一种用于防治洋葱根腐病的农药复配剂及其筛选方法技术领域
本发明属于农药应用技术领域，尤其涉及一种用于防治洋葱根腐病的农药复配剂
及其筛选方法。
背景技术
洋葱属百合科葱属二年生草本植物，其营养丰富。我国洋葱种植面积、产量均居世
界首位，洋葱已成为重要的蔬菜之一。但是，洋葱根系易被病原菌侵染，洋葱根腐病发生普
遍、危害严重，病原菌侵染性强，蔓延速度快，防治困难，洋葱根腐病成为危害特别严重的洋
葱病害之一。
目前，国内对洋葱根腐病的防治主要是对洋葱基盘腐烂病、干腐病、鳞茎软腐病病
原菌分离鉴定，采用单一的杀菌剂福美双或多菌灵进行根腐病的防治。这种防治方法没有
专门分离、鉴定出洋葱根腐病病原菌，而且通常是采用内吸性杀菌剂福美双和多菌灵来达
到根腐病的防治，但是该方法具有毒性大、持效期短、易产生抗性、蓄积性、环境污染的特
点。对于通过分离、鉴定出洋葱根腐病病原菌，筛选出防治洋葱根腐病的农药新品种(组合)
并没有专门研究。
哈茨木霉菌是木霉菌中应用的一个菌种，可预防由腐霉菌、立枯丝核菌、镰刀菌、
黑根霉、柱孢霉等病原菌引起的植物病害的仿生菌。哈茨木霉菌具有抗生素作用、植物生长
调节作用、诱导植物抗性及启动植物的局部反应等优点，其抗生素作用主要体现在可分泌
一部分抗生素，抑制病原菌的生长定植，减轻病原菌的危害。由于哈茨木霉菌无抗性，菌类
在土壤繁殖持效期长，改善土壤环境，对作物安全，无污染环境，可与其他化学农药混用，因
此采用以菌治菌、菌与杀菌剂相结合的方式，将生防菌哈茨木霉菌和杀菌剂相结合进行洋
葱根腐病的防治方法具有突出的优点。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于防治洋葱根腐病的农药复配剂及其筛选方法，旨
在解决洋葱根腐病过程中没有专门分离、鉴定出洋葱根腐病病原菌，仅采用单一的内吸性
杀菌剂福美双和多菌灵来达到根腐病的防治，防治过程农药具有毒性大、持效期短、易产生
抗性、蓄积性、环境污染的问题。
本发明是这样实现的：一种用于防治洋葱根腐病的农药复配剂，该农药复配剂中
的有效成分为哈茨木霉菌和杀菌剂，所述杀菌剂为福美双和多菌灵中的一种，所述哈茨木
霉菌和福美双组成第一种复配剂，哈茨木霉菌和多菌灵组成第二种复配剂。
进一步地，所述第一种复配剂中，哈茨木霉菌含量为3亿CFU/g，有效菌为800-900
亿CFU/亩，50％福美双有效菌含量为1000-1020g/亩。
进一步地，所述第二种复配剂中，哈茨木霉菌含量为3亿CFU/g，有效菌为800-900
亿CFU/亩，15％多菌灵有效菌含量为400-480g/亩。
本发明还提供用于防治洋葱根腐病的农药复配剂的筛选方法，包括以下步骤：
步骤一，菌种分离鉴定及生物学测定
从发病洋葱植株上分离菌株，在PDA培养基上培养菌落，菌落为圆形、气生菌丝棉
絮状，颜色开始为纯白色，后渐变为桃红色；显微镜镜检可见典型的镰刀状、非链状着生的
分生小孢子，小型分生孢子自单出瓶状小分生孢子梗产生，椭圆至卵圆形，大型分生孢子镰
刀型；
步骤二，筛选药剂
配制10种不同的参试药液，清水作对照，采用抑菌圈法，将直径为5mm的滤纸片(滤
纸事先经高压灭菌)在参试药液中浸泡2h，取出后移入60℃烘箱烘干备用；
先将菌丝悬浮液按每皿2mL接入无菌培养皿内，然后将冷却至40～45℃的PDA培养
基按定量倒入盛有菌丝悬浮液的培养皿制成带菌培养基，待培养基凝固后，再把用药液处
理过的滤纸片接入带菌培养基上，每皿接滤纸片3片，然后将培养皿放入恒温25℃培养箱中
培养，48h后测量抑菌圈大小，筛选抑菌效果好的药剂；
步骤三，筛选复配剂
根据抑菌试验结果，配制8种不同药剂，分别对洋葱根进行处理，定植时，用药剂进
行洋葱蘸根，在洋葱膨大期灌根，统计处理后洋葱根腐病的发病率，筛选出对洋葱根腐病防
治效果显著的药剂。
进一步地，所述步骤一中，分生孢子大小有3个隔膜与5个隔膜两种，33～44um×
3.8～4um；生长适宜温度24-28℃，27℃生长速率10mm/天，致死温度55～60℃。
进一步地，所述步骤二中，10种不同的参试药液分别为：
1号WP：有效成分为(3亿CFU/g)哈茨木霉菌WP500倍液；
2号WP：有效成分为50％福美双WP500倍液；
3号WP：有效成分为15％多菌灵WP500倍液；
4号WP：有效成分为(1000亿个/g)枯草芽孢杆菌WP500倍液；
5号WP：有效成分为55％敌克松WP500倍液；
6号WP：有效成分为(有效活菌数≥5亿)健立宝500倍液；
7号WP：有效成分为高锰酸钾500倍液；
8号WP：有效成分为(3亿CFU/g)哈茨木霉菌WP1000倍液+15％多菌灵WP1000倍液；
9号WP：有效成分为(1000亿个/g)枯草芽孢杆菌WP1000倍液+50％多菌灵WP1000倍
液；
10号WP：有效成分为(3亿CFU/g)哈茨木霉菌WP1000倍液+50％福美双WP1000倍液。
进一步地，所述步骤三中，8种不同药剂处理分别为：
处理1：(3亿CFU/g)哈茨木霉菌40g/亩，稀释100倍蘸根，(3亿CFU/g)哈茨木霉菌
250g/亩，稀释1500倍洋葱膨大期灌根；
处理2：(3亿CFU/g)哈茨木霉菌40g/亩稀释100倍，加50％福美双20g/亩稀释100倍
洋葱蘸根；(3亿CFU/g)哈茨木霉菌250g/亩稀释1500倍，加50％福美双2000g/亩稀释800倍
洋葱膨大期灌根；
处理3：(3亿CFU/g)哈茨木霉菌40g/亩稀释100倍，加15％多菌灵30g/亩稀释100倍
蘸根；(3亿CFU/g)哈茨木霉菌250g/亩稀释1500倍，加15％多菌灵3000g/亩稀释800倍灌根；
处理4：29％石硫合剂2000g/亩，稀释800倍洋葱膨大期灌根；
处理5：55％敌克松30g/亩，稀释100倍蘸根；55％敌克松3000g/亩，稀释800倍
(CK1)洋葱膨大期灌根；
处理6：清水CK2；
处理7：(1000亿个/g)枯草芽孢杆菌40g/亩，稀释100倍蘸根；(1000亿个/g)枯草芽
孢杆菌250g/亩，稀释1500倍液洋葱膨大期灌根；
处理8：(有效活菌数≥5亿/g)健立宝40g/亩，稀释100倍蘸根，洋葱膨大期拌沙子
撒施(有效活菌数≥5亿/g)健立宝250g/亩。
进一步地，所述步骤三中，筛选出对洋葱根腐病防治效果显著的是处理2和处理3
所用药剂，分别称作第一种复配剂和第二种复配剂。
本发明的有益效果：本发明提供的用于防治洋葱根腐病的农药复配剂及其筛选方
法，对洋葱根腐病病原菌进行分离、生物学测定，将生防菌哈茨木霉菌和杀菌剂相结合形成
农药复配剂，哈茨木霉菌和福美双复配剂的相对防治效果达92.41％，哈茨木霉菌和多菌灵
复配剂的相对防治效果达76.74％，本发明采用以菌治菌、菌与杀菌剂相结合的洋葱根腐病
防治方法，防治过程农药毒性小、持效期长、能有效防治洋葱根腐病，并且降低环境污染。
本发明取得的经济效益：利用本发明的农药复配剂进行基地试验，试验结果表明，
示范基地洋葱平均产量8.02吨/亩，较对照亩增产1736kg,增产27.7％，亩新增纯收益868
元，已获得经济效益3095.5万元，科研投资年经济效益1884.2万元，科研投资年均收益率
9.25元/元。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明
进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于
限定本发明。
下面结合具体实施例对本发明的应用原理作进一步描述。
用于防治洋葱根腐病的农药复配剂及其筛选方法，具体实施方法如下：
一、菌种分离鉴定及生物学测定
供试菌种为2016年酒泉市农科院植保实验室从发病洋葱植株上分离培养的菌株，
在PDA培养基上培养菌落，菌落为圆形、气生菌丝棉絮状，颜色开始为纯白色，后渐变为桃红
色；显微镜镜检可见典型的镰刀状、非链状着生的分生小孢子，小型分生孢子自单出瓶状小
分生孢子梗产生，椭圆至卵圆形，大型分生孢子镰刀型；分生孢子大小有3个隔膜与5个隔膜
两种，33～44um×3.8～4um，生长适宜温度24-28℃，27℃生长速率10mm/天，致死温度55-60
℃。
二、筛选药剂
1、试验药剂
1号WP：有效成分为(3亿CFU/g)哈茨木霉菌WP500倍液(美国拜沃股份有限公司)；
2号WP：有效成分为50％福美双WP500倍液(威海韩孚生化药业有限公司)；
3号WP：有效成分为15％多菌灵WP500倍液(威海韩孚生化药业有限公司)；
4号WP：有效成分为(1000亿个/g)枯草芽孢杆菌WP500倍液(中国农科院植保所廊
坊农药中试厂)；
5号WP：有效成分为55％敌克松WP500倍液(辽宁省丹东市农药总厂)；
6号WP：有效成分为(有效活菌数≥5亿)健立宝500倍液(北京正农农业科技有限公
司)；
7号WP：有效成分为高锰酸钾500倍液(山东奥凯农业发展有限公司)；
8号WP：有效成分为(3亿CFU/g)哈茨木霉菌WP1000倍液+15％多菌灵WP1000倍液
(美国拜沃股份有限公司的哈茨木霉菌、威海韩孚生化药业有限公司的多菌灵)；
9号WP：有效成分为(1000亿个/g)枯草芽孢杆菌WP1000倍液+50％多菌灵WP1000倍
液(中国农科院植保所廊坊农药中试厂的枯草芽孢杆菌、威海韩孚生化药业有限公司的多
菌灵)；
10号WP：有效成分为(3亿CFU/g)哈茨木霉菌WP1000倍液+50％福美双WP1000倍液
(美国拜沃股份有限公司的哈茨木霉菌、威海韩孚生化药业有限公司的福美双)；
清水作对照，标记为CK(清水)。
2、抑菌试验
采用抑菌圈法(新农药)先将上述参试农药按处理要求的浓度配成药液，然后将直
径为5mm的滤纸片(滤纸事先经高压灭菌)在药液中浸泡2h，取出后移入60℃烘箱烘干备用，
其中1号、4号不需烘干浸泡后备用，8号、9号及10号先用农药处理烘干再接种菌剂。
先将菌丝悬浮液按每皿2ml接入无菌培养皿内，然后将冷却至40～45℃的PDA培养
基按定量倒入盛有菌丝悬浮液的培养皿制成带菌培养基，待培养基凝固后，再把用药液处
理过的滤纸片接入带菌培养基上，每皿接滤纸片3片，然后将培养皿放入恒温25℃培养箱中
培养，48h后测量抑菌圈大小。
3、抑菌结果与分析
表1为室内抑菌测定3天不同药剂对洋葱根腐病的影响，由表1可看出，抑菌测定3
天不同杀菌剂(除1、6号WP)的相同稀释浓度对洋葱根腐病菌丝生长均有抑制效果，但抑制
效果不同。杀菌剂处理抑菌圈平均直径0-20.8mm，其中抑菌圈平均直径最大为10号WP为
20.8mm，其次为9号WP为20mm，8号WP的抑菌圈直径为18.8mm，1号WP和6号WP没有抑菌效果。
杀菌剂处理平均抑菌率为0-69.3％，其中抑菌率最高为10号WP69.3％，其次是9号
WP66.7％，第三是8号WP62.7％。
表1室内抑菌测定3天不同药剂对洋葱根腐病的影响
表2为室内抑菌测定7天不同药剂对洋葱根腐病的影响，由表2可看出，抑菌测定7
天杀菌剂1号WP、5号WP、6号WP、7号WP相同稀释浓度对洋葱根腐病菌丝生长均没有抑制效
果，杀菌剂2号WP、3号WP、4号WP、8号WP、9号WP、10号WP的相同稀释浓度对洋葱根腐病菌丝生
长均有抑制效果。其中抑菌圈平均直径最大为10号WP为20mm，其次为9号WP为17.5mm，8号WP
的抑菌圈直径为16.5mm。杀菌剂处理平均抑菌率为0-69.3％，其中抑菌率最高为10号
WP66.7％，其次是9号WP58.3％，第三是8号WP55％，1号WP、5号WP、6号WP、7号WP抑菌率为0。
表2室内抑菌测定7天不同药剂对洋葱根腐病的影响
综合分析，杀菌剂10号WP药后7天较药后3天抑菌圈和抑菌率分别减少0.8mm和
2.6％，9号WP药后7天较药后3天抑菌圈和抑菌率分别减少2.5mm和8.4％，8号WP药后7天较
药后3天抑菌圈和抑菌率分别减少2.3mm和7.7％,杀菌剂10号WP、9号WP、8号WP对洋葱根腐
病病原菌有较好抑制作用，持效期较长，是防治洋葱根腐病适宜杀菌剂。杀菌剂2号WP药后7
天较药后3天抑菌圈和抑菌率分别减少7.7mm和25.7％，3号WP药后7天较药后3天抑菌圈和
抑菌率分别减少7.5mm和25％，4号WP药后7天较药后3天抑菌圈和抑菌率分别减少0.8mm和
2.7％,5号WP药后7天没有抑菌效果，2号WP、3号WP、4号WP、5号WP对洋葱根腐病也有较好防
效，但持效期短。
室内抑菌试验结果表明，10号WP、9号WP及8号WP对洋葱根腐病有较好的抑菌效果，
药后3天抑菌圈直径和抑菌率分别为20.8mm和69.3％、20mm和66.7％、18.8mm和62.7％，药
后7天抑菌圈直径和抑菌率分别为20mm和66.7％、17.5mm和58.3％、16.5mm和55％，且持效
期长，可以用于洋葱根腐病田间防效筛选试验。
三、筛选复配剂
根据抑菌试验结果，配制8种不同药剂，分别对洋葱根进行下列处理：
处理1：(3亿CFU/g)哈茨木霉菌40g/亩，稀释100倍蘸根，(3亿CFU/g)哈茨木霉菌
250g/亩，稀释1500倍洋葱膨大期灌根；
处理2：(3亿CFU/g)哈茨木霉菌40g/亩，稀释100倍，加50％福美双20g/亩，稀释100
倍洋葱蘸根；(3亿CFU/g)哈茨木霉菌250g/亩，稀释1500倍，加50％福美双2000g/亩，稀释
800倍洋葱膨大期灌根；
处理3：(3亿CFU/g)哈茨木霉菌40g/亩稀释100倍，加15％多菌灵30g/亩稀释100倍
蘸根；(3亿CFU/g)哈茨木霉菌250g/亩稀释1500倍，加15％多菌灵3000g/亩稀释800倍灌根；
处理4：29％石硫合剂2000g/亩，稀释800倍洋葱膨大期灌根；
处理5：55％敌克松30g/亩，稀释100倍蘸根；55％敌克松3000g/亩，稀释800倍
(CK1)洋葱膨大期灌根；
处理6：清水CK2；
处理7：(1000亿个/g)枯草芽孢杆菌40g/亩，稀释100倍蘸根；(1000亿个/g)枯草芽
孢杆菌250g/亩，稀释1500倍液洋葱膨大期灌根；
处理8：(有效活菌数≥5亿/g)健立宝40g/亩，稀释100倍蘸根，洋葱膨大期拌沙子
撒施(有效活菌数≥5亿/g)健立宝250g/亩。
表3试验处理发病率
(表中，处理2：哈茨木霉菌和福美双复配剂，处理3：哈茨木霉菌和多菌灵复配剂。)
表3所示为不同试验处理洋葱根腐病发病率，从表3中可以看出，处理2和处理3对
洋葱根腐病防治效果显著，相对防效分别为92.41％和76.74％。
选择处理2所用药剂为第一种复配剂，该复配剂中，哈茨木霉菌含量为3亿CFU/g，
有效菌为800-900亿CFU/亩，50％福美双有效菌含量为1000-1020g/亩；选择处理3所用药剂
为第二种复配剂，该复配剂中，哈茨木霉菌含量为3亿CFU/g，有效菌为800-900亿CFU/亩，
15％多菌灵有效菌含量为400-480g/亩。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精
神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。