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1、(10)申请公布号 CN 104140946 A (43)申请公布日 2014.11.12 CN 104140946 A (21)申请号 201410355239.0 (22)申请日 2014.07.25 C12N 1/38(2006.01) C12N 1/20(2006.01) C12N 1/16(2006.01) C12R 1/07(2006.01) (71)申请人 内蒙古斯隆生物技术有限责任公司 地址 011517 内蒙古自治区呼和浩特市盛乐 经济园区 (72)发明人 于长青 蔺兴盛 李俊霞 (54) 发明名称 酵母菌、 乳酸菌、 芽孢杆菌固体发酵的增效剂 (57) 摘要 本发明涉及酵母。
2、菌、 乳酸菌、 芽孢杆菌固体发 酵的增效剂， 包括以下组成成分 ： 赖氨酸 0.2-3g/ L、 山梨糖醇 100-500g/L、 海藻糖 600-1000g/L、 硫 酸钴 0.023-0.12g/L、 硫酸锌 0.1-0.45g/L、 酵母 硒 0.1-0.5g/L、 甘露聚糖酶 100000-200000U/L ； 本发明不仅可以增加酵母菌、 芽孢杆菌或乳酸菌 单菌 / 混菌发酵后的益生菌的活菌数量， 缩短发 酵时间， 提高生产效率， 降低发酵成本， 还可以提 高酵母菌、 芽孢杆菌和乳酸菌的保存时间， 增强生 物活性， 具有良好的经济、 生态及社会效益。 (51)Int.Cl. 权利要求。
3、书 1 页 说明书 4 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书4页 (10)申请公布号 CN 104140946 A CN 104140946 A 1/1 页 2 1. 酵母菌、 乳酸菌、 芽孢杆菌固体发酵的增效剂， 其特征在于 ： 包括以下组成成分 ： 赖 氨酸0.2-3g/L、 山梨糖醇100-500g/L、 海藻糖600-1000g/L、 硫酸钴0.023-0.12g/L、 硫酸锌 0.1-0.45g/L、 酵母硒 0.1-0.5g/L、 甘露聚糖酶 100000-200000U/L。 2. 根据权利要求 1 所述的酵母菌、 乳酸菌、 芽孢。
4、杆菌固体发酵的增效剂， 其特征在于 ： 用于在酵母菌、 乳酸菌、 芽孢杆菌发酵过程中的用途 ； 所述的酵母菌、 乳酸菌、 芽孢杆菌为 ： 酿酒酵母菌、 植物乳杆菌、 枯草芽孢杆菌中的一种或两种或三种的混合菌。 3. 根据权利要求 1 所述的酵母菌、 乳酸菌、 芽孢杆菌固体发酵的增效剂， 其特征在于 ： 在发酵前按照 0.2-1.8 (v/w) 的添加量， 添加到固体培养基中 ； 添加前， 需要先配制成水 溶液， 再添加到固体培养基中。 4. 根据权利要求 3 所述的酵母菌、 乳酸菌、 芽孢杆菌固体发酵的增效剂， 其特征在于 ： 所用的固体培养基为 ： 麸皮 70-85、 豆粕 5-10、 玉米。
5、粉 5-10、 红糖 0.5-3、 酵母粉 0.5-2、 生物素 0.01-0.04， pH 自然。 5. 根据权利要求 1 或 2 或 3 或 4 所述的酵母菌、 乳酸菌、 芽孢杆菌固体发酵的增效剂， 其特征在于 ： 其发酵方法为 ： 第一步 ： 配置固体培养基 按照添加比例称取各组分原料并混合均匀 ； 麸皮 70-85、 豆粕 5-10、 玉米粉 5-10、 红糖 0.5-3、 酵母粉 0.5-2、 生物素 0.01-0.04 ； 第二步 ： 配置增效剂溶液 配制增效剂水溶液， 使各组分浓度为赖氨酸 0.2-3g/L、 山梨糖醇 100-500g/L、 海藻糖 600-1000g/L、 硫。
6、酸钴 0.023-0.12g/L、 硫酸锌 0.1-0.45g/L、 酵母硒 0.1-0.5g/L、 甘露聚糖 酶 100000-200000U/L ； 第三步 ： 将增效剂加入固体培养基中 按照 0.2-1.8 (v/w) 的增效剂添加量， 计算需要添加的增效剂溶液的体积 ； 量取增 效剂水溶液先混合入一定体积的蒸馏水中， 使得发酵的料水比为 1 0.6-1.0 ； 搅拌均匀后 再将增效剂、 种子液和蒸馏水混合液拌入第一步配好的固体培养基中， pH 自然 ； 发酵温度 30-37， 发酵时间为 48-60h。 权 利 要 求 书 CN 104140946 A 2 1/4 页 3 酵母菌、 乳。
7、酸菌、 芽孢杆菌固体发酵的增效剂 技术领域 ： 0001 本发明涉及一种增效剂， 特别涉及一种酵母菌、 乳酸菌、 芽孢杆菌固体发酵的增效 剂。 背景技术 ： 0002 微生物发酵饲料是以微生物发酵技术为核心生产的动物饲料， 微生物饲料不仅能 够改善饲料营养吸收水平， 降解饲料原料中存在的抗营养物质和可能存在的毒素， 提高营 养物质的含量， 还能大大减少抗生素等药物类添加剂的使用， 提高禽蛋和肉产品等的食品 安全性。 0003 目前利用饲用益生菌发酵生产生物饲料， 大部分都是采用固体发酵技术。使用微 生物发酵饲料一定要保证微生物发酵饲料产品中的活菌数。 发酵产品中活菌数含量高能说 明发酵效果好，。
8、 并且活菌数含量高才能在动物肠道中成为优势菌群， 抑制致病菌的生长繁 殖， 发挥防病治病和助生长的作用。但是由于发酵技术综合水平较差， 发酵产品中杂菌数 高， 发酵周期长， 成本高， 发酵产品存在益生菌活菌数低等问题， 大大降低了生物饲料的效 果。 尤其是对于产品中芽孢杆菌、 酵母菌和乳酸菌此类益生菌来说， 在工业生产中在室温保 存时活菌存留率低、 死亡率高是普遍存在的问题。 发明内容 ： 0004 本发明的目的就是提供酵母菌、 乳酸菌、 芽孢杆菌固体发酵的增效剂， 能有效的克 服现有技术中发酵产品杂菌数高， 发酵周期长， 成本高， 发酵产品存在益生菌活菌数低、 降 低生物饲料的应用效果等问题。
9、 ； 尤其是能解决产品保存过程中芽孢杆菌、 酵母菌和乳酸菌 活菌存留率低这个现实问题。 0005 为实现上述目的， 本发明提供了酵母菌、 乳酸菌、 芽孢杆菌固体发酵的增效剂， 包 括以下组成成分 ： 赖氨酸 0.2-3g/L、 山梨糖醇 100-500g/L、 海藻糖 600-1000g/L、 硫酸钴 0.023-0.12g/L、 硫酸锌 0.1-0.45g/L、 酵母硒 0.1-0.5g/L、 甘露聚糖酶 100000-200000U/L。 0006 用于在酵母菌、 乳酸菌、 芽孢杆菌发酵过程中的用途 ； 所述的酵母菌、 乳酸菌、 芽孢 杆菌为 ： 酿酒酵母菌、 植物乳杆菌、 枯草芽孢杆菌中。
10、的一种或两种或三种的混合菌。 0007 在发酵前按照 0.2-1.8 (v/w) 的添加量， 添加到固体培养基中 ； 添加前， 需要先 配制成水溶液， 再添加到固体培养基中。 0008 所用的固体培养基为 ： 麸皮 70-85、 豆粕 5-10、 玉米粉 5-10、 红糖 0.5-3、 酵母粉 0.5-2、 生物素 0.01-0.04， pH 自然。 0009 酵母菌、 乳酸菌、 芽孢杆菌固体发酵的增效剂， 其发酵方法为 ： 0010 第一步 ： 配置固体培养基 0011 按照添加比例称取各组分原料并混合均匀。麸皮 70-85、 豆粕 5-10、 玉米粉 5-10、 红糖 0.5-3、 酵母粉。
11、 0.5-2、 生物素 0.01-0.04 ； 0012 第二步 ： 配置增效剂溶液 说 明 书 CN 104140946 A 3 2/4 页 4 0013 配制增效剂水溶液， 使各组分浓度为赖氨酸 0.2-3g/L、 山梨糖醇 100-500g/L、 海 藻糖 600-1000g/L、 硫酸钴 0.023-0.12g/L、 硫酸锌 0.1-0.45g/L、 酵母硒 0.1-0.5g/L、 甘露 聚糖酶 100000-200000U/L ； 0014 第三步 ： 将增效剂加入固体培养基中 0015 按照 0.2-1.8 (v/w) 的增效剂添加量， 计算需要添加的增效剂溶液的体积 ； 量取 增。
12、效剂水溶液先混合入一定体积的蒸馏水中， 使得发酵的料水比为10.6-1.0。 搅拌均匀 后再将增效剂、 种子液和蒸馏水混合液拌入第一步配好的固体培养基中， pH 自然。发酵温 度 30-37， 发酵时间为 48-60h。 0016 本发明提供的一种用于固体发酵生物饲料的增效剂具有以下优点 ： 本发明立足于 提高微生物发酵饲料中的益生菌活菌数， 提高发酵饲料产品质量， 缩短发酵时间， 节约生产 成本， 研制了一种用于酵母菌、 芽孢杆菌和乳酸菌单菌 / 混菌固体发酵生物饲料的增效剂。 本发明不仅可以增加酵母菌、 芽孢杆菌或乳酸菌单菌 / 混菌发酵后的益生菌的活菌数量， 缩短发酵时间， 提高生产效率。
13、， 降低发酵成本， 还可以提高酵母菌、 芽孢杆菌和乳酸菌的保 存时间， 增强生物活性， 具有良好的经济、 生态及社会效益。 具体实施方式 ： 0017 下面通过实施例， 对本发明的技术方案做进一步的详细说明。 0018 三种种子液的培养方法 ： 0019 酿酒酵母种子液 ： 从试管斜面上挑取一环酿酒酵母菌种， 接种至麦芽汁培养基， 28、 180rpm 条件下振荡培养 24h， 种子液待用。 0020 植物乳杆菌种子液 ： 从试管斜面上挑取一环植物乳杆菌菌种， 接种至 MRS 培养基， 37静置培养 24h， 种子液待用。 0021 枯草芽孢杆菌种子液 ： 从试管斜面上挑取一环枯草芽孢杆菌菌种。
14、， 接种至肉汤培 养基， 37、 180rpm 条件下振荡培养 20h， 种子液待用。 0022 实施例 1 ： 0023 酵母菌、 乳酸菌、 芽孢杆菌固体发酵的增效剂， 包括以下组成成分 ： 赖氨酸 0.28g/ L、 山梨糖醇150g/L、 海藻糖300g/L、 硫酸钴0.03g/L、 硫酸锌0.3g/L、 酵母硒0.1g/L、 甘露聚 糖酶 110000U/L ； 混合均匀， 加入水至完全溶解 ； 在发酵前按照 1.2 v/w 的添加量， 添加到 固体培养基中 ； 0024 固体培养基为麸皮 80、 豆粕 10、 玉米粉 7、 红糖 1.5、 酵母粉 1.47、 生物 素 0.03的培养。
15、基中， pH 自然 ； 再加入水和种子液 (5接种量 )， 料水比 1 0.6， 发酵温 度为 30， 发酵池中堆放发酵时间 48h。 0025 所述的酵母菌、 乳酸菌、 芽孢杆菌为 ： 酿酒酵母菌、 植物乳杆菌、 枯草芽孢杆菌的混 合菌 ( 三种种子液体积比 1 1 1)。 0026 实施例 2 ： 0027 酵母菌、 乳酸菌、 芽孢杆菌固体发酵的增效剂， 包括以下组成成分 ： 赖氨酸 1.5g/ L、 山梨糖醇 320g/L、 海藻糖 600g/L、 硫酸钴 0.08g/L、 硫酸锌 0.25g/L、 酵母硒 0.3g/L、 甘露 聚糖酶 160000U/L ； 混合均匀， 加入水至完全溶。
16、解 ； 在发酵前按照 1.0 v/w 的添加量， 添加 到固体培养基中 ； 说 明 书 CN 104140946 A 4 3/4 页 5 0028 固体培养基为 ： 麸皮 76、 豆粕 9、 玉米粉 10、 红糖 2.98、 酵母粉 2、 生物 素 0.02， pH 自然 ； 再加入水和种子液 (5接种量 )， 料水比 1 0.8， 发酵温度为 30， 发 酵池中堆放发酵时间 48h。 0029 所述的菌为 ： 酿酒酵母菌、 植物乳杆菌的混合菌 ( 两种种子液体积比 1 1)。 0030 实施例 3 ： 0031 酵母菌、 乳酸菌、 芽孢杆菌固体发酵的增效剂， 包括以下组成成分 ： 赖氨酸 3。
17、g/L、 山梨糖醇500g/L、 海藻糖1000g/L、 硫酸钴0.1g/L、 硫酸锌0.45g/L、 酵母硒0.45g/L、 甘露聚 糖酶 200000U/L ； 混合均匀， 加入水至完全溶解 ； 在发酵前按照 0.7 v/w 的添加量， 添加到 固体培养基中 ； 0032 固体培养基为 ： 麸皮 85、 豆粕 6、 玉米粉 7、 红糖 0.56、 酵母粉 1.4、 生物 素 0.04， pH 自然 ； 再加入水和种子液 (5接种量 )， 料水比 1 0.8， 发酵温度 32， 发酵 池中堆放发酵时间 48h。 0033 所述的菌为 ： 枯草芽孢杆菌、 植物乳杆菌的混合菌 ( 两种种子液体积。
18、比 1 1)。 0034 实施例 4 ： 0035 酵母菌、 乳酸菌、 芽孢杆菌固体发酵的增效剂， 包括以下组成成分 ： 赖氨酸 2.2g/ L、 山梨糖醇430g/L、 海藻糖960g/L、 硫酸钴0.03g/L、 硫酸锌0.1g/L、 酵母硒0.5g/L、 甘露聚 糖酶 200000U/L ； 混合均匀， 加入水至完全溶解 ； 在发酵前按照 0.3 v/w 的添加量， 添加到 固体培养基中 ； 0036 固体培养基为 ： 麸皮 78、 豆粕 10、 玉米粉 10、 红糖 0.9、 酵母粉 1.065、 生物素 0.035， pH 自然 ； 加入水和种子液 (5接种量 )， 料水比 1 1，。
19、 发酵温度为 30， 发酵池中堆放发酵时间 48h。 0037 所述的菌为 ： 酿酒酵母菌。 0038 实施例 5 ： 0039 酵母菌、 乳酸菌、 芽孢杆菌固体发酵的增效剂， 包括以下组成成分 ： 赖氨酸 0.2g/ L、 山梨糖醇100g/L、 海藻糖800g/L、 硫酸钴0.1g/L、 硫酸锌0.35g/L、 酵母硒0.4g/L、 甘露聚 糖酶 190000U/L ； 加入水至完全溶解 ； 在发酵前按照 1.7 v/w 的添加量， 添加到固体培养 基中 ； 0040 在发酵前按照 (v/w) 的添加量， 加入水至完全溶解后， 添加到固体培养基中 ； 所 用的固体培养基为 ： 麸皮 84、。
20、 豆粕 5、 玉米粉 9、 红糖 0.5、 酵母粉 1.49、 生物素 0.01， pH 自然 ； 加入水和种子液 (5接种量 )， 料水比 1 0.8， 发酵温度为 35， 发酵池 中堆放发酵时间 48h ； 0041 所述的菌为 ： 植物乳杆菌。 0042 下面通过具体的实验来说明本发明的显著功效 ： 0043 通过加速试验测定发酵产品的存放时间。选择 40 2、 RH75 5条件下 进行 6 个月存放试验。在试验期间第 0、 1、 2、 3、 6 个月末取样检测考察指标。其中 1 为添加 了本发明酵母菌、 乳酸菌、 芽孢杆菌固体发酵的增效剂进行的固体发酵产品， 2 为未添加本 发明常规固。
21、体发酵产品。 0044 说 明 书 CN 104140946 A 5 4/4 页 6 0045 由实验结果可知， 在固体培养基中按一定比例加入由赖氨酸、 山梨糖醇、 海藻糖、 硫酸钴、 硫酸锌、 酵母硒、 甘露聚糖酶组成的增效剂， 可以使酿酒酵母、 植物乳杆菌和枯草芽 孢杆菌单菌 / 混菌固体发酵时， 大大增加最终发酵产品中的活菌数， 缩短发酵时间， 并且， 添加本发明中的增效剂可以提高发酵产品中益生菌活菌 ( 酵母菌、 乳酸菌和芽孢杆菌 ) 的 保存时间。因此， 本发明中的增效剂对于提高单菌 / 混菌固体发酵生产的生物饲料的质量 和活性有很大的增效作用， 具有良好的经济、 生态及社会效益。 0046 最后所应该说明的是， 以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制， 尽管 参照最佳实施例对本发明进行了详细说明， 本领域的普通技术人员应当理解， 可以对本发 明的技术方案进行修改或等同替换， 而不脱离本发明技术方案的精神和范围。 说 明 书 CN 104140946 A 6 。