桑黄新菌株及其驯化.pdf

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摘要
申请专利号:

CN201110095370.4

申请日:

2011.04.15

公开号:

CN102334418A

公开日:

2012.02.01

当前法律状态:

撤回

有效性:

无权

法律详情:

发明专利申请公布后的视为撤回IPC(主分类):C12N 1/14申请公布日:20120201|||实质审查的生效IPC(主分类):A01G 1/04申请日:20110415|||公开

IPC分类号:

A01G1/04; C05G3/00

主分类号:

A01G1/04

申请人:

付红敏; 蒯元璋; 吴立云

发明人:

付红敏; 蒯元璋; 吴立云

地址:

212001 江苏省镇江市仙鹤巷38-402号

优先权:

专利代理机构:

代理人:

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内容摘要

桑黄(Phellinuslinteus,PL)是寄生桑树的一种稀有真菌菌种。原产于日本国女岛。据国内外大量文献报道,PL的活性物质具有强大的抗肿瘤功能。中国也有桑黄(Phellinusingniarius,PI)的分布,与日本的桑黄是同名异种。PL与PI的活性物质是不同的,PI抗肿瘤的功效比PL的差。本发明是在引进PL菌种的基础上,经自助剂诱变处理、分离、筛选获得新桑黄菌株。新菌株子实体质量好、产量高,极具规模化生产的前景。

权利要求书

1: 用自配 C 助剂 (以下简称 C 助剂) 制成 PDA 加富培养基, 将桑黄子实体进行组织分离 培养, 生产出纯母种桑黄菌株, 再将纯母种桑黄菌株转接到首代桑黄母种菌株培养基上, 培 养出首代母种桑黄菌株, 完成桑黄新菌株及其驯化。
2: PDA 加富培养基配方为 : 马铃薯 200 克、 葡萄糖 20 克、 磷酸二氢钾 3 克、 硫酸镁 1.5 克、 VB110 毫克、 琼脂 18-20 克、 桑树枝 (截成 3 厘米左右) 100 克、 加入 C 助剂 1000 毫升。
3: 制作方法 : a, 将桑树木段放入 C 助剂 100° C 中煮沸 20 分钟, 过滤取其滤液, 不足 1000 毫升补足, 马铃薯洗净去皮去芽眼, 切成小薄片放入桑枝滤液中煮沸, 马铃薯煮至酥而不烂时用 8 层 纱布过滤, 滤液加 C 助剂补足 1000 毫升, 再将其它物质加入滤液中, 搅拌使其充分溶化, 趁 热分装入试管中, 擦掉试管壁上培养基, 塞上棉塞, 十只一捆, 棉塞端包上报纸、 盖上高压塑 料膜, 放入高压锅中灭菌, 当锅内压力达 0.05MP 时, 打开放气阀排净冷空气, 指针回零后, 重新升至 0.1-0.13MP 时维持 25-30 分钟, 指针自然回零后取出, 制成 PDA 加富培养基, 培养 基在温度 25° C 室温下放置两天, 检查无杂菌菌落, 即可在接种箱内将桑黄子实体组织接 入试管中, 进行组织分离培养, 生产出纯母种桑黄菌株。 b, 重复完成 (a,) 的 PDA 加富培养基制作过程, 然后将纯母种桑黄菌株接入 PDA 加富 培养基试管中, 在温度 23° C-25° C, 湿度 65%, 避光培养 7-10 天菌丝长满试管, 检查无杂 菌感染, 培养出首代母种桑黄菌株, 完成桑黄新菌株及其驯化的方法。

说明书


桑黄新菌株及其驯化

    【技术领域】
     桑黄 (Phellinus linteus,PL)是 寄 生 桑 树 的 一 种 稀 有 真 菌, 属多孔菌目 (Polyporalas )、 多孔菌科 (Polypoeaceae )、 针层孔菌属 (Phellinus )。原产于北亚热带的 日本、 冲绳、 女岛分布的野生桑树上。其主要特征 : 子实体黄色, 菌盖呈牛蹄状, 间生黑色绒 毛状结构 (此为子实体形态识别菌种的主要标识) 。
     据国内外大量文献报道认为 : 桑黄 (PL) 的活性物质对肿瘤抑制率可达 96.7% ; 提 高巨噬细胞五倍 ; 提高 T 细胞三倍 ; 具强大抗氧化性, 优于灵芝, 其强大的抗肿瘤功能, 日本 人誉之为 ‘梦幻蕈’ 。
     背景技术 隶属于针层孔菌属的有不少菌种。 分布在我国有此属的、 并称为桑黄的, 甚至有桑 黄产品上市的大多菌种是 (P. ingniarius, PI) 。而 PL 与 PI 是不同的菌种, 其有效活性物 质以及抗肿瘤功效完全不同。
     据日本有关单位研究, 在 PL 中分离到许多菌株 (PL-01~PL-18) 其活性物质和产量 是不同的, 并认为只有 PL-08,PL-10 菌株及其 PL-08 培养法, 才能得到这种功效。此菌株和 培养法在日本、 韩国对外保密基本上不外传。我们得到二株 PL 菌种, 其中一株为 PL-08。
     发明内容 经我们研究并在自己研发的 C 助剂 (C 助剂的作用 : 1, 加速了菌丝营养生长向生殖 生长的转化速度 ; 2, 明显提高了菌丝的抗杂能力 ; 3, 延缓菌丝衰老, 同等条件下能延长存 储时间 70% ; 4, 具有消除自由基作用) 培养下, 不断驯化培养, 得到自主的新菌株, PL-06K 和 PL-10S。驯化的菌株适应镇江地区、 北亚热带北缘生产。
     本发明 PL 菌株, 其菌丝浓黄色、 爬壁能力强、 在适温、 适湿下 10 天能长满试管, 菌 丝不易老化 ; 本发明的加 C 助剂培养方法, 能显著提高抗杂菌污染能力, 生产栽培出子实体 质量好体大, 极具规模化生产的前景。
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资源描述

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1、10申请公布号CN102334418A43申请公布日20120201CN102334418ACN102334418A21申请号201110095370422申请日20110415A01G1/04200601C05G3/0020060171申请人付红敏地址212001江苏省镇江市仙鹤巷38402号申请人蒯元璋吴立云72发明人付红敏蒯元璋吴立云54发明名称桑黄新菌株及其驯化57摘要桑黄(PHELLINUSLINTEUS,PL)是寄生桑树的一种稀有真菌菌种。原产于日本国女岛。据国内外大量文献报道,PL的活性物质具有强大的抗肿瘤功能。中国也有桑黄(PHELLINUSINGNIARIUS,PI)的分布,。

2、与日本的桑黄是同名异种。PL与PI的活性物质是不同的,PI抗肿瘤的功效比PL的差。本发明是在引进PL菌种的基础上,经自助剂诱变处理、分离、筛选获得新桑黄菌株。新菌株子实体质量好、产量高,极具规模化生产的前景。51INTCL19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书1页CN102334425A1/1页21用自配C助剂(以下简称C助剂)制成PDA加富培养基,将桑黄子实体进行组织分离培养,生产出纯母种桑黄菌株,再将纯母种桑黄菌株转接到首代桑黄母种菌株培养基上,培养出首代母种桑黄菌株,完成桑黄新菌株及其驯化。2PDA加富培养基配方为马铃薯200克、葡萄糖20克、磷酸二氢钾3克。

3、、硫酸镁15克、VB110毫克、琼脂1820克、桑树枝(截成3厘米左右)100克、加入C助剂1000毫升。3制作方法A,将桑树木段放入C助剂100C中煮沸20分钟,过滤取其滤液,不足1000毫升补足,马铃薯洗净去皮去芽眼,切成小薄片放入桑枝滤液中煮沸,马铃薯煮至酥而不烂时用8层纱布过滤,滤液加C助剂补足1000毫升,再将其它物质加入滤液中,搅拌使其充分溶化,趁热分装入试管中,擦掉试管壁上培养基,塞上棉塞,十只一捆,棉塞端包上报纸、盖上高压塑料膜,放入高压锅中灭菌,当锅内压力达005MP时,打开放气阀排净冷空气,指针回零后,重新升至01013MP时维持2530分钟,指针自然回零后取出,制成PDA。

4、加富培养基,培养基在温度25C室温下放置两天,检查无杂菌菌落,即可在接种箱内将桑黄子实体组织接入试管中,进行组织分离培养,生产出纯母种桑黄菌株。B,重复完成A,的PDA加富培养基制作过程,然后将纯母种桑黄菌株接入PDA加富培养基试管中,在温度23C25C,湿度65,避光培养710天菌丝长满试管,检查无杂菌感染,培养出首代母种桑黄菌株,完成桑黄新菌株及其驯化的方法。权利要求书CN102334418ACN102334425A1/1页3桑黄新菌株及其驯化技术领域0001桑黄(PHELLINUSLINTEUS,PL)是寄生桑树的一种稀有真菌,属多孔菌目POLYPORALAS、多孔菌科POLYPOEAC。

5、EAE、针层孔菌属PHELLINUS。原产于北亚热带的日本、冲绳、女岛分布的野生桑树上。其主要特征子实体黄色,菌盖呈牛蹄状,间生黑色绒毛状结构(此为子实体形态识别菌种的主要标识)。0002据国内外大量文献报道认为桑黄(PL)的活性物质对肿瘤抑制率可达967;提高巨噬细胞五倍;提高T细胞三倍;具强大抗氧化性,优于灵芝,其强大的抗肿瘤功能,日本人誉之为梦幻蕈。0003背景技术0004隶属于针层孔菌属的有不少菌种。分布在我国有此属的、并称为桑黄的,甚至有桑黄产品上市的大多菌种是(PINGNIARIUS,PI)。而PL与PI是不同的菌种,其有效活性物质以及抗肿瘤功效完全不同。0005据日本有关单位研究。

6、,在PL中分离到许多菌株(PL01PL18)其活性物质和产量是不同的,并认为只有PL08,PL10菌株及其PL08培养法,才能得到这种功效。此菌株和培养法在日本、韩国对外保密基本上不外传。我们得到二株PL菌种,其中一株为PL08。发明内容0006经我们研究并在自己研发的C助剂(C助剂的作用1,加速了菌丝营养生长向生殖生长的转化速度;2,明显提高了菌丝的抗杂能力;3,延缓菌丝衰老,同等条件下能延长存储时间70;4,具有消除自由基作用)培养下,不断驯化培养,得到自主的新菌株,PL06K和PL10S。驯化的菌株适应镇江地区、北亚热带北缘生产。0007本发明PL菌株,其菌丝浓黄色、爬壁能力强、在适温、适湿下10天能长满试管,菌丝不易老化;本发明的加C助剂培养方法,能显著提高抗杂菌污染能力,生产栽培出子实体质量好体大,极具规模化生产的前景。说明书CN102334418A。

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