-C12)-烷基羧酸和苯甲酸)的碱金属和碱土金属盐、碱金属和碱土金属碳酸盐和碳酸氢盐(如碳酸钙、碳酸镁、碳酸氢钾)和仲胺(如哌啶、吗啉)以及叔胺(如吡啶、三乙胺、二异丙基乙基胺、N-甲基吗啉、N-乙基哌啶、N-甲基哌啶等)。特别优选的弱碱是乙酸钠或哌啶，因为它们经济而且有效。
在典型的这类反应中(Yietze et al.，“The Knoevenagel reaction”，p.341 ff.，Pergamon Press，Oxford 1991，Eds.：Trost BM，Fleming I.)，大约等摩尔量的醛起始材料P1a和其它起始化合物(如噻唑烷二酮)P3和0.5-1当量的哌啶在二甲氧基甲烷或类似的溶剂中混合，并在120-200℃之间加热，在约15min-3h内反应可基本上完成。所需的式(Ia)所示烯如果冷却后从反应混合物沉淀出来，可通过过滤分离，或者例如可通过与水混合然后过滤，以得到粗产物，如果需要，可用例如结晶或标准色谱法纯化。
或者，通常可将等摩尔量的噻唑烷二酮P3与醛P1a和摩尔过量(优选2-4倍过量)的无水乙酸钠混合，混合物在高得足以使混合物发生熔融的温度加热，在此温度下，反应于5-60min内基本上完成，获得式(Ia)所示化合物。
优选上述反应在在酸性介质(如乙酸)中在乙酸钠或β-丙氨酸存在下进行。
上述反应也可在微波作为热源的条件下进行。通常起始材料醛P1a和噻唑烷二酮P3以大约等摩尔量与0.5-1当量哌啶在二甲氧基甲烷或类似溶剂中混合，在140℃-240℃加热，在此温度下3-10min内反应基本上完成。
本发明化合物的药学上可接受的阳离子盐可通过使酸形式与适当的碱(通常是1当量)在共溶剂中反应而容易地制备。常用的碱是氢氧化钠、甲醇钠、乙醇钠、氢化钠、氢氧化钾、甲醇钾、氢氧化镁、氢氧化钙、双苄基乙二胺、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、麦格鲁明、苯乙苄胺、二乙胺、哌嗪和氨丁三醇。通过浓缩至干或通过加入非溶剂来分离盐。在某些情况下，使用一种所需的阳离子盐能在其中沉淀的溶剂，将酸的溶液与阳离子(乙基己酸钠、油酸镁)的溶液混合可制备盐，或者可通过浓缩并加入非溶剂来分离盐。
2，4-唑烷酮衍生物P3可从各个商业来源购得。式P1a的醛可通过各种已知的方法制备，例如从相应的羧酸烷酯或羧酸，通过氧化-还原反应，运用标准技术用氢化锂铝、二异丙基铝等将羧酸烷酯或羧酸还原为苄基醇，最后再通过温和的氧化，用如二氧化锰、铬酸、Dess-Martin试剂或Swern氧化，或在已知的从伯醇产生醛的条件下，将相应的苄基醇氧化为相应的醛。还有一个方法是用DIBAL在低温下或用其它本领域已知的方法直接将相应的羧酸烷酯或羧酸还原为醛。
流程5
制备合适的醛的另一种方法是用已知的方法(如DIBAL等)将腈部分选择性还原为相应的醛。另一个得到醛P1a的方法是用例如三叔丁氧基氢化锂铝将相应的酰氯选择性还原(ChaJS，Brown HC，JOC 1993，58，p.4732-34)。产生合适醛的另一个方法是相应的苯衍生物进行Friedel-Crafts型反应，其中上面流程5所示的底物P4与1，1-二氯甲基甲基醚在路易斯酸(如四氯化钛或三氯化铝或适合于该反应的其它任何路易斯酸)存在下进行反应。
按照本发明更优选的方法，如在文献中所叙述的(Petrov OI，Kalcheva VB，Antonova AT，Collect.Czech.Chem.Commun，62，p.494-7(1997))和下面流程6所述的方法，从P5开始通过如上述与1，1-二氯甲基甲基醚反应可以得到反应物P2。
流程6
按照本发明的另一个更优选的方法，如下面流程7所述，从P7开始，通过在镁或正丁基锂存在下与DMF反应，或通过本领域技术人员已知的任何其它方法，可以得到反应物P6。
流程7
按照本发明另一个更优选的方法，如下面的流程8所述的，从P9开始，通过在合适的亲电试剂R1-X存在下使正丁基锂或LDA反应，或用其它本领域技术人员已知的方法，可以得到反应物P6。该方法可用P8重复，以得到相应的P6。
流程8
同样，可用P9和合适的亲电试剂R1-X和R2-X在一锅反应中得到饱和的前体P6，如流程9所示。
流程9
如果上述的一般合成方法还不能用来得到式(I)化合物和/或合成式(I)化合物所需要的中间体，应使用本领域技术人员已知的合适的制备方法。一般，各个具体的式(I)化合物的合成路线取决于每个分子的具体取代基并取决于所需的中间体是否容易得到；这些因素是本领域技术人员所熟知的。
关于保护和脱保护的方法，见Philip J.Kocienski，in“Protecting Groups”，GeorgThieme Verlag Stuttgart，New York，1994和Theodora W.Greene and Peter GM Wuts in“Protective Groups in Organic Synthesis”，Wiley Interscience，3rd Edition 1999。
通过结晶从合适溶剂的蒸发可分离得到与溶剂分子缔合的本发明化合物。含有碱中心的本发明化合物的药学上可接受的酸加成盐可用常规的方法加以制备。例如，可用合适的酸(纯净的酸或溶解在合适溶剂中的酸)处理游离碱的溶液，通过过滤或真空蒸发反应溶剂来分离生成的盐。同样地可通过用合适的碱处理本发明的化合物而得到药学上可接受的碱加成盐。两种类型的盐可用离子交换树脂形成或互相转化。
当用作药物时，本发明的唑烷二酮-乙烯基稠合的-苯衍生物通常以药物组合物的形式给药。因此，包含本发明化合物和药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物也在本发明的范围内。本领域技术人员知晓全部这些适合于配制药物组合物的载体、稀释剂或赋形剂。
本发明化合物可与常规使用的助剂、载体、稀释剂或赋形剂一起放入药物组合物的剂型及其单位剂量中，其剂型可为固体(如药片或充填的胶囊)，或液体(如溶液、悬浮液、乳液、酏剂、或充填了这些的胶囊)用于口服应用；或者是灭菌的可注射溶液用于肠胃外给药(包括皮下给药)。这样的药物组合物和单位剂型可以常规的比例包含各成分，含有或不含有其它活性成分，而且这样的单位剂型可含有与所要使用的日剂量范围相当的任何适当有效量的活性成分。
含有本发明唑烷二酮-乙烯基稠合的-苯衍生物的药物组合物可用制药行业熟知的方法制备，包含至少一种活性化合物。一般，本发明化合物以药学有效量给药。实际给予的化合物的量一般由医生根据相关的情况决定，包括要治疗的疾病、选择的给药途径、给予的实际化合物、年龄、体重、每个病人的反应、病人症状的严重程度等等。
本发明药物组合物可通过多种途径给予，包括口服、直肠、透皮、皮下、静脉内、肌肉内和鼻内。口服给药的组合物可采用大液体溶液或悬浮液的形式，或大粉剂的形式。但是更为通常的，组合物以单位剂量的形式呈现，以利于精确给药。术语“单位剂型”指物理上分离的单位，适合为人或其它哺乳动物作为单一剂量使用，每单位含有计算好了能产生所需治疗效果的预定量的活性物质，以及合适的药物赋形剂。典型的单位剂型包括液体组合物的预充填的、预计量的安瓿或注射剂，或固体组合物的丸剂、片剂、胶囊等。在这样的组合物中，噻唑烷二酮-乙烯基稠合的-苯衍生物通常是小量组分(约0.1-50重量％或优选约1-40重量％)，其余的是各种赋形剂或载体以及有助于形成所需剂型的加工助剂。
适合于口服的液体形式可包括合适的水性或非水性赋形剂，含有缓冲剂、悬浮和分散剂、色料、调味剂等。固体形式可包括例如任何以下的成分或类似性质的化合物：粘合剂(如微晶纤维素、黄蓍胶或明胶)、赋形剂(如带淀粉或乳糖)、崩解剂(如海藻酸、Primogel、或玉米淀粉)、润滑剂(如硬脂酸镁)、助滑剂(如胶体二氧化硅)、甜味剂(如蔗糖或糖精)、或调味剂(如薄荷、水杨酸甲酯或橙味剂)。
可注射组合物通常基于灭菌的可注射盐水或磷酸盐缓冲的盐水或本领域已知的其它可注射的载体。如上所述，式(I)所示噻唑烷二酮-乙烯基稠合的-苯衍生物在这样的组合物中通常是小量成分，常常是在0.05-10重量％的范围，其余的是可注射的载体等。
上述用于口服或可注射组合物的成分只是代表性的。进一步的材料和加工技术等可参见Part 5 of Remington’s Pharmaceutical Sciences，20th Edition，2000，Marck PublishingCompany，Easton，Pennsylvania，结合在此引为参考。
本发明化合物可以持续释放的形式给药或从持续释放药物输送系统给药。代表性的持续释放材料的叙述也可见上述Remington’s Pharmaceutical Sciences。
以下本发明将要通过一些实施例加以说明，但这些实施例不应该被看成是限制本发明的范围。在实施例中使用以下缩写：min(分钟)、hr(小时)、g(克)、mmol(毫摩尔)、m.p.(熔点)、eq(当量)、mL(毫升)、μL(微升)、ACN(乙腈)、Boc(叔丁氧羰基)、Cbz(羧基苄基)、CDCl3(氘化氯仿)、cHex(环己烷)、dba(二亚苄基丙酮)、DCM(二氯甲烷)DEAD(偶氮二羧酸二乙酯)、DIC(二异丙基碳二亚胺)、DIEA(二异丙基乙胺)、DMAP(4-二甲基氨基吡啶)、DME(二甲氧基乙烷)、DMF(二甲基甲酰胺)、DMSO(二甲基亚砜)、DMSO-d6(氘化二甲基亚砜)、EDC(1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)、EtOAc(乙酸乙酯)、Et2O(乙醚)、Fmoc(9-芴基甲氧基羰基)、HOBt(1-羟基苯并三唑)、K2CO3(碳酸钾)、MgSO4(硫酸镁)、MsCl(甲基磺酰氯)、MTBE(叔丁基甲基醚)、NaH(氢化钠)、NaHCO3(碳酸氢钠)、nBuLi(正丁基锂)、PCC(氯铬酸吡啶盐)、PE(石油醚)、QCl(氯化四丁基铵)、rt(室温)、TBTU(O-苯并三唑基-N，N，N’N’-四甲基脲鎓-四氟硼酸盐)、TEA(三乙胺)、TFA(三氟乙酸)、THF(四氢呋喃)、TMOF(原甲酸三甲酯)、TMAD(N，N，N’N’-四甲基偶氮羧酰胺)、TosCl(对甲苯磺酰氯)。
实施例
下列化合物按照以下方法合成：
实施例 名称
1 5-(1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
2 5-(1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基亚甲基)-2-硫代-1，3-噻唑烷-4-酮
3 5-(2，3-二氢-1，4-苯并二噁英-6-基亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
4 5-(2，3-二氢-1-苯并呋喃-5-基亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
5 5-[(7-甲氧基-1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基)亚甲基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
6 5-[(9，10-二氧代-9，10-二氢蒽-2-基)亚甲基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
7 (5-[(2，2-二氟-1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基)亚甲基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
8 (5Z)-5-(1，3-二氢-2-苯并呋喃-5-基亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
9 5-(1-苯并呋喃-5-基亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
10 5-[(4-甲基-3-氧代-3，4-二氢-2H-1，4-苯并噁嗪-6-基)亚甲基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
11 5-(1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基亚甲基-2-亚氨基-1，3-噻唑烷-4-酮
12 5-喹啉-6-基亚甲基-噻唑烷-2，4-二酮
13 5-喹啉-6-基亚甲基-2-硫代-噻唑烷-4-酮
14 2-亚氨基-5-喹啉-6-基亚甲基-噻唑烷-4-酮
15 5-(3-甲基-苯并[d]异噁唑-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
16 5-(4-苯基-喹唑啉-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
17 5-(4-二甲基氨基-喹唑啉-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
18 5-[(4-氨基-喹唑啉-6-基)亚甲基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
19 5-[(4-哌啶-1-基喹唑啉-6-基)亚甲基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
20 5-[(4-吗啉-4-基喹唑啉-6-基)亚甲基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
21 5-{[4-(苄基氨基)喹唑啉-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
22 5-{[4-(二乙基氨基)喹唑啉-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
23 5-({4-[(吡啶-2-基甲基)氨基]喹唑啉-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
24 5-({4-[(吡啶-3-基甲基)氨基]喹唑啉-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
25 1-{6-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]喹唑啉-4-基}哌啶-3-羧酸乙酯
26 1-{6-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]喹唑啉-4-基}哌啶-4-羧酸乙酯
27 1-{6-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]喹唑啉-4-基}-L-脯氨酸叔丁酯
28 5-{[4-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-6-基]亚甲基}-1，3噻唑烷-2，4-二酮
29 5-{[4-(4-嘧啶-2-基哌嗪-1-基)喹唑啉-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
30 5-({4-[4-(4-氟苯基)哌啶-1-基]喹唑啉-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
31 5-{[4-(4-苄基哌啶-1-基)喹唑啉-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
32 5-({4-[4-(2-苯基乙基)哌啶-1-基]喹唑啉-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
33 5-{[4-(4-甲基哌啶-1-基)喹唑啉-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
34 5-{[4-(4-羟基哌啶-1-基)喹唑啉-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
35 1-[6-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)喹唑啉-4-基]-哌啶-4-羧酸
36 1-[6-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)喹唑啉-4-基]-哌啶-3-羧酸
37 1-[6-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)喹唑啉-4-基]-吡咯烷-2-羧酸
38 5-(4-甲基氨基-喹唑啉-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
39 5-(4-甲氧基-喹唑啉-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
40 2-亚氨基-5-(4-甲基氨基-喹唑啉-6-基亚甲基)-噻唑烷-4-酮
41 2-亚氨基-5-(4-哌啶基-喹唑啉-6-基亚甲基)-噻唑烷-4-酮
42 2-亚氨基-5-(4-二甲基氨基-喹唑啉-6-基亚甲基)-噻唑烷-4-酮
43 5-(2-甲基-2H-苯并三唑-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
44 5-(3-甲基-3H-苯并三唑-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
45 5-(3-乙基-3H-苯并咪唑-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
46 5-{[1-(4-苯基丁基)-1H-苯并咪唑-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
47 5-[(1-丙-2-炔-1-基-1H-苯并咪唑-6-基)亚甲基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
48 5-[(1-{2-[4-(三氟甲基)苯基]乙基}-1H-苯并咪唑-6-基)亚甲基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
49 5-({1-[2-(4-羟基苯基)乙基]-1H-苯并咪唑-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
50 4-{6-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1H-苯并咪唑-1-基}环己烷羧酸甲酯
51 5-({1-[2-(5-甲氧基-1H-吲哚-3-基)乙基]-1H-苯并咪唑-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
52 5-({1-[(1-甲基-1H-吡唑-4-基)甲基]-1H-苯并咪唑-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
53 5-({1-[2-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]-1H-苯并咪唑-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
54 5-({1-[2-(4-苯氧基苯基)乙基]-1H-苯并咪唑-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
55 5-({1-[4-(三氟甲基)苄基]-1H-苯并咪唑-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
56 4-{6-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1H-苯并咪唑-1-基}环己烷羧酸
57 5-[(1-异丁基-1H-苯并咪唑-6-基)亚甲基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
58 5-({1-[2-(1，3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基)乙基]-1H-苯并咪唑-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
59 5-({1-[2-(2-苯氧基苯基)乙基]-1H-苯并咪唑-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
60 5-{[1-(3，3-二苯基丙基)-1H-苯并咪唑-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
61 5-{[1-(2-甲氧基苄基)-1H-苯并咪唑-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
62 5-{[1-(3呋喃基甲基)-1H-苯并咪唑-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
63 5-[1-(1-丙基-1H-苯并咪唑-6-基)亚甲基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
64 5-喹喔啉-6-基亚甲基-噻唑烷-2，4-二酮
65 5-喹喔啉-6-基亚甲基-2-硫代-噻唑烷-4-酮
66 2-亚氨基-5-喹喔啉-6-基亚甲基-噻唑烷-4-酮
67 5-苯并噻唑-6-基亚甲基-噻唑烷-2，4-二酮
68 5-(3-甲基-苯并呋喃-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
69 5-(2-溴-3-甲基-苯并呋喃-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
70 5-(3-溴-苯并呋喃-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
71 3-[5-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-苯并呋喃-3-基]-丙烯酸乙酯
72 3-[5-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-苯并呋喃-3-基]-丙烯酸
73 5-[3-(3-氧代-3-哌啶-1-基-丙烯基)-苯并呋喃-5-基亚甲基]-噻唑烷-2，4-二酮
74 1-((3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}-丙-2-烯酰基)脯氨酸甲酯
75 1-((3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}-丙-2-烯酰基)-D-脯氨酸甲酯
76 (5-({3-[(3-氧代-3-吡咯烷-1-基丙-1-烯-1-基)-1-苯并呋喃-5-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
77 5-({3-[3-吗啉-4-基-3-氧代丙-1-烯-1-基]-1-苯并呋喃-5-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
78 1-(3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}-丙-2-烯酰基)-L-脯氨酸甲酯
79 N-环己基-3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}-N-甲基丙烯酰胺
80 3-{5[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}-N-乙基-N(2-羟基乙基)丙烯酰胺
81 N-环丁基-3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}-丙烯酰胺
82 5-({3-[3-氮杂环丁烷-1-基-3-氧代丙-1-烯-1-基]-1-苯并呋喃-5-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
83 5-({3-[3-(1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)-3-氧代丙-1-烯-1-基]-1-苯并呋喃-5-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
84 5-({3-[3-氮杂环庚烷-1-基-3-氧代丙-1-烯-1-基]-1-苯并呋喃-5-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
85 3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}-N-哌啶-1-基丙烯酰胺
86 3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}-N-(吡啶-3-基甲基)丙烯酰胺
87 N-环己基-3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}丙烯酰胺
88 5-({3-[3-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-氧代丙-1-烯-1-基]-1-苯并呋喃-5-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
89 N-环庚基-3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}丙烯酰胺
90 5-({3-[3-(2，5-二氢-1H-吡咯-1-基)-3-氧代丙-1-烯-1-基]-1-苯并呋喃-5-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮
91 N-环戊基-3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}丙烯酰胺
92 3-[5-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-苯并呋喃-3-基]-丙酸乙酯
93 3-[5-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-苯并呋喃-3-基]-丙酸
94 5-[3-(3-氧代-哌啶-1-基-丙基)-苯并呋喃-5-基]亚甲基]-噻唑烷-2，4-二酮
95 6-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-2，3-二氢-苯并[1，4]噁嗪-4-羧酸叔丁酯
96 5-(3，4-2H-二氢-苯并[1，4]噁嗪-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
97 5-(4-苯甲酰基-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
98 5-(4-乙酰基-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
99 6-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-苯并[1，4]噁嗪-4-羧酸叔丁酯
100 [6-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-3-氧代-2，3-二氢-苯并[1，4]噁嗪-4-基]乙酸甲酯
101 N-苄基-2-[6-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-3-氧代-2，3-二氢-苯并[1，4]噁嗪-4-基]-乙酰胺
102 5-(4-丁基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
103 5-(4-苄基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
104 5-(2-氯-苯并呋喃-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
105 5-(3-氨基-苯并[d]异噁唑-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
106 5-(3-苯基乙炔基-苯并呋喃-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
107 5-苯并[1，2，5]噻二唑-5-基亚甲基-噻唑烷-2，4-二酮
108 5-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基亚甲基-噻唑烷-2，4-二酮
109 5-(2-甲基-苯并呋喃-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
110 5-(2-羧甲基-苯并呋喃-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
111 5-(3-溴-2-氟-2，3-二氢-苯并呋喃-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
112 5-(2-氟-苯并呋喃-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
以下的中间体醛是可以购得的：2，2-二氟-1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-甲醛、1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-甲醛、1，4-苯并二噁烷-6-甲醛、9，10-二氧代-9，10-二氢-蒽-2-甲醛、2，3-二氢-苯并[b]呋喃-5-甲醛、3-甲氧基-4，5-亚甲基二氧苯甲醛。
噻唑烷二酮和绕丹宁是可以购得的。中间体醛可按照下述的方法合成。
下述实施例中的HPLC、NMR和MS数据是这样得到：HPLC：柱Waters Symmetry C8 50×4.6mm，条件：MeCN/H20，5-100％(8min)，最大图标230-400nm；质谱：PE-SCIEX API 150 EX(APCI和ESI)，LC/MS谱：Waters ZMD(ES)；1H NMR：Bruker DPX-300MHz。
如下进行纯化：制备性HPLC Waters Prep LC 4000系统，装备柱Prep Nova-Pak_HR C186μm60_，40×30mm(最高上柱量100mg)或40×300mm(最高上柱量1g)。所有纯化都用梯度MeCN/水0.09％TFA完成。
中间体1：5-甲酰基-1-苯并呋喃的制备
步骤I：2-甲酰基-4-溴苯氧基乙酸乙酯：
将5-溴水杨醛(50g，0.248mol)、溴乙酸乙酯(42g，0.248mol)和K2CO3(68g，0.49mol)在干燥DMF(200mL)中的混合物在RT搅拌12h。过滤反应混合物，滤液用水稀释。混合物用乙醚(4×200mL)提取，用盐水洗涤，浓缩，得到粗制的2-甲酰基-4-溴苯氧基乙酸乙酯(64g，90％)，为固体。
步骤II：4-溴-2-甲酰基苯氧基乙酸：
将2-甲酰基-4-溴苯氧基乙酸乙酯(60g，0.192mol)，LiOH(7.5g，0.31mol)，THF(250mL)和水(100mL)的混合物在RT搅拌24h。减压浓缩反应混合物，残留物用1.5N HCl酸化到pH＝2。过滤得到的固体沉淀，干燥，得到4-溴-2-甲酰基苯氧基乙酸(50g，94％)。
步骤III：5-溴-1-苯并呋喃：
向2-甲酰基4-溴苯氧基乙酸(50g，0.192mol)、乙酸钠(100g，1.21mol)在乙酸(250mL)中的混合物于100℃经3h分批加入乙酸酐(100mL)。反应混合物回流20h，蒸去溶剂，残渣用3N HCl(500mL)稀释，回流2h。然后减压浓缩反应混合物，产物用石油醚(3×200mL)提取。有机层用10％NaHCO3溶液洗涤，蒸发，得到5-溴-1-苯并呋喃(15g，40％)，为淡黄色液体。
步骤IV：5-甲酰基-1-苯并呋喃(实施例9，流程2中的P1a)
将5-溴-1-苯并呋喃(0.5g，)，Mg(0.92g，0.038mol)，碘(1颗晶体)在干燥的THF(2.5mL)中的混合物在N2气氛下回流30min。在碘颜色消失时，立即加入5-溴-1-苯并呋喃(4.5g)在25mL干燥THF中的溶液，再回流2h。然后将反应混合物冷却到-40℃，滴加干燥的DMF(3.6g)并缓慢温热到RT，为时12h。然后将反应混合物冷却到0℃，用3N HCl酸化到pH＝2，搅拌30min，然后用水(500mL)稀释，用乙酸乙酯(2×200mL)提取，用盐水洗涤，干燥。减压蒸发溶剂，用硅胶柱色谱提纯(石油醚/CH2Cl2)，得到5-甲酰基-1-苯并呋喃(2g，54％)，为液体。LC-MS：M/Z ESI：1.47min，147.34(M+1)。
中间体2：4-甲基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-甲醛的制备
步骤I：2-(N-甲基氨基)-苯酚
将1g苯并噁唑溶解在20mL THF中。在氮气和搅拌下加入0.9g NaBH4。悬浮液冷却到0℃，缓慢加入0.86mL乙酸溶解在5mL THF中的溶液，保持反应温度在5℃以下。反应在0℃搅拌30min并在RT再搅拌12h。反应混合物再冷却到0℃，小心加入50mL饱和NH4Cl溶液。各相分离，水层用EtOAc提取2次。合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤。蒸发溶剂后得到0.97g纯的2-(N-甲基氨基)-苯酚。
步骤II：4-甲基-4H-苯并[1，4]噁嗪-3-酮
将1g 2-(N-甲基氨基)-苯酚溶解在氯仿中，然后加入10mL饱和NaHCO3水溶液。剧烈搅拌下向该悬浮液中缓慢加入1g 2-氯乙酰氯在丙酮中的溶液。将反应混合物RT搅拌2h。各层分离。有机层用水洗涤，用Na2SO4干燥。蒸发溶剂后，用30mL DMF收集红色油，加入1g K2C03，所得浆料在70℃再加热2h。用TLC进行环化。加入200mL EtOAc，有机层用0.1NHCl洗涤3次，用盐水洗涤5次，用MgSO4干燥，过滤。减压蒸去EtOAc，得到1.45g纯的4-甲基-4H-苯并[1，4]噁嗪-3-酮。
步骤III：4-甲基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-甲醛
将1g AlCl3悬浮在10mL DCM中，加入0.5mL硝基甲烷以溶解AlCl3，溶液冷却到0℃。将4-甲基-4H-苯并[1，4]噁嗪-3-酮(0.5g，3.06mmol)溶解在DCM中，然后加入上述溶液中，在0℃搅拌15min。向该溶液中再加入0.36mL二-氯甲基-甲基醚在DCM中的溶液。反应混合物在0℃搅拌15min，在RT搅拌3h。将粗反应混合物倒在冰上，各层分离，有机相用NaHCO3和盐水洗涤。用MgSO4干燥，过滤，蒸发溶剂，得到0.43g粗产物。用快速色谱法提纯暗色的油，用EtOAC和环己烷作洗脱液，得到0.2g(37％)4-甲基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-甲醛，为无色固体。
HPLC：2.07min。LC-MS：M/Z ESI：1.31min，192，28(M+1)。
中间体3：4-甲基-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-7-甲醛的制备
步骤1：4-甲基-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪
将0.97g 2-(N-甲基氨基)-苯酚溶解在50mL丙酮中，然后加入2g K2CO3在水中的溶液。向该悬浮液中缓慢加入2.66g二溴乙烷在丙酮中的溶液。反应混合物回流搅拌22h。蒸发丙酮，加入200mL EtOAc，有机相用3×0.1N HCl和3x盐水洗涤。有机相用MgSO4干燥，过滤，减压蒸去EtOAc，得到1g纯的4-甲基-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪。
步骤II：4-甲基-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-7-甲醛
在氩气下将4-甲基-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪溶解在200μL DMF中。氩气下加入POCl3。在密封小瓶中90℃加热反应混合物75min。加入1mL NaAc在水中的溶液并搅拌，这时形成棕色的油。用DCM提取该油。有机相用盐水洗涤，干燥，蒸发到干，得到0.18g(76％)4-甲基-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-7-甲醛，为无色固体。
LC-MS：M/Z ESI：1.37min，178.35(M+1)。
中间体4：1，3-二氢异苯并呋喃-5-甲醛的制备
步骤I：(1，3-二氢-异苯并呋喃-5-基)-甲醇
室温下，在装有回流冷凝器的圆底烧瓶中加入1.0g 3-丙-2-炔氧基-丙炔和2.08g丙炔醇在10mL乙醇中的溶液，然后加入9.8g三(三苯膦)氯化铑(Wilkinson催化剂)。反应液加热到70℃，反应液的颜色很快变成黄色。r.t.搅拌1天后，TLC分析表明起始材料已经完全转化。蒸发溶剂，用DCM稀释，用水提取，用MgSO4干燥。褐色混合物用快速色谱法提纯，用8/2 cHex/AcOEt作为流动相，得到(1，3-二氢-异苯并呋喃-5基)-甲醇，为纯的无色固体(0.92g，60％)。
步骤II：1，3-二氢异苯并呋喃-5-甲醛
将(1，3-二氢-异苯并呋喃-5-基)-甲醇(440mg，2.9mmol)溶解于20mL DCM，加入1，1，1-三乙酰氧基-1，1-二氢-1，2-苯碘氧基(benziodoxol)-3(1H)-酮(Dess-Martin试剂)(1.3g，3.2mmol)，反应液在r.t.搅拌4h。用乙醚稀释反应混合物，用1N NaOH提取2次，用水提取2次，用MgSO4干燥。粗产物足够纯，无需进一步提纯即可使用。
HPLC：2.00min。LC-MS：M/Z ESI：1.50min，149.18(M+1)。
中间体5：喹啉-6-甲醛的制备
步骤I：喹啉-6-基甲醇
将5g喹啉-6-羧酸甲酯溶解在干燥的THF中。在氩气中于-20℃加入1M LiAlH4在THF中的溶液(2eq.)。在同样温度搅拌反应1h。缓慢加入异丙醇，粗产物通过硅藻土过滤，用DCM洗涤，浓缩，得到3.6g(85％)纯的醇。
HPLC：1.10min。LC-MS M/Z ESI：0.91min，160.43(M+1)。
步骤II：喹啉-6-甲醛
将2g喹啉-6-基甲醇溶于DCM。加入15g MnO2，将反应混合物搅拌5h。粗产物通过硅藻土过滤并用DCM充分洗涤，浓缩，得到1.85g(93％)纯的醛。
HPLC：0.8min。LC-MS ESI：1.07min，158.37(M+1)。1H NMR(DMSO-d6)δ10.19(s，1H)，9.06(t，J＝3Hz，1H)，8.6-8.66(m，2H)，8.15(s，2H)，7.68(dd，J＝3Hz，9Hz，1H)。
用合适的起始材料按照同样的方法合成以下中间体：
中间体6：3-甲基-苯并[d]异噁唑-5-甲醛的制备
HPLC：2.06min。LC-MS：M/Z ESI：1.26min，162.31(M+1)。1H NMR(DMSO-d6)δ10.10(s，1H)，8.52(s，1H)，8.16(d，J＝12Hz，1H)，8.15(s，2H)，7.90(d，J＝9Hz，1H)，2.63(s，3H)。
中间体7：4-氯-喹唑啉-6-羧酸甲酯的制备
步骤I：4-硝基-间苯二甲酸
将3-甲基-4-硝基苯甲酸(150g，0.825mol)、吡啶(1.5L)和水(1.5L)的混合物加热到回流。向热的反应混合物分批加入KMnO4(10mol)，回流72h。热反应混合物通过硅藻土过滤，用热水洗涤。滤液真空浓缩，残留物用水(750mL)稀释，在0℃用浓盐酸酸化。过滤得到的固体，用水洗涤，真空干燥，得到4-硝基-间苯二甲酸(98g，56％)。
TLC，氯仿/甲醇，7∶3，Rf＝0.2。
步骤II：4-氨基-间苯二甲酸
向4-硝基-间苯二甲酸(98g，0.457mol)的甲醇(5L)溶液中加入Pd/C(20％)，在RT氢化4h。反应混合物通过硅藻土过滤，滤液真空浓缩，得到4-氨基-间苯二甲酸固体(72g，87％)。
TLC，氯仿/甲醇，7∶3，Rf＝0.4。
步骤III：4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-6-羧酸
将4-氨基-间苯二甲酸(17g，0.093mol)和甲酰胺(85mL)的混合物在180℃加热5h。反应混合物冷却到RT加入丙酮。得到的固体沉淀搅拌2h，过滤，干燥，得到4-氧代-3，4-二氢喹唑啉-6-羧酸(11g，61％)。
TLC，氯仿/甲醇，8∶2，Rf＝0.25
步骤IV：4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-6-羧酸甲酯
于5℃向4-氧代-3，4-二氢喹唑啉-6-羧酸(24g，0.125mol)在干燥甲醇(800mL)中的溶液加入亚硫酰氯(37g)，在80℃回流5h。将反应混合物真空浓缩，用乙酸乙酯(250mL)收集粗产物。有机相用10％NaHCO3、水、盐水洗涤，干燥。真空蒸去溶剂，得到4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-6-羧酸甲酯(24g，92％)，为固体。
TLC，氯仿/甲醇，8∶2，Rf＝0.6
步骤V：4-氯喹唑啉-6-羧酸甲酯
将4-氧代-3，4-二氢喹啉-6-羧酸甲酯(12g，0.058mol)和磷酰氯(180mL)的混合物加热回流7h。蒸去过量的磷酰氯，粗产物溶解在乙酸乙酯(250mL)。有机相用10％NaHCO3水溶液、水、盐水洗涤，干燥。减压除去溶剂，粗产物用硅胶柱色谱(30％乙酸乙酯在石油醚中的溶液)提纯，得到4-氯喹唑啉-6-羧酸甲酯固体(4.5g，34％)。
TLC，石油醚/乙酸乙酯，1∶1，Rf＝0.65
LC-MS：M/Z ESI：1.50min，223.19(M+1)。1H NMR(DMSO-d6)δ 8.66(d，J＝1.9Hz，1H)，8.39(s，1H)，8.30(dd，J＝0.6Hz，8.5Hz，1H)，7.79(d，J＝8.5Hz，1H)，3.90(s，3H)
中间体8：4-甲氧基-喹唑啉-6-羧酸甲酯的制备
在1eq.DIEA存在下，将200mg 4-氯喹啉-6-羧酸甲酯在5mL MeOH于60℃搅拌24h。蒸去MeOH，粗产物溶解在EtOAc中，用NH4Cl洗涤，得到白色固体，其纯度足以用于下一步。
HPLC：2.3min，LC-MS M/Z ESI：1.19min，219.17(M+1)。
按照中间体8的合成制备以下中间体。
中间体9：4-甲基氨基-喹唑啉-6-羧酸甲酯的制备
HPLC：1.12min，LC-MS M/Z ESI：1.06min，218.31(M+1)。
中间体10：4-甲氧基-喹唑啉-6-甲醛的制备
按照中间体5的合成方法，从4-甲氧基-喹唑啉-6-羧酸甲酯开始制备本中间体。HPLC：1.41min，LC-MS M/Z ESI：1.24min，189.31(M+1)。
中间体11：4-甲基氨基-喹唑啉-6-甲醛的制备
按照中间体5的合成方法，从4-甲基氨基-喹唑啉-6-羧酸甲酯开始制备本中间体。HPLC：1.3min，LC-MS M/Z ESI：0.90min，188.34(M+1)。
中间体12：4-氯-喹唑啉-6-甲醛的制备
步骤I：4-氯-喹唑啉-6-基甲醇
于-25°向4-氯喹唑啉-6-羧酸甲酯(3.5g，0.015mol)在干THF(35mL)中的溶液加入DIBAL-H(4.4g，0.031mol)，在-25℃到RT搅拌2h。将反应混合物冷却到-10℃，用10％NaHCO3水溶液(9mL)终止反应。用乙酸乙酯(100mL)提取反应混合物，用水、盐水洗涤，干燥。真空蒸发溶剂，得到4-氯-喹唑啉-6-基甲醇(2g，66％)。
TLC，氯仿/甲醇，8∶2，Rf＝0.35
步骤II：4-氯-喹唑啉-6-甲醛
向4-氯-喹唑啉-6-基甲醇(3.5g，0.018mol)在干DCM(100mL)中的溶液加入Dess-Martin periodinane试剂(8.4g，0.019mol)，在RT搅拌30min。用10％NaHCO3水溶液(75mL)、水和盐水洗涤反应混合物，干燥。真空蒸发溶剂，得到4-氯-喹唑啉-6-甲醛(3g，88％)，为淡黄色固体。
TLC，氯仿/甲醇，9∶1，Rf＝0.6
中间体13：4-苯基-喹唑啉-6-甲醛的制备
将4-氯-喹唑啉-6-甲醛(50mg，0.26mmol)、Pd(PPh3)4(13mg，0.01mmol)、苯基硼酸(63mg，0.52mmol)和碳酸钠(饱和溶液，50μl)在甲苯中于100℃加热12h。蒸发溶剂后，残留物溶解在乙酸乙酯中，用盐水洗涤2次。有机相浓缩，粗产物用硅胶提纯，用DCM/EtOH 95∶5洗脱，得到50mg(82％)所需产物，纯度为85％。
HPLC：2.68min。LC-MS：M/Z ESI：1.25min，235.30(M+1)。
中间体14：4-二甲基氨基-喹唑啉-6-甲醛的制备
将4-氯-喹唑啉-6-甲醛(200mg，1mmol)溶解在10mL二噁烷中。向此溶液中加入二甲胺的水溶液(5eq.)。将混合物在r.t.搅拌2h。高真空蒸发溶剂和多余的胺，得到4-二甲基氨基-喹唑啉-6-甲醛，为黄色固体，不必提纯即可用在下一步(190mg，91％)。
HPLC：0.91min.LC-MS：M/Z ESI：1.23min，202.33(M+1)。1H NMR(DMSO-d6)δ10.19(s，1H)，8.70(s，1H)，8.50(d，J＝3Hz，1H)，8.15(dd，J＝3Hz，9Hz，1H)，7.88(d，J＝9Hz，1H)。用合适的胺作为亲核试剂，用类似的方法合成以下的中间体。No. 中间体M/ZESI：(M+1)15 4-哌啶-1-基-喹唑啉-6-甲醛242.2716 4-氨基-喹唑啉-6-甲醛174.1817 4-苄基氨基-喹唑啉-6-甲醛264.30 18 4-[(吡啶-2-基甲基)-氨基]-喹唑啉-6-甲醛 265.33 19 4-[(吡啶-3-基甲基)-氨基]-喹唑啉-6-甲醛 265.33 20 4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-喹唑啉-6-甲醛 257.31 21 4-二乙基氨基-喹唑啉-6-甲醛 230.28 22 4-吗啉-4-基-喹唑啉-6-甲醛 244.26 23 1-(6-甲酰基-喹唑啉-4-基)-哌啶-3-羧酸乙酯 314.36 24 1-(6-甲酰基-喹唑啉-4-基)-吡咯烷-2-羧酸叔丁酯 328.39 25 1-(6-甲酰基-喹唑啉-4-基)-哌啶-4-羧酸乙酯 314.36 26 4-(4-羟基-哌啶-1-基)-喹唑啉-6-甲醛 258.30 27 4-(4-甲基-哌啶-1-基)-喹唑啉-6-甲醛 256.32 28 4-(4-苯乙基-哌啶-1-基)-喹唑啉-6-甲醛 346.42 29 4-(4-苄基-哌啶-1-基)-喹唑啉-6-甲醛 332.40 30 4-[4-(4-氟-苯基)-哌啶-1-基]-喹唑啉-6-甲醛 336.38 31 4-(4-嘧啶-2-基-哌嗪-1-基)-喹唑啉-6-甲醛 321.36
中间体32：甲基-苯并三唑-5-羧酸甲酯的制备
在0℃，将1g苯并三唑-5-羧酸甲酯(5.64mmol)溶解在20mL DMF中。于0℃向该溶液中加入1eq.NaH(60％)。将混合物0℃搅拌30min，缓慢加入801mg(1eq.)碘甲烷，所得混合物在rt搅拌2h。加入EtOAc，用盐水和水充分洗涤有机层，用MgSO4干燥，过滤，得到1g粗甲基-苯并三唑-5-羧酸甲酯，为三个不同的区域异构体，用硅胶分离，以EtOAc/CH 3∶7为洗脱剂。
中间体32a：2-甲基-2H-苯并三唑-5-羧酸甲酯的制备
第一个洗脱组分是2-甲基-2H-苯并三唑-5-羧酸甲酯(250mg，22％)。
HPLC：2.32min。1H NMR(DMSO-d6)δ8.56(s，1H)，8.02(d，J＝9Hz，1H)，7.93(d，J＝9Hz，1H)，4.55(s，3H)，3.90(s，1H)。
中间体32b：3-甲基-3H-苯并三唑-5-羧酸甲酯的制备
第二个洗脱组分是3-甲基-3H-苯并三唑-5-羧酸甲酯(130mg，12％)。
HPLC：2.03min。1H NMR(DMSO-d6)δ8.56(s，1H)，8.13(d，J＝6Hz，1H)，7.93(d，J＝9Hz，1H)，4.39(s，3H)，3.92(s，3H)。
中间体32c：1-甲基-1H-苯并三唑-5-羧酸甲酯的制备
第三个洗脱组分是1-甲基-3H-苯并三唑-5-羧酸甲酯(135mg，12％)。
HPLC：2.03min。1H NMR(DMSO-d6)δ8.62(s，1H)，8.11(d，J＝9Hz，1H)，7.97(d，J＝9Hz，1H)，4.35(s，3H)，3.90(s，3H)。
中间体33：2-甲基-2H-苯并三唑-5-甲醛
用2-甲基-2H-苯并三唑-5-羧酸甲酯(中间体32a)为起点，按照中间体5的方法合成本中间体。
HPLC：1.88min。1H NMR(DMSO-d6)δ10.12(s，1H)，8.65(s，1H)，8.06(d，J＝9Hz，1H)，7.85(d，J＝9Hz，1H)，4.57(s，3H)。
中间体34：3-甲基-3H-苯并三唑-5-甲醛
用3-甲基-3H-苯并三唑-5-羧酸甲酯(中间体32b)为起点，按照中间体5的方法合成本中间体。
HPLC：1.49min。1H NMR(DMSO-d6)δ10.18(s，1H)，8.54(s，1H)，8.20(d，J＝9Hz，1H)，7.88(d，J＝9Hz，1H)，4.41(s，3H)。
中间体35：1-甲基-1H-苯并三唑-5-甲醛
用1-甲基-1H-苯并三唑-5-羧酸甲酯(中间体32c)为起点，按照中间体5的方法合成本中间体。
HPLC：1.49min。LC-MS：M/Z ESI：1.07min，162.32(M+1)。1H NMR(DMSO-d6)δ10.13(s，1H)，8.70(s，1H)，8.05(s，2H)，4.36(s，3H)。
中间体36：5-(4-氨基-3-乙基氨基-亚苄基)-噻唑烷-2，4-二酮
步骤I：3-氟-4-硝基苄基醇(Bioorg.Med.Chem.7，1999，2647)
30min内，向冰冷却的NaBH4(204mg，5.4mmol)在THF(10mL)中的悬浮液滴加3-氟-4-硝基苯甲酸(500mg，2.7mmol，1eq.)在THF(10mL)中的溶液。然后在30min内滴加BF3-Et2O(7.3mmol，2.7eq.)。溶液rt搅拌过夜。滴加1N HCl分解过量的NaBH4。真空蒸发溶剂，残留物溶解在DCM中，用水、盐水洗涤，有机层用MgSO4干燥，真空蒸发溶剂，得到425mg3-氟-4-硝基苄基醇(92％产率)。无需进一步提纯即可用于下一步。
1H NMRδ＝(400MHz，CDCl3)：7.97(m，1H)，7.28(m，1H)，7.18(m，1H)，4.75(m，2H)。
步骤II：3-氟-4-硝基苄基醛
将3-氟-4-硝基苄基醇(116mg，0.68mmol，1eq.)溶解在DCM(10mL)中，用MnO2(580mg，6.73mmol，10eq.)处理，悬浮液rt搅拌过夜。用硅藻土滤去MnO2，蒸发溶剂，得到相应的醛，为白色固体(66％产率)。
1H NMRδ＝(400MHz，CDCl3)：9.98(s，1H，CHO)，8.08(m，1H，ArH)，7.78(m，2H，ArH)。
步骤III：5-(3-氟-4-硝基-亚苄基)-噻唑烷-2，4-二酮(J.Med.Chem.37，2，1994，322)
将3-氟-4-硝基苄基醛(280mg，1.65mmol，1eq.)、噻唑烷二酮(193mg，1.65mmol，1eq.)和β-丙氨酸(95mg，1.1mmol，0.65eq.)在乙酸(5mL)中的混合物于100℃搅拌过夜。将冷却的反应混合物加到水中，搅拌1h。过滤沉淀的产物，用水洗涤，干燥，得到最终的产物，为黄色/橙色固体(77％产率)。
1H NMRδ＝(400MHz，(CD3)2CO)：8.0(m，1H，ArH)，7.68(m，2H，ArH)，7.53(s，1H，CH＝C)。
步骤IV：5-(3-乙基氨基-4-硝基-亚苄基)-噻唑烷-2，4-二酮.
将5-(3-氟-4-硝基-亚苄基)-噻唑烷-2，4-二酮(200mg，0.75mmol，1eq.)溶解在DME(6mL)和TEA(208μl，1.5mmol，2eq.)中，加入乙胺的溶液(2eq.)。反应混合物在60℃摇动过夜。真空蒸发溶剂，残留物溶解在乙酸乙酯中，用10％氯化铵水溶液洗涤，有机层用Na2SO4干燥，蒸发溶剂，得到相应的苯胺衍生物，为红色油。不必进一步提纯即可用于下一步。
步骤V：5-(3-乙基氨基-4-氨基-亚苄基)-噻唑烷-2，4-二酮
向搅拌中的5-(3-乙基氨基-4-硝基-亚苄基)-噻唑烷-2，4-二酮在THF中的溶液缓慢加入亚硫酸氢钠(3eq.)的水溶液，然后加入K2CO3水溶液。反应混合物回流过夜。真空蒸发THF，残留物用乙酸乙酯提取。有机层用Na2SO4干燥，蒸发溶剂，得到相应的苯胺衍生物，不必进一步提纯即可使用。
用合适的胺作为亲核试剂，如中间体36步骤IV所示，合成以下的中间体。将所得到的3-烷基氨基-4-硝基-亚苄基)-噻唑烷-2，4-二酮如中间体36步骤V所示进行还原，得到3-烷基氨基-4-氨基-亚苄基)-噻唑烷-2，4-二酮。 No.中间体M/Z ESI：(M+1) 375-[4-氨基-3-(4-苯基-丁基氨基)-亚苄基]-噻唑烷-2，4-二酮368.2 385-{4-氨基-3-[2-(4-三氟甲基-苯基)-乙基氨基]-亚苄基}-噻唑烷-2，4-二酮408.12 395-{4-氨基-3-[2-(4-羟基-苯基)-乙基氨基]-亚苄基}-356.13噻唑烷-2，4-二酮 404-[2-氨基-5-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-苯基氨基]环己烷羧酸甲酯376.35 415-{4-氨基-3-[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基]亚苄基}噻唑烷-2，4-二酮409.21 425-{4-氨基-3-[(1-甲基-1H-吡唑-4-基甲基)-氨基]亚苄基}噻唑烷-2，4-二酮331.1 435-{4-氨基-3-[2-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基氨基]亚苄基}噻唑烷-2，4-二酮400.21 445-[4-氨基-3-(4-三氟甲基-苄基氨基)亚苄基]噻唑烷-2，4-二酮394.15 454-[2-氨基-5-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-苯基氨基]环己烷羧酸362.17 465-(4-氨基-3-异丁基氨基-亚苄基)-噻唑烷-2，4-二酮292.22 475-[4-氨基-3-(2-苯并[1，3]间二氧杂环戊烯-4-基-乙基氨基)亚苄基]噻唑烷-2，4-二酮384.26 485-{4-氨基-3-[2-(2-苯氧基-苯基)-乙基氨基]亚苄基}噻唑烷-2，4-二酮432.28 495-[4-氨基-3-(3，3-二苯基-丙基氨基)亚苄基]噻唑烷-2，4-二酮430.27 505-(4-氨基-3-丙-2-炔基氨基)亚苄基]噻唑烷-2，4-二酮274.21 515-[4-氨基-3-(2-甲氧基-苄基氨基)亚苄基]噻唑烷-2，4-二酮356.23 525-{4-氨基-3-[(呋喃-3-基甲基)-氨基]亚苄基}噻唑烷-2，4-二酮316.21 535-(4-氨基-3-丙基氨基-亚苄基)-噻唑烷-2，4-二酮278.16 545-{4-氨基-3-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基氨基]亚苄基}噻唑烷-2，4-二酮432.23
中间体55：喹喔啉-6-甲醛
步骤I：喹喔啉-6-羰基氯
在一个1L三颈烧瓶中，放入喹喔啉-6-羧酸(20.2g)在500mL THF中的溶液。向该溶液缓慢加入亚硫酰氯(42mL，5eq.)。将反应混合物机械搅拌并加热回流，然后HPLC淬灭，用NH4OH终止反应。回流3h后，已经不存在起始材料，减压除去溶剂，用甲苯驱赶SOCl23次。将固体悬浮在100mL EtOAc中，过滤，得到23.47g米黄色固体。
HPLC：1.114min。1H NMR(DMSO-d6)δ9.01-7.40(m，5H)。
步骤I：喹喔啉-6-甲醛
在氩气下，在一个1L三颈烧瓶中放入喹喔啉-6-羰基氯在600mL DME中的溶液。在-78℃经1.5h向该溶液加入三叔丁氧基氢化铝锂(1eq.)。在该温度下保持反应5h。加入冰，用AcOEt稀释反应液，用硅藻土过滤。分开两层，有机层用饱和NaHCO3洗涤，蒸发溶剂，得到喹喔啉-6-甲醛(73％产率)，为黄色固体。
HPLC：1.49min。LC-MS M/Z ESI：0.81min.159.37(M+1)。1H NMR(CDCl3)δ10.28(s，1H)，8.97(s，2H)，8.61(s，1H)，8.27(q，6Hz，9Hz，2H)。
中间体56：苯并噻唑-6-甲醛.
从苯并噻唑-6-羧酸开始，用中间体55的合成方法，合成该中间体。
HPLC：1.92min。LC-MS M/Z ESI：0.97min.164.27(M+1)。1H NMR(CDCl3)δ10.1(s，1H)，9.60(s，1H)，8.60(s，1H)，8.20(m，1H)，8.10(d，1H)。
中间体57：3-甲基-苯并呋喃-5-甲醛
用2-乙酰基-4-溴苯氧基乙酸乙酯作为起始材料，通过与中间体1相同的路线，得到本中间体。
LC-MS M/Z ESI：1.55min.161.34(M+1)。1H NMR(DMSO-d6)δ10.1(s，1H)，8.21(d，J＝1.5Hz，1H)，7.92(d，J＝1.3Hz，1H)，7.88-7.84(dd，J＝1.6Hz，1H)，7.73-7.71(d，J＝8.5，1H)，2.25(s，3H)。
中间体58：3-溴-苯并呋喃-5-甲醛
步骤I：2，3-二溴-2，3-二氢苯并呋喃-5-甲醛
将中间体1(2g，13.7mmol)溶解在10mL CHCl3中，冷却到-10℃。向该溶液中加入溴在CHCl3的溶液(1.55eq.，c＝4.162mol/L)。反应混合物转为暗色，在1h内达到rt。HPLC表明溴已经完全加成。减压除去溶剂和余下的溴，得到微红色的油(4.1g，90％)，不必进一步提纯，用于下一步。
HPLC：3.43min。
步骤II：3-溴-1-苯并呋喃-5-甲醛
向2，3-二溴-2，3-二氢-1-苯并呋喃-5-甲醛(4.1g)的干燥乙醇(15mL)溶液加入KOH(2.2eq.)的干燥乙醇(14mL)溶液，在70℃回流1h。冷却反应混合物，用水稀释，用EtOAc(3×50mL)提取。有机层用水、盐水洗涤，干燥，真空除去溶剂，残留物用快速色谱法提纯(石油醚/EtOAc 99.5∶0.5)，得到标题化合物，为淡黄色固体(2.91g，(80％纯度)，产率78％)。
HPLC：3.35min。1H NMR(DMSO-d6)δ10.12(s，1H)，8.47(s，1H)，8.14(d，J＝1.5Hz，1H)，7.97(dd，J＝8.6，1.5Hz，1H)，7.87(d，J＝8.6，1H)。
中间体59：3-苯基乙炔基-苯并呋喃-5-甲醛
在干燥的烧瓶中将3-溴-1-苯并呋喃-5-甲醛(16，4.4mmol)溶解在无水THF(50mL)中。在氩气下向该溶液加入二(三苯膦)氯化钯(II)(160mg，0.2mmol)、TEA(2.81mL，5eq.)、CuI(40mg，0.2mmol)和苯基乙炔(897mg，8.8mmol)。反应液在55℃加热2天。粗产物通过硅藻土过滤，并用硅胶提纯，用环己烷-乙酸乙酯(7-3)洗脱，得到680mg(产率56％)。
HPLC：4.71min。1H NMR(DMSO-d6)δ10.14(s，1H)，8.64(s，1H)，8.38(s，1H)，7.97(dd，J＝1.5Hz，8.3Hz，，1H)，7.90(d，J＝8.6，1H)，7.65(m，2H)，7.46(m，3H)。
中间体60：3-(5-甲酰基-苯并呋喃-3-基)-丙烯酸乙酯
在封管中，将3-溴-1-苯并呋喃-5-甲醛(500mg，2.22mmol)溶解在7mL ACN中。向该溶液中加入PPh3(1.16g，4.44mmol)、乙酸钯(II)(500mg，2.2mmol)、Et3N(0.73mL，5.55mmol)，最后加入丙烯酸乙酯(2.41mL，22mmol)。密封反应管，120℃加热1h。在硅藻土上过滤粗产物以除去无机杂质，蒸发溶剂，粗产物用硅胶色谱提纯，用环己烷-AcOEt 95-5到50-50洗脱，得到淡黄色固体(400mg，产率42％)。
HPLC：3.69min。1H NMR(DMSO-d6)δ10.15(s，1H)，8.70(s，2H)，7.97(d，J＝9Hz，1H)，7.88(s，1H)，7.82(s，1H)，6.76(d，J＝15Hz，1H)，4.23(q，J＝6Hz，12Hz，2H)，1.28(t，J＝9Hz，3H)。
中间体61：2，3-二氢-苯并[1，4]噁嗪-4，6-二羧酸4-叔丁酯6-甲酯
步骤I：3-氨基-4-羟基-苯甲酸甲酯
向一个含有3-硝基-4-羟基苯甲酸甲酯(43g，218mmol)和MeOH(860mL，20体积)的2000mL三颈烧瓶中加入钯/碳水悬液(2g在10mL水中)。于搅拌下一次加入甲酸铵(68.76g，5eq.)。2-3min后观察到沉淀，温度从20℃升高到30℃。用冰浴把反应混合物冷却到20℃，并在此温度搅拌40min直到反应完成(不再呈黄色)。在硅胶塞上过滤反应混合物，用MeOH洗涤，滤液真空浓缩，得到绿色油，溶解在乙酸乙酯(400mL)中。有机相用水洗涤2次，用MgSO4干燥，过滤，浓缩，得到奶油状固体31.35g(86％)。
LC-MS：M/Z ESI：0.81min，168.37(M+1)。
步骤II：3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-羧酸甲酯*盐酸盐
在N2下，向一个含3-氨基-4-羟基-苯甲酸甲酯(31.35g，187mmol)和无水DMF(630mL，20体积)的2000mL三颈烧瓶中于RT下一次加入K2CO3(103g，4eq.)，接着一次加入1，2-二溴乙烷(65mL，4eq.)。反应混合物在70℃搅拌12h。使温度冷却到RT，加入1N HCl至pH＝8，用乙醚(3*200mL)提取。有机相用水(2*200mL)洗涤，MgSO4干燥，浓缩，得到带固体的棕红色油，将其溶解于乙醚(450mL)和THF(50mL)中，过滤除去白色固体。向滤液中加入1N HCl，加入乙醚(130mL)，悬浮液RT搅拌5min，过滤，得到27.6g粗产物。水相再用乙酸乙酯提取，又得到6.23g产物。合并的组分(32g)用EtOH(420mL，13体积)重结晶，过滤，干燥，得到白色粉末(19.47g(16.37g游离碱))，产率＝40％。
HPLC：1.954min。LC-MS ESI：1.27min，194.45(M+1)。
步骤III：2，3-二氢-苯并[1，4]噁嗪-4，6-二羧酸4-叔丁酯6-甲酯
在N2下，向一个含3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-羧酸甲酯*盐酸盐THF(145mL，10体积)悬浮液500mL三颈烧瓶中于RT下一次加入DIEA(27mL，2.5eq.)，观察到部分溶解。一次加入Boc酐(16.4g，1.2eq.)，反应液65℃搅拌5天。在此期间分几次小量加入0.2eq.Boc2O和DIEA。真空除去THF，残留物溶解在150mL DCM中。有机相用饱和NaHCO3然后用盐水溶液洗涤。MgSO4干燥，过滤后，真空除去挥发物，残留物用EtOH(80mL)重结晶，得到奶油状结晶(14.8g，76％)。
HPLC：4.038min。1H NMR(CDCl3)δ8.49(s，1H)，7.68(dd，J＝3Hz，9Hz，1H)，6.89(d，J＝9Hz，1H)，4.30(q，J＝3Hz，9Hz，2H)，3.89(m，5H)，1.62(s，9H)。
中间体62：6-甲酰基-2，3-二氢苯并[1，4]噁嗪-4-羧酸叔丁酯
按照中间体5所述方法，通过氧化-还原得到本中间体。
HPLC：3.727min。LC-MS ESI：1.81min，264.34(M+1)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.83(s，1H)，8.35(s，1H)，7.53(d，J＝6Hz，1H)，7.05(d，J＝9Hz，1H)，4.31(t，J＝3Hz，，2H)，3.83(t，J＝6Hz，2H)，1.50(s，9H)。
中间体63：6-甲酰基-苯并[1，4]噁嗪-4-羧酸叔丁酯
步骤I：2，3-二溴-2，3-二氢-苯并[1，4]噁嗪-4，6-二羧酸4-叔丁酯6-甲酯
向2，3-二氢-苯并[1，4]噁嗪-4，6-二羧酸4-叔丁酯6-甲酯(500mg，1.7mmol)在干四氯化碳(20mL)溶液中加入N-溴琥珀酰亚胺(667mg，3.75mmol)和催化量的过氧化苯甲酰。将所得混合物搅拌并用灯泡(100W)加热回流45min。冷却混合物，滤去琥珀酰亚胺。滤液蒸发，得到油(767mg，99％)，用于下一步已经足够纯。
HPLC：3.978min。
步骤II：苯并[1，4]噁嗪-4，6-二羧酸4-叔丁酯6-甲酯
将上个步骤得到的2，3-二溴-2，3-二氢-苯并[1，4]噁嗪-4，6-二羧酸4-叔丁酯6-甲酯(767mg，1.7mmol)在丙酮(14mL)中与NaI(1.27g，8.5mmol)一起RT搅拌2h。除去溶剂，加入EtOAc、水和1M硫代硫酸钠。分离两相后，有机相用盐水洗涤。蒸发溶剂，粗产物用硅胶提纯，用CH/EtOAc 7∶3洗脱，得到无色油(456mg，92％)。
HPLC：4.386min。
步骤III：6-羟基甲基-苯并[1，4]噁嗪-4-羧酸叔丁酯
步骤IV：6-甲酰基-苯并[1，4]噁嗪-4羧酸叔丁酯
步骤III和IV按照中间体5合成方法进行。
HPLC：3.388min。
中间体64：(6-甲酰基-3-氧代-2，3-二氢-苯并[1，4]噁嗪-4-基)乙酸甲酯
步骤I：3-氨基-4-羟基苯甲酸甲酯
向3-氨基-4-羟基苯甲酸(100g，0.65mmol)的甲醇(1.5L)溶液中于5-10℃搅拌下滴加亚硫酰氯(233g，1.96mmol)，然后在65℃回流16h。蒸馏过量的亚硫酰氯和甲醇，粗产物溶解在乙酸乙酯(500mL)中。有机相用5％NaHCO3水溶液、水、盐水洗涤，干燥。真空除去溶剂，得到3-氨基-4-羟基苯甲酸甲酯(105g，95％)。
步骤II：甲基-3-氧代-3，4-二氢-2H-1，4-苯并噁嗪-6-羧酸甲酯
搅拌下向3-氨基-4-羟基苯甲酸甲酯(105g，0.62mol)和苄基三乙基氯化铵(142g，0.62mol)在干燥的CHCl3(1.5L)中的混合物中加入NaHCO3(211g，2.5mol)。将反应混合物冷却到-5℃，在相同温度经1.5h加入氯乙酰氯(85g，0.75mol)在干燥CHCl3(350mL)中的溶液。然后将反应混合物加热到55℃，16h。真空蒸发溶剂，加入水(3L)，过滤固体。将固体产物干燥，用乙醇重结晶，得到3-氧代-3，4-二氢-2H-1，4-苯并噁嗪-6-羧酸甲酯(108g，83％)。
步骤III：6-(羟基甲基)-2H-1，4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
将3-氧代-3，4-二氢-2H-1，4-苯并噁嗪-6-羧酸甲酯(30g，0.145mol)在干燥CH2Cl2(500mL)中的溶液冷却到-78℃，经45min加入DIBAL-H(51g，0.36mol)，然后在同样温度搅拌14h。用1.5N HCl终止反应，过滤固体产物，真空干燥，得到6-(羟基甲基)-2H-1，4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(18g，69％)。
步骤IV：TBDMS-6-(羟基甲基)-2H-1，4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
向6-(羟基甲基)-2H-1，4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(18g，0.10mol)的干燥DMF(250mL)溶液中加入咪唑(13.7g，0.2mol)，在0℃搅拌30min。向上述混合物中分批加入TBDMSiCl(23g，0.15mol)，RT搅拌4h。用水稀释反应混合物，过滤得到的固体，真空干燥，得到TBDMS-6-(羟基甲基)-2H-1，4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(24.5g，83％)。
步骤V：[6-(羟基甲基)-3-氧代-2，3-二氢-4H-1，4-苯并噁嗪-4-基]乙酸甲酯
于0℃搅拌下，向NaH(0.3g，0.01mol)在干燥DMF(15mL)中的悬浮液中加入TBDMS-6-(羟基甲基)-2H-1，4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(2g，0.0068mol)，RT搅拌2h。将反应混合物冷却到0℃，加入氯乙酸甲酯(1g，0.0088mol)，在RT搅拌12h。将反应混合物再冷却到0℃，加入50mL 1.5N HCl溶液，RT搅拌12h。反应混合物用水(200mL)稀释，用乙酸乙酯(3×150mL)提取。合并的有机层用10％NaHCO3水溶液、盐水洗涤，干燥，真空蒸发溶剂，粗产物用硅胶柱色谱提纯(CHCl3/甲醇，99.5∶0.5)，得到[6-(羟基甲基)-3-氧代-2，3-二氢-4H-1，4-苯并噁嗪-4-基]乙酸甲酯(1.2g，70％)。
步骤VI：[6-(甲酰基)-3-氧代-2，3-二氢-4H-1，4-苯并噁嗪-4-基]乙酸甲酯
将PCC(4.2g，0.019mol)和硅藻土(4g)在干燥CH2Cl2(100mL)中的混合物冷却到0℃，在N2气下缓慢加入[6-(羟基甲基)-3-氧代-2，3-二氢-4H-1，4-苯并噁嗪-4-基]乙酸甲酯(1.2g，0.0048mol)在CH2Cl2(30mL)中的溶液。将反应混合物RT搅拌2h，通过硅藻土，用CH2Cl2(50mL)洗涤，浓缩，得到粗产物，用硅胶提纯，得到1.05g(87％)。
LC-MS ESI：1.15min.250.41(M+1)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.88(s，1H)，7.65-7.60(m，2H)，7.24(d，J＝8.1Hz，1H)，4.85(d，J＝9.9Hz，，4H)，3.71(s，3H)。
中间体65：4-丁基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-甲醛
按照中间体2的合成方法合成本中间体。总产率33％。
LC-MS ESI：1.60min，234.35(M+1)。1H NMR(DMSO-d6)δ7.66(d，J＝0.7Hz，1H)，7.58(dd，J＝1.7Hz，8.1Hz，1H)，7.18(d，J＝8.2Hz，，1H)，4.77(s，2H)，3.96(t，J＝7.3Hz，1H)，1.671-1.512(m，3H)，1.97-1.27(m，3H)，0.91(t，J＝7.3Hz，3H)。
中间体66：4-苄基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-甲醛
按照中间体2的合成方法合成本中间体。总产率29％。
1H NMR(DMSO-d6)δ9.78(s，1H)，7.58(dd，J＝1.5Hz，7.9Hz，1H)，7.47(d，J＝1.9Hz，1H)，7.40-7.18(m，6H)，5.22(s，2H)，4.95(s，2H)，3.3(d，J＝7.2Hz，1H)。
中间体67：2-氯-5-[1，3]二噁烷-2-基-苯并呋喃
步骤I：5-[1，3]二噁烷-2-基-苯并呋喃
将苯并呋喃-5甲醛(150mg，1.03mmol)、乙二醇(230μl，4eq.)、原甲酸三甲酯(123μl，1.1eq.)和三溴化四丁基铵(49mg，0.1eq.)的混合物在RT搅拌过夜。用TLC可以检测到一些起始材料。但是，把反应混合物倒在饱和NaHCO3溶液中，用乙酸乙酯提取产物。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到粗产物。用快速色谱法提纯，用环己烷/乙酸乙酯20∶0.75洗脱，得到标题化合物，产率36％(70mg)。
(pp79-99)
LC-MS：M/Z ESI：1.51min，191.30(M+1)。
步骤II：2-氯-5-[1，3]二噁烷-2-基-苯并呋喃
将5-[1，3]二噁烷-2-基-苯并呋喃(50mg，0.26mmol)溶解在THF(2mL)中，溶液冷却到-78℃。滴加丁基锂(180μL，1.1mmol)。混合物在25℃搅拌30min。然后将反应混合物冷却到-78℃，滴加NCS(39mg，1.1eq.)在1mL THF中的溶液。-78℃经过1.5h后，只能检测出少量的起始材料。将温度缓慢上升到室温过夜。向混合物中加入水和乙酸乙酯，提取水相3次。合并的有机相用MgSO4干燥，过滤，浓缩，得到2-氯-5-[1，3]二噁烷-2-基-苯并呋喃(48.1mg，81％)，用于下一个步骤已足够纯。
LC-MS：M/Z ESI：1.77min，225.23(M+1)。
中间体68：3-氨基-苯并[d]异噁唑-5-甲醛
Kaiser肟树脂(Novabiochem 01-64-0188)(250mg)用DCM和THF洗涤(3次5min)，加入2mL THF，接着在r.t.加入300μL叔丁醇钾(1M在THF中，1.2eq.)。树脂变成橙色，在Quest210TM中摇动15min。加入2-氟-5-甲酰基-苄腈(75mg，2eq.)在1mL THF中的溶液。反应液在55℃加热12h。用DCM、MeOH、水(2×5min)和MeOH(4×5min)洗涤树脂，在40℃用氩气流将树脂干燥30min，然后切割。
这样干燥的树脂用TFA/5N HCl 4∶1(2.5mL)在55℃处理2h。溶液收集在20mL小瓶中，树脂用4mL DCM洗涤2次。所收集的级份用Genevac HT4蒸发到干，得到37mg(92％)纯的3-氨基-苯并[d]异噁唑-5-甲醛。
HPLC：1.47min。LC-MS：M/Z ESI：0.82min，163.26(M+1)。
中间体69：4-哌啶-1-基-喹唑啉-6-羧酸甲酯
按照中间体8的合成方法，从4-氯-喹唑啉-6-羧酸甲酯(中间体7)开始，制备该中间体。
HPLC：1.81min。LC-MS：M/Z ESI：1.78min，272.32(M+1)。
中间体70：4-哌啶-1-基-喹唑啉-6-甲醛
按照中间体5的合成方法，从4-哌啶-喹唑啉-6-羧酸甲酯(中间体71)开始，制备该中间体。
HPLC：1.36min。LC-MS：M/Z ESI：1.40min，242.32(M+1)。
中间体71：3-(5-甲酰基-苯并呋喃-3-基)-丙酸乙酯
在钯/碳和氩气存在下将100mg的3-(5-甲酰基-苯并呋喃-3-基)丙烯酸乙酯(中间体62)溶解在乙酸乙酯中。将氢气球与它连接，进行氢化12h。过滤除去钯，蒸发溶剂，得到纯的标题化合物(80mg，80％)。
HPLC：3.53min。LC-MS M/Z ESI：1.68min，247.25(M+1)。
中间体72：2-甲基-5-[1，3]二噁烷-2-基-苯并呋喃
将5-[1，3]二噁烷-2-基-苯并呋喃(50mg，0.26mmol)溶解在THF(2mL)中，溶液冷却到-78℃。滴加丁基锂(180μL，1.1eq.)。混合物在25℃搅拌30min，然后冷却到-78℃，滴加碘甲烷(18.1μL，1.1eq.)在1mL THF中的溶液。温度缓慢上升到室温过夜。尽管还检测出一些起始材料，向混合物中加入水和乙酸乙酯，提取水相3次。合并的有机相用MgSO4干燥，过滤，浓缩，得到2-甲基-5-[1，3]二噁烷-2-基-苯并呋喃(41.2mg，70％)，用于下一个步骤已足够纯。
LC-MS：M/Z ESI：1.71min，205.34(M+1)。
中间体73：5-[1，3]二噁戊烷-2-基苯并呋喃-2-羧酸甲酯
将5-[1，3]二噁烷-2-基苯并呋喃(50mg，0.26mmol)溶解在THF(2mL)中，溶液冷却到-78℃。滴加丁基锂(180μL，1.1eq.)。混合物在25℃搅拌30min。然后将反应混合物冷却到-78℃，滴加氰基甲酸甲酯(23μL，1.1eq.)在1mL THF中的溶液。在1.5h后，仅能检测出小量的起始材料，形成了2个主要化合物(预期的产物/二聚体73∶27)。将温度缓慢上升到室温过夜。向混合物加入水和乙酸乙酯，水相提取3次。合并的有机相用MgSO4干燥，过滤，蒸发，得到与二聚体混合的5-[1，3]二噁烷-2-基苯并呋喃-2-羧酸甲酯(31.9mg，44％)(预期的产物/二聚体46∶54)。混合物直接用于下一步。
LC-MS：M/Z ESI：1.54min，249.26(M+1)；1.88min，407.20(M+1，二聚体)。
中间体74：3-溴-2-氟-苯并呋喃-5-甲醛
在聚丙烯管中，将苯并呋喃-5-甲醛(100mg，0.68mmol)放入乙醚(1mL)中，加入NBS(158mg，1.3eq.)和多氟化氢吡啶鎓70％(0.850mL)在乙醚(4mL)中的冷(-78℃)溶液。使反应液温热到室温过夜。将反应混合物倾倒在冰水中，用乙醚提取。醚相用碳酸氢钠水溶液洗涤，硫酸钠干燥，过滤，蒸发，得到3-溴-2-氟-苯并呋喃-5-甲醛(141.6mg)。在反相HPLC上提纯(溶剂梯度水/CH3CN 0.1％TFA)，得到标题化合物(62mg，37％)，用于下一个步骤。LC-MS：M/Z ESI：1.56min。HPLC＝3.11min(99.34)。1H NMR：(DMSO-d6)δ9.94(s，1H)，8.09(d，1H，3J＝1.8Hz)，7.99(dd，1H，3J＝8.4，1.8Hz)，7.38(d，1H，3J＝8.4Hz)，6.87(d，1H，2JH-F＝59Hz)，6.01(d，1H，3JH-F＝15.1Hz)。19F NMR：(DMSO-d6)δ-114.80，-114.88。
中间体75：2-氟-5-[1，3]二噁烷-2-基-苯并呋喃
将5-[1，3]二噁烷-2-基-苯并呋喃(50mg，0.26mmol)溶解在THF(2mL)中，溶液冷却到-78℃。滴加丁基锂(180μL，1.1eq)。混合物在25℃搅拌30min。混合物再冷到-78℃，滴加N-氟二苯磺酰胺(91mg，1.1eq)溶解在1mL THF中的溶液。混合物在-78℃到室温之间搅拌过夜。加入水和乙酸乙酯，水相提取3次。合并的有机相用MgSO4干燥，过滤，蒸发，得到混合副产物的2-氟-5-[1，3]二噁烷-2-基-苯并呋喃(75mg)。它已经足够纯，可以用于下一步。
合成了以下的实施例：
实施例1：5-(1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮的制备
在100mL圆底烧瓶中放入20g噻唑烷、15.6g胡椒醛、7.7g β-丙氨酸和80mL乙酸。反应液100℃搅拌3h，然后缓慢冷到室温，这时所需的缩合产物结晶出来。过滤结晶，用乙酸(rt)和水洗涤，从DME(25mL)重结晶，得到28g(84％)纯5-(1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮。通过以下途径得到相应的钠盐：将5-(1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮悬浮在THF中，加入1N KOH溶液(1.0eq)。得到澄清的溶液，将其冷冻干燥得到5-(1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮的纯钾盐。
HPLC：3.48min。LC-MS：M/Z ESI：1.31min，248.12(M-1)。NMR(母体化合物)：1H NMR(DMSO-d6)δ12.5(br.s，1H)，7.71(s，1H)，7.06-7.16(m，3H)，6.12(s，2H)。
如果最后产物不能从反应溶液中结晶析出，加入少量水，使所需的缩合产物发生沉淀。
从反应混合物沉淀的粗产物或者足够纯，或者从合适的溶剂(如DME、甲醇、EtOAc)重结晶，或者用快速色谱法提纯，用EtOAc、环己烷混合物作为洗脱液。
或者，最后的产物可按照以下方案用平行方式合成：
在平行合成仪Quest 210TM中放入相应的醛，加入哌啶(17.9mg/管)和2，4-噻唑烷二酮(49.2mg/管)在DME(2mL/管)中的混合物。反应液在120℃搅拌3h，然后振动下冷到室温，加入2mL水。通过下支管过滤出沉淀的化合物。留下的澄清溶液体积减小，然后加入水。过滤出这样形成的固体，用小量DME洗涤，得到纯的缩合产物。
实施例2：5-(1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基亚甲基)-2-硫代-1，3-噻唑烷-4-酮的制备
在24mL小瓶中放入1g市售绕丹宁、1.3g胡椒醛和0.5mL TEA在10mL DME中的溶液。反应液在120℃搅拌5h，然后冷到室温，这时最后的产物沉淀出来。过滤固体，用DME洗涤，得到1.6g(80％)橙色粉末。
LC-MS：M/Z ESI：1.46min，266.00(M+1)。NMR(母体化合物)：1H NMR(DMSO-d6)δ13.75(br.s，1H)，7.58(s，1H)，7.08-7.18(m，3H)，6.14(s，2H)。
实施例3：5-(2，3-二氢-1，4-苯并二噁英-6-基亚甲基)-1，3-噻唑烷-4-二酮的制备
按照实施例1的方法，从2，3-二氢-1，4-苯并二噁英-6-甲醛和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：2.58min。LC-MS：M/Z ESI：1.32min，262.16(M-1)。1H NMR(DMSO-d6)δ12.52(br.s，1H)，7.68(s，1H)，7.09(dd，2H，J＝1.9，7.1)，7.00(d，1H，J＝9.0Hz)，4.36-4.22(m，4H)。
实施例4：5-(2，3-二氢-1-苯并呋喃-5-基亚甲基)-1，3-噻唑烷-4-二酮的制备
按照实施例1列举的一般方法，从2，3-二氢-1-苯并呋喃-5-甲醛和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：3.27min。LC-MS：M/Z ESI：1.37min，246.18(M-1)。1H NMR(DMSO-d6)δ9.80(br.s，1H)，7.37(s，1H)，7.25(d，1H，J＝8.3)，7.21(s，1H)，6.80(d，1H，J＝8.3Hz)，4.54(t，2H，J＝8.85)，3.19(t，2H，J＝8.85)。
实施例5：5-[(7-甲氧基-1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮的制备
按照实施例1列举的一般方法，从7-甲氧基-1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基)甲醛和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：3.57min。LC-MS：M/Z ESI：1.30min，278.07(M-1)。1H NMR(DMSO-d6)δ12.63(br.s，1H)，7.78(s，1H)，7.65(s，1H)，7.57(d，1H，J＝8.5Hz)，7.45(dd，2H，J＝0.8，7.6)。
实施例6：5-[(9，10-二氧代-9，10-二氢蒽-2-基)亚甲基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮的制备
按照实施例1列举的一般方法，从(9，10-二氧代-9，10二氢蒽-2-基)甲醛和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：4.12min。LC-MS：M/Z ESI：1.50min，334.09(M-1)。
实施例7:5-[(2,2二氟-1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基亚甲基）-1，3-噻唑烷-2，4-二酮的制备
按照实施例1列举的一般方法，从(2，2-二氟-1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基)甲醛和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：3.85min。LC-MS：M/Z ESI：3.15min，284.11(M-1)。1H NMR(DMSO-d6)δ12.63(br.s，1H)，7.78(s，1H)，7.65(s，1H)，7.57(d，1H，J＝8.5Hz)，7.45(dd，2H，J＝0.8，7.6)。
实施例8：5-(1，3-二氢-2-苯并呋喃-5-基亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮的制备
按照实施例1列举的一般方法，从1，3-二氢-2-苯并呋喃-5-甲醛(中间体4)和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：2.89min。LC-MS：M/Z ESI：1.20min，246.20(M-1)。1H NMR(DMSO-d6)δ12.60(br.s，1H)，7.80(s，1H)，7.56-7.42(m，2H)，5.03(s，4H)。
实施例9：5-(1-苯并呋喃-5-基亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮的制备
按照实施例1列举的一般方法，从1-苯并呋喃-5-甲醛(中间体1)和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：3.54min。LC-MS：M/Z ESI：1.47min，244.20(M-1)。1H NMR(DMSO-d6)δ12.58(br.s，1H)，8.10(d，1H，J＝2.2Hz)，7.92(s，2H)，7.74(d，1H，J＝8.6Hz)，7.57(d，1H，J＝8.6Hz)，7.07(s，1H)。
实施例10：5-[(4-甲基-3-氧代-3，4-二氢-2H-1，4-苯并噁嗪-6-基亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮的制备
按照实施例1列举的一般方法，从[(4-甲基-3-氧代-3，4-二氢2H-1，4-苯并噁嗪-6-基)-甲醛(中间体2)和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：2.79min。LC-MS：M/Z ESI：1.19min，289.22(M-1)。1H NMR(DMSO-d6)δ12.58(br.s，1H)，7.81(s，1H)，7.41(s，1H)，7.13-7.26(d，2H)，2.99(s，3H)。
实施例11：5-(1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基亚甲基)-1，3-噻唑烷-4-酮的制备
按照实施例1列举的一般方法，从1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-甲醛和2-亚氨基-1，3-噻唑烷-4-酮开始，得到标题化合物。
HPLC：2.29min。LC-MS：M/Z ESI：1.21min，247.25(M-1)。
实施例12：5-喹啉-6-基亚甲基-噻唑烷-2，4-二酮的制备
按照实施例1列举的一般方法，从喹啉-6-甲醛(中间体5)和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：1.445min。LC-MS：M/Z ESI：1.17min，257.21(M+1)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.88(d，J＝6Hz，1H)，8.40(d，J＝9Hz，1H)，8.07-7.90(m，3H)，7.55(q，J＝6Hz，9Hz，，1H)，7.45(s，1H)。
实施例13：5-喹啉-6-基亚甲基-2-硫代-噻唑烷-4-酮的制备
按照实施例1列举的一般方法，从喹啉-6-甲醛(中间体5)和绕丹宁开始，得到标题化合物。
HPLC：2.05min。LC-MS：M/Z ESI：1.25min，273.14(M-1)。1H NMR(DMSO-d6)δ14.00(br.s，1H)，8.97(d，J＝2.3，1H)，8.23(d，J-9Hz，1H)，8.10(d，J＝9Hz，1H)，7.95(d，J＝9Hz，1H)，7.79(s，1H)，7.61(q，J＝3Hz，9Hz，1H)。
实施例14：2-亚氨基-5-喹啉-6-基亚甲基-噻唑烷-4-酮的制备
按照实施例1列举的一般方法，从喹啉-6-甲醛(中间体5)和2-亚氨基-1，3-噻唑烷-4-酮开始，得到标题化合物。
HPLC：1.16min。LC-MS：M/Z ESI：1.10min，256.18(M+1)。1H NMR(DMSO-d6)δ12.58(br.s，1H)，8.84(s，1H)，8.37(d，J＝6Hz，1H)，8.02-7.86(m，3H)，7.52(q，J＝6Hz，9Hz，1H)，7.26(s，1H)，7.02(b.s，1H)。
实施例15：5-(3-甲基-苯并[d]异噁唑-5-基亚甲基)-噻唑烷-24-二酮的制备
按照实施例1列举的一般方法，从3-甲基-苯并噁唑-5-甲醛(中间体6)和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：2.99min。LC-MS：M/Z ESI：1.30min，259.17(M-1)。1H NMR(DMSO-d6)δ12.58(br.s，1H)，8.08(s，1H)，7.95(s，1H)，7.85(s，2H)，2.59(s，3H)。
实施例16：5-(4-苯基-喹唑啉-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮的制备
按照实施例1列举的一般方法，从4-苯基-喹唑啉-6-甲醛(中间体13)和1，3-噻唑烷2，4-二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：3.45min。LC-MS：M/Z ESI：1.25min，334.15(M+1)。1H NMR(DMSO-d6)δ12.74(br.s，1H)，9.43(s，1H)，8.24(m，2H)，8.00-7.86(m，2H)，7.72-7.66(m，5H)。
实施例17：5-(4-二甲基氨基-喹喔啉-6-基亚甲基)-喹唑啉-2，4-二酮的制备
按照实施例1列举的一般方法，从4-二甲基氨基-喹唑啉-6-甲醛(中间体14)和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：1.47min。LC-MS：M/Z ESI：1.26min，301.26(M-1)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.81(s，1H)，8.54(s，1H)，8.16-7.95(m，3H)，7.13-7.26(d，2H)，3.63(s，6H)。
以下实施例按照实施例1和17所述，从中间体15至31和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始合成。实施例作起始材料的中间体#化合物名称质量(M+1) 18 165-[(4-氨基喹唑啉-6-基)亚甲基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮273.29 19 155-[(4-哌啶-1-基喹唑啉-6-基)亚甲基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮341.40 20 225-[(4-吗啉-4-基喹唑啉-6-基)亚甲基]-1，3-噻唑343.2烷-2，4-二酮0 21 175-{[4-(苄基氨基)喹唑啉-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮363.10 22 215-{[4-(二乙基氨基)喹唑啉-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮329.30 23 185-({4-[(吡啶-2-基甲基)氨基]喹唑啉-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮364.40 24 195-({4-[(吡啶-3-基甲基)氨基]喹唑啉-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮364.40 25 231-{6-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]喹唑啉-4-基}哌啶-3-羧酸乙酯413.20 26 251-{6-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]喹唑啉-4-基}哌啶-4-羧酸乙酯413.30 27 241-{6-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]喹唑啉-4-基}-L-脯氨酸叔丁酯427.20 28 205-{[4-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮356.13 29 315-{[4-(4-嘧啶-2-基哌嗪-1-基)喹唑啉-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮420.20 30 305-({4-[4-(4-氟苯基)哌啶-1-基]喹唑啉-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮435.30 31 295-{[4-(4-苄基哌啶-1-基)喹唑啉-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮431.30 32 285-({4-[4-(2-苯基乙基)哌啶-1-基]喹唑啉-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮445.40 33 275-{[4-(4-甲基哌啶-1-基)喹唑啉-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮355.20 34 265-{[4-(4-羟基哌啶-1-基)喹唑啉-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮357.40
实施例35：1-[6-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)喹唑啉-4-基]-哌啶-4-羧酸
将50mg 1-{6-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]喹唑啉-4-基}哌啶-4-羧酸乙酯(实施例26)溶解在2mL THF/水(1/1)的溶液中。加入几滴5N NaOH，将反应液在rt搅拌12h。反应完成后，蒸发溶剂，在乙醚中沉淀出标题产物，为黄色固体(40mg，82％)。
HPLC：1.43min。LC-MS：M/Z ESI：1.15min，385，20(M+1)。
实施例36：1-[6-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)喹唑啉-4-基]-哌啶-3-羧酸
按照实施例35列举的一般方法，得到标题化合物。
HPLC：1.50min。LC-MS：M/Z ESI：1.10min，385.40(M+1)。
实施例37：1-[6-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)喹唑啉-4-基]-吡咯烷-2-羧酸
将10mg 1-{6-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]喹唑啉-4-基}-L-脯氨酸叔丁酯(实施例27)在25％(TFA/DCM)溶液中rt搅拌12h。真空蒸发溶剂，在乙醚中沉淀出纯的1-[6-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)喹唑啉-4-基]-吡咯烷-2-羧酸(7mg，81％)。
HPLC：1.43min。LC-MS：M/Z ESI：1.10min，371.30(M+1)。
实施例38：5-(4-甲基氨基-喹唑啉-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
按照实施例1列举的一般方法，从4-甲基氨基-喹唑啉-6-甲醛(中间体11)和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：1.43min。LC-MS：M/Z ESI：1.03min，287.19(M+1)。1H NMR(DMSO-d6)δ11.97(b.s，1H)，8.53(b.s，2H)，8.37(s，1H)，7.92(d，J＝8Hz，1H)，7.76(s，2H)，3.03(s，3H)。
实施例39：5-(4-甲氧基-喹唑啉-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
按照实施例1列举的一般方法，从4-甲氧基-喹唑啉-6-甲醛(中间体10)和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：2.57min。LC-MS：M/Z ESI：1.12min，288.20(M+1)。1H NMR(DMSO-d6)δ12.74(br.s，1H)，8.86(s，1H)，8.32(s，1H)，8.11(m，1H)，8.03-7.98(m，2H)，4.18(s，3H)。
实施例40：2-亚氨基-5-(4-甲基氨基-喹唑啉-6-基亚甲基)-噻唑烷-4-酮的制备
按照实施例1列举的一般方法，从4-甲基氨基-喹唑啉-6-甲醛(中间体11)和2-亚氨基-1，3-噻唑烷-4-酮开始，得到标题化合物。
HPLC：2.43min。LC-MS：M/Z ESI：1.07min，286.14(M+1)。
实施例41：2-亚氨基-5-(4-哌啶-喹唑啉-6-基亚甲基)-噻唑烷-4-酮
按照实施例1列举的一般方法，从4-哌啶-喹唑啉-6-甲醛(中间体72)和2-亚氨基1，3-噻唑烷-4-酮开始，得到标题化合物。
HPLC：1.78min。LC-MS：M/Z ESI：1.40min，340.26(M-1)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.76(s，1H)，8.18(s，1H)，8.16(d，J＝6Hz，1H)，7.88(d，J＝9Hz，1H)，7.80(s，1H)，4.09(s，4H)，1.80(s，6H)。
实施例42：2-亚氨基-5-(4-二甲基氨基-喹唑啉-6-基亚甲基)-噻唑烷-4-酮
按照实施例1列举的一般方法，从4-哌啶-喹唑啉-6-甲醛(中间体14)和2-亚氨基-1，3-噻唑烷-4-酮开始，得到标题化合物。
HPLC：1.32min。LC-MS：M/Z ESI：1.54min，300.23(M-1)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.82(s，1H)，8.543s，1H)，8.16(d，J＝9Hz，1H)，7.87(t，J＝9Hz，2H)，3.65(s，6H)。
实施例43：5-(2-甲基-2H-苯并三唑-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
按照实施例1列举的一般方法，从2-甲基-2H-苯并三唑-5-甲醛(中间体33)和噻唑烷二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：2.68min.1H NMR(DMSO-d6)δ12.58(br.s，1H)，7.98(s，1H)，7.92(d，J＝9Hz，1H)，7.62(d，J＝6Hz，1H)，7.43(s，1H)，4.48(s，3H)。
实施例44：5-(3-甲基-3H-苯并三唑-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
按照实施例1列举的一般方法，从3-甲基-3H-苯并三唑-5-甲醛(中间体34)和噻唑烷二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：2.35min。LC-MS：M/Z ESI：1.22min，259.23(M-1)。1H NMR(DMSO-d6)δ12.58(br.s，1H)，8.17(d，J＝9Hz，1H)，8.07(s，1H)，7.62(d，J＝6Hz，1H)，7.73(s，1H)，4.33(s，3H)。
实施例45：5-(3-乙基-3H-苯并咪唑-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
将5-(4-氨基-3-乙基氨基-亚苄基)-噻唑烷-2，4-二酮(50mg，0.19mmol)(中间体36)溶解在甲酸(5mL)中，溶液在100℃搅拌过夜。真空蒸发甲酸。粗产物用硅胶柱提纯，得到标题化合物(35mg，63％)。
HPLC：1.71min。LC-MS：M/Z ESI：0.82min，274.21(M+1)。
以下实施例按照实施例45所述，从中间体37至54和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始合成。实施例作起始材料的中间体#化合物名称质量(M+1) 46 375-{[1-(4-苯基丁基)-1H-苯并咪唑-6-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷2，4-二酮378.30 47 505-[(1-丙-2-炔-1-基-1H-苯并咪唑-6-基)亚284.24甲基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮 48 385-[(1-{2-[4-(三氟甲基)苯基]乙基}-1H-苯并咪唑-6-基)亚甲基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮418.17 49 395-({1-[2-(4-羟基苯基)乙基]-1H-苯并咪唑-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮366.26 50 404-{6-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1H-苯并咪唑-1-基}环己烷羧酸甲酯386.35 51 415-({1-[2-(5-甲氧基-1H-吲哚-3-基)乙基]-1H-苯并咪唑-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮419.21 52 425-({1-[(1-甲基-1H-吡唑-4-基)甲基]-1H-苯并咪唑-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮340.99 53 435-({1-[2-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]-1H-苯并咪唑-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮410.37 54 545-({1-[2-(4-苯氧基苯基)乙基]-1H-苯并咪唑-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮442.51 55 445-({1-[4-(三氟甲基)苄基]-1H-苯并咪唑-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮404.16 56 454-{6-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1H-苯并咪唑-1-基}环己烷羧酸372.18 57 465-[(1-异丁基-1H-苯并咪唑-6-基)亚甲基]-1，3-噻唑烷-2，4-二酮302.25 58 475-({1-[2-(1，3-苯并间二氧杂环戊烯-4-基)乙基]-1H-苯并咪唑-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮349.27 59 485-({1-[2-(2-苯氧基苯基)乙基]-1H-苯并咪唑-6-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮442.29 60 49 5-{[1-(3，3-二苯基丙基)-1H-苯并咪唑-6- 基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮 440.27 61 51 5-{[1-(2-甲氧基苄基)-1H-苯并咪唑-6-基] 亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮 366.33 62 52 5-{[1-(3呋喃基甲基)-1H-苯并咪唑-6-基] 亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮 326.24 63 53 5-[1-(1-丙基-1H-苯并咪唑-6-基)亚甲基]- 1，3-噻唑烷-2，4-二酮 288.18
实施例64：5-喹喔啉-6-基亚甲基-噻唑烷-2，4-二酮
按照实施例1列举的一般方法，从喹喔啉-6-甲醛(中间体55)和噻唑烷二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：2.48min。LC-MS：M/Z ESI：1.01min，256.20(M-1)。1H NMR：(DMSO-d6)δ12.58(br.s.1H)，8.93(d，J＝9Hz，2H)，8.18(s，1H)，8.10(d，J＝9Hz，1H)，8.03(d，J＝9Hz，1H)，7.51(s，1H)。
实施例65：5-喹喔啉-6-基亚甲基-2-硫代-噻唑烷-4-酮
按照实施例1列举的一般方法，从喹喔啉-6-甲醛(中间体55)和绕丹宁开始，得到标题化合物。
HPLC：3.10min。LC-MS：M/Z ESI：1.17min，272.13(M-1)。1H NMR：(DMSO-d6)δ12.00(br.s.1H)，9.02(s，2H)，8.31(s，1H)，8.21(d，J＝9Hz，1H)，8.04(d，J＝9Hz，1H)，7.90(s，1H)。
实施例66：2-亚氨基-5-喹喔啉-6-基亚甲基-噻唑烷-4-酮
按照实施例1列举的一般方法，从喹喔啉-6-甲醛(中间体55)和2-亚氨基-1，3-噻唑烷-4-酮开始，得到标题化合物。
HPLC：1.97min。LC-MS：M/Z ESI：1.02min，255.19(M-1)。1H NMR：(DMSO-d6)δ9.57-9.30(b.d.J＝81Hz，2H)，9.00(s，2H)，8.26-8.07(m，3H)，7.84(s，1H)。
实施例67：5-苯并噻唑-6-基亚甲基-噻唑烷-2，4-二酮
按照实施例1列举的一般方法，从喹喔啉-6-甲醛(中间体56)和噻唑烷二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：2.85min。LC-MS：M/Z ESI：1.06min，261.11(M-1)。1H NMR：(DMSO-d6)δ12.58(br.s.1H)，9.39(s，2H)，8.27(s，1H)，8.11(d，J＝9Hz，1H)，7.70(d，J＝9Hz，1H)，7.42(s，1H)。
实施例68：5-(3-甲基苯并呋喃-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
按照实施例1列举的一般方法，从3-甲基苯并呋喃-5-甲醛(中间体57)和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：1.47min。LC-MS：M/Z ESI：1.15min，257.21(M-1)。1H NMR：(DMSO-d6)δ12.50(br.s.1H)，8.87(d，J＝6Hz，1H)，8.38(d，J＝9，1H)，8.07(t，J＝12Hz，2H)，7.92(d，J＝9Hz，1H)，7.53(q，J＝6Hz，12Hz，1H)，7.45(s，1H)。
实施例69：5-(2-溴-3-甲基苯并呋喃-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
0℃在一个25mL的三颈烧瓶中，放入5-(3-甲基苯并呋喃-5-基亚甲基)噻唑烷-2，4-二酮(100mg，0.39mmol)(实施例68)和溴(20μL，1eq)在2mL AcOH中使反应混合物温热至室温。RT 2h后再加入一当量溴。3h后过滤反应物，得到黄色产物，为标题化合物(87mg，66％)。
LC-MS：M/ZESI：1.69min，339.8(M+1)。1H NMR：(DMSO-d6)δ12.50(br.s.1H)，7.93(s，1H)，7.82(s，1H)，7.72(d，J＝6Hz，1H)，7.54(d，J＝6Hz，1H)，2.20(s，3H)。
实施例70：5-(3-溴-苯并呋喃-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
按照实施例1列举的一般方法，从3-溴-苯并呋喃-5-甲醛(中间体58)和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：3.92min。LC-MS：M/Z ESI：1.57min，325.17(M+1)。1H NMR：(DMSO-d6)δ12.60(br.s.1H)，8.42(s，1H)，8.00(s，1H)，7.85(d，J＝23Hz，1H)，7.76(d，J＝23Hz，1H)。
实施例71：3-[5-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-苯并呋喃-3-基]-丙烯酸乙酯
按照实施例1列举的一般方法，从3-(甲酰基-苯并呋喃-3-基)-丙烯酸乙酯(中间体60)和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：4.00min。LC-MS：M/Z ESI：1.60min，342.20(M-1)。1H NMR：(DMSO-d6)δ12.50(br.s.1H)，8.63(s，1H)，8.42(s，1H)，8.08(s，1H)，7.83(m，2H)，7.62(s，1H)，4.22(q，J＝6Hz，9Hz，2H)。
实施例72：3-[5-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-苯并呋喃-3-基]-丙烯酸
将3-[5-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-苯并呋喃-3-基]-丙烯酸乙酯(205mg，0.6mmol)(实施例71)溶解在THF/水4∶2中。搅拌下向该溶液加入81mg(4eq)LiOH.H2O。反应液搅拌15h，蒸去溶剂，残留物用乙醚沉淀。固体用1N HCl洗涤，干燥，得到170mg(90％)纯的3-[5-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-苯并呋喃-3-基]-丙烯酸。
HPLC：3.25min。LC-MS：M/Z ESI：1.01min，314.11(M-1)。1H NMR：(DMSO-d6)δ8.22(s，1H)，8.03(s，1H)，7.58(dd，J＝9Hz，33Hz，2H)，7.43(s，1H)，7.25(d，J＝18Hz，1H)，7.07(s，1H)。
实施例73：5-[3-(3-氧代-3-哌啶-1-基-丙烯基)-苯并呋喃-5-基亚甲基]-噻唑烷-2，4-二酮
将180mg(0.57mmol)3-[5-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-苯并呋喃-3-基]-丙烯酸(实施例72)悬浮在THF(25mL)中。向悬浮液中加入DIEA(2eq)和哌啶(3eq)。搅拌下加入PyBOP(1.5eq)。30min后反应混合物变得澄清。再1h后形成沉淀。反应液搅拌过夜。过滤出沉淀并用THF和1N HCl洗涤，得到高纯度的标题产物。
HPLC：3.91min。LC-MS：M/Z ESI：1.58min，383.22(M+1)。1H NMR：(DMSO-d6)δ8.46(s，1H)，8.19(s，1H)，7.71-7.51(m，4H)，7.23(d，J＝15，1H)，3.73(d，J＝48Hz，2H)，1.51(d，J＝36Hz，3H)。
按照实施例73的合成方法合成以下的酰胺。实施例起始材料胺化合物名称质量(M+1) 74 脯氨酸甲酯1-((3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}-丙-2-烯酰基)脯氨酸甲酯427.15 75 D-脯氨酸甲酯1-((3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}-丙-2-烯酰基)-D-脯氨酸甲酯413.15 76 吡咯烷(5-({3-[(3-氧代-3-吡咯烷-1-基丙-1-烯-1-基)-1-苯并呋喃-5-基]亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮369.52 77 吗啉5-({3-[3-吗啉-4-基-3-氧代丙-1-烯-1-基]-1-苯并呋喃-5-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮385.07 78 L-脯氨酸甲酯1-(3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}-丙-2-烯酰427.13基)-L-脯氨酸甲酯 79N-甲基环己胺N-环己基-3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}-N-甲基丙烯酰胺411.12 80N-乙基羟基乙基胺3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}-N-乙基-N-(2-羟基乙基)丙烯酰胺387.10 81环丁胺N-环丁基-3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}-丙烯酰胺369.13 82氮杂环丁烷5-({3-[3-氮杂环丁烷-1-基-3-氧代丙-1-烯-1-基]-1-苯并呋喃-5-基}亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮355.64 831，3-二氢-2H-异吲哚5-({3-[3-(1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)-3-氧代丙-1-烯-1-基]-1-苯并呋喃-5-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮415.00(M-1) 84氮杂环庚烷5-({3-[3-氮杂环庚烷-1-基-3-氧代丙-1-烯-1-基]-1-苯并呋喃-5-基}亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮387.46 85哌啶-1-基胺3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}-N-哌啶-1-基丙烯酰胺398.00 86吡啶-3-基甲基胺3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}-N-(吡啶-3-基甲基)丙烯酰胺406.10 87环己胺N-环己基-3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}丙烯酰胺397.08 884-N-甲基哌嗪5-({3-[3-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-氧代丙-1-烯-1-基]-1-苯并呋喃-5-基}亚甲基}-1，3-噻唑烷-2，4-二酮398.02 89环庚胺N-环庚基-3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}丙烯酰胺411.44 90吡咯啉5-({3-[3-(2，5-二氢-1H-吡咯-1-基)-3-氧代丙-1-烯-1-基]-1-苯并呋喃-5-基}亚甲基)-1，3-噻唑烷-2，4-二酮367.11 91环戊胺N-环戊基-3-{5-[(2，4-二氧代-1，3-亚噻唑烷-5-基)甲基]-1-苯并呋喃-3-基}丙烯酰胺383.11
实施例92：3-[5-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-苯并呋喃-3-基]-丙酸乙酯
按照实施例1列举的一般方法，从3-(5-甲酰基-苯并呋喃-3-基)-丙酸乙酯(中间体71)和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：3.97min。LC-MS：M/Z ESI：2.87min，346.15(M-1)。1H NMR：(DMSO-d6)δ12.58(br.s.1H)，7.92(d，J＝6Hz，3H)，7.72(d，J＝9Hz，1H)，7.53(d，J＝9Hz，1H)，4.03(q，J＝9Hz，15Hz，2H)，2.94(t，J＝9Hz，2H)，2.73(t，J＝6Hz，2H)，1.14(t，J＝6Hz)。
实施例93：3-[5-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-苯并呋喃-3-基]-丙酸
按照实施例72所述的标准皂化方法，用实施例92为起始原料，得到标题化合物。
HPLC：3.09min。LC-MS：M/Z ESI：1.19min，316.14(M-1)。1H NMR：(DMSO-d6)δ12.58(br.s.1H)，12.22(s，1H)，7，93(d，J＝12Hz，3H)，7.70(d，J＝9Hz，1H)，7.54(d，J＝9Hz，1H)，2.91(t，J＝9Hz，2H)，2.65(t，J＝6Hz，2H)。
实施例94：5-[3-(3-氧代-3-哌啶-1-基-丙基)-苯并呋喃-5-基亚甲基]-噻唑烷-2，4-二酮
按照实施例73所述的合成方法，用实施例93为原料，得到标题化合物。
HPLC：3.783min。LC-MS：M/Z ESI：1.46min，383.22(M+1)。1H NMR：(DMSO-d6)δ12.66(br.s，1H)，8.06(s，3H)，8.10(s，1H)，7.79(s，1H)，3.50-1.60(m，14H)。
实施例95：6-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-2，3-二氢-苯并[1，4]噁嗪-4-羧酸叔丁酯
按照实施例1列举的一般方法，从6-甲酰基-2，3-二氢苯并噁嗪-4-羧酸叔丁酯(中间体62)和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：2.52min。LC-MS：M/Z ESI：min，261.21(M-Boc-1)。
实施例96：5-(3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
将100mg 6-甲酰基-2，3-二氢-苯并[1，4]噁嗪-4-羧酸叔丁酯(中间体62)用TFA/DCM 25％处理2h。将溶剂蒸发至干，留下的粗产物无需进一步纯化，用来进行实施例1中所述的Knoevenagel反应，得到标题化合物，为黄色固体。
HPLC：2.56min。LC-MS：M/Z ESI：1.14min，261.24(M-1)。1H NMR：(DMSO-d6)δ12.58(br.s.1H)，7，57(s，1H)，6.78(s，3H)，4.17(t，J＝3Hz，2H)，3.28(t，J＝6Hz，2H)。
实施例97：5-(3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
在DIEA(2eq.)存在下，在4mL THF中，用苯甲酰氯(156μL，10eq.)将5-(3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮(实施例96)(35mg，0.13mmol)处理3h。水解过量的苯甲酰氯，加入EtOAc，有机层用NaHCO3和盐水洗涤。粗产物在硅胶上提纯，用EtOAc/cHex 3∶7洗脱，得到14mg(35％)标题产物。
HPLC：4.57min。LC-MS：M/Z ESI：2.11min，364.91(M-1)。
用实施例97中描述的相同方法合成以下实施例。
实施例98：5-(4-乙酰基-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
产率＝43mg(95％)。
HPLC：2.65min。LC-MS：M/Z ESI：1.12min，305.24(M+1)。1H NMR：(DMSO-d6)δ12.58(br.s.1H)，8.30(bs，1H)，7.71(s，1H)，7.35(d，J＝9Hz，1H)，7.05(d，J＝9Hz，1H)，4.33(t，J＝6Hz，2H)，4.00(t，J＝6Hz，2H)。
实施例99：6-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-苯并[1，4]噁嗪-4-羧酸叔丁酯
按照实施例1列举的一般方法，从6-甲酰基-苯并[1，4]-噁嗪-4-羧酸叔丁酯(中间体63)和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：4.23min。LC-MS：M/Z ESI：1.82min，359.16(M-1)。1H NMR：(DMSO-d6)δ12.50(br.s.1H)，7.63(d，J＝3，2H)，7.31(d，J＝3Hz，1H)，6.95(d，J＝9Hz，1H)，6.30(s，2H)。
实施例100：[6-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-3-氧代-2，3-二氢-苯并[1，4]噁嗪-4-基]乙酸甲酯
按照实施例1列举的一般方法，从(6-甲酰基-3-氧代-2，3-二氢-苯并[1，4]-噁嗪-4-基)乙酸甲酯(中间体64)和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：2.83min。LC-MS：M/Z ESI：1.20min，347.25(M-1)。1H NMR：(DMSO-d6)δ12.58(br.s.1H)，7.76(s，1H)，7.36(s，1H)，7.20(m，2H)，4.82(d，J＝15Hz，4H)，3.71(s，3H)。
实施例101：N-苄基-2-[6-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)3-氧代-2，3-二氢-苯并[1，4]噁嗪-4-基]-乙酰胺
如实施例74所述，用2eq.LiOH将[6-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-3-氧代-2，3-二氢-苯并[1，4]噁嗪-4-基]乙酸甲酯(195mg，0.56mmol)(实施例100)皂化，得到[6-(2，4-二氧代-亚噻唑烷-5-基甲基)-3-氧代-2，3-二氢-苯并[1，4]噁嗪-4-基]乙酸。将这样得到的酸(50mg，0.15mmol)溶解在THF中。搅拌下加入HOBt(32mg，1.5eq.)、EDC(43mg，1.5eq.)和苄基胺(25mg，1.5eq.)。反应混合物在rt搅拌15h。加入EtOAc，有机相用1N HCl、NaHCO3、盐水各洗涤3次。蒸发溶剂后，粗残留物在硅胶上提纯，用DCM/EtOAc作洗脱液，得到标题化合物，为无色粉末(35mg，54％)。
HPLC：3.06min。LC-MS：M/Z ESI：1.27min，424.21(M+1)。
实施例102：5-(4-丁基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-
二酮
按照实施例1列举的一般方法，从4-丁基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]-噁嗪-6-甲醛(中间体65)和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：3.76min。LC-MS：M/Z ESI：1.49min，331.23(M-1)。1H NMR：(DMSO-d6)δ12.58(br.s.1H)，7.85(s，1H)，7.43(s，1H)，7.24(d，J＝6Hz，1H)，7.15(d，J＝9Hz，1H)，4.73(s，2H)，3.91(t，J＝3Hz，2H)，1.57(m，2H)，1.36(m，2H)，0.91(t，J＝9Hz，3H)。
实施例103：5-(4-苄基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
按照实施例1列举的一般方法，从4-苄基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]-噁嗪-6-甲醛(中间体66)和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：3.67min。LC-MS：M/Z ESI：1.46min，365.17(M-1)。1H NMR：(DMSO-d6)δ12.58(br.s.1H)，7.68(s，1H)，7.38-7.22(m，8H)，5.24(m，2H)，4.97(s，2H)。
实施例104：5-(2-氯-苯并呋喃-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
按照实施例1列举的一般方法，从2-氯-5-[1，3]-二噁烷-2-基-苯并呋喃(中间体67)和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：3.84min。LC-MS：M/Z ESI：1.62min，278.12(M-1)。1H NMR：(DMSO-d6)δ7.79-7.75(m，2H)，7.68(d，J＝9Hz，1H)，7.52(d，J＝9Hz，1H)，7.09(s，1H)。
实施例105：5-(3-氨基-苯并[d]异噁唑-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
按照实施例1列举的一般方法，从3-氨基-苯并异噁唑-5-甲醛(中间体68)和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：2.45min。LC-MS：M/Z ESI：0.97min，260.17(M-1)。1H NMR：(DMSO-d6)δ12.60(br.s，1H)，8.01(s，1H)，7.85(s，1H)，7.60(d，J＝9Hz，1H)，6.67(s，1H)。
实施例106：5-(3-苯基乙炔基-苯并呋喃-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
按照实施例1列举的一般方法，从3-苯基乙炔基-苯并呋喃-5-甲醛(中间体59)和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：4.82min。LC-MS：M/Z ESI：2.02min，344.18(M-1)。1H NMR：(DMSO-d6)δ12.58(br.s.1H)，8.49(s，1H)，7.92(s，1H)，7.7.2(d，J＝9Hz，1H)，7.62(m，3H)，7.45(m，4H)。
实施例107：5-苯并[1，2，5]噻二唑-5-基亚甲基-噻唑烷-2，4-二酮
按照实施例1列举的一般方法，从2，1，3-苯并噻二唑-5-甲醛和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：3.03min。LC-MS：M/Z ESI：1.14min，262.11(M-1)。1H NMR：(DMSO-d6)δ12.58(br.s.1H)，8.11(m，2H)，7.90(d，J＝9Hz，1H)，7.47(s，1H)。
实施例108：5-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基亚甲基-噻唑烷-2，4-二酮
按照实施例1列举的一般方法，从2，1，3-苯并噁二唑-5-甲醛和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，得到标题化合物。
HPLC：3.02min。LC-MS：M/Z ESI：1.17min，246.17(M-1)。1H NMR：(DMSO-d6)δ12.58(br.s.1H)，8.07(m，2H)，7.82(d，J＝9Hz，1H)，7.40(s，1H)。
实施例109：5-(2-甲基-苯并呋喃-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
按照实施例1列举的一般方法，从2-甲基-5-[1，3]-二噁烷-2-基-苯并呋喃(中间体72)和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，在反相HPLC(溶剂梯度H2O/CH3CN 0.1％TFA)提纯后，得到标题化合物。
HPLC：3.65min，90.75％。LC-MS：M/Z ESI：1.65min，258.21(M-1)。1H NMR：(DMSO-d6)δ12.45(s1，1H)，7.88(s，1H)，7.77(d，J＝1.5Hz，1H)，7.64(d，J＝8.6Hz，1H)，7.47(dd，1H，J＝8.6Hz，1.5Hz)，6.69(s，1H)，2.37(s，3H)。
实施例110：5-(2-羧甲基-苯并呋喃-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
按照实施例1列举的一般方法，从5-[1，3]-二噁烷-2-基-苯并呋喃-2羧酸甲酯(中间体73)和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，在反相HPLC(溶剂梯度H2O/CH3CN 0.1％TFA)提纯后，得到标题化合物。
HPLC：3.32min。LC-MS：M/Z ESI：1.51min，302.19(M-1)。1H NMR：(DMSO-d6)δ12.52(s1，1H)，7.97(d，J＝1.5Hz，1H)，7.82(m，3H)，7.69(dd，1H，J＝8.6，1.5Hz)，3.90(s，3H)
实施例111：5-(3-溴-2-氟-2，3-二氢-苯并呋喃-5-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
按照实施例1列举的一般方法，从3-溴-2-氟-苯并呋喃-5-甲醛(中间体74)和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，在反相HPLC(溶剂梯度H2O/CH3CN 0.1％TFA)提纯后，得到标题化合物。
HPLC：3.66min。LC-MS：M/Z ESI：1.56min，343.09(M-1)。1H NMR：(DMSO-d6)δ12.82(s1，1H)，8.00(d，J＝1.8Hz，1H)，7.88(dd，1H，J＝8.5，1.8Hz)，7.55(d，1H，J＝8.5Hz)，7.03(d，1H，2JF＝59.5Hz)，6.20(d，1H，3JF＝15.3Hz)。19F NMR：(DMSO-d6)δ-114.66。
实施例112：5-(2-氟-苯并呋喃-6-基亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮
按照实施例1列举的一般方法，从2-氟-5-[1，3]二噁烷-2-基-苯并呋喃(中间体75)和1，3-噻唑烷-2，4-二酮开始，在反相HPLC(溶剂梯度H2O/CH3CN 0.1％TFA)提纯后，得到标题化合物。
HPLC：3.67min.，99.47％。LC-MS：M/Z ESI：1.51min，262.14(M-1)。1H NMR：(DMSO-d6)δ12.04(s1，1H)，7.89(d，J＝1.5Hz，1H)，7.83(d，1H，J＝1.5Hz)，7.73(d，1H，J＝8.6Hz)，7.55(dd，1H，J＝8.6，1.5Hz)，6.47(d，1H，3JF＝6.4Hz)。19F NMR：(DMSO-d6)δ-111.28，-112.18.
实施例113：药物制剂的制备
以下的制剂实施例举例说明本发明代表性的药物组合物，但本发明不受此限制。
制剂1：片剂
将式(I)化合物以干粉与干明胶粘合剂以大约1∶2的重量比混合。加入小量硬脂酸镁作为润滑剂。在压片机中将混合物制成240-270mg片剂(每片80-90mg活性成分)。
制剂2：胶囊
将式(I)化合物以干粉与淀粉稀释剂以大约1∶1的重量比混合。将混合物充填入250mg胶囊(每个胶囊125mg活性唑烷酮化合物)。
制剂3：液体
将式(I)化合物(1250mg)、蔗糖(1.75g)和黄原胶(4mg)混合，通过No.10美国筛，然后与先前制备的微晶纤维素和羧甲基纤维素钠(11∶89，50mg)的水溶液混合。将苯甲酸钠(10mg)、调味剂和色料用水稀释，于搅拌下加入。然后加入足量水，使总体积达到5mL。
制剂4：片剂
将式(I)化合物以干粉与干明胶粘合剂以大约1∶2的重量比混合。加入小量硬脂酸镁作为润滑剂。在压片机中将混合物制成450-900mg片剂(每片150-300mg活性唑烷酮化合物)。
制剂5：注射剂
将式(I)化合物溶解在缓冲的灭菌盐水可注射水性介质中，达到大约5mg/mL的浓度。
实施例114：生物学试验
用本发明化合物进行以下试验：
a)高通量PI3K脂质激酶测试(结合试验)：
本试验将闪烁亲近测定技术(SPA，Amersham)与新霉素(一种多阳离子抗生素)以高亲和性和特异性与磷脂结合的能力组合起来。闪烁亲近测定法基于弱发射同位素(如3H、125I、33P)的性质。用新霉素包衣的SPA珠在同一个孔中与重组PI3K和放射性ATP一起培育后，通过特异性结合于新霉素捕获SPA珠上的放射性磷脂，可检测磷酸化的脂质底物。
向含有5μL受试式(I)化合物(溶解在6％DMSO中；受试化合物的浓度为100，30，10，3，1，0.3，0.1，0.03，0.01，0.001μM的试验化合物)的384孔MTP中，加入以下试验组分：
(1)5μL(58ng)重组的人GST-PI3Kγ(在Hepes 40mM(pH7.4)，DTT 1mM和乙二醇5％中))(2)10μL脂质微泡体和(3)10μL激酶缓冲液([33P]γ-ATP 45μM/60nCi，MgCl2 30mM，DTT 1mM，β-磷酸甘油1mM，Na3VO4 100μM，胆酸钠0.3％，在Hepes 40mM(pH7.4中))。在温和搅动下rt培育180min后，加入在含ATP 10mM和MEDTA 5mM的PBS中含有100μg新霉素-包衣的PVT SPA珠的溶液60μL终止反应。在温和搅动进一步rt培育60min，使得磷脂结合在新霉素-SPA珠上。1500xg沉淀新霉素包衣的PVT SPA珠5min后，在Wallac MicroBetaTM平板计数器中闪烁计数，定量测定放射性PtdIns(3)P。
指示PI3Kγ数值是IC50，即为达到所述靶标50％抑制所需的量。所述的数值表明，本发明唑烷酮-乙烯基稠合的-苯衍生物对于PI3Kγ具有相当的效力。
所试验的式(I)化合物对于PI3Kγ显示出低于2μM，更佳为·1μM的抑制(IC50)。
表1列出了试验化合物41、61、66、73、103、107和110的抑制活性的例子。
表1：唑烷酮-乙烯基稠合的-苯衍生物对PI3Kγ的IC50值 实施例No. PI3Kγ，IC50(μM) 41 ＜1 61 ＜1 66 ＜1 73 ＜1 103 ＜1 107 ＜1 110 ＜1
b)监测PI3K抑制的细胞基ELISA
测定C5a刺激后巨噬细胞中的Akt/PKB磷酸化：
Raw 264：在细胞刺激之前24h，将Raw 264-7巨噬细胞(培养在含10％胎牛血清和抗生素的DMEM-F12培养基中)以20000细胞/孔放在96 MTP中。在用50nM补体5a(C5a；它是一种公知的刺激所用细胞的趋化因子)刺激细胞5min之前，细胞缺乏血清饥饿2h，并用抑制剂预处理20min。在刺激之后，用4％甲醛将细胞固定20min并用含1％Triton X-100的PBS(PBS/Triton)洗涤3次。在含0.6％H2O2和0.1％叠氮化钠的PBS/Triton中培育20min，用PBS/Triton洗涤3次来阻断内源性过氧化酶。然后用10％胎牛血清(PBS/Triton)培育60min，将细胞阻断。然后，用以含5％牛血清白蛋白(BSA)PBS/Triton稀释800倍的第一抗体(抗磷酰丝氨酸473 Akt IHC，Cell Signaling)在4℃培育过夜，检测磷酸化的Akt/PKB。用PBS/Triton洗涤3次后，细胞用过氧化酶结合的山羊-抗-家兔抗体(用含5％BSAPBS/Triton 1/400稀释)培育60min，用PBS/Triton洗涤3次，PBS洗涤2次，再在100μL底物试剂溶液(R&D)中培育20min，加入50μL 1M H2SO4终止反应，在450nm测定吸收值。
与基础水平比较，所示的数值反映了AKT磷酸化的抑制百分率。所述数值表明唑烷酮-乙烯基稠合的-苯化合物对巨噬细胞中AKT磷酸化激活的明显作用。
实施例1、19、66和107的化合物在10μM使用时完全(约100％)抑制C5a-介导的AKT磷酸化。实施例17、19或73在1μM使用时可抑制95％的C5a-介导的AKT-磷酸化。