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1、(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201410848974.5 (22)申请日 2014.12.31 A23L 1/29(2006.01) A61K 38/01(2006.01) A61P 1/00(2006.01) A61P 39/06(2006.01) A61P 3/06(2006.01) A61P 9/12(2006.01) A61P 37/04(2006.01) (71)申请人 广西壮族自治区农业科学院农产品 加工研究所 地址 530007 广西壮族自治区南宁市大学东 路 174 号 (72)发明人 游向荣 张雅媛 卫萍 孙健 李明娟 李志春 杨媚 (74)专利代。
2、理机构 深圳市科吉华烽知识产权事 务所 ( 普通合伙 ) 44248 代理人 胡吉科 (54) 发明名称 一种火麻含片及其制备方法 (57) 摘要 本发明提供一种火麻含片及其制备方法, 其 组分按重量份包括 : 火麻蛋白肽冻干粉 1025 份、 青香蕉抗性淀粉 1018 份、 葡萄籽提取物 26 份、 山黄皮提取物 25 份, 甘草 35 份, 木糖醇 26 份、 麦芽糊精 58 份, - 淀粉酶 0.10.3 份, 甜 菊糖苷 12.8 份、 甜橙油 0.20.8 份、 姜黄色素 0.10.3 份、 柠檬酸 0.20.5 份, 黏合剂 1.22.8 份。本发明的有益效果是 : 1、 具有抗氧。
3、化、 降血 脂、 降血压、 提高免疫力、 抗衰老等功效, 同时在 治疗胃肠道疾病方面也具有很好的疗效 ; 2、 火麻 蛋白肽成分是经特定蛋白酶定向水解, 能更好地 被人体吸收 ; 3、 含片中添加了青香蕉抗性淀粉成 分, 可降低产品热量, 强化其防治肠道疾病、 降低 血糖、 提高免疫力等功效 ; 4、 产品的分散性、 溶解 性、 功能性得到明显的改善, 更容易被人吸收利 用。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书2页 说明书7页 附图1页 (10)申请公布号 CN 104473171 A (43)申请公布日 2015.04.01 CN 。
4、104473171 A 1/2 页 2 1.一种火麻含片, 其特征在于, 按重量份, 包括 : 火麻蛋白肽冻干粉1025份、 青香蕉抗 性淀粉 1018 份、 葡萄籽提取物 26 份、 山黄皮提取物 25 份, 甘草 35 份, 木糖醇 26 份、 麦芽糊精 58 份, - 淀粉酶 0.10.3 份, 甜菊糖苷 12.8 份、 甜橙油 0.20.8 份、 姜黄色素 0.10.3 份、 柠檬酸 0.20.5 份, 黏合剂 1.22.8 份。 2.一种制备如权利要求 1 所述的火麻含片的方法, 其特征在于, 包括以下几个步骤 : 1) 火麻蛋白肽冻干粉的制备 : a、 火麻仁分离蛋白的制备 : 称。
5、取脱脂火麻仁粕, 低温干燥, 粉碎, 过筛去除杂质, 加水至 料液比为 1 : 1020 g/mL, 匀浆, 匀浆后的物料过 400 目筛, 超声波辅助提取, 第一次恒温碱 提蛋白, 等电点沉淀, 第一次离心除去上清液 ; 再加水至固定料液比为 1 : 1020 g/mL, 均质 23 次, 均质后的物料过 600 目筛, 超声波辅助提取, 第二次恒温碱提蛋白, 等电点沉淀, 第 二次离心除去上清液, 中和, 低温干燥得到火麻仁分离蛋白 ; b、 火麻仁蛋白肽水解液的制备 : 将火麻仁分离蛋白加入去离子水, 调节 pH 值, 加入混 合蛋白酶, 恒温酶解, 沸水浴灭酶, 离心取上清液 ; c、。
6、 火麻蛋白肽冻干粉的制备 : 将火麻仁蛋白水解液用纳滤膜过滤脱盐, 二级超滤收集 组分, 将收集所得火麻仁蛋白 ACE 抑制肽进行冷冻干燥, 即制得高纯度火麻蛋白肽冻干粉 ; 2) 青青香蕉抗性淀粉的制备 : 将青香蕉清洗、 去皮, 切片, 浸泡, 灭酶, 护色, 低温干燥, 再将干燥后的香蕉片进行超微 粉碎, 水酶法提取, 获得青青香蕉抗性淀粉 ; 3) 葡萄籽及山黄皮提取物的制备 : 葡萄籽清洗、 山黄皮清洗去核, 烘干, 中药粉碎机粉碎, 过 200 目筛, 超微粉碎机粉碎, 过 600 目筛, 加入去离子水至料液比 1:1220 g/mL, 调整 pH 至 3.54.5, 5060恒温。
7、水浴 下进行超声波辅助提取, 离心取上清液, 冷冻干燥 ; 4) 含片的制备 : 制湿粒、 干燥 : 将步骤 1) 3) 所得原料与其他原料混合, 加入粘合剂、 润湿剂高速搅拌 制粒, 干燥, 过筛整粒后, 在干燥颗粒中加入润滑剂, 总混均匀, 压片成型。 3.如权利要求 2 所述的制备方法, 其特征在于, 所述步骤 a 及步骤 3) 中, 超声波辅助提 取采用温度 2030, 作用功率为 120200W, 占空比为 20:20s/s, 时间为 4080 min。 4.如权利要求 2 所述的制备方法, 其特征在于, 所述步骤 a 中, 碱提的条件是 : pH 为 89.5, 提取温度为 455。
8、5, 提取时间为 4080 min。 5.如权利要求2所述的制备方法, 其特征在于, 所述步骤a中, 匀浆为使用胶体磨匀浆, 温度为 2025, 胶体磨间隙为 0.11mm, 匀浆时间为 510min ; 均质温度为 5565、 均质 压力为 2530MPa。 6.如权利要求 2 所述的制备方法, 其特征在于, 所述步骤 a 中, 第一次离心转速为 50006000 r/ min, 离心时间为 1020 min ; 第二次离心转速为 70008000r/min, 离心时 间为 510 min。 7.如权利要求 2 所述的制备方法, 其特征在于, 所述步骤 b 中, 混合蛋白酶包括碱性蛋 白酶、。
9、 中性蛋白酶和木瓜蛋白酶, 所述混合质量比为 : 12:13:13。 8.如权利要求 2 所述的制备方法, 其特征在于, 所述步骤 b 中, 加酶量为 45008000U/ g, 底物质量浓度为 616%, 温度为 4555, pH 为 89.5, 酶解时间为 24h。 权 利 要 求 书 CN 104473171 A 2 2/2 页 3 9.如权利要求 2 所述的制备方法, 其特征在于, 所述步骤 c 中, 过滤脱盐条件为 : 操作 压力 0.50.8MPa, 料液浓度为 510ug/mL, pH 为 88.5, 温度为 35。 10.如权利要求 2 所述的制备方法, 其特征在于, 所述步骤。
10、 c 中, 所述二级超滤为 : 第 一级超滤采用 5KD 的膜过滤组件进行超滤, 压力 0.40.5MPa, 温度为 30, 料液浓度为 5080mg/ml, 取滤过液 ; 第二级超滤采用 1KD 的膜过滤组件进行超滤, 压力为 0.50.6MPa, 温度为 30。 权 利 要 求 书 CN 104473171 A 3 1/7 页 4 一种火麻含片及其制备方法 技术领域 0001 本发明属于火麻加工领域, 涉及一种火麻含片及其制备方法。 背景技术 0002 火麻 ( 学名 : Cannabis sativa) 又名汉麻、 线麻、 赤麻子等, 为桑科大麻属一年生 草本植物。火麻资源广泛分布在亚欧。
11、的温带和热带地区。在中国, 火麻有六千多年的种植 历史, 是一种重要的经济作物。 诗经 和 吕氏春秋 中都有记载火麻的文字, 大麻一直以 来作为重要的食物、 纤维和医药在古国使用了数千年。其茎中的纤维可做为耐用的纺织品 和特种纸质。成熟的火麻仁种子可作为优质的油脂、 纤维和蛋白原。 0003 目前, 国内对火麻仁的研究和利用主要集中在火麻仁油的提取和利用上, 通常都 是将火麻仁榨油, 渣滓用作动物饲料, 造成大量的资源浪费。火麻仁中蛋白质的含量较高, 还含有多种氨基酸, 对火麻仁进行深加工, 充分利用其营养成分, 有利于火麻产业的发展。 0004 口含片常以食用、 携带方便而为人们所青睐。而现。
12、有的功能性植物口含片加工制 作方法因主要是先浸提植物中的有效成分, 后经过滤、 浓缩得到浸膏, 再将其与填充剂混合 压片。 显然, 这些方法不仅工艺复杂, 生产效率低, 对设备及加工条件要求也都非常高, 并且 难以有效保持原料营养成分。另一方面, 原料经浸提过滤后, 大部分不溶成分被丢弃, 而这 些不溶成分也含有大量有经济价值的有效成分, 因而导致原料价值的利用率非常低, 造成 资源浪费, 也不经济, 阻碍了口含片市场的发展。 发明内容 0005 本发明克服了上述不足, 提供了一种具有具有降血糖、 提高免疫力等保健功能的 火麻含片及其制备方法。 0006 一种火麻含片, 按重量份, 包括 : 。
13、火麻蛋白肽冻干粉 10 25 份、 青香蕉抗性淀粉 10 18 份、 葡萄籽提取物 2 6 份、 山黄皮提取物 2 5 份, 甘草 3 5 份, 木糖醇 2 6 份、 麦芽糊精 5 8 份, - 淀粉酶 0.1 0.3 份, 甜菊糖苷 1 2.8 份、 甜橙油 0.2 0.8 份、 姜黄色素 0.1 0.3 份、 柠檬酸 0.2 0.5 份, 黏合剂 1.2 2.8 份。 0007 优选的, 所述黏合剂为硬脂酸镁。 0008 同时, 本发明还提供了一种制备上述火麻含片的方法, 包括以下几个步骤 : 0009 1) 火麻蛋白肽冻干粉的制备 : 0010 a、 火麻仁分离蛋白的制备 : 称取脱脂火。
14、麻仁粕, 低温干燥, 粉碎, 过筛去除杂质, 加 水至料液比为 1 : 10 20g/mL, 匀浆, 匀浆后的物料过 400 目筛, 超声波辅助提取, 第一次恒 温碱提蛋白, 等电点沉淀, 第一次离心除去上清液 ; 再加水至固定料液比为1 : 1020g/mL, 均质 2 3 次, 均质后的物料过 600 目筛, 超声波辅助提取, 第二次恒温碱提蛋白, 等电点沉 淀, 第二次离心除去上清液, 中和, 低温干燥得到火麻仁分离蛋白 ; 0011 b、 火麻仁蛋白肽水解液的制备 : 将火麻仁分离蛋白加入去离子水, 调节 pH 值, 加 入混合蛋白酶, 恒温酶解, 沸水浴灭酶, 离心取上清液 ; 说 。
15、明 书 CN 104473171 A 4 2/7 页 5 0012 c、 火麻蛋白肽冻干粉的制备 : 将火麻仁蛋白水解液用纳滤膜过滤脱盐, 二级超滤 收集组分, 所得浓缩液为分子量在1KD-5KD范围的多肽, 将收集所得火麻仁蛋白ACE抑制肽 进行冷冻干燥, 即制得高纯度火麻蛋白肽冻干粉 ; 0013 2) 青青香蕉抗性淀粉的制备 : 0014 将青香蕉清洗、 去皮, 切片, 浸泡, 灭酶, 护色, 低温干燥, 再将干燥后的香蕉片进行 超微粉碎, 水酶法提取, 获得青青香蕉抗性淀粉 ; 0015 3) 葡萄籽及山黄皮提取物的制备 : 0016 葡萄籽清洗、 山黄皮清洗去核, 烘干, 中药粉碎机。
16、粉碎, 过 200 目筛, 超微粉碎机粉 碎, 过 600 目筛, 加入去离子水至料液比 1:12 20g/mL, 调整 pH 至 3.5 4.5, 50 60 恒温水浴下进行超声波辅助提取, 离心取上清液, 冷冻干燥 ; 0017 4) 含片的制备 : 0018 制湿粒、 干燥 : 将步骤1)3)所得原料与其他原料混合, 加入粘合剂、 润湿剂高速 搅拌制粒, 干燥, 过筛整粒后, 在干燥颗粒中加入润滑剂, 总混均匀, 压片成型。 0019 优选的, 所述步骤 a 及步骤 3) 中, 超声波辅助处理采用温度 20 30, 作用功率 为 120 200W, 占空比为 20:20s/s, 时间为 。
17、40 80min。 0020 优选的, 所述步骤 a 中, 碱提的条件是 : pH 为 8 9.5, 提取温度为 45 55, 提 取时间为 40 80min。 0021 优选的, 所述步骤 a 中, 匀浆为使用胶体磨匀浆, 温度为 20 25, 胶体磨间隙为 0.1 1mm, 匀浆时间为 5 10min ; 均质温度为 55 65、 均质压力为 25 30MPa。 0022 优选的, 所述步骤 a 中, 第一次离心转速为 5000 6000r/min, 离心时间为 10 20min ; 第二次离心转速为 7000 8000r/min, 离心时间为 5 10min。 0023 优选的, 所述步。
18、骤 b 中, 混合蛋白酶包括碱性蛋白酶、 中性蛋白酶和木瓜蛋白酶, 所述混合质量比为 : 1 2:1 3:1 3。 0024 优选的, 所述步骤 b 中, 加酶量为 4500 8000U/g, 底物质量浓度为 6 16, 温 度为 45 55, pH 为 8 9.5, 酶解时间为 2 4h。 0025 优选的, 所述步骤c中, 过滤脱盐条件为 : 操作压力0.50.8MPa, 料液浓度为5 10ug/mL, pH 为 8 8.5, 温度为 35。 0026 优选的, 所述步骤 c 中, 所述二级超滤为 : 第一级超滤采用 5KD 的膜过滤组件进行 超滤, 压力 0.4 0.5MPa, 温度为 。
19、30, 料液浓度为 50 80mg/ml, 取滤过液 ; 第二级超滤 采用 1KD 的膜过滤组件进行超滤, 压力为 0.5 0.6MPa, 温度为 30。 0027 优选的, 所述步骤4)中, 黏合剂为硬脂酸镁, 润湿剂为95乙醇, 干燥温度为55 65。 0028 本发明的有益效果是 : 。 0029 1、 本含片中的火麻蛋白肽具有抗氧化、 降血脂、 降血压、 提高免疫力、 抗衰老等功 效, 同时在治疗胃肠道疾病方面也具有很好的疗效 ; 0030 2、 火麻蛋白肽成分是经特定蛋白酶定向水解, 能更好地被人体吸收 ; 0031 3、 含片中添加了青香蕉抗性淀粉成分, 替代传统淀粉作为成型剂, 。
20、可降低产品热 量, 强化其防治肠道疾病, 降低血糖、 提高免疫力等生理功效, 适宜于糖尿病人食用, 产品的 适用人群更广泛 ; 说 明 书 CN 104473171 A 5 3/7 页 6 0032 4、 青香蕉抗性淀粉原料经过超微粉碎, 由于颗粒的超微细化, 其表面积和孔隙率 显著增加, 产品的分散性、 溶解性、 功能性可得到明显的改善, 更容易被人吸收利用, 且口感 更好。 附图说明 0033 图 1 为一次性灌胃火麻含片对 SHR 大鼠血压的影响图。 0034 图 2 为连续灌胃火麻含片对 SHR 大鼠血压的影响图。 具体实施方式 0035 下面对本发明的较优的实施例作进一步的详细说明 。
21、: 0036 实施例 1 0037 含片组份 : 火麻蛋白肽冻干粉 10g、 青香蕉抗性淀粉 15g、 葡萄籽提取物 3g、 山黄皮 提取物 2g, 甘草 3g, 木糖醇 2g、 麦芽糊精 5g, - 淀粉酶 0.1g, 甜菊糖苷 2.8g、 甜橙油 0.2g、 姜黄色素 0.1g、 柠檬酸 0.2g, 硬脂酸镁 1.2g。 0038 制备方法为 : 0039 1) : 火麻蛋白肽冻干粉的制备 : 0040 a、 火麻仁分离蛋白的制备 : 称取脱脂火麻仁粕, 低温干燥, 粉碎, 过筛去除杂质, 加 水至料液比为 1 : 12g/mL, 用胶体磨匀浆, 匀浆温度为 25, 胶体磨间隙为 0.1m。
22、m, 匀浆时间 为 5min, 匀浆后的物料过 400 目筛, 超声波辅助提取, 温度为 25, 作用功率为 200W, 占空 比为 20:20s/s, 时间为 60min ; 调 pH 为 8.5, 水浴温度为 45, 第一次恒温碱提蛋白, 等电 点沉淀, 提取时间为 60min ; 第一次离心除去上清液, 离心转速为 5000r/min, 离心时间为 20min ; 再加水至固定料液比为 1 : 12g/mL, 用均质机均质 3 次, 均质温度为 65、 均质压力 为 25MPa, 均质后的物料过 600 目筛, 超声波辅助提取, 第二次恒温碱提蛋白, 等电点沉淀, 第二次离心除去上清液,。
23、 离心转速为 8000r/min, 离心时间为 10min, 中和, 低温干燥得到火 麻仁分离蛋白 ; 0041 b、 火麻仁蛋白肽水解液的制备 : 将火麻仁分离蛋白加入去离子水, 调节 pH 值为 8, 加入由碱性蛋白酶、 中性蛋白酶和木瓜蛋白酶按质量比为 1:1:1 组成的混合蛋白酶, 加酶 量为 7000U/g, 底物质量浓度为 12, 在温度为 50, pH 为 9 条件下恒温酶解 4h, 沸水浴灭 酶, 离心取上清液 ; 0042 c、 火麻蛋白肽冻干粉的制备:将火麻仁蛋白水解液用NF400纳滤膜在操作压力为 0.5MPa, 料液浓度为 5ug/mL, pH 为 8、 温度为 35的。
24、条件下过滤脱盐, 脱盐后的水解液进行 二级超滤, 第一级超滤采用 5KD 的膜过滤组件进行超滤, 压力 0.5MPa, 温度为 30, 料液浓 度为 50mg/ml, 取滤过液进行第二级超滤, 第二级超滤采用 1KD 的膜过滤组件进行超滤, 压 力为 0.6MPa 温度为 30, 取浓缩液, 浓缩液为分子量在 1KD-5KD 范围的多肽, 真空冷冻干 燥, 即为纯化火麻蛋白 ACE 抑制肽 ; 0043 2) 青青香蕉抗性淀粉的制备 : 0044 将青香蕉清洗、 去皮, 切片, 浸泡, 灭酶, 护色, 低温干燥, 再将干燥后的香蕉片进 行超微粉碎, 将青香蕉全粉加入去离子水, 物料比为 1:1。
25、2, 调 pH 值至 4.2, 加入果胶酶和 - 淀粉酶, 50水浴, 磁力搅拌 1h, 水酶法提取, 离心去上清, 沉淀在 50低温干燥, 获得 说 明 书 CN 104473171 A 6 4/7 页 7 青青香蕉抗性淀粉 ; 0045 3) 葡萄籽及山黄皮提取物的制备 : 0046 葡萄籽清洗、 山黄皮清洗去核, 烘干, 中药粉碎机粉碎, 过 200 目筛, 超微粉碎机粉 碎, 过 600 目筛, 加入去离子水至料液比 1:12g/mL, 调整 pH 至 4.5, 50恒温水浴下进行超 声波辅助提取, 离心取上清液, 冷冻干燥 ; 0047 4) 含片的制备 : 0048 制湿粒、 干燥。
26、 : 将步骤1)3)所得原料与其他原料混合, 加入粘合剂硬脂酸镁、 润 湿剂 95乙醇高速搅拌制粒, 55干燥, 过筛整粒后, 在干燥颗粒中加入润滑剂, 总混均匀, 压片成型。 0049 实施例 2 0050 含片组份 : 火麻蛋白肽冻干粉 25g、 青香蕉抗性淀粉 10g、 葡萄籽提取物 2g、 山黄皮 提取物 5g, 甘草 5g, 木糖醇 6g、 麦芽糊精 8g, - 淀粉酶 0.3g, 甜菊糖苷 2.8g、 甜橙油 0.8g、 姜黄色素 0.3g、 柠檬酸 0.5g, 硬脂酸镁 2.8g。 0051 制备方法为 : 0052 1) : 火麻蛋白肽冻干粉的制备 : 0053 a、 火麻仁分。
27、离蛋白的制备 : 称取脱脂火麻仁粕, 低温干燥, 粉碎, 过筛去除杂质, 加水至料液比为 1 : 20g/mL, 用胶体磨匀浆, 匀浆温度为 20, 胶体磨间隙为 1mm, 匀浆时间 为 10min, 匀浆后的物料过 400 目筛, 超声波辅助提取, 温度为 30, 作用功率为 150W, 占 空比为 20:20s/s, 时间为 40min ; 调 pH 为 9.5, 水浴温度为 50, 第一次恒温碱提蛋白, 等 电点沉淀, 提取时间为 80min ; 第一次离心除去上清液, 离心转速为 6000r/min, 离心时间为 10min ; 再加水至固定料液比为 1 : 20g/mL, 用均质机均。
28、质 2 次, 均质温度为 65、 均质压力 为 30MPa, 均质后的物料过 600 目筛, 超声波辅助提取, 第二次恒温碱提蛋白, 等电点沉淀, 第二次离心除去上清液, 离心转速为 7000r/min, 离心时间为 10min, 中和, 低温干燥得到火 麻仁分离蛋白 ; 0054 b、 火麻仁蛋白肽水解液的制备 : 将火麻仁分离蛋白加入去离子水, 调节 pH 值为 9.5, 加入由碱性蛋白酶、 中性蛋白酶和木瓜蛋白酶按质量比为 2:3:3 组成的混合蛋白酶, 加酶量为 8000U/g, 底物质量浓度为 10, 在温度为 45, pH 为 9.5 条件下恒温酶解 4h, 沸 水浴灭酶, 离心取。
29、上清液 ; 0055 c、 火麻蛋白肽冻干粉的制备:将火麻仁蛋白水解液用NF400纳滤膜在操作压力为 0.8MPa, 料液浓度为10ug/mL, pH为8.5、 温度为35的条件下过滤脱盐, 脱盐后的水解液进 行二级超滤, 第一级超滤采用 5KD 的膜过滤组件进行超滤, 压力 0.5MPa, 温度为 30, 料液 浓度为 80mg/ml, 取滤过液进行第二级超滤, 第二级超滤采用 1KD 的膜过滤组件进行超滤, 压力为0.6MPa温度为30, 取浓缩液, 浓缩液为分子量在1KD-5KD范围的多肽, 真空冷冻干 燥, 即为纯化火麻蛋白 ACE 抑制肽 ; 0056 2) 青青香蕉抗性淀粉的制备 。
30、: 0057 将青香蕉清洗、 去皮, 切片, 浸泡, 灭酶, 护色, 低温干燥, 再将干燥后的香蕉片进 行超微粉碎, 将青香蕉全粉加入去离子水, 物料比为 1:12, 调 pH 值至 4.2, 加入果胶酶和 - 淀粉酶 ,50水浴, 磁力搅拌 1h, 水酶法提取, 离心去上清, 沉淀在 50低温干燥, 获得 青青香蕉抗性淀粉 ; 说 明 书 CN 104473171 A 7 5/7 页 8 0058 3) 葡萄籽及山黄皮提取物的制备 : 0059 葡萄籽清洗、 山黄皮清洗去核, 烘干, 中药粉碎机粉碎, 过 200 目筛, 超微粉碎机粉 碎, 过 600 目筛, 加入去离子水至料液比 1:10。
31、g/mL, 调整 pH 至 3.5, 50恒温水浴下进行超 声波辅助提取, 离心取上清液, 冷冻干燥 ; 0060 4) 含片的制备 : 0061 制湿粒、 干燥 : 将步骤1)3)所得原料与其他原料混合, 加入粘合剂硬脂酸镁、 润 湿剂 95乙醇高速搅拌制粒, 55干燥, 过筛整粒后, 在干燥颗粒中加入润滑剂, 总混均匀, 压片成型。 0062 实施例 3 0063 含片组份 : 火麻蛋白肽冻干粉 15g、 青香蕉抗性淀粉 15g、 葡萄籽提取物 4g、 山黄皮 提取物 4g, 甘草 3g, 木糖醇 3g、 麦芽糊精 5g, - 淀粉酶 0.2g, 甜菊糖苷 2g、 甜橙油 0.5g、 姜 。
32、黄色素 0.2g、 柠檬酸 0.2g, 硬脂酸镁 2g。 0064 制备方法 : 同实施例 1。 0065 实施例 4 0066 一、 含片基本性能测定 0067 以原料未添加火麻蛋白肽冻干粉、 青香蕉抗性淀粉及葡萄籽和山黄皮提取物的含 片作为对照组 1, 以原料未添加火麻蛋白肽冻干粉作为对照组 2 ; 组 3 5 为本发明配方实 施例 1 3 制备的火麻含片, 测定对照组 1、 2 及组 3 5 的体外 ACE 抑制能力和抗氧化能 力。 0068 (1) 测定本发明体外 ACE 抑制能力 0069 将上述对照和实例组的含片重新粉碎后分别配成浓度为 0.1mg/mL 的液体, 取 10l 溶液。
33、样品和 40l HHL 溶液, 于 37保温 6min, 加入 20l ACE, 37下反应 30min 后, 加入 85l 1mol/L 的 HCl 溶液终止反应, 至室温, 过 0.22m 的滤膜, 取 5l 反应产物 进样, 通过 HPLC 洗脱图谱定量马尿酸生成量, 以马尿酸的生成量来判断样品对 ACE 活性的 抑制作用, 同时做空白对照。 0070 0071 色谱条件为 : 色谱柱 : C18 分析用色谱柱 (4.6mm150mm, 5mm) ; 流速 : 1.0ml/min ; 检测波长 : 228nm ; 进样量 : 5ml ; 柱温 : 30; 流动相 : 12乙腈 ( 含 0。
34、.5乙酸 )。不同配方 饮料样品的 ACE 抑制率结果如表 1 所示 : 0072 表 1 不同配方含片样品的 ACE 抑制率结果 0073 组别对照 1对照 2实施例 1实施例 2实施例 3 抑制率 ( )未检出2.330.0260.320.3161.280.4467.280.34 0074 (2) 测定本发明体外抗氧化功能 0075 分别用对照组 1、 2 和实施例 1、 2、 3 所制得的含片进行如下实验。 0076 DPPH 自由基 说 明 书 CN 104473171 A 8 6/7 页 9 0077 将上述对照和实例组的含片重新粉碎后分别配成浓度为 0.1mg/mL 的液体, 分别。
35、 取 2mL 对照组 1、 2 和实例 1、 2、 3 中的样液于具塞试管中, 加入 210-4mol/L 的 DPPH 溶液 2mL, 摇匀, 30min 后, 在 515nm 处测定其吸光度值 Ai ; 同时测定 2mLDPPH 溶液与 2mL70乙 醇混合后的吸光度值 Ac和 2mL 待测液与 2mL70乙醇混合后的吸光度值 Aj, 均以 70乙醇 作参比。根据如下公式计算清除率。 0078 清除率 ( ) 1-(Ai-Aj)/Ac100 0079 式中 Ac: DPPH 与溶剂混合液的吸光值 ; A i: DPPH 与样液反应后的吸光值 ; Aj: 样液 与溶剂混合液的吸光值。以抗坏血。
36、酸 (Vc) 作阳性对照。 0080 实施例 1 3 所制得饮料的功能活性检测结果如表 2 所示 0081 表 2 不同配方含片样品的 DPPH 自由基清除结果 0082 组别对照 1对照 2实施例 1实施例 2实施例 3 清除率 ( )4.020.823.330.48 77.110.168.280.7272.130.34 0083 OH清除率 0084 在具塞试管中依次加入 9mmol/L FeSO4溶液 2mL、 9mmol/L 水杨酸 - 乙醇溶液 2mL、 分别将实例 1、 2、 3 中的样液 2mL 和 8.8mmol/L H2O22mL, 摇匀, 于 37水浴中反应 30min, 。
37、在 510nm 下测定吸光度值 AX。并按相同方法, 测定不加样液的溶液的吸光度 A0, 不加 H2O2溶液 的吸光度 AX0, 均以蒸馏水为参比。清除率计算公式 : 0085 清除率 ( ) A0-(AX-AX0)/A0100 0086 式中 : A0: 空白对照液的吸光度 ; A X: 加入样液后的吸光度 ; AX0: 不加 H2O2样液的吸 光度。以抗坏血酸 (Vc) 作阳性对照。 0087 对照组 1、 2 和实施例 1 3 所制得饮料的功能活性检测结果如表 3 所示 0088 表 3 不同配方含片样品的 OH清除效果 0089 组别对照 1对照 2实施例 1实施例 2实施例 3 清除。
38、率 ( )未检出26.470.763.200.257.200.260.100.4 0090 结果如表1-3所示, 采用体外模拟消化试验证明, 本发明具有良好的体外ACE抑制 效果和抗氧化效果。 0091 二、 含片体内降血压功能实验 0092 采用原发性高血压模型大鼠(Spontaneously Hypertensive Rats, SHR)为实验动 物, 25 只, 雄性, 8 10 周龄, 体重 200g 左右, 收缩压 180mmHg, 将 SHR 大鼠随机分为五组, 每笼 5 只喂养, 自由采食引水, 环境温度 (251), 相对湿度 (555), SHR 大鼠适应环 境 7d 后, 。
39、开始实验。 0093 一次性灌胃含片对大鼠血压的影响 0094 一次性灌胃给予 SHR 大鼠火麻水解蛋白肽复合含片, 大鼠适应环境后, 将五组的 SHR大鼠分别对应定为空白对照组、 阳性对照组、 低剂量组、 中剂量组和高剂量组。 火麻蛋白 说 明 书 CN 104473171 A 9 7/7 页 10 肽含片重新粉碎为适合灌胃的粉末, 其低、 中、 高剂量分别为 50、 100、 500mg/kgbw, 经灌胃 给予 SHR 大鼠, 空白对照组灌胃给予相应剂量的蒸馏水, 阳性对照组灌胃给予 5mg/kgbw 卡托普利。测定灌胃后 0、 2、 4、 6、 8h 时 SHR 大鼠的血压。大鼠血压测。
40、定方法采用尾动脉脉 搏间接测定法测定清醒大鼠的血压和心率。 0095 一次性灌胃火麻水解蛋白肽复合含片对 SHR 大鼠血压的影响从图 1 可以看出, 与 空白对照组相比, 阳性对照组与火麻水解蛋白肽复合含片不同剂量浓度组的 SHR 大鼠的血 压在灌胃后均有明显下降, 在灌胃后 2h 血压下降值达到最大, 然后缓慢回升。由图 1 可见, 各组与空白组相比, 血压下降幅度基本相同, 但在回升过程中, 明显呈现含片灌胃剂量越 大, 回升速度越慢, 且火麻水解蛋白肽复合含片高剂量组与阳性对照组的回升幅度基本相 同。实验结果表明, 通过灌胃摄入火麻水解蛋白肽复合含片中、 高剂量组, 与空白对照组相 比,。
41、 血压水平下降显著 (P0.05)。 0096 连续灌胃含片对大鼠血压的影响 0097 连续灌胃给予 SHR 大鼠火麻蛋白肽复合含片, 采用连续 20d 定时灌胃给予四组的 SHR 大鼠蒸馏水和固定剂量 (100mg/kg bw) 的火麻蛋白肽含片粉末, 每天测定灌胃后 0h 和 2h时SHR大鼠的血压。 大鼠血压测定方法采用尾动脉脉搏间接测定法测定清醒大鼠的血压 和心率。 0098 目前, 高血压患者大都是依靠长期服用药物来控制血压水平, 这样不可避免会产 生一些副作用, 因此, 寻找更安全可靠的降压方法也是防治高血压研究中的一个重点。 我们 在一次性灌胃的基础上, 对 SHR 大鼠进行连续。
42、灌胃, 以考察火麻蛋白肽含片在长期服用过 程中的降压效果及平稳性。 0099 从图 2 可以看出, 与空白对照组相比较, 火麻蛋白肽含片组的 SHR 大鼠在灌胃 2h 后, 血压水平有明显的下降, 血压下降幅度在 60mmHg 左右, 并且在连续灌胃 10d 后, 火麻蛋 白肽含片组的 SHR 大鼠血压开始缓慢下降, 与空白对照组的差值也越来越明显, 血压下降 幅度从 0mmHg 增加到 40mmHg 左右。这说明火麻蛋白肽含片不仅可以降血压, 而且可以通过 长期服用平稳地控制血压水平。 0100 以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明, 不能认定 本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说, 在 不脱离本发明构思的前提下, 还可以做出若干简单推演或替换, 都应当视为属于本发明的 保护范围。 说 明 书 CN 104473171 A 10 1/1 页 11 图 1 图 2 说 明 书 附 图 CN 104473171 A 11 。