《一种雨生红球藻提取物的制备方法.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《一种雨生红球藻提取物的制备方法.pdf（9页珍藏版）》请在专利查询网上搜索。
1、10申请公布号CN101991612A43申请公布日20110330CN101991612ACN101991612A21申请号201010548303922申请日20101116A61K36/05200601A23L1/30200601A61P9/00200601A61P17/16200601A61P25/00200601A61P27/02200601A61P35/00200601A61P37/04200601A61P39/0620060171申请人云南绿A生物工程有限公司地址650106云南省昆明市高新技术开发区海源中路930号72发明人龙祥鸭乔胡志祥王朝军万庆家杜伟春张秋玲74专利代理机构。
2、北京泛华伟业知识产权代理有限公司11280代理人刘丹妮54发明名称一种雨生红球藻提取物的制备方法57摘要本发明提供一种雨生红球藻提取物的制备方法及其测定方法、用途。本发明提供的雨生红球藻提取物的制备方法是以CO2为萃取介质的超临界流体萃取方法，按照上述方法制备的雨生红球藻提取物中，虾青素的含量可达到220W/W。本发明提供的方法具有操作简单、能耗低、质量可控、提取物除含功效成分虾青素之外还含有人体必需的多种营养成分等特点，可生产出高品质雨生红球藻提取物，满足药品、保健食品、普通食品生产所需原料要求。51INTCL19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书6页附图1页C。
3、N101991614A1/1页21一种雨生红球藻提取物的制备方法，所述方法为以CO2为萃取介质的超临界流体萃取方法，具体的萃取条件如下温度为6080，压力为3545MPA，CO2流速为1525L/H，时间为24小时。2根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括在以下条件下分离雨生红球藻提取物的步骤温度为6080，压力为3545MPA。3根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述方法还包括在进行萃取前将雨生红球藻破壁的步骤。4根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述方法采用高压均质机对雨生红球藻进行破壁处理；优选地，所述处理压力为第一次3040MPA，第二次8090MPA。5权利。
4、要求1至4中任一项所述方法制备的雨生红球藻提取物，其特征在于，所述雨生红球藻提取物中虾青素的含量为220W/W，优选为315W/W，更优选为510W/W。6权利要求5所述雨生红球藻提取物在制备用于抗氧化、增强免疫功能、抑制肿瘤发生、预防心血管疾病、防止皮肤衰老、维护眼睛和中枢神经系统健康的药物或保健品中的用途。权利要求书CN101991612ACN101991614A1/6页3一种雨生红球藻提取物的制备方法技术领域0001本发明涉及雨生红球藻提取物的制备方法，具体涉及采用超临界流体萃取方法制备雨生红球藻提取物。背景技术0002雨生红球藻HAEMATOCOCCUS是一种单细胞绿藻，在逆境条件下可。
5、积累大量的虾青素，被公认为自然界天然虾青素的主要来源。采用超临界流体CO2技术的雨生红球藻提取物除富含有天然抗氧化剂虾青素外，还含有维生素B1、B2、B6、B12、单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸等人体必需的营养成分。0003虾青素ASTAXANTHIN是一种红色的天然类胡萝卜素，具有清除氧自由基的强大能力，其抗氧化活性是维生素的550倍、类胡萝卜素的10倍，被誉为“超级抗氧化剂”1、NAKAGAWAK，KANGS，PARKD，ETALINHIBITIONBYBETACAROTENEANDASTAXANTHINOFNADPHDEPENDENTMICROSOMALPHOSPHOLIPIDPEROX。
6、IDATIONJNUTRITSCIVITAMIN，1997，43，3345；2、NAGUIBYMAANTIOXIDANTACTIVITIESOFASTAXANTHINANDRELATEDCAROTENOIDSJAGRICFOODCHEM，2000，48，1150，对人体绝对安全1、NISHIKAWAY，MINENAKAY，ICHIMURAMPHYSIOLOGICALANDBIOCHEMICALEFFECTSOFCAROTENOIDBETACAROTENEANDASTAXANTHINONRATJKASHIENDAIGKUKIYA，1997，2519；2、AQUASEARCHINCTECHNICA。
7、LREPORTTR3005001HAEMATOCOCCUSPLUVIALISANDASTAXANTHINSAFETYFORHUMANCONSUMPTION，1999。动物和临床试验研究证明，虾青素有增强免疫功能、抑制肿瘤发生、预防心血管疾病、防止皮肤衰老、维护眼睛及中枢神经系统健康等多种生物功能TANAKAT，MORISHITAY，SUZUIM，ETALCHEMOPREVENTIONOFMOUSEURINARYBLADDERCARCINOGENESISGYNATURALLYOCCURRINGCAROTENIODASTAXANTHINJCARCINGENESIS，1994，1511519；JYO。
8、NOUCHI，ETAL2000。0004维生素B1能促进血液循环、辅助盐酸制造、血流形成及糖类代谢；有助于人体感知，并使脑功能发挥最佳状态；对能量代谢、生长、食欲、学习能力均起着积极的作用；帮助人体抵抗衰老及烟酒对人体的不利影响。维生素B2是红细胞形成、抗体制造及细胞呼吸作用及生长必须的。维生素B6有利于盐酸合成及脂肪、蛋白质的吸收，协助维持体内钠钾平衡，促进红细胞的形成；另外还有利于解决体内水分滞留带来的不便，帮助脑和免疫系统发挥正常的生理机能；控制细胞增长和分裂的DNA、RNA等遗传物质的合成也离不开B6。B6还可以活化体内的许多种酶，并有助于B12的吸收。维生素B12是抗贫血所需的，它可。
9、协助叶酸调节红细胞的生成并有利于铁的利用；而且消化机能的正常，食物的消化和蛋白质的合成，脂肪和糖类的代谢均需要维生素B12。此外B12还有助于防止神经损伤，维持生育能力，促进正常的生长发育及防止神经脱髓鞘的作用。0005单不饱和脂肪酸具有降血糖作用施万英，徐甲芬，蔺淑贤单不饱和脂肪酸肠内营养制剂CLUCEMA用于2型糖尿病J中国临床营养杂志，2004，1213942；调节血脂作用王军波，肖颖，梁学军，等膳食脂质对中老年胆固醇血症患者血清胆固醇的影说明书CN101991612ACN101991614A2/6页4响J卫生研究，2000，293及降低胆固醇作用等。多不饱和脂肪酸对动脉血栓形成和血小板。
10、功能有明显影响，防止血栓形成钟耀光功能食品M北京化学工业出版社，2004，8121128。大量实验表明，多不饱和脂肪酸具有较好的抗癌作用，其能通过降低胆固醇水平，抑制癌细胞生长；并参与细胞基因表达调控，提高机体免疫能力，减少肿瘤坏死因子；多不饱和脂肪酸还能大大增加细胞膜的流动性，有利于细胞代谢和修复，阻止肿瘤细胞的异常增生1、钟耀光功能食品M北京化学工业出版社，2004，81211282、刘冀红，曹伟新3多不饱和脂肪酸在肿瘤防治中的意义J肠外与肠内营养，2004，1115456。0006由此可见，雨生红球藻提取物中含有大量对人体有益和人体必需的功能成分，其用于药品、保健品原料，应用前景十分广阔。
11、。0007文献报道的红球藻提取方法有溶剂法、超临界法、微波法、超声法等，而微波法、超声法很少用于规模生产。由于虾青素油是雨生红球藻中主要的功效性成分，具有较强抗氧化性，对光、热、氧、湿敏感不稳定，因此采用通常溶剂的提取油工艺极易造成氧化变质，若改成低温浸出法，化学试剂耗用量较大，油中类脂物及伴随物多给精炼带来困难且有溶剂残留。0008因此，还有必要开发新的制备雨生红球藻提取物的方法。发明内容0009本发明的目的是提供一种雨生红球藻提取物的制备方法。0010本发明的另一个目的是提供上述方法所制备的雨生红球藻提取物。0011本发明的目的是采用以下技术方案来实现的。0012一方面，本发明提供一种雨生。
12、红球藻提取物的制备方法，所述方法为以CO2为萃取介质的超临界流体萃取方法，具体的萃取条件如下温度为6080，压力为3545MPA，CO2流速为1525L/H，时间为24小时。0013优选地，所述方法还包括在以下条件下分离雨生红球藻提取物的步骤温度为6080，压力为3545MPA。0014优选地，所述方法还包括在进行萃取前将雨生红球藻破壁的步骤。0015优选地，所述方法采用高压均质机对雨生红球藻进行破壁处理；优选地，所述处理压力为第一次3040MPA，第二次8090MPA。0016另一方面，本发明提供上述方法制备的雨生红球藻提取物，所述雨生红球藻提取物中虾青素的含量为220W/W，优选为315W。
13、/W，更优选为510W/W。0017此外，本发明还提供了上述雨生红球藻提取物在制备用于抗氧化、增强免疫功能、抑制肿瘤发生、预防心血管疾病、防止皮肤衰老、维护眼睛和中枢神经系统健康的药物或保健品中的用途。0018由此可见，本发明提供了一种采用超临界流体CO2制备雨生红球藻提取物的方法，将已破壁雨生红球藻粉装入CO2超临界萃取设备萃取釜中，设置萃取釜和分离釜温度和压力，开启设备，开通CO2气罐，同时给萃取釜加温加压，当温度达到萃取温度6080，压力达到萃取压力3545MPA时，保温保压，同时控制CO2流速1525L/H，萃取24小时后，在相同条件下从分离釜出口阀接收雨生红球藻提取物。说明书CN10。
14、1991612ACN101991614A3/6页50019本发明将采用超临界流体CO2制备的雨生红球藻提取物，其中含有的活性成分虾青素含量较高。并且所提供的制备工艺便于操作，成本低，便于推广应用。0020与现有工艺技术比较，本发明具有以下突出优点和效果0021超临界流体CO2法提取天然虾青素油具有操作简单、能耗低、质量可控、保护易氧化物质等特点，适用于药品、保健食品及食品生产原料加工，可有效避免将藻粉中重金属、微生物带入到提取物中，提取物不存在溶剂残留问题，可生产出高品质雨生红球藻提取物，满足药品、保健食品研发生产需求。本发明采用的技术可使虾青素的收率达到90以上，同时还可提取到维生素B1、B。
15、2、B6、B12、单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸等人体必需的营养成分，满足药品、保健食品、普通食品生产所需原料要求。附图说明0022图1为本发明实施例1中考察的萃取温度对虾青素转移率影响的曲线图。0023图2为本发明实施例1中考察的萃取压力对虾青素转移率影响的曲线图。具体实施方式0024以下参照具体的实施例来说明本发明。本领域技术人员能够理解，这些实施例仅用于说明本发明，其不以任何方式限制本发明的范围。0025以下各实施例中，虾青素含量的测定方法采用丙酮对样品中游离虾青素及虾青素酯进行提取，提取液以丙酮作为空白对照，通过吸光度值计算总类胡萝卜素及虾青素含量，具体操作如下00261样品溶液的配制。
16、取待测样品约20MG，精密称定。置于25ML容量瓶中，加少量丙酮轻轻振摇使溶解，加丙酮定容至刻度，摇匀。精密吸取1ML至50ML容量瓶中，用丙酮定容至刻度，摇匀即得。00272以丙酮溶液作空白，用分光光度计GBCUV/VIS916可见紫外分光光度计，生产厂商澳大利亚GBC公司，于474NM处读取样品溶液吸光度，按下式其中210为吸光系数，92为虾青素比例系数计算类胡萝卜素和虾青素含量0028002900300031实施例1红球藻提取物的制备工艺0032本实施例对超临界流体萃取方法制备雨生红球藻提取物的制备工艺进行了优化，具体包括以下操作步骤说明书CN101991612ACN101991614A。
17、4/6页600331雨生红球藻的破壁0034A、破壁设备0035采用高压均质机进行破壁处理。0036B、根据现有高压均质机处理能力及处理效果，一次藻泥最大处理量为400500KG相当于3000M2培养系统一次培养所采收的全部藻泥量。0037C、控制参数如表1所示。0038表1红球藻红色孢子破壁工艺控制参数00390040D、红球藻孢子破壁过程除满足以上控制参数要求外，须严格控制物料损耗，具体措施为00411保证高压均质机的设备性能状态；00422因设备原因随冷却水排水管中排除的藻泥溶液用藻泥桶等容器收集后可经过静置去除上清液合并至物料中再次进入破壁环节过程；00433加料及更换接料桶时避免滴、。
18、漏等情况。00442超临界流体萃取方法中工艺条件的优化0045将已破壁的雨生红球藻粉500G装入超临界萃取设备HA1215002型萃取装置，江苏华安科研仪器有限公司的萃取釜中，设置萃取釜和分离釜温度和压力，开启设备，开通CO2气罐，同时给萃取釜加温加压，当温度达到萃取温度，压力达到萃取压力时，保温保压，同时控制CO2流速1525L/H，萃取24小时。0046A、温度的影响0047考虑到虾青素在高温下90会影响其活性，而温度过低又不利于萃取，故采用40、45、50、55、60、65、70、75、80、90十个水平开展温度工艺优化考察，在其他条件不变的情况下压力45MPA，CO2流量20L/H，萃。
19、取时间24小时，以虾青素转移率即雨生红球藻粉中所含虾青素转移到提取物中的比例为考察指标，结果见表2。0048表2温度对虾青素转移率影响研究结果说明书CN101991612ACN101991614A5/6页70049编号温度虾青素转移率14015124515235015745521356073166575477077987582798072310902240050按照表2中的结果作出温度对虾青素转移率影响曲线图，具体如图1所示。从图1可知，在其他条件不变情况下，温度低于55时，随温度升高，虾青素转移率变化不明显；温度在6075时，随温度升高虾青素转移率升高明显，温度高于80，转移率明显下降。因此。
20、，最佳萃取温度为6080。0051B、压力的影响0052虾青素属于色素，结构式中含有两个羟基，在CO2中溶解度较低，需要较高的操作压力。但压力升高，对设备要求也会提高，成本也会随之上升。在其他条件不变情况下温度70，CO2流量20L/H，萃取时间24小时，选取20、30、35、40、45、50MPA共6个水平，开展压力对虾青素转移率影响试验，结果见表3。0053表3压力对虾青素转移率影响研究结果0054编号压力MPA虾青素转移率1200230183335524440615说明书CN101991612ACN101991614A6/6页854573165076200550056按照表3中的结果作出。
21、压力对虾青素转移率影响曲线图，具体如图2所示。从图2可知，在其他条件不变的情况下，虾青素转移率随压力升高而增大，压力低于20MPA时无法提取虾青素，压力升至35MPA时虾青素转移率升高明显，至45MPA时趋于平缓。因此，最佳萃取压力应在3545MPA。00573雨生红球藻的优选制备例0058将破壁的雨生红球藻粉500G装入超临界萃取设备HA1215002型萃取装置，江苏华安科研仪器有限公司的萃取釜中，设置萃取釜和分离釜温度和压力，开启设备，开通CO2气罐，同时给萃取釜加温加压，当温度达到萃取温度70，压力达到萃取压力45MPA时，保温保压，同时控制CO2流速1525L/H，萃取24小时后，从分离釜50，9MPA出口阀接收雨生红球藻提取物共125G。经测定，该雨生红球藻提取物中虾青素的质量百分含量为966。说明书CN101991612ACN101991614A1/1页9图1图2说明书附图CN101991612A。