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1、(10)申请公布号 CN 103173392 A (43)申请公布日 2013.06.26 CN 103173392 A *CN103173392A* (21)申请号 201310087769.7 (22)申请日 2013.03.19 C12N 1/20(2006.01) (71)申请人 云南省烟草农业科学研究院 地址 650021 云南省昆明市圆通街 33 号 (72)发明人 方敦煌 陈学军 李永平 肖炳光 (74)专利代理机构 昆明知道专利事务所 ( 特殊 普通合伙企业 ) 53116 代理人 姜开侠 姬介南 (54) 发明名称 一种培养基平板磁旋式涂布细菌的方法 (57) 摘要 本发明公。
2、开了一种培养基平板磁旋式涂布细 菌的方法， 将磁力搅拌棒加热灭菌后干燥， 冷却 至室温备用 ； 所述磁力搅拌棒的长度小于培养基 平板的内径 ； 将磁力搅拌棒设置在培养基平板的 中心轴线上， 对应磁力搅拌棒中心点位置滴加细 菌悬浮液于培养基上， 然后盖好培养皿盖 ； 将培 养基平板放置在磁力搅拌器上， 磁力搅拌器带动 磁力搅拌棒在培养基平板表面转动， 细菌悬浮液 被均匀涂布于培养基平板表面 ； 涂布完成后， 取 出磁力搅拌棒消毒清洗后备重复利用。本发明以 磁力搅拌棒作为涂布工具， 利用磁力搅拌棒的水 平转动将细菌悬浮液均匀涂布在培养基平板的表 面。 巧妙利用磁力搅拌棒无接触驱动， 实现封闭状 态。
3、下细菌涂布， 提高了涂布效率， 降低了人为操作 误差。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 3 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书3页 (10)申请公布号 CN 103173392 A CN 103173392 A *CN103173392A* 1/1 页 2 1. 一种培养基平板磁旋式涂布细菌的方法， 其特征在于包括以下步骤 ： A、 磁力搅拌棒灭菌 ： 将磁力搅拌棒加热灭菌后干燥， 冷却至室温备用 ； 所述磁力搅拌 棒的长度小于培养基平板的内径 ； B、 磁力搅拌棒设置 ： 将磁力搅拌棒设置在培养基平板的中心轴线上， 对应。
4、磁力搅拌棒 中心点位置滴加细菌悬浮液于培养基上， 然后盖好培养皿盖 ； C、 细菌涂布 ： 将培养基平板放置在磁力搅拌器上， 磁力搅拌器带动磁力搅拌棒在培养 基平板表面转动， 细菌悬浮液被均匀涂布于培养基平板表面 ； 涂布完成后， 取出磁力搅拌棒 消毒清洗后备重复利用。 2. 根据权利要求 1 所述的培养基平板磁旋式涂布细菌的方法， 其特征是 ： 所述的磁力 搅拌棒为不锈钢、 磁性铁或普通铁的磁力搅拌棒， 磁力搅拌棒为直径 36mm 的圆柱体。 3. 根据权利要求 2 所述的培养基平板磁旋式涂布细菌的方法， 其特征是 ： 所述的磁性 铁或普通铁磁力搅拌棒外包覆一层耐热防腐蚀材料。 4. 根据权。
5、利要求 3 所述的培养基平板磁旋式涂布细菌的方法， 其特征是 ： 所述的耐热 防腐蚀材料为玻璃、 陶瓷或聚四氟乙烯材料。 5.根据权利要求1所述的培养基平板磁旋式涂布细菌的方法， 其特征是 ： A步骤所述的 加热灭菌是将磁力搅拌棒盛装在耐热容器中加热灭菌。 6.根据权利要求1所述的培养基平板磁旋式涂布细菌的方法， 其特征是 ： A步骤所述的 加热灭菌为湿热法或干热法灭菌。 7.根据权利要求1所述的培养基平板磁旋式涂布细菌的方法， 其特征是 ： C步骤所述的 磁力搅拌棒转动为顺时针转动、 逆时针转动或顺、 逆时针交替转动。 8.根据权利要求1或7所述的培养基平板磁旋式涂布细菌的方法， 其特征是 。
6、： C步骤所 述的磁力搅拌棒转动时间为 12min。 9. 根据权利要求 1 所述的培养基平板磁旋式涂布细菌的方法， 其特征是 ： 所述的培养 基平板使用的塑料或玻璃培养皿， 培养皿直径为 60mm、 90mm、 100mm 或 120mm。 权 利 要 求 书 CN 103173392 A 2 1/3 页 3 一种培养基平板磁旋式涂布细菌的方法 技术领域 0001 本发明属于微生物实验技术领域， 具体涉及一种培养基平板磁旋式涂布细菌的方 法。 背景技术 0002 培养基平板涂布细菌是微生物实验中常用的方法， 被广泛应用于细菌分离、 细菌 计数、 药敏试验、 拮抗检测等操作中。 细菌通常采用涂。
7、布棒手工涂布， 虽然简便， 但是该方式 容易划伤培养基表面， 较难涂布均匀， 还容易出现人为误差等问题， 而且涂布棒操作要求平 板必须处于敞开或半敞开状态， 培养基与空气接触时间长， 很容易造成杂菌污染。为此， 出 现了细菌涂布接种仪， 该仪器由放置培养皿的可旋转平台 （手动和自动两种） 和无菌涂布器 （不锈钢涂布棒） 组成， 可实现细菌涂布标准化作业。细菌涂布接种仪的工作方式是将培养 皿放在旋转台上， 在培养皿中心放适量样品液， 然后旋转平台带动培养皿旋转， 使样液甩向 四周， 再用不锈钢涂布棒或一次性塑料无菌涂布棒配合平台转动制作出平整而均匀的培养 液膜。这种装置的涂布效果虽然很好， 但是。
8、仍需要将培养基平板敞开才能操作。为此， 开发 一种能够在封闭状态下实现自动化细菌涂布的方法， 对于微生物实验是非常有利的。 发明内容 0003 本发明的目的在于提供了一种能够在封闭状态下自动化涂布细菌的培养基平板 磁旋式涂布细菌的方法。 0004 本发明的目的是这样实现的， 包括以下步骤 ： A、 磁力搅拌棒灭菌 ： 将磁力搅拌棒加热灭菌后干燥， 冷却至室温备用 ； 所述磁力搅拌 棒的长度小于培养基平板的内径 ； B、 磁力搅拌棒设置 ： 将磁力搅拌棒设置在培养基平板的中心轴线上， 对应磁力搅拌棒 中心点位置滴加细菌悬浮液于培养基上， 然后盖好培养皿盖 ； C、 细菌涂布 ： 将培养基平板放置。
9、在磁力搅拌器上， 磁力搅拌器带动磁力搅拌棒在培养 基平板表面转动， 细菌悬浮液被均匀涂布于培养基平板表面 ； 涂布完成后， 取出磁力搅拌棒 消毒清洗后备重复利用。 0005 本发明以磁力搅拌棒作为涂布工具， 利用磁力搅拌棒的水平转动将细菌悬浮液均 匀涂布在培养基平板的表面。本发明巧妙利用了磁力搅拌棒无接触驱动， 实现封闭状态下 细菌涂布 ； 磁力搅拌棒平稳快速旋转， 使细菌悬浮液快速涂布， 提高了涂布效率 ； 磁力搅拌 棒能集中灭菌存放， 缩短了涂布用具准备的时间 ； 利用磁力搅拌棒涂布细菌可实现涂布标 准化， 降低了人为操作误差， 每次都能得到规范化的涂布样品。 具体实施方式 0006 下面。
10、结合实施例对本发明作进一步的说明， 但不以任何方式对本发明加以限定， 任何基于本发明的技术思路的等同替换， 均落入本发明的保护范围。 说 明 书 CN 103173392 A 3 2/3 页 4 0007 本发明包括以下步骤 ： A、 磁力搅拌棒灭菌 ： 将磁力搅拌棒加热灭菌后干燥， 冷却至室温备用 ； 所述磁力搅拌 棒的长度小于培养基平板的内径 ； B、 磁力搅拌棒设置 ： 将磁力搅拌棒设置在培养基平板的中心轴线上， 对应磁力搅拌棒 中心点位置滴加细菌悬浮液于培养基上， 然后盖好培养皿盖 ； C、 细菌涂布 ： 将培养基平板放置在磁力搅拌器上， 磁力搅拌器带动磁力搅拌棒在培养 基平板表面转动。
11、， 细菌悬浮液被均匀涂布于培养基平板表面 ； 涂布完成后， 取出磁力搅拌棒 消毒清洗后备重复利用。 0008 所述的磁力搅拌棒为不锈钢、 磁性铁或普通铁的磁力搅拌棒， 磁力搅拌棒为直径 36mm 的圆柱体。所述的磁性铁或普通铁磁力搅拌棒外包覆一层耐热防腐蚀材料。所述的 耐热防腐蚀材料为玻璃、 陶瓷或聚四氟乙烯材料。 0009 A 步骤所述的加热灭菌是将磁力搅拌棒盛装在耐热容器中加热灭菌。 0010 A 步骤所述的加热灭菌为湿热法或干热法灭菌。 0011 C步骤所述的磁力搅拌棒转动为顺时针转动、 逆时针转动或顺、 逆时针交替转动。 C 步骤所述的磁力搅拌棒转动时间为 12min。 0012 所述。
12、的培养基平板使用的塑料或玻璃培养皿， 培养皿直径为 60mm、 90mm、 100mm 或 120mm。 0013 本发明的工作原理 ： 本发明以磁力搅拌棒作为涂布工具， 利用磁力搅拌棒的水平转动将细菌悬浮液均匀涂 布在培养基平板的表面。本发明巧妙利用了磁力搅拌棒无接触驱动， 实现封闭状态下细菌 涂布 ； 磁力搅拌棒平稳快速旋转， 使细菌悬浮液快速涂布， 提高了涂布效率 ； 磁力搅拌棒能 集中灭菌存放， 缩短了涂布用具准备的时间 ； 利用磁力搅拌棒涂布细菌可实现涂布标准化 作用， 降低了人为操作误差， 每次都能得到规范化的涂布样品。 0014 实施例 1 选择 60mm 的培养基平板， 不锈钢。
13、磁力搅拌棒为直径 3mm 的圆柱体， 长度小于培养基平 板的内径 ； 将磁力搅拌棒盛装在耐热容器中， 湿热法灭菌后， 干燥， 冷却至室温备用 ； 将磁 力搅拌棒设置在培养基平板的中心轴线上， 对应磁力搅拌棒中心点位置滴加细菌悬浮液于 培养基上， 然后盖好培养皿盖 ； 将培养基平板放置在磁力搅拌器上， 磁力搅拌器带动磁力搅 拌棒在培养基平板表面顺时针转动 1min， 将细菌悬浮液均匀涂布于培养基平板表面 ； 涂布 完成后， 取出磁力搅拌棒消毒清洗后备重复利用。 0015 实施例 2 选择 90mm 的培养基平板， 包覆聚四氟乙烯的磁性铁磁力搅拌棒为直径 4mm 的圆柱体， 长度小于培养基平板的内。
14、径 ； 将磁力搅拌棒盛装在耐热容器中， 干热法灭菌后， 干燥， 冷却 至室温备用 ； 将磁力搅拌棒设置在培养基平板的中心轴线上， 对应磁力搅拌棒中心点位置 滴加细菌悬浮液于培养基上， 然后盖好培养皿盖 ； 将培养基平板放置在磁力搅拌器上， 磁力 搅拌器带动磁力搅拌棒在培养基平板表面逆时针转动 2min， 将细菌悬浮液均匀涂布于培养 基平板表面 ； 涂布完成后， 取出磁力搅拌棒消毒清洗后备重复利用。 0016 实施例 3 选择100mm的培养基平板， 包覆聚四氟乙烯的普通铁磁力搅拌棒为直径6mm的圆柱体， 说 明 书 CN 103173392 A 4 3/3 页 5 长度小于培养基平板的内径 ；。
15、 将磁力搅拌棒盛装在耐热容器中， 湿热法灭菌后， 干燥， 冷却 至室温备用 ； 将磁力搅拌棒设置在培养基平板的中心轴线上， 对应磁力搅拌棒中心点位置 滴加细菌悬浮液于培养基上， 然后盖好培养皿盖 ； 将培养基平板放置在磁力搅拌器上， 磁力 搅拌器带动磁力搅拌棒在培养基平板表面顺、 逆时针交替转动 2min， 将细菌悬浮液均匀涂 布于培养基平板表面 ； 涂布完成后， 取出磁力搅拌棒消毒清洗后备重复利用。 0017 实施例 4 选择120mm的培养基平板， 包覆玻璃的普通铁磁力搅拌棒为直径5mm的圆柱体， 长度小 于培养基平板的内径 ； 将磁力搅拌棒盛装在耐热容器中， 干热法灭菌后， 干燥， 冷却。
16、至室温 备用 ； 将磁力搅拌棒设置在培养基平板的中心轴线上， 对应磁力搅拌棒中心点位置滴加细 菌悬浮液于培养基上， 然后盖好培养皿盖 ； 将培养基平板放置在磁力搅拌器上， 磁力搅拌器 带动磁力搅拌棒在培养基平板表面逆时针转动 1.5min， 将细菌悬浮液均匀涂布于培养基平 板表面 ； 涂布完成后， 取出磁力搅拌棒消毒清洗后备重复利用。 0018 实施例 5 选择 90mm 的培养基平板， 包覆陶瓷的磁性铁磁力搅拌棒为直径 4mm 的圆柱体， 长度小 于培养基平板的内径 ； 将磁力搅拌棒盛装在耐热容器中， 湿热法灭菌后， 干燥， 冷却至室温 备用 ； 将磁力搅拌棒设置在培养基平板的中心轴线上， 对应磁力搅拌棒中心点位置滴加细 菌悬浮液于培养基上， 然后盖好培养皿盖 ； 将培养基平板放置在磁力搅拌器上， 磁力搅拌器 带动磁力搅拌棒在培养基平板表面顺、 逆时针交替转动 1.5min， 将细菌悬浮液均匀涂布于 培养基平板表面 ； 涂布完成后， 取出磁力搅拌棒消毒清洗后备重复利用。 说 明 书 CN 103173392 A 5 。