作为抗炎剂的 3H- 咪唑并 [4， 5-c] 吡啶 -6- 甲酰胺 技术领域 本发明涉及作为微粒体前列腺素 E2 合成酶 -1(mPGES-1) 抑制剂的新的化合物、 包 含这些新的化合物的药物组合物及其作为治疗和 / 或预防炎性疾病及相关病症的药物的 用途。
现有技术
存在许多本质上为炎症的急性及慢性疾病 / 病症， 包括 ( 但不限于 ) 类风湿性疾 病， 例如类风湿性关节炎 ； 骨关节炎 ； 内脏系统疾病， 例如炎性肠道综合征 (inflammatory bowel syndrome) ； 自身免疫疾病， 例如红斑狼疮 ； 肺病， 例如哮喘及 COPD。 目前使用非甾体 抗炎药 (NSAID) 及环氧合酶 (COX)-2 抑制剂进行治疗是有效的， 但普遍显示胃肠及心血管 副作用。迫切需要具有同等功效且副作用状况改善的新的治疗方案。
NSAID 及 COX-2 抑制剂经过抑制 1 种或 2 种 COX 酶异构体来减少炎症及疼痛。环 氧合酶 (COX) 以两种形式存在， 一种是在许多细胞及组织中组成性表达 (COX-1)， 一种是在 炎症响应期间在大部分细胞及组织中由促炎性刺激物 ( 例如细胞因子 ) 诱导产生 (COX-2)。 COX 使花生四烯酸代谢为不稳定的中间体前列腺素 H2(PGH2)。PGH2 进一步被代谢为其它 前列腺素， 包括 PGE2、 PGF2α、 PGD2、 前列环素及血栓素 A2。已知这些花生四烯酸代谢物具 有包括促炎性效应在内的显著的生理学及病理生理学活性。具体而言， 已知 PGE2 为强促 炎性介体并会诱发发烧、 炎症及疼痛。因此， 为了抑制 PGE2 的形成， 研发出许多药物， 包括 “NSAID” ( 非甾体抗炎药 ) 及 “昔布类药物 (coxibs)” ( 选择性 COX-2 抑制剂 )。这些药物 主要通过抑制 COX-1 和 / 或 COX-2 起作用， 由此减少 PGE2 的形成。
然而， 抑制 COX 的缺点是导致减少 PGH2 下游的所有代谢物的形成， 已知其中一些 代谢物具有有益性质。鉴于此， 因此已知 / 怀疑通过抑制 COX 起作用的药物会引起不良生 物学效应。
例如， 利用 NSAID 非选择性抑制 COX 会引起胃肠副作用且影响血小板及肾功能。 即 使利用昔布类药物选择性抑制 COX-2， 虽然减少这些胃肠副作用， 但仍相信其会引起心血管 问题。
因此， 不会引起上述副作用的炎症疾病替代性治疗将会在临床上具有实际益处。 具体而言， 预期更适宜选择性抑制 PGH2 转化为促炎性介体 PGE2 的药物可能在不引起其他有 益的花生四烯酸代谢物的形成相应减少的情况下降低炎症响应。 因此可预期该抑制将会缓 解上述不良副作用。
PGH2 可通过前列腺素 E 合成酶 (PGES) 转化为 PGE2。已公开了两种微粒体前列腺 素 E 合成酶 (mPGES-1 及 mPGES-2) 以及一种胞内前列腺素 E 合成酶 (cPGES)。
白三烯 (LT) 是由花生四烯酸通过与 COX/PGES 途径中的酶不同的一组酶形成。已 知白三烯 B4 为强促炎性介体， 而含有半胱氨酰基的白三烯 C4、 D4 及 E4(CysLT) 主要为极有效 的支气管收缩剂， 因此其与哮喘的病理生物学有关。通过名为 CysLT1 及 CysLT2 的两种受体 可以介导 CysLT 的生物学活性。作为类固醇的替代物， 已研发出白三烯受体拮抗剂 (LTRa)用于治疗哮喘。这些药物可口服给药， 但并未令人满意地控制炎症。目前使用的 LTRa 对于 CysLT1 具有高度选择性。假设若能降低两种 CysLT 受体的活性， 则可更好地控制哮喘， 对 COPD 可能也会如此。 这可通过开发非选择性 LTRa 来实现， 而且可通过抑制 CysLT 的合成所 涉及的蛋白 ( 例如酶 ) 的活性来实现。这些蛋白涉及 5- 脂氧合酶、 5- 脂氧合酶活化蛋白 (FLAP) 及白三烯 C4 合成酶。FLAP 抑制剂还会减少促炎性 LTB4 的形成。
mPGES-1、 FLAP 及白三烯 C4 合成酶属于类花生酸及谷胱甘肽代谢 (MAPEG) 家族 中与膜相关的蛋白。此家族的其它成员包括微粒体谷胱甘肽 S- 转移酶 (MGST1、 MGST2 及 MGST3)。 对 于 综 述， 参 见 P.-J.Jacobsson 等 人， Am.J.Respir.Crit.Care Med.161， S20(2000)。众所周知， 针对拮抗 MAPEG 之一而制备的化合物还可能对其他家族成员显示 抑 制 活 性， 参 见 J.H Hutchinson 等 人， J.Med.Chem.38， 4538(1995) 及 D.Claveau 等 人， J.Immunol.170， 4738(2003)。 前一篇论文还描述了这些化合物还可能显示对花生四烯酸级 联中不属于 MAPEG 家族的蛋白 ( 例如， 5- 脂氧合酶 ) 的显著交叉反应性。
因此， 能够抑制 mPGES-1 的作用且因此减少特定花生四烯酸代谢物 PGE2 的形成的 药物可能对治疗炎症有利。此外， 能够抑制白三烯合成所涉及的蛋白的作用的药物还可能 对治疗哮喘及 COPD 有利。 除了抗炎作用外， 还已知 mPGES-1 抑制剂可潜在地用于治疗或预防肿瘤， 例如国 际专利申请 WO 2007/124589 中所描述。其背后的理论基础可基于 PGE2 的产生被认为会促 进肿瘤的形成、 生长和 / 或转移这一事实。 因为 mPGES-1 在良性及癌性肿瘤中常常与 COX-2 一起表达， 所以抑制 mPGES-1( 而非 COX-2) 可引起 PGE2 减少， 因此 mPGES-1 抑制剂可适用 于治疗良性或恶性肿瘤。
本说明书中对明显在先公开文献的列举或论述不必将其理解为承认该文献属于 现有技术或为一般常识。
发明详述
在第一实施方式中， 在通式 I 中，
X 及 Y 中之一表示 -N(R6)- ； 且另一个表示 -N ＝ ； 1 2 3
Z、 Z 及 Z 中之一独立地表示 -C(R7) ＝或 -N ＝ ； 且 Z1、 Z2 及 Z3 中的其它两个表 示 -C(R7) ＝ ；
Q2、 Q3 及 Q4 分别表示 -C(R2) ＝、 -C(R3) ＝及 -C(R4) ＝ ； 或 Q2、 Q3 或 Q4 中的任一个
或两个可替代地且独立地表示 -N ＝ ；
R1 表示卤素、 OH、 -CN ； C1-3 烷基、 C2-6 炔基、 OC1-3 烷基， 后三个基团任选被一个或多 个选自氟、 -CN、 ＝ O、 OH、 -OCH3、 -OCF3 的取代基取代 ； 2 3 4
R、 R 及 R 独立地表示氢、 卤素、 -CN ； C1-3 烷基、 OC1-3 烷基， 后两个基团任选被一个 或多个选自氟、 -CN、 ＝ O、 OH、 -OCH3、 -OCF3 的取代基取代 ； a b
R、 R 独立地表示氢、 C1-3 烷基， 或两者与其所连接的碳原子一起形成 C3-7 亚环烷基 环或 4-6 元亚杂环烷基环 ；
Rc 表示氢或 C1-3 烷基 ；
W 表示 -C(O)-、 -S(O)-、 -S(O)2-、 -C(O)O- 或 -C(O)NRd-， 这些基团经碳或硫原子连 c 接至 -NR - 部分的氮 ；
Rd 表示氢或 C1-3 烷基 ；
M 表示 C1-7 烷基、 C3-7 环烷基， 该两个基团任选被一个或多个选自以下的基团取代 ： 氟、 -OH、 -CN、 -NH2、 -NH(C1-3 烷基 )、 N(C1-3 烷基 )2、 -OC1-3 烷基、 -SC1-3 烷基、 芳基、 杂芳基 [ 后 两个基团可被一个或多个选自卤素、 OH、 -CN、 C1-3 烷基、 -OC1-3 烷基 ( 后两个烷基任选被一 个或多个氟原子取代 ) 的取代基取代 ]、 C1-7 烷基、 C2-7 炔基、 C3-7 环烷基 -C0-2 烷基、 4-7 元 杂环烷基 -C0-2 烷基 ( 后述烷基、 炔基、 杂环烷基或环烷基任选被一个或多个选自氟、 -CN、 ＝ O、 -NH2、 -NH(C1-3 烷基 )、 -N(C1-3 烷基 )2、 -OH、 -OC1-3 烷基的取代基取代 ) ；
或芳基、 杂芳基、 4-7 元杂环烷基， 所有这些基团任选被一个或多个选自以下的取 代基取代 ： 卤素、 -OH、 -CN、 -NH2、 -NH(C1-3 烷基 )、 -N(C1-3 烷基 )2、 -OC1-3 烷基、 -SC1-3 烷基、 芳基、 杂芳基 [ 后两个基团可被一个或多个选自卤素、 OH、 -CN、 C1-3 烷基、 -OC1-3 烷基 ( 后两 个烷基任选被一个或多个氟原子取代 ) 的取代基取代 ]、 C1-7 烷基、 C2-7 炔基、 C3-7 环烷基、 4-7 元杂环烷基 ( 后述烷基、 炔基、 杂环烷基或环烷基任选被一个或多个选自氟、 -CN、 ＝ O、 -NH2、 -NH(C1-3 烷基 )、 -N(C1-3 烷基 )2、 -OH、 -OC1-3 烷基的取代基取代 ) ； 5
R 表示氢或 C1-3 烷基 ；
R6 表示氢 ； C1-5 烷基、 C3-6 炔基、 4-7 元杂环烷基 -C0-2 烷基或 C3-7 环烷基 -C0-2 烷基 ( 后四个基团任选被一个或多个选自氟、 -CN、 ＝ O、 C1-3 烷基、 -OH、 -OC1-3 烷基、 -NH2、 -NH(C1-3 烷基 )、 -N(C1-3 烷基 )2 的取代基取代 ) ；
每一 R7 独立地表示氢、 卤素、 -CN、 C1-7 烷基、 C2-7 炔基、 C3-7 环烷基、 C1-5 烷基 -O-、 C3-7 环烷基 -C0-2 烷基 -O-、 4-7 元杂环烷基 -C0-2 烷基 -O-( 在后六个基团中， 烷基、 炔基、 环 烷基或杂环烷基片段任选被一个或多个选自氟、 -CN、 ＝ O、 OH、 -OC1-3 烷基、 -NH2、 -NH-C1-3 烷 基、 -N(C1-3 烷基 )2 的取代基取代， 或被一个或多个可任选被一个或多个氟原子取代的 C1-3 烷 基取代 ) ；
或芳基或杂芳基， 后两个基团可被一个或多个选自卤素、 OH、 -CN、 C1-3 烷基、 -OC1-3 烷基 ( 在后两个基团中， 烷基片段任选被一个或多个氟原子取代 ) 的取代基取代 ；
L 表 示 -C(O)N(R8)-、 -N(R8)C(O)-、 -S(O)2N(R8)-、 -N(R8)S(O)2-、 -N(R8)C(O) N(R8)-、 -OC(O)N(R8)- 或 -N(R8)C(O)O- ；
A 表示氢、 C1-8 烷基、 C3-8 炔基、 芳基、 杂芳基、 芳基 -C1-3 烷基 -、 C3-8 环烷基 -C0-3 烷 基 -、 4-7 元杂环烷基 -C0-3 烷基 -、 杂芳基 -C1-3 烷基 -， 其中烷基、 炔基、 环烷基及杂环烷基片 9a 段任选被一个或多个选自 R 的取代基取代， 芳基及杂芳基片段任选被一个或多个选自 R9b的取代基取代 ；
或 A-L- 在一起表示以下基团之一，
其中 ：
V 表示化学键、 -CH2CH2-、 -CH2CH2CH2-， 其中在后的每一个亚烷基中一个亚甲基 [-(CH2)-] 单元可任选被氧原子、 -NH- 或 -N(C1-3 烷基 )- 置换且每一亚甲基单元可任选 地且独立地被以下一个或两个基团取代 ： 氟、 -CN、 ＝ O、 -NH2、 -NH(C1-3 烷基 )、 -N(C1-3 烷 基 )2、 -OH、 -OC1-3 烷基 ；
每一 R8 独立地表示氢或 C1-3 烷基 ；
每 一 R9a 独 立 地 表 示 氟、 -OH、 -CN、＝ O、 -NH2、 -NH(C1-3 烷 基 )、 -N(C1-3 烷 基 )2、 -OC1-6 烷基、 C1-6 烷基 ( 在后四个基团中， 烷基片段任选被一个或多个选自氟、 -CN、 ＝ O、 -NH2、 -NH(C1-3 烷基 )、 -N(C1-3 烷基 )2、 -OH、 -OC1-3 烷基的取代基取代 ) 或芳基、 杂芳基 [ 后
两个基团可被一个或多个选自卤素、 OH、 -CN、 C1-3 烷基、 OC1-3 烷基 ( 后两个烷基任选被一个 或多个氟原子取代 ) 的取代基取代 ] ；
每一 R9b 独立地表示卤素、 -OH、 -CN、 -NH2、 -NH(C1-3 烷基 )、 -N(C1-3 烷基 )2、 -OC1-3 烷基、 -SC1-3 烷基、 芳基、 杂芳基 [ 后两个基团可被一个或多个选自卤素、 OH、 -CN、 C1-3 烷基、 OC1-3 烷基 ( 后两个烷基任选被一个或多个氟原子取代 ) 的取代基取代 ]、 C1-7 烷基、 C2-7 炔 基、 C3-7 环烷基、 4-7 元杂环烷基 ( 后述烷基、 炔基、 杂环烷基或环烷基任选被一个或多个选 自氟、 -CN、 ＝ O、 -NH2、 -NH(C1-3 烷基 )、 -N(C1-3 烷基 )2、 -OH、 -OC1-3 烷基的取代基取代 ) ；
及其盐， 特别是其与有机或无机酸或碱形成的生理学上可接受的盐。
在第二实施方式中， 在通式 I 中，
其中 ： X 及 Y 中之一表示 -N(R6)- ； 且另一个表示 -N ＝ ； 1 2 3 Z、 Z 及 Z 中之一独立地表示 -C(R7) ＝或 -N ＝ ； 且 Z1、 Z2 及 Z3 中的其它两个表示 -C(R7) ＝ ；
Q2、 Q3 及 Q4 分别表示 -C(R2) ＝、 -C(R3) ＝及 -C(R4) ＝ ； 或 Q2、 Q3 或 Q4 中的任一个 或两个可替代地且独立地表示 -N ＝ ；
R1 表示卤素、 OH、 -CN ； C1-3 烷基、 C2-6 炔基、 OC1-3 烷基， 后三个基团任选被一个或多 个选自氟、 -CN、 ＝ O、 OH、 -OCH3、 -OCF3 的取代基取代 ； 2 3 4
R、 R 及 R 独立地表示氢、 卤素、 -CN ； C1-3 烷基、 OC1-3 烷基， 后两个基团任选被一个 或多个选自氟、 -CN、 ＝ O、 OH、 -OCH3、 -OCF3 的取代基取代 ； a b
R、 R 独立地表示氢、 C1-3 烷基， 或两者与其所连接的碳原子一起形成 C3-7 亚环烷基 环或 4-6 元亚杂环烷基环 ；
Rc 表示氢或 C1-3 烷基 ；
W 表示 -C(O)-、 -S(O)-、 -S(O)2-、 -C(O)O- 或 -C(O)NRc-， 这些基团经碳或硫原子连 c 接至 -NR - 部分的氮 ；
M 表 示 C1-7 烷 基、 C3-7 环 烷 基， 这两个基团未被取代或被一个或多个氟 原子取代 ； 或 C1-7 烷 基、 C3-7 环 烷 基， 这两个基团被一个或多个选自以下的基团取 代： -OH、 -CN、 -NH2、 -NH(C1-3 烷基 )、 N(C1-3 烷基 )2、 -OC1-3 烷基、 -SC1-3 烷基、 芳基、 杂芳基 [ 后 两个基团可被一个或多个选自卤素、 OH、 -CN、 C1-3 烷基、 OC1-3 烷基 ( 后两个烷基任选被一个 或多个氟原子取代 ) 的取代基取代 ]、 C1-7 烷基、 C2-7 炔基、 C3-7 环烷基、 杂环烷基 ( 后述烷基、 炔基、 杂环烷基或环烷基任选被一个或多个选自氟、 -CN、 ＝ O、 -NH2、 -NH(C1-3 烷基 )、 -N(C1-3 烷基 )2、 -OH、 -OC1-3 烷基的取代基取代 ) ；
或芳基、 杂芳基、 杂环烷基， 所有这些基团任选被一个或多个选自以下的取代基取 代： 卤素、 -OH、 -CN、 -NH2、 -NH(C1-3 烷基 )、 -N(C1-3 烷基 )2、 -OC1-3 烷基、 -SC1-3 烷基、 芳基、 杂 芳基 [ 后两个基团可被一个或多个选自卤素、 OH、 -CN、 C1-3 烷基、 -OC1-3 烷基 ( 后两个烷基 任选被一个或多个氟原子取代 ) 的取代基取代 ]、 C1-7 烷基、 C2-7 炔基、 C3-7 环烷基、 杂环烷基 ( 后述烷基、 炔基、 杂环烷基或环烷基任选被一个或多个选自氟、 -CN、 ＝ O、 -NH2、 -NH(C1-3 烷 基 )、 N(C1-3 烷基 )2、 -OH、 -OC1-3 烷基的取代基取代 ) ； 5
R 表示氢或 C1-3 烷基 ；
R6 表示氢 ； C1-3 烷基、 C3-6 炔基、 杂环烷基或环烷基 ( 后四个基团任选被一个或多个 选自氟、 -CN、 ＝ O、 C1-3 烷基、 -OC1-3 烷基的取代基取代 ) ； 7
每一 R 独立地表示氢、 卤素、 -CN、 C1-7 烷基、 C2-7 炔基、 C3-7 环烷基、 -OC1-3 烷基、 -OC3-7 环烷基、 -OC3-7 杂环烷基， 其中烷基片段任选被一个或多个选自氟、 -CN、 ＝ O、 OH、 -OC1-3 烷 基、 -NH2、 -NH-C1-3 烷基、 -N(C1-3 烷基 )2 的取代基取代 ；
或芳基或杂芳基， 后两个基团可被一个或多个选自卤素、 OH、 -CN、 C1-3 烷基、 -OC1-3 烷基 ( 在后两个基团中， 烷基片段任选被一个或多个氟原子取代 ) 的取代基取代 ；
L 表 示 -C(O)N(R8)-、 -N(R8)C(O)-、 -S(O)2N(R8)-、 -N(R8)S(O)2-、 -N(R8)C(O) N(R8)-、 -OC(O)N(R8)- 或 -N(R8)C(O)O- ；
A 表示 C1-8 烷基、 C3-8 炔基、 芳基、 杂芳基、 芳基 -C1-3 亚烷基、 C3-8 环烷基 -C0-3 亚烷 基、 杂环烷基 -C0-3 烷基、 杂芳基 -C1-3 亚烷基， 其中烷基、 炔基、 环烷基及杂环烷基片段任选 9a 被一个或多个选自 R 的取代基取代， 芳基及杂芳基片段任选被 R9b 取代 ；
或 A-L 在一起表示以下基团之一，其中 ：
V 表示化学键、 -CH2-、 -CH2CH2-、 -CH2CH2CH2-， 其中在后的每一个亚烷基中一个 亚甲基 [-(CH2)-] 单元可任选被氧原子、 -NH- 或 -NH(C1-3 烷基 ) 置换且每一亚甲基单元 可任选独立地被以下一个或两个基团取代 ： 氟、 -CN、 ＝ O、 -NH2、 -NH(C1-3 烷基 )、 N(C1-3 烷 基 )2、 -OH、 -OC1-3 烷基 ；
每一 R8 独立地表示氢或 C1-3 烷基 ；
每 一 R9a 独 立 地 表 示 氟、 -CN、 ＝ O、 -NH2、 -OH、 C1-3 烷 基、 -OC1-3 烷 基、 -NH(C1-3 烷基 )、 -N(C1-3 烷基 )2， 在后三个基团中， 烷基片段任选被一个或多个选自氟、 -CN、 ＝ O、 -NH2、 -NH(C1-3 烷基 )、 N(C1-3 烷基 )2、 -OH、 -OC1-3 烷基的取代基取代 ； 9b
每一 R 独立地表示卤素、 -OH、 -CN、 -NH2、 -NH(C1-3 烷基 )、 -N(C1-3 烷基 )2、 -OC1-3
烷基、 -SC1-3 烷基、 芳基、 杂芳基 [ 后两个基团可被一个或多个选自卤素、 OH、 -CN、 C1-3 烷 基、 -OC1-3 烷基 ( 后两个烷基任选被一个或多个氟原子取代 ) 的取代基取代 ]、 C1-7 烷基、 C2-7 炔基、 C3-7 环烷基、 杂环烷基 ( 后述烷基、 炔基、 杂环烷基或环烷基任选被一个或多个选 自氟、 -CN、 ＝ O、 -NH2、 -NH(C1-3 烷基 )、 -N(C1-3 烷基 )2、 -OH、 -OC1-3 烷基的取代基取代 ) ；
及其盐， 特别是其与有机或无机酸或碱形成的生理学上可接受的盐。
本发明的另一实施方式包含通式 I 化合物， 即式 Ia 化合物，
其中 A、 L、 M、 Q2、 Q3、 Q4、 R1、 R6、 Ra、 Rb、 Rc、 W、 Z1、 Z2、 Z3 具有如任一前述实施方式中所 定义的相同含义，
及其盐， 特别是其与有机或无机酸或碱形成的生理学上可接受的盐。
本发明的另一实施方式包含式 I 化合物， 即式 Ib 化合物，
其中 A、 L、 M、 Q2、 Q3、 Q4、 R 1、 R6、 R7、 Ra、 Rb、 Rc、 W 具有如任一前述实施方式中所定义的 相同含义，
及其盐， 特别是其与有机或无机酸或碱形成的生理学上可接受的盐。
本发明的另一实施方式包含式 I 化合物， 即式 Ic 化合物，
其中 A、 L、 M、 R1、 R2、 R3、 R4、 R6、 Ra、 Rb、 Rc、 W、 Z1、 Z2、 Z3 具有如任一前述实施方式中所 定义的相同含义，
及其盐， 特别是其与有机或无机酸或碱形成的生理学上可接受的盐。
本发明的另一实施方式包含式 I 化合物， 即式 Id 化合物，
其中 A、 L、 M、 R1、 R2、 R3、 R 4、 R6、 R7、 Ra、 Rb、 Rc、 W 具有如任一前述实施方式中所定义的 相同含义，
及其盐， 特别是其与有机或无机酸或碱形成的生理学上可接受的盐。
在另一实施方式中， 在通式 I 中， A、 L、 M、 Q 2、 Q3、 Q4、 R 1、 R2、 R3、 R4、 R5、 R6、 R7、 Ra、 Rb、 Rc、 X、 Y、 Z1、 Z2、 Z3 具有如任一前述实施方式中所定义的相同含义， 且 W 表示 -C(O)-、 -S(O)2-，
这些基团经碳或硫原子连接至 -NRc- 部分的氮 ；
及其盐， 特别是其与有机或无机酸或碱形成的生理学上可接受的盐。
在另一实施方式中， 在通式 I 中， A、 L、 Q2、 Q 3、 Q4、 R1、 R2、 R 3、 R4、 R5、 R 6、 R7、 Ra、 Rb、 Rc、 W、 X、 Y、 Z1、 Z2、 Z3 具有如任一前述实施方式中所定义的相同含义，
且 M 表示 C1-7 烷基、 C3-7 环烷基， 这两个基团任选被一个或多个选自以下的基团取 代： 氟、 -OH、 -CN、 -NH2、 -OC1-3 烷基、 -SC1-3 烷基、 芳基 [ 后述芳基可被一个或多个选自卤素、 OH、 -CN、 C1-3 烷基、 -OC1-3 烷基 ( 后两个烷基任选被一个或多个氟原子取代 ) 的取代基取 代 ]、 C1-7 烷基、 C3-7 环烷基 -C0-2 烷基 ( 后述烷基及环烷基任选被一个或多个选自氟、 -CN、 ＝ O、 -NH2、 -NH(C1-3 烷基 )、 -N(C1-3 烷基 )2、 -OH、 -OC1-3 烷基的取代基取代 ) ；
或 芳 基、 杂 芳 基、 4-7 元 杂 环 烷 基， 所有这些基团任选被一个或多个选自卤 素、 -CN、 -OC1-3 烷基、 C1-7 烷基、 C3-7 环烷基 ( 后述烷基及环烷基任选被一个或多个选自 氟、 -CN、 -OC1-3 烷基的取代基取代 ) 的取代基取代 ；
及其盐， 特别是其与有机或无机酸或碱形成的生理学上可接受的盐。
在另一实施方式中， 在通式 I 中， A、 L、 M、 Q 2、 Q3、 Q 4、 R1、 R2、 R3、 R 4、 R5、 R7、 Ra、 R b、 Rc、 W、 X、 Y、 Z1、 Z 2、 Z3 具有如任一前述实施方式中所定义的相同含义， 且 R6 表示氢、 C1-5 烷基、 C3-5 环烷基 -C0-1 烷基， 后两个基团任选被一个或多个选自氟、 -OCH3、 -NH(C1-3 烷基 )、 -N(C1-3 烷 基 )2 的取代基取代 ；
及其盐， 特别是其与有机或无机酸或碱形成的生理学上可接受的盐。
在另一实施方式中， 在通式 I 中， A、 L、 M、 Q2、 Q3、 Q4、 R1、 R5、 R6、 R7、 R9a、 R9b、 Ra、 Rb、 Rc、 W、 X、 Y、 Z1、 Z2、 Z3 具有如任一前述实施方式中所定义的相同含义， 且 R2、 R3 及 R4 独立地表示 氢、 氟、 氯或任选被一个或多个氟原子取代的 -CH3 ；
及其盐， 特别是其与有机或无机酸或碱形成的生理学上可接受的盐。
在另一实施方式中， 在通式 I 中， A、 L、 M、 Q 2、 Q3、 Q4、 R 1、 R2、 R3、 R4、 R5、 R6、 R7、 Ra、 Rb、 Rc、 W、 X、 Y、 Z1、 Z2、 Z3 具有如任一前述实施方式中所定义的相同含义， 且每一 R9a 独立地表示 氟、 -CN、 C1-6 烷基、 -OC1-6 烷基， 在后两个基团中烷基片段任选被一个或多个氟原子取代 ； 每 9b 一 R 独立地表示卤素、 -CN、 -OC1-3 烷基、 C1-7 烷基 ( 后两个基团任选被一个或多个氟原子取 代)；
及其盐， 特别是其与有机或无机酸或碱形成的生理学上可接受的盐。
在另一实施方式中， 在通式 I 中， A、 L、 M、 Q 2、 Q3、 Q4、 R 1、 R2、 R3、 R4、 R5、 R6、 R7、 Ra、 Rb、 Rc、 W、 X、 Y、 Z1、 Z2、 Z3 具有如任一前述实施方式中所定义的相同含义， 且每一 R9a 独立地表示 氟、 -CN、 C1-3 烷基、 -OC1-3 烷基， 在后两个基团中烷基片段任选被一个或多个氟原子取代 ； 每 9b 一 R 独立地表示卤素、 -CN、 -OC1-3 烷基、 C1-7 烷基 ( 后两个基团任选被一个或多个氟原子取 代)；
及其盐， 特别是其与有机或无机酸或碱形成的生理学上可接受的盐。
在另一实施方式中， 在通式 I 中， A、 M、 Q2、 Q3、 Q4、 R1、 R2、 R3、 R4、 R5、 R6、 R7、 Ra、 Rb、 Rc、 W、 X、 Y、 Z1、 Z2、 Z3 具有如任一前述实施方式中所定义的相同含义， 且 L 表示 -C(O) 8 8 N(R )- 或 -S(O)2N(R )-， 这些基团分别经碳或硫原子连接至 9 元稠合的杂芳香骨架 ； 或 A-L- 在一起表示以下基团之一，
其中 ：
V 表示化学键、 -CH2-、 -CH2CH2-、 -CH2CH2CH2-， 后述亚烷基可任选被以下一个或两个 基团取代 ： 氟、 -CN、 -OC1-3 烷基 ；
及其盐， 特别是其与有机或无机酸或碱形成的生理学上可接受的盐。
在另一实施方式中， 在通式 I 中， A、 M、 Q2、 Q3、 Q4、 R1、 R2、 R3、 R4、 R5、 R6、 R7、 Ra、 Rb、 Rc、 W、 X、 Y、 Z1、 Z2、 Z3 具有如任一前述实施方式中所定义的相同含义， 且 L 表示 -C(O) NH- 或 -S(O)2NH-， 这些基团分别经碳或硫原子连接至 9 元稠合的杂芳香骨架 ；
及其盐， 特别是其与有机或无机酸或碱形成的生理学上可接受的盐。
在另一实施方式中， 在通式 I 中， L、 A、 M、 Q 2、 Q3、 Q4、 R1、 R2、 R3、 R4、 R5、 R6、 Ra、 Rb、 Rc、 W、 X、 Y、 Z1、 Z2、 Z3 具有如任一前述实施方式中所定义的相同含义， 且每一 R7 表示氢、 卤素、 C1-5 烷基 -O-、 C3-5 环烷基 -C0-2 烷基 -O-、 4-5 元杂环烷基 -C0-2 烷基 -O-( 在后三个基团中烷 基、 环烷基或杂环烷基片段任选被一个或多个选自氟、 -OC1-3 烷基的取代基取代或被一个或
多个可任选被一个或多个氟原子取代的 C1-3 烷基取代 ) ；
及其盐， 特别是其与有机或无机酸或碱形成的生理学上可接受的盐。
在另一实施方式中， 在通式 I 中， L、 M、 Q2、 Q 3、 Q4、 R1、 R2、 R3、 R4、 R5、 R6、 R7、 Ra、 Rb、 Rc、 W、 1 2 3 X、 Y、 Z、 Z、 Z 具有如任一前述实施方式中所定义的相同含义， 且 A 表示氢、 C1-6 烷基、 C3-6 炔 基、 苯基、 5-6 元杂芳基、 C3-6 环烷基 -C0-2 烷基、 4-6 元杂环烷基 -C0-2 烷基、 苯基 -C1-3 烷基 -、 5-6 元杂芳基 -C1-3 烷基， 其中烷基、 炔基、 环烷基及杂环烷基片段任选被一个或两个选自 R9a 的取代基取代， 苯基、 噻吩基及吡啶基片段任选被一个或两个选自 R9b 的取代基取代 ； 每一 9a R 独立地表示氟、 苯基、 C1-2 烷基、 -OC1-4 烷基， 后两个基团任选被 1 至 3 个氟原子取代 ； 每 9b 一 R 独立地表示氟、 氯、 溴、 C1-2 烷基、 -OC1-2 烷基， 后两个基团任选被一个或多个氟取代 ；
及其盐， 特别是其与有机或无机酸或碱形成的生理学上可接受的盐。
在另一实施方式中， 在通式 I 中， A、 L、 Q2、 Q3、 Q 4、 R1、 R2、 R 3、 R 4、 R5、 R 6、 R7、 R a、 Rb、 Rc、 W、 X、 Y、 Z1、 Z2、 Z3 具有如任一前述实施方式中所定义的相同含义， 且 M 表示 C1-6 烷基、 C3-6 环 烷基、 4-6 元杂环烷基， 所有这些基团任选被一个或多个选自氟、 -OH、 -CN、 -NH2、 苯基、 -CF3、 C1-2 烷基、 C3-5 环烷基 -C0-1 烷基的基团取代 ； 或苯基、 5-6 元杂芳基， 这两者任选被一个或多 个独立地选自氟、 氯、 甲基、 -CF3、 甲氧基的取代基取代 ；
及其盐， 特别是其与有机或无机酸或碱形成的生理学上可接受的盐。
在另一实施方式中， 在通式 I 中， A、 L、 M、 Q2、 Q3、 Q4、 R2、 R3、 R4、 R5、 R6、 R7、 Ra、 Rb、 Rc、 W、 X、 Y、 Z1、 Z2、 Z3 具有如任一前述实施方式中所定义的相同含义， 且 R1 表示氟、 氯、 溴、 C1-2 烷 基、 C1-2 烷氧基， 后两个基团任选被一个或多个氟原子取代 ；
及其盐， 特别是其与有机或无机酸或碱形成的生理学上可接受的盐。
在另一实施方式中， 在通式 I 中， A、 L、 M、 Q2、 Q3、 Q 4、 R1、 R2、 R 3、 R4、 R5、 R6、 R7、 W、 X、 Y、 1 2 3 a b c Z、 Z、 Z 具有如任一前述实施方式中所定义的相同含义， 且R、 R 及 R 表示氢，
及其盐， 特别是其与有机或无机酸或碱形成的生理学上可接受的盐。本发明的另一实施方式包含式 I 化合物， 即式 Ie 化合物，其中 ：
A 表示氢、 C1-6 烷基、 苯基炔丙基、 苯基、 C3-6 环烷基 -C0-2 烷基、 四氢呋喃基 -C0-2 烷 基、 吡咯烷基 -C0-2 烷基、 哌啶 -C0-2 烷基、 吡啶基 -C1-2 烷基 -， 其中烷基、 炔基、 环烷基及杂环 9a 烷基片段任选被一个或多个选自 R 的取代基取代， 苯基及吡啶基片段任选被一个或多个 9b 选自 R 的取代基取代 ；
每一 R9a 独立地表示氟、 C1-2 烷基、 -OC1-4 烷基， 在后两个基团中烷基片段任选被一 个或多个氟原子取代 ；
每一 R9b 独立地表示氟、 氯、 溴，
L 表示 -C(O)NH- 或 -S(O)2NH-， 这些基团分别经碳或硫原子连接至 9 元稠合的杂 芳香骨架 ；
W 表示 -C(O)-、 -S(O)2- ；
M 表示 C1-4 烷基、 C3-6 环烷基， 后两个基团任选被一个或多个选自氟、 -OH、 -CN、 -NH2、 苯基、 CF3、 C1-2 烷基、 环丙基 - 甲基的基团取代 ； 或表示氧杂环丁烷基或四氢呋喃基， 这两个 基团任选被 CH3 基团取代 ； 或苯基、 噻吩基， 这两个基团任选被一个或两个独立地选自氟或 氯的取代基取代，
R1 表示氟、 氯、 溴、 CH3、 CH2F、 CHF2、 CF3、 -OCH3 ； 4
R 表示氢或氟 ；
R6 表示氢、 C1-3 烷基、 C3-5 环烷基 -C0-1 烷基， 后两个基团任选被一个或多个选自 氟、 -OCH3、 -NH(C1-3 烷基 )、 -N(C1-3 烷基 )2 的取代基取代 ； 7-Z2
R 表示氢、 卤素、 -OC1-5 烷基， 其中后述基团烷基任选被一个或多个氟原子取代 ； 7-Z1 7-Z3
R 及 R 独立地表示氢或氟 ；
及其盐， 特别是其与有机或无机酸或碱形成的生理学上可接受的盐。
所用的术语及定义
本文中使用的术语 “药学上可接受的” 是指在合理的医学判断范围内， 适合于人类 及动物组织接触使用而无过度毒性、 刺激性、 过敏反应或其它问题或并发症、 与合理的收益 / 风险比率相称的那些化合物、 物质、 组合物和 / 或剂型。
如本文所使用的 “药学上可接受的盐” 是指所公开化合物的衍生物， 其中母体化合 物通过制成其酸性盐或碱性盐而进行修饰。药学上可接受的盐的实施例包括 ( 但不限于 ) 碱性残基 ( 例如胺 ) 的无机酸盐或有机酸盐 ； 酸性残基 ( 例如羧酸 ) 的碱金属盐或有机盐 ； 及其类似物。 药学上可接受的盐包括例如由无毒性的无机或有机酸形成的母体化合物的常
规无毒性盐或季铵盐。
本发明的药学上可接受的盐可通过常规化学方法由含有碱性或酸性部分的母体 化合物进行合成。一般而言， 此类盐可通过将游离酸或游离碱形式的这些化合物在水或有 机溶剂或两者的混合物中与化学计算量的适宜碱或酸反应而制备 ； 一般而言， 如乙醚、 乙 酸乙酯、 乙醇、 异丙醇或乙腈的非水性介质为优选。合适的盐的例子可见于 Remington′ s Pharmaceutical Sciences， 第 17 版， Mack Publishing Company， Easton， Pa， 1985， 第 1418 页中， 将该文献的公开内容在此引入作为参考。
作为本说明书主题的各化合物的药学活性盐的实施例包括 ( 但不限于 ) 由药学上 可接受的酸或碱， 包括有机酸及无机酸以及有机碱及无机碱制备的盐。若优选化合物呈碱 性， 则可由药学上可接受的酸制备成盐。当选择最优选的盐或明确表示是否使用盐或中性 化合物时， 尤其要考虑例如生物利用度、 制造简易度、 可加工性及贮存期这些性质。
合适的药学上可接受的酸包括乙酸、 苯磺酸 ( 苯磺酸盐 )、 苯甲酸、 对溴苯磺酸、 樟脑磺酸、 碳酸、 柠檬酸、 乙磺酸、 富马酸、 葡萄糖酸、 谷氨酸、 氢溴酸、 盐酸、 氢碘酸、 羟乙基 磺酸、 乳酸、 马来酸、 苹果酸、 扁桃酸、 甲磺酸 ( 甲磺酸盐 )、 粘糠酸 (mucinic acid)、 硝酸、 草酸、 双羟萘酸、 泛酸、 磷酸、 琥珀酸、 硫酸、 酒石酸、 对甲苯磺酸及其类似物。药学上可接受 的盐的实施例包括 ( 但不限于 ) 乙酸盐、 苯甲酸盐、 羟基丁酸盐、 硫酸氢盐、 亚硫酸氢盐、 溴 化物、 丁炔 -1， 4- 二酸盐、 己酸盐、 氯化物、 氯苯甲酸盐、 柠檬酸盐、 磷酸二氢盐、 二硝基苯甲 酸盐、 富马酸盐、 谷氨酸盐、 乙醇酸盐、 庚酸盐、 己炔 -1， 6- 二酸盐、 羟基苯甲酸盐、 碘化物、 乳酸盐、 马来酸盐、 丙二酸盐、 扁桃酸盐、 偏磷酸盐、 甲磺酸盐、 甲氧基苯甲酸盐、 甲基苯甲酸 盐、 磷酸氢盐、 萘 -1- 磺酸盐、 萘 -2- 磺酸盐、 草酸盐、 苯基丁酸盐、 苯基丙酸盐、 磷酸盐、 邻苯 二甲酸盐、 苯基乙酸盐、 丙磺酸盐、 丙炔酸盐、 丙酸盐、 焦谷氨酸盐、 焦磷酸盐、 焦硫酸盐、 癸 二酸盐、 辛二酸盐、 琥珀酸盐、 硫酸盐、 亚硫酸盐、 磺酸盐、 酒石酸盐、 三氟乙酸盐、 二甲苯磺 酸盐及其类似物。
“异构体” ： 应当理解， 本发明的化合物可含有一个或多个经不对称取代的碳原子， 因此其可被分离为外消旋形式或光学活性形式 ( 即， 呈其相应的对映异构体或非对映异构 体形式 )。
在某些情况下， 式 I 化合物的对映异构体或非对映异构体与另一者相比可表现出 较高活性。如有需要， 可使用常规技术， 例如分步结晶或 HPLC 技术从化合物的非对映异构 混合物中分离出非对映异构体。可利用本领域技术人员熟知的方法获得所需的对映异构 体， 即， 通过将合适的光学活性起始物质在不会引起外消旋化或差向异构化的条件下反应 ( 即， “手性池” 方法 ) ； 通过将合适的起始物质与 “手性助剂” 反应， 随后可在合适的阶段 移除该手性助剂 ； 通过衍生作用 ( 即拆分， 包括动力学拆分 )， 例如以单一手性酸处理， 接 着通过例如色谱法这样的常规方法分离非对映异构衍生物 ( 参见例如 Thomas J.Tucker 等人， J.Med.Chem.1994， 37， 2437-2444) ； 或通过在本领域技术人员已知的条件下与合适 的手性试剂或手性催化剂进行反应 ( 例如， Mark A.Huffman 等人， J.org.Chem.1995， 60 1590-1594)。
本发明的化合物可含有双键， 因此每一个单独的双键存在 E( 反式 ) 及 Z( 顺式 ) 几何异构体。所有这些异构体及其混合物包括在本发明的范围内。本发明的化合物还可呈 现出互变异构现象。所有互变异构形式及其混合物包括在本发明的范围内。例如， 可认为含有部分 “1H- 苯并咪唑” 的化合物与含有 “3H- 苯并咪唑” 部分的相应化合物一致。
除非明确指出特定的立体化学或异构体形式， 否则所有手性、 对映异构、 非对映异 构、 外消旋结构形式、 互变异构结构形式及所有几何异构结构形式均包括在本发明的范围 内。显然， 药理学上最有效且副作用最低的异构体是优选的。
本发明的主题还包括经氘化的通式 I 化合物， 即， 其中一个或多个氢原子， 例如 1 个、 2 个、 3 个、 4 个或 5 个氢原子由氢同位素氘置换。
术语 “C1-3 烷基” ( 包括作为其它基团一部分的那些基团 ) 是指具有 1 至 3 个碳原 子的烷基， 术语 “C1-4 烷基” 是指具有 1 至 4 个碳原子的支链烷基及直链烷基， 术语 “C1-6 烷 基” 是指具有 1 至 6 个碳原子的支链烷基及直链烷基， 术语 “C1-8 烷基” 是指具有 1 至 8 个 碳原子的支链烷基及直链烷基。实例包括 ： 甲基、 乙基、 正丙基、 异丙基、 正丁基、 异丁基、 仲 丁基、 叔丁基、 正戊基、 新戊基、 正己基、 正庚基及正辛基。 还可任选使用上述基团的缩写 Me、 Et、 n-Pr、 i-Pr、 n-Bu、 i-Bu、 t-Bu 等。除非另有说明， 否则丙基及丁基的定义包括所述基团 的所有可能的异构形式。 因此， 例如， 丙基包括正丙基及异丙基， 丁基包括异丁基、 仲丁基及 叔丁基。术语 “烷基” 还包括 1 至 3 个氢原子被氟原子置换的烷基。
术语 “C1-n 亚烷基” ( 其中 n 为整数 1 至 n) 单独表示或与另一基团共同表示含有 1 至 n 个碳原子的非环状直链或支链二价烷基。 例如， 术语 C1-4 亚烷基包括 -(CH2)-、 -(CH2-CH )-、 -(CH(CH3))-、 -(CH2-CH2-CH2)-、 -(C(CH3)2)-、 -(CH(CH2CH3))-、 -(CH(CH3)-CH2)-、 -(CH2-CH(C H3))-、 -(CH2-CH2-CH2-CH2)-、 -(CH2-CH2-CH(CH3))-、 -(CH(CH3)-CH2-CH2)-、 -(CH2-CH(CH3)-CH2 )-、 -(CH2-C(CH3)2)-、 -(C(CH3)2-CH2)-、 -(CH(CH3)-CH(CH3))-、 -(CH2-CH(CH2CH3))-、 -(CH(CH2CH -(CH(CH2CH2CH3))-、 -(CHCH(CH3)2)- 及 -C(CH3)(CH2CH3)-。 3)-CH2)-、
术语 “C3-8 环烷基” ( 包括作为其它基团一部分的那些基团 ) 是指具有 3 至 8 个碳 原子的环状烷基， 术语 “C3-6 环烷基” 是指具有 3 至 6 个碳原子的环状烷基。实例包括 ： 环丙 基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 环庚基或环辛基， 还包括以下结构 ：2
除非另有说明， 否则环状烷基可被一个或多个选自甲基、 乙基、 异丙基、 叔丁基、 羟 基、 氟、 氯、 溴及碘的基团取代。此外， 这些环烷基可与苯环环并 ( 即稠合 )， 从而形成 9 至 12 元双环杂环。
术语 “C2-6 烯基” ( 包括作为其它基团一部分的那些基团 ) 是指具有 2 至 6 个碳原 子的支链烯基及直链烯基， 条件是其具有至少一个双键。优选为具有 2 至 4 个碳原子的烯 基。实例包括乙烯基、 丙烯基、 丁烯基、 戊烯基或己烯基。除非另有说明， 否则丙烯基、 丁烯 基、 戊烯基及己烯基的定义包括所述基团的所有可能的异构形式。因此， 例如， 丙烯基包括
1- 丙烯基及 2- 丙烯基， 丁烯基包括 1- 丁烯基、 2- 丁烯基及 3- 丁烯基、 1- 甲基 -1- 丙烯基、 1- 甲基 -2- 丙烯基等。
术语 “C2-7 炔基” ( 包括作为其它基团一部分的那些基团 ) 是指具有 2 至 7 个碳原 子的支链炔基及直链炔基， 条件是其具有至少一个叁键。优选为具有 2 至 4 个碳原子的炔 基。这些炔基的实例包括 ： 乙炔基、 丙炔基、 丁炔基、 戊炔基或己炔基。除非另有说明， 否则 丙炔基、 丁炔基、 戊炔基及己炔基的定义包括所述基团的所有可能的异构形式。 因此， 例如， 丙炔基包括 1- 丙炔基及 2- 丙炔基， 丁炔基包括 1- 丁炔基、 2- 丁炔基及 3- 丁炔基、 1- 甲 基 -1- 丙炔基、 1- 甲基 -2- 丙炔基等。
此处使用的术语 “卤素” 包括氟、 氯、 溴及碘。除非另有说明， 否则认为氟、 氯及溴 为优选卤素。
术语 “4-7 元杂环烷基” 是指饱和及单不饱和的稳定的 4 元、 5 元、 6 元或 7 元单环 杂环体系。 一个或两个环碳原子可独立地被选自氧、 氮及硫的杂原子置换， 后述两种杂原子 ( 即氮及硫 ) 可任选被氧化 ( 从而形成 N- 氧化物、 亚砜或砜 )。前述杂环可经碳原子或氮 原子连接至分子的其余部分。4 元、 5 元、 6 元或 7 元杂环体系的实例包括 ：
此外， 这些杂环烷基可与苯环环并 ( 即稠合 )， 从而形成 8 元或 11 元双环杂环。
术语 “芳基” ( 包括作为其它基团一部分的那些基团 ) 是指具有 6 个或 14 个碳原 子的芳环体系 ( 例如 C6-10 芳基 )。这些基团可为单环、 双环或三环形式且具有 6 至 14 个环 碳原子。实例包括苯基、 1- 萘基或 2- 萘基。优选芳基为苯基。除非另有说明， 否则芳香基 团可被一个或多个选自甲基、 乙基、 正丙基、 异丙基、 叔丁基、 羟基、 甲氧基、 三氟甲氧基、 氟、 氯、 溴及碘的基团取代， 而且这些基团可相同或不同。
术语 “杂芳基” 是指可含有 1 个、 2 个、 3 个或 4 个选自氧、 硫及氮的杂原子且还含 有共轭双键数量足以形成芳香系统的 5 元或 6 元杂环芳香基团。此外， 这些杂芳基可与苯 环环并 ( 即稠合 )， 从而形成 9 元或 10 元双环杂芳基。
5 元或 6 元杂环芳香基团的实例包括 ：
9 元或 10 元杂环芳香基团的实例包括 ：除非另有说明， 否则前述杂芳基可被一个或多个选自甲基、 乙基、 正丙基、 异丙基、 叔丁基、 羟基、 甲氧基、 三氟甲氧基、 氟、 氯、 溴及碘的基团取代， 而且这些基团可相同或不 同。此外， 杂芳基中存在的氮原子可被氧化， 从而形成 N- 氧化物。
为了避免疑义， 在式 I 化合物中两个或两个以上取代基的定义可能相同的情况 下， 各取代基的实际定义不管怎样均无相关性。例如， 在 Z1 及 Z2 两者均表示＝ C(R7)- 的情 形中， 则所述的＝ C(R7)- 基团可相同或不同。 类似地， 当基团被一个以上如本文中定义的取 代基取代时， 不应认为那些个别取代基的定义具有相关性。 例如， 当 A 基团表示经两个 R9a 基 团取代的 C1-8 烷基时， 其中在两种情况下 R9a 均表示 -N(C1-3 烷基 )2， 则不应认为两个 -N(C1-3 烷基 )2 基团的定义具有相关性， 即， 两个 -N(C1-3 烷基 )2 部分可相同或不同。类似地， 一个 特定 -N(C1-3 烷基 )2 基团内的 C1-3 烷基也是彼此独立的， 即， 其可彼此相同或不同。
为了避免疑义， 当本文中提及优选特征时， 则可认为这些特征与其它优选特征无 关或与其它优选特征相关。
本领域技术人员应当理解， 作为本发明目标的式 I 化合物包括那些稳定化合物。 即， 本发明的化合物包括其稳定性足够的那些化合物， 以便其以有效纯度从例如反应混合
物中分离出来。
制备方法
可根据例如下文中及实验部分中所描述的本领域技术人员公知的技术制备本发 明的化合物。根据本发明的另一方面， 提供一种制备式 I 化合物的方法， 该方法可例如根据 以下方案 A-E 进行。
方案 A(R5 ＝ H， 所有其它可变基团如权利要求 1 中所定义 ) ：
步骤 a) 中引入的保护基 PG 为本领域技术人员所熟知的标准氮保护基， 例如 “Protective Groups in Organic Synthesis” ， 第 3 版， T.W.Greene & P.G.M.Wutz，
Wiley-Interscience(1999) 中所描述的氮保护基， 例如叔丁氧羰基、 苄氧羰基、 乙氧羰基、 甲氧羰基、 烯丙氧羰基或三氟甲基羰基。
可根据如 “Protective Groups in Organic Synthesis” ， 第 3 版， T.W.Greene& P.G.M.Wutz， Wiley-Interscience(1999) 中所描述的文献操作进行步骤 a)， 例如以 2-( 叔 丁氧基羰氧基亚胺基 )-2- 苯基乙腈 (BOC-ON)、 焦碳酸二 - 叔丁酯 (BOC2O)、 焦碳酸二甲酯、 焦碳酸二乙酯、 氯甲酸乙酯、 氯甲酸甲酯、 氯甲酸烯丙酯、 氯甲酸苄酯或三氟乙酰氯作为试 剂在由该文献已知的条件下， 优选在碱 ( 例如氢氧化钠、 三乙胺、 二异丙基乙胺、 4- 二甲基 氨基 - 吡啶 ) 存在下进行。 适用于此步骤的溶剂例如二氯甲烷、 四氢呋喃 (THF)、 乙腈、 二甲 基甲酰胺 (DMF)、 二甲基乙酰胺、 N- 甲基吡咯烷酮或上述溶剂的混合物。
可使用 H2/ 阮内镍 (raney-Nickel)、 H2/ 钯炭、 Fe 粉末 /NH4Cl 水溶液、 Fe/HCl、 Zn/ HCl、 Na2S2O4、 SnCl2/HCl、 Zn/HCl 或 NaBH4/CuCl 或根据文献例如 R.Larock， Comprehensive Organic Transformations， VCH Verlagsgemeinschaft， Weinheim(1989) 中 描 述 的 操 作 进行步骤 b)。适用于此步骤的溶剂例如二氯甲烷、 四氢呋喃 (THF)、 乙腈、 二甲基甲酰胺 (DMF)、 二甲基乙酰胺、 甲基吡咯烷酮、 乙醇、 甲醇、 异丙醇或上述溶剂的混合物。
可 根 据 标 准 文 献 操 作， 例 如 在 二 氯 甲 烷 或 二 甲 基 甲 酰 胺 的 溶 剂 中， 使用例 如 1， 1 ′ - 硫代羰基二 -2- 吡啶酮或 1， 1 ′ - 硫代羰基二咪唑作为试剂或使用硫光气 (thiophosgene) 且任选添加例如 4- 二甲基氨基 - 吡啶或三乙胺的碱的情况下进行步骤 c)。
可在本领域技术人员已知的标准条件下， 在例如二乙醚、 二甲基甲酰胺、 二氯甲 烷、 乙腈和 / 或四氢呋喃的合适的溶剂存在下进行步骤 d)。优选在例如 NaOH、 KOH、 NaHCO3、 三乙胺、 N- 乙基二异丙胺、 4- 二甲基氨基 - 吡啶的碱或其它合适的碱存在下进行偶合反应。
优选在合适的 “偶合” 试剂存在下进行步骤 e)。例如， 可使用例如二环己基碳二 亚胺 (DCC)、 1- 乙基 -3-(3- 二甲基氨基丙基 ) 碳二亚胺 ( 或其盐， 例如盐酸盐 ) 或 N， N- 二 异丙基碳二亚胺 (DIC) 的基于碳二亚胺的化合物作为 “偶合” 试剂。反应可在任何合适的 温度 ( 例如， 约 0℃至约 200℃之间的温度 ) 下进行， 还可在添加剂 ( 例如 2， 2， 2- 三氟 -N， O- 双 -( 三甲基硅烷基 )- 乙酰胺 ) 存在下进行。适用于此步骤的共溶剂例如二氯甲烷、 四 氢呋喃 (THF)、 乙腈、 二甲基甲酰胺 (DMF)、 二甲基乙酰胺、 N- 甲基吡咯烷酮或上述溶剂的混 合物。
可在分离中间体 XV 或不分离 XV 的情况下以逐步反应进行步骤 d 及 e。
步骤 f) ： 可根据本领域技术人员熟知的技术， 如下文描述脱除保护基。例如， 可使 用 HCl 或 H2SO4 溶液、 三氟乙酸、 KOH、 Ba(OH)2、 钯炭、 三甲基碘硅烷或如 “Protective Groups in Organic Synthesis” ， 第 3 版， T.W.Greene& P.G.M.Wutz， Wiley-Interscience(1999) 中所描述的其它条件将本文中描述的受保护化合物 / 中间体以化学方法转化为不受保护 的化合物。适用于此步骤的共溶剂例如二氯甲烷、 四氢呋喃 (THF)、 乙腈、 二甲基甲酰胺 (DMF)、 二甲基乙酰胺、 N- 甲基吡咯烷酮或上述溶剂的混合物。
步 骤 g) ： 可 使 用 例 如 1- 丙 基 膦 酸 环 酐 (1-propylphosphonic acid cyclic anhydride)、 O-( 苯并三唑 -1- 基 )-N， N， N’ ， N’ - 四甲基脲 唑 -1- 基 )-N， N， N’ ， N’ - 四甲基脲 四氟硼酸盐或 O-( 苯并三 六氟磷酸盐、 N， N′ - 二环己基碳二亚胺、 1-(3- 二甲37基氨基丙基 )-3- 乙基碳二亚胺、 羰基二咪唑、 草酰氯的其它原位活化剂或现有技术的其它102341395 A CN 102341409说明书18/105 页活化剂进行胺 XVII 与酸 XXa 的偶合。
优选在例如 NaOH、 KOH、 NaHCO3、 三乙胺、 N- 乙基二异丙胺、 N， N- 二甲基氨基吡 啶的碱或现有技术的其它合适的碱存在下且例如 Houben-Weyl， “Methods in Organic Synthesis” ， 第 E22a 卷， 第 425 页及后页中所描述进行偶合反应。
或者， 可使用活化的酸衍生物 XXb 进行胺 XVII 的偶合， 其中离去基 LG 可例如 为氟、 氯、 溴、 叠氮化物或异丙氧基 -C(O)-O 阴离子。优选在例如 Houben-Weyl， “Methods in Organic Synthesis” ， 第 E22a 卷， 第 425 页及后页中描述的条件下， 于例如 NaOH、 KOH、 NaHCO3、 三乙胺、 N- 乙基二异丙胺、 4- 二甲基氨基 - 吡啶的碱或其它合适的碱存在下进行偶 合反应。
若在三甲基铝或三乙基铝存在下进行步骤 g)， 则 XXb 中的离去基还可为甲氧基或 乙氧基。
在合适的溶剂例如二氯甲烷、 四氢呋喃 (THF)、 乙腈、 二甲基甲酰胺 (DMF)、 二甲基 乙酰胺、 N- 甲基吡咯烷酮或上述溶剂的混合物中进行上述偶合反应。
方案 B(R5 ＝符合上文定义的烷基链， 其它可变基团如权利要求 1 中所定义 )
步骤 h) ： 根据已知操作， 在合适的溶剂例如在四氢呋喃或二氯甲烷中， 使用三乙 酰氧基硼氢化钠、 硼氢化钠或氰基硼氢化钠进行还原胺化， 如果需要可添加乙酸或三氟乙 酸， 或在氢气氛围下在四氢呋喃或乙醇或甲醇或异丙醇或二甲基甲酰胺中使用钯炭， 优选在乙酸或三氟乙酸存在下进行还原胺化。
可根据标准文献操作进行步骤 i)， 例如在合适的溶剂 ( 例如二氯甲烷或二甲基甲 酰胺 ) 中使用试剂例如硫光气， 任选添加碱例如 4- 二甲基氨基 - 吡啶或三乙胺。
可在本领域技术人员已知的标准条件下， 于例如二乙醚、 二甲基甲酰胺、 二氯甲 烷、 乙腈和 / 或四氢呋喃的合适的溶剂存在下进行步骤 j)。优选在例如 NaOH、 KOH、 NaHCO3、 三乙胺、 N- 乙基二异丙胺、 4- 二甲基氨基 - 吡啶的碱或其它合适的碱存在下进行偶合反应。
优选在合适的偶合试剂 ( 例如基于碳二亚胺的化合物， 例如二环己基碳二亚胺 (DCC)、 1- 乙基 -3-(3- 二甲基氨基丙基 ) 碳二亚胺 ( 或其盐， 例如盐酸盐 ) 或 N， N- 二异丙 基碳二亚胺 (DIC)) 存在下进行步骤 k)。 反应可在任何合适的温度 ( 例如， 约 0℃至约 200℃ 之间的温度 ) 下进行， 还可在添加剂 ( 例如 2， 2， 2- 三氟 -N， O- 双 -( 三甲基硅烷基 )- 乙酰 胺 ) 存在下执行。适用于此步骤的共溶剂为例如二氯甲烷、 四氢呋喃、 乙腈、 二甲基甲酰胺、 二甲基乙酰胺、 N- 甲基吡咯烷酮或上述溶剂的混合物。
可在分离中间体 XXI 或不分离 XXI 的情况下以逐步反应进行步骤 j 及 k。
步骤 l) ： 可根据本领域技术人员熟知的技术， 如下文描述脱除保护基。例如， 可使 用 HCl 或 H2SO4 溶液、 三氟乙酸、 KOH、 Ba(OH)2、 钯炭、 三甲基碘硅烷或如 “Protective Groups in Organic Synthesis” ， 第 3 版， T.W.Greene& P.G.M.Wutz， Wiley-Interscience(1999) 中所描述的其它条件将本文中所描述的受保护化合物 / 中间体以化学方法转化为不受保 护的化合物。 适用于此步骤的共溶剂为例如二氯甲烷、 四氢呋喃、 乙腈、 二甲基甲酰胺、 二甲 基乙酰胺、 N- 甲基吡咯烷酮、 甲醇、 乙醇或上述溶剂的混合物。
步骤 m) ： 可使用例如 1- 丙基膦酸环酐、 O-( 苯并三唑 -1- 基 )-N， N， N’ ， N’ -四 甲基脲 四氟硼酸盐或 O-( 苯并三唑 -1- 基 )-N， N， N’ ， N’ - 四甲基脲 六氟磷酸盐、 N， N′ - 二环己基碳二亚胺、 1-(3- 二甲基氨基丙基 )-3- 乙基碳二亚胺、 羰基二咪唑、 草酰氯的 额外原位活化剂或现有技术的其它活化剂进行胺 XXIII 与酸 XXa 的偶合。
优选在例如 NaOH、 KOH、 NaHCO3、 三乙胺、 N- 乙基二异丙胺、 N， N- 二甲基氨基吡啶 的碱或现有技术的其它合适的碱的存在下进行偶合反应， 例如 Houben-Weyl， “Methods in Organic Synthesis” ， 第 E22a 卷， 第 425 页及后页中所描述。
或者， 可使用活化的酸衍生物 XXb 进行胺 XXIII 的偶合， 其中离去基 LG 可为例 如氟、 氯、 溴、 叠氮化物或异丙氧基 -C(O)-O 阴离子。优选在例如 Houben-Weyl， “Methods in Organic Synthesis” ， 第 E22a 卷， 第 425 页及后页中描述的条件下， 于例如 NaOH、 KOH、 NaHCO3、 三乙胺、 N- 乙基二异丙胺、 4- 二甲基氨基 - 吡啶的碱或其它合适的碱的存在下进行 偶合反应。
若在三甲基铝或三乙基铝存在下进行步骤 g)， 则 XXb 中的离去基还可为甲氧基或 乙氧基。
在例如二氯甲烷、 四氢呋喃、 乙腈、 二甲基甲酰胺 (DMF)、 二甲基乙酰胺、 N- 甲基吡 咯烷酮的合适的溶剂或上述溶剂的混合物中进行上述偶合反应。
方案 C(R5、 所有可变基团如权利要求 1 中所定义 )
可根据标准文献操作进行步骤 n)， 例如在二氯甲烷或二甲基甲酰胺的溶剂中使用 例如 1， 1′ - 硫代羰基 -2- 吡啶酮或 1， 1′ - 硫代羰基二咪唑的试剂或使用硫光气， 任选添 加碱例如 4- 二甲基氨基 - 吡啶或三乙胺。
可在本领域技术人员已知的标准条件下， 于例如二乙醚、 二甲基甲酰胺、 二氯甲 烷、 乙腈和 / 或四氢呋喃的合适的溶剂存在下进行步骤 o)。优选在例如 NaOH、 KOH、 NaHCO3、 三乙胺、 N- 乙基二异丙胺、 4- 甲基氨基 - 吡啶的碱或其它合适的碱的存在下进行偶合反应。
优选在合适的 “偶合” 试剂存在下进行步骤 p)。例如， 可使用例如二环己基碳二 亚胺 (DCC)、 1- 乙基 -3-(3- 二甲基氨基丙基 ) 碳二亚胺 ( 或其盐， 例如盐酸盐 ) 或 N， N- 二 异丙基碳二亚胺 (DIC) 的基于碳二亚胺的化合物作为 “偶合” 试剂。反应可在任何合适的 温度 ( 例如， 约 0℃至约 200℃之间的温度 ) 下进行， 还可在添加剂 ( 例如 2， 2， 2- 三氟 -N， O- 双 -( 三甲基硅烷基 )- 乙酰胺 ) 存在下进行。适用于此步骤的共溶剂为例如二氯甲烷、 四氢呋喃 (THF)、 乙腈、 二甲基甲酰胺 (DMF)、 二甲基乙酰胺、 N- 甲基吡咯烷酮或上述溶剂的 混合物。
可在分离中间体 XXV 或不分离 XXV 的情况下以逐步反应进行步骤 o 及 p。
根据方案 D， 构建块 XXIX-a 或 XXIX-b 还可用作前体 (PG1 ＝保护基 )。
方案 D( 除 L 外， 所有可变基团如权利要求 1 中所定义 ) ：保护基 PG1 为本领域技术人员所熟知的标准氮保护基， 例如 “Protective Groups in Organic Synthesis” ， 第 3 版， T.W.Greene & P.G.M.Wutz， Wiley-Interscience(1999) 中所描述的氮保护基， 例如叔丁氧羰基、 苄氧羰基、 乙氧羰基、 甲氧羰基、 烯丙氧羰基或三氟 甲基羰基。
可在本领域技术人员已知的标准条件下， 于例如二乙醚、 二甲基甲酰胺、 二氯甲 烷、 乙腈和 / 或四氢呋喃的合适的溶剂存在下进行步骤 q)。优选在例如 NaOH、 KOH、 NaHCO3、
三乙胺、 N- 乙基二异丙胺、 4- 二甲基氨基 - 吡啶的碱或其它合适的碱的存在下进行偶合反 应。
优选在合适的 “偶合” 试剂存在下进行步骤 r)。例如， 可使用例如二环己基碳二 亚胺 (DCC)、 1- 乙基 -3-(3- 二甲基氨基丙基 ) 碳二亚胺 ( 或其盐， 例如盐酸盐 ) 或 N， N- 二 异丙基碳二亚胺 (DIC) 的基于碳二亚胺的化合物作为 “偶合” 试剂。反应可在任何合适的 温度 ( 例如， 约 0℃至约 200℃之间的温度 ) 下进行， 还可在添加剂 ( 例如 2， 2， 2- 三氟 -N， O- 双 -( 三甲基硅烷基 )- 乙酰胺 ) 存在下进行。适用于此步骤的共溶剂为例如二氯甲烷、 四氢呋喃 (THF)、 乙腈、 二甲基甲酰胺 (DMF)、 二甲基乙酰胺、 N- 甲基吡咯烷酮或上述溶剂的 混合物。
可在分离中间体 XXVII 或不分离 XXVII 的情况下以逐步反应进行步骤 q 及 r。
步 骤 s) ： 可 根 据 本 领 域 技 术 人 员 熟 知 的 技 术， 如 下 文 描 述 脱 除 保 护 基 PG1。 例 如， 可 使 用 HCl 或 H2SO4 溶 液、 三 氟 乙 酸、 KOH、 Ba(OH)2、 钯 炭、 三甲基碘硅烷或如 “Protective Groups in Organic Synthesis” ， 第 3 版， T.W.Greene & P.G.M.Wutz， Wiley-Interscience(1999) 中所描述的其它条件将本文中所描述的受保护化合物 / 中间 体以化学方法转化为不受保护的化合物。适用于此步骤的共溶剂为例如二氯甲烷、 四氢呋 喃 (THF)、 乙腈、 二甲基甲酰胺 (DMF)、 二甲基乙酰胺、 N- 甲基吡咯烷酮、 甲醇、 乙醇或上述溶 剂的混合物。
步骤 t) ： 可使用例如 1- 丙基膦酸环酐、 O-( 苯并三唑 -1- 基 )-N， N， N’ ， N’ -四 甲基脲 四氟硼酸盐或 O-( 苯并三唑 -1- 基 )-N， N， N’ ， N’ - 四甲基脲 六氟磷酸盐、 N， N′ - 二环己基碳二亚胺、 1-(3- 二甲基氨基丙基 )-3- 乙基碳二亚胺、 羰基二咪唑、 草酰氯的 额外原位活化剂或现有技术的其它活化剂进行胺 XXVIII 与酸 A-COOH 的偶合。
优选在例如 NaOH、 KOH、 NaHCO3、 三乙胺、 N- 乙基二异丙胺、 N， N- 二甲基氨基吡啶 的碱或现有技术的其它合适的碱的存在下进行偶合反应， 例如 Houben-Weyl， “Methods in Organic Synthesis” ， 第 E22a 卷， 第 425 页及后页中所描述。
或者， 可使用活化酸衍生物 A-C(O)-LG( 其中离去基 LG 可为例如氟、 氯、 溴、 叠 氮化物或异丙氧基 -C(O)-O 阴离子 ) 或 A-SO2-Cl 进行胺 XXVIII 的偶合。优选在例如 Houben-Weyl， “Methods in Organic Synthesis” ， 第 E22a 卷， 第 425 页及后页中描述的条 件下， 于例如 NaOH、 KOH、 NaHCO3、 三乙胺、 N- 乙基二异丙胺、 N， N- 二甲基氨基吡啶的碱或其 它合适的碱的存在下进行偶合反应。 在例如二氯甲烷、 四氢呋喃 (THF)、 乙腈、 二甲基甲酰胺 (DMF)、 二甲基乙酰胺、 N- 甲基吡咯烷酮的合适的溶剂或上述溶剂的混合物中进行上述偶合反应。
根据方案 E， 构建块 XXX-a 或 XXX-b 还可用作前体。
方案 E( 除 L 外， 所有可变基团如权利要求 1 中所定义 ) ：可在本领域技术人员已知的标准条件下， 于例如二乙醚、 二甲基甲酰胺、 二氯甲 烷、 乙腈和 / 或四氢呋喃的合适的溶剂存在下进行步骤 u)。优选在例如 NaOH、 KOH、 NaHCO3、 三乙胺、 N- 乙基二异丙胺、 4- 二甲基氨基 - 吡啶的碱或其它合适的碱的存在下进行偶合反 应。
优选在合适的 “偶合” 试剂存在下进行步骤 v)。例如， 可使用例如二环己基碳二 亚胺 (DCC)、 1- 乙基 -3-(3- 二甲基氨基丙基 ) 碳二亚胺 ( 或其盐， 例如盐酸盐 ) 或 N， N- 二
异丙基碳二亚胺 (DIC) 的基于碳二亚胺的化合物作为 “偶合” 试剂。反应可在任何合适的 温度 ( 例如， 约 0℃至约 200℃之间的温度 ) 下进行， 还可在添加剂 ( 例如 2， 2， 2- 三氟 -N， O- 双 -( 三甲基硅烷基 )- 乙酰胺 ) 存在下进行。适用于此步骤的共溶剂为例如二氯甲烷、 四氢呋喃 (THF)、 乙腈、 二甲基甲酰胺 (DMF)、 二甲基乙酰胺、 N- 甲基吡咯烷酮或上述溶剂的 混合物。
可在分离中间体 XXXI 或不分离 XXXI 的情况下以逐步反应进行步骤 u 及 v。
可使用已知皂化方法， 例如乙醇、 甲醇或二烷中的 NaOH 或 KOH 水溶液进行步骤w)。
步骤 x) ： 可使用例如 1- 丙基膦酸环酐、 O-( 苯并三唑 -1- 基 )-N， N， N’ ， N’ -四 四氟硼酸盐或 O-( 苯并三唑 -1- 基 )-N， N， N’ ， N’ - 四甲基脲 六氟磷酸盐、 N，甲基脲N′ - 二环己基碳二亚胺、 1-(3- 二甲基氨基丙基 )-3- 乙基碳二亚胺、 羰基二咪唑、 草酰氯的 额外原位活化剂或现有技术的其它活化剂进行胺 XXXIV 与酸 XXXIII 的偶合。
优选在例如 NaOH、 KOH、 NaHCO3、 三乙胺、 N- 乙基二异丙胺、 N， N- 二甲基氨基吡啶 的碱或现有技术的其它合适的碱的存在下进行偶合反应， 例如 Houben-Weyl， “Methods in Organic Synthesis” ， 第 E22a 卷， 第 425 页及后页中所描述。
在例如二氯甲烷、 四氢呋喃 (THF)、 乙腈、 二甲基甲酰胺 (DMF)、 二甲基乙酰胺、 N- 甲基吡咯烷酮的合适的溶剂或上述溶剂的混合物中进行上述偶合反应。
本领域技术人员应当理解， 在上下文描述的方法中， 中间体化合物的官能团可能 需要由保护基保护。
可在上述方案中的反应之前或之后进行官能团的保护和脱除保护基。
可根据本领域技术人员熟知的技术， 如下文描述脱除保护基。 例如， 可使用标准脱 除保护基技术将本文中所描述的受保护化合物 / 中间体以化学方法转化为不受保护的化 合物。
所涉及的化学反应类型将决定保护基的需要及类型以及实现合成的顺序。
保护基的使用充分描述于 “Protective Groups in Organic Chemistry” ， J W F McOmie 编， Plenum Press(1973) 及 “Protective Groups in Organic Synthesis” ， 第 3 版， T.W.Greene & P.G.M.Wutz， Wiley-Interscience(1999) 中。
上 述 方 案 中 所 有 各 步 骤 ( 例 如 保 护 / 脱 除 保 护 基 步 骤、 还 原 胺 化、 酰胺形成 及其它步骤 ) 的条件已为技术人员所熟知， 且描述于例如 Houben-Weyl ： Methoden der organischen Chemie， Georg-Thieme-Verlag， Stuttgart 的标准文献中， 其在实验部分中有 更详细的举例说明。
可使用常规技术由反应混合物中分离出式 I 化合物 ( 包括 I-1 至 I-4)。
生物学检测
所使用的检测基础为测量不同化合物对由 PGH2 形成的微粒体前列腺素 E2 合成 酶 -1(mPGES-1) 依赖性前列腺素 (PG)E2 的抑制。因此， 将 PGE2 的形成用作信号， 此信号的 降低可理解为 mPGES-1 受到抑制。测量 mPGES-1 的抑制的类似检测先前已描述于文献 [1， 2] 中。
所用试剂列表 ：
·谷胱甘肽 (Sigma， G-4251)·Rosetta 大肠杆菌 (E coli) 表达菌株的冷冻培养物
· 具有氨苄西林 (Amp) 的 LB 生长培养基， 该 Amp 在培养物中最终浓度为 50μg/ml
·氯霉素 (Chloroamphenicol) 储备物 34mg/ml(chloro)， 在培养物中最终浓度为 34μg/ml
·用于 500 毫升 -1 升培养物的无菌生长烧瓶
·0.1 M KPi 缓冲液， pH 7.4
·9.25％ HCl
·PGH2(0.25mM)
·Fe(II)Cl2 四水合物， 99％ (Sigma， 220229)
·具有化合物的 384 孔板
·96 孔板， 聚丙烯 (Thermo fast 96， 带裙边， VWR)
·384 孔板聚丙烯 PCR 板 (Greiner 785201)
·Greiner 384 孔聚丙烯板 ( 体外， 目录号 ： 781280)
·用于 96 孔板的粘着密封膜 (Sigma-Aldrich)
·铝箔 (PCR 箔， 来自 Labora 的 310-0030-127-471)
·PBS(GIBCO 14040)
·前列腺素 E2 分析物 (Cisbio， 目录号 ： 62P2APEC)
·Biomek FX 机器人 (Beckman Coulter)
·Biomek NX 机器人 (Beckman Coulter)
·分液仪 (Multidrop) ； 微型或组合 (ThermoLabsystems)
·板读取器 ： Safire2(Tecan)
可如下文所述获得由表达重组人类 mPGES-1 的 Rosetta 大肠杆菌的微粒体 ：
使用冷冻培养物的细菌接种 5ml 具有 Amp 及 Chloro 的 LB。在 37℃以 200rpm 培 育过夜。接着， 用 5ml 培养物接种 500-800ml 含有 Amp 及 Chloro 的 LB， 生长至 0.6-0.8 的 OD640。在诱导前将培养物冷却至 +4℃。以最终浓度为 400μM 的 IPTG 诱导培养物。在室 温 18-23℃以 200rpm 震荡过夜， 表达蛋白。
可在第二天进行以下步骤 ：
1. 在 250ml 离心烧瓶中以 7000rpm 旋落细胞 15 分钟
2. 在 12.5ml 均质缓冲液中溶解来自 250ml 培养物的离心块
3. 通过超声处理破碎细胞， 35％振幅下 4×10 秒
4. 添加 2.5ml MgCl2(100mM) 及 DNase 12.5μl(0.8mg/ml)， 在冰上培育 30 分钟
5. 将细菌碎片旋落且保留上清液， 7000rpm， 15 分钟
6. 通过 1 小时 45000×g 的超速离心法分离上清液中含有蛋白的膜
7. 丢弃上清液， 在 20mM KPi 缓冲液中溶解离心块， 将酶等分且在 -80℃储存等分 样品。
在进行各实验前， 将酶的等分样品解冻， 接着可将其溶解于含有 2.5mMGSH 的 0.1 M KPi pH 7.4 缓冲液中。随后在室温将 50μl 的该酶溶液分配于 384 孔板中。此后， 向各 孔中添加溶解于 DMSO 中的 0.5μl 抑制剂， 在室温培育 25 分钟。随后， 向各孔中添加溶解 于合适的溶剂中的 2μl PGH2， 在室温 1 分钟后加入含有 FeCl2 的酸化终止溶液。将总体积4μl 转移至独立板中， 在定量 PGE2 之前以两个独立步骤按 750 倍稀释。
为了定量已形成的 PGE2 的量， 可通过使用来自 CisBio 的市售试剂盒基本按照制 造商的方案进行 PGE2 的均相时间解析荧光 (HTRF) 检测。简言之， 将 10μl 经稀释的样本 转移至白色 384 孔板中， 可在室温以连续方式或如指示进行以下步骤。
·向阴性对照 (NC) 孔中加入 5μl 由制造商提供的重构缓冲液。
·用粘着密封膜覆盖板。
·现可以 1200rpm 对板离心分离 1 分钟。
·用密封膜覆盖 NC 样本。
· 可 在 4750μl 由 制 造 商 提 供 的 重 构 缓 冲 液 中 稀 释 250μl d2 标 记 的 PGE2(d2-PGE2)。
· 可在 4750μl 由制造商提供的重构缓冲液中稀释 250μl Eu3+- 穴状化合物 (cryptate)。
·现可使用分液仪向 1 至 24 行添加 5μl d2-PGE2。接着自 NC 孔移除密封膜。
·现可使用分液仪向 1 至 24 行添加 5μl Eu3+- 穴状化合物标记的抗 PGE2。
·现可用密封膜覆盖板。
·现可以 1200rpm 对板离心分离 1 分钟且置放于 4℃过夜。
在培育过夜后， 通过使用合适的微板读取器来测量荧光。分别使用以下激发及发 射波长测量 Eu3+- 穴状化合物及 d2-PGE2 的荧光 ： 铕穴状化合物 ： λmaxex ＝ 307nm， λmaxem ＝ 620nm ； d2 ： λmaxex ＝ 620nm， λmaxem ＝ 665nm。具体 HTRF 的程度以 665nm 下的发射强度与 620nm 下的发射强度的比值来衡量。使用合成 PGE2 的标准曲线定量未知样本中 PGE2 的量。 可通过将未知样本中形成的 PGE2 的量除以对照样本中形成的 PGE2 的量， 从而将抑制程度计 算为抑制百分比。
参考文献 ：
1.Riendeau， D.， R.Aspiotis， D.Ethier， Y.Gareau， E.Grimm， J.Guay， S.GuiRal， H.Juteau， J.Mancini， N.Methot， J.Rubin 及 R.Friesen， Inhibitors of the inducible microsomal prostaglandin E2 synthase(mPGES-1) derived from MK-886.Bioorg Med Chem Lett， 2005.15(14) ： 第 3352-3355 页。
2.Cote， B.， L.Boulet， C.Brideau， D.Claveau， D.Ethier， R.Frenette， M.Gagnon， A.Giroux， J.Guay， S.GuiRal， J.Mancini， E.Martins， F.Masse， N.Methot， D.Riendeau， J.Rubin， D.Xu， H.Yu， Y.Ducharme 及 R.Friesen， Substituted phenanthrene imidazoles as potent， selective， and orally active mPGES-1 inhibitors.Bioorg Med Chem Lett， 2007.17(24) ： 第 6816-6820 页。
测试结果 ：
表 1 显示了在上述 HTRF 检测中 10μM 浓度下 ( 除非另有说明 ) 对于所选化合物 测量的 mPGES-1 抑制效应 ( 以抑制百分比表示 )。实施例显示出 10μM 化合物对 PGE2 产生 的抑制达到指定程度。这些数据表明给出的实施例化合物可成功地抑制 mPGES-1。
表 1. 在 HTRF 检测中本发明化合物在 10μM 浓度下的 mPGES-1 抑制效应 ( 以抑制 百分比表示 )
48102341395 A CN 102341409说实施例 1 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24明书％抑制 100 100 83 100 100 98 98 98 100 100 100 100 100 99 80 95 98 98 100 100 98 100 9729/105 页49102341395 A CN 102341409 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48说明书99 100 100 100 99 98 99 98 93 100 100 100 100 100 100 98 100 100 100 100 100 100 100 10030/105 页50102341395 A CN 102341409 49 50 51 52 53 54 55
说明书100 100 94 96 100 98 6831/105 页表 2 显示 了在 上述 HTRF 检 测中对于所 选 实施 例 测 量出 的 mPGES-1 抑制 效 应(IC50)。这些数据表明给出的实施例化合物可成功地抑制 mPGES-1。
表 2. 在 HTRF 检测中本发明化合物的 mPGES-1 抑制效应 (IC50 值， 单位为 nM)
治疗方法 本发明涉及式 I 化合物， 其适用于预防和 / 或治疗抑制前列腺素 E 合成酶， 尤其抑制微粒体前列腺素 E2 合成酶 -1(mPGES-1) 具有治疗益处的疾病和 / 或病症， 包括 ( 但不限 于 ) 治疗和 / 或预防炎症和 / 或相关病症。
术语 “炎症” 应理解为包括任何炎性疾病、 病况或病症本身、 任何具有相关炎性组 成的病症和 / 或任何以炎症作为症状特征的病症， 尤其包括急性、 慢性、 溃疡性、 特异性、 过 敏性及坏死性炎症， 以及本领域技术人员已知的其它炎症形式。因此， 为达成本发明的目 的， 该术语还包括炎性疼痛、 全身疼痛和 / 或发热。
在某一病症具有相关炎性组成或以炎症作为症状特征的情况下， 本领域技术人员 应当理解， 本发明化合物可适用于治疗与该病症相关的炎性症状和 / 或炎症。
本发明化合物还可具有与发炎机制无关的作用， 例如减少个体的骨质流失。这些 病症包括骨质疏松症、 骨关节炎、 佩吉特病 (Paget’ s disease) 和 / 或牙周病。
本发明的另一方面涉及一种式 I 化合物， 其用作药物。
本发明的另一方面为式 I 化合物用于治疗和 / 或预防抑制 mPGES-1 具有治疗益处 的疾病和 / 或病症的用途。
本发明的另一方面为式 I 化合物用于治疗和 / 或预防炎症和 / 或相关病症的用 途。
本发明还涉及式 I 化合物用于治疗和 / 或预防以下疾病及病症的用途 ：
1. 风湿病或自身免疫性疾病或肌肉骨骼疾病 ： 所有形式的风湿病， 包括例如软 组织风湿病、 类风湿性关节炎、 风湿性多肌痛、 反应性关节炎、 腱鞘炎、 痛风或代谢性关节 炎、 滑囊炎、 肌腱炎、 幼年型关节炎 ； 脊椎关节病， 例如脊椎炎、 僵直性脊椎炎、 牛皮癣性关 节病 ； 类肉瘤病、 肌肉纤维疼痛、 肌炎、 多肌炎、 骨关节炎、 创伤性关节炎 ； 任何起源的胶原 性疾病， 例如系统性红斑狼疮、 硬皮病、 皮肌炎、 斯蒂尔病 (Still′ s Disease)、 舍格伦综 合征 (Sjogren syndrome)、 费尔蒂综合征 (Felty syndrome) ； 风湿热及风湿性心脏病 ； 血 管病， 例如血管炎、 多发性结节性关节炎、 贝切特综合征 (Behcet′ s syndrome)、 巨细胞关 节炎、 韦格纳肉芽肿病 (Wegener ′ s granulomatosis)、 过敏性紫癜 (Henoch-Schonlein purpura) ； 牛皮癣性关节炎、 真菌性关节炎， 尤其包括与上述病症中的任一者相关的疼痛。
2. 头痛， 例如有先兆的偏头痛及无先兆的偏头痛、 紧张型头痛、 丛集性头痛及具有 不同起源的头痛 ；
3. 交感神经维持性疼痛， 例如 I 型及 II 型复合性区域疼痛综合征 ；
4. 神经性疼痛， 例如下背痛、 髋部疼痛、 腿疼痛、 非疱疹性神经痛、 疱疹后神经痛、 糖尿病神经病变、 神经损害诱发性疼痛、 获得性免疫缺陷综合征 (AIDS) 相关性神经痛、 头 部创伤、 毒素及化学疗法引起的神经损伤、 幻肢痛、 多发性硬化、 根部撕脱、 疼痛创伤性单神 经病变、 疼痛多发性神经病变、 丘脑疼痛综合征、 中风后疼痛、 中枢神经系统损伤、 术后疼 痛、 腕隧道综合征、 三叉神经痛、 乳房切除术后综合征、 剖胸术后综合征、 残端痛、 重复运动 疼痛、 神经疼痛相关性痛觉过敏及异常疼痛、 酒精中毒及其它药物诱发性疼痛 ；
5. 由肿瘤 ( 例如骨肿瘤、 淋巴细胞性白血病、 霍奇金病 (Hodgkin′ s disease)、 恶 性淋巴瘤、 淋巴肉芽肿病、 淋巴肉瘤、 实体恶性肿瘤、 广泛转移癌 ) 诱发或与肿瘤相关的癌 性疼痛 ；
6. 内脏病症， 例如慢性骨盆疼痛、 胰腺炎、 胃溃疡、 间质性膀胱炎、 膀胱炎、 肾绞 痛、 绞痛症、 痛经、 月经、 妇科疼痛、 过敏性肠综合征 (IBS)、 炎症性肠病、 节段性回肠炎(Crohn′ s disease) 及溃疡性结肠炎、 肾炎、 前列腺炎、 外阴疼痛、 非溃疡性消化不良、 非心 脏性胸痛、 心肌缺血 ；
7. 与炎症相关的耳部疾病、 鼻部疾病、 口腔疾病及咽喉疾病， 例如流行性感冒及 病毒性 / 细菌性感染， 例如普通感冒、 过敏性鼻炎 ( 季节性及常年性 )、 咽炎、 扁桃腺炎、 齿 龈炎、 喉炎、 窦炎及血管舒缩性鼻炎、 发烧、 花粉热、 甲状腺炎、 耳炎、 例如牙痛的牙齿病症、 围手术期及术后病症、 三叉神经痛、 葡萄膜炎、 虹膜炎、 过敏性角膜炎、 结膜炎、 睑炎、 视神经 炎、 脉络膜炎、 青光眼、 交感性眼炎及其疼痛 ；
8. 神 经 疾 病， 例如脑水肿及血管性水肿 ； 大 脑 痴 呆 病， 例如帕金森氏病 (Parkinson′ s disease) 及阿尔茨海默氏病 (Alzheimers disease)、 老年痴呆症 ； 多发性 硬化、 中风、 重症肌无力、 脑部及脑膜感染， 例如脑脊髓炎、 脑膜炎， 包括 HIV 以及精神分裂 症、 妄想症、 自闭症、 情感障碍及抽动障碍 ；
9 与工作相关的疾病， 例如肺尘症， 包括矾土肺、 炭末沉着病、 石棉沉着病、 石末沉 着病、 驼鸟毛尘肺、 肺铁末沉着症、 硅肺病、 烟草尘肺及棉屑沉着病 ；
10. 肺病， 例如哮喘， 包括过敏性哮喘 ( 特应性或非特应性 ) 以及运动诱发的支 气管收缩、 职业性哮喘、 哮喘的病毒性或细菌性恶化、 其它非过敏性哮喘及 “喘鸣婴儿综合 征” ； 慢性阻塞性肺病 (COPD)， 包括肺气肿、 成人呼吸窘迫综合征、 支气管炎、 肺炎、 成人呼吸 窘迫综合征 (ARDS)、 养鸽者病 (pigeon fancier′ s disease)、 农夫肺 (farmers lung) ；
11. 皮肤病， 例如牛皮癣及湿疹、 皮炎、 晒伤、 烧伤、 扭伤、 过劳损伤及组织创伤 ；
12 与炎症相关的血管及心脏疾病， 例如动脉粥样硬化 ( 包括心脏移植动脉粥样硬 化 )、 结节性全动脉炎、 结节性动脉周围炎、 颞动脉炎、 韦格纳肉芽肿病、 巨细胞关节炎、 再灌 注损伤及结节性红斑、 血栓症 ( 例如， 深静脉血栓症、 肾部、 肝部、 门静脉血栓症 ) ； 冠状动脉 病、 动脉瘤、 血管性排斥反应、 心肌梗塞、 栓塞、 中风、 血栓症 ( 包括静脉血栓症 )、 绞痛症 ( 包 括不稳定绞痛 )、 冠状动脉斑块炎症、 细菌诱发性炎症 ( 包括衣原体诱发性炎症 )、 病毒诱发 性炎症及与外科手术 ( 例如血管移植术 ( 包括冠状动脉绕道术 )、 血管再造术 ( 包括血管成 形术 )、 支架置入、 动脉内膜切除术或其它涉及动脉、 静脉及毛细管的侵入性手术 ) 相关的 炎症、 动脉再狭窄 ；
13 与糖尿病相关的症状， 例如糖尿病性血管病变、 糖尿病性神经病变、 糖尿病性视 网膜病、 毛细管后阻力或与胰岛炎相关的糖尿病症状 ( 例如高血糖、 多尿、 蛋白尿以及亚硝 酸盐及胰舒血管素尿排泄增加 ) ；
14. 良性及恶性肿瘤， 包括癌症， 例如结肠直肠癌、 脑癌、 骨癌、 上皮细胞源性瘤 ( 上皮癌 )， 例如基底细胞癌、 腺癌、 胃肠癌， 例如唇癌、 口腔癌、 食道癌、 小肠癌、 胃癌、 结肠 癌、 肝癌、 膀胱癌、 胰腺癌、 卵巢癌、 子宫颈癌、 肺癌、 乳癌、 皮肤癌 ( 例如鳞状细胞癌及基底 细胞癌 )、 前列腺癌、 肾细胞癌瘤及其它已知的影响全身上皮细胞的癌症 ； 肿瘤， 例如胃肠 癌、 巴雷特食道症 (Barrett′ s esophagus)、 肝癌、 膀胱癌、 胰腺癌、 卵巢癌、 前列腺癌、 子宫 颈癌、 肺癌、 乳腺癌及皮肤癌 ； 腺瘤性息肉， 包括家族性腺瘤性息肉病 (FAP) ； 以及防止在具 有罹患 FAP 风险的患者体内形成息肉 ；
15. 各种其它病况及病症， 例如癫痫症 ； 败血性休克 ( 例如作为抗低血溶性和 / 或 抗低血压药物 ) ； 败血症 ； 骨质疏松症 ； 良性前列腺肥大及膀胱机能亢进 ； 肾炎 ； 搔痒症 ； 白 斑病 ； 呼吸、 泌尿生殖、 胃肠或血管区域内脏活动失调 ； 创伤 ； 过敏性皮肤反应 ； 混合性血管综合征及非血管综合征 ； 与细菌性感染或创伤相关联的败血性休克 ； 中枢神经系统损伤 ； 组织损伤及术后发热 ； 与瘙痒相关的综合征。
本发明优选使用式 I 化合物治疗和 / 或预防疼痛， 尤其为与以上列举的疾病或病 症中的任一者相关的疼痛。
本发明的另一方面为一种治疗和 / 或预防上述疾病及病症的方法， 该方法包含向 人类给予有效量的式 I 化合物。
无论用于上述适应症还是用于其它方面， 本发明的化合物与现有技术中已知的化 合物相比还可具有下列优点 ： 更加有效、 毒性较低、 作用时间更长、 更有效力、 产生较少副作 用、 更容易吸收和 / 或具有优选药物动力学性质 ( 例如较高口服生物利用度和 / 或较低清 除率 ) 和 / 或具有其它有效药理学、 物理或化学性质。
剂量
术语 “有效量” 是指化合物对所治疗的患者具有治疗效果的量。该效果可为客观 的 ( 即， 可通过一些测试或标记来测量 ) 或主观的 ( 即， 个体提供效果指示或感觉到效果 )。
可通过变化剂量施用本发明的化合物。口服、 肺部用及局部剂量可在约每天 0.01 毫克 / 千克体重 ( 毫克 / 千克 / 天 ) 至约 100 毫克 / 千克 / 天之间， 优选为约 0.01 至约 100 毫克 / 千克 / 天， 更优选为约 0.1 至约 25 毫克 / 千克 / 天的范围内。对于例如口服， 组 合物通常含有约 0.01mg 至约 5000mg 之间且优选约 1mg 至约 2000mg 之间的活性成份。对 于静脉内给药， 在恒定速率输注期间最佳剂量将在约 0.001 至约 10 毫克 / 千克 / 小时的范 围内。有利的是， 可通过单一日剂量施用化合物， 或可通过每日两次、 三次或四次的分次剂 量给予全部日剂量。
在任何情况下， 医师或本领域技术人员应能够确定最适合于个别患者的实际剂 量， 该剂量可能随给药途径、 治疗病症的类型及严重程度以及特定患者的种类、 年龄、 体重、 性别、 肾功能、 肝功能及反应而变化。上述剂量为一般情况的例示 ； 当然可存在较高或较低 剂量范围有益的个别情形且这些情形属于本发明的范围。
药物制剂
适用于施用上文中以化学式表示的化合物的制剂对本领域一般技术人员而言是 显而易见的， 包括例如片剂、 丸剂、 胶囊、 栓剂、 含剂、 糖衣片、 溶液、 糖浆、 酏剂、 药囊、 可注射 剂、 吸入剂及散剂等。可根据标准和 / 或公知的药学方法制备这些制剂。
根据例如本发明化合物 ( 即活性成份 ) 的效能及物理特性而定， 以整个组合物计， 药学活性化合物的含量应在 1 至 99 重量％， 优选为 10 至 90 重量％， 更优选为 20 至 70 重 量％范围内。
合适的片剂可例如通过混合一种或多种式 I 化合物与已知赋形剂 ( 例如惰性稀释 剂、 载体、 崩解剂、 佐剂、 表面活性剂、 粘合剂和 / 或润滑剂 ) 而获得。片剂还可由若干层组 成。本发明的另一方面为一种药物制剂， 其包括式 I 化合物与药学上可接受的佐剂、 稀释剂 或载体混合。
组合疗法
本发明的化合物可与已知在治疗任一上述适应症 ( 这些适应症的治疗为本发明 的焦点 ) 的技术中使用的其它治疗方案组合。
被认为适合与本发明的治疗组合的此类治疗选择有 ：- 包括 COX-2 抑制剂的非甾体抗炎药 (NSAID) ； - 阿片受体激动剂 ； - 大麻素激动剂 ； - 钠离子通道阻断剂 ； -N 型钙离子通道阻断剂 ； -5- 羟色胺及去甲肾上腺素调节剂 ； - 皮质类固醇 ； - 组胺 H1 受体拮抗剂 ； - 组胺 H2 受体拮抗剂 ； - 质子泵抑制剂 ； - 白三烯拮抗剂及 5- 脂氧合酶抑制剂 ； - 局部麻醉剂 ； -VR1 激动剂及拮抗剂 ； - 烟碱乙酰胆碱受体激动剂 ； -P2X3 受体拮抗剂 ； -NGF 激动剂及拮抗剂 ； -NK1 及 NK2 拮抗剂 ； -NMDA 拮抗剂 ； - 钾离子通道调节剂 ； -GABA 调节剂 ； -5- 羟色胺及去甲肾上腺素调节剂 ； - 抗偏头痛药物。 上述例举不应视为具有限制性。 在下文中提供这些治疗方案的代表性示例。 · 包括 COX-2 抑制剂的非甾体抗炎药 (NSAID) ： 丙酸衍生物 ( 阿明洛芬、 苯 洛芬、布氯酸、 卡洛芬、 芬护芬 (fenhufen)、 非诺洛芬、 氟比洛芬、 布洛芬、 吲哚洛芬、 酮洛芬、 咪洛 芬、 萘普生、 奥沙普秦、 吡洛芬、 普拉洛芬、 舒洛芬、 噻洛芬酸及硫 洛芬 )、 乙酸衍生物 ( 吲 哚美辛、 阿西美辛、 阿氯芬酸、 环氯茚酸、 双氯芬酸、 芬氯酸、 芬克洛酸、 芬替酸、 呋罗芬酸、 异 丁芬酸、 伊索克酸、 欧比那酸 (oxpinac)、 舒林酸、 硫平酸、 托美丁、 齐多美辛及佐美酸 )、 灭 酸衍生物 ( 甲氯芬那酸、 甲芬那酸及托芬那酸 )、 联苯基羧酸衍生物、 昔康类 (oxicams)( 伊 索昔康、 美洛昔康、 吡罗昔康、 舒多昔康及替诺昔康 )、 水杨酸盐 ( 乙酰水杨酸、 柳氮磺吡啶 ) 及二氢吡唑酮 ( 阿扎丙宗、 贝比派瑞 (bezpiperylon)、 非普拉宗、 莫非布宗、 羟布宗、 保泰 松 ) 及昔布类药物 ( 塞来昔布、 伐地考昔 (valecoxib)、 罗非昔布及依他昔布 ) 等 ；
· 抗 病 毒 药 物， 例 如 阿 昔 洛 韦、 特 洛 韦 (tenovir)、 普 来 可 那 利、 帕拉米韦 (peramivir)、 泊库萨诺 (pocosanol) 等 ；
· 抗生素药物， 例如庆大霉素、 链霉素、 格尔德霉素、 多利培南、 头孢氨苄、 头孢克 洛、 头孢他啶、 头孢吡肟、 红霉素、 万古霉素、 氨曲南、 阿莫西林、 杆菌肽、 依诺沙星、 磺胺米 隆、 多西环素、 氯霉素等 ；
·阿片受体激动剂 ： 吗啡、 丙氧芬 ( 达而丰 (Darvon))、 曲马多、 丁丙诺啡等 ；· 糖皮类固醇， 例如倍他米松 (bethamethasone)、 布地奈德、 地塞米松、 氢化可的 松、 甲泼尼龙、 泼尼松龙、 泼尼松、 曲安西龙及地夫可特 ；
· 免疫抑制、 免疫调节或细胞抑制药物， 包括 ( 但不限于 ) 羟基氯喹、 D- 青霉胺、 柳 氮磺胺吡啶 (sulfasalizine)、 金诺芬、 金巯嘌呤 (gold mercaptopurine)、 他克莫司、 西罗 莫司、 霉酚酸酯、 环孢霉素 A、 来氟米特、 甲氨蝶呤、 硫唑嘌呤、 环磷酰胺及醋酸格拉太米尔及 米托蒽醌、 芬戈莫德 (fingolimod)(FTY720)、 米诺环素及沙利度胺等 ；
·抗 TNF 抗体或 TNF 受体拮抗剂， 例如 ( 但不限于 ) 依那西普、 英夫利昔单抗、 阿 达木单抗 (D2E7)、 CDP 571 及 Ro 45-2081( 来那西普 )， 或直接针对靶标例如 ( 但不限于 ) CD-4、 CTLA-4、 LFA-1、 IL-6、 ICAM-1、 C5 的生物剂及那他珠单抗等 ；
·IL-1 受体拮抗剂， 例如 ( 但不限于 ) 阿那白滞素 (Kineret) ；
· 钠离子通道阻断剂 ： 卡马西平、 美西律、 拉莫三嗪、 特西汀 (tectin)、 拉科酰胺 (lacosamide) 等 ；
·N 型钙离子通道阻断剂 ： 齐考诺肽等 ；
·5- 羟色胺及去甲肾上腺素调节剂 ： 帕罗西汀、 度洛西汀、 可乐宁、 阿米替林、 西酞 普兰 ；
·组胺 H1 受体拮抗剂 ： 溴苯那敏 (bromophtniramint)、 氯苯那敏、 右氯苯那敏、 曲 普利啶、 氯马斯汀、 苯海拉明、 二苯拉林、 曲吡那敏、 羟嗪、 甲地嗪、 异丙嗪、 阿利马嗪、 阿扎他 啶、 赛庚啶、 安他唑啉、 非尼拉敏、 美吡拉敏、 阿司咪唑、 特非那定、 氯雷他定、 西替利嗪、 地氯 雷他定、 非索非那定及左西替利嗪等 ；
·组胺 H2 受体拮抗剂 ： 西咪替丁、 法莫替丁及雷尼替丁等 ；
·质子泵抑制剂 ： 奥美拉唑、 泮托拉唑及艾美拉唑等 ；
· 白三烯拮抗剂及 5- 脂氧合酶抑制剂 ： 扎鲁司特、 孟鲁司特、 普仑司特及齐留通 等；
·局部麻醉剂， 例如氨溴索、 利多卡因等 ；
·钾离子通道调节剂， 例如瑞替加滨 ；
·GABA 调节剂 ： 拉科酰胺 (lacosamide)、 普瑞巴林、 加巴喷丁等 ；
· 抗 偏 头 痛 药 物 ： 舒 马 曲 坦、 佐 米 曲 坦、 那 拉 曲 坦、 依 来 曲 普 坦、 特卡格特 (telcegepant) 等 ；
·NGF 抗体， 例如 RI-724 等。
还有可能利用新原理以组合疗法治疗疼痛， 例如与 P2X3 拮抗剂、 VR1 拮抗剂、 NK1 及 NK2 拮抗剂、 NMDA 拮抗剂、 mGluR 拮抗剂等组合。
化合物的组合优选为协同组合。协同作用， 例如由 Chou 及 Talalay， Adv.Enzyme Regul.22 ： 27-55(1984) 中描述， 发生在化合物以组合方式施用时的效应大于化合物以单 一试剂单独施用时的累加效应时。一般而言， 在化合物的次最佳浓度情况下最清楚地显示 出协同效应。 协同作用可体现在如下方面 ： 组合与各组份相比细胞毒性降低、 药理学效应增 加或具有某些其它有益效果。
实验部分
通式 I 化合物的制备实施例
除非另有说明， 否则可原位制备和 / 或分离以下描述的实施例化合物的一个或多个互变异构形式。以下描述的实施例化合物的所有互变异构形式应被认为已公开。
使用以下实施例例示本发明， 其中可使用以下缩写 ：
缩写 ：
分析方法
使用以下薄层色谱板获得 TLC 数据 ：
a) 硅胶板 60 F254 Merck 型号 ： 1.05714.0001， 在实验部分中缩写为 “硅胶” ；
b) 反相板 RP-8 F254s Merck 型号 ： 1.15684.0001， 在实验部分中缩写为 “RP-8” ；
c) 氧化铝板 60 F254 Merck 1.05713.0001， 在实验部分中缩写为 “Alox” 。
给出的 Rf 值在无需展开室饱和的情况下测定。
在以下条件下获得所列举的 HPLC/MS 数据 ：
具有四元泵的 Agilent 1100、 Gilson G215 自动取样器、 HP 二极管阵列检测器 ； 在 210-550nm 的波长范围内进行二极管阵列检测 ； 质谱检测范围 ： m/z 120 至 m/z 1000。
使用以下方法 ：
方法 A ：
流动相 ：
E1 ： 含有 0.15％甲酸的水
E2 ： 乙腈
动相梯度 C( 非极性 ) ：
以下的柱用作固定相 ： ( 柱温 ： 恒定在 25℃ ) ： Zorbax Stable Bond C18， 1.8μm， 3.0×30mm。
方法 B ：
流动相 ： E1 ： 含有 0.15％甲酸的水 E2 ： 乙腈 流动相梯度 C( 非极性 ) ：以下的柱用作固定相 ： ( 柱温 ： 恒定在 25℃ ) ： Zorbax StableBond C18， 3.5μm， 4.6×75mm。
以下化合物附有结构图。本领域技术人员应当理解必须遵循价键规则， 因此必 须存在一定数目的键连接于各原子上， 这些键可能不必在图中示出。例如， 在氮杂原子被 表示为仅有一个或两个键连接于其上的情况下， 本领域技术人员将知晓其应连接另外的 一个或两个键 ( 总共三个 )， 其中这些键通常连接至一个或两个氢原子 ( 从而形成 -NH2
或 -N(H)- 部分 )。
实施例 1
2-[5-(1- 乙 酰 氨 基 乙 基 )-2- 氯 苯 基 氨 基 ]-N-(4- 溴 苯 基 )-1- 甲 基 苯 并 咪 唑 -5- 甲酰胺
(a)4- 氯 -α- 甲基 -3- 硝基苄胺
在室温向 4- 氯 -3- 硝基苯乙酮 (1.00g， 5mmol) 的 MeOH(15mL) 混合物中加入乙酸 铵 (3.86g， 50mmol)、 NaBH3CN(0.22g， 3.5mmol) 及 分子筛 (25g)。 在室温搅拌混合物 20 小 时， 加入 NaHCO3( 饱和水溶液 ) 及 EtOAc。将混合物过滤并用 EtOAc 洗涤水层。使用 Na2SO4 干燥经合并的有机相， 浓缩得到副标题化合物。产率 ： 0.27g(27％ )。
(b)N-[1-(4- 氯 -3- 硝基苯基 ) 乙基 ] 乙酰胺
在室温向 4- 氯 -α- 甲基 -3- 硝基苄胺 (0.27g， 1.3mmol) 的 THF(5mL) 溶液中相 继加入 TEA(0.28mL， 2.0mmol) 及乙酰氯 (96μL， 1.3mmol)。 在室温搅拌混合物 3.5 小时， 再 次加入乙酰氯 (20μL， 0.27mmol)。室温 1 小时后， 加入 NaHCO3(5％水溶液 ) 并用 EtOAc 萃 取混合物。
使用 Na2SO4 干燥经合并的萃取物， 浓缩得到副标题化合物。产率 ： 0.30g(92％ )。
(c)N-[1-(3- 氨基 -4- 氯苯基 ) 乙基 ] 乙酰胺
在 55 ℃ 向 经 剧 烈 搅 拌 的 N-[1-(4- 氯 -3- 硝 基 苯 基 ) 乙 基 ] 乙 酰 胺 (0.30g， 1.2mmol) 的 EtOH(20mL) 混合物中加入连二亚硫酸钠 (1.08g， 6.1mmol) 的 H2O(4mL) 溶液。 在 55℃ 4 小时后， 再次加入连二亚硫酸钠 (0.20g， 1.1mmol)， 继续在 55℃搅拌 1.5 小时。将 混合物冷却并加入 NaHCO3( 饱和水溶液 )。用 EtOAc 萃取混合物， 使用 Na2SO4 干燥经合并的 萃取物， 浓缩得到副标题化合物。产率 ： 90mg(34％ )。
(d)N-[1-(4- 氯 -3- 异硫氰酸酯基 (isothiocyanato) 苯基 ) 乙基 ] 乙酰胺
在室温向 1， 1′ - 硫代羰基二 -2- 吡啶酮 (69mg， 0.2mmol)、 DMAP(7mg， 0.05mmol) 及 DCM(2mL) 的混合物中加入 N-[1-(3- 氨基 -4- 氯苯基 ) 乙基 ] 乙酰胺 (90mg， 0.2mmol)。 浓缩混合物， 无需进一步纯化即用于下一步骤。
(e)3- 硝基 -N-(4- 溴苯基 )-4- 甲基氨基苯甲酰胺
搅拌 3- 硝基 -4- 甲基氨基苯甲酸 (196mg， 1.00mmol)、 20ml DCM、 0.15ml 吡啶及 160mg 的 1- 氯 -N， N， 2- 三甲基丙 -1- 烯基胺的混合物， 直至获得澄清溶液。加入 4- 溴苯 胺 (172mg， 1.0mmol)， 搅拌混合物 16 小时。使用 ALOXB 垫将混合物过滤且浓缩。加入 5ml DMF 及 20ml H2O， 收集沉淀并干燥。产率 ： 240mg(68％ )。
(f)3- 氨基 -N-(4- 溴苯基 )-4- 甲基氨基苯甲酰胺
在氢气氛围 (3.5 巴 ) 下搅拌 3- 硝基 -N-(4- 溴苯基 )-4- 甲基氨基苯甲酰胺 (120mg， 0.34mmol)、 10ml THF、 10ml MeOH 及 30mg 5％钯 / 碳的混合物 4 小时。通过过滤移 除催化剂， 浓缩混合物， 无需进一步纯化即用于下一步骤。
(g)3-{3-[5-(1- 乙酰基氨基乙基 )-2- 氯苯基 ] 硫脲基 }-N-(4- 溴苯基 )-4-( 甲 基氨基 ) 苯甲酰胺
在室温向 3- 氨基 -N-(4- 溴苯基 )-4- 甲基氨基苯甲酰胺 (87mg， 0.2mmol， 来自以 上步骤的粗制物质 ) 的 DMF(2mL) 混合物中加入 N-[1-(4- 氯 -3- 异硫氰酸酯基苯基 ) 乙 基 ] 乙酰胺的 DMF(2mL) 溶液。在室温搅拌混合物过夜并浓缩。通过色谱纯化残余物得到 副标题化合物。产率 ： 130mg。
(h)2-[5-(1- 乙酰基氨基乙基 )-2- 氯苯基氨基 ]-N-(4- 溴苯基 )-1- 甲基苯并咪 唑 -5- 甲酰胺
在 室 温 向 3-{3-[5-(1- 乙 酰 基 氨 基 乙 基 )-2- 氯 苯 基 ] 硫 脲 基 }-N-(4- 溴 苯 基 )-4-( 甲基氨基 ) 苯甲酰胺 (130mg， 0.2mmol) 的 DMF(2mL) 溶液中加入 N， N- 二异丙基碳 二亚胺 (46μL， 0.2mmol)。在 80℃搅拌混合物 2 小时， 冷却并浓缩。通过色谱纯化残余物 得到标题化合物。产率 ： 30mg(24％ )。MS m/z ： 540[M+H]+。
HPLC- 方法 A ： Rt ＝ 1.60 分钟。
实施例 2
2-[5-( 叔丁基羰基氨基甲基 )-2- 氯苯基氨基 ]-6- 氯 -N-(2， 2， 2- 三氟乙基 )- 苯 并咪唑 -5- 甲酰胺
(a)4- 氯 -3- 硝基苄基氨基甲酸叔丁酯
向 已 用 冰 冷 却 的 4- 氯 -3- 硝 基 苄 胺 (15g， 80.4mmol)、 DMAP(0.49g， 4mmol) 及 DCM(100mL) 的混合物中加入焦碳酸二 - 叔丁酯 (21.05g， 96.5mmol) 的 DCM(30mL) 溶液。在 室温搅拌混合物 12 小时， 倾入氨水中并用 DCM 萃取。用盐水洗涤经合并的萃取物并浓缩。
用 Et2O 洗涤残余物得到副标题化合物， 其未经任何进一步纯化即直接用于下一步 骤。
(b)3- 氨基 -4- 氯苄基氨基甲酸叔丁酯
在 90℃加热 4- 氯 -3- 硝基苄基氨基甲酸叔丁酯 ( 来自步骤 (b) 的粗制物 )、 Fe 粉 末 (17.65g， 316mmol)、 NH4Cl( 饱和水溶液， 100mL) 及 EtOH(100mL) 的混合物 4 小时， 然后加
以冷却。调节 pH 值至约等于 10， 通过硅藻土 (Celite) 过滤混合物。用 EtOAc 及 EtOH 洗涤 固体， 浓缩经合并的滤液以移除有机溶剂。向氨水中加入残余物并用 DCM 萃取混合物。用 盐水洗涤经合并的萃取物， 使用 Na2SO4 干燥并浓缩。由 EtOAc/ 石油醚结晶得到副标题化合 物。产率 ： 15.5g(75％， 自 4- 氯 -3- 硝基苄基胺计算 )。
(c)4- 氯 -3- 异硫氰酸酯基苄基氨基甲酸叔丁酯
根据实施例 1 步骤 (d)， 由 3- 氨基 -4- 氯苄基氨基甲酸叔丁酯制备副标题化合物。
(d)2-[5-( 叔丁氧羰基氨基甲基 )-2- 氯苯基氨基 ]-6- 氯 - 苯并咪唑 -5- 甲酸乙 酯
根据实施例 1 步骤 (g)， 使用另外的 TEA 及实施例 1 步骤 (h)， 由 4- 氯 -3- 异硫氰 酸酯基苄基氨基甲酸叔丁酯及 2- 氯 -4， 5- 二氨基 - 苯甲酸乙酯以两步步骤制备副标题化 合物。
(e)2-[5-( 氨基甲基 )-2- 氯苯基氨基 ]-6- 氯 - 苯并咪唑 -5- 甲酸乙酯
搅拌 1.15g(2.4mmol) 的 2-[5-( 叔丁基羰基氨基甲基 )-2- 氯苯基氨基 ]- 苯并咪 唑 -5- 甲酸乙酯及 10ml 4M HCl 的二
烷溶液的混合物过夜。 在减压下浓缩反应混合物得到副标题化合物。产率 ： 1.0g(100％ )。 (f)2-[5-( 叔丁基羰基氨基甲基 )-2- 氯苯基氨基 ]-6- 氯 - 苯并咪唑 -5- 甲酸乙 酯 在室温搅拌 2-[5-( 氨基甲基 )-2- 氯苯基氨基 ]-6- 氯 - 苯并咪唑 -5- 甲酸乙酯 (1.00g， 2.4mmol)、 特戊酰氯 (0.296ml， 2.4mmol)、 1.5ml TEA 及 50ml THF 的混合物 18 小时。 浓缩混合物， 用 EtOAc 稀释， 用 H2O 洗涤 2 次， 使用 Na2SO4 干燥并浓缩。通过色谱纯化残余 物， 得到副标题化合物。产率 ： 0.92g(83％ )。
(g)2-[5-( 叔丁基羰基氨基甲基 )-2- 氯苯基氨基 ]-6- 氯 - 苯并咪唑 -5- 甲酸
用 1N NaOH(3.9ml+0.98ml+0.98ml) 分别在室温、 在 50℃和在室温处理 2-[5-( 叔 丁基羰基氨基甲基 )-2- 氯苯基氨基 ]-6- 氯 - 苯并咪唑 -5- 甲酸乙酯 (0.91g， 1.9mmol) 的 20ml EtOH 混合物 4 小时、 5 小时和 3 天。浓缩混合物， 用 H2O 稀释， 用 1N HCl 酸化并在冰 浴中冷却。过滤沉淀， 用冰水洗涤并干燥， 得到副标题化合物。产率 ： 0.81 g(95％ )。
(h)2-[5-( 叔丁基羰基氨基甲基 )-2- 氯苯基氨基 ]-6- 氯 -N-(2， 2， 2- 三氟乙 基 )- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺
在 60 ℃ 搅 拌 2-[5-( 叔 丁 基 羰 基 氨 基 甲 基 )-2- 氯 苯 基 氨 基 ]-6- 氯 - 苯 并 咪 唑 -5- 甲酸 (0.15g， 0.345mmol)、 2， 2， 2- 三氟乙胺 (2×0.027ml， 0.345mmol)、 1- 丙基膦酸 环酐 (PPA， 0.244ml， 50％于 EtOAc 中 )、 0.12ml TEA 及 10ml MeCN 的混合物 48 小时并浓缩。 通过色谱纯化残余物， 得到标题化合物。产率 ： 17mg(10％ )。 +
m/z ： 516[M+H] 。
HPLC- 方法 B ： Rt ＝ 2.35 分钟。
实施例 3
6- 氯 -2-{2- 氯 -5-[(1- 甲基环己基酰氨基 ) 甲基 ] 苯基氨基 }-N- 环戊基 -1- 甲 基苯并咪唑 -5- 甲酰胺
(a)2- 氯 -N- 环戊基 -4- 氟 -5- 硝基苯甲酰胺及 2- 氯 -N- 环戊基 -4- 环戊基氨 基 -5- 硝基苯甲酰胺
在 -20 ℃向环戊胺 (430μL， 12.6mmol)、 TEA(1.76mL， 12.6mmol) 及 DCM(30mL) 的 混合物中加入 2- 氯 -4- 氟 -5- 硝基苯甲酰氯 (1.5g， 6.30mmol)。在室温 12 小时后， 用 DCM 稀释混合物并用 NH4OH( 饱和水溶液 ) 洗涤。用 H2O 及盐水洗涤有机层， 使用 Na2SO4 干燥， 浓缩并通过 HPLC 纯化， 得到 510mg(28％ ) 的 2- 氯 -N- 环戊基 -4- 氟 -5- 硝基苯甲酰胺和 300mg(14％ )2- 氯 -N- 环戊基 -4- 环戊基氨基 -5- 硝基 - 苯甲酰胺。
(b)2- 氯 -N- 环戊基 -4- 甲基氨基 -5- 硝基苯甲酰胺
向 2- 氯 -N- 环戊基 -4- 氟 -5- 硝基苯甲酰胺 (230mg， 0.79mmol) 的 EtOH 溶液中加 入 N- 甲胺的 MeOH 溶液 (2M， 2.0mL， 4.0mmol)。在密封容器中于 50℃加热混合物 12 小时， 冷却并浓缩。通过色谱纯化残余物， 得到副标题化合物。产率 ： 150mg(64％ )。
(c)5- 氨基 -2- 氯 -N- 环戊基 -4- 甲基氨基苯甲酰胺
根据实施例 2 步骤 (b)， 由 2- 氯 -N- 环戊基 -4- 甲基氨基 -5- 硝基苯甲酰胺制备 副标题化合物。
(d)3- 氨基 -4- 氯 - 苄胺
在 H2 氛围 (3 巴 ) 下， 于室温搅拌 3- 氨基 -4- 氯 - 苄腈 (1.32g， 8.33mmol)、 阮内 镍 (Ra-Nickel)(0.25g) 及 80ml NH3 的 MeOH 混合物 4 小时。过滤混合物并浓缩， 副标题化 合物无需进一步纯化即使用。
(e)N-(4- 氯 -3- 氨基苄基 )-1- 甲基环己基酰胺
在室温搅拌 3- 氨基 -4- 氯 - 苄胺 (0.69g， 4.17mmol)、 1- 甲基 - 环己烷 -1- 甲酸
(0.59g， 4.17mmol)、 1.47g TBTU、 1.45ml TEA 及 30ml THF 的混合物 6 小时。浓缩混合物， 用 EtOAc 稀释， 用 2M NaOH 洗涤 2 次， 用盐水洗涤 1 次， 用 Na2SO4 干燥， 过滤且浓缩， 得到副 标题化合物。产率 ： 1.17g(100％ )。
(f)N-(4- 氯 -3- 异硫氰酸酯基苄基 )-1- 甲基环己基酰胺
类似于实施例 1 步骤 (d)， 但用 1， 1′ - 硫代羰基 - 二咪唑替代 1， 1′ - 硫代羰基 二 -2- 吡啶酮， 由 N-(4- 氯 -3- 氨基苄基 )-1- 甲基环己基酰胺制备副标题化合物。
(g)6- 氯 -2-{2- 氯 -5-[(1- 甲 基 环 己 基 酰 氨 基 ) 甲 基 ] 苯 基 氨 基 }-N- 环 戊 基 -1- 甲基苯并咪唑 -5- 甲酰胺
类似于实施例 1 步骤 (g 及 h)， 但不分离硫脲基衍生物且用 EDC 作为偶合试剂替代 N， N- 二异丙基碳二亚胺， 由 N-(4- 氯 -3- 异硫氰酸酯基苄基 )-1- 甲基环己基酰胺及 5- 氨 基 -2- 氯 -N- 环戊基 -4- 甲基氨基苯甲酰胺制备标题化合物。200MHz 1H-NMR(DMSO-d6， ppm) δ 8.43(1H ， s)8.20(1H ， d， J ＝ 7.4Hz)8.10(1H ， t， J ＝ 5.6Hz)7.84-7.78(1H ， m)7.52-7.48(1H ，m)7.42(1H ，d ，J ＝ 8.2Hz)7.26-7.22(1H ，m)7.00-6.91(1H ， m)4.31-4.08(3H， m)3.69(3H， s)1.98-1.76(4H， m)1.68-1.16(14H， m)1.06(3H， s)。MS m/z ： + 556[M+H] 。
实施例 4
N-{4- 氯 -3-[5-(1- 吡咯烷基羰基 )-2- 苯并咪唑基氨基 ] 苄基 }-1- 甲基环己基 酰胺
(a)2-{2- 氯 -5-[(1- 甲基环己基酰氨基 ) 甲基 ] 苯基氨基 } 苯并咪唑 -5- 甲酸 在 90 ℃加热 2-{2- 氯 -5-[(1- 甲基环己基酰氨基 ) 甲基 ] 苯基氨基 } 苯并咪 烷 (15mL) 的唑 -5- 甲酸甲酯 (910mg， 2.0mmol)、 NaOH( 水溶液， 2M， 3.0mL， 6.0mmol) 及二混合物 12 小时并浓缩。将残余物分配于 NaOH( 水溶液， 2M) 与 MTBE 之中。用 HCl( 水溶液， 4M) 将水相酸化为 pH 值约为 4-5。收集沉淀， 用 H2O 洗涤， 干燥得到副标题化合物。产率 ： 873mg(99％ )。
(b)N-{4- 氯 -3-[5-(1- 吡咯烷基羰基 )-2- 苯并咪唑基氨基 ] 苄基 }-1- 甲基环己 基酰胺
向 2-{2- 氯 -5-[(1- 甲基环己基酰氨基 ) 甲基 ] 苯基氨基 } 苯并咪唑 -5- 甲酸 (200mg， 0.45mmol) 的 DMF(3mL) 溶液中相继加入 TEA(130μL， 0.91mmol) 及 HBTU(171mg， 0.45mmol)。在室温 10 分钟后， 加入吡咯烷 (37μL， 0.45mmol) 的 DMF(1mL) 溶液。在室 温 12 小时后， 浓缩混合物并将残余物分配于水与 DCM 之中。用 DCM 萃取水层， 用盐水洗涤 经合并的萃取物， 使用 Na2SO4 干燥并浓缩。通过色谱纯化残余物， 得到标题化合物。产率 ：127mg(57％ )。
400MHz 1H-NMR(DMSO-d6， ppm)δ11.22-11.08(1H， m)8.83-8.69(1H， m)8.55(1H， s)8.12(1H ，t ，J ＝ 5.8Hz)7.58-7.44(1H ，m)7.41-7.28(2H ，m)7.26-7.18(1H ， m)6.89-6.82(1H ，m)4.28(2H ，d ，J ＝ 5.8Hz)3.50-3.41(4H ，m)2.01-1.91(2H ， m)1.89-1.75(4H， m)1.47-1.16(8H， m)1.12(3H， s)。 +
MS m/z ： 494[M+H] 。
实施例 5
5- 氯 -2-{2- 氯 -5-[(1- 甲基环己基酰氨基 ) 甲基 ] 苯基氨基 }-1- 甲基 -6- 苯并 咪唑基氨基甲酸叔丁酯
(a)2， 5- 二氯 -4- 硝基苯基亚氨基二碳酸二 - 叔丁酯
向 2， 5- 二 氯 -4- 硝 基 苯 胺 (2.07g， 10.0mmol)、 DMAP(61.1mg， 0.5mmol) 及 THF(15mL) 的混合物中逐份加入焦碳酸二 - 叔丁酯 (4.58g， 21.0mmol)。在室温 12 小时后， 浓缩混合物并将残余物分配于 EtOAc 与柠檬酸 ( 水溶液， 1M) 之中。用盐水洗涤有机层， 使 用 Na2SO4 干燥并浓缩。用石油醚洗涤残余物， 得到副标题化合物。产率 ： 3.67g(91％ )。
(b)2- 氯 -5-( 甲基氨基 )-4- 硝基苯基氨基甲酸叔丁酯
根据实施例 3 步骤 (b)， 由 2， 5- 二氯 -4- 硝基苯基亚氨基二碳酸二 - 叔丁酯制备 副标题化合物。
(c)4- 氨基 -2- 氯 -5-( 甲基氨基 ) 苯基氨基甲酸叔丁酯
根据实施例 2 步骤 (b)， 由 2- 氯 -5-( 甲基氨基 )-4- 硝基苯基氨基甲酸叔丁酯制 备副标题化合物。
(d)5- 氯 -2-{2- 氯 -5-[(1- 甲基环己基酰氨基 ) 甲基 ] 苯基氨基 }-1- 甲基 -6- 苯 并咪唑基氨基甲酸叔丁酯
按照上述操作， 由 N-(4- 氯 -3- 异硫氰酸酯基苄基 )-1- 甲基环己基酰胺及 4- 氨 基 -2- 氯 -5-( 甲基氨基 ) 苯基氨基甲酸叔丁酯制备标题化合物。
200MHz 1H-NMR(DMSO-d 6， ppm) δ 8.55(1H ， s)8.40(1H ， s)8.12(1H ， t， J ＝ 5.2)7.80-7.74(1H， m)7.48-7.29(3H， m)7.01-6.89(1H， m)4.26(2H， d， J ＝ 6.0)3.66(3H，
s)2.00-1.85(2H， m)1.46(9H， s)1.42-1.10(8H， m)1.06(3H， s)。 +
MS m/z ： 560[M+H] 。
实施例 6
N-{4- 氯 -3-[5- 氯 -6-( 环 戊 基 酰 氨 基 )-1- 甲 基 -2- 苯 并 咪 唑 基 氨 基 ] 苄 基 }-1- 甲基环己基酰胺
(a)N-[4- 氯 -3-(6- 氨基 -5- 氯 -1- 甲基 -2- 苯并咪唑基氨基 ) 苄基 ]-1- 甲基环 己基酰胺
在密封管中 80℃加热 5- 氯 -2-{2- 氯 -5-[(1- 甲基环己基酰氨基 ) 甲基 ] 苯基氨 基 }-1- 甲基 -6- 苯并咪唑基氨基甲酸叔丁酯 (400mg， 0.71mmol)、 TFA(0.5mL， 6.7mmol) 及 DCM(10mL) 的混合物 3 小时。冷却混合物， 用 DCM 稀释并用 NaHCO3( 饱和水溶液 ) 洗涤 ( 注 意： 气体逸出！ )， 用 Na2SO4 干燥。浓缩得到副标题化合物。产率 ： 320mg(98％ )。
(b)N-{4- 氯 -3-[5- 氯 -6-( 环戊基酰氨基 )-1- 甲基 -2- 苯并咪唑基氨基 ] 苄 基 }-1- 甲基环己基酰胺
根据实施例 4 步骤 (b)， 由 N-[4- 氯 -3-(6- 氨基 -5- 氯 -1- 甲基 -2- 苯并咪唑基 氨基 ) 苄基 ]-1- 甲基环己基酰胺及环戊基甲酸及 HBTU 制备标题化合物。
200MHz 1H-NMR(DMSO-d 6， ppm) δ 9.37(1H ， s)8.42(1H ， s)8.12(1H ， t， J ＝ 5.8Hz)7.84-7.72(1H， m)7.51(1H， s)7.43(1H， d， J ＝ 8.2Hz)7.36(1H， s)6.96(1H， dd， J＝ 8.2， 1.2Hz)4.27(2H， d， J ＝ 5.8Hz)3.67(3H， s)2.98-2.79(1H， m)2.04-1.0(21H， m)。MS m/ + z： 556[M+H] 。
实施例 7
N-{4- 氯 -3-[5-(N- 环 戊 基 氨 基 磺 酰 基 )-1- 甲 基 -2- 苯 并 咪 唑 基 氨 基 ] 苄 基 }-1- 甲基环己基酰胺
(a)4- 氯 -N- 环戊基 -3- 硝基苯磺酰胺
向已用冰冷却的 4- 氯 -3- 硝基苯磺酰氯 (2.0g， 7.8mmol) 的 MeCN(20mL) 溶液中 经 10 分钟加入环戊胺 (1.5mL， 15.6mmol) 的 MeCN(10mL) 溶液。在室温 1 小时后， 将混合物 倾入冰水中并用 EtOAc 萃取。用盐水洗涤经合并的萃取物， 使用 Na2SO4 干燥且浓缩得到副 标题化合物。产率 ： 2.2g(92％ )。
(b)N- 环戊基 -4- 甲基氨基 -3- 硝基苯磺酰胺
根据实施例 3 步骤 (b)， 由 4- 氯 -N- 环戊基 -3- 硝基 - 苯磺酰胺及甲胺制备副标
题化合物。
(c)3- 氨基 -N- 环戊基 -4- 甲基氨基苯磺酰胺
根据实施例 2 步骤 (b)， 由 N- 环戊基 -4- 甲基氨基 -3- 硝基苯磺酰胺制备副标题 化合物。
(d)N-{4- 氯 -3-[5-(N- 环戊基氨基磺酰基 )-1- 甲基 -2- 苯并咪唑基 - 氨基 ] 苄 基 }-1- 甲基环己基酰胺
根据实施例 3 步骤 (g)， 由 N-(4- 氯 -3- 异硫氰酸酯基苄基 )-1- 甲基环己基酰胺 及 3- 氨基 -N- 环戊基 -4- 甲基氨基苯磺酰胺制备标题化合物。
200MHz 1H-NMR(DMSO-d6， ppm)δ8.51(1H， s)8.13(1H， t， J ＝ 6.0)7.87-7.81(1H， m)7.58-7.39(4H， m)7.04-6.94(1H， m)4.28(2H， d， J ＝ 6.0)3.47(3H， s)3.38-3.28(1H， m， 与 + H2O 重叠 )2.01-1.86(2H， m)1.60-1.11(16H， m)1.06(3H， s)。MS m/z ： 558[M+H] 。
实施例 8
2-{2- 氯 -5-[(1- 甲基环丙基酰氨基 ) 甲基 ] 苯基氨基 }-N- 环己基甲基 -1- 甲基 苯并咪唑 -5- 甲酰胺
(a)2-(5- 氨基甲基 -2- 氯苯基氨基 )-N- 环己基甲基 -1- 甲基苯并咪唑 -5- 甲酰胺 将 2-(2- 氯 -5- 氰基苯基氨基 )-N- 环己基甲基 -1- 甲基苯并咪唑 -5- 甲酰胺 (500 mg， 1.19mmol， 类似于上述实验操作制备 ) 及 EtOH(20mL) 的混合物用氨水饱和。加入新近 制备的阮内镍 (7mg， 0.12mmol)， 氢化 ( 室温， 70atm) 混合物 48 小时。通过硅藻土过滤混合 物并用 EtOAc 洗涤滤饼。浓缩经合并的滤液， 用石油醚及乙醚的混合物处理残余物， 得到副 标题化合物。产率 ： 500mg(98％ )。
(h)2-{2- 氯 -5-[(1- 甲基环丙基酰氨基 ) 甲基 ] 苯基氨基 }-N- 环己基甲基 -1- 甲 基苯并咪唑 -5- 甲酰胺
根 据 实 施 例 4 步 骤 (b)， 由 2-(5- 氨 基 甲 基 -2- 氯 苯 基 氨 基 )-N- 环 己 基 甲 基 -1- 甲基苯并咪唑 -5- 甲酰胺及 1- 甲基环丙基甲酸及 HBTU 制备标题化合物。200MHz 1 H-NMR(DMSO-d6， ppm)δ8.38(1H， s)8.33-8.22(1H， m)8.19-8.08(1H， m)7.91-7.80(2H， m)7.66-7.57(1H， m)7.42(1H， d， J ＝ 8.2Hz)7.37(1H， d， J ＝ 8.2Hz)7.00-6.89(1H， m)4.24(2H， d， J ＝ 5.6Hz)3.71(3H ， s)3.15-2.99(2H ， m)1.79-1.45(7H ， m)1.27(3H ， s)1.21-1.06(3H， m)1.00-0.80(5H， m)。MS m/z ： 508[M+H]+。
实施例 9
2-{2- 氯 -5-[(2- 噻吩基磺酰氨基 ) 甲基 ] 苯基氨基 }-N- 环己基甲基 -1- 甲基苯 并咪唑 -5- 甲酰胺
向 2-(5- 氨基甲基 -2- 氯苯基氨基 )-N- 环己基甲基 -1- 甲基苯并咪唑 -5- 甲酰 胺 (150mg， 0.35mmol)、 TEA(150μL， 1.1mmol) 及 MeCN(2mL) 的 混 合 物 中 加 入 噻 吩 -2- 磺 酰 氯 (64mg， 0.35mmol) 的 MeCN(1mL) 溶 液。 在 室 温 12 小 时 后， 用 DCM 稀 释 混 合 物 并 用 NH3( 饱和水溶液 ) 及盐水洗涤， 用 Na2SO4 干燥并浓缩。通过色谱纯化残余物得到标题化合 物。产率 ： 36mg(18％ )。200MHz 1H-NMR(DMSO-d6， ppm)δ8.50-8.36(2H， m)8.35-8.22(1H， m)7.94-7.82(3H ，m)7.69-7.57(2H ，m)7.42(1H ，d ，J ＝ 8.2Hz)7.37(1H ，d ，J ＝ 8.2Hz)7.18-7.11(1H， m)7.04-6.95(1H， m)4.09-3.96(2H， m)3.71(3H， s)3.14-3.00(2H， + m)1.77-1.47(7H， m)1.29-1.07(4H， m)。MS m/z ： 572[M+H] 。
实施例 10
4- 溴 -N-(2-{2- 氯 -5-[(1- 甲基环丙基酰氨基 ) 甲基 ] 苯基氨基 }-1- 甲基 -5- 苯 并咪唑基 ) 苯甲酰胺
(a)2-[5-( 氨基甲基 )-2- 氯苯基氨基 ]-N-(4- 溴苯基 )-1- 甲基苯并咪唑 -5- 甲酰胺 在室温向 3-[5-(4- 溴苯基氨基甲酰基 )-1- 甲基 -2- 苯并咪唑基氨基 ]-4- 氯苄 基氨基甲酸叔丁酯 (960mg， 1.7mmol， 类似于上述实验操作制备 ) 的 DCM(20mL) 溶液中加入 TFA(1.5mL)。在室温 16 小时后， 加入 TFA(2mL) 并在室温搅拌混合物 16 小时， 用 DCM 稀释， 用 NaHCO3( 饱和水溶液 ) 及盐水洗涤， 干燥且浓缩得到副标题化合物， 其无需进一步纯化即 用于下一步骤。产率 ： 706mg (90％ )。
(b)4- 溴 -N-(2-{2- 氯 -5-[(1- 甲 基 环 丙 基 酰 氨 基 ) 甲 基 ] 苯 基 氨 基 }-1- 甲 基 -5- 苯并咪唑基 ) 苯甲酰胺
根 据 实 施 例 4 步 骤 (b)， 由 2-[5-( 氨 基 甲 基 )-2- 氯 苯 基 氨 基 ]-N-(4- 溴 苯 基 )-1- 甲基苯并咪唑 -5- 甲酰胺及 1- 甲基环丙基甲酸及 HBTU 合成标题化合物。
200MHz 1H-NMR(DMSO-d6， ppm)δ10.24(1H， s)8.53-8.47(1H， m)8.17(1H， t， J＝ 6.0Hz)8.03(1H， d， J ＝ 1.2Hz)7.89-7.71(4H， m)7.60-7.40(4H， m)7.00(1H， dd， J ＝ 8.2， 1.8Hz)4.27(2H， d， J ＝ 6.0Hz)3.76(3H， s)1.29(3H， s)1.00-0.93(2H， m)0.55-0.48(2H， m)。 + MS m/z ： 566[M+H] 。
实施例 11
2-{2- 氯 -5-[(1- 三 氟 甲 基 环 丙 基 酰 氨 基 ) 甲 基 ] 苯 基 氨 基 }-N- 环 丙 基 甲 基 -1- 甲基苯并咪唑 -5- 甲酰胺
(a)4- 甲基氨基 -3- 硝基苯甲酸
在 室 温 向 3， 4- 二 硝 基 苯 甲 酸 (10g， 47.2mmol) 的 EtOH(50mL) 溶 液 中 加 入 TEA(13mL) 及甲胺 (2M 于 MeOH 中， 35mL， 70mmol)。在室温 24 小时后， 浓缩混合物并向残 余物加入 H2O。过滤混合物并用 AcOH 酸化。收集固体并干燥， 得到副标题化合物。产率 ： 7.5g(81％ )。
(b)4- 甲基氨基 -3- 硝基苯甲酸甲酯
在回流下用 HCl 向 4- 甲基氨基 -3- 硝基苯甲酸 (7.41g， 37.8mmol)、 DMF(60mL) 及 MeOH(250mL) 的混合物鼓泡 10 小时。将混合物冷却、 过滤并浓缩。向残余物中加入 NaHCO3( 饱和水溶液 )， 用 EtOAc 萃取残余物。用盐水洗涤经合并的萃取物， 干燥并浓缩得 到副标题化合物。
产率 ： 2.5g(32％ )。
(c)3- 氨基 -4- 甲基氨基苯甲酸甲酯
在回流下向 4- 甲基氨基 -3- 硝基苯甲酸甲酯 (2.5g， 12.0mmol)、 AcOH(10mL) 及 MeOH(100mL) 的混合物中加入 Fe 粉末 (3.4g， 60mmol)。在回流下加热混合物 30 分钟， 冷却 至室温。通过加入 NaHCO3( 饱和水溶液 ) 将 pH 值调节为约等于 8， 通过硅藻土过滤混合物。 用 EtOH 洗涤滤饼并浓缩经合并的滤液， 用 EtOAc 萃取残余物。 用盐水洗涤经合并的萃取物， 干燥并浓缩得到副标题化合物。产率 ： 1.91g(88％ )。
(d)2-{5-[( 叔丁氧羰基氨基 ) 甲基 ]-2- 氯苯基氨基 }-1- 甲基苯并咪唑 -5- 甲酸 甲酯
根据实施例 3 步骤 (g)， 由 4- 氯 -3- 异硫氰酸酯基苄基氨基甲酸叔丁酯 ( 参见实 施例 2d) 及 3- 氨基 -4- 甲基氨基苯甲酸甲酯制备副标题化合物。
(e)2-[5-( 氨基甲基 )-2- 氯苯基氨基 ]-1- 甲基苯并 [d] 咪唑 -5- 甲酸甲酯
根据实施例 10 步骤 (a) 中的操作， 由 2-{5-[( 叔丁氧羰基氨基 ) 甲基 ]-2- 氯苯 基氨基 }-1- 甲基苯并咪唑 -5- 甲酸甲酯制备副标题化合物。
(f)2-{2- 氯 -5-[(1- 三氟甲基环丙基酰氨基 ) 甲基 ] 苯基氨基 }-1- 甲基苯并咪 唑 -5- 甲酸甲酯
根据实施例 3 步骤 (e) 中的操作， 由 2-[5-( 氨基甲基 )-2- 氯苯基氨基 ]-1- 甲基 苯并 [d] 咪唑 -5- 甲酸甲酯及 1- 三氟甲基环丙基甲酸及 TBTU 制备副标题化合物。
(g)2-{2- 氯 -5-[(1- 三氟甲基环丙基酰氨基 ) 甲基 ] 苯基氨基 }-1- 甲基苯并咪 唑 -5- 甲酸
在回流下加热 2-{2- 氯 -5-[(1- 三氟甲基环丙基酰氨基 ) 甲基 ] 苯基氨基 }-1- 甲
基苯并咪唑 -5- 甲酸甲酯 (1.36g， 2.8mmol)、 NaOH( 水溶液， 2M， 15mL) 及二烷 (15mL) 的混合物 45 分钟。将混合物冷却并浓缩， 加入 HCl( 水溶液， 1M)。收集固体， 用 H2O 洗涤且干 燥得到副标题化合物。产率 ： 1.01g(77％ )。
(h)2-{2- 氯 -5-[(1- 三氟甲基环丙基酰氨基 ) 甲基 ] 苯基氨基 }-N- 环丙基甲基 -1- 甲基苯并咪唑 -5- 甲酰胺
根据实施例 3 步骤 (e) 中的操作， 由 2-{2- 氯 -5-[(1- 三氟甲基环丙基酰氨基 ) 甲基 ] 苯基氨基 }-1- 甲基苯并咪唑 -5- 甲酸及环丙基甲胺及 TBTU 制备标题化合物。
400MHz 1H-NMR(DMSO-d6， ppm)δ( 次要互变异构体的信号未指定 )8.50-8.34(3H， m)7.95-7.89(1H， m)7.88-7.82(1H， m)7.70-7.63(1H， m)7.45(1H， d， J ＝ 8.2Hz)7.40(1H， d， J ＝ 8.4Hz)6.99-6.92(1H， m)4.28(2H， d， J ＝ 5.8Hz)3.73(3H， s)3.18-3.11(2H， m)1.40-0.98(5H， m)0.45-0.38(2H， m)0.26-0.20(2H， m)。MS m/z ： 520[M+H]+。
类似于以上详细描述的制备方法合成以下化合物。
实施例 59
N-(4- 溴 - 苯基 )-2-(2- 氯 -5-{[(1- 三氟甲基 - 环丙烷羰基 )- 氨基 ]- 甲基 }- 苯 基氨基 )-6-(2， 2- 二氟 - 乙氧基 )-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺
(aa)(4- 氯 -3- 硝基苯基 ) 甲胺盐酸盐
在 0℃， 向 4- 氯 -3- 硝基苄腈 (30g， 164mmol) 的 THF(100mL) 溶液中经 30 分钟加入 BH3/THF(279mL， 279mmol)， 搅拌所得混合物过夜并使其达到室温。 加入 MeOH(150mL) 及浓盐 酸 (60mL)， 回流所得混合物 4 小时， 然后浓缩。用水 (500mL) 处理残余物并滤出所得沉淀。 用 NaCl(120g) 处理滤液且加热且滤出所得沉淀得到副标题化合物。 产率 ： 24.059g(65％ )。
(a)N-(4- 氯 -3- 硝基苄基 )-1-( 三氟甲基 ) 环丙烷甲酰胺
向 1-( 三 氟 甲 基 )- 环 丙 烷 甲 酸 (8.00g， 51.9mmol) 及 TBTU(16.7g， 52mmol) 的 DMF(40mL) 混合物中加入 TEA(21.7mL， 156mmol)。在室温 1 小时后， 经 30 分钟逐滴加入 (4- 氯 -3- 硝基苯基 ) 甲胺盐酸盐 (11.6g， 52mmol) 的 DMF(70mL) 溶液。在室温 17 小时后，
浓缩混合物， 将残余物分配于水与 MTBE 之中。用水洗涤有机层， 用 Na2SO4 干燥并浓缩。通 过柱色谱纯化残余物， 得到副标题化合物。产率 ： 13.191g(78％ )。
(b)N-(3- 氨基 -4- 氯苄基 )-1-( 三氟甲基 ) 环丙烷甲酰胺
根据实施例 2 步骤 (b)， 由 N-(4- 氯 -3- 硝基苄基 )-1-( 三氟甲基 ) 环丙烷甲酰胺 制备副标题化合物。产率 ： 11.586g(98％ )。
(c)N-(4- 氯 -3- 异硫氰酸酯基苄基 )-1-( 三氟甲基 ) 环丙烷甲酰胺
在 0℃向 TCDI(3.80g， 21.34mmol) 的 DCM(30mL) 溶液中加入 N-(3- 氨基 -4- 氯苄 基 )-1-( 三氟甲基 ) 环丙烷甲酰胺 (5.21g， 17.79mmol) 的 DCM(40mL) 溶液。在室温 12 小 时后， 浓缩混合物， 通过柱色谱纯化残余物， 得到副标题化合物。产率 ： 5.00g(84％ )。
(d)2， 4- 二氟 -5- 硝基苯甲酸乙酯
在 0℃向 2， 4- 二氟苯甲酸乙酯 (10.0g， 53.7mmol) 的浓硫酸 (8mL) 混合物中逐滴 加入浓硝酸 (8mL)。在 0℃ 2 小时后， 将混合物倾于冰上并用 EtOAc 萃取。用饱和 NaHCO3 溶 液 ( 水溶液 ) 洗涤有机萃取物， 浓缩得到副标题化合物。产率 ： 11.8g(95％ )。
(e)2- 氟 -4-( 甲基氨基 )-5- 硝基苯甲酸乙酯
在 -5℃向 2， 4- 二氟 -5- 硝基苯甲酸乙酯 (5.0g， 21.6mmol) 的 THF(70mL) 溶液中 逐滴加入 MeNH2 的 THF 溶液 (21.6mL， 2M， 43.3mmol)。在室温静置混合物过夜， 接着在 0℃ 再加入 MeNH2 的 THF 溶液 (10.0mL， 2M， 21.6mmol)。在室温 3 小时后， 加入水并浓缩混合物。 滤出所得沉淀并干燥， 得到副标题化合物。产率 ： 5.0g(96％ )。
(f)2-(2， 2- 二氟乙氧基 )-4-( 甲基氨基 )-5- 硝基苯甲酸乙酯
向 2- 氟 -4-( 甲基氨基 )-5- 硝基苯甲酸乙酯 (5.0g， 20.6mmol) 的 DMF(100mL) 溶 液中加入 2， 2- 二氟乙醇 (1.7g， 20.6mmol) 的 THF(50mL) 溶液。逐份加入氢化钠 (0.824g， 60 ％， 20.6mmol)， 在室温搅拌混合物过夜。加入 TFA 溶液 (30mL， 0.45M 水溶液 ) 并浓缩 混合物。滤出所得沉淀， 用水洗涤并干燥， 由 EtOH/ 水重结晶得到副标题化合物。产率 ： 4.8g(76％ )。
(g)5- 氨基 -2-(2， 2- 二氟乙氧基 )-4-( 甲基氨基 ) 苯甲酸乙酯
在室温 H2 氛围 (8atm) 下搅拌 2-(2， 2- 二氟乙氧基 )-4-( 甲基氨基 )-5- 硝基苯甲 酸乙酯 (2.0g， 6.57mmol)、 Ra-Ni(1.0g) 及 THF(100mL) 的混合物过夜。加入 Na2SO4 并在 H2 氛围下再搅拌混合物 30 分钟。通过硅藻土过滤混合物， 副标题化合物无需进一步纯化即用 于下一步骤。
(h)2-(2- 氯 -5-{[(1- 三氟甲基 - 环丙烷羰基 )- 氨基 ]- 甲基 }- 苯基氨基 )-6-(2， 2- 二氟 - 乙氧基 )-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酸乙酯
在室温搅拌 5- 氨基 -2-(2， 2- 二氟乙氧基 )-4-( 甲基氨基 ) 苯甲酸乙酯 (0.737g， 2.68mmol， 来自步骤 (g) 的粗制物 ) 及 N-(4- 氯 -3- 异硫氰酸酯基苄基 )-1-( 三氟甲基 ) 环 丙烷甲酰胺 (0.900g， 2.68mmol) 的 THF(100mL) 混合物过夜。加入 DIC(0.338g， 2.68mmol) 并在室温搅拌混合物 6 小时。加入另一份 DIC(0.169g， 1.34mmol)， 在室温再搅拌混合物 6 小时。浓缩混合物并通过柱色谱纯化， 得到副标题化合物。产率 ： 0.790g(51％ )。
(i)N-(4- 溴 - 苯基 )-2-(2- 氯 -5-{[(1- 三氟甲基 - 环丙烷羰基 )- 氨基 ]- 甲 基 }- 苯基氨基 )-6-(2， 2- 二氟 - 乙氧基 )-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺
向 4- 溴苯胺 (0.180g， 1.05mmol) 的 1， 4- 二噁烷 (5mL) 溶液中加入 Me3Al 的甲苯溶液 (0.870mL， 2M， 1.74mmol)， 在室温搅拌混合物 20 分钟。 接着通过套管向温热 (60℃ ) 的 2-(2- 氯 -5-{[(1- 三氟甲基 - 环丙烷羰基 )- 氨基 ]- 甲基 }- 苯基氨基 )-6-(2， 2- 二氟 - 乙 氧基 )-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酸乙酯 (0.200g， 0.35mmol) 的 1， 4- 二 烷 (5mL) 溶 液中加入混合物。 在 100℃搅拌所得混合物过夜， 冷却至室温， 接着倾入盐水 (20mL) 中并用 EtOAc 萃取。用盐水洗涤经合并的萃取物， 经由 Na2SO4 干燥并浓缩。通过柱色谱纯化残余 物， 得到标题化合物。 产率 ： 0.134g(55％ )。 400MHz 1H-NMR(DMSO-d6， ppm)δ12.3-11.1(1H， br s)10.16(1H， s)8.45(1H， t， J ＝ 5.9Hz)7.69-7.57(5H， m)7.53-7.47(2H， m)7.45(1H， d， J ＝ 2.0Hz)7.34(1H， dd， J ＝ 8.2， 2.0Hz)6.48(1H， tt， J ＝ 54.4， 3.3Hz)4.53(2H， td， J＝ 14.5， 3.3Hz)4.30(2H， d， J ＝ 5.6Hz)3.81(3H， s)1.33-1.26(2H， m)1.25-1.19(2H， m)。MS + m/z ： 700， 702， 704[M+H] 。
类似于以上详细描述的制备方法合成以下化合物。
实施例 63
N-(4- 溴 - 苯基 )-2-(2- 氯 -5-{[(1- 三氟甲基 - 环丙烷羰基 )- 氨基 ]- 甲基 }- 苯 基氨基 )-6- 甲氧基 -1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺
(aa)2- 甲氧基 -4-(N- 甲基乙酰基氨基 )-5- 硝基苯甲酸甲酯在室温搅拌 4- 乙酰基氨基 -2- 甲氧基 -5- 硝基苯甲酸甲酯 (2.0g， 7.5mmol)、 甲烷 磺酸甲酯 (0.85g， 7.7mmol) 及 K2CO3(2.0g， 14.5mmol) 的 DMF(20mL) 混合物 36 小时。接着 将混合物倾入盐水中并用 EtOAc 萃取。用盐水洗涤经合并的萃取物， 用 Na2SO4 干燥， 过滤并 浓缩得到粗制副标题化合物。
(ab)2- 甲氧基 -4-( 甲基氨基 )-5- 硝基苯甲酸
回流 2- 甲氧基 -4-(N- 甲基乙酰基氨基 )-5- 硝基苯甲酸甲酯 (2.1g， 0.74mmol)、 NaOH 水溶液 (29mL， 1M， 29mmol) 及 EtOH(30mL) 的混合物 2 小时。接着浓缩混合物， 用乙酸 将剩余水相酸化为强酸性 pH 值， 超声处理并过滤得到副标题化合物。产率 ： 1.28g(76％ )。
(ac)5- 氨基 -2- 甲氧基 -4-( 甲基氨基 ) 苯甲酸
在 50℃ H2 氛围 (8atm) 下搅拌 2- 甲氧基 -4-( 甲基氨基 )-5- 硝基苯甲酸 (7.0g， 31mmol)、 Pd/C(1.0g)、 MeOH(25mL) 及 THF(75mL) 的混合物 24 小时。 加入第二份 Pd/C(1.0g) 且再氢化混合物 24 小时。加入第三份 Pd/C(0.5g) 且氢化混合物过夜。浓缩悬浮液且在氩 气下储存残余物， 无需进一步纯化即用于下一步骤。
(a)2-(2- 氯 -5-{[(1- 三氟甲基 - 环丙烷羰基 )- 氨基 ]- 甲基 }- 苯基氨基 )-6- 甲 氧基 -1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酸
在室温搅拌 N-(4- 氯 -3- 异硫氰酸酯基苄基 )-1-( 三氟甲基 ) 环丙烷甲酰胺 (1.71g， 5.10mmol) 及 5- 氨基 -2- 甲氧基 -4-( 甲基氨基 ) 苯甲酸 (1.00g， 1.00mmol) 的 DMF(20mL) 混合物过夜。接着加热混合物至 60℃， 加入 BSTFA(1.44g， 5.61mmol) 并搅拌 1 小时， 然后加入 DIC(0.772g， 6.12mmol)。在 80℃搅拌所得混合物 3 小时。加入乙酸 (2mL)， 浓缩混合物， 将残余物倾入 NaOH 水溶液 (2M) 中并调节 pH 值约为 3-4。用 EtOAc 萃取混合 物， 用盐水洗涤有机萃取物， 用 Na2SO4 干燥， 过滤且浓缩。通过 EtOAc/ 石油醚重结晶残余物 得到副标题化合物。产率 ： 0.570g(22％ )。
(b)N-(4- 溴 - 苯基 )-2-(2- 氯 -5-{[(1- 三氟甲基 - 环丙烷羰基 )- 氨基 ]- 甲 基 }- 苯基氨基 )-6- 甲氧基 -1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺
根 据 实 施 例 59 步 骤 (a)， 由 2-(2- 氯 -5-{[(1- 三 氟 甲 基 - 环 丙 烷 羰 基 )- 氨 基 ]- 甲基 }- 苯基氨基 )-6- 甲氧基 -1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酸 (92mg， 0.19mmol) 及 1 4- 溴苯胺 (33mg， 0.19mmol) 制备标题化合物。产率 ： 73mg(59％ )。400MHz HNMR(DMSO-d6， ppm)δ10.16(1H， s)8.40(1H， t， J ＝ 6.0Hz)8.25(1H， s)7.85-7.81(1H， m)7.76-7.68(3H， m)7.51-7.46(2H， m)7.40(1H， d， J ＝ 8.2Hz)7.22-7.17(1H， m)6.92-6.86(1H， m)4.25(2H， d， J ＝ 6.0Hz)3.97(3H， s)3.71(3H， s)1.37-1.32(2H， m)1.23-1.18(2H， m)。MS m/z ： 650， 652， + 654[M+H] 。
类似于以上详细描述的制备方法合成以下化合物。
实施例 66N-(4- 溴 - 苯基 )-2-(2- 氟 -5-{[(1- 三氟甲基 - 环丙烷羰基 )- 氨基 ]- 甲基 }- 苯 基氨基 )-6-(2， 2- 二氟 - 乙氧基 )-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺
(a)(4- 氟 -3- 硝基苯基 ) 甲胺盐酸盐
在 0 ℃经 30 分钟向 4- 氟 -3- 硝基苄腈 (10g， 60mmol) 于 THF(50mL) 中的溶液中 加入 BH3/THF(120mL， 120mmol)， 在 0℃搅拌所得混合物 1 小时并在室温搅拌 3 小时。酸化 混合物至 pH 值约为 1， 在室温搅拌 1 小时， 碱化为 pH 值约为 7-8， 用 EtOAc 萃取。用 Na2SO4
干燥有机萃取物， 过滤且浓缩。在 Et2O 中溶解残余物， 用 HCl 的 1， 4- 二烷溶液处理得到副标题化合物。产率 ： 8.7g(70％ )。
(b)N-(4- 氟 -3- 硝基 - 苄基 )-1-( 三氟甲基 ) 环丙烷甲酰胺
根据实施例 72 步骤 (c) 中的操作， 使用 (4- 氟 -3- 硝基苯基 ) 甲胺盐酸盐 (3.0g， 14.5mmol)、 1-( 三 氟 甲 基 )- 环 丙 烷 甲 酸 (2.5g， 16.0mmol)、 HBTU(6.07g， 16.0mmol)、 TEA(5.88g， 58.1mmol) 及 DMF(50mL) 制备副标题化合物。产率 ： 3.8g(85％ )。
(c)N-(3- 氨基 -4- 氟苄基 )-1-( 三氟甲基 ) 环丙烷甲酰胺
根 据 实 施 例 2 步 骤 (b) 中 的 操 作， 使 用 N-(4- 氟 -3- 硝 基 苄 基 )-1-( 三 氟 甲 基 )- 环丙烷甲酰胺 (3.77g， 12.3mmol)、 Fe(3.45g， 61.6mmol)、 NH4Cl( 饱和水溶液， 30mL) 及 EtOH(30mL) 制备副标题化合物。产率 ： 3.2g(76％ )。
(d)N-(4- 氟 -3- 异硫氰酸酯基苄基 )-1-( 三氟甲基 ) 环丙烷甲酰胺
在 50 ℃ 加 热 N-(3- 氨 基 -4- 氟 苄 基 )-1-( 三 氟 甲 基 ) 环 丙 烷 甲 酰 胺 (3.17g，11.5mmol) 及 TCDI(3.07g， 17.2mmol) 的 DCM(50mL) 混合物过夜。 浓缩混合物并通过柱色谱 纯化残余物， 得到副标题化合物。产率 ： 3g(82％ )。
(e)2-(2， 2- 二氟乙氧基 )-4-( 甲基氨基 )-5- 硝基苯甲酸
根据实施例 72 步骤 (b)， 使用 2-(2， 2- 二氟乙氧基 )-4-( 甲基氨基 )-5- 硝基苯 甲酸乙酯 ((950mg， 3.12mmol)， 参见实施例 59， 步骤 (f))、 NaOH(3.1mL， 2M 水溶液， 6.2mmol) 及 1， 4- 二
烷 (10mL) 制备副标题化合物。产率 ： 800mg(93％ )。(f)N-(4- 溴苯基 )-2-(2， 2- 二氟乙氧基 )-4-( 甲基氨基 )-5- 硝基苯甲酰胺
根据实施例 72 步骤 (c)， 使用 2-(2， 2- 二氟乙氧基 )-4-( 甲基氨基 )-5- 硝基苯甲 酸 (800mg， 2.90mmol)、 4- 溴苯胺 (499mg， 2.90mmol)、 HBTU(1.10g， 2.90mmol)、 TEA(587mg， 5.80mmol) 及 DMF(15mL) 制备副标题化合物。产率 ： 1.01g(81％ )。
(g)5- 氨基 -N-(4- 溴苯基 )-2-(2， 2- 二氟乙氧基 )-4-( 甲基氨基 ) 苯甲酰胺
根据操作 3d， 使用 N-(4- 溴苯基 )-2-(2， 2- 二氟乙氧基 )-4-( 甲基氨基 )-5- 硝基 苯甲酰胺 (1.01g， 2.34mmol)、 Ra-Ni(14mg)、 H2(8atm) 及 THF(50mL) 通过氢化制备副标题化 合物。产率 ： 905mg(97％ )。
(h)N-(4- 溴 - 苯基 )-2-(2- 氟 -5-{[(1- 三氟甲基 - 环丙烷羰基 )- 氨基 ]- 甲 基 }- 苯基氨基 )-6-(2， 2- 二氟 - 乙氧基 )-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺 根 据 实 施 例 72 步 骤 (a) 中 的 操 作， 使 用 N-(4- 氟 -3- 异 硫 氰 酸 酯 基 苄 基 )-1-( 三 氟 甲 基 ) 环 丙 烷 甲 酰 胺 (160mg， 0.50mmol)、 5- 氨 基 -N-(4- 溴 苯 基 )-2-(2， 2- 二 氟 乙 氧 基 )-4-( 甲 基 氨 基 ) 苯 甲 酰 胺 (200mg， 0.50mmol)、 DIC(63mg， 0.50mmol) 及 1 DMF(4mL) 制备标题化合物。产率 ： 25mg(7％ )。400MHz H-NMR(DMSO-d6， ppm)δ10.06(1H， s)8.61(1H， s)8.39(1H， t， J ＝ 5.8Hz)7.87-7.81(1H， m)7.73-7.65(3H， m)7.52-7.48(2H， m)7.29-7.26(1H， m)7.21-7.14(1H， m)6.91-6.86(1H， m)6.65-6.36(1H， m)4.55-4.46(2H， m)4.24(2H， d， J ＝ 5.8Hz)3.71(3H， s)1.39-1.32(2H， m)1.23-1.20(2H， m)。MS m/z ： 684， + 686[M+H] 。
实施例 67
N-(4- 溴 - 苯基 )-2-(2- 氯 -5-{[(1- 三氟甲基 - 环丙烷羰基 )- 氨基 ]- 甲基 }- 苯 基氨基 )-6-(2， 2- 二氟 - 乙氧基 )-1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺
(a)4- 氨基 -2- 氟 -5- 硝基苯甲酸乙酯
在 0℃用 NH3 的 THF 溶液 (2.7mL， 8M， 21.6mmol) 处理 2， 4- 二氟 -5- 硝基苯甲酸乙 酯 (5.00g， 21.6mmol)( 参见实施例 59(d)) 的 THF(100mL) 混合物， 搅拌混合物过夜。加入 另一份 NH3 的 THF 溶液 (1.0mL， 8M， 8mmol) 并搅拌混合物过夜。加入水 (100mL)， 浓缩混合 物。滤出沉淀并干燥得到副标题化合物。产率 ： 4.80g(98％ )。
(b)4- 氨基 -2-(2， 2- 二氟乙氧基 )-5- 硝基苯甲酸乙酯
根据实施例 59(f)， 使用 4- 氨基 -2- 氟 -5- 硝基苯甲酸乙酯 (4.80g， 21.0mmol)、 2， 2- 二 氟 乙 醇 (1.73g， 21.0mmol)、氢 化 钠 (0.841g， 60 ％， 21.0mmol)、 THF(100mL) 及 DMF(50mL) 制备副标题化合物。产率 ： 2.40g(39％ )。
(c)4， 5- 二氨基 -2-(2， 2- 二氟乙氧基 ) 苯甲酸乙酯
根 据 实 施 例 59(g)， 使 用 4- 氨 基 -2-(2， 2- 二 氟 乙 氧 基 )-5- 硝 基 苯 甲 酸 乙 酯 (1.00g， 3.44mmol)、 Ra-Ni(1.0g) 及 THF(50mL) 制备副标题化合物。副标题化合物无需进 一步纯化即用于下一步骤。
(d)2-(2- 氯 -5-{[(1- 三氟甲基 - 环丙烷羰基 )- 氨基 ]- 甲基 }- 苯基氨基 )-6-(2， 2- 二氟 - 乙氧基 )-1H- 苯并咪唑 -5- 甲酸乙酯
根据实施例 59(h)， 使用 4， 5- 二氨基 -2-(2， 2- 二氟乙氧基 ) 苯甲酸乙酯 (0.466g， 1.79mmol， 来自步骤 (c) 的粗制物 )、 N-(4- 氯 -3- 异硫氰酸酯基苄基 )-1-( 三氟甲基 ) 环 丙烷甲酰胺 (0.600g， 1.79mmol)、 DIC(0.226g， 1.79mmol) 及 THF(40mL) 制备副标题化合物。 产率 ： 0.620g(62％ )。
(e)N-(4- 溴 - 苯基 )-2-(2- 氯 -5-{[(1- 三氟甲基 - 环丙烷羰基 )- 氨基 ]- 甲 基 }- 苯基氨基 )-6-(2， 2- 二氟 - 乙氧基 )-1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺
根据实施例 59(i)， 使用 2-(2- 氯 -5-{[(1- 三氟甲基 - 环丙烷羰基 )- 氨基 ]- 甲 基 }-6-(2， 2- 二氟 - 乙氧基 )-1H- 苯并咪唑 -5- 甲酸乙酯 (0.200g， 0.36mmol)、 4- 溴苯胺
99102341395 A CN 102341409说明1书80/105 页(0.184g， 1.07mmol)、 Me3Al 的甲苯溶液 (0.900mL， 2M， 1.80mmol) 及 1， 4- 二烷 (10mL) 制备标题化合物。产率 ： 0.115g(47 ％ )。400MHz H-NMR(DMSO-d6， ppm)δ11.3-11.1(1H， br s)10.17(1H， s)9.1-8.8(1H， br s)8.65-8.57(1H， m)8.53(1H， t， J ＝ 5.8Hz)7.95-7.90(1H， m)7.80-7.73(2H， m)7.63-7.57(2H， m)7.49(1H， d， J ＝ 8.4Hz)7.31-7.26(1H， m)6.94(1H， dd， J ＝ 8.2， 1.6Hz)6.59(1H， tt， J ＝ 54.3， 3.1Hz)4.57(2H， td， J ＝ 14.9， 3.0Hz)4.38(2H， d， J ＝ 5.8Hz)1.54-1.47(2H， m)1.38-1.31(2H， m)。MS m/z ： 686， 688， 690[M+H]+。
类似于以上详细描述的制备方法合成以下化合物。
实施例 69
N-(4- 溴 - 苯基 )-2-(2- 氯 -5-{[(1- 三氟甲基 - 环丙烷羰基 )- 氨基 ]- 甲基 }- 苯 基氨基 )-6- 甲氧基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺
(a)4- 氨基 -2- 甲氧基 -5- 硝基苯甲酸
回 流 4- 乙 酰 基 氨 基 -2- 甲 氧 基 -5- 硝 基 苯 甲 酸 乙 酯 (4.0g， 14.9mmol) 及 NaOH(40mL， 1M 水溶液， 40mmol) 的 EtOH(80mL) 混合物 2 小时。冷却混合物至室温并加入水 (20mL)。用 HCl(6M 水溶液 ) 酸化混合物， 滤出副标题化合物。产率 ： 3.0g(95％ )。
(b)4- 氨基 -N-(4- 溴苯基 )-2- 甲氧基 -5- 硝基苯甲酰胺
根据实施例 59 步骤 (a) 中的操作， 使用 4- 氨基 -2- 甲氧基 -5- 硝基苯甲酸 (2.0g， 9.43mmol)、 TBTU(3.33g， 10.4mmol)、 TEA(2.9mL， 20.8mmol)、 4- 溴苯胺 (1.62g， 9.43mmol) 及 DMF(70mL) 制备副标题化合物。产率 ： 3.41g(99％ )。
(c)4， 5- 二氨基 -N-(4- 溴苯基 )-2- 甲氧基苯甲酰胺
用 AcOH(3mL) 处理 4- 氨基 -N-(4- 溴苯基 )-2- 甲氧基 -5- 硝基苯甲酰胺 (1.30g， 3.55mmol)、 THF(80mL) 及 EtOH(50mL) 的混合物并在 100℃搅拌 15 分钟。向温热混合物中 小心地逐份加入 Fe(1.30g， 23.3mmol)， 在 100℃加热所得混合物 2 小时。冷却混合物， 通过 硅藻土过滤， 浓缩得到粗制副标题化合物。
(d)N-(4- 溴 - 苯基 )-2-(2- 氯 -5-{[(1- 三氟甲基 - 环丙烷羰基 )- 氨基 ]- 甲 基 }- 苯基氨基 )-6- 甲氧基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺
根据实施例 72 步骤 (a) 中的操作， 使用 N-(4- 氯 -3- 异硫氰酸酯基苄基 )-1-( 三氟 甲基 ) 环丙烷甲酰胺 ((200mg， 0.60mmol)， 参见实施例 59， 步骤 (c))、 4， 5- 二氨基 -N-(4- 溴 苯基 )-2- 甲氧基苯甲酰胺 (202mg， 0.60mmol)、 DIC(76mg， 0.60mmol) 及 DMF(4mL) 制备标 1 题化合物。产率 ： 63mg(16％ )。400MHz H-NMR(DMSO-d6， ppm)δ11.12(0.36H， s， 次要互变 异构体 )11.00(0.57H， s， 主要互变异构体 )10.22-10.14(1H， m)8.94(0.57H， s， 主要互变异 构体 )8.76(0.36H， s， 次要互变异构体 )8.61-8.52(1H， m)8.48-8.41(1H， m)7.86-7.69(3H， m)7.53-7.45(2H， m)7.42-7.35(1H， m)7.21(0.38H， s， 次 要 互 变 异 构 体 )7.10(0.59H， s， 主 要 互 变 异 构 体 )6.87-6.79(1H， m)4.29(2H， d， J ＝ 5.8Hz)3.93(3H， s)1.49-1.39(2H， + m)1.28-1.23(2H， m)。MS m/z ： 636， 638， 640[M+H] 。
实施例 70
N-(4- 溴 - 苯基 )-2-(2- 氯 -5-{[(1- 三氟甲基 - 环丙烷羰基 )- 氨基 ]- 甲基 }- 苯 基氨基 )-1-(2-( 二甲基氨基 ) 乙基 )-1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺
(a)N-(4- 溴苯基 )-4- 氟 -3- 硝基苯甲酰胺
回流 4- 氟 -3- 硝基苯甲酸 (10.0g， 54.0mmol)、 SOCl2(20.0mL， 270mmol) 及 DMF(2-3 滴 ) 的混合物 4 小时， 浓缩并在 DCM(25mL) 中溶解残余物， 在 0 ℃缓慢加入至 4- 溴苯胺 (9.3g， 54.1mmol) 及 TEA(11.4mL， 81.0mmol) 的 DCM(50mL) 混合物中。在室温搅拌混合物 1 小时， 浓缩， 加入 EtOAc 并相继用 NaHCO3 水溶液、 HCl 水溶液 (1M) 洗涤有机相， 用 Na2SO4 干 燥， 过滤、 浓缩， 得到副标题化合物。产率 ： 18.0g(98％ )。
(b)N-(4- 溴苯基 )-4-(2-( 二甲基氨基 ) 乙基氨基 )-3- 硝基苯甲酰胺
在 50℃搅拌 N-(4- 溴苯基 )-4- 氟 -3- 硝基苯甲酰胺 (400mg， 1.18mmol) 及 2- 二 甲基氨基乙胺 (208mg， 2.36mmol) 的 EtOH(5mL) 混合物过夜。接着将混合物倾入 NaHCO3 水 溶液中并用 EtOAc 萃取。用 Na2SO4 干燥有机层， 过滤并浓缩。通过 EtOAc/ 石油醚重结晶得 到粗制副标题化合物 (560mg)。
(c)3- 氨基 -N-(4- 溴苯基 )-4-(2-( 二甲基氨基 ) 乙基氨基 ) 苯甲酰胺
根据实施例 2 步骤 (b) 中的操作， 使用 N-(4- 溴苯基 )-4-(2-( 二甲基氨基 ) 乙氨 基 )-3- 硝基苯甲酰胺 (560mg， 1.38mmol)、 Fe(384mg， 6.88mmol)、 NH4Cl( 饱和水溶液， 10mL) 及 EtOH(10mL) 制备副标题化合物。产率 ： 475mg(91％ )。
(d)N-(4- 溴 - 苯基 )-2-(2- 氯 -5-{[(1- 三氟甲基 - 环丙烷羰基 )- 氨基 ]- 甲 基 }- 苯基氨基 )-1-(2-( 二甲基氨基 ) 乙基 )-1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺
根据实施例 72 步骤 (a) 中的操作， 使用 N-(4- 氯 -3- 异硫氰酸酯基苄基 )-1-( 三 氟甲基 ) 环丙烷甲酰胺 ((222mg， 0.66mmol)， 参见实施例 59， 步骤 (c))、 3- 氨基 -N-(4- 溴 苯基 )-4-(2-( 二甲基氨基 ) 乙氨基 ) 苯甲酰胺 (250mg， 0.66mmol)、 DIC(83mg， 0.66mmol) 1 及 DMF(4mL) 制 备 标 题 化 合 物。 产 率 ： 151mg(34 ％ )。400MHz H-NMR(DMSO-d6， ppm) δ10.37(1H， s)10.22(1H， s)8.39(1H， t， J ＝ 5.8Hz)8.10(1H， d， J ＝ 1.8Hz)8.06(1H， d， J ＝ 1.6Hz)7.82-7.71(3H， m)7.53-7.46(3H， m)7.40(1H， d， J ＝ 8.2Hz)6.86(1H， dd， J ＝ 8.2， 1.8Hz)4.32-4.21(4H， m)2.74-2.68(2H， m)2.29(6H， s)1.37-1.32(2H， m)1.23-1.19(2H， m)。 + MS m/z ： 677， 679， 681[M+H] 。
类似于以上详细描述的制备方法合成以下化合物。
实施例 72
N-(4- 溴 - 苯基 )-2-(2- 氯 -5-{[(1， 1- 二氟 - 乙基羰基 )- 氨基 ]- 甲基 }- 苯基 氨基 )-6-(2， 2- 二氟 - 乙氧基 )-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺
(a)2-(2- 氯 -5-{[( 叔丁氧羰基 )- 氨基 ]- 甲基 }- 苯基氨基 )-6-(2， 2- 二氟 - 乙 氧基 )-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酸乙酯
在室温搅拌 4- 氯 -3- 异硫氰酸酯基苄基氨基甲酸叔丁酯 (( 参见实施例 2， 步骤 (c))， 974mg， 3.26mmol) 及 5- 氨基 -2-(2， 2- 二氟乙氧基 )-4-( 甲基氨基 ) 苯甲酸乙酯 (( 参 见实施例 59， 步骤 (g))， 894mg， 3.26mmol) 的 DMF(10mL) 混合物过夜。加入 DIC(411mg，
3.26mmol) 并在 90℃加热混合物 1.5 小时。浓缩混合物， 通过 EtOAc/ 石油醚重结晶残余物 并用 Et2O 洗涤， 得到副标题化合物。产率 ： 1.75g(99％ )。
(b)2-(2- 氯 -5-{[( 叔丁氧羰基 )- 氨基 ]- 甲基 }- 苯基氨基 )-6-(2， 2- 二氟 - 乙 氧基 )-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酸
回 流 2-(2- 氯 -5-{[( 叔 丁 氧 羰 基 )- 氨 基 ]- 甲 基 }- 苯 基 氨 基 )-6-(2， 2- 二 氟 - 乙氧基 )-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酸乙酯 (1.35g， 2.50mmol)、 NaOH(4mL， 2M 水溶 液， 8mmol) 及 1， 4- 二 烷 (15mL) 的混合物 3 小时。冷却至室温后， 酸化混合物至 pH 值约 过滤且浓缩。用 Et2O 洗涤残余物， 得到 为 5-6， 用 EtOAc 萃取。用 Na2SO4 干燥有机萃取物， 副标题化合物。产率 ： 1.12g(88％ )。
(c)N-(4- 溴 - 苯 基 )-2-(2- 氯 -5-{[( 叔 丁 氧 羰 基 )- 氨 基 ]- 甲 基 }- 苯 基 氨 基 )-6-(2， 2- 二氟 - 乙氧基 )-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺
在室温搅拌 2-(2- 氯 -5-{[( 叔丁氧羰基 )- 氨基 ]- 甲基 }- 苯基氨基 )-6-(2， 2- 二 氟 - 乙氧基 )-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酸 (1.12g， 2.19mmo1)、 HBTU(831mg， 2.19mmol) 及 TEA(433mg， 4.38mmol) 的 DMF(10mL) 混 合 物 30 分 钟， 接 着 加 入 至 4- 溴 苯 胺 (377mg， 2.19mmol) 的 DMF(10mL) 溶液中。在室温搅拌所得混合物过夜， 倾入盐水中并用 EtOAc 萃 过滤且浓缩。通过柱色谱纯化残余物， 得到副标题化合 取。使用 Na2SO4 干燥有机萃取物， 物。产率 ： 1.35g(93％ )。
(d)N-(4- 溴 - 苯基 )-2-(2- 氯 -5-{[ 氨基 ]- 甲基 }- 苯基氨基 )-6-(2， 2- 二氟 - 乙 氧基 )-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺
在室温搅拌 N-(4- 溴 - 苯基 )-2-(2- 氯 -5-{[( 叔丁氧羰基 )- 氨基 ]- 甲基 }- 苯 基氨基 )-6-(2， 2- 二氟 - 乙氧基 )-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺 (1.35g， 2.03mmol) 及 TFA(3.47g， 30.5mmol) 的 DCM(75mL) 混合物过夜。冷却混合物至 0℃， 碱化至 pH 值约为 10 并用 DCM 萃取。使用 Na2SO4 干燥有机萃取物， 过滤且浓缩。用 Et2O 与石油醚的混合物洗 涤残余物， 得到副标题化合物。产率 ： 1.15g(100％ )。
(e)N-(4- 溴 - 苯基 )-2-(2- 氯 -5-{[(1， 1- 二氟 - 乙基羰基 )- 氨基 ]- 甲基 }- 苯 基氨基 )-6-(2， 2- 二氟 - 乙氧基 )-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺
根据实施例 72 步骤 (c)， 使用 N-(4- 溴 - 苯基 )-2-(2- 氯 -5-{[ 氨基 ]- 甲基 }- 苯 基氨基 )-6-(2， 2- 二氟 - 乙氧基 )-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺 (170mg， 0.30mmol)、 2， 2- 二 氟 丙 酸 (33mg， 0.30mmol)、 HBTU(114mg， 0.30mmol)、 TEA(61mg， 0.60mmol) 及 1 DMF(3mL) 制备标题化合物。产率 ： 63mg(32％ )。400MHz H-NMR(DMSO-d6， ppm)δ10.07(1H， s)9.30(1H， t， J ＝ 5.8Hz)8.35(1H， s)7.87-7.82(1H， m)7.73-7.60(3H， m)7.53-7.39(3H， m)7.33-7.27(1H， m)6.99-6.90(1H， m)6.66-6.34(1H， m)4.59-4.44(2H， m)4.30(2H， d， J＝ 5.8Hz)3.71(2.38H， s， 主要互变异构体 )3.43(0.41H， s， 次要互变异构体 )1.74(3H， t， J＝ + 19.6Hz)。MS m/z ： 656， 658， 660[M+H] 。
类似于以上详细描述的制备方法合成以下化合物。
实施例 78
N-(4- 溴 - 苯 基 )-2-(2- 氯 -5-{[( 叔 丁 基 羰 基 )- 氨 基 ]- 甲 基 }- 苯 基 氨 基 )-6-(2， 2- 二氟 - 乙氧基 )-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺
在 0 ℃ 向 N-(4- 溴 - 苯 基 )-2-(2- 氯 -5-{[ 氨 基 ]- 甲 基 }- 苯 基 氨 基 )-6-(2， 2- 二 氟 - 乙 氧 基 )-1- 甲 基 -1H- 苯 并 咪 唑 -5- 甲 酰 胺 (( 参 见 实 施 例 72， 步 骤 (d))， 150mg， 0.27mmol)、 TEA(41mg， 0.41mmol) 及 DCM(2mL) 的混合物中逐滴加入特戊酰氯 (34mg， 0.28mmol) 的 DCM(1mL) 溶液。 在室温搅拌所得混合物过夜， 倾入水中并用 DCM 萃取。 用盐水 洗涤有机萃取物， 用 Na2SO4 干燥， 过滤且浓缩。通过 EtOAc/ 石油醚重结晶残余物， 得到标题 1 化合物。产率 ： 119mg(68％ )。400MHz H-NMR(DMSO-d6， ppm)δ10.09-9.96(1H， m)8.27(1H， s)8.10(1H， t， J ＝ 5.8Hz)7.89-7.84(1H， m)7.75-7.61(3H， m)7.54-7.46(2H， m)7.39(1H， d， J ＝ 8.2Hz)7.33-7.27(1H ， m)6.95-6.87(1H ， m)6.67-6.35(1H ， m)4.58-4.44(2H ， m)4.22(2H， d， J ＝ 5.8Hz)3.70(2.63H， s， 主要互变异构体 )3.42(0.33H， s， 次要互变异构 + 体 )1.10(9H， s)。MS m/z ： 648， 650， 652[M+H] 。
类似于以上详细描述的制备方法合成以下化合物。
实施例 82
N-(4- 溴 - 苯 基 )-2-(2- 氯 -5-{[( 叔 丁 基 磺 酰 基 )- 氨 基 ]- 甲 基 }- 苯 基 氨 基 )-6-(2， 2- 二氟 - 乙氧基 )-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺
在室温搅拌 N-(4- 溴 - 苯基 )-2-(2- 氯 -5-{[( 叔丁基亚磺酰基 )- 氨基 ]- 甲 基 }- 苯基氨基 )-6-(2， 2- 二氟 - 乙氧基 )-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺 (100mg， 0.15mmol)、 间氯过氧苯甲酸 (28mg， 0.16mmol) 及 DCM(20mL) 的混合物过夜。碱化混合物 至 pH 值约为 8-9 并用 EtOAc 萃取。使用 Na2SO4 干燥有机萃取物， 过滤且浓缩。通过柱色谱纯化残余物， 得到标题化合物。产率 ： 24mg(23 ％ )。200MHz 1H-NMR(DMSO-d6， ppm) δ10.06-10.02(1H， m)7.75-7.62(4H， m)7.54-7.44(4H， m)7.27-7.17(2H， m)6.95-6.84(1H， m)6.57-6.49(1H， m)4.58-4.42(2H， m)4.16-4.09(2H， m)3.57-3.51(3H， m)1.29(9H， s)。MS + m/z ： 684， 686， 690[M+H] 。
实施例 83
N-(4- 溴 - 苯基 )-2-(2- 三氟甲基 -5-{[(1- 三氟甲基 - 环丙烷羰基 )- 氨基 ]- 甲 基 }- 苯基氨基 )-6-(2， 2- 二氟 - 乙氧基 )-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺(a)3- 氨基 -4-( 三氟甲基 ) 苄腈
在 90℃加热装有 3- 氟 -4-( 三氟甲基 ) 苄腈 (10.0g， 52.9mmol) 及液态 NH3(60 mL) 的封闭压力管 6 天。冷却压力管至 -60℃并打开。在室温搅拌混合物 1 小时。用盐水处理 残余物并用 EtOAc 萃取， 得到粗制副标题化合物 (10.2g)。
(b)N-[5- 氰基 -2-( 三氟甲基 ) 苯基 ]- 氨基甲酸叔丁酯
在 0℃用 BOC2O(12.9g， 59.1mmol) 的 DCM(50mL) 溶液逐滴处理 3- 氨基 -4-( 三氟 甲基 ) 苄腈 (10.0g， 53.7mmol)、 DCM(100mL) 及 TEA(8.2mL， 59mmol) 的混合物， 接着搅拌过 夜。加入另一份 BOC2O 的 DCM 溶液及 DMAP(656mg， 5.37mmol) 并在室温再搅拌混合物 12 小 时， 用水及盐水洗涤， 使用 Na2SO4 干燥， 过滤且浓缩。 通过柱色谱纯化残余物， 得到副标题化 合物。产率 ： 8.50g(55％ )。
(c)N-[5-( 氨基甲基 )-2-( 三氟甲基 ) 苯基 ]- 氨基甲酸叔丁酯
根据实施例 59 步骤 (g) 中的操作， 使用 N-[5- 氰基 -2-( 三氟甲基 ) 苯基 ]- 氨基 甲酸叔丁酯 (8.5g， 29.7mmol)、 Ra-Ni(174mg， 2.97mmol)、 H2(5atm) 及 THF(60mL) 制备副标 题化合物。产率 ： 8g(93％ )。
(d)N-(3- 氨基 -4-( 三氟甲基 )- 苄基 )-1-( 三氟甲基 )- 环丙烷甲酰胺
根据实施例 72 步骤 (c) 及实施例 72 步骤 (d) 中的操作， 使用 N-[5-( 氨基甲 基 )-2-( 三 氟 甲 基 ) 苯 基 ] 氨 基 甲 酸 叔 丁 酯 (2.09g， 7.20mmol)、 1-( 三 氟 甲 基 )- 环 丙 烷 甲 酸 (1.11g， 7.20mmol)、 HBTU(2.73g， 7.20mmol)、 TEA(2.19g， 21.6mmol)、 DMF(25mL)、 TFA(10mL) 及 DCM(50mL) 制备副标题化合物。产率 ： 1.8g(77％ )。
(e)N-(4- 三氟甲基 -3- 异硫氰酸酯基 - 苄基 )-1-( 三氟甲基 ) 环丙烷甲酰胺
在 60℃， 在压力管中搅拌 N-(3- 氨基 -4-( 三氟甲基 )- 苄基 )-1-( 三氟甲基 )- 环 丙 烷 甲 酰 胺 (1.60g， 4.90mmol)、 二 -(2- 吡 啶 基 ) 硫 代 碳 酸 酯 (1.71g， 7.36mmol) 及 THF(40mL) 的混合物 2 天。浓缩混合物并通过柱色谱纯化残余物， 得到副标题化合物。产 率： 1.29g(72％ )。
(f)N-(4- 溴 - 苯 基 )-2-(2- 三 氟 甲 基 -5-{[(1- 三 氟 甲 基 - 环 丙 烷 羰 基 )- 氨 基 ]- 甲基 }- 苯基氨基 )-6-(2， 2- 二氟 - 乙氧基 )-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺
根据实施例 72 步骤 (a) 中的操作， 使用 N-(4- 三氟甲基 -3- 异硫氰酸酯基 - 苄
基 )-1-( 三氟甲基 ) 环丙烷甲酰胺 (184mg， 0.50mmol)、 5- 氨基 -N-(4- 溴苯基 )-2-(2， 2- 二 氟乙氧基 )-4-( 甲基氨基 ) 苯甲酰胺 (200mg， 0.50mmol)、 DIC(63mg， 0.50mmol) 及 DMF(4mL) 1 制备标题化合物。产率 ： 59mg(16％ )。400MHz H-NMR(DMSO-d6， ppm)δ10.62(0.57H， s， 主 要互变异构体 )10.09-9.96(1H， m)8.47-8.41(0.38H， m， 次要互变异构体 )8.36-8.28(1H， m)7.72-7.61(3H， m)7.58-7.47(3H， m)7.36-7.28(1H， m)7.12-6.84(2H， m)6.67-6.35(1H， m)4.58-4.45(2H， m)4.34-4.25(2H， m)3.64(0.96H， s， 次要互变异构体 )3.41(1.93H， s， 主要 + 互变异构体 )1.31-1.17(4H， m)。MS m/z ： 734， 736[M+H] 。
实施例 84
2-(2- 氯 -4- 氟 -5-{[(1-( 三 氟 甲 基 ) 环 丙 烷 羰 基 ) 氨 基 ] 甲 基 }- 苯 基 氨 基 )-6-(2， 2- 二氟乙氧基 )-1- 甲基 -N-( 反式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -5- 甲酰胺
(a)4- 氯 -2- 氟 -5- 硝基苄腈
在 1-2℃用浓硝酸 (3.9mL) 逐滴处理 4- 氯 -2- 氟苄腈 (4.62g， 29.7mmol) 的浓硫 酸 (42mL) 混合物。在 1-2℃搅拌 2 小时后， 将混合物倾入冰中， 过滤得到副标题化合物。产 率： 5.18g(87％ )。
(b)4- 氯 -2- 氟 -5- 异硫氰酸酯基苄腈
将 H2 通入 4- 氯 -2- 氟 -5- 硝基苄腈 (1.0g， 5.0mmol) 及 Ra-Ni(29mg， 0.50mmol) 的 THF(50mL) 混 合 物 6 小 时。 通 过 硅 藻 土 过 滤 混 合 物。 加 入 CSCl2(2.29g， 19.9mmol)、 K2CO3(3.45g， 25.0mmol)， 在室温搅拌所得混合物过夜并浓缩。 通过柱色谱纯化残余物， 得到 副标题化合物。产率 ： 840mg(79％ )。
(c)2-[(2- 氯 -5- 氰基 -4- 氟苯基 )- 氨基 ]-6-(2， 2- 二氟乙氧基 )-1- 甲基 -N-( 反 式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -5- 甲酰胺
根 据 实 施 例 72 步 骤 (a) 中 的 操 作， 使 用 4- 氯 -2- 氟 -5- 异 硫 氰 酸 酯 基 苄 腈 (270mg， 1.27mmol)、 5- 氨基 -2-(2， 2- 二氟乙氧基 )-4-( 甲基氨基 )-N-(( 反 )-4-( 三氟甲 基 ) 环己基 ) 苯甲酰胺 [502mg， 1.27mmol， 类似于实施例 66 的步骤 (f+g)， 由 4- 反式 - 三氟 甲基 - 环己胺及 2-(2， 2- 二氟乙氧基 )-4-( 甲基氨基 )-5- 硝基苯甲酸制备 ]、 DIC(160mg，
1.27mmol) 及 DMF(10mL) 制备副标题化合物。产率 ： 210mg(29％ )。
(d)2-[5-( 氨基甲基 )-2- 氯 -4- 氟 - 苯基 ] 氨基 -6-(2， 2- 二氟乙氧基 )-1- 甲 基 -N-( 反式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -5- 甲酰胺
根据实施例 3d， 使用 2-[(2- 氯 -5- 氰基 -4- 氟 - 苯基 )- 氨基 ]-6-(2， 2- 二氟乙氧 基 )-1- 甲基 -N-( 反式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -5- 甲酰胺 (210mg， 0.37mmol)、 Ra-Ni(3mg)、 H2(5atm) 及 THF(10mL) 制备副标题化合物。产率 ： 150mg(70％ )。
(e)2-(2- 氯 -4- 氟 -5-{[(1-( 三氟甲基 ) 环丙烷羰基 ) 氨基 ] 甲基 }- 苯基氨 基 )-6-(2， 2- 二氟乙氧基 )-1- 甲基 -N-( 反式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -5- 甲酰胺
根 据 实 施 例 72 步 骤 (c) 中 的 操 作， 使 用 2-[5-( 氨 基 甲 基 )-2- 氯 -4- 氟 - 苯 基 ] 氨基 -6-(2， 2- 二氟乙氧基 )-1- 甲基 -N-( 反式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )-1H- 苯 并 [d] 咪 唑 -5- 甲 酰 胺 (150mg， 0.26mmol)、 1-( 三 氟 甲 基 )- 环 丙 烷 甲 酸 (40mg， 0.26mmol)、 HBTU(99mg， 0.26mmol)、 TEA(53mg， 0.52mmol) 及 DMF(4mL) 制 备 标 题 化 合 物。 1 产 率： 39mg(21 ％ )。400MHz H-NMR(DMSO-d6， ppm)δ8.40(1H， t， J ＝ 5.8Hz)8.32(1H， s)7.90-7.82(2H ，m)7.78-7.74(1H ，m)7.44(1H ，d ，J ＝ 9.6Hz)7.23-7.19(1H ， m)6.63-6.34(1H ，m)4.51-4.40( 2H ，m)4.29(2H ，d ，J ＝ 5.8Hz)3.78-3.65(4H ， m)2.28-2.17(1H， m)2.03-1.97(2H， m)1.91-1.85(2H， m)1.39-1.19(8H， m)。MS m/z ： 714， + 716[M+H] 。
类似于以上详细描述的制备方法合成以下化合物。
实施例 86
N-(3- 氯 -4- 氟 - 苯基 )-2-(2- 氯 -5-{[( 叔丁基羰基 )- 氨基 ]- 甲基 }- 苯基氨 基 )-6-(2， 2- 二氟 - 乙氧基 )-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺
(a)2- 氟 -4- 甲基氨基 -5- 硝基 - 苯甲酸乙酯
在 -5℃向 2， 4- 二氟 -5- 硝基 - 苯甲酸乙酯 (2.50g， 10.8mmol) 的 20ml THF 溶液 中加入 2N 甲胺的 THF 溶液 (11.5ml， 23.0mmol)， 移除冷却浴。在室温 15 分钟后， 在真空下 (i.vac.) 浓缩混合物， 加入 50ml DCM， 用水洗涤有机相并用 MgSO4 干燥。在真空下浓缩后， 以乙醇研磨粗产物， 得到结晶产物。
产率 ： 1.72g(66％ ) ； MS m/z ： 243[M+H]+。
(b)2-(2， 2- 二氟乙氧基 )-4- 甲基氨基 -5- 硝基 - 苯甲酸乙酯
向 2， 2- 二氟乙醇 (0.16ml， 2.48mmol) 与 10ml THF 的混合物中加入 KOtBu(0.26g， 95 ％， 2.39mmol)。搅拌所得物 15 分钟， 加入 2- 氟 -4- 甲基氨基 -5- 硝基 - 苯甲酸乙酯 (0.40g， 1.65mmol) 并搅拌所得物 3 天。用水稀释混合物， 在真空下浓缩并通过过滤收集粗
产物。 产率 ： 0.47g(94％ ) ； TLC ： 硅胶， PE/EtOAc 60 ∶ 40， Rf ＝ 0.35。
(c)2-(2， 2- 二氟乙氧基 )-4- 甲基氨基 -5- 氨基 - 苯甲酸乙酯
用 含 10 ％ Pd/C(50mg) 的 15ml MeOH 氢 化 2-(2， 2- 二 氟 乙 氧 基 )-4- 甲 基 氨 基 -5- 硝基 - 苯甲酸乙酯 (0.47g， 1.54mmol)18 小时 (50psi H2)， 过滤并浓缩。
产率 ： 0.35g(83％ ) ； TLC ： 硅胶， DCM/EtOH 95 ∶ 5， Rf ＝ 0.4。
(d)2-(2- 氯 -5-{[( 叔丁基羰基 ) 氨基 ] 甲基 } 苯基氨基 )-6-(2， 2- 二氟乙氧 基 )-1- 甲基 -1H- 苯并 [d] 咪唑 -5- 甲酸乙酯
与实施例 72a 类似， 在室温用含 DIC 的 DMF 由 2-(2， 2- 二氟乙氧基 )-4- 甲基氨 基 -5- 氨基 - 苯甲酸乙酯及 N-(4- 氯 -3- 异硫氰酸酯基苄基 )-2， 2- 二甲基丙酰胺制备副 标题化合物。粗制物无需进一步纯化即用于下一步骤。
(e)2-(2- 氯 -5-{[( 叔丁基羰基 ) 氨基 ] 甲基 } 苯基氨基 )-6-(2， 2- 二氟乙氧 基 )-1- 甲基 -1H- 苯并 [d] 咪唑 -5- 甲酸
与实施例 2g 类似， 用 NaOH 由粗 2-(2- 氯 -5-{[( 叔丁基羰基 ) 氨基 ] 甲基 } 苯基 氨基 )-6-(2， 2- 二氟乙氧基 )-1- 甲基 -1H- 苯并 [d] 咪唑 -5- 甲酸乙酯制备副标题化合物。
产 率： (85 ％，两 步 ) ； TLC ：硅 胶， DCM/EtOH 95 ∶ 5， Rf ＝ 0.2。MS m/z ： + 495/497[M+H] 。
(f)N-(3- 氯 -4- 氟 - 苯基 )-2-(2- 氯 -5-{[( 叔丁基羰基 )- 氨基 ]- 甲基 }- 苯基 氨基 )-6-(2， 2- 二氟 - 乙氧基 )-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺
与实施例 3e 类似， 用 HATU 及 TEA 的 THF 溶液由 2-(2- 氯 -5-{[( 叔丁基羰基 ) 氨基 ] 甲基 }- 苯基氨基 )-6-(2， 2- 二氟乙氧基 )-1- 甲基 -1H- 苯并 [d] 咪唑 -5- 甲酸及 3- 氯 -4- 氟 - 苯胺制备标题化合物， 通过快速色谱纯化。
产率 ： (57％ ) ；
TLC ： 硅胶， DCM/EtOH 95 ∶ 5， Rf ＝ 0.2。HPLC Rt ＝ 1.40 分钟 ( 方法 A) +
MS m/z ： 622/624[M+H] 。
类似于以上详细描述的制备方法合成以下化合物。
实施例 91
2-({5-[( 叔丁氧羰基 ) 氨基 ] 甲基 }-2- 三氟甲基 - 苯基氨基 )-6- 甲氧基 -N-( 反 式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -5- 甲酰胺
(a)3- 硝基 -4- 三氟甲基 - 苯甲酰胺
向 30ml 浓氨水中逐滴加入含 3- 硝基 -4- 三氟甲基 - 苯甲酰氯 (5.32g， 21mmol) 的 30ml THF。搅拌混合物过夜， 过滤并用水洗涤沉淀。
产率 ： 3.05g(62％ ) ； MS m/z ： 233[M+H]。TLC ： 硅胶， DCM/EtOH 95 ∶ 5， Rf ＝ 0.3。
(b)3- 硝基 -4- 三氟甲基 - 苄胺
在 0℃向含 3- 硝基 -4- 三氟甲基 - 苯甲酰胺 (3.00g， 12.8mmol) 的 50ml THF 加入 硼烷的 THF(51ml， 51mmol)1M 溶液并搅拌 3 天。小心加入甲醇， 在室温搅拌 30 分钟并在回 流下搅拌 2 小时。接着在真空下浓缩所得物， 加入 NaOH(pH 8)， 用 EtOAc 萃取混合物。用 Na2SO4 干燥有机层， 过滤且浓缩， 得到粗制副标题化合物。
(c)N-(3- 硝基 -4- 三氟甲基 - 苄基 ) 氨基甲酸叔丁酯
类似于实施例 2a， 用焦碳酸二 - 叔丁酯由粗 3- 硝基 -4- 三氟甲基 - 苄胺制备副标 题化合物。
TLC ： 硅胶， DCM/EtOH 95 ∶ 5， Rf ＝ 0.73。MS m/z ： 321[M+H]+。
(d)N-(3- 氨基 -4- 三氟甲基 - 苄基 ) 氨基甲酸叔丁酯
类似于实施例 2b， 用铁粉由 N-(3- 硝基 -4- 三氟甲基 - 苄基 ) 氨基甲酸叔丁酯制 备副标题化合物。
TLC ： 硅胶， DCM/EtOH 95 ∶ 5， Rf ＝ 0.51。MS m/z ： 291[M+H]+。
(e)N-(3- 异硫氰酸酯基 -4- 三氟甲基 - 苄基 ) 氨基甲酸叔丁酯
类似于实施例 1d， 用 1， 1 ′ - 硫代羰基二 -2- 吡啶酮由 N-(3- 氨基 -4- 三氟甲 基 - 苄基 ) 氨基甲酸叔丁酯制备副标题化合物。
产率 ： 86％ ； TLC ： 硅胶， DCM/EtOH 95 ∶ 5， Rf ＝ 0.8。
(f)N-( 反式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )-2- 甲氧基 -4- 氨基 -5- 硝基苯甲酰胺
类似于实施例 3e， 由 TBTU 与 TEA 的 DMF 溶液由 2- 甲氧基 -4- 氨基 -5- 硝基苯甲酸 及反式 -4- 三氟甲基 - 环己胺制备副标题化合物。 产率 ： 定量 ； TLC ： 硅胶， DCM/EtOH 9 ∶ 1， Rf ＝ 0.68。
(g)N-( 反式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )-2- 甲氧基 -4， 5- 二氨基苯甲酰胺
类似于实施例 59g， 用 Ra-Ni 由 N-( 反式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )-2- 甲氧 基 -4- 氨基 -5- 硝基苯甲酰胺制备副标题化合物。产率 ： 99％； TLC ： 硅胶， DCM/EtOH 9 ∶ 1， Rf ＝ 0.40。
(h)2-({5-[( 叔 丁 氧 羰 基 ) 氨 基 ] 甲 基 }-2- 三 氟 甲 基 - 苯 基 氨 基 )-6- 甲 氧 基 -N-( 反式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -5- 甲酰胺
类似于实施例 72a， 用 DIC 由 N-( 反式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )-2- 甲氧基 -4， 5- 二氨基苯甲酰胺及 N-(3- 异硫氰酸酯基 -4- 三氟甲基 - 苄基 ) 氨基甲酸叔丁酯制备标题 化合物。
产率 ： 77％ ； TLC ： 硅胶， DCM/EtOH 95 ∶ 5， Rf ＝ 0.3。MSm/z ： 630[M+H]+。
实施例 92
2-({5-[(2- 氨基 -3， 3， 3- 三氟 - 丙酰基 ) 氨基 ] 甲基 }-2- 三氟甲基 - 苯基氨 基 )-6- 甲氧基 -N-( 反式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -5- 甲酰胺
(a)2-(5- 氨基甲基 -2- 三氟甲基 - 苯基氨基 )-6- 甲氧基 -N-( 反式 -4- 三氟甲 基 - 环己 -1- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -5- 甲酰胺
类似于实施例 2e， 由 2-({5-[( 叔丁氧羰基 ) 氨基 ] 甲基 }-2- 三氟甲基 - 苯基氨 基 )-6- 甲氧基 -N-( 反式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -5- 甲酰胺及 6M HCl 的 THF 溶液制备标题化合物。
产率 ： 76 ％ ； TLC ： 硅胶， DCM/EtOH/NH3 水溶液 90 ∶ 10 ∶ 1， Rf ＝ 0.2。MS m/z ： + 530[M+H] 。
(b)2-(5-{[(2- 叔丁氧羰基氨基 -3， 3， 3- 三氟 - 丙酰基 ) 氨基 ] 甲基 }-2- 三氟甲 基 - 苯基氨基 )-6- 甲氧基 -N-( 反式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -5- 甲 酰胺
类似于实施例 3e， 用 TBTU 及 TEA 的 THF 溶液由 2-(5- 氨基甲基 -2- 三氟甲基 - 苯 基氨基 )-6- 甲氧基 -N-( 反式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -5- 甲酰胺 及 2- 叔丁氧羰基氨基 -3， 3， 3- 三氟 - 丙酸制备标题化合物。
产率 ： 70％； HPLC Rt ＝ 1.38 分钟 ( 方法 A)。TLC ： 硅胶， DCM/EtOH 95 ∶ 5 ∶ 1， Rf + ＝ 0.3。MS m/z ： 755[M+H] 。
(c)2-({5-[(2- 氨基 -3， 3， 3- 三氟丙酰基 ) 氨基 ] 甲基 }-2- 三氟甲基 - 苯基氨 基 )-6- 甲氧基 -N-( 反式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -5- 甲酰胺
类似于实施例 2e， 由 2-(5-{[(2- 叔丁氧羰基氨基 -3， 3， 3- 三氟 - 丙酰基 ) 氨基 ] 甲基 }-2- 三氟甲基 - 苯基氨基 )-6- 甲氧基 -N-( 反式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )-1H- 苯 并 [d] 咪唑 -5- 甲酰胺及 6M HCl 的 THF 溶液制备标题化合物。
产率 ： 99 ％ ； HPLC Rt ＝ 1.23 分 钟 ( 方 法 A)。TLC ： 硅 胶， DCM/EtOH/NH3 水 溶 液 + 95 ∶ 5 ∶ 1， Rf ＝ 0.55。MS m/z ： 655[M+H] 。
类似于以上详细描述的制备方法合成以下化合物。
实施例 95
N-( 反式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )-1- 甲基 -2-(2- 三氟甲基 -5-{[( 叔丁基羰 基 )- 氨基 ]- 甲基 }- 苯基氨基 )-6-(2， 2- 二氟 - 乙氧基 )-1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺
(a)3- 氨基 -4- 三氟甲基 - 苄胺
类似于实施例 2e， 由 N-(3- 氨基 -4- 三氟甲基 - 苄基 ) 氨基甲酸叔丁酯及 6MHCl 的 THF 溶液制备标题化合物。
产率 ： 99％ ； HPLC Rt ＝ 0.68 分钟 ( 方法 A)。MS m/z ： 191[M+H]+。
(b)N-(3- 氨基 -4- 三氟甲基 - 苄基 )- 特戊酰胺
类似于实施例 1b， 用 TEA 由 3- 氨基 -4- 三氟甲基 - 苄胺及特戊酰氯制备副标题化 合物。
产率 ： 96％ ； HPLC Rt ＝ 1.31 分钟 ( 方法 A)。MS m/z ： 275[M+H]+。
(c)N-(3- 异硫氰酸酯基 -4- 三氟甲基 - 苄基 )- 特戊酰胺
类似于实施例 1d， 用 1， 1 ′ - 硫代羰基二 -2- 吡啶酮由 N-(3- 氨基 -4- 三氟甲 基 - 苄基 )- 特戊酰胺制备副标题化合物。
产率 ： 72％ ； TLC ： 硅胶， DCM/EtOH 95 ∶ 5， Rf ＝ 0.75。
(d)5- 硝基 -2- 氟 -4-( 甲基氨基 )-N-( 反式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )- 苯甲 酰胺
类似于实施例 3e， 用 DIPEA 及 TBTU 由 4- 反式 - 三氟甲基 - 环己胺及 2- 氟 -4-( 甲 基氨基 )-5- 硝基苯甲酸制备副标题化合物。
产率 ： 70％ ； HPLC Rt ＝ 1.44 分钟 ( 方法 A)。MS m/z ： 364[M+H]+。
(e)5- 硝基 -2-(2， 2- 二氟乙氧基 )-4-( 甲基氨基 )-N-( 反式 -4- 三氟甲基 - 环 己 -1- 基 )- 苯甲酰胺
类似于实施例 86b， 用 KOtBu 由 5- 硝基 -2- 氟 -4-( 甲基氨基 )-N-( 反式 -4- 三氟 甲基环己 -1- 基 )- 苯甲酰胺及 2， 2- 二氟乙醇制备副标题化合物。
产率 ： 89％ ； HPLC Rt ＝ 1.47 分钟 ( 方法 A)。MS m/z ： 426[M+H]+。
(f)5- 氨基 -2-(2， 2- 二氟乙氧基 )-4-( 甲基氨基 )-N-( 反式 -4- 三氟甲基 - 环 己 -1- 基 )- 苯甲酰胺
类似于实施例 86c， 由 5- 硝基 -2-(2， 2- 二氟乙氧基 )-4-( 甲基氨基 )-N-( 反 式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )- 苯甲酰胺、 氢气及 Pd/C 制备副标题化合物。
产率 ： 98％ ； HPLC Rt ＝ 1.24 分钟 ( 方法 A)。MS m/z ： 396[M+H]+。
(g)N-( 反式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )-1- 甲基 -2-(2- 三氟甲基 -5-{[( 叔丁 基羰基 )- 氨基 ]- 甲基 }- 苯基氨基 )-6-(2， 2- 二氟 - 乙氧基 )-1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺
类似于实施例 72a， 由 5- 氨基 -2-(2， 2- 二氟乙氧基 )-4-( 甲基氨基 )-N-( 反 式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )- 苯甲酰胺及 N-(3- 异硫氰酸酯基 -4- 三氟甲基 - 苄基 )- 特 戊酰胺制备副标题化合物。
产率 ： 51％； HPLC Rt ＝ 1.38 分钟 ( 方法 A)。MS m/z ： 678[M+H]+。TLC ： 硅胶， DCM/ EtOH 95 ∶ 5 ； Rf ＝ 0.3。
类似于以上详细描述的制备方法合成以下化合物。
实施例 99
N-( 反式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )-2-(2- 甲氧基 -5-{[( 叔丁基羰基 )- 氨 基 ]- 甲基 }- 苯基氨基 )-6- 氯 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺
(a)N-(3- 氨基 -4- 甲氧基 - 苄基 )- 特戊酰胺
类似于实施例 1b， 用 TEA 由 3- 氨基 -4- 甲氧基 - 苄胺及特戊酰氯制备副标题化合 物。产率 ： 30％ ； MS m/z ： 237[M+H]+。
(b)N-(3- 异硫氰酸酯基 -4- 甲氧基 - 苄基 )- 特戊酰胺
类似于实施例 1d， 用 1， 1′ - 硫代羰基二 -2- 吡啶酮由 N-(3- 氨基 -4- 甲氧基 - 苄 基 )- 特戊酰胺制备副标题化合物。
产率 ： 99％ ； MS m/z ： 279[M+H]+。
(c)5- 硝基 -2- 氯 -4- 氟 -N-( 反式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )- 苯甲酰胺
根据实施例 70a， 由 2- 氯 -4- 氟 -5- 硝基苯甲酸 ( 用亚硫酰氯将其转化为相应酸 氯化物 ) 及 4- 反式 - 三氟甲基 - 环己胺制备副标题化合物。
产率 ： 100％ ； MS m/z ： 369[M+H]+。
(d)5- 硝基 -2- 氯 -4- 氨基 -N-( 反式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )- 苯甲酰胺
在 -10℃向 5- 硝基 -2- 氯 -4- 氟 -N-( 反式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )- 苯甲酰 胺 (0.20g， 0.54mmol) 与 10ml THF 的混合物中分批加入浓氨水 (0.8ml)， 在室温搅拌过夜。 加入水并在真空下浓缩混合物。以水研磨残余物、 过滤。用水洗涤滤饼、 干燥， 得到粗制副 + 标题化合物 (MS m/z ： 366[M+H] )。
(e)4， 5- 二氨基 -2- 氯 -N-( 反式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )- 苯甲酰胺
类似于实施例 66g， 用 Ra-Ni 氢化 5- 硝基 -2- 氯 -4- 氨基 -N-( 反式 -4- 三氟甲 基 - 环己 -1- 基 )- 苯甲酰胺。粗制物无需进一步纯化即直接加以使用。
(f)N-( 反式 -4- 三氟甲基 - 环己 -1- 基 )-2-(2- 甲氧基 -5-{[( 叔丁基羰基 )- 氨 基 ]- 甲基 }- 苯基氨基 )-6- 氯 -1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺
类 似 于 实 施 例 72a，由 4， 5- 二 氨 基 -2- 氯 -N-( 反 式 -4- 三 氟 甲 基 - 环 己 -1- 基 )- 苯甲酰胺及 N-(3- 异硫氰酸酯基 -4- 甲氧基 - 苄基 )- 特戊酰胺制备化合物。
产率 ： 32％ ； MS m/z ： 580[M+H]+。
实施例 100
N-(4- 溴 - 苯 基 )-2-(2- 氯 -5-{[( 叔 丁 基 羰 基 )- 氨 基 ]- 甲 基 }- 苯 基 氨 基 )-6-(2， 2- 二氟 - 乙氧基 )-1-(2， 2- 二氟乙基 )-1H- 苯并咪唑 -5- 甲酰胺
类似于实施例 59i， 使用三甲基铝将 2-(2- 氯 -5-{[( 叔丁基羰基 ) 氨基 ] 甲基 } 苯基氨基 )-6-(2， 2- 二氟乙氧基 )-1-(2， 2- 二氟乙基 )-1H- 苯并 [d] 咪唑 -5- 甲酸乙酯 ( 类似于实施例 86a-d 制备 ) 与 4- 溴苯胺偶合。
产率 ： (57％ )。TLC ： 硅胶， DCM/EtOH 9 ∶ 1， Rf ＝ 0.6。MS m/z ： 698[M+H]+。
125