一种畜禽扶正解毒复方中草药微生态制剂及其制备方法技术领域
本发明属于中药发酵类药物领域，具体涉及一种畜禽扶正解毒复方中草药微生态
制剂及其制备方法。
背景技术
随着集约化、规模化养殖的发展，养殖动物疾病肆虐，造成严重的经济损失和社会
危害。目前，尽管疫苗作为防控传染性疾病手段得到了政府、企业和养殖户的重视，在防控
疫病方面做出了不可磨灭的贡献，但是其存在的缺陷也是众所周知的。中兽医学认为畜禽
体与自然环境密切相关，“阴平阳秘、精神乃治”，重在平衡阴阳；“正气内存、邪不可干”，重
在提高机体的非特异性免疫能力。通过中草药调节动物机体，增强免疫能力，可大大提高养
殖动物的素质和整体防疫水平，降低发病率。扶正解毒散是根据《中华人民共和国兽药典》
2010版二部扶正解毒散项下规定，由黄芪、板蓝根和淫羊藿三味中药按一定比例组合粉碎
而成的成方制剂，具有扶正祛邪、清热解毒、补中益气的功效。另外，还可帮助修复免疫细胞
功能，诱导机体产生抗干扰素，调整机体免疫功能。然而，现有扶正解毒散临床效果也不是
非常理想。
因此，亟需优化扶正解毒散的配方及制备工艺，提高其疗效。
发明内容
为克服现有技术中存在的不足之处，本发明的目的旨在提供一种畜禽扶正解毒复
方中草药微生态制剂及其制备方法。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案如下：
一种畜禽扶正解毒复方中草药微生态制剂的制备方法，步骤如下：
S1、中草药的加工处理：按重量份，称量配伍板蓝根40~60份、黄芪40~60份、淫羊霍20~
30份、太子参15~20份、大青叶10~15份，然后粉碎、过筛；其中，称量配伍是指板蓝根、黄芪、
淫羊霍、太子参、大青叶五味中草药按照配方量进行称量和称量后混合；粉碎是指混合后的
配伍中草药投料至高效粉碎机内进行物料粉碎；过筛是指粉碎后的中草药进行过筛筛分，
筛分后的中草药颗粒度达60~100目；
S2、益生菌发酵液的制备：
（a）干酪乳杆菌LCZ-1发酵种子液的制备：将干酪乳杆菌LCZ-1由斜面菌种分别进行一
级活化、二级扩大制成发酵种子液；
（b）植物乳杆菌、酵母菌和干酪乳杆菌LCZ-1的共培养发酵：无菌条件下，先以g/L计，将
植物乳杆菌、酵母菌的商品菌粉各按0.25~0.5%加入液体培养基一中，再以体积比计，将干
酪乳杆菌LCZ-1发酵种子液按5~8%加入液体培养基一中进行共培养发酵，共培养发酵的温
度为35~37℃，静置培养24~26h；其中，液体培养基一的组成为：红糖30~50 g、玉米浆20~30
g、低聚异麦芽糖0.1~0.3 g、吐温-80 0.05~0. 1 mL和水1000mL，pH值为6.5~6.8；植物乳杆
菌的商品菌粉的活菌数≥1010 CFU/g、酵母菌的商品菌粉的活菌数≥109 CFU/g；
（c）枯草芽孢杆菌的培养发酵：无菌条件下，以g/L计，将枯草芽孢杆菌的商品菌粉按
0.25~0.5%加入液体培养基二中进行发酵，发酵的温度为35~37℃，匀速搅拌发酵（转速为
100~120rpm/min）20~24h；其中，液体培养基二的组成为：红糖30~50 g、玉米浆20~30 g和水
1000mL，pH值为6.8~7.3；枯草芽孢杆菌的商品菌粉的活菌数≥1010 CFU/g；
S3、将S1获得的复方中草药粉与S2获得的益生菌发酵液进行拌料并后发酵：
（a）拌料：先向复方中草药粉中，添加辅料混合物，辅料混合物为麦麸、玉米淀粉和滑石
粉，麦麸：玉米淀粉：滑石粉的质量比值为1：1：0.5 ~ 3：2：1，且辅料混合物投料量按质量比
占复方中草药粉的15~20%；最后以L/kg计，按复方中草药粉量和辅料混合物量的总和的30~
40%加入益生菌发酵液，搅拌（转速为90~100 rpm/min）混合20~30min；其中，益生菌发酵液
为S2（b）所得发酵液和S2（c）所得发酵液的混合液，前后两者体积比例为1：1~3：2；
（b）后发酵：先将拌料结束后的混合物分装至发酵袋中，发酵袋分装采用顶部设置有气
体单向阀的透明塑料袋，规格可根据产品要求设计，然后称重和热力封口；将分装结束的发
酵袋直接运输至发酵车间内，发酵车间要求30~37℃恒温和避光，发酵15~20d。
具体地，S2（a）的过程为：
①一级活化：无菌条件下，将干酪乳杆菌LCZ-1试管斜面菌种利用3~5mL生理盐水进行
冲洗，制成活菌数≥1010 CFU/g的混悬液；将此混悬液全部注入已灭菌且冷却为室温的25~
35mL液体MRS培养基中，然后恒温厌氧震荡培养10~12h，培养温度35~37℃，震荡培养转速
120~150rpm/min；
②二级扩大：以体积比计，将一级活化发酵液按8~10%的添加量注入已灭菌且冷却为室
温的400~600mL液体MRS培养基中，然后恒温厌氧震荡培养12~15h，培养条件同一级活化，最
终制成发酵种子液。
较好地，液体培养基一和液体培养基二在接种前进行灭菌，待灭菌后温度达到室
温后进行接种，灭菌温度115~121℃，时间15~30min。
一种利用上述制备方法制备的畜禽扶正解毒复方中草药微生态制剂。
本发明中，植物乳杆菌、酵母菌和枯草芽孢杆菌均可通过市购获得；干酪乳杆菌
LCZ-1可从中国普通微生物菌种保藏管理中心获得，本申请人已于2015年8月20日将其在中
国普通微生物菌种保藏管理中心保藏，保藏编号为：CGMCC NO.11256，提交保藏的样品状
态：试管斜面菌种；且在申请号201510603648.2的专利中已公开使用。
本发明特意优化了配方，在本发明中板蓝根、大青叶清热解毒、凉血利咽，淫羊藿
补肾阳、祛风湿，黄芪益气固表、匡扶正气，太子参增强免疫功能、减轻病后虚弱和气阴不
足。本发明中发酵益生菌使用了植物乳杆菌、干酪乳杆菌LCZ-1、酵母菌和枯草芽孢杆菌，复
方中草药经复合益生菌发酵后，有效成分释放量增加、毒性降低，提高利用率，促进大分子
物质降解为可利用的小分子利于机体直接吸收。
有益效果：本发明制备的微生态制剂具有扶助正气、巩固根本、清热解毒的功效，
可增强养殖动物机体免疫力，提高养殖动物抗病能力，还具有副作用少，可减少抗生素使
用、药物残留和滥用药物等问题，符合绿色、安全的要求，利于养殖动物的群体防控。
具体实施方式
实施例1
一种畜禽扶正解毒复方中草药微生态制剂的制备方法，步骤如下：
S1、中草药的加工处理：按重量份，称量配伍板蓝根60份、黄芪60份、淫羊霍30份、太子
参18份、大青叶12份，然后粉碎、过筛；其中，称量配伍是指板蓝根、黄芪、淫羊霍、太子参、大
青叶五味中草药按照配方量进行称量和称量后混合；粉碎是指混合后的配伍中草药投料至
高效粉碎机内进行物料粉碎；过筛是指粉碎后的中草药进行过筛筛分，筛分后的中草药颗
粒度达80目；
S2、益生菌发酵液的制备：
（a）干酪乳杆菌LCZ-1发酵种子液的制备：
①一级活化：无菌条件下，将干酪乳杆菌LCZ-1试管斜面菌种（可直接从中国普通微生
物菌种保藏管理中心获得；如果从中国普通微生物菌种保藏管理中心获得的不是试管斜面
菌种而是干酪乳杆菌LCZ-1，则可在MRS琼脂培养基中，37℃培养2d获得）利用5mL生理盐水
进行冲洗，制成活菌数≥1010 CFU/g的混悬液；于无菌厌氧箱中操作，利用注射器将此全部
混悬液注入已灭菌且冷却为室温的内装30mL液体MRS培养基的100mL厌氧培养瓶内，然后取
出厌氧培养瓶，置于恒温培养箱内，震荡培养10h，培养温度36℃，震荡培养转速130rpm/
min；
②二级扩大：于无菌厌氧箱中操作，以体积比计，利用注射器将一级活化发酵液按9%的
添加量注入已灭菌且冷却为室温的内装500mL液体MRS培养基的1L厌氧培养瓶内，然后取出
厌氧培养瓶，置于恒温培养箱内，震荡培养13h，培养条件同一级活化，最终制成发酵种子
液；
（b）植物乳杆菌、酵母菌和干酪乳杆菌LCZ-1的共培养发酵：无菌条件下，先以g/L计，将
植物乳杆菌、酵母菌的商品菌粉各按0.4%加入至共培养发酵的发酵罐内，再以体积比计，将
干酪乳杆菌LCZ-1发酵种子液按6%加入至共培养发酵的发酵罐内进行共培养发酵，共培养
发酵的温度为36℃，静置培养25h；其中，共培养发酵的发酵罐内装有液体培养基一，其组成
为：红糖40 g、玉米浆25 g、低聚异麦芽糖0.2 g、吐温-80 0.08 mL和水1000mL，pH值为6.5；
液体培养基一在接种前进行灭菌，待灭菌后温度达到室温后进行接种，灭菌温度121℃，时
间15min；植物乳杆菌的商品菌粉的活菌数≥1010 CFU/g、酵母菌的商品菌粉的活菌数≥109
CFU/g；
（c）枯草芽孢杆菌的培养发酵：无菌条件下，以g/L计，将枯草芽孢杆菌的商品菌粉按
0.4%加入液体培养基二中进行发酵，发酵的温度为36℃，匀速搅拌发酵（转速为110rpm/
min）22h；其中，共培养发酵的发酵罐内装有液体培养基二，其组成为：红糖40g、玉米浆25 g
和水1000mL，pH值为7.0；液体培养基二在接种前进行灭菌，待灭菌后温度达到室温后进行
接种，灭菌温度115℃，时间30min；
S3、将S1获得的复方中草药粉与S2获得的益生菌发酵液进行拌料并后发酵：
（a）拌料：先将复方中草药粉投料至微生态制剂拌料设备（为申请人前期已授权的实用
新型专利设备，专利号为201620053478.5）内腔中，再添加辅料混合物，辅料混合物为麦麸、
玉米淀粉和滑石粉，麦麸：玉米淀粉：滑石粉的质量比值为3：2：1，且辅料混合物投料量按质
量比占复方中草药粉的18%；最后以L/kg计，将益生菌发酵液按复方中草药粉量和辅料混合
物量的总和的35%添加至拌料设备内腔中，搅拌（转速为100rpm/min）混合25min；其中，益生
菌发酵液为S2（b）所得发酵液和S2（c）所得发酵液的混合液，前后两者体积比例为1：1；
（b）后发酵：先将拌料结束后的混合物分装至发酵袋中，发酵袋分装采用顶部设置有气
体单向阀的透明塑料袋，规格可根据产品要求设计，然后称重和热力封口；将分装结束的发
酵袋直接运输至发酵车间内，发酵车间要求35℃恒温和避光，发酵18d。
实施例1制成的成品颜色偏灰黄，气味酸香并带有醇香。
动物实验
从同一品种的发病鸡群中挑选体重均匀，症状表现程度相近，饲养管理条件相同，未曾
使用任何药物治疗，经临床观察、实验室诊断确诊为鸡传染性法氏囊病的病鸡140只，随机
分为7组，每组20只，其中设立使用《中华人民共和国兽药典》2010版二部扶正解毒散进行治
疗的为对照组，另外6组对比试验分别使用本发明实施例1制备的微生态制剂进行治疗，该6
组对比试验采用的治疗量分别为对照组的1（一组）、0.9（二组）、0.8（三组）、0.6（四组）、0.4
（五组）、0.2（六组）倍。本整体试验中给患病鸡统一饲喂和卫生管理，让鸡自由采食及饮水，
连续治疗观察5d，对照组中扶正解毒散每天治疗使用一次，用量1g/鸡（只），拌食，对比试验
组参考对照组。治疗中，将所有试验鸡转入“饲养隔离栏”中饲养，所有试验人员和饲养员进
行严格的消毒和防护措施(穿戴隔离服，一次性口罩和手套)。死亡鸡、鸡粪、试验污物等均
在指定区域内消毒、焚烧和掩土深埋。
诊断标准：
1、临床症状：精神不振，翅膀下垂，羽毛蓬乱，怕冷，采食下降，发病鸡排水样、米汤样白
色粪便，粪便污染肛周羽毛，严重脱水，趾爪干瘪，饮水增加；
2、剖检病变：剖检后可见病死鸡脱水，胸肌和腿肌有条纹状或斑状出血；腺胃与肌胃交
界处有溃疡和出血斑，肠粘膜出血，肾肿大，苍白；输尿管扩张充满白色尿酸盐；法氏囊肿
大，外被黄色透明的胶冻物；内褶肿胀、出血、内有炎性分泌物或黄色干酪样物；发病后期法
氏囊萎缩或法氏囊囊壁变薄。
疗效标准：
(1)死亡率：用药后，鸡只出现法氏囊病的典型症状并死亡，尸体剖检有典型特征性病
变，则判定为死亡；根据每组中的死亡数占该组鸡只总数即得死亡率；
(2)治愈率：用药后鸡只精神活泼，采食、饮水正常，羽毛有光泽，粪便正常，则判定为治
愈；根据每组中的治愈数占该组鸡只总数即得治愈率。
实验结果为：对照组和对比试验第一组至第六组的死亡率分别为10.5%、4.7%、
4.9%、5.2%、6.6%、10.7%、11.1%，其治愈率分别为85.1%、90.5%、90.1%、87.8%、86.2%、83.2%、
81.1%。结果表明：0.2、0.4倍对照组计剂的治愈率稍低于对照组的治愈率，但死亡率与对照
组相当；0.6、0.8倍对照组计剂的治愈率已与对照组的治愈率相当，但死亡率明显低于对照
组；0.9、1倍对照组计剂时的疗效显著高于对照组的疗效但并不存在显著差异，且死亡率明
显低于对照组；因而本发明实施例中的微生态制剂能够较好地起到治疗鸡传染性法氏囊
病，并且可以在用量少的情况下（仅为0.6倍扶正解毒散的用量）达到与扶正解毒散相当的
疗效。
最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照
较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的
技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在
本发明的权利要求范围当中。