胺基噻吩芳基氧化膦P2Y12受体拮抗剂及其用途技术领域
本发明涉及心血管疾病治疗的药物领域。具体地讲，本发明涉及对心血管疾病尤
其是血栓栓塞性疾病具有治疗作用的一类含胺基噻吩芳基氧化膦结构的P2Y12受体拮抗
剂、其制备方法及用途。
背景技术
与发生血栓形成有关的医学并发症代表一种主要的致死原因。一些与发展血栓形
成有关的病理学实例包括急性心肌梗塞、不稳定型心绞痛和慢性稳定型心绞痛、短暂性缺
血发作、脑血管意外、周围性血管疾病、先兆子痫和子痫、深部静脉血栓形成、栓塞(脑栓塞、
肺栓塞、冠状动脉栓塞、肾栓塞等等)、弥散性血管内凝血或血栓性血小板减少性紫癜。在侵
入性外科手术期间和之后仍有发生血栓形成和再狭窄并发症的危险，所述侵入性外科手术
如血管成形术、颈动脉内膜切除术、主动脉冠状动脉旁路移植术或支架或血管内假体的安
置。
动脉血栓形成可在血管壁损伤或动脉粥样化斑块破裂后发生。血小板在这些血栓
形成中发挥着必要的作用。血小板可通过以下物质激活：血流中循环细胞或沿血管壁呈现
的损害性内皮细胞所释放的介体，或者在血管损伤期间所暴露的内皮下基质(如胶原)的血
栓形成分子。此外，血小板还可在具有高剪切应力的血流条件下如在狭窄血管中所观察到
的那样激活。激活后，所述循环血小板粘附并积聚在血管损伤处，形成血栓。在该过程中，血
管中所产生的血栓对血流是体积足够大的，从而使其被部分或完全堵塞。
在静脉中，血栓还可在阻塞或血流慢处形成。由于这些静脉血栓的性质，其可产生
在血管系统中移动的栓子。这些栓子因而可堵塞更远距离的血管中的血流，所述血管如肺
动脉或冠状动脉。
许多研究已经证明5'-二磷酸腺苷(ADP)是血小板激活和聚集的主要介体，在血栓
形成的启动和进展中发挥着决定性作用(Maffrand et al.,Thromb.Haemostas.,1988,59,
225-230)。ADP通过损害的红细胞和动脉粥样硬化壁的内皮细胞释放到循环中，更具体而
言，由以密集颗粒在非常高浓度储存ADP之处的激活血小板所分泌。ADP-诱导的血小板聚集
由其与在人血小板的细胞膜表达的两种特异性嘌呤能受体P2Y1和P2Y12的结合所触发。所
述P2Y1受体，与经Gαq的PLCβ刺激联合，负责内部钙储存的动员、血小板形状的改变和在ADP
上的瞬间聚集。所述P2Y12，与经Gαi2的腺苷酸环化酶的抑制和PI-3激酶的激活联合，负责
响应的放大和聚集的稳定化。P2Y1-/-转基因小鼠(Gachet et al.,J.Clin.Invest.,1999,
104,1731-1737)和P2Y12-/-小鼠(Conley et al.,Nature,2001,409,202-207)的使用证明
了所述两种受体在体内血栓发展中的重要性。在人类中，已经描述P2Y12基因缺陷与出血表
型和ADP-诱导的血小板聚集的显著衰退有关。在人类临床实践中使用氯吡格雷已经证明，
由拮抗剂阻断P2Y12受体代表着治疗心血管疾病的关键治疗策略。氯吡格雷为噻吩并吡啶
家族的前药，其活性代谢物共价结合至P2Y12受体，导致体内血小板活性的不可逆抑制
(Savi et al.,Biochem.Biophys.Res.Commun.,2001,283,379-383)，该药物在若干临床试
验中显示其效能，即降低有危险的患者发生心血管意外的危险。
本发明公开了一种含胺基噻吩芳基氧化膦结构的P2Y12受体拮抗剂，这些化合物
可用于制备治疗心血管疾病尤其是血栓栓塞性疾病的药物。
发明内容
本发明的一个目的是提供一种具有式I的良好活性的P2Y12受体拮抗剂。
本发明的另一个目的是提供制备具有式I的化合物的方法。
本发明的再一个目的是提供含有式I的化合物作为有效成分，及其在治疗心血管
疾病尤其是血栓栓塞性疾病方面的应用。
现结合本发明的目的对本发明内容进行具体描述。
本发明具有式I的化合物具有下述结构式：
其中，R选自C1-C6的烷基。
优选，式I结构的化合物：
本发明所述式I化合物可以通过以下路线合成：
化合物II和化合物III先反应生成烯胺中间体，后者经过还原得到化合物IV；化合
物IV先在低温下用n-BuLi处理，得到的芳基锂中间体再与二苯基氯化膦反应，得到化合物
V；化合物V用氧化剂处理得到化合物I；其中R的定义如权利要求1-2所示。
本发明所述式I化合物具有P2Y12受体的拮抗作用，可作为有效成分用于制备心血
管疾病尤其是血栓栓塞性疾病治疗药物。本发明所述式I化合物的活性是通过体外人血血
小板聚集的抑制试验来验证的。
本发明的式I化合物在相当宽的剂量范围内是有效的。例如每天服用的剂量约在
1mg-700mg/人范围内，分为一次或数次给药。实际服用本发明式I化合物的剂量可由医生根
据有关的情况来决定。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的说明。需要说明的是，下述实施例仅是用于
说明，而并非用于限制本发明。本领域技术人员根据本发明的教导所做出的各种变化均应
在本申请权利要求所要求的保护范围之内。
实施例1化合物I-1的合成
步骤1.化合物IV-1的合成
化合物II(0.85g,10mmol)和化合物III-1(1.47g,10mmol)溶于10mL甲醇中，室温
下搅拌过夜，而后再加入NaCNBH3(1.26g,20mmol)，室温下再搅拌5小时，TLC显示反应完成。
反应混合物小心倾倒入200mL冰水中，搅拌，用50mL×3CH2Cl2萃取，合并萃取相，用盐水洗
涤，无水硫酸钠干燥。抽滤除去干燥剂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，残余物使用硅胶柱层析
纯化，得到化合物IV-1，白色固体。ESI-MS,m/z＝216([M+H]+)。
步骤2.化合物V-1的合成
化合物IV-1(1.29g,6mmol)溶于15mL干燥的THF中，搅拌，在氮气气氛中冷却到-78
℃，而后用注射器慢慢滴加1.6M的n-BuLi的正己烷溶液(3.75mL,6mmol)，滴加完毕后，反应
混合物在该温度下继续搅拌1小时。用注射器再慢慢滴加二苯基氯化磷(1.32g,6mmol)溶于
7mL干燥的THF制成的溶液，滴加完毕后，反应混合物在该温度下搅拌半小时，而后升温至室
温再搅拌过夜。反应混合物小心倾倒入200mL冰水中，搅拌，用50mL×3CH2Cl2萃取，合并萃取
相，用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。抽滤除去干燥剂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，残余物使用
硅胶柱层析纯化，得到化合物V-1，白色固体。ESI-MS,m/z＝366([M+H]+)。
步骤3.化合物I-1的合成
化合物V-1(0.73g,2mmol)溶于10mL冰醋酸中，室温下搅拌，慢慢滴加30％的H2O2水
溶液(1mL)，滴加完毕后，反应混合物在室温下继续搅拌过夜，TLC发现反应完成。反应混合
物小心倾倒入200mL冰水中，搅拌，用50mL×3CH2Cl2萃取，合并萃取相，用盐水洗涤，无水硫
酸钠干燥。抽滤除去干燥剂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，残余物使用硅胶柱层析纯化，得到
化合物I-1，白色固体，熔点212-214℃，ESI-MS,m/z＝382([M+H]+)。
实施例2化合物I-2的合成
步骤1.化合物IV-2的合成
化合物II(0.99g,10mmol)和化合物III-2(1.61g,10mmol)溶于10mL甲醇中，室温
下搅拌过夜，而后再加入NaCNBH3(1.26g,20mmol)，室温下再搅拌5小时，TLC显示反应完成。
反应混合物小心倾倒入200mL冰水中，搅拌，用50mL×3CH2Cl2萃取，合并萃取相，用盐水洗
涤，无水硫酸钠干燥。抽滤除去干燥剂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，残余物使用硅胶柱层析
纯化，得到化合物IV-2，白色固体。ESI-MS,m/z＝245([M+H]+)。
步骤2.化合物V-2的合成
化合物IV-2(1.47g,6mmol)溶于15mL干燥的THF中，搅拌，在氮气气氛中冷却到-78
℃，而后用注射器慢慢滴加1.6M的n-BuLi的正己烷溶液(3.75mL,6mmol)，滴加完毕后，反应
混合物在该温度下继续搅拌1小时。用注射器再慢慢滴加二苯基氯化磷(1.32g,6mmol)溶于
7mL干燥的THF制成的溶液，滴加完毕后，反应混合物在该温度下搅拌半小时，而后升温至室
温再搅拌过夜。反应混合物小心倾倒入200mL冰水中，搅拌，用50mL×3CH2Cl2萃取，合并萃取
相，用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。抽滤除去干燥剂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，残余物使用
硅胶柱层析纯化，得到化合物V-2，白色固体，ESI-MS,m/z＝395([M+H]+)。
步骤3.化合物I-2的合成
化合物V-2(0.79g,2mmol)溶于10mL冰醋酸中，室温下搅拌，慢慢滴加30％的H2O2水
溶液(1mL)，滴加完毕后，反应混合物在室温下继续搅拌过夜，TLC发现反应完成。反应混合
物小心倾倒入200mL冰水中，搅拌，用50mL×3CH2Cl2萃取，合并萃取相，用盐水洗涤，无水硫
酸钠干燥。抽滤除去干燥剂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，残余物使用硅胶柱层析纯化，得到
化合物I-2，白色固体，熔点166-167℃，ESI-MS,m/z＝411([M+H]+)。
实施例3-6
参照实施例1-2操作步骤，合成了下表所列化合物。
实施例7化合物体外对人血血小板的抑制作用
使用含有2mL缓冲的柠檬酸钠的20mL注射器，从健康志愿者采集血液。将血液转移
至聚丙烯管中，并在室温离心(100g)5分钟(不使用离心机的制动)。然后收集浮在表面的富
血小板血浆(PRP)，稀释，并在将其用于聚集测量之前进行血小板计数。
在玻璃管中37℃进行血小板聚集的测量(血小板聚集仪)。将4μL测试化合物(比需
要的终浓度浓100倍的DMSO溶液)与392μL新制的PRP混合，并伴随搅拌孵育1分钟。然后向混
合物中加入4μL 250μM的ADP溶液。持续搅拌，通过按照G.V.R.Born的方法记录光密度变化
(Born,Nature,1962,194,927)，监测聚集的测量6至8分钟。使用以高度表示的聚集振幅计
算结果，并以抑制百分数表示。本发明化合物的(血小板聚集抑制作用的)IC50如下表所示。
化合物
IC50(nM)
实施例1化合物
328
实施例2化合物
90
实施例3化合物
113
实施例4化合物
135
实施例5化合物
241
实施例6化合物
352
从上表结果可以看出，本发明的化合物对P2Y12具有很强的拮抗作用，可以作为制
备治疗心血管疾病尤其是血栓栓塞性疾病的药物。