一种治疗鸡球虫病的中药组方及其口服液的制备方法.pdf

本发明一种治疗鸡球虫病的中药组方及其口服液的制备方法，涉及一种含有地榆属等传统草药的药物制剂，特别是涉及一种用于治疗鸡球虫病的含有地榆属等传统草药的药物制剂。其目的是为了提供一种配伍合理、治疗效果好、无毒副作用的治疗鸡球虫病的中药组方及其口服液的制备方法。本发明一种治疗鸡球虫病的中药组方按质量份数包括青蒿23-27份、苦参13-17份、大蓟8-12份、仙鹤草13-17份、地榆8-12份、白头翁13-17份、黄芪8-12份。本发明的一种治疗鸡球虫病的中药口服液治疗鸡球虫病效果显著，能够促进鸡的生长，且无毒副作用。本发明用于鸡球虫病的治疗领域。

权利要求书
1.  一种治疗鸡球虫病的中药口服液，其特征在于按质量份数包括以下原料：青蒿23-27 份、苦参13-17份、大蓟8-12份、仙鹤草13-17份、地榆8-12份、白头翁13-17份、黄芪8-12 份。

2.  根据权利要求1所述的治疗鸡球虫病的中药口服液，其特征在于按质量份数包括以下 原料：青蒿24-26份、苦参14-16份、大蓟9-11份、仙鹤草14-16份、地榆9-11份、白头翁 14-16份、黄芪9-11份。

3.  根据权利要求2所述的治疗鸡球虫病的中药口服液，其特征在于按质量份数包括以下 原料：青蒿25份、苦参15份、大蓟10份、仙鹤草15份、地榆10份、白头翁15份、黄芪 10份。

4.  一种治疗鸡球虫病的中药口服液的制备方法，其特征在于按以下步骤进行：
一、浸泡：按上述质量比称取各原料，总重量记为1份，加入6份纯化水，40-50℃浸泡 1h，使药材充分膨胀；
二、提取、醇沉：采用两次煎煮法，将步骤一中的药材和纯化水，控制蒸汽压强为 0.1-0.2MPa，加热至沸腾后，继续煮沸2h；分离取出煎出液，继续向药材内加入4份的纯化 水，控制蒸汽压强为0.1-0.2MPa，加热至沸腾后，继续煮沸1.5h，合并两次煎出液即为提取 液；
三、浓缩：将步骤二中制得的提取液加入双效浓缩罐中进行浓缩，真空浓缩蒸汽压力为 0.1MPa，一效真空浓缩器工作压力为0.04MPa，温度为80℃；二效浓缩器工作压力0.06MPa， 温度为65℃，浓缩时间为2.5-3.5 h，热测相对密度为1.17-1.20时，得到浓缩液；
四、醇沉：将浓缩液置于醇沉罐中，向醇沉罐中缓慢加入95％乙醇，使乙醇含量为 65％-70％，搅拌30min，4℃冷藏静置48h，减压浓缩至相对密度为1.40-1.50，回收乙醇，即 得到醇提取液；
五、配液：向配液罐中加入0.3-0.4份纯化水，然后依次加入步骤四中所得醇提取液、0.003 份的苯甲酸钠，搅拌至充分溶解，加入纯化水定容至1份的量，搅拌15min，调节pH值为 5.0-7.0，制得治疗鸡球虫病的中药口服液。

说明书一种治疗鸡球虫病的中药组方及其口服液的制备方法
技术领域
本发明涉及一种含有地榆属等传统草药的药物制剂，特别是涉及一种用于治疗鸡球虫病 的含有地榆属等传统草药的药物制剂。
背景技术
鸡球虫病是由艾美耳属的多种球虫寄生于鸡肠上皮细胞内所引起的一种原虫病。该病分 布广、危害大，是全球性流行的严重危害养鸡业的疾病之一，在各种鸡病中球虫病的发生率 最高。占六分之一到五分之一，严重威胁养禽业的发展。
目前，控制球虫病的主要手段仍然是化学药物纺织。由于长期使用化学药物，耐药虫株 的出现和药物在肉蛋中的残留是用化学药物防治鸡球虫病需要解决的两大难题。中草药具有 毒副作用小和抑杀球虫、增强机体免疫功能及促进生长等优点，尤其是鸡球虫对其不易产生 耐药性和残留，所以，中草药防治鸡球虫病会有更广阔的应用前景。尽管现在很多研究和生 产中使用中药来防治球虫病，但由于中药剂型多为散剂，只能拌料给药，有的甚至用鲜品或 干品切碎饲喂，存在药物剂量大、吸收差、用药成本高等缺点。此外，球虫病一旦爆发，鸡 食欲明显下降，而药物直接拌入饲料内，因采食量减少，摄入的药物剂量相应减少，不能保 证足够药物对疾病的治疗。况且临床上虽然有不少中草药抗球虫病高效的报道，但许多试验 有待于进一步深入研究和验证。因此，研发高效、安全、使用方便的抗球虫中药复方口服液 是今后发展的必然趋势。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种配伍合理、治疗效果好、无毒副作用的治疗鸡球虫 病的中药组方及其口服液的制备方法。
本发明一种治疗鸡球虫病的中药组方，按质量份数包括以下原料：青蒿23-27份、苦参 13-17份、大蓟8-12份、仙鹤草13-17份、地榆8-12份、白头翁13-17份、黄芪8-12份。
进一步，本发明一种治疗鸡球虫病的中药组方，其原料的质量份数如下：青蒿24-26份、 苦参14-16份、大蓟9-11份、仙鹤草14-16份、地榆9-11份、白头翁14-16份、黄芪9-11份。
进一步，本发明一种治疗鸡球虫病的中药组方，其原料的质量份数如下：青蒿25份、苦 参15份、大蓟10份、仙鹤草15份、地榆10份、白头翁15份、黄芪10份。
本发明一种治疗鸡球虫病的中药口服液的制备方法包括以下步骤：
一、浸泡：按上述质量比称取各原料，总重量记为1份，加入6份纯化水，40-50℃浸泡 1h，使药材充分膨胀；
二、提取、醇沉：采用两次煎煮法，将步骤一中的药材和纯化水，控制蒸汽压强为 0.1-0.2MPa，加热至沸腾后，继续煮沸2h；分离取出煎出液，继续向药材内加入4份的纯化 水，控制蒸汽压强为0.1-0.2MPa，加热至沸腾后，继续煮沸1.5h，合并两次煎出液即为提取 液；
三、浓缩：将步骤二中制得的提取液加入双效浓缩罐中进行浓缩，真空浓缩蒸汽压力为 0.1MPa，一效真空浓缩器工作压力为0.04MPa，温度为80℃；二效浓缩器工作压力0.06MPa， 温度为65℃，浓缩时间为2.5-3.5h，热测相对密度为1.17-1.20时，得到浓缩液；
四、醇沉：将浓缩液置于醇沉罐中，向醇沉罐中缓慢加入95％乙醇，使乙醇含量为 65％-70％，搅拌30min，4℃冷藏静置48h，减压浓缩至相对密度为1.40-1.50，回收乙醇，即 得到醇提取液；
五、配液：向配液罐中加入0.3-0.4份纯化水，然后依次加入步骤四中所得醇提取液、0.003 份的苯甲酸钠，搅拌至充分溶解，加入纯化水定容至1份的量(水的密度按1.0×103kg/m3)， 搅拌15min，调节pH值为5.0-7.0，制得治疗鸡球虫病的中药口服液，即球必妥口服液。
本发明一种治疗鸡球虫病的中药口服液及其制备方法与现有技术不同之处在于：
1、本发明的治疗鸡球虫病的中药口服液以清热燥湿、凉血止痢、杀虫为主，主治肠腑湿 热、球虫血痢证。其中，青蒿为主药，具有清热、凉血、杀虫的功效；苦参为臣药，具有清 热燥湿、杀虫的功效；大蓟、仙鹤草、地榆、白头翁、黄芪共为佐使药，其中大蓟、地榆和 仙鹤草合用能够提高凉血止血、收敛止血、止痢的功效，用于血热妄行所致的便血，白头翁 还能提高青蒿、苦参凉血、燥湿、杀虫的功效，黄芪具有补气固表、利水消肿的功效，用于 气虚、食少便溏、中气下陷、久泻脱肛、便血、血虚等证，大蓟还具有行瘀消肿的功效，同 黄芪合用能够提高二者消肿之功效。综上所述，以上7味中药材合用能够实现防治鸡球虫病 的目的。
2、鸡长期服用本发明的治疗鸡球虫病的中药口服液，其精神状况、采食、饮水、排粪等 均无异常表现，体态发育良好，无任何中毒症状，存活率为100％。且本发明的球必妥口服液 具有促生长作用，降低料重比，各组GPT、GOT活力、肌酐、尿酸、总蛋白、白蛋白、球蛋 白、T.Bili和D.Bili含量与Ⅰ组比较无明显差异。
3、本发明的制备方法采用浸泡和两次煎煮的方法，提高中药中有效成分的提出率；然后 浓缩提取液并经过醇沉等操作进一步去除杂质。以上的操作步骤最大限度的保留本发明中药 组方中的有效成分，去除了杂质，从而提高口服液的成色达到精制的目的。
具体实施方式
下面结合实施例与验证试验对本发明的一种治疗鸡球虫病的中药组方及其口服液的制备 方法作进一步的说明。
实施例1
本实施例的治疗鸡球虫病的中药口服液(以下称球必妥口服液)按以下步骤制备：
一、浸泡：分别称取青蒿68.32kg、苦参41.58kg、大蓟32.67kg、仙鹤草41.58kg、地 榆35.64kg、白头翁47.53kg、黄芪32.67kg，加入1800L纯化水，40℃浸泡1h，使药材充 分膨胀；
二、提取、醇沉：采用两次煎煮法，将步骤一中的药材和纯化水，控制蒸汽压强为0.15MPa， 加热至沸腾后，继续煮沸2h；分离取出煎出液，继续向药材内加入1200L纯化水，控制蒸汽 压强为0.15MPa，加热至沸腾后，继续煮沸1.5h，合并两次煎出液即为提取液；
三、浓缩：将步骤二中制得的提取液加入双效浓缩罐中进行浓缩，真空浓缩蒸汽压力为 0.1MPa，一效真空浓缩器工作压力为0.04MPa，温度为80℃；二效浓缩器工作压力0.06MPa， 温度为65℃，浓缩时间为2.5h，热测相对密度为1.19时，得到浓缩液；
四、醇沉：将浓缩液置于醇沉罐中，向醇沉罐中缓慢加入95％乙醇，使乙醇含量为68％， 搅拌30min，4℃冷藏静置48h，减压浓缩至相对密度为1.50，回收乙醇，即得到醇提取液；
五、配液：向配液罐中加入100L纯化水，然后依次加入步骤四中所得醇提取液、0.9kg 的苯甲酸钠，搅拌至充分溶解，加入纯化水定容至300L，搅拌15min，调节pH值为5.0，制 得治疗鸡球虫病的中药口服液，即球必妥口服液。
实施例2
一、浸泡：分别称取青蒿74.26kg、苦参38.61kg、大蓟35.64kg、仙鹤草44.55kg、地 榆29.70kg、白头翁50.50kg、黄芪26.73kg，加入1800L纯化水，47℃浸泡1h，使药材充 分膨胀；
二、提取、醇沉：采用两次煎煮法，将步骤一中的药材和纯化水，控制蒸汽压强为0.2MPa， 加热至沸腾后，继续煮沸2h；分离取出煎出液，继续向药材内加入1200L纯化水，控制蒸汽 压强为0.2MPa，加热至沸腾后，继续煮沸1.5h，合并两次煎出液即为提取液；
三、浓缩：将步骤二中制得的提取液加入双效浓缩罐中进行浓缩，真空浓缩蒸汽压力为 0.1MPa，一效真空浓缩器工作压力为0.04MPa，温度为80℃；二效浓缩器工作压力0.06MPa， 温度为65℃，浓缩时间为3.5h，热测相对密度为1.18时，得到浓缩液；
四、醇沉：将浓缩液置于醇沉罐中，向醇沉罐中缓慢加入95％乙醇，使乙醇含量为66％， 搅拌30min，4℃冷藏静置48h，减压浓缩至相对密度为1.40，回收乙醇，即得到醇提取液；
五、配液：向配液罐中加入100L纯化水，然后依次加入步骤四中所得醇提取液、0.9kg 的苯甲酸钠，搅拌至充分溶解，加入纯化水定容至300L，搅拌15min，调节pH值为6.0，制 得治疗鸡球虫病的中药口服液，即球必妥口服液。
实施例3
一、浸泡：分别称取青蒿73.47kg、苦参48.98kg、大蓟27.55kg、仙鹤草48.98kg、地 榆24.49kg、白头翁39.80kg、黄芪36.73kg，加入1800L纯化水，45℃浸泡1h，使药材充 分膨胀；
二、提取、醇沉：采用两次煎煮法，将步骤一中的药材和纯化水，控制蒸汽压强为0.1MPa， 加热至沸腾后，继续煮沸2h；分离取出煎出液，继续向药材内加入1200L纯化水，控制蒸汽 压强为0.1MPa，加热至沸腾后，继续煮沸1.5h，合并两次煎出液即为提取液；
三、浓缩：将步骤二中制得的提取液加入双效浓缩罐中进行浓缩，真空浓缩蒸汽压力为 0.1MPa，一效真空浓缩器工作压力为0.04MPa，温度为80℃；二效浓缩器工作压力0.06MPa， 温度为65℃，浓缩时间为3h，热测相对密度为1.20时，得到浓缩液；
四、醇沉：将浓缩液置于醇沉罐中，向醇沉罐中缓慢加入95％乙醇，使乙醇含量为65％， 搅拌30min，4℃冷藏静置48h，减压浓缩至相对密度为1.45，回收乙醇，即得到醇提取液；
五、配液：向配液罐中加入100L纯化水，然后依次加入步骤四中所得醇提取液、0.9kg 的苯甲酸钠，搅拌至充分溶解，加入纯化水定容至300L，搅拌15min，调节pH值为5.5，制 得治疗鸡球虫病的中药口服液，即球必妥口服液。
实施例4
一、浸泡：分别称取青蒿75.73kg、苦参49.51kg、大蓟23.30kg、仙鹤草49.51kg、地 榆32.04kg、白头翁40.78kg、黄芪29.13kg，加入1800L纯化水，50℃浸泡1h，使药材充 分膨胀；
二、提取、醇沉：采用两次煎煮法，将步骤一中的药材和纯化水，控制蒸汽压强为0.15MPa， 加热至沸腾后，继续煮沸2h；分离取出煎出液，继续向药材内加入1200L纯化水，控制蒸汽 压强为0.15MPa，加热至沸腾后，继续煮沸1.5h，合并两次煎出液即为提取液；
三、浓缩：将步骤二中制得的提取液加入双效浓缩罐中进行浓缩，真空浓缩蒸汽压力为 0.1MPa，一效真空浓缩器工作压力为0.04MPa，温度为80℃；二效浓缩器工作压力0.06MPa， 温度为65℃，浓缩时间为2.5h，热测相对密度为1.17时，得到浓缩液；
四、醇沉：将浓缩液置于醇沉罐中，向醇沉罐中缓慢加入95％乙醇，使乙醇含量为69％， 搅拌30min，4℃冷藏静置48h，减压浓缩至相对密度为1.40，回收乙醇，即得到醇提取液；
五、配液：向配液罐中加入100L纯化水，然后依次加入步骤四中所得醇提取液、0.9kg 的苯甲酸钠，搅拌至充分溶解，加入纯化水定容至300L，搅拌15min，调节pH值为7.0，制 得治疗鸡球虫病的中药口服液，即球必妥口服液。
实施例5
一、浸泡：分别称取青蒿83.51kg、苦参46.39kg、大蓟30.93kg、仙鹤草40.21kg、地 榆27.84kg、白头翁46.39kg、黄芪24.74kg，加入1800L纯化水，42℃浸泡1h，使药材充 分膨胀；
二、提取、醇沉：采用两次煎煮法，将步骤一中的药材和纯化水，控制蒸汽压强为0.1MPa， 加热至沸腾后，继续煮沸2h；分离取出煎出液，继续向药材内加入1200L纯化水，控制蒸汽 压强为0.1MPa，加热至沸腾后，继续煮沸1.5h，合并两次煎出液即为提取液；
三、浓缩：将步骤二中制得的提取液加入双效浓缩罐中进行浓缩，真空浓缩蒸汽压力为 0.1MPa，一效真空浓缩器工作压力为0.04MPa，温度为80℃；二效浓缩器工作压力0.06MPa， 温度为65℃，浓缩时间为3.5h，热测相对密度为1.18时，得到浓缩液；
四、醇沉：将浓缩液置于醇沉罐中，向醇沉罐中缓慢加入95％乙醇，使乙醇含量为70％， 搅拌30min，4℃冷藏静置48h，减压浓缩至相对密度为1.50，回收乙醇，即得到醇提取液；
五、配液：向配液罐中加入100L纯化水，然后依次加入步骤四中所得醇提取液、0.9kg 的苯甲酸钠，搅拌至充分溶解，加入纯化水定容至300L，搅拌15min，调节pH值为6.5，制 得治疗鸡球虫病的中药口服液，即球必妥口服液。
采用以下方法对实施例1-5制得的球必妥口服液的药效进行验证。
1.体外抗球虫作用评价
在锥形瓶中分别加入质量浓度为0.05、0.10、0.2g/mL的实施例1-5制得的球必妥口服液 5mL，另设2.5％重铬酸钾5mL作为对照，于每个样品中均加入5mL含5×106个未孢子化 E.tenella卵囊悬液，每组设3个重复，在28℃条件下培养4天，计数卵囊孢子化率。卵囊孢 子化率＝成熟卵囊数÷(未成熟卵囊数+成熟卵囊数)×100％。结果如表1所示，不同质量浓 度球必妥口服液与球虫卵囊作用4天，孢子化率极显著低于重铬酸钾组(对照组)，并随浓度 的增加，孢子化率呈下降趋势，说明球必妥口服液对球虫卵囊的繁殖有抑制作用。球必妥口 服液卵囊孢子化率为26.5％-42.33％。
表1球必妥口服液作用4d对球虫卵囊孢子化率的影响(％)

2.体内抗球虫作用评价(人工感染防治试验)
选择健康、体重均匀的14日龄雏鸡150只，随机分成5组，每组3个重复，每个重复 10只鸡。第1组为未感染对照组；第2组为感染对照组；第3、4、5组分别饮用质量浓度为 22.5、45、90g/L的实施例2制得的球必妥口服液。除第1组外其它各组试验鸡于分组后当天 用钝头注射器将0.4mL含有1.0×105个E.tenella孢子化卵囊悬液接种于鸡的嗉囊中，并于当 天开始用药，至第8d结束。根据抗球虫指数(ACI)判断其抗球虫效果，ACI＝(存活率+相对 增重率)-(病变值+卵囊值)。其中：
(1)增重及相对增重率：与感染后第8d逐只空腹称重，并计算各阶段的增重。
相对增重率(％)＝(感染各组鸡平均增重/未感染对照组鸡平均增重)×100％。
(2)存活率：存活率(％)＝(组内鸡存活数/组内鸡总数)×100％。
(3)病变值：试验结束时剖杀，做鸡的盲肠病变记分，两侧盲肠病变不一致时以严重 一侧为准。其中+0分：无肉眼病变；+1分：盲肠壁有很少散在的瘀点，肠壁不增厚，内容 物正常；+2分：病变数量较多，盲肠内容物明显带血，盲肠壁稍增厚，内容物正常；+3分： 盲肠内有多量血液或有肠芯，血凝块可见灰白色干酪样的香蕉型块状物，盲肠壁明显增厚， 盲肠中粪便含量少；+4分：充满大量血液或肠芯，盲肠肿大，肠芯中含有粪渣或不含，死 亡鸡也记+4分。病变值＝每组平均病变记分×10。
(4)卵囊值：试验结束时将鸡全部剖杀，刮取盲肠内容物，计算克粪便卵囊数(OPG 值)，算出卵囊比数，并换算成卵囊值。卵囊比数＝(未感染对照组或用药组卵囊数/感染对 照组卵囊数)×100％，卵囊值与卵囊比数关系如下：卵囊比数分别为1％以下，1％～25％， 26％～50％，51％～75％和76％～100％时，卵囊值分别为0，5，10，20和40。
由表2可知，饮用不同浓度球必妥口服液的抗球虫指数均大于160，其中以第4组ACI最高， 属抗球虫效果良好。
表2各组抗球虫效果综合评价

3.球必妥口服液安全性评价
选择体重相近的14日龄蛋公雏90只，随机分成3组，每组3个重复，每个重复10。其 中第I组为空白对照组；第Ⅱ组为饮用质量浓度为45g/L的实施例2制得的球必妥口服液； 第Ⅲ组为饮用质量浓度为90g/L的球必妥口服液。于分组后当天开始用药，连续用药30d。 试验期间逐日观察并记录各组鸡的采食、饮水、排粪、羽毛的光泽度等。试验结束时空腹称 重，统计并比较体重增长情况。于试验开始前和试验结束时每组随机抽取5只，心脏采血并 分离血清，用于血液生化指标测定。其中血清尿酸(UA)：酶比色法；血清肌酐(Cre)：苦味 酸法；血清直接胆红素(T.Bili)与血清总胆红素(D.Bili)：重氮法；血清谷丙转氨酶(GPT) 与血清谷草转氨酶(GOT)：连续监测法；血清总蛋白含量(TP)：双缩脲法；血清白蛋白(ALB)： 溴甲酚绿法；血清球蛋白(GLB)：差减法(总蛋白—白蛋白)。
试验结果如表3、表4所示，长期服用球必妥口服液，其精神状况、采食、饮水、排粪 等均无异常表现，体态发育良好，无任何中毒症状，存活率为100％。且本发明的球必妥口服 液具有促生长作用，降低料重比，各组GPT、GOT活力、肌酐、尿酸、总蛋白、白蛋白、球蛋 白、T.Bili和D.Bili含量与Ⅰ组比较无明显差异，说明球必妥口服液是安全的。
表3各组增重和料重比

表4各组不同时间血清生化指标变化

虽然以上描述了本发明的具体实施方式，但是本领域的技术人员应当理解，这些仅是举 例说明，本发明的保护范围是由所附权利要求书限定的。本领域的技术人员在不背离本发明 的原理和实质的前提下，可以对这些实施方式作出多种变更或修改，但这些变更和修改均落 入本发明的保护范围。