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1、(10)申请公布号 CN 103141185 A (43)申请公布日 2013.06.12 CN 103141185 A *CN103141185A* (21)申请号 201310091750.X (22)申请日 2013.03.21 A01C 1/08(2006.01) A01C 1/00(2006.01) A01G 1/00(2006.01) (71)申请人 湖南农业大学 地址 410128 湖南省长沙市芙蓉区农大路 1 号 (72)发明人 钟军 熊兴耀 仇萍 吴飞驰 曾维军 文迎艺 李爱华 龙宪军 彭祖仁 (74)专利代理机构 长沙市融智专利事务所 43114 代理人 袁靖 (54) 发。
2、明名称 一种鱼腥草种子繁殖方法 (57) 摘要 本发明公开了一种鱼腥草种子繁殖方法， 涉 及植物繁殖和植物生理领域。取成熟鱼腥草的蒴 果， 置于 40恒温鼓风干燥箱中， 直到蒴果干燥， 将脱粒的干种子经过消毒后放入 PEG6000 溶液处 理， 然后将种子播种在培养皿上， 在光照培养箱中 萌发培养 25 天 （252， 光照强度 2000Lx， 12 小 时 /d 的光照） ， 种子萌发率可达 90% 以上。本发明 用 PEG6000 处理鱼腥草种子， 改变种子的生理状 态， 促进其萌发， 生长形成幼苗。本发明的种子繁 殖方法不仅是一种简单经济的种子繁殖技术， 打 破鱼腥草种子休眠， 加大繁殖。
3、系数， 完善了其种子 快繁体系 ； 同时还可以避免地下根茎无性繁殖容 易将母株的病虫源带到幼苗中， 造成大田病虫害 发生的问题， 同时降低种植成本。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 5 页 附图 2 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书5页 附图2页 (10)申请公布号 CN 103141185 A CN 103141185 A *CN103141185A* 1/1 页 2 1. 一种鱼腥草种子的繁殖方法， 其特征在于， 包括以下步骤 ： （1） 蒴果的收集与干燥 ： 摘取当年成熟鱼腥草的蒴果进行干燥脱粒 ； （2） 种子的。
4、消毒与处理 ： 将成熟干燥脱粒的种子先经 0.1% 升汞进行处理 60s， 然后再在 0.5g/L链霉素+0.5g/L青霉素钠的混合液中浸泡0.5h， 最后在70%酒精浸泡30s， 无菌水冲 洗 4-5 次后， 放在 10% 的 PEG6000 溶液中， 不停搅拌 1.5-2 小时， 用蒸馏水冲洗 3-5 次， 浸泡 在蒸馏水中 30 分钟， 再用蒸馏水冲洗 3-5 次 ； （3） 种子催芽萌发 ： 将 PEG6000 处理后的种子均匀播种在已灭菌的铺有吸水纸的培 养皿上， 于光照培养箱中催芽萌发， 条件为培养温度 252， 光照为 12 小时 /d， 强度 2000Lx ； （4） 幼苗培育。
5、 ： 待种子培养 25 天， 然后将萌发后的种子再培养 7-15 天后将鱼腥草种苗 从培养皿中取出， 移栽至花盆中。 2. 根据权利要求 1 所述的鱼腥草种子的繁殖方法， 其特征在于 ： 步骤 （1） 蒴果干燥的条件为 40 -42鼓风干燥保持 48 72 小时。 3. 根据权利要求 1 所述的鱼腥草种子的繁殖方法， 其特征在于 ： 步骤 （4） 完成后， 用喷 雾器喷施叶面肥一次， 长到 4-5 片真叶， 移栽到地里， 长成成苗。 权 利 要 求 书 CN 103141185 A 2 1/5 页 3 一种鱼腥草种子繁殖方法 技术领域 0001 本发明属于植物繁殖和植物生理领域， 具体涉及一种。
6、药用植物种子的繁殖方法， 特别是一种鱼腥草种子繁殖方法。 背景技术 0002 鱼腥草学名蕺菜， 属三白草科蕺菜属， 是宿根性多年生草本植物， 原产中国， 在我 国其资源分布很广泛。传统认为鱼腥草具有清热解毒， 利尿消肿等功能。现代医学研究和 实践进一步表明鱼腥草还具有很多全新的用途 ： 如抗菌作用 （鱼腥草的有效成分癸酰乙醛 等有抑菌作用） 、 抗病毒作用 （鱼腥草提取物对亚洲甲型病毒有抑制作用， 并能延缓孤儿病 毒ECH011的致细胞病变） 、 抗炎、 利尿作用 （鱼腥草槲皮甙能扩张肾动脉， 增加尿液分泌， 具有 利尿作用） 和增强机体免疫功能 （鱼腥草可以增强白细胞的吞噬能力， 显著提高外。
7、周血 T 淋 巴细胞的比例， 提高血清溶血水平， 增强机体非特异性和特异性免疫能力） 。制药企业利用 鱼腥草为原料已经生产了鱼腥草注射液、 鱼腥草滴眼液、 复方鱼腥草口服液、 鱼腥草含片等 产品。此外， 鱼腥草还含有丰富的营养成分。每 l00g 干品中含蛋白质 5.26g、 脂肪 2.41g， 碳水化合物 67.5g， 此外还含有钙、 磷、 铁元素， 以及维生素 C、 维生素 B2、 维生素 E 和多种氨 基酸 ； 此外鱼腥草含有可溶性糖、 蔗糖、 果糖和鱼腥草素 （一种挥发油） 等物质以及矿物质等 营养成份。目前， 鱼腥草作为天然菜、 保健药膳 （鱼腥草酒、 鱼腥草饮料等） 和美容食品 （鱼。
8、腥 草袋泡茶等） 已走进千家万户。 0003 无论鱼腥草作为药品或蔬菜或保健品开发， 已被国家卫生部正式确定为 “既是药 品， 又是食品” 的极具开发潜力的资源之一， 现在在某些地区已出口创汇， 成效可观。 如湖南 芷江侗族自治县罗旧镇曹家坪村一村民2006年种植1.3公顷鱼腥草， 收入13万余元 ； 浙江 永康市古山镇农民胡祖根种植 4 公顷， 平均每亩产 2000 多公斤合每亩 7000 多元。 0004 鱼腥草作为一种具有独特药效的中药材， 历来为野生植物， 从上世纪 80 年代初开 始进行人工栽培， 以地下茎的无性繁殖为主， 长年进行无性繁殖容易造成种茎的退化 ； 而鱼 腥草种子体积很。
9、小， 繁殖难， 鱼腥草种子快速繁殖体系至今还没有建立， 不利于鱼腥草试验 和育种工作的顺利进行。 发明内容 0005 本发明的目的是提供一种操作简便、 成本低、 有利于培育壮苗且不具有任何潜在 风险的鱼腥草种子繁殖方法， 该方法处理过的种子发芽率在 90% 以上， 其具体操作复方如 下 ： 一种鱼腥草种子的繁殖方法， 包括以下步骤 ： 0006 （1） 蒴果的收集与干燥 ： 摘取当年成熟鱼腥草的蒴果进行干燥脱粒 ； 0007 （2） 种子的消毒与处理 ： 将成熟干燥脱粒的种子先经 0.1% 升汞进行处理 60s， 然后 再在 0.5g/L 链霉素 +0.5g/L 青霉素钠的混合液中浸泡 0.5。
10、h， 最后在 70% 酒精浸泡 30s， 无 菌水冲洗 4-5 次后， 放在 10% 的 PEG6000 溶液中， 不停搅拌 1.5-2 小时， 用蒸馏水冲洗 3-5 次， 浸泡在蒸馏水中 30 分钟， 再用蒸馏水冲洗 3-5 次 ； 说 明 书 CN 103141185 A 3 2/5 页 4 0008 （3） 种子催芽萌发 ： 将 PEG6000 处理后的种子均匀播种在已灭菌的铺有吸水纸的 培养皿上， 于光照培养箱中催芽萌发， 条件为培养温度 252， 光照为 12 小时 /d， 强度 2000Lx ； 0009 （4） 幼苗培育 ： 待种子培养 25 天， 然后将萌发后的种子再培养 7-。
11、15 天后将鱼腥草 种苗从培养皿中取出， 移栽至花盆中。 0010 步骤 （1） 蒴果干燥的条件为 40 -42鼓风干燥保持 48 72 小时。 0011 步骤 （4） 完成后， 用喷雾器喷施叶面肥一次， 长到 4-5 片真叶， 移栽到地里， 长成成 苗。 0012 通过种子有性繁殖是高等生物进行的一种普遍繁殖方式。在自然界， 可能由于鱼 腥草无性繁殖方式比较发达， 而利用种子萌发进行有性繁殖的方式已经退化。鱼腥草每株 可收获几十至上百粒种子， 造成其种子难以萌发 （未经处理的萌发率 2%） 的原因目前尚不 清楚， 可能与种子的休眠有关。在本发明中用 PEG6000 处理鱼腥草种子， 改变了种。
12、子的生 理状态， 促进其萌发， 生长形成幼苗 ； 萌发率达到 90% 以上。本发明的种子繁殖方法不仅是 一种简单经济的种子繁殖技术， 打破鱼腥草种子休眠， 加大繁殖系数， 完善了其种子快繁体 系 ； 同时还可以避免地下根茎无性繁殖容易将母株的病虫源带到幼苗中， 造成大田病虫害 发生的问题， 同时降低种植成本。 附图说明 0013 图 1 为不同年份的成熟鱼腥草种子发芽率的比较 ； 0014 a 为 2010 年 （一年） ,b 为 2011 年 （当年） ； 0015 图 2 为不同消毒方法种子污染率的比较 ； 0016 a 从图中可以看出采用本发明消毒方法的污染率为 0， b 为没有采用本发。
13、明方法的 种子污染明显 ； 0017 图 3 为不同 PEG6000 处理浓度种子发芽率的比较 ； 0018 a为5%PEG6000处理， b为10%PEG6000处理， c为15%PEG6000处理， d为20%PEG6000 处理， e 为 25%PEG6000 处理 ； 0019 图 4 为不同 PEG6000 浸泡时间种子发芽率的比较 ； 0020 a 为 PEG6000 处理 1h， b 为 PEG6000 处理 1.5h， c 为 PEG6000 处理 2h ； d 为 PEG6000 处理 2.5h， e 为 PEG6000 处理 3h ； 0021 图 5 为不同培养温度种子发。
14、芽率的比较 ； 0022 a 为 202， b 为 252， c 为 302 ； 0023 图 6 为移栽至花盆中的鱼腥草种苗 ； 0024 图 7 为移栽到大田中生长的鱼腥草。 具体实施方式 0025 以下结合实施例旨在进一步说明本发明， 而非限制本发明。 0026 实施例 1 ： 鱼腥草种子繁殖方法包括如下步骤 ： 0027 （1） 不同年份的成熟鱼腥草种子发芽率的比较 0028 分别将 2010 年 （一年） 和 2011 年 （当年） 9 月收获的成熟鱼腥草种子 （100 粒） 经过 说 明 书 CN 103141185 A 4 3/5 页 5 消毒后， 采用 10%PEG6000 处。
15、理 1.5h 的方法于 2011 年 10 月在光照培养箱中进行种子萌发 试验 （光照强度 2000Lx， 12 小时 /d 的光照） ， 结果表明 （表 1） ： 当年收获的种子在培养了 25 天后， 其种子发芽率即可达到 100%， 而一年的种子在培养了 35 天后， 其种子发芽率仍然为 0%。 0029 表 1 不同年份的成熟鱼腥草种子发芽率比较 0030 0031 （2） 不同消毒方法种子污染率的比较 0032 处理 1 的消毒方法为将鱼腥草种子先经 0.1% 升汞进行处理 60s， 然后再在 0.5g/L 链霉素 +0.5g/L 青霉素钠的混合液中浸泡 0.5h， 最后在 70% 酒。
16、精浸泡 30s， 无菌水冲洗 4-5 次 ； 处理 2 的消毒方法为将鱼腥草种子先经 0.1% 升汞进行处理 60s， 然后在 70% 酒精浸泡 30s， 无菌水冲洗 4-5 次。结果表明 ： 处理 1 的污染率为 0% 而处理 2 的污染率高达 39%， 如 图 2。 0033 （3） 不同 PEG6000 处理浓度和时间种子发芽率的比较 0034 PEG6000 浓度处理 ： 试验设计 PEG 浓度分别为 5%、 10%、 15%、 20% 和 25% 五个处 理， 另设对照 (CK， 即种子不做任何处理 )。每个处理 100 粒种子， 样品随机取样， 重复 4 次， 浸种 1h。 003。
17、5 PEG6000 浸泡时间处理 ： 选取上一试验结果中的最适浓度浸泡处理鱼腥草种 子， 设计浸泡时间分别为 1h、 1.5h、 2h、 2.5h、 3h 五个处理， 另设对照 (CK， 即种子不做任何处 理 )。每个处理 100 粒种子， 样品随机取样， 重复 4 次。 0036 萌发试验 ： 将各处理后的种子置于内垫两层滤纸的培养皿上， 用蒸馏水润湿 滤纸后， 把培养皿放入恒温箱内， 培养条件为培养温度 252， 光照为 12 小时 /d， 强度 2000Lx， 每天观察其发芽情况， 待其生长稳定后测量相关数据。 0037 表 2 结果表明 ： 经过 PEG6000 处理的鱼腥草种子在发芽。
18、率、 发芽势、 发芽指数均高 于不经过任何处理的 （对照） ， 且差异极显著 ； 10%PEG6000浓度处理的， 在发芽率、 发芽势、 发 芽指数均表现最佳， 与其他处理间呈不同程度的差异。 0038 表 2 不同浓度 PEG6000 处理间鱼腥草生理指标的多重比较 0039 说 明 书 CN 103141185 A 5 4/5 页 6 0040 表 3 结果表明 ： 经 PEG6000 浸泡的鱼腥草种子在发芽率、 发芽势、 发芽指数均高于 不经过任何处理的 （对照） ， 且差异极显著 ； 处理 1.5 和 2.0h 的鱼腥草种子， 在发芽率、 发芽 势、 发芽指数均表现最佳， 与其他处理间。
19、呈不同程度的差异。 0041 表 3 不同 PEG6000 浸泡时间处理间鱼腥草生理指标的多重比较 0042 0043 综上所述， 鱼腥草种子发芽率和生理指标， 在不同 PEG6000 浓度处理间表现出 不同程度的差异， 结合处理浓度和浸泡时间， 本发明认为最佳处理为 10%PEG6000 处理 1.5-2h。 0044 （4） 不同培养温度种子发芽率的比较 0045 不同培养温度设置了 202、 252和 302三个处理。结果表明 ： 100 粒成 熟鱼腥草种子在培养了 25 天后 （光照强度 2000Lx， 12 小时 /d 的光照） ， 不同处理间种子发 芽率的差异显著， 最佳培养温度为。
20、 252。 0046 实施例 2 0047 经过实施例 1 条件摸索后， 选择各步骤最优化条件进行种子繁殖 0048 （1） 蒴果的收集与干燥 ： 摘取当年成熟鱼腥草的蒴果 40鼓风干燥保持 48 72 小时 ； 0049 （2） 种子的消毒与处理 ： 将成熟干燥脱粒的种子先经 0.1% 升汞进行处理 60s， 然后 再在 0.5g/L 链霉素 +0.5g/L 青霉素钠的混合液中浸泡 0.5h， 最后在 70% 酒精浸泡 30s， 无 菌水冲洗 4-5 次后， 放在 10%PEG6000 溶液中， 不停搅拌 1.5-2 小时， 用蒸馏水冲洗 3-5 次， 浸泡在蒸馏水中 30 分钟， 再用蒸馏。
21、水冲洗 3-5 次 ； 0050 （3） 种子催芽萌发 ： 将 PEG6000 处理后的种子均匀播种在已灭菌的培养皿上， 于光 照培养箱中催芽萌发， 条件为培养温度 252， 光照为 12 小时 /d， 强度 2000Lx ； 说 明 书 CN 103141185 A 6 5/5 页 7 0051 （4） 幼苗培育 ： 待种子培养 25 天， 然后将萌发后的种子再培养 7 天将鱼腥草种苗 从培养皿中取出， 移栽至花盆中。 0052 （5） 将花盆中的幼苗用喷雾器喷施叶面肥一次， 长到 4-5 片真叶， 移栽到地里， 可 长成成苗。 说 明 书 CN 103141185 A 7 1/2 页 8 图 1 图 2 图 3 说 明 书 附 图 CN 103141185 A 8 2/2 页 9 图 4 图 5 图 6图 7 说 明 书 附 图 CN 103141185 A 9 。