癌症的治疗 本申请是申请日为 2006 年 7 月 18 日， 申请号为 200680030583.6， 发明名称为 “癌 症的治疗” 的发明专利申请的分案申请。
相互参照
本申请涉及并要求 2005 年 7 月 18 日申请的美国临时申请第 60/700,446 号之优 先权， 该临时申请全文以引用的方式并入本文中。
背景技术 癌症是现代社会中的一个严重威胁。由于其独特性质， 恶性癌生长对现代医学提 出了严峻考验。它们的特征包括不可控的细胞增殖导致恶性组织不受调控地生长、 侵袭局 部甚至远隔组织的能力、 缺乏分化、 缺乏可检测到的症状， 最重要的是缺乏有效的防治手 段。
癌可在任何年龄段的任何器官的任何组织中发生。癌症病因学尚未阐明， 但以下 多种机理均与恶性细胞生长和转化相关， 如遗传易感性、 染色体断裂紊乱、 病毒、 环境因素 和免疫紊乱。癌症包含了众多种类的医疗状况， 影响全球数百万患者。癌细胞几乎可在机
体的任何器官和 / 或组织中出现。当机体某个部位的细胞开始不受控制地生长或分化时， 癌症即发生了。所有癌症类型均始于异常细胞不受控制的生长。
癌症类型众多， 包括乳腺癌、 肺癌、 卵巢癌、 膀胱癌、 前列腺癌、 胰腺癌、 子宫颈癌和 白血病。当前主要的治疗手段有手术、 放射治疗和化学治疗。一般而言手术属于激烈的措 施， 可能造成严重后果。例如， 所有治疗卵巢癌的方法均会导致不孕。某些治疗子宫颈癌和 膀胱癌的措施会导致不孕和 / 或性功能障碍。治疗胰腺癌的手术可能部分或全部切除胰腺 从而给患者带来巨大风险。乳腺癌手术无一例外地涉及部分或整个乳房的切除。某些前列 腺癌手术可能带来尿失禁和阳痿的风险。 肺癌患者的手术由于需要切割肋骨以进入并切除 癌性肺组织因而常出现严重的术后疼痛。此外， 同时患有肺癌和其他肺部疾病如肺气肿或 慢性支气管炎的患者， 常在术后出现呼吸困难加重。
放射治疗具有杀灭癌细胞的优点， 但它同时还会损伤非癌组织。化学治疗包括给 患者施用各种抗癌药物， 但是通常伴有副作用。
全球每年有超过一千万名患者被诊断出癌症， 而预计到 2020 年该数字会增加到 每年一千五百万例新发病例。癌症造成全球每年六百万人死亡， 或占总死亡数的 12％。因 此需要寻找出可以治疗癌症的方法。 这些方法可以为在预防和治疗人类和其他哺乳动物癌 症中有用的药物组合物提供基础。
已有一系列抗肿瘤药物经过鉴定。这些药物包括硝基和亚硝基化合物及其代谢 物， 它们是 1995 年 11 月 7 日授予的名称为 “可用作抗病毒和抗肿瘤药的芳香族硝基和亚硝 基化合物及其代谢物” 的美国专利第 5,464,871 号、 1997 年 9 月 23 日授予的名称为 “可用 作抗病毒和抗肿瘤药的芳香族硝基和亚硝基化合物及其代谢物” 的第 5,670,518 号、 1999 年 12 月 21 日授予的名称为 “采用芳香族硝基和亚硝基化合物及其代谢物治疗癌症的方法” 的第 6,004,978 号专利的主题， 这些专利的公开内容以引用的方式并入本文中。发明内容 本发明主要涉及采用芳香族硝基苯甲酰胺化合物及其代谢物治疗肿瘤性疾病的 方法。更具体地， 它涉及采用硝基化合物 4- 碘 -3- 硝基苯甲酰胺或它的盐、 溶剂化物、 异构 体、 互变异构体、 代谢物、 类似物或前药控制和抑制哺乳动物的肿瘤生长。
本发明一方面提供了一种治疗癌症和癌症相关疾病的方法， 包括施用包含通式 (Ia) 的化合物与一种或多种其他药理活性剂的药物组合物。本发明另一方面提供了一 种治疗癌症和癌症相关疾病的方法， 包括联合施用通式 (Ia) 的化合物和丁硫氨酸亚砜胺 (ButhionineSulfoximine， BSO)。通式 (Ia) 的化合物还可与通式 (II) 的苯并吡喃酮化合 物联用， 可加或不加用 BSO。
在部分优选实施方式中， 癌症为卵巢癌、 子宫内膜癌、 子宫颈癌、 胰腺癌、 膀胱癌、 眼癌、 中枢神经系统癌、 肾癌、 甲状腺癌和肺癌。在部分优选实施方式中， 癌症为乳腺导管 癌、 小叶型乳腺浸润癌、 乳腺导管内癌、 乳腺粘液癌、 外周血早幼粒细胞白血病、 卵巢腺癌、 已腹腔转移的卵巢腺癌、 前列腺腺癌、 膀胱移行细胞癌、 胰管上皮癌、 胰管腺癌、 宫颈上皮腺 癌和肺癌。在部分优选实施方式中， 癌症为小叶型乳腺浸润癌、 乳腺导管内癌和乳腺粘液 癌。在部分优选实施方式中， 癌症为结肠癌、 前列腺癌、 肝癌、 白血病、 神经胶质瘤和黑色素 瘤。
在本发明上述方面的部分优选实施方式中， 治疗还包括手术、 放射治疗、 化学治 疗、 基因治疗、 免疫治疗和它们的联用。在部分优选实施方式中， 化合物的给药方式为静脉 内给药。在部分优选实施方式中， 聚 -ADP- 核糖聚合酶 (PARP) 分子被本发明的化合物所抑 制。在部分优选实施方式中， 受试者在施用本发明的化合物后， 肿瘤细胞发生细胞凋亡、 细 胞周期停滞和 / 或坏死。
本发明涉及用于治疗癌症的物质组合物和药物组合物以及使用方法。例如， 本发 明的组合物可以是两种或多种本文所述化合物的组合和 / 或本文所述化合物的两种或多 种形式的组合。本发明的药物组合物可以是适合施用于受试者的组合物。
附图简述
图 1 表示硝基苯甲酰胺化合物在有或无丁硫氨酸亚砜胺 (BSO) 共处理时对 BT474 乳腺癌细胞系的作用。
图 2 表示硝基苯甲酰胺和苯并吡喃酮化合物在有或无 BSO 共处理时对 Ovcar3 和 Skov3 卵巢癌细胞系的作用。
图 3A 和 3B 表示硝基苯甲酰胺和苯并吡喃酮化合物在有或无 BSO 共处理时对肺癌 细胞系的作用。
图 4 表示硝基苯甲酰胺和苯并吡喃酮化合物在有或无 BSO 共处理时对肺癌细胞系 的作用。
图 5 表示硝基苯甲酰胺化合物对 TUCCSUP 膀胱癌细胞系的作用。
图 6 表示硝基苯甲酰胺和苯并吡喃酮化合物在有或无 BSO 共处理时对前列腺癌细 胞系的作用。
图 7 表示硝基苯甲酰胺和苯并吡喃酮化合物在有或无 BSO 共处理时对前列腺癌细 胞系的作用。
图 8 表示硝基苯甲酰胺和苯并吡喃酮化合物在有或无 BSO 共处理时对胰腺癌细胞 系的作用。
图 9 表示硝基苯甲酰胺和苯并吡喃酮化合物在有或无 BSO 共处理时对胰腺癌细胞 系的作用。
图 10 表示硝基苯甲酰胺和苯并吡喃酮化合物在有或无 BSO 共处理时对胰腺癌细 胞系的作用。
图 11 表示硝基苯甲酰胺和苯并吡喃酮化合物在有或无 BSO 共处理时对子宫颈癌 细胞系的作用。
图 12 表示硝基苯甲酰胺和苯并吡喃酮化合物在有或无 BSO 共处理时对体内皮下 乳腺癌模型的作用。
图 13 表示 4- 碘 -3- 硝基苯甲酰胺在 OVCAR3( 人卵巢腺癌 ) 异种移植裸小鼠模型 中的作用。
图 14 表示在 OVCAR3( 人卵巢腺癌 ) 异种移植裸小鼠模型中评价 4- 碘 -3- 硝基苯 甲酰胺过程中对体重的影响。
图 15 表示 6- 氨基 -5- 碘 -2H-1- 苯并吡喃 -2- 酮 (BP) 对乳腺 (MDAMB 231) 癌裸 小鼠异种移植物的作用。 图 16 表示 6- 氨基 -5- 碘 -2H-1- 苯并吡喃 -2- 酮 (BP) 和 4- 碘 -3- 硝基苯甲酰 胺 (BA) 对乳腺 (MDA MB 231) 癌裸小鼠异种移植物的作用。
发明详述
定义
“硝基苯甲酰胺化合物” 是指通式 (Ia) 的化合物， 及其药学可接受的盐、 溶剂化物、 异构体、 互变异构体、 代谢物、 类似物或前药
其中 R1、 R 2、 R3、 R4 和 R5 独立地选自氢、 羟基、 氨基、 硝基、 碘、 (C1-C6) 烷基、 (C1-C6) 烷氧基、 (C3-C7) 环烷基和苯基， 其中 R1、 R2、 R3、 R4 和 R5 五个取代基中至少有两个总是为氢， 五个取代基中至少一个总是为硝基， 至少一个与硝基位置相邻的取代基总是为碘。R1、 R2、 R3、 R4 和 R5 还可以是卤素基团， 如氯、 氟或溴。
“手术” 是指任何治疗性或诊断性操作， 其涉及对人体或其他哺乳动物身体的手部 条理性动作或应用器械进行的手部动作， 以达到治疗、 矫正或诊断效果。
“放射治疗” 是指将患者置于高能放射线中， 包括但不限于 x 射线、 γ 射线和中子。
此类治疗包括但不限于外照射放射治疗 (externalbeam therapy)、 内照射治疗、 植入照射、 近距离放射治疗、 全身放射治疗和放射线治疗。
“化学治疗” 是指通过各种方法将一种或多种抗癌药如抗肿瘤化疗药、 化学预防药 和 / 或其他药剂施用给癌症患者， 给药方法包括静脉内、 口服、 肌肉内、 腹腹内、 膀胱内、 皮 下、 经皮、 含服或吸入或以栓剂形式给药。化学治疗可在术前进行， 以使大肿瘤在手术切除 之前萎缩， 在手术或放射治疗后进行， 以防止体内任何残留癌细胞的生长。
术语 “有效量” 或 “药物有效量” 是指药物无毒却又足以产生预期的生物学、 治疗 和 / 或预防结果的剂量。该结果可以是疾病的体征、 症状或病因减少和 / 或减轻， 或是任何 其他预期的生理系统改变。例如， 治疗用 “有效量” 指在临床上显著减轻疾病所需的本文公 开的硝基苯甲酰胺化合物本身的用量， 或是包含本文中硝基苯甲酰胺化合物的组合物的用 量。任何具体情况下的适当的有效量可以由本领域普通技术人员采用常规实验方法确定。
“药学可接受的” 或 “药理学可接受的” 是指物质不会在生物学上或其他方面不符 合要求， 即给个体施用该物质后不会产生任何不希望的生物效应或与组合物所含的任何成 分发生不良的相互作用。
本文使用的术语 “治疗” 和它在语法上的等同术语包括获得治疗益处和 / 或预防 益处。治疗益处是指根除或减轻所治疗的疾病。例如， 对于癌症患者， 治疗益处包括根除或 减轻癌症。治疗益处还可以是根除或减轻与所患疾病相关的一种或多种生理症状， 从而观 察到患者症状改善， 尽管事实是患者可能仍在经受所患疾病的折磨。 为获得预防益处， 可将 本发明的方法应用于或将本发明的组合物施用于具有患癌风险的患者或报告具有该病的 一种或多种生理症状的患者， 即使此时病情诊断可能尚未进行。 硝基苯甲酰胺化合物
本发明采用的化合物为通式 (Ia) 的化合物， 及其药学可接受的盐、 溶剂化物、 异 构体、 互变异构体、 代谢物、 类似物或前药
其中 R1、 R 2、 R3、 R4 和 R5 独立地选自氢、 羟基、 氨基、 硝基、 碘、 (C1-C6) 烷基、 (C1-C6) 烷氧基、 (C3-C7) 环烷基和苯基， 其中 R1、 R2、 R3、 R4 和 R5 五个取代基中至少有两个总是为氢， 五个取代基中至少一个总是为硝基， 至少一个与硝基位置相邻的取代基总是为碘。R1、 R2、 R3、 R4 和 R5 还可以是卤素基团， 如氯、 氟或溴。
一种优选的通式 Ia 的化合物为 ：
4- 碘 -3- 硝基苯甲酰胺 (BA)
本发明提供将上述硝基苯甲酰胺化合物用于治疗乳腺癌包括乳腺导管癌、 其他 形式的白血病包括急性外周血早幼粒细胞白血病、 卵巢癌、 肺癌、 膀胱癌、 前列腺癌、 胰腺 癌和子宫颈癌， 以及本文描述的其他类型的癌 ( 美国专利第 5,464,871 号、 美国专利第 5,670,518 号和美国专利第 6,004,978 号全文以引用方式并入本文 )。本发明还提供将上 述硝基苯甲酰胺化合物用于治疗 Gleevac( 甲磺酸伊玛替尼 ) 抗性患者群体。 Gleevac 是一 种酪氨酸激酶抑制剂。
在部分优选实施方式中， 本发明的硝基苯甲酰胺化合物用于治疗乳腺癌， 特别是 乳腺导管癌、 小叶型乳腺浸润癌、 乳腺导管内癌和乳腺粘液癌。在部分优选实施方式中， 本 发明的硝基苯甲酰胺化合物用于治疗卵巢癌和子宫内膜癌。在更为优选的实施方式中， 本 发明的硝基苯甲酰胺化合物用于治疗肺癌和结肠癌。
在部分优选实施方式中， 本发明的硝基苯甲酰胺化合物用于治疗膀胱癌和前列腺 癌。在部分优选实施方式中， 本发明的硝基苯甲酰胺化合物用于治疗肝癌和胰腺癌。在部 分优选实施方式中， 本发明的硝基苯甲酰胺化合物用于治疗白血病、 子宫颈癌、 神经胶质瘤 和黑色素瘤。
在进一步优选的实施方式中， 本发明的硝基苯甲酰胺化合物用于治疗来源于干细 胞的癌症。在乳腺癌和其他恶性肿瘤中， 一部分肿瘤细胞—“癌干细胞”—具有广泛增殖 和肿瘤转移的能力。干细胞命运和生长的改变可能在肿瘤发生中发挥作用。上皮干细胞具 有至少与生物体相当的生存期， 因而被认为易受多种遗传因素影响， 这些遗传因素积累起 来导致肿瘤形成。 许多癌症， 如皮肤癌和结肠癌， 出现在整个生命周期中始终有细胞不断补 充的组织中。但导致疾病的关键性突变可能发生在组织形成时期， 此时细胞呈指数分裂。
目前已被鉴定几乎存在于每个组织中的干细胞区室， 可以被定义为稀有细胞亚 群， 在生物体的整个生存期中具有独有的自我更新和持续存在的特性， 其不同于分化的细 胞， 分化的细胞形成组织实体， 但是通常特征是有丝分裂后行为和短生存期。 细胞需要多次 突变才能转化为癌细胞的事实提示多数组织中的突变可能在干细胞中积累。 由于癌干细胞 可自我更新， 提示他们可能来源于可自我更新的正常干细胞， 或者源自更多已获得干细胞 独有特性的分化的细胞。由此肿瘤也可被看作一种组织， 包括 “分化的” 细胞和 “癌干细胞” 亚群， 其中含有肿瘤物质， 可能是继发肿瘤形成 ( 转移 ) 的原因。因此， 本发明的硝基苯甲 酰胺可用于靶向干细胞来源的癌。
本发明公开了 4- 碘 -3- 硝基苯甲酰胺 (BA) 在人肿瘤和正常原代细胞中以及在小
鼠、 大鼠和狗中的非临床药理学结果。在体外 BA 可抑制多种人肿瘤细胞的增殖， 包括乳腺 癌、 结肠癌、 前列腺癌、 子宫颈癌、 肺癌、 卵巢癌、 黑素瘤、 淋巴瘤和白血病。在体内在多个肿 瘤发生动物模型中评价了 BA。 每日一次或每周两次施用 BA 可抑制裸小鼠和 SCID 小鼠的人 卵巢腺癌异种移植模型中的肿瘤生长， 还可正面影响每日一次或每周两次给药的动物的存 活率。
每周两次连续 3 周施用 BA， 其后为 1 周的清除期， 这是根据对 BA 功效和安全性的 临床前评价结果确定的。
有文献报道硝基苯甲酰胺化合物对恶性癌细胞具有选择性的细胞毒性， 而对非恶 性癌细胞无作用。参见 Rice 等人， Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89 ： 7703-7707(1992)。在一 种实施方式中， 本发明方法中使用的硝基苯甲酰胺化合物对肿瘤细胞比对非肿瘤细胞具有 选择性更强的毒性作用。
有文献报道硝基苯甲酰胺和亚硝基苯甲酰胺化合物对肿瘤发生的作用在给癌 细 胞 共 施 用 BSO 时 得 到 增 强。 参 见 Mendeleyev 等 人， Biochemical Pharmacol.50(5) ： 705-714(1995)。丁硫氨酸亚砜胺 (BSO) 可抑制 γ 谷氨酰半胱氨酸合成酶， 该酶为谷胱苷 肽生物合成的关键酶， 谷胱苷肽部分负责细胞对化学治疗的耐受性。参见 Chen 等人， Chem Biol Interact.Apr 24 ； 111-112 ： 263-75(1998)。 本发明还提供一种治疗癌症的方法， 包括 硝基苯甲酰胺和 / 或苯并吡喃酮化合物与 BSO 的联合给药。
除 BSO 以 外， 其他 γ 谷氨酰半胱氨酸合成酶抑制剂也可与硝基苯甲酰胺和 / 或苯并吡喃酮化合物联用。其他适合的 BSO 类似物包括但不限于丙硫氨酸亚砜胺 (proprothionine sulfoximine)、 甲硫氨酸亚砜胺、 乙硫氨酸亚砜胺、 甲基丁硫氨酸亚砜 胺、 γ- 谷氨酰 -α- 氨基丁酸和 γ- 谷氨酰半胱氨酸。
苯并吡喃酮化合物
在部分实施方式中， 苯甲酰胺化合物与通式 II 的苯并吡喃酮化合物联合给药。通 式 II 的苯并吡喃酮化合物为 ：
其中 R1、 R2、 R3 和 R4 独立地选自 H、 卤素原子、 任选取代的羟基、 任选取代的氨基、 任 选取代的低碳烷基、 任选取代的苯基、 任选取代的 C4-C10 杂芳基和任选取代的 C3-C8 环烷基， 或它们的盐、 溶剂化物、 异构体、 互变异构体、 代谢物或前药 ( 美国专利第 5,484,951 号， 全 文以引用的方式并入本文中 )。
在一种优选实施方式中， 本发明涉及下述通式 II 的苯并吡喃酮化合物
6- 氨基 -5- 碘 - 苯并吡喃酮
(BP)
硝基苯甲酰胺化合物的作用机理
本文所述化合物的抗癌特性被认为是通过调控聚 (ADP- 核糖 ) 聚合酶来实现的， 但并不仅限于一个作用机理。药物的作用机理涉及它们作为核酶聚 (ADP- 核糖 ) 聚合酶 (PARP-1) 的配体起作用的能力。参见 Mendeleyev 等人， 同上， (1995)。PARP-1 在细胞核 + 中表达， 催化 β- 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 (NAD ) 转化为烟酰胺和聚 -ADP- 核糖 (PAR)。在 稳态条件下 PARP-1 的作用似乎仅限于 DNA 转录和修复。然而当细胞应激引发 DNA 损伤时， PARP-1 活性急剧升高， 这看来是基因组完整性所必需的。Shall 等人， Mutat Res.Jun 30 ； 460(1) ： 1-15(2000)。
PARP-1 的功能之一是合成生物聚合物 — 聚 (ADP- 核糖 )。聚 (ADP- 核糖 ) 和 PARP-1 均与 DNA 损伤修复、 细胞凋亡、 基因组稳定性维持和癌症发生有关。参见 Masutani 等人， Genes， Chromosomes， andCancer 38 ： 339-348(2003)。PARP-1 在 DNA 修复中特别是 在碱基切除修复 (BER) 中发挥作用。BER 是哺乳动物细胞在单个碱基 DNA 断裂时的一种保 护性机制。PARP-1 通过其锌指结构域以高亲和力与 DNA 片段末端结合， 以此起 DNA 损伤 传感器的作用。Gradwohl 等人， Proc.Natl.Acad.Sci.USA 87 ： 2990-2994(1990) ； Murcia 等 人， TrendsBiochem Sci 19 ： 172-176(1994)。DNA 断 裂 引 发 PARP-1 与 断 裂 位 点 的 结 合应答。进而 PARP-1 的催化活性增加数百倍 ( 参见 Simonin 等人， J Biol Chem 278 ： 13454-13461(1993))， 并且开始转化自身的聚 ADP 核糖基化 (Desmarais 等人， Biochim Biophys Acta 1078 ： 179-186(1991)) 和 BER 蛋白， 如 DNA-PKcs 和分子支架蛋白 XRCC-1。 参 见 Ruscetti 等人， J.Biol.Chem.Jun 5 ； 273(23) ： 14461-14467(1998) 和 Masson 等人， Mol Cell Biol.Jun ； 18(6) ： 3563-71(1998)。BER 蛋白快速募集至 DNA 损伤部位。El-Kaminsy 等人， Nucleic Acid Res.31(19) ： 5526-5533(2003) ； Okano 等人， Mol Cell Biol.23(11) ： 3974-3981(2003)。接着 PARP-1 与 DNA 断裂部位分离， 但仍然维持在 DNA 修复事件的周围。
抑制 PARP 分子活性包括降低这类分子的活性。术语 “抑制” 和它的语法变化形式 如 “抑制的” 并不是要求完全降低 PARP 活性。这种降低优选为在无抑制作用时例如在无 抑制剂如本发明的硝基苯甲酰胺化合物时的分子活性的至少约 50％、 至少约 75％、 至少约 90％， 更优选至少约 95％。 最优选地， 该术语意为活性出现可观测的或可测定的降低。 在治 疗计划中， 抑制优选足以对所治疗疾病产生治疗和 / 或预防益处。短语 “不抑制” 和它的语 法变化形式并不要求完全缺乏对活性的影响。例如， 它表示在有抑制剂如本发明的硝基苯 甲酰胺化合物存在时， PARP 活性下降低于约 20％、 低于约 10％， 优选低于约 5％。
苯甲酰胺化合物的应用
癌症类型
本发明提供治疗多种特定癌症或肿瘤的方法。 例如， 癌症类型包括肾上腺皮质癌、
肛门癌、 再生障碍性贫血、 胆管癌、 膀胱癌、 骨癌、 骨转移、 成人中枢神经系统脑肿瘤、 儿童中 枢神经系统脑肿瘤、 乳腺癌、 巨大淋巴结增生症、 子宫颈癌、 儿童非何杰金淋巴瘤、 结肠和直 肠癌、 子宫内膜癌、 食道癌、 尤文家族肿瘤、 眼癌、 胆囊癌、 胃肠类癌瘤、 胃肠间质瘤、 妊娠性 滋养层细胞病、 何杰金病、 卡波西肉瘤、 肾癌、 喉及下咽癌、 急性淋巴细胞白血病、 急性骨髓 性白血病、 儿童白血病、 慢性淋巴细胞白血病、 慢性骨髓性白血病、 肝癌、 肺癌、 肺类癌瘤、 非 何杰金淋巴瘤、 男性乳腺癌、 恶性间皮瘤、 多发性骨髓瘤、 骨髓增生异常综合征、 鼻腔及鼻窦 癌、 鼻咽癌、 神经母细胞瘤、 口腔及口咽癌、 骨肉瘤、 卵巢癌、 胰腺癌、 阴茎癌、 垂体瘤、 前列腺 癌、 视网膜母细胞瘤、 横纹肌肉瘤、 唾液腺癌、 肉瘤 ( 成人软组织癌 )、 黑色素瘤皮肤癌、 非黑 色素瘤皮肤癌、 胃癌、 睾丸癌、 胸腺癌、 甲状腺癌、 子宫肉瘤、 阴道癌、 外阴癌和瓦尔登斯特伦 巨球蛋白血症。
甲状腺癌是内分泌系统最常见的恶性肿瘤。甲状腺癌包括分化型肿瘤 ( 乳头状或 滤泡状 ) 和低分化型肿瘤 ( 髓样或退行性 )。阴道癌包括鳞状细胞癌、 腺癌、 黑色素瘤和肉 瘤。睾丸癌概括地分为精原细胞瘤和非精原细胞瘤类型。
胸腺瘤为胸腺上皮肿瘤， 可能被或可能未被非肿瘤淋巴细胞广泛浸润。术语胸腺 瘤通常用于描述不显示明显的上皮成分非典型性的肿瘤。 显示出不再为胸腺特异性的清晰 的细胞学非典型性和组织学特征的胸腺上皮肿瘤被称为胸腺癌 ( 也叫 C 型胸腺瘤 )。 本发明提供的方法可包括苯甲酰胺化合物给药与其他治疗方法的联用。 选择能够 与本发明组合物联用的疗法部分取决于所治疗的疾病。 例如， 为治疗急性骨髓性白血病， 本 发明部分实施方式中的苯甲酰胺化合物可与放射治疗、 单克隆抗体治疗、 化学治疗、 骨髓移 植、 基因治疗、 免疫治疗及以上方法的组合联用。
乳腺癌
一方面， 本发明提供了一种治疗乳腺癌、 优选治疗乳腺导管组织中的导管癌的方 法。
有几种类型的乳腺癌可以采用本发明提供的方法治疗。 原位小叶癌和原位导管癌 是分别发生在小叶和导管中但尚未扩散到乳房周围的脂肪组织或身体其他区域的乳腺癌。 浸润型 ( 或侵袭性 ) 小叶癌和导管癌是分别发生在小叶和导管中且已扩散至乳房脂肪组织 和 / 或身体其他部分的癌症。其他可受益于本发明提供的治疗方法的乳腺癌有髓状癌、 胶 样癌、 管状癌和炎性乳腺癌。
针对乳腺癌患者的治疗方法有手术、 免疫治疗、 放射治疗、 化学治疗、 内分泌治疗 或它们的组合。局部病灶切除术和乳房切除术是可用于乳腺癌患者的两种可选的手术操 作。
化学治疗采用抗肿瘤药物防止癌细胞增殖、 侵袭、 转移和致死患者。 有多种药物可 治疗乳腺癌， 包括细胞毒性药物如多柔比星、 环磷酰胺、 氨甲蝶呤、 紫杉醇、 塞替派、 米托蒽 醌、 长春新碱或它们的组合。 在剩余的乳腺组织仍保持内分泌敏感性的情况下， 内分泌治疗 可能是一种有效的治疗方法。该疗法所用药物包括他莫昔芬、 醋酸甲地孕酮、 氨鲁米特、 氟 甲睾酮、 亮丙瑞林、 戈舍瑞林和泼尼松。
本发明提供的方法可通过硝基苯甲酰胺化合物给药或采用硝基苯甲酰胺化合物 给药与手术、 放射治疗、 化学治疗或内分泌治疗的联用而给乳腺癌患者带来有益的效果。
卵巢癌
在另一方面， 本发明提供了一种治疗卵巢癌 ( 包括上皮卵巢肿瘤 ) 的方法。优选 地， 本发明提供了一种治疗卵巢癌的方法， 所述卵巢癌选自 ： 卵巢内腺癌和已从卵巢转移至 腹腔的腺癌。 卵巢癌的可行治疗措施有手术、 免疫治疗、 化学治疗、 激素治疗、 放射治疗或它 们的组合。一些可能的手术操作包括肿块切除、 单侧或双侧卵巢切除和 / 或单侧或双侧输 卵管切除。
可采用的抗癌药包括环磷酰胺、 依托泊苷、 六甲蜜胺和异环磷酰胺。 应用药物他莫 西芬的激素疗法可用于萎缩卵巢肿瘤。放射治疗可选择外照射放射治疗和 / 或近距离放射 治疗。
本发明提供的方法可通过硝基苯甲酰胺化合物给药或采用硝基苯甲酰胺化合物 给药与手术、 放射治疗、 化学治疗、 内分泌治疗或其组合的联用而给卵巢癌患者带来有益的 效果。
子宫颈癌
在另一方面， 本发明提供了一种治疗子宫颈癌、 优选治疗子宫颈上皮内的腺癌的 方法。这种癌主要有两种类型 ： 鳞状细胞癌和腺癌。前者占所有子宫颈癌的大约 80-90％， 在外宫颈 ( 最靠近阴道的部分 ) 与内宫颈 ( 最靠近子宫的部分 ) 连接之处发展。后者在 内宫颈的产粘液的腺细胞中发展。 某些子宫颈癌具有上述两种特征而被称为腺鳞癌或混合 癌。 子宫颈癌的主要治疗措施有手术、 免疫治疗、 放射治疗和化学治疗。 一些可能的手 术选择有冷冻手术、 子宫切除术和子宫根治术。对子宫颈癌患者的放射治疗包括外照射放 射治疗或近距离放射治疗。 可以作为化学治疗的一部分施用来治疗子宫颈癌的抗癌药包括 顺铂、 卡铂、 羟基脲、 伊立替康、 博来霉素、 长春新碱、 丝裂霉素、 异环磷酰胺、 氟尿嘧啶、 依托 泊苷、 氨甲蝶呤和它们的组合。
本发明提供的方法可通过硝基苯甲酰胺化合物给药或采用硝基苯甲酰胺化合物 给药与手术、 放射治疗、 化学治疗或其组合的联用而给子宫颈癌患者带来有益的效果。
前列腺癌
在另一方面， 本发明提供治疗前列腺癌的方法， 优选的前列腺癌选自 ： 腺癌或已发 生骨转移的腺癌。前列腺癌发生在环绕尿道起始部的男性前列腺器官中。前列腺含有中数 种细胞型， 但 99％的肿瘤为腺癌， 发生在产生精液的腺细胞中。
针对前列腺癌患者的一些治疗措施有手术、 免疫治疗、 放射治疗、 冷冻手术、 激素 治疗和化学治疗。治疗前列腺癌的可行的手术操作包括耻骨后前列腺癌根治性切除术、 会 阴前列腺癌根治性切除术和腹腔镜前列腺癌根治性切除术。 某些放射治疗选择可以是外照 射放射治疗， 包括三维适形放射治疗、 强度调节放射治疗和适形质子束放射治疗。 近距离放 射治疗 ( 粒子植入或间质放射治疗 ) 也是治疗前列腺癌的可行方法。冷冻手术是用于治疗 局部前列腺癌细胞的另一可能的方法。
激素治疗也称为去雄激素治疗或抑雄激素治疗， 可用于治疗前列腺癌。该疗法的 几种方法是可行的， 包括睾丸切除， 即将产生 90％雄激素的睾丸去除。 另一种方法是施用促 黄体激素 - 释放激素 (LHRH) 类似物以降低雄激素水平。可以应用的 LHRH 类似物包括亮丙 瑞林、 戈舍瑞林、 曲普瑞林和组氨瑞林。还可施用 LHRH 拮抗剂如阿巴瑞克。
另一种可行的疗法是采用阻断体内雄激素活性的抗雄激素药物进行治疗。 这类药
物包括氟他胺、 比卡鲁胺和尼鲁米特。该疗法常与 LHRH 类似物给药或睾丸切除术联合应 用， 这被称为联合雄激素阻断 (CAB)。
化学治疗适用于前列腺肿瘤扩散至前列腺之外及激素治疗无效的情形。 可施用抗 癌药来延缓前列腺癌生长、 减轻症状并改善生活质量， 所述抗癌药如多柔比星、 雌莫司汀、 依托泊苷、 米托蒽醌、 长春碱、 紫杉醇、 多西紫杉醇、 卡铂和泼尼松。
本发明提供的方法可通过硝基苯甲酰胺化合物给药或采用硝基苯甲酰胺化合物 给药与手术、 放射治疗、 化学治疗、 激素治疗或其组合的联用而给前列腺癌患者带来有益的 效果。
胰腺癌
在另一方面， 本发明提供治疗胰腺癌的方法， 优选的胰腺癌选自 ： 胰管组织内的上 皮癌和胰管内的腺癌。
最常见的胰腺癌类型是腺癌， 发生在胰管内层。 胰腺癌的可行治疗措施有手术、 免 疫治疗、 放射治疗和化学治疗。可能的手术治疗选择包括远端或全胰切除术和胰十二指肠 切除术 (Whipple 手术 )。
放射治疗也是胰腺癌患者的一种选择， 特别是外照射放射治疗， 该治疗通过体外 的仪器将放射线集中到肿瘤上。另一选择是在手术过程中施行的术中电子束放射。
化学治疗可用于治疗胰腺癌患者。 适合的抗癌药包括 5- 氟尿嘧啶 (5-FU)、 丝裂霉 素、 异环磷酰胺、 多柔比星、 链佐星、 氯脲菌素和他们的组合。
本发明提供的方法可通过硝基苯甲酰胺化合物给药或采用硝基苯甲酰胺化合物 给药与手术、 放射治疗或化学治疗的联用而给胰腺癌患者带来有益的效果。
膀胱癌
在另一方面， 本发明提供治疗膀胱癌、 优选膀胱内的移行细胞癌的方法。 膀胱癌是 膀胱上皮癌 ( 移行细胞癌 ) 或位于膀胱内层的膀胱上皮细胞中的肿瘤。其余的膀胱癌类型 有鳞状细胞癌、 腺癌和小细胞癌。膀胱上皮癌的几种亚型根据其是非侵袭性的还是侵袭性 的以及是乳头状的还是扁平状的来划分。非侵袭性肿瘤位于膀胱最里层的膀胱上皮中， 而 侵袭性肿瘤由膀胱上皮扩散至膀胱主要肌壁的较深层中。 侵袭性乳头状膀胱上皮癌呈细指 样突起， 分支到膀胱的中空的中心部位， 还向外生长进入膀胱壁。 非侵袭性乳头状膀胱上皮 肿瘤向膀胱中心生长。非侵袭性扁平状膀胱上皮肿瘤 ( 也称作原位扁平癌 ) 局限于最靠近 膀胱内空心部位的细胞层， 而侵袭性扁平状膀胱上皮癌则侵入膀胱的较深层， 特别是肌肉 层。
治疗膀胱癌可采用手术、 放射治疗、 免疫治疗、 化学治疗或上述方法的联用。一些 可行的手术选择有经尿道切除、 膀胱切除术或膀胱根治术。对于膀胱癌的放射治疗包括外 照射放射治疗和近距离放射治疗。
免疫治疗是另一种可用于治疗膀胱癌患者的方法。该方法通常在膀胱内进行， 通 过导管将治疗药物直接送达膀胱。 一种方法是采用卡介苗 (BCG)， 将有时用于结核接种的细 菌通过导管直接给予膀胱。机体产生针对细菌的免疫反应， 由此攻击并杀死癌细胞。
免疫治疗的另一种方法是施用干扰素、 调节免疫反应的糖蛋白。干扰素 α 常用于 治疗膀胱癌。
治疗膀胱癌的化学治疗中可以使用的抗癌药包括塞替派、 氨甲蝶呤、 长春碱、 多柔比星、 环磷酰胺、 紫杉醇、 卡铂、 顺铂、 异环磷酰胺、 吉西他滨或它们的组合。
本发明提供的方法可通过硝基苯甲酰胺化合物给药或采用硝基苯甲酰胺化合物 给药与手术、 放射治疗、 免疫治疗、 化学治疗或其组合的联用而给膀胱癌患者带来有益的效 果。
急性骨髓性白血病
在另一方面， 本发明提供治疗急性骨髓性白血病 (AML)、 优选外周血急性早幼粒细 胞白血病的方法。 AML 始发于骨髓但能扩散到身体其他部位包括淋巴结、 肝、 脾、 中枢神经系 统和睾丸。 急性是指其发展迅速， 若在几个月内不治疗则会致死。 AML 的特征是未成熟的骨 髓细胞， 通常为粒细胞或单核细胞， 它们持续增殖和集聚。
治疗 AML 可采用免疫治疗、 放射治疗、 化学治疗、 骨髓或外周血干细胞移植或上述 方法的联合。放射治疗包括外照射放射治疗， 可能具有副作用。在治疗 AML 的化学治疗中 可以采用的抗癌药包括阿糖胞苷、 蒽环类抗生素、 蒽二酮、 伊达比星、 柔红霉素、 伊达比星、 米托蒽醌、 硫鸟嘌呤、 长春新碱、 泼尼松、 依托泊苷或它们的组合。
单克隆抗体疗法可用于治疗 AML 患者。小分子或放射性化学物质可在对患者给药 前连接于这些抗体上， 以提供在体内杀死白血病细胞的工具。单克隆抗体吉妥珠单抗奥佐 米星 (gemtuzumabozogamicin) 能够结合 AML 细胞上的 CD33， 可用于治疗无法耐受现有化学 治疗方案的 AML 患者。
骨髓或外周血干细胞移植可用于治疗 AML 患者。可行的移植方案有同种异体或自 体移植。
本发明提供的方法可通过硝基苯甲酰胺化合物给药或采用硝基苯甲酰胺化合物 给药与手术、 放射治疗、 化学治疗或移植治疗的联用而给白血病患者带来有益的效果。
还可采用本发明提供的方法治疗的其他类型白血病包括但不限于急性淋巴细胞 白血病、 急性骨髓性白血病、 慢性淋巴细胞白血病、 慢性骨髓性白血病、 毛细胞白血病、 脊髓 发育不良和骨髓增生障碍。
肺癌
在另一方面， 本发明提供治疗肺癌的方法。最常见的肺癌类型是非小细胞肺癌 (NSCLC)， 约占肺癌的 80-85％， 可分为鳞状细胞癌、 腺癌和大细胞未分化癌。小细胞肺癌占 肺癌的 15-20％。
肺癌的治疗选择包括手术、 免疫治疗、 放射治疗、 化学治疗、 光动力学疗法或上述 方法的联合。治疗肺癌的可行的手术选择有肺段切除术或楔形切除术、 肺叶切除术或全肺 切除术。放射治疗可选外照射放射治疗或近距离放射治疗。
在治疗肺癌的化学治疗中可以采用的部分抗癌药包括顺铂、 卡铂、 紫杉醇、 多西紫 杉醇、 吉西他滨、 长春瑞滨、 伊立替康、 依托泊苷、 长春碱、 吉非替尼、 异环磷酰胺、 氨甲蝶呤 或它们的组合。光动力学疗法 (PDT) 可用于治疗肺癌患者。
本发明提供的方法可通过硝基苯甲酰胺化合物给药或采用硝基苯甲酰胺化合物 给药与手术、 放射治疗、 化学治疗、 光动力学疗法或其组合的联用而给肺癌患者带来有益的 效果。
皮肤癌
在另一方面， 本发明提供治疗皮肤癌的方法。有多种类型的癌症始发于皮肤。最常见的类型是属于非黑色素皮肤癌的基底细胞癌和鳞状细胞癌。 光化性角化病是一种可能 发展为鳞状细胞癌的皮肤病。非黑色素皮肤癌很少扩散到身体其他部位。黑色素瘤是皮肤 癌中最罕见的类型， 更可能会侵袭相邻组织并扩散至身体其他部位。治疗非黑色素瘤和黑 色素瘤皮肤癌及光化性角化病患者的不同类型的治疗方法包括手术、 放射治疗、 化学治疗 和光动力学疗法。 治疗皮肤癌的可行的手术选择有莫氏显微外科手术、 单纯切除、 电干燥法 和刮除术、 冷冻手术、 激光手术。放射治疗可选择外照射放射治疗或近距离放射治疗。其他 正在进行临床试验的治疗类型有生物疗法或免疫治疗、 化学免疫治疗、 氟尿嘧啶局部化学 治疗和光动力学疗法。
本发明提供的方法可通过硝基苯甲酰胺化合物给药或采用硝基苯甲酰胺化合物 给药与手术、 放射治疗、 化学治疗、 光动力学疗法或其组合的联用而给皮肤癌患者带来有益 的效果。
眼癌、 视网膜母细胞瘤
在另一方面， 本发明提供治疗眼视网膜母细胞瘤的方法。视网膜母细胞瘤属恶性 视网膜肿瘤。 尽管视网膜母细胞瘤可在任何年龄段发生， 但最常发生在幼龄儿童中， 通常在 5 岁之前。肿瘤可出现在单眼或双眼。视网膜母细胞瘤通常局限于眼部而不会扩散至相邻 组织或身体其他部位。治疗患者并保持视力的治疗选择包括摘出术 ( 摘眼手术 )、 放射治 疗、 冷冻疗法、 光凝固法、 免疫治疗、 热疗和化学治疗。 放射治疗可选用外照射放射治疗或近 距离放射治疗。 本发明提供的方法可通过硝基苯甲酰胺化合物给药或采用硝基苯甲酰胺化合物 给药与手术、 放射治疗、 冷冻疗法、 光凝固法、 热疗和化学治疗或其组合的联用而给眼视网 膜母细胞瘤患者带来有益的效果。
眼癌、 眼内黑色素瘤
在另一方面， 本发明提供治疗眼内 ( 眼 ) 黑色素瘤的方法。 眼内黑色素瘤是一种罕 见的癌症， 在称作眼色素层的眼内部位存在癌细胞。眼色素层包括虹膜、 睫状体和脉络膜。 眼内黑色素瘤最常发生在中年人中。 眼内黑色素瘤的治疗方法包括手术、 免疫治疗、 放射治 疗和激光治疗。手术是最常用的眼内黑色素瘤治疗方法。可行的手术选择有虹膜切除术、 虹膜小梁切除术、 虹膜睫状体切除术、 脉络膜切除术、 摘出术和眶内容物摘除术。放射治疗 可选择外照射放射治疗或近距离放射治疗。激光治疗是采用高强度的光束破坏肿瘤， 热疗 或光凝固法。
本发明提供的方法可通过硝基苯甲酰胺化合物给药或采用硝基苯甲酰胺化合物 给药与手术、 放射治疗和激光治疗或其组合的联用而给眼内黑色素瘤患者带来有益的效 果。
子宫内膜癌
在另一方面， 本发明提供治疗子宫内膜癌的方法。子宫内膜癌是开始于子宫内 层—子宫内膜—的癌症。 子宫癌和子宫内膜癌的部分实例包括但不限于腺癌、 腺角化癌、 腺 鳞癌、 乳头状浆液性腺癌、 透明细胞癌、 子宫肉瘤、 间质肉瘤、 混合恶性中胚层瘤和平滑肌肉 瘤。
本发明提供的方法可通过硝基苯甲酰胺化合物给药或采用硝基苯甲酰胺化合物 给药与手术、 放射治疗、 化学治疗、 基因治疗、 光动力学疗法、 血管生成抑制疗法、 免疫治疗
或其组合的联用而给子宫内膜癌患者带来有益的效果。
肝癌
在另一方面， 本发明提供治疗原发性肝癌 ( 始发于肝脏的癌症 ) 的方法。原发性 肝癌可发生于成人和儿童。针对原发性肝癌患者可使用不同类型的治疗方法。其中包括手 术、 免疫治疗、 放射治疗、 化学治疗和经皮乙醇注射。 可采用的手术类型有冷冻手术、 部分肝 切除术、 全肝切除术和射频消蚀。放射治疗可选择外照射放射治疗、 近距离放射治疗、 放射 增敏剂或放射性标记抗体。其他类型的治疗方法包括高温疗法和免疫治疗。
本发明提供的方法可通过硝基苯甲酰胺化合物给药或采用硝基苯甲酰胺化合物 给药与手术、 放射治疗、 化学治疗、 经皮乙醇注射、 高温疗法和免疫治疗、 或其组合的联用而 给肝癌患者带来有益的效果。
肾癌
在另一方面， 本发明提供治疗肾癌的方法。 肾癌 ( 也称为肾细胞癌或肾腺癌 ) 是指 在肾小管内层出现恶性细胞的疾病。 治疗肾癌可通过手术、 放射治疗、 化学治疗和免疫治疗 进行。治疗肾癌的可行的手术选择有部分肾切除术、 单纯肾切除术和根治性肾切除术。放 射治疗可选择外照射放射治疗或近距离放射治疗。干细胞移植也可用于治疗肾癌。 本发明提供的方法可通过硝基苯甲酰胺化合物给药或采用硝基苯甲酰胺化合物 给药与手术、 放射治疗、 化学治疗、 免疫治疗和干细胞移植、 或其组合的联用而给肾癌患者 带来有益的效果。
甲状腺癌
在另一方面， 本发明提供治疗甲状腺癌的方法。甲状腺癌是指在甲状腺组织中出 现癌 ( 恶性 ) 细胞的疾病。甲状腺癌的四种主要类型是乳头状癌、 滤泡状癌、 髓样癌和退行 性癌。治疗甲状腺癌可采用手术、 免疫治疗、 放射治疗、 激素治疗和化学治疗。手术是最常 用的甲状腺癌治疗手段。 治疗甲状腺癌的可行的手术选择有叶切除术、 甲状腺近全切术、 甲 状腺全切术和淋巴结切除。 放射治疗可选择外照射放射治疗或可能需要摄入含放射性碘的 液体。激素治疗采用激素来阻断癌细胞生长。在治疗甲状腺癌过程中， 激素可用于阻断机 体产生其他可能会使癌细胞生长的激素。
本发明提供的方法可通过硝基苯甲酰胺化合物给药或采用硝基苯甲酰胺化合物 给药与手术、 手术、 放射治疗、 激素治疗和化学治疗、 或其组合的联用而给甲状腺癌患者带 来有益的效果。
AIDS 相关癌症
AIDS 相关淋巴瘤
在另一方面， 本发明提供治疗 AIDS 相关淋巴瘤的方法。 AIDS 相关淋巴瘤是在患有 获得性免疫缺陷综合征 (AIDS) 的患者的淋巴系统中形成恶性细胞的疾病。AIDS 是由人免 疫缺陷病毒 (HIV) 引起的， 该病毒攻击并削弱机体免疫系统。造成免疫系统无法对抗侵害 机体的感染和疾病。 HIV 病患者发生感染、 淋巴瘤和其他类型癌症的风险增加。 淋巴瘤是影 响淋巴系统白细胞的癌症。淋巴瘤分为两大类 ： 何杰金淋巴瘤和非何杰金淋巴瘤。何杰金 淋巴瘤和非何杰金淋巴瘤都可在 AIDS 患者出现， 但非何杰金淋巴瘤更为普遍。当 AIDS 病 人患上非何杰金淋巴瘤时则被称为 AIDS 相关淋巴瘤。非何杰金淋巴瘤可能为惰性的 ( 生 长缓慢 ) 或侵袭性 ( 生长快速 ) 的。AIDS 相关淋巴瘤通常为侵袭性的。AIDS 相关淋巴瘤
的三种主要类型是弥漫性大 B 细胞淋巴瘤、 B 细胞免疫母细胞淋巴瘤和小无裂细胞淋巴瘤。
对 AIDS 相关淋巴瘤的治疗是将淋巴瘤治疗与 AIDS 治疗相结合。 AIDS 患者的免疫 系统功能减退， 治疗可能会带来进一步损伤。鉴于此原因， 治疗 AIDS 相关淋巴瘤患者的给 药剂量通常会低于无 AIDS 的淋巴瘤患者。 高活性抗逆转录病毒治疗 (HAART) 用于减缓 HIV 的进展。也使用药物来预防和治疗可能较严重的感染。治疗 AIDS 相关淋巴瘤可通过化学 治疗、 免疫治疗、 放射治疗和高剂量化学治疗并干细胞移植。 放射治疗可选择外照射放射治 疗或近距离放射治疗。AIDS 相关淋巴瘤可采用单克隆抗体疗法治疗。
本发明提供的方法可通过硝基苯甲酰胺化合物给药或采用硝基苯甲酰胺化合物 给药与化学治疗、 放射治疗和高剂量化学治疗、 或其组合的联用而给 AIDS 相关淋巴瘤患者 带来有益的效果。
卡波西肉瘤
在另一方面， 本发明提供治疗卡波西肉瘤的方法。 卡波西肉瘤是在皮下组织或嘴、 鼻和肛门内层粘膜中出现癌细胞的疾病。经典的卡波西肉瘤通常在犹太族、 意大利或地中 海后裔的老年男性中发生。该类型卡波西肉瘤进展缓慢， 有时需 10 至 15 年。卡波西肉瘤 可发生在服用免疫抑制剂的病人身上。获得性免疫缺陷综合征 (AIDS) 患者的卡波西肉瘤 被称为传染性卡波西肉瘤。AIDS 患者的卡波西肉瘤一般比其他类型的卡波西肉瘤扩散迅 速， 常常会在身体的许多部位出现。治疗卡波西肉瘤可采用手术、 化学治疗、 放射治疗和免 疫治疗。外放射治疗是治疗卡波西肉瘤的常用方法。治疗卡波西肉瘤的一些可行的手术选 择有局部切除、 电干燥法和刮除术、 和冷冻治疗。
本发明提供的方法可通过硝基苯甲酰胺化合物给药或采用硝基苯甲酰胺化合物 给药与手术、 化学治疗、 放射治疗和免疫治疗、 或其组合的联用而给卡波西肉瘤患者带来有 益的效果。
病毒诱导的癌症
在另一方面， 本发明提供治疗病毒诱导的癌症的方法。几种常见病毒是一些特定 恶性肿瘤病因学的明确或可能的诱因。这些病毒或通常具有潜伏期， 或很少可以变为持续 感染。癌症发生可能与被感染宿主体内病毒活化水平增高相关， 表现为高病毒载量或免疫 控制受损。主要的病毒 - 恶性肿瘤系统包括乙型肝炎病毒 (HBV)、 丙型肝炎病毒 (HCV) 和 肝细胞癌 ； 人类 1 型亲淋巴病毒 (HTLV-1) 和成人 T 细胞白血病 / 淋巴瘤 ； 和人乳头瘤病毒 (HPV) 和子宫颈癌。 一般来说， 这些恶性肿瘤发生在生命的较早期， 通常出现在中年或更早。
病毒诱导的肝细胞癌
HBVA 和 HCV 与肝细胞癌或肝癌的因果关系已由实际的流行病学资料所确定。 它们 都是通过在肝内的慢性复制而作用， 引起细胞死亡与随后的再生。对肝癌患者有不同类型 的治疗措施。它们包括手术、 免疫治疗、 放射治疗、 化学治疗和经皮乙醇注射。可采用的手 术类型有冷冻手术、 部分肝切除术、 全肝切除术和射频消蚀。 放射治疗可选择外照射放射治 疗、 近距离放射治疗、 放射增敏剂或放射性标记抗体。 其他类型的治疗包括高温疗法和免疫 治疗。
本发明提供的方法可通过硝基苯甲酰胺化合物给药或采用硝基苯甲酰胺化合物 给药与手术、 放射治疗、 化学治疗、 经皮乙醇注射、 高温疗法和免疫治疗、 或其组合的联用而 给病毒诱导的肝细胞癌患者带来有益的效果。病毒诱导的成人 T 细胞白血病 / 淋巴瘤
HTLV-1 与成人 T 细胞白血病 (ATL) 的相关性已被确定。 与全世界范围内发现的其 他致癌病毒不同， HTLV-1 具有高度地域限制性， 主要出现在日本南部、 加勒比海、 西非和中 非以及南太平洋岛。因果关系的证据包括在几乎所有 ATL 病例中病毒基因组在载体中的单 克隆整合。HTLV-1 相关恶性肿瘤的危险因素有围产期感染、 高病毒载量和男性。
成人 T 细胞白血病属于血和骨髓的癌症。对成人 T 细胞白血病 / 淋巴瘤的标准治 疗是放射治疗、 免疫治疗和化学治疗。 放射治疗可选择外照射放射治疗或近距离放射治疗。 治疗成人 T 细胞白血病 / 淋巴瘤的其他方法包括免疫治疗和高剂量化学治疗并干细胞移 植。
本发明提供的方法可通过硝基苯甲酰胺化合物给药或采用硝基苯甲酰胺化合物 给药与放射治疗、 化学治疗、 免疫治疗和高剂量化学治疗并干细胞移植、 或其组合的联用而 给成人 T 细胞白血病患者带来有益的效果。
病毒诱导的子宫颈癌
子宫颈感染人乳头瘤病毒 (HPV) 是子宫颈癌的最常见原因。但并非所有感染 HPV 的妇女均会发生子宫颈癌。子宫颈癌一般发展缓慢。在子宫颈出现癌变之前， 宫颈细胞出 现被称为发育异常的变化， 不正常的细胞开始在子宫颈组织中出现。 之后， 癌细胞开始生长 并扩散至宫颈更深处以及临近区域。 子宫颈癌的标准治疗有手术、 免疫治疗、 放射治疗和化 学治疗。可采用的手术类型有锥形切除术、 全子宫切除术、 双侧输卵管 - 卵巢切除术、 根治 性子宫切除术、 盆腔廓清术、 冷冻手术、 激光手术和电圈切除术。放射治疗可选择外照射放 射治疗或近距离放射治疗。
本发明提供的方法可通过硝基苯甲酰胺化合物给药或采用硝基苯甲酰胺化合物 给药与放射治疗、 化学治疗或其组合的联用而给成人子宫颈癌患者带来有益的效果。
中枢神经系统癌
大脑和脊髓肿瘤指作为中枢神经系统 (CNS) 主要成分的组织在颅骨或脊椎骨中 的异常生长。良性肿瘤是非癌性的， 而恶性肿瘤是癌性的。CNS 被包围在坚硬的骨骼 ( 即颅 骨和脊椎 ) 中， 因此无论是良性还是恶性的任何异常生长， 均会加压于敏感组织上而影响 功能。始发于大脑或脊髓的肿瘤被称为原发性肿瘤。大多数原发性肿瘤是由围绕并支持神 经元的细胞的不受控制的生长引起的。在少数个体中， 原发性肿瘤可由特定遗传病 ( 如神 经纤维瘤、 结节性硬化症 ) 或暴露于射线或致癌化学物所致。大多数原发性肿瘤的病因尚 不明确。
诊断脑和脊椎肿瘤的第一步是进行神经学检查。还可借助特殊成像技术 ( 计算机 断层扫描、 磁共振成像、 正电子发射断层成像 )。实验室检测包括 EEG 和腰椎穿刺。组织活 检有助于医生诊断肿瘤类型， 组织活检是从疑似肿瘤中采集组织样品的手术操作。
根据肿瘤可能来源的细胞类型对肿瘤分类。 最常见的成人原发性脑肿瘤来源于脑 内星形胶质细胞， 星形胶质细胞组成血脑屏障并对中枢神经系统提供营养。这类肿瘤称为 神经胶质瘤 ( 星形细胞瘤、 退行性星形细胞瘤或多形性成胶质细胞瘤 )， 占所有中枢神经系 统肿瘤的 65％。 这类肿瘤包括但不限于少突神经胶质瘤、 室管膜瘤、 脑膜瘤、 淋巴瘤、 许旺氏 细胞瘤和髓母细胞瘤。
CNS 神经上皮肿瘤星形细胞的肿瘤， 如星形细胞瘤 ； 退行性 ( 恶性 ) 星形细胞瘤， 如半球的、 间脑的、 眼的、 脑干的、 小脑的 ； 多形性成胶质细胞瘤 ； 毛细胞性星形细胞瘤， 如半球的、 间脑的、 眼 的、 脑干的、 小脑的 ； 室管膜下巨细胞性星形细胞瘤 ； 和多形性黄色星形细胞瘤。少突神经 胶质肿瘤， 如少突神经胶质瘤 ； 和退形性 ( 恶性 ) 少突神经胶质瘤。室管膜细胞肿瘤， 如 室管膜瘤 ； 退行性室管膜瘤 ； 粘液乳头型室管膜瘤 ； 和室管膜下瘤。混合型神经胶质瘤， 如混合型少突星形细胞瘤 ； 退行性 ( 恶性 ) 少突星形细胞瘤 ； 和其他肿瘤 ( 如室管膜 - 星 形细胞瘤 )。未确定来源的神经上皮肿瘤， 如极性成胶质细胞瘤 ； 星形母细胞瘤 ； 和大脑 神经胶质瘤。脉络丛肿瘤， 如脉络丛乳头瘤 ； 和脉络丛癌 ( 退行性脉络丛乳头瘤 )。神经 元性和混合型神经元 - 胶质细胞肿瘤， 如神经节细胞瘤 ； 发育不良性小脑神经节细胞瘤 (Lhermitte-Duclos) ； 神经节神经胶质瘤 ； 间变性 ( 恶性 ) 神经节神经胶质瘤 ； 婴儿结缔组 织增生性神经节神经胶质瘤， 如婴儿结缔组织增生性星形细胞瘤 ； 中枢神经细胞瘤 ； 胚胎 发育不良性神经上皮瘤 ； 嗅神经母细胞瘤 ( 鼻腔神经胶质瘤 )。松果体实质肿瘤， 如松果体 细胞瘤 ； 松果体母细胞瘤 ； 和混合型松果体细胞瘤 / 松果体母细胞瘤。 具有神经母细胞或胶 质母细胞成分的肿瘤 ( 胚胎性肿瘤 )， 如髓上皮瘤 ； 具有多能性分化的原发性神经外胚层肿 瘤， 如髓母细胞瘤 ； 大脑原发性神经外胚层肿瘤 ； 神经母细胞瘤 ； 视网膜母细胞瘤 ； 和室管 膜母细胞瘤。
其他 CNS 肿瘤
鞍区肿瘤， 如垂体腺瘤 ； 垂体癌 ； 和颅咽管瘤。造血细胞肿瘤， 如原发性恶性淋巴 瘤； 浆细胞瘤 ； 和粒细胞肉瘤。生殖细胞肿瘤， 如生殖细胞瘤、 胚胎性癌 ； 卵黄囊瘤 ( 内胚层 窦瘤 ) ； 绒毛膜癌 ； 畸胎瘤 ； 和混合型生殖细胞瘤。脑膜肿瘤， 如脑膜瘤 ； 非典型脑膜瘤 ； 和 间变性 ( 恶性 ) 脑膜瘤。脑膜的非脑膜上皮肿瘤， 如良性间质瘤 ； 恶性间质瘤 ； 原发性黑素 细胞损伤 ； 造血细胞赘生物 ； 和不明确组织来源的肿瘤， 如成血管细胞瘤 ( 成毛细血管细胞 瘤 )。脑神经和脊神经肿瘤， 如许旺氏细胞瘤 ( 神经细胞瘤、 神经鞘瘤 ) ； 神经纤维瘤 ； 恶性 外周神经鞘瘤 ( 恶性许旺氏细胞瘤 )， 如上皮样、 分散间质或上皮分化和黑色素瘤。区域肿 瘤的局部扩张 ； 如神经节细胞瘤 ( 化学感受器瘤 ) ； 脊索瘤 ； 软骨瘤 ； 软骨肉瘤 ； 癌。转移性 肿瘤、 未分类的肿瘤和囊肿及肿瘤样损害， 如 Rathke 裂囊肿 ； 表皮囊肿 ； 皮样囊肿 ； 第三脑 室胶样囊肿 ； 肠原性囊肿 ； 神经胶质囊肿 ； 颗粒细胞肿瘤 ( 迷芽瘤、 垂体细胞瘤 ) ； 下丘脑神 经元错构瘤 ； 鼻部神经胶质异位 ； 和浆细胞肉芽肿。
可用的化疗药包括但不限于 ： 烷基化药物， 如环磷酰胺、 异环磷酰胺、 美法仑、 苯丁 酸氮芥、 BCNU、 CCNU、 氨烯咪胺、 丙卡巴肼、 白消安和塞替派 ； 抗代谢药， 如氨甲蝶呤、 5- 氟尿 嘧啶、 阿糖胞苷、 吉西他滨 (Gemzar )、 6- 巯基嘌呤、 6- 硫代鸟嘌呤、 氟达拉滨和克拉屈滨 ； 蒽环类药物， 如柔红霉素、 多柔比星、 伊达比星、 表柔比星和米托蒽醌 ； 抗生素类药物， 如博 来霉素 ； 喜树碱类药物， 如伊立替康和托泊替康 ； 紫杉烷类药物， 如紫杉醇和多西紫杉醇 ； 以及铂类药物， 如顺铂、 卡铂和奥沙利铂。
治疗手段有手术、 放射治疗、 免疫治疗、 高温治疗、 基因治疗、 化学治疗和放射治疗 联合化学治疗。医生还可给予甾体类药物以减轻 CNS 内部肿胀。
本发明提供的方法可通过硝基苯甲酰胺化合物给药或采用硝基苯甲酰胺化合物 给药与放射治疗、 化学治疗或其组合的联用而给成人子宫颈癌患者带来有益的效果。
外周神经系统癌外周神经系统由从大脑和脊髓发出分支的神经组成。这些神经组成了连接 CNS 和 身体各部分的通信网络。外周神经系统进一步细分为躯体神经系统和内脏神经系统。躯体 神经系统由通向皮肤和肌肉的神经组成， 涉及意识活动。内脏神经系统由连接 CNS 与内脏 器官如心脏、 胃和肠的神经组成。它介导非意识活动。
听神经瘤为良性纤维生长， 来源于平衡神经， 也叫做第八脑神经或前庭蜗神经。 这 类肿瘤是非恶性的， 即不会扩散或转移到身体其他部位。 该肿瘤位于颅骨内深处， 临近脑干 中的重要脑中枢。若肿瘤增大， 会影响其周围与生命功能有关的结构。在大多数病例中， 这 类肿瘤在数年的时期内缓慢生长。
恶性周围神经鞘瘤 (MPNST) 是对应于良性软组织肿瘤如神经纤维瘤和许旺氏细 胞瘤的恶性肿瘤。其最常见于软组织深处， 通常在靠近神经干之处。最常见的部位包括坐 骨神经、 臂神经丛和骶神经丛。最常见的症状为疼痛， 通常促使进行活检。罕见的、 侵袭性、 致死性眼眶肿瘤通常起源于成人三叉神经感觉支。恶性 PNS 肿瘤沿神经扩散累及大脑， 多 数患者在临床诊断后的 5 年以内死亡。MPNST 可以分为三个主要类别 ： 上皮样、 间质或腺样 特征。 部分 MPNST 包括但不限于 ： 伴有软骨分化的皮下恶性上皮样许旺氏细胞瘤、 伴有神经 束膜分化的恶性腺样许旺氏细胞瘤、 恶性外周神经鞘瘤、 具有杆状特征的皮肤上皮样恶性 神经鞘瘤、 表皮上皮样 MPNST、 蝾螈瘤 ( 伴有横纹肌母细胞分化的 MPNST)、 伴有横纹肌母细 胞分化的许旺氏细胞瘤。罕见的 MPNST 病例包括多发性肉瘤组织型， 特别是骨肉瘤、 软骨肉 瘤和血管肉瘤。它们有时难以与软组织的恶性间叶瘤相区别。
其他类型的 PNS 癌包括但不限于恶性纤维细胞瘤、 恶性纤维组织细胞瘤、 恶性脑 膜瘤、 恶性间皮瘤和恶性苗勒管混合瘤。
治疗手段有手术、 放射治疗、 免疫治疗、 化学治疗和放射治疗联合化学治疗。
本发明提供的方法可通过硝基苯甲酰胺化合物给药或采用硝基苯甲酰胺化合物 给药与放射治疗、 化学治疗或其组合的联用而给 PNS 癌患者带来有益的效果。
口腔及口咽癌
中枢神经系统 (CNS) 癌症患者的治疗仍是一项艰巨的任务。诸如下咽癌、 喉癌、 鼻 咽癌、 口咽癌等癌症曾采用手术、 免疫治疗、 化学治疗、 化学治疗联合放射治疗进行治疗。 两 种常用的抑制拓扑异构酶 II 的抗癌药依托泊苷和放线菌素 D 在可用的剂量下不能透过血 脑屏障。
本发明提供的方法可通过硝基苯甲酰胺化合物给药或采用硝基苯甲酰胺化合物 给药与放射治疗、 化学治疗或其组合的联用而给口腔及口咽癌患者带来有益的效果。
胃癌
胃癌是胃内层中细胞发生改变的结果。 胃癌有三种主要类型 ： 淋巴瘤、 胃间质肿瘤 和类癌瘤。淋巴瘤属免疫系统组织的癌症， 有时可出现在胃壁中。胃间质肿瘤从胃壁组织 发展。类癌瘤是胃的激素产生细胞的肿瘤。
胃癌的病因仍有争议。遗传和环境 ( 饮食、 吸烟等 ) 因素的结合均被认为起一定 的作用。 常用的治疗方法包括手术、 免疫治疗、 化学治疗、 放射治疗、 化学治疗联合放射治疗 或生物治疗。
本发明提供的方法可通过硝基苯甲酰胺化合物给药或采用硝基苯甲酰胺化合物 给药与放射治疗、 化学治疗或其组合的联用而给胃癌患者带来有益的效果。睾丸癌
睾丸癌是通常在年轻男性的单侧或双侧睾丸中发生的癌症。 睾丸癌发生在被称为 生殖细胞的特定细胞中。在男性中发生的生殖细胞肿瘤 (GCT) 的两种主要类型是精原细胞 瘤 (60％ ) 和非精原细胞瘤 (40％ )。肿瘤还可发生于睾丸的支持和产激素组织或间质内。 这类肿瘤被称为性腺间质肿瘤。两种主要类型是莱迪希细胞瘤和塞尔托利细胞瘤。继发性 睾丸肿瘤是指始发于其他器官而后扩散至睾丸的肿瘤。淋巴瘤是最常见的继发性睾丸癌。
常规治疗方法包括手术、 免疫治疗、 化学治疗、 放射治疗、 化学治疗联合放射治疗 或生物治疗。有几种药物常用于睾丸癌治疗 ： Platinol( 顺铂 )、 凡毕士或 VP-16( 依托泊 苷 ) 和 Blenoxance( 硫酸博来霉素 )。此外， Ifex( 异环磷酰胺 )、 Velban( 硫酸长春碱 ) 等 也可使用。
本发明提供的方法可通过硝基苯甲酰胺化合物给药或采用硝基苯甲酰胺化合物 给药与放射治疗、 化学治疗或其组合的联用而给睾丸癌患者带来有益的效果。
胸腺癌
胸腺是位于胸腔上 / 前部的小器官， 从喉底延伸至心脏前。胸腺含有两种主要的 细胞类型 ： 胸腺上皮细胞和淋巴细胞。胸腺上皮细胞是胸腺瘤和胸腺癌的原发细胞。胸腺 或淋巴结中的淋巴细胞可变为恶性的， 并且发展为被称为何杰金病和非何杰金淋巴瘤的癌 症。胸腺还含有另一种更少见的细胞类型， 叫做 Kulchitsky 细胞， 或通常释放某些激素的 神经内分泌细胞。这类细胞可发展成被称为类癌或类癌肿瘤的癌症， 这种肿瘤通常会释放 相同类型的激素， 与来源于体内其他部位的神经内分泌细胞的其他肿瘤相似。
常规治疗方法包括手术、 免疫治疗、 化学治疗、 放射治疗、 化学治疗联合放射治疗 或生物治疗。曾用于治疗胸腺瘤和胸腺癌的抗癌药有多柔比星 ( 亚德里亚霉素 )、 顺铂、 异 环磷酰胺和皮质类固醇 ( 泼尼松 )。通常会联合应用这些药物以提高有效性。治疗胸腺癌 的药物联用包括顺铂、 多柔比星、 依托泊苷和环磷酰胺联用， 以及顺铂、 多柔比星、 环磷酰胺 和长春新碱联用。
本发明提供的方法可通过硝基苯甲酰胺化合物给药或采用硝基苯甲酰胺化合物 给药与放射治疗、 化学治疗或其组合的联用而给胸腺癌患者带来有益的效果。
联合治疗
本发明一方面提供采用不同的治疗方案组合治疗癌症的方法。例如， 这种组合包 括但不限于， 一种或多种硝基苯甲酰胺化合物与一种或多种不同的抗肿瘤化疗药、 化学预 防药、 和 / 或副作用限制药联用。
抗肿瘤化疗药
本发明中采用的适宜的抗肿瘤化疗药包括但不限于烷基化药、 抗代谢药、 天然抗 肿瘤药、 激素抗肿瘤药、 血管生成抑制剂、 促分化剂、 RNA 抑制剂、 抗体或免疫治疗药、 基因治 疗药、 小分子酶抑制剂、 生物反应调节剂和抗转移药。
烷基化药物
已知烷基化药物是通过对大分子如癌细胞 DNA 进行烷基化而起作用的， 通常是强 亲电子物质。该活性可破坏 DNA 合成和细胞分裂。适合本文应用的烷基化药物实例包括氮 芥及其类似物和衍生物， 包括环磷酰胺、 异环磷酰胺、 苯丁酸氮芥、 雌莫司汀、 盐酸双氯乙基 甲胺、 美法仑和尿嘧啶氮芥。其他烷基化药物实例包括烷基磺酸盐类 ( 如白消安 )、 亚硝基脲类 ( 如卡莫司汀、 洛莫司汀和链佐星 )、 三氮烯类 ( 如达卡巴嗪和替莫唑胺 )、 乙撑亚胺 / 甲基蜜胺类 ( 如六甲蜜胺和塞替派 ) 和甲基肼衍生物 ( 如丙卡巴肼 )。烷基化药物类还包 括类烷基化含铂药物， 包括卡铂、 顺铂和奥沙利铂。
抗代谢药
抗代谢抗肿瘤药在结构上与天然代谢物相似， 可参与癌细胞的正常代谢过程， 如 核酸和蛋白质合成。 但他们又与天然代谢物有充分的区别， 从而干扰癌细胞的代谢过程。 本 发明中使用的合适的抗代谢抗肿瘤药可以根据其影响的代谢过程进行分类， 包括但不限于 叶酸、 嘧啶、 嘌呤和胞苷的类似物和衍生物。 适合本文应用的叶酸家族药物成员包括但不限 于氨甲蝶呤 ( 氨克生 )、 培美曲塞和它们的类似物和衍生物。 适合本文使用的嘧啶类药物包 括但不限于阿糖胞苷、 氟尿苷、 氟尿嘧啶 (5- 氟尿嘧啶 )、 卡培他滨、 吉西他滨和它们的类似 物和衍生物。适合本文使用的嘌呤类药物包括但不限于巯基嘌呤 (6- 巯基嘌呤 )、 喷司他 丁、 硫鸟嘌呤、 克拉屈滨和它们的类似物和衍生物。 适合本文使用的胞苷啶类药物包括但不 限于阿糖胞苷 ( 胞嘧啶阿糖苷 )、 阿扎胞苷 (5- 氮杂胞苷 ) 和它们的类似物和衍生物。
天然抗肿瘤药
天然抗肿瘤药包括抗有丝分裂药、 抗生素抗肿瘤药、 喜树碱类似物和酶。 适合本文 使用的抗有丝分裂药物包括但不限于长春花生物碱如长春碱、 长春新碱、 长春地辛、 长春瑞 滨和它们的类似物和衍生物。上述药物来源于马达加斯加长春花植物， 通常对于 M 期是细 胞周期特异性的， 与癌细胞微管中的微管蛋白结合。其他适合本文使用的抗有丝分裂药物 有鬼臼毒素类， 包括但不限于依托泊苷、 替尼泊苷和它们的类似物和衍生物。 这类药物主要 针对细胞周期中的 G2 期和 S 期晚期。 天然抗肿瘤药的药物还包括抗生素抗肿瘤药。 抗生素抗肿瘤药是具有抗肿瘤特性 的抗微生物药， 通常可与癌细胞 DNA 相互作用。适合本文使用的抗生素抗肿瘤药包括但不 限于博来霉素、 更生霉素、 多柔比星、 伊达比星、 表柔比星、 丝裂霉素、 米托蒽醌、 喷司他丁、 普卡霉素和它们的类似物和衍生物。
天然抗肿瘤药分类还包括喜树碱类似物和衍生物， 它们适合在本发明中使用， 包 括喜树碱、 托泊替康和伊立替康。这类药物主要通过靶向核酶拓扑异构酶 I 而起作用。天 然抗肿瘤药的另一个亚类是酶， L- 天冬酰胺酶及其变体。L- 天冬酰胺酶通过催化循环中的 天冬酰胺水解为天冬氨酸和氨， 去除某些癌细胞内的 L- 天冬酰胺而发挥作用。
激素抗肿瘤药
激素抗肿瘤药主要作用于激素依赖的与前列腺组织、 乳腺组织、 子宫内膜组织、 卵 巢组织、 淋巴瘤和白血病有关的癌细胞。这些组织可对诸如糖皮质激素类、 黄体酮类、 雌激 素类和雄激素类的药物类别产生反应并依赖于这些药物。 作为激动剂或拮抗剂的类似物和 衍生物均适合在本发明中用于治疗肿瘤。适合本文应用的糖皮质激素激动剂 / 拮抗剂的 实例有地塞米松、 氢化可的松、 皮质酮、 泼尼松、 米非司酮 (RU486)、 它们的类似物和衍生物。 适合本文应用的黄体酮激动剂 / 拮抗剂亚类药物包括但不限于羟孕酮、 甲羟孕酮、 醋酸甲 地孕酮、 米非司酮 (RU486)、 ZK98299、 它们的类似物和衍生物。适合本文应用的雌激素激动 剂 / 拮抗剂亚类药物的实例包括但不限于雌激素、 他莫西芬、 托瑞米芬、 RU58668、 SR16234、 ZD164384、 ZK191703、 氟维司群、 它们的类似物和衍生物。适合本文应用的抑制雌激素产生 的芳香酶抑制剂的实例包括但不限于雄甾烯二酮、 福美坦、 依西美坦、 氨鲁米特、 阿那曲唑、
来曲唑、 它们的类似物和衍生物。适合本文应用的雄激素激动剂 / 拮抗剂亚类药物的实例 包括但不限于睾酮、 双氢睾酮、 氟甲睾酮、 睾内酯、 庚酸睾酮、 丙酸睾酮、 促性腺激素释放激 素激动剂 / 拮抗剂 ( 如亮丙瑞林、 戈舍瑞林、 曲普瑞林、 布舍瑞林 )、 己烯雌酚、 阿巴瑞克、 环 丙孕酮、 氟他胺、 尼鲁米特、 比卡鲁胺、 它们的类似物和衍生物。
血管生成抑制剂
血管生成抑制剂通过抑制肿瘤的血管生成而发挥作用。血管生成抑制剂包括种 类广泛的药物， 包括小分子药物、 抗体药物和针对 RNA 功能的药物。适合本文应用的血管 生成抑制剂的实例包括但不限于兰尼单抗 (ranibizumab)、 贝伐单抗、 SU11248、 PTK787、 ZK222584、 CEP-7055、 angiozyme、 达肝素、 沙利度胺、 苏拉明、 CC-5013、 考布他汀 A4 磷酸酯、 LY317615、 大豆异黄酮、 AE-941、 干扰素 α、 PTK787/ZK222584、 ZD6474、 EMD 121974、 ZD6474、 BAY 543-9006、 塞来考昔、 氢溴酸卤夫酮、 贝伐单抗、 它们的类似物、 变体或衍生物。
促分化药
促分化药通过诱导癌细胞分化的机制抑制肿瘤生长。 适合本文应用的该类药物的 一个亚类包括但不限于维生素 A 类似物或维甲酸类， 和过氧化物酶体增生物活化受体激动 剂 (PPAR)。适合本文应用的维甲酸类包括但不限于维生素 A、 维生素 A 醛 ( 视黄醛 )、 视黄 酸、 芬维 A 胺、 9- 顺式 - 视黄酸、 13- 反式 - 视黄酸、 全反式视黄酸、 异维 A 酸、 维 A 酸、 棕榈 酸视黄酯、 它们的类似物和衍生物。适合本文应用的 PPAR 激动剂包括但不限于曲格列酮、 环格列酮、 tesaglitazar、 它们的类似物和衍生物。
RNA 抑制剂
某些 RNA 抑制剂可用于抑制与癌症表型相关的信使 RNA( “mRNA” ) 的表达或翻译。 适合本文应用的这类药物的实例包括但不限于短干扰 RNA(“siRNA” )、 核酶和反义寡核苷 酸。适合本文应用的 RNA 抑制剂的具体实例包括但不限于 Cand5、 Sirna-027、 福米韦生和 angiozyme。
抗体 / 免疫治疗药物
抗体药物可与癌细胞中选择性表达的靶标结合， 从而利用复合物杀死与该靶标相 关的细胞， 或引起机体免疫应答而破坏癌细胞。免疫治疗药物包括多克隆抗体或单克隆抗 体。抗体包括非人类的动物 ( 如小鼠 ) 和人类的组分， 或包括完全为人类的组分 ( “人源化 抗体” )。适合本文应用的单克隆免疫治疗药物的实例包括但不限于利妥昔单抗、 托西莫单 抗、 替伊莫单抗， 其靶标为 CD-20 蛋白。适合本文应用的其他实例包括曲妥珠单抗、 依决洛 单抗、 贝伐单抗、 西妥昔单抗、 癌胚抗原抗体、 吉妥珠单抗、 阿仑珠单抗、 mapatumumab、 帕尼 单抗 (panitumumab)、 EMD 72000、 TheraCIM hR3、 2C4、 HGS-TR2J 和 HGS-ETR2。
基因治疗药物
基因治疗药物将基因拷贝插入特定的一组患者细胞中， 并可同时靶向癌细胞和非 癌细胞。 基因治疗的目标是将改变的基因替换为功能基因、 刺激患者对癌症的免疫应答、 使 癌细胞对化学治疗更为敏感、 放置 “自杀” 基因于癌细胞中、 或抑制血管生成。基因可通过 病毒、 脂质体或其他媒介物或载体递送至目标细胞。 这可如下实现 ： 将基因 - 载体组合物直 接注射到患者体内， 或在体外将来自体内的细胞感染后再输回患者体内。这些组合物均适 合本发明应用。
小分子酶抑制剂一些小分子治疗药物能靶向于酪氨酸激酶酶活性或某些细胞受体如表皮生长因 子受体 (“EGFR” ) 或血管内皮生长因子受体 (“VEGFR” ) 的下游信号转导信号。小分子治 疗剂的这种靶向可起到抗癌作用。适合本文应用的这类药物的实例包括但不限于伊马替 尼、 吉非替尼、 埃罗替尼、 拉帕替尼 (lapatinib)、 卡纽替尼 (canertinib)、 ZD6474、 索拉非 尼 (BAY 43-9006)、 ERB-569 和它们的类似物和衍生物。
生物反应调节药物
一些蛋白质或小分子药物可用于抗癌治疗， 它们通过直接的抗肿瘤作用或间接作 用发挥作用。 适合本文应用的直接作用药物的实例包括但不限于促分化药如维甲酸类和维 甲酸衍生物。 适合本文应用的间接作用药物包括但不限于调节或增强免疫或其他系统的药 物如干扰素、 白介素、 造血生长因子 ( 如促红细胞生成素 ) 和抗体 ( 单克隆抗体和多克隆抗 体 )。
抗转移药物
癌细胞从原发肿瘤部位扩散至身体其他部位的过程称为癌症转移。一些药物具 有抗转移性质， 可用于抑制癌细胞扩散。适合本文应用的这类药物的实例包括但不限于马 立马司他、 贝伐单抗、 曲妥珠单抗、 利妥昔抗体、 埃罗替尼、 MMI-166、 GRN163L、 捕获 - 杀伤肽 (hunter-killer peptide)、 金属蛋白酶组织抑制剂 (TIMP)、 它们的类似物、 衍生物和变体。
化学预防药
一些药物能够用于预防癌症的最初发生， 或防止复发或转移。这类化学预防药与 一种或多种其他抗癌药 ( 包括硝基苯甲酰胺化合物 ) 联用能够治疗和预防癌症的复发。适 合本文应用的化学预防药的实例包括但不限于他莫西芬、 雷洛昔芬、 替勃龙、 二碳磷酸盐化 合物、 伊班膦酸盐、 雌激素受体调节剂、 芳香酶抑制剂 ( 来曲唑、 阿那曲唑 )、 黄体激素释放 激素激动剂、 戈舍瑞林、 维生素 A、 视黄醛、 视黄酸、 芬维 A 胺、 9- 顺式 - 视黄酸、 13- 顺式 - 视 黄酸、 全反式视黄酸、 异维 A 酸、 维 A 酸、 维生素 B6、 维生素 B 12、 维生素 C、 维生素 D、 维生素 E、 环加氧酶抑制剂、 非甾体抗炎药 (NSAID)、 阿司匹林、 布洛芬、 塞来考昔、 多酚、 多酚 E、 绿 茶提取物、 叶酸、 葡萄糖二酸、 干扰素 α、 anethole dithiolethione、 锌、 吡哆醇、 非那雄胺、 多沙唑嗪、 硒、 吲哚 -3- 甲醇、 α- 二氟甲基鸟氨酸、 类胡萝卜素、 β- 胡萝卜素、 番茄红素、 抗 氧化剂、 辅酶 Q10、 类黄酮、 槲皮素、 姜黄素、 儿茶素、 表没食子儿茶素没食子酸酯、 N- 乙酰半 胱氨酸、 吲哚 -3- 甲醇、 六磷酸肌醇、 异黄酮、 葡萄糖酸、 迷迭香、 大豆、 沙巴棕和钙。另一种 适合本发明应用的化学预防药的实例是癌症疫苗。 这可以通过用接种程序所靶向的所有或 部分癌细胞类型对患者进行免疫而产生。
副作用限制药
在硝基苯甲酰胺化合物单独使用或联合其他抗肿瘤化合物治疗癌症时， 可同时施 用能够减轻抗肿瘤药产生的副作用的药物。适合本文应用的此类药物包括但不限于止吐 剂、 抗粘膜炎药、 疼痛控制药物、 感染控制药物和抗贫血 / 抗血小板减少药。适合本文应用 的止吐剂的实例包括但不限于 5- 羟色胺 3 受体拮抗剂、 甲氧氯普胺、 类固醇、 劳拉西泮、 昂 丹司琼、 大麻酚类、 它们的类似物和衍生物。 适合本文应用的抗粘膜炎药的实例包括但不限 于帕利夫明 ( 角化细胞生长因子 )、 胰高血糖素样肽 2、 替度鲁肽 (teduglutide)、 L- 谷氨 酰胺、 氨磷汀和成纤维细胞生长因子 20。适合本文应用的疼痛控制药物的实例包括但不限 于阿片样物质、 阿片制剂和非甾体抗炎化合物。适合本文应用的用于控制感染的药物的实例包括但不限于抗菌药如氨基糖甙类、 青霉素类、 头孢菌素类、 四环素类、 克林霉素、 林可霉 素、 大环内酯类、 万古霉素、 碳青霉烯类、 单酰胺菌素类、 氟喹诺酮类、 磺胺类、 呋喃妥因类、 它们的类似物和衍生物。 适合本文应用的可治疗化学治疗相关贫血或血小板减少的药物实 例包括但不限于促红细胞生成素和促血小板生成素。
还有几种另外的疗法适合与本文描述的硝基苯甲酰胺化合物和其他化合物联 用。例如， 参见 Goodman 和 Gilman 的 ThePharmacological Basis of Therapeutics 11th ed.Brunton LL， Lazo JS， and Parker KL， ed.McGraw-Hill， New York， 2006。
制剂、 给药途径和有效剂量
本发明的另一个方面涉及包含硝基苯甲酰胺化合物的药物组合物的制剂及给药 途径。这些药物组合物可用于按照以上详述的方法治疗癌症。
通式 Ia 的化合物可以作为前药提供， 和 / 或可以允许在给药后在体内互变为亚硝 基苯甲酰胺形式。因此， 硝基苯甲酰胺形式和 / 或亚硝基苯甲酰胺形式、 或药学可接受的盐 均可用于开发在本发明中应用的制剂。 并且， 在部分实施方式中， 该化合物可与一种或多种 其他化合物联合使用， 或以一种或多种其他形式使用。 例如， 一种制剂可包含特定比例的硝 基苯甲酰胺化合物和它的酸形式， 该比例根据各自形式的相对功效和预期适应症来确定。 两种形式可共同配制在同一剂量单元中， 如在一份乳膏、 栓剂、 片剂、 胶囊或欲溶于饮料的 粉包中 ； 或可以将每种形式分别配制于独立的单元中， 如两份乳膏、 两份栓剂、 两份片剂、 两 份胶囊、 一份片剂与一份溶解该片剂的液体、 一份粉包与一份溶解该粉末的液体等等。
包含硝基苯甲酰胺化合物与另一种活性药物的组合的组合物是有效的。两种化 合物和 / 或一种化合物的两种形式可共同配制在同一剂量单元中， 如在一份乳膏、 栓剂、 片 剂、 胶囊或欲溶于饮料的粉包中 ； 或可以将每种形式分别配制于独立的单元中， 例如两份乳 膏、 栓剂、 片剂、 两份胶囊、 一份片剂与一份溶解该片剂的液体、 一份粉包与一份溶解该粉末 的液体等等。
术语 “药学可接受的盐” 是指本发明中使用的保留了化合物的生物学有效性和特 性的盐， 并且它在生物学方面或其他方面是符合需要的。 例如， 在治疗癌症时药学可接受的 盐不会干扰本发明化合物的有益效果。
典型的盐为无机离子盐， 例如钠离子、 钾离子、 钙离子和镁离子盐。这些盐包括无 机酸或有机酸的盐， 如盐酸、 氢溴酸、 磷酸、 硝酸、 硫酸、 甲磺酸、 对甲苯磺酸、 醋酸、 延胡索 酸、 丁二酸、 乳酸、 苦杏仁酸、 苹果酸、 枸橼酸、 酒石酸或马来酸的盐。此外， 若本发明使用的 化合物含有羧基基团或其他酸性基团， 则可利用无机碱或有机碱将其转化为药学可接受的 加成盐。 合适的碱的实例包括氢氧化钠、 氢氧化钾、 氨、 环己胺、 二环己胺、 乙醇胺、 二乙醇胺 和三乙醇胺。
对于经口给药， 可将活性化合物与本领域公知的药学可接受的载体组合， 从而容 易地配制该化合物。这些载体可使本发明的化合物制成片剂 ( 包括咀嚼片 )、 丸剂、 锭剂、 胶囊、 糖锭、 硬糖剂、 液体剂、 凝胶剂、 糖浆、 膏剂、 粉剂、 混悬剂、 酏剂、 薄片等， 供所治疗的患 者经口摄取。 该制剂可包含药学可接受的载体， 包括固体稀释剂或填充剂、 无菌水性介质和 各种无毒有机溶剂。通常， 所包含的本发明化合物的浓度水平占口服剂量形式组合物总重 量的约 0.5％、 约 5％、 约 10％、 约 20％、 或约 30％至约 50％、 约 60％、 约 70％、 约 80％或约 90％， 其量应足以提供预期的剂量单位。水性混悬剂可含有硝基苯甲酰胺化合物和药学可接受的赋形剂， 如悬浮剂 ( 如甲 基纤维素 )、 湿润剂 ( 如卵磷脂、 溶血卵磷脂和 / 或长链脂肪醇 )、 以及着色剂、 防腐剂、 香味 剂等。
在部分实施方式中， 由于 ( 例如 ) 存在大的亲脂性部分， 可能需要采用油或非水性 溶剂将化合物制成溶液。 可选地， 可以使用乳剂、 混悬剂或其他制剂， 例如脂质体制剂。 对于 脂质体制剂， 任何制备治疗疾病的脂质体的已知方法均可采用。参见， 例如 Bangham 等人， J.Mol.Biol， 23 ： 238-252(1965) 和 Szoka 等人， Proc.Natl Acad.Sci75 ： 4149-4198(1978)， 以引用方式并入本文。还可在脂质体上连接配体， 以将组合物引导至特定的作用部位。本 发明的化合物也可添加到食品中， 如奶油干酪、 黄油、 色拉调料或冰淇淋， 以利于溶解、 给药 和 / 或某些患者群体的依从性。
口服用药物制剂可以应用固体赋形剂获得， 任选地在加入适当的辅料 ( 需要时 ) 后， 研磨所得混合物并加工颗粒混合物， 得到片剂或糖衣丸核心。适合的赋形剂尤其包括 ： 填充剂， 如糖， 包括乳糖、 蔗糖、 甘露醇或山梨醇 ； 调味成分， 纤维素制剂， 例如玉米淀粉、 小 麦淀粉、 稻米淀粉、 土豆淀粉、 明胶、 西黄蓍胶、 甲基纤维素、 羟丙基甲基纤维素、 羧甲基纤维 素钠、 和 / 或聚乙烯吡咯烷酮 (PVP)。若需要可加入崩解剂， 如交联聚乙烯吡咯烷酮、 琼脂、 海藻酸或它的盐如海藻酸钠。所述化合物也可制成缓释制剂。
糖衣丸核心可以进行适当包衣。 为此目的， 可采用浓缩糖溶液， 任选地可含有阿拉 伯胶、 滑石、 聚乙烯吡咯烷酮、 聚羧乙烯胶、 聚乙二醇、 和 / 或二氧化钛、 漆溶液、 和适合的有 机溶剂或溶剂混合物。 片剂或糖衣丸的包衣中可加入染料或色素以区分或辨别活性化合物 剂量的不同组合。
可用于口服的药物制剂包括由明胶制成的推合胶囊， 以及由明胶和增塑剂如甘油 或山梨醇制成的封闭软胶囊。推合胶囊可包含活性成分与填充剂的混合物， 所述填充剂例 如是乳糖、 粘合剂如淀粉、 和 / 或润滑剂如滑石或硬脂酸镁、 和任选的稳定剂。在软胶囊中， 活性化合物可以溶解或混悬于适当的液体如脂肪油、 液体石蜡或液体聚乙二醇中。此外还 可加入稳定剂。所有口服制剂的剂量都应适合服用。
为进行注射， 本发明的抑制剂可以在水溶液中配制， 优选地在生理相容的缓冲液 如 Hank’ s 液、 Ringer’ s 液或生理盐水中配制。该组合物还可包含一种或多种赋形剂， 例如防腐剂、 增溶剂、 填充剂、 润滑剂、 稳定剂、 白蛋白等。配制方法在本领域内公知， 例如 MackPublishing Co.， Easton P 出版的 Remington’ s Pharmaceutical Sciences 最新版本 中公开的方法。 所述化合物还可配制用于经粘膜给药、 含服给药、 吸入给药、 胃肠外给药、 经 皮给药和直肠给药。
除上述制剂外， 所述化合物还可配制成储库型 (depot) 制剂。这种长效制剂可以 通过植入或经皮递送 ( 例如皮下或肌肉内 )、 肌内注射或使用透皮贴来施用。例如， 化合物 可与以下成分一同配制， 适合的多聚物或疏水物质 ( 例如在可接受油中的乳剂 ) 或离子交 换树脂、 或微溶性衍生物例如微溶的盐。
适合本发明应用的药物组合物包括这样的组合物 ： 其中的活性成分以有效量存 在， 即， 其含量在本文描述的至少一种癌症中有效获得治疗和 / 或预防益处。用于特定应用 的实际有效量取决于以下因素 ： 所治疗的疾病、 治疗对象的状况、 制剂和给药途径， 以及本 领域技术人员熟知的其他因素。 本领域技术人员根据本文公开内容可以很容易地确定硝基苯甲酰胺化合物的有效量， 并且可采用常规优化技术进行确定。 实施例 实施例 1
体外实验 - 细胞毒性检测
不同来源不同类型的癌细胞系或原代细胞接种于 48 孔板 (5×104) 或 96 孔板 (2×104) 中。细胞在适宜培养基中培养。培养物置于 37℃、 充满 95％ O2/5％ CO2 潮湿空气 的孵箱中。 细胞接种后 (24 小时 )， 去除培养基， 换用含不同浓度 INO2BA 或 INH2BP 的培养基 在含或不含 200μM BSO 的情况下继续培养。 37℃孵育 6 天后， 采用 Cell Titer-Blue， Cell Viability Assay(Promega) 测定细胞活力。 ( 参见 O’ Brien， J. 等人 (2000)Investigation of the Alamar Blue(resazurin)fluorescent dye for the assessment of mammalian cellcytotoxicity.Eur.J.Biochem.267 ， 5421-26 和 Gonzalez ， R.K. 和 Tarloff ， J.B.(2001)Evaluation of hepatic subcellular fractions for Alamar Blueand MTT reductase)。该检测方法引入荧光比色 / 比色生长指示剂， 其原理是基于活体染料还原而 进行检测。细胞毒性通过生长抑制来测定。
细胞毒性还采用活细胞计数进行检测。用 PBS 冲洗单层细胞， 然后加入 0.25％胰 蛋白酶和 0.02％ EDTA 短时间孵育， 由此收集细胞。然后合并细胞， 通过离心洗涤 2 次， 并 重悬在 PBS 中。用 0.2％台盼蓝盐溶液染色少量细胞混悬液， 在血细胞计数仪上检查细胞， 确定细胞数和活力。参见 Kerley-Hamilton 等人 (2005)p53-dominanttranscriptional response to cisplatin in testicular germ cell tumor-derivedhuman embyronal carcinoma， 和 Cheol 等 人 (2005)Induction ofapoptosis and inhibition of cyclooxygenase-2expression by N-methyl-N’ -nitro-N-nitrosoguanidine in human leukemia cells。
不同细胞系的细胞增殖测定结果列于图 1-10 中。
实施例 2
采用 BrdU-ELISA 检测细胞增殖
在不同浓度的试验物质 ( 药物 ) 的存在下， 细胞在 37 ℃的潮湿空气中以终体积 100μl/ 孔于黑色 96 孔 MP( 组织培养级别 ； 透明平底 ) 中孵育。若细胞以 100μl/ 孔培养， 则以 10μl/ 孔加入 BrdU 标记溶液 ( 终浓度 ： 10μM BrdU)， 细胞于 37℃继续孵育 2 至 24 小时 ( 若细胞以 200μl/ 孔培养， 则以 20μl/ 孔加入 BrdU 标记溶液 )。MP 以 300×g 离心 10 分钟， 用吸管吸取去除标记的培养基。细胞用吹风机干燥约 15 分钟， 或于 60℃干燥 1h。 以 200μl/ 孔向细胞中加入 FixDenat， 于 15-25 ℃孵育 30 分钟。通过轻弹并轻叩完全去 除 FixDenat 溶液。以 100μl/ 孔加入抗 -BrdU-POD 工作液。于 15-25 ℃孵育约 90 分钟。 可选地， 孵育时间可根据具体要求在 30-120 分钟之间。通过轻弹除去抗体偶联物， 各孔用 200-300μl/ 孔洗液冲洗三次。 轻叩去除洗液。 透明底部用黑色粘合箔封上， 用多通道移液 器以 100μl/ 孔向各孔加入底物溶液。采用带光电倍增管的微孔板光度计测量样品的光发 射。
使用不同细胞系和药物的该细胞增殖检测的结果示于图 11 中。
实施例 3
实验设计BP+BSO 与 BA 联用
向 100 只雌性 NU/NU-nuBR 小鼠 (Charles River， 5-6 周 ) 中植入 0.72mg 17-β 雌二醇 ( 人 ) 丸 (pellet)， 用夹子进行耳部标记， 于肿瘤细胞植入前 24-48 小时称重。将肿 7 瘤细胞 BT474(2×10 细胞 / 小鼠 ) 注射到肩胛下乳腺脂肪垫中 (0.2ml 体积 )。第 21 天开 始测径， 此后每周测量三次 ( 周一、 周三、 周五 )。动物按有无肿瘤以及肿瘤体积分开。从植 入后第 3 周开始每周测量动物体重 2 次 ( 周一和周五 )。当肿瘤大小在 150-250mm3( 长 × 宽 × 高 ) 时开始进行药物处理。 药物和载体施用方式为管饲每天两次 (BP+BSO)， 腹膜内注 射每天一次 (BA)， 连续 5 天。下个循环开始前有两天的休息期。实验计划若不出现意料之 外的毒性， 则动物接受三个周期 ( 每个 5 天 ) 的处理。动物安乐死标准为体重减轻超出初 始重量的 15％或出现某些症状。药物以 5ml/kg 的体积通过管饲和腹膜内给药。药物和载 体在箔纸覆盖的小瓶中于 4℃保存。该实验的结果示于图 12 中。
实施例 4
采用人卵巢癌细胞 (OVCAR) 异种移植裸小鼠评价化合物的作用。
雌性 NU/NU 37-BU-04-BAC 小鼠 (Charles River， 5-6 周 ) 用夹子进行耳部标记， 于 6 肿瘤细胞植入前 24-48 小时称重。将肿瘤细胞 Ovcar3(5×10 细胞 / 小鼠 ) 皮下植入到雌 性裸小鼠宿主的肩胛下乳腺脂肪垫中。肿瘤细胞植入后 7 天开始测径， 此后每周测量两次 ( 周一和周五 )。动物按有无肿瘤以及肿瘤体积分开。动物每周称重一次。当肿瘤的最大 直径在 0.4-0.5cm 时开始进行药物处理。4- 碘 -3- 硝基苯甲酰胺 (BA)( 溶于 50μl 100％ DMSO/ 小鼠 ) 和载体 (50μl 100％ DMSO/ 小鼠 ) 腹膜内注射每天两次， 连续 5 天。下个循 环开始前有两天的休息期。
实验设计
*实验结果示于图 13 和 14 中。
实施例 5
本实验的目的是评价香豆素类似物 6- 氨基 --5- 碘 -2H-1- 苯并吡喃 -2- 酮 (BP) 对乳腺 (MDA MB 231) 癌裸小鼠异种移植物的功效。
雌性荷瘤小鼠采用 BP(2 个剂量水平 ) 每周处理 5 天， 周一至周五。实验分为两项 任务 ： 任务 1 是测试肿瘤植入前用 BP 预处理动物的效果， 任务 2 是测试肿瘤形成后开始处 理的效果。在任务 1 中， 雌性裸小鼠用 BP(300 或 1000mg/kg) 预处理一周， 接着皮下植入肿 瘤细胞， 继续用口服剂量的玉米油 ： PEG 400 或 BP 处理动物 4-8 周。在任务 2 中， BP 与临床 3 使用的化疗药进行对比。荷瘤 20-30mm (MDA MB 231) 的雌性裸小鼠用口服剂量的玉米油 ： PEG 400、 BP 或环磷酰胺 (CTX， MDA MB 231 的阳性对照 ) 处理， 每周 5 次。对 MDA MB 231 3 肿瘤的处理一直持续到每只动物的肿瘤达到≥ 1600mm 或发生溃烂。任务 2 中某些 MDA MB 231 肿瘤未达到 1600mm3。对缩小的肿瘤的追踪持续 3 个月。
MDA MB 231 乳腺肿瘤对 BP 和 CTX( 阳性对照 ) 处理发生响应。 在任务 1 中， 300mg/ kg 和 1000mg/kg 的 BP 分别抑制 2/9 的动物和 2/10 的动物中的肿瘤形成。8 只对照动物全 部形成肿瘤。在任务 2 中， BP(1000mg/kg 或 2000mg/kg 体重 ) 处理动物使 3/5 的肿瘤缩小。
一般方法
将 MDA MB 231 人乳腺癌细胞皮下注射到雌性裸小鼠右胁部。任务 1 中， 在肿瘤细 胞植入前进行 BP 给药连续 5 天， 之后继续每周 5 天给药， 连续 4-8 周。在任务 2 中， 当肿瘤 3 平均体积达 50-60mm 时进行癌细胞注射， 小鼠按每组 8 只分组， 采用玉米油 ： PEG 400( 对 照 )、 BP 或 CTX(MDA MB 231 的阳性对照 ) 进行处理。药物处理开始后监测肿瘤体积 90 天 ( 对于 MDA MB 231)。
实验程序
细胞系
MDA MB 231 是在 1973 年由一名患者的胸腔积液建立的人乳腺癌细胞系， 该患者 在开始建立细胞系前 3 个月曾接受 5-FU、 多柔比星、 氨甲蝶呤和 CTX 治疗。该细胞系为雌 激素受体阴性， 曾用于筛选非激素拮抗剂靶向的抗癌药。MDA MB 231 在含 1.5g NaHCO3/L、 10％胎牛血清 (FBS) 和 2mM L- 谷氨酰胺的 Dulbecco 改良 Eagle 培养基 (DMEM) 中生长， 保 持在 37℃ 5％ CO2/ 空气的潮湿孵箱中。培养基中不加抗生素。
动物肿瘤模型
4-5 周龄的 Swiis NCr 雌性裸小鼠 (nu/nu) 购自 Taconic(Germantown， NY)。动 物在购自 Bio Bubble， Inc.(Fort Collins， CO) 的清洁隔离房中的带顶部无菌过滤器的笼 中饲养， 每笼 3 只。到达后， 在使用前隔离四个工作日。保持室温 72±5 华氏度， 相对湿度 35-70％， 12 小时的光照 / 黑夜循环。小鼠采用符合标准的高压灭菌的 Purina 啮齿动物食 物任意喂食。饮用水为高压灭菌的酸化水， 水源经再循环、 去离子、 UV 照射和 5μM 过滤处 理。
在动物隔离结束后， 向小鼠右胁部皮下注射 1 或 5×106MDA MB231 细胞 (0.1ml 注 射体积 )。任务 1 中小鼠在细胞注射前接受 5 天预处理。每周测量 2 次肿瘤尺寸和体重。 采用游标卡尺测量肿瘤三个平面的尺寸， 肿瘤体积 (V) 按下式计算 ： V ＝ π(x×y×z)/6， 其 中 x、 y 和 z 为肿瘤测量值减去皮肤厚度。实验结束时， 通过 CO2 吸入然后颈脱位法处死小 鼠。
药物
BP 采用玉米油 ： PEG 400 配制 (2 ∶ 1， V/V)， 浓度为 30mg/ml 和 100mg/ml。药物在 该浓度时为混悬液。阳性对照药物用磷酸盐缓冲液 (PBS) 和 15mg/ml 的 CTX 配制。药物使 用前均过滤除菌 (0.2μM 滤器 )。
处理方案
任务 1 中， 将要植入 MDA MB 231 肿瘤细胞的小鼠采用 BP(300 或 1000mg/kg) 预处 理 5 天， 之后皮下注射细胞混悬液， 药物处理继续每周 5 天 ( 周一至周五 )， 最少持续 4 周。 3
任务 2 中， 当肿瘤体积达到预定大小 ( 肿瘤平均体积 50-60mm ) 后， 将小鼠分成各 个处理组， 每组 8 只小鼠。所有 BP 处理均为每周给药 5 次 ( 周一至周五 )， 连续至少 4 周。 CTX 仅按 150mg/kg 剂量腹膜内给药一次。 所有 BP 处理均为经口给药 ； 对于植入 MDA MB 231 细胞的小鼠， 剂量为 1000mg/kg 或 2000mg/kg。对于每项任务， 所有处理于同一天开始。
首次药物处理后， 每周 2 次测量肿瘤， 至少持续 9 周 (MDA MB231)。计算各组在每 个时间点的肿瘤平均体积。采用非配对双尾 t 检验对各组的特定时间点进行比较， 结果采 用方差分析 (ANOVA) 进行分析。任务 2 中， 每个肿瘤体积 (V) 表示为与第 0 天 ( 处理第一 天 ) 的肿瘤体积 (V0) 相比的分数。各组的平均比值 V/V0 以处理后时间为函数作图。根据 肿瘤对处理的反应， 用两种方法测定对处理的反应。对于对处理有反应的组， 对 log( 肿瘤 体积 )- 时间函数图进行线性回归， 从而确定每个肿瘤的体积加倍时间 (VDT) 和体积增四倍 时间 (VQT)。测定各处理组的肿瘤生长延迟， 采用 ANOVA 分析组间差异。
系统毒性根据治疗后的体重减轻进行评价。观测期结束时处死小鼠， 或者肿瘤体 3 积达到 1600mm 或肿瘤出现溃烂时可提前处死。
统计学分析
采用 InStat(Graphpad Software， San Diego， CA) 进行上述统计学分析。
肿瘤生长
MDA MB 231 肿瘤在肿瘤细胞注射后 3 周内均可测量到， 生长很缓慢， 加倍时间是 7 天。这些数值由对照组数据计算而得到。处理开始时的平均肿瘤体积和体重列于表 1( 任 务 1) 和表 2( 任务 2) 中。
*SEM ＝均值的标准误SEM ＝均值的标准误
肿瘤对处理的反应
预处理 MDA MB 231 植入小鼠的结果是， 阻止了 1/9 的小鼠中的肿瘤形成， 并有一 个小肿瘤出现消退， 该肿瘤在消失前已长至 10mm3 的大小。1000mg/kg BP 预处理小鼠阻止 2/10 的动物 (20％ ) 中的肿瘤生长， 并且一个在第 63 天长至 195mm3 的肿瘤在实验结束的第 86 天缩小为 93mm3。若假定未形成肿瘤的动物存活 6 个月 (180 天 )， 则 1000mg/kg BP 预处 理的动物的平均存活时间为 115 天， 与之相比对照组为 72 天 (p ＝ 0.01)。
任务 2 中 MDA MB 231 肿瘤对两种处理均有反应。CTX(150mg/kg) 和 BP(1000 或 2000mg/kg) 基本上可减缓肿瘤生长， 两种药物治疗均引起完全消退。1000mg/kg BP 处理的 2 只动物与对照相比未显示肿瘤生长率降低， 而 2 个肿瘤完全消退。 2000mg/kg BP 处理组的 全部 3 只动物的植入肿瘤均有缩小。 处理在第 42 天停止， 此时 2 个肿瘤已完全消退， 一个相 对较大的肿瘤开始缩小 ( 第 31 天为 310mm3， 第 45 天为 163mm3)。在 3 个月的追踪期内， 完 全消退的肿瘤均没有再开始重新生长， 然而部分消退的肿瘤在处理结束后开始重新生长并
31*102335163 A CN 102335171说明书29/32 页在实验终止时达到 1835mm3 的大小。2000mg/kg BP 处理组动物的存活时间有延长的趋势。
实验结果示于图 15 和 16 中。
实施例 6
非临床毒理学
支持 4- 碘 -3- 硝基苯甲酰胺 (BA) 的肿瘤学应用的非临床毒理学项目包括大鼠和 狗的急性 ( 单剂量 )、 两周 ( 多剂量 )、 剂量范围和多剂量 (4 周 ) 毒理学实验， 其中 BA 为静 脉内给药。实验中使用的 BA 在 β- 羟丙基环糊精 (25％ )(Kleptose) 中配制。
确定的 4 周实验研究包括 BA 以 60mg/kg/ 天的剂量每周 2 次给药， 包括全面的临 床评价和 / 或所列全部组织的显微镜检查。狗的多剂量实验包括心电图检查和身体检查， 包括心律、 呼吸频率和体温测量。还在大鼠和狗的 4 周多剂量研究中采集了毒物代谢动力 学数据。 此外， 还进行了两项特殊实验， 一项是采用狗和人的血液及血浆进行的体外溶血能 力 / 血浆相容性研究， 另一项为兔的静脉内局部耐受性研究。还利用大鼠进行了单剂量研 究， 以评价在该模型中给药速率对 BA 引起的神经行为作用的影响。
在大鼠和狗中， 单次静脉内剂量高至 50mg/kg 时仍可良好耐受 BA。在单次静脉内 推注剂量为 100mg/kg 时， 观察到临床体征， 包括大鼠抽搐和狗的共济失调。100mg/kg 重复 剂量引起狗的临床改变， 主要包括唾液分泌过多、 体重减轻及食物摄取减少。 实施例 7
标题 ： A 期 1， 标签公开的人体剂量递增研究的第一阶段， 在晚期实体肿瘤患者中 评价 BA 的安全性和药代动力学。
研究阶段 ： 1
适应症 ： 晚期实体肿瘤的治疗
首要目的 ： 选择组织学证明为晚期实体肿瘤且标准治疗无效或无标准疗法的成年 患者， 静脉内施用 BA 后， 评价 BA 的安全性， 建立最大耐受剂量 (MTD)， 建立 BA 的药代动力学 曲线。
第二目的 ： 评价患有可检测疾病的研究对象的反应 ( 根据 RECIST 标准 )。确立安 全性曲线 ： 显著的实验室改变和未定义为剂量限制性毒性 (DLT) 的不良事件 (AE)。
探索性目的 ： 评价治疗对肿瘤状态的生物标志物的作用。
实验设计 ： A 期 1， 标签公开的人体剂量递增的研究的第一阶段， 设计为确定 BA 的 安全性、 MTD 和 PK 曲线。BA 静脉内给药， 每周两次 ( 每周的第 1 天和第 4 天 )， 连续 3 周， 接着是一周的不进行 BA 治疗的休息期， 每 28 天为一个周期。周期一 ( 第 1 天至第 28 天 ) 定义为实验安全期， 其间确定药物的 MTD。 实验的其余时间称为维持期。 实验对象可一直参 与该研究， 直至出现药物不耐受或疾病进展。
安全性评价遵循 2003 年 12 月的 Cancer Therapy EvaluationProgram Common Terminology Criteria for Adverse Events(CTCAE) 第 3.0 版的指导进行。对于可检测 的疾病， 其肿瘤反应的第一次评价在研究第 8 周进行， 此后约每 8 周进行一次。采用修订的 ResponseEvaluation Criteria in Solid Tumors(RECIST) 标准建立疾病进程。对于不可 检测的疾病， 则利用最好的医学实践确定疾病进展时间。
第一终点和第二终点 ： 第一终点是安全性 / 耐受性， 用于表征 DLT 和 PK 曲线 ： BA 半衰期 (t1/2)、 最大观测浓度 (Cmax)、 血浆浓度 - 时间曲线下面积 (AUC) 和清除率 (CL)。第
二终点是根据 RECIST 标准评价的肿瘤反应 ； 安全性曲线 ； 显著实验室改变和其他 AE( 未被 定义为 DLT 的 )。探索研究为循环肿瘤细胞 (CTC) 水平的降低。
样本量 ： 预计有 36 名对象参与该研究。研究对象被分配到不同剂量水平的 1、 3或 6 名对象的连续队列 (cohort) 中。可能需要 10 个剂量队列来确定 MTD。
研究对象合格标准的概括 ：
加入标准包括 ： (a) ≥ 18 岁， 病理学证明为晚期实体肿瘤且经标准治疗无效或无 标准疗法， (b) 东方肿瘤学协作组 (Eastern OncologyCooperative Group， ECOG) 表现状态 9 ≤ 2， 和 (c) 绝对中性粒细胞数 (ANC) ≥ 1.5×10 /L( 研究第 1 天的前 2 周内无 GCF 支持 ) ； 血小板数≥ 100.0×109/L( 研究第 1 天的前 2 周内未输血 ) ； 和血红蛋白≥ 9.0g/dL( 允许 使用促红细胞生成药物 )。
淘汰标准包括 ： 研究对象参与另外的研究设计或药物试验、 或正接受其他试验药 物； 血液恶性疾病 ； 有症状的或未治疗的脑转移需要同时治疗， 包括但不限于手术、 放射治 疗和皮质类固醇 ； 有癫痫疾病史 ； 研究第 1 天的前 6 个月内 MI、 不稳定的心绞痛、 充血性 心力衰竭 (CHF)， 纽约心脏协会 (New York Heart Association， NYHA) ＞ II 级、 不能控制 的高血压 ； 正在或之前 ( 研究第 1 天的前 7 天内 ) 进行抗凝治疗 ； 正在进行特定药物治疗 ( 见 4.2.3 小节 ) ； 血清肌酸酐＞ 1.5×ULN ； 肝酶升高 (AST/ALT) ＞ 2.5×ULN， 或＞ 5.0( 若 为肝转移继发 )， 碱性磷酸酶＞ 2.5×ULN， 或＞ 5.0( 若为肝或骨转移继发 ) ； 总胆红素＞ 1.5×ULN ； 研究第 1 天的前 28 天内 ( 对于 BCNU 或丝裂霉素 C， 在 42 天的清除期内 ) 有全 身性化学治疗 ； 研究第 1 天的前 28 天内有过放射治疗 ； 研究第 1 天的前 1 个月内有过针对 所患恶性病的抗体治疗 ； 和正在用 BA 以外的其他任何药物进行化学治疗或在研究期间未 经允许进行了放射治疗。
试验性药物的剂量和给药 ： BA 以浓度 10mg/mL 在 10mL 小瓶中提供。估计需要 10 个队列用于确定 MTD。
起始剂量 ( 队列 A) ： 队列 A 中， 一个研究对象接受剂量水平 0.5mg/kg( 基于筛选 时称量的体重 ) 的 BA 给药， 一周两次。如果该对象出现 2 级或以上毒性反应， 则另外 3 名 对象加入该队列。 若该队列在此剂量下没有另外的对象出现 DLT， 则如下进行剂量递增。 若 最初的对象未出现 DLT， 则如下进行剂量递增。
2 级毒性之前的剂量递增 ( 可能队列 B-J) ： 除非研究对象出现 2 级或以上的毒性， 一个对象将从开始纳入全部连续队列中， 其具有计划的 100％的剂量水平增加， 如队列 A 所 述可能出现队列的扩大。经 6 个 BA 剂量后需检查安全性数据， 若无对象出现 2 级或以上毒 则加入另 性， 则可决定增加到下个队列。如果在该队列中有一名对象出现 2 级或以上毒性， 外 3 名对象到本队列中。如果该队列在此剂量下这另外三个对象中没有再出现 DLT， 则可 进行进一步的剂量递增。如果这 3 人中有 1 人出现 DLT， 则再加入 3 名对象到相同剂量的 相同队列中。若这 3 人中没有人出现 DLT 则继续剂量递增。如果队列中一个或多个对象出 现 DLT， 则前一个较低的剂量水平被确定为 MTD。如果需要可以增加 MTD 下的研究对象， 以 保证该研究中至少有 18 名对象接受 BA 治疗。
2 级毒性水平之后的剂量递增 ( 可能的队列 B-J) ： 在为了向下一水平进行剂量递 增而扩大并清除与初始 2 级毒性相关的剂量之后， 三名对象将从开始时加入以后的所有队 列 ( 队列 B、 C、 D、 E、 F、 G、 H、 I 或 J) 研究之中。若 3 名初始对象中没有人发生 DLT， 则向下个队列进行剂量递增。若 3 人中 1 人出现 DLT， 则另加入 3 名对象到相同剂量的相同队列 中。若此 3 人中没有人出现 DLT， 则继续递增。如果队列中另外一个或多个对象出现 DLT， 则前一个较低的剂量水平被确定为 MTD。 如果需要可以增加 MTD 下的研究对象， 以保证该研 究中至少有 18 名对象接受 BA。
对象内的剂量递增 ： 一旦根据上述标准确认一个 BA 剂量水平是安全的和可耐受 的， 所有正接受较低剂量的对象都应适当地递增到最高安全剂量 ( 由主要研究者确定 )。 一 旦确定了 MTD， 研究中的所有对象均应适当地递增到接受该 MTD。
总剂量递增限制 ： 如果观察到 2 级毒性且随后清除了该剂量水平， 那么队列之间 的个体剂量递增应更加保守， 应限制为比前一剂量水平最高增加 40％左右， 直到观察到 3 级毒性， 接下来的剂量递增应限制为 25％左右的剂量增强。绝对剂量递增应该由安全观察 组在参考所有已得数据后决定。
对照组 ： 无
程序 ：
筛选 ： 只有在得到每名对象签名的书面 Institutional Review Board(IRB) 批准 的知情同意书之后， 才能进行加入前筛选试验和评价。如无特别说明， 整个程序应在研究 第 1 天的前 2 周内进行。临床评价包括完整病史、 体检、 ECOG 状态、 身高、 体重、 生命体征和 同时用药资料。实验室检查包括血液学 ( 分类的、 网织红细胞计数和血小板 ) ； 凝血酶原时 间 (PT) 和部分促凝血酶原激酶时间 (PTT) ； 生化全套 ( 钠、 钾、 氯、 CO2、 肌酸酐、 钙、 磷、 镁、 BUN、 尿酸、 白蛋白、 AST、 ALT、 碱性磷酸酶、 总胆红素、 胆固醇、 HDL、 和 LDL)， 经显微镜检查的 尿液分析、 血清肿瘤标志物、 对可能怀孕的妇女进行血清或尿孕检。 心功能检查包括肌酸激 酶 (CK) 和 12 道心电图 (EKG)。临床分期包括在研究第 1 天的前 4 周内通过计算机断层扫 描 (CT) 或磁共振 (MRI) 对可检测的疾病进行成像。可能出现对不可检测的疾病的临床分 期资料。
处理 ： 合格的对象纳入研究中， 在第一天接受研究药物。 如研究方案所述进行给药 前和给药后试验。BA 每周两次给药， 每个 28 天循环中的第 1、 4、 8、 11、 15 和 18 天给药 ； 给 药的输注时间为 2 小时。第 29 天， 实验对象开始第 2 个循环， 继续在该循环和以后每个循 环的第 1、 4、 8、 11、 15 和 18 天给药。对象可以始终参与该研究， 直到出现药物不耐受或疾病 进展或表示退出意愿。符合疾病进展的 RECIST 修订标准的实验对象若证明有临床益处， 可 继续进行研究。
对于可检测的疾病， 计划的第一个肿瘤反应测量应在本研究的第 8 周进行 ( 研究 第 50±5 天 )， 此后每 8 周进行一次。通过 CT 或 MRI( 必须使用与筛选时相同的技术 )， 利 用基于修订的 ResponseEvaluation Criteria in Solid Tumors(RECIST) 标准的肿瘤反应 建立疾病进展。对于不可检测的疾病， 则利用最好的医学实践确定疾病进展时间。
研究的结束 ： 按实验方案所述， 每个对象都应结束研究程序， 在最后一次 BA 给药 后 30 天内完成。此外， 如果在最后一次 BA 给药前 30 天内未作评价， 则实验对象还需通过 临床成像进行总体肿瘤反应的评价。
统计学描述 ： 描述性统计学将计算安全性、 PK 和 PD 终点。建立进展时间的反应数 据以列表形式进行描述性报告。肿瘤进展数据根据修订的 RECIST 标准分类。
采用非室模型估计 PK 参数。PK 参数通过算术平均值、 标准差、 变异系数、 最大值、最小值、 中值和几何平均值进行描述。采用 SPlus 5.1 版本 ( 或更新版本 ) 进行统计学计 算。
适当时， 还可通过非线性混合效应模建法 ( 群体法 ) 至区室分析法进行数据分析。 其他分析适当地描述性进行。
在所有对象都接受至少一轮循环 (6 次给药 ) 的 MTD 剂量水平 ( 或在该研究中接 受的最高剂量水平 ) 的 BA 后， 对结果进行分析。这与该研究的安全期的结束相符。根据需 要还可对正在进行的基础进行其他分析， 为以后的试验设计提供信息。
以上实施例绝非限制本发明的范围。 此外， 本领域普通技术人员可意识到， 在不背 离附加权利要求书的宗旨或范围的情况下， 能够对其做许多改动和调整， 这些改动和调整 均在本发明的范围之内。
对本领域普通技术人员来说显而易见的是， 可以进行诸多改动和调整而不会背离 附加权利要求书的宗旨或范围。