免疫调节剂相关申请的交叉引用
根据35U.S.C.§119(e)，本申请要求2014年6月6日提交的美国临时申请62/008,947的
优先权，通过引用的方式将其全部内容并入申请。
在联邦资助的研究和开发下所作的发明的权利声明
不适用
对在光盘上提交的“序列表”、表格或计算机程序列表附录的引用
不适用
背景技术
吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO；也称为IDO1)为在免疫调节中起作用的IFN-γ靶基因。IDO
为氧化还原酶以及催化在将色氨酸转化为N-甲酰基-犬尿氨酸的第一和限速步骤的两种酶
之一。它以在若干细胞群中发现的41kD单体存在，所述细胞群包括免疫细胞、内皮细胞和成
纤维细胞。IDO在物种之间相对非常保守，其中小鼠和人在氨基酸水平上共享63％的序列同
一性。得自其晶体结构和定点诱变的数据显示，底物结合以及底物与铁结合的双加氧酶之
间的关系均对于活性而言是必需的。已经鉴定了与IDO享有44％氨基酸序列同源性的IDO
(IDO2)同源物，但其功能与IDO的功能大为不同。(参见，例如，Serafini P,et al.,Semin
Cancer Biol.2006Feb:16(1):53-65and Ball HJ,et al.,Gene.2007Jul 1:396(1):203-
13)。
IDO在免疫调节中起主要作用，且其免疫抑制功能以多种方式表现。重要的是，IDO以T
细胞水平调节免疫，并且在IDO和细胞因子产生之间存在联系。另外，肿瘤通常通过上调IDO
来操控免疫功能。因此，IDO的调节可对许多疾病、障碍和病症具有治疗影响。
IDO和癌症之间存在病理生理学联系。免疫内稳定的破坏与肿瘤生长和进展密切相关，
并且肿瘤微环境中IDO的产生似乎有助于肿瘤生长和转移。此外，增加的IDO活性水平与多
种不同的肿瘤相关(Brandacher G.et al.,Clin Cancer Res.2006Feb 15；12(4):1144-
51)。
癌症的治疗通常需要手术切除，接着进行化学疗法和放射疗法。标准治疗方案显示出
高度不同程度的长期成功，因为肿瘤细胞具有通过再生原发性肿瘤生长并且通常更重要的
是播种远处转移而基本上逃逸的能力。癌症和癌症相关疾病、障碍和病症的治疗的最近进
展包括使用将免疫疗法与更传统的化学疗法和放射疗法结合的组合疗法。在大多数情况
下，免疫疗法与传统化学疗法相比具有较低的毒性，因为它利用患者自身的免疫系统来鉴
定和消除肿瘤细胞。
除了癌症之外，IDO还涉及免疫抑制、慢性感染和自身免疫性疾病或病症(例如，类风湿
性关节炎)等疾病。因此，通过抑制IDO活性而抑制色氨酸降解具有巨大的治疗价值。此外，
当T细胞被妊娠、恶性肿瘤或病毒(例如，HIV)抑制时，IDO抑制剂可用于增强T细胞活化。虽
然它们的作用不是很明确，但IDO抑制剂也可用于治疗患有神经性或神经精神性疾病或病
症(例如，抑郁症)的患者。
已经开发了IDO的小分子抑制剂来治疗或预防IDO相关疾病。例如，IDO抑制剂1-甲基-
DL-色氨酸；p-(3-苯并呋喃基)-DL-丙氨酸；对-[3-苯并(b)噻吩基]-DL-丙氨酸；和6-硝基-
L-色氨酸已经用于通过改变色氨酸和色氨酸代谢物的局部细胞外浓度来调节T细胞介导的
免疫(WO 99/29310)。具有IDO抑制活性的化合物在WO 2004/094409中被进一步报道。
鉴于吲哚胺2,3-双加氧酶在各种疾病、障碍和病症中的作用以及当前IDO抑制剂的局
限性(例如，功效)，需要新型IDO调节剂和组合物及与其相关的方法。
发明内容
本发明涉及调节氧化还原酶吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)的化合物和包含所述化合物的
组合物(例如，药物组合物)。所述化合物，包括其合成方法，以及组合物在下文详细描述。
本发明还涉及所述化合物和组合物用于治疗和/或预防由IDO全部或部分介导的多种
疾病、障碍和病症的用途。所述疾病、障碍和病症在本申请他处详细描述。除非另有说明，否
则当在本申请中描述本发明化合物的用途时，应理解所述化合物可呈组合物(例如，药物组
合物)的形式。
如下所述，虽然认为本发明的化合物通过抑制IDO来实现其活性，但是实施本发明不需
要精确理解所述化合物的潜在作用机理。据设想，所述化合物可通过抑制色氨酸-2,3-双加
氧酶(TDO)活性来选择性地实现其活性。还设想所述化合物可通过抑制IDO和TDO两者功能
来实现其活性。尽管本发明的化合物在本申请中通常称为IDO抑制剂，但应理解，术语“IDO
抑制剂”涵盖通过抑制TDO或IDO单独起作用的化合物，和/或通过抑制IDO和TDO两者起作用
的化合物。
在一方面，本发明提供由式(I)表示的化合物：
或其药用盐、水合物或溶剂化物。
在式(I)中，X1和X2表示独立选择的取代基，其选自氢、卤素、CN、SO2NH2、NHSO2CH3、
NHSO2CF3、OCF3、SO2CH3、SO2CF3、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的C1-C4烷氧基、卤代C1-C4烷
基、环丙基和CONH2。另外，当X1和X2在苯环的相邻顶点时，它们任选地一起连接形成任选取
代的含有0、1或2个杂原子的5-或6-元芳族或脂族环。
R1和R2独立地选自氢、任选取代的C1-C8烷基、任选取代的C3-C8环烷基、任选取代的C3-
C8环烷基-C1-C4烷基、任选取代的3-至7-元环杂烷基、任选取代的卤代C1-C4烷基、羟基、任选
取代的芳基和任选取代的杂芳基；和R1和R2任选地一起连接形成任选取代的C3-C8环烷基或
任选取代的3-至7-元环杂烷基，前提条件是R1和R2不一起连接形成未经取代的环己烷环，并
且R1和R2中至少一个不为氢。
在另一方面，本发明提供由式(II)表示的化合物：
或其药用盐、水合物或溶剂化物。
在式(II)中，虚线表示环顶点之间的单键或双键；X1、X2和X3为独立地选自以下的取代
基：氢、卤素、CN、SO2NH2、NHSO2CH3、NHSO2CF3、OCF3、SO2CH3、SO2CF3、任选取代的C1-C4烷基、任
选取代的C1-C4烷氧基、卤代C1-C4烷基、环丙基和CONH2；并且当X1和X2在苯环的相邻顶点时，
它们任选地一起连接形成任选取代的含有0、1或2个杂原子的5-或6-元芳族或脂族环；R3选
自氢、任选取代的C1-C8烷基、任选取代的C3-C8环烷基、任选取代的C3-C8环烷基-C1-C4烷基、
任选取代的3-至7-元环杂烷基、任选取代的卤代C1-C4烷基、任选取代的芳基和任选取代的
杂芳基；B选自键、C(O)、任选取代的C1-C8烷基和任选取代的C2-C8杂烷基；A选自O、C、CR4、N和
NR4；每个R4独立地选自氢、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤代C1-C4烷基和羟基；R5选自氢、羟基、
CH3和CF3；当A为O时，下标m为0，且当A为选自N、NR4和CR4时，m为1；并且下标n为0或1，其表明
具有作为环顶点的A的环为五元或六元环。
在另一方面，本发明提供了其中式(I)或(II)的化合物或其组合与一种或多种药用赋
形剂组合的组合物。
在一些实施方案中，本发明涵盖用于治疗或预防受试者(例如，人)中的癌症的方法，所
述方法包括向受试者给予治疗有效量的至少一种本申请所述的IDO抑制剂。本发明包括通
过向受试者给予有效逆转或停止IDO介导的免疫抑制的进展的量的IDO抑制剂来治疗或预
防受试者中的癌症的方法。在一些实施方案中，IDO介导的免疫抑制由抗原递呈细胞(APC)
介导。
可使用本申请所述的化合物和组合物治疗的癌症的实例包括但不限于：前列腺癌、结
肠直肠癌、胰腺癌、子宫颈癌、胃癌、子宫内膜癌、脑癌、肝癌、膀胱癌、卵巢癌、睾丸癌、头部
癌、颈部癌、皮肤癌(包括黑素瘤和基底细胞癌)、间皮层癌、白细胞癌(包括淋巴瘤和白血
病)、食道癌、乳腺癌、肌肉癌、结缔组织癌、肺癌(包括小细胞肺癌和非小细胞肺癌)、肾上腺
癌、甲状腺癌、肾癌或骨癌；成胶质细胞瘤、间皮瘤、肾细胞癌、胃癌、肉瘤、绒毛膜癌、皮肤基
底细胞癌和睾丸精原细胞瘤。在本发明的一些实施方案中，癌症为黑素瘤、结肠癌、胰腺癌、
乳腺癌、前列腺癌、肺癌、白血病、脑肿瘤、淋巴瘤、肉瘤、卵巢癌、头颈癌、子宫颈癌或卡波西
肉瘤。作为用本发明的化合物和组合物治疗的候选者的癌症在下文中进一步讨论。
本发明涵盖治疗接受骨髓移植或外周血干细胞移植的受试者的方法，其通过给予治疗
有效量的足以增加对肿瘤抗原的延迟型超敏反应、延迟移植后恶性肿瘤的复发时间、增加
移植后无复发生存时间和/或增加长期移植后存活的IDO抑制剂。
在某些实施方案中，本发明涵盖用于治疗或预防受试者(例如，人)中的感染性病症(例
如，病毒感染)的方法，所述方法包括向受试者给予治疗有效量的至少一种IDO抑制剂(例
如，本发明的新颖抑制剂)。在一些实施方案中，所述感染性病症为病毒感染(例如，慢性病
毒感染)、细菌感染或寄生虫感染。在某些实施方案中，所述病毒感染为人免疫缺陷病毒或
巨细胞病毒。在其它实施方案中，所述细菌感染为分枝杆菌(Mycobacterium)感染(例如，麻
风分枝杆菌(Mycobacterium leprae)或结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis))。
在其它实施方案中，寄生虫感染是杜氏利什曼原虫(Leishmania donovani)、热带利什曼原
虫(Leishmania tropica)、硕大利什曼原虫(Leishmania major)、埃塞俄比亚利什曼原虫
(Leishmania aethiopica)、墨西哥利什曼原虫(Leishmania mexicana)、恶性疟原虫
(Plasmodium falciparum)、间日疟原虫(Plasmodium vivax)、卵形疟原虫(Plasmodium
ovale)或三日疟原虫(Plasmodium malariae)。在进一步的实施方案中，所述感染性病症为
真菌感染。
在其它实施方案中，本发明涵盖用于治疗或预防受试者(例如，人)中的免疫相关疾病、
障碍或病症的方法，所述方法包括向受试者给予治疗有效量的至少一种IDO抑制剂(例如，
优选本发明的新颖抑制剂)。免疫相关疾病、障碍和病症的实例描述于下文中。
可通过调节IDO活性全部或部分治疗或预防的其它疾病、障碍和病症为本申请所述的
IDO抑制剂化合物的候选适应症。
本发明进一步涵盖本申请所述的IDO抑制剂与一种或多种另外的药物组合的用途。所
述一种或多种另外的药物可具有某种IDO调节活性和/或它们可通过不同的作用机制起作
用。在一些实施方案中，所述药物包括放射(例如局部放射疗法或全身放射疗法)和/或非药
理学性质的其它治疗模式。当使用组合疗法时，一种或多种IDO抑制剂和一种另外的药物可
呈单一组合物或多种组合物的形式，并且治疗模式可同时、依序或通过一些其它方案给予。
举例而言，本发明包括一种治疗方案，其中放射阶段之后是化学治疗阶段。组合疗法可具有
累加或协同效应。组合疗法的其它益处在下文中描述。
在一些实施方案中，本发明进一步包括本申请所述的IDO抑制剂与骨髓移植、外周血干
细胞移植或其它类型的移植疗法组合的用途。
在具体的实施方案中，本发明涵盖本申请所述的IDO功能的抑制剂与免疫检查点抑制
剂组合的用途。导致抗原特异性T细胞应答扩增的免疫检查点的阻断已经显示在人类癌症
治疗中是有希望的方法。免疫检查点(配体和受体)的实例，其中一些在各种类型的作为阻
断的候选者的肿瘤细胞中选择性上调，包括PD1(程序性细胞死亡蛋白1)；PDL1(PD1配体)；
BTLA(B和T淋巴细胞衰减子)；CTLA4(细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4)；TIM3(T细胞膜蛋白
3)；LAG3(淋巴细胞激活基因3)；A2aR(腺苷A2a受体A2aR)；和杀伤抑制受体。免疫检查点抑
制剂及其组合治疗在本申请他处详细讨论。
在其它实施方案中，本发明提供了用于治疗受试者中的癌症的方法，所述方法包括向
受试者给予治疗有效量的至少一种IDO抑制剂和至少一种化学治疗剂，所述药物包括但不
限于烷化剂(例如，氮芥类诸如苯丁酸氮芥(chlorambucil)、环磷酰胺
(cyclophosphamide)、异环磷酰胺(isofamide)、氮芥(mechlorethamine)、美法仑
(melphalan)和尿嘧啶氮芥；氮杂环丙烷类诸如噻替派(thiotepa)；甲磺酸酯类诸如白消安
(busulfan)；核苷类似物(例如，吉西他滨(gemcitabine))；亚硝基脲类诸如卡莫司汀
(carmustine)、洛莫司汀(lomustine)和链佐星(streptozocin)；拓扑异构酶(例如，伊立替
康(irinotecan))；铂络合物，诸如顺铂和卡铂；生物还原烷化剂，诸如丝裂霉素
(mitomycin)、丙卡巴肼(procarbazine)、达卡巴嗪(dacarbazine)和六甲蜜胺
(altretamine))；DNA链断裂剂(例如，博来霉素(bleomycin))；拓扑异构酶II抑制剂(例如
安吖啶(amsacrine)、更生霉素(dactinomycin)、柔红霉素(daunorubicin)、伊达比星
(idarubicin)、米托蒽醌(mitoxantrone)、多柔比星(doxorubicin)、依托泊苷(etoposide)
和替尼泊苷(teniposide))；DNA小沟结合剂(例如，肽聚糖(plicamydin))；抗代谢物(例如，
叶酸拮抗剂诸如甲氨蝶呤(methotrexate)和三甲曲沙(trimetrexate)；嘧啶拮抗剂诸如氟
尿嘧啶(fluorouracil)、氟脱氧尿苷(fluorodeoxyuridine)、CB3717、阿扎胞苷
(azacitidine)、阿糖胞苷(cytarabine)和氟尿苷(floxuridine)；嘌呤拮抗剂诸如巯嘌呤
(mercaptopurine)、6-硫鸟嘌呤(6-thioguanine)、氟达拉滨(fludarabine)、喷司他丁
(pentostatin)；天冬酰胺酶(asparginase)；和核糖核苷酸还原酶抑制剂诸如羟基脲
(hydroxyurea))；微管蛋白相互作用剂(例如，长春新碱(vincristine)、雌莫司汀
(estramustine)、长春碱(vinblastine)、多西他赛(docetaxol)、埃博霉素(epothilone)衍
生物和紫杉醇(paclitaxel))；激素药(例如，雌激素(estrogen)；缀合型雌激素；乙炔雌二
醇(ethinyl estradiol)；己烯雌酚(diethylstilbesterol)；胆碱酯酶(chlortrianisen)；
双烯雌酚(idenestrol)；孕激素诸如己酸羟孕酮(hydroxyprogesterone caproate)、甲羟
孕酮(medroxyprogesterone)和甲地孕酮(megestrol)；和雄激素诸如睾酮
(testosterone)、丙酸睾酮、氟甲睾酮(fluoxymesterone)和甲基睾酮)；肾上腺皮质类固醇
(例如，强的松(prednisone)、地塞米松(dexamethasone)、甲基泼尼松龙
(methylprednisolone)和泼尼松龙(prednisolone))；促黄体生成激素释放剂和促性腺激
素释放激素拮抗剂(例如，醋酸亮丙瑞林(leuprolide acetate)和醋酸戈舍瑞林
(goserelin acetate))；和抗激素抗原(例如，他莫昔芬(tamoxifen)、抗雄激素剂诸如氟他
胺(flutamide)；和抗肾上腺剂诸如米托坦(mitotane)和氨鲁米特(aminoglutethimide))。
本发明还包括IDO抑制剂与本领域已知的其它药物(例如，三氧化二砷)和未来开发的其它
化学治疗剂的组合的用途。
在涉及治疗癌症的方法的一些实施方案中，给予治疗有效量的IDO抑制剂与至少一种
化学治疗剂的组合导致癌症存活率大于通过单独给予所观察到的癌症存活率。在涉及治疗
癌症的方法的另外的实施方案中，给予治疗有效量的IDO抑制剂与至少一种化学治疗剂的
组合导致肿瘤尺寸减小或使大于肿瘤尺寸减小的肿瘤生长或通过单独给予一种药物观察
到肿瘤生长减慢。
在进一步的实施方案中，本发明涵盖用于治疗或预防受试者中的癌症的方法，所述方
法包括向受试者给予治疗有效量的至少一种IDO抑制剂和至少一种信号转导抑制剂(STI)。
在一个具体实施方案中，所述至少一种STI选自bcr/abl激酶抑制剂、表皮生长因子(EGF)受
体抑制剂、her-2/neu受体抑制剂和法尼基转移酶抑制剂(FTI)。其它候选STI药物在本申请
他处阐述。
本发明还涵盖增强(augment)受试者中肿瘤细胞排斥的方法，所述方法包括与至少一
种化学治疗剂和/或放射疗法联合给予IDO抑制剂，其中所得肿瘤细胞的排斥大于通过单独
给予IDO抑制剂、化疗剂或放射疗法所获得的肿瘤细胞的排斥。
在进一步的实施方案中，本发明提供了用于治疗受试者中的癌症的方法，所述方法包
括向受试者给予治疗有效量的至少一种IDO抑制剂和除了IDO抑制剂之外的至少一种免疫
调节剂。在具体实施方案中，所述至少一种免疫调节剂选自CD40L、B7、B7RP1、抗-CD40、抗-
CD38、抗-ICOS、4-IBB配体、树突细胞癌症疫苗、IL2、IL12、ELC/CCL19、SLC/CCL21、MCP-1、
IL-4、IL-18、TNF、IL-15、MDC、IFN-α/-β、M-CSF、IL-3、GM-CSF、IL-13和抗-IL-10。其它候选
免疫调节剂在本申请他处阐述。
本发明涵盖包括用于治疗或预防受试者(例如，人)中的感染性病症(例如，病毒感染)
的方法的实施方案，所述方法包括向受试者给予治疗有效量的至少一种IDO抑制剂和治疗
有效量的抗感染剂，
在本发明的一些实施方案中，另外的治疗剂为细胞因子，其包括例如粒细胞-巨噬细胞
集落刺激因子(GM-CSF)或flt3-配体。本发明还涵盖用于治疗或预防病毒感染(例如，慢性
病毒感染)的方法，所述病毒感染包括但不限于丙型肝炎病毒(HCV)、人乳头状瘤病毒
(HPV)、巨细胞病毒(CMV)、Epstein-Barr病毒(EBV)、水痘带状疱疹病毒、柯萨奇病毒和人免
疫缺陷病毒(HIV)感染。在下文中进一步讨论本申请所述的IDO抑制剂用于治疗(单独或作
为组合疗法的组分)感染的用途。
在另外的实施方案中，感染性病症的治疗通过共同给予疫苗与给予治疗有效量的本发
明的IDO抑制剂的组合来实现。在一些实施方案中，所述疫苗为抗病毒疫苗，包括例如抗-
HIV疫苗。在其它实施方案中，所述疫苗对于结核病或疟疾是有效的。在其它实施方案中，所
述疫苗为肿瘤疫苗(例如，对黑素瘤有效的疫苗)；肿瘤疫苗可包含经遗传修饰的肿瘤细胞
或经遗传修饰的细胞系，包括经转染以表达粒细胞-巨噬细胞刺激因子(GM-CSF)的经遗传
修饰的肿瘤细胞或经遗传修饰的细胞系。在具体实施方案中，所述疫苗包括一种或多种免
疫原性肽和/或树突细胞。
在一些实施方案中，本发明涵盖使用本申请公开的IDO抑制剂与一种或多种抗微生物
剂组合的方法。
在涉及通过给予IDO抑制剂和至少一种另外的治疗剂治疗感染的某些实施方案中，在
给予IDO抑制剂和另外的治疗剂两者后观察到的感染的症状相对于在单独给予任一者后所
观察到的感染的相同症状而言是有所改善的。在一些实施方案中，观察到的感染症状可为
病毒载量减少、CD4+T细胞计数增加、机会性感染减少、存活时间增加、根除慢性感染或其组
合。
附图简述
图1提供了用于制备本申请所述化合物的合成方案。
图2A-2H提供了本申请提供的化合物的结构和活性数据。
具体实施方式
在进一步描述本发明之前，应理解本发明不限于本申请所述的具体实施方案，且也应
理解本申请使用的术语仅出于描述具体实施方案的目的，且不意欲为限制性的
在提供数值的范围的情况下，应当理解，除非上下文另有明确说明，否则在该范围的上
限和下限之间的每个中间值(至下限单位的十分之一)，以及在规定范围内的任何其它规定
或中间值，均包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括在较小范围内，并
且也涵盖在本发明内，在规定范围内受到任何特定排他性限制。当规定范围包括一个或两
个限值时，排除这些所包括的限值中的一个或两个的范围也包括在本发明中。除非另有限
定，否则本申请使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常理
解的相同的含义。
必须注意，除非上下文另外明确指出，否则本申请和所附权利要求中使用的单数形式
“一个”、“一种”和“所述”包括复数指代。还应注意，权利要求书可经起草以排除任何任选的
要素。因此，本说明旨在用作使用与权利要求元素的叙述相关的诸如“单独”、“仅仅”等排他
性术语或使用“否定”限制的前提基础。
本申请中讨论的出版物仅提供其在本申请的申请日之前的公开内容。此外，所提供的
公布日期可能不同于实际公布日期，其可能需要独立确认。
一般原则
免疫失调与宿主免疫系统的肿瘤逃逸密切相关，导致肿瘤生长和进展。包括化学疗法
和放射疗法的传统治疗方法对于患者而言通常难以忍受并且随着肿瘤进展以经受住这种
治疗而变得不太有效。通过利用患者自身的免疫系统来鉴定和消除肿瘤细胞，免疫疗法具
有毒性降低的益处。由于免疫调节酶吲哚胺2,3-双加氧酶的上调包括由肿瘤操控以促进生
长的机制，抑制酶活性的药物(例如，小分子化合物)提供了预防和/或治疗的有希望的途
径。
此外，大量实验数据表明IDO抑制在免疫抑制、肿瘤抗性和/或排斥、慢性感染、HIV感染
和自身免疫性疾病或病症中的作用。对于神经性或神经精神性疾病或病症(诸如抑郁症)的
患者，IDO的抑制也可为重要的治疗策略。本申请的化合物、组合物和方法解决了对新类别
的IDO调节剂的需要。
定义
除非另有说明，否则以下术语旨在具有下面给出的含义。其它术语在整个说明书的他
处定义。
除非另有说明，否则术语“烷基”本身或作为另一取代基的一部分意指具有指定碳原子
数(即C1-8意指1至8个碳)的直链或支链烃基。烷基的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、
正丁基、叔丁基、异丁基、仲丁基、正戊基、正己基、正庚基、正辛基等。
术语“环烷基”是指具有指定环原子数(例如，C3-6环烷基)且是完全饱和的或在环顶点
之间具有不超过一个双键的烃环。“环烷基”还意指双环和多环烃环，诸如双环[2.2.1]庚
烷、双环[2.2.2]辛烷等。
术语“环杂烷基”是指具有指定环顶点(或成员)数且具有一至五个选自N、O和S的替换
一至五个碳顶点的杂原子，且其中氮和硫原子任选地被氧化，且氮原子任选地被季铵化的
环烷基环。环杂烷基可为单环、双环或多环系统。环杂烷基的非限制性实例包括吡咯烷、咪
唑烷、吡唑烷、丁内酰胺、戊内酰胺、咪唑啉酮、乙内酰脲、二氧杂环戊烷、邻苯二甲酰亚胺、
哌啶、1,4-二噁烷、吗啉、硫吗啉、硫吗啉-S-氧化物、硫吗啉-S,S-氧化物、哌嗪、吡喃、吡啶
酮、3-吡咯啉、噻喃、吡喃酮、四氢呋喃、四氢噻吩、奎宁环等。环杂烷基可通过环碳或杂原子
连接到分子的其余部分。
本申请使用的与本申请所述的任何化学结构中的单键、双键或三键相交的波浪线
表示单键、双键或三键与分子的其余部分的连接点。另外，延伸到环(例如，苯基环)中
心的键意在表示在任何可用的环顶点处的连接。本领域技术人员应理解，显示为连接到环
上的多个取代基将占据提供稳定化合物且另外空间相容的环顶点。
术语“烷氧基”、“烷基氨基”和“烷基硫基”(或硫代烷氧基)以其常规含义使用，并且是
指分别通过氧原子、氨基或硫原子连接到分子其余部分的那些烷基。另外，对于二烷基氨
基，烷基部分可相同或不同，并且还可与各自连接的氮原子一起形成3-7元环。因此，表示为
二烷基氨基或-NRaRb的基团意在包括哌啶基、吡咯烷基、吗啉基、氮杂环丁烷基等。
除非另有说明，否则术语“卤代”或“卤素”本身或作为另一取代基的一部分是指氟、氯、
溴或碘原子。另外，术语诸如“卤代烷基”意在包括单卤代烷基和多卤代烷基。例如，术语“卤
代C1-4烷基”意在包括三氟甲基、2,2,2-三氟乙基、4-氯丁基、3-溴丙基等。
除非另有说明，否则术语“芳基”意指多不饱和的，通常为芳族的烃基，其可为单环或稠
合在一起或共价连接的多环(至多三个环)。芳基的非限制性实例包括苯基、萘基和联苯。
术语“杂芳基”是指含有1至5个选自N、O和S的杂原子的芳基(或环)，其中氮和硫原子任
选被氧化，且氮原子任选被季铵化。杂芳基可通过杂原子连接到分子的其余部分。杂芳基的
非限制性实例包括吡啶基、哒嗪基、吡嗪基、嘧啶基、三嗪基、喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、
噌啉基、酞嗪基、苯并三嗪基、嘌呤基、苯并咪唑基、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯并异噁唑
基、异苯并呋喃基、异吲哚基、吲嗪基、苯并三嗪基、噻吩并吡啶基、噻吩并嘧啶基、吡唑并嘧
啶基、咪唑并吡啶、苯并噻唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、异噻
唑基、吡唑基、吲唑基、蝶啶基、咪唑基、三唑基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、噻二唑基、吡咯
基、噻唑基、呋喃基、噻吩基等。杂芳基环的取代基可选自下述可接受的取代基。
在一些实施方案中，上述术语(例如，“烷基”、“芳基”和“杂芳基”)将是任选取代的。下
文提供每种类型基团的选择的取代基。
烷基(包括通常称为亚烷基、烯基、炔基和环烷基的基团)的任选取代基可为选自以下
的各种基团：卤素、-OR’、-NR’R”、-SR’、-SiR’R”R”’、-OC(O)R’、-C(O)R’、-CO2R’、-CONR’
R”、-OC(O)NR’R”、-NR”C(O)R’、-NR’-C(O)NR”R”’、-NR”C(O)2R’、-NH-C(NH2)＝NH、-NR’C
(NH2)＝NH、-NH-C(NH2)＝NR’、-S(O)R’、-S(O)2R’、-S(O)2NR’R”、-NR’S(O)2R”、-CN和-NO2，其
数量范围从0到(2m'+1)，其中m'为所述基团中碳原子的总数。R'、R”和R”’各自独立地指氢、
未经取代的C1-8烷基、未经取代的芳基、取代有1-3个卤素的芳基、未经取代的C1-8烷基、C1-8
烷氧基或硫代C1-8烷氧基，或未经取代的芳基-C1-4烷基。当R’和R”连接到相同的氮原子时，
它们可与氮原子结合形成3-、4-、5-、6-或7-元环。例如，-NR’R”意在包括1-吡咯烷基和4-吗
啉基。
类似地，芳基和杂芳基的任选取代基是变化的且通常选自-卤素、-OR’、-OC(O)R’、-NR’
R”、-SR’、-R’、-CN、-NO2、-CO2R’、-CONR’R”、-C(O)R’、-OC(O)NR’R”、-NR”C(O)R’、-NR”C(O)
2R’、-NR’-C(O)NR”R”’、-NH-C(NH2)＝NH、-NR’C(NH2)＝NH、-NH-C(NH2)＝NR’、-S(O)R’、-S
(O)2R’、-S(O)2NR’R”、-NR’S(O)2R”、-N3、全氟(C1-C4)烷氧基和全氟(C1-C4)烷基，其数目在零
至芳族环系统上开放化合价的总数的范围内；且其中R’、R”和R”’独立地选自氢、C1-8烷基、
卤代C1-8烷基、C3-6环烷基、C2-8烯基和C2-8炔基。其它合适的取代基包括通过1-4个碳原子的
亚烷基链与环原子连接的上述芳基取代基中的每一个。
芳基或杂芳基环的相邻原子上的两个取代基可任选地被式-T-C(O)-(CH2)q-U-的取代
基替换，其中T和U独立地为-NH-、-O-、-CH2-或单键，q为0至2的整数。或者，芳基或杂芳基环
的相邻原子上的两个取代基可任选被式-A-(CH2)r-B-替换，其中A和B独立地为-CH2-、-O-、-
NH-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-S(O)2NR’-或单键，并且r为1至3的整数。如此形成的新环的单键
之一可任选地被双键替换。或者，芳基或杂芳基环的相邻原子上的两个取代基可任选地被
式-(CH2)s-X-(CH2)t-的取代基替换，其中s和t独立地为0至3的整数，且X为-O-、-NR’-、-
S-、-S(O)-、-S(O)2-或-S(O)2NR’-。-NR'-和-S(O)2NR’-中的取代基R'选自氢或未经取代的
C1-6烷基。
本申请使用的术语“杂原子”意在包括氧(O)、氮(N)、硫(S)和硅(Si)。
术语“药用盐”意在包括用相对无毒的酸或碱制备的活性化合物的盐，这取决于在本申
请所述的化合物上发现的具体取代基。当本发明的化合物含有相对酸性的官能团时，可通
过使所述化合物的中性形式与足量的所需碱(纯的或在合适的惰性溶剂中)接触来获得碱
加成盐。衍生自药用无机碱的盐的实例包括铝盐、铵盐、钙盐、铜盐、铁盐、亚铁盐、锂盐、镁
盐、锰盐、亚锰盐、钾盐、钠盐、锌盐等。衍生自药用有机碱的盐包括伯胺、仲胺和叔胺的盐，
包括经取代的胺、环状胺、天然存在的胺等，诸如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N,N'-二苄
基乙二胺、二乙胺、2-二乙基氨基乙醇，2-二甲基氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-
乙基哌啶、葡萄糖胺(glucamine)、氨基葡萄糖(glucosamine)、组氨酸、哈胺、异丙胺、赖氨
酸、甲基葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙
胺、氨丁三醇等。当本发明的化合物含有相对碱性的官能团时，可通过将所述化合物的中性
形式与足量的所需酸(无论是纯的或在合适的惰性溶剂中)接触来获得酸加成盐。药用酸加
成盐的实例包括衍生自无机酸的盐以及衍生自相对无毒的有机酸的盐，所述无机酸如盐
酸、氢溴酸、硝酸、碳酸、一氢碳酸、磷酸、一氢磷酸、二氢磷酸、硫酸、一氢硫酸、氢碘酸或亚
磷酸等，所述有机酸如乙酸、丙酸、异丁酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、富马酸、扁桃
酸、邻苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、柠檬酸、酒石酸、甲磺酸等。本发明还包括氨基酸的
盐，诸如精氨酸盐等，以及有机酸的盐，如葡萄糖醛酸或半乳糖醛酸的盐等(参见，例如，
Berge,S.M.,et al,“Pharmaceutical Salts”,Journal of Pharmaceutical Science,
1977,66,1-19)。本发明的某些具体化合物含有碱性和酸性官能团，其允许化合物转化为碱
或酸加成盐。
化合物的中性形式可通过使盐与碱或酸接触并以常规方式分离母体化合物来再生。化
合物的母体形式在某些物理性质方面(诸如在极性溶剂中的溶解性)不同于各种盐形式，但
是出于本发明的目的，在其它方面，盐等同于化合物的母体形式。
除了盐形式之外，本发明提供呈前药形式的化合物。本申请所述化合物的前药是在生
理条件下容易经历化学变化以提供本发明化合物的那些化合物。另外，前药可在离体环境
中通过化学或生物化学方法转化为本发明的化合物。例如，当置于具有合适的酶或化学试
剂的透皮贴剂储库中时，前药可缓慢地转化为本发明的化合物。
本发明的某些化合物可以非溶剂化形式以及溶剂化形式存在，包括水合形式。通常，溶
剂化形式等同于非溶剂化形式，并且意在包括在本发明的范围内。本发明的某些化合物可
以多种结晶或无定形形式存在。通常，所有物理形式对于本发明预期的用途是等同的且意
欲在本发明的范围内。
本发明的某些化合物具有不对称碳原子(光学中心)或双键；外消旋体、非对映异构体、
几何异构体、区域异构体和单独的异构体(例如，单独的对映异构体)都意欲包括在本发明
的范围内。例如，羟基脒的结构显示为单一异构体。本申请所示的描述意在包括两种异构
体，以及其中存在一种异构体且基本上不含其它异构体的化合物的形式。“基本上不含”另
一种异构体表明两种异构体的比率为至少80/20，更优选90/10，或95/5或更高。在一些实施
方案中，一种异构体将以至少99％的量存在。
本发明的化合物还可在构成所述化合物的一个或多个原子含有非天然比例的原子同
位素。同位素的非天然比例可定义为从自然界中发现的量到由100％的所述原子组成的量。
例如，化合物可掺入放射性同位素，诸如氚(3H)、碘-125(125I)或碳-14(14C)，或非放射性同
位素，诸如氘(2H)或碳-13(13C)。所述同位素变体可为本申请中他处描述的那些提供另外的
效用。例如，本发明化合物的同位素变体可发现另外的效用，包括但不限于作为诊断和/或
成像试剂，或作为细胞毒性/放射毒性治疗剂。另外，本发明化合物的同位素变体可具有改
变的药物动力学和药效学特征，其可有助于在治疗期间增强安全性、耐受性或功效。本发明
化合物的所有同位素变体，无论是否是放射性的，都意欲包括在本发明的范围内。
术语“患者”或“受试者”可互换使用，是指人或非人动物(例如，哺乳动物)。
当术语“给予”、“给药”等应用于例如受试者、细胞、组织、器官或生物流体时，是指使例
如IDO抑制剂、包含IDO抑制剂的药物组合物或诊断剂与所述受试者、细胞、组织、器官或生
物流体接触。在细胞的上下文中，给予包括使试剂与细胞接触(例如，体外或离体)，以及使
试剂与流体接触，其中流体与细胞接触。
术语“治疗”、“处置”、“处理”等是指在疾病、障碍或病症或其症状之后开始的作用过程
(诸如给予IDO抑制剂或包含IDO抑制剂的药物组合物)已被诊断、观察等，以便暂时或永久
地消除、减少、抑制、减轻或改善至少一种折磨受试者的疾病、障碍或病症的潜在原因，或至
少一种与折磨受试者的疾病、障碍或病症相关的症状。因此，治疗包括抑制(例如，阻止疾
病、障碍或病症或与其相关的临床症状的发展或进一步发展)活动性疾病。
本申请使用的术语“需要治疗”是指医师或其它护理人员所作的受试者需要或将受益
于治疗的判断。该判断基于在医师或护理人员的专业领域的各种因素。
术语“预防”、“防止”、“防治”等是指以某种方式(例如，在疾病、障碍、病症或其症状发
作之前)开始的作用过程(诸如，给予IDO抑制剂或包含IDO抑制剂的药物组合物)，以便暂时
或永久地预防、遏制、抑制或减少受试者发展疾病、障碍、病症等的风险(如通过例如不存在
临床症状确定)或延迟其发作，通常在倾向于患有特定疾病、障碍或病症的受试者的上下文
中。在某些情况下，该术语还指减缓疾病、障碍或病症的进展或者抑制其进展成有害的或其
它不期望的状态。
本申请使用的术语“需要预防”是指由医师或其它护理人员作出的受试者需要或将受
益于预防性护理的判断。该判断是基于医师或护理人员的专业领域的各种因素。
短语“治疗有效量”是指将药物单独或作为药物组合物的一部分给予受试者，并且以单
剂量或作为一系列剂量的一部分，以当对受试者给予时能够对疾病、障碍或病症的任何症
状、方面或特征具有任何可检测的积极效果的量。治疗有效量可通过测量相关的生理效应
来确定，并且其可与受试者病症的给药方案和诊断分析等相关地进行调整。举例而言，在给
药后的特定时间测量IDO抑制剂(或其代谢物)的血清水平的测量值可指示是否已使用治疗
有效量。
短语“呈足以实现变化的量”意指在具体疗法之前(例如，基线水平)和之后测量的指示
剂水平之间存在可检测的差异。指示剂包括任何客观参数(例如，血清浓度)或主观参数(例
如，受试者的健康感觉)。
术语“小分子”是指分子量小于约10kDa、小于约2kDa或小于约1kDa的化学化合物。小分
子包括但不限于无机分子、有机分子、含有无机组分的有机分子、包含放射性原子的分子和
合成分子。在治疗上，小分子可对细胞更具渗透性，对降解更不敏感，并且比大分子更不太
可能引发免疫应答。
本申请使用的术语“IDO抑制剂”、“IDO阻断剂”及与其类似的术语是指能够抑制IDO活
性，从而逆转IDO介导的免疫抑制的药物。IDO抑制剂可为竞争性、非竞争性或不可逆的IDO
抑制剂。“竞争性IDO抑制剂”是在催化位点可逆地抑制IDO酶活性的化合物；“非竞争性IDO
抑制剂”是在非催化位点可逆地抑制IDO酶活性的化合物；且“不可逆IDO抑制剂”是通过与
酶形成共价键(或抑制酶功能的其它稳定手段)不可逆地消除IDO酶活性的化合物。许多IDO
抑制剂是可商购的(例如，1,3-二乙酸5-Br-4-Cl-吲哚氧基酯和1-甲基-DL-色氨酸(1MT)；
两者均可得自Sigma-Aldrich,St.Louis,MO)且可用作例如“工具”或“参考”化合物。
术语“配体”是指例如可作为受体的激动剂或拮抗剂的肽、多肽、膜结合分子或膜结合
分子或其复合物。配体包括天然和合成的配体，例如，细胞因子、细胞因子变体、类似物、突
变蛋白和衍生自抗体的结合组合物，以及小分子。该术语还包括既不是激动剂也不是拮抗
剂，但是可结合受体而不显著影响其生物学性质(例如，信号传导或粘附)的试剂。此外，该
术语包括已通过例如化学或重组方法改变为膜结合配体的可溶形式的膜结合配体。配体或
受体可完全为细胞内的，即它可存在于细胞质、细胞核或一些其它细胞内隔室中。配体和受
体的复合物称为“配体-受体复合物”。
术语“抑制剂”和“拮抗剂”或“激活剂”和“激动剂”分别是指抑制性或激活性分子，例
如，用于激活例如配体、受体、辅因子、基因、细胞、组织或器官。抑制剂为减少、阻断、阻止、
延迟激活、失活、脱敏或下调例如基因、蛋白质、配体、受体或细胞的分子。激活剂为增加、激
活、促进、增强激活、敏化或上调例如基因、蛋白质、配体、受体或细胞的分子。抑制剂也可定
义为减少、阻断或失活组成型活性的分子。“激动剂”为与靶标相互作用以引起或促进靶标
的激活增加的分子。“拮抗剂”为与激动剂的作用相反的分子。拮抗剂预防、降低、抑制或中
和激动剂的活性，并且拮抗剂还可预防、抑制或降低靶标(例如靶标受体)的组成型活性，甚
至在没有鉴定的激动剂的情况下。
术语“调节”、“调制”等是指分子(例如，活化剂或抑制剂)直接或间接增加或降低IDO的
功能或活性的能力。调节剂可单独起作用，或者它可使用辅因子，例如蛋白质、金属离子或
小分子。调节剂的实例包括小分子化合物和其它生物有机分子。许多小分子化合物库(例
如，组合库)是商业上可获得的且可作为鉴定调节剂的起点。本领域技术人员能够开发一种
或多种测定(例如，生物化学或基于细胞的测定)，其中可筛选所述化合物库以鉴定一种或
多种具有期望性质的化合物；此后，熟练的医药化学家能够通过诸如合成和评价其类似物
和衍生物来优化这样的一种或多种化合物。合成和/或分子建模研究也可用于鉴定激活剂。
分子的“活性”可描述或指分子与配体或受体的结合；催化活性；刺激基因表达或细胞
信号传导、分化或成熟的能力；抗原活性；调节其它分子的活性等。术语“增殖活性”包括促
进例如正常细胞分裂以及癌症、肿瘤、发育不良、细胞转化、转移和血管生成所必需的或与
其特异性相关的活性。
本申请使用的“可比较的”、“可比较的活性”，“可与…比较的活性”、“可比较的效果”，
“可与…比较的效果”等是可定量和/或定性观察的相对术语。术语的含义通常取决于使用
它们的上下文。举例而言，两种激活受体的药物可被视为具有从定性角度来看可比较的效
果，但是如在本领域接受的测定(例如，剂量-响应测定)中或在本领域接受的动物模型中确
定，如果一种药物仅能够实现另一药物的活性的20％，则可认为这两种药物从定量观点来
看缺乏可比较的效果。当将一个结果与另一个结果(例如，一个结果与参考标准)比较时，
“可比较的”经常(但不总是)意指一个结果偏离参考标准小于35％、小于30％、小于25％、小
于20％、小于15％、小于10％、小于7％、小于5％、小于4％、小于3％、小于2％或小于1％。在
具体实施方案中，如果一个结果偏离参考标准小于15％、小于10％或小于5％，则该结果可
与参考标准相比较。举例而言，但非限制，活性或效应可指功效、稳定性、溶解性或免疫原
性。
“基本上纯的”表示组分占组合物总含量的大于约50％，并且通常大于总多肽含量的约
60％。更典型地，“基本上纯的”是指其中总组合物的至少75％、至少85％、至少90％或更多
为感兴趣的组分的组合物。在一些情况下，多肽将占组合物总含量的大于约90％，或大于约
95％。
当提及配体/受体、抗体/抗原或其它结合对时，术语“特异性结合”或“选择性结合”指
示确定在蛋白质与其它生物制剂的非均质群体中存在蛋白质的结合反应。因此，在指定的
条件下，特定的配体与特定受体结合，并且不以显著量与样品中存在的其它蛋白质结合。所
设想的方法的抗体或衍生自抗体的抗原结合位点的结合组合物结合其抗原或其变体或突
变蛋白，其结合亲和力为与任何其它抗体或由其衍生的结合组合物的亲和力的至少2倍、至
少10倍、至少20倍或至少100倍。在一个具体的实施方案中，抗体将具有大于约109升/mol的
亲和力，如通过例如Scatchard分析(Munsen,et al.1980Analyt.Biochem.107:220-239)所
确定的。
术语“响应/应答”例如细胞、组织、器官或生物体的响应/应答包括生物化学或生理行
为的变化，例如生物隔室内的浓度、密度、粘附或迁移，基因表达率或分化状态，其中变化与
激活、刺激或治疗相关，或与内部机制诸如遗传编程相关。在某些上下文中，术语“激活”、
“刺激”等是指通过内部机制以及通过外部或环境因素调节的细胞激活；而术语“抑制”、“下
调”等是指相反的效应。
本申请可互换使用的术语“多肽”、“肽”和“蛋白质”是指任何长度的氨基酸的聚合形
式，其可包括遗传编码和非遗传编码的氨基酸、经化学或生物化学修饰或衍生化的氨基酸
和具有经修饰的多肽骨架的多肽。该术语包括融合蛋白，包括但不限于具有异源氨基酸序
列的融合蛋白，具有异源和同源前导序列的融合蛋白，具有或不具有N-末端甲硫氨酸残基；
免疫学标记的蛋白等。
本申请使用的术语“变体”和“同系物”可互换使用，分别指与参比氨基酸或核酸序列相
似的氨基酸或DNA序列。该术语包括天然存在的变体和非天然存在的变体。天然存在的变体
包括同系物(分别在氨基酸或核苷酸序列上一个物种与另一个不同的多肽和核酸)和等位
基因变体(一个物种内的一个个体与另一个个体分别在氨基酸或核苷酸序列上不同的多肽
和核酸)。因此，变体和同系物包括天然存在的DNA序列和由其编码的蛋白质及其同工型，以
及蛋白质或基因的剪接变体。该术语还包括在来自天然存在的DNA序列的一个或多个碱基
上变化但仍然由于遗传密码的简并性而仍然翻译为对应于天然存在的蛋白质的氨基酸序
列的核酸序列。非天然存在的变体和同系物包括分别包含氨基酸或核苷酸序列变化的多肽
和核酸，其中序列中的变化是人工引入的(例如，突变蛋白)；例如，该变化在实验室中通过
人类干预(“人工”)产生。因此，非天然存在的变体和同系物也可指通过一个或多个保守取
代和/或标签和/或缀合物与天然存在的序列不同的那些。
本申请使用的术语“突变蛋白”广泛地指突变的重组蛋白。这些蛋白质通常携带单个或
多个氨基酸取代，并且经常来自经过定点或随机诱变的克隆基因或来自完全合成的基因。
术语“DNA”、“核酸”、“核酸分子”、“多核苷酸”等在本申请中可互换使用，是指任何长度
的核苷酸的聚合形式，即脱氧核糖核酸或核糖核苷酸或其类似物。多核苷酸的非限制性实
例包括直链和环状核酸、信使RNA(mRNA)、互补DNA(cDNA)、重组多核苷酸、载体(vector)、探
针、引物等。
吲哚胺2,3-双加氧酶
如前所提及，IDO为通常在肿瘤细胞和活化的免疫细胞中表达的免疫调节酶。IDO为参
与肿瘤免疫逃逸的几种免疫应答检查点之一；因此，IDO抑制剂破坏了肿瘤经此逃避身体正
常免疫系统的机制。
IDO下调通过色氨酸氧化介导的免疫应答。这导致T细胞活化的抑制和T细胞凋亡的诱
导，产生其中肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞功能失活或不再能攻击受试者的癌细胞的环
境。因此，需要通过抑制IDO活性来抑制色氨酸降解的治疗剂。IDO的抑制剂可用于活化T细
胞，并且因此当T细胞被妊娠、恶性肿瘤或诸如HIV的病毒抑制时，增强T细胞活化。对于患有
神经性或神经精神性疾病或病症(诸如抑郁症)的患者，IDO的抑制也可为重要的治疗策略。
本申请的化合物、组合物和方法有助于满足当前对IDO调节剂的需要。
IDO的表达由复杂的信号阵列调节，因此牵涉许多不同的作用机制。例如，IDO可通过抑
制DNA甲基转移酶或组蛋白脱乙酰酶来诱导。NF-κB信号传导通路也牵涉于IDO功能。抑制
NF-κB活性阻断IDO表达并产生强烈的T细胞和IDO双重依赖性抗肿瘤应答；或者，NF-κB活化
(其可通过多种因子诸如干扰素-γR1/-γR2信号传导和toll样受体活化来实现)诱导IDO
基因表达。
其它机制涉及IDO功能的调节。举例而言，反应性氧物质(ROS)的抑制剂可实现IDO的稳
定化；IDO水平可通过抑制或激活位于IDO下游和上游的途径来调节；并且干扰素-γ的活化
可激活IDO的自分泌诱导。
研究表明IDO途径在许多癌症中是活跃的，在肿瘤细胞内作为针对T细胞攻击的直接防
御，以及在肿瘤引流淋巴结中的抗原递呈细胞(APC)内导致对肿瘤相关抗原(TAA)的外周耐
受。癌症可使用IDO途径以促进表达可以其它方式被免疫系统识别和攻击的TAA的恶性细胞
的存活、生长、侵袭和转移。
如本申请所提及的，通过限速酶IDO在肿瘤组织中的色氨酸分解代谢提供了使用IDO抑
制剂作为常规化学疗法的治疗替代物或添加剂的机会。然而，某些癌症能够分解代谢色氨
酸，但主要是IDO阴性的。最近的研究表明涉及色氨酸-2,3-双加氧酶(TDO)的色氨酸分解代
谢的替代酶途径也与癌症相关。被认为负责调节肝脏中全身色氨酸水平的TDO在一些癌症
中组成性表达，并且还能够抑制抗肿瘤免疫应答(参见例如，Platten,M.et al.,Cancer
Res 72(21):5435-40(Nov 1 2012))。
IDO在多种人类肿瘤和肿瘤细胞系以及在宿主APC中表达，其与更差的临床预后相关。
因此，IDO的抑制可改善具有IDO介导的免疫抑制的癌症患者的存活。相比之下，TDO在多种
人类肿瘤和肿瘤细胞系中表达，并且TDO的表达在晚期人成胶质细胞瘤中是明显的。鉴定表
达高水平IDO或TDO的肿瘤可允许对色氨酸调节的免疫抑制途径的更多选择性抑制。或者，
抑制IDO和TDO的化合物可通过其它色氨酸降解酶的互补性表达提供最大的覆盖以防止肿
瘤逃逸。因此，使用双重IDO/TDO抑制剂或IDO-和TDO-特异性抑制剂的组合可证明在癌症的
免疫疗法中是阻断由色氨酸代谢介导的免疫抑制的优良治疗替代物。
虽然对本发明化合物实现其活性的潜在作用机制的预先理解不是实施本发明所必需
的，但据信化合物(或其子集)抑制IDO功能。或者，化合物(或其子集)可抑制TDO功能。化合
物(或其子集)也可对IDO和TDO功能具有抑制活性。尽管本发明的化合物在本申请中通常称
为IDO抑制剂，但应理解，术语“IDO抑制剂”包括通过抑制TDO或IDO单独起作用的化合物，
和/或通过抑制IDO和TDO两者起作用的化合物。
具有期望特征的IDO抑制剂的鉴定
本发明部分地涉及鉴定具有至少一种具有治疗相关性的性质或特征的IDO抑制剂。可
通过使用例如本领域接受的测定或模型来鉴定候选抑制剂，其实例在本申请中描述。
在鉴定后，可通过使用提供关于抑制剂的特征(例如，药物动力学参数、确定溶解度或
稳定性的手段)的数据的技术来进一步评价候选抑制剂。候选抑制剂与参考标准(其可能是
当前抑制剂的“最佳类型”)的比较指示了所述候选者的潜在可行性。
本发明的化合物
如上所述，本发明提供由式(I)表示的化合物或其药用盐、水合物或溶剂化物：
在式(I)中，X1和X2表示独立选择的选自以下的取代基：氢、卤素、CN、SO2NH2、NHSO2CH3、
NHSO2CF3、OCF3、SO2CH3、SO2CF3、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的C1-C4烷氧基、卤代C1-C4烷
基、环丙基和CONH2。另外，当X1和X2在苯环的相邻顶点时，它们任选地一起连接形成任选取
代的含有0、1或2个杂原子的5-或6-元芳族或脂族环。
R1和R2独立地选自氢、任选取代的C1-C8烷基、任选取代的C3-C8环烷基、任选取代的C3-
C8环烷基-C1-C4烷基、任选取代的3-至7-元环杂烷基、任选取代的卤代C1-C4烷基、羟基、任选
取代的芳基和任选取代的杂芳基；和R1和R2任选地一起连接形成任选取代的C3-C8环烷基或
任选取代的3-至7-元环杂烷基，前提条件是R1和R2不一起连接形成未经取代的环己烷环，并
且R1和R2中的至少一个不为氢。
在一组实施方案中，本发明提供具有式(Ia)的化合物：
其中，X1和X2如针对式(I)所提供，且R1选自任选取代的C1-C8烷基、任选取代的C3-C8环
烷基、任选取代的C3-C8环烷基-C1-C4烷基、任选取代的3-至7-元环杂烷基、任选取代的卤代
C1-C4烷基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基。在选择的实施方案中，R1选自任选取代的
C3-C8环烷基、任选取代的C3-C8环烷基-C1-C4烷基和任选取代的3-至7-元环杂烷基。
在另一组实施方案中，本发明提供具有式(Ib)的化合物：
其中，X1选自卤素、CN、OCF3、SO2CH3、SO2CF3、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的C1-C4烷
氧基、卤代C1-C4烷基和环丙基；X2选自氢、卤素、CN、SO2NH2、NHSO2CH3、NHSO2CF3、OCF3、SO2CH3、
SO2CF3、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的C1-C4烷氧基、卤代C1-C4烷基、环丙基和CONH2；和
R1选自任选取代的C1-C8烷基、任选取代的C3-C8环烷基、任选取代的C3-C8环烷基-C1-C4烷基、
任选取代的3-至7-元环杂烷基、任选取代的卤代C1-C4烷基、任选取代的芳基和任选取代的
杂芳基。在某些选择的式(Ib)的实施方案中，R1选自任选取代的C3-C8环烷基、任选取代的
C3-C8环烷基-C1-C4烷基和任选取代的3-至7-元环杂烷基。
在一组选择的实施方案中，本发明提供了涉及式(I)、(Ia)和(Ib)的任何上述实施方案
的化合物，其中X2为氢。
在另一组选择的实施方案中，本发明提供了涉及式(I)、(Ia)和(Ib)的任何上述实施方
案的化合物，其中R1选自任选取代的C3-C6环烷基和任选取代的C3-C6环烷基-C1-C4烷基。
在另一组选择的实施方案中，本发明提供了涉及式(I)、(Ia)和(Ib)的任何上述实施方
案的化合物，其中R1选自任选取代的4-至6-元环杂烷基。
在另一组选择的实施方案中，本发明提供了涉及式(I)、(Ia)和(Ib)的任何上述实施方
案的化合物，其中R1选自
在另一组选定的实施方案中，本发明提供了涉及式(I)和(Ia)的任何上述实施方案的
化合物，其中R1选自甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、1-丁基、2-甲基丙基、3-羟基丙基、1-戊基
和1,1-二甲基乙基。
在另一组选择的实施方案中，本发明提供了式(I)的化合物，其中X1为卤素或卤代C1-C4
烷基；X2为氢或卤素；且R1选自任选取代的C1-C8烷基、任选取代的C3-C8环烷基、任选取代的
C3-C8环烷基-C1-C4烷基和任选取代的3-至7-元环杂烷基；或R1和R2任选地一起连接形成任
选取代的环丁基、环戊基或环庚基。更进一步选择的实施方案是其中R1选自任选取代的C3-
C6环烷基和任选取代的C3-C6环烷基-C1-C4烷基的那些。在其它选择的实施方案中，R1选自任
选取代的4-至6-元环杂烷基。在其它选择的实施方案中，R1选自
在其它选择的实施方案中，R1选自甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、1-丁基、2-甲基丙基、3-
羟基丙基、1-戊基和1,1-二甲基乙基。
在另一方面，本发明提供由式(II)表示的化合物或其药用盐、水合物或溶剂化物：
在式(II)中，虚线表示环顶点之间的单键或双键；X1、X2和X3为独立地选自以下的取代
基：氢、卤素、CN、SO2NH2、NHSO2CH3、NHSO2CF3、OCF3、SO2CH3、SO2CF3、任选取代的C1-C4烷基、任
选取代的C1-C4烷氧基、卤代C1-C4烷基、环丙基和CONH2；并且当X1和X2在苯环的相邻顶点时，
它们任选地一起连接形成任选取代的含有0、1或2个杂原子的5-或6-元芳族或脂族环；R3选
自氢、任选取代的C1-C8烷基、任选取代的C3-C8环烷基、任选取代的C3-C8环烷基-C1-C4烷基、
任选取代的3-至7-元环杂烷基、任选取代的卤代C1-C4烷基、任选取代的芳基和任选取代的
杂芳基；B选自键、C(O)、任选取代的C1-C8烷基和任选取代的C2-C8杂烷基；A选自O、C、CR4、N和
NR4；每个R4独立地选自氢、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤代C1-C4烷基和羟基；R5选自氢、羟基、
CH3和CF3；当A为O时，下标m为0，且当A选自N、NR4和CR4时，m为1；并且下标n为0或1时，表明具
有作为环顶点的A的环为五元或六元环。
在一组实施方案中，本发明提供具有式(IIa)的化合物：
其中，X1选自卤素、CN、OCF3、SO2CH3、SO2CF3、环丙基、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的
C1-C4烷氧基和卤代C1-C4烷基；X2选自氢、卤素、CN、OCF3、SO2NH2、NHSO2CH3、NHSO2CF3、SO2CH3、
SO2CF3、环丙基、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的C1-C4烷氧基、卤代C1-C4烷基和CONH2；R3
选自氢、任选取代的C1-C8烷基、任选取代的C3-C8环烷基、任选取代的C3-C8环烷基-C1-C4烷
基、任选取代的3-至7-元环杂烷基、任选取代的卤代C1-C4烷基、任选取代的芳基和任选取代
的杂芳基；B选自键、任选取代的C1-C8烷基和任选取代的C2-C8杂烷基；A选自O、CR4、N和NR4；
R4选自氢、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤代C1-C4烷基或羟基；且R5选自氢、羟基、CH3或CF3；且下
标m具有参考式(II)所提供的含义。
在另一组实施方案中，本发明提供具有式(IIb)的化合物：
其中，X1选自卤素、CN、OCF3、SO2CH3、SO2CF3、环丙基、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的
C1-C4烷氧基和卤代C1-C4烷基；X2选自氢、卤素、CN、OCF3、SO2NH2、NHSO2CH3、NHSO2CF3、SO2CH3、
SO2CF3、环丙基、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的C1-C4烷氧基、卤代C1-C4烷基和CONH2；R3
选自氢、任选取代的C1-C8烷基、任选取代的C3-C8环烷基、任选取代的C3-C8环烷基-C1-C4烷
基、任选取代的3-至7-元环杂烷基、任选取代的卤代C1-C4烷基、任选取代的芳基和任选取代
的杂芳基；B选自键、任选取代的C1-C8烷基和任选取代的C2-C8杂烷基；A选自O、CR4、N和NR4；
R4选自氢、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、卤代C1-C3烷基和羟基；R5选自氢、羟基、CH3和CF3。
在一组选择的实施方案中，本发明提供了涉及式(II)、(IIa)和(IIb)的任何上述实施
方案的化合物，其中A为O。
在另一组选择的实施方案中，本发明提供了涉及式(II)、(IIa)和(IIb)的任何上述实
施方案的化合物，其中A为N。
在另一组选择的实施方案中，本发明提供了涉及式(II)、(IIa)和(IIb)的任何上述实
施方案的化合物，其中A为CR4。
在另一组选择的实施方案中，本发明提供了涉及式(II)、(IIa)和(IIb)的任何上述实
施方案的化合物，其中A为NR4。
在另一组选择的实施方案中，本发明提供了涉及式(II)、(IIa)和(IIb)的任何上述实
施方案的化合物，其中X2为氢。
在另一组选择的实施方案中，本发明提供了涉及式(II)、(IIa)和(IIb)的任何上述实
施方案的化合物，其中X1为卤素且X2为氢。
在一组选择的实施方案中，本发明提供了表1的任一种化合物。
在另一组选择的实施方案中，本发明提供了表1的任一种化合物，其具有鉴定为“A”或
“B”的活性水平。
在另一组选择的实施方案中，本发明提供了表1的任一种化合物，其具有鉴定为“A”的
活性水平。
合成方法
本申请所述的化合物可通过多种方法制备。图1中提供了示例说明合成化合物的路线
的一个方案。
用于增强抑制剂特征的修饰
改善本申请公开的治疗模式的一种或多种物理性质和/或给予它们的方式通常是有益
的，有时是必要的。物理性质的改善包括例如增加水溶性、生物利用度、血清半衰期和/或治
疗性半衰期的方法；和/或调节生物活性的方法。
本领域已知的修饰包括聚乙二醇化、Fc-融合和白蛋白融合。尽管通常与大分子试剂
(例如，多肽)相关，但是最近已经用特定小分子评价了所述修饰。举例而言，Chiang,M.et
al.(J.Am.Chem.Soc.,2014,136(9):3370-73)描述了与免疫球蛋白Fc结构域缀合的腺苷2a
受体的小分子激动剂。小分子-Fc缀合物保留有效的Fc受体和腺苷2a受体相互作用，并且与
未缀合的小分子相比显示出优异的性质。也已经描述了PEG分子与小分子治疗剂的共价连
接(Li,W.et al.,Progress in Polymer Science,2013 38:421-44)。
治疗性和预防性用途
本发明涵盖本申请所述的IDO抑制剂在治疗或预防广泛的疾病、障碍和/或病症，和/或
其症状中的用途。虽然在下文中详细描述了具体的用途，但是应当理解，本发明不限于此。
此外，尽管下文阐述了具体疾病、障碍和病症的一般类别，但是一些疾病、障碍和病症可为
具有多于一个类别的成员，并且其它可能不是任何所公开类别的成员。
肿瘤相关病症。根据本发明，IDO抑制剂可用于治疗或预防增殖性病症或障碍，包括癌
症，例如，子宫癌、宫颈癌、乳腺癌、前列腺癌、睾丸癌、胃肠道癌(例如，食道癌、口咽癌、胃
癌、小或大肠癌、结肠或直肠)、肾癌、肾细胞癌、膀胱癌、骨癌、骨髓癌、皮肤癌、头部或颈部
癌、肝癌、胆囊癌、心脏癌、肺癌、胰腺癌、唾液腺癌、肾上腺癌、甲状腺癌、脑癌(例如，神经胶
质瘤)、神经节癌、中枢神经系统(CNS)和周围神经系统(PNS)的癌症，以及造血系统和免疫
系统(例如，脾或胸腺)的癌症。本发明还提供了治疗或预防其它癌症相关疾病、障碍或病症
的方法，包括例如，免疫原性肿瘤、非免疫原性肿瘤、休眠肿瘤、病毒诱导的癌症(例如，上皮
细胞癌、内皮细胞癌、鳞状细胞癌和乳头瘤病毒)、腺癌、淋巴瘤、癌瘤、黑素瘤、白血病、骨髓
瘤、肉瘤、畸胎癌、化学诱导的癌症、转移和血管生成。本发明涵盖例如通过对调节性T-细胞
和/或CD8+T-细胞的活性的调节来降低对肿瘤细胞或癌细胞抗原的耐受性(参见，例如，
Ramirez-Montagut,et al.(2003)Oncogene 22:3180-87；and Sawaya,et al.(2003)New
Engl.J.Med.349:1501-09)。在具体实施方案中，所述肿瘤或癌症为结肠癌、卵巢癌、乳腺
癌、黑素瘤、肺癌、成胶质细胞瘤或白血病。使用术语癌症相关疾病、障碍和病症广义上意指
直接或间接与癌症相关并且包括例如血管生成和癌前病状诸如发育不良的病症。
在一些实施方案中，本发明提供了用IDO抑制剂和至少一种另外的治疗剂或诊断剂治
疗增殖性病症、癌症、肿瘤或癌前病症的方法，其实例在本申请他处阐述。
免疫和炎症相关病症。本申请使用的术语诸如“免疫疾病”、“免疫病症”、“免疫障碍”、
“炎性疾病”、“炎性病症”、“炎性障碍”等意指广泛地包括任何免疫或炎症相关病症(例如，
病理性炎症和自身免疫性疾病)。所述病症通常与其它疾病、障碍和病症密切相关。举例而
言，“免疫病症”可指增殖性病症，诸如癌症、肿瘤和血管生成；包括感染(急性和慢性)、肿瘤
和抵抗免疫系统根除的癌症。
可用本发明的化合物和组合物治疗或预防的免疫和炎症相关疾病、障碍和病症的非限
制性列举包括关节炎(例如，类风湿性关节炎)、肾衰竭、狼疮、哮喘、银屑病、结肠炎、胰腺
炎、过敏、纤维化、外科并发症(例如，其中炎性细胞因子阻止愈合的外科并发症)、贫血和纤
维肌痛。可与慢性炎症相关的其它疾病和病症包括阿尔茨海默病、充血性心力衰竭、中风、
主动脉瓣狭窄、动脉硬化、骨质疏松症、帕金森病、感染、炎性肠病(例如，克罗恩病和溃疡性
结肠炎)、过敏性接触性皮炎和其它湿疹、系统性硬化症、移植和多发性硬化。
在其它免疫相关疾病中，预期IDO功能的抑制也可在免疫耐受和预防子宫内胎儿排斥
中起作用。
在一些实施方案中，本申请所述的IDO抑制剂可与免疫抑制剂组合以减少免疫效应器
细胞的数量。
以下更详细地描述了一些前述疾病、障碍和病症，(由于例如当前疗法的限制)IDO抑制
剂可对其特别有效。
类风湿性关节炎(RA)通常以关节的膜衬里(滑膜)中的慢性炎症为特征，影响约1％的
美国人口(约210万人)。进一步了解细胞因子，包括TNF-α和IL-1在炎症过程中的作用已经
使得能够开发和引入一类新的疾病缓解性抗风湿药(DMARD)。药物(其中一些与RA的治疗模
式重叠)包括ENBREL(依那西普(etanercept))、REMICADE(英夫利昔单抗(infliximab))、
HUMIRA(阿达木单抗(adalimumab))和KINERET(阿那白滞素(anakinra))。尽管这些药物中
的一些能缓解症状、抑制结构损伤的发展并改善特定患者群体的身体功能，但仍然需要具
有改善的功效、互补的作用机制以及较少/较不严重的不良反应的替代药物。
银屑病是一种常见的免疫介导的慢性皮肤病，在美国它影响了超过450万人，其中150
万被认为患有中度至重度形式的该疾病。此外，超过10％的银屑病患者发展银屑病关节炎，
其损害关节周围的骨和结缔组织。对银屑病的潜在生理学的更好的理解导致引入例如靶向
负责疾病的炎性性质的T淋巴细胞和细胞因子的活性的试剂。所述药物包括TNF-α抑制剂
(也用于治疗类风湿性关节炎(RA))，包括ENBREL(依那西普)、REMICADE(英夫利昔单抗)和
HUMIRA(阿达木单抗))和T细胞抑制剂诸如AMEVIVE(阿法赛特(alefacept))和RAPTIVA(依
法利珠单抗(efalizumab))。尽管这些药物中的几种在某些程度上在某些患者群体中是有
效的，但是没有一种显示能有效地治疗所有患者。
本申请所述的IDO抑制剂可特别地有助于罹患多发性硬化(MS)(一种包括多个区域的
炎症及脑和脊髓中的髓磷脂的瘢痕形成的导致严重虚弱的自身免疫疾病)的受试者，因为
目前的治疗仅缓解症状或延迟残疾的进展。
类似地，IDO抑制剂可特别有利于患有神经变性病症诸如阿尔茨海默病(AD)(一种严重
损害患者的思想、记忆和语言过程的脑病)和帕金森病(PD)(一种特征在于例如异常运动、
僵硬和震颤的CNS的进行性疾病)的受试者。这些病症是进行性的和使身体衰弱的，并且没
有治疗剂可用。
病毒相关疾病。本发明涵盖IDO抑制剂在治疗和/或预防任何病毒性疾病、障碍或病症
中的用途，其中用IDO抑制剂治疗可为有益的。在具体实施方案中，所述病毒性病症为慢性
病毒性疾病。预期的病毒性疾病、障碍和病症的实例包括但不限于乙型肝炎病毒(HBV)、丙
型肝炎病毒(HCV)、人乳头状瘤病毒(HPV)、HIV、AIDS(包括其表现诸如恶病质、痴呆和腹
泻)、单纯疱疹病毒(HSV)、Epstein-Barr病毒(EBV)、水痘带状疱疹病毒、柯萨奇病毒和巨细
胞病毒(CMV)。
细菌和寄生虫相关病症。本发明的实施方案涵盖向受试者给予本申请所述的IDO抑制
剂用于治疗细菌感染，例如分枝杆菌感染(例如，麻风分枝杆菌或结核分枝杆菌)或由单核
细胞增多性李氏杆菌(Listeria monocytogenes)或弓形虫(Toxplasma gondii)引起的感
染。其它实施方案涵盖包括但不限于杜氏利什曼原虫、热带利什曼原虫、硕大利什曼原虫、
埃塞俄比亚利什曼原虫、墨西哥利什曼原虫、恶性疟原虫、间日疟原虫、卵形疟原虫或三日
疟原虫的寄生虫感染的治疗。通常，预防性地给予抗寄生虫疗法(例如，在受试者行进到具
有高频率的寄生虫感染的区域之前)。
药物组合物
本发明的IDO抑制剂可呈适于向受试者给予的组合物的形式。通常，所述组合物为包含
一种或多种IDO抑制剂和一种或多种药学上可接受或生理学上可接受的稀释剂、载体或赋
形剂的“药物组合物”。在某些实施方案中，所述IDO抑制剂以治疗可接受的量存在。药物组
合物可用于本发明的方法；因此，例如，所述药物组合物可以离体或体内给予于受试者，以
实施本申请所述的治疗性和预防性方法和用途。
本发明的药物组合物可配制成与预期的给予方法或途径相容；本申请阐述了示例性的
给予途径。此外，药物组合物可与本申请所述的其它治疗活性剂或化合物组合使用，以治疗
或预防本发明所预期的疾病、障碍和病症。
含有活性成分(例如IDO功能抑制剂)的药物组合物可呈适于口服使用的形式，例如片
剂、胶囊、锭剂、糖锭、水性或油性混悬剂，可分散的粉剂或颗粒剂、乳剂、硬或软胶囊、或糖
浆、溶液、微珠或酏剂。用于口服使用的药物组合物可根据本领域已知的用于制备药物组合
物的任何方法制备，并且所述组合物可含有一种或多种药物，诸如增甜剂、矫味剂、着色剂
和防腐剂以提供药学上美观和适口的制剂。片剂、胶囊等含有活性成分与适于制备片剂的
无毒的药用赋形剂的混合物。这些赋形剂可为例如稀释剂，诸如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸
钙或磷酸钠；成粒剂和崩解剂，诸如玉米淀粉或藻酸；粘合剂，诸如淀粉、明胶或阿拉伯胶，
以及润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。
适于口服给药的片剂、胶囊等可为未包衣的或通过已知技术包衣以延迟在胃肠道中的
崩解和吸收，从而提供持续的作用。例如，可使用延时材料，诸如单硬脂酸甘油酯或二硬脂
酸甘油酯。它们也可通过本领域已知的技术包衣以形成用于控制释放的渗透性治疗片剂。
另外的试剂包括生物可降解或生物相容性颗粒或聚合物质诸如聚酯、聚胺酸、水凝胶、聚乙
烯吡咯烷酮、聚酐、聚乙醇酸、乙烯-乙酸乙烯酯、甲基纤维素、羧甲基纤维素、硫酸鱼精蛋白
或丙交酯/乙交酯共聚物，多乳酸/乙交酯共聚物，或乙烯乙酸乙烯酯共聚物，以控制给予的
组合物的递送。例如，口服药物通过分别使用羟基甲基纤维素或明胶微胶囊或聚(甲基丙烯
酸甲酯)微胶囊可包埋在通过凝聚技术或通过界面聚合制备的微胶囊中，或可包埋在胶体
药物递送系统中。胶体分散系统包括大分子复合物、纳米胶囊、微球、微珠和基于脂质的系
统，包括水包油乳液、胶束、混合胶束和脂质体。制备上述制剂的方法对本领域技术人员是
显而易见的。
口服使用的制剂也可呈现为硬明胶胶囊，其中活性成分与惰性固体稀释剂例如碳酸
钙、磷酸钙、高岭土或微晶纤维素混合，或呈现为软明胶胶囊，其中活性成分与水或油介质，
例如花生油、液体石蜡或橄榄油混合。
水性悬浮液含有活性材料与适合于其制备的赋形剂的混合物。所述赋形剂可为助悬
剂，例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍
胶和阿拉伯胶；分散剂或润湿剂，例如天然存在的磷脂(例如，卵磷脂)或环氧烷与脂肪酸的
缩合产物(例如，聚氧乙烯硬脂酸酯)，或环氧乙烷与长链脂族醇的缩合产物(例如，十七碳
乙烯氧基鲸蜡醇)，或环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物(例如，聚氧乙
烯山梨醇单油酸酯)，或环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产物(例如，聚
乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯)。水性悬浮液还可含有一种或多种防腐剂。
油性悬浮液可通过将活性成分悬浮在植物油(例如花生油、橄榄油、麻油或椰子油)或
矿物油(诸如液体石蜡)中来配制。油性悬浮液可含有增稠剂，例如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。
可添加如上所述的增甜剂和矫味剂以提供适口的口服制剂。
适于通过添加水制备水性悬浮液的可分散粉末和颗粒提供与分散或润湿剂、助悬剂和
一种或多种防腐剂混合的活性成分。合适的分散剂或润湿剂和助悬剂在本申请中举例说
明。
本发明的药物组合物也可呈水包油乳液的形式。油相可为植物油，例如橄榄油或花生
油；或矿物油，例如液体石蜡，或这些的混合物。合适的乳化剂可为天然存在的树胶，例如阿
拉伯胶或黄蓍胶；天然存在的磷脂，例如大豆磷脂、卵磷脂和衍生自脂肪酸的酯或偏酯；己
糖醇酐，例如脱水山梨糖醇单油酸酯；和偏酯与环氧乙烷的缩合产物，例如聚氧乙烯脱水山
梨糖醇单油酸酯。
制剂还可包括保护组合物免于从体内快速降解或消除的载体，诸如控制释放制剂，包
括植入物、脂质体、水凝胶、前药和微囊化递送系统。例如，可使用时间延迟材料，诸如单独
的单硬脂酸甘油酯或硬脂酸甘油酯，或与蜡组合使用。
药物组合物通常包含治疗有效量的本发明涵盖的IDO抑制剂和一种或多种药学和生理
学上可接受的配制剂。合适的药学上可接受或生理学上可接受的稀释剂、载体或赋形剂包
括但不限于抗氧化剂(例如，抗坏血酸和硫酸氢钠)、防腐剂(例如，苄醇、对羟基苯甲酸甲
酯、对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯)、乳化剂、助悬剂、分散剂、溶剂、填充剂，膨
松剂、洗涤剂、缓冲剂、媒介物、稀释剂和/或辅料。例如，合适的媒介物可为生理盐水溶液或
柠檬酸盐缓冲盐水，可能补充有用于胃肠外给予的药物组合物中常见的其它材料。中性缓
冲盐水或与血清白蛋白混合的盐水为另外的示例性媒介物。本领域技术人员将容易地认识
到可用于本申请所涵盖的药物组合物和剂型中的多种缓冲剂。典型的缓冲剂包括但不限于
药用弱酸、弱碱或其混合物。作为实例，缓冲组分可为水溶性材料，诸如磷酸、酒石酸、乳酸、
琥珀酸、柠檬酸、乙酸、抗坏血酸、天冬氨酸、谷氨酸及其盐。可接受的缓冲剂包括例如Tris
缓冲液、N-(2-羟基乙基)哌嗪-N'-(2-乙磺酸)(HEPES)、2-(N-吗啉代)乙磺酸(MES)、2-(N-
吗啉代)乙磺酸钠盐(MES)，3-(N-吗啉代)丙磺酸(MOPS)和N-三[羟基甲基]甲基-3-氨基丙
磺酸(TAPS)。
在配制药物组合物后，其可作为溶液、悬浮液、凝胶、乳液、固体或脱水或冻干粉末储存
在无菌小瓶中。这样的制剂可以即用(ready-to-use)形式、使用之前需要重构的冻干形式、
使用之前需要稀释的液体形式或其它可接受的形式储存。在一些实施方案中，药物组合物
在单次使用的容器(例如，一次性使用的小瓶、安瓿、注射器或自动注射器(类似于例如
))中提供，而在其它实施方案中提供多用途容器(例如，多次使用的小瓶)。任何
药物递送装置可用于递送，并且IDO抑制剂，包括植入物(例如，可植入泵)和导管系统、缓慢
注射泵和装置，所有这些都是本领域技术人员公知的。通常皮下或肌内给予的贮库注射也
可用于在限定的时间段内释放本申请公开的多肽。贮库注射通常为基于固体或基于油的，
并且通常包含本申请所述的制剂组分中的至少一种。本领域普通技术人员熟悉贮库注射的
可能的制剂和用途。
药物组合物可呈无菌可注射水性或油性悬浮液的形式。该悬浮液可根据已知技术使用
本申请提及的那些合适的分散剂或润湿剂和助悬剂来配制。无菌可注射制剂还可为在无毒
的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或悬浮液，例如作为于1,3-丁二醇中
的溶液。可使用的可接受的稀释剂、溶剂和分散介质包括水、林格溶液、等渗氯化钠溶液、
Cremophor ELTM(BASF,Parsippany,NJ)或磷酸盐缓冲盐水(PBS)、乙醇、多元醇(例如甘油、
丙二醇和液体聚乙二醇)及其合适的混合物。此外，无菌的不挥发油通常用作溶剂或悬浮介
质。为此目的，可使用任何温和的不挥发油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。此外，脂肪酸
诸如油酸，可用于制备注射剂。可通过包括延迟吸收的试剂(例如单硬脂酸铝或明胶)来实
现特定可注射制剂的延长吸收。
本发明涵盖以用于直肠给予的栓剂的形式给予IDO抑制剂。栓剂可通过将药物与合适
的无刺激性赋形剂混合来制备，所述赋形剂在常温为固体，但在直肠温度为液体，因此将在
直肠中融化以释放药物。所述材料包括但不限于可可脂和聚乙二醇。
本发明涵盖的IDO抑制剂可为目前已知的或未来开发的任何其它合适的药物组合物的
形式(例如，用于经鼻或吸入使用的喷雾剂)。
制剂中多肽或其片段的浓度可广泛变化(例如，从小于约0.1wt％，通常为或至少约
2wt％至多达20wt％至50wt％或更高)，并且通常为主要基于根据例如所选择的具体给予模
式的流体体积、粘度和基于受试者的因素进行选择。
给予途径
本发明涵盖以任何适当的方式给予IDO抑制剂及其组合物。合适的给予途径包括口服、
肠胃外(例如，肌内、静脉内、皮下(例如，注射或植入)、腹膜内、脑池内、关节内、腹膜内、脑
内(脑实质内)和脑室内)、经鼻、经阴道、舌下、眼内、经直肠、局部(例如，透皮)、舌下和吸
入。通常皮下或肌内给予的贮库注射也可用于在限定的时间段内释放本申请公开的IDO抑
制剂。
本发明的具体实施方案涵盖口服给予。
组合疗法
本发明涵盖IDO抑制剂与一种或多种活性治疗剂(例如，化学治疗剂)或其它预防或治
疗模式(例如，放射)组合的用途。在所述组合疗法中，各种活性剂通常具有不同的、互补的
作用机制。通过允许一种或多种药物的剂量减少，从而减少或消除与一种或多种药物相关
的不良反应，所述组合疗法可能是特别有利的。此外，所述组合疗法可对潜在的疾病、障碍
或病症具有协同的治疗或预防效果。
本申请使用的“组合”意在包括可单独给予的疗法，例如，单独配制用于单独给予的疗
法(例如，可在试剂盒中提供)和可以单一制剂一起给予的疗法(即“共同制剂(co-
formulation)”)。
在某些实施方案中，依序给予或施用IDO抑制剂，例如，其中一种药物在一种或多种其
它药物之前给予。在其它实施方案中，同时给予IDO抑制剂，例如，其中两种或更多种药物在
同一时间或大约同时给予；两种或更多种药物可以两种或更多种单独的制剂存在或组合成
单一制剂(即，共同制剂)。不管两种或更多种试剂是依序给予还是同时给予，它们被认为是
组合给予用于本发明的目的。
本发明的IDO抑制剂可以在该情况下适当的任何方式与至少一种其它(活性)药物组合
使用。在一个实施方案中，在一段时间内保持用本发明的至少一种活性剂和至少一种IDO抑
制剂的治疗。在另一个实施方案中，减少或中断用至少一种活性剂的治疗(例如，当受试者
稳定时)，而在恒定给药方案保持用本发明的IDO抑制剂的治疗。在另一个实施方案中，减少
或中断用至少一种活性剂的治疗(例如，当受试者稳定时)，而减少用本发明的IDO抑制剂治
疗(例如，较低剂量、较低频率给药或较短治疗方案)。在另一个实施方案中，减少或中断用
至少一种活性剂的治疗(例如，当受试者稳定时)，并增加用本发明的IDO抑制剂治疗(例如，
更高剂量、更频繁给药或更长治疗方案)。在另一个实施方案中，维持用至少一种活性剂的
治疗，并减少或中断用本发明的IDO抑制剂的治疗(例如，较低剂量、较低频率给药或较短治
疗方案)。在另一个实施方案中，减少或中断用至少一种活性剂的治疗和用本发明的IDO抑
制剂的治疗(例如，较低剂量、较低频率给药或较短治疗方案)。
肿瘤相关疾病。本发明提供了用IDO抑制剂和至少一种另外的治疗剂诸如放射、免疫调
节剂或化学治疗剂或诊断剂治疗和/或预防增殖性病症、癌症、肿瘤或癌前疾病、障碍或病
症的方法。可用于本发明的合适的免疫调节剂包括CD40L、B7和B7RP1；激活单克隆抗体
(mAb)，诸如抗-CD40、抗-CD38、抗-ICOS和4-IBB配体；树突细胞抗原加载(体外或体内)；抗
癌疫苗诸如树突细胞癌疫苗；细胞因子/趋化因子，诸如IL1、IL2、IL12、IL18、ELC/CCL19、
SLC/CCL21、MCP-1、IL-4、IL-18、TNF、IL-15、MDC、IFNa/b、M-CSF、IL-3、GM-CSF、IL-13和抗-
IL-10；细菌脂多糖(LPS)；和免疫刺激性寡核苷酸。
化学治疗剂的实例包括但不限于烷化剂，诸如塞替派和环磷酰胺；烷基磺酸盐，诸如白
消安、英丙舒凡(improsulfan)和哌泊舒凡(piposulfan)；氮杂环丙烷类，诸如苯佐替哌
(benzodopa)、卡波醌(carboquone)、美妥替哌(meturedopa)和乌瑞替哌(uredopa)；乙撑亚
胺类和甲基蜜胺类，包括六甲蜜胺(altretamine)、三亚乙基蜜胺、三亚乙基磷酰胺、三亚乙
基硫代磷酰胺和三羟甲蜜胺；氮芥类，诸如苯丁酸氮芥(chiorambucil)、萘氮芥
(chlornaphazine)、cholophosphamide、雌莫司汀(estramustine)、异环磷酰胺
(ifosfamide)、二氯甲基二乙胺(mechlorethamine)、盐酸氧氮芥(mechlorethamine oxide
hydrochloride)、美法仑(melphalan)、新恩比兴(novembichin)、苯芥胆甾醇
(phenesterine)、泼尼莫司汀(prednimustine)、曲磷胺(trofosfamide)、尿嘧啶氮芥；硝基
脲类诸如卡莫司汀(carmustine)、氯唑菌素(chlorozotocin)、福莫司汀(fotemustine)、洛
莫司汀(lomustine)、尼莫司汀(nimustine)、雷莫司汀(ranimustine)；抗生素，诸如阿克拉
霉素(aclacinomysin)、放线菌素(actinomycin)、氨茴霉素(authramycin)、重氮丝氨酸
(azaserine)、博来霉素(bleomycin)、放线菌素C(cactinomycin)、加利车霉素
(calicheamicin)、卡柔比星(carabicin)、caminomycin、嗜癌菌素(carzinophilin)、色霉
素(chromomycin)、更生霉素(dactinomycin)、柔红霉素(daunorubicin)、地托比星
(detorubicin)、6-重氮-5-氧代-L-正亮氨酸、多柔比星(doxorubicin)、表柔比星
(epirubicin)、依索比星(esorubicin)、伊达比星(idarubicin)、马西罗霉素
(marcellomycin)、丝裂霉素(mitomycin)、霉酚酸(mycophenolic acid)、诺加霉素
(nogalamycin)、橄榄霉素(olivomycin)、培霉素(peplomycin)、泊非霉素(potfiromycin)、
嘌呤霉素(puromycin)、三铁阿霉素(quelamycin)、罗多比星(rodorubicin)、链黑霉素
(streptonigrin)、链佐星(streptozocin)、杀结核菌素(tubercidin)、乌苯美司
(ubenimex)、净司他丁(zinostatin)、佐柔比星(zorubicin)；抗代谢物诸如甲氨蝶呤
(methotrexate)和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物诸如二甲叶酸(denopterin)、甲氨蝶呤、
蝶罗呤(pteropterin)、三甲曲沙(trimetrexate)；嘌呤类似物诸如氟达拉滨
(fludarabine)、6-巯基嘌呤、硫咪嘌呤(thiamiprine)、硫鸟嘌呤；嘧啶类似物诸如阿扎他
滨(ancitabine)、阿扎胞苷(azacitidine)、6-氮尿苷(6-azauridine)、卡莫氟(carmofur)、
阿糖胞苷(cytarabine)、二脱氧尿苷(dideoxyuridine)、脱氧氟尿苷(doxifluridine)、依
诺他滨(enocitabine)、氟尿苷(floxuridine)、5-FU；雄激素类诸如卡鲁睾酮
(calusterone)、屈他雄酮丙酸酯(dromostanolone propionate)、环硫雄醇
(epitiostanol)、美雄烷(mepitiostane)、睾内酯(testolactone)；抗肾上腺药诸如氨鲁米
特(aminoglutethimide)、米托坦(mitotane)、曲洛司坦(trilostane)；叶酸补充剂诸如亚
叶酸(frolinic acid)；醋葡醛内酯(aceglatone)；醛磷酰胺糖苷(aldophosphamide
glycoside)；氨基乙酰丙酸(aminolevulinic acid)；安吖啶(amsacrine)；贝塔布辛
(bestrabucil)；比生群(bisantrene)；依达曲沙(edatraxate)；地磷酰胺(defofamine)；地
美可辛(demecolcine)；地吖醌(diaziquone)；依氟鸟苷酸(elformithine)；依利醋铵
(elliptinium acetate)；依托格鲁(etoglucid)；硝酸镓(gallium nitrate)；羟基脲
(hydroxyurea)；香菇多糖(lentinan)；氯尼达明(lonidamine)；米托胍腙(mitoguazone)；
米托蒽醌(mitoxantrone)；莫哌达醇(mopidamol)；二胺硝吖啶(nitracrine)；喷司他丁
(pentostatin)；蛋氨氮芥(phenamet)；吡柔比星(pirarubicin)；鬼臼酸(podophyllinic
acid)；2-乙基酰肼；丙卡巴肼(procarbazine)；雷佐生(razoxane)；西佐喃(sizofiran)；螺
旋锗(spirogermanium)；细交链孢菌酮酸(tenuazonic acid)；三乙撑亚胺苯醌
(triaziquone)；2,2',2”-三氯三乙胺；乌拉坦(urethan)；长春地辛(vindesine)；达卡巴嗪
(dacarbazine)；甘露醇氮芥(mannomustine)；二溴甘露醇(mitobronitol)；二溴卫矛醇
(mitolactol)；哌血生(pipobroman)；gacytosine；阿糖胞苷(arabinoside)(Ara-C)；环磷
酰胺；塞替哌(thiotepa)；紫杉烷类(taxoid)，例如，紫杉醇和多西他赛；苯丁酸氮芥
(chlorambucil)；吉西他滨(gemcitabine)；6-硫鸟嘌呤(6-thioguanine)；巯基嘌呤
(mercaptopurine)；甲氨蝶呤(methotrexate)；铂和铂配位络合物诸如顺铂和卡铂；长春碱
(vinblastine)；依托泊苷(etoposide)(VP-16)；异环磷酰胺(ifosfamide)；丝裂霉素C
(mitomycin C)；米托蒽醌(mitoxantrone)；长春新碱(vincristine)；长春瑞滨
(vinorelbine)；诺维本(navelbine)；诺消灵(novantrone)；替尼泊苷(teniposide)；道诺
霉素(daunomycin)；氨基蝶呤(aminopterin)；塞罗达(xeloda)；伊班膦酸盐
(ibandronate)；CPT11；拓扑异构酶抑制剂；二氟甲基鸟氨酸(DMFO)；视黄酸(retinoic
acid)；埃斯波霉素(esperamicin)；卡培他滨(capecitabine)；以及任何上述的药用盐、酸
或衍生物。
化学治疗剂还包括用于调节或抑制对肿瘤的激素作用的抗激素剂，诸如抗雌激素类，
包括例如他莫昔芬(tamoxifen)、雷洛昔芬(raloxifene)、抑制芳香酶的4(5)-咪唑类、4-羟
基他莫昔芬、曲沃昔芬(trioxifene)、雷洛西芬(keoxifene)、奥那司酮(onapristone)和托
瑞米芬(toremifene)；和抗雄激素类诸如氟他胺(flutamide)、尼鲁米特(nilutamide)、比
卡鲁胺(bicalutamide)、亮丙瑞林(leuprolide)和戈舍瑞林(goserelin)；以及任何上述的
药用盐、酸或衍生物。在某些实施方案中，组合疗法包括给予激素或相关激素剂。
化学治疗剂还包括信号转导抑制剂(STI)。术语“信号转导抑制剂”是指选择性抑制信
号传导途径中的一个或多个步骤的药物。本发明的信号转导抑制剂(STI)包括：(i)bcr/abl
激酶抑制剂(例如，GLEEVEC)；(ii)表皮生长因子(EGF)受体抑制剂，包括激酶抑制剂和抗
体；(iii)her-2/neu受体抑制剂(例如，HERCEPTIN)；(iv)Akt家族激酶或Akt途径(例如，雷
帕霉素)的抑制剂；(v)细胞周期激酶抑制剂(例如，夫拉平度(flavopiridol))；和(vi)磷脂
酰肌醇激酶抑制剂。
可与IDO抑制剂组合使用的另外的治疗模式包括细胞因子或细胞因子拮抗剂(诸如IL-
12、IFN或抗表皮生长因子受体)、放射疗法、针对另一种肿瘤抗原的单克隆抗体、单克隆抗
体和毒素的复合物、T细胞佐剂、骨髓移植物或抗原递呈细胞(例如，树突细胞疗法)。本申请
还提供疫苗(例如，作为可溶性蛋白或作为编码蛋白的核酸)。
心血管疾病。本发明提供了用IDO抑制剂和至少一种另外的治疗剂或诊断剂治疗和/或
预防某些心血管和/或代谢相关的疾病、障碍和病症以及与其相关的病症的方法。
用于治疗高胆固醇血症(和动脉粥样硬化)的组合疗法的治疗剂的实例包括抑制胆固
醇的酶促合成的他汀类(例如，CRESTOR、LESCOL、LIPITOR、MEVACOR、PRAVACOL和ZOCOR)；胆
酸树脂(例如，COLESTID、LO-CHOLEST、PREVALITE、QUESTRAN和WELCHOL)，其螯合胆固醇并防
止其吸收；依折麦布(ezetimibe)(ZETIA)，其阻断胆固醇吸收；纤维酸(例如，TRICOR)，其减
少甘油三酯并可适度地增加HDL；烟酸(例如，NIACOR)，其适度地降低LDL胆固醇和甘油三
酯；和/或前述的组合(例如，VYTORIN(依折麦布与辛伐他汀(simvastatin))。可为与本申请
所述的IDO抑制剂组合使用的候选物的替代性胆固醇治疗包括各种补充剂和草药(例如，大
蒜(garlic)、普利醇(policosanol)和印度没药(guggul))。本发明包括任何上述的药用盐、
酸或衍生物。
免疫和炎症相关病症。本发明提供了用IDO抑制剂和至少一种另外的治疗剂或诊断剂
治疗和/或预防免疫和/或炎症相关的疾病、障碍和病症以及与其相关的病症的方法。
可用于组合疗法的治疗剂的实例包括但不限于以下：非甾体抗炎药(NSAID)，诸如阿司
匹林(aspirin)，布洛芬(ibuprofen)和其它丙酸衍生物(阿明洛芬(alminoprofen)、苯恶洛
芬(benoxaprofen)、布氯酸(bucloxic acid)、卡洛芬(carprofen)、芬布芬(fenbufen)、非
诺洛芬(fenoprofen)、氟洛芬(fluprofen)、氟比洛芬(flurbiprofen)、吲哚洛芬
(indoprofen)、酮洛芬(ketoprofen)、米洛芬(miroprofen)、萘普生(naproxen)、奥沙普秦
(oxaprozin)、吡洛芬(pirprofen)、双吡苯丙酸(pranoprofen)、舒洛芬(suprofen)、噻洛芬
酸(tiaprofenic acid)和噻洛芬(tioxaprofen))、乙酸衍生物(吲哚美辛(indomethacin)、
阿西美辛(acemetacin)、阿氯芬酸(alclofenac)、环氯茚酸(clidanac)、双氯芬酸
(diclofenac)、芬氯酸(fenclofenac)、芬苯唑酸(fenclozic acid)、芬替酸(fentiazac)、
氟诺芬酸(fuirofenac)、异丁苯丙酸(ibufenac)、异恶唑酸(isoxepac)、奥昔那酸
(oxpinac)、舒林酸(sulindac)、噻洛芬(tiopinac)、托美丁(tolmetin)、齐多美辛
(zidometacin)和佐美酸(zomepirac))、芬那酸衍生物(氟灭酸(flufenamic acid)、甲氯芬
那酸(meclofenamic acid)、甲芬那酸(mefenamic acid)、尼氟酸(niflumic acid)和托芬
那酸(tolfenamic acid))、联苯羧酸衍生物(二氟尼柳(diflunisal)和氟苯柳
(flufenisal))、昔康类(伊索昔康(isoxicam)、吡罗昔康(piroxicam)、舒多昔康
(sudoxicam)和替诺昔康(tenoxican))、水杨酸盐类(乙酰水杨酸(acetyl salicylic
acid)、柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine))和吡唑啉酮类(阿扎丙宗(apazone)、苄哌立隆
(bezpiperylon)、非普拉宗(feprazone)、莫非布宗(mofebutazone)、羟布宗
(oxyphenbutazone)、保泰松(phenylbutazone))。其它组合包括环氧合酶-2(COX-2)抑制
剂。
用于组合的其它活性剂包括类固醇类诸如泼尼松龙(prednisolone)、泼尼松
(prednisone)、甲基泼尼松龙(methylprednisolone)、倍他米松(betamethasone)、地塞米
松(dexamethasone)或氢化可的松(hydrocortisone)。所述组合可能是特别有利的，因为类
固醇的一种或多种不良反应可通过逐渐减少所需的类固醇剂量而减少或甚至消除。
可组合用于治疗例如类风湿性关节炎的活性剂的另外实例包括细胞因子抑制性抗炎
药(CSAID)；其它人细胞因子或生长因子例如TNF、LT、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-7、IL-8、IL-15、
IL-16、IL-18、EMAP-II、GM-CSF、FGF或PDGF。
活性剂的具体组合可在自身免疫和随后的炎症级联中的不同点干扰，并且包括TNF拮
抗剂诸如嵌合的、人源化或人TNF抗体，REMICADE，抗-TNF抗体片段(例如，CDP870)，和可溶
性p55或p75TNF受体，其衍生物，p75TNFRIgG(ENBREL.)或p55TNFR1gG(LENERCEPT)，可溶性
IL-13受体(sIL-13)，以及TNFα转化酶(TACE)抑制剂；类似地，IL-1抑制剂(例如，白细胞介
素-1-转化酶抑制剂)可为有效的。其它组合包括白细胞介素11、抗-P7和p-选择蛋白糖蛋白
配体(PSGL)。可用于与本申请所述IDO抑制剂组合的药物的其它实例包括干扰素-β1a
(AVONEX)；干扰素-β1b(BETASERON)；克帕松(copaxone)；高压氧；静脉注射免疫球蛋白；克
拉屈滨(clabribine)；和其它人细胞因子或生长因子(例如，针对CD40配体和CD80的抗体)
的抗体或拮抗剂。
免疫检查点抑制剂。本发明涵盖本申请所述的IDO功能抑制剂与其它免疫检查点抑制
剂的组合的用途。
大量的作为所有癌症的特征的遗传和后生改变提供了多种抗原，免疫系统可使用这些
抗原来区分肿瘤细胞与其正常对应物。在T细胞的情况下，通过经T细胞受体(TCR)的抗原识
别启动的应答的最终幅度(例如，细胞因子产生或增殖的水平)和质量(例如，产生的免疫应
答的类型，诸如细胞因子产生的模式)，通过共刺激和抑制信号(免疫检查点)之间的平衡来
调节。在正常生理条件下，免疫检查点对于预防自身免疫(即，维持自身耐受)以及当免疫系
统响应病原性感染时保护组织免受损伤至关重要。作为重要的免疫耐受机制，可通过肿瘤
使免疫检查点蛋白的表达失调。
T细胞已成为治疗性操控内源性抗肿瘤免疫力的主要着重点，因为i)其选择性识别来
自所有细胞隔室中的蛋白质的肽的能力；ii)它们直接识别和杀死抗原表达细胞(通过CD8+
效应器T细胞；也称为细胞毒性T淋巴细胞(CTL))的能力；和iii)它们通过整合适应性和先
天的效应机制的CD4+辅助T细胞来协调不同的免疫应答的能力。在临床环境中，阻断免疫检
查点—其导致抗原特异性T细胞应答的扩增—已显示在人类癌症治疗中是有希望的方法。
T细胞介导的免疫包括多个顺序步骤，其中通过使刺激和抑制信号抗衡来调节每个步
骤，以优化应答。尽管免疫应答中的几乎所有抑制信号最终调节细胞内信号传导途径，但许
多是通过膜受体引发的，膜受体的配体是膜结合的或可溶的(细胞因子)。虽然调节T细胞活
化的共刺激和抑制性受体和配体通常在相对于正常组织的癌症中不过表达，但是调节组织
中T细胞效应器功能的抑制性配体和受体通常在肿瘤细胞或与肿瘤微环境相关的未转化细
胞上过表达。可使用激动剂抗体(用于共刺激途径)或拮抗剂抗体(用于抑制途径)调节可溶
性和膜结合受体-配体免疫检查点的功能。因此，与目前批准用于癌症疗法的大多数抗体相
反，阻断免疫检查点的抗体不直接靶向肿瘤细胞，而是靶向淋巴细胞受体或其配体，以增强
内源性抗肿瘤活性。[参见Pardoll,(April 2012)Nature Rev.Cancer 12:252-64]。
作为阻断的候选者的免疫检查点(配体和受体)(其中一些在各种类型的肿瘤细胞中选
择性上调)的实例包括PD1(程序性细胞死亡蛋白1)；PDL1(PD1配体)；BTLA(B和T淋巴细胞衰
减子)；CTLA4(细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4)；TIM3(T细胞膜蛋白3)；LAG3(淋巴细胞激活
基因3)；A2aR(腺苷A2a受体A2aR)；和杀伤抑制性受体，其可基于其结构特征分为两类：i)杀
伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)，和ii)C型凝集素受体(II型跨膜受体家族的成员)。文献中
已经描述了其它较不明确定义的免疫检查点，包括受体(例如，2B4(也称为CD244)受体)和
配体(例如，某些B7家族抑制性配体，诸如B7-H3(也称为CD276)和B7-H4(也称为B7-S1、B7x
和VCTN1))。[参见Pardoll,(April 2012)Nature Rev.Cancer 12:252-64]。
本发明涵盖本申请所述的IDO功能抑制剂与前述免疫-检查点受体和配体的抑制剂以
及尚待描述的免疫-检查点受体和配体的组合的用途。免疫检查点的某些调节剂目前可用，
而其它调节剂处于晚期开发中。为了说明，当其在2011年被批准用于治疗黑色素瘤时，完全
人源化的CTLA4单克隆抗体依匹木单抗(ipilimumab)(YERVOY；Bristol-Myers Squibb)成
为在美国接受监管批准的第一种免疫检查点抑制剂。包含CTLA4和抗体的融合蛋白(CTLA4-
Ig；abatcept(ORENCIA；Bristol-Myers Squibb))已经用于治疗类风湿性关节炎，并且已经
显示其它融合蛋白在对Epstein Barr病毒敏感的肾移植患者中有效。PD1抗体也可用于治
疗癌症，包括例如纳武单抗(nivolumab)(Bristol-Myers Squibb)和帕母单抗
(pembroluzimab)(Merck)，并且也正在评估抗-PDL1抗体(例如，MPDL3280A(Roche))。纳武
单抗在患有黑色素瘤、肺癌和肾癌以及多种其它恶性肿瘤的患者中显示出希
望。
在本发明的一个方面，要求保护的IDO抑制剂与免疫肿瘤剂组合，所述免疫肿瘤剂为
(i)刺激性(包括共刺激性)受体的激动剂或(ii)T细胞上抑制性(包括共抑制)信号的拮抗
剂，这两者都导致扩增抗原特异性T细胞应答。某些刺激性和抑制性分子是免疫球蛋白超家
族(IgSF)的成员。结合共刺激或共抑制受体的一个重要的膜结合配体家族为B7家族，其包
括B7-1、B7-2、B7-H1(PD-L1)、B7-DC(PD-L2)、B7-H2(ICOS-L)、B7-H3、B7-H4、B7-H5(VISTA)
和B7-H6。与共刺激或共抑制受体结合的另一膜结合配体家族为结合同族TNF受体家族成员
的TNF家族分子，其包括CD40和CD40L、OX-40、OX-40L、CD70、CD27L、CD30、CD30L、4-1BBL、
CD137(4-1BB)、TRAIL/Apo2-L、TRAILR1/DR4、TRAILR2/DR5、TRAILR3、TRAILR4、OPG、RANK、
RANKL、TWEAKR/Fn14、TWEAK、BAFFR、EDAR、XEDAR、TACI、APRIL、BCMA、LTβR、LIGHT、DcR3、
HVEM、VEGI/TL1A、TRAMP/DR3、EDAR、EDA1、XEDAR、EDA2、TNFR1、淋巴毒素α/TNFβ、TNFR2、TNF
α、LTβR、淋巴毒素α1β2、FAS、FASL、RELT、DR6、TROY、NGFR。
在另一方面，免疫肿瘤剂为抑制T细胞活化的细胞因子(例如IL-6、IL-10、TGF-β、VEGF
和其它免疫抑制性细胞因子)或用于刺激免疫应答刺激T细胞活化的细胞因子。
在一个方面，T细胞应答可通过要求保护的IDO抑制剂和一种或多种以下药物的组合来
刺激：(i)抑制T细胞活化的蛋白质的拮抗剂(例如，免疫检查点抑制剂)诸如CTLA-4、PD-1、
PD-L1、PD-L2、LAG-3、TIM-3、半乳凝素9、CEACAM-1、BTLA、CD69、半乳凝素-1、TIGIT、CD113、
GPR56、VISTA、2B4、CD48、GARP、PD1H、LAIR1、TIM-1和TIM-4，和/或(ii)刺激T细胞活化的蛋
白质的激动剂，诸如B7-1、B7-2、CD28、4-1BB(CD137)、4-1BBL、ICOS、ICOS-L、OX40、OX40L、
GITR、GITRL、CD70、CD27、CD40、DR3和CD2。可与本发明的IDO抑制剂组合用于治疗癌症的其
它药物包括NK细胞上的抑制性受体的拮抗剂或NK细胞上激活受体的激动剂。例如，本申请
的化合物可与KIR的拮抗剂诸如利瑞珠单抗(lirilumab)组合。
用于组合疗法的其它药物包括抑制或减少巨噬细胞或单核细胞的药物，包括但不限于
CSF-1R拮抗剂，诸如CSF-1R拮抗剂抗体，包括RG7155(WO11/70024、WO11/107553、WO11/
131407、WO13/87699、WO13/119716、WO13/132044)或FPA-008(WO11/140249；WO13169264；
WO14/036357)。
在另一方面，要求保护的IDO抑制剂可与一种或多种结合阳性共刺激受体的激动剂，通
过抑制性受体减弱信号传导的阻断剂，拮抗剂，和一种或多种全身性增加抗肿瘤T细胞的频
率的药物，克服肿瘤微环境内的不同免疫抑制途径(例如，阻断抑制性受体结合(例如，PD-
L1/PD-1相互作用)、减少或抑制Treg(例如，使用抗-CD25单克隆抗体(例如，达克珠单抗
(daclizumab))或通过离体抗-CD25珠减少)、或逆转/防止T细胞无反应或耗尽)的药物和在
肿瘤部位触发先天性免疫激活和/或炎症的药物一起使用。
在一个方面，所述免疫肿瘤剂为CTLA-4拮抗剂，诸如拮抗性CTLA-4抗体。合适的CTLA-4
抗体包括例如YERVOY(依匹木单抗)或替西木单抗(tremelimumab)。
在另一方面，所述免疫肿瘤剂为PD-1拮抗剂，诸如拮抗性PD-1抗体。合适的PD-1抗体包
括例如OPDIVO(纳武单抗)、KEYTRUDA(派姆单抗(pembrolizumab))或MEDI-0680(AMP-514；
WO2012/145493)。免疫肿瘤剂还可包括pidilizumab(CT-011)，尽管其对PD-1结合的特异性
已被质疑。靶向PD-1受体的另一种方法是由与IgG1的Fc部分融合的PD-L2胞外结构域(B7-
DC)组成的称为AMP-224的重组蛋白。
在另一方面，所述免疫肿瘤剂为PD-L1拮抗剂，诸如拮抗性PD-L1抗体。合适的PD-L1抗
体包括例如MPDL3280A(RG7446；WO2010/077634)、durvalumab(MEDI4736)、BMS-936559
(WO2007/005874)和MSB0010718C(WO2013/79174)。
在另一方面，所述免疫肿瘤剂为LAG-3拮抗剂，诸如拮抗性LAG-3抗体。合适的LAG3抗体
包括例如BMS-986016(WO10/19570、WO14/08218)，或IMP-731或IMP-321(WO08/132601、
WO09/44273)。
在另一方面，所述免疫肿瘤剂为CD137(4-1BB)激动剂，诸如激动性CD137抗体。合适的
CD137抗体包括例如urelumab和PF-05082566(WO12/32433)。
在另一方面，所述免疫肿瘤剂为GITR激动剂，诸如激动性GITR抗体。合适的GITR抗体包
括例如BMS-986153、BMS-986156、TRX-518(WO06/105021、WO09/009116)和MK-4166(WO11/
028683)。
在另一方面，所述免疫肿瘤剂为OX40激动剂，诸如激动性OX40抗体。合适的OX40抗体包
括例如MEDI-6383或MEDI-6469。
在另一方面，所述免疫肿瘤剂为OX40L拮抗剂，诸如拮抗性OX40抗体。合适的OX40L拮抗
剂包括例如RG-7888(WO06/029879)。
在另一方面，所述免疫肿瘤剂为CD40激动剂，诸如激动性CD40抗体。在另一实施方案
中，所述免疫肿瘤剂为CD40拮抗剂，诸如拮抗性CD40抗体。合适的CD40抗体包括例如
lucatumumab或达西珠单抗(dacetuzumab)。
在另一方面，所述免疫肿瘤剂为CD27激动剂，诸如激动性CD27抗体。合适的CD27抗体包
括例如varlilumab。
在另一方面，所述免疫肿瘤剂为MGA271(to B7H3)(WO11/109400)。
本发明包括任何上述的药用盐、酸或衍生物。
病毒性疾病。本发明提供了用IDO抑制剂和至少一种另外的治疗剂或诊断剂(例如，一
种或多种其它抗病毒剂和/或一种或多种不与病毒治疗相关的药物)治疗和/或预防病毒性
疾病、障碍和病症以及与其相关的病症的方法。
所述组合疗法包括靶向各个病毒生命周期阶段并具有不同作用机制的抗病毒剂，包括
但不限于以下：病毒脱壳的抑制剂(例如，金刚烷胺(amantadine)和金刚乙胺
(rimantidine))；逆转录酶抑制剂(例如，阿昔洛韦(acyclovir)、齐多夫定(zidovudine)和
拉米夫定(lamivudine))；靶向整合酶的药物；阻断转录因子与病毒DNA连接的药物；影响翻
译的药物(例如，反义分子)(例如，福米韦生(fomivirsen))；调节翻译/核酶功能的药物；蛋
白酶抑制剂；病毒组装调节剂(例如，利福平(rifampicin))；抗逆转录病毒剂，例如核苷类
似物逆转录酶抑制剂(例如，叠氮胸苷(azidothymidine)(AZT)、ddl、ddC、3TC、d4T)；非核苷
逆转录酶抑制剂(例如，依法韦仑(efavirenz)、奈韦拉平(nevirapine))；核苷酸类似物逆
转录酶抑制剂；和防止病毒颗粒释放的药物(例如，扎那米韦(zanamivir)和奥司他韦
(oseltamivir))。治疗和/或预防某些病毒感染(例如，HIV)通常需要抗病毒剂的组(“混合
物(cocktail)”)。
预期与IDO抑制剂组合使用的其它抗病毒剂包括但不限于以下：阿巴卡韦(abacavir)、
阿德福韦(adefovir)、金刚烷胺(amantadine)、安普那韦(amprenavir)、安普利近
(ampligen)、阿比朵尔(arbidol)、阿扎那韦(atazanavir)、atripla、boceprevirertet、西
多福韦(cidofovir)、可比韦(combivir)、达芦那韦(darunavir)、地拉韦啶(delavirdine)、
地丹诺辛(didanosine)、二十二醇(docosanol)、依度尿苷(edoxudine)、恩曲他滨
(emtricitabine)、恩夫韦肽(enfuvirtide)、恩替卡韦(entecavir)、泛昔洛韦
(famciclovir)、福沙那韦(fosamprenavir)、膦甲酸钠(foscarnet)、膦甲酸(fosfonet)、更
昔洛韦(ganciclovir)、伊巴他滨(ibacitabine)、异丙肌苷(imunovir)、碘苷
(idoxuridine)、咪喹莫特(imiquimod)、茚地那韦(indinavir)、肌酐(inosine)、各种干扰
素(例如,聚乙二醇化干扰素α-2a)、洛匹那韦(lopinavir)、洛韦胺(loviride)、马拉韦罗
(maraviroc)、吗啉胍(moroxydine)、甲吲噻腙(methisazone)、奈非那韦(nelfinavir)、
nexavir、喷昔洛韦(penciclovir)、帕拉米韦(peramivir)、普乐康尼(pleconaril)、鬼臼毒
素(podophyllotoxin)、雷特格韦(raltegravir)、利巴韦林(ribavirin)、利托那韦
(ritonavir)、吡拉明(pyramidine)、沙奎那韦(saquinavir)、司他夫定(stavudine)、特拉
匹韦(telaprevir)、替诺福韦(tenofovir)、替拉那韦(tipranavir)、trivividine、阿巴卡
韦(trizivir)、醋胺金刚烷(tromantadine)、特鲁瓦达(truvada)、万乃洛韦
(valaciclovir)、缬更昔洛韦(valganciclovir)、维立韦罗(vicriviroc)、阿糖腺苷
(vidarabine)、韦拉米啶(viramidine)和扎西他滨(zalcitabine)。
本发明包括任何上述的药用盐、酸或衍生物。
寄生虫疾病。本发明涵盖本申请所述的IDO功能抑制剂与抗寄生虫剂组合的用途。所述
药物包括但不限于噻苯咪唑(thiabendazole)、双羟萘酸噻嘧啶(pyrantel pamoate)、甲苯
达唑(mebendazole)、吡喹酮(praziquantel)、氯硝柳胺(niclosamide)、硫双二氯酚
(bithionol)、羟胺硝喹(oxamniquine)、美曲膦酯(metrifonate)、伊维菌素(ivermectin)、
阿苯达唑(albendazole)、依氟鸟氨酸(eflornithine)、美拉胂醇(melarsoprol)、喷他脒
(pentamidine)、苄硝唑(benznidazole)、硝呋替莫(nifurtimox)和硝基咪唑
(nitroimidazole)。本领域技术人员知道可用于治疗寄生虫疾病的其它药物。
本发明包括任何上述的药用盐、酸或衍生物。
细菌感染。本发明的实施方案涵盖本申请所述的IDO抑制剂与用于治疗或预防细菌病
症的药物的组合的用途。抗菌剂可以各种方式分类，包括基于作用机制、基于化学结构和基
于活性谱。抗菌剂的实例包括靶向细菌细胞壁(例如，头孢菌素类(cephalosporins)和青霉
素类(penicillins))或细胞膜(例如，多粘菌素类(polymyxins))，或干扰必需细菌酶(例
如，磺酰胺类，利福霉素类(rifamycins)和喹啉类)的那些。靶向蛋白质合成的大多数抗菌
剂(例如，四环素类和大环内酯类)是抑菌的，而药物诸如氨基糖苷是杀菌的。分类抗菌剂的
另一种方法是基于它们的靶标特异性；“窄谱”药物靶向特定类型的细菌(例如，革兰氏阳性
细菌诸如链球菌(Streptococcus))，而“广谱”药物对更广泛的细菌具有活性。本领域技术
人员知道适用于特定细菌感染的抗细菌剂的类型。
本发明包括上述药物(以及药物类别的成员)的药用盐、酸或衍生物。
给药
本发明的IDO抑制剂可以依赖于以下的量给予受试者：例如给予目的(例如，所需的分
辨程度)；给予制剂的受试者的年龄、体重、性别及健康和身体状况；给予途径；以及疾病、障
碍、病症或其症状的性质。给药方案还可考虑与所给予的药物相关的任何不良反应的存在、
性质和程度。有效剂量和剂量方案可容易地从例如安全性和剂量递增试验、体内研究(例
如，动物模型)和本领域技术人员已知的其它方法确定。
通常，给药参数指示剂量小于可对受试者具有不可逆毒性的量(最大耐受剂量(MTD))，
并且不小于对受试者产生可测量效应所需的量。考虑给予途径和其它因素，所述量由例如
与ADME相关的药物动力学和药效学参数确定。
有效剂量(ED)是在一部分服用它的受试者中产生治疗响应或期望效果的药物的剂量
或量。药物的“中间有效剂量”或ED50是在50％的给予药物的群体中产生治疗响应或期望效
果的药物的剂量或量。尽管ED50通常用作对药物效果的合理预期的量度，但是其不一定是
临床医生考虑所有相关因素可能认为合适的剂量。因此，在一些情况下，有效量大于计算的
ED50，在其它情况下，有效量小于计算的ED50，而在其它情况下，有效量与计算的ED50相同。
此外，本发明的IDO抑制剂的有效剂量可为当以一个或多个剂量给予于受试者时，相对
于健康受试者产生期望结果的量。例如，对于经历具体病症的受试者，有效剂量可为使该病
症的诊断参数、量度、标记等改善至少约5％、至少约10％、至少约20％、至少约25％、至少约
30％、至少约40％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％、至少约90％或超过
90％，其中100％定义为正常受试者表现的诊断参数、量度、标记等。
对于口服药物的给予，组合物可以片剂、胶囊等的形式提供，其含有1.0至1000毫克的
活性成分，具体为1.0、3.0、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0、50.0、75.0、100.0、150.0、200.0、
250.0、300.0、400.0、500.0、600.0、750.0、800.0、900.0和1000.0毫克的活性成分。
在某些实施方案中，所需IDO抑制剂的剂量包含在“单位剂型”中。短语“单位剂型”是指
物理上分离的单位，每个单位含有预定量的IDO抑制剂，单独或与一种或多种另外的药物组
合，足以产生期望的效果。应当理解，单位剂型的参数将取决于具体的药物和要实现的效
果。
试剂盒
本发明还涵盖包含IDO抑制剂及其药物组合物的试剂盒。如下所述，试剂盒通常呈容纳
各种组分的物理结构的形式，并且可用于例如实施上述方法。
试剂盒可包括一种或多种本申请公开的IDO抑制剂(在例如无菌容器中提供)，其可呈
适于给予于受试者的药物组合物的形式。IDO抑制剂可以即用型(例如，片剂或胶囊)的形式
或以在给予之前需要例如重构或稀释(例如，粉末)的形式提供。当IDO抑制剂呈需要由使用
者重构或稀释的形式时，试剂盒还可包括与IDO抑制剂包装在一起或与IDO抑制剂分开的稀
释剂(例如，无菌水)、缓冲液、药用赋形剂等。当涵盖组合疗法时，试剂盒可单独含有几种药
物，或者它们可已经组合在试剂盒中。试剂盒的每种组分可包封在单个容器内，并且所有各
种容器可在单个包装内。本发明的试剂盒可设计用于适当地保持容纳在其中的组分(例如，
冷藏或冷冻)所需的条件。
试剂盒可包含标签或包装说明书，包括其中组分的识别信息及其使用说明(例如，剂量
参数，活性成分的临床药理学，包括作用机制、药物动力学和药效学、不良反应、禁忌症等)。
标签或插页可包括制造商信息，诸如批号和失效日期。标签或包装插页可例如集成到容纳
组分的物理结构中，单独地包含在物理结构内，或者固定于试剂盒的组件(例如，安瓿、管或
小瓶)。
标签或插入物可另外包括或并入计算机可读介质，诸如盘(例如，硬盘、卡、存储盘)、光
盘诸如CD-或DVD-ROM/RAM、DVD、MP3、磁带或电子存储介质诸如RAM和ROM或这些存储介质的
混合体，诸如磁/光存储介质、FLASH介质或存储器类型的卡。在一些实施方案中，实际指令
不存在于试剂盒中，而是提供用于从远程源(例如，经由因特网)获得指令的装置。
实验
提出以下实施例以向本领域普通技术人员提供如何制备和使用本发明的完全公开内
容和描述，并且不旨在限制发明人认为是其发明的范围，它们也不旨在表示进行下面的实
验或它们是可进行的所有实验。应当理解，不一定进行以现在时态书写的示例性描述，而是
可进行描述以产生其中描述的性质的数据等。已经努力确保关于使用的数字(例如，量、温
度等)的准确性，但是应该考虑一些实验误差和偏差。
除非另有说明，否则份数为重量份，分子量为重均分子量，温度为摄氏度(℃)，压力为
大气压或接近大气压。使用标准缩写，包括以下：wt＝野生型；bp＝碱基对；kb＝千碱基；nt
＝核苷酸；aa＝氨基酸；s或sec＝秒；min＝分钟；h或hr＝小时；ng＝纳克；μg＝微克；mg＝毫
克；g＝克；kg＝千克；dl或dL＝分升；μl或μL＝微升；ml或mL＝毫升；l或L＝升；μM＝微摩尔；
mM＝毫摩尔；M＝摩尔；kDa＝千道尔顿；i.m.＝肌内；i.p.＝腹膜内；SC或SQ＝皮下；QD＝每
日；BID＝每日两次；QW＝每周；QM＝每月；HPLC＝高效液相色谱；BW＝体重；U＝单位；ns＝无
统计学显著性；PBS＝磷酸盐缓冲盐水；IHC＝免疫组织化学；DMEM＝Dulbeco改良的Eagle培
养基；EDTA＝乙二胺四乙酸。
材料和方法
使用以下一般材料和方法，其中指出或可用于以下实施例中：
分子生物学中的标准方法描述于科学文献中(参见，例如，Sambrook和Russell(2001)
Molecular Cloning,3rd ed.,Cold Spring Harbor Laboratory Press,Cold Spring
Harbor,N.Y.；and Ausubel,et al.(2001)Current Protocols in Molecular Biology,
Vols.1-4,John Wiley and Sons,Inc.New York,N.Y.，其描述了在细菌细胞中的克隆和
DNA诱变(Vol.1)、在哺乳动物细胞和酵母中的克隆(Vol.2)、糖缀合物和蛋白质表达
(Vol.3)和生物信息学(Vol.4))。
科学文献描述了用于蛋白质纯化的方法，包括免疫沉淀、色谱、电泳、离心和结晶，以及
化学分析、化学修饰、翻译后修饰、融合蛋白的产生和蛋白质的糖基化(参见，例如，
Coligan,et al.(2000)Current Protocols in Protein Science,Vols.1-2,John Wiley
and Sons,Inc.,NY)。
用于确定例如抗原性片段、前导序列、蛋白质折叠、功能结构域、糖基化位点和序列比
对的软件包和数据库是可获得的(参见，例如，GCG Wisconsin Package(Accelrys,Inc.,
San Diego,CA)；and DeCypherTM(TimeLogic Corp.,Crystal Bay,NV)。
文献充分描述了可用作评价本申请所述化合物的基础的测定和其它实验技术。
Sarkar,S.A.et al.,Diabetes 56:72-79(2007)中描述了犬尿氨酸(KYN)的IDO酶测定
和细胞生产。简而言之，除非另有说明，否则所有化学品可购自Sigma-Aldrich(St.Louis,
MO)。可将含1,000个人胰岛的组在具有细胞因子的1mL培养基中培养24小时，通过在800x g
离心5分钟回收，并在含有蛋白酶抑制剂混合物(Set 2；Calbiochem,EMD Biosciences,San
Diego,CA)中超声处理。超声处理物可以10,000x g离心10分钟，上清液可通过以下方式一
式三份进行测定：使40μl样品与等体积的100mmol/L磷酸钾缓冲液(pH6.5)，含有40mmol/L
抗坏血酸(中和至pH 7.0)、100μmol/L亚甲基蓝、200μg/mL过氧化氢酶和400μmol/l L-Trp
在37℃孵育30分钟。可通过添加16μL 30％(w/v)三氯乙酸(TCA)终止测定，并在60℃进一步
孵育15分钟以将N-甲酰基犬尿氨酸水解成KYN。然后可将混合物以12,000rpm离心15分钟，
并且可通过以下方式定量KYN：在96孔微量滴定板中使等体积上清液与2％(w/v)Ehrlich试
剂在冰醋酸中混合，并使用L-KYN作为标准读取在480nm处的吸光度。胰岛样品中的蛋白质
可通过Bio-Rad Protein测定在595nm处定量。为了在胰岛培养物上清液中检测L-KYN，可用
5％(w/v)TCA沉淀蛋白质并以12,000rpm离心15分钟，并且可如上所述用Ehrlich试剂确定
上清液中的KYN。可将IL-4(10μg/mL；500-2,000单位/mL)和1-α-甲基Trp(1-MT；40μmol/L)
添加至所示培养基中。该测定也可形成基于细胞的测定的基础，并且可通过LCMS/MS作为
UV/Vis检测的替代来定量。
Western印迹分析。在细胞因子存在下在Miami培养基中孵育24小时的含1,000-1,200
个胰岛的组可如上收获并在PBS中超声处理，50μg蛋白质样品可在0％SDS-PAGE凝胶上进行
电泳。用人-IDO质粒(3μg)或空载体细胞转染的COS7细胞(0.6x 106个细胞/60mm3培养皿)
可分别用作阳性和阴性对照。可通过半干法将蛋白质电泳转移到聚偏氟乙烯
(polyvinylidine fluoride)膜上，并且在Tris缓冲盐水和0.1％Tween中用5％(w/v)脱脂
奶粉封闭1小时，然后与抗-人小鼠IDO抗体(1:500；Chemicon,Temecula,CA)、磷-STAT1αp91
和STAT1αp91(1:500；Zymed,San Francisco,CA)孵育过夜。在与抗-小鼠辣根过氧化物酶缀
合的二抗(Jackson Immunolabs,West Grove,PA)孵育1小时后，可用ECL Plus Western印
迹检测试剂(Amersham BioSciences,Buckinghamshire,U.K.)使免疫反应性蛋白可视化。
IDO的免疫组化检测。胰岛可在PBS(Invitrogen)中的4％多聚甲醛中固定1小时，固定
在熔融的10％猪皮明胶块(37℃)中，并包埋在最佳切割温度化合物中。胰岛组织上的免疫
荧光染色可在用针对胰十二指肠同源框1(PDX1)和IDO的抗体染色的7μm切片上进行。抗原
修复可在97℃在含有10mmol/l Tris和1mmol/l EDTA(pH 9.0)的缓冲液中在水浴中进行30
分钟。可用PBS中的5％正常山羊血清封闭切片1小时。然后将组织与小鼠单克隆抗-人IDO抗
体(1:2,000；Chemicon)和山羊多克隆抗-人PDX1抗体(1:2,000；可从Dr.Chris Wright,
School of Medicine,Vanderbilt,TN获得)在室温在潮湿室中过夜反应。抗-山羊(用Cy3标
记)和抗-小鼠(用Cy2标记)二抗可购自Jackson Immunolabs并且可以1:200的浓度使用。核
可用Hoechst 33258(Molecular Probes,Eugene,OR)染色。图像可通过来自配备有Olympus
DSU(旋转盘共聚焦)和Hamamatsu ORCA IIER单色CCD相机的Olympus 1X81倒置电动显微镜
的智能成像系统软件获取。
用于评价本发明的IDO抑制剂的替代方法描述于WO 2010/0233166中并在下文中概述。
生物化学测定。已经分离了人和小鼠IDO的cDNA克隆，并通过测序验证且为可商购的。
为了制备用于生物化学研究的IDO，可使用IPTG诱导型pET5a载体系统在大肠杆菌中产生C-
端His标签的IDO蛋白，并在镍柱上分离。部分纯化的蛋白质的产量可通过凝胶电泳来验证，
并通过与蛋白质标准品比较来估计浓度。为了测定IDO酶活性，可按照公开的操作(参见，例
如，Littlejohn,T.K.,et al.(2000)Prot.Exp.Purif.19:22-29)进行用于犬尿氨酸产生的
96孔板光度测定。为了筛选IDO抑制活性，可以例如200μM的单一浓度针对50ng IDO酶以100
μL反应体积评价化合物，其中以增加的浓度在例如0、2、20和200μM添加色氨酸。犬尿氨酸产
生可在1小时测量。
基于细胞的测定。根据制造商的推荐，可使用Lipofectamine 2000(Invitrogen)，用表
达IDO cDNA的CMV启动子驱动的质粒瞬时转染COS-1细胞。可用表达TDO的质粒瞬时转染伴
侣组的细胞。转染后48小时，可将细胞以6x 104个细胞/孔分配到96孔格式中。次日，可洗涤
孔，并可与抑制剂一起添加含有20μg/mL色氨酸的新培养基(不含酚红)。反应可在5小时停
止，除去上清液，并如先前对于酶测定所述用光谱光度法测定犬尿氨酸。为了获得IDO活性
的初始确认，可在例如100μM的单一浓度评价化合物。可针对选择的化合物收集更广泛的剂
量递增曲线(profiles)。
药效学和药物动力学评价。药效学测定可基于测量犬尿氨酸和色氨酸两者的血清水
平，并且计算犬尿氨酸/色氨酸比率提供独立于基线色氨酸水平的IDO活性的估计。血清色
氨酸和犬尿氨酸水平可通过HPLC分析来确定，并且血清化合物水平也可任选地在相同的
HPLC运行中确定。
最初可通过用LPS攻击小鼠然后在血清犬尿氨酸水平平台期间给予推注剂量的化合物
评价化合物。随着犬尿氨酸池快速翻转，血清中半衰期少于10分钟，预期先前存在的犬尿氨
酸不会过度掩盖IDO抑制剂对犬尿氨酸生成的影响。每项实验可包括非-LPS-暴露的小鼠
(以确定用于比较其它小鼠的基线犬尿氨酸水平)和一组单独给予媒介物的LPS-暴露的小
鼠(以提供IDO活化的阳性对照)。最初可在小鼠中以单一高i.p.推注剂量在至少100mg/kg
的范围内评价每个化合物。可以限定的时间间隔收集血液(例如，在化合物给予后5分钟、15
分钟、30分钟、1小时、2小时、4小时、6小时、8小时和24小时，50μL样品)用于犬尿氨酸和色氨
酸水平(药效学分析)以及化合物的水平(药物动力学分析)的HPLC分析。从药物动力学数据
可确定达到的化合物的峰值血清浓度以及估计的清除率。通过比较不同时间点相对于犬尿
氨酸/色氨酸比率的血清中化合物的水平，可粗略估计体内IDO抑制的有效IC50。可评价表现
出功效的化合物以确定在峰浓度实现100％IDO抑制的最大剂量。
实施例
一般方法：
本领域技术人员将认识到，存在多种可用于合成权利要求中所示的分子的方法。下面
显示了用于合成权利要求中所示的化合物的有用方法的三个实施例(方程式i、ii和iii)。
在第一个实施例中，将苯胺金属化(例如用丁基锂)。然后将苯胺金属(metal anilide)添加
到烷基硝基化合物中，得到本发明的羟基脒。在第二个实施例中，使用标准方法形成酰胺，
然后使用POCl3、PCl5、SOCl2等进行氯化，随后添加羟胺以得到本发明的羟基脒。第三种方法
也通过初始的酰胺，然后用合适的硫化剂(诸如Lawesson试剂)硫化，然后进行S-烷基化(代
表性烷化剂包括碘甲烷或硫酸二甲酯)，随后添加羟基胺，得到本发明的化合物。可使用常
见的合成策略来进一步加工(elaborate)本发明的化合物。本领域技术人员将认识到，引入
羟基脒的时间可变化，并且可为制备给定化合物中的第一、最后或中间转化。
1-环己基-3-硝基丙-1-酮：如Shi,Z.；Tong,Q.；Leong,W.W.Y.；Zhong,
G.Chem.Eur.J.2012,32,9802-9806中所述制备1-环己基丙-2-烯-1-酮。向1-环己基丙-2-
烯-1-酮(1.32g,9.57mmol)于THF(9.6mL)中的溶液中先后添加亚硝酸钠(1.32g,19.1mmol)
和乙酸(1.15g,1.05mL,19.13mmol)。将所得反应混合物在室温搅拌16小时，此时添加乙醚
(25mL)，并通过用另外25mL乙醚洗涤的2x 2cm硅胶塞过滤所得悬浮液。减压浓缩滤液并采
用硅胶色谱(10％EtOAc/己烷)纯化所得粗反应混合物以得到呈黄色油状物的820mg期望产
物。1H-NMR(600MHz；CDCl3):δ4.63(t,J＝6.1Hz,2H),3.08(t,J＝6.1Hz,2H),2.42(tt,J＝
11.3,3.5Hz,1H),1.91-1.88(m,2H),1.79(dt,J＝12.8,3.6Hz,2H),1.41-1.17(m,6H)。
1-环己基-3-硝基丙-1-醇：在0℃，历时5分钟，向1-环己基-3-硝基丙-1-酮(3.70g,
20.0mmol)于EtOH(100mL)中的溶液中逐份添加NaBH4。将所得反应混合物在0℃搅拌30分
钟，此时滴加饱和NH4Cl溶液。用EtOAc(50mL)稀释非均相悬浮液并分离各层。用EtOAc(3x
50mL)萃取水层。合并的有机萃取物以无水MgSO4干燥，过滤，并减压浓缩。采用硅胶色谱(10
至50％EtOAc/己烷)纯化所得粗反应混合物以得到呈黄色油状物的期望产物。1H-NMR
(400MHz；CDCl3):δ4.61-4.49(m,2H),3.44-3.41(m,1H),2.28-2.20(m,1H),1.98(dddd,J＝
14.4,10.3,6.7,5.7Hz,1H),1.83-1.73(m,4H),1.69-1.64(m,2H),1.37-0.93(m,6H)。
一般操作A：羟基脒的制备：
如Sanguineti,G.；Le,H.V.；Ganem,B.Tetrahedron,2011,67,10208-10211中一般所述
制备羟基脒。在-78℃，向经取代的苯胺(1.2mmol)于THF(1.0mL)中的溶液中添加n-BuLi的
溶液(480μL,1.2mmol,2.5M于己烷中)。所得反应混合物变为非均相并使其历时30分钟温热
至室温。将反应混合物冷却至0℃并滴加1-环己基-3-硝基丙-1-醇(56mg,0.3mmol)。将所得
悬浮液加热至65℃且持续2小时，此时TLC分析指示硝基烷烃完全消耗。将反应混合物冷却
至0℃并用饱和NH4Cl溶液(10mL)、EtOAc(10mL)稀释且搅拌5分钟。分离各层，并用EtOAc(3x
15mL)萃取水层。合并的有机萃取物以无水MgSO4干燥，过滤，并减压浓缩。采用硅胶色谱纯
化粗反应混合物以得到期望产物。
(Z)-N-(3-氯苯基)-3-环己基-N',3-二羟基丙脒：使用一般操作A采用56mg 1-环己基-
3-硝基丙-1-醇和154mg 3-氯苯胺制备。使用硅胶色谱(0至5％MeOH/CH2Cl2)纯化以得到呈
油状物的期望产物(33mg,37％)。1H-NMR(600MHz；CDCl3):δ7.22(t,J＝8.0Hz,1H),7.11(dd,
J＝8.0,1.1Hz,1H),7.05(t,J＝2.0Hz,1H),6.92(dd,J＝8.0,1.2Hz,1H),3.54(ddd,J＝
10.1,6.0,2.0Hz,1H),2.57(dd,J＝15.4,2.1Hz,1H),2.29(dd,J＝15.5,10.2Hz,1H),1.75-
1.65(m,4H),1.57(dd,J＝43.6,12.4Hz,2H),1.32-1.01(m,4H),0.91(dddt,J＝16.3,12.3,
8.3,4.1Hz,2H).m/z 297.2(M+H+)。
(Z)-3-环己基-N-(3,4-二氟苯基)-N',3-二羟基丙脒：使用一般操作A采用56mg 1-环
己基-3-硝基丙-1-醇和155mg 3,4-二氟苯胺制备。使用硅胶色谱(0至5％MeOH/CH2Cl2)纯化
以得到呈黄褐色油状物的期望产物(56mg,62％)。1H-NMR(600MHz；CDCl3):δ7.10(q,J＝
9.2Hz,1H),6.92(ddd,J＝10.9,7.1,2.6Hz,1H),6.81-6.78(m,1H),3.53-3.51(m,1H),2.47
(dd,J＝15.4,1.6Hz,1H),2.23(dd,J＝15.4,10.3Hz,1H),1.73-1.65(m,4H),1.55(dd,J＝
59.4,12.3Hz,2H),1.29-0.97(m,4H),0.93-0.85(m,2H).m/z 299.2(M+H+)。
(Z)-N-(4-氯-3-氟苯基)-3-环己基-N',3-二羟基丙脒：使用一般操作A采用56mg 1-环
己基-3-硝基丙-1-醇和175mg 4-氯-3-氟苯胺制备。使用硅胶色谱(0至5％MeOH/CH2Cl2)纯
化以得到呈黄色泡沫状物的期望产物(57mg,60％)。1H-NMR(600MHz；CDCl3):δ7.30(t,J＝
8.4Hz,1H),6.86(dd,J＝10.1,2.5Hz,1H),6.77(ddd,J＝8.6,2.4,0.8Hz,1H),3.55(ddd,J
＝10.2,6.0,2.0Hz,1H),2.54(dd,J＝15.5,2.1Hz,1H),2.30(dd,J＝15.5,10.3Hz,1H),
1.75-1.66(m,4H),1.57(dd,J＝50.1,12.4Hz,2H),1.35-0.97(m,4H),0.96-0.88(m,2H).m/
z 315.2(M+H+)。
(Z)-3-环己基-N-(3-氟苯基)-N',3-二羟基丙脒：使用一般操作A采用56mg 1-环己基-
3-硝基丙-1-醇和133mg 3-氟苯胺制备。使用硅胶色谱(0至5％MeOH/CH2Cl2)纯化以得到呈
黄色油状物的期望产物(43mg,51％)。1H-NMR(600MHz；CDCl3):δ7.30(t,J＝8.4Hz,1H),6.86
(dd,J＝10.1,2.5Hz,1H),6.77(ddd,J＝8.6,2.4,0.8Hz,1H),3.55(ddd,J＝10.2,6.0,
2.0Hz,1H),2.54(dd,J＝15.5,2.1Hz,1H),2.30(dd,J＝15.5,10.3Hz,1H),1.75-1.66(m,
4H),1.57(dd,J＝50.1,12.4Hz,2H),1.35-0.97(m,4H),0.96-0.88(m,2H).m/z281.2(M+H
+)。
(Z)-3-环己基-N',3-二羟基-N-(间甲苯基)丙脒：使用一般操作A采用56mg 1-环己基-
3-硝基丙-1-醇和107mg间甲苯胺制备。使用硅胶色谱(0至5％MeOH/CH2Cl2)纯化以得到呈黄
色油状物的期望产物(36mg,43％)。1H-NMR(600MHz；CDCl3):δ7.17(t,J＝7.6Hz,1H),6.94
(d,J＝7.6Hz,1H),6.84(d,J＝8.0Hz,1H),3.54(ddd,J＝10.0,6.0,2.0Hz,1H),2.55(dd,J
＝15.4,2.0Hz,1H),2.30(s,3H),2.24(dd,J＝15.4,10.2Hz,1H),1.75-1.62(m,4H),1.54
(dd,J＝46.2,12.4Hz,2H),1.34-0.96(m,4H),0.93-0.84(m,2H).m/z 277.3(M+H+)。
(Z)-3-环己基-N-(3,5-二氯苯基)-N',3-二羟基丙脒：使用一般操作A采用56mg 1-环
己基-3-硝基丙-1-醇和194mg 3,5-二氯苯胺制备。使用硅胶色谱(0至5％MeOH/CH2Cl2)纯化
以得到呈油状物的期望产物(50mg,50％)。1H-NMR(600MHz；CDCl3):δ7.08(t,J＝1.7Hz,1H),
6.91(d,J＝1.7Hz,2H),3.50(dd,J＝8.5,6.1Hz,1H),2.60(dd,J＝15.3,1.6Hz,1H),2.29
(dd,J＝15.3,10.4Hz,1H),1.73-1.66(m,4H),1.57(dd,J＝37.9,12.4Hz,2H),1.32-1.05
(m,4H),0.93-0.87(m,2H).m/z 331.1(M+H+)。
(Z)-3-环己基-N',3-二羟基-N-(3-(三氟甲基)苯基)丙脒：使用一般操作A采用56mg
1-环己基-3-硝基丙-1-醇和193mg 3-(三氟甲基)苯胺制备。使用硅胶色谱(0至5％MeOH/
CH2Cl2)纯化以得到呈油状物的期望产物(62mg,63％)。1H-NMR(600MHz；CDCl3):δ7.40(t,J
＝7.8Hz,1H),7.37(d,J＝7.7Hz,1H),7.28(s,1H),7.21(d,J＝7.6Hz,1H),3.50(dd,J＝
8.1,7.8Hz,1H),2.60(d,J＝15.2Hz,1H),2.30(dd,J＝15.2,10.5Hz,1H),1.75-1.62(m,
4H),1.54(dd,J＝53.8,12.3Hz,2H),1.27-1.01(m,4H),0.89-0.81(m,2H).m/z331.2(M+H
+)。
(Z)-N-(3-氯-5-氟苯基)-3-环己基-N',3-二羟基丙脒：使用一般操作A采用56mg 1-环
己基-3-硝基丙-1-醇和175mg 3-氯-5-氟苯胺制备。使用硅胶色谱(0至5％MeOH/CH2Cl2)纯
化以得到呈油状物的期望产物(53mg,56％)。1H-NMR(600MHz；CDCl3):δ7.40(t,J＝7.8Hz,
1H),7.37(d,J＝7.7Hz,1H),7.28(s,1H),7.21(d,J＝7.6Hz,1H),3.50(dd,J＝8.1,7.8Hz,
1H),2.60(d,J＝15.2Hz,1H),2.30(dd,J＝15.2,10.5Hz,1H),1.75-1.62(m,4H),1.54(dd,J
＝53.8,12.3Hz,2H),1.27-1.01(m,4H),0.89-0.81(m,2H).m/z 315.2(M+H+)。
一般操作B：硝基烷烃底物的制备
通过碘化然后用亚硝酸银置换，由相应的醇制备非商业硝基烷烃：在0℃向PPh3
(2.88g,11.0mmol)和咪唑(1.50g,22.0mmol)于CH2Cl2(20mL)中的溶液中添加I2(2.78g,
11.0mmol)。将反应混合物搅拌10分钟，此时滴加醇(10.0mmol)。使反应混合物升温至室温
并搅拌16小时，此时添加Na2S2O3的溶液(2M,20mL)。将两相混合物搅拌10分钟，分离各层。水
层用CH2Cl2(3x 25mL)萃取，合并的有机层经无水MgSO4干燥，过滤，减压浓缩。将所得粗反应
混合物溶于乙醚中，通过用乙醚(150mL)洗脱的4x 4cm硅胶塞过滤。减压浓缩滤液，得到期
望的烷基碘化物，其不经进一步纯化即使用。将粗烷基碘溶于乙醚(20mL)中，加入亚硝酸银
(I)(11.0mmol)。将反应容器包裹在箔中以避光并在室温搅拌24小时。将反应混合物用20mL
乙醚稀释，通过用乙醚(150mL)洗脱的4x 4cm硅胶塞过滤。浓缩滤液以得到粗硝基烷，其无
需进一步纯化即使用。
一般操作C：羟基脒的制备
在-78℃向3-氯苯胺(510mg,4.0mmol)于THF中溶液中添加n-BuLi(1.6mL,4.0mmol,
2.5M于己烷中)。所得反应混合物变为非均相并使其历时30分钟温热至室温。将反应混合物
冷却至0℃并滴加硝基烷烃(1.0mmol)。将所得悬浮液加热至60℃且保持2小时，此时TLC分
析指示硝基烷烃完全消耗。将反应混合物冷却至0℃，并用饱和NH4Cl溶液(20mL)、EtOAc
(20mL)稀释且搅拌5分钟。分离各层，水层用EtOAc(3x 15mL)萃取。将合并的有机萃取物经
无水MgSO4干燥，过滤，并减压浓缩。采用硅胶色谱纯化粗反应混合物以得到期望产物。
(Z)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基丙脒：使用一般操作C采用89mg 1-硝基丙烷和510mg 3-氯
苯胺制备。使用硅胶色谱(0至5％MeOH/CH2Cl2)纯化以得到呈黄褐色油状物的期望产物
(156mg,79％)。1H-NMR(600MHz；CDCl3):δ7.22(t,J＝8.0Hz,1H),7.10(ddd,J＝8.0,1.9,
0.9Hz,1H),7.06(t,J＝2.0Hz,1H),6.94(ddd,J＝8.0,2.1,0.8Hz,1H),2.38(q,J＝7.4Hz,
2H),1.03(t,J＝7.4Hz,3H).m/z 199.1(M+H+)。
(Z)-N-(3-氯苯基)-3-环己基-N'-羟基丙脒：使用一般操作C采用171mg(3-硝基丙基)
环己烷和510mg 3-氯苯胺制备。使用硅胶色谱(0至5％MeOH/CH2Cl2)纯化以得到呈黄色油状
物的期望产物(156mg,56％)。1H-NMR(600MHz；CDCl3):δ7.23(t,J＝8.0Hz,1H),7.10(dd,J＝
8.0,1.0Hz,1H),7.06(t,J＝2.0Hz,1H),6.94-6.93(m,1H),2.35(t,J＝8.1Hz,2H),1.64-
1.57(m,4H),1.33-1.29(m,2H),1.19-1.05(m,4H),0.81-0.75(m,2H).
(Z)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基环戊烷甲脒：使用一般操作C采用129mg(硝基甲基)环戊烷
和510mg 3-氯苯胺制备。使用硅胶色谱(0至5％MeOH/CH2Cl2)纯化以得到呈红色油状物的期
望产物(70mg,29％)。1H-NMR(600MHz；CDCl3):δ7.23(t,J＝8.0Hz,1H),7.11(d,J＝8.1Hz,
1H),7.08(s,1H),6.97(d,J＝7.9Hz,1H),2.89(五重峰,J＝7.7Hz,1H),1.75-1.64(m,6H),
1.48(d,J＝4.6Hz,2H).m/z 239.1(M+H+)。
(Z)-N-(3-氯苯基)-2-环己基-N'-羟基乙脒：使用一般操作C采用157mg(2-硝基乙基)
环己烷和510mg 3-氯苯胺制备。使用硅胶色谱(0至5％MeOH/CH2Cl2)纯化以得到呈黄褐色油
状物的期望产物(18mg,7％)。1H-NMR(600MHz；CDCl3):δ7.23(t,J＝8.0Hz,1H),7.10(dd,J＝
8.0,0.8Hz,1H),7.05(s,1H),6.92(dd,J＝8.0,0.9Hz,1H),2.22(d,J＝7.1Hz,2H),1.71-
1.56(m,8H),1.15-1.08(m,3H).
(Z)-N-(3-氯苯基)-2-环戊基-N'-羟基乙脒：使用一般操作C采用143mg(2-硝基乙基)
环戊烷和510mg 3-氯苯胺制备。使用硅胶色谱(0至5％MeOH/CH2Cl2)纯化以得到呈黄褐色油
状物的期望产物(156mg,62％)。1H-NMR(600MHz；CDCl3):δ7.23(t,J＝8.0Hz,1H),7.23(t,J
＝8.0Hz,1H),7.09(d,J＝8.0Hz,1H),7.09(d,J＝8.0Hz,1H),7.06(d,J＝1.9Hz,1H),7.06
(d,J＝1.9Hz,1H),6.94(d,J＝8.0Hz,1H),6.94(d,J＝8.0Hz,1H),2.35(d,J＝7.4Hz,2H),
2.35(d,J＝7.4Hz,2H),1.93(dt,J＝15.3,7.7Hz,1H),1.93(dt,J＝15.3,7.7Hz,1H),1.72-
1.68(m,2H),1.72-1.68(m,2H),1.59-1.52(m,2H),1.59-1.52(m,2H),1.49-1.45(m,2H),
1.49-1.45(m,2H),1.14-1.09(m,2H),1.14-1.09(m,2H).m/z 253.2(M+H+)。
(Z)-N-(3-氯苯基)-3-环戊基-N'-羟基丙脒：使用一般操作C采用157mg(3-硝基丙基)
环戊烷和510mg 3-氯苯胺制备。使用硅胶色谱(0至5％MeOH/CH2Cl2)纯化以得到呈黄褐色油
状物的期望产物(170mg,64％)。1H-NMR(600MHz；CDCl3):δ7.23(t,J＝8.2Hz,1H),7.10(d,J
＝8.0Hz,1H),7.06(d,J＝1.2Hz,1H),6.94(d,J＝8.0Hz,1H),2.37-2.34(m,2H),1.72-1.65
(m,3H),1.55-1.49(m,2H),1.49-1.41(m,4H),1.01-0.94(m,2H).m/z 267.2(M+H+)。
(Z)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基丁脒：使用一般操作C采用103mg 1-硝基丁烷和510mg 3-
氯苯胺制备。使用硅胶色谱(0至40％EtOAc/己烷)纯化以得到呈黄色油状物的期望产物。
1H-NMR(600MHz；CDCl3):δ7.23(t,J＝8.0Hz,1H),7.11-7.09(m,1H),7.06(t,J＝2.0Hz,1H),
6.94(dt,J＝8.0,1.0Hz,1H),2.33(t,J＝7.6Hz,2H),1.49-1.43(m,2H),0.88(t,J＝7.4Hz,
3H)；m/z 213.1(M+H+)。
(Z)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基戊脒：使用一般操作C采用117mg 1-硝基戊烷和510mg 3-
氯苯胺制备。使用硅胶色谱(0至40％EtOAc/己烷)纯化以得到呈黄色油状物的期望产物
(165mg,73％)。1H-NMR(600MHz；CDCl3):δ7.23(t,J＝8.0Hz,1H),7.10(dt,J＝8.0,0.9Hz,
1H),7.06(t,J＝2.0Hz,1H),6.95-6.93(m,1H),2.34(t,J＝7.7Hz,2H),1.43-1.38(m,2H),
1.31-1.26(m,2H),0.83(t,J＝7.3Hz,3H).m/z 227.1(M+H+)。
(Z)-N-(3-氯苯基)-2-环丙基-N'-羟基乙脒：使用一般操作C采用115mg(2-硝基乙基)
环丙烷和510mg 3-氯苯胺制备。使用硅胶色谱(0至35％EtOAc/己烷)纯化以得到呈橙色油
状物的期望产物(156mg,69％)。1H-NMR(600MHz；CDCl3):δ7.23(t,J＝8.0Hz,1H),7.10(dt,J
＝8.0,0.9Hz,1H),7.08(t,J＝2.0Hz,1H),6.97-6.95(m,1H),2.27(d,J＝6.8Hz,2H),0.83-
0.76(m,1H),0.47-0.43(m,2H),0.08(q,J＝5.2Hz,2H).m/z 225.1(M+H+)。
(Z)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基-3-甲基丁脒：使用一般操作C采用117mg 3-甲基-1-硝基
丁烷和510mg 3-氯苯胺制备。使用硅胶色谱(0至35％EtOAc/己烷)纯化以得到呈橙色油状
物的期望产物(165mg,73％)。1H-NMR(600MHz；CDCl3):δ7.23(t,J＝8.0Hz,1H),7.11-7.09
(m,1H),7.05(t,J＝1.9Hz,1H),6.93(dt,J＝8.0,1.0Hz,1H),2.23(d,J＝7.3Hz,2H),1.69
(双五重峰,J＝13.6,6.8Hz,1H),0.86(d,J＝6.6Hz,6H).m/z 227.2(M+H+)。
(Z)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基己脒：使用一般操作C采用131mg 1-硝基己烷和510mg 3-
氯苯胺制备。使用硅胶色谱(0至25％EtOAc/己烷)纯化以得到呈灰白色固体的期望产物
(208mg,86％)。1H-NMR(600MHz；CDCl3):δ7.23(t,J＝8.0Hz,1H),7.11-7.09(m,1H),7.05(t,
J＝1.9Hz,1H),6.93(dt,J＝8.0,1.0Hz,1H),2.23(d,J＝7.3Hz,2H),1.69(双五重峰,J＝
13.6,6.8Hz,1H),0.86(d,J＝6.6Hz,6H).m/z 241.1(M+H+)。
(Z)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基-2-(四氢呋喃-2-基)乙脒：使用一般操作C采用145mg 2-
(2-硝基乙基)四氢呋喃和510mg 3-氯苯胺制备。使用硅胶色谱(15至60％EtOAc/己烷)纯化
以得到呈油状物的期望产物(55mg,22％)。1H-NMR(600MHz；CDCl3):δ7.21(t,J＝7.9Hz,1H),
7.09-7.07(m,2H),6.95-6.93(m,1H),4.04-4.00(m,1H),3.81-3.76(m,1H),3.69-3.65(m,
1H),2.65(ddd,J＝15.0,6.7,3.2Hz,1H),2.43(ddd,J＝15.1,6.4,3.1Hz,1H),2.00-1.94
(m,1H),1.84-1.80(m,2H),1.54-1.48(m,1H).m/z 255.1(M+H+)。
(Z)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基-4-甲基戊脒：使用一般操作C采用131mg 4-甲基-1-硝基
戊烷和510mg 3-氯苯胺制备。使用硅胶色谱(0至35％EtOAc/己烷)纯化以得到呈灰白色固
体的期望产物(130mg,54％)。1H-NMR(600MHz；CDCl3):δ7.23(t,J＝8.0Hz,1H),7.10(dd,J＝
8.0,0.9Hz,1H),7.07(s,1H),6.94(dt,J＝8.0,0.8Hz,1H),2.35(dd,J＝9.0,7.1Hz,2H),
1.50(双五重峰,J＝13.3,6.6Hz,1H),1.33-1.29(m,2H),0.80(d,J＝6.6Hz,6H).m/z241.2
(M+H+)。
(Z)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基庚脒：使用一般操作C采用145mg 1-硝基庚烷和510mg 3-
氯苯胺制备。使用硅胶色谱(0至25％EtOAc/己烷)纯化以得到呈灰白色固体的期望产物
(140mg,55％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.23(t,J＝8.0Hz,1H),7.10(ddd,J＝8.0,2.0,
1.0Hz,1H),7.06(t,J＝2.0Hz,1H),6.94(ddd,J＝8.0,2.1,1.0Hz,1H),1.29-1.16(m,6H),
0.83(t,J＝7.0Hz,3H).m/z 255.2(M+H+)。
(Z)-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基戊脒：使用一般操作C
采用247mg叔丁基二甲基((5-硝基戊基)氧基)甲硅烷和510mg 3-氯苯胺制备。使用硅胶色
谱(0至4％MeOH/CH2Cl2)纯化以得到呈红色油状物的期望产物。m/z 357.2(M+H+)。
(Z)-N-(3-氯苯基)-N',5-二羟基戊脒：向(Z)-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-N-
(3-氯苯基)-N'-羟基戊脒(107mg,0.3mmol)的溶液中添加四丁基氟化铵的溶液(330μL,
0.33mmol,于THF中的1M溶液)。将反应混合物在室温搅拌6h并通过用50mL EtOAc洗脱的2x
2cm硅胶塞过滤。浓缩滤液并使用硅胶色谱(30至100％EtOAc/己烷)纯化以得到呈橙色固体
的期望产物。m/z 243.2(M+H+)。
(Z)-2-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环戊基)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基乙脒：使
用一般操作C采用272mg叔丁基二甲基((2-(2-硝基乙基)环戊基)氧基)甲硅烷和510mg 3-
氯苯胺制备。使用硅胶色谱(0至4％MeOH/CH2Cl2)纯化以得到呈红色油状物的期望产物。m/z
383.2(M+H+)。
(Z)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基-2-(2-羟基环戊基)乙脒：向(Z)-2-(2-((叔丁基二甲基甲
硅烷基)氧基)环戊基)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基乙脒(115mg,0.3mmol)的溶液中添加四丁基
氟化铵的溶液(330μL,0.33mmol,于THF中的1M溶液)。将反应混合物在室温搅拌6小时并经
50mL EtOAc洗脱的2x 2cm硅胶塞过滤。浓缩滤液并使用硅胶色谱(25至60％EtOAc/己烷)纯
化以得到呈橙色固体的期望产物。m/z 269.2(M+H+)。
(Z)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基-3,3-二甲基丁脒：使用一般操作C采用131mg3,3-二甲基-
1-硝基丁烷和510mg 3-氯苯胺制备。使用硅胶色谱(0至50％EtOAc/己烷)纯化以得到呈黄
色半固体的期望产物。(157mg,62％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.22(t,J＝8.0Hz,1H),
7.10-7.07(m,1H),7.01(t,J＝2.0Hz,1H),6.89(ddd,J＝8.0,2.0,0.8Hz,1H),2.33(s,2H),
0.86(s,9H).m/z241.2(M+H+)。
一般操作D：Horner-Wadsworth-Emmons烯化
在0℃，历时1小时，向NaOtBu或NaH(1.1当量)于THF(1.6M)中的悬浮液中添加膦酰基乙
酸三乙酯(1.1当量)。将混合物在0℃搅拌1小时，滴加适量酮(1.0当量)于THF(1.5M)中的溶
液。将混合物缓慢温热至室温并搅拌90分钟，然后倒入饱和NH4Cl水溶液和EtOAc中。分离各
层，水层用EtOAc(3x)萃取。将合并的有机物依次用饱和NaHCO3和盐水洗涤，然后用无水
Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩。将粗物质通过硅胶色谱(10％EtOAc/己烷)纯化以得到期望产
物。
一般操作E：α,β-不饱和酯的氢化
向α,β-不饱和酯(1.0当量)于乙醇(0.25M)中的溶液中添加10％钯/炭(20重量％)。将
溶液用氢气鼓泡5分钟，然后封盖并在氢气气囊下搅拌16小时。此后，将混合物通过硅藻土
过滤并用EtOAc充分洗涤。然后通过硅胶柱纯化该物质并浓缩，以良好的产率得到饱和产
物。
一般操作F：用Stryker试剂还原α,β-不饱和酯
向α,β-不饱和酯(1.0当量)于甲苯(0.5M)中的溶液中添加[PPh3CuH]6(1mol％)和tBuOH
(1.1当量)。将溶液用氩气鼓泡5分钟，然后添加聚甲基氢硅氧烷(590μL)。将所得混合物在
氩气下在室温搅拌14小时，此时添加饱和NaHCO3水溶液和乙醚。将非均相混合物搅拌3小
时，分离各层。水层用乙醚(2x)萃取，合并的有机萃取液经无水Na2SO4干燥，减压浓缩，采用
硅胶色谱(0至100％EtOAc/己烷)纯化所得混合物以得到期望产物。
一般操作G：酯水解
向酯(1.0当量)于EtOH中的溶液(1.0M)中添加等体积的LiOH水溶液(7.25M)。将混合物
剧烈搅拌，加热至50℃且保持1小时，然后用50mL水稀释，再加热至50℃且保持5小时。将混
合物用冰浴冷却，通过缓慢添加3M HCl酸化(pH约1)。添加EtOAc，分离各层，水相用EtOAc
(3x)萃取。合并的有机萃取物经无水Na2SO4干燥并减压浓缩以得到期望的羧酸，其不经进一
步纯化即使用。
一般操作H：经由酰氯的酰胺形成
将适当的羧酸(1.0当量)溶解于二氯甲烷(0.5M)中并冷却至0℃。小心地添加草酰氯
(1.2当量)，然后添加1滴DMF。然后将混合物历时15分钟温热至室温，之后冷却回至0℃。同
时，将适量苯胺(2.0当量)和三乙胺(2.0当量)合并于二氯甲烷(相对于苯胺为1M)。将该溶
液滴加至冷的酰氯溶液中。然后将混合物在室温搅拌2小时，然后用1N HCl小心淬灭。分离
有机层，水层用二氯甲烷再萃取一次。合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并减
压浓缩。粗残余物通过硅胶色谱(0至100％EtOAc/己烷)纯化以得到期望产物。
一般操作I：用HATU的酰胺键偶联
向经搅拌的羧酸(1.0当量)于DMF(0.3M)溶液中添加苯胺(1.5当量)、iPr2NEt(2当量)
和1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化六氟磷酸盐(HATU)
(1.2当量)。将所得混合物在室温搅拌3小时，此时添加3M HCl和CH2Cl2。分离各层，水层用
CH2Cl2(2x)萃取。合并的有机萃取物经无水Na2SO4干燥，减压浓缩，所得残余物通过硅胶色
谱(0至100％EtOAc/己烷)纯化以得到期望产物。
一般操作J：苯胺加成至酯
在0℃，向苯胺(2.0当量)于THF(0.25M)中的溶液中添加iPrMgCl(2.0当量,2M于THF
中)。将所得溶液温热至室温，搅拌5分钟，此时滴加酯(1.0当量)。将所得混合物在室温搅拌
8小时，并倾倒在饱和NH4Cl溶液上。添加EtOAc，分离各层。水层用EtOAc(3x)萃取。合并的有
机萃取物经无水MgSO4干燥，过滤，并减压浓缩。采用硅胶色谱(0至100％EtOAc/己烷)纯化
粗混合物以得到期望产物。
一般操作K：硫代酰胺形成
将酰胺(0.1mmol,1.0当量)和Lawesson试剂(0.055mmol,0.55当量)的浆液于PhMe(400
μL)中加热2小时。浓缩所得黄色溶液并使用硅胶快速色谱(0至25％EtOAc/己烷)纯化以得
到呈黄色油状物的期望产物。
一般操作L：硫代亚氨基醚(Thioimino ether)形成
向硫代酰胺(0.1mmol,1.0当量)于CH2Cl2(500μL)中的溶液中添加NaHCO3(168mg,
2.0mmol,20当量)。将所得浆液冷却至0℃，并添加Me3OBF4(74mg,0.5mmol,5.0当量)。使混合
物温热至室温，并搅拌1小时。将混合物冷却至0℃，添加饱和NaHCO3溶液(2mL)。将两相混合
物搅拌5分钟，用EtOAc(10mL)稀释，分离各层。水层用EtOAc(3x 10mL)萃取。合并的有机萃
取物经无水MgSO4干燥，过滤并浓缩。粗混合物直接用于随后的步骤。
一般操作M：由硫代亚氨基醚形成羟基脒
向来自前述步骤的粗的硫代亚氨基醚于EtOH(1.0mL)中的溶液中添加羟胺溶液
(50wt.％于H2O中,120μL)，将所得混合物加热至60℃且保持16小时。LC/MS分析指示起始材
料完全消耗并形成期望产物。将混合物用水(10mL)和EtOAc(10mL)稀释，分离各层。水层用
EtOAc(3x 10mL)萃取。合并的有机萃取物经无水MgSO4干燥，过滤，并减压浓缩。采用硅胶快
速色谱(0至5％MeOH/CH2Cl2)纯化粗混合物以得到呈黄色油状物的期望产物。
一般操作N：由硝基化合物形成羟基脒
在-78℃，向经取代的苯胺(1.2mmol)于THF(1.0mL)中的溶液中添加n-BuLi的溶液(480
μL,1.2mmol,2.5M于己烷中)。所得混合物变成非均相的并使其历时30分钟温热至室温。将
混合物冷却至0℃并滴加适量硝基烷烃(0.3mmol)。将所得悬浮液加热至65℃保持2小时，此
时TLC分析指示硝基烷烃完全消耗。将混合物冷却至0℃，用饱和NH4Cl溶液(10mL)、EtOAc
(10mL)稀释，搅拌5分钟。分离各层，水层用EtOAc(3x 15mL)萃取。合并的有机层经无水
MgSO4干燥，过滤并减压浓缩。采用硅胶色谱纯化粗混合物以得到期望产物。
一般操作O：经由Suzuki交叉偶联反应制备芳基环己烯
向于1,4-二噁烷(0.25M)中的2-(4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯-1-基)乙酸
乙酯(1.0当量)、硼酸(1.2当量)、K3PO4(1.5当量)、KBr(1.1当量)中先后添加水(0.025M)和
Pd(PPh3)4(5-10mol％)。将所得混合物加热至80℃且保持16小时，然后将粗混合物减压浓
缩。将所得固体用EtOAc和水稀释并分离各层。水层用EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物经
无水MgSO4干燥，过滤，并减压浓缩。采用硅胶色谱(0至100％EtOAc/己烷)纯化粗混合物以
得到期望产物。
一般操作P：氢化
用氮气吹扫不饱和起始材料在指定溶剂中的溶液并添加20wt.％指定催化剂(无水的
活化Pd/C 10wt.％，或Degussa Pd/C 10wt.％，或10wt.％Pd(OH)2/C)。用橡胶隔膜封闭烧
瓶，并将氢气鼓泡通过非均相混合物，直到起始材料完全消失(通过TLC和/或LC-MS和/或
NMR确定)。完成后，将混合物用氮气吹扫，通过硅藻土垫过滤，并减压浓缩。采用硅胶色谱(0
至100％EtOAc/己烷)纯化粗混合物以得到期望产物。
一般操作Q：经由Suzuki交叉偶联反应制备芳基环己烯
向2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯-1-基)乙酸乙酯
(1.0当量)、芳基卤化物(1.0当量)、Na2CO3(3.0当量)和Pd(PPh3)4(5-10mol％)中添加1,4-
二噁烷/水(9:1,0.2M)。将所得混合物用氮气脱气并加热至85℃且保持24小时，之后将粗混
合物减压浓缩。所得固体用EtOAc和水稀释，并分离各层。水层用EtOAc(3x)萃取。合并的有
机层经无水MgSO4干燥，过滤并减压浓缩。使用硅胶色谱(0至100％EtOAc/己烷)纯化粗混合
物以得到期望产物。
一般操作R：羟基脒的制备
在-78℃，向酰胺于CH2Cl2(0.1M)中的溶液中添加Tf2O(1.5当量)和吡啶(2当量)。将混
合物温热至室温并在室温搅拌15分钟。然后，添加NH2OH(20当量,50wt.％于H2O中)并将混合
物搅拌1小时。减压浓缩混合物并通过硅胶柱色谱纯化以得到期望产物。
(顺式)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基-2-(3-苯基环戊基)乙脒和(反式)-N-(3-氯苯基)-N'-
羟基-2-(3-苯基环戊基)乙脒：用环戊烯酮替代环己烯酮，以与N-(3-氯苯基)-N'-羟基-2-
((1,3)-3-苯基环己基)乙脒相同的方式制备。分离非对映异构体的混合物，呈白色固体。1H
NMR(400MHz,CDCl3):δ9.20–8.40(bs,1H),7.30–6.96(m,9H),3.15–2.87(m,1H),2.64–2.39
(m,2H),2.35–1.18(m,7H)ppm。
(顺式)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基-2-(4-(吡啶-4-基)环己基)乙脒和(反式)-N-(3-氯苯
基)-N'-羟基-2-(4-(吡啶-4-基)环己基)乙脒：使用一般操作Q、P、G、H、K、L、M制备。在一般
操作Q中，使用4-溴吡啶盐酸盐。在一般操作P中，使用AcOH和Degussa Pd/C。在一般操作H
中，使用3-氯苯胺。在一般操作L中，用K2CO3替代NaHCO3。获得期望产物，其为呈灰白色固体
的非对映异构体的混合物。1H NMR(400MHz,CD3OD):δ8.40-8.33(m,2H),7.33-7.23(m,3H),
7.17–7.08(m,2H),7.14-7.04(m,1H),2.56-2.42(m,2H),2.32(d,J＝7.2Hz,1H),1.81(t,J
＝13.0Hz,3H),1.63–1.16(m,5H),1.15–0.98(m,1H)ppm。m/z 172.7(M+2H)2+。
(顺式)-4-(4-(2-((3-氯苯基)氨基)-2-(羟基亚氨基)乙基)环己基)-苯甲酸甲酯：
使用一般操作O、P和J得到4-(4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)环己基)苯甲酸。在一般操作O
中，使用4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)苯甲酸叔丁酯。在一般操作P
中，使用AcOH和Degussa Pd/C。
使用一般操作J(其采用3-氯苯胺)获得4-(4-(2-((3-氯苯基)氨基)-2-氧代乙基)环己
基)苯甲酸。
添加4-(4-(2-((3-氯苯基)氨基)-2-氧代乙基)环己基)苯甲酸于MeOH中的溶液。将混
合物在回流加热8小时。将混合物冷却至室温并减压浓缩以得到(顺式)-4-(4-(2-((3-氯苯
基)氨基)-2-氧代乙基)环己基)苯甲酸甲酯。
使用一般操作K、L和M由(顺式)-4-(4-(2-((3-氯苯基)氨基)-2-氧代乙基)环己基)苯
甲酸甲酯制备。在一般操作L中，用K2CO3替代NaHCO3以得到呈灰白色固体的期望产物。1H
NMR(400MHz,CDCl3):δ7.93(d,J＝8.3Hz,2H),7.22(d,J＝8.5Hz,2H),7.15-6.93(m,4H),
3.89(s,3H),2.49(d,J＝7.4Hz,2H),1.88-1.80(m,1H)1.67–1.41(m,9H)ppm。m/z 401.2(M+
H)+。
(顺式)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基-2-(4-(4-(2-羟基丙-2-基)苯基)环己基)乙脒：
使用一般操作K以得到(顺式)-4-(4-(2-((3-氯苯基)氨基)-2-硫代乙基)环己基)苯甲
酸甲酯。
在0℃至室温，用于乙醚中的MeMgCl(3.5当量)处理(顺式)-4-(4-(2-((3-氯苯基)氨
基)-2-硫代乙基)环己基)苯甲酸甲酯30分钟。添加饱和NH4Cl并用EtOAc萃取混合物。有机
层经Na2SO4干燥并减压浓缩以得到(顺式)-N-(3-氯苯基)-2-(4-(4-(2-羟基丙-2-基)苯基)
环己基)硫代乙酰胺。
使用一般操作L和M以得到呈灰白色固体的期望产物。在一般操作L中，使用K2CO3作为
碱替代NaHCO3。1H NMR(400MHz,CD3OD):δ7.44–6.97(m,8H),2.55(d,J＝7.8Hz,2H),2.47–
2.36(m,1H),1.96–1.26(m,15H)ppm。m/z 401.2(M+H)+。
(顺式)-4-(4-(2-((3-氯苯基)氨基)-2-(羟基亚氨基)乙基)环己基)苯甲酸：将(顺
式)-4-(4-(2-((3-氯苯基)氨基)-2-(羟基亚氨基)乙基)环己基)苯甲酸甲酯用于EtOH:H2O
(1:1,0.2M)中的LiOH(3.5当量)处理8小时。混合物用CH2Cl2萃取。减压浓缩混合物以得到分
离成灰白色固体的期望产物。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.10(d,J＝8.3Hz,2H),7.41(d,J＝
8.3Hz,2H),7.33–7.27(m,1H),7.22–7.14(m,2H),7.08–7.03(m,1H),2.72(d,J＝9.1Hz,
2H),2.55–2.42(m,1H),1.94–1.39(m,9H)ppm。m/z 387.2(M+H)+。
(顺式)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基-2-(4-(4-(羟基甲基)苯基)环己基)-乙脒：
使用一般操作K制备得到(顺式)-4-(4-(2-((3-氯苯基)氨基)-2-硫代乙基)环己基)苯
甲酸甲酯。
在0℃，将(顺式)-4-(4-(2-((3-氯苯基)氨基)-2-硫代乙基)环己基)苯甲酸甲酯用于
THF(0.1M)中的LiAlH4(2.0当量)处理10分钟。混合物用1M HCl淬灭，用EtOAc萃取并通过硅
胶柱色谱(0-100％EtOAc/己烷)纯化以获得N-(顺式)-(3-氯苯基)-2-(4-(4-(羟基甲基)苯
基)环己基)硫代乙酰胺。
使用一般操作L和M制备。在一般操作L中，用K2CO3替代NaHCO3。获得呈灰白色固体的期
望产物。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.30–7.26(m,2H),7.20–6.93(m,6H),4.65(s,1H),2.49
(d,J＝7.7Hz,2H),1.92–1.74(m,1H),1.65–1.45(m,9H)ppm。m/z 373.2(M+H)+。
(顺式)-(4-(4-(2-((3-氯苯基)氨基)-2-(羟基亚氨基)乙基)-环己基)苯基)氨基甲酸
叔丁酯：通过一般操作O、P、G、I、K、L和M制备。在一般操作O中，使用4-(Boc-氨基)苯基硼酸
作为偶联配偶体(partner)。在一般操作P中，分别使用Degussa Pd/C和AcOH作为催化剂和
溶剂。在一般操作I中，使用3-氯苯胺。在一般操作L中，使用K2CO3替代NaHCO3。获得呈灰白色
固体的期望产物。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.25–7.21(m,3H),7.15–7.02(m,5H),6.96(d,J
＝9.2Hz,1H),2.50–2.40(m,3H),1.83(s,1H),1.65–1.39(m,19H)ppm。
(顺式)-2-(4-(4-氨基苯基)环己基)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基乙脒：通过在室温用三氟
乙酸和CH2Cl2(1:1,0.1M)处理30分钟，用1M NaOH淬灭，用CH2Cl2萃取并通过硅胶色谱(0-
100％EtOAc/己烷)纯化，由(顺式)-(4-(4-(2-((3-氯苯基)氨基)-2-(羟基亚氨基)乙基)环
己基)苯基)氨基甲酸叔丁酯制备。分离出呈灰白色固体的期望产物。m/z 358.3(M+H)+。
(顺式)-氨基甲酸4-(4-(2-((3-氯苯基)氨基)-2-(羟基亚氨基)乙基)环己基)苄基酯：
N-(顺式)-(3-氯苯基)-2-(4-(4-(羟基甲基)苯基)环己基)硫代乙酰胺溶于CH2Cl2中
并在室温添加三氯乙酰异氰酸酯(1.1当量)。搅拌1小时后，添加MeOH和K2CO3并经混合物搅
拌4小时。减压浓缩混合物并通过硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/己烷)纯化残余物以得到(顺
式)-氨基甲酸4-(4-(2-((3-氯苯基)氨基)-2-硫代乙基)环己基)苄基酯。
使用一般操作L和M以得到呈灰白色固体的期望产物。在一般操作L中，使用K2CO3替代
NaHCO3。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.28–7.22(m,2H),7.18–7.10(m,4H),7.07(t,J＝2.0Hz,
1H),6.94(ddd,J＝8.0,2.1,1.0Hz,1H),5.04(s,2H),4.78(s,2H),2.55–2.35(m,3H),1.92–
1.76(m,2H),1.67–1.47(m,7H)ppm。m/z 416.2(M+H)+。
(顺式)-N-(4-(4-((Z)-2-((3-氯苯基)氨基)-2-(羟基亚氨基)乙基)-环己基)苯基)乙
酰胺：
采用一般操作O、P、G、I、K。在一般操作O中使用4-(Boc-氨基)苯基硼酸作为偶联配偶
体。在一般操作P中，分别使用Degussa Pd/C和AcOH作为催化剂和溶剂。在一般操作I中，使
用3-氯苯胺。在一般操作L中，使用K2CO3替代NaHCO3以得到(顺式)-(4-(4-(2-((3-氯苯基)
氨基)-2-硫代乙基)环己基)苯基)氨基甲酸叔丁酯。
将(顺式)-(4-(4-(2-((3-氯苯基)氨基)-2-硫代乙基)环己基)-苯基)氨基甲酸叔丁酯
溶于三氟乙酸和CH2Cl2(1:1,0.1M)中并将混合物在室温搅拌30分钟。将混合物用饱和
NaHCO3水溶液碱化，用CH2Cl2萃取。减压浓缩有机层。残余物用吡啶(0.1M)稀释并添加乙酸
酐(1.2当量)。将混合物在室温搅拌1.5小时，倾倒在饱和NH4Cl水溶液上并用CH2Cl2萃取。有
机层经Na2SO4干燥并减压浓缩以得到(顺式)-N-(4-(4-(2-((3-氯苯基)氨基)-2-硫代乙基)
环己基)苯基)乙酰胺。
采用一般操作L和M。在一般操作L中，采用K2CO3替代NaHCO3。1H NMR(400MHz,CD3OD):δ
7.40(d,J＝8.5Hz,2H),7.29(t,J＝8.0Hz,1H),7.16–7.01(m,5H),2.53(d,J＝7.8Hz,2H),
2.46–2.37(m,1H),2.09(s,3H),1.95–1.43(m,9H)ppm。m/z 400.3(M+H)+。
(顺式)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基-2-(4-(吡啶-3-基)环己基)乙脒和(反式)-N-(3-氯苯
基)-N'-羟基-2-(4-(吡啶-3-基)环己基)乙脒：通过一般操作Q、P、J和R制备。通过硅胶柱色
谱(0-20％MeOH/CH2Cl2)纯化以得到非对映异构体的混合物。1H NMR(400MHz,CD3OD):δ
8.46–8.27(m,2H),7.80–7.61(m,1H),7.40–7.22(m,2H),7.17–7.01(m,3H),2.70–2.27(m,
3H),2.02–0.83(m,9H)ppm。m/z 172.7(M+2H)2+。
(顺式)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基-2-(4-(吡啶-2-基)环己基)乙脒和(反式)-N-(3-氯苯
基)-N'-羟基-2-(4-(吡啶-2-基)环己基)乙脒：通过一般操作Q、P、J和R制备。通过硅胶柱色
谱(0-20％MeOH/CH2Cl2)纯化以得到非对映异构体的混合物。1H NMR(400MHz,CD3OD):δ
8.47–8.33(m,1H),7.80–7.68(m,1H),7.40–7.00(m,6H),2.82–2.24(m,3H),2.05–1.00(m,
9H)ppm。LC/MS,m/z 172.7(M+2H)2+。
(顺式)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基-2-(4-丙基环己基)乙脒：通过一般操作D、E、J和R制
备。在一般操作D中，使用4-丙基环己酮。在一般操作B中，使用Degussa Pd/C和EtOH。在一般
操作J中，使用3-氯苯胺。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.23(d,J＝8.0Hz,1H),7.13–7.09(m,
1H),7.06(t,J＝2.1Hz,1H),6.96–6.92(m,1H),2.33(d,J＝7.5Hz,2H),1.71–1.08(m,16H),
0.85(t,J＝7.1Hz,3H)ppm。m/z 309.2(M+H)+。
(顺式)-N-(3,4-二氟苯基)-N'-羟基-2-(4-丙基环己基)乙脒：通过一般操作D、E、J和R
制备。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.17–7.06(m,1H),6.91(ddd,J＝11.5,7.0,2.7Hz,1H),
6.83–6.77(m,1H),2.25(d,J＝7.4Hz,2H),1.45–1.11(m,14H),0.85(t,J＝7.1Hz,3H)ppm。
m/z 311.3(M+H)+。
(顺式)-N-(4-氯苯基)-N'-羟基-2-(4-丙基环己基)乙脒：通过一般操作D、E、J和R制
备。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.30–7.26(m,2H),7.02–6.97(m,2H),2.28(d,J＝7.5Hz,2H),
1.63–1.11(m,14H),0.85(t,J＝7.1Hz,3H)ppm。m/z 309.2(M+H)+。
(顺式)-N-(4-溴苯基)-N'-羟基-2-(4-苯基环己基)乙脒：通过一般操作D、F、J、K、L和M
制备。在一般操作D中，使用4-苯基环己酮。在一般操作J中，使用4-溴苯胺。在一般操作L中，
使用K2CO3替代NaHCO3。产物以灰白色固体分离出来。1H NMR(400MHz,CD3OD):δ7.46–7.40(m,
2H),7.28–7.18(m,2H),7.13–7.07(m,3H),7.05–6.98(m,2H),2.51(d,J＝7.9Hz,2H),2.45–
2.35(m,1H),1.80–1.40(m,9H)ppm。m/z 387.2(M+H)+。
(顺式)-N'-羟基-2-(4-苯基环己基)-N-(4-(三氟甲氧基)苯基)-乙脒：通过一般操作
D、F、J、K、L和M制备。在一般操作D中，使用4-苯基环己酮。在一般操作J中，使用4-三氟甲氧
基苯胺。在一般操作L中，使用K2CO3替代NaHCO3。产物以灰白色固体分离出来。1H NMR
(400MHz,CD3OD)δ7.27–7.01(m,9H),2.51(d,J＝7.8Hz,2H),2.44–2.35(m,1H),1.79–1.39
(m,9H)ppm。m/z 393.2(M+H)+。
(顺式)-N-(4-甲基苯基)-N'-羟基-2-(4-苯基环己基)乙脒：通过一般操作D、E、J、K、L
和M制备。在一般操作D中，使用4-苯基环己酮。在一般操作J中，使用4-甲基苯胺。在一般操
作L中，使用K2CO3替代NaHCO3。产物以灰白色固体分离出来。1H NMR(400MHz,CD3OD):δ7.36–
6.85(m,9H),2.56–2.17(m,6H),1.81–1.20(m,9H)ppm。m/z 323.2(M+H)+。
(顺式)-N-(4-氯-3-氟苯基)-N'-羟基-2-(4-(4-甲氧基苯基)环己基)-乙脒：由(顺
式)-2-((1,4)4-(4-甲氧基苯基)环己基)乙酸甲酯通过一般操作G、I、K、L和M制备。在一般
操作I中，使用3-氟-4-氯苯胺。在一般操作L中，使用K2CO3替代NaHCO3。产物以灰白色固体分
离出来。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.33(t,J＝8.4z Hz,1H),7.08(d,J＝8.7Hz,2H),6.90-
6.75(m,4H),3.77(s,3H),2.48(d,J＝7.7Hz,3H),1.83(s,1H),1.62-1.45(m,8H)ppm。m/
z391.2(M+H)+。
(顺式)-N-(4-氯苯基)-N'-羟基-2-(4-(噻唑-2-基)环己基)-乙脒：
将三丁基-2-噻唑基甲锡烷(1.0当量)、2-(4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯-
1-基)乙酸乙酯(1.0当量)、Pd(PPh3)4(0.1当量)、CuI(0.2当量)和LiCl(1.5当量)于二噁烷
(0.1M)中的溶液在100℃加热16小时。混合物减压浓缩且残余物通过硅胶色谱(0-20％
EtOAc/己烷)纯化，以得到2-(4-(噻唑-2-基)环己-3-烯-1-基)乙酸乙酯。
采用一般操作P、J、K、L和M。在一般操作P中，使用Pd/C和EtOH。在一般操作J中，使用4-
氯苯胺。在一般操作L中，使用K2CO3替代NaHCO3。产物以灰白色固体分离出来。1H NMR
(400MHz,CDCl3):δ7.65(d,J＝3.3Hz,1H),7.31–7.26(m,2H),7.18(d,J＝3.3Hz,1H),7.03–
6.95(m,2H),3.17–3.04(m,1H),2.30(d,J＝7.4Hz,2H),2.14–1.34(m,9H)ppm。m/z 175.6(M
+2H)2+。
(顺式)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基-2-(4-(噻唑-2-基)环己基)乙脒：使用与制备(顺式)-
N-(4-氯苯基)-N'-羟基-2-(4-(噻唑-2-基)环己基)乙脒所使用的操作相同的操作制备，在
一般操作J中用3-氯苯胺替换4-氯苯胺。期望产物以灰白色固体分离出来。1H NMR(400MHz,
CDCl3):δ7.66(d,J＝3.3Hz,1H),7.23(d,J＝8.0Hz,1H),7.18(d,J＝3.3Hz,1H),7.13–7.03
(m,3H),6.94(ddd,J＝8.0,2.1,0.9Hz,1H),3.16–3.07(m,1H),2.35(d,J＝7.4Hz,2H),
2.01–1.33(m,9H)ppm。m/z 175.6(M+2H)2+。
2-(4-苯基亚环己基)乙酸乙酯：将叔丁醇钠(6.1g,63.2mmol)悬浮于THF(72mL)并冷却
至0℃。滴加磷酰基乙酸三乙酯(12.5mL,63.2mmol)并将混合物温热至室温。温热后溶液变
成无色。将混合物冷却至0℃并历时30分钟滴加4-苯基环己酮(10g,57.5mmol)的THF(72mL)
溶液。添加后，将混合物温热至室温，在此期间混合物变成两相。继续搅拌1小时，然后减压
除去溶剂。残余物溶于EtOAc(150mL)中并用1M HCl(100mL)洗涤。有机层用Na2SO4无水干燥，
减压浓缩并通过硅胶色谱(0-30％EtOAc/己烷)纯化，其得到呈澄清油状物的期望产物
(13.3g,95％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.35–7.26(m,2H),7.23–7.15(m,3H),5.68(s,1H),
4.15(d,J＝7.5Hz,2H),4.03–3.89(m,1H),2.79(tt,J＝12.2,3.4Hz,1H),2.49–2.28(m,
2H),2.13–1.97(m,3H),1.74–1.59(m,2H),1.36–1.22(m,3H)ppm。
(反式)-2-(4-苯基环己基)乙酸和(顺式)-2-(4-苯基环己基)乙酸：向2-(4-苯基环己
基)乙酸乙酯(5.8g,23.5mmol,1.0当量)于EtOH(1.0M)中的溶液中添加等体积的LiOH水溶
液(7.25M,145mmol)。将混合物剧烈搅拌，加热至50℃且保持1小时，然后用50mL水稀释并进
一步加热至50℃且保持5小时。然后将混合物冷却至室温并将固体过滤，小心地用冷的5％
LiOH水溶液(2x 10mL)洗涤。然后将湿滤饼在EtOAc(40mL)与6N HCl(25mL)之间分配直至所
有固体溶解。分离各层并减压浓缩有机层以得到纯的反式-非对映异构体。
通过过滤滤液并用3N HCl水溶液酸化至pH约2，获得顺式非对映异构体。然后用EtOAc
(50mL)萃取滤液以得到作为主要产物的顺式非对映异构体。
(反式)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基-2-(4-苯基环己基)乙脒：使用一般操作H、K、L和M制
备，在一般操作H中采用(反式)-2-(4-苯基环己基)-乙酸(400mg)和3-氯苯胺(0.39mL)。使
用硅胶色谱(0至40％EtOAc/己烷)纯化终产物，以得到呈白色泡沫状物的期望产物。1H-NMR
(400MHz；CDCl3):δ7.30–7.23(m,3H),7.19–7.11(m,4H),7.09(t,J＝2.0Hz,1H),6.96(ddd,
J＝8.0,2.1,1.0Hz,1H),2.44–2.37(m,1H),2.31(d,J＝7.1Hz,2H),1.85(d,J＝10.5Hz,
4H),1.51–1.44(m,1H),1.43–1.31(m,2H),1.14–0.95(m,2H)ppm。m/z 343.2(M+H)+。
(顺式)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基-2-(4-苯基环己基)乙脒：使用一般操作H、K、L和M制
备，在一般操作H中采用(顺式)-2-(4-苯基环己基)-乙酸(300mg)和3-氯苯胺(0.30mL)。使
用硅胶色谱(0至100％EtOAc/己烷)纯化终产物，以得到呈白色泡沫状物的期望产物。1H-
NMR(400MHz；CDCl3):δ7.29–7.21(m,3H),7.19–7.04(m,6H),6.95(ddd,J＝8.0,2.2,1.0Hz,
1H),2.51–2.45(m,3H),1.89–1.81(m,1H),1.66–1.51(m,8H)ppm。m/z 343.2(M+H)+。
(反式)-N-(3,4-二氯苯基)-N'-羟基-2-(4-苯基环己基)乙脒：使用一般操作H、K、L和M
制备，在一般操作H中采用(反式)-2-(4-苯基环己基)-乙酸(300mg)和3,4-二氯苯胺
(444mg)。使用硅胶色谱(0至100％EtOAc/己烷)纯化终产物，以得到呈白色固体的期望产
物。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.39(d,J＝8.5Hz,1H),7.29–7.23(m,2H),7.18–7.15(dd,J＝
8.8,2.7Hz,4H),6.92(dd,J＝8.6,2.5Hz,1H),2.46–2.37(m,1H),2.27(d,J＝7.0Hz,2H),
1.88–1.82(m,4H),1.52–1.31(m,3H),1.06(dq,J＝12.9,3.3Hz,2H)ppm。m/z 377.1(M+H)+。
(顺式)-N-(3-氯-4-氟苯基)-N'-羟基-2-(4-苯基环己基)-乙脒：使用一般操作H、K、L
和M制备，在一般操作H中采用(顺式)-2-(4-苯基环己基)乙酸(200mg)和3-氯-4-氟苯胺
(173mg)。使用硅胶色谱(0至100％EtOAc/己烷)纯化终产物，以得到呈白色固体的期望产
物。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.30–7.21(m,3H),7.20–7.06(m,4H),6.96(ddd,J＝8.7,4.1,
2.7Hz,2H),2.54–2.46(m,1H),2.42(d,J＝7.7Hz,2H),1.89–1.75(m,1H),1.68–1.49(m,8H)
ppm。m/z 361.2(M+H)+。
(顺式)-N-(4-氯-3-氟苯基)-N'-羟基-2-(4-苯基环己基)-乙脒：使用一般操作H、K、L
和M制备，在一般操作H中采用(顺式)-2-(4-苯基环己基)乙酸(200mg)和4-氯-3-氟苯胺
(173mg)。使用硅胶色谱(0至100％EtOAc/己烷)纯化终产物，以得到呈白色固体的期望产
物。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.32(t,J＝8.4Hz,1H),7.29–7.21(m,2H),7.20–7.09(m,3H),
6.84(dd,J＝10.2,2.5Hz,1H),6.76(ddd,J＝8.6,2.3,0.9Hz,1H),2.51–2.49(m,3H),1.91–
1.78(m,1H),1.70–1.46(m,8H)ppm。m/z 361.2(M+H)+。
(顺式)-N-(3,4-二氯苯基)-N'-羟基-2-(4-苯基环己基)乙脒：使用一般操作H、K、L和M
制备，在一般操作H中采用(顺式)-2-(4-苯基环己基)-乙酸(150mg)和3,4-二氯苯胺
(133mg)。使用硅胶色谱(0至100％EtOAc/己烷)纯化终产物，以得到呈白色固体的期望产
物。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.37(d,J＝8.6Hz,1H),7.30–7.21(m,3H),7.20–7.12(m,4H),
6.87(dd,J＝8.6,2.6Hz,1H),2.50–2.47(m,3H),1.93–1.75(m,1H),1.62–1.56(m,8H)ppm。
m/z377.3(M+H)+。
(顺式)-N-(3-氟苯基)-N'-羟基-2-(4-苯基环己基)乙脒：使用一般操作H、K、L和M制
备，在一般操作H中采用(顺式)-2-(4-苯基环己基)-乙酸(150mg)和3-氟苯胺(92mg)。使用
硅胶色谱(0至100％EtOAc/己烷)纯化终产物，以得到呈白色固体的期望产物。1H-NMR
(400MHz；CDCl3):δ7.33–7.21(m,3H),7.15(dd,J＝10.8,4.4Hz,4H),6.87–6.82(m,2H),
6.79(dt,J＝10.2,2.3Hz,1H),2.52–2.46(m,3H),1.91–1.80(m,1H),1.64–1.57(m,8H)ppm。
m/z327.2(M+H)+。
(顺式)-N-(3,4-二氟苯基)-N'-羟基-2-(4-苯基环己基)乙脒：使用一般操作H、K、L和M
制备，在一般操作H中采用(顺式)-2-(4-苯基环己基)-乙酸(150mg)和3,4-二氟苯胺
(0.08mL)。使用硅胶色谱(0至100％EtOAc/己烷)纯化终产物，以得到呈白色固体的期望产
物。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.31–7.21(m,2H),7.20–7.06(m,4H),6.96–6.91(m,2H),6.85–
6.78(m,1H),2.54–2.46(m,1H),2.42(d,J＝7.6Hz,2H),1.89–1.74(m,1H),1.67–1.50(m,
8H)ppm。m/z 345.3(M+H)+。
(顺式)-N'-羟基-2-(4-苯基环己基)-N-(3-(三氟甲基)苯基)-乙脒：使用一般操作H、
K、L和M制备，在一般操作H中采用(顺式)-2-(4-苯基环己基)乙酸(200mg)和3-(三氟甲基)
苯胺(0.15mL)。使用硅胶色谱(0至50％EtOAc/己烷)纯化终产物，以得到呈白色固体的期望
产物。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.49–7.35(m,2H),7.32(s,1H),7.29–7.10(m,7H),2.58–
2.43(m,3H),1.92–1.79(m,1H),1.68–1.49(m,8H)ppm。m/z 377.3(M+H)+。
(顺式)-N-(2-氯苯基)-N'-羟基-2-(4-苯基环己基)乙脒：使用一般操作H、K、L和M制
备，在一般操作H中采用(顺式)-2-(4-苯基环己基)-乙酸(100mg)和2-氯苯胺(0.07mL)。使
用硅胶色谱(0至20％EtOAc/己烷)纯化终产物，以得到呈白色固体的期望产物。1H-NMR
(400MHz；CDCl3):δ7.42(dd,J＝8.0,1.4Hz,1H),7.28–7.18(m,5H),7.16–7.07(m,4H),
2.49–2.41(m,3H),1.87–1.69(m,1H),1.60–1.52(m,8H)ppm。m/z 343.2(M+H)+。
(顺式)-N-(4-氯苯基)-N'-羟基-2-(4-苯基环己基)乙脒：使用一般操作H、K、L和M制
备，在一般操作H中采用(顺式)-2-(4-苯基环己基)-乙酸(100mg)和4-氯苯胺(82mg)。使用
硅胶色谱(0至30％EtOAc/己烷)纯化终产物，以得到呈白色固体的期望产物。1H-NMR
(400MHz；CDCl3):δ7.31–7.23(m,4H),7.17–7.14(m,3H),7.04–6.97(m,2H),2.47(d,J＝
7.6Hz,3H),1.87–1.80(m,1H),1.62–1.52(m,8H)ppm。m/z 343.2(M+H)+。
(顺式)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-N'-羟基-2-(4-苯基环己基)乙脒：使用一般操
作I、K、L和M制备，在一般操作I中采用(顺式)-2-(4-苯基环己基)乙酸(120mg)和4-氟-3-
(三氟甲基)-苯胺(0.14mL)。使用硅胶色谱(10至50％EtOAc/己烷)纯化终产物，以得到呈白
色固体的期望产物。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.36–7.05(m,9H),2.49–2.44(m,3H),1.84–
1.74(m,1H),1.68–1.44(m,8H)ppm。m/z 395.2(M+H)+。
2-(4-(4-羟基苯基)亚环己基)乙酸乙酯：向烘干的烧瓶(烧瓶#1)中添加NaH(60％于油
中的分散液,11.8g,295mmol)和120mL THF并冷却至0℃。膦酰基乙酸三乙酯(46.9mL,
236mmol)溶于250mL THF中并历时1小时滴加NaH混合物。添加后，将混合物在室温搅拌1小
时。
向单独的烧瓶中添加伴随加热溶于250mL THF中的37.47克(196.9mmol)的4-(4-羟基
苯基)环己酮。使该溶液冷却至室温后，历时45分钟将其小心地添加至另一烧瓶(烧瓶#2)
中，该烧瓶含有NaH(60％于油中的分散液,8.67g,216mmol)于100mL THF中的0℃混合物。添
加后，将混合物在室温搅拌2小时直至混合物变成澄清溶液。一旦该溶液澄清，将烧瓶#1冷
却回至0℃并经由套管添加烧瓶#2的内容物。添加后，将混合物温热回至室温并搅拌2小时。
通过小心地添加冰和水(1L)淬灭混合物，随后用EtOAc(3x 500mL)萃取并用盐水(1L)
洗涤合并的有机物，以硫酸钠干燥，过滤，并减压浓缩，以97％产率得到呈白色固体的2-(4-
(4-羟基苯基)亚环己基)乙酸乙酯。
(反式)-2-4-(4-羟基苯基)环己基)乙酸乙酯和(顺式)-2-4-(4-羟基苯基)环己基)乙
酸乙酯：向2-(4-(4-羟基苯基)-亚环己基)乙酸乙酯(9.74g,35.8mmol)于EtOAc(180mL)中
的溶液中添加10％钯/炭(0.974g)。溶液用氢气鼓泡5分钟，然后封盖并在氢气气囊下搅拌
16小时。通过硅藻土塞过滤混合物并用EtOAc洗涤硅藻土塞。减压浓缩滤液。然后从EtOAc/
己烷(8mL/10mL)中重结晶固体。通过过滤分离出固体以得到纯的反式异构体。减压浓缩滤
液以得到固体，其中顺式:反式非对映异构体比例为2:1。
(顺式)-2-4-(4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)苯基)环己基)乙酸：使用采用(顺
式)-2-4-(4-羟基苯基)环己基)乙酸乙酯的一般操作G以得到(顺式)-2-(4-(4-羟基苯基)
环己基)乙酸。向(顺式)-2-(4-(4-羟基苯基)环己基)乙酸(3.0g,12.8mmol)于DMF(100mL)
中的溶液中添加咪唑(2.18g,32.0mmol)。将混合物冷却至0℃，然后按份添加叔丁基二甲基
甲硅烷基氯(4.05g,26.9mmol)。然后将混合物慢慢温热至室温并在室温搅拌16小时。添加
饱和氯化铵水溶液(100mL)。然后用EtOAc(3x 100mL)萃取混合物并用水(2x 100mL)和盐水
(100mL)洗涤合并的有机层。有机层以硫酸钠干燥并减压浓缩。通过硅胶色谱(0至100％
EtOAc/己烷)纯化残余物得到无色油状物。将无色油状物溶于THF(50mL)中并添加固体K2CO3
(2.6g,18.8mmol)。然后将混合物搅拌16小时，然后添加水(6mL)，接着搅拌1小时。然后使用
0.2N HCl调节溶液的pH直至pH约7。然后用EtOAc(3x 50mL)萃取混合物并以硫酸钠干燥合
并的有机物，且减压浓缩。通过硅胶色谱(0至100％EtOAc/己烷)纯化粗混合物，以分离出
(顺式)-2-4-(4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)苯基)环己基)乙酸。
(顺式)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基-2-(4-(4-羟基苯基)环己基)-乙脒：
使用一般操作H、K，在一般操作H中采用(顺式)-2-4-(4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧
基)苯基)环己基)乙酸(1.50g)和3-氯苯胺(0.55mL)，以得到(顺式)-2-(4-(4-((叔丁基二
甲基甲硅烷基)氧基)苯基)环己基)-N-(3-氯苯基)硫代乙酰胺。
在0℃，向(顺式)-2-(4-(4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)苯基)环己基)-N-(3-氯苯
基)硫代乙酰胺(180mg,0.380mmol)于THF(1.3mL)中的溶液中添加TBAF(1.0M于THF中,
0.418mL)。将混合物温热至室温并在室温搅拌3小时。通过慢慢添加水(1mL)淬灭混合物。用
EtOAc(3x 10mL)萃取混合物并以硫酸钠干燥合并的有机物，且减压浓缩。通过硅胶色谱(0
至100％EtOAc/己烷)纯化残余物，以得到(顺式)-N-(3-氯苯基)-2-(4-(4-羟基苯基)环己
基)硫代乙酰胺。
使用一般操作L和M。一般操作M采用30当量的羟胺溶液(50wt.％)并在50℃加热混合
物。使用硅胶色谱(30至50％EtOAc/己烷)纯化终产物，以得到呈白色泡沫状物的期望产物
。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.28–7.20(m,2H),7.16–7.09(m,1H),7.08(t,J＝2.1Hz,1H),
7.03–6.90(m,3H),6.76–6.67(m,2H),2.49(d,J＝7.7Hz,2H),2.45–2.35(m,1H),1.84–1.74
(m,1H),1.62–1.43(m,8H)ppm。m/z 359.2(M+H)+。
(顺式)-2-4-(4-羟基苯基)环己基)乙酸甲酯：将(顺式)-2-(4-(4-羟基苯基)环己基)
乙酸(1.7g,7.25mmol)溶于甲醇(15mL)和一滴浓硫酸中。将混合物回流加热16小时。然后将
混合物冷却至室温并添加饱和碳酸氢盐水溶液直至混合物的pH为约7。然后用EtOAc(3x
25mL)萃取混合物并用盐水(50mL)洗涤合并的有机物，以硫酸钠干燥，并浓缩，以得到呈淡
黄色固体的(顺式)-2-4-(4-羟基苯基)环己基)乙酸甲酯。
(顺式)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基-2-(4-(4-吗啉代苯基)环己基)-乙脒和(反式)-N-(3-
氯苯基)-N'-羟基-2-(4-(4-吗啉代-苯基)环己基)乙脒：使用一般操作J、K、L和M制备，在一
般操作J中采用(顺式)-2-4-(4-羟基苯基)环己基)乙酸甲酯(300mg)和3,4-二氟苯胺
(0.36mL)。使用硅胶色谱(30至80％EtOAc/己烷)纯化终产物，以2:1顺式:反式非对映异构
体比例得到呈白色固体的期望产物。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.16–7.09(m,1H),7.04–6.98
(m,2H),6.97–6.88(m,1H),6.83–6.80(m,1H),6.76–6.70(m,2H),2.46–2.18(m,3H),1.83–
1.76(m,3H),1.57–1.51(m,4H),1.42–1.33(m,1H),1.17–0.98(m,1H)ppm。m/z 361.2(M+H
)+。
2-(4-(4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)苯基)环己基)乙酸甲酯：向(顺式)-2-4-(4-羟基
苯基)环己基)乙酸甲酯(1.5g,6.04mmol)于二氯甲烷(30mL)中的0℃溶液中添加三氟甲磺
酸酐(1.22mL,7.25mmol)。将混合物在0℃搅拌20分钟，然后历时20分钟滴加三乙胺(2.1mL,
15.1mmol)。在此期间，混合物的颜色变成红，然后变黑。将混合物在0℃保持90分钟，然后温
热至室温并在室温搅拌16小时。添加水(20mL)小心地淬灭混合物。然后用二氯甲烷(3x
20mL)萃取混合物并相继用饱和碳酸氢盐水溶液(20mL)和盐水(20mL)洗涤合并的有机物，
然后经硫酸钠干燥并减压浓缩。通过硅胶色谱(0至50％EtOAc/己烷)纯化粗残余物以得到
呈黄色油状物的产物，其为顺式:反式非对映异构体的2:1混合物。
2-(4-(4-吗啉代苯基)环己基)乙酸甲酯：在密封管中合并2-(4-(4-(((三氟甲基)磺酰
基)氧基)苯基)环己基)乙酸甲酯(760mg,2.0mmol,2:1dr)、吗啉(0.22mL,2.6mmol)、乙酸钯
(44mg,0.20mmol)、Xphos(96mg,0.20mmol)、碳酸铯(652mg,2.0mmol)和甲苯(10mL)。然后将
该混合物用N2(g)脱气10分钟，随后在116℃加热16小时。然后将混合物冷却至室温并通过
硅藻土塞过滤。用EtOAc彻底洗涤硅藻土塞。减压浓缩滤液并通过硅胶色谱(20至100％
EtOAc/己烷)纯化残余物，以2:1顺式:反式非对映异构体比例得到呈淡黄色固体的分离的
2-(4-(4-吗啉代苯基)环己基)乙酸甲酯。
2-(4-(4-吗啉代苯基)环己基)乙酸盐酸盐：圆底烧瓶装入2-(4-(4-吗啉代苯基)环己
基)乙酸甲酯(650mg,2.05mmol)和乙醇(7mL)。将氢氧化锂(61mg,2.56mmol)溶于水(3mL)中
并添加至乙醇溶液中。将混合物在60℃搅拌16小时，此时添加氢氧化锂(40mg于1mL水中)并
将混合物在70℃再加热3小时。将溶液冷却至0℃并用HCl(2M于Et2O中)酸化至pH约2。减压
浓缩混合物以得到呈橙色泡沫状物的标题化合物。
(顺式)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基-2-(4-(4-吗啉代苯基)环己基)-乙脒：使用一般操作
I、K、L和M制备，在一般操作I中采用2-(4-(4-吗啉代苯基)环己基)乙酸盐酸盐(150mg)和3-
氯苯胺(0.08mL)。使用硅胶色谱(0至100％EtOAc/己烷)纯化终产物，以得到呈白色固体的
期望产物。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.29–7.20(m,2H),7.16–7.02(m,4H),6.95(ddd,J＝
8.0,2.1,0.9Hz,1H),6.85–6.80(m,2H),3.90–3.80(m,4H),3.16–3.04(m,4H),2.48(d,J＝
7.6Hz,2H),2.46–2.38(m,1H),1.87–1.77(m,1H),1.65–1.46(m,8H)ppm。m/z 428.2(M+H)+。
2-(4-(4-(二甲基氨基)苯基)环己基)乙酸甲酯：在密封管中合并2-(4-(4-(((三氟甲
基)磺酰基)氧基)苯基)环己基)乙酸甲酯(1.0g,2.63mmol,2:1dr)、二甲胺(1.0M在THF中,
5.25mL,5.26mmol)、乙酸钯(59mg,0.263mmol)、Xphos(125mg,0.263mmol)、碳酸铯(837mg,
2.63mmol)和甲苯(12mL)。然后将该混合物用N2脱气10分钟，随后在116℃加热16小时。然后
将混合物冷却至室温并通过硅藻土塞过滤。用EtOAc彻底洗涤硅藻土塞。然后减压浓缩滤液
并通过硅胶色谱(20至30％EtOAc/己烷)纯化残余物。以2:1顺式:反式非对映异构体比例分
离出呈澄清油状物的标题化合物。
2-4-(4-(二甲基氨基)苯基)环己基)乙酸盐酸盐：圆底烧瓶装入2-(4-(4-(二甲基氨
基)苯基)环己基)乙酸甲酯(600mg,2.18mmol)和乙醇(8mL)。将氢氧化锂(157mg,6.54mmol)
溶于水(3mL)中并添加至乙醇溶液中。将混合物在70℃搅拌5小时。将溶液冷却至0℃并用
HCl(2M于Et2O中)酸化至pH约2。减压浓缩混合物以得到呈棕色油状物的标题化合物，其未
经进一步纯化即使用。
(顺式)-N-(3,4-二氟苯基)-2-(4-(4-(二甲基氨基)苯基)环己基)-N'-羟基乙脒和(反
式)-N-(3,4-二氟苯基)-2-(4-(4-(二甲基氨基)苯基)环己基)-N'-羟基乙脒：使用一般操
作I、K、L和M制备，在一般操作I中采用2-4-(4-(二甲基氨基)苯基)环己基)乙酸盐酸盐
(300mg)和3,4-二氟苯胺(0.20mL)。使用硅胶色谱(20至60％EtOAc/己烷)纯化终产物，以2:
1顺式:反式非对映异构体比例得到呈白色固体的期望产物。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.22–
6.98(m,4H),6.94–6.90(m,1H),6.86–6.77(m,1H),6.73–6.62(m,2H),2.90–2.88(m,6H),
2.44–2.22(m,3H),1.81(m,2H),1.60–1.54(m,5H),1.37–1.26(m,1H,次要非对映异构体),
1.09–0.95(m,1H,次要非对映异构体)。
(顺式)-N-(3-氯苯基)-2-(4-(4-(二甲基氨基)苯基)环己基)-N'-羟基乙脒和(反式)-
N-(3-氯苯基)-2-(4-(4-(二甲基氨基)苯基)-环己基)-N'-羟基乙脒：使用一般操作I、K、L
和M制备，在一般操作I中采用2-4-(4-(二甲基氨基)苯基)环己基)乙酸盐酸盐(300mg)和3-
氯苯胺(0.21mL)。使用硅胶色谱(20至60％EtOAc/己烷)纯化终产物，以2:1顺式:反式非对
映异构体比例得到呈白色固体的期望产物。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.30–7.21(m,2H),
7.21–7.01(m,4H),6.96(m,1H),6.74–6.61(m,2H),2.94–2.85(m,6H),2.54–2.25(m,3H),
1.84–1.82(m,2H),1.66–1.47(m,5H),1.38–1.27(m,1H,次要非对映异构体),1.10–0.98(m,
1H,次要非对映异构体)。
(顺式)-2-((1,4)4-(4-甲氧基苯基)环己基)乙酸甲酯：向圆底烧瓶中添加(顺式)-2-
4-(4-羟基苯基)环己基)乙酸甲酯(1.4g,5.64mmol)、碳酸铯(3.21g,9.87mmol)和DMF
(57mL)。然后添加碘甲烷(0.44mL,7.04mmol)并将混合物在室温搅拌2小时。此后，将混合物
冷却至0℃，用水(100mL)稀释，并用EtOAc(3x 50mL)萃取。合并的有机层用盐水(50mL)洗
涤，经硫酸钠干燥并减压浓缩。通过硅胶色谱(0至15％EtOAc/己烷)纯化残余物，以得到呈
无色油状物的(顺式)-2-((1,4)4-(4-甲氧基苯基)环己基)乙酸甲酯。
(顺式)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基-2-(4-(4-甲氧基苯基)环己基)-乙脒：使用一般操作
G、H、K、L和M，在一般操作G中采用(顺式)-2-(4-(4-甲氧基苯基)环己基)乙酸甲酯。在一般
操作H中使用3-氯苯胺(0.32mL)。使用硅胶色谱(0至100％EtOAc/己烷)纯化终产物，以得到
呈白色泡沫状物的期望产物。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.28–7.19(m,1H),7.15–7.03(m,
5H),6.94(ddd,J＝8.0,2.1,0.9Hz,1H),6.83–6.74(m,2H),3.76(s,3H),2.49(d,J＝7.6Hz,
2H),2.47–2.38(m,1H),1.90–1.79(m,1H),1.65–1.51(m,8H)ppm。m/z373.2(M+H)+。
(顺式)-4-(4-(2-((3,4-二氟苯基)氨基)-2-(羟基亚氨基)乙基)-环己基)苯甲酸甲
酯：用4-(4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)环己基)苯甲酸(320mg)和3,4-二氟苯胺(0.33mL)完成
一般操作J，得到4-(4-(2-((3,4-二氟苯基)氨基)-2-氧代乙基)环己基)苯甲酸。将4-(4-
(2-((3,4-二氟苯基)氨基)-2-氧代乙基)环己基)苯甲酸溶于甲醇(10mL)和2滴浓硫酸中。
将混合物加热至回流且保持16小时。将混合物冷却至室温，小心添加碳酸氢钠进行碱化并
用EtOAc(3x 25mL)萃取。合并的有机层经硫酸钠干燥，并减压浓缩。通过硅胶色谱(20至
25％EtOAc/己烷)纯化粗残余物，以得到(顺式)-4-(4-(2-((3,4-二氟苯基)氨基)-2-氧代
乙基)环己基)苯甲酸甲酯。然后采用一般操作K、L和M并使用硅胶色谱(0至100％EtOAc/己
烷)纯化终产物，以得到呈白色泡沫状物的期望产物。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.92–7.84
(m,2H),7.22(d,J＝8.3Hz,2H),7.10(dd,J＝18.7,8.8Hz,1H),7.02(s,1H),6.89(ddd,J＝
11.1,6.9,2.6Hz,1H),6.84–6.71(m,1H),3.93–3.80(m,3H),2.53(dd,J＝14.5,7.4Hz,1H),
2.43(d,J＝7.7Hz,2H),1.87–1.70(m,1H),1.57(dt,J＝16.9,9.7Hz,8H)ppm。m/z 403.2(M+
H)+。
(顺式)-2-(4-(叔丁基)环己基)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基乙脒：使用一般操作D、E、G、I、
K、L和M，在操作D中采用4-叔丁基环己酮。在一般操作I中使用3-氯苯胺。使用硅胶色谱(0至
20％EtOAc/己烷)纯化终产物，以得到呈白色泡沫状物的期望产物。1H-NMR(400MHz；CDCl3):
δ7.23(t,J＝8.0Hz,1H),7.12–7.04(m,2H),6.94(ddd,J＝8.0,2.1,0.9Hz,1H),2.42(d,J＝
7.6Hz,2H),1.87–1.72(m,1H),1.57(d,J＝12.8Hz,2H),1.44(d,J＝12.8Hz,2H),1.41–1.28
(m,2H),1.07–0.81(m,3H),0.78(s,9H)ppm。m/z 323.2(M+H)+。
(顺式)-2-(4-(叔丁基)环己基)-N-(3,4-二氟苯基)-N'-羟基-乙脒：使用一般操作D、
E、G、I、K、L和M，在操作D中采用4-叔丁基环己酮。在一般操作I中使用3,4-二氟苯胺。使用硅
胶色谱(0至20％EtOAc/己烷)纯化终产物，以得到呈白色泡沫状物的期望产物。1H-NMR
(400MHz；CDCl3):δ7.18–7.00(m,2H),6.96–6.84(m,1H),6.84–6.74(m,1H),2.35(d,J＝
7.7Hz,2H),1.79–1.72(m,1H),1.54(d,J＝12.4Hz,2H),1.44(d,J＝12.8Hz,2H),1.40–1.28
(m,2H),1.07–0.82(m,3H),0.79(s,9H)ppm。m/z 325.3(M+H)+。
(顺式)-4-(2-((3-氯苯基)氨基)-2-氧代乙基)环己烷-1-羧酸甲酯：使用一般操作D、E
和J，在一般操作D中采用4-氧代环己烷羧酸。一般操作E采用氧化铂作为催化剂并在室温搅
拌混合物3天。在一般操作J中使用3-氯苯胺以制备4-(2-((3-氯苯基)氨基)-2-氧代乙基)
环己烷-1-羧酸。向4-(2-((3-氯苯基)氨基)-2-氧代乙基)环己烷-1-羧酸(1.23g,
4.16mmol)中添加甲醇(25mL)和5滴浓硫酸。将混合物回流加热16小时。然后将混合物冷却
至室温并用碳酸氢钠水溶液调节pH至8。用EtOAc(3x 25mL)萃取该混合物并用盐水(25mL)
洗涤合并的有机层，以无水Na2SO4干燥并减压浓缩。使用硅胶色谱(10至25％EtOAc/己烷)纯
化残余物，以得到(顺式)-4-(2-((3-氯苯基)氨基)-2-氧代乙基)环己烷-1-羧酸甲酯。
(顺式)-N-(3-氯苯基)-2-(4-(2-羟基丙-2-基)环己基)硫代乙酰胺：使用采用(顺式)-
4-(2-((3-氯苯基)氨基)-2-氧代乙基)环己烷-1-羧酸甲酯的一般操作K，以得到(顺式)-4-
(2-((3-氯苯基)氨基)-2-硫代乙基)环己烷-1-羧酸甲酯。将(顺式)-4-(2-((3-氯苯基)氨
基)-2-硫代乙基)环己烷-1-羧酸甲酯(110mg,0.34mmol)溶于THF(2mL)中并冷却至0℃，然
后添加甲基溴化镁(2.5M于THF中,0.54mL,1.35mmol)。将混合物在室温搅拌1小时，然后添
加饱和氯化铵水溶液。用EtOAc(3x 10mL)萃取混合物并用盐水(25mL)洗涤合并的有机层，
以Na2SO4无水干燥，并减压浓缩。使用硅胶色谱(10至25％EtOAc/己烷)纯化残余物，以得到
(顺式)-N-(3-氯苯基)-2-(4-(2-羟基丙-2-基)环己基)硫代乙酰胺。
(顺式)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基-2-(4-(2-羟基丙-2-基)环己基)-乙脒：使用一般操作
L和M以由(顺式)-N-(3-氯苯基)-2-(4-(2-羟基丙-2-基)环己基)硫代乙酰胺制备标题化合
物。使用硅胶色谱(30至100％EtOAc/己烷)纯化终产物，以得到呈白色固体的期望产物。1H-
NMR(400MHz；CDCl3):δ7.23(t,J＝8.0Hz,1H),7.15–7.02(m,2H),6.98–6.91(m,1H),2.43
(d,J＝7.8Hz,2H),1.82–1.73(m,1H),1.64–1.47(m,4H),1.41–1.34(m,2H),1.23–1.01(m,
9H)ppm。m/z 325.2(M+H)+。
(顺式)-4-(2-((3-氯苯基)氨基)-2-(羟基亚氨基)乙基)环己烷-1-羧酸甲酯：使用一
般操作K、L和M以由(顺式)-4-(2-((3-氯苯基)氨基)-2-氧代乙基)环己烷-1-羧酸甲酯制备
标题化合物。使用硅胶色谱(0至30％EtOAc/己烷)纯化终产物，以得到呈白色固体的期望产
物。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.23(t,J＝8.0Hz,1H),7.15(s,1H),7.10(ddd,J＝8.0,1.9,
0.9Hz,1H),7.07(t,J＝2.0Hz,1H),6.94(ddd,J＝8.0,2.1,1.0Hz,1H),3.63(s,3H),2.51–
2.39(m,1H),2.30(d,J＝6.9Hz,2H),1.99–1.84(m,2H),1.61–1.39(m,5H),1.26–1.15(m,
2H)ppm。
(顺式)-4-(2-((4-氯苯基)氨基)-2-氧代乙基)环己烷-1-羧酸甲酯：使用一般操作D、E
和J，在操作D中采用4-氧代环己烷羧酸。一般操作E采用氧化铂作为催化剂并在室温搅拌混
合物3天。一般操作J使用4-氯苯胺以得到4-(2-((4-氯苯基)氨基)-2-氧代乙基)环己烷-1-
羧酸。向于二氯甲烷(25mL)和甲醇(25mL)中的4-(2-((4-氯苯基)氨基)-2-氧代乙基)环己
烷-1-羧酸(1.4g,4.16mmol)滴加(三甲基甲硅烷基)重氮甲烷溶液(2.0M于乙醚中,
4.73mL)。然后将混合物在室温搅拌15分钟，然后添加硅胶。减压浓缩混合物并通过硅胶色
谱(15至40％EtOAc/己烷)纯化，以得到呈白色固体的(顺式)-4-(2-((4-氯苯基)氨基)-2-
氧代乙基)环己烷-1-羧酸甲酯。
(顺式)-4-(2-((4-氯苯基)氨基)-2-(羟基亚氨基)乙基)环己烷-1-羧酸甲酯：使用一
般操作K、L和M以由(顺式)-4-(2-((4-氯苯基)氨基)-2-氧代乙基)环己烷-1-羧酸甲酯制备
标题化合物。使用硅胶色谱(0至30％EtOAc/己烷)纯化终产物，以得到呈白色固体的期望产
物。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.32–7.22(m,2H),7.08(s,1H),7.03–6.94(m,2H),3.62(s,
3H),2.50–2.39(m,1H),2.25(d,J＝6.8Hz,2H),1.98–1.82(m,2H),1.55–1.38(m,5H),1.25–
1.11(m,2H)ppm。
4-((顺式)-2-((3-氯苯基)氨基)-2-(羟基亚氨基)乙基)-N-苯基环己烷-1-甲酰胺：进
行使用(顺式)-4-(2-((3-氯苯基)氨基)-2-硫代乙基)环己烷-1-羧酸甲酯(110mg)和苯胺
(0.12mL)的一般操作J，以得到(顺式)-4-(2-((3-氯苯基)氨基)-2-硫代乙基)-N-苯基环己
烷-1-甲酰胺，随后使其经受一般操作L和M。使用硅胶色谱(10至50％EtOAc/己烷)纯化终产
物，以得到呈白色固体的期望产物。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.46(d,J＝7.8Hz,2H),7.33–
7.14(m,5H),7.13–6.98(m,3H),6.93(ddd,J＝8.0,2.1,1.0Hz,1H),2.40(d,J＝7.5Hz,2H),
2.35–2.30(m,1H),1.93–1.79(m,2H),1.71–1.56(m,3H),1.56–1.41(m,4H)ppm。m/z 386.2
(M+H)+。
(顺式)-N'-羟基-N-(4-甲氧基苯基)-2-(4-苯基环己基)乙脒：使用一般操作D、E、G、I、
K、L和M制备。一般操作E使用2-(4-苯基亚环己基)乙酸乙酯和Degussa Pd/C(10wt.％)。一
般操作G使用2-(4-苯基环己基)乙酸乙酯。一般操作I使用2-(4-苯基环己基)乙酸和4-甲氧
基苯胺(2当量)。一般操作K使用N-(4-甲氧基苯基)-2-(4-苯基环己基)乙酰胺。使用硅胶色
谱(0至30％EtOAc/己烷)分离出作为第一洗脱异构体的期望的(顺式)-异构体。当于DMSO-
d6中进行NMR时观察到E和Z异构体的混合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.39(s,0.7H),
8.92(s,0.3H),7.65(s,0.3H),7.52(s,0.7H),7.38-7.25(m,0.7H),7.19-7.30(m,2.7H),
7.08-7.17(m,2.3H),6.97-7.03(m,1.3H),6.81-6.87(m,1.3H),6.71-6.77(m,0.7H),3.70
(s,2H),3.65(s,1H),2.47-2.53(m,1.3H),2.33-2.44(m,0.7H),2.31(d,J＝7.7Hz,1.3H)
2.20-2.30(m,0.3H),1.74-1.88(m,0.7H),1.63-1.74(m,0.7H),1.49-1.62(m,2H),1.33-
1.50(m,5H)ppm。m/z 339.3(M+H)+。
(顺式)-N-(3-氟-4-甲氧基苯基)-N'-羟基-2-(4-苯基环己基)-乙脒：使用一般操作D、
E、G、I、K、L和M制备。一般操作E使用2-(4-苯基亚环己基)乙酸乙酯和Degussa Pd/C
(10wt.％)。一般操作G使用2-(4-苯基环己基)乙酸乙酯。一般操作I使用2-(4-苯基环己基)
乙酸和3-氟-4-甲氧基苯胺(2当量)。一般操作K使用N-(3-氟-4-甲氧基苯基)-2-(4-苯基环
己基)乙酰胺。使用硅胶色谱(0至30％EtOAc/己烷)分离出作为第一洗脱异构体的期望的
(顺式)-异构体。m/z 357.3(M+H)+。
(顺式)-N-(3,5-二氟-4-甲氧基苯基)-N'-羟基-2-(4-苯基环己基)-乙脒：使用一般操
作D、E、G、I、K、L和M制备。一般操作E使用2-(4-苯基亚环己基)乙酸乙酯和Degussa Pd/C
(10wt.％)。一般操作G使用2-(4-苯基环己基)乙酸乙酯。一般操作I使用2-(4-苯基环己基)
乙酸和3,5-二氟-4-甲氧基苯胺(2当量)。一般操作K使用N-(3,5-二氟-4-甲氧基苯基)-2-
(4-苯基环己基)乙酰胺。使用硅胶色谱(0至30％EtOAc/己烷)分离出作为第一洗脱异构体
的期望的(顺式)-异构体。m/z 375.3(M+H)+。
(顺式)-N-(4-三氟甲基苯基)-N'-羟基-2-(4-苯基环己基)-乙脒：使用一般操作D、E、
G、I、K、L和M制备。一般操作E使用2-(4-苯基亚环己基)乙酸乙酯和Degussa Pd/C
(10wt.％)。一般操作G使用2-(4-苯基环己基)乙酸乙酯。一般操作I使用2-(4-苯基环己基)
乙酸和4-三氟甲基苯胺(2当量)。一般操作K使用N-(4-三氟甲基苯基)-2-(4-苯基环己基)
乙酰胺。使用硅胶色谱(0至30％EtOAc/己烷)分离出作为第一洗脱异构体的期望的(顺式)-
异构体。当于DMSO-d6中进行NMR时观察到E和Z异构体的混合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ
9.98(s,0.25H),9.44(s,0.75H),8.38(s,0.75H),8.29(s,0.25H),7.64-7.69(m,1.6H),
7.46-7.55(m,2H),7.20-7.31(m,3.5H),7.08-7.18(m,1.9H),2.48-2.60(m,3H),2.38-2.48
(m,0.25H),2.18-2.28(m,0.75H),1.75-1.90(m,1.75H),1.42-1.64(m,6.25H)ppm。m/z
377.2(M+H)+。
(顺式)-N-(3-氟-4-三氟甲基苯基)-N'-羟基-2-(4-苯基环己基)乙脒：使用一般操作
D、E、G、I、K、L和M制备。一般操作E使用2-(4-苯基亚环己基)乙酸乙酯和Degussa Pd/C
(10wt.％)。一般操作G使用2-(4-苯基环己基)乙酸乙酯。一般操作I使用2-(4-苯基环己基)
乙酸和4-3-氟-4-三氟甲基苯胺(2当量)。一般操作K使用N-(3-氟-4-三氟甲基苯基)-2-(4-
苯基环己基)乙酰胺。使用硅胶色谱(0至30％EtOAc/己烷)分离出作为第一洗脱异构体的
(顺式)-异构体。当于DMSO-d6中进行NMR时观察到E和Z异构体的混合物。1H NMR(400MHz,
DMSO-d6):10.22(s,0.15H),9.65(s,0.85H),8.68(s,0.85H),8.54(s,0.15H),7.74-7.82
(m,0.85H),7.47-7.55(m,1H),7.21-7.30(m,4.85H),7.10-7.18(m,1.15H),6.84-6.92(m,
0.15H),2.48-2.60(m,3H),2.38-2.48(m,0.15H),2.16-2.26(m,0.85H),1.74-1.88(m,
1.85H),1.46-1.64(m,6.15H)ppm。m/z 395.2(M+H)+。
(顺式)-N-(3-氟-4-甲基苯基)-N'-羟基-2-(4-苯基环己基)-乙脒：使用一般操作D、E、
G、I、K、L和M制备。一般操作E使用2-(4-苯基亚环己基)乙酸乙酯和Degussa Pd/C
(10wt.％)。一般操作G使用2-(4-苯基环己基)乙酸乙酯。一般操作I使用2-(4-苯基环己基)
乙酸和3-氟-4-甲基苯胺(2当量)。一般操作K使用N-(3-氟-4-甲基苯基)-2-(4-苯基环己
基)乙酰胺。使用硅胶色谱(0至30％EtOAc/己烷)分离出作为第一洗脱异构体的(顺式)-异
构体。当于DMSO-d6中进行NMR时观察到E和Z异构体的混合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):
9.67(s,0.35H),9.21(m,0.65H),8.02(s,0.65H),7.87(s,0.35H),7.51-7.57(m,0.65H),
7.20-7.30(m,3.35H),7.08-7.17(m,2H),7.07-7.05(m,1.35H),7.76-7.86(m,0.65H),
2.48-2.55(m,1.85H),2.35-2.48(m,1.25H),2.17-2.27(m,0.65H),2.12-2.15(m,1H),
2.07-2.10(m,2H),1.67-1.87(m,1.75H),1.40-1.60(m,6.5H)ppm。m/z 341.2(M+H)+。
N-(3-氯-4-氟苯基)-2-环戊基-N'-羟基乙脒：使用一般操作N制备，其采用143mg(2-硝
基乙基)环戊烷、582mg 3-氯-4-氟苯胺和于5.0mL THF中的4.0mmol BuLi。使用硅胶色谱(0
至5％MeOH/CH2Cl2)纯化，以得到呈油状物的期望产物。m/z 271.1(M+H+)。
3-(2-羟基乙基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯：在-78℃，向2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-
基)乙酸(2.29g,10mmol)的溶液中添加BH3·SMe2的溶液(12mL,12.0mmol 1M于THF中)。使混
合物温热至室温并搅拌4小时。将混合物冷却至0℃。添加1M NaOH溶液(20mL)，接着添加
EtOAc(30mL)。分离各层，并用EtOAc(3x 25mL)萃取水层。合并的有机层以无水MgSO4干燥，
过滤，并减压浓缩。采用硅胶色谱(40至100％EtOAc/己烷)纯化残余物，以得到呈油状物的
期望产物，596g，67％。
3-(2-((3-氯苯基)氨基)-2-(羟基亚氨基)乙基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯：使用一般操作
N制备，其采用855mg 3-(2-硝基乙基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯、1.79g 3-氯苯胺和于18.0mL
THF中的14.0mmol BuLi。使用硅胶色谱(20至70％EtOAc/己烷)纯化，以得到呈油状物的期
望产物(1.06g,85％产率)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.33(s,1H),7.28-7.24(m,1H),7.14
(dd,J＝7.8,0.2Hz,1H),7.08(t,J＝1.9Hz,1H),6.97-6.95(m,1H),3.48-3.30(m,2H),
3.23-3.17(m,1H),2.97-2.83(m,1H),2.48-2.40(m,2H),2.28-2.21(m,1H),1.95-1.90(m,
1H),1.54-1.46(m,1H),1.40(s,9H)ppm。m/z 298.1(M+H+)。
N-(3-氯苯基)-N'-羟基-2-(吡咯烷-3-基)乙脒：在0℃，向(Z)-3-(2-((3-氯苯基)氨
基)-2-(羟基亚氨基)乙基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(35mg,0.1mmol)于CH2Cl2(500μL)中的溶
液中添加TFA(114mg,1.0mmol)。将混合物温热至室温并搅拌4小时。减压浓缩混合物并使用
硅胶色谱(0至25％MeOH/CH2Cl2)纯化残余物，以得到呈油状物的期望产物。1H-NMR(400MHz；
CDCl3):δ9.73(s,1H),9.40(s,1H),7.29(t,J＝8.0Hz,1H),7.20-7.18(m,1H),7.08(t,J＝
1.9Hz,1H),6.97(dd,J＝7.9,1.0Hz,1H),3.46-3.37(m,2H),3.17-3.13(m,2H),2.65(dd,J
＝15.0,4.0Hz,1H),2.54-2.48(m,1H),2.48-2.39(m,1H),2.15-2.06(m,1H),1.79-1.69(m,
1H)ppm。m/z 239.1(M+H+)。
4-(2-羟基乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：在室温，向2-(哌啶-4-基)乙-1-醇(5.0g,
38.7mmol)于THF(100mL)中的溶液中添加Boc2O(8.45g,38.7mmol)。将混合物在室温搅拌16
小时，然后减压浓缩。使用硅胶色谱(40至80％EtOAc/己烷)纯化残余物，以得到呈油状物的
期望产物。
4-(2-((3-氯苯基)氨基)-2-(羟基亚氨基)乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：使用一般操作N
制备，其采用129mg 4-(2-硝基乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯、255mg 3-氯苯胺和于2.5mL THF
中的2.0mmol BuLi。使用硅胶色谱(20至70％EtOAc/己烷)纯化以得到呈油状物的期望产物
(132mg,72％产率)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.25(t,J＝8.0Hz,1H),7.13(ddd,J＝8.0,
2.0,0.9Hz,1H),7.09-7.05(m,2H),6.93(ddd,J＝8.0,2.1,1.0Hz,1H),4.02(s,2H),2.64-
2.55(m,2H),2.27(d,J＝6.8Hz,2H),1.66-1.53(m,4H),1.42(s,9H),1.11-1.00(m,2H)ppm。
2-(1-乙酰基哌啶-4-基)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基乙脒：使用一般操作N制备，其采用
100mg 1-(4-(2-硝基乙基)哌啶-1-基)乙-1-酮、255mg 3-氯苯胺和于2.5mL THF中的
2.0mmol BuLi。使用硅胶色谱(0至25％MeOH/CH2Cl2)纯化，以得到呈橙色泡沫状物的期望产
物。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.22(t,J＝8.0Hz,1H),7.09(dd,J＝8.0,0.9Hz,1H),7.02(s,
1H),6.91-6.89(m,1H),4.50-4.46(m,1H),3.70-3.67(m,1H),2.92-2.85(m,1H),2.44-2.38
(m,1H),2.29-2.24(m,2H),2.01(s,3H),1.69-1.58(m,3H),1.10-0.99(m,2H)ppm。m/z310.1
(M+H+)。
2-(1-苯甲酰基哌啶-4-基)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基乙脒：使用一般操作N制备，其采用
235mg 1-(4-(2-硝基乙基)哌啶-1-基)乙-1-酮、459mg 3-氯苯胺和于4.5mL THF中的
3.6mmol BuLi。使用硅胶色谱(50至100％EtOAc/己烷)纯化，以得到呈泡沫状物的期望产物
(151mg,45％产率)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.36-7.30(m,5H),7.22(t,J＝8.0Hz,1H),
7.10-7.08(m,1H),7.02(t,J＝2.0Hz,1H),6.91-6.89(m,1H),4.61-4.58(m,1H),3.66-3.61
(m,1H),2.89-2.60(m,2H),2.37-2.26(m,2H),1.75-1.54(m,3H),1.19-1.02(m,2H)ppm。m/z
372.2(M+H+)。
N-(3-氯苯基)-2-(1-(环戊烷羰基)哌啶-4-基)-N'-羟基乙脒：使用一般操作N制备，其
采用36mg环戊基(4-(2-硝基乙基)哌啶-1-基)甲酮、71mg 3-氯苯胺和于0.7mL THF中的
0.56mmol BuLi。使用硅胶色谱(50至100％EtOAc/己烷)纯化，以得到呈棕色泡沫状物的期
望产物(39mg,45％产率)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.24(t,J＝8.0Hz,1H),7.12-7.10(m,
1H),7.04(t,J＝2.0Hz,1H),6.92(dt,J＝8.0,1.0Hz,1H),4.55-4.52(m,1H),3.89-3.86(m,
1H),2.91-2.78(m,2H),2.48-2.41(m,1H),2.28(dd,J＝6.7,2.7Hz,2H),1.79-1.60(m,8H),
1.56-1.49(m,3H),1.07-1.01(m,2H)ppm。m/z 364.2(M+H+)。
(顺式)-4-(4-(2-((3-氯苯基)氨基)-2-(羟基亚氨基)乙基)环己基)-苯甲酰胺：使用
一般操作D、F、G、H、K、L和M制备。在一般操作D中采用4-(4-氧代环己基)苯甲腈。一般操作H
使用3-氯苯胺。一般操作M使用(顺式)-N-(3-氯苯基)-2-(4-(4-氰基苯基)环己基)硫代乙
酰亚氨酸甲酯(35mg)、羟胺溶液(61μL)、EtOH(500mL)。使用硅胶色谱(0至5％MeOH/CH2Cl2)
纯化，以得到呈油状物的期望产物。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.70(d,J＝8.3Hz,1H),7.50
(d,J＝8.3Hz,2H),7.23(d,J＝1.4Hz,2H),7.19(d,J＝8.3Hz,1H),7.12(ddd,J＝8.0,2.0,
0.9Hz,1H),7.09(q,J＝1.9Hz,1H),6.97-6.94(m,1H),4.88-4.81(br s,2H),2.50(d,J＝
7.7Hz,2H),1.86-1.81(m,1H),1.62-1.56(m,11H)ppm。m/z 386.2(M+H+)。
(顺式)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基-2-(4-异丙基环己基)乙脒：使用一般操作D、F、J、K、L
和M制备。在一般操作D中采用4-异丙基环己烷-1-酮。在一般操作J中使用3-氯苯胺。一般操
作M使用(顺式)-N-(3-氯苯基)-2-(4-异丙基环己基)硫代乙酰亚氨酸甲酯(110mg)、羟胺溶
液(227μL)和EtOH(3.0mL)。使用硅胶色谱(5至20％EtOAc/己烷)纯化，以得到呈油状物的期
望产物。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.23(t,J＝8.0Hz,1H),7.10-7.08(m,1H),7.05(q,J＝
2.0Hz,1H),6.94(dt,J＝8.0,1.0Hz,1H),2.39(d,J＝7.5Hz,2H),1.71-1.63(m,1H),1.46-
1.20(m,9H),1.03-0.94(m,1H),0.88-0.85(m,1H),0.80(d,J＝6.7Hz,6H)ppm。m/z 309.2(M
+H+)。
(顺式)-N-(3,4-二氟苯基)-N'-羟基-2-(4-异丙基环己基)乙脒：使用一般操作D、F、J、
K、L和M制备。在一般操作D中采用4-异丙基环己烷-1-酮。在一般操作J中使用3,4-二氟苯
胺。一般操作M使用(顺式)-N-(3,4-二氟苯基)-2-(4-异丙基环己基)硫代乙酰亚氨酸甲酯
(111mg)、羟胺溶液227μL和EtOH(3.0mL)。使用硅胶色谱(0至10％EtOAc/己烷)纯化，以得到
呈油状物的期望产物。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.11(dt,J＝10.0,8.8Hz,1H),7.00(s,1H),
6.91(ddd,J＝11.3,6.9,2.6Hz,1H),6.80(dddd,J＝8.8,3.9,2.5,1.5Hz,1H),2.29(d,J＝
7.5Hz,2H),1.65-1.62(m,1H),1.48-1.39(m,1H),1.40-1.31(m,5H),1.27-1.17(m,2H),
1.02-0.96(m,1H),0.80(d,J＝6.7Hz,6H)ppm。m/z311.3(M+H+)。
(顺式)-N-(4-氯苯基)-N'-羟基-2-(4-异丙基环己基)乙脒：使用一般操作D、F、J、K、L
和M制备。在一般操作D中采用4-异丙基环己烷-1-酮。在一般操作J中使用4-氯苯胺。一般操
作M使用(顺式)-N-(4-氯苯基)-2-(4-异丙基环己基)硫代乙酰亚氨酸甲酯(81mg)、羟胺溶
液(167μL)和EtOH(2.0mL)。使用硅胶色谱(0至10％EtOAc/己烷)纯化，以得到呈油状物的期
望产物。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.29-7.26(m,2H),7.09(br s,1H),7.01-6.97(m,2H),
2.32(d,J＝7.5Hz,2H),1.67-1.61(m,1H),1.43(dt,J＝13.6,6.8Hz,1H),1.38-1.30(m,
6H),1.26-1.18(m,2H),1.02-0.94(m,1H),0.80(d,J＝6.7Hz,6H)ppm。m/z 309.2(M+H+)。
(顺式)-N-(3,4-二氟苯基)-N'-羟基-2-(4-(三氟甲基)环己基)-乙脒：使用一般操作
D、F、J、K、L和M制备。在一般操作D中采用4-三氟甲基环己烷-1-酮。在一般操作J中使用3,4-
二氟苯胺。一般操作M使用(顺式)-N-(3,4-二氟苯基)-2-(4-(三氟甲基)环己基)硫代乙酰
亚氨酸甲酯(105mg)、羟胺溶液(200μL)和EtOH(3.0mL)。使用硅胶色谱(0至20％EtOAc/己
烷)纯化，以得到呈油状物的期望产物。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.12(dt,J＝9.9,8.8Hz,
1H),7.06(s,1H),6.91(ddd,J＝11.2,6.9,2.7Hz,1H),6.81(dddd,J＝8.8,3.9,2.5,1.5Hz,
1H),2.37-2.31(m,2H),2.03-1.94(m,1H),1.71-1.65(m,1H),1.59(tq,J＝11.5,4.0Hz,
3H),1.53-1.38(m,5H)ppm。m/z 337.2(M+H+)。
(顺式)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基-2-((1s,4s)-4-(三氟甲基)环己基)-乙脒：使用
一般操作D、F、J、K、L和M制备。在一般操作D中使用4-三氟甲基环己烷-1-酮。在一般操作J中
使用3-氯苯胺。一般操作M使用(顺式)-N-(3-氯苯基)-2-(4-(三氟甲基)环己基)硫代乙酰
亚氨酸甲酯(105mg)、羟胺溶液(200μL)和EtOH(3.0mL)。使用硅胶色谱(0至20％EtOAc/己
烷)纯化，以得到呈油状物的期望产物。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.25(t,J＝8.0Hz,1H),
7.15(s,1H),7.13-7.11(m,1H),7.06(t,J＝2.1Hz,1H),6.96-6.93(m,1H),2.41(d,J＝
7.6Hz,2H),2.03-1.94(m,1H),1.77-1.69(m,1H),1.66-1.57(m,2H),1.56-1.38(m,6H)ppm。
m/z 335.1(M+H+)。
(顺式)-N-(4-氯苯基)-N'-羟基-2-(4-(三氟甲基)环己基)-乙脒：使用一般操作D、F、
J、K、L和M制备。在一般操作D中采用4-三氟甲基-环己烷-1-酮。在一般操作J中使用4-氯苯
胺。一般操作M使用(顺式)-N-(4-氯苯基)-2-(4-(三氟甲基)-环己基)硫代乙酰亚氨酸甲酯
(87mg)、羟胺溶液(167μL)和EtOH(2.0mL)。使用硅胶色谱(0至25％EtOAc/己烷)纯化，以得
到呈油状物的期望产物。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.30-7.26(m,2H),7.01-6.98(m,2H),
2.37(d,J＝7.7Hz,2H),2.02-1.93(m,1H),1.71-1.64(m,1H),1.63-1.35(m,9H)ppm。m/z
335.1(M+H+)。
(顺式)-2-((1,1'-双(环己烷))-4-基)-N-(4-氯苯基)-N'-羟基乙脒：使用一般操作D、
F、J、K、L和M制备。在一般操作D中使用(1,1'-双(环己烷))-4-酮。在一般操作J中采用4-氯
苯胺。一般操作M使用(顺式)-2-((1,1'-双(环己烷))-4-基)-N-(4-氯苯基)硫代乙酰亚氨
酸甲酯(84mg)、羟胺溶液(80μL)和EtOH(2.0mL)。使用硅胶色谱(0至25％EtOAc/己烷)纯化，
以得到呈油状物的期望产物。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.29-7.26(m,2H),7.08(br s,1H),
7.01-6.98(m,2H),2.31(d,J＝7.5Hz,2H),1.69-1.58(m,6H),1.36-1.01(m,13H),0.87-
0.77(m,2H)ppm。m/z 349.3(M+H+)。
(顺式)-2-((1,1'-双(环己烷))-4-基)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基乙脒：使用一般操作D、
F、J、K、L和M制备。在一般操作D中采用(1,1'-双(环己烷))-4-酮。一般操作J采用3-氯苯胺。
一般操作M使用(顺式)-2-((1,1'-双(环己烷))-4-基)-N-(3-氯苯基)硫代乙酰亚氨酸甲酯
(91mg)、羟胺溶液(83μL)和EtOH(2.0mL)。使用硅胶色谱(0至25％EtOAc/己烷)纯化，以得到
呈油状物的期望产物。m/z 349.3(M+H+)。
(顺式)-2-((1,1'-双(环己烷))-4-基)-N-(3,4-二氟苯基)-N'-羟基乙脒：使用一般操
作D、F、J、K、L和M制备。一般操作D使用(1,1'-双(环己烷))-4-酮。在一般操作J中使用3,4-
二氟苯胺。一般操作M使用(顺式)-2-((1,1'-双(环己烷))-4-基)-N-(3,4-二氟苯基)硫代
乙酰亚氨酸甲酯(69mg)、羟胺溶液(63μL)和EtOH(2.0mL)。使用硅胶色谱(0至25％EtOAc/己
烷)纯化，以得到呈油状物的期望产物。m/z 351.3(M+H+)。
4-(2-硝基乙基)哌啶：在0℃，向4-(2-硝基乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(129mg,0.5mmol)
于CH2Cl2(2.0mL)中的溶液中添加TFA(570mg,5.0mmol)。将混合物温热至室温，在室温搅拌8
小时，并减压浓缩。残余物未经进一步纯化即使用。
N-(3-氯苯基)-N'-羟基-2-(1-苯基哌啶-4-基)乙脒：使用一般操作N制备，其采用4-
(2-硝基乙基)-1-苯基哌啶(47mg)、3-氯苯胺(102mg)、n-BuLi(0.8mmol)和THF(3mL)。使用
硅胶色谱(0至5％MeOH/CH2Cl2)纯化，以得到呈黄色泡沫状物的期望产物(50mg,73％产率)
。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.23(t,J＝8.0Hz,3H),7.13(ddd,J＝8.0,1.9,0.9Hz,1H),7.09
(d,J＝2.0Hz,1H),6.96(ddd,J＝8.0,2.1,0.9Hz,1H),6.91-6.89(m,2H),6.82(t,J＝
7.3Hz,1H),3.60(d,J＝12.4Hz,2H),2.60(td,J＝12.1,2.2Hz,2H),2.37(d,J＝7.0Hz,2H),
1.78-1.75(m,2H),1.59-1.52(m,1H),1.36(qd,J＝12.1,3.6Hz,2H)ppm。m/z 172.7(M+2H
+)。
N-(3,4-二氟苯基)-N'-羟基-4-甲基戊脒：使用一般操作N制备，其采用4-甲基-1-硝基
戊烷(131mg)、3,4-二氟苯胺(516mg)、n-BuLi(4.0mmol)和THF(4.0mL)。使用硅胶色谱(0至
25％EtOAc/己烷)纯化，以得到呈红色油状物的期望产物。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.11
(dt,J＝10.0,8.8Hz,1H),7.01(br s,1H),6.92(ddd,J＝11.2,6.9,2.7Hz,1H),6.83-6.79
(m,1H),2.29-2.25(m,2H),1.53-1.43(m,1H),1.31-1.28(m,1H),0.79(d,J＝6.6Hz,6H)
ppm。m/z243.2(M+H+)。
(顺式)-N-(4-氯苯基)-N'-羟基-2-(4-(4-甲氧基苯基)环己基)-乙脒：由(顺式)-2-
((1,4)4-(4-甲氧基苯基)环己基)乙酸甲酯通过一般操作G、I、K、L和M制备。在一般操作I
中，使用4-氯苯胺。一般操作M使用(顺式)-N-(4-氯苯基)-2-(4-(4-甲氧基苯基)环己基)-
硫代乙酰亚氨酸甲酯(50mg)、羟胺溶液(43μL)和EtOH(2.0mL)。使用硅胶色谱(0至30％
EtOAc/己烷)纯化，以得到呈油状物的期望产物。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.32-7.28(m,
2H),7.07-7.04(m,2H),7.03-7.00(m,2H),6.83-6.80(m,2H),3.77(s,3H),2.44(d,J＝
7.7Hz,2H),1.62-1.48(m,9H)ppm。m/z 373.2(M+H+)。
(顺式)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基-2-(1-羟基-4-苯基环己基)-乙脒：
向顺式-1-烯丙基-4-苯基环己-1-醇i(1.30g,6.0mmol)于CH2Cl2(12mL)中的溶液中添
加2,6-二甲基吡啶(1.61g,15.0mmol)，将混合物冷却至0℃并滴加TBSOTf(2.38g,
9.0mmol)。使混合物温热至室温并搅拌6小时。将混合物冷却至0℃并添加NaHCO3溶液
(50mL)。将两相混合物搅拌10分钟，并添加EtOAc(100mL)。分离各层，并用EtOAc(3x 50mL)
萃取水层。合并的有机层以无水MgSO4干燥，过滤，并减压浓缩。采用硅胶色谱(0至25％
EtOAc/己烷)纯化残余物，以得到呈油状物的(((顺式)-1-烯丙基-4-苯基环己基)氧基)(叔
丁基)二甲基甲硅烷(1.87g,94％产率)。
向(((顺式)-1-烯丙基-4-苯基环己基)氧基)(叔丁基)二甲基甲硅烷(331mg,1.0mmol)
于二噁烷/水(3:1,5.0mL)中的溶液中添加2,6-二甲基吡啶(114mg,2.0mmol)、NaIO4
(856mg,4.0mmol)和OsO4溶液(100μL,4wt.％于水中)。混合物的颜色变黑并将混合物在室
温搅拌16小时。添加饱和Na2S2O3溶液(20mL)，并将所得浆液在室温搅拌15分钟。添加EtOAc
(50mL)。分离各层，并用EtOAc(3x 25mL)萃取水层。合并的有机层以无水MgSO4干燥，过滤，
并减压浓缩，以得到2-((顺式)-1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4-苯基环己基)乙醛，
其未经进一步纯化即使用。
向2-((顺式)-1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4-苯基环己基)-乙醛(331mg,
1.0mmol)于tBuOH(10mL)中的溶液中添加环己烯(1.64g,20mmol)、NaH2PO4(840mg,7.0mmol)
和NaClO2(904mg,10mmol)。将混合物温热至室温，搅拌30分钟。然后添加饱和Na2S2O3溶液
(20mL)。将所得浆液搅拌15分钟，并添加EtOAc(50mL)。分离各层，并用EtOAc(3x 25mL)萃取
水层。合并的有机层以无水MgSO4干燥，过滤，并减压浓缩，以得到2-((顺式)-1-((叔丁基二
甲基甲硅烷基)氧基)-4-苯基环己基)乙酸，其未经进一步纯化即使用。
使用一般操作I、K、L和M。在一般操作I中采用3-氯苯胺和2-((顺式)-1-((叔丁基二甲
基甲硅烷基)氧基)-4-苯基环己基)乙酸。一般操作M使用(顺式)-2-(1-((叔丁基二甲基甲
硅烷基)氧基)-4-苯基环己基)-N-(3-氯苯基)硫代乙酰亚氨酸甲酯(161mg)、220μL羟胺溶
液和EtOH(3.0mL)。使用硅胶色谱(5至20％EtOAc/己烷)纯化，以得到呈白色泡沫状物的2-
((顺式)-1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4-苯基环己基)-N-(3-氯苯基)-N'-羟基乙
脒。
在0℃，向2-((顺式)-1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4-苯基环己基)-N-(3-氯苯
基)-N'-羟基乙脒(72mg,0.15mmol)于THF(1.0mL)中的溶液中添加TBAF溶液(1M,180μL,
0.18mmol)。将混合物温热至室温并搅拌16小时。混合物用EtOAc(25mL)稀释并通过用另外
100mL EtOAc洗涤的硅胶(2x2cm塞)过滤。减压浓缩滤液。使用硅胶色谱(10至50％EtOAc/己
烷)纯化残余物，以得到呈白色固体的期望产物(46mg,85％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3):δ7.30
(t,J＝8.0Hz,2H),7.24-7.20(m,4H),7.17-7.13(m,2H),6.97(ddd,J＝7.9,2.1,1.0Hz,
1H),6.89-6.87(m,2H),2.70(s,2H),2.44(tt,J＝12.1,3.7Hz,1H),1.88-1.84(m,2H),
1.72-1.58(m,5H),1.10(qd,J＝12.9,3.2Hz,2H)ppm。m/z 359.2(M+H+)。
N-(3-氯苯基)-N'-羟基-2-(2,3,4,5-四氢-[1,1'-联苯]-4-基)乙脒
在0℃，向8-苯基-1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-醇(1.74g,7.43mmol)于CH2Cl2(15mL)中的
溶液中添加2,6-二甲基吡啶(1.19g,11.9mmol)，随后滴加TBSOTf(2.93g,11.1mmol)。使所
得混合物温热至室温并搅拌6小时。将混合物冷却至0℃并添加NaHCO3(75mL)。将两相混合
物搅拌10分钟，并添加EtOAc(100mL)。分离各层，并用EtOAc(3x 50mL)萃取水层。合并的有
机层以无水MgSO4干燥，过滤，并减压浓缩。采用硅胶色谱(0至25％EtOAc/己烷)纯化粗混合
物，以得到呈油状物的叔丁基二甲基((8-苯基-1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)氧基)甲硅烷
(1.69g,65％产率)。
向叔丁基二甲基((8-苯基-1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)氧基)甲硅烷(17.4mg,
0.05mmol)于丙酮(0.5mL)中的溶液中添加HCl水溶液(1M,0.5mL,0.5mmol)。将混合物搅拌
16小时。添加EtOAc(10mL)。分离各层，并用EtOAc(3x 10mL)萃取水层。合并的有机层以无水
MgSO4干燥，过滤，并减压浓缩。采用硅胶色谱(0至50％EtOAc/己烷)纯化残余物，以得到呈
油状物的4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4-苯基环己烷-1-酮。
采用一般操作D和F将4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4-苯基环己烷-1-酮转化成
2-(4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4-苯基环己基)-N-(3-氯苯基)乙酰胺。
向2-(4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4-苯基环己基)-N-(3-氯苯基)乙酰胺
(105mg,0.23mmol)于PhMe(1.2mL)中添加Lawesson试剂(51mg,0.13mmol)。将非均相混合物
加热至100℃且保持2小时。减压浓缩混合物。采用硅胶色谱(0至20％EtOAc/己烷)纯化残余
物，以得到呈固体的N-(3-氯苯基)-2-(2,3,4,5-四氢-[1,1'-联苯]-4-基)硫代乙酰胺
(40mg)。
使用一般操作L和M制备。使用硅胶色谱(5至15％EtOAc/己烷)纯化，以得到呈白色固体
的期望产物。m/z 341.2(M+H+)。
生物学实施例
在与上述相当的IDO酶活性测定中评价具体化合物。结果提供在表1中。
表1：
具体实施例的活性(效力：IDO IC50A<1uM,B<10uM；C<100uM)
另外的化合物和活性提供在图2A-2H中。
本申请描述了本发明的具体实施方案，包括发明人已知的用于实施本发明的最佳模
式。在阅读上述描述时，所公开的实施方案的变化形式对本领域技术人员可变得显而易见，
并且预期本领域技术人员可适当地采用这样的变化形式。因此，意图是本发明以不同于本
申请具体描述的方式实施，并且本发明包括适用法律所允许的所附权利要求中所述的主题
的所有修改和等价形式。此外，除非本申请另有说明或与上下文明显矛盾，否则本发明包括
上述元素在其所有可能变化形式中的任何组合。
本说明书中引用的所有出版物、专利申请、登录号和其它参考文献通过引用的方式并
入本申请，如同每个单独的出版物或专利申请被具体且单独地指明通过引用的方式并入。