2吡啶2基吡唑32H酮的衍生物、其制备和作为HIF激活剂的治疗用途.pdf

2- 吡啶 -2- 基 - 吡唑 -3(2H)- 酮的衍生物、 其制备和作为 HIF 激活剂的治疗用途
    本发明涉及新的取代的二氢吡唑啉酮衍生物， 涉及它们的制备以及它们作为转录 因子 HIF 的活化剂的治疗用途。
     缺氧诱导因子 (Hypoxia-inducible factor， HIF)(HIF1α) 为在所有组织中组成 性表达的转录因子。 该蛋白由 Gregg Semenza 于 1994 年在研究 EPO 基因的调节序列的过程 中发现。他鉴定了位于 EPO 启动子的非编码 3’ 位的序列， 其具有 “缺氧应答元件 (hypoxia response element)” (HRE) 的名称且其为允许 EPO 转录激活的蛋白 HIF1α 的结合位点。 之 后， HRE 序列还位于超过 70 个其它基因上， 如 VEGF( 血管内皮生长因子 ) 或 Glut1( 葡萄糖 载体 1)。该转录复合物 HIF-1 最小为由蛋白 HIF1α 或 HIF2α 和另一转录因子 ARNT( 之前 已知为 HIF1β) 形成的杂二聚体。ARNT 组成性且稳定地在细胞中表达， 且转录复合物调节 的主要部分与细胞中存在的 HIF1α 的量相关， 因此其为限制因子。
     在常氧条件下， 蛋白 HIF1α 快速降解 ( 半衰期为 5 分钟 )。在 HIF 脯氨酰羟化酶 (HIF-PHDs 或 EGLNs) 分别羟化人形的脯氨酸 402 和 563 以及脯氨酸 405 和 531 上的 HIF1α 或 HIF2α 后发生该降解。该羟化使得 Von Hippell Lindau 蛋白 (pVHL) 与泛素连接酶结 合， 其导致 HIF1α 或 HIF2α 通过泛素蛋白酶体系统降解。当细胞或组织经受高缺氧 / 缺 血时， HIF1α 或 HIF2α 不再被泛素 - 蛋白酶体系统降解， 然后可与 HIF 复合物的其它转录 因子结合以转移至核中并活化它们的靶基因。
     尽管高缺氧是蛋白 HIF1α 和 HIF2α 活化的主要原因， 其它诱导剂 ( 如胰岛素和 生长因子 ) 也可在它们的稳定中起作用， 尤其通过在它们的丝氨酸 641 和 643 上的磷酸化 起作用。
     因此， 建立涉及测量蛋白 HIF1α 和 / 或 HIF2α 的稳定的表型筛选以鉴别本发明 的化合物。
     本发明化合物对应于下式 (I) ：
     其中
     R 表示基团 -SO2-NR3R4、 氢原子、 卤素原子、 基团 - 卤代 (C1-C5) 烷基、 基团 -CO2R5 或基团 -SO2-R4 ； R3、 R4 和 R5 如下定义 ；
     R1 表 示 不 含 氮 原 子 的 杂 环 烷 基、 基 团 -W-(C3-C6) 环 烷 基、 基 团 -W- 芳 基、 基 团 -W- 杂芳基、 基团 -W- 杂环烷基、 基团 -W-COOR5 或基团 -W-CONR5R6，
     (i) 所述芳基、 杂芳基和杂环烷基任选地在至少一个碳原子上被至少一个选自 以下的取代基取代 ： 卤素原子、 基团 (C1-C5) 烷基、 基团 -(C1-C5) 亚烷基 -O-(C1-C5) 烷 基、 基 团 -(C1-C5) 烷 氧 基、 羟 基、 基 团 - 卤 代 (C1-C5) 烷 基、 氰 基、 基 团 -O(C1-C5) 亚 烷
     基 -O-(C1-C5) 烷基、 基团 -O-(C1-C5) 亚烷基 -NR5R6、 基团 -SO2-(C1-C5) 烷基、 基团 -NR5R6 和基团 -CO2R5， 和
     (ii) 当其为杂环烷基时， 所述基团包括至少一个氮原子， 该原子可任选地具有一 个选自基团 (C1-C5) 烷基的取代基，
     R2 表示氢原子、 基团 -(C1-C5) 烷基、 基团 -(C1-C5) 亚烷基 -O-(C1-C5) 烷基、 基 团 - 卤代 (C1-C5) 烷基、 基团 -W-COOR5、 基团 -W-C(O)NHR5 或基团 -W-C(O)-NR5R6 ； W、 R5 和 R6 如下定义 ；
     ○ n 表示 0、 1或2；
     ○W为
     (i) 基团 -(C1-C5) 亚烷基 -， 其任选地被选自基团 -(CH2)n-CO2R5 和基团 -(CH2) n-(CO)NR5R6 的基团取代， 其中 n 如上定义且 R5 和 R6 如下定义 ； 或
     (ii) 基团 -(C3-C6) 亚环烷基 -，
     ○ R3 和 R4
     (i) 其可相同或不同， 彼此独立地表示氢原子、 基团 -(C1-C5) 烷基、 基团 -(C3-C6) 环烷基、 基团 -(C1-C5) 亚烷基 -O-(C1-C5) 烷基、 芳基、 基团 -CH2- 芳基、 杂芳基、 杂环烷基、 基团 -W-OH、 基团 -W-CHOH-CH2OH、 基团 -W-CO2R5、 基团 -W-NR5R6 或基团
     -W-O-(CH2)n- 芳基 ；
     所述基团 -(C3-C6) 环烷基和杂环烷基任选地
     ○在至少一个碳原子上被至少一个选自以下的基团取代 ：
     -(C1-C5) 烷基、 基团 -(C1-C5) 烷氧基、 羟基、 基团 -W-NR5R6 和基团 -W-CO2R5， 在 基团 -(C3-C6) 环烷基和杂环烷基的情况下， 和/或
     ○在至少一个选自氮的杂原子上被至少一个选自 -(C1-C5) 烷基的基团取代， 在 杂环烷基的情况下，
     其中 W 和 n 如上定义， 且 R5 和 R6 如下定义， 且当 R3 和 R4 相同时， 它们不能为氢 原子 ；
     (ii) 或者 R3 和 R4 与携带它们的氮原子一起形成杂环烷基， 其任选地在至少一 个碳原子和 / 或， 合适时， 在至少一个杂原子上被至少一个选自基团 -(C1-C5) 烷基和基 团 -CH2- 芳基的取代基取代 ；
     ○ R5 和 R6 可 相 同 或 不 同， 彼 此 独 立 地 表 示 氢 原 子、 基 团 -(C1-C5) 烷 基 或 基 团 -(C1-C5) 卤代烷基，
     下列化合物除外 ：
     ● 4- 苄基 -2-( 吡啶 -2- 基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮
     ● 4-(2， 4- 二氯苄基 )-2-( 吡啶 -2- 基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮
     ● 4-(4- 甲氧基苄基 )-2-( 吡啶 -2- 基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮
     ● 4-(4- 溴苄基 )-2-( 吡啶 -2- 基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮
     ● 2-( 吡啶 -2- 基 )-4-[2-( 三氟甲基 ) 苄基 ]-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮
     ● 4-(4- 氯苄基 )-2-( 吡啶 -2- 基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮
     ● 4-(1， 3- 苯并二氧杂环戊烯 -5- 基甲基 )-2-( 吡啶 -2- 基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡 唑 -3- 酮● 4-(3- 甲基苄基 )-2-( 吡啶 -2- 基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮
     ● 4-(2- 氯苄基 )-2-( 吡啶 -2- 基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮
     ● 4-(4- 甲基苄基 )-2-( 吡啶 -2- 基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮
     ● 4-(3- 氯苄基 )-2-( 吡啶 -2- 基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮
     ● 4-(4- 叔丁基苄基 )-2-( 吡啶 -2- 基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮
     ● 4- 苄基 -5- 甲基 -2-( 吡啶 -2- 基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮
     ● 5- 甲基 -4-(1- 苯基乙基 )-2-( 吡啶 -2- 基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮
     ● 4- 苄基 -2-(6- 氯吡啶 -2- 基 )-5- 甲基 -1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮
     ● 4-{1-[4-( 二 乙 基 氨 基 ) 苯 基 ] 乙 基 }-5- 甲 基 -2-( 吡 啶 -2- 基 )-1， 2- 二 氢 -3H- 吡唑 -3- 酮。
     式 (I) 化合物可以以碱或盐的形式存在， 在该情况下的式 (I) 化合物已经与酸或 碱 ( 尤其是药学上可接受的酸或碱 ) 成盐。然后将它们提及为加成盐， 其构成本发明的一 部分。
     所述盐有利地用药学上可接受的酸制备， 但例如用于纯化或分离式 (I) 化合物的 与其它酸形成的盐也构成本发明的一部分。
     式 (I) 化合物还可以以水合物或溶剂合物的形式存在， 即结合或组合一个或多个 水分子或溶剂的形式。该水合物和溶剂合物也构成本发明的一部分。
     式 (I) 化合物的各种互变异构形式也构成本发明的一部分。
     另外， 本发明的一个主题还为统一测试方法 (uniform test process)， 其用于在 将所述细胞用一种或多种测试化合物处理后， 通过 β- 半乳糖苷酶互补直接测量细胞 ( 优 选 HEK 细胞 ) 核中的 HIF1α 蛋白的量， 其由以下组成 ：
     (a) 优选在 384- 孔板中， 将所述细胞接种至合适的培养基 ( 优选 1％胎牛血清 ( 缩 写为 FCS)) 中 ；
     (b) 将在合适溶剂中的合适浓度的测试化合物加入至之前在所述培养基中接种的 细胞中 ； 优选地， 将测试化合物在 0.1％ FCS 中稀释 ；
     (c) 在培养箱中在大约 37℃培养由此制得的所述细胞， 有利地培养大约 6 小时 ；
     (d) 用含有 β- 半乳糖苷酶的化学发光底物的溶胞缓冲液溶解细胞 ；
     (e) 避光培养， 然后读数和测量发光， 其为 β- 半乳糖苷酶活性的函数。
     本发明化合物接受了如上定义的筛选测试。
     在本发明上下文中， 除非在文中另外提及， 否则适用以下定义 ：
     - 卤素原子 ： 氟、 氯、 溴或碘原子 ；
     - 烷基 ： 直链或支链的饱和脂肪基团， 其可包含 1、 2、 3、 4 或 5 个碳原子 ( 缩写 为 -(C1-C5) 烷基 )。 可以提及的实例包括 ： 作为 (i) 基团 -C1 烷基， 甲基， 作为 (ii) 基团 -C2 烷基， 乙基， 作为 (iii) 基团 -C3 烷基， 丙基或异丙基， 作为 (iv) 基团 -C4 烷基， 丁基、 异丁 基或叔丁基， 作为 (v) 基团 -C5 烷基， 戊基或异戊基 ；
     - 亚烷基 ： 直链或支链的饱和二价的如上定义的烷基基团， 其可包含 1、 2、 3、 4或5 个碳原子 ( 缩写为 -(C1-C5) 亚烷基 -)。可以提及的实例包括亚甲基 ( 或 -CH2-)、 亚乙基 ( 或 -CH2-CH2-) 或亚丙基 (-CH2-CH2-CH2- 或 -C(CH3)2-) ；
     - 环烷基 ： 环状烷基基团， 其可包含 3、 4、 5 或 6 个碳原子， 也缩写为 -(C3-C6) 环烷 基。可以提及的实例包括环丙基、 环丁基、 环戊基和环己基 ；
     - 亚环烷基 ： 饱和二价的如上定义的环烷基， 其可包含 3、 4、 5 或 6 个碳原子且缩写 为 -(C3-C6) 亚环烷基 -。可以提及的实例包括基团 - 亚环丙基 -、 - 亚环丁基 -、 - 亚环戊 基 - 和 - 亚环己基 - ；
     - 烷氧基 ： 基团 -O- 烷基， 其中所述烷基基团如上定义。可以提及的实例包括基 团 -O-(C1-C5) 烷基或 -(C1-C5) 烷氧基， 尤其是作为 (i) 基团 -O-C1 烷基， 基团 -O 甲基， 作 为 (ii) 基团 -O-C2 烷基， 基团 -O 乙基， 作为 (iii) 基团 -O-C3 烷基， 基团 -O 丙基或 -O 异丙 基， 作为 (iv) 基团 -O-C4 烷基， 基团 -O 丁基、 -O 异丁基或 -O 叔丁基， 作为 (v) 基团 -O-C5 烷基， 基团 -O 戊基或 -O 异戊基 ；
     - 烷氧基 - 烷基 ： 式 - 亚烷基 -O- 烷基的基团， 其中包括相同数目的碳原子或不包 括相同数目的碳原子的所述烷基和亚烷基如上定义。可以提及的实例包括基团 -(C1-C5) 亚烷基 -O-(C1-C5) 烷基， 其中 -(C1-C5) 亚烷基 - 和 -(C1-C5) 烷基如上定义 ；
     - 烷氧基 - 烷氧基 ： 式 -O- 亚烷基 -O- 烷基的基团， 其中包括相同数目的碳或不包 括相同数目的碳的所述亚烷基和烷基如上定义 ；
     - 卤代烷基 ： 如上定义的烷基基团， 被 1、 2、 3、 4 或 5 个如上定义的卤素原子取代。 可以提及的实例包括基团 - 卤代 (C1-C5) 烷基， 其中 (C1-C5) 烷基如上定义， 例如三氟甲基 ( 缩写为 -CF3) 或基团 -CH2-CF3 ；
     - 芳基 ： 含有 5 或 6 个碳原子的环状芳香基团。可以提及的芳基的实例为苯基 ；
     - 杂芳基 ： 含有 2、 3、 4 或 5 个碳原子且包括 1 至 3 个杂原子的环状芳香基团， 所述 杂原子可相同或不同， 彼此独立地选自氮原子、 氧原子和硫原子， 当存在两个杂原子时， 或 所述杂原子可相同或不同， 彼此独立， 当存在三个杂原子时。可提及吡啶基、 吡咯基和呋喃 基；
     - 杂环烷基 ： 含有 4、 5、 6 或 7 个碳原子和包括 1、 2 或 3 个选自氧、 氮和硫的杂 原子的任选桥接的环状烷基。可尤其提及哌啶基、 哌嗪基、 吡咯烷基、 六亚甲基亚氨基 (hexamethyleneimino)、 吗啉基和 1， 1- 二氧化四氢噻吩基 (dioxydotetrahydrothienyl) ；
     - 围绕式 (I) 化合物的吡啶的字母 α、 β、 γ 和 δ 使得识别不同碳原子的位置成 为可能。
     在本发明所述化合物中， 可提及第一组对应于式 (I) 的化合物， 其中 ：
     R 表示基团 -SO2-NR3R4、 氢原子、 卤素原子、 基团 - 卤代 (C1-C5) 烷基、 基团 -CO2R5或基团 -SO2-R4 ； R3、 R4 和 R5 如下定义 ；
     和/或
     R1 表 示 不 含 氮 原 子 的 杂 环 烷 基、 基 团 -W-(C3-C6) 环 烷 基、 基 团 -W- 芳 基、 基 团 -W- 杂芳基、 基团 -W- 杂环烷基、 基团 -W-COOR5 或基团 -W-CONR5R6，
     (i) 所述芳基、 杂芳基和杂环烷基任选地在至少一个碳原子上被至少一个选自 以下的取代基取代 ： 卤素原子、 基团 (C1-C5) 烷基、 基团 -(C1-C5) 亚烷基 -O-(C1-C5) 烷 基、 基 团 -(C1-C5) 烷 氧 基、 羟 基、 基 团 - 卤 代 (C1-C5) 烷 基、 氰 基、 基 团 -O(C1-C5) 亚 烷 基 -O-(C1-C5) 烷基、 基团 -O-(C1-C5) 亚烷基 -NR5R6、 基团 -SO2-(C1-C5) 烷基、 基团 -NR5R6 和基团 -CO2R5， 和
     (ii) 当其为杂环烷基时， 所述基团包括至少一个氮原子， 该原子可任选地具有一 个选自基团 (C1-C5) 烷基的取代基，
     和/或
     R2 表示氢原子、 基团 -(C1-C5) 烷基、 基团 -(C1-C5) 亚烷基 -O-(C1-C5) 烷基、 基 团 - 卤代 (C1-C5) 烷基、 基团 -W-COOR5、 基团 -W-C(O)NHR5 或基团 -W-C(O)-NR5R6 ； W、 R5 和 R6 如下定义 ；
     和/或
     n 表示 0、 1或2；
     和/或
     W为
     (i) 基 团 -(C1-C5) 亚 烷 基 -， 其任选地被选自以下的基团取代 ： 基 团 -(CH2) n-CO2R5 和基团 -(CH2)n-(CO)NR5R6， 其中 n 如上定义且 R5 和 R6 如下定义 ； 或
     (ii) 基团 -(C3-C6) 亚环烷基 -，
     和/或
     R3 和 R4
     (i) 其可相同或不同， 彼此独立地表示氢原子、 基团 -(C1-C5) 烷基、 基团 -(C3-C6) 环烷基、 基团 -(C1-C5) 亚烷基 -O-(C1-C5) 烷基、 芳基、 基团 -CH2- 芳基、 杂芳基、 杂环烷基、 基团 -W-OH、 基团 -W-CHOH-CH2OH、 基团 -W-CO2R5、 基团 -W-NR5R6 或基团 -W-O-(CH2)n- 芳基 ；
     所述基团 -(C3-C6) 环烷基和杂环烷基任选地
     ○在至少一个碳原子上被至少一个选自以下的基团取代 ： -(C1-C5) 烷基、 基 团 -(C1-C5) 烷氧基、 羟基、 基团 -W-NR5R6 和基团 -W-CO2R5， 在基团 -(C3-C6) 环烷基和杂环 烷基的情况下， 和/或
     ○在至少一个选自氮的杂原子上被至少一个选自 -(C1-C5) 烷基的基团取代， 在 杂环烷基的情况下，
     其中 W 和 n 如上定义且 R5 和 R6 如下定义， 且当 R3 和 R4 相同时， 它们不可为氢原 子；
     (ii) 或者 R3 和 R4 与携带它们的氮原子一起形成杂环烷基， 其任选地在至少一 个碳原子和 / 或， 合适时， 在至少一个杂原子上， 被至少一个选自基团 -(C1-C5) 烷基和基 团 -CH2- 芳基的取代基取代 ；
     和/或R5 和 R6， 其可相同或不同， 彼此独立地表示氢原子、 基团 -(C1-C5) 烷基或基 团 -(C1-C5) 卤代烷基 ；
     除了上面已经提及的化合物本身外。
     第一小组的本发明化合物由式 (I) 化合物构成， 其中 R 表示基团 -SO2-NR3R4、 基 团 - 卤代 (C1-C5) 烷基、 基团 -CO2R5 或基团 -SO2-R4， 其中 R3、 R4 个 R5 如上定义。
     第二小组的本发明化合物由式 (I) 化合物构成， 其中 R 表示基团 -SO2-NR3R4 或 -CO2R5， 其中 R3、 R5 和 R4 如上定义。
     第三小组的本发明化合物由式 (I) 化合物构成， 其中 R 表示氢原子、 卤素原子、 基 团 - 卤代 (C1-C5) 烷基、 基团 -CO2R5 或基团 -SO2-R4， 其中 R4 和 R5 如上定义。
     第四小组的本发明化合物由式 (I) 化合物构成， 其中 R 为吡啶 β 位的原子上的取 代基。
     第五小组的本发明化合物由式 (I) 化合物构成， 其中 R1 表示不含氮原子的杂环 烷基、 基团 -W-(C3-C6) 环烷基、 基团 -W- 芳基、 基团 -W- 杂芳基、 基团 -W- 杂环烷基、 基 团 -W-COOR5 或基团 -W-CONR5R6，
     所述芳基、 杂芳基和杂环烷基任选地在至少一个碳原子上被至少一个选自以 下的取代基取代 ： 卤 素 原 子、 基 团 (C1-C5) 烷 基、 基 团 -(C1-C5) 亚 烷 基 -O-(C1-C5) 烷 基、 基 团 -(C1-C5) 烷 氧 基、 羟 基、 基 团 - 卤 代 (C1-C5) 烷 基、 氰 基、 基 团 -O(C1-C5) 亚 烷 基 -O-(C1-C5) 烷基、 基团 -O-(C1-C5) 亚烷基 -NR5R6、 基团 -SO2-(C1-C5) 烷基、 基团 -NR5R6 和基团 -CO2R5， 和
     当其为杂环烷基时， 所述基团包括至少一个氮原子， 该原子可任选地具有选自基 团 (C1-C5) 烷基的取代基，
     其中 W 为基团 (C1-C5) 亚烷基或基团 (C3-C6) 亚环烷基且其中 R5 和 R6， 其可相同 或不同， 彼此独立地表示氢原子、 基团 -(C1-C5) 烷基或基团 -(C1-C5) 卤代烷基。
     有利地， 所述杂环烷基表示哌啶基， 所述芳基表示苯基， 且所述杂芳基表示吡啶 基。
     第 六 小 组 的 本 发 明 化 合 物 由 式 (I) 化 合 物 构 成， 其 中 R2 表 示 氢 原 子、 基 团 -(C1-C5) 烷基、 基团 -(C1-C5) 亚烷基 -O-(C1-C5) 烷基、 基团 - 卤代 (C1-C5) 烷基、 基 团 -W-COOR5、 基团 -W-C(O)NHR5 或基团 -W-C(O)-NR5R6 ；
     其中 W、 R5 个 R6 如上定义。
     第七小组的本发明化合物由式 (I) 化合物构成， 其中 R 表示基团 -SO2-NR3R4， 有利地在吡啶的 β 位， 且其中 R3 和 R4， 其可相同或不同， 彼此独立地表示氢原子、 基 团 -(C1-C5) 烷基、 基团 -(C3-C6) 环烷基、 基团 -(C1-C5) 亚烷基 -O-(C1-C5) 烷基、 芳基、 基团 -CH2- 芳基、 杂芳基、 杂环烷基、 基团 -W-OH、 基团 -W-CHOH-CH2OH、 基团 -W-CO2R5、 基 团 -W-NR5R6 或基团 -W-O-(CH2)n- 芳基 ；
     当 R3 和 R4 相同时， 它们不为氢原子 ； 且
     当 R3 和 / 或 R4 选自基团 -(C3-C6) 环烷基和杂环烷基时， 所述基团可任选地
     ○在至少一个碳原子上被至少一个选自以下的基团取代 ： -(C1-C5) 烷基、 基 团 -(C1-C5) 烷氧基、 羟基、 基团 -W-NR5R6 和基团 -W-CO2R5， 在基团 -(C3-C6) 环烷基和杂环 烷基的情况下， 和/或○在至少一个选自氮的杂原子上被至少一个选自 -(C1-C5) 烷基的基团取代， 在 杂环烷基的情况下，
     其中 W、 R5 和 R6 如上定义且其中 n 表示 0、 1 或 2。
     有利地， 所述杂环烷基表示哌啶基， 所述芳基表示苯基且所述杂芳基表示吡啶基。
     第八小组的本发明化合物由式 (I) 化合物构成， 其中 R 表示基团 -SO2-NR3R4， 有利 地在吡啶的 β 位， 且其中 R3 和 R4 与携带它们的氮原子一起形成杂环烷基， 其任选地在至 少一个碳原子和 / 或， 合适时， 在至少一个杂原子上被至少一个选自基团 -(C1-C5) 烷基和 基团 -CH2- 芳基的取代基取代。
     有利地， 所述杂环烷基表示选自以下的基团 ： 哌啶基、 哌嗪基、 吗啉基、 吡咯烷基和 六亚甲基亚氨基， 且所述芳基表示苯基。
     第九小组的本发明化合物由式 (I) 化合物构成， 其中基团 R、 R1 和 / 或 R2 包括基 团 R5 和 / 或 R6，
     R5 或 R6 为氢原子、 基团 -(C1-C5) 烷基或基团 -(C1-C5) 卤代烷基， 或
     R5 和 R6， 其可相同或不同， 彼此独立地表示氢原子、 基团 -(C1-C5) 烷基或基 团 -(C1-C5) 卤代烷基。
     有利地， R5 和 / 或 R6 选自基团 (C1-C5) 烷基。
     第十小组的本发明化合物由式 (I) 化合物构成， 其中 R 表示基团 -SO2-NR3R4 或氢 原子， 其中 R3 和 R4 如上定义和 / 或 R2 表示氢原子或基团 -(C1-C5) 烷基， 有利地为甲基和 / 或 R1 表示基团 -W- 芳基或基团 -W- 杂芳基， 有利地其中所述 W 表示 -CH2-， 所述芳基表示 苯基且所述杂芳基表示吡啶基。
     如上定义的小组， 分别地或组合地构成本发明的一部分。
     以下化合物排除在本发明之外， 即：
     化合物 4R1-1[2- 嘧啶基 ]- 吡唑啉 -5- 酮， 其中 R1 ＝
     以下的化合物 3- 甲基 -4R1-[2- 嘧啶基 ]- 吡唑啉 -5- 酮， 其中 R1 表示 ： 基团 化合物 ：23
     或基团
     102333769 A CN 102333783
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     和 化合物 ：在本发明主题的式 (I) 化合物中， 可尤其提及以下化合物 ：
     ● 4-(2- 氯苄基 )-5- 甲基 -2-[5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 基 ]-1， 2- 二氢 -3H- 吡 唑 -3- 酮 ；
     ● 6-[4-(2- 氯苄基 )-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 甲 酸；
     ● 4-(2- 氯苄基 )-5- 甲基 -2-( 吡啶 -2- 基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● 4-(2- 氯苄基 )-5- 甲基 -2-{5-[(4- 甲基哌嗪 -1- 基 ) 磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮三氟乙酸盐 ；
     ● (±)4-(2- 氯苄基 )-2-(5-{[(3R， 5S)-3， 5- 二甲基哌啶 -1- 基 ] 磺酰基 } 吡 啶 -2- 基 )-5- 甲基 -1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● 6-[4-(2- 氯苄基 )-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ]-N， N- 二乙 基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-[4-(2- 氯 苄 基 )-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 乙 基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-[4-(2- 氯苄基 )-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ]-N， N- 二 ( 丙烷 -2- 基 ) 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 4-(2- 氯苄基 )-5- 甲基 -2-[5-( 哌啶 -1- 基磺酰基 ) 吡啶 -2- 基 ]-1， 2- 二 氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● N， N- 二乙基 -6-[4-(2- 氟苄基 )-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 4-(2- 氟苄基 )-5- 甲基 -2-( 吡啶 -2- 基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● 4-(2- 氟苄基 )-5- 甲基 -2-[5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 基 ]-1， 2- 二氢 -3H- 吡 唑 -3- 酮 ；
     ● 4-(2- 氟苄基 )-5- 甲基 -2-{5-[(4- 甲基哌嗪 -1- 基 ) 磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮三氟乙酸盐 ；
     ● 2-(5-{[(3R， 5S)-3， 5- 二甲基哌啶 -1- 基 ] 磺酰基 } 吡啶 -2- 基 )-4-(2- 氟苄
     基 )-5- 甲基 -1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● N- 乙 基 -6-[4-(2- 氟 苄 基 )-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 4-(2- 氟苄基 )-5- 甲基 -2-[5-( 哌啶 -1- 基磺酰基 ) 吡啶 -2- 基 ]-1， 2- 二 氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● 4-(2， 4- 氯苄基 )-5- 甲基 -2-( 吡啶 -2- 基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● 4-(2， 4- 氯苄基 )-5- 甲基 -2-[5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 基 ]-1， 2- 二氢 -3H- 吡 唑 -3- 酮 ；
     ● 4-(2， 4- 氯 苄 基 )-5- 甲 基 -2-{5-[(4- 甲 基 哌 嗪 -1- 基 ) 磺 酰 基 ] 吡 啶 -2- 基 }-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮三氟乙酸盐 ；
     ● 4-(2， 4- 二氯苄基 )-2-(5-{[(3R， 5S)-3， 5- 二甲基哌啶 -1- 基 ] 磺酰基 } 吡 啶 -2- 基 )-5- 甲基 -1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● 6-[4-(2， 4- 氯苄基 )-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ]-N- 乙 基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-[4-(2， 4- 氯苄基 )-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ]-N， N- 二 ( 丙烷 -2- 基 ) 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 4-(2， 4- 二氯苄基 )-5- 甲基 -2-[5-( 哌啶 -1- 基磺酰基 ) 吡啶 -2- 基 ]-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● 4-(2- 氯 -6- 氟 苄 基 )-5- 甲 基 -2-[5-( 三 氟 甲 基 ) 吡 啶 -2- 基 ]-1， 2- 二 氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● 4-(2- 氯 -6- 氟 苄 基 )-5- 甲 基 -2-{5-[(4- 甲 基 哌 嗪 -1- 基 ) 磺 酰 基 ] 吡 啶 -2- 基 }-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮三氟乙酸盐 ；
     ● 4-(2- 氯 -6- 氟苄基 )-2-(5-{[(3R， 5S)-3， 5- 二甲基哌啶 -1- 基 ] 磺酰基 } 吡 啶 -2- 基 )-5- 甲基 -1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● 6-[4-(2- 氯 -6- 氟苄基 )-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ]-N， N- 二乙基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-[4-(2- 氯 -6- 氟苄基 )-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ]-N- 乙 基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-[4-(2- 氯 -6- 氟苄基 )-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ]-N， N- 二 ( 丙烷 -2- 基 ) 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 4-(2- 氯 -6- 氟苄基 )-5- 甲基 -2-[5-( 哌啶 -1- 基磺酰基 ) 吡啶 -2- 基 ]-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● 6-[4-(2- 氯苄基 )-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 甲 酸甲酯 ；
     ● 4-(4- 氯苄基 )-5- 甲基 -2-( 吡啶 -2- 基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● 4-(4- 氯苄基 )-5- 甲基 -2-{5-[(4- 甲基哌嗪 -1- 基 ) 磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● 4-(4- 氯 苄 基 )-2-(5-{[(3R， 5S)-3， 5- 二 甲 基 哌 啶 -1- 基 ] 磺 酰 基 } 吡 啶 -2- 基 )-5- 甲基 -1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；● 6-[4-(4- 氯苄基 )-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ]-N， N- 二乙 基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-[4-(4- 氯 苄 基 )-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 乙 基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-[4-(4- 氯苄基 )-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ]-N， N- 二 ( 丙烷 -2- 基 ) 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 4-(4- 氯苄基 )-5- 甲基 -2-[5-( 哌啶 -1- 基磺酰基 ) 吡啶 -2- 基 ]-1， 2- 二 氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● 6-[4-(2- 氟苄基 )-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ]-N， N- 二 ( 丙烷 -2- 基 ) 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 4-(1， 1- 二氧化四氢噻吩 -3- 基 )-5- 甲基 -2-[5-( 哌啶 -1- 基磺酰基 ) 吡 啶 -2- 基 ]-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● 6-[4-(1， 1- 二 氧 化 四 氢 噻 吩 -3- 基 )-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 乙基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-[4-(1， 1- 二 氧 化 四 氢 噻 吩 -3- 基 )-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N， N- 二 ( 丙烷 -2- 基 ) 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 2-{[5- 甲基 -3- 氧代 -2-( 吡啶 -2- 基 )-2， 3- 二氢 -1H- 吡唑 -4- 基 ] 甲基 } 苯甲腈 ；
     ● 4-{[5- 甲基 -3- 氧代 -2-( 吡啶 -2- 基 )-2， 3- 二氢 -1H- 吡唑 -4- 基 ] 甲基 } 苯甲腈 ；
     ● N- 乙基 -6-{4-[4-( 甲氧基甲基 ) 苄基 ]-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 }-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 4-[3-( 甲 氧 基 甲 基 ) 苄 基 ]-5- 甲 基 -2-( 吡 啶 -2- 基 )-1， 2- 二 氢 -3H- 吡 唑 -3- 酮 ；
     ● N- 乙基 -6-{4-[3-( 甲氧基甲基 ) 苄基 ]-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 }-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-[4-(3- 氰基苄基 )-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ]-N- 乙 基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-[4-(4- 氰基苄基 )-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ]-N- 乙 基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 5- 甲基 -2-( 吡啶 -2- 基 )-4-( 吡啶 -4- 基甲基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● 3-{[5- 甲基 -3- 氧代 -2-( 吡啶 -2- 基 )-2， 3- 二氢 -1H- 吡唑 -4- 基 ] 甲基 } 苯甲腈 ；
     ● 4- 苄基 -2-(5- 溴吡啶 -2- 基 )-5- 甲基 -1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● 6-[4-(2- 氰基苄基 )-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ]-N- 乙 基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● N- 乙 基 -6-{4-[3-(2- 甲 氧 基 乙 氧 基 ) 苄 基 ]-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -1- 基 }-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 4-(3， 5- 甲氧基苄基 )-5- 甲基 -2-( 吡啶 -2- 基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；● 5- 甲 基 -4-[4-( 甲 基 磺 酰 基 ) 苄 基 ]-2-( 吡 啶 -2- 基 )-1， 2- 二 氢 -3H- 吡 唑 -3- 酮 ；
     ● N- 乙基 -6-{3- 甲基 -4-[4-( 甲基磺酰基 ) 苄基 ]-5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 }-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 4-[3-(2- 甲氧基乙氧基 ) 苄基 ]-5- 甲基 -2-( 吡啶 -2- 基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡 唑 -3- 酮 ；
     ● 4- 苄基 -5- 甲基 -2-( 吡啶 -2- 基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● N- 乙 基 -6-[3- 甲 基 -5- 氧 代 -4-( 吡 啶 -4- 基 甲 基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● N- 乙 基 -6-[3- 甲 基 -5- 氧 代 -4-( 吡 啶 -2- 基 甲 基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 5- 甲基 -2-( 吡啶 -2- 基 )-4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● 6-(4- 苄基 -3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 乙基 -N- 苯基 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● N- 乙 基 -6-[3- 甲 基 -5- 氧 代 -4-( 吡 啶 -3- 基 甲 基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ； ● 4-(2， 5- 二 甲 氧 基 苄 基 )-5- 甲 基 -2-( 吡 啶 -2- 基 )-1， 2- 二 氢 -3H- 吡 唑 -3- 酮 ；
     ● 6-[4-(2， 5- 二 甲 氧 基 苄 基 )-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 乙基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● N- 乙 基 -6-{3- 甲 基 -4-[(1- 甲 基 哌 啶 -4- 基 ) 甲 基 ]-5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -1- 基 }-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● N- 乙基 -6-{3- 甲基 -5- 氧代 -4-[4-( 三氟甲基 ) 苄基 ]-2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 }-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● N- 乙基 -6-{3- 甲基 -5- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苄基 ]-2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 }-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 5- 甲 基 -2-( 吡 啶 -2- 基 )-4-[3-( 三 氟 甲 基 ) 苄 基 ]-1， 2- 二 氢 -3H- 吡 唑 -3- 酮 ；
     ● 5- 甲 基 -2-( 吡 啶 -2- 基 )-4-[4-( 三 氟 甲 基 ) 苄 基 ]-1， 2- 二 氢 -3H- 吡 唑 -3- 酮 ；
     ● 6-[4-(3， 5- 二 甲 氧 基 苄 基 )-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 乙基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 4-(4- 羟基苄基 )-5- 甲基 -2-( 吡啶 -2- 基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● N- 乙 基 -6-[4-(4- 羟 基 苄 基 )-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-(4-{4-[2-( 二 甲 基 氨 基 ) 乙 氧 基 ] 苄 基 }-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 乙基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-{4-[4-( 二 甲 基 氨 基 ) 苄 基 ]-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 }-N- 乙基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 5- 甲 基 -2-( 吡 啶 -2- 基 )-4-[2-( 三 氟 甲 基 ) 苄 基 ]-1， 2- 二 氢 -3H- 吡 唑 -3- 酮 ；
     ● 4-[4-( 二 甲 基 氨 基 ) 苄 基 ]-5- 甲 基 -2-( 吡 啶 -2- 基 )-1， 2- 二 氢 -3H- 吡 唑 -3- 酮 ；
     ● N- 乙基 -6-{3- 甲基 -5- 氧代 -4-[2-( 三氟甲基 ) 苄基 ]-2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 }-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-(4- 苄基 -3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N-(3- 甲基丁基 ) 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 4-[3-( 二 甲 基 氨 基 ) 苄 基 ]-5- 甲 基 -2-( 吡 啶 -2- 基 )-1， 2- 二 氢 -3H- 吡 唑 -3- 酮 ；
     ● 6-{4-[3-( 二 甲 基 氨 基 ) 苄 基 ]-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 }-N- 乙基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 4-(4- 甲氧基苄基 )-5- 甲基 -2-( 吡啶 -2- 基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● N- 乙 基 -6-[4-(4- 甲 氧 基 苄 基 )-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 4-(2- 甲氧基苄基 )-5- 甲基 -2-( 吡啶 -2- 基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● 4-(3- 甲氧基苄基 )-5- 甲基 -2-( 吡啶 -2- 基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● N- 乙 基 -6-[4-(3- 甲 氧 基 苄 基 )-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-(4-{3-[2-( 二 甲 基 氨 基 ) 乙 氧 基 ] 苄 基 }-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 乙基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● N- 乙 基 -6-[4-(2- 甲 氧 基 苄 基 )-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 4- 苄基 -5- 甲基 -2-[5-( 吗啉 -4- 基磺酰基 ) 吡啶 -2- 基 ]-1， 2- 二氢 -3H- 吡 唑 -3- 酮 ；
     ● N- 乙 基 -6-[4-(3- 羟 基 苄 基 )-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-(4- 苄基 -3- 乙基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 乙基 -N- 苯基 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 4-(3- 羟基苄基 )-5- 甲基 -2-( 吡啶 -2- 基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● N- 乙 基 -6-{4-[4-(2- 甲 氧 基 乙 氧 基 ) 苄 基 ]-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -1- 基 }-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 4- 苄基 -5- 乙基 -2-( 吡啶 -2- 基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● 4- 苄基 -5- 甲基 -2-[5-( 吡咯烷 -1- 基磺酰基 ) 吡啶 -2- 基 ]-1， 2- 二氢 -3H- 吡 唑 -3- 酮 ；
     ● 2-[5-( 氮杂环庚烷 -1- 基磺酰基 ) 吡啶 -2- 基 ]-4- 苄基 -5- 甲基 -1， 2- 二 氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● N， N- 二乙基 -6-[3- 甲基 -5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺 ；● N， N- 二乙基 -6-[3- 甲基 -5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺盐酸盐 ；
     ● N， N- 二甲基 -6-[3- 甲基 -5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● N， N- 二甲基 -6-[3- 甲基 -5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺盐酸盐 ；
     ● 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -3- 丙基 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 乙基 -N- 苯基 吡啶 -3- 磺酰胺盐酸盐 ；
     ● 6-[3- 甲基 -5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ]-N-( 丙 烷 -2- 基 ) 吡啶 -3- 磺酰胺盐酸盐 ；
     ● 5- 甲基 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2-[5-( 吡咯烷 -1- 基磺酰基 ) 吡啶 -2- 基 ]-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮盐酸盐 ；
     ● N- 叔 丁 基 -6-[3- 甲 基 -5- 氧 代 -4-( 吡 啶 -3- 基 甲 基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺盐酸盐 ；
     ● N- 环 丙 基 -6-[3- 甲 基 -5- 氧 代 -4-( 吡 啶 -3- 基 甲 基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺盐酸盐 ；
     ● N- 环 戊 基 -6-[3- 甲 基 -5- 氧 代 -4-( 吡 啶 -3- 基 甲 基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺盐酸盐 ；
     ● N- 乙 基 -6-[3- 甲 基 -5- 氧 代 -4-(2- 苯 基 乙 基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 5- 甲基 -4-(2- 苯基乙基 )-2-( 吡啶 -2- 基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● N- 甲 基 -6-[3- 甲 基 -5- 氧 代 -4-( 吡 啶 -3- 基 甲 基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N-( 吡啶 -2- 基 ) 吡啶 -3- 磺酰胺盐酸盐 ；
     ● 2-{5-[(4- 苄基哌啶 -1- 基 ) 磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-5- 甲基 -4-( 吡啶 -3- 基 甲基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● N- 乙 基 -6-[3- 甲 基 -5- 氧 代 -4-(2- 苯 基 丙 烷 -2- 基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● N- 乙 基 -6-{4-[(6- 甲 氧 基 吡 啶 -2- 基 ) 甲 基 ]-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -1- 基 }-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-[3- 甲基 -5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ]-N-( 吡 啶 -2- 基 ) 吡啶 -3- 磺酰胺盐酸盐 ；
     ● N- 乙 基 -6-[3- 甲 基 -5- 氧 代 -4-(1- 苯 基 环 丙 基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● N- 乙 基 -6-{4-[(3- 甲 氧 基 吡 啶 -2- 基 ) 甲 基 ]-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -1- 基 }-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺盐酸盐 ；
     ● 6-[4- 苄基 -3-( 甲氧基甲基 )-5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ]-N- 乙 基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-[4- 苄 基 -5- 氧 代 -3-( 三 氟 甲 基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 乙 基 -N- 苯基 - 吡啶 -3- 磺酰胺 ；● 1-[5-( 氮杂环庚烷 -1- 基磺酰基 ) 吡啶 -2- 基 ]-3- 甲基 -4-( 吡啶 -3- 基甲 基 )-1H- 吡唑 -5- 醇盐 (olate) ；
     ● N- 乙基 -6-{3- 甲基 -5- 氧代 -4-[2-( 吡啶 -2- 基 ) 乙基 ]-2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 }-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● N- 乙 基 -6-{4-[(5- 甲 氧 基 吡 啶 -3- 基 ) 甲 基 ]-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -1- 基 }-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● N-(2- 甲氧基乙基 )-N- 甲基 -6-[3- 甲基 -5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-[4- 苄基 -3-(2- 甲基丙基 )-5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ]-N- 乙 基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● N- 乙 基 -6-[3- 甲 基 -5- 氧 代 -4-( 吡 啶 -3- 基 甲 基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-[3- 甲基 -5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ]-N- 苯 基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● N- 乙 基 -6-[3- 甲 基 -5- 氧 代 -4-(3- 苯 基 丙 基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 乙基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺 酰胺 ；
     ● N- 环 丙 基 -N- 甲 基 -6-[3- 甲 基 -5- 氧 代 -4-( 吡 啶 -3- 基 甲 基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● N- 叔丁基 -6-{4-[(5- 甲氧基吡啶 -3- 基 ) 甲基 ]-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -1- 基 } 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-{4-[(5- 氰 基 吡 啶 -3- 基 ) 甲 基 ]-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 }-N- 乙基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-[5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 甲 酸叔丁酯 ；
     ● 6-[3- 甲基 -5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 吡 啶 -3- 甲酸叔丁酯 ；
     ● N- 叔丁基 -6-[5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● N- 叔丁基 -6-[5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺盐酸盐 ；
     ● N- 乙基 -6-[5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ]-N- 苯 基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-(4- 苄 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 )-N- 叔 丁 基 -N- 甲 基 吡 啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● N- 乙基 -6-{4-[(5- 甲氧基吡啶 -3- 基 ) 甲基 ]-5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 }-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 5- 甲基 -2-[5-( 苯基磺酰基 ) 吡啶 -2- 基 ]-4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● N- 叔丁基 -6-{4-[(5- 甲氧基吡啶 -3- 基 ) 甲基 ]-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -1- 基 }-N- 甲基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-{4-[(6- 氰 基 吡 啶 -3- 基 ) 甲 基 ]-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 }-N- 乙基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● (2-{5-[ 乙基 ( 苯基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-3- 氧代 -2， 3- 二氢 -1H- 吡 唑 -4- 基 ) 乙酸 ；
     ● 2-(2-{5-[ 乙基 ( 苯基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-3- 氧代 -2， 3- 二氢 -1H- 吡 唑 -4- 基 )-N， N- 二甲基乙酰胺 ；
     ● (2-{5-[ 乙基 ( 苯基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-3- 氧代 -2， 3- 二氢 -1H- 吡 唑 -4- 基 ) 乙酸甲酯 ；
     ● (4- 苄基 -1-{5-[ 乙基 ( 苯基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-5- 氧代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -3- 基 ) 乙酸乙酯 ；
     ● 2-(2-{5-[ 乙基 ( 苯基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-3- 氧代 -2， 3- 二氢 -1H- 吡 唑 -4- 基 )-N- 甲基乙酰胺 ；
     ● N- 叔丁基 -6-{4-[(5- 甲氧基吡啶 -2- 基 ) 甲基 ]-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -1- 基 }-N- 甲基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 2-(4- 苄基 -1-{5-[ 乙基 ( 苯基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-5- 氧代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -3- 基 )-N， N- 二甲基乙酰胺 ；
     ● 3-(2-{5-[ 乙基 ( 苯基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-3- 氧代 -2， 3- 二氢 -1H- 吡 唑 -4- 基 ) 丙酸 ；
     ● 3-[(2-{5-[ 乙基 ( 苯基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-5- 甲基 -3- 氧代 -2， 3- 二氢 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ] 苯甲酸甲酯 ；
     ● 3-(2-{5-[ 乙基 ( 苯基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-3- 氧代 -2， 3- 二氢 -1H- 吡 唑 -4- 基 ) 丙酸甲酯 ；
     ● {2-[5-( 叔 丁 基 氨 基 磺 酰 基 ) 吡 啶 -2- 基 ]-3- 氧 代 -2， 3- 二 氢 -1H- 吡 唑 -4- 基 }( 苯基 ) 乙酸甲酯 ；
     ● 2-[(2-{5-[ 乙基 ( 苯基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-5- 甲基 -3- 氧代 -2， 3- 二氢 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ] 苯甲酸甲酯 ；
     ● N- 环 戊 基 -N- 乙 基 -6-[5- 氧 代 -4-( 吡 啶 -3- 基 甲 基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● N- 环 戊 基 -N- 甲 基 -6-[5- 氧 代 -4-( 吡 啶 -3- 基 甲 基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 2-[(1-{5-[ 乙基 ( 苯基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-3- 甲基 -5- 氧化 -1H- 吡 唑 -4- 基 ) 甲基 ] 苯甲酸盐 ；
     ● 2-[5-( 氮杂环庚烷 -1- 基磺酰基 ) 吡啶 -2- 基 ]-4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● N- 环 戊 基 -N- 甲 基 -6-[5- 氧 代 -4-( 吡 啶 -4- 基 甲 基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺 ；● N- 环 戊 基 -N- 乙 基 -6-[5- 氧 代 -4-( 吡 啶 -4- 基 甲 基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 3-(2-{5-[ 环 戊 基 ( 甲 基 ) 氨 基 磺 酰 基 ] 吡 啶 -2- 基 }-3- 氧 代 -2， 3- 二 氢 -1H- 吡唑 -4- 基 )-3- 苯基丙酸甲酯 ；
     ● N-(2， 2- 二甲基丙基 )-N- 甲基 -6-[5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-[5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 甲 酸 2， 2- 二甲基丙基酯 ；
     ● N- 环戊基 -N-({6-[5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 基 } 磺酰基 ) 甘氨酸甲酯 ；
     ● 6-(4- 苄 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 )-N-[2-( 苄 基 氧 基 ) 乙 基 ]-N- 环戊基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-(4- 苄 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 )-N-[3-( 苄 基 氧 基 ) 丙 基 ]-N- 环戊基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 环戊基 -N-(3- 羟基丙 基 ) 吡啶 -3- 磺酰胺 ； ● 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 环戊基 -N-(2- 羟基乙 基 ) 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● (1S， 2R)-2-[ 甲 基 ({6-[5- 氧 代 -4-( 吡 啶 -3- 基 甲 基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 基 } 磺酰基 ) 氨基 ] 环戊烷甲酸甲酯 ；
     ● 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 环戊基 -N-(2， 3- 二羟 基丙基 ) 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 环戊基 -N-[2-( 二甲基 氨基 )- 乙基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 4- 苄基 -2-{5-[(4- 甲基哌嗪 -1- 基 ) 磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-1， 2- 二氢 -3H- 吡 唑 -3- 酮 ；
     ● 6-[4-( 环戊基甲基 )-5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ]-N- 乙基 -N- 苯基 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 4- 苄基 -2-{5-[(4- 甲基 -1， 4- 二氮杂环庚烷 -1- 基 ) 磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● N-(2， 2- 二甲基丙基 )-6-[5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● N-(2- 甲基丁 -2- 基 )-6-[5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N-[(1R， 3S)-3-( 羟基甲 基 ) 环戊基 ]-N- 甲基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 甲基 -N-(1- 甲基吡咯 烷 -3- 基 ) 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N-(2- 甲氧基 -2- 甲基丙
     基 ) 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 吡啶 -3- 甲酸 2， 2- 二甲基 丙基酯 ；
     ● 6-(4- 苄 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 )-N- 环 戊 基 -N-[(2R)-2， 3- 二羟基丙基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N-(2， 3- 二羟基丙基 )-N- 苯 基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● N- 环戊基 -6-{4-[(4- 甲氧基吡啶 -3- 基 ) 甲基 ]-5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 }-N- 甲基吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● N- 甲基 -N-(2- 甲基丁 -2- 基 )-6-[5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 3-(2-{5-[ 环 戊 基 ( 甲 基 ) 氨 基 磺 酰 基 ] 吡 啶 -2- 基 }-3- 氧 代 -2， 3- 二 氢 -1H- 吡唑 -4- 基 )-3- 苯基 -N-(2， 2， 2- 三氟乙基 ) 丙酰胺 ；
     ● 6-(4- 苄 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 )-N- 环 戊 基 -N-[3- 羟 基 -2-( 羟基甲基 ) 丙基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺 ； ● 6-(4- 苄 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 )-N- 环 戊 基 -N-[(2S)-2， 3- 二羟基丙基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-[5- 氧代 -4-( 吡啶 -4- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 甲 酸 2， 2- 二甲基丙基酯 ；
     ● 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N-[(1S， 2S)-2- 羟基环戊 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● N- 叔丁基 -6-[5- 氧代 -4-( 吡啶 -4- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 4- 苄 基 -2-(5-{[(3R)-3-( 二 甲 基 氨 基 ) 吡 咯 烷 -1- 基 ] 磺 酰 基 } 吡 啶 -2- 基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ；
     ● 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N-[1-( 二甲基氨基 )-2- 甲 基丙烷 -2- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 甲基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺 酰胺 ；
     ● 3-{2-[5-( 叔 丁 基 氨 基 磺 酰 基 ) 吡 啶 -2- 基 ]-3- 氧 代 -2， 3- 二 氢 -1H- 吡 唑 -4- 基 }-3-( 吡啶 -3- 基 ) 丙酸甲酯 ；
     ● 3-{2-[5-( 叔 丁 基 氨 基 磺 酰 基 ) 吡 啶 -2- 基 ]-3- 氧 代 -2， 3- 二 氢 -1H- 吡 唑 -4- 基 }-3- 苯基丙酸乙酯 ；
     ● 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 叔丁基 -N-(2， 3- 二羟 基丙基 )- 吡啶 -3- 磺酰胺 ；
     ● 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N-(2- 羟基乙基 ) 吡啶 -3- 磺 酰胺 ；
     ● N-(2， 3- 二羟基丙基 )-6-[5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺盐酸盐 ；
     ● 3-(2-{5-[ 环 戊 基 ( 甲 基 ) 氨 基 磺 酰 基 ] 吡 啶 -2- 基 }-3- 氧 代 -2， 3- 二 氢 -1H- 吡唑 -4- 基 )-3-( 吡啶 -3- 基 ) 丙酸甲酯盐酸盐 ；
     ● 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 环戊基 -N-[3-( 二甲基 氨基 ) 丙基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺盐酸盐 ；
     ● 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 环戊基 -N-[3-( 二甲基 氨基 ) 丙基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺盐酸盐。
     在下文中， 术语 “保护基” (PG) 是指以下基团 ： 其在合成中首先可保护活性基团 ( 例如羟基或胺 )。 保护基的实例以及保护和脱保护的方法可参考 “Protective Groups in nd Organic Synthesis” Greene 等， 2 Edition (John Wiley &Sons， Inc.， New York)。
     在 下 文 中， 术语 “离 去 基 团” (LG) 是 指 可 通 过 断 裂 异 化 学 键 (breaking a heterolytic bond) 和电子对分离容易地从分子中脱除的离核基团。因此， 该基团可例如， 容易地在取代反应中被另一基团替换。该离去基团为例如， 卤素或活化的羟基， 例如甲磺 酰基 (mesyl)、 甲苯磺酰基、 三氟甲磺酰基 (triflate)、 乙酰基等。离去基团的实例及其制 备的参考文献可参考 “Advances in Organic Chemistry” ， J.March， 3rd Edition， Wiley Interscience， pp.310-316。
     根据本发明， 通式 (I) 化合物可按照以下方法制备。
     方案 1 描述了式 (I) 化合物合成， 其中 R 可为基团 -SO2-NR3R4、 氢原子、 卤素原子、 基团 - 卤代 (C1-C5) 烷基、 基团 -CO2R5 或基团 -SO2-R4 ； R1 可为不含氮原子的杂环烷基、 基 团 -W-(C3-C6) 环烷基、 基团 -W- 芳基、 基团 -W- 杂芳基、 基团 -W- 杂环烷基、 基团 -W-COOR5 或基团 -W-CONR5R6， 其中 R3、 R4 和 R5 如上定义 ； W 可为基团 (C1-C5) 亚烷基， 且 n 可为 0、 1 或 2。
     所述化合物在下文提及为式 (Ia) 化合物。
     方案 1
     在方案 1 中， 将式 (II) 化合物 ( 其中 R1 和 R2 如式 (Ia) 化合物中所定义且 z 表 示烷基 ( 例如甲基或乙基 )) 与式 (III) 化合物反应， 得到式 (Ia) 化合物， 优选在质子溶 剂 ( 例如乙醇 / 乙酸混合物 ) 中在 80℃的温度， 或在非质子溶剂 ( 例如甲苯 ) 中在 80 至 110℃的温度， 在催化量的有机酸 ( 例如对甲苯磺酸 ) 的存在下进行。或者， 它们可依次通 过以下反应获得 ： 在甲醇 / 乙酸混合物中反应得到中间体腙， 然后在甲醇中， 在甲醇钠的存
     在下， 优选在 40℃的温度进行环化反应。
     获得的化合物 (I) 任选用酸或碱转化为其相应的盐。
     方案 2
     式 (II) 化合物可按照方案 2 经式 (IV) 的 β- 酮酯 R2COCH2CO2z 与式 (V) 醛 R1CHO 之间的 Knoevenagel 反应获得， 其中 R1 如上定义， 且 R2 为基团 (C1-C5) 烷基、 -(C1-C5) 烷 基 -(C1-C5) 烷氧基、 - 卤代 (C1-C5) 烷基、 基团 -W-COOR5， 其中 W 如上定义 ； z 表示烷基 ( 例
     如甲基或乙基 )， 其在非极性溶剂 ( 优选正己烷 ) 中， 在催化量的对甲苯磺酸吡啶的存在下， 得到式 (VI) 化合物， 然后在极性质子溶剂 ( 优选乙醇 )， 在催化剂 ( 例如钯 / 碳 ) 的存 在下进行氢化步骤。
     方案 3
     或者， 式 (II) 化合物可按照方案 3 依次通过以下反应获得 ： 将式 (IV) 的 β- 酮酯 R2COCH2CO2z 用醇盐型的有机碱 ( 优选甲醇钠 ) 在醇性溶剂中， 或用矿碱 ( 例如氢氧化钾或 更强碱 ( 例如氢化钠 ) 去质子化， 然后加入式 (VII) 的亲电试剂 R1-CH2-Lg( 其中 R1 如上 定义且 R2 为基团 (C1-C5) 烷基、 -(C1-C5) 烷基 -(C1-C5) 烷氧基、 - 卤代 (C1-C5) 烷基、 基 团 -W-COOR5， 其中 W 如上定义且 z 为烷基 ( 例如甲基或乙基 ) 且 Lg 如上所述 )。
     其中 R1 为 W- 芳基或 W- 杂芳基且 W 表示式 -CH( 烷基 )( 烷基 ) 的支链的亚烷基 的式 (II) 化合物的合成如方案 4 所述。所述化合物在下文提及为式 (IIa) 化合物。
     方案 4
     式 (IX) 化合物通过式 (VIII) 酮 R7COR8( 其中 R7 和 R8 可独立地或一起为 C1 至 C4 烷基 ) 与式 (IV) 的 β- 酮酯 R2-CH2-CO2z( 其中 R2 如上定义且 z 为烷基 ( 例如甲基或 乙基 ))， 在 Lewis 酸 ( 优选氯化锌 ) 的存在下， 在溶剂 ( 例如乙酸酐 ) 中， 在 40℃至 80℃ 的温度缩合得到。式 (IIa) 化合物然后经式 (X) 的有机金属化合物芳基 - 金属 (“ArM” ) ( 优选芳基 -MgX 型的有机镁化合物， 其中 X 表示卤素原子 ( 例如溴或氯原子 )) 与式 (IX) 化合物的 1， 4 加成获得， 在催化量的碘化亚铜的存在下， 在无水溶剂 ( 优选乙醚 ) 中进行。
     其中 R2 为氢的式 (II) 化合物的合成如方案 5 所述。所述化合物在下文提及为式 (IIb) 化合物。
     方案 5
     式 (IIb) 化合物通过式 (V) 酯 R1-CH2-CO2z( 其中 R1 如上定义且 z 为烷基 ( 例如 甲基或乙基 )) 的甲酰化得到。甲酰化步骤由以下组成 ： 优选地将甲酸甲酯或甲酸乙酯与 式 (V) 酯在钠金属的存在下在无水非质子溶剂 ( 例如乙醚 ) 中， 在 0℃至 30℃的温度， 或在 Lewis 酸 ( 例如四氯化钛 ) 和有机碱 ( 例如三丁基胺 ) 的存在下， 在催化量的三氟甲磺酸三 甲基硅酯的存在下， 在非质子溶剂 ( 例如甲苯 ) 中， 在 50℃至 60℃的温度反应。
     当不可市售获得时， 其中 R 表示 - 卤代烷基或 -CO2R5 且 R5 如上所述的式 (III) 化 合物的合成如方案 6 所述。所述化合物在下文提及为式 (IIIa) 化合物。
     方案 6式 (IIIa) 化合物由化合物 XI( 其中 Lg 和 R 如上定义 ) 获得， 通过加入水合肼， 优 选在质子溶剂 ( 例如 EtOH) 中， 在 60 至 80℃的温度进行。
     其中 R 表示基团 -SO2NR3R4 且 R3 和 R4 如上定义的式 (III) 化合物的合成如方案 7 所述。所述化合物在下文提及为式 (IIIb) 化合物。
     方案 7
     式 (IIIb) 化 合 物 由 式 (XII) 的 2- 氯 吡 啶 -5- 磺 酰 氯， 通 过 与 式 (XIII) 胺 R3NHR4( 其中 R3 和 R4 如上定义 )， 在有机碱 ( 优选三乙胺 ) 的存在下， 在极性溶剂 ( 优选 二氯甲烷 ) 中反应得到。然后将获得的式 (XIV) 化合物与水合肼在质子溶剂 ( 例如乙醇 ) 中， 在 70℃反应， 得到所需化合物。
     其中 R 为烷基或烷氧基的式 (III) 化合物的合成如方案 8 所述。所述化合物在下 文提及为式 (IIIc) 化合物。式 (IIIc) 化合物由式 (XV) 化合物 ( 其中 Lg 和 R 如上定义 ) 获得。肼基经式 (XVI) 的二苯甲酮腙与式 (XV) 化合物之间的偶合反应引入， 在催化量的钯 的存在下进行， 得到式 (XVII) 中间体， 所述肼基通过酸 ( 例如盐酸 ) 处理得以游离， 在不混 溶的溶剂 ( 例如甲苯和水 ) 的二元混合物中， 在 100℃的温度进行。
     方案 8
     方案 9 描述了式 (I) 化合物的合成， 其中 R1 为基团 -W- 芳基或 -W- 杂芳基， 所述 基团被一个或多个基团 -NR5R6 取代， 且其中 W 为基团 (C1-C5) 亚烷基。所述化合物在下文 提及为式 (Ib) 化合物。
     方案 9
     式 (XIX) 化合物通过将式 (IV) 的 β- 酮酯化合物 R2COCH2CO2z(R2 为基团 (C1-C5) 烷基、 -(C1-C5) 烷基 -(C1-C5) 烷氧基或 - 卤代 (C1-C5) 烷基且 z 表示烷基 ( 例如甲基或 乙基 )) 与被一个或多个硝基取代的式 (XVIII) 的苯甲醛化合物反应获得。式 (XX) 化合物 然后通过以下反应获得 ： 在催化剂 ( 例如钯 / 碳 ) 的存在下， 在质子溶剂 ( 例如乙醇 ) 中完 全氢化， 优选接着进行还原胺化， 当 R5 和 R6 为甲基时在甲酸的条件下， 在还原剂 ( 例如三 乙酰氧基硼氢化钠 ) 的存在下， 在质子溶剂 ( 例如乙酸 ) 中进行。式 (XX) 化合物然后如方 案 1 所述与式 (III) 化合物反应， 得到所需的式 (Ib) 化合物。
     方案 10 描述了式 (I) 化合物的合成， 其中 R1 为基团 -W- 芳基， 且 W 为基团 (C1-C5) 亚烷基 ； 所述芳基被一个或多个基团 -O-(C1-C5) 烷基 -O-(C1-C5) 烷基 -(C1-C5) 烷氧基 或 -O-(C1-C5) 烷基 -NR5R6 取代。所述化合物在下文提及为式 (Ic) 化合物。
     方案 10
     式 (XXII) 化合物通过将式 (IV) 的 β- 酮酯化合物 R2COCH2CO2z( 其中 R2 如上定 义且 z 表示烷基 ( 例如甲基或乙基 )) 与式 (XXI) 的苯甲醛化合物反应， 然后在钯 / 碳的 存在下， 优选在溶剂 ( 例如乙醇 ) 中进行完全氢化获得。式 (XXIV) 化合物然后通过用式 (XXIII) 化合物 R9-Lg( 其中 R9 表示基团 (C1-C5) 亚烷基、 -(C1-C5) 烷基 -(C1-C5) 烷氧基 或 -(C1-C5) 烷基 -NR5R6 且 Lg 如上定义 ) 烷基化， 在碱 ( 优选矿碱 ( 例如碳酸钾 )) 的存 在下， 并在极性溶剂 ( 例如 DMF) 中进行 ； 然后将其如方案 1 所述与式 (III) 化合物反应， 得 到所需的式 (Ic) 化合物。
     在以下的实施例中， 当制备方法未描述时， 起始化合物、 中间体和试剂可市售获得 或如文献所述， 或可按照本领域技术人员已知的方法制备。
     以下的实施例例示了本发明具体化合物的制备。 实施例给出的化合物的编号参考 了后面给出的表格中的编号， 所述表格例示了本发明具体化合物的化学结构和物理性质。
     使用以下缩写和公式 ：
     质子核磁共振 (1H NMR) 谱， 如下所述， 在 DMSO-d6 中以 400MHz 记录， 使用 DMSO-d5 的峰作为参考。化学位移 δ 表示为百万分率 (ppm)。观察到的信号如下表示 ： s ＝单峰 ； bs ＝宽单峰 ； d ＝双重峰 ； dd ＝两组双重峰 ； dt ＝两组三重峰 ； t ＝三重峰 ； m ＝多重峰 ； H ＝质 子。
     在以下 LC/MS 联用条件下获得质谱 ： 方法 1 ： 柱： Jsphere33×2mm ； 4μM ； 洗脱剂 ： A ＝ H2O+0.05％ TFA ； B ＝ CH3CN+0.05％ TFA T0 ： 98％ A ； T1.0 至 T5.0 分钟 ： 95％ B ； 方法 2 ： 柱： Acquity BEH C18(50×2.1mm ； 1.7μM) ； 洗脱剂 ： A ＝ H2O+0.05％ TFA ； B ＝ CH3CN+0.035％ TFA T0 ： 98％ A ； T1.6 至 T2.1 分钟 ： 100％ B ； T2.5 至 T3 分钟 ： 98％ A流速 1.0mL/ 分钟 ； T℃＝ 40℃， 进样 2μL
     方法 3 ： 柱： Kromasil C18(50×2.1mm ； 3.5μm) ；
     洗脱剂 ： A ＝ CH3CO2NH4+3％ CH3CN ； B ＝ CH3CN ；
     T0 ： 100％ A ； T5.5 至 T7 分钟 ： 100％ B ； T7.1 至 T10 分钟 ： 100％ B ； 流速 0.8mL/ 分 钟； T ＝ 40℃， 进样 5μL。
     实施例 1 ： N- 乙 基 -6-[3- 甲 基 -4-(1- 甲 基 -1- 苯 基 乙 基 )-5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ( 表 I 的化合物 77)
     1.1.2- 乙酰基 -3- 甲基丁 -2- 烯酸甲酯
     向 9.54g(70mmol) 无水 ZnCl2、 53.9mL(500mmol) 乙酰乙酸甲酯和 55mL(750mmol) 丙酮的混合物中加入 64mL 乙酸酐。然后将反应介质在 50℃加热 3 天， 然后用 1L 的 DCM 稀 过滤然后在减压下浓缩。将获得的残 释并用水 (3×100mL) 洗涤。将有机相经 Na2SO4 干燥、 余物通过硅胶柱色谱纯化， 用梯度为 0 至 10％ EtOAc 的环己烷 /EtOAc 洗脱。在减压下浓缩 后， 得到 51.5g 的 2- 乙酰基 -3- 甲基丁 -2- 烯酸甲酯， 其为无色油状物的形式。
     产率＝ 70％ 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 3.79(s， 3H) ； 2.29(s， 3H) ； 2.12(s， 3H) ； 1.97(s， 3H)。
     1.2.2- 乙酰基 -3- 甲基 -3- 苯基丁酸甲酯
     在 0℃在氩气气流下， 向 146mg(0.8mmol) 无水 CuI(I) 在 5mL 无水乙醚的悬浮液中 加入 3.6mL(10.9mmol) 的 3M 的苯基溴化镁的 Et2O 溶液。在 0℃搅拌 30 分钟后， 一次性加 入 1g(6.4mmol) 的 2- 乙酰基 -3- 甲基丁 -2- 烯酸甲酯。使得混合物温热至室温， 并继续搅 拌 18 小时。然后将反应混合物用 100mL 饱和 NH4Cl 溶液处理， 通过沉降分离各相， 并将有 机相再次用 100mL 饱和 NH4Cl 溶液处理。将水相用 4×100mL 的 DCM 萃取。合并有机相、 经 Na2SO4 干燥并在减压下浓缩。通过硅胶色谱纯化， 用 95/5 环己烷 /EtOAc 混合物洗脱后， 得 到 1g 的 2- 乙酰基 -3- 甲基 -3- 苯基丁酸甲酯， 其为无色油状物的形式。
     产率＝ 67％。 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 7.4-7.2(m， 5H) ； 3.9(s， 1H) ； 3.8(s， 3H) ； 1.90(s， 3H) ； 1.6(s， 3H)， 1.55(s， 3H)。
     1.3.N- 乙基 -6-[3- 甲基 -4-(1- 甲基 -1- 苯基乙基 )-5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺
     向 200mg(0.85mmol) 的 2- 乙酰基 -3- 甲基 -3- 苯基丁酸甲酯在 2mL 的 EtOH/AcOH 混合物 (1 ∶ 1) 的溶液中加入 249mg(0.85mmol) 的 N- 乙基 -6- 肼基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰 胺， 然后将反应混合物在 90℃加热 2 小时。 在减压下浓缩后， 将残余物溶于 100mL 的 DCM、 用 2×30mL 饱和 NaHCO3 溶液洗涤、 经 Na2SO4 干燥、 过滤、 在减压下浓缩， 然后通过硅胶柱色谱纯 化， 用梯度为 0 至 20％ EtOAc 的环己烷 /EtOAc 洗脱。 在减压下浓缩后， 得到 312mg 黄色油状
     物， 在 20mL 戊烷中固化。将固体过滤， 然后在真空下干燥。得到 178mg 的 N- 乙基 -6-[3- 甲 基 -4-(1- 甲基 -1- 苯基乙基 )-5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺 酰胺， 其为白色粉末的形式。
     产率＝ 44％
     m.p.(℃ ) ＝ 122
     M ＝ C26H28N4O3S ＝ 476 ； M+H ＝ 477 ； 方法 2 ： Tr ＝ 1.54 分钟 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 12.0(bs， 1H) ； 8.55(bs， 1H) ； 8.45(s， 1H) ； 8.1(d， 1H) ； 7.5-7.3(m， 7H) ； 7.2(m， 1H) ； 7.1(d， 2H) ； 3.65(q， 2H) ； 1.9(s， 3H) ； 1.7(s， 6H) ； 1.0(t， 3H)。
     实施例 2 ： N- 乙基 -6-[3- 甲基 -5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ( 表 I 中的化合物 43)
     2.1.(2E/Z)-3- 氧代 -2-( 吡啶 -3- 基亚甲基 ) 丁酸甲酯
     将 10g(86mmol) 的 3- 氧 代 丁 酸 甲 酯、 9.2g(86mmol) 吡 啶 -2- 甲 醛 和 70mg(1.1mmol) 的 PPTS 在 27mL 己烷的混合物在 Dean-Stark 装置中回流 48 小时。然后将 介质在减压下浓缩， 溶于 50mL 的 EtOAc、 连续用水 (2×100mL) 和饱和食盐水 (100mL) 洗涤、 经 Na2SO4 干燥、 过滤并在减压下浓缩。得到 17.6g 的 (2E/Z)-3- 氧代 -2-( 吡啶 -3- 基亚甲 基 ) 丁酸甲酯， 其为黄色油状物的形式， 其不经进一步纯化直接用于以下步骤。
     产率＝ 99％。 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 8.7(s， 1H) ； 8.5(d， 1H) ； 8.00(d， 1H) ； 7.6(s， 1H) ； 7.35(dd， 1H) ； 3.7(s， 3H) ； 2.3(s， 3H)。
     2.2.3- 氧代 -2-( 吡啶 -3- 基甲基 ) 丁酸甲酯
     在 Parr 装置中， 将 14g(68mmol) 的 (2E/Z)-3- 氧代 -2-( 吡啶 -3- 基亚甲基 ) 丁 酸甲酯在 200mL 的 MeOH 中的溶液和 2.2g 的 10％ Pd/C 的混合物在 7 巴氢化 48 小时。然后 将反应混合物经 Whatman GF/F 纸过滤， 并在减压下浓缩。因此获得 14g 的 3- 氧代 -2-( 吡 啶 -3- 基甲基 ) 丁酸甲酯， 其为深黄色油状物的形式， 其不经进一步纯化直接用于以下步 骤。
     产率＝ 99％。 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 8.5(m， 2H) ； 7.28(d， 1H) ； 7.21(dd， 1H) ； 3.78(t， 1H) ； 3.71(s， 3H) ； 3.16(dd， 2H) ； 2.23(s， 3H)。
     2.3N- 乙 基 -6-[3- 甲 基 -5- 氧 代 -4-( 吡 啶 -3- 基 甲 基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺盐酸盐
     将 300mg(1.45mmol) 的 3- 氧 代 -2-( 吡 啶 -3- 基 甲 基 ) 丁 酸 甲 酯 和 423mg(1.45mmol) 的 N- 乙基 -6- 肼基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺在 4mL 的 EtOH/AcOH 混合 物 (1/1) 中的溶液在 85 ℃加热 4 小时。冷却至室温后， 将获得的沉淀过滤， 然后连续用
     Et2O(20mL) 和戊烷 (20mL) 洗涤。分离得到 210mg 残余物， 并将该残余物溶于 40mL 水、 2mL 乙腈和 0.48mL 的 0.2N HCl 溶液中， 然后冷冻干燥。因此获得 220mg 的 N- 乙基 -6-[3- 甲 基 -5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 盐酸盐， 其为白色冻干物 (lyophilizate) 的形式。
     产率＝ 33％
     m.p.(℃ ) ＝ 128
     M ＝ C23H23N5O3S ＝ 449 ； M+H ＝ 450 ； 方法 2 ： Tr ＝ 0.85 分钟 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 12.5(bs， 1H) ； 8.90(s， 1H) ； 8.8(d， 1H) ； 8.6(d， 1H) ； 8.5(d， 1H) ； 8.4(s， 1H) ； 8.2(dd， 1H) ； 8.05(dd， 1H) ； 7.4(m， 3H) ； 7.1(d， 2H) ； 3.8(s， 2H) ； 3.65(q， 2H) ； 2.3(s， 3H) ； 1.0(t， 3H)。
     实施例 3 ： 6-(4-{3-[2-( 二甲基氨基 ) 乙氧基 ] 苄基 }-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 乙基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺盐酸盐 ( 表 I 的化合物 56)
     3.1.(2E/Z)-2-[(3- 羟基苯基 ) 亚甲基 ]-3- 氧代丁酸甲酯
     按照实施例 2.1 所述的方法， 由 5g 的 3- 羟基苯甲醛和 4.75g 的 3- 氧代丁酸甲酯 起始， 得到 2.5g 的 (2E/Z)-2-[(3- 羟基苯基 ) 亚甲基 ]-3- 氧代丁酸甲酯， 其为淡黄色粉末 的形式。
     产率＝ 27％ 1
     H NMR(CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 7.4(s， 1H) ； 7.2(m， 1H) ； 6.9-6.8(m， 2H) ； 5.1(s， 1H) ； 3.8(s， 3H) ； 2.4(s， 3H) ； 2.4(s， 3H)。
     3.2.2-(3- 羟基苄基 )-3- 氧代丁酸甲酯
     按照实施例 2.2 所述的方法， 由 2.5g 的 (2E/Z)-2-[(3- 羟基苯基 ) 亚甲基 ]-3- 氧 代丁酸甲酯起始， 得到 2.5g 的 2-(3- 羟基苄基 )-3- 氧代丁酸甲酯， 其为半透明蜡的形式。
     产率＝ 99％ 1
     H NMR CDCl 3， 400MHz ， δ (ppm) ： 7.15(t ， 1H) ； 6.7-6.85(m ， 3H) ； 5.6(s ， 1H) ； 3.7(s， 3H) ； 3.15(d， 2H) ； 2.25(s， 3H)。
     3.3.2-{3-[2-( 二甲基氨基 ) 乙氧基 ] 苄基 }-3- 氧代丁酸甲酯
     将 1.5g(6.75mmol) 的 2-(3- 羟基苄基 )-3- 氧代丁酸甲酯、 6.6g(20.25mmol) 无 水 Cs2CO3、 0.1g(0.67mmol) 的 NaI 和 1g(7.1mmol) 的 2- 二甲基氨基氯乙烷盐酸盐在 20mL 无水 CH3CN 中的混合物在 90℃加热 4 小时， 然后在室温搅拌过夜。将反应介质过滤， 然后 在减压下浓缩。将获得的残余物溶于 DCM(100mL)、 用饱和食盐水 (30mL) 洗涤、 经 Na2SO4 干 燥、 过滤、 在减压下浓缩， 然后通过硅胶柱色谱纯化， 用梯度为 0 至 10％ MeOH 的 DCM/MeOH 洗 脱。在减压下浓缩后， 得到 409mg 的 2-{3-[2-( 二甲基氨基 ) 乙氧基 ] 苄基 }-3- 氧代丁酸 甲酯， 其为棕色蜡的形式。
     产率＝ 19.5％
     44102333769 A CN 102333783
     1说明书29/95 页H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 7.2(t， 1H) ； 6.7-6.8(m， 3H) ； 4.1(t， 2H) ； 3.8(t， 1H) ； 3.7(s， 3H) ； 3.15(d， 2H) ； 2.8(t， 2H) ； 2.4(s， 6H) ； 2.3(s， 3H)。
     3.4.6-(4-{3-[2-( 二 甲 基 氨 基 ) 乙 氧 基 ] 苄 基 }-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 乙基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺盐酸盐
     按照实施例 2.3 所述的方法， 由 195mg 的 2-{3-[2-( 二甲基氨基 ) 乙氧基 ] 苄 基 }-3- 氧代丁酸甲酯和 194mg 的 N- 乙基 -6- 肼基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺起始， 得到 70mg 的 6-(4-{3-[2-( 二甲基氨基 ) 乙氧基 ] 苄基 }-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 )-N- 乙基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺盐酸盐， 其为白色冻干物的形式。
     产率＝ 20％
     m.p.(℃ ) ＝ 124
     M ＝ C28H33N5O4S ＝ 535 ； M+H ＝ 536 ； 方法 2 ： Tr ＝ 0.98 分钟 1
     H NMR ， d6-DMSO ， 400MHz ， δ (ppm) ： 12.0(bs ， 1H) ； 10.0(bs ， 1H) ； 8.6(d ， 1H) ； 8.4(s， 1H) ； 8.1(d， 1H) ； 7.4(m， 3H) ； 7.25(t， 1H) ； 7.15(d， 2H) ； 6.9(d， 2H) ； 6.8(d， 1H) ； 4.3(t， 2H) ； 3.6(q， 2H) ； 3.5(s， 2H) ； 3.4(t， 2H) ； 2.8(s， 6H) ； 2.2(s， 3H) ； 1.0(t， 3H)。
     实施例 4 ： 6-{4-[3-( 二甲基氨基 ) 苄基 ]-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 }-N- 乙基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ( 表 I 的化合物 53)
     4.1.(2Z/E)-2-[(4- 硝基苯基 ) 亚甲基 ]-3- 氧代丁酸甲酯
     按照实施例 2.1 所述的方法， 由 6.18g 的 4- 硝基苯甲醛和 4.75g 的 3- 氧代丁酸 甲酯起始， 得到 4.2g 的 (2Z/E)-2-[(4- 硝基苯基 ) 亚甲基 ]-3- 氧代丁酸甲酯， 其为油状物 的形式。
     产率＝ 41％ 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 8.4(s， 1H) ； 8.3(d， 1H) ； 7.8(d， 1H) ； 7.6(m， 2H) ； 3.9(s， 3H) ； 2.5(s， 3H)。
     4.2.2-(4- 氨基苄基 )-3- 氧代丁酸甲酯
     按照实施例 2.2 所述的方法， 由 4.2g 的 (2Z/E)-2-[(4- 硝基苯基 ) 亚甲基 ]-3- 氧 代丁酸甲酯起始， 得到 2g 的 2-(4- 氨基苄基 )-3- 氧代丁酸甲酯， 其为油状物的形式。 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 7.1(t， 1H) ； 6.6-6.5(m， 3H) ； 3.9(t， 1H) ； 3.8(s， 3H) ； 3.7(bs， 2H) ； 3.1(d， 2H) ； 2.2(s， 3H)。
     产率＝ 54％。
     4.3.2-[4-( 二甲基氨基 ) 苄基 ]-3- 氧代丁酸甲酯
     在 0 ℃ 向 1.5g(6.78mmol) 的 2-(4- 氨 基 苄 基 )-3- 氧 代 丁 酸 甲 酯、 40μl(0.04mmol) 的 AcOH 和 5.1mL(67.8mmol) 的 37％甲醛水溶液在 13mL 的 CH3CN 中的混合 物中滴加 4.3g(20.34mmol) 三乙酰氧基硼氢化钠。然后将反应介质缓慢温热至室温， 并持 续搅拌 12 小时。 将反应混合物倒入 50mL 饱和 NaHCO3 溶液和 30g 冰中、 用 EtOAc(2×100mL)
     萃取、 经 Na2SO4 干燥、 过滤， 并在减压下浓缩， 然后通过硅胶柱色谱纯化， 用梯度为 0 至 50％ EtOAc 的环己烷 /EtOAc 洗脱。得到 344mg 的 2-[4-( 二甲基氨基 ) 苄基 ]-3- 氧代丁酸甲 酯， 其为黄色油状物的形式。
     产率 ： 20％ 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 7.1(t， 1H) ； 6.65(d， 1H) ； 6.55(m， 2H) ； 3.9(t， 1H) ； 3.8(s， 3H) ； 3.2(d， 2H) ； 3.0(s， 6H) ； 2.2(s， 3H)。
     4.4.6-{4-[3-( 二 甲 基 氨 基 ) 苄 基 ]-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 }-N- 乙基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺
     按照实施例 1.3 所述方法， 由 172mg 的 2-[4-( 二甲基氨基 ) 苄基 ]-3- 氧代丁酸甲 酯和 202mg 的 N- 乙基 -6- 肼基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺起始， 得到 138mg 的 6-{4-[3-( 二 甲基氨基 ) 苄基 ]-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 }-N- 乙基 -N- 苯基吡 啶 -3- 磺酰胺， 其为白色固体的形式。
     产率＝ 41％
     m.p.(℃ ) ＝ 122
     M ＝ C26H29N5O3S ＝ 491 ； M+H ＝ 492 ； 方法 2 ： Tr ＝ 0.96 1
     H NMR ， d6-DMSO ， 400MHz ， δ (ppm) ： 12.0(bs ， 1H) ； 8.7(bs ， 1H) ； 8.45(s ， 1H) ； 8.1(d ， 1H) ； 7.4(m ， 3H) ； 7.2(d ， 2H) ； 7.1(t ， 1H) ； 6.7(s ， 1H) ； 6.5(d ， 2H) ； 3.7(q ， 2H) ； 3.5(s， 2H) ； 2.9(s， 6H) ； 2.15(s， 3H) ； 1.0(t， 3H)。
     实施例 5 ： N， N- 二 甲 基 -6-[3- 甲 基 -5- 氧 代 -4-( 吡 啶 -3- 基 甲 基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺 ( 表 I 的化合物 66)
     5.1.6- 氯 -N， N- 二甲基吡啶 -3- 磺酰胺
     在 0℃向 4.7mL(9.43mmol) 二甲胺 (2N 的 THF 溶液 ) 和 2.6mL(18.86mmol) 的 TEA 在 20mL 的 THF 的混合物中滴加 2g(9.43mmol) 的 6- 氯吡啶 -3- 磺酰氯 ( 按照专利 WO 9840332 制备 ) 在 5mL 的 THF 中的溶液。在 0℃搅拌 40 分钟后， 将反应介质溶于 40mL 的 EtOAc、 用水 (2×40mL) 和饱和食盐水 (40mL) 洗涤、 经 Na2SO4 干燥、 过滤， 并在减压下浓缩。得到 1.93g 的 6- 氯 -N， N- 二甲基吡啶 -3- 磺酰胺， 其为棕色固体的形式， 其不经进一步纯化直接用于 以下步骤。
     产率＝ 93％ 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 8.8(s， 1H) ； 8.0(d， 1H) ； 7.4(d， 1H) ； 2.7(s， 6H)。
     5.2.6- 肼基 -N， N- 二甲基吡啶 -3- 磺酰胺
     将 1.9g(8.8mmol) 的 6- 氯 -N， N- 二甲基吡啶 -3- 磺酰胺和 4.6mL(91.5mmol) 肼 一水合物在 10mL 的 EtOH 中的混合物在 80℃加热 2 小时。获得沉淀， 冷却至室温后， 过滤， 然后用 10mL 的 EtOH 洗涤， 在真空下干燥。得到 1.62g 的 6- 肼基 -N， N- 二甲基吡啶 -3- 磺 酰胺， 其为白色粉末的形式。 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 8.5(bs， 1H) ； 8.3(s， 1H) ； 7.7(d， 1H) ； 6.85(d，
     1H) ； 4.4(s， 2H) ； 2.6(s， 6H)。
     5.3.N， N- 二甲基 -6-[3- 甲基 -5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺
     将 400mg(1.85mmol) 的 6- 肼基 -N， N- 二甲基吡啶 -3- 磺酰胺和 383mg(1.85mmol) 的 3- 氧代 -2-( 吡啶 -3- 基甲基 ) 丁酸甲酯在 4mL 的 EtOH/AcOH 混合物 (1 ∶ 1) 中的混合 物在 80℃加热 4 小时， 然后在减压下浓缩。将获得的残余物溶于 20mL 的 EtOAc、 连续用水 (2×20mL)、 饱和 NaHCO3 溶液 (20mL) 和饱和食盐水 (20mL) 洗涤、 经 Na2SO4 干燥、 过滤， 并在 减压下浓缩。残余物然后在 20mL 的 Et2O/ 戊烷混合物 (1/1) 中固化、 过滤， 并从环己烷 / EtOH 混合物中重结晶。得到 188mg 的 N， N- 二甲基 -6-[3- 甲基 -5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基 甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺， 其为白色结晶的形式。
     产率＝ 28％
     m.p.(℃ ) ＝ 212
     M ＝ C17H19N5O3S ＝ 373 ； M+H ＝ 374 ； 方法 2 ： Tr ＝ 0.58 分钟 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 12(bs， 1H) ； 8.7(s， 1H) ； 8.65(d， 1H) ； 8.5(s， 1H) ； 8.4(d， 1H) ； 8.35(d， 1H) ； 7.7(d， 1H) ； 7.3(dd， 1H) ； 3.6(s， 2H) ； 2.7(s， 6H) ； 2.2(s， 3H)。
     实施例 6 ： N- 乙基 -6-{4-[3-( 甲氧基甲基 ) 苄基 ]-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -1- 基 }-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ( 表 I 的化合物 34)
     6.1.3-( 甲氧基甲基 ) 苯甲酸甲酯
     在室温向 15g(65.5mmol) 的 3-( 溴甲基 ) 苯甲酸甲酯在 20mL 无水 MeOH 中的溶液 中滴加甲醇钠的 MeOH 溶液 ( 预先由 2.25g(98.2mmol) 钠在 65mL 的 MeOH 中制备 )。然后 将反应介质在 65℃加热 4 小时， 然后在减压下浓缩， 溶于 500mL 的 DCM、 用水 (100mL) 和饱 和食盐水 (100mL) 洗涤、 经 Na2SO4 干燥、 过滤， 并在减压下浓缩。得到 7.8g 的 3-( 甲氧基甲 基 ) 苯甲酸甲酯， 其为油状物的形式， 其不经进一步纯化直接用于以下步骤。
     产率＝ 66％ 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 8.1(s， 1H) ； 8.0(d， 1H) ； 7.5(d， 1H) ； 7.4(t， 1H) ； 4.5(s， 2H) ； 4.0(s， 3H) ； 3.4(s， 3H)。
     6.2.[3-( 甲氧基甲基 ) 苯基 ] 甲醇
     向 7.8g(43.3mmol) 的 3-( 甲氧基甲基 ) 苯甲酸甲酯在 60mL 的 THF/ 二烷混合物 (1/1) 中的溶液中加入 0.94g(43.3mmol) 硼氢化锂。然后将反应介质在 80℃加热 3 小 时， 并在室温搅拌过夜。将反应介质溶于 500mL 的 EtOAc、 用水 (2×100mL) 洗涤、 经 Na2SO4 干燥、 过滤， 并在减压下浓缩。得到 5.9g 的 [3-( 甲氧基甲基 ) 苯基 ] 甲醇， 其为黄色液体 的形式， 其不经进一步纯化直接用于以下步骤。
     产率＝ 90％47102333769 A CN 102333783
     1说明书32/95 页H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 7.4-7.2(m， 4H) ； 4.7(s， 2H) ； 4.5(s， 2H) ； 3.4(s， 3H) ； 2.4(bs， 1H)。
     6.3.1-( 溴甲基 )-3-( 甲氧基甲基 ) 苯
     在 0℃向 5.91g(38.8mmol) 的 [3-( 甲氧基甲基 ) 苯基 ] 甲醇在 75mL 的 Et2O 中的 溶液中滴加 9.1mL(97.1mmol) 三溴化磷。将反应混合物缓慢温热至室温， 并继续搅拌 4 小 时。然后将粗反应混合物小心倒入 100g 冰和 100mL 的 MeOH 的混合物中。在减压下蒸除 MeOH 后， 将水相用 DCM(2×200mL) 萃取。合并有机相、 经 Na2SO4 干燥、 过滤， 然后在减压下 浓缩。将获得的残余物通过硅胶柱色谱纯化， 用梯度为 0 至 20％ EtOAc 的环己烷 /EtOAc 洗 脱。
     因此获得 3.25g 的 1-( 溴甲基 )-3-( 甲氧基甲基 ) 苯， 其为油状物的形式。
     产率＝ 39％ 1
     H NMR CDCl 3， 400MHz ， δ (ppm) ： 7.4-7.1(m ， 4H) ； 4.45(s ， 2H) ； 4.35(s ， 2H) ； 3.3(s， 3H)。
     6.4.2-[3-( 甲氧基甲基 ) 苄基 ]-3- 氧代丁酸甲酯
     在室温和在氩气中， 向 0.34g(15.1mmol) 钠在 8mL 无水 MeOH 中的溶液中滴加 1.6mL(15.1mmol) 乙酰乙酸甲酯。搅拌 30 分钟后， 迅速滴加 3.25g(15.11mmol) 的 1-( 溴甲 基 )-3-( 甲氧基甲基 ) 苯， 然后将反应介质在 70℃加热 2 小时 30 分钟。然后将反应介质在 减压下浓缩， 并将获得的残余物通过硅胶柱色谱纯化， 用梯度为 0 至 20％ EtOAc 的环己烷 / EtOAc 洗脱。得到 3.2g 的 2-[3-( 甲氧基甲基 ) 苄基 ]-3- 氧代丁酸甲酯， 其为油状物的形 式。
     产率＝ 85％ 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 7.4-7.1(m， 4H) ； 4.45(s， 2H) ； 3.8(t， 1H) ； 3.7(t， 3H) ； 3.4(t， 3H) ； 3.2(d， 2H) ； 2.2(s， 3H)。
     6.5.N- 乙基 -6-{4-[3-( 甲氧基甲基 ) 苄基 ]-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 }-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺
     按照实施例 1.3 所述的方法， 由 300mg 的 2-[3-( 甲氧基甲基 ) 苄基 ]-3- 氧代丁 酸甲酯和 350mg 的 N- 乙基 -6- 肼基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺起始， 得到 341mg 的 N- 乙 基 -6-{4-[3-( 甲氧基甲基 ) 苄基 ]-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 }-N- 苯 基吡啶 -3- 磺酰胺， 其为白色粉末的形式。
     产率＝ 58％
     m.p.(℃ ) ＝ 144
     M ＝ C26H28N4O4S ＝ 492 ； M+H ＝ 493 ； 方法 2 ： Tr ＝ 1.29 分钟。 1
     H NMR ， d6-DMSO ， 400MHz ， δ (ppm) ： 12.0(bs ， 1H) ； 8.7(bs ， 1H) ； 8.45(s ， 1H) ； 8.1(d， 1H) ； 7.4(m， 3H) ； 7.3-7.1(m， 6H) ； 4.35(s， 2H) ； 3.6(q， 2H) ； 3.5(s， 2H) ； 3.3(s， 3H) ； 2.15(s， 3H) ； 1.0(t， 3H)。
     实施例 7 ： N- 乙基 -6-[3- 甲基 -5- 氧代 -4-(2- 苯基乙基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ( 表 I 的化合物 74)
     7.1.3- 氧代 -2-(2- 苯基乙基 ) 丁酸甲酯
     按照实施例 6.4 所述的方法， 由 5.16g 的 (2- 溴乙基 ) 苯和 3.2g 乙酰乙酸甲酯起 始， 得到 1.9g 的 3- 氧代 -2-(2- 苯基乙基 ) 丁酸甲酯， 其为半透明油状物的形式。
     产率＝ 31％。 1
     H NMR ， CDCl 3， 400MHz ， δ (ppm) ： 7.2-7.35(m ， 5H) ； 3.75(s ， 3H) ； 3.5(t ， 1H) ； 2.5-2.7(m， 2H) ； 2.2(s， 3H) ； 2.15-2.3(m， 2H)。
     7.2.N- 乙 基 -6-[3- 甲 基 -5- 氧 代 -4-(2- 苯 基 乙 基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺
     按照实施例 1.3 所述的方法， 由 264mg 的 3- 氧代 -2-(2- 苯基乙基 ) 丁酸甲酯和 351mg 的 N- 乙基 -6- 肼基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺起始， 得到 291mg 的 N- 乙基 -6-[3- 甲 基 -5- 氧代 -4-(2- 苯基乙基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺， 其 为白色粉末的形式。
     产率＝ 53％
     m.p.(℃ ) ＝ 158
     M ＝ C25H26N4O3S ＝ 462 ； M+H ＝ 463 ； 方法 2 ＝ 1.35 分钟 1
     H NMR ， d6-DMSO ， 400MHz ， δ (ppm) ： 11.8(bs ， 1H) ； 8.6(bs ， 1H) ； 8.45(s ， 1H) ； 8.1(d ， 1H) ； 7.4(m ， 3H) ； 7.3(m ， 2H) ； 7.2(d ， 3H) ； 7.1(d ， 2H) ； 3.6(q ， 2H) ； 2.8(t ， 2H) ； 2.5(t， 2H) ； 1.9(s， 3H) ； 1.0(t， 3H)。
     实施例 8 ： 6-(4- 苄 基 -5- 氧 代 -3- 丙 基 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 )-N- 乙 基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ( 表 I 的化合物 68)
     8.1.2- 苄基 -3- 氧代己酸乙酯
     按照实施例 6.4 所述的方法， 由 2.2g 溴苄和 4g 丁酰乙酸乙酯起始， 得到 2.5g 的 2- 苄基 -3- 氧代己酸乙酯， 其为半透明油状物的形式。
     产率＝ 40％ 1
     H NMR ， CDCl 3， 400MHz ， δ (ppm) ： 7.15-7.30(m ， 5H) ； 4.2(q ， 2H) ； 3.8(t ， 1H) ； 3.2(dd， 2H) ； 2.5-2.3(m， 2H) ； 1.55(m， 2H) ； 1.2(t， 3H) ； 0.86(t， 3H)。
     8.2.6-(4- 苄基 -5- 氧代 -3- 丙基 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 乙基 -N- 苯 基吡啶 -3- 磺酰胺
     按照实施例 1.3 所述的方法， 由 300mg 的 2- 苄基 -3- 氧代己酸乙酯和 353mg 的
     N- 乙基 -6- 肼基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺起始， 得到 400mg 的 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -3- 丙 基 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 乙基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺， 其为白色粉末的形式。
     产率＝ 69％
     m.p.(℃ ) ＝ 180
     M ＝ C26H28N4O3S ＝ 476 ； M+H ＝ 477 ； 方法 2 ： Tr ＝ 1.45 分钟。 1
     H NMR ， d6-DMSO ， 400MHz ， δ (ppm) ： 12.0(bs ， 1H) ； 8.6(bs ， 1H) ； 8.45(s ， 1H) ； 8.1(d， 1H) ； 7.45-7.1(m， 10H) ； 3.65(q， 2H) ； 3.6(s， 2H) ； 2.5(t， 2H) ； 1.5(m， 2H) ； 1.0(t， 3H) ； 0.9(t， 3H)。
     实施例 9 ： N- 乙基 -6-{4-[3-(2- 甲氧基乙氧基 ) 苄基 ]-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -1- 基 }-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ( 表 I 的化合物 38)
     9.1.[3-(2- 甲氧基乙氧基 ) 苯基 ] 甲醇
     将 10g(80.6mmol) 的 3-( 羟 基 甲 基 ) 酚、 78.4g(241.7mmol) 的 Cs2CO3 和 8.4mL(88.6mmol) 溴乙基甲基醚在 150mL 的 CH3CN 中的混合物在 110℃加热 12 小时。冷却 至室温后， 将介质过滤、 在减压下浓缩、 溶于 500mL 的 DCM、 用饱和食盐水 (2×100mL) 洗涤、 经 Na2SO4 干燥、 过滤， 然后在减压下浓缩。
     得到 10.9g 的 3-(2- 甲氧基乙氧基 ) 苯基 ] 甲醇， 其为黄色油状物的形式。
     产率＝ 75％ 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 7.3(t， 1H) ； 6.95(m， 2H) ； 6.85(d， 1H) ； 4.6(s， 2H) ； 4.1(t， 2H) ； 3.8(t， 2H) ； 3.4(s， 3H) ； 2.1(bs， 1H)。
     9.2.1-( 溴甲基 )-3-(2- 甲氧基乙氧基 ) 苯
     按照实施例 6.3 所述的方法， 由 10g 的 [3-(2- 甲氧基乙氧基 ) 苯基 ] 甲醇起始， 得到 11.8g 的 1-( 溴甲基 )-3-(2- 甲氧基乙氧基 ) 苯， 其为油状物的形式。
     产率＝ 87％ 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 7.3(m， 1H) ； 7.0(m， 2H) ； 6.9(d， 1H) ； 4.45(s， 2H) ； 4.15(t， 2H) ； 3.75(t， 2H) ； 3.4(s， 3H)。
     9.3.2-[3-(2- 甲氧基乙氧基 ) 苄基 ]-3- 氧代丁酸甲酯
     按照实施例 6.4 所述的方法， 由 5.6g 的 1-( 溴甲基 )-3-(2- 甲氧基乙氧基 ) 苯和 2.52g 乙酰乙酸甲酯起始， 得到 3.44g 的 2-[3-(2- 甲氧基乙氧基 ) 苄基 ]-3- 氧代丁酸甲 酯， 其为黄色油状物的形式。 1
     H NMR CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 7.2(t， 1H) ； 6.75(m， 3H) ； 4.15(d， 2H) ； 3.8(t， 1H) ； 3.75(s， 3H) ； 3.45(s， 3H) ； 3.15(d， 2H) ； 2.2(s， 3H)。
     9.4.N- 乙 基 -6-{4-[3-(2- 甲 氧 基 乙 氧 基 ) 苄 基 ]-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -1- 基 }-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺
     按照实施例 1.3 所述的方法， 由 336mg 的 2-[3-(2- 甲氧基乙氧基 ) 苄基 ]-3- 氧
     代丁酸甲酯和 351mg 的 N- 乙基 -6- 肼基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺起始， 得到 441mg 的 N- 乙 基 -6-{4-[3-(2- 甲 氧 基 乙 氧 基 ) 苄 基 ]-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 }-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺， 其为白色粉末的形式。
     产率＝ 70％
     m.p.(℃ ) ＝ 126
     M ＝ C27H30N4O5S ＝ 522 ； M+H ＝ 523 ； 方法 2 ： Tr ＝ 1.27 分钟。 1
     H NMR ， d6-DMSO ， 400MHz ， δ (ppm) ： 12.0(bs ， 1H) ； 8.6(bs ， 1H) ； 8.45(s ， 1H) ； 8.1(d， 1H) ； 7.4(m， 3H) ； 7.3-7.1(m， 3H) ； 6.8(d， 2H) ； 7.1(d， 1H) ； 4.1(d， 2H) ； 3.6(m， 4H) ； 3.5(s， 2H) ； 3.3(s， 3H) ； 2.1(s， 3H) ； 1.0(t， 3H)。
     实施例 10 ： N- 乙基 -6-[4-(4- 甲氧基苄基 )-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ( 表 I 的化合物 54)
     10.1.2-(4- 甲氧基苄基 )-3- 氧代丁酸甲酯
     将 1.34g(8.6mmol) 的 1-( 氯甲基 )-4- 甲氧基苯、 0.93mL(8.6mmol) 乙酰乙酸甲 酯、 0.24g(0.86mmol) 四丁基氯化铵和 6.9g 的 K2CO3/KOH(4/1) 的混合物 ( 重量比 ) 在 5mL 甲苯中的混合物在微波反应器中在 110℃加热 5 分钟。将反应介质溶于 80mL 的 EtOAc、 连 续用水 (2×20mL)、 饱和 NaHCO3 溶液 (20mL) 和饱和食盐水 (20mL) 洗涤、 经 Na2SO4 干燥， 然 后在减压下浓缩。将获得的残余物通过硅胶柱色谱纯化， 用梯度为 0 至 30％ EtOAc 的环己 烷 /EtOAc 洗脱。
     因此获得 0.93g 的 2-(4- 甲氧基苄基 )-3- 氧代丁酸甲酯， 其为黄色油状物的形 式。
     产率＝ 48％ 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 7.2(d， 1H) ； 7.1(d， 1H) ； 6.8(m， 2H) ； 3.8(s， 3H) ； 3.75(t， 1H) ； 3.7(s， 3H) ； 3.2(m， 2H) ； 2.2(s， 3H)。
     10.2.N- 乙 基 -6-[4-(4- 甲 氧 基 苄 基 )-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺
     按照实施例 1.3 所述的方法， 由 300mg 的 2-(4- 甲氧基苄基 )-3- 氧代丁酸甲酯和 371mg 的 N- 乙基 -6- 肼基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺起始， 得到 338mg 的 N- 乙基 -6-[4-(4- 甲 氧基苄基 )-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺， 其为 白色粉末的形式。
     产率＝ 56％
     m.p.(℃ ) ＝ 188
     M ＝ C25H26N4O4S ＝ 478 ； M+H ＝ 479 ； 方法 2 ： Tr ＝ 1.29 分钟。 1
     H NMR ， d6-DMSO ， 400MHz ， δ (ppm) ： 11.8(bs ， 1H) ； 8.6(bs ， 1H) ； 8.45(s ， 1H) ； 8.1(d， 1H) ； 7.4(m， 3H) ； 7.3-7.1(m， 4H) ； 6.8(d， 2H) ； 3.75(s， 3H) ； 3.6(s， 2H) ； 3.5(s， 2H) ；
     2.1(s， 3H) ； 1.0(t， 3H)。
     实 施 例 11 ： 6-[4-(2- 氯 -6- 氟 苄 基 )-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 乙基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ( 表 I 的化合物 20)
     将 52mg(0.2mmol) 的 2-(2- 氯 -6- 氟苄基 )-3- 氧代丁酸甲酯、 73mg(0.25mmol) 的 N- 乙基 -6- 肼基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺和 5mg 的 pTsOH 在 2mL 甲苯中的混合物在 110℃ 加热 12 小时， 然后在减压下浓缩。将残余物溶于 2mL 的 DMF 并过滤， 将滤液在 RP18 反相柱 上色谱纯化， 用梯度为 0 至 100％ CH3CN 的 H2O( 含 2％ TFA)/CH3CN 洗脱。
     得 到 86mg 的 6-[4-(2- 氯 -6- 氟 苄 基 )-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 乙基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺， 其为白色粉末的形式 ；
     产率＝ 99％
     m.p.(℃ ) ＝ 206
     M ＝ C24H22ClFN4O3S ＝ 501。M+H ＝ 502 ； 方法 1 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 11.9(bs， 1H) ； 8.6(bs， 1H) ； 8.4(s， 1H) ； 8.0(d， 1H) ； 7.5-7.3(m， 5H) ； 7.2-7.0(m， 3H) ； 3.7(s， 2H) ； 3.6(q， 2H) ； 2.1(s， 3H) ； 1.0(t， 3H)。
     实施例 12 ： N- 乙基 -6-[3- 甲基 -5- 氧代 -4-(1- 苯基环丙基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ( 表 I 的化合物 80)
     12.1.2- 乙酰基 -3- 苯基丁 -3- 烯酸甲酯
     将 3.2g(27.5mmol) 的 3- 氧 代 丁 酸 甲 酯、 5.6g(55.0mmol) 苯 乙 炔 和 700mg(0.8mmol) 的 *[ReBr(CO)3(THF)]2 在 55mL 无水甲苯中的悬浮液在 50℃搅拌 18 小时。 冷却至室温后， 将介质在减压下浓缩。 将获得的残余物溶于 100mL 的 DCM、 连续用水 (100mL) 和饱和食盐水 (100mL) 洗涤、 经 Na2SO4 干燥， 然后在减压下浓缩， 并通过硅胶柱色谱纯化， 用 99/1 的 DCM/MeOH 混合物洗脱。得到 5g 的 2- 乙酰基 -3- 苯基丁 -3- 烯酸甲酯， 其为黄色油 状物的形式。
     产率＝ 84％ 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 12.6(s， 1H) ； 7.3-7.2(m， 5H) ； 5.7(s， 1H) ； 5.1(s， 1H) ； 3.55(s， 3H) ； 1.9(s， 3H)。
     *： [ReBr(CO)3(THF)]2 由 2g(4.9mmol) 的 ReBr(CO)5 在 60mL 无 水 THF 中 回 流 搅 拌 16 小时新鲜制备。在减压下浓缩后， 从 5mL 正己烷 /THF(1/1) 中重结晶， 得到 700mg 的 [ReBr(CO)3(THF)]2， 其为白色粉末的形式。
     产率＝ 35％。
     12.2.3- 氧代 -2-(1- 苯基环丙基 ) 丁酸甲酯
     向 1g(4.6mmol) 的 2- 乙酰基 -3- 苯基丁 -3- 烯酸甲酯在 16mL 的 DCM 中的溶液 中 连 续 滴 加 20.8mL(22.9mmol) 的 1.1M 二 乙 基 锌 的 甲 苯 溶 液 和 3.7mL(45.8mmol) 二 碘 甲烷。将反应介质回流 18 小时。冷却至室温后， 将反应混合物用 100mL 水处理， 然后用 DCM(3×100mL) 萃取。合并有机相、 连续用水 (4×100mL) 和饱和食盐水 (100mL) 洗涤、 经 Na2SO4 干燥、 过滤， 然后在减压下浓缩。将获得的残余物通过硅胶柱色谱纯化， 用 95/5 环己 烷 /EtOAc 混合物洗脱。得到 280mg 的 3- 氧代 -2-(1- 苯基环丙基 ) 丁酸甲酯， 其为黄色油 状物的形式。
     产率＝ 26％。 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 7.3-6.9(m， 5H) ； 3.7(s， 1H) ； 3.6(s， 3H) ； 2.0(s， 3H) ； 1.4(s， 2H) ； 1.25(s， 2H)。
     12.3.N- 乙 基 -6-[3- 甲 基 -5- 氧 代 -4-(1- 苯 基 环 丙 基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺
     按照实施例 1.3 所述的方法， 由 280mg 的 3- 氧代 -2-(1- 苯基环丙基 ) 丁酸甲酯和 352mg 的 N- 乙基 -6- 肼基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺起始， 得到 110mg 的 N- 乙基 -6-[3- 甲 基 -5- 氧代 -4-(1- 苯基环丙基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺， 其为白色粉末的形式。
     m.p.(℃ ) ＝ 146
     M ＝ C26H26N4O3S ＝ 474， M+H ＝ 475 ； 方法 2 ： Tr ＝ 1.44 分钟。 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 12.0(bs， 1H) ； 8.6(bs， 1H) ； 8.4(s， 1H) ； 8.1(d， 1H) ； 7.4-7.1(m， 10H) ； 3.6(q， 2H) ； 2.2(s， 3H) ； 1.15(dd， 4H) ； 1.0(t， 3H)。
     实 施 例 14 ： N- 叔 丁 基 -6-[5- 氧 代 -4-( 吡 啶 -3- 基 甲 基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺盐酸盐 ( 表 I 的化合物 98B)
     14.1.N- 叔丁基 -6- 氯吡啶 -3- 磺酰胺
     在 0℃向 17.3mL(165mmol) 叔丁基胺和 69mL(495mmol) 的 TEA 在 330mL 的 DCM 中 的混合物中分次加入 35g(165mmol) 的 6- 氯吡啶 -3- 磺酰氯。在 0℃搅拌 2 小时后， 将反应 介质溶于 600mL 的 DCM、 用水 (1L)、 饱和 NaHCO3 溶液 (1L) 和饱和食盐水 (1L) 洗涤、 经 Na2SO4 干燥、 过滤， 并在减压下浓缩。得到 32.4g 的 N- 叔丁基 -6- 氯吡啶 -3- 磺酰胺， 其为白色固 体的形式。
     产率＝ 79％ 1
     H NMR CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 8.8(s， 1H) ； 8.0(d， 1H) ； 7.4(d， 1H) ； 4.5(bs， 1H) ；
     1.2(s， 9H)。
     14.2.2- 甲酰基 -3-( 吡啶 -3- 基 ) 丙酸甲酯
     在 0 ℃ 在 氩 气 中， 向 2.1g(90.8mmol) 钠 在 55mL 无 水 Et2O 中 的 悬 浮 液 中 滴 加 15g(90.8mmol) 的 3-( 吡啶 -3- 基 ) 丙酸甲酯和 7.3mL(57.41mmol) 甲酸乙酯的混合物。然 后将介质在室温搅拌 12 小时， 溶于 200mL 水， 并用 100mL 的 Et2O 萃取。 将水相酸化至 pH 5， 然后用 2×300mL 的 EtOAc 萃取。然后将有机相经 Na2SO4 干燥、 过滤， 并在减压下浓缩。将 获得的残余物通过硅胶柱色谱纯化， 用梯度为 0 至 10％ MeOH 的 DCM/MeOH 洗脱。得到 4.8g 的 2- 甲酰基 -3-( 吡啶 -3- 基 ) 丙酸甲酯， 其为白色固体的形式。
     产率＝ 28％ 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 11.0(bs， 1H) ； 8.45(s， 1H) ； 8.4(d， 1H) ； 7.7(d， 1H) ； 7.5(d， 1H) ； 7.2(dd， 1H) ； 3.6(s， 2H) ； 3.5(s， 3H)。
     14.3N- 叔丁基 -6- 肼基吡啶 -3- 磺酰胺
     按照实施例 5.2 所述的方法， 由 32.4g 的 N- 叔丁基 -6- 氯吡啶 -3- 磺酰胺和 12.9mL 肼一水合物起始， 得到 22.6g 的 N- 叔丁基 -6- 肼基吡啶 -3- 磺酰胺， 其为白色固体 的形式。
     产率 ： 71％ 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 8.3(d， 2H) ； 7.8(d， 1H) ； 7.2(s， 1H) ； 7.0(bs， 1H) ； 4.3(bs， 2H) ； 1.2(s， 9H)。
     14.4.N- 叔丁基 -6-[5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺 ( 表 I 的化合物 98A)
     按照实施例 1.3 所述的方法， 由 12g 的 N- 叔丁基 -6- 肼基吡啶 -3- 磺酰胺和 9.1g 的 2- 甲酰基 -3-( 吡啶 -3- 基 ) 丙酸甲酯起始， 得到 9.92g 的 N- 叔丁基 -6-[5- 氧代 -4-( 吡 啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺， 其为白色固体的形式。 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 8.9(bs， 1H) ； 8.5(bs， 2H) ； 8.4(s， 1H) ； 8.3(d， 1H) ； 7.9(s， 1H) ； 7.8(s， 1H) ； 7.7(d， 1H) ； 7.3(dd， 1H) ； 3.6(s， 2H) ； 1.2(s， 9H)。
     产率＝ 64％
     m.p.(℃ ) ＝ 160
     M ＝ C18H21N5O3S ＝ 387 ； M+H ＝ 388 ； 方法 2 ： Tr ＝ 0.58 分钟。 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 8.8(s， 1H) ； 8.3(bs， 3H) ； 8.4(s， 1H) ； 8.3(d， 1H) ； 7.9(s， 1H) ； 7.7(d， 1H) ； 7.4(t， 1H) ； 3.6(s， 2H) ； 3.4(bs， 1H) ； 1.1(s， 9H)。
     14.5.N- 叔丁基 -6-[5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺盐酸盐
     向 912mg 的 N- 叔 丁 基 -6-[5- 氧 代 -4-( 吡 啶 -3- 基 甲 基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺在 20mL 的 DCM 中加入 1 当量的 HCl(4N 的二 烷溶液 )， 然后 将介质在真空下浓缩。得到 1g 的 N- 叔丁基 -6-[5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺盐酸盐， 其为白色粉末的形式。
     产率＝ 100％
     m.p.(℃ ) ＝ 140℃
     M ＝ C18H21N5O3S ＝ 387 ； M+H ＝ 388 ； 方法 2 ： Tr ＝ 0.58 分钟。54102333769 A CN 102333783
     1说明书39/95 页H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 12， 0(bs， 1H) ； 8.9(bs， 1H) ； 8.8(s， 1H) ； 8.7(d， 1H) ； 8.5(d， 2H) ； 8.3(d， 1H) ； 8.0(t， 1H) ； 7.9(s， 1H) ； 7.8(s， 1H) ； 3.8(s， 2H) ； 1.2(s， 9H)。
     实施例 15 ： (2-{5-[ 乙基 ( 苯基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-3- 氧代 -2， 3- 二 氢 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 乙酸 ( 表 I 的化合物 104)
     15.1.2- 甲酰基丁二酸乙酯
     在 0 ℃在氩气中， 向 1.32g(57.41mmol) 钠在 35mL 无水 Et2O 中的悬浮液中滴加 10g(57.41mmol) 丁二酸乙酯和 4.62mL(57.41mmol) 甲酸乙酯的混合物。 然后将介质在室温 搅拌 12 小时， 溶于 100mL 水， 并用 100mL 的 Et2O 萃取。将水相酸化至 pH 5， 然后用 100mL 的 Et2O 萃取。 然后将有机相经 Na2SO4 干燥、 过滤， 然后在减压下浓缩。 将获得的残余物通过 硅胶柱色谱纯化， 用 7/3 环己烷 /EtOAc 混合物洗脱。得到 4.3g 的 2- 甲酰基丁二酸乙酯， 其为无色油状物的形式。
     产率 ： 37％ 1 1
     H NMR， H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 10.0(s， 1H) ； 7.1(d， 1H) ； 4.4-4.2(m， 5H) ； 2.9(dd， 2H) ； 1.3(m， 6H) ；
     15.2 (2-{5-[ 乙基 ( 苯基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-3- 氧代 -2， 3- 二氢 -1H- 吡 唑 -4- 基 ) 乙酸
     将 2.17g(7.42mmol) 的 N- 乙 基 -6- 肼 基 -N- 苯 基 吡 啶 -3- 磺 酰 胺 和 1.5g(7.42mmol) 的 2- 甲酰基丁二酸乙酯在 15mL 的 EtOH 中的混合物在 80℃加热 5 小时。 然后将介质在减压下浓缩。将获得的沉淀在 Et2O 中研磨， 然后过滤， 并用叶轮泵干燥。在 室温， 将获得的 4.1g 米色粉末加至溶于 17mL 无水 MeOH 的 212mg(9.23mmol) 钠的溶液中， 并继续搅拌 2 小时。将介质在减压下浓缩， 然后溶于 10mL 水和 4mL 的 1N 氢氧化钠， 并在室 温搅拌 12 小时。然后用 1N HCl 将介质酸化至 pH 5， 然后用 DCM(2× 100mL) 萃取。将合并 的有机相经 Na2SO4 干燥、 过滤， 然后在减压下浓缩。 将获得的残余物在戊烷中固化、 过滤、 并 在真空下干燥， 得到 2.1g 的 (2-{5-[ 乙基 ( 苯基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-3- 氧代 -2， 3- 二氢 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 乙酸， 其为白色粉末的形式。
     产率＝ 58％
     m.p.(℃ ) ＝ 174℃
     M ＝ C18H18N4O5S ＝ 402 ； M+H ＝ 403 ； 方法 Tr ＝ 1.02 分钟。 1
     H NMR ， d6-DMSO ， 400MHz ， δ (ppm) ： 12.0(bs ， 2H) ； 8.6(bs ， 1H) ； 8.5(bs ， 1H) ； 8.2(d， 1H) ； 7.9(bs， 1H) ； 7.4(m， 3H) ； 7.2(d， 2H) ； 3.7(q， 2H) ； 3.4(s， 2H) ； 1.0(t， 3H)。
     实施例 16 ： (2-{5-[ 乙基 ( 苯基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-3- 氧代 -2， 3- 二 氢 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 乙酸甲酯 ( 表 I 的化合物 107)
     16.1 (2-{5-[ 乙基 ( 苯基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-3- 氧代 -2， 3- 二氢 -1H- 吡 唑 -4- 基 ) 乙酸甲酯
     将 0.5g(1.24mmol) 的 (2-{5-[ 乙基 ( 苯基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-3- 氧 代 -2， 3- 二氢 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 乙酸和 0.256g(1.24mmol) 的 DCC 的混合物在室温搅拌 3 小时。将形成的沉淀过滤， 并将滤液在减压下浓缩。将获得的残余物通过硅胶柱色谱纯 化， 用 9/1 的 DCM/MeOH 混合物洗脱。得到 0.5g 的 2-{5-[ 乙基 ( 苯基 ) 氨基磺酰基 ] 吡 啶 -2- 基 }-3- 氧代 -2， 3- 二氢 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 乙酸甲酯， 其为棕色粉末的形式。
     产率＝ 96％
     m.p.(℃ ) ＝ 140℃
     M ＝ C19H20N4O5S ＝ 416 ； M+H ＝ 417 ； 方法 2 ； Tr ＝ 1.44 分钟 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 12.0(bs， 1H) ； 8.6(s， 1H) ； 8.4(s， 1H) ； 8.2(d， 1H) ； 7.9(s， 1H) ； 7.4(m， 3H) ； 7.2(d， 2H) ； 5.6(d， 0.5H) ； 3.75(q， 2H) ； 3.7(s， 3H) ； 3.3(d， 1.5H) ； 1.0(t， 3H)。
     实施例 17 ： 2-(2-{5-[ 乙基 ( 苯基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-3- 氧代 -2， 3- 二 氢 -1H- 吡唑 -4- 基 )-N- 甲基乙酰胺 ( 表 I 的化合物 108)在 0 ℃ 向 0.28g(0.7mmol) 的 (2-{5-[ 乙 基 ( 苯 基 ) 氨 基 磺 酰 基 ] 吡 啶 -2- 基 }-3- 氧 代 -2， 3- 二 氢 -1H- 吡 唑 -4- 基 ) 乙 酸、 0.61mL(3.48mmol) 的 DIEA 和 0.8mL(1.4mmol) 甲胺 (2N 的 THF 溶液 ) 在 2mL 的 DCM 中的混合物中加入 0.33g(1.04mmol) 的 TBTU。在室温搅拌 3 小时后， 将介质溶于 500mL 的 DCM、 连续用 0.1N HCl(2× 40mL)、 饱 和 NaHCO3 溶液 (2× 40mL) 和饱和食盐水 (30mL) 洗涤、 经 Na2SO4 干燥， 然后在减压下浓缩和 通过硅胶柱色谱纯化， 用 95/5 的 DCM/MeOH 混合物洗脱。得到 18mg 的 2-(2-{5-[ 乙基 ( 苯 基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-3- 氧代 -2， 3- 二氢 -1H- 吡唑 -4- 基 )-N- 甲基乙酰胺， 其 为棕色粉末的形式。
     产率＝ 6％
     m.p.(℃ ) ＝ 194℃
     M ＝ C19H21N5O5S ＝ 415 ； M+H ＝ 416 ； 方法 2Tr ＝ 0.98 分钟 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 12.0(bs， 1H) ； 8.6(bs， 1H) ； 8.5(s， 1H) ； 8.2(d， 1H) ； 7.8(s， 2H) ； 7.5(m， 3H) ； 7.2(d， 2H) ； 3.6(q， 2H) ； 3.1(s， 2H) ； 2.6(s， 3H) ； 1.0(t， 3H)。
     实施例 18 ： (4- 苄基 -1-{5-[ 乙基 ( 苯基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -3- 基 ) 乙酸乙酯 ( 表 I 的化合物 106)
     18.1 2- 苄基 -3- 氧代戊二酸二乙酯
     在氩气中在室温， 将 1.7g(74.18mmol) 钠溶于 75mL 无水 EtOH 中。然后在室温滴 加 13.5mL(74.2mmol) 的 3- 氧代戊二酸二乙酯， 然后滴加 8.8mL(74.2mmol) 溴苄。然后将 介质回流 3 小时、 在减压下浓缩， 并通过硅胶柱色谱纯化， 用梯度为 0 至 20％ EtOAc 的环己 烷 /EtOAc 洗脱。得到 8.29g 的 2- 苄基 -3- 氧代戊二酸二乙酯， 其为半透明油状物的形式。
     产率＝ 38％ 1 1
     H NMR， H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 7.4-7.2(m， 5H) ； 4.2(m， 4H) ； 4.1(t， 1H) ； 3.2(d， 2H) ； 1.2(m， 6H) ；
     18.2.4- 苄基 -1-{5-[ 乙基 ( 苯基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-5- 氧代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -3- 基 ) 乙酸乙酯
     按照实施例 1.3 所述的方法， 由 5g(17.1mmol) 的 2- 苄基 -3- 氧代戊二酸二乙 酯和 5g(17.1mmol) 的 N- 乙基 -6- 肼基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺起始， 得到 3g 的 4- 苄 基 -1-{5-[ 乙基 ( 苯基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -3- 基 ) 乙酸乙酯， 其为白色粉末的形式。
     产率＝ 34％
     m.p.(℃ ) ＝ 156
     M ＝ C27H28N4O5S ＝ 520 ； M+H ＝ 521 方法 2 ： Tr ＝ 1.52 分钟。 1
     H NMR ， d6-DMSO ， 400MHz ， δ (ppm) ： 12.0(bs ， 1H) ； 8.5(bs ， 2H) ； 8.15(d ， 1H) ； 7.4-7.1(m， 10H) ； 4.1(q， 2H) ； 3.8-3.6(m， 6H) ； 1.2(t， 3H) ； 1.0(t， 3H)。
     实 施 例 19 ： 6-{4-[(5- 氰 基 吡 啶 -3- 基 ) 甲 基 ]-3- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -1- 基 }-N- 乙基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ( 表 I 的化合物 97)
     19.1 (5- 溴吡啶 -3- 基 ) 甲醇
     在氩气中在 -10℃， 向 12g(59.4mmol) 的 5- 溴吡啶 -3- 甲酸在 300mL 无水 THF 中 的溶液中加入 6.6mL 的 NMM， 然后加入 5.7mL(59.4mmol) 氯甲酸乙酯。 在 -10℃搅拌 20 分钟 后， 分次加入 6.8g(179.8mmol) 硼氢化钠。然后将介质冷却至 -70℃， 并经 1 小时 30 分钟加 入 400mL 的 MeOH。 允许温度升至室温， 并继续搅拌 12 小时。 然后将介质在减压下浓缩， 然后 通过硅胶柱色谱纯化， 用 98/2 的 DCM/MeOH 混合物洗脱。得到 8.4g 的 (5- 溴吡啶 -3- 基 ) 甲醇， 其为黄色油状物的形式。
     产率＝ 75％ 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 8.5(s， 1H) ； 8.4(s， 1H) ； 7.9(s， 1H) ； 4.6(s， 2H) ； 2.8(bs， 1H)。
     19.2 5-( 羟基甲基 ) 吡啶 -3- 甲腈
     将 4.2g(22.34mmol) 的 (5- 溴吡啶 -3- 基 ) 甲醇和 5g(55.84mmol) 氰化铜在 22mL 吡啶中的混合物在密封管中在 160℃加热 20 小时。冷却至室温后， 将介质溶于 10mL 浓氨 水和 30mL 饱和 NH4Cl 溶液， 然后搅拌 2 小时。然后将介质用 200mL 的 DCM/iPrOH 混合物 (85/15) 萃取、 经 Na2SO4 干燥， 然后在减压下浓缩和通过硅胶柱色谱纯化， 用 98/2 的 DCM/ MeOH 混合物洗脱。得到 2.13g 的 5-( 羟基甲基 ) 吡啶 -3- 甲腈， 其为白色固体的形式。
     产率＝ 51％ 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 8.9(d， 2H) ； 8.0(s， 1H) ； 4.9(s， 2H) ； 2.3(bs， 1H)。
     19.3 5-( 氯甲基 ) 吡啶 -3- 甲腈
     向 0.2g(1.49mmol) 的 5-( 羟 基 甲 基 ) 吡 啶 -3- 甲 腈 在 2mL 的 DCM 中 的 溶 液 中 加 入 1mL(4mmol) 的 4N HCl 的 二 烷 溶 液。 将 混 合 物 在 减 压 下 浓 缩， 然后加入至 0.65mL(8.95mmol) 氯化亚砜中， 接着在 60℃加热 3 小时。冷却至室温后， 将介质溶于 20mL 甲苯、 将形成的沉淀过滤， 然后用 30mL 的 DCM 和 30mL 饱和 NaHCO3 溶液处理。分离出有机 相， 经 Na2SO4 干燥， 然后在减压下浓缩。得到 161mg 的 5-( 氯甲基 ) 吡啶 -3- 甲腈， 其为油 状物的形式。
     产率＝ 73％ 1 1
     H NMR， H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 8.9(d， 2H) ； 8.0(s， 1H) ； 3.5(s， 2H)。
     19.4.2-[(5- 氰基吡啶 -3- 基 ) 甲基 ]-3- 氧代丁酸甲酯
     在氩气中在 0℃， 向 84mg(2.11mmol) 氢化钠 (60％， 在油中 ) 在 3mL 无水 DME 中的 悬浮液中加入 0.23ml(2.11mmol) 乙酰乙酸甲酯。 将反应介质在 0℃搅拌 30 分钟， 并在室温 搅拌 30 分钟， 接着加入稀释于 1mL 的 DME 的 161mg(1.06mmol) 的 5-( 氯甲基 ) 吡啶 -3- 甲 腈和 29mg(0.11mmol) 的四丁基碘化铵。然后将介质在 65℃加热 4 小时。冷却至室温后， 将 介质溶于 10mL 水， 通过加入 0.1N HCl 中和， 然后用 EtOAc(2× 40mL) 萃取， 经 Na2SO4 干燥、 在减压下浓缩， 和通过硅胶柱色谱纯化， 用环己烷 /EtOAc 混合物 (8/2) 洗脱。得到 140mg 的 2-[(5- 氰基吡啶 -3- 基 ) 甲基 ]-3- 氧代丁酸甲酯， 其为无色油状物的形式。
     产率＝ 57％1 H NMR， H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 8.8(s， 1H) ； 8.6(s， 1H) ； 7.8(s， 1H) ； 3.7(t， 1H) ； 3.65(s， 3H) ； 3.2(dd， 2H) ； 2.2(s， 3H)。
     19.5 6-{4-[(5- 氰基吡啶 -3- 基 ) 甲基 ]-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 }-N- 乙基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺
     按照实施例 1.3 所述的方法， 由 125mg(0.43mmol) 的 2-[(5- 氰基吡啶 -3- 基 ) 甲 基 ]-3- 氧代丁酸甲酯和 99mg(0.43mmol) 的 N- 乙基 -6- 肼基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺起 始， 得到 103mg 的 6-{4-[(5- 氰基吡啶 -3- 基 ) 甲基 ]-3- 甲基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 }-N- 乙基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺， 其为黄色粉末的形式。
     产率＝ 51％
     m.p.(℃ ) ＝ 164
     1M ＝ C24H22N6O3S ＝ 474 ； M+H ＝ 475 ； 方法 2 ： Tr ＝ 1.24 分钟。 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 12.0(bs， 1H) ； 8.9(s， 1H) ； 8.8(s， 1H) ； 8.6(bs， 1H) ； 8.4(s， 1H) ； 8.2(s， 1H) ； 8.15(d， 1H) ； 7.4(m， 3H) ； 7.1(d， 2H) ； 3.7(s， 4H) ； 2.2(s， 3H) ； 1.0(t， 3H)。
     实施例 20 ： 5- 甲基 -2-[5-( 苯基磺酰基 ) 吡啶 -2- 基 ]-4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮 ( 表 II 的化合物 197)
     20.1 2- 氯 -5-( 苯基硫基 ) 吡啶
     将 3.4g(14.3mmol) 的 2- 氯 -5- 碘 吡 啶、 1.9g(17.2mmol) 的 硫 酚、 0.93g(17.2mmol) 甲醇钠和 0.36g(5.7mmol) 铜在 18mL 的 MeOH 中的混合物在 80℃加热 12 小时。冷却至室温后， 将介质溶于 100mL 的 1N NaOH， 并将 MeOH 在减压下蒸除。将反应介 质用 EtOAc(2×100mL) 萃取， 将有机相用 0.1N NaOH(2×30mL) 洗涤， 然后经 Na2SO4 干燥、 在 减压下浓缩， 并通过硅胶柱色谱纯化， 用环己烷 /EtOAc 混合物 (8/2) 洗脱。得到 1.90g 的 2- 氯 -5-( 苯基硫基 ) 吡啶， 其为白色粉末的形式。
     产率＝ 60％ 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 8.5(d， 1H) ； 8.3(s， 1H) ； 7.9(s， 1H) ； 7.5-7.4(m， 5H)。
     20.2 2- 氯 -5-( 苯基磺酰基 ) 吡啶
     在室温经 15 分钟向 1.9g(8.57mmol) 的 2- 氯 -5-( 苯基硫基 ) 吡啶在 40mL 的 DCM 中的溶液中加入 4.8g(21.42mmol) 的 77％的 3- 氯过氧苯甲酸在 20mL 的 DCM 中的悬浮液。 搅拌 1 小时后， 将形成的沉淀滤除， 将滤液溶于 200mL 的 DCM， 连续用 100mL 的 0.2N 氢氧化 钠、 100mL 饱和硫代硫酸钠溶液洗涤、 经 Na2SO4 干燥、 在减压下浓缩， 并通过硅胶柱色谱纯 化， 用环己烷 /EtOAc 混合物 (8/2) 洗脱。得到 0.67g 的 2- 氯 -5-( 苯基磺酰基 ) 吡啶， 其 为白色粉末的形式。
     产率＝ 31％ 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 8.9(s， 1H) ； 8.1-7.9(m， 3H) ； 7.6-7.4(m， 3H) ； 7.3(m， 1H)。
     20.3 2- 肼基 -5-( 苯基磺酰基 ) 吡啶
     按照实施例 5.2 的方法， 由 0.67g(2.64mmol) 的 2- 氯 -5-( 苯基磺酰基 ) 吡啶起 始， 得到 340mg 的 2- 肼基 -5-( 苯基磺酰基 ) 吡啶， 其为白色粉末的形式。
     产率＝ 51％ 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 9.0(s， 1H) ； 8.6(d， 1H) ； 8.5(s， 1H) ； 8.4(m， 2H) ； 8.0(d， 1H) ； 7.8-7.5(m， 3H) ； 7.3(m， 1H) ； 3.3(bs， 1H)。
     20.4 5- 甲基 -2-[5-( 苯基磺酰基 ) 吡啶 -2- 基 ]-4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-1， 2- 二 氢 -3H- 吡唑 -3- 酮
     按照实施例 1.3 所述的方法， 由 340mg(1.36mmol) 的 2- 肼基 -5-( 苯基磺酰基 ) 吡
     啶和 283mg(1.36mmol) 的 3- 氧代 -2-( 吡啶 -3- 基甲基 ) 丁酸甲酯起始， 得到 130mg 的 5- 甲 基 -2-[5-( 苯基磺酰基 ) 吡啶 -2- 基 ]-4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-1， 2- 二氢 -3H- 吡唑 -3- 酮， 其为白色粉末的形式。
     产率＝ 23％
     m.p.(℃ ) ＝ 176
     M ＝ C21H18N4O3S ＝ 406 ； M+H ＝ 407 ； 方法 2 ： Tr ＝ 0.78 分钟。 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm)12.0(bs， 1H) ； 9.0(s， 1H) ； 8.6(d， 1H) ； 8.5(s， 1H) ； 8.4(m， 2H) ； 8.0(d， 2H) ； 7.8-7.6(m， 4H) ； 7.3(m， 1H) ； 3.6(s， 2H) ； 2.2(s， 3H)。
     实 施 例 21 ： N- 乙 基 -6-{4-[(5- 甲 氧 基 吡 啶 -3- 基 ) 甲 基 ]-5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -1- 基 }-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺盐酸盐 ( 表 I 的化合物 101)
     21.1.(2E)-3-(5- 甲氧基吡啶 -3- 基 ) 丙 -2- 烯酸甲酯
     在氩气中和在 0℃， 经 45 分钟向 3.12g(78.1mmol) 氢化钠 (60％， 在油中 ) 在 30mL 无水 THF 中的悬浮液中加入 16.4g(78.1mmol) 的 ( 二乙氧基磷酰基 ) 乙酸甲酯在 10mL 的 THF 中的溶液。在 0 ℃搅拌 30 分钟， 然后在 0 ℃滴加 5.1g(37.2mmol) 的 5- 甲氧基吡 啶 -3- 甲醛在 20mL 无水 THF 中的溶液。冷却至室温后， 将反应混合物用 150mL 水处理， 然 后用 EtOAc(3×100mL) 萃取。合并有机相、 连续用水 (2×20mL) 洗涤、 经 Na2SO4 干燥、 过滤， 然后在减压下浓缩。将获得的残余物通过硅胶柱色谱纯化， 用梯度为 0 至 40％ EtOAc 的环 己烷 /EtOAc 洗脱。得到 1g 的 (2E)-3-(5- 甲氧基吡啶 -3- 基 ) 丙 -2- 烯酸甲酯， 其为白色 粉末的形式。
     产率＝ 14％。 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 8.4(d， 1H) ； 7.7(d， 1H) ； 7.4(s， 1H) ； 6.5(d， 1H) ； 3.9(s， 3H) ； 3.8(s， 3H)。
     21.2.3-(5- 甲氧基吡啶 -3- 基 ) 丙酸甲酯
     在 Parr 装置中， 将 1g(5.33mmol) 的 (2E)-3-(5- 甲氧基吡啶 -3- 基 ) 丙 -2- 烯 酸甲酯在 20mL 的 MeOH 中的溶液和 0.1g 的 10％ Pd/C 的混合物在 7 巴氢化 5 小时。然后 将反应混合物经 Whatman GF/F 纸过滤， 并在减压下浓缩。因此获得 1g 的 3-(5- 甲氧基吡 啶 -3- 基 ) 丙酸甲酯， 其为蜡的形式， 其不经进一步纯化直接用于以下步骤。
     产率＝ 100％ 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 8.3(s， 1H) ； 8.2(s， 1H) ； 7.1(s， 1H) ； 3.85(s， 3H) ； 3.6(s， 3H) ； 3.0(t， 2H) ； 2.7(t， 3H)。
     21.3.2- 甲酰基 -3-(5- 甲氧基吡啶 -3- 基 ) 丙酸甲酯
     按照实施例 14.2 所述的方法， 由 1.04g(5.33mmol) 的 3-(5- 甲氧基吡啶 -3- 基 ) 丙酸甲酯起始， 得到 600mg 的 2- 甲酰基 -3-(5- 甲氧基吡啶 -3- 基 ) 丙酸甲酯， 其为蜡的形 式， 其不经进一步纯化直接用于以下步骤。
     产率＝ 51％。
     21.4.N- 乙基 -6-{4-[(5- 甲氧基吡啶 -3- 基 ) 甲基 ]-5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 }-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺盐酸盐
     按照实施例 2.3 所述的方法， 由 250mg(1.12mmol) 的 2- 甲酰基 -3-(5- 甲氧基吡 啶 -3- 基 ) 丙酸甲酯和 327mg(1.12mmol) 的 N- 乙基 -6- 肼基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺起始， 得到 131mg 的 N- 乙基 -6-{4-[(5- 甲氧基吡啶 -3- 基 ) 甲基 ]-5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 }-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺盐酸盐， 其为冻干物的形式。
     产率＝ 25％
     m.p.(℃ ) ＝ 136
     M ＝ C23H23N5O4S ＝ 465 ； M+H ＝ 466 ； 方法 2 ： Tr ＝ 0.97 分钟。 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 11.0(bs， 1H) ； 8.6(s， 2H) ； 8.4(d， 2H) ； 8.2(d， 1H) ； 8.1(s， 1H) ； 7.9(s， 1H) ； 7.4(m， 3H) ； 7.1(d， 2H) ； 4.0(s， 3H) ； 3.8(s， 2H) ； 3.6(q， 2H) ； 1.0(t， 3H)。
     实施例 22 ： {2-[5-( 叔丁基氨基磺酰基 ) 吡啶 -2- 基 ]-3- 氧代 -2， 3- 二氢 -1H- 吡 唑 -4- 基 }( 苯基 ) 乙酸甲酯 ( 表 I 的化合物 113)
     22.1.3- 氰基 -3- 苯基丙酸乙酯
     将 64g(257.8mmol) 亚苄基丙二酸二乙酯 (diethyl benzylidenepropanedioate) 和 17g(261mmol) 氰化钾在 750mL 的 EtOH 和 75mL 水中的混合物在 60℃加热 18 小时。然后 将介质在减压下浓缩并溶于 500mL 饱和食盐水， 然后用 Et2O(2×500mL) 萃取。将有机相经 Na2SO4 干燥、 过滤， 然后在减压下浓缩。得到 43.5g 的 3- 氰基 -3- 苯基丙酸乙酯， 其为固体 的形式， 其不经进一步纯化直接用于以下步骤。
     产率＝ 83％。
     22.2.2- 苯基丁二酸
     将 43.5g(214mmol) 的 3- 氰基 -3- 苯基丙酸乙酯和 52.2g(930.4mmol) 氢氧化钾在 670mL 的 EtOH 中的混合物回流 4 小时。冷却至室温后， 将介质在真空下浓缩， 然后用 1L 的 1N HCl 处理， 然后形成沉淀， 其经过滤并用水 (2× 50mL) 冲洗。将获得的固体溶于 200mL 甲苯和 40mL 的 EtOH 的混合物中， 并在减压下浓缩， 然后用叶轮泵干燥。得到 37g 的 2- 苯 基丁二酸， 其为固体的形式， 其不经进一步纯化直接用于以下步骤。
     产率＝ 89％。
     22.3.2- 苯基丁二酸二乙酯
     在 Dean-Stark 装置中， 将 37g(190.5mmol) 的 2- 苯基丁二酸、 6mL 浓 H2SO4、 80mL 甲 苯和 80mL 的 EtOH 的混合物回流 72 小时。冷却至室温后， 将反应混合物在减压下浓缩， 然 后用 300mL 水处理， 并用 Et2O(2×400mL) 萃取。合并有机相、 经 Na2SO4 干燥、 过滤， 然后在
     减压下浓缩。将获得的残余物通过硅胶柱色谱纯化， 用梯度为 0 至 10％ EtOAc 的环己烷 / EtOAc 洗脱。得到 22g 的 2- 苯基丁二酸二乙酯， 其为油状物的形式。
     产率＝ 46％。 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 7.5(m， 5H) ； 4.2(m， 5H) ； 3.0(dd， 2H) ； 1.0(t， 6H)。
     22.4.2- 甲酰基 -3- 苯基丁二酸二乙酯
     按照实施例 14.2 所述的方法， 由 7.0g(28mmol) 的 2- 苯基丁二酸二乙酯起始， 得 到 7.0g 的 2- 甲酰基 -3- 苯基丁二酸二乙酯， 其为油状物的形式。
     产率＝ 89％。
     22.5.{2-[5-( 叔 丁 基 氨 基 磺 酰 基 ) 吡 啶 -2- 基 ]-3- 氧 代 -2， 3- 二 氢 -1H- 吡 唑 -4- 基 }( 苯基 ) 乙酸乙酯
     按照实施例 27.2 所述的方法， 由 2g(7.19mmol) 的 2- 甲酰基 -3- 苯基丁二酸二乙 酯和 1.75g(7.19mmol) 的 N- 叔丁基 -6- 肼基吡啶 -3- 磺酰胺起始， 得到 3.1g 的 {2-[5-( 叔 丁基氨基磺酰基 ) 吡啶 -2- 基 ]-3- 氧代 -2， 3- 二氢 -1H- 吡唑 -4- 基 }( 苯基 ) 乙酸甲酯， 其为粉末的形式。
     产率＝ 93％ 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 8.6(s， 1H) ； 8.6(d， 1H) ； 8.0(d， 1H) ； 7.7(s， 2H) ； 7.3(m， 5H) ； 4.6(s， 1H) ； 4.1(q， 2H) ； 1.0(m， 12H)。
     22.6 1-[5-( 叔丁基氨基磺酰基 ) 吡啶 -2- 基 ]-4-[ 羧基 ( 苯基 ) 甲基 ]-1H- 吡 唑 -5- 醇盐
     将 2.8g(5.8mmol) 的 2-[5-( 叔丁基氨基磺酰基 ) 吡啶 -2- 基 ]-3- 氧代 -2， 3- 二 氢 -1H- 吡唑 -4- 基 }( 苯基 ) 乙酸乙酯和 5.8mL(5.8mmol) 的 1N NaOH 在 12mL 的 EtOH 中 的混合物在室温搅拌 5 小时。加入 5.8mL 的 1N HCl， 并将介质用 DCM(2×100mL) 萃取。将 有机相经 Na2SO4 干燥、 过滤， 然后在减压下浓缩。得到 2g 的 1-[5-( 叔丁基氨基磺酰基 ) 吡 啶 -2- 基 ]-4-[ 羧基 ( 苯基 ) 甲基 ]-1H- 吡唑 -5- 醇盐， 其为米色粉末的形式， 其不经进一 步纯化直接用于以下步骤。
     22.7.{2-[5-( 叔 丁 基 氨 基 磺 酰 基 ) 吡 啶 -2- 基 ]-3- 氧 代 -2， 3- 二 氢 -1H- 吡 唑 -4- 基 }( 苯基 ) 乙酸甲酯
     在 0℃向 0.3g(0.66mmol) 的 1-[5-( 叔丁基氨基磺酰基 ) 吡啶 -2- 基 ]-4-[ 羧基 ( 苯基 ) 甲基 ]-1H- 吡唑 -5- 醇盐在 3mL 无水 MeOH 中的混合物中加入 0.11mL(0.73mmol) 氯化亚砜。冷却至室温后， 连续搅拌 12 小时。将介质溶于 40mL 的 DCM， 用 20mL 饱和 NaHCO3 溶液洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 然后在减压下浓缩。将获得的残余物在 DCM/ 戊烷混合物中固化， 然后过滤， 在真空下干燥。得到 0.67g 的 2-[5-( 叔丁基氨基磺酰基 ) 吡啶 -2- 基 ]-3- 氧 代 -2， 3- 二氢 -1H- 吡唑 -4- 基 }( 苯基 ) 乙酸甲酯， 其为米色粉末的形式。
     产率＝ 73％
     m.p.(℃ ) ＝ 66
     M ＝ C21H24N4O5S ＝ 444 ； M+H ＝ 445 ； 方法 2 ： Tr ＝ 1.21 分钟。 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 12.3(bs， 1H) ； 8.8(s， 1H) ； 8.6(bs， 1H) ； 8.3(d， 1H) ； 7.7(d， 2H) ； 7.4(m， 5H) ； 4.9(s， 1H) ； 3.7(s， 3H) ； 1.0(t， 9H)。
     实施例 23 ： N- 环戊基 -N-({6-[5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 基 } 磺酰基 ) 甘氨酸甲酯盐酸盐 ( 表 I 的化合物 128)
     23.1.6- 氯 -N- 环戊基吡啶 -3- 磺酰胺
     按 照 实 施 例 14.1 所 述 的 方 法， 由 5g(23.6mmol) 的 6- 氯 吡 啶 -3- 磺 酰 氯 和 2g(23.6mmol) 环戊胺起始， 得到 5.1g 的 6- 氯 -N- 环戊基吡啶 -3- 磺酰胺， 其为棕色固体的 形式。
     产率＝ 84％ 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 8.8(s， 1H) ； 8.0(d， 1H) ； 7.4(d， 1H) ； 4.5(d， 1H) ； 3.6(m， 1H) ； 1.8(m， 2H) ； 1.6(m， 4H) ； 1.3(m， 2H)。
     23.2.N-[(6- 氯吡啶 -3- 基 ) 磺酰基 ]-N- 环戊基甘氨酸甲酯
     将 2g(7.67mmol) 的 6- 氯 -N- 环戊基吡啶 -3- 磺酰胺、 0.7mL(7.67mmol) 溴乙酸甲 酯和 1.2g(8.4mmol) 的 K2CO3 在 15mL 的 CH3CN 中的混合物在 80℃加热 12 小时。冷却至室 温后， 将介质过滤， 并将滤液浓缩。将残余物溶于 100mL 的 DCM， 连续用 50mL 饱和 NaHCO3 溶 液和 50mL 水洗涤， 然后将有机相经 Na2SO4 干燥、 在减压下浓缩， 并通过硅胶柱色谱纯化， 用 8/2 的庚烷 /EtOAc 混合物洗脱。得到 2.4g 的 N-[(6- 氯吡啶 -3- 基 ) 磺酰基 ]-N- 环戊基 甘氨酸甲酯， 其为油状物的形式。
     产率＝ 93％ 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm)9.0(s， 1H) ； 8.3(d， 1H) ； 7.4(d， 1H) ； 4.1(s， 2H) ； 4.05(m， 1H) ； 3.8(s， 3H) ； 1.9(m， 2H) ； 1.6(m， 4H) ； 1.3(m， 2H)。
     23.3.N- 环戊基 -N-[(6- 肼基吡啶 -3- 基 ) 磺酰基 ] 甘氨酸甲酯
     按照实施例 5.2 所述的方法， 由 2.4g(7.2mmol) 的 N-[(6- 氯吡啶 -3- 基 ) 磺酰 基 ]-N- 环戊基甘氨酸甲酯起始， 得到 2g 的 N- 环戊基 -N-[(6- 肼基吡啶 -3- 基 ) 磺酰基 ] 甘氨酸甲酯， 其为黄色固体的形式。
     产率＝ 85％ 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm)8.6(s， 1H) ； 8.0(d， 1H) ； 6.8(d， 1H) ； 6.6(bs， 1H) ； 4.05(m， 1H) ； 4.0(s， 2H) ； 3.6(s， 3H) ； 1.8(m， 2H) ； 1.6(m， 4H) ； 1.2(m， 2H)。
     23.4.N- 环 戊 基 -N-({6-[5- 氧 代 -4-( 吡 啶 -3- 基 甲 基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 基 } 磺酰基 ) 甘氨酸甲酯盐酸盐
     按照实施例 2.3 所述的方法， 由 200mg(0.61mmol) 的 N- 环戊基 -N-[(6- 肼基吡 啶 -3- 基 ) 磺酰基 ] 甘氨酸甲酯和 117mg(0.61mmol) 的 3- 氧代 -2-( 吡啶 -3- 基甲基 ) 丁酸甲酯起始， 得到 130mg 的 N- 环戊基 -N-({6-[5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 基 } 磺酰基 ) 甘氨酸甲酯盐酸盐， 其为白色冻干物的形式。
     产率＝ 34％
     m.p.(℃ ) ＝ 100
     M ＝ C22H25N5O5S ＝ 471 ； M+H ＝ 472 ； 方法 2 ： Tr ＝ 0.87 分钟。 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm)8.7(d， 2H) ； 8.6(d， 1H) ； 8.4(d， 2H) ； 8.3(d， 1H) ；
     7.8(m， 1H) ； 7.7(s， 1H) ； 5.0-4.0(bs， 2H) ； 3.9(m， 1H) ； 3.8(s， 2H) ； 3.6(s， 2H) ； 3.4(s， 3H) ； 1.4-1.0(m， 8H)。
     实施例 24 ： 6-[5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 吡 啶 -3- 甲酸 2， 2- 二甲基丙基酯 ( 表 II 的化合物 198)
     24.1.6- 氯吡啶 -3- 甲酸 2， 2- 二甲基丙基酯
     在氩气中在室温， 向 10g(56.8mmol) 的 6- 氯吡啶 -3- 甲酰氯在 100mL 无水甲苯中 的溶液中加入 15g(170.4mmol) 的 2， 2- 二甲基丙醇。 然后将反应介质在 80℃加热 6 小时。 冷 却至室温后， 将介质浓缩， 并将获得的残余物溶于 800mL 的 EtOAc， 连续用水 (2× 200mL)、 饱和 NaHCO3 溶液 (2× 200mL) 和饱和食盐水 (100mL) 洗涤、 经 Na2SO4 干燥、 然后在减压下 浓缩并通过硅胶柱色谱纯化， 用梯度为 0 至 5％ EtOAc 的环己烷 /EtOAc 洗脱。得到 11.9g 的 6- 氯吡啶 -3- 甲酸 2， 2- 二甲基丙基酯， 其为白色粉末的形式。
     产率＝ 92％。 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 7.5(m， 5H) ； 4.2(m， 5H) ； 3.0(dd， 2H) ； 1.0(t， 6H)。
     24.2.6- 肼基吡啶 -3- 甲酸 2， 2- 二甲基丙基酯
     按照实施例 5.2 所述的方法， 由 11.9g(52.26mmol) 的 6- 氯吡啶 -3- 甲酸 2， 2- 二 甲基丙基酯起始， 得到 4.3g 的 6- 肼基吡啶 -3- 甲酸 2， 2- 二甲基丙基酯， 其为白色粉末的 形式。
     产率＝ 37％ 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 8.7(s， 1H) ； 8.15(d， 1H) ； 6.9(d， 1H) ； 4.0(s， 2H) ； 3.5(bs， 1H) ； 1.0(s， 9H)。
     24.3.6-[5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 甲 酸 2， 2- 二甲基丙基酯
     按照实施例 1.3 所述的方法， 由 0.3g(1.34mmol) 的 6- 肼基吡啶 -3- 甲酸 2， 2- 二 甲基丙基酯和 0.26g(1.34mmol) 的 3- 氧代 -2-( 吡啶 -3- 基甲基 ) 丁酸甲酯起始， 得到 185mg 的 6-[5- 氧代 -4-( 吡啶 -3- 基甲基 )-2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 ] 吡啶 -3- 甲酸 2， 2- 二甲基丙基酯， 其为白色固体的形式。
     产率＝ 38％
     m.p.(℃ ) ＝ 160
     M ＝ C20H22N4O3 ＝ 366 ； M+H ＝ 367 ； 方法 2 ： Tr ＝ 1.01 分钟。 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 12.0(bs， 1H) ； 8.9(s， 1H) ； 8.8(s， 1H) ； 8.7(d， 1H) ； 8.5(d， 1H) ； 8.4(d， 1H) ； 8.3(d， 1H) ； 8.0(t， 1H)7.9(s， 1H) ； 3.9(s， 2H) ； 3.8(s， 2H) ； 1.0(s， 9H)。
     实施例 25 ： 3-(2-{5-[ 环戊基 ( 甲基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-3- 氧代 -2， 3- 二氢 -1H- 吡唑 -4- 基 )-3- 苯基丙酸甲酯 ( 表 I 的化合物 121)
     25.1.3- 苯基戊二酸二乙酯
     将 6g(28.8mmol) 的 3- 苯基戊二酸和 7.9mL(109.5mol) 氯化亚砜的混合物在 80℃ 加热 1 小时。然后将介质浓缩， 并在 0℃将获得的固体分次加入至 8mL 的 EtOH 中。然后将 介质在 80℃加热 30 分钟。 冷却至室温后， 将介质浓缩， 并将获得的残余物溶于 400mL 的 DCM 中， 连续用饱和 NaHCO3 溶液 (2×100mL) 和饱和食盐水 (100mL) 洗涤、 经 Na2SO4 干燥， 然后 在减压下浓缩。得到 6.97g 的 3- 苯基戊二酸二乙酯， 其为粉末的形式， 其不经进一步纯化 直接用于以下步骤。
     产率＝ 91.5％。
     25.2.2- 甲酰基 -3- 苯基戊二酸二乙酯
     按照实施例 14.2 所述的方法， 由 3g(11.35mmol) 的 3- 苯基戊二酸二乙酯起始， 得 到 0.23g 的 2- 甲酰基 -3- 苯基戊二酸二乙酯， 其为黄色油状物的形式。
     产率＝ 7％ 1
     H NMR ， d6-DMSO ， 400MHz ， δ (ppm)10.9(s ， 1H) ； 7.7(d ， 1H) ； 7.3-7.1(m ， 5H) ； 4.5(t， 1H) ； 4.0(q， 4H) ； 3.0(m， 2H) ； 1.0(m， 6H)。
     25.3.3-(2-{5-[ 环戊基 ( 甲基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-3- 氧代 -2， 3- 二 氢 -1H- 吡唑 -4- 基 )-3- 苯基丙酸盐
     按照实施例 22.5 和 22.6 的方法， 由 0.23g(0.79mmol) 的 2- 甲酰基 -3- 苯基戊 二酸二乙酯和 0.21g(0.79mmol) 的 N- 环戊基 -6- 肼基 -N- 甲基吡啶 -3- 磺酰胺起始， 得 到 0.38g 的 3-(1-{5-[ 环 戊 基 ( 甲 基 ) 氨 基 磺 酰 基 ] 吡 啶 -2- 基 }-5- 氧 化 -1H- 吡 唑 -4- 基 )-3- 苯基丙酸盐， 其为粉末的形式。
     产率＝ 89％。
     25.4.3-(2-{5-[ 环戊基 ( 甲基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-3- 氧代 -2， 3- 二 氢 -1H- 吡唑 -4- 基 )-3- 苯基丙酸甲酯
     按 照 实 施 例 22.7 所 述 的 方 法， 由 0.38g(0.78mmol) 的 3-(2-{5-[ 环 戊 基 ( 甲 基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-3- 氧代 -2， 3- 二氢 -1H- 吡唑 -4- 基 )-3- 苯基丙酸盐起 始， 得到 0.34g 的 3-(1-{5-[ 环戊基 ( 甲基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-5- 氧化 -1H- 吡 唑 -4- 基 )-3- 苯基丙酸甲酯。
     m.p.(℃ ) ＝ 80
     M ＝ C24H28N4O5S ＝ 484 ； M+H ＝ 485 ； 方法 3 ： Tr ＝ 4.4 分钟。 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 8.9(s， 1H) ； 8.7(bs， 1H) ； 8.5(d， 1H) ； 7.9(s， 1H) ； 7.4(d， 1H) ； 7.3(t， 3H) ； 7.2(t， 2H) ； 4.4(t， 1H) ； 4.3(t， 1H) ； 3.6(s， 3H) ； 3.2(dd， 1H) ； 3.1(dd， 1H) ； 2.7(s， 3H) ； 1.8-1.4(m， 8H)。
     实 施 例 26 ： 6-(4- 苄 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 )-N- 环 戊 基 -N-[3-( 二甲基氨基 ) 丙基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺盐酸盐 ( 表 I 的化合物 123)
     26.1.N-[3-( 苄基氧基 ) 丙基 ]-6- 氯 -N- 环戊基吡啶 -3- 磺酰胺
     将 1g(3.84mmol) 的 6- 氯 -N- 环戊基吡啶 -3- 磺酰胺、 1.32g(9.59mmol) 的 K2CO3 和 0.88mL(4.99mmol) 的 [(3- 溴丙氧基 ) 甲基 ] 苯在 8mL 无水 DMF 中的混合物在 40℃加热 12 小时。冷却至室温后， 将介质溶于 300mL 的 EtOAc， 连续用水 (2×100mL)、 饱和 NaHCO3 溶 液 (100mL) 和饱和食盐水 (100mL) 洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 然后在减压下浓缩和通过硅胶柱色 谱纯化， 用梯度为 0 至 10％ EtOAc 的环己烷 /EtOAc 洗脱。因此获得 1.65g 的 N-[3-( 苄基 氧基 ) 丙基 ]-6- 氯 -N- 环戊基吡啶 -3- 磺酰胺， 其为油状物的形式。
     产率＝ 99％。 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 8.85(s， 1H) ； 8.1(d， 1H) ； 7.5(d， 1H) ； 7.4-7.3(m， 5H) ； 4.5(s， 2H) ； 4.2(m， 1H) ； 3.6(t， 2H) ； 3.2(dd， 2H) ； 2.1(m， 2H) ； 1.6-1.3(m， 8H)。
     26.2.N-[3-( 苄基氧基 ) 丙基 ]-N- 环戊基 -6- 肼基吡啶 -3- 磺酰胺
     按 照 实 施 例 5.2 所 述 的 方 法， 由 1.55g(3.79mmol) 的 N-[3-( 苄 基 氧 基 ) 丙 基 ]-6- 氯 -N- 环戊基吡啶 -3- 磺酰胺起始， 得到 1.5g 的 N-[3-( 苄基氧基 ) 丙基 ]-N- 环 戊基 -6- 肼基吡啶 -3- 磺酰胺， 其为黄色固体的形式。
     产率＝ 90％ 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 8.6(s， 1H) ； 8.4(bs， 1H) ； 7.95(d， 1H) ； 7.85(d， 1H) ； 7.5-7.3(m ， 5H) ； 6.9(d ， 1H) ； 6.6(bs ， 1H) ； 4.5(s ， 2H) ； 4.2(m ， 1H) ； 3.6(t ， 2H) ； 3.2(dd， 2H) ； 2.1(m， 2H) ； 1.6-1.3(m， 8H)。
     26.3.6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N-[3-( 苄基氧基 ) 丙 基 ]-N- 环戊基吡啶 -3- 磺酰胺
     按照实施例 1.3 所述的方法， 由 0.19g 的 2- 苄基 -3- 氧代丙酸甲酯和 0.4g 的 N-[3-( 苄基氧基 ) 丙基 ]-N- 环戊基 -6- 肼基吡啶 -3- 磺酰胺起始， 得到 0.29g 的 6-(4- 苄 基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N-[3-( 苄基氧基 ) 丙基 ]-N- 环戊基吡啶 -3- 磺 酰胺， 其为米色固体的形式。
     产率＝ 55％ 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 12.0(bs， 1H) ； 8.8(s， 1H) ； 8.6(bs， 1H) ； 8.4(d， 1H) ； 7.7(s， 1H) ； 7.4-7.1(m， 10H) ； 4.5(s， 2H) ； 4.2(m， 1H) ； 3.6(s， 2H) ； 3.5(t， 2H) ； 3.2(t， 2H) ； 2.0(m， 2H) ； 1.6-1.2(6H)。
     26.4.6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 环戊基 -N-(3- 羟基 丙基 ) 吡啶 -3- 磺酰胺
     在 -78℃在氩气中， 向 150mg(0.27mmol) 的 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 )-N-[3-( 苄基氧基 ) 丙基 ]-N- 环戊基吡啶 -3- 磺酰胺在 2mL 的 DCM 中的溶液中 滴加 0.82mL(0.82mmol) 的三溴化硼 (1M 的 DCM 溶液 )。在 -78℃继续搅拌 1 小时， 然后在 0℃加入 2mL 的 MeOH。将介质溶于 40mL 的 DCM， 连续用饱和 NaHCO3 溶液 (30mL) 和饱和食盐 水 (30mL) 洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 然后在减压下浓缩并通过硅胶柱色谱纯化， 用 9/1 的 DCM/ MeOH 混合物洗脱。得到 106mg 的 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 环 戊基 -N-(3- 羟基丙基 ) 吡啶 -3- 磺酰胺， 其为粉末的形式。
     产率＝ 85％ 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 8.8(s， 1H) ； 8.6(bs， 1H) ； 8.4(d， 1H) ； 7.7(s， 1H) ； 7.4(m， 5H) ； 7.3(m， 1H) ； 4.5(t， 1H) ； 4.2(m， 1H) ； 3.6(s， 2H) ； 3.5(q， 2H) ； 3.2(t， 2H) ； 1.8(m， 2H) ； 1.5-1.2(6H)。
     26.5.6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 环戊基 -N-[3-( 二甲 基氨基 ) 丙基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺盐酸盐
     在氩气中在 0 ℃， 向 82mg(0.18mmol) 的 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 )-N- 环戊基 -N-(3- 羟基丙基 ) 吡啶 -3- 磺酰胺和 50μL(0.36mmol) 的 Et3N 在 0.5mL 无水 DCM 中的溶液中加入 27μL(0.36mmol) 甲磺酰氯 ； 允许温度逐渐回升至室温， 继 续搅拌 1 小时。将介质溶于 20mL 的 DCM， 连续用水 (2×10mL) 和饱和食盐水 (20mL) 洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 然后在减压下浓缩。在密封管中， 将获得的残余物 (110mg 黄色油状物 ) 溶 于 2mL 的 DCM 中， 然后用向溶液中鼓泡的二甲胺气流处理 1 分钟。然后将介质在 60℃加热 11 小时。冷却至室温后， 将介质浓缩， 并将获得的残余物在 Et2O/CH3CN 混合物中研磨。将 形成的沉淀过滤， 用戊烷冲洗， 在减压下干燥， 然后在加入 1 当量的 1N HCl 后冷冻干燥。因 此获得 57mg 的 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 环戊基 -N-[3-( 二 甲基氨基 ) 丙基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺盐酸盐， 其为冻干物的形式。
     产率＝ 88％
     m.p.(℃ ) ＝ 230
     M ＝ C25H33N5O3S ＝ 483 ； M+H ＝ 484 ； 方法 2 ： Tr ＝ 1.1 分钟 1
     H NMR ， d6-DMSO ， 400MHz ， δ (ppm) ： 12.0(bs ， 1H) ； 10.8(bs ， 1H) ； 8.9(s ， 1H) ； 8.8(s ， 1H) ； 8.5(d ， 1H) ； 7.8(s ， 1H) ； 7.4(m ， 5H) ； 7.3(m ， 1H) ； 4.5(m ， 1H) ； 4.2(m ， 1H) ； 3.6(s， 2H) ； 3.3(t， 2H) ； 3.2(q， 2H) ； 2.7t(s， 6H) ； 2.0(m， 2H) ； 1.6-1.3(6H)。
     实施例 27 ： 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 乙基 -N- 苯基 吡啶 -3- 磺酰胺 ( 表 I 的化合物 93)
     27.1.2- 苄基 -3- 氧代丙酸甲酯
     在氩气中向 3g(18.3mmol) 的 3- 苯基丙酸甲酯和 3.57mL(54.8mmol) 的甲酸甲 酯 在 36mL 甲 苯 中 的 混 合 物 中 连 续 滴 加 54.8mL(54.8mmol) 的 1M 的 TiCl4 的 甲 苯 溶 液、 0.17mL(0.91mmol) 三氟甲磺酸三甲基硅酯和 19.6mL(82.2mmol) 的三丁基胺。然后将介质 在 60℃加热 2 小时 30 分钟， 并在室温搅拌 12 小时。
     将反应介质用 200mL 水进行水解， 并用 200mL 的 Et2O 萃取。将有机相经 Na2SO4 干 燥、 过滤， 并在减压下浓缩。得到 3.12g 的 2- 苄基 -3- 氧代丙酸甲酯， 其为油状物的形式， 其不经进一步纯化直接用于以下步骤。
     产率＝ 87％。
     27.2.6-(4- 苄 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 )-N- 乙 基 -N- 苯 基 吡 啶 -3- 磺酰胺
     将 0.38g(1.3mmol) 的 N- 乙 基 -6- 肼 基 -N- 苯 基 吡 啶 -3- 磺 酰 胺 和 0.25g(1.3mmol) 的 2- 苄基 -3- 氧代丙酸甲酯在 2mL 的 AcOH/MeOH 混合物 (1/1) 中的混 合物在 80 ℃加热 4 小时。然后将介质在减压下浓缩， 将获得的残余物在 Et2O/ 戊烷混合 物 (1/1) 中固化， 然后过滤， 并在减压下干燥。在室温， 将获得的 440mg 固体分次加入至 22mg(0.96mmol) 钠在 1mL 的 MeOH 中的溶液中， 然后在室温连续搅拌 3 小时。然后将反应 混合物在减压下浓缩， 溶于 10mL 水， 然后通过加入 AcOH 酸化至 pH 3-4。然后将获得的沉 淀过滤， 用戊烷洗涤， 然后从 EtOH 中重结晶， 并干燥。因此获得 245mg 的 6-(4- 苄基 -5- 氧 代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 乙基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺， 其为白色粉末的形式。
     产率＝ 59％
     m.p.(℃ ) ＝ 180
     M ＝ C23H22N4O3S ＝ 434 ； M+H ＝ 435 ； 方法 2 ： Tr ＝ 1.35 分钟。 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 12(bs， 1H) ； 8.6(bs， 1H) ； 8.5(s， 1H) ； 8.1(d， 1H)7.7(s， 1H) ； 7.5-7.1(m， 10H) ； 3.7(q， 2H) ； 3.6(s， 2H) ； 1.0(t， 3H)。
     实施例 28 ： 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -3- 三氟甲基 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 乙 基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ( 表 I 的化合物 83)
     28.1.2- 苄基 -4， 4， 4- 三氟 -3， 3- 二羟基丁酸甲酯
     在 氩 气 中，向 675mg(29.4mmol) 钠 在 15mL 无 水 MeOH 中 的 溶 液 滴 加 3.73mL(29.4mmol) 的 3， 3， 3- 三氟丙酸甲酯。在室温搅拌 30 分钟后， 加入 3.5mL 溴苄， 然后 将介质在 70℃加热 12 小时。 然后将反应混合物在减压下浓缩。 将获得的残余物溶于 100mL 的 EtOAc， 用 50mL 饱和食盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥、 过滤， 并在减压下浓缩。通过硅胶柱色 谱纯化， 用环己烷 /EtOAc 混合物 (85/15) 洗脱后， 得到 3.4g 的 2- 苄基 -4， 4， 4- 三氟 -3， 3- 二羟基丁酸甲酯， 其为油状物的形式， 其不经进一步纯化直接用于以下步骤。
     产率＝ 37％。
     28.2.6-(4- 苄 基 -5- 氧 代 -3- 三 氟 甲 基 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 )-N- 乙 基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺
     将 1g(3.59mmol) 的 2- 苄 基 -4， 4， 4- 三 氟 -3， 3- 二 羟 基 丁 酸 甲 酯、 1.05g(3.59mmol) 的 N- 乙基 -6- 肼基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺和 1g 的 分子筛在 8mL 的 MeOH 中的混合物在 90℃加热 12 小时。在室温， 将反应介质溶于 30mL 甲苯， 在 Dean-Stark 装置中回流 12 小时。 然后将反应介质过滤和在减压下浓缩， 然后将获得的残余物溶于 50mL 的 DCM 中， 用 1N HCl 溶液 (2×50mL) 洗涤， 经 Na2SO4 干燥、 过滤， 并在减压下浓缩。将因 此获得的固体从 EtOH 重结晶。得到 224mg 的 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -3- 三氟甲基 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 乙基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺， 其为白色结晶的形式。
     产率＝ 12％
     m.p.(℃ ) ＝ 186
     M ＝ C24H21F3N4O3S ＝ 502 ； M+H ＝ 503 ； 方法 3 ： Tr ＝ 4.4 分钟。 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 12(bs， 1H) ； 8.7(s， 1H) ； 8.25(d， 1H) ； 8.0(d， 1H) ； 7.5-7.1(m， 10H) ； 3.9(s， 2H) ； 3.7(q， 2H) ； 1.0(t， 3H)。
     实施例 29 ： 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N-[(1R， 3S)-3-( 羟 基甲基 ) 环戊基 ]-N- 甲基吡啶 -3- 磺酰胺 ( 表 I 的化合物 138)
     29.1.[(1R， 3S)-3-( 羟基甲基 ) 环戊基 ] 氨基甲酸叔丁酯
     在 -20℃向 2g(8.7mmol) 的 (1S， 3R)-3-[( 叔 - 丁氧基羰基 ) 氨基 ] 环戊烷甲酸和 1.33mL(9.6mmol) 的 Et3N 在 20mL 无水 THF 中的溶液中滴加 1.2mL(9.2mmol) 氯甲酸异丁酯。 将介质在 -20℃搅拌 45 分钟， 然后滤除形成的不溶物质。在 -10℃将 1g(26.2mmol) 硼氢化 钠在 THF/H2O 混合物 (16mL/4mL) 中的溶液滴加至该滤液中， 然后继续搅拌， 同时允许温度 回升至室温。然后缓慢加入 100mL 的 0.1N HCl， 并将反应介质用 2×200mL 的 EtOAc 萃取， 经 Na2SO4 干燥、 过滤， 并在减压下浓缩。通过硅胶柱色谱纯化， 用 DCM/MeOH 混合物 (95/5)
     洗脱后， 得到 1.4g 的 [(1R， 3S)-3-( 羟基甲基 ) 环戊基 ] 氨基甲酸叔丁酯， 其为油状物的形 式。
     产率＝ 77％。 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 4.5(bs， 1H) ； 3.9(m， 1H) ； 3.5(d， 2H) ； 2.1(m， 2H) ； 1.8-1.7(m， 3H) ； 1.5(s， 2H) ； 1.4(s， 9H) ； 1.0(m， 1H)。
     29.2.{(1R， 3S)-3-[( 苄基氧基 ) 甲基 ] 环戊基 } 氨基甲酸叔丁酯
     在氩气中在室温， 向 1.4g(6.7mmol) 的 [(1R， 3S)-3-( 羟基甲基 ) 环戊基 ] 氨基甲 酸叔丁酯在 20mL 无水 THF 中的溶液中分次加入 0.27g(6.7mmol) 氢化钠 (60％， 在油中 )。 搅拌 45 分钟后， 将介质冷却至 0℃， 并加入 0.8mL(6.7mmol) 溴苄。在室温搅拌 1 小时后， 将介质用 30mL 水进行水解， 并用 2×100mL 的 EtOAc 萃取， 经 Na2SO4 干燥、 在减压下浓缩， 然后 通过硅胶柱色谱纯化， 用 99/1 的 DCM/MeOH 混合物洗脱。得到 1.53g 的 {(1R， 3S)-3-[( 苄 基氧基 ) 甲基 ] 环戊基 } 氨基甲酸叔丁酯， 其为油状物的形式。
     产率＝ 75％。
     29.3.(1R， 3S)-3-[( 苄基氧基 ) 甲基 ] 环戊胺盐酸盐
     在 0℃向 1.52g(5mmol) 的 {(1R， 3S)-3-[( 苄基氧基 ) 甲基 ] 环戊基 } 氨基甲酸叔 丁酯在 20mL 的 DCM 中的溶液中加入 5mL(20mmol) 的 4N 的 HCl 的二 烷溶液。然后将介质 在室温搅拌 12 小时， 然后在减压下浓缩。 将获得的残余物在 20mL 的 Et2O 中固化， 过滤和在 真空下干燥。得到 1g 的 (1R， 3S)-3-[( 苄基氧基 ) 甲基 ] 环戊胺盐酸盐， 其为粉末的形式。
     产率＝ 83％。
     29.4.N-{(1R， 3S)-3-[( 苄基氧基 ) 甲基 ] 环戊基 }-6- 氯吡啶 -3- 磺酰胺
     按照实施例 14.1 的方法， 由 1g 的 (1R， 3S)-3-[( 苄基氧基 ) 甲基 ] 环戊胺盐酸盐 和 1g 的 6- 氯吡啶 -3- 磺酰氯起始， 得到 1.2g 的 N-{(1R， 3S)-3-[( 苄基氧基 ) 甲基 ] 环戊 基 }-6- 氯吡啶 -3- 磺酰胺， 其为粉色粉末的形式。
     产率＝ 83％ H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 8.6(s， 1H) ； 7.8(dd， 1H) ； 7.4-7.3(m， 5H) ； 7.2(s， 1H) ； 5.8(d， 1H) ； 4.5(dd， 2H) ； 3.7(m， 1H) ； 3.3(m， 2H) ； 2.2(m， 1H) ； 1.9(m， 1H) ； 1.6-1.5(m， 4H) ； 1.2(dd， 1H)。
     29.5.N-{(1R， 3S)-3-[( 苄基氧基 ) 甲基 ] 环戊基 }-6- 氯 -N- 甲基吡啶 -3- 磺酰 胺
     按照方法 23.2， 由 0.66g 的 4N-{(1R， 3S)-3-[( 苄基氧基 ) 甲基 ] 环戊基 }-6- 氯 吡啶 -3- 磺酰胺和 0.22mL 碘甲烷起始， 得到 0.58g 的 N-{(1R， 3S)-3-[( 苄基氧基 ) 甲基 ] 环戊基 }-6- 氯 -N- 甲基吡啶 -3- 磺酰胺， 其为油状物的形式。
     产率＝ 86％。
     29.6.N-{(1R， 3S)-3-[( 苄基氧基 ) 甲基 ] 环戊基 }-6- 肼基 -N- 甲基吡啶 -3- 磺 酰胺
     按 照 方 法 5.2，由 0.58g 的 N-{(1R， 3S)-3-[( 苄 基 氧 基 ) 甲 基 ] 环 戊 基 }-6- 氯 -N- 甲 基 吡 啶 -3- 磺 酰 胺 和 0.15mL 水 合 肼 起 始， 得 到 0.49g 的 N-{(1R， 3S)-3-[( 苄基氧基 ) 甲基 ] 环戊基 }-6- 肼基 -N- 甲基吡啶 -3- 磺酰胺。
     1产率＝ 86％。
     29.7.6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N-{(1R， 3S)-3-[( 苄基 氧基 ) 甲基 ] 环戊基 } 吡啶 -3- 磺酰胺
     按照实施例 1.3 所述的方法， 由 0.495g 的 N-{(1R， 3S)-3-[( 苄基氧基 ) 甲基 ] 环 戊基 }-6- 肼基 -N- 甲基吡啶 -3- 磺酰胺和 0.244g 的 2- 苄基 -3- 氧代丙酸甲酯起始， 得到 301mg 的 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N-{(1R， 3S)-3-[( 苄基氧基 ) 甲基 ] 环戊基 } 吡啶 -3- 磺酰胺， 其为粉末的形式。
     产率＝ 44％。
     29.8.6-(4- 苄基 -5- 氧代 -25- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N-[(1R 3S)-3-( 羟基甲 基 ) 环戊基 ]-N- 甲基吡啶 -3- 磺酰胺
     向 0.3g(0.57mmol) 的 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N-{(1R， 3S)-3-[( 苄基氧基 ) 甲基 ] 环戊基 } 吡啶 -3- 磺酰胺在 2mL 冷却至 -78℃的 DCM 中的溶液 中加入 1.7mL 三溴化硼。然后将温度升至 0℃并在 0℃继续搅拌 1 小时。然后在 -10℃加 入 10mL 的 MeOH， 并将介质在减压下浓缩。将介质溶于 100mL 的 DCM， 连续用饱和 NaHCO3 溶 液 (2×20mL) 和饱和食盐水 (20mL) 洗涤， 经 Na2SO4 干燥、 在减压下浓缩， 然后通过硅胶柱 色谱纯化， 用 90/10 的 DCM/MeOH 混合物洗脱。得到 126mg 的 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N-[(1R， 3S)-3-( 羟基甲基 ) 环戊基 ]-N- 甲基吡啶 -3- 磺酰胺， 其为 粉末的形式。
     产率＝ 50％
     α20D ＝ -12(c ＝ 0.1 ； MeOH)
     m.p.(℃ ) ＝ 108
     M ＝ C22H26N4O4S ＝ 442 ； M+H ＝ 443 ； 方法 2 ： Tr ＝ 1.09 分钟。 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 8.8(s， 1H) ； 8.7(bs， 1H) ； 8.4(d， 1H) ； 7.8(bs， 1H) ； 7.4-7.3(m ， 5H) ； 7.1(m ， 1H) ； 4.5(bs ， 1H) ； 4.4(m ， 1H) ； 3.6(bs ， 2H) ； 3.4(m ， 2H) ； 2.8(s， 3H) ； 1.9(m， 1H) ； 1.6-1.1(m， 6H)。
     实施例 30 ： 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 环戊基 -N-[3- 羟 基 -2-( 羟基甲基 ) 丙基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺 ( 表 I 的化合物 147)
     30.1.4- 甲基苯磺酸 (2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧杂环己烷 -5- 基 ) 甲基酯
     向冷却至 0℃的 1.5g(10.26mmol) 的 (2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧杂环己烷 -5- 基 ) 甲醇和 1.71mL 的 Et3N 在 15mL 的 DCM 中的溶液中加入 2.15g(11.3mmol) 甲苯磺酰氯。将介 质温热至室温， 并继续搅拌 1 小时。将介质溶于 100mL 的 DCM， 连续用 0.1N HCl(2×20mL) 和饱和食盐水 (20mL) 洗涤， 经 Na2SO4 干燥、 在减压下浓缩， 然后通过硅胶柱色谱纯化， 用 99/1 的 DCM/MeOH 混合物洗脱。得到 3g 的 4- 甲基苯磺酸 (2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧杂环己 烷 -5- 基 ) 甲基酯， 其为无色油状物的形式。
     产率＝ 97％ 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 7.8(d， 2H) ； 7.3(d， 2H) ； 4.1(d， 2H) ； 3.9(dd， 2H) ； 3.6(dd， 2H) ； 2.4(s， 3H) ； 1.9(m， 1H) ； 1.4(s， 3H) ； 1.2(s， 3H)。
     30.2.N-[(2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧杂环己烷 -5- 基 ) 甲基 ] 环戊胺
     将 1.5g(5mmol) 的 4- 甲基苯磺酸 (2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧杂环己烷 -5- 基 ) 甲 基酯和 10mL(101mmol) 环戊胺的混合物在 80℃加热 12 小时。将介质在减压下浓缩， 然后 溶于 200mL 的 Et2O， 用水 (2×50mL) 洗涤， 然后经 Na2SO4 干燥， 并在减压下浓缩。得到 1g 的 N-[(2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧杂环己烷 -5- 基 ) 甲基 ] 环戊胺， 其为油状物的形式， 其不经进 一步纯化直接用于以下步骤。
     产率＝ 100％。
     30.3 N- 环戊基 -N-[(2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧杂环己烷 -5- 基 ) 甲基 ]-6- 肼基吡 啶 -3- 磺酰胺
     该 化 合 物 按 照 方 法 14.1 和 14.3 制 备， 由 N-[(2， 2- 二 甲 基 -1， 3- 二 氧 杂 环 己 烷 -5- 基 ) 甲基 ] 环戊胺、 6- 氯吡啶 -3- 磺酰氯和水合肼起始。
     产率 ： 70％ 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 8.5(s， 1H) ； 8.25(s， 1H) ； 8.0(s， 1H) ； 7.8(d， 1H) ； 7.7(s， 1H) ； 7.2(d， 1H) ； 6.8(d， 1H) ； 4.4(s， 1H) ； 4.2(m， 1H) ； 3.9(dd， 2H) ； 3.6(dd， 2H) ； 3.0(dd， 2H) ； 2.0(m， 1H) ； 1.9(d， 2H) ； 1.6-1.4(m， 4H) ； 1.3(s， 3H) ； 1.2(s， 3H)。
     30.4.6-(4- 苄 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 )-N- 环 戊 基 -N-[3- 羟 基 -2-( 羟基甲基 ) 丙基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺
     按照实施例 11 所述的方法， 由 0.485g 的 N- 环戊基 -N-[(2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧 杂环己烷 -5- 基 ) 甲基 ]-6- 肼基吡啶 -3- 磺酰胺和 0.242g 的 2- 苄基 -3- 氧代丙酸甲酯起 始， 得到 79mg 的 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 环戊基 -N-[3- 羟 基 -2-( 羟基甲基 ) 丙基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺， 其为粉末的形式。
     产率＝ 14％
     m.p.(℃ ) ＞ 260
     M ＝ C24H30N4O5S ＝ 486 ； M+H ＝ 487 ； 方法 2 ： Tr ＝ 2.09 分钟。 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 12(bs， 1H) ； 8.8(s， 1H) ； 8.6(t， 2H) ； 8.25(d， 1H) ； 7.7(s， 1H) ； 7.4-7.2(m， 5H) ； 4.3(q， 2H) ； 3.9(m， 2H) ； 3.0(m， 1H) ； 2.8(m， 1H) ； 2.7(s， 3H) ； 1.6-1.3(m， 8H)。
     实 施 例 31 ： 6-(4- 苄 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 )-N- 环 戊 基 -N-[(2R)-2， 3- 二羟基丙基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺 ( 表 I 的化合物 142)
     按照实施例 30 所述的方法， 该化合物由 [(4R)-2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧杂环戊 烷 -4- 基 ] 甲醇、 环戊胺、 6- 氯吡啶 -3- 磺酰氯和 2- 苄基 -3- 氧代丙酸甲酯获得。
     m.p.(℃ ) ＝ 184 (c ＝ 0.1 ； DMSO)M ＝ C23H28N4O5S ＝ 472 ； M+H ＝ 473 ； 方法 2 ： Tr ＝ 1.39 分钟。 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 12(bs， 1H) ； 8.8(s， 1H) ； 8.6(bs， 1H) ； 8.4(d， 1H) ； 7.8(s， 1H) ； 7.3-7.1(m， 5H) ； 4.8(s， 1H) ； 4.6(s， 1H) ； 4.2(m， 1H) ； 3.8(s， 1H) ； 3.6(s， 2H) ； 3.3(m， 2H) ； 2.9(m， 1H) ； 1.6-1.3(m， 9H)。
     实 施 例 32 ： 6-(4- 苄 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 )-N- 环 戊 基 -N-[(2S)-2， 3- 二羟基丙基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺 ( 表 I 的化合物 148)
     按照实施例 30 所述的方法， 该化合物由 [(4S)-2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧杂环戊 烷 -4- 基 ] 甲醇、 环戊胺、 6- 氯吡啶 -3- 磺酰氯和 2- 苄基 -3- 氧代丙酸甲酯获得。
     m.p.(℃ ) ＝ 184
     (c ＝ 0.15 ； DMSO)M ＝ C23H28N4O5S ＝ 472 ； M+H ＝ 473 ； 方法 2 ： Tr ＝ 1.39 分钟。 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 12(bs， 1H) ； 8.8(s， 1H) ； 8.6(bs， 1H) ； 8.4(d， 1H) ； 7.8(s， 1H) ； 7.3-7.1(m， 5H) ； 4.8(s， 1H) ； 4.6(s， 1H) ； 4.2(m， 1H) ； 3.8(s， 1H) ； 3.6(s， 2H) ； 3.3(m， 2H) ； 2.9(m， 1H) ； 1.6-1.3(m， 9H)。
     实施例 33 ： 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N-(2， 3- 二羟基丙 基 )-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺 ( 表 I 的合物 143)
     32.1.6- 氯 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺
     按照方法 14.1， 由 1g 的 6- 氯吡啶 -3- 磺酰氯和 0.86mL 苯胺起始， 得到 1.15g 的 6- 氯 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺， 其为黄色固体的形式。
     产率＝ 91％ 1
     H NMR ， d6-DMSO ， 400MHz ， δ (ppm) ： 10.5(bs ， 1H) ； 8.7(s ， 1H) ； 8.1(dd ， 1H) ； 7.75(dd， 1H) ； 7.3(m， 2H) ； 7.2(m， 3H)。
     32.2.6- 氯 -N- 苯基 -N-( 丙 -2- 烯 -1- 基 ) 吡啶 -3- 磺酰胺
     按照方法 23.2， 由 1.15g 的 6- 氯 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺和 0.37mL 的烯丙基溴 起始， 得到 1.29g 的 6- 氯 -N- 苯基 -N-( 丙 -2- 烯 -1- 基 ) 吡啶 -3- 磺酰胺， 其为黄色固体 的形式。
     产率＝ 97％ 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 8.6(s， 1H) ； 8.0(dd， 1H) ； 7.9(dd， 1H) ； 7.4(m， 3H) ； 7.2(m， 2H) ； 5.7(m， 1H) ； 5.2(dd， 1H) ； 5.1(dd， 1H) ； 4.3(d， 2H)。
     32.3.6- 氯 -N-(2， 3- 二羟基丙基 )-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺
     在室温向 1.3g(4.2mmol) 的 6- 氯 -N- 苯基 -N-( 丙 -2- 烯 -1- 基 ) 吡啶 -3- 磺 酰胺在 17mL 的 tBuOH 和水的混合物 (1/1) 中的溶液中加入 1.37g(11.7mmol) 的 NMO 和 0.52mL(0.04mmol) 的 2.5％ OsO4 的 tBuOH 溶液。继续搅拌 12 小时。然后将介质用 200mL 水稀释， 并用 Et2O(2×100mL) 萃取， 经 Na2SO4 干燥、 过滤， 并在减压下浓缩。得到 1.14g 的 6- 氯 -N-(2， 3- 二羟基丙基 )-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺， 其为油状物的形式， 其不经进一步纯 化直接用于以下步骤。
     产率＝ 80％。 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 8.5(s， 1H) ； 7.8(d， 1H) ； 7.4-7.3(m， 4H) ； 7.1(d， 2H) ； 3.7-3.5(m， 3H) ； 2.5(bs， 1H) ； 2.0(bs， 1H) ； (m， 2H)。
     32.4.6- 氯 -N-[(2， 2- 二 甲 基 -1， 3- 二 氧 杂 环 戊 烷 -4- 基 ) 甲 基 ]-N- 苯 基 吡 啶 -3- 磺酰胺
     将 0.67g(1.96mmol) 的 6- 氯 -N-(2， 3- 二羟基丙基 )-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺、 0.53mL(4.3mmol) 的 2， 2- 二甲氧基丙烷和 37mg 的 pTsOH 在 4mL 的 DMF 中的混合物在室温 搅拌 3 小时。将介质溶于 100mL 的 EtOAc， 用 50mL 饱和 NaHCO3 溶液和 50mL 水洗涤， 然后经 Na2SO4 干燥、 过滤， 并在减压下浓缩。得到 0.54g 的 6- 氯 -N-[(2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧杂 环戊烷 -4- 基 ) 甲基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺， 其为棕色固体的形式， 其不经进一步纯化 直接用于以下步骤。
     产率＝ 73％。 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 8.5(s， 1H) ； 7.7(d， 1H) ； 7.4(d， 1H) ； 7.3(m， 3H) ； 7.0(d， 2H) ； 4.1(m， 1H) ； 3.9(m， 1H)， 3.8(dd， 2H) ； 3.5(m， 1H) ； 1.3(s， 3H) ； 1.2(s， 3H)。
     32.5.N-[(2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧杂环戊烷 -4- 基 ) 甲基 ]-6- 肼基 -N- 苯基吡 啶 -3- 磺酰胺
     按照方法 5.2， 由 0.54g 的 6- 氯 -N-[(2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧杂环戊烷 -4- 基 ) 甲基 ]-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺和 30μL 水合肼起始， 得到 0.53g 的 N-[(2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧杂环戊烷 -4- 基 ) 甲基 ]-6- 肼基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺， 其为白色固体的形式。
     产率＝ 99％ 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 8.6(s， 1H) ； 8.1(s， 1H) ； 7.5(d， 1H) ； 7.4(m， 3H) ； 7.2(d， 2H) ； 6.8(bs， 1H) ； 1.3(s， 3H) ； 1.2(s， 3H)。
     32.6 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -25- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N-(23- 二羟基丙基 )-N- 苯 基吡啶 -3- 磺酰胺
     按 照 方 法 1.3， 由 0.2g(0.53mmol) 的 N-[(2， 2- 二 甲 基 -1， 3- 二 氧 杂 环 戊 烷 -4- 基 ) 甲基 ]-6- 肼基 -N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺和 0.1g 的 2- 苄基 -3- 氧代丙酸甲酯 起始， 得到 127mg 的 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N-(2， 3- 二羟基丙 基 )-N- 苯基吡啶 -3- 磺酰胺， 其为白色固体的形式。
     产率＝ 50％
     m.p.(℃ ) ＝ 174
     M ＝ C24H24N4O5S ＝ 480 ； M+H ＝ 481 ； 方法 2 ： Tr ＝ 1.39 分钟。 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 12(bs， 1H) ； 8.5(bs， 1H) ； 8.4(s， 1H) ； 8.1(d， 2H) ； 7.8(s， 1H) ； 7.4-7.2(m， 7H) ； 7.2-7.1(m， 3H) ； 4.7(d， 1H) ； 4.5(t， 1H) ； 3.6(dd， 2H) ； 3.4(m， 4H)。
     实施例 33 ： 3-(2-{5-[ 环戊基 ( 甲基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-3- 氧代 -2， 3- 二氢 -1H- 吡唑 -4- 基 )-3- 苯基 -N-(2， 2， 2- 三氟乙基 ) 丙酰胺 ( 表 I 的化合物 146)
     33.1 3-(2-{5-[ 环戊基 ( 甲基 ) 氨基磺酰基 ] 吡啶 -2- 基 }-3- 氧代 -2， 3- 二 氢 -1H- 吡唑 -4- 基 )-3- 苯基 -N-(2， 2， 2- 三氟乙基 ) 丙酰胺
     在 0 ℃ 向 200mg(0.43mmol) 的 3-(2-{5-[ 环 戊 基 ( 甲 基 ) 氨 基 磺 酰 基 ] 吡 啶 -2- 基 }-3- 氧代 -2， 3- 二氢 -1H- 吡唑 -4- 基 )-3- 苯基丙酸盐、 0.3mL(1.7mmol) 的 DIEA 和 30μL(0.43mmol) 的 2， 2， 2- 三氟乙基胺在 1mL 的 DCM 中的溶液中加入 207mg(0.64mmol) 的 TBTU。将介质在室温搅拌 12 小时。然后加入另外 0.3mL 的 2， 2， 2- 三氟乙基胺， 并将介 质在 40℃加热 6 小时。将介质溶于 20mL 的 DCM， 连续用水 (2×10mL) 和饱和食盐水 (20mL) 洗涤， 经 Na2SO4 干燥和在减压下浓缩， 然后通过硅胶柱色谱纯化， 用梯度为 0 至 10％ EtOAc 的环己烷 /EtOAc 洗脱。因此获得 32mg 的 3-(2-{5-[ 环戊基 ( 甲基 ) 氨基磺酰基 ] 吡
     啶 -2- 基 }-3- 氧代 -2， 3- 二氢 -1H- 吡唑 -4- 基 )-3- 苯基 -N-(2， 2， 2- 三氟乙基 ) 丙酰胺， 其为粉末的形式。
     产率＝ 14％
     m.p.(℃ ) ＝ 80
     M ＝ C25H28F3N5O4S ＝ 551 ； M+H ＝ 552 ； 方法 2 ： Tr ＝ 1.21 分钟。 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 12(bs， 1H) ； 8.8(s， 1H) ； 8.6(t， 2H) ； 8.25(d， 1H) ； 7.7(s， 1H) ； 7.4-7.2(m， 5H) ； 4.3(q， 2H) ； 3.9(m， 2H) ； 3.0(m， 1H) ； 2.8(m， 1H) ； 2.7(s， 3H) ； 1.6-1.3(m， 8H)。
     实施例 34 ： 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 环戊基 -N-[3- 羟 基 -2-( 羟基甲基 ) 丙基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺 ( 表 I 的化合物 147)
     34.1.4- 甲基苯磺酸 (2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧杂环己烷 -5- 基 ) 甲基酯
     向冷却至 0℃的 1.5g(10.26mmol) 的 (2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧杂环己烷 -5- 基 ) 甲 醇和 1.71mL 的 Et3N 在 15mL 的 DCM 中的溶液中加入 2.15g(11.3mmol) 甲苯磺酰氯。允许介 质温热至室温， 并继续搅拌 1 小时。将介质溶于 100mL 的 DCM， 连续用 0.11N HCl(2×20mL) 和饱和食盐水 (20mL) 洗涤， 经 Na2SO4 干燥、 在减压下浓缩， 然后通过硅胶柱色谱纯化， 用 99/1 的 DCM/MeOH 混合物洗脱。得到 3g 的 4- 甲基苯磺酸 (2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧杂环己 烷 -5- 基 ) 甲基酯， 其为无色油状物的形式。
     产率＝ 97％
     75102333769 A CN 102333783
     1说明书60/95 页H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm) ： 7.8(d， 2H) ； 7.3(d， 2H) ； 4.1(d， 2H) ； 3.9(dd， 2H) ； 3.6(dd， 2H) ； 2.4(s， 3H) ； 1.9(m， 1H) ； 1.4(s， 3H) ； 1.2(s， 3H)。
     34.2.N-[(2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧杂环己烷 -5- 基 ) 甲基 ] 环戊胺
     将 1.5g(5mmol) 的 4- 甲基苯磺酸 (2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧杂环己烷 -5- 基 ) 甲 基酯和 10mL(101mmol) 环戊胺的混合物在 80℃加热 12 小时。 将介质在减压下浓缩， 然后溶 于 200mL 的 Et2O， 用水 (2×50mL) 洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 并在减压下浓缩。得到 1g 的 N-[(2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧杂环己烷 -5- 基 ) 甲基 ] 环戊胺， 其为油状物的形式， 其不经进一步纯 化直接用于以下步骤。
     产率＝ 100％。
     34.3.N- 环戊基 -N-[(2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧杂环己烷 -5- 基 ) 甲基 ]-6- 肼基吡 啶 -3- 磺酰胺
     该 化 合 物 按 照 方 法 14.1 和 5.2 制 备， 由 N-[(2， 2- 二 甲 基 -1， 3- 二 氧 杂 环 己 烷 -5- 基 ) 甲基 ] 环戊胺、 6- 氯吡啶 -3- 磺酰氯和水合肼起始。
     产率 ： 70％ 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 8.5(s， 1H) ； 8.25(s， 1H) ； 8.0(s， 1H) ； 7.8(d， 1H) ； 7.7(s， 1H) ； 7.2(d， 1H) ； 6.8(d， 1H) ； 4.4(s， 1H) ； 4.2(m， 1H) ； 3.9(dd， 2H) ； 3.6(dd， 2H) ； 3.0(dd， 2H) ； 2.0(m， 1H) ； 1.9(d， 2H) ； 1.6-1.4(m， 4H) ； 1.3(s， 3H) ； 1.2(s， 3H)。
     34.4.6-(4- 苄 基 -5- 氧 代 -2， 5- 二 氢 -1H- 吡 唑 -1- 基 )-N- 环 戊 基 -N-[3- 羟 基 -2-( 羟基甲基 ) 丙基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺
     按照实施例 11 所述的方法， 由 0.485g 的 N- 环戊基 -N-[(2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧 杂环己烷 -5- 基 ) 甲基 ]-6- 肼基吡啶 -3- 磺酰胺和 0.242g 的 2- 苄基 -3- 氧代丙酸甲酯起 始， 得到 79mg 的 6-(4- 苄基 -5- 氧代 -2， 5- 二氢 -1H- 吡唑 -1- 基 )-N- 环戊基 -N-[3- 羟 基 -2-( 羟基甲基 ) 丙基 ] 吡啶 -3- 磺酰胺， 其为粉末的形式。
     产率＝ 14％
     m.p.(℃ ) ＞ 260
     M ＝ C24H30N4O5S ＝ 486 ； M+H ＝ 487 ； 方法 2 ： Tr ＝ 2.09 分钟。 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 12(bs， 1H) ； 8.8(s， 1H) ； 8.6(t， 2H) ； 8.25(d， 1H) ； 7.7(s， 1H) ； 7.4-7.2(m， 5H) ； 4.3(q， 2H) ； 3.9(m， 2H) ； 3.0(m， 1H) ； 2.8(m， 1H) ； 2.7(s， 3H) ； 1.6-1.3(m， 8H)。
     实 施 例 35 ： 3-{2-[5-( 叔 丁 基 氨 基 磺 酰 基 ) 吡 啶 -2- 基 ]-3- 氧 代 -2， 3- 二 氢 -1H- 吡唑 -4- 基 }-3-( 吡啶 -3- 基 ) 丙酸甲酯 ( 表 I 的化合物 154)
     35.1.(2Z)-3-( 吡啶 -3- 基 ) 戊 -2- 烯二酸二乙基酯 在 氩 气 气 流 下， 向 15mL(85.6mmol) 的 (2E)- 戊 -2- 烯 二 酸 二 乙 基 酯 在 5mL 无水 DMF 中 的 溶 液 中 加 入 0.62g(2.8mmol) 的 Pd(OAc)2、 1.7g(5.56mmol) 的 P(OTol)3 和 5.5mL(39.7mmol) 的 Et3N， 然后将介质加热至 40℃， 并加入 4mL(39.75mmol) 的 3- 溴吡啶。 然后将介质在 90 ℃加热 24 小时， 然后溶于 100mL 的 EtOAc， 用 100mL 水洗涤， 经 Na2SO4 干 燥、 在减压下浓缩， 并通过硅胶柱色谱纯化， 用梯度为 0 至 10％ EtOAc 的环己烷 /EtOAc 洗 脱。得到 9.12g 的 (2Z)-3-( 吡啶 -3- 基 ) 戊 -2- 烯二酸二乙酯， 其为黄色蜡的形式。
     产率＝ 87％ 1
     H NMR， CDCl3， 400MHz， δ(ppm)8.8(s， 1H) ； 8.6(d， 1H) ； 7.8(dd， 1H) ； 7.4(dd， 1H) ； 6.3(s， 1H) ； 4.2(q， 2H) ； 4.15(s， 2H) ； 4.1(q， 2H) ； 1.3(t， 3H) ； 1.2(t， 3H)。
     35.2.2- 甲酰基 -3-( 吡啶 -3- 基 ) 戊二酸二乙酯
     该化合物按照方法 21.2 和 14.2 制备， 由 (2Z)-3-( 吡啶 -3- 基 ) 戊 -2- 烯二酸二 乙酯起始。
     产率 ： 18％。
     35.3.3-{2-[5-( 叔丁基氨基磺酰基 ) 吡啶 -2- 基 ]-3- 氧代 -2， 3- 二氢 -1H- 吡 唑 -4- 基 }-3-( 吡啶 -3- 基 ) 丙酸甲酯
     按照方法 22.5 至 22.7， 由 88mg 的 2- 甲酰基 -3-( 吡啶 -3- 基 ) 戊二酸二乙酯和 74mg 的 N- 叔丁基 -6- 肼基吡啶 -3- 磺酰胺起始， 然后在 1 当量的 0.1N HCl 的存在下冷冻 干燥获得的化合物， 得到 17mg 的 3-{2-[5-( 叔丁基氨基磺酰基 ) 吡啶 -2- 基 ]-3- 氧代 -2， 3- 二氢 -1H- 吡唑 -4- 基 }-3-( 吡啶 -3- 基 ) 丙酸甲酯盐酸盐， 其为绿色冻干物的形式。
     产率＝ 17％
     m.p.(℃ ) ＝ 146
     M ＝ C21H25N5O5S ＝ 459 ； M+H ＝ 460 ； 方法 2 ： Tr ＝ 1.19 分钟。 1
     H NMR， d6-DMSO， 400MHz， δ(ppm) ： 12.5(bs， 1H) ； 8.8(s， 1H) ； 8.7(bs， 1H) ； 8.6(d， 1H) ； 8.4(bs， 1H) ； 8.3(d， 1H) ； 8.2(d， 1H) ； 7.9(s， 1H) ； 7.8(t， 1H) ； 7.6(s， 1H) ； 4.3(t， 1H) ； 3.5(s， 3H) ； 3.2(m， 2H) ； 1.0(s， 9H)。
     下面的表 I 和表 II 例示了本发明化合物的一些实施例的化学结构和物理性质。
     表 I 例示了本发明的式 (I) 化合物， 其中 R 表示 -SO2-NR3R4。所述化合物在下文 提及为式 (I’ ) 化合物。
     表 II 例示了本发明的式 (I) 化合物， 其中 R 如所述表格所定义。所述化合物在下 文提及为式 (I” ) 化合物。
     下面的表 I 和 II 例示了本发明化合物的一些实施例的化学结构和物理性质。
     在这些表中 ：
     -在 “盐” 栏， “-” 表示化合物为游离碱形式， 而 “CF3COOH” 、 “HCl” 和 “Na” 分别表 示化合物为三氟乙酸盐、 盐酸盐和钠盐的形式 ；
     - 在其他栏中， “-” 是指所考虑的取代基不出现在分子上 ；
     -Me、 Et、 n-Pr、 i-Pr、 n-Bu 和 i-Bu 分别表示甲基、 乙基、 正丙基、 异丙基、 正丁基和 异丁基 ；
     -Ph 和 Bn 分别表示苯基和苄基 ；
     -“m.p.” 栏指示所考虑的化合物的熔点， 以℃计 ； +
     - 质谱鉴定的峰 MH ， 以及使用的和先前详细说明的高效液相色谱分析方法分别在“LC/MS” 栏和 “方法” 栏中指出。
     表I
     表 II

    [1011] 根据本发明的化合物接受药理试验以测定它们的性质， 且特别是 ： - 直接测量蛋白 HIF1-α 的稳定的体外测试， 该蛋白 HIF1-α 为在细胞中组成性表达但在正常氧条件下被泛素 / 蛋白酶体系统降解的转录因子 ；

    [1018] - 用于在 He3pB 细胞中测量 VEGF 和 EPO 的分泌的功能试验， VEGF 和 EPO 为肝细胞 中 HIF1-α 活化的两个标记。

    [1019] 所述两种测试如下所述。

    [1020] 1. 在 HEKEA 细胞中测量 HIF1-α 的稳定

    [1021] 1.1 目的

    [1022] HIF 为参与细胞适应缺氧的转录因子。该转录因子最小为由两种蛋白， ARNT 和 HIF1-α 形成的杂二聚体。ARNT 在细胞中组成性且稳定地表达， 且转录复合物调节的大多 数通过蛋白 HIF1-α 的稳定进行。实际上， 该蛋白， 在常氧条件下 (20％， 约等于环境的氧 值 ) 尤其在两种脯氨酸 ( 人蛋白的脯氨酸 402 和 564) 上经 HIF 脯氨酰 - 羟化酶羟基化， 导 致 von Hippell Lindau(VHL) 蛋白的结合。VHL 与 HIF1-α 的结合然后通过泛素 / 蛋白酶 体系统导致 HIF1-α 的降解。在缺氧下 ( 在细胞测试中 O2 ＜ 5％ )， HIF 脯氨酰 - 羟化酶被 抑制， 其反映为细胞中 HIF1-α 蛋白的量的增加。该蛋白然后可与 ARNT 结合以转移至核中 并活化其靶基因。

    [1023] 由于 HIF 活化的基因参与细胞对缺氧和组织对缺血的适应性反应， 因此该目的在 于鉴别和表征在细胞中稳定 HIF1-α 的化合物， 以放大或模拟其有益作用。

    [1024] 存在许多测试， 其描述了通过报道基因系统 (HRE- 荧光素酶 ) 或通过测量 HIF- 诱 导的蛋白 ( 例如 VEGF 或 EPO) 间接测量 HIF 的活性。 而且， 允许直接测量细胞中 HIF1-α 蛋 白的量的唯一测试为使用抗体的测试， 例如包括消耗细胞和时间的细胞提取相 ( 总溶解产 物或核萃取物 ) 的蛋白印迹， 因此限制化合物筛选能力。因此该目的在于开发一种灵敏的 筛选测试， 适合于 384- 孔板， 用于直接测量细胞核中 HIF1-α 蛋白的量。该测试在 HEK 细 胞 ( 来自肾腺癌的人上皮细胞 ) 中建立。

    [1025] 1.2 测试原理

    [1026] 该测试为基于酶互补原理的细胞测试， 本文使用的酶为 β- 半乳糖苷酶。 HEKEA 细 胞为稳定表达 ( 且在核中受限制 ) 突变体 β- 半乳糖苷酶 (Ω 片段， 也已知为 EA) 的 HEK 细胞 (DiscoverX 销售的系列 )。该构造使得仅当包含 Prolabel 互补片段的蛋白迁移至核 中时可获得 β- 半乳糖苷酶活性。

    [1027] 在该情况下， 包含 Prolabel 片段的感兴趣蛋白为在两个脯氨酸 402 和 564 被丙氨 酸替代的突变的 HIF1-α 或 HIF1-α， 其 C- 端通过分子生物学 (Clontech 销售的 DiscoverX 载体 ) 与小互补肽片段 (Prolabel 或 ED， 约 4kDa) 融合。然后将编码嵌合蛋白 HIF1-α_ Prolabel 的载体转染至 HEKEA 细胞以得到稳定的克隆 (HEKEA_HIF1-αPLBL)。

    [1028] 将 细 胞 进 行 缺 氧 处 理 或 用 潜 在 HIF 活 化 剂 的 化 合 物 处 理 后 获 得 的 C- 端 Prolabel-“标记的” HIF1-α 蛋白的量通过向细胞中添加含 β- 半乳糖苷酶的化学发光底 物的溶胞缓冲液测量。

    [1029] β- 半乳糖苷酶活性的测量与 Prolabel 的量成比例， 从而与迁移至细胞核中的 HIF1-α 的量成比例。

    [1030] 在内部平行地进行实验以证实单独的 Prolabel 片段在细胞中不稳定， 从而不允 许测量任何活性。

    [1031] 1.3 实验方案1.3.1 实验计划

    [1033] 1) 在 D0 接种细胞

    [1034] 2) 在常氧下粘附 24 小时

    [1035] 3) 在 D+1 制备和添加产物 (Biomek 2000 和 FX)

    [1036] 4) 在常氧培养 6 小时

    [1037] 5) 对板读数 ( 通过发光 )

    [1038] 1.3.2 接种细胞

    [1039] 用 Multidrop 在白色不透明底的 384- 孔板 (Greiner ref 3704) 中于 30μl 培养 基 (1％ FCS) 中以 10000 细胞 / 孔 ( 细胞板 ) 接种细胞。

    [1040] 1.3.3 处理

    [1041] ●稀释板 (DL 板 ) 的制备

    [1042] 测试产物以 3×10-2M 在 100％ DMSO 中制备， 然后在含有 0.1％ FCS(10μl 在 990μl -4 的 MEM 中 ) 的培养基中稀释至 3×10 M。 然后手动将其放置在称为稀释板 (dl) 的圆底 96- 孔 板的第 12 列 ( 各个化合物各 200μl)。然后用 Biomek 2000 制备 3×10-4M 至 10-9M 的完整 DL 板 ( 程序 ： 连续 10 点的范围 )。对于参照和对照， 将含有 0.1 ％ FCS 的 100μl 的 DMEM -3 以及将 100μl 的去铁胺 加入至第 1 列， 将 100μl 的去铁胺 10 M 加入至第 2 列的孔 ABCD， -3 5×10 M 加入至第 2 列的孔 EFGH。

    [1043] ●细胞板中的 DL 板分布

    [1044] 用 Biomek FX 96 从 DL 板移取 3.3μL， 一式两份放入水平的 ( 第 1 至 24 列 ) 各 384- 孔细胞板 (HEKEA_HIF1αPLBL 细胞板 ) 中。

    [1045] 然后在培养箱中在 37℃ ( 环境 O2， 6％ CO2) 将细胞放置 6 小时。

    [1046] 1.3.4β- 半乳糖苷酶活性的测量

    [1047] 所用的试剂盒为 Prolabel 的化学发光试剂盒 (Ref 93-0001 DiscoverX)。

    [1048] 在 37 ℃培养 6 小时后， 加入 15μl 含有 β- 半乳糖苷酶底物 (19 体积的 Path hunter 细 胞 (Path hunter cell) 测 定 缓 冲 液 +5 体 积 的 Emarald II 溶 液 +1 体 积 的 Galacton star) 的溶胞缓冲液溶解细胞， 通过直接将其加入至板中的 30μl 培养基中。将 板在避光环境培养 60 分钟， 然后用 Top Count 仪读取发光。然后用合适的拟合软件计算化 合物的 EC50 值， 其在下表 III 中给出。

    [1049] 化合物对 HIF 的激活活性通过产生 50％最大响应的该化合物的摩尔浓度给出。

    [1050] 表 III

    [1051] 化合物号 14 31 37 38 EC50(M) 3.8E-06 3.0E-06 3.2E-06 4.7E-06104102333769 A CN 102333783 39 42 43 44 46 47 48 51 53 54 56 58 59 62 63 64 68 70 71 72 74 76 77 80说明书1.8E-06 4.8E-06 3.1E-06 3.1E-06 9.6E-06 1.1E-06 4.3E-06 4.4E-06 2.6E-06 6.4E-06 2.1E-06 5.7E-06 1.7E-06 1.6E-05 9.2E-06 4.3E-06 1.5E-06 3.5E-06 5.0E-06 7.5E-06 3.7E-06 2.0E-06 4.8E-06 3.3E-0689/95 页105102333769 A CN 102333783 81 82 83 84 85 87 88 92 93 98B

    [1052] 说明书7.5E-06 1.5E-06 3.3E-06 9.9E-06 1.8E-06 9.8E-06 8.8E-07 8.6E-07 3.5E-07 2.5E-0690/95 页1.4 附件

    [1054] 1.4.1.HEKEA_HIF1αPLBL 细胞的保持

    [1055] 所述细胞在完全培养基 (whole medium)( 如下 ) 中， 在烧瓶 T225 中在 37℃在 CO2 培养箱中培养。

    [1056] 1.4.2.HEKEA_HIF1αPLBL 细胞的培养基

    [1053] 2.Hep3B 肝细胞分泌 VEGF 和 EPO 的测量

    [1060] 2.1. 目的

    [1061] HIF 是一种参与细胞适应缺氧的转录因子。由于被 HIF 激活的基因参与了细胞对 缺氧和组织对缺血的适应性反应， 本目的在于鉴定和表征在细胞中稳定 HIF1α 的化合物， 以放大或模拟其有益效果。HIF1α 在分析 EPO 基因启动子后鉴定， 其使得该蛋白 (HIF1α 的第一标记之一 ) 激活。此外， VEGF 还在文献中识别为 HIF 激活的主要标记之一。因此选 择测量这两种蛋白用于表征 Hep3B 细胞中的 HIF 激活剂的化合物。

    [1062] 因此， 本目的在于开发一种适用于 96- 孔板的灵敏的筛选测试， 用于直接测量

    [1059] Hep3B 细胞 ( 来源于人肝癌的细胞 ) 上清液中对可能的 HIF 激活剂响应的 VEGF 和 EPO 的 量。

    [1063] 2.2. 测试原理

    [1064] 所述测试为用于测量 Hep3B 细胞上清液中 VEGF 和 EPO 的 ELISA 测试， 所述细胞经 缺氧处理或经去铁胺处理作为对照或经可能的 HIF 激活剂处理。 所述测试适用于 96- 孔板， 使之具有更大的化合物筛选能力。

    [1065] 2.3. 实验方案

    [1066] 2.3.1 实验计划

    [1067] 1) 在 D0 接种细胞

    [1068] 2) 在常氧下粘附 6 小时

    [1069] 3) 制备和加入产物 (Biomek 2000 和 FX)

    [1070] 4) 在常氧下培养 18 小时

    [1071] 5) 在 D+1 在上清液中测定 EPO 和 VEGF

    [1072] 2.3.2 接种细胞

    [1073] 在黑色、 不透明底的 96- 孔板 ( 参考 Costar 3916) 中以 30000 细胞 / 孔， 在 100μl 培养基 (10％ FCS) 中以 Multidrop 次代培养细胞。

    [1074] 2.3.3 处理细胞

    [1075] ●稀释板 （DL 板 ) 的制备

    [1076] 测试产物以 10-2M 在 100％ DMSO 中制备， 然后在含有 0.1％ FCS(6μl 在 194μl 的 4 MEM 中 ) 的培养基中稀释至 3×10 M。将 200μl 各个化合物放置在 96- 孔板的第 12 列。用 Biomek 2000 制备 3×10-4M 至 3×10-8M 的稀释范围 ( 程序 ： 连续 9 点的范围 )。分别加入 -3 100μl 的 MEM 0.1％ FCS 和去铁胺 5×10 M 至第 3 列的孔 A， B， C， D 和孔 E， F， G， H 作为对 照。

    [1077] ●细胞板中的 DL 板分布

    [1078] 将在前一天接种在 96- 孔板的细胞培养基更换为 90μl 含有 0.1％ FCS 的培养基， 并用 FX 96 从 96- 孔 DL 板中分配 10μl 至细胞板中。

    [1079] 将如此处理的细胞板在培养箱中在 37℃ ( 环境 O2， 6％ CO2) 放置 18 小时。

    [1080] 2.3.3EPO 和 VEGF 的测定

    [1081] 在 96- 孔 板 中 用 可 能 的 HIF 激 活 剂 处 理 的 Hep3B 细 胞 的 上 清 液 (80μl) 用 多 通 道 移 液 管 回 收， 用 于 通 过 ELISA 根 据 制 造 商 的 使 用 说 明 书 (Kit EPOMesoscale(refK15122B-2)) 同时测定 VEGF 和 EPO。然后用合适的拟合软件计算化合物 对 EPO 和 VEGF 的 EC50 值， 其在下表 IV 中给出。

    [1082] 2.4. 附件

    [1083] Hep3B 细胞的培养基 ：

    [1084] 3. 结果 化合物对 HIF 的激活活性通过产生 50％最大响应的该化合物的浓度给出于下表 表 IV化合物号 14 20 31 34 37 38 39 42 43 44 46 47 48 51 53 54 56 EC50 EPO(M) 3.0E-07 1E-06 2.1E-06 9E-07 1.0E-06 1.0E-06 2.0E-06 1.1E-06 1.5E-06 1.9E-06 7.0E-07 2.0E-06 1.1E-06 3.0E-07 9.0E-07 4.5E-07 2E-06 EC50 VEGF(M) 1.1E-06 1.3E-06 1.7E-06 2.1E-06 1.2E-06 2.8E-06 1.9E-06 4.0E-07 3.2E-06 3.0E-07 2.5E-06IV 中。

    [1087] 108102333769 A CN 102333783 58 59 62 64 68 70 71 72 74 76 77 80 81 82 83 84 85 88 92 93

    [1089] 说明书3.6E-06 6.8E-07 1.0E-06 2.4E-06 5.0E-07 2.9E-06 1.6E-06 1.7E-0693/95 页3.2E-06 8.1E-07 9.0E-07 1.4E-06 4.0E-07 2.7E-06 1.6E-06 1.0E-06 3E-07 2.0E-07 1.4E-06 4.0E-07 1.2E-06 1E-06 1.4E-06 2.9E-06 2.5E-06 3.0E-07 5.0E-07 4.0E-072.0E-07 1.3E-06 9.0E-07 1.9E-06 1.2E-06 1.3E-06 3.3E-06 2.5E-06 4.0E-07 5.0E-07 4.0E-07因此， 本发明化合物可用于制备药物， 特别是制备为 HIF 转录因子的激活剂的药物。 因此， 根据另一方面， 本发明的一个主题为药物， 其包括式 (I) 化合物， 或式 (I) 化 合物与药学上可接受的酸形成的加成盐。

    [1091] 本发明还涉及药物组合物， 其包括本发明的式 (I) 化合物， 或该化合物的药学上 可接受的盐， 以及至少一种药学上可接受的赋形剂。

    [1092] 所述药物在尤其在治疗 / 预防特别是人中和动物中的心血管疾病、 下肢缺血、 心

    [1090] 功能不全、 源于缺血的冠心病、 例如心绞痛或心肌梗塞、 动脉硬化、 源于缺血的中风、 肺高血 压和任何部分或全部血管闭塞导致的病理中具有治疗用途。

    [1093] 所述药物还可用于治疗 / 预防青光眼、 源于神经变性或其他的肾病或脑病、 以及 贫血， 或用于促进愈合的药物或缩短术后恢复期的药物， 或治疗四肢无力病症的药物， 或在 大型外科手术 ( 例如颅或胸部手术， 或心脏、 颈动脉或主动脉手术 ) 后用于在自身输血必要 时获得血液的药物。

    [1094] 所述化合物尤其在治疗 / 预防贫血中具有治疗用途。

    [1095] 所述化合物还可在人和动物中， 在大型外科手术 ( 例如颅或胸部手术， 或心脏、 颈 动脉或主动脉手术 ) 后用于在自身输血必要时获得血液的目的。

    [1096] 所述化合物可用于人和动物， 作为用于促进愈合的药物或缩短术后恢复期的药 物。

    [1097] 所述化合物可用于人和动物， 用于治疗四肢无力病症， 尤其包括在老年人中出现 的恶病质。

    [1098] 所述化合物可用于人和动物， 用于治疗青光眼、 源于神经变性或其他的肾病或脑 病。

    [1099] 最后， 本发明所述化合物可用于人和动物， 用于治疗源于缺血的心脏或外周疾病， 其经再生性药物以自体和异源方式使用非 - 胚胎干细胞或成肌细胞用于治疗目的， 不论是 作为给药前细胞的治疗还是作为局部给药这些细胞的同时治疗。

    [1100] 此外， 本发明所述化合物可单独使用， 或必要时组合一种或多种用于治疗高血压、 心功能不全、 糖尿病和贫血的其它活性化合物使用。

    [1101] 例如， 提及本发明化合物与一种或多种选自以下的化合物的组合 ： 转化酶抑制剂、 血管紧张素 II 受体拮抗剂、 β 阻断剂、 盐皮质激素受体拮抗剂、 利尿剂、 钙拮抗剂、 他汀类 和洋地黄苷衍生物。

    [1102] 根据另一方面， 本发明涉及药物组合物， 其包括作为有效成分的本发明化合物。 所 述药物组合物包含有效量的至少一种本发明化合物， 或所述化合物的药学上可接受的盐， 以及至少一种药学上可接受的赋形剂。

    [1103] 所述赋形剂根据药学形式和所需的给药模式， 从本领域技术人员已知的常规赋形 剂中选自。

    [1104] 在用于口服、 舌下、 皮下、 肌内、 静脉注射、 局部 (topical)、 局部 (local)、 气管内、 鼻内、 经皮或直肠给药的本发明的药物组合物中， 上述式 (I) 的有效成分或其盐可以以单 位给药形式， 作为与标准药学赋形剂的混合物向人和动物给药， 用于预防或治疗上述病症 或疾病。

    [1105] 合适的单位给药形式包括口服剂型， 例如片剂、 软和硬明胶胶囊、 粉剂、 颗粒剂和 口服溶液或悬浮液， 舌下、 含服、 气管内、 眼内、 鼻内和吸入给药形式， 局部、 经皮、 皮下、 肌内 和静脉注射给药形式， 直肠给药形式和埋植剂。对于局部应用， 本发明化合物可以霜剂、 凝 胶剂、 软膏剂或洗剂使用。

    [1106] 通过实例的方式， 以片剂形式的本发明化合物的单位给药形式可包括以下成分 ：

    [1107] 存在特殊情况， 其中更高或更低的剂量是合适的 ； 该剂量不背离本发明的范围。 根 据常规实践， 适合各患者的剂量由医师根据给药模式和所述患者的体重和响应来确定。

    [1109] 根据另一方面， 本发明还涉及用于治疗上述病理的方法， 其包括向患者给药有效 量的本发明化合物， 或其药学上可接受的盐。

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