《一种利用鸭血生产小分子血肽的方法.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《一种利用鸭血生产小分子血肽的方法.pdf（4页珍藏版）》请在专利查询网上搜索。
1、(10)申请公布号 CN 102911990 A (43)申请公布日 2013.02.06 CN 102911990 A *CN102911990A* (21)申请号 201210357150.9 (22)申请日 2012.09.24 C12P 21/06(2006.01) C07K 1/34(2006.01) (71)申请人 南昌大学 地址 330031 江西省南昌市红谷新区学府大 道 999 号 (72)发明人 刘伟 刘成梅 杨水兵 钟业俊 吴孛 徐慧 (74)专利代理机构 南昌市平凡知识产权代理事 务所 36122 代理人 夏材祥 (54) 发明名称 一种利用鸭血生产小分子血肽的方法 (。
2、57) 摘要 一种利用鸭血生产小分子血肽的方法， 是以 肉鸭加工副产物鸭血为原料， 运用抗凝抗氧化技 术、 冷热变温交替技术和动态超高压技术、 阶段酶 解技术、 酶解上清液脱色处理、 膜分级分离技术以 及喷雾干燥等技术集成， 研发特定分子量范围具 有生理活性的小分子血肽。使用本发明的生产工 艺制得的小分子血肽 ： 平均肽链长度为 2.9-3.5 个氨基酸残基， 分子量分布范围为 1000-3000d， 小肽含量 35%。本发明所述生产工艺不仅提高 了产品的附加值， 对鸭血资源进行了全效综合利 用， 而且生产过程中无污染物排放， 可达到无环境 污染的生态效益。 (51)Int.Cl. 权利要求书。
3、 1 页 说明书 2 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 2 页 1/1 页 2 1. 一种利用鸭血生产小分子血肽的方法， 其特征是 ： （1） 鸭血的抗凝抗氧化处理 ： 采用 2 g/L 的抗坏血酸作为抗氧化剂， 添加量为血量的 0.05%-0.1% ； 以及 4 g/L 的柠檬酸三钠作为抗凝剂， 添加量为血量的 16.7% ； （2） 离心处理 ： 采用 4000r/min 离心 30min， 上清液为血浆， 离心沉淀物为血细胞 ； （3） 血细胞的溶血破胞 ： 将步骤 （2） 离心处理获得的沉淀物血细胞通过冷热交替变温 即-20和9。
4、0的方法使部分血细胞溶血， 之后在120MPa动态超高压微射流均质机下处理 1 次进行破胞得到血红蛋白 ； （4） 阶段酶解的控制 ： 分两个阶段， 第一阶段在 pH 8.5， 温度 55下， 采用 0.5% 的碱性 蛋白酶酶解 2.5h ； 第二阶段在 pH 值 7.0， 反应温度 50， 采用 0.3% 中性蛋白酶和 0.2% 风 味蛋白酶同步酶解时间 4.8h， 得到深度酶解液 ； （5） 灭酶、 离心 ： 将步骤 （4） 酶解得到的酶解液升温至 85加热 30min 进行灭酶处理， 将灭酶处理后的溶液进行离心， 将血浆蛋白粗粗提液的 pH 值调至 4.5， 静置 2h， 4000r/m。
5、in 离心 30 min， 收集沉淀 ； 上清液为血肽溶液， 离心沉淀物为血红素 ； （6） 血肽的脱苦脱色处理 ： 将步骤 （5） 灭酶离心得到的上清液进行脱苦脱色处理， 在 pH4.0， 温度为 50时， 使用 2% 羧甲基淀粉钠对酶解上清液处理 1h ； （7）小分子血肽的反渗透超滤分级纯化 ： 在操作压力 29psi 下， 使用截留分子量为 3000Da 的多功能分级分离设备对小分子血肽进行纯化， 可得到不同分子量段的小分子血 肽 ； （8） 小分子血肽的喷雾干燥 ： 将步骤 （7） 小分子血肽的分级纯化的溶液调整到浓度在 25% 30%， 小分子血肽的干燥条件为进风温度为 175-1。
6、80， 出风温度为 90-95， 获得小 分子血肽粉产品。 权 利 要 求 书 CN 102911990 A 2 1/2 页 3 一种利用鸭血生产小分子血肽的方法 技术领域 0001 本发明涉及一种以鸭血为原料综合生产小分子血肽的方法， 属于农副产品精 加工技术和食品营养领域。 背景技术 0002 畜禽血液是一种营养价值很高的食品， 素有 “液态肉” 之称， 它富含蛋白质和微量 元素 ( 如铁 )， 以及适量矿物质、 维生素、 激素、 酶系和其它一些生理活性物质。畜禽血分 为血浆和血细胞， 其中血浆的蛋白质含量为全血蛋白质总量的 25% 左右， 血细胞的蛋白质 含量为 l5% 左右。据资料， 。
7、我国每年家禽出栏数超过 90 亿羽， 并且年存栏量和出栏量基本 上保持 5 10的增长率， 通常屠宰一只家禽， 约可收集 0.1kg 血液， 每年肉鸭加工过程中 产生的禽血每年达 5000 多吨， 但是目前我国畜禽血液副产物加工技术落后， 产业化程度较 低， 除部分以血粉、 血豆腐或饲料原料等初级加工形式利用之外， 相当一部分以污水的形式 排放或丢弃， 利用率不到 10%， 致使大量宝贵营养资源流失， 且造成严重的环境污染。 0003 近年来 , 美国、 日本、 英国、 德国等发达国家先后利用畜血生产食品添加剂、 保健 品及药品等。目前市场上少量的血肽素产品是氨基酸、 血肽和血红素的复合物， 。
8、纯度低， 功 效不明， 应用受限， 只能是初级产品， 本发明采用的技术方案不以复合物血肽素为主要产 品， 而是在生产过程中， 通过综合工艺路线， 生产小分子血肽。 0004 该技术方案不仅提高了产品的附加值， 对鸭血资源进行了全效综合利用， 而且生 产过程中无污染物排放， 可达到无环境污染的生态效益。目前对鸭血综合利用生产多功能 小分子血肽的工艺未见国内文献公开报道。 发明内容 0005 本发明的目的是针对现有技术的不足， 提供一种生产特定分子量范围具有生理活 性的小分子血肽的工艺。 0006 本发明采取的技术方案是， 对鸭血采用抗凝抗氧化处理、 冷热变温交替处理和动 态超高压处理进行血细胞破。
9、胞、 阶段酶解对血细胞进行水解、 等电点沉淀对酶解沉淀物除 杂、 酶解上清液脱色处理、 反渗透进行浓缩脱盐、 膜分级分离进行分离纯化、 喷雾干燥等技 术集成， 生产特定分子量范围具有生理活性的小分子血肽。 0007 本发明的工艺步骤为 ： （1） 鸭血的抗凝抗氧化处理 ： 采用 2 g/L 的抗坏血酸作为抗氧化剂， 添加量为血量的 0.05%-0.1% ； 以及 4 g/L 的柠檬酸三钠作为抗凝剂， 添加量为血量的 16.7% ； （2） 离心处理 ： 采用 4000r/min 离心 30min， 上清液为血浆， 离心沉淀物为血细胞 ； （3） 血细胞的溶血破胞 ： 将步骤 （2） 离心处理获。
10、得的沉淀物血细胞通过冷热交替变温 即-20和90的方法使部分血细胞溶血， 之后在120MPa动态超高压微射流均质机下处理 1 次进行破胞得到血红蛋白 ； （4） 阶段酶解的控制 ： 分两个阶段， 第一阶段在 pH 8.5， 温度 55下， 采用 0.5% 的碱性 说 明 书 CN 102911990 A 3 2/2 页 4 蛋白酶酶解 2.5h ； 第二阶段在 pH 值 7.0， 反应温度 50， 采用 0.3% 中性蛋白酶和 0.2% 风 味蛋白酶同步酶解时间 4.8h， 得到深度酶解液 ； （5） 灭酶、 离心 ： 将步骤 （4） 酶解得到的酶解液升温至 85加热 30min 进行灭酶处理。
11、， 将灭酶处理后的溶液进行离心， 将血浆蛋白粗粗提液的 pH 值调至 4.5， 静置 2h， 4000r/min 离心 30 min， 收集沉淀 ； 上清液为血肽溶液， 离心沉淀物为血红素 ； （6） 血肽的脱苦脱色处理 ： 将步骤 （5） 灭酶离心得到的上清液进行脱苦脱色处理， 在 pH4.0， 温度为 50时， 使用 2% 羧甲基淀粉钠对酶解上清液处理 1h ； （7）小分子血肽的反渗透超滤分级纯化 ： 在操作压力 29psi 下， 使用截留分子量为 3000Da 的多功能分级分离设备对小分子血肽进行纯化， 可得到不同分子量段的小分子血 肽 ； （8） 小分子血肽的喷雾干燥 ： 将步骤 （。
12、7） 小分子血肽的分级纯化的溶液调整到浓度在 25% 30%， 小分子血肽的干燥条件为进风温度为 175-180， 出风温度为 90-95， 获得小 分子血肽粉产品。 0008 本发明的有益效果是 ： 本发明所述生产工艺不仅提高了产品的附加值， 对鸭血资 源进行了全效综合利用， 而且生产过程中无污染物排放， 可达到无环境污染的生态效益。 具体实施方式 0009 本发明的工艺步骤为 ： （1） 鸭血的抗凝抗氧化处理 ： 采用 2 g/L 的抗坏血酸作为抗氧化剂， 添加量为血量的 0.05%-0.1% ； 以及 4 g/L 的柠檬酸三钠作为抗凝剂， 添加量为血量的 16.7% ； （2） 离心处理。
13、 ： 采用 4000r/min 离心 30min， 上清液为血浆， 离心沉淀物为血细胞 ； （3） 血细胞的溶血破胞 ： 将步骤 （2） 离心处理获得的沉淀物血细胞通过冷热交替变温 即-20和90的方法使部分血细胞溶血， 之后在120MPa动态超高压微射流均质机下处理 1 次进行破胞得到血红蛋白 ； （4） 阶段酶解的控制 ： 分两个阶段， 第一阶段在 pH 8.5， 温度 55下， 采用 0.5% 的碱性 蛋白酶酶解 2.5h ； 第二阶段在 pH 值 7.0， 反应温度 50， 采用 0.3% 中性蛋白酶和 0.2% 风 味蛋白酶同步酶解时间 4.8h， 得到深度酶解液 ； （5） 灭酶、。
14、 离心 ： 将步骤 （4） 酶解得到的酶解液升温至 85加热 30min 进行灭酶处理， 将灭酶处理后的溶液进行离心， 将血浆蛋白粗粗提液的 pH 值调至 4.5， 静置 2h， 4000r/min 离心 30 min， 收集沉淀 ； 上清液为血肽溶液， 离心沉淀物为血红素 ； （6） 血肽的脱苦脱色处理 ： 将步骤 （5） 灭酶离心得到的上清液进行脱苦脱色处理， 在 pH4.0， 温度为 50时， 使用 2% 羧甲基淀粉钠对酶解上清液处理 1h ； （7）小分子血肽的反渗透超滤分级纯化 ： 在操作压力 29psi 下， 使用截留分子量为 3000Da 的多功能分级分离设备对小分子血肽进行纯化， 可得到不同分子量段的小分子血 肽 ； （8） 小分子血肽的喷雾干燥 ： 将步骤 （7） 小分子血肽的分级纯化的溶液调整到浓度在 25% 30%， 小分子血肽的干燥条件为进风温度为 175-180， 出风温度为 90-95， 获得小 分子血肽粉产品。 说 明 书 CN 102911990 A 4 。