一种从荠菜中提取金黄色葡萄球菌抑制物的方法.pdf

本发明公开了一种从荠菜中提取金黄色葡萄球菌抑制物的方法，以95%的乙醇为提取剂，采用超声波辅助提取，提取液中HCl浓度为5%-6%，料液比为1:9-1:11，提取时间为50-70分钟，提取液浓缩、干燥后即得。本发明提取物浓度在20-25mg/mL时对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径达34-35mm，比普通方法得到的荠菜提取物抑制金黄色葡萄球菌圈直径大20%-30%，抑菌效果十分突出。本发明方法简单、成本低、实用性强，得到的荠菜提取物在医药和保健食品方面具有较好的应用前景。

权利要求书
1.  一种从荠菜中提取金黄色葡萄球菌抑制物的方法，其特征在于：以95%的乙醇为提取剂，采用超声波辅助提取，提取液中HCl浓度为5%-6%，料液比为1:9-1:11，提取时间为50-70分钟，提取液浓缩、干燥后即得。

2.  根据权利要求1所述方法得到的荠菜提取物，其特征在于：提取物浓度在20-25mg/mL时对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径达34-35 mm。

说明书一种从荠菜中提取金黄色葡萄球菌抑制物的方法
技术领域
本发明涉及一种从荠菜中提取金黄色葡萄球菌抑制物的方法。
背景技术
荠菜为十字花科一年或两年生自花授粉植物，又称地菜，广布南半球温带和亚热带地区，我国各地均有分布。春食荠菜是我国民间由来已久的传统习俗，有“到了三月三，地菜可以当灵丹”之说，用荠菜做羹，味道甚好，既可增加食欲，又能开胃而增寿，故又称“百岁羹”。传统中医认为荠菜性味甘平无毒，具有益脾明目，祛风解热，止血和胃的功效，可用于痢疾、水肿、吐血、便血、淋病、乳糜尿、月经过多、目赤疼痛等多种疾病的防治。
研究表明，荠菜提取物对小鼠实体瘤有抑制作用，荠菜含麦角克碱，有类似麦角碱的作用，水煎液对炎症早期渗出具有一定的抑制作用，荠菜粗多糖对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌都有一定的抑制效果。可见荠菜中多种物质可能都存在抑菌效果，也可能存在多种物质协同抑制效应。
金黄色葡萄球菌是人类的一种重要病原菌，隶属于葡萄球菌属，有“嗜肉菌"的别称，可引起许多严重感染。因此，从荠菜中提取金黄色葡萄球菌抑制物可以广泛应用于药品和保健食品领域，具有重要意义。然而，如何使荠菜提取物具有最佳抑制金黄色葡萄球菌的效果，却是一直没有解决的技术难题。
发明内容
为得到抑制金黄色葡萄球菌最佳效果的荠菜提取物并尽可能降低成本，使之具备产业化实施的条件，本发明人经过大量试验，采用响应面曲线法并通过建立模型的方式，终于发明出一种从荠菜中提取金黄色葡萄球菌抑制物的方法，该方法简单、可行性强，得到的荠菜提取物浓度在20-25mg/mL时抑制金黄色葡萄球菌效果好，对金黄色葡萄球菌的抑菌圈达34-35mm。
为获得抑制金黄色葡萄球菌最佳效果的荠菜提取物，本发明采用超声波辅助提取荠菜抑菌物质，在单因素优化得出乙醇为最佳提取剂的基础上，通过Minnimum Run Equireplicated Res IV实验设计筛选提取工艺参数中具有显著性影响的参数为HCl浓度、料液比和提取时间，进而通过最陡爬坡实验确定响应面法优化实验的中心点，根据Box-Behnken的中心组合实验设计原理，设计四因素三水平实验，建立了三元二次回归方程，经对模型的验证，该模型能较好预测荠菜提取物抑菌效果。
通过模型预测和大量试验验证，本发明最终获得的从荠菜中提取金黄色葡萄球菌抑制物的技术方案为：以95%乙醇为提取剂，采用超声波辅助提取，提取液中HCl浓度为5%-6%，料液比为1:9-1:11，提取时间为50-70分钟，提取液浓缩、干燥后即得。
将上述方法得到的荠菜提取物溶解，采用牛津杯法考察抑制金黄色葡萄球菌效果，以提取试剂溶液为空白对照，平行实验三次，将平板置于28℃下培养24-48h后，观察并测量透明圈的直径。
本发明提取物浓度在20-25mg/mL时对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径达34-35 mm，比普通方法得到的荠菜提取物抑制金黄色葡萄球菌圈直径大20%-30%，抑菌效果十分突出。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
通过建立模型和大量试验，终于发明了一种从荠菜中提取金黄色葡萄球菌抑制物的方法，有力推动了科技进步，该方法制备的荠菜提取物抑菌效果十分突出，提取物浓度在20-25mg/mL时其抑菌圈直径达34-35 mm，比普通方法得到的荠菜提取物抑制金黄色葡萄球菌圈直径大20%-30%，本发明方法简单、成本低、实用性强，得到的荠菜提取物在医药和保健食品方面具有较好的应用前景。
具体实施方式
以下对一种从荠菜中提取金黄色葡萄球菌抑制物的方法进行详细说明。
实施例1：
以95%乙醇为提取剂，采用超声波辅助提取，提取液中HCl浓度为5.11%，料液比为1:9.3，提取时间为61分钟，提取液浓缩、干燥后即得。
本发明提取物浓度在22.7mg/mL时对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为34.47mm，抑菌效果十分突出。
实施例2：
以95%乙醇为提取剂，采用超声波辅助提取，提取液中HCl浓度为5.93%，料液比为1:10.2，提取时间为51分钟，提取液浓缩、干燥后即得。
本发明提取物浓度在24.6mg/mL时对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为34.89mm，抑菌效果十分突出。
实施例3：
以95%乙醇为提取剂，采用超声波辅助提取，提取液中HCl浓度为5.51%，料液比为1:10.8，提取时间为68分钟，提取液浓缩、干燥后即得。
本发明提取物浓度在20.9mg/mL时对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为34.06mm，抑菌效果十分突出。
上述实施例并非对本发明作任何形式上的限制，任何熟悉本领域的技术人员，在不脱离本发明技术方案范围的情况下，都可利用上述揭示的技术内容对本发明技术方案做出许多可能的变动和修饰，或修改为等同变化的等效实施例。因此，凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明技术实质对以上实施例所做的任何简单修改、等同变化及修饰，均应落在本发明技术方案保护的范围内。