醋氯芬酸对乙酰氨基酚药物组合物及其脂质体固体制剂 【技术领域】
本发明具体涉及一种含醋氯芬酸对乙酰氨基酚药物组合物脂质体的固体制剂及其制备方法，属于医药技术领域。
背景技术
醋氯芬酸最早由西班牙Prodesfarma合成，于1992年首次上市。面市不到10年时间，已在西班牙、葡萄牙、德国、英国、法国、芬兰和比利时等二十余个国家上市使用，并在1998年被收入欧洲药典和英国药典，证明该药的安全性和有效性已得到广泛肯定。但是，临床实验证实，健康人口服醋氯芬酸后可迅速完全吸收，其生物利用度几乎达100％，血药浓度达峰时间为用药后1.25-3小时。平均血浆消除半衰期为4-4.3小时，消除率约为6L/h，近2/3药物主要以结合形式的烃化代谢物通过尿排泄，原型药物仅占药物剂量的1％。
国内目前已有醋氯芬酸片、醋氯芬酸胶囊、醋氯芬酸肠溶片及肠溶胶囊的产品。如专利文献CN1543359A公开了一种可生物利用的口服剂型醋氯芬酸组合物及其制备方法；CN1989957A公开了一种醋氯芬酸颗粒剂。由于醋氯芬酸的半衰期较短，为维持有效血药浓度，需一日服药2～3次，且血药浓度波动较大；而且风湿、类风湿等病的患者，一般需长期服药，进而增加了药物的毒副作用的风险。醋氯芬酸主要不良反应为胃肠道反应，如消化不良、腹痛、恶心和腹泻，最常见的是消化不良。
对乙酰氨基酚是常用止痛和解热药，丰富的经验清楚地证实，其为轻度到中度疼痛状态的标准解热和止痛药。对乙酰氨基酚在许多个国家以常规液体、栓剂、胶囊、片剂和囊片剂型以非处方柜台药销售。在摄食例如片剂或胶囊的固体形式的对乙酰氨基酚之后，药物吸收速率和药理活性的起效可能因患者而异。举例而言，已证明片剂形式的对乙酰氨基酚的吸收在很大程度上受到食物的影响且不能一直达到对乙酰氨基酚的最小治疗浓度，这些因素可能会与某些患者的镇痛有关联(Stillings M.等人，Current MedicalResearch and Opinion 16(2)：115-124，2000)。
非甾体抗炎药与对乙酰氨基酚组成的制剂，在国内外的文献中进行了许多疗效方面报道，证明了两者联合用药的显著疗效。目前已经上市的典型制剂为在印度上市的Parafortan片、Uhrozox的药物组合物片剂、国内广州明兴药业有限公司的蒙洛英注射液、日本专利介绍了成分比较复杂的片剂处方：对乙酰氨基酚150rag，双氯芬酸钠15rag，咖啡因60mg，二苯酰硫胺素(dibenzoylthiamine)8mg。这些都证明了对乙酰氨基酚和非甾体抗炎药是一对具有协同作用的药物。
醋氯芬酸作为疗效及安全性优于双氯芬酸的药物，其与对乙酰氨基酚的药物组合物制剂2005年4月于印度上市，经药理分析和临床证明将醋氯芬酸和对乙酰氨基酚制成药物组合物制剂，可起到解热抗炎镇痛的功效，适用于骨关节炎、类风湿性关节炎、强直性脊椎炎、腰(背)痛和牙痛等引起的疼痛和炎症症状的治疗以及妇科炎症和耳、鼻、喉炎症的治疗。专利文献CN101411699A公开了含醋氯芬酸和对乙酰氨基酚的片剂，加入淀粉等常规填充剂制成，该专利中直接将醋氯芬酸、对乙酰氨基酚和淀粉混合制得的片剂稳定性较差，而且溶出度较差，生物利用度低。
自20世纪60年代末Rahman等人首先将脂质体作为药物载体应用以来，随着科学技术的不断进展，脂质体制备工艺逐步完善，脂质体作用机制进一步阐明，脂质体成为当前研究的热门技术领域。已经证明，脂质体适合体内降解、无毒性和无免疫原性，更为重要的是脂质体作为药物载体可以提高药物治疗指数、降低药物毒性和减少药物副作用。
申请人由此设想用脂质体包裹醋氯芬酸和对乙酰氨基酚，期望获得药理学活性，并降低其不良副作用。
【发明内容】
鉴于醋氯芬酸和对乙酰氨基酚各自存在的缺陷，以及已有醋氯芬酸对乙酰氨基酚的普通固体制剂未能解决以上缺陷，本申请人研制出含醋氯芬酸对乙酰氨基酚药物组合物的脂质体的制剂，不仅降低了醋氯芬酸的副作用，还提高了对乙酰氨基酚的药理学活性，在缓解风湿性关节炎、类风湿性关节炎、骨关节炎和强直性脊椎炎引起的炎症和疼痛，以及腰疼、牙疼、妇科疼痛以及耳部、鼻喉部的炎症及疼痛的治疗上，大大提高了疗效。
本发明的目的在于提供一种醋氯芬酸对乙酰氨基酚药物组合物的脂质体。
本发明的目的还在于提供一种含醋氯芬酸对乙酰氨基酚药物组合物的脂质体的固体制剂，具体的说，通过一定含量的大豆卵磷脂、胆固醇、去氧胆酸钠、泊洛沙姆188和活性成分醋氯芬酸以及对乙酰氨基酚的组合，采用薄膜分散技术制成醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体，然后再和一定的赋形剂混合制成片剂，可以更加有效缓解各种疼痛，获得了令人满意的技术效果。
本发明解决的技术方案如下：
本发明提供一种醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体，包含重量份计的组分：醋氯芬酸1份，对乙酰氨基酚5份，大豆卵磷脂5-32份，胆固醇2-17份，去氧胆酸钠2.5-15份，泊洛沙姆1884-24份。
作为本发明一优选实施方案，上述所述的醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体，包含按重量份计地组分：醋氯芬酸1份，对乙酰氨基酚5份，大豆卵磷脂12-24份，胆固醇3-9份，去氧胆酸钠2-6份，泊洛沙姆1885-12份。
作为优选，上述的醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体，其特征在于通过包含以下步骤的方法制得：
(1)将大豆卵磷脂、胆固醇、去氧胆酸钠和泊洛沙姆188溶于溶剂中，混合均匀，除去溶剂制得磷脂膜；
(2)加入缓冲盐溶液搅拌使磷脂膜完全水化，制成空白脂质体混悬液；
(3)将醋氯芬酸和对乙酰氨基酚均匀分散于水中，加入空白脂质体混悬液中，制成脂质体混悬液；
(4)将混悬液冷冻干燥或喷雾干燥，即得醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体。
其中，所述的缓冲盐溶液，优选为pH值4.2～5.6的药学上可接受的缓冲盐溶液，例如缓冲盐溶液选自磷酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液中的一种或几种；优选加入所述的缓冲盐溶液基于以上重量份计为20～50重量份。
其中，所述的溶剂为有机溶剂，例如优选自乙醇、甲醇、叔丁醇、正丁醇、异丙醇、丙酮、乙醚、苯甲醇、正己烷中的一种或几种，更优选溶剂是异丙醇。
作为优选，上述的醋氯芬酸对乙酰氨基酚脂质体，优选步骤(2)中加入缓冲盐溶液搅拌使磷脂膜完全水化，再用组织捣碎机匀质乳化，成脂质体混悬液；或者，其中步骤(3)中将醋氯芬酸和对乙酰氨基酚均匀分散于水中，加入空白脂质体混悬液中，保温55-65℃，再用组织捣碎机匀质乳化10-30min，得脂质体的混悬液。
进一步地，作为本发明最优选实施方式之一，上述所述的醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体，是通过包括如下步骤的方法制得：
(1)将大豆卵磷脂、胆固醇、去氧胆酸钠和泊洛沙姆188溶于异丙醇中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去异丙醇，制得磷脂膜；
(2)加入缓冲盐溶液搅拌使磷脂膜完全水化，用组织捣碎机匀质乳化，制得空白脂质体混悬液；
(3)将醋氯芬酸和对乙酰氨基酚均匀分散于水中，加入空白脂质体混悬液中，保温55-65℃，再用组织捣碎机匀质乳化10-30min，得醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体的混悬液；
(4)将混悬液冷冻干燥或喷雾干燥，即得醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体。
本发明所述方法制备的醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体可以通过适宜的方式配制成片剂、软或硬胶囊、用于制备与其溶解度相适应的即用溶液或液体的颗粒状粉末，以及药学上可接受的任何常规剂型。
本发明另一发明目的是提供一种含醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体的固体制剂，其特征在于包含以上获得的醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体和药学上可接受的赋形剂；所述的固体制剂是优选包含按重量份计的组分：醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体1份、填充剂0.01～0.5份、崩解剂0.01～0.1份、粘合剂0.001～0.01份、润滑剂0.01～0.1份。
以上所述填充剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂选自本领域常用的赋形剂。本领域技术人员还应当理解，根据实际需要可以加入其它药学上可接受的赋形剂制成所需的固体制剂。
其中：
所述的填充剂优选自微晶纤维素、乳糖、预胶化淀粉、山梨醇、甘露醇、糊精、硫酸钙、磷酸氢钙中的一种或几种；
所述的崩解剂优选自羧甲淀粉钠、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠中的一种或几种；
所述的粘合剂优选自羟丙甲纤维素、淀粉浆、羧甲基纤维素钠中的一种或几种；
所述的润滑剂优选自滑石粉、胶性二氧化硅、PEG6000、十二烷基硫酸钠等中的一种或几种。
进一步地，上述的醋氯芬酸对乙酰氨基酚的固体制剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)将醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体粉碎，过80目筛，备用；
(2)将填充剂、崩解剂粉碎，过80目筛，混合，备用；
(3)将上述原辅料混合均匀，加入粘合剂制软材，过筛制粒，烘干，加入润滑剂混合均匀，整粒；
(4)将干燥的颗粒压片，制得醋氯芬酸对乙酰氨基酚的片剂。
本发明的另一个目的是醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体在制备治疗骨关节炎、类风湿性关节炎、强直性脊椎炎、腰痛、牙痛、妇科炎症以及耳、鼻、喉炎症的药物中的应用。
本发明通过合适原辅料及其配比，制得的醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体，再与药学上常规赋形剂制成醋氯芬酸对乙酰氨基酚的固体制剂。本发明提供的醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体及醋氯芬酸对乙酰氨基酚的固体制剂，主要有以下优点：
(1)醋氯芬酸和对乙酰氨基酚被包埋于脂质体内，解决了稳定差的问题，提高了药效和生物利用度，保证了产品质量；
(2)所用的大豆卵磷脂、胆固醇、泊洛沙姆188和去氧胆酸钠在体内降解、无毒性和无免疫原性，而且可以提高药物治疗指数、降低药物毒性和减少药物副作用；
(3)生产工艺简单，成本低，可以工业化规模生产；
(4)醋氯芬酸对乙酰氨基酚的片剂，起效快，缓解各种疼痛效果明显。
本发明提供的醋氯芬酸对乙酰氨基酚的固体制剂，进行稳定性试验考察，在高温40℃、相对湿度75％±5％条件下加速试验6个月，各项检测指标没有明显变化。
本发明提供的醋氯芬酸对乙酰氨基酚的固体制剂，进行急性毒性试验、异常毒性试验和热源检查，均符合规定，安全性得到证明。
脂质体的制备工艺早已成熟，现有技术也公开了多种制备工艺，例如CN101391098A公开了一种蜂毒素脂质体制剂，其特征是由蜂毒素1份、大豆磷脂5-40份、胆固醇1.3-10份、泊洛沙姆10-140份组成。CN1813678A公开了一种乙肝疫苗脂质体，其中磷脂可选自卵磷脂、脑磷脂、大豆磷脂、氢化磷脂；离子型表面活性剂选自胆酸钠、去氧胆酸钠，或非离子型表面活性剂选自司盘类、吐温类、泊洛沙姆。申请200710175540.3公开了一种脂质体的制备方法，其特征在于该方法为：取注射用大豆磷脂300-500重量份、胆固醇80-150重量份溶于10-40体积份乙醚中作为有机相，将盐酸青藤碱30-70重量份溶于含30-70重量份胆酸钠的5-20体积份pH7.1-7.5磷酸盐缓冲液中作为水相；搅拌下将水相逐滴加入有机相中，待滴加完毕继续搅拌10-30分钟，得到水/油型乳液；旋转蒸发除尽乙醚；室温下继续搅拌20-40分钟即得载药脂质体。申请200810155948.9的实施例1公开了紫杉醇的脂质体，包含：紫杉醇1g、大豆磷脂30g、吐温80 1g、去氧胆酸钠1g、胆固醇3g、甘露醇60g、水600mL。
本领域技术人员应当充分理解，脂质体的制备工艺虽然是普遍获得的，但是构成脂质体的各成分类别及其含量的选择并非显而易见的，申请人需要付出创造性的劳动才能得到一定成分配比的具有优良包封率的脂质体。以下实施例将逐一证明本发明的创造性所在。
【具体实施方式】
以下通过实施例进一步说明本发明，但不应理解为对本发明的限制。
实施例1 醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体的制备
处方：
醋氯芬酸 100g
对乙酰氨基酚 500g
大豆卵磷脂 1200g
胆固醇 300g
去氧胆酸钠 200g
泊洛沙姆188 500g
制备工艺
(1)将1200g大豆卵磷脂、300g胆固醇、200g去氧胆酸钠和500g泊洛沙姆188溶于8000ml异丙醇中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去异丙醇，制得磷脂膜；
(2)加入pH＝4.2的磷酸-磷酸二氢钠缓冲溶液2000ml，搅拌使磷脂膜完全水化，再用组织捣碎机匀质乳化20min，转速12000r/min，制得空白脂质体混悬液；(醋氯芬酸100g为1份，缓冲溶液2000ml为2000g，2000g/100g＝20份)
(3)将100g醋氯芬酸和500g对乙酰氨基酚均匀分散于水5000ml中，加入空白脂质体混悬液中，保温65℃，再用组织捣碎机匀质乳化10min，得醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体混悬液；
(4)将混悬液冷冻干燥，即得醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体。
对比例1 醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体的制备
处方：
醋氯芬酸 100g
对乙酰氨基酚 500g
大豆卵磷脂 1200g
胆固醇 300g
泊洛沙姆188 500g
制备工艺同实施例1，选取非本发明优选组分组合，制得醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体。
对比例2 醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体的制备
处方：
醋氯芬酸 100g
对乙酰氨基酚 500g
大豆卵磷脂 1200g
胆固醇 300g
去氧胆酸钠 200g
制备工艺同实施例1，选取非本发明优选组分组合，制得醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体。
实施例2 醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体的制备
处方：
醋氯芬酸 100g
对乙酰氨基酚 500g
大豆卵磷脂 2400g
胆固醇 900g
去氧胆酸钠 600g
泊洛沙姆188 1200g
制备工艺
(1)将2400g大豆卵磷脂、900g胆固醇、600g去氧胆酸钠和1200g泊洛沙姆188溶于18000ml异丙醇中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去异丙醇，制得磷脂膜；
(2)加入pH＝5.6的枸橼酸-枸橼酸钠缓冲溶液5000ml，搅拌使磷脂膜完全水化，再用组织捣碎机匀质乳化15min，转速15000r/min，制得空白脂质体混悬液；
(3)将100g醋氯芬酸和500g对乙酰氨基酚均匀分散于水5000ml中，加入空白脂质体混悬液中，保温55℃，再用组织捣碎机匀质乳化20min，得醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体混悬液；
(4)将混悬液喷雾干燥，即得醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体。
对比例3 不同方法制备醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体
处方：
醋氯芬酸 100g
对乙酰氨基酚 500g
大豆卵磷脂 2400g
胆固醇 900g
去氧胆酸钠 600g
泊洛沙姆188 1200g
制备工艺
(1)将100g醋氯芬酸、500g对乙酰氨基酚、2400g大豆卵磷脂、900g胆固醇、600g去氧胆酸钠和1200g泊洛沙姆188溶于23000ml异丙醇中，混合均匀，加入pH＝5.6枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液500ml，组织捣碎机高速匀质乳化15min，转速15000r/min，减压除去异丙醇，得醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体混悬液；
(2)将混悬液喷雾干燥，即得醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体。
实施例3 醋氯芬酸对乙酰氨基酚的片剂的制备
选用醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体600g(含醋氯芬酸100g，对乙酰氨基(来自实施例1) 酚500g)
微晶纤维素 76g
乳糖 50g
交联聚维酮 40g
羟丙甲纤维素 3g
胶性二氧化硅 15g
滑石粉 20g
制备工艺
(1)将实施例1制备的含600g醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体粉碎，过80目筛，备用；
(2)称取76g微晶纤维素、50g乳糖、40g交联聚维酮，过80目筛，混合，备用；
(3)将上述原辅料混合均匀，加入2％羟丙甲纤维素50％乙醇溶液150ml制软材，过20目筛制粒，60℃烘干，过18目筛整粒；
(4)将干燥的颗粒压片，制得醋氯芬酸对乙酰氨基酚的片剂。
实施例4 醋氯芬酸对乙酰氨基酚的片剂的制备
选用醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体600g(含醋氯芬酸100g，对乙酰氨基(来自实施例2) 酚500g)
预胶化淀粉 54g
乳糖 68g
羧甲淀粉钠 52g
羟丙甲纤维素 3g
滑石粉 20g
制备工艺
(1)将实施例2制备的含600g醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体粉碎，过80目筛，备用；
(2)称取54g预胶化淀粉、68g乳糖、52g羧甲淀粉钠，过80目筛，混合，备用；
(3)将上述原辅料混合均匀，加入2％羟丙甲纤维素50％乙醇溶液150ml制软材，过20目筛制粒，55℃烘干，加入20g滑石粉混合均匀，18目筛整粒；
(4)将干燥的颗粒压片，制得醋氯芬酸对乙酰氨基酚的片剂。
对比例4 醋氯芬酸对乙酰氨基酚的片剂的制备
选用醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体600g(含醋氯芬酸100g，对乙酰氨基(来自对比例1) 酚500g)
微晶纤维素 76g
乳糖 50g
交联聚维酮 40g
羟丙甲纤维素 3g
胶性二氧化硅 15g
滑石粉 20g
制备工艺同实施例3，采用对比例1制备的脂质体作为活性成分，制得醋氯芬酸对乙酰氨基酚的片剂。
对比例5 醋氯芬酸对乙酰氨基酚的片剂的制备
选用醋氯芬酸对乙酰氨基酚的脂质体600g(含醋氯芬酸100g，对乙酰氨基(对比例3) 酚500g)
预胶化淀粉 54g
乳糖 68g
羧甲淀粉钠 52g
羟丙甲纤维素 3g
滑石粉 20g
制备工艺同实施例4，采用对比例3制备的脂质体作为活性成分，制得醋氯芬酸对乙酰氨基酚的片剂。
对比例6 采用现有技术CN101411699A的具体实施例制得的片剂。
试验例1 包封率的测定
取实施例1-2和对比例1-3制备的脂质体制剂，高效液相色谱法检测醋氯芬酸和对乙酰氨基酚的总含量为M，选用柱色谱法分离脂质体。
取1.5g葡聚糖凝胶G-50，用pH6.8磷酸盐缓冲液浸泡溶胀12h以上，装入层析柱内(200×10mm)，用上述磷酸盐缓冲液冲洗平衡，分别取实施例1-2和对比例1-3得到的醋氯芬酸对乙酰氨基酚脂质体加水溶解，制成每1ml含有醋氯芬酸约20mg的溶液，分别取溶液1.8ml加入层析柱顶部，用磷酸盐缓冲液50ml洗脱，流速1.4ml/min，收集的洗脱液加入破膜剂(乙醇∶苯甲醇＝6∶1)50ml，混匀，高效液相色谱法检测醋氯芬酸和对乙酰氨基酚的含量M1。
包封率％＝M1/M×100％.
表1包封率测定结果
实施例 实施例1 对比例1 对比例2 实施例2 对比例3 包封率 90.4％ 57.7％ 55.4％ 88.6％ 54.3％
由以上结果可知，本发明制得的脂质体包封率很高，基本符合实际生产要求；而本发明范围外处方配比的对比例和不同制备工艺的对比例制得的脂质体包封率很低，和实施例相比有明显的差距，不适合生产要求。
试验例2 粒径的检测
取实施例1-2和对比例1-3制备的脂质体，采用显微图像分析仪测定脂质体的粒径分布，结果如表2：
表2粒径检测结果
由以上结果可知，实施例1-2制得的脂质体显球状、椭圆状，粒径均匀，范围为100-200nm；对比例1-3制得的脂质体形状不定，大小不一，粒径不均匀，范围为600-900nm。
试验例3 稳定性考察
将本发明中的实施例3-4和对比例4-6制备的样品在高温40℃、相对湿度75％±5％条件下加速试验6个月，检测各项主要指标的变化，结果见表3。
表3加速试验结果
由以上实验结果可见，本发明实施例3-4制备的样品溶出度高，稳定性好，加速6个月后，各项检测指标几乎没有明显的变化；而对比例4-6制备的样品溶出度低，稳定性差，加速6个月后各项检测变化较大。充分说明了本发明的优越性。
在本文中描述了本发明的优选实施方案，包括为发明人所知的实施本发明的最佳方式。那些优选的实施方案的变化对于本领域的普通技术人员而言在阅读上述的说明后可变得显而易见。发明人预期技术人员酌情应用这类变化，发明人旨在本发明可按照不同于本文中具体描述的方式来实施。因此，本发明包括本文中所附权利要求中描述的主题的所有改变和同等物，这是适用法律允许的。然而，上述要素各种可能的变化的任何组合都被本发明包括，除非本文中另有说明或与上下文明显矛盾。