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一种猪精液的保存液
    【技术领域】

    本发明涉及一种精液保存液，特别涉及一种猪精液的保存液，属于动物繁殖技术领域。

    技术背景

    人工授精可以说是提高畜禽繁殖率最重要的管理工作。自20世纪初，丹麦的种马育种者Sand和Stribolt将人工授精用作商业性工具以最大限度地利用优良种马精液以来，人工授精技术在马、家禽、牛和绵羊生产上被大规模应用。

    人工受精技术具有以下优点：1.利用来自遗传学上的优良种畜(禽)精液给众多的母畜(禽)进行授精，使得遗传改良速度得到显著的提高；2.通过控制某些病原体的传播来改善畜禽的健康、提高猪场的生物安全水平；3.减少公畜(禽)地饲养量，降低生产成本。

    精液的保存技术是人工受精得以实现的关键技术之一。现行的精液保存方法，可分为常温(15-25℃)保存、低温(0-5℃)保存和超低温(-79～196℃)保存三种。其中，常温保存(15-25℃)是将精液保存在一定变动幅度的室温下，所以亦称变温保存或室温保存。由于猪精子对低温非常敏感，特别是从体温急剧降温至10-0℃，会使精子发生不可逆的冷休克现象，因此，低温保存和超低温保存在生产中较少应用。而常温保存所需的设备简单，便于普及推广，特别适宜于猪全份精液保存。

    但是，在常温保存的温度条件(15-25℃)下，降低精子的新陈代谢和抑制微生物的生长都比较困难，猪精液稀释与保存液的质量直接影响到精子存活时间。现有的猪精液常温保存液存在着保存时间较短，导致精液大量浪费；同时，国外进口的猪精液保存液价格昂贵，不能满足中国广大农村和牧区的需求。

    【发明内容】

    本发明针对现有技术中存在的不足，旨在提供一种能够有效保存猪精液、延长精液保存时间且成本较低的猪精液保存液。

    为此，本发明采用如下技术方案：

    一种猪精液的保存液，其特征在于其组分配比(按重量计)为：无水葡萄糖25.5～35.0g/l，二水合柠檬酸三钠5.1～7.0g/l，碳酸氢钠1～10g/l，EDTA 2～4g/l，氯化钾1～3g/l，柠檬酸2.4～3.4g/l，TRIS(三羟甲基氨基甲烷)8.5～9.5g/l，AMK(阿米卡星)0.26～1g/l，V-C(维生素C)0.2～1g/l。

    作为优选的组分配比(按重量计)为：无水葡萄糖30.0～35.0g/l，二水合柠檬酸三钠6.2～7.0g/l，碳酸氢钠4～10g/l，EDTA 3～4g/l，氯化钾2～3g/l，柠檬酸3.0～3.4g/l，TRIS 8.7～9.2g/l，AMK 0.6～1g/l，V-C 0.6～1g/l。

    作为优选，本发明还可以包括浓度为5×10-6～5×10-5mol/l的褪黑素(Melatonin，MLT)。

    作为优选，所述褪黑素的浓度为1×10-5mol/l。

    用本发明的猪精液保存液保存的猪精液，经检测其精子活力达到0.60-0.85，精子顶体完整率达到90％，超过目前人工受精的要求。

    【具体实施方式】

    实施例1：一种猪精液的保存液，其组分配比(按重量计)为：无水葡萄糖25.5g/l，二水合柠檬酸三钠5.1g/l，碳酸氢钠2g/l，EDTA 2g/l，氯化钾1g/l，柠檬酸2.4g/l，TRIS 8.5g/l，AMK 0.26g/l，V-C 0.2g/l。

    制备方法：

    (1)分别计量称取无水葡萄糖25.5g，二水合柠檬酸三钠5.1g，碳酸氢钠2g，EDTA 2g，氯化钾1g，柠檬酸2.4g，TRIS 8.5g，AMK 0.26g，V-C 0.2g；

    (2)将步骤(1)的组分置入容器内，加蒸馏水溶解至1升，摇匀；

    (3)将步骤(2)得到的溶液过滤，得到保存液，调节PH值至7.2-7.4；

    (4)使用时，以1份精液加2份保存液的比例使用，并保存在16～22℃的温度环境下。

    实施例2：一种猪精液的保存液，其组分配比(按重量计)为：无水葡萄糖35.0g/l，二水合柠檬酸三钠7.0g/l，碳酸氢钠10g/l，EDTA 4g/l，氯化钾3g/l，柠檬酸3.4g/l，TRIS 9.5g/l，AMK 1g/l，V-C 1g/l。

    制备方法同实施例1。

    实施例3：一种猪精液的保存液，其组分配比(按重量计)为：无水葡萄糖30.0g/l，二水合柠檬酸三钠6.0g/l，碳酸氢钠5.5g/l，EDTA 3g/l，氯化钾2g/l，柠檬酸3.0g/l，TRIS 9.0g/l，AMK 0.6g/l，V-C 0.6g/l。

    制备方法同实施例1。

    实施例4：一种猪精液的保存液，其组分配比(按重量计)为：无水葡萄糖32.5g/l，二水合柠檬酸三钠6.7g/l，碳酸氢钠6g/l，EDTA 3g/l，氯化钾2.5g/l，柠檬酸3.0g/l，TRIS 9.0g/l，AMK 0.7g/l，V-C 0.8g/l。

    制备方法同实施例1。

    实施例5：在实施例4的基础上加入浓度为1×10-5mol/l的褪黑素(Melatonin，MLT)。

    本发明不同实施例的保存液，保存猪精液的效果如表1和表2所示(以BTS精液保存液配方为对照)：

    表1猪精液保存7天后精子活力和顶体完整率

     保存液编号  精子活力  精子顶体完整率 实施例1的保存液  0.60  0.89 实施例2的保存液  0.63  0.88

     保存液编号  精子活力  精子顶体完整率 实施例3的保存液  0.70  0.89 实施例4的保存液  0.75  0.90 实施例5的保存液  0.85  0.92 对照(BTS)  0.47  0.81

    表2本发明的保存液与BTS保存液对人工受精与自然交配效果比较

    最后，还需要注意的是，以上列举的仅是本发明的若干具体实施例。若本领域普通技术人员从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本发明的保护范围。