定向淋巴的前药发明领域
本发明涉及前药形式的化合物，特别是促进药物活性剂转运至淋巴系统且随后增
强母体药物释放的化合物。
发明背景
淋巴系统由分布在全身的紧邻血管系统的血管、结节和淋巴组织的特化网状结构
组成。淋巴系统在免疫应答、体液平衡、营养物吸收、脂质稳态和肿瘤转移中起众多的关键
作用。由于淋巴系统的独特解剖学和生理学特征，将靶向递药至淋巴系统和通过淋巴系统
靶向递药建议为改善药物动力学和药效学特性的手段。淋巴药物转运具有通过避免首过代
谢提高口服生物利用度、改变系统药物处置和增强对淋巴或淋巴细胞介导的病理学情况
(例如淋巴瘤、白血病、淋巴肿瘤转移、自身免疫疾病、淋巴停留感染和移植体排斥)的效能
的潜能。
为了药物接近肠淋巴，它们必须首先结合肠淋巴脂蛋白，所述脂蛋白响应脂质吸
收而在肠吸收细胞(肠囊肿)中组装。与这些脂蛋白的结合随后促进药物转运入淋巴，因为
它们的尺寸阻碍跨过消耗小肠的内衬毛细血管的血管内皮的便利扩散。相反，这些大胶体
结构进入淋巴毛细管，因为淋巴内皮明显地比血管内皮更具有渗透性。从历史上看，具有高
淋巴转运的药物具有高度亲脂性，以促进与脂蛋白的物理结合(通常，但不排它地，log D>
5，且在长链甘油三酯中的溶解度>50mg/g)。因此，药物的高度亲脂性类似物被设想为促进
淋巴药物转运的一种方式。然而，母体药物的化学修饰可能导致作用强度降低，并且在许多
情况中，亲脂性的显著增加与毒性增加相关联。
亲脂性前药形式的化合物提供了一种暂时增加药物化合物的亲脂性和的脂蛋白
亲和力(由此增加淋巴靶向)的方式。通过淋巴系统转运，前药最终恢复成母体药物，以便在
其靶位点上具有活性。
存在几种探查药物的简单脂族酯类用作定向淋巴的前药的潜能的研究。十一酸睾
酮提供了一个采用该方法的上市销售的化合物的实例。口服后，睾酮在其首次通过肝时几
乎全部被完全代谢，最终结果是它具有最低的生物利用度。睾酮的十一酸酯使小比例的被
吸收的剂量重新定向进入淋巴系统，由此避免肝脏首过代谢并且增加睾酮的口服生物利用
度。然而，这种方法仍然是非常低效的，且认为口服所述十一酸酯后睾酮的生物利用度<
5％。
促进淋巴药物转移的另一种机制是使用前药，该前药结合进入与膳食脂质的吸
收、转运和处置相关的内源性途径。用作前药的膳食脂质的一个实例是甘油三酯。药物-脂
质缀合物的实例已被记录在大量在先的出版物中，其中母体药物包含可利用的羧酸基团且
直接与甘油酯骨架缀合(Paris，G.Y.等人，J.Med.Chem.1979，22，(6)，683-687；Garzon
Aburbeh，A.等人，J.Med.Chem.1983，26，(8)，1200-1203；Deverre，J.R.；等人，
J.Pharm.Pharmacol.1989，41，(3)，191-193；Mergen，F.等人，J.Pharm.Pharmacol.1991，
43，(11)，815-816；Garzon Aburbeh，A.等人，J.Med.Chem.1986，29，(5)，687-69；以及Han，
S.等人J Control.Release 2014，177，1-10)。
在其它实例中，短的连接基已用于促进药物-甘油三酯缀合，其中药物不含可利用
的羧酸(Scriba，G.K.E.，Arch.Pharm.(Weinheim)。1995，328，(3)，271-276；以及Scriba，
G.K.E.等人，J.Pharm.Pharmacol.1995，47，(11)，945-948)。这些药物-脂质缀合物使用琥
珀酸促进与可利用的羟基官能团缀合。然而，文献教导这种结构根本无用，例如，Scriba检
查了睾酮-琥珀酸-甘油酯脂质缀合物的体外水解，并且得出结论“本研究中通过化学水解、
血浆酯酶催化的水解和脂肪酶介导的水解从前药中仅极为缓慢地释放睾酮…因此，睾酮缀
合物看起来是递送类固醇的差前药。”
其它文献使用了醚键与甘油酯连接以及酯键与药物连接(Sugihara，J.等人，
J.Pharmacobiodyn.1988，11，(5)，369-376；以及Sugihara，J.等人，
J.Pharmacobiodyn.1988，11，(8)，555-562)。这些论文的作者清楚地描述，甘油与正烷基链
之间的醚键和正烷基链与药物之间的酯键对于药物的化学修饰似乎是必需的。然而，本发
明的发明人发现，醚键实际上是起反作用的，无法实现显著的淋巴转运。
因此，对于研发新的脂质-药物活性剂缀合物存在需求，所述缀合物有利于药物活
性剂稳定地转运至肠淋巴并且易于回复为母体活性剂以便有效。
发明概述
现已发现，使用某些“连接基”使药物活性剂连接至甘油三酯单元为所得到的脂
质-药物活性剂缀合物提供了最佳的药物动力学特性。
因此，一方面，本发明提供式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐：
其中
R1和R2独立地表示H或C2-C28脂肪酸的残基；
-X-选自-O-、-NH-和-S-；
-Y-表示任选被取代的-C3-C20烷基-、-C3-C20烯基-或-C3-C20炔基-，其中所述烷基、
烯基或炔基中的一个或多个碳原子可以被NH、S、O、C5-C8芳族或脂族环状基团或C5-C8芳族
或脂族杂环基团替代，条件是所述烷基、烯基或炔基不超过相当于直链C20烷基的长度；
表示药物活性剂的残基；
-L-是-X’-或-X’C(O)-；
X’是O、S、N、N(R4)或S(O)2NH；
表示单键，此时X’是O、S、N(R4)或S(O)2NH；或
表示两个单独的键，此时X’是N；
-Z-是-C(O)-或-C(O)R3-，此时-L-是-X’-；或
-Z-不存在，此时-L-是-X’C(O)-；
R3是自我毁灭的基团；且
R4是H或C1-C4烷基。
另一方面，本发明提供式(I)的化合物，其表示为式(II)：
其中
R1和R2独立地表示H或C2-C28脂肪酸的残基；
-X-选自-O-、-NH-和-S-；
-Y-表示任选被取代的-C3-C20烷基-、-C3-C20烯基-或-C3-C20炔基-，其中所述烷基、
烯基或炔基中的一个或多个碳原子可以被NH、S、O、C5-C8芳族或脂族环状基团或C5-C8芳族
或脂族杂环基团替代，条件是所述烷基、烯基或炔基不超过相当于直链C20烷基的长度；
表示药物活性剂的残基；
-L-是-X’-或-X’C(O)-；
X’是O、S或N(R4)；
R4是H或C1-C4烷基；且
-Z-是-C(O)-，此时-L-是-X’-；或
-Z-不存在，此时-L-是-X’C(O)-；或
其药学上可接受的盐。
另一方面，本发明提供式(I)的化合物，其表示为式(III)：
其中
R1、R2、-X-、和-Z-如对式(I)或式(II)所定义；
R5和R6各自选自氢和C1-C4烷基；且
n是1至18；或
其药学上可接受的盐。
另一方面，本发明提供式(I)的化合物，其表示为式(IV)：
其中R1、R2和X如对式(I)所定义；
R5和R6各自选自氢和C1-C4烷基；
-Z-是-C(O)-或-C(O)R3-；
R3是自我毁灭的基团；且
n是1至18；或
其药学上可接受的盐。
另一方面，本发明提供式(I)的化合物，其表示为式(V)：
其中R1、R2、X、R5、R6和n如对式(IV)所定义；且
-Z-是-C(O)-；或
其药学上可接受的盐。
另一方面，本发明提供治疗或预防其中增加的睾酮水平是有益的疾病或障碍的方
法，其包括对有此需要的受试者施用治疗有效量的式(IV)的化合物。
另一方面，本发明提供式(IV)的化合物在制备用于治疗或预防其中增加的睾酮水
平是有益的疾病或障碍的药剂中的用途。
另一方面，本发明提供式(IV)的化合物，其用于治疗或预防其中增加的睾酮水平
是有益的疾病或障碍。
另一方面，本发明提供一种促进药物活性剂的淋巴转运和系统性释放的方法，其
包括使该药物活性剂与式(VI)的前药残基或其药学上可接受的盐缀合：
其中
R1和R2独立地表示H或C2-C28脂肪酸的残基；
-X-选自-O-、-NH-和-S-；
-Y-表示任选被取代的-C3-C20烷基-、-C3-C20烯基-或-C3-C20炔基-，其中所述烷基、
烯基或炔基中的一个或多个碳原子可以被NH、S、O、C5-C8芳族或脂族环状基团或C5-C8芳族
或脂族杂环基团替代，条件是所述烷基、烯基或炔基不超过相当于直链C20烷基的长度；
-Z-是-C(O)-、-C(O)R3-或-CH2-；
R3是自我毁灭的基团；且
表示连接基与所述药物活性剂缀合的点。
对于本领域技术人员而言，在结合所伴有的实施例和权利要求书阅读如下详细描
述时，本发明的这些方面和其它方面将是更加显见的。
附图简要说明
图1：十二指肠内输注十一酸睾酮(TU)和化合物10、11、14和41后麻醉的肠系膜淋
巴管插管的雌性SD大鼠中总的睾酮相关衍生物的累积淋巴转运(所施用剂量的％)与时间
关系的图示。
图2：十二指肠内输注MPA和化合物30至35后麻醉的肠系膜淋巴管插管的雄性SD大
鼠中总的包含麦考酚酸(MPA)的化合物的累积淋巴转运(所施用剂量的％)与时间关系的图
示。
图3：十二指肠内输注MPA和化合物31和40后麻醉的肠系膜淋巴管插管的雄性SD大
鼠中总的包含麦考酚酸(MPA)的化合物的累积淋巴转运(所施用剂量的％)与时间关系的图
示。
图4：十二指肠内输注十一酸睾酮(TU)和化合物10、16和18后麻醉的肠系膜淋巴管
插管的雌性SD大鼠中总的睾酮相关衍生物的累积淋巴转运(所施用剂量的％)与时间关系
的图示。
图5：十二指肠内输注MPA和化合物31、32、34、36、37、38和39后麻醉的肠系膜淋巴
管插管的雄性SD大鼠中总的包含麦考酚酸(MPA)的化合物的累积淋巴转运(所施用剂量
的％)与时间关系的图示。
图6：十二指肠内输注MPA和化合物30、32、42、43、44和45后麻醉的肠系膜淋巴管插
管的雄性SD大鼠中总的包含麦考酚酸(MPA)的化合物的累积淋巴转运(所施用剂量的％)与
时间关系的图示。
图7.十二指肠内输注MET和化合物3后麻醉的肠系膜淋巴管插管的雄性SD大鼠中
总的美托洛尔(MET)相关衍生物的累积淋巴转运(所施用剂量的％)与时间关系的图示。
图8.十二指肠内输注ATV和化合物9后麻醉的肠系膜淋巴管插管的雄性SD大鼠中
总的阿托伐他汀(ATV)相关衍生物的累积淋巴转运(所施用剂量的％)与时间关系的图示。
图9.十二指肠内输注ASP和化合物8后麻醉的肠系膜淋巴管插管的雄性SD大鼠中
总的阿司匹林(ASP)相关衍生物的累积淋巴转运(所施用剂量的％)与时间关系的图示。
图10.十二指肠内输注SER和化合物1、6和7后麻醉的肠系膜淋巴管插管的雄性SD
大鼠中总的舍曲林(SER)相关衍生物的累积淋巴转运(所施用剂量的％)与时间关系的图
示。
图11.十二指肠内输注化合物5后麻醉的肠系膜淋巴管插管的雄性SD大鼠中总的
塞来昔布相关衍生物的累积淋巴转运(所施用剂量的％)与时间关系的图示。
图12：经口管饲十一酸睾酮(TU)和化合物10、11、13、14和40至有意识的颈动脉插
管的雌性SD大鼠后剂量归一化睾酮血浆浓度的图示。
图13：经口管饲十一酸睾酮(TU)(以商业产品Testocaps的形式)和化合物13至喂
食状态的雌性灰狗或经口管饲化合物13至禁食状态的灰狗后剂量归一化睾酮血浆浓度的
图示。
图14：经口管饲十一酸睾酮(TU)和化合物10、13、16、18和19至有意识的颈动脉插
管的雌性SD大鼠后剂量归一化睾酮血浆浓度的图示。
图15：经口管饲十一酸睾酮(TU)和化合物11、13、18、19、22、25、26和27至有意识的
颈动脉插管的雌性SD大鼠后剂量归一化睾酮血浆浓度的图示。
图16：经口管饲十一酸睾酮(TU)和化合物11、18、21和23至有意识的颈动脉插管的
雌性SD大鼠后剂量归一化睾酮血浆浓度的图示。
图17：经口管饲十一酸睾酮(TU)和化合物10、18、28和29至有意识的颈动脉插管的
雌性SD大鼠后剂量归一化睾酮血浆浓度的图示。
图18：经口管饲阿法沙龙或化合物2至有意识的颈动脉插管的雄性SD大鼠后阿法
沙龙(ALP)血浆浓度的图示。
图19：化合物10、13、16和化合物18的单酸甘油酯形式在体外与新鲜采集的大鼠胆
汁和胰液(对于化合物10和18)或猪胰脂肪酶(对于化合物13和16)一起温育过程中的稳定
性特性的图示。
图20：化合物11、13、22、25、26和27的单酸甘油酯形式在体外与猪胰脂肪酶一起温
育过程中的稳定性特性的图示。
图21：化合物11、13、21、23和24的单酸甘油酯形式在体外与猪胰脂肪酶一起温育
过程中的稳定性特性的图示。
图22：化合物10和29的单酸甘油酯形式在体外与猪胰脂肪酶一起温育过程中的稳
定性特性的图示。
图23：化合物31、32、34、36、37、38和39的单酸甘油酯形式在体外与新鲜采集的大
鼠胆汁和胰液一起温育过程中的稳定性特性的图示。
图24：在不存在或存在0.6mg JZL184和9μg奥利司他的情况下十二指肠内输注MPA
和化合物32后麻醉的肠系膜淋巴管插管的雄性SD大鼠中总的包含麦考酚酸(MPA)的化合物
的累积淋巴转运(所施用剂量的％)与时间关系的图示。
发明详述
当前药策略用于药物开发领域以改善药物动力学特性时，通常预期前药可以通过
非特异性降解或酶介导的生物转化回复为母体化合物，然后展示出生物活性。本发明公开
了基于修饰的甘油酯的化合物，它们能够促进药物活性剂的淋巴转运并且改善所述化合物
回复为活性药用物质。
膳食脂质，例如甘油三酯类应用独特的代谢途经以获得进入淋巴(并且最终到达
体循环)，其完全不同于其它营养物(例如蛋白质和碳水化合物)的代谢途经。在摄入后，膳
食甘油三酯类被体腔脂肪酶水解，每个甘油三酯分子释放一个单酸甘油酯和两个脂肪酸。
该单酸甘油酯和两个脂肪酸随后被吸收入肠细胞，在那里它们被重新酯化成甘油三酯类。
再合成的甘油三酯类被组装成肠脂蛋白(主要是乳糜微粒)且由此形成的乳糜微
粒从肠细胞胞吐出来，且随后获得优先进入肠淋巴管。在淋巴管内，乳糜微粒形式的脂质通
过一系列毛细血管、结节和输送管排出，最终在左锁骨下静脉和颈内静脉的连接处排空进
入体循环。在进入血液循环后，乳糜微粒中的甘油三酯类优先和有效地被具有高脂蛋白脂
肪酶表达的组织(例如脂肪组织、肝和潜在的某些类型的肿瘤组织)吸收。
预期脂质模拟性化合物与天然甘油三酯类行为类似，且在到达体循环之前被转运
至淋巴系统和通过淋巴系统。按照这种方式，母体药物活性剂的药物动力学和药效学特性
可以被操作以便增强进入淋巴和淋巴组织，由此通过避免首过代谢(和潜在的肠流出)提高
口服生物利用度。脂质模拟性化合物还可以促进药物靶向至淋巴、淋巴结和淋巴组织内的
部位和高脂质利用和脂蛋白脂肪酶表达的部位，例如脂肪组织和一些肿瘤。
易于转化成母体药物的脂质化前药在通过体循环转运后降低了胃肠(GI)道中的
游离药物浓度，这可以在减少胃肠刺激、掩蔽味道、促进药物在肠胆汁盐微团中增溶方面
(归因于与内源性单酸甘油酯类的类似性)和提高被动膜渗透性方面(通过增加亲脂性)提
供益处。脂质化前药还提高在包含单独的脂质或脂质与表面活性剂和/或助溶剂的混合物
的脂质载体中的溶解度，并且这样做使得能以大于对母体药物可能是可行的剂量以药物溶
液施用。
本发明的发明人令人惊奇地发现，将药物活性剂连接至甘油酯单元的药物-甘油
酯缀合物的部分可以被修饰，以改善药物-甘油酯缀合物在GI道中的稳定性，促进转运至肠
淋巴，且最终促进药物活性剂从药物活性剂-甘油酯前药中释放。因此，通过改变将药物活
性剂连接至甘油酯单元的“连接基”，对于所得到的化合物可以实现最佳的药物动力学特
性。
在本说明书中，应用了本领域技术人员众所周知的大量术语。尽管如此，但是为了
清楚目的，定义大量术语。
在本说明书中，除非另有定义，否则术语“任选被取代的”是指基团可以进一步被
一个或多个基团取代，也可以不被这些基团取代，所述基团选自羟基、烷基、烷氧基、烷氧基
羰基、烯基、烯氧基、炔基、炔氧基、氨基、氨基酰基、硫代、芳基烷基、芳基烷氧基、芳基、芳氧
基、酰基氨基、羧基、氰基、卤素、硝基、磺基、膦酰基、磷酰基氨基、膦基、杂芳基、杂芳氧基、
杂环基、杂环氧基、三卤代甲基、五氟乙基、三氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲硫基、三氟乙烯
基、一-和二-烷基氨基、一-和二-(取代的烷基)氨基、一-和二-芳基氨基、一-和二-杂芳基
氨基、一-和二-杂环基、氨基和带有不同取代基的不对称二-取代的胺类，所述取代基选自
烷基、芳基、杂芳基和杂环基。
如本申请中所用的，单独使用或在化合物措词中使用的术语“烷基”表示直链或支
链烷基。前缀例如“C2-C20”用于表示烷基内的碳原子数(在这种情况中为2－20个)。直链和
支链烷基的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲-丁基、叔-丁基、正戊基、己基、
庚基、5-甲基庚基、5-甲基己基、辛基、壬基、癸基、十一基、十二烷基和二十二烷基(C22)。
如本申请中所用的，单独使用或在化合物措词中使用的术语“烯基”表示包含至少
一个碳-碳双键的直链或支链烃残基，包括如上述所定义的烯烃类单-、二-或多不饱和烷
基。优选地，烯基是直链烯基。前缀例如“C2-C20”用于表示烯基内的碳原子数(在这种情况中
为2－20个)。烯基的实例包括乙烯基、烯丙基、1-甲基乙烯基、丁烯基、异-丁烯基、3-甲基-
2-丁烯基、1-戊烯基、1-己烯基、3-己烯基、1-庚烯基、3-庚烯基、1-辛烯基、1-壬烯基、2-壬
烯基、3-壬烯基、1-癸烯基、3-癸烯基、1,3-丁二烯基、1,4-戊二烯基、1,3-己二烯基、1,4-己
二烯基和5-二十二烯基(C22)。
如本申请中所用的，单独使用或在化合物措词中使用的术语“炔基”表示包含至少
一个碳-碳三键的直链或支链烃残基，包括如上述所定义的烯烃类单-、二-或多不饱和烷
基。优选地，炔基是直链炔基。前缀例如“C2-C20”用于表示炔基内的碳原子数(在这种情况中
为2－20个)。
如本申请中所用的，单独使用或在化合物措词中使用的术语例如“杂环”或“杂环
基”表示饱和、部分不饱和或完全不饱和单环、双环或稠合多环环系，其包含至少一个选自
氮、硫和氧的杂原子。前缀例如“C5-C8”用于表示该基团环状部分内的碳原子数(在这种情况
中为5－8个)。适合的杂环取代基的实例包括，但不限于吡咯、呋喃、苯并呋喃、苯并噻唑、咪
唑、苯并咪唑、咪唑啉、吡唑、吡唑啉、三唑、唑、唑啉、异唑、异唑啉、呋咱、二
唑、哌啶、吡啶、嘧啶、哒嗪和吡嗪，它们各自可以进一步被1-3个取代基取。
如本申请中所用的，术语例如“芳基”或“芳族环状基团”表示任意单核或多核的缀
合的或稠合的芳族烃基环系的残基。前缀例如“C5-C8”用于表示芳基环状部分内的碳原子数
(在这种情况中为5－8个)。芳基的实例包括苯基(单核)、萘基(稠合多核)、联苯基(缀合的
多核)和四氢萘基(稠合的多核)。
如本申请中所用的，术语“连接基”表示对于本申请中所述的式(I)的化合物而言
从“X”到“L”的化合物部分，其使药物活性剂连接至甘油酯单元。
如本申请中所用的，术语“自我毁灭的基团”定义一种化学部分，其与连接基形成
易断裂的键，与药物活性剂形成稳定的键，其中与药物活性剂的键在连接基裂解时变得不
稳定。自我毁灭的基团的实例包括，但不限于乙缩醛自我毁灭的基团、对羟基苄基羰基自我
毁灭的基团、翻转酯的自我毁灭的基团和三甲基锁自我毁灭的基团。许多其它适合的自我
毁灭的基团在本领域中是已知的，例如Blencowe等人，Polym.Chem.2011，2，773-790和
Kratz等人Chem Med Chem.2008，3，20-53中所描述的。
如本申请中所用的，术语“药物活性剂”表示任意的药物活性物质或成像(造影)
剂，其将得益于通过肠淋巴系统转运，例如以避免首过代谢或用于在淋巴系统内靶向递送。
适合的药物活性剂的实例包括，但不限于睾酮、麦考酚酸、雌激素(雌激素)、吗啡、
美托洛尔、雷洛昔芬、阿法沙龙、他汀类药物例如阿托伐他汀、喷他佐辛、普萘洛尔、L-DOPA、
丁丙诺啡、咪达唑仑、利多卡因、氯丙嗪、阿米替林、去甲替林、喷他佐辛，硝酸异山梨酯、三
硝酸甘油酯、氧烯洛尔、拉贝洛尔、维拉帕米、沙丁胺醇、环硫雄醇、美法仑、洛伐他汀、非甾
类抗炎药(NSAIDS，例如阿司匹林、布洛芬、萘普生)、COX-2抑制剂(例如塞来昔布、罗非昔
布)、皮质类固醇抗炎药(例如泼尼松龙、泼尼松、地塞米松)、抗疟药(例如羟氯喹)、环磷酰
胺、亚硝基脲类、铂、甲氨蝶呤、硫唑嘌呤、巯嘌呤、氟尿嘧啶、放线菌素D、蒽环类(例如柔红
霉素)、丝裂霉素C、博来霉素、光辉霉素、作用于抑免蛋白的药物(例如环孢素、他克莫司、西
罗莫司)、柳氮磺吡啶、来氟米特、麦考酚酯、阿片样物质、芬戈莫德、多球壳菌素、苯丁酸氮
芥、多柔比星、奈拉滨、可的松、地塞米松、泼尼松、普拉曲沙、长春碱、硼替佐米、噻替派、奈
拉滨、盐酸柔红霉素、氯法拉滨、阿糖胞苷、达沙替尼、甲磺酸伊马替尼、盐酸普纳替尼、硫酸
长春新碱、盐酸苯达莫司汀、磷酸氟达拉滨、波舒替尼、尼洛替尼、美琥他辛、阿那曲唑、卡培
他滨、来曲唑、紫杉醇、吉西他滨、氟维司群、他莫昔芬、拉帕替尼、托瑞米芬、伊沙匹隆、艾立
布林、阿苯达唑、伊维菌素、乙胺嗪、阿苯达唑、多西环素、氯生太尔、马拉韦罗、恩夫韦肽、脱
氧胸腺嘧啶核苷、齐多夫定、司他夫定、去羟肌苷、扎西他滨、阿巴卡韦、拉米夫定、恩曲他
滨、替诺福韦、奈韦拉平、地拉韦啶、依非韦伦、利匹韦林、拉替拉韦、艾维雷韦、洛匹那韦、茚
地那韦、奈非那韦、氨普那韦、利托那韦、阿昔洛韦和药物活性肽类。
适合的成像剂的实例包括，但不限于，荧光团，例如用于荧光显微镜检查的或用于
体内成像的其中荧光团在红外范围内具有发射光谱的Alexa Fluor系列的光学成像探针；
可以用于正电子发射断层摄影术(PET)的γ-发射体，例如氟脱氧葡萄糖或螯合剂，以螯合
磁共振成像探针，例如钆或铁。
对于式(I)的化合物，当X’是-O-或-S-时，基团是即表
示单键。然而，当X’是N时，表示两个单独的键，即不是双键，它们使氮原子连接至构成药
物活性剂的组成部分的两个单独的原子。对于示例性的化合物，化合物1、6和7，其中药物活
性剂是具有如下化学结构的舍曲林：
两个单独的键为从氮原子到1,2,3,4-四氢萘部分的键和从氮原子到甲基的键，此
时连接基键合至舍曲林的仲氮原子。例如，当药物活性剂是具有如下结构的替诺福韦时：
两个单独的键为从氮原子到嘌呤部分的键和从氮原子到氢原子的键，此时连接基
键合至可利用的伯胺。类似地，如果药物活性剂是具有如下结构的拉贝洛尔：
并且连接基键合至可利用的酰胺基团，则两个单独的键为从氮原子到羧基碳原子
的键和从氮原子到氢原子的键。针对式(I)的化合物提及不是想暗示氮原子通过双键键
合至药物活性剂。
为避免任何疑虑，所涉及的“相当于直链C20烷基的长度”是指20个单数键合的碳原
子理论上展开的长度。
在本发明的一些优选的实施方案中，关于通式(I)，适用如下定义的一个或多个：
a)R1和R2独立地表示H或C2-C28脂肪酸的残基。
b)R1表示H，且R2表示C2-C28脂肪酸的残基。
c)R2表示H，且R1表示C2-C28脂肪酸的残基。
d)R1和R2各自表示棕榈酸。
e)-X-是-O-。
f)-X-是-NH-。
g)-X-是-S-。
h)-Y-表示任选被取代的-C3-C20烷基-、-C3-C20烯基-或-C3-C20炔基-，其中所述烷
基、烯基或炔基上的碳原子的一个或多个可以被NH、S、O、C5-C8芳族或脂族环状基团或C5-C8
芳族或脂族杂环基团替代，条件是所述烷基、烯基或炔基不超过相当于直链C20烷基的长度。
i)-Y-表示-C3-C20烷基-、-C3-C20烯基-或-C3-C20炔基-，它们任选地被烷基取代。
j)-Y-表示-C3-C20烷基-、-C3-C20烯基-或-C3-C20炔基-，它们任选地被甲基取代。
k)-Z-是C(O)R3-，此时-L-是-X'-，且R3是自我毁灭的基团。
l)R3是自我毁灭的基团，其选自乙缩醛、三甲基锁、对羟基苄基羰基或翻转酯的自
我毁灭的基团。
m)-Z-是-C(O)-，此时-L-是-X'-。
n)X'是O。
o)X'是S。
p)X'是N。
q)X'是N(R4)。
r)R4是H。
s)R4是C1-C4烷基。
t)R4是甲基。
在一个优选的实施方案中，-Z-是-C(O)-，此时-L-是-X'-。
因此，在另一个实施方案中，本发明提供式(I)的化合物，其表示为式(II)：
其中
R1和R2独立地表示H或C2-C28脂肪酸的残基；
-X-选自-O-、-NH-和-S-；
-Y-表示任选被取代的-C3-C20烷基-、-C3-C20烯基-或-C3-C20炔基-，其中所述烷基、
烯基或炔基上的碳原子的一个或多个可以被NH、S、O、C5-C8芳族或脂族环状基团或C5-C8芳
族或脂族杂环基团替代，条件是所述烷基、烯基或炔基不超过相当于直链C20烷基的长度；
表示药物活性剂的残基；
-L-是-X'-或-X'C(O)-；
-Z-是-C(O)-，此时-L-是-X'-；或
-Z-不存在，此时-L-是-X'C(O)-；且
X’选自O、S和NR4；且
R4是H或C1-C4烷基；或
其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本发明提供式(I)的化合物，其表示为式(III)：
其中
R1、R2、-X-和-Z-如对式(I)所定义；
R5和R6各自选自氢和C1-C4烷基；且
n是1至18；或
其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，式(III)的化合物选自表1中列出的那些化合物。
表1.下式的化合物：
1TML＝三甲基锁自我毁灭的基团；2PHB＝对羟基苄基羰基自我毁灭的基团；3ASI＝
乙缩醛自我毁灭的基团。
在一个实施方案中，所述药物活性剂是睾酮或其衍生物或类似物。睾酮替代疗法
(TRT)常用于具有性腺功能减退症(特征在于异常低血清睾酮水平的障碍)的患者，以使其
血清睾酮水平恢复至正常范围且由此缓解性腺功能减退症的许多症状，例如情绪紊乱、性
功能障碍等。
因此，在一个实施方案中，本发明提供式(I)的化合物，其表示为式(IV)：
其中R1、R2和X如对式(I)所定义；
R5和R6各自选自氢和C1-C4烷基；
-Z-是-C(O)-或-C(O)R3-；
R3是自我毁灭的基团；且
n是1至18；或
其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，式(IV)的化合物选自表2中列出的那些化合物。
表2.式(IV)的化合物：
1ASI＝乙缩醛自我毁灭的基团；2TML＝三甲基锁自我毁灭的基团；3PHB＝对羟基苄
基羰基自我毁灭的基团；4FSI＝翻转酯自我毁灭的基团。
在另一个实施方案中，本发明提供治疗或预防其中增加的睾酮水平是有益的疾病
或障碍的方法，其包括对有此需要的受试者施用治疗有效量的式(IV)的化合物。
在另一个实施方案中，本发明提供式(IV)的化合物在制备用于治疗或预防其中增
加的睾酮水平是有益的疾病或障碍的药剂中的用途。
在另一个实施方案中，本发明提供式(IV)的化合物，其用于治疗或预防其中增加
的睾酮水平是有益的疾病或障碍。
其中所述增加的睾酮水平可能是有益的疾病和障碍包括，但不限于性腺功能减退
症、因骨髓衰竭导致的贫血、因肾衰竭导致的贫血、慢性呼吸衰竭、慢性心力衰竭、类固醇依
赖性自身免疫疾病、艾滋病消耗、遗传性血管水肿或荨麻疹、晚期乳腺癌或绝经。
在另一个实施方案中，所述药物活性剂是麦考酚酸(MPA)。MPA对淋巴细胞中的嘌
呤合成途径起作用且是广泛应用的用于治疗自身免疫疾病和器官移植排斥的免疫抑制剂。
因此，在另一个实施方案中，本发明提供式(I)的化合物或，其表示为式(VII)：
其中R1、R2、X和X'如对式(I)所定义；
R5和R6各自选自氢和C1-C4烷基；且
n是1至18；或
其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，式(VII)的化合物选自表3中列出的那些化合物。
表3.式(VII)的化合物：
在另一个实施方案中，本发明提供治疗或预防自身免疫疾病和器官移植排斥的方
法，其包括对有此需要的受试者施用治疗有效量的式(VII)的化合物。
在另一个实施方案中，本发明提供式(VII)的化合物在制备用于治疗或预防自身
免疫疾病和器官移植排斥的药剂中的用途。
在另一个实施方案中，本发明提供式(VII)的化合物，其用于治疗或预防自身免疫
疾病和器官移植排斥。
在另一个实施方案中，本发明提供促进药物活性剂淋巴转运和系统性释放的方
法，其包括使式(VI)的前药残基或其药学上可接受的盐缀合至所述药物化合物：
其中
R1和R2独立地表示H或C2-C28脂肪酸的残基；
-X-选自-O-、-NH-和-S-；
-Y-表示任选被取代的-C3-C20烷基-、-C3-C20烯基-或-C3-C20炔基-，其中所述烷基、
烯基或炔基上的碳原子的一个或多个可以被NH、S、O、C5-C8芳族或脂族环状基团或C5-C8芳
族或脂族杂环基团替代，条件是所述烷基、烯基或炔基不超过相当于直链C20烷基的长度；
-Z-是-C(O)-、-C(O)R3-或-CH2-；
R3是自我毁灭的基团；且
表示点，其中连接基缀合至药物活性剂。
在一个实施方案中，对如上文所定义的化合物的Y和Z进行选择，以有利于药物活
性剂稳定地转运至肠淋巴。在另一个实施方案中，对Y和Z进行选择，以有利于药物活性剂在
淋巴、淋巴细胞、淋巴组织、具有高脂肪酶活性的组织例如脂肪组织、一些癌症、肝脏或体循
环中释放。在另一个实施方案中，对Y和Z进行选择，以有利于药物活性剂转运至肠淋巴并且
有利于药物活性剂在淋巴、淋巴细胞、淋巴组织、具有高脂肪酶活性的组织例如脂肪组织、
一些癌症、肝脏或体循环中释放。
本发明的化合物用于稳定地将药物活性剂转运至肠淋巴并且在淋巴、淋巴细胞、
淋巴组织、具有高脂肪酶活性的组织例如脂肪组织、一些癌症、肝脏或体循环中释放药物活
性剂。本发明的化合物特别地用于转运和释放得益于避免首过代谢的药物活性剂，例如，展
示出大于50％首过代谢的化合物。在一个实施方案中，预期所述药物活性剂展示出大于
60％的首过代谢。在另一个实施方案中，所述药物活性剂展示出大于70％的首过代谢。在另
一个实施方案中，所述药物活性剂展示出大于80％的首过代谢。在另一个实施方案中，所述
药物活性剂展示出大于90％的首过代谢。
可以得益于稳定地转运至肠淋巴并且在淋巴、淋巴细胞、淋巴组织、具有高脂肪酶
活性的组织例如脂肪组织、一些癌症、肝脏或体循环的药物活性剂包括，但不限于睾酮、麦
考酚酸、雌激素(雌激素)、吗啡、美托洛尔、雷洛昔芬、阿法沙龙、他汀类药物例如阿托伐他
汀、喷他佐辛、普萘洛尔、L-DOPA、丁丙诺啡、咪达唑仑、利多卡因、氯丙嗪、阿米替林、去甲替
林、喷他佐辛、硝酸异山梨酯、三硝酸甘油酯、氧烯洛尔、拉贝洛尔、维拉帕米、沙丁胺醇、环
硫雄醇、美法仑、洛伐他汀和药物活性肽类。
本发明的化合物还用于所述药物活性剂在淋巴系统内的靶向释放，例如在淋巴、
淋巴细胞和淋巴组织以及具有高脂肪酶活性的组织例如脂肪组织、一些癌症或肝中。
可以得益于在淋巴系统或脂肪组织内靶向释放的药物活性剂包括，但不限于非甾
类抗炎药(NSAIDS，例如阿司匹林、布洛芬、萘普生)、COX-2抑制剂(例如塞来昔布)、皮质类
固醇抗炎药(例如泼尼松龙、地塞米松)、抗疟药(例如羟氯喹)、环磷酰胺、PPAR激动剂(例如
贝特类)、亚硝基脲类、铂、甲氨蝶呤、硫唑嘌呤、巯嘌呤、氟尿嘧啶、放线菌素D、蒽环类、丝裂
霉素C、博来霉素、光辉霉素、作用于抑免蛋白的药物(例如环孢素、他克莫司、西罗莫司)、柳
氮磺吡啶、来氟米特、麦考酚酯、阿片样物质、芬戈莫德、多球壳菌素、苯丁酸氮芥、多柔比
星、奈拉滨、可的松、地塞米松、泼尼松、普拉曲沙、长春碱、硼替佐米、噻替派、奈拉滨、盐酸
柔红霉素、氯法拉滨、阿糖胞苷、达沙替尼、甲磺酸伊马替尼、盐酸普纳替尼、硫酸长春新碱、
盐酸苯达莫司汀、磷酸氟达拉滨、波舒替尼、尼洛替尼、美琥他辛、阿那曲唑、卡培他滨、来曲
唑、紫杉醇、吉西他滨、氟维司群、他莫昔芬、拉帕替尼、托瑞米芬、伊沙匹隆、艾立布林、阿苯
达唑、伊维菌素、乙胺嗪、多西环素、氯生太尔、马拉韦罗、恩夫韦肽、脱氧胸腺嘧啶核苷、齐
多夫定、司他夫定、去羟肌苷、扎西他滨、阿巴卡韦、拉米夫定、恩曲他滨、替诺福韦、奈韦拉
平、地拉韦啶、依非韦伦、利匹韦林、拉替拉韦、艾维雷韦、洛匹那韦、茚地那韦、奈非那韦、氨
普那韦、利托那韦、阿昔洛韦和免疫抑制剂例如麦考酚酸、环孢菌素、他克莫司和西罗莫司。
作为一般性的策略，本发明的化合物可以通过如下路径之一合成。
方案1.本发明的未被取代的烷基-连接的化合物的合成，其中L是X’，且X’是O
如方案1中所示，可以通过使酸-甘油三酯IV与包含醇的药物活性剂(A-OH)在标准
酯-键形成条件下反应，制备本发明的化合物，其中-Y-是未被取代的烷基。在大部分情况
中，可以通过在吡啶的存在下用1,3-二酰基甘油III处理由酸酐I(n＝1)或二酰氯II(n>1)
(得自相应的二羧酸)获得所述酸-甘油三酯IV。
为了合成化合物，其中-Y-是α-取代或β-取代的烷基，酸酐I或二酰氯II通过方案1
中所述的路径转化成酸-甘油三酯IV并非典型地可行，因为原料是不对称的。因此，经由方
案1的合成将导致形成混合的酸-甘油三酯产物。在这些情况中，连接基单元可以由更为简
单的原料构建，且然后按照顺序在适合的点与二酰基甘油III合并，最终得到酸-甘油三酯
IV。
方案2.本发明的α-取代的化合物的合成
为了合成包含α-烷基取代的烷基连接基的化合物，可以通过衍生自醇VI的醛与稳
定的内盐VII之间的维蒂希反应组装用于间隔基的所需碳骨架，得到α-烷基-α,β-不饱
和的酯VIII。在该酯水解释放游离酸IX后，与二酰基甘油III在标准条件下偶合，得到甘油
三酯X。一步氢化-氢解得到饱和醇XI，首先使用PCC将其氧化，得到醛XII，然后进一步在
Pinnick条件下氧化，得到期望的α-取代的酸-甘油三酯IV。
方案3.本发明的β-取代的化合物的合成
为了合成包含β-烷基取代的烷基连接基的化合物，上述方案1中概括的方法可以
用于其中n＝1的特定情况，因为β-取代基维持二酰氯II中的对称性。上述方案3提供用于合
成包含β-烷基取代基的化合物的方法，在此情况中，其中n>1。最终，使用强碱例如n-BuLi使
TMS乙炔脱质子化，然后添加作为亲电体的烷基溴XIII，导致形成甲硅烷基炔XIV。在去甲硅
烷基化后，PdII和CuI介导的炔XV与烯醇三氟甲磺酸酯XVI的Sonogashira交叉偶合得到包含
所需β-烷基取代基的烯炔XVII。烯炔XVII的催化氢化得到β-甲基-ω-羟基酯XVIII，其可以
被转化成TBDPS醚XIX，用于导入甘油酯官能团的制备。然后通过在加压碱性条件下(2M KOH
的EtOH溶液，在60℃)水解酯XIX来进行，然后使得到的酸XX与二酰基甘油III进行标准偶
合，得到甘油三酯XXI。然后使用TBAF去甲硅烷基得到羟基甘油三酯XI，可以按照与方案2中
概括的类似的方式将其转化成目标酸-甘油三酯IV。
方案4.化合物的合成，其中L是–X’C(O)-，且X’是O或S
如果药物活性剂带有可以缀合形成本发明化合物的羧酸基团，则该化合物通常可
以根据方案4制备。为了在甘油酯与期望的连接基之间生成酯键，使ω-卤代羧酸XXII与1,
3-二酰基甘油III在标准偶合条件的存在下偶合，得到ω-卤代甘油三酯类XXIII。包含羧酸
的药物活性剂的缀合随后可以通过用适合的羧酸酯亲核体置换卤素离去基进行，得到本发
明的化合物XXIV。在此情况中，其中卤代羧酸XXII不是商购的，从更简单的前体合成是期望
的。对于较短的链(n＝2、3)，α-烷基或β-烷基取代的实例或长链(例如：n＝12)未取代的实
例，可以通过相应内酯类的开环得到必要的酸XXII(参见实施例6，化合物aj–am)。对于长链
α-烷基或β-烷基实例(n>3)，必要的卤代甘油三酯类XXIII可以由上述方案2和3中所述的羟
基甘油三酯XI制备。
如果本发明的化合物需要纯化，则可以使用多种技术例如重结晶和色谱技术，包
括高效液相色谱法(HPLC)和正向或反相硅胶色谱法。所述化合物可以用核磁共振(NMR)质
谱法和/或其它适合的方法表征。
应当理解，本发明的化合物可以以一种或多种立体异构体形式存在(例如非对映
异构体)。本发明在其范围内包括所有这些分离(例如对映体分离)或组合(包括外消旋混合
物和非对映异构体混合物)的立体异构体形式。
本发明由此还涉及关于氨基酸残基的不对称中心的基本上纯的立体异构体形式
的化合物，例如大于约90％de，例如约95％至97％de或大于99％de，以及混合物，包括其外
消旋混合物。这类非对映异构体可以通过不对称合成，例如采用手性中间体来制备，或可以
通过常规方法拆分混合物，例如色谱法或应用拆分试剂。
如果所述化合物包含一个或多个可以质子化或脱质子化的官能团(例如在生理pH
下)，则该化合物可以作为药学上可接受的盐制备和/或分离。应当理解，所述化合物在指定
pH下可以为两性离子形式。本申请中所用的表述“药学上可接受的盐”是指所指定的化合物
的盐，其中该盐适合于作为药物施用。这类盐可以通过分别使酸或碱与胺或羧酸基团反应
形成。
药学上可接受的酸加成盐可以由无机酸和有机酸制备。无机酸的实例包括盐酸、
氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等。有机酸的实例包括乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、
丙二酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、
对甲苯磺酸、水杨酸等。
药学上可接受的碱加成盐可以由无机碱和有机碱制备，衍生自无机碱的相应的平
衡离子包括钠、钾、锂、铵、钙和镁盐。有机碱包括伯、仲和叔胺类、取代的胺类包括天然存在
的取代的胺类和环胺类，包括异丙基胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、2-二甲氨
基乙醇、氨丁三醇、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、海巴明(hydrabamine)、胆
碱、甜菜碱、乙二胺、葡糖胺、N-烷基葡糖胺、可可碱、嘌呤、哌嗪、哌啶和N-乙基哌啶。
酸/碱加成盐倾向于比相应的游离酸/碱形式更溶于水性溶剂。
本发明的化合物可以为晶型或为溶剂合物(例如水合物)，并且预期两者均属于本
发明的范围内。术语“溶剂合物”是溶质和溶剂形成的可变化学计算量的复合物。这类溶剂
不应当干扰溶质的生物活性。作为实例，溶剂可以为水、乙醇或乙酸。溶剂化方法通常使本
领域公知的。
本发明化合物的施用途经预期包括口服和肠施用。因此，该活性化合物可以用惰
性稀释剂或可同化的可食用载体配制，或可以将其包封在硬壳胶囊或软壳胶囊内，或可以
将其压制成片剂，或可以将其直接掺入膳食食物。为了口服治疗施用，可以将活性化合物与
赋形剂掺合并且以可摄入片剂、口含或舌下片、药片、胶囊、酏剂、混悬液、糖浆剂、糯米纸囊
剂等的形式使用。活性化合物在这类治疗上有用的组合物中的量使得可以得到适合的剂
量。
所述片剂、药片、丸剂、胶囊等还可以包含如下文所列出的成分：可以加入粘合剂，
例如树胶、阿拉伯胶、玉米淀粉或明胶；赋形剂，例如磷酸二钙；崩解剂，例如玉米淀粉、马铃
薯淀粉、藻酸等；润滑剂，例如硬脂酸镁；以及甜味剂，例如蔗糖、乳糖或糖精，或矫味剂，例
如薄荷、冬青油或樱桃香精。当剂型是胶囊时，除上述类型的物质外，它还可以包含液体载
体。各种其它材料可以作为包衣衣料提供，否则可以改变剂型的物理形式。例如，可以用虫
胶、糖或它们两者给片剂、丸剂或胶囊包衣。糖浆剂或酏剂可以包含活性化合物、作为甜味
剂的蔗糖、作为防腐剂的对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯、染料和矫味剂例如樱桃
或橙子香精。当然，用于制备任意单位剂型的任意材料应当是药学纯的且在使用量上基本
上是无毒的。此外，可以将本发明的化合物掺入缓释制品和制剂，包括能够将活性肽特异性
地递送至肠的特定区域的那些。
还可以通过胃或食管直接内窥管经肠施用液体制剂。
在一个实施方案中，通过口服将本发明的化合物与食物一起施用以促进转运至肠
淋巴。
在另一个实施方案中，将本发明的化合物与以脂质为基质的制剂一起经口施用，
以促进与或不与共同施用的食物一起转运至肠淋巴。
用于口服递送的以脂质为基质的制剂是本领域公知的且可以包括，例如基本上非
水的媒介物，其典型地包含一种或多种脂质成分。脂质载体和得到的脂质制剂可以有用地
如下所述根据其共有公同特征，按照脂质制剂分类系统(LFCS)进行分类(Pouton，C.W.，
Eur.J.Pharm.Sci.11(增刊2)，S93-S98，2000；Pouton，C.W.，Eur.J.Pharm.Sci.29278-287，
2006)。
因此，脂质载体和得到的脂质制剂可以包含油/脂质和/或表面活性剂，任选地与
助溶剂。I型制剂包括需要消化的油或脂质，例如单、二和三-甘油酯类及其组合。II型制剂
是不溶于水的SEDDS，其包含用于I型制剂的脂质和油与其它不溶于水的表面活性剂。III型
制剂为SEDDS或自-微乳化的递药系统(SMEDDS)，其包含用于I型制剂的脂质和油与其它水
溶性表面活性剂和/或助溶剂(IIIa型)或更大比例的水溶性成分(IIIb型)。IV型制剂主要
包含亲水性表面活性剂和助溶剂(例如PEG、丙二醇和二甘醇一乙醚)并且用于难溶于水、而
非亲脂性的药物。任意这类脂质制剂(I-IV型)是本申请中关注的。
在一些实施方案中，脂质载体包含一种或多种油或脂质，不含其它表面活性剂、辅
助表面活性剂或辅助乳化剂或助溶剂，认为它们主要油一种或多种油或脂质组成。在另外
一些实施方案中，脂质载体包含一种或多种油或脂质与一种或多种不溶于水的表面活性
剂、任选地与一种或多种助溶剂。在另外一些实施方案中，脂质载体包含一种或多种油或脂
质与一种或多种水溶性表面活性剂、任选地与一种或多种助溶剂。在一些实施方案中，脂质
载体包含油/脂质、表面活性剂和助溶剂的混合物。在一些实施方案中，脂质载体主要由一
种或多种表面活性剂/辅助表面活性剂/辅助乳化剂和/或溶剂/助溶剂组成。
可以用于本发明的油或脂质的实例包括杏仁油、巴巴苏油、黑醋栗种子油、琉璃苣
油、介花油、蓖麻油、椰子油、鳕鱼肝油、玉米油、棉籽油、月见草油、鱼油、葡萄籽油、芥菜籽
油、橄榄油、棕榈仁油、棕榈油、花生油、菜籽油、红花油、芝麻油、鲨鱼肝油、大豆油、向日葵
油、胡桃油、小麦胚芽油、鳄梨油、糠油、氢化蓖麻油、氢化椰子油、氢化棉籽油、氢化棕榈油、
氢化大豆油、部分氢化大豆油、氢化植物油、辛酸/癸酸甘油三酯、分级分离的甘油三酯、三
癸酸甘油酯、三己酸甘油酯、三辛酸甘油酯、三辛酸/癸酸甘油酯、三辛酸/癸酸甘油酯、三辛
酸/硅酸/月桂酸甘油酯、三辛酸/硅酸/亚油酸甘油酯、三辛酸/硅酸/硬脂酸甘油酯、三月桂
酸甘油酯、单月桂酸甘油酯、山嵛酸甘油酯、单亚油酸甘油酯、三亚油酸甘油酯、三油酸甘油
酯、三十一酸甘油酯、甘油基三硬脂酸酯亚油酸甘油酯、饱和聚乙二醇化甘油酯、主要包含
C8-C12脂肪酸链的合成中链甘油三酯、主要包含C8-C12脂肪酸链的中链甘油三酯、主要包含>
C12脂肪酸链的长链甘油三酯、修饰的甘油三酯、分级分离的甘油三酯及其混合物。
可以用于本发明的单酸甘油酯和甘油二酯的实例包括具有8－40个碳原子的脂肪
酸链的一-和二酯类，包括水解的椰子油(例如MCM)、水解的玉米油(例如
MaisineTM35-1)。在一些实施方案中，单酸甘油酯和甘油二酯是具有8－18个碳链长度的脂
肪酸链的甘油的单-或二-饱和脂肪酸酯类(例如单硬脂酸甘油酯、二硬脂酸甘油酯、单辛酸
甘油酯、二辛酸甘油酯、单癸酸甘油酯和二癸酸甘油酯)。
用于脂质制剂的适合的表面活性剂包括C8-C22脂肪酸的丙二醇一-和二-酯，例如，
但不限于丙二醇单辛酸酯、丙二醇二辛酸酯、丙二醇单月桂酸酯，其以商品名例如
90、PG、FCC销售；糖脂肪酸酯类，例如，但不限
于棕榈酸蔗糖酯、月桂酸蔗糖酯、硬脂酸蔗糖酯；脱水山梨糖醇脂肪酸酯类，例如，但不限于
月桂山梨坦、棕榈山梨坦、油酸山梨坦；聚氧乙烯水山梨糖醇脂肪酸酯类，例如，但不限于聚
山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60和聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯85；聚氧乙烯一-和
二-脂肪酸酯类，包括，但不限于聚氧乙烯40硬脂酸酯和聚氧乙烯40油酸酯；C8-C22脂肪酸的
聚氧乙烯一-和二-酯类的混合物和C8-C22脂肪酸的甘油一-、二-和三-酯类，其销售商品名
为例如44/14、50/13、聚氧乙烯蓖
麻油化合物，例如，但不限于聚氧乙烯35蓖麻油、聚氧乙烯40氢化蓖麻油和聚氧乙烯60氢化
蓖麻油，其作为商品名例如EL、
RH40、RH60销售；聚氧乙烯烷基醚，包括，但不限于聚氧乙
烯20十六烷基十八烷基醚和聚氧乙烯10油醚；DL-.α.-生育酚聚乙二醇琥珀酸酯，其可以作
为商品名销售；甘油一-、二-和三-酯；C8-C22脂肪酸的甘油一-、二-和三-酯；蔗糖一-、二-和
三-酯；磺基琥珀酸二辛酸钠；聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物，例如，但不限于泊洛沙姆124、泊
洛沙姆188、泊洛沙姆407；C8-C22脂肪醇的聚氧乙烯醚类，包括，但不限于聚氧乙烯月桂醇、
聚氧乙烯鲸蜡醇、聚氧乙烯十八烷醇、聚氧乙烯油醇，其销售的商品名为例如35、
58、7898；或它们的任意两种或多种的混合物。
辅助乳化剂或辅助表面活性剂可以用于制剂。适合的辅助乳化剂或辅助表面活性
剂可以是磷酸甘油酯；磷脂，例如卵磷脂或游离脂肪酸，其在室温下为液体，例如异硬脂酸、
油酸、亚油酸、亚麻酸、棕榈酸、硬脂酸、月桂酸、癸酸、辛酸和己酸。
适合的溶剂/助溶剂包括乙醇、丙二醇、聚乙二醇、二甘醇一乙醚和甘油。
聚合物也可以用于制剂以抑制药物沉淀。已经证实一定范围的加合物可以影响这
些特性且是本领域技术人员众所周知的。适合的聚合物包括羟丙基甲基纤维素、羟丙基甲
基纤维素乙酰基琥珀酸酯、其它纤维素衍生的聚合物例如甲基纤维素；聚(甲基)丙烯酸酯
类，例如Eudragit系列聚合物，包括Eudragit E100、聚乙烯吡咯烷酮或例如Warren等人
Mol.Pharmaceutics 2013，10，2823-2848中所述的其他聚合物。
制剂还可以包含本领域技术人员通常已知以脂质为基质的制剂中包括的材料，例
如丁羟茴醚(BHA)或丁羟甲苯(BHT)和固化剂，例如微孔二氧化硅，例如偏硅酸铝镁
(Neusilin)。
在另一个实施方案中，所述化合物可以与酶抑制剂一起经口施用以增加前药在胃
肠道或肠细胞中的稳定性。在一些实施方案中，关注所述酶抑制剂抑制胰脂肪酶，其实例包
括，但不限于Alli和奥利司他。在其它实施方案中，关注所述酶抑制剂抑制细胞脂肪酶，例
如一酰基甘油脂肪酶，其实例包括，但不限于JZL184(4-硝基苯基-4-[双(1,3-苯并间二氧
杂环戊烯-5-基)(羟基)甲基]哌啶-1-甲酸酯)。
尽管如上文所述的化合物或其药学上可接受的盐可以以单独的活性成分施用于
受试者，但是其它活性成分与所述化合物一起施用属于本发明的范围。在一个或多个实施
方案中，关注本发明的化合物的两种或多种的组合施用于受试者。
本发明还提供药物组合物，其包含治疗有效量的如上文所定义的化合物或其药学
上可接受的盐与至少一种药学上可接受的载体或稀释剂。
术语“组合物”预期包括活性成分与作为载体的包囊材料的制剂，得到胶囊，其中
活性成分(与或不与另一种载体)被载体包围。
正如本领域技术人员易于理解的，药学上可接受的载体的性质取决于被治疗的病
症和哺乳动物的性质。认为特定载体或递送系统的选择易于由本领域技术人员确定。在制
备包含活性混合物的任意制剂的过程中，应当谨慎考量，以确保化合物的活性不在该过程
中被破坏，且该化合物能够达到其作用部位而不受破坏。在一些情形中，有必要通过本领域
公知的方式保护化合物，例如，微囊化。
本领域技术人员易于采样常规方法确定用于本发明化合物的适合的制剂。鉴定优
选的pH范围和适合的赋形剂例如抗氧化剂是本领域常规的。缓冲系统常用于提供期望范围
的pH值，并且包括羧酸缓冲液，例如乙酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐和琥珀酸盐。各种抗氧化剂可
以利用于这类制剂，包括酚类化合物，例如BHT或维生素E、还原剂例如甲硫氨酸或亚硫酸盐
和金属螯合剂例如EDTA。
药学上可接受的媒介物和/或稀释剂包括任意和所有的溶剂、分散介质、包衣衣
料、抗菌剂和抗真菌剂、等渗和吸收延迟剂等。这类介质和试剂在药物活性物质中的应用是
本领域众所周知的。除了任意常用介质或试剂与活性成分不相容，其在治疗组合物中的应
用被考虑。还可以将补充的活性成分掺入组合物。
还可以将所述化合物与一种或多种其它治疗剂以组合方式施用。该组合能够单
独、依次或同时施用上文所述的化合物与其它活性成分。该组合物可以以药物组合物的形
式提供。
本申请中所用的，术语“组合”是指组合物或套件产品，其中如上述所定义的组合
伴侣可以以依赖性或独立方式施用或通过使用与差别用量的组合伴侣的不同固定组合来
施用，即同时或在不同时间点施用。然后，例如，可以将组合伴侣同时或按年代交错施用，对
于套件的不同组成部分，其可以在不同的时间点和等同或不同时间间隔施用。组合中施用
的组合伴侣的总量的比例可变，例如，以符合待治疗患者亚群的需求或单一患者的需求，单
一患者的不同需求可以归因于该患者的年龄、性别、体重等。
尤其有利的是配制单位剂型形式的组合物，其易于施用且剂量均匀。本申请中所
用的单位剂型是指适合于作为待治疗哺乳动物受试者的单元剂量的物理分散单元；每个单
元包含预定量的活性物质，经计算其与所需的药学上可接受的媒介物结合产生期望的治疗
作用。用于本发明新的单位剂型的规格根据如下因素指定并且直接取决于如下因素：(a)活
性物质的独特特征和所实现的特定治疗作用；以及(b)本领域中混合用于治疗活受试者的
疾病的活性物质的内在限制，所述受试者具有患病的条件，其中身体健康如本申请中详细
描公开的受损。
如上所述，可以混合主要活性成分，以便利和有效地以治疗有效量与适合的药学
上可接受的媒介物一起在单位剂型中施用。例如，单位剂型可以包含用量为0.25μg－约
2000mg的主要活性成分。按照比例表示，活性化合物的存在量约为0.25μg－约2000mg/mL载
体。在包含补充活性成分的组合物的情况中，可以参照所述成分的常用剂量和施用方式确
定剂量。
如本申请中所用的，术语“有效量”是指当根据期望的施药方案施用时提供期望的
治疗活性的化合物用量。施药可以为1次或在数分钟或数小时间隔1次，或在这些期限的任
意一个内连续进行。适合的剂量可以在约0.1纳克/千克体重－1克/千克体重/剂量的范围。
典型剂量为1微克－1克/千克体重/剂量，例如1毫克-1克/千克体重/剂量。在一个实施方案
中，该剂量可以为1毫克-500毫克/千克体重/剂量。在另一个实施方案中，该剂量可以为1毫
克-250毫克/千克体重/剂量。在另一个实施方案中，该剂量可以为1毫克-100毫克/千克体
重/剂量，例如至多50毫克/体重/剂量。
本申请中所用的，术语“治疗”涵盖动物，优选哺乳动物，更优选人的病症或疾病的
任意治疗，且包括其中睾酮水平增加为有益的任意疾病或障碍的治疗。本申请中所用的，术
语“预防”涵盖动物，优选哺乳动物，更优选人的病症或疾病的预防，且包括其中睾酮水平增
加为有益的任意疾病或障碍的预防。
现在参照下列非限制性实施例描述本发明。下列实施例是通式(I)的代表，并且提
供了用于制备本发明示例性化合物的详细方法。
实施例1.用于制备式(I)的化合物的方法，其中Y表示未被取代的烷基且L表示X'，
其中X'是O。
a)5-((1,3-双(棕榈酰氧基)丙-2-基)氧基)-5-氧代戊酸(IV)
将4-(二甲氨基)吡啶(64.4mg，0.527mmol)加入甘油二酯III(300mg，0.527mmol)
和戊二酸酐I(120mg，1.05mmol)在吡啶/THF/CH2Cl2(各1.5mL)中的溶液中，将该混合物在室
温搅拌2天。用乙酸乙酯(20mL)稀释该反应体系，用1M HCl和盐水(各20mL)洗涤，干燥
(MgSO4)，减压浓缩，得到粗产物。进行硅胶色谱法(10％-15％乙酸乙酯/己烷)，得到酸甘油
三酯IV(140mg，39％)，为无色固体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.26(m，1H)，4.31(dd，J＝11.9，4.3Hz，2H)，4.14(dd，J＝
11.9，5.9Hz，2H)，2.44(t，J＝7.4Hz，2H)，2.42(t，J＝7.4Hz，2H)，2.31(t，J＝7.6Hz，4H)，
1.96(pent，J＝7.3Hz，2H)，1.67–1.54(m，4H)，1.49–1.18(m，48H)，0.88(t，J＝6.8Hz，6H)。
b)辛二酰二氯(II)
将辛二酸(84.2mg，0.483mmol)和DMF(1滴)在亚硫酰氯(351μL，4.83mmol)中的混
合物回流加热1.5小时。将该反应体系冷却至室温，用甲苯(5mL)稀释，减压浓缩，得到二酰
氯II(102mg，定量)，为黄色油状物，不经纯化使用。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.90(t，J＝7.2Hz，4H)，1.78–1.68(m，4H)，1.42–1.35(m，
4H)。
c)8-((1,3-双(棕榈酰氧基)丙-2-基)氧基)-8-氧代辛酸(IV)
将甘油二酯III(50.0mg，0.0879mmol)和吡啶(71.1μL，0.879mmol)在CH2Cl2(2mL)
中的溶液加入辛二酰二氯II(102mg，0.483mmol)在CH2Cl2(1.5mL)中的溶液中，将该混合物
在室温搅拌3.5小时。将该反应体系冷却至室温，用水(10mL)和1M HCl(3mL)稀释，用乙酸乙
酯(3×15mL)萃取水层。用1M HCl(30mL)和盐水(2×30mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥
(MgSO4)，减压浓缩，得到粗产物。通过硅胶色谱法纯化(20％-50％乙酸乙酯/己烷)，得到酸
甘油三酯IV(29.5mg，46％)，为淡黄色固体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.25(m，1H)，4.29(dd，J＝11.9，4.3Hz，2H)，4.14(dd，J＝
11.9，5.9Hz，2H)，2.37–2.28(m，8H)，1.68–1.56(m，8H)，1.39–1.21(m，52H)，0.87(t，J＝
6.8Hz，6H)。
d)10-(1,3-双(棕榈酰氧基)丙-2-基)癸二酸1-((3R,5S,8S,9S,10S,13S,14S,
17S)-17-乙酰基-10,13-二甲基-11-氧代十六氢-1H-环戊并[a]菲-3-基)酯(2)
将4-(二甲氨基)吡啶(DMAP，5.2mg，42.5μmol)、EDC·HCl(20.4mg，106μmol)和阿
法沙龙(22.6mg，68.0μmol)加入酸-TG IV(32.0mg，42.5μmol)在CH2Cl2(1.5mL)中的溶液中，
将该混合物在室温搅拌22小时。用CH2Cl2(5mL)稀释该反应体系，加入硅胶，减压浓缩该混合
物。通过硅胶色谱法纯化(15％-20％乙酸乙酯/己烷)，得到化合物2(20.5mg，45％)，为无色
固体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.25(m，1H)，5.00(m，1H)，4.29(dd，J＝11.9，4.4Hz，2H)，
4.14(dd，J＝11.9，5.9Hz，2H)，2.71(t，J＝9.0Hz，1H)，2.56(d，J＝11.9Hz，1H)，2.48(d，J＝
12.0Hz，1H)，2.34–2.18(m，10H)，2.09(s，3H)，1.86–1.37(m，18H)，1.36–1.07(m，62H)，1.00
(s，3H)，0.87(t，J＝6.8Hz，6H)，0.57(s，3H)。
e)10-(1-((叔丁氧基羰基)(异丙基)氨基)-3-(4-(2-甲氧基乙基)苯氧基)丙-2-
基)癸二酸1-(1,3-双(棕榈酰氧基)丙-2-基)酯(XXV)
将4-(二甲氨基)吡啶(DMAP，5.6mg，45.4μmol)和EDC·HCl(17.4mg，90.0μmol)加
入预先制备的N-Boc-美托洛尔(16.7mg，45.4μmol)和酸-TG IV(34.2mg，45.4μmol)在CH2Cl2
(2mL)中的溶液中，将该混合物在室温搅拌19小时。然后减压浓缩该反应体系，得到粗产物。
通过硅胶色谱法纯化(10％-25％乙酸乙酯/己烷)，得到被保护的前药XXV(23.3mg，47％)，
为无色固体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.12(d，J＝8.5Hz，2H)，6.83–6.78(m，2H)，5.33(m，1H)，
5.25(m，1H)，4.29(dd，J＝11.9，4.4Hz，2H)，4.14(dd，J＝11.9，5.9Hz，2H)，4.22–3.98(m，
3H)，3.55(t，J＝7.1Hz，2H)，3.47(m，1H)，3.34(s，3H)，3.31(m，1H)，2.81(t，J＝7.1Hz，2H)，
2.33–2.27(m，8H)，1.64–1.56(m，8H)，1.46(s，9H)，1.37–1.20(m，56H)，1.18(d，J＝6.8Hz，
3H)，1.14(d，J＝6.7Hz，3H)，0.87(t，J＝6.9Hz，6H)。
f)10-(1-(异丙基氨基)-3-(4-(2-甲氧基乙基)苯氧基)丙-2-基)癸二酸1-(1,3-
双(棕榈酰氧基)丙-2-基)酯(3)
将三氟乙酸(TFA)(7.7μL，0.104mmol)加入Boc氨基甲酸酯XXV(23.0mg，
0.0209mmol)在CH2Cl2(1mL)中的溶液中，将该反应体系在室温搅拌6小时。此时，TLC分析显
示反应缓慢进展，因此再加入TFA(15.4μL，0.208mmoL)，将该混合物在室温再搅拌18小时。
加入三乙胺(Et3N，50μL)，在N2气流中浓缩该反应体系，得到粗产物。通过硅胶色谱法纯化
(含有1％Et3N的20％-40％-60％乙酸乙酯/己烷)，得到化合物3(19.0mg，91％)，为无色油
状物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.16–7.09(m，2H)，6.87–6.81(m，2H)，5.29–5.18(m，2H)，
4.29(dd，J＝11.9，4.4Hz，2H)，4.14(dd，J＝11.9，5.9Hz，2H)，4.11–4.08(m，2H)，3.55(t，J
＝7.1Hz，2H)，3.34(s，3H)，2.99–2.88(m，2H)，2.86–2.77(m，3H)，2.35–2.28(m，8H)，1.69–
1.49(m，8H)，1.37–1.16(m，56H)，1.05(d，J＝6.2Hz，6H)，0.88(t，J＝6.8Hz，6H)。
g)10-(4-(6-羟基-3-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯甲酰基)苯并[b]噻吩-2-基)
苯基)癸二酸1-(1,3-双(棕榈酰氧基)丙-2-基)酯(4)的合成：
在雷洛昔芬(RAL)的情况中，其包含两个酚羟基，对母体分子进行单保护是必不可
少的，以防止在随后的偶合步骤中形成混合的单酰基和双酰基产物。在碱的存在下用1当量
的TBSCl处理雷洛昔芬得到区域异构体一甲硅烷基醚的混合物，通过色谱法可以将其部分
分离。极性较低的酚异构体XXVI与酸-TG IV在标准条件下偶合得到被保护的前药XXVII。使
用TBAF除去甲硅烷基保护基得到化合物4。应当注意，也可以采用该方法将酚XXVI的区域异
构体转化成相应的异构体前药。
g)(i)(6-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(4-羟基苯基)苯并[b]噻吩-3-基)
(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯基)甲酮(XXVI)
将4-(二甲氨基)吡啶(DMAP，108mg，0.882mmol)加入在DMF(10mL)中的盐酸雷洛昔
芬(180mg，0.353mmol)中，将该混合物在室温搅拌1小时。将该反应体系冷却至0℃，加入叔
丁基(氯)二甲基硅烷(TBSCl，53.2mg，0.353mmol)，将得到的混合物在室温再搅拌2.5小时。
用乙酸乙酯(60mL)稀释该反应体系，用水(2×50mL)、饱和NaHCO3水溶液(50mL)和盐水
(50mL)洗涤有机相，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到粗产物。通过硅胶色谱法纯化(含有1％
Et3N的0％-12.5％MeOH/CH2Cl2)，得到被保护的一甲硅烷基醚XXVI(25.0mg，12％)，为黄色
油状物，以及大量的混合区域异构体一甲硅烷基醚和未反应的雷洛昔芬的级分。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.68(d，J＝8.8Hz，2H)，7.47(d，J＝8.7Hz，1H)，7.30(d，J
＝2.0Hz，1H)，7.22(d，J＝8.5Hz，2H)，6.87(dd，J＝8.7，2.0Hz，1H)，6.65(d，J＝7.9Hz，4H)，
4.06(t，J＝5.9Hz，2H)，2.75(t，J＝5.9Hz，2H)，2.55–2.47(m，4H)，1.65–1.58(m，4H)，1.48–
1.41(m，2H)，0.92(s，9H)，0.11(s，6H)。
g)(ii)10-(4-(6-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧
基)苯甲酰基)苯并[b]噻吩-2-基)苯基)癸二酸1-(1,3-双(棕榈酰氧基)丙-2-基)酯
(XXVII)
将4-(二甲氨基)吡啶(DMAP，2.4mg，19.9μmol)和EDC·HCl(9.5mg，49.8μmol)加入
酸-TG IV(15.0mg，19.9μmol)和XXVI(11.7mg，19.9μmol)在CH2Cl2(0.6mL)中的溶液中，将该
混合物在室温搅拌6小时。用CH2Cl2(5mL)稀释该反应体系，加入硅胶，减压浓缩该混合物。通
过硅胶色谱法纯化(含有1％Et3N的0％-1.5％MeOH/CH2Cl2)，得到被保护的前药XXVII
(16.0mg，61％)，为无色油状物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.74–7.67(m，3H)，7.59(d，J＝2.1Hz，1H)，7.30–7.23(m，
2H)，7.06(dd，J＝8.8，2.1Hz，1H)，6.73(d，J＝8.8Hz，2H)，6.67(d，J＝8.6Hz，2H)，5.26(m，
1H)，4.29(dd，J＝11.9，4.3Hz，2H)，4.14(dd，J＝11.9，5.9Hz，2H)，4.07(t，J＝6.0Hz，2H)，
2.74(t，J＝5.9Hz，2H)，2.58(t，J＝7.5Hz，2H)，2.53–2.44(m，4H)，2.35–2.27(m，6H)，1.82–
1.73(m，2H)，1.68–1.53(m，10H)，1.49–1.39(m，4H)，1.38–1.19(m，54H)，0.93(s，9H)，0.87
(t，J＝6.8Hz，6H)，0.12(s，6H)。
g)(iii)10-(4-(6-羟基-3-(4-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯甲酰基)苯并[b]噻吩-
2-基)苯基)癸二酸1-(1,3-双(棕榈酰氧基)丙-2-基)酯(4)
在0℃将氟化四正丁基铵(TBAF，0.1M的THF溶液，70.0μL，7.0μmol)和乙酸(1.0M的
THF溶液，10.0μL，10.0μmol)加入TBS醚XXVII(7.1mg，5.4μmol)在THF(0.4mL)中的溶液中，
将该混合物在0℃搅拌50分钟。用乙酸乙酯(20mL)稀释该反应体系，用水和盐水(15mL)洗
涤，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到粗产物。通过硅胶色谱法纯化(含有1％Et3N的0％-2％
MeOH/CH2Cl2)，得到化合物4(4.9mg，75％)，为淡黄色油状物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.77(d，J＝8.8Hz，1H)，7.66(d，J＝8.9Hz，2H)，7.59(d，J
＝2.1Hz，1H)，7.19(d，J＝8.6Hz，2H)，7.08(dd，J＝8.8，2.2Hz，1H)，6.67(d，J＝7.3Hz，2H)，
6.61(d，J＝8.6Hz，2H)，5.26(m，1H)，4.30(dd，J＝11.9，4.3Hz，2H)，4.15(dd，J＝11.9，
5.9Hz，2H)，4.09(t，J＝5.7Hz，2H)，2.77(t，J＝5.8Hz，2H)，2.62–2.50(m，6H)，2.37–2.27
(m，6H)，1.82–1.73(m，2H)，1.69–1.55(m，10H)，1.50–1.19(m，58H)，0.87(t，J＝6.8Hz，6H)。
实施例2.用于制备式(I)的化合物的方法，其中Y表示α-甲基取代的烷基，且L表示
X'，其中X'是O。
h)(E)-10-(苄氧基)-2-甲基癸-2-烯酸甲酯(VIII)
将氯铬酸吡啶(PCC，39.7mg，0.184mmol)和C盐(Celite)(30mg)加入醇VI
(29.0mg，0.123mmol)在CH2Cl2(1.5mL)中的溶液中，将该反应该体系在室温搅拌1.5小时。通
过短硅胶垫过滤得到的深色混悬液，用50％乙酸乙酯/己烷洗脱，减压浓缩洗脱液，得到粗
醛，即刻再溶于甲苯(1.5mL)。加入内盐VII(85.5mg，0.245mmol)，将该混合物回流加热
20小时。将该反应体系冷却至室温，减压浓缩，得到粗产物。通过硅胶色谱法纯化(5％-8％
乙酸乙酯/己烷)，得到α,β-不饱和甲酯VIII(26.2mg，70％)，为黄色油状物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.38–7.26(m，5H)，6.76(m，1H)，4.50(s，2H)，3.73(s，3H)，
3.46(t，J＝6.6Hz，2H)，2.10–2.02(m，2H)，1.83(d，J＝1.3Hz，3H)，1.65–1.58(m，2H)，1.47–
1.28(m，8H)。
i)(E)-10-(苄氧基)-2-甲基癸-2-烯酸(IX)
将氢氧化钠溶液(2.0M，256μL，0.512mmol)加入在甲醇(0.9mL)和水(0.65mL)中的
酯VIII(26.0mg.0.0854mmol)中，将该混合物在室温搅拌30分钟，然后在0℃搅拌20小时。通
过添加1M HCl将该反应体系酸化至pH 1，用水(5mL)稀释，用乙酸乙酯(4×15mL)萃取水相。
用盐水(40mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到粗酸IX(24.8mg，定
量)，为无色油状物，不经纯化使用。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.39–7.26(m，5H)，6.91(td，J＝7.5，1.3Hz，1H)，4.51(s，
2H)，3.47(t，J＝6.6Hz，2H)，2.23–2.15(m，2H)，1.83(d，J＝0.7Hz，3H)，1.67–1.56(m，2H)，
1.49–1.25(m，8H)。
j)(E)-二棕榈酸2-((10-(苄氧基)-2-甲基癸-2-烯酰基)氧基)丙-1,3-二基酯(X)
将4-(二甲氨基)吡啶(DMAP，10.4mg，0.0854mmol)、EDC·HCl(40.9mg，0.214mmol)
和甘油二酯III(77.7mg，0.137mmol)加入酸IX(24.8mg，0.0854mmol)在CH2Cl2(2mL)中的溶
液中，将该混合物在室温搅拌17小时。用CH2Cl2(5mL)稀释该反应体系，加入硅胶，减压浓缩
该混合物。通过硅胶色谱法纯化(3％-7.5％乙酸乙酯/己烷)，得到甘油三酯X(44.6mg，
62％，2步)，为无色固体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.37–7.24(m，5H)，6.76(m，1H)，5.30(m，1H)，4.50(s，2H)，
4.31(dd，J＝11.8，4.5Hz，2H)，4.22(dd，J＝11.8，5.8Hz，2H)，3.46(t，J＝6.6Hz，2H)，2.31
(t，J＝7.5Hz，4H)，2.16(dt，J＝7.4，7.4Hz，2H)，1.81(d，J＝1.1Hz，3H)，1.66–1.55(m，6H)，
1.47–1.19(m，56H)，0.88(t，J＝6.9Hz，6H)。
k)二棕榈酸2-((10-羟基-2-甲基癸酰基)氧基)丙-1,3-二基酯(XI)
将在三-颈烧瓶中的苄基醚X(40.0mg，47.6μmol)在乙酸乙酯(5mL)中的溶液抽真
空2次，用N2气吹扫在，然后加入披钯碳(10％w/w，12.7mg，11.9μmol)，将得到的混悬液再抽
真空，用N2吹扫2次。给烧瓶配备H2气囊，抽真空，用H2吹扫3次，将该反应混合物在室温在
1atm的H2气氛中搅拌3小时。通过C盐垫过滤该反应体系，用乙酸乙酯洗涤，减压浓缩，得到
饱和醇XI(32.1mg)，为无色油状物，不经纯化使用。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.27(m，1H)，4.29(dd，J＝11.7，3.9Hz，2H)，4.14(dd，J＝
11.9，6.1Hz，2H)，3.63(t，J＝6.6Hz，2H)，2.44(m，1H)，2.30(t，J＝7.6Hz，4H)，1.67–1.50
(m，8H)，1.42–1.20(m，58H)，1.14(d，J＝7.0Hz，3H)，0.88(t，J＝6.9Hz，6H)。
l)二棕榈酸2-((2-甲基-10-氧代癸酰基)氧基)丙-1,3-二基酯(XII)
在0℃将氯铬酸吡啶(PCC，15.2mg，70.4μmol)加入醇XI(26.5mg，35.2μmol)和C
盐(20mg)在CH2Cl2(1mL)中的混悬液中，将该混合物在室温搅拌1小时。通过短硅胶垫过滤该
反应体系，用50％乙酸乙酯/己烷洗脱，减压浓缩滤液，得到粗醛XII(26.4mg)，为黄色油状
物，未经进一步纯化使用它。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.76(t，J＝1.8Hz，1H)，5.27(m，1H)，4.29(ddd，J＝11.9，
4.3，3.1Hz，2H)，4.14(dd，J＝11.9，6.1Hz，2H)，2.42(m，1H)，2.41(td，J＝7.3，1.8Hz，2H)，
2.30(t，J＝7.5Hz，4H)，1.67–1.54(m，8H)，1.44–1.18(m，56H)，1.14(d，J＝7.0Hz，3H)，0.88
(t，J＝6.9Hz，6H)。
m)10-((1,3-双(棕榈酰氧基)丙-2-基)氧基)-9-甲基-10-氧代癸酸(IV)
将亚氯酸钠(28.6mg，0.317mmol)和磷酸二氢钠(NaH2PO4，29.5mg，0.246mmol)在水
(0.5mL)中的溶液滴加到在t-BuOH(1mL)和2,3-二甲基-2-丁烯(0.2mL)中的醛XII(26.4mg，
0.0352mmol)中，将该反应体系在室温搅拌1.5小时。用水(5mL)稀释该反应体系，用己烷(3
×5mL)萃取水层。干燥合并的有机萃取物(MgSO4)，减压浓缩，得到粗酸IV(27.0mg)，为无色
油状物，未经进一步纯化使用它。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.27(m，1H)，4.29(ddd，J＝11.8，4.3，3.2Hz，2H)，4.14
(dd，J＝11.9，6.1Hz，2H)，2.43(m，1H)，2.36-2.28(m，6H)，1.65–1.55(m，8H)，1.38–1.19(m，
56H)，1.14(d，J＝7.0Hz，3H)，0.88(t，J＝7.0Hz，6H)。
实施例3.用于制备式(I)的化合物的方法，其中Y表示β-甲基取代的烷基，且L表示
X'，其中X'是O。
n)(7-(苄氧基)庚-1-炔-1-基)三甲基硅烷(XIV)
在–78℃将正丁基锂(n-BuLi，1.6M的己烷溶液，765μL，1.23mmol)缓慢地加入TMS-
乙炔(198μL，1.40mmol)在THF(1.5mL)中的溶液中，将该混合物在–78℃搅拌5分钟，然后温
热至室温，再搅拌15分钟。将该反应体系再冷却至–50℃，滴加溴化物XIII(90.0mg，
0.350mmol)在THF(1mL)中的溶液，将该混合物在–50℃搅拌15分钟，然后在室温搅拌17小
时。用盐水(15mL)稀释该反应体系，用乙酸乙酯(3×15mL)萃取水相。用盐水(30mL)洗涤合
并的有机萃取物，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到粗产物。通过硅胶色谱法纯化(4％-5％乙酸
乙酯/己烷)，得到TMS炔XIV(45.9mg，48％)，为无色油状物，其还包含去甲硅烷基化的炔XV
(9.7mg，通过1H NMR级分为14％)和少量PPh3。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.37–7.26(m，5H)，4.50(s，2H)，3.48(t，J＝6.5Hz，2H)，
2.23(t，J＝7.0Hz，2H)，1.68–1.60(m，2H)，1.58–1.42(m，4H)，0.14(s，7H)。
o)((庚-6-炔-1-基氧基)甲基)苯(XV)
在0℃将氟化四丁基铵(TBAF，1.0M的THF溶液，201μL，0.201mmol)滴加到甲硅烷基
炔XIV和炔XV(合并55.6mg，0.215mmol)在THF(1mL)中的7：2混合物中，将该混合物在室温搅
拌1小时。用水(5mL)和饱和水溶液NH4Cl(3mL)稀释该反应体系，用乙酸乙酯(3×10mL)萃取
水相。用盐水(20mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到粗产物。通过硅
胶色谱法纯化(4％乙酸乙酯/己烷)，得到炔XV(37.5mg，53％，2步)，为无色油状物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.39–7.27(m，5H)，4.51(s，2H)，3.49(t，J＝6.5Hz，2H)，
2.21(td，J＝6.9，2.6Hz，2H)，1.95(t，J＝2.7Hz，1H)，1.70–1.61(m，2H)，1.60–1.48(m，4H)。
p)(Z)-10-(苄氧基)-3-甲基癸-2-烯-4-炔酸乙酯(XVII)
使用N2气给PdCl2(PPh3)2(16.8mg，0.0240mmol)在DMF(1.5mL)中的混悬液脱气5分
钟，然后加入在DMF(2mL)中的CuI(9.1mg，0.0480mmol)、Et3N(66.8μL，0.480mmol)和脱气的
炔XV(48.5mg，0.240mmol)和三氟甲磺酸烯醇酯XVI(94.3mg，0.360mmol)。使用N2气流给该
混合物再脱气5分钟，然后在0℃加热1小时。将该反应体系冷却至室温，用乙酸乙酯(30mL)
稀释，用1M HCl、饱和水溶液NaHCO3、水和盐水(各20mL)洗涤，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到
粗产物。进行硅胶色谱法(4％-5％乙酸乙酯/己烷)，得到烯炔XVII(46.6mg，62％)，为淡黄
色油状物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.37–7.24(m，5H)，5.92(m，1H)，4.50(s，2H)，4.17(q，J＝
7.1Hz，2H)，3.48(t，J＝6.5Hz，2H)，2.45(t，J＝7.0Hz，2H)，2.01(d，J＝1.4Hz，3H)，1.69–
1.59(m，4H)，1.56–1.49(m，2H)，1.27(t，J＝7.1Hz，3H)。
q)10-羟基-3-甲基癸酸乙酯(XVIII)
给在双-颈烧瓶中的苄基醚XVII(31.4mg，0.100mmol)在乙酸乙酯(8mL)中的溶液
抽真空2次，用N2气吹扫，然后加入披钯碳(10％w/w，26.6mg，0.0250mmol)，将得到的混悬液
再抽真空，用N2吹扫3次。给烧瓶配备H2气囊，抽真空，用H2吹扫3次，将该反应混合物在室温
在1atm H2气氛中搅拌1小时。通过C盐垫过滤该反应体系，用乙酸乙酯洗涤，减压浓缩，得到
饱和醇XVIII(23.0mg，定量)，为无色油状物，未经进一步纯化使用它。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.12(q，J＝7.1Hz，2H)，3.63(t，J＝6.6Hz，2H)，2.28(dd，J
＝14.6，6.1Hz，1H)，2.09(dd，J＝14.6，8.1Hz，1H)，1.94(m，1H)，1.60–1.50(m，2H)，1.25(t，
J＝6.6Hz，3H)，1.40–1.13(m，10H)，0.92(d，J＝6.6Hz，3H)。
r)10-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-3-甲基癸酸乙酯(XIX)
将咪唑(9.6mg，0.141mmol)和叔丁基(氯)二苯基硅烷(TBDPSCl，50.8μL，
0.195mmol)加入醇XVIII(18.0mg，0.0781mmol)在DMF(3mL)中的溶液中，将该混合物在室温
搅拌16小时。用(20mL)乙酸乙酯稀释该反应体系，用盐水(2×15mL)洗涤，干燥(MgSO4)，减
压浓缩，得到粗产物。通过硅胶色谱法纯化(含有0.5％Et3N的4％乙酸乙酯/己烷)，得到
TBDPS醚XIX(33.7mg，92％)，为无色油状物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.70–7.64(m，4H)，7.45–7.33(m，6H)，4.13(q，J＝7.1Hz，
2H)，3.65(t，J＝6.5Hz，2H)，2.28(dd，J＝14.6，6.0Hz，1H)，2.09(dd，J＝14.6，8.2Hz，1H)，
1.94(m，1H)，1.60–1.50(m，2H)，1.38–1.21(m，3H)，1.05(s，J＝2.9Hz，2H)，1.05(s，9H)，
0.93(d，J＝6.6Hz，3H)。
s)10-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-3-甲基癸酸(XX)
将氢氧化钾溶液(2.0M，427μL，0.853mmol)加入在乙醇(2mL)中的酯XIX
(40.0mg.0.0853mmol)中，将该混合物在80℃加热2小时。通过添加1M HCl将该反应体系酸
化至pH 1，减压除去有机溶剂。用水(5mL)稀释残余物，用乙酸乙酯(3×15mL)萃取水相，用
盐水(30mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到粗酸XX(37.6mg，定量)，
为无色油状物，不经进一步纯化使用。当在高浓度下运行时，观察到1H和13C NMR光谱中的信
号倍增(4：1之比)，这启示可能溶液中存在单体和二聚化物质。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.74–7.63(m，4H)，7.45–7.34(m，6H)，3.65(t，J＝6.5Hz，
2H)，2.35(dd，J＝15.0，5.9Hz，1H)，2.14(dd，J＝15.0，8.2Hz，1H)，1.95(m，1H)，1.61–1.50
(m，2H)，1.38–1.18(m，10H)，1.04(s，9H)，0.96(d，J＝6.6Hz，3H)。
t)二棕榈酸2-((10-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-3-甲基癸酰基)氧基)丙-1,
3-二基酯(XXI)
将4-(二甲氨基)吡啶(DMAP，10.1mg，0.0831mmol)、EDC·HCl(39.8mg，0.208mmol)
和甘油二酯III(70.9mg，0.125mmol)加热到酸XX(36.6mg，0.0831mmol)在CH2Cl2(2.5mL)中
的溶液中，将该混合物在室温搅拌21小时。用CH2Cl2(5mL)稀释该反应体系，加入硅胶，减压
浓缩该混合物。通过硅胶色谱法纯化(4％-5％乙酸乙酯/己烷)，得到甘油三酯XXI(39.9mg，
48％，2步)，为无色固体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.69–7.64(m，4H)，7.44–7.34(m，6H)，5.28(m，1H)，4.29
(ddd，J＝11.8，4.2，0.6Hz，2H)，4.14(dd，J＝12.0，5.9Hz，2H)，3.65(t，J＝6.5Hz，2H)，
2.37–2.27(m，5H)，2.11(dd，J＝14.7，8.4Hz，1H)，1.92(m，1H)，1.67–1.50(m，8H)，1.39–
1.14(m，56H)，1.04(s，9H)，0.93(d，J＝6.6Hz，3H)，0.88(t，J＝6.9Hz，6H)。
u)二棕榈酸2-((10-羟基-3-甲基癸酰基)氧基)丙-1,3-二基酯(XI)
在0℃将氟化四丁基铵(TBAF，1.0M的THF溶液，98.3μL，98.3μmol)加入TBDPS醚XXI
(39.0mg，39.3μmol)在THF(2.5mL)中的溶液中，将该混合物在室温搅拌3小时。用水(10mL)
稀释该反应体系，用乙酸乙酯(3×15mL)萃取，用盐水(30mL)洗涤有机萃取物，干燥
(MgSO4)，减压浓缩，得到粗产物。通过硅胶色谱法纯化(10％-20％乙酸乙酯/己烷)，得到醇
XI(21.8mg，74％)，为无色固体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.28(m，1H)，4.29(dd，J＝11.9，4.3Hz，2H)，4.14(dd，J＝
11.9，5.9Hz，2H)，3.64(t，J＝6.6Hz，2H)，2.36–2.27(m，5H)，2.12(dd，J＝14.7，8.2Hz，1H)，
1.93(m，1H)，1.65–1.52(m，6H)，1.39–1.16(m，58H)，0.93(d，J＝6.6Hz，3H)，0.88(t，J＝
6.9Hz，6H)。
v)二棕榈酸2-((3-甲基-10-氧代癸酰基)氧基)丙-1,3-二基酯(XII)
在0℃将氯铬酸吡啶(PCC，12.0mg，55.8μmol)加入醇XI(21.0mg，27.9μmol)和C
盐(15mg)在CH2Cl2(1.5mL)中的混悬液中，将该混合物在室温搅拌1.75小时。通过短硅胶垫
过滤该反应体系，用洗脱乙酸乙酯，减压浓缩滤液，得到粗醛XII(20.9mg，定量)，为黄色油
状物，未经进一步纯化使用它。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.76(s，1H)，5.28(m，1H)，4.29(dd，J＝11.6，3.5Hz，2H)，
4.14(dd，J＝11.6，5.7Hz，2H)，2.42(t，J＝7.1Hz，2H)，2.36–2.25(m，5H)，2.12(dd，J＝
14.5，8.3Hz，1H)，1.93(m，1H)，1.72–1.53(m，6H)，1.42–1.05(m，56H)，0.93(d，J＝6.5Hz，
3H)，0.88(t，J＝6.6Hz，6H)。
w)10-((1,3-双(棕榈酰氧基)丙-2-基)氧基)-8-甲基-10-氧代癸酸(IV)
将亚氯酸钠(22.7mg，0.251mmol)和磷酸二氢钠(NaH2PO4，23.4mg，0.195mmol)在水
(1mL)中的溶液滴加到在t-BuOH(1.5mL)和2,3-二甲基-2-丁烯(0.3mL)中的醛XII(20.9mg，
0.0279mmol)中，将该反应体系在室温搅拌2.25小时。用水(10mL)稀释该反应体系，用乙酸
乙酯(3×15mL)萃取水层。用盐水(30mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO4)，减压浓缩，
得到粗产物。通过硅胶色谱法纯化(含有0.5％AcOH的10％-20％乙酸乙酯/己烷)，得到酸IV
(16.1mg，75％)，为无色固体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.27(m，1H)，4.29(dd，J＝11.9，4.3Hz，2H)，4.14(dd，J＝
12.0，6.0Hz，2H)，2.37–2.27(m，7H)，2.12(dd，J＝14.7，8.2Hz，1H)，1.93(m，1H)，1.67–1.55
(m，6H)，1.40–1.14(m，56H)，0.93(d，J＝6.6Hz，3H)，0.88(t，J＝6.9Hz，6H)。
x)10-((8R,9S,10R,13S,14S,17S)-10,13-二甲基-3-氧代-2,3,6,7,8,9,10,11,
12,13,14,15,16,17-十四氢-1H-环戊并[a]菲-17-基)3-甲基癸二酸1-(1,3-双(棕榈酰氧
基)丙-2-基)酯(19)
将4-(二甲氨基)吡啶(DMAP，2.5mg，20.6μmol)、EDC·HCl(9.9mg，51.4μmol)和睾
酮(10.7mg，37.1μmol)加入酸-TG IV(13.6mg，17.7μmol)在CH2Cl2(1mL)中的溶液中，将该混
合物在室温搅拌17小时。用CH2Cl2(5mL)稀释该反应体系，加入硅胶，减压浓缩该混合物。通
过硅胶色谱法纯化(15％乙酸乙酯/己烷)，得到化合物19(10.1mg，55％)，为无色固体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.73(s，1H)，5.27(m，1H)，4.61(dd，J＝9.0，7.9Hz，1H)，
4.29(dd，J＝11.9，3.8Hz，2H)，4.14(dd，J＝11.9，6.0Hz，2H)，2.48–2.24(m，11H)，2.23–
1.99(m，4H)，1.93(m，1H)，1.85(m，1H)，1.77(m，1H)，1.72–1.22(m，68H)，1.19(s，3H)，1.16–
0.96(m，4H)，0.93(d，J＝6.6Hz，3H)，0.88(t，J＝6.9Hz，6H)，0.83(s，3H)。
下表4中提供其它示例性的式(I)的化合物。
表4.下式的有代表性的化合物的1H NMR数据：
实施例4.用于制备式(I)的化合物的方法，其中Z表示C(O)R3，R3表示乙缩醛自我毁
灭的基团，且L表示X'，其中X'是O或N(R4)。
方案5：具有乙缩醛自我毁灭的连接基的化合物的合成
为了合成包含位于药物活性剂与烷基间隔给之间的乙缩醛自我毁灭连接基的化
合物，以有利于母体分子的系统性释放(Wittman，M.D.等人Bioorg.Med.Chem.Lett.2001，
11，811-814)，带有醇的药物活性剂必须被官能化且活化，然后如方案5中所概括的与酸-甘
油三酯IV缀合。在乙酐和乙酸的混合物中用DMSO处理醇导致形成(甲硫基)甲基(MTM)醚
XXVIII。使用磺酰氯活化MTM醚形成推定的亚砜种类，其可以与酸-甘油三酯IV的羧酸酯反
应，得到带有乙缩醛的化合物XXIX。
y)(8R,9S,10R,13S,14S,17S)-10,13-二甲基-17-((甲硫基)甲氧基)-1,2,6,7,8,
9,10,11-12,13,14,15,16,17-十四氢-3H-环戊并[a]菲-3-酮(XXVIII)
将乙酸(44μL，0.769mmol)和乙酐(140μL，1.48mmol)加入在DMSO(216μL，
3.04mmol)中的睾酮(36.1mg，0.125mmol)中，将该混合物在室温搅拌2天和18小时。此时对
该反应混合物的LCMS分析显示无未反应的睾酮且55％得到期望的MTM醚的转化率，其中大
量其它包含睾酮的种类构成物料平衡。在适度不同条件下以相同等级进行总计5次反应(参
见下表)，然后合并用于分离期望的产物。用水(15mL)稀释合并的反应混合物，用10％K2CO3
溶液中和。用乙酸乙酯(3×20mL)萃取水相，用饱和水溶液NaHCO3(40mL)和盐水(40mL)洗涤
合并的有机萃取物，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到粗产物。通过硅胶色谱法纯化(含有1％
Et3N的10％-15％乙酸乙酯/己烷)，得到睾酮MTM醚XXVIII(113mg，52％)，为淡黄色固体。
溶剂混合物：A＝54:35:11v/v DMSO:Ac2O:AcOH(总计400μL)
B＝1.2:1:0.8v/v DMSO:Ac2O:AcOH(总计375μL)
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.73(s，1H)，4.67(d，J＝11.2Hz，1H)，4.58(d，J＝11.2Hz，
1H)，3.68(t，J＝8.4Hz，1H)，2.48–2.24(m，4H)，2.13(s，3H)，2.08–1.97(m，2H)，1.93–1.80
(m，2H)，1.75–1.22(m，8H)，1.19(s，3H)，1.07–0.90(m，3H)，0.82(s，3H)。
z)(((8R,9S,10R,13S,14S,17S)-10,13-二甲基-3-氧代-2,3,6,7-8,9,10,11,12,
13,14-15,16,17-十四氢-1H-环戊并[a]菲-17-基)氧基)甲基己二酸1,3-双(棕榈酰氧基)
丙-2-基酯(21)
在0℃将磺酰氯(0.81M的CH2Cl2溶液，100μL，80.9μmol)加入MTM醚XXVIII(22.3mg，
63.9μmol)在CH2Cl2(0.8mL)中的溶液中，将该反应体系在0℃搅拌30分钟，然后在室温再搅
拌1小时。在N2气流中浓缩该反应体系，减压干燥。然后将粗残余物再溶于CH2Cl2(0.8mL)，加
入预先搅拌20分钟的酸-TG IV(29.7mg，42.6μmol)和DBU(7.6μL，51.1μmol)在甲苯(0.8mL)
中的溶液中，将该混合物在室温搅拌1.5小时。用CH2Cl2(20mL)稀释该反应体系，用饱和
NaHCO3水溶液(15mL)和盐水(15mL)洗涤有机相，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到粗产物。通过
硅胶色谱法纯化(10％-12.5％乙酸乙酯/己烷)，得到化合物21(18.8mg，44％)，为淡黄色固
体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.72(s，1H)，5.30–5.21(m，3H)，4.29(dd，J＝11.9，4.4Hz，
2H)，4.13(dd，J＝11.6，5.5Hz，2H)，3.53(dd，J＝8.3，8.3Hz，1H)，2.48–2.22(m，12H)，2.08–
1.98(m，2H)，1.92–1.80(m，2H)，1.75–1.50(m，13H)，1.49–1.20(m，49H)，1.18(s，3H)，1.17–
0.83(m，5H)，0.87(t，J＝6.9Hz，6H)，0.79(s，3H)。
方案6.具有经修饰的乙缩醛自我毁灭的连接基的胺前药的合成。
在此情况中，其中药物活性剂包含伯或仲胺，可以使用修饰形式的乙缩醛自我毁
灭的基团，其中还包括氨基甲酸酯连接物(参见方案6)。胺与氯甲酸氯甲酯反应得到氨基甲
酸氯甲酯XXX。然后通过在回流的甲苯中用衍生自酸-TG IV的羧酸酯处理置换卤化物离去
基，得到修饰的ASI前药XXXI。
aa)((1S,4S)-4-(3,4-二氯苯基)-1,2,3,4-四氢萘-1-基)(甲基)氨基甲酸氯甲酯
(XXX)
在0℃将氯甲酸氯甲酯(8.3μL，93.3μmol)和吡啶(14.1μL，175μmol)加入盐酸舍曲
林(20.0mg，58.3μmol)在CH2Cl2(4.5mL)中的溶液中，将该混合物在0℃搅拌30分钟，然后在
室温搅拌4小时。用CH2Cl2(20mL)稀释该反应体系，用饱和NaHCO3水溶液(2×20mL)和盐水
(各20mL)洗涤有机相，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到粗产物。通过硅胶色谱法纯化(10％-
15％乙酸乙酯/己烷)，得到氨基甲酸氯甲酯XXX(20.5mg，88％)，为无色固体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.34(d，J＝8.3Hz，1H)，7.29(m，1H)，7.23–7.19(m，2H)，
7.08(s，br，1H)，6.97(m，1H)，6.81(m，1H)，5.93–5.83(m，2H)，5.51(dd，J＝10.5，6.4Hz，
0.6H)，5.33(m，0.4H)，4.20(m，1H)，2.77(s，1.2H)，2.72(s，1.8H)，2.29(m，1H)，2.02(m，
1H)，1.79(m，2H)。注意：级分整合反映出存在～3：2的旋转异构体混合物，这归因于受限的
围绕N-甲基氨基甲酸酯官能团旋转。
ab)3-甲基戊二酸1-(1,3-双(棕榈酰氧基)丙-2-基)5-(((((1S,4S)-4-(3,4-二氯
苯基)-1,2,3,4-四氢萘-1-基)(甲基)氨基甲酰基)氧基)甲基)酯(7)
将1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯(DBU)(8.6μL，57.2μmol)和碘化四正丁基铵
(TBAI，5.8mg，)加入酸-TG IV(20.5mg，29.4μmol)和氯甲基醚XXX(11.8mg，29.6
μmol)在甲苯(1.5mL)中的溶液中，将该混合物回流加热3小时。将该反应体系冷却至室温，
用乙酸乙酯(15mL)稀释，用水(3×15mL)和盐水(2×15mL)洗涤有机相，干燥(MgSO4)，减压
浓缩，得到粗产物。进行硅胶色谱法(10％-20％乙酸乙酯/己烷)，得到化合物7(21.1mg，
68％)，为无色油状物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.33(d，J＝8.3Hz，1H)，7.31–7.27(m，1H)，7.21–7.16(m，
2H)，7.09(d，J＝2.0Hz，1H)，6.96(d，J＝7.2Hz，1H)，6.80(td，J＝8.0，2.0Hz，1H)，5.89–
5.82(m，2H)，5.49(dd，J＝10.3，6.5Hz，0.6H)，5.37–5.30(m，0.4H)，5.27(m，1H)，4.33–4.25
(m，2H)，4.19(m，1H)，4.15–4.10(m，2H)，2.74(s，1.2H)，2.69(s，1.8H)，2.54–2.39(m，3H)，
2.36–2.23(m，3H)，2.30(t，J＝7.5Hz，4H)，2.01(m，1H)，1.84–1.70(m，2H)，1.66–1.57(m，
4H)，1.33–1.20(m，48H)，1.05(d，J＝6.2Hz，2H)，1.02(d，J＝6.0Hz，1H)，0.88(t，J＝6.9Hz，
6H)。注意：级分整合反映出存在～3：2的旋转异构体混合物，这归因于受限的围绕N-甲基氨
基甲酸酯官能团旋转。
实施例5.用于制备式(I)的化合物的方法，其中Z表示C(O)R3，且R3表示三甲基锁自
我毁灭的基团，且L表示X'，其中X'是O、NR4或S(O)2NH。
方案7.带有三甲基锁自我毁灭的连接基的化合物的合成。
为了合成包含‘三甲基锁’(TML)自我毁灭的连接基的前药(Levine，M.N.；Raines，
R.T.Chem.Sci.2012，3，2412-2420)，该连接基还位于药物活性剂与烷基间隔基之间，以有
利于母体分子的系统释放，必须用TML部分使酸-甘油三酯IV官能化，然后如方案7中所概括
的与药物活性剂缀合。酸-TG IV与TML酚XXXII在标准条件下偶合得到甘油三酯XXXIII，可
以按照与方案4中所述类似的方式将其转化成期望的酸XXXVI。可以在酸性条件下(10-樟脑
磺酸)使TBS醚XXXIII脱保护，用2-步法使得到的醇XXXIV氧化，得到酸XXXVI。然后可以在标
准条件下与包含醇、胺或磺酰胺的药物活性剂偶合，得到目标化合物XXXVII。
ac)(2-(4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-甲基丁-2-基)-3,5-二甲基苯基)
己二酸1,3-双(棕榈酰氧基)丙-2-基酯(XXXIII)
将4-(二甲氨基)吡啶(DMAP，4.0mg，33.1μmol)和EDC·HCl(12.6mg，66.2μmol)加
入酸-TG IV(30.0mg，43.0μmol)和酚XXXII(10.7mg，33.1μmol)在CH2Cl2(1mL)中的溶液中，
将该混合物在室温搅拌16小时。用CH2Cl2(5mL)稀释该反应体系，加入硅胶，减压浓缩该混合
物。通过硅胶色谱法纯化(4％-6％乙酸乙酯/己烷)，得到TML甘油三酯XXXIII(19.8mg，
59％)，为无色油状物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.80(d，J＝2.0Hz，1H)，6.52(d，J＝1.9Hz，1H)，5.27(m，
1H)，4.31(dd，J＝11.9，4.3Hz，2H)，4.15(dd，J＝11.9，5.9Hz，2H)，3.47(t，J＝7.5Hz，1H)，
2.55(t，J＝7.1Hz，2H)，2.51(s，3H)，2.39(t，J＝7.0Hz，2H)，2.31(t，J＝7.6Hz，4H)，2.22
(s，3H)，2.02(t，J＝7.5Hz，1H)，1.82–1.72(m，4H)，1.65–1.56(m，4H)，1.45(s，6H)，1.36–
1.20(m，48H)，0.88(t，J＝6.9Hz，6H)，0.84(s，9H)，-0.03(s，6H)。
ad)(2-(4-羟基-2-甲基丁-2-基)-3,5-二甲基苯基)己二酸1,3-双(棕榈酰氧基)
丙-2-基酯(XXXIV)
将10-樟脑磺酸的溶液(0.122M的MeOH溶液，10μL，1.2μmol)加入在CH2Cl2(0.4mL)
和MeOH(0.4mL)中的TBS醚XXXIII(6.1mg，6.1μmol)中，将该混合物在室温搅拌1小时。用水
(5mL)稀释该反应体系，用(3×10mL)乙酸乙酯萃取水层。用饱和水溶液NaHCO3和盐水(各
20mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到粗醇XXXIV(6.1mg，定量)，为无
色油状物，未经进一步纯化使用它。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.82(d，J＝1.4Hz，1H)，6.53(d，J＝1.2Hz，1H)，5.27(m，
2H)，4.31(dd，J＝11.9，4.3Hz，2H)，4.15(dd，J＝11.9，5.8Hz，2H)，3.53(t，J＝7.2Hz，2H)，
2.58(t，J＝7.0Hz，2H)，2.52(s，3H)，2.40(t，J＝6.9Hz，2H)，2.31(t，J＝7.6Hz，4H)，2.23
(s，3H)，2.04(t，J＝7.2Hz，2H)，1.82–1.72(m，4H)，1.65–1.53(m，4H)，1.48(s，6H)，1.36–
1.13(m，48H)，0.88(t，J＝6.7Hz，6H)。
ae)(3,5-二甲基-2-(2-甲基-4-氧代丁-2-基)苯基)己二酸1,3-双(棕榈酰氧基)
丙-2-基酯(XXXV)
在0℃将氯铬酸吡啶(PCC，2.6mg，12.2μmol)加入醇XXXIV(5.4mg，6.1μmol)和C
盐(5mg)在CH2Cl2(0.5mL)中的混悬液中，将该混合物在室温搅拌1小时。通过短硅胶垫过滤
该反应体系，用50％乙酸乙酯/己烷洗脱，减压浓缩滤液。得到粗醛XXXV(5.4mg，定量)，为黄
色油状物，未经进一步纯化使用它。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.53(t，J＝2.6Hz，1H)，6.84(d，J＝1.4Hz，1H)，6.57(d，J
＝1.8Hz，1H)，5.27(m，1H)，4.31(dd，J＝11.9，4.3Hz，2H)，4.15(dd，J＝11.9，5.9Hz，2H)，
2.80(d，J＝2.6Hz，2H)，2.57(t，J＝7.1Hz，2H)，2.53(s，3H)，2.40(t，J＝7.0Hz，2H)，2.31
(t，J＝7.6Hz，5H)，2.24(s，3H)，1.83–1.72(m，4H)，1.65–1.56(m，4H)，1.55(s，6H)，1.35–
1.16(m，48H)，0.88(t，J＝6.7Hz，6H)。
af)3-(2-((6-((1,3-双(棕榈酰氧基)丙-2-基)氧基)-6-氧代己酰基)氧基)-4,6-
二甲基苯基)-3-甲基丁酸(XXXVI)
将高锰酸钾溶液(0.0775M的1：1丙酮/水溶液，200μL，15.5μmol)加入在丙酮
(0.5mL)和水(0.1mL)中的醛XXXV(12.5mg，0.0340μmol)中，将该混合物在室温搅拌18小时。
用水(10mL)稀释该反应体系，使用1M HCl酸化至pH 2，用乙酸乙酯(3×15mL)萃取水层。用
盐水(30mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到粗产物。通过硅胶色谱法
纯化(10％-20％乙酸乙酯/己烷)，得到酸XXXVI(9.5mg，75％)，为无色固体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.82(d，J＝1.3Hz，1H)，6.56(d，J＝1.7Hz，1H)，5.26(m，
1H)，4.32(dd，J＝11.9，4.4Hz，2H)，4.15(dd，J＝11.9，5.8Hz，2H)，2.82(s，2H)，2.60(t，J＝
7.0Hz，2H)，2.55(s，3H)，2.40(t，J＝6.9Hz，2H)，2.31(t，J＝7.6Hz，4H)，2.22(s，3H)，1.84–
1.72(m，4H)，1.66–1.49(m，4H)，1.58(s，6H)，1.36–1.19(m，48H)，0.88(t，J＝6.8Hz，6H)。
ag)(2-(4-(((8R,9S,10R,13S,14S,17S)-10,13-二甲基-3-氧代-2,3,6,7,8,9,
10,11,12,13-14,15,16,17-十四氢-1H-环戊并[a]菲-17-基)氧基)-2-甲基-4-氧代丁-2-
基)-3,5-二甲基苯基)己二酸1,3-双(棕榈酰氧基)丙-2-基酯(22)
将4-(二甲氨基)吡啶(DMAP，1.8mg，14.4μmol)、EDC·HCl(6.9mg，36.1μmol)和睾
酮(7.5mg，26.0μmol)加入酸XXXVI(13.0mg，14.4μmol)在CH2Cl2(1mL)中的溶液中，将该混合
物在室温搅拌26小时。用CH2Cl2(5mL)稀释该反应体系，加入硅胶，减压浓缩该混合物。通过
硅胶色谱法纯化(15％-20％乙酸乙酯/己烷)，得到化合物22(8.6mg，51％)，为无色固体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.80(d，J＝1.8Hz，1H)，6.55(d，J＝1.7Hz，1H)，5.72(s，
1H)，5.27(m，1H)，4.45(dd，J＝9.1，7.3Hz，1H)，4.31(dd，J＝11.9，4.4Hz，2H)，4.15(dd，J＝
11.9，5.8Hz，2H)，2.80(ABq，2H)，2.58(t，J＝7.0Hz，2H)，2.54(s，3H)，2.48–2.23(m，10H)，
2.21(s，3H)，2.11–1.97(m，2H)，1.86–1.47(m，16H)，1.55(s，6H)，1.43–1.19(m，49H)，1.17
(s，3H)，1.12–0.82(m，4H)，0.88(t，J＝6.9Hz，6H)，0.65(s，3H)。
ah)(2-(4-(((1S,4S)-4-(3,4-二氯苯基)-1,2,3,4-四氢-萘-1-基)(甲基)氨基)-
2-甲基-4-氧代丁-2-基)-3,5-二甲基苯基)己二酸1,3-双(棕榈酰氧基)丙-2-基酯(1)
将4-(二甲氨基)吡啶(DMAP，0.9mg，7.8μmol)、EDC·HCl(4.4mg，23.3μmol)，Et3N
(5.0μL，66.6μmol)和盐酸舍曲林(5.3mg，15.5μmol)加入酸XXXVI(7.0mg，7.8μmol)在CH2Cl2
(0.5mL)中的溶液中，将该混合物在室温搅拌16小时。用CH2Cl2(3mL)稀释该反应体系，加入
硅胶，减压浓缩该混合物。通过硅胶色谱法纯化(10％-20％乙酸乙酯/己烷)，得到化合物1
(5.6mg，61％)，为无色固体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.32(d，J＝8.3Hz，0.7H)，7.31(d，J＝8.3Hz，0.3H)，7.25–
7.11(m，2H)，7.09–7.02(m，1.3H)，6.97–6.90(m，1H)，6.87–6.78(m，2.4H)，6.72(dd，J＝
8.3，2.0Hz，0.3H)，6.58(d，J＝1.5Hz，0.7H)，6.55(d，J＝1.5Hz，0.3H)，5.88(dd，J＝10.7，
6.3Hz，0.7H)，5.25(m，1H)，4.94(dd，J＝10.8，5.7Hz，0.3H)，4.30(dd，J＝11.9，4.4Hz，2H)，
4.20–4.14(m，1H)，4.14(dd，J＝11.9，4.4Hz，2H)，3.07(d，J＝15.4Hz，0.7H)，3.00(d，J＝
4.9Hz，0.6H)，2.82(d，J＝15.4Hz，0.7H)，2.64(s，2.1H)，2.62–2.53(m，5.3H)，2.48(t，J＝
7.1Hz，0.6H)，2.39(t，J＝7.1Hz，1.4H)，2.31(t，J＝7.6Hz，4.6H)，2.23(s，2.1H)，2.21(s，
0.9H)，1.99–1.91(m，1H)，1.85–1.72(m，4H)，1.71–1.53(m，13H)，1.36–1.19(m，48H)，0.88
(t，J＝6.9Hz，6H)。注意：级分整合反映出存在旋转异构体的～7：3混合物，这归因于受限的
围绕N-甲基酰胺官能团的旋转。
下表5中提供了其它示例性的包含三甲基锁的式(I)的化合物的表征数据。
表5.有代表性的化合物的1H NMR数据
实施例6.用于制备式(I)的化合物的方法，其中Y表示未取代的或短链(n＝2、3)α-
甲基或β-甲基取代的烷基，且L表示X'C(O)，其中X'是O。
ai)二棕榈酸2-((4-溴丁酰基)氧基)丙-1,3-二基酯(XXIII)
将4-(二甲氨基)吡啶(DMAP，64.4mg，0.527mmol)和N,N′-二环己基碳二亚胺(DCC，
218mg，1.05mmol)依次加入4-溴丁酸(XXII)(141mg，0.844mmol)和III(300mg，0.527mmol)
在CH2Cl2(12mL)中的溶液中，将该混合物在室温搅拌19小时。用CH2Cl2(15mL)稀释得到的混
悬液，冷却至0℃，通过C盐过滤，再用CH2Cl2(20mL)洗涤。用1M HCl、水、饱和水溶液NaHCO3和
盐水(各30mL)洗涤有机相，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到粗产物。进行硅胶色谱法(5％乙酸
乙酯/己烷)，得到溴甘油三酯XXIII(352mg，93％)，为无色固体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.27(m，1H)，4.32(dd，J＝12.0，4.2Hz，2H)，4.14(dd，J＝
12.0，6.0Hz，2H)，3.46(t，J＝6.5Hz，2H)，2.53(t，J＝7.1Hz，2H)，2.32(t，J＝7.6Hz，4H)，
2.20–2.15(m，2H)，1.65–1.58(m，4H)，1.36–1.21(m，48H)，0.88(t，J＝6.9Hz，3H)。
在一些情况中，其中ω-卤代羧酸XXII不是商购的，可以如下所述通过使用相应的
内酯类、然后开环来进行合成。
aj)氧杂环十六烷-2-酮(XXXVIII)
在0℃将间-氯过苯甲酸(m-CPBA，70％纯，687mg，2.79mmol)加入环戊并癸酮
(500mg，2.23mmol)在CH2Cl2(6mL)中的溶液中，将该反应体系在室温搅拌4天和22小时。3天
后对取得的等分的反应体系的1H NMR分析显示74％的酮消耗率，此时，再加入一部分m-
CPBA(150mg)。4天和22小时后，用CH2Cl2(20mL)稀释该反应体系，用饱和水溶液NaHCO3(3×
20mL)、水(20mL)和盐水(20mL)洗涤，减压浓缩，得到粗产物。进行硅胶色谱法(5％-10％乙
酸乙酯/己烷)，得到内酯XXXVIII(463mg，86％)，为无色油状物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.15–4.11(m，2H)，2.35–2.29(m，2H)，1.71–1.58(m，4H)，
1.45–1.27(m，20H)。
ak)15-碘十五酸(XXII)
将氯三甲基硅烷(TMSCl，242μL，1.91mmol)加入XXXVIII(153mg，0.636mmol)和碘
化钠(286mg，1.91mmol)在乙腈(1.5mL)中的混悬液中，将该混合物回流加热21小时。将该反
应体系冷却至室温，用水(10mL)和10％Na2S2O3水溶液(10mL)稀释，用乙酸乙酯(3×20mL)萃
取。用盐水(40mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到粗产物。进行硅胶
色谱法(50％乙酸乙酯/己烷)，得到碘酸XXII(87.4mg，37％，70％纯)，为黄色油状物。观察
到在色谱后1H NMR光谱中的几个杂质信号的强度增加，疑似两个次要成分之一是通过水解
碘化物官能团形成的羟酸(δ3.53，羟基；δ3.18，碘)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.18(t，J＝7.1Hz，2H)，2.34(t，J＝7.5Hz，2H)，1.86–1.78
(m，2H)，1.68–1.57(m，2H)，1.42–1.22(m，20H)。
al)3-甲基四氢-2H-吡喃-2-酮(XXXIX)
在0℃将正丁基锂溶液(1.0M的己烷溶液，5.49mL，5.49mmol)滴加到二异丙基胺
(910μL，6.49mmol)在THF(4mL)中的溶液中，将该混合物在0℃搅拌30分钟，得到LDA淡黄色
溶液，然后将其冷却至–40℃。通过套管滴加冷的(–40℃)δ-戊内酯(500mg，4.99mmol)在THF
(4mL)中的溶液，将得到的混合物在–40℃搅拌10分钟，然后冷却至–78℃。然后滴加碘甲烷
(466μL，7.49mmol)，将该混合物缓慢地温热至0℃，历时4小时。通过缓慢添加乙酸(320μL)
使反应停止，用乙酸乙酯(10mL)和水(15mL)稀释，用乙酸乙酯(3×15mL)萃取水相。用饱和
NaHCO3水溶液和盐水(各30mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到粗产
物。硅胶色谱法(含有1％Et3N的15％-17.5％乙酸乙酯/己烷)，得到α-甲基-δ-戊内酯XXXIX
(144mg，25％)，为无色油状物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.37–4.26(m，2H)，2.58(ddt，J＝11.1，7.0，7.0Hz，1H)，
2.09(tt，J＝12.4，6.2Hz，1H)，1.98–1.83(m，2H)，1.54(ddt，J＝13.4，11.1，7.4Hz，1H)，
1.26(d，J＝6.9Hz，3H)。
am)4-甲基四氢-2H-吡喃-2-酮(XL)
在0℃将甲基锂(1.0M的Et2O溶液，2.00mL，2.00mmol)加入CuI(190mg，1.00mmol)
在Et2O(2mL)中的混悬液中，将淡黄色反应混合物即刻冷却至–40℃。通过套管滴加5,6-二
氢-2H-吡喃-2-酮(43.1μL，0.50mmol)在Et2O(2mL)中的溶液，将该反应体系在–40℃搅拌10
分钟，然后在0℃搅拌10分钟，在室温搅拌30分钟。在–40℃通过注射器将得到的黄色混悬液
转入剧烈搅拌的饱和NH4Cl水溶液(5mL)和乙酸乙酯(5mL)的混合物中，将猝灭的反应体系
缓慢地温热至室温，历时30分钟。用水(5mL)稀释该反应体系，用乙酸乙酯(3×15mL)萃取，
用1M Na2S2O3和盐水(各30mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到粗的β-
甲基-δ-戊内酯XL(22.7mg，40％)，为黄色油状物，未经进一步纯化使用它。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.42(ddd，J＝11.4，4.9，4.0Hz，1H)，4.27(ddd，J＝11.4，
10.6，3.8Hz，1H)，2.68(m，1H)，2.17–2.06(m，2H)，1.92(dqd，J＝13.8，3.9，1.5Hz，1H)，1.52
(m，1H),1。
an)(E)-6-(4-(烯丙氧基)-6-甲氧基-7-甲基-3-氧代-1,3-二氢异苯并呋喃-5-
基)-4-甲基-己-4-烯酸烯丙酯(XLI)
将1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯(DBU)(602μL，4.03mmol)和烯丙基溴(238μ
L，2.82mmol)加入麦考酚酸(250mg，0.809mmol)在DMF(15mL)中的溶液中，将该混合物在室
温搅拌18小时。用乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)稀释该反应体系，用乙酸乙酯(2×30mL)萃取
水相。用水和盐水(各40mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到粗产物。
进行硅胶色谱法(30％乙酸乙酯/己烷)，得到烯丙酯XLI(292mg，93％)，为无色油状物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.09(ddt，J＝17.1，10.4，5.9Hz，1H)，5.86(ddt，J＝17.2，
10.4，5.7Hz，1H)，5.37(dq，J＝17.2，1.5Hz，1H)，5.30–5.15(m，4H)，5.13(s，2H)，4.78(dt，J
＝5.9，1.3Hz，2H)，4.52(dt，J＝5.7，1.4Hz，2H)，3.76(s，3H)，3.41(d，J＝6.5Hz，2H)，2.44–
2.39(m，2H)，2.35–2.27(m，2H)，2.17(s，3H)，1.79(s，3H)。
ao)(E)-6-(4-(烯丙氧基)-6-甲氧基-7-甲基-3-氧代-1,3-二氢异苯并呋喃-5-
基)-4-甲基己-4-烯酸(XLII)
将酯XLI(44.0mg，0.110mmol)在2M NaOH(330μL，0.660mmol)中、水(1mL)和MeOH
(1.3mL)的混合物在室温搅拌1.5小时。用1M HCl将该反应体系酸化至pH 1，用水(5mL)稀
释，然后用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。用盐水(30mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO4)，
减压浓缩，得到粗产物。进行硅胶色谱法(40％-60％乙酸乙酯/己烷)，得到酸XLII(32.7mg，
83％)，为无色油状物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.09(m，1H)，5.36(ddd，J＝17.2，3.1，1.5Hz，1H)，5.25–
5.16(m，2H)，5.13(s，2H)，4.77(dt，J＝5.9，1.3Hz，2H)，3.76(s，3H)，3.42(d，J＝6.7Hz，
2H)，2.45–2.39(m，2H)，2.35–2.25(m，2H)，2.17(s，3H)，1.79(s，3H)。
ap)E)-二棕榈酸2-((4-((6-(4-(烯丙氧基)-6-甲氧基-7-甲基-3-氧代-1,3-二氢
异苯并呋喃-5-基)-4-甲基己-4-烯酰基)氧基)丁酰基)氧基)丙-1,3-二基酯(XLIII)
将1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯(DBU)(18.5μL，124μmol)加入XLII(30.6mg，
85.0μmol)和溴化物XXIII(55.5mg，77.3μmol)在甲苯(2mL)中的混悬液中，将该混合物回流
加热3.5小时。将该反应体系冷却至室温，通过添加1M HCl(3-4滴)酸化，用水(10mL)稀释。
用乙酸乙酯(3×15mL)萃取水相，用水和盐水(各30mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥
(MgSO4)，减压浓缩，得到粗产物。进行硅胶色谱法(15％-20％乙酸乙酯/己烷)，得到MPA甘
油三酯XLIII(56.2mg，73％)，为无色油状物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.10(ddt，J＝17.2，10.4，5.9Hz，1H)，5.37(dq，J＝17.2，
1.5Hz，1H)，5.29–5.15(m，3H)，5.13(s，2H)，4.78(dt，J＝5.9，1.3Hz，2H)，4.30(dd，J＝
11.9，4.4Hz，2H)，4.14(dd，J＝11.9，5.8Hz，2H)，4.06(t，J＝6.4Hz，2H)，3.77(s，3H)，3.42
(d，J＝6.8Hz，2H)，2.41–2.35(m，4H)，2.34–2.25(m，6H)，2.18(s，3H)，1.97–1.88(m，2H)，
1.79(s，3H)，1.65–1.52(m，4H)，1.35–1.19(m，48H)，0.88(t，J＝6.9Hz，6H)。
aq)(E)-二棕榈酸2-((4-((6-(4-羟基-6-甲氧基-7-甲基-3-氧代-1,3-二氢异苯
并呋喃-5-基)-4-甲基己-4-烯酰基)氧基)丁酰基)氧基)丙-1,3-二基酯(30)
将1,3-二甲基巴比妥酸(12.4mg，79.2μmol)和Pd(PPh3)4(9.2mg，7.92μmol)加入在
CH2Cl2(3mL)中的烯丙基醚XLIII(39.5mg，39.6μmol)，将该混合物在30℃搅拌2小时。将该反
应混合物直接上短硅胶垫，用乙酸乙酯(40mL)洗脱，减压浓缩滤液，得到粗产物。进行硅胶
色谱法(15％-20％乙酸乙酯/己烷)，得到化合物30(36.2mg，96％)，为无色固体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)(s，1H)，5.30–5.21(m，2H)，5.20(s，2H)，4.30(dd，J
＝11.9，4.4Hz，2H)，4.14(dd，J＝11.9，5.8Hz，2H)，4.06(t，J＝6.4Hz，2H)，3.76(s，3H)，
3.38(d，J＝7.0Hz，2H)，2.43–2.35(m，4H)，2.34–2.27(m，6H)，2.15(s，3H)，1.97–1.89(m，
2H)，1.80(s，3H)，1.65–1.52(m，4H)，1.34–1.21(m，48H)，0.87(t，J＝6.9Hz，3H)。
ar)二棕榈酸2-((5-((2-乙酰氧基苯甲酰基)氧基)戊酰基)氧基)丙-1,3-二基酯
(8)
将1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯(DBU)(14.7mL，98.4mmol)加入乙酰水杨酸
(阿司匹林，14.8mg，81.9mmol)和溴化物XXIII(40.0mg，54.7mmol)在甲苯(2mL)中的混悬液
中，将该混合物回流加热3.5小时。将该反应体系冷却至室温，然后用乙酸乙酯(5mL)和水
(15mL)稀释。分离水层，用1M HCl酸化至pH 2，然后用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。用水和盐水
(各40mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到粗产物。进行硅胶色谱法
(10％乙酸乙酯/己烷)，得到化合物8(23.9mg，53％)，为无色固体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.01(dd，J＝7.9，1.6Hz，1H)，7.56(ddd，J＝8.1，7.5，
1.7Hz，1H)，7.31(td，J＝7.7，1.2Hz，1H)，7.10(dd，J＝8.1，1.0Hz，1H)，5.26(m，1H)，4.31
(dd，J＝11.9，4.3Hz，2H)，4.28(t，J＝6.9Hz，2H)，4.14(dd，J＝11.9，5.9Hz，2H)，2.40(t，J
＝6.9Hz，2H)，2.35(s，3H)，2.30(t，J＝7.6Hz，4H)，1.83–1.74(m，4H)，1.64–1.54(m，4H)，
1.35–1.19(m，48H)，0.88(t，J＝6.9Hz，6H)。
as)二棕榈酸2-((6-(((3R,5R)-7-(2-(4-氟苯基)-5-异丙基-3-苯基-4-(苯基氨
基甲酰基)-1H-吡咯-1-基)-3,5-二羟基庚酰基)氧基)己酰基)氧基)丙-1,3-二基酯(9)的
合成
在阿托伐他汀(ATV)的情况中，二元醇官能团需要被掩蔽为丙酮化合物(亚异丙基
乙缩醛)，以防止其干扰随后的反应。如上所述在回流的甲苯中用DBU和ω-溴-TG XXIII处
理ATV丙酮化合物XLIV，得到被保护的前药XLV。然后在酸性条件下暴露二元醇，得到化合物
9。
as(i)2-((4R,6R)-6-(2-(2-(4-氟苯基)-5-异丙基-3-苯基-4-(苯基氨基甲酰
基)-1H-吡咯-1-基)乙基)-2,2-二甲基-1,3-二烷-4-基)乙酸(XLIV)
将对甲苯磺酸(p-TsOH，10.1mg，0.053mmol)加入在2,2-二甲氧基丙烷(1.5mL)和
丙酮(1.5mL)中的阿托伐他汀(160mg，0.265mmol)中，将该混合物在室温搅拌15小时。用乙
酸乙酯(30mL)稀释该反应体系，用水(25mL)和盐水(2×25mL)洗涤有机相，干燥(MgSO4)，减
压浓缩，得到粗产物。通过硅胶色谱法纯化(20％-30％-50％乙酸乙酯/己烷)，得到丙酮化
合物-酸XLIV(72.2mg，46％)，为无色泡沫体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.22–7.13(m，9H)，7.07(d，J＝7.7Hz，2H)，7.03–6.97(m，
3H)，6.86(br s，1H)，4.20(m，1H)，4.09(m，1H)，3.85(m，1H)，3.71(m，1H)，3.57(m，1H)，2.54
(dd，J＝15.8，6.8Hz，1H)，2.43(dd，J＝15.8，5.6Hz，1H)，1.71–1.61(m，2H)，1.53(d，J＝
7.1Hz，6H)，1.38(s，3H)，1,36(m，1H)，1.34(s，3H)，1.09(m，1H)。
as(ii)2-((6-(2-((4R,6R)-6-(2-(2-(4-氟苯基)-5-异丙基-3-苯基-4-(苯基氨
基甲酰基)-1H-吡咯-1-基)乙基)-2,2-二甲基-1,3-二烷-4-基)乙酰氧基)己酰基)氧
基)-丙-1,3-二基二棕榈酸酯(XLV)
将1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯(DBU)(4.3μL，29.0μmol)加入丙酮化合物-
酸XLIV(11.6mg，19.3μmol)和ω-溴-TG XXIII(12.0mg，16.1μmol)在甲苯(1.5mL)中的溶液
中，将该混合物回流加热2.5小时。将该反应体系冷却至室温，用乙酸乙酯(30mL)稀释，用水
(25mL)、饱和NaHCO3水溶液(25mL)和盐水(25mL)洗涤有机相，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到
粗产物。进行硅胶色谱法(20％乙酸乙酯/己烷)，得到ATV-甘油三酯XLV(13.0mg，64％)，为
无色油状物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.23–7.12(m，9H)，7.06(d，J＝7.8Hz，2H)，7.03–6.94(m，
3H)，6.86(br s，1H)，5.25(m，1H)，4.30(dd，J＝11.9，4.4Hz，2H)，4.19(m，1H)，4.14(dd，J＝
11.9，5.8Hz，2H)，4.07(m，1H)，4.07(t，J＝6.6Hz，2H)，3.82(m，1H)，3.70(m，1H)，3.57(m，
1H)，2.48(dd，J＝15.7，7.0Hz，1H)，2.36–2.27(m，7H)，1.70–1.58(m，10H)，1.53(d，J＝
7.1Hz，6H)，1.36(s，3H)，1.29(s，3H)，1.44–1.20(m，51H)，1.05(m，1H)，0.88(t，J＝6.9Hz，
6H)。
as(iii)二棕榈酸2-((6-(((3R,5R)-7-(2-(4-氟苯基)-5-异丙基-3-苯基-4-(苯
基氨基甲酰基)-1H-吡咯-1-基)-3,5-二羟基庚酰基)氧基)己酰基)氧基)丙-1,3-二基酯
(9)
将对甲苯磺酸(1.6mg，8.4mmol)加入丙酮化合物XLV(35.2mg，27.9mmol)在CH2Cl2
(0.5mL)和MeOH(1mL)中的溶液中，将该反应体系在室温搅拌5.5小时。用稀释该反应体系
CH2Cl2(20mL)，用饱和NaHCO3水溶液(15mL)和盐水(15mL)洗涤有机相，干燥(MgSO4)，减压浓
缩，得到粗产物。通过硅胶色谱法纯化(20％-35％乙酸乙酯/己烷)，得到化合物9(14.6mg，
43％)，为无色油状物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.22–7.13(m，9H)，7.06(d，J＝7.6Hz，2H)，7.02–6.96(m，
3H)，6.85(br s，1H)，5.25(m，1H)，4.30(dd，J＝11.9，4.4Hz，2H)，4.16(m，1H)，4.14(dd，J＝
11.9，5.6Hz，2H)，4.10(t，J＝7.5Hz，2H)，4.10(m，1H)，3.94(m，1H)，3.74(m，1H)，3.58(m，
1H)，2.40(d，J＝6.1Hz，2H)，2.33(t，J＝7.4Hz，2H)，2.31(t，J＝7.6Hz，4H)，1.73–1.51(m，
10H)，1.54(d，J＝7.4Hz，6H)，1.50–1.34(m，3H)，1.33–1.20(m，49H)，0.88(t，J＝6.9Hz，
1H)。
下表6中提供了其它示例性的式(I)的化合物，其中L表示X'C(O)。表6.式(I)的有
代表性的化合物的1H NMR数据
实施例7.用于制备式(I)的化合物的方法，其中Z表示C(O)R3，且R3表示对羟基苄基
羰基(PHB)自我毁灭的基团，且L表示X'，其中X'是O、S或NR4。
方案8.带有对羟基苄基羰基自我毁灭的连接基的化合物的合成
为了合成包含对羟基苄基(PHB)羰基自我毁灭的基团的前药，首先将对羟基苄醇
(XLVI)的伯羟基保护为甲硅烷基醚，使游离酚羟基与酸-TG IV偶合，得到PHB甘油三酯
XLVIII。除去硅保护基后，可以通过用氯甲酸对硝基苯酯(PNP)处理活化伯醇XLIX，得到PNP
碳酸酯L。通过与药物活性剂(AX’H)在碱性条件下反应置换PNP基团，得到期望的PHB前药
LI。
at)4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)苯酚(XLVII)
将咪唑(85.1mg，1.25mmol)和叔丁基(氯)二甲基硅烷(TBSCl，90.4mg，0.600mmol)
加入4-羟基苄醇(XLVI)(62.1mg，0.500mmol)在DMF(4mL)中的溶液中，将该混合物在室温搅
拌45分钟。用乙酸乙酯(30mL)稀释该反应体系，用水(30mL)、饱和NaHCO3水溶液(30mL)和盐
水(30mL)洗涤有机相，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到TBS醚XLVII(119mg，定量)，为无色油状
物，未经进一步纯化使用它。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.21–7.15(m，2H)，6.83–6.78(m，2H)，4.66(s，2H)，0.93
(s，9H)，0.08(s，6H)。
au)10-(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-苯基)癸二酸1-(1,3-双(棕榈
酰氧基)丙-2-基)酯(XLVIII)
将4-(二甲氨基)吡啶(DMAP，11.8mg，0.0966mmol)和EDC·HCl(46.3mg，
0.241mmol)加入酸-TG IV(80.0mg，0.106mmol)和酚XLVII(23.0mg，0.0966mmol)在CH2Cl2
(2.5mL)中的溶液中，将该混合物在室温搅拌18小时。用CH2Cl2(10mL)稀释该反应体系，加入
硅胶，减压浓缩该混合物。通过硅胶色谱法纯化(5％-7.5％-10％乙酸乙酯/己烷)，得到PHB
甘油三酯XLVIII(60.7mg，65％，2步)，为无色油状物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.35–7.28(m，2H)，7.05–6.99(m，2H)，5.26(m，1H)，4.72
(s，2H)，4.29(dd，J＝11.9，4.3Hz，2H)，4.14(dd，J＝11.9，5.9Hz，2H)，2.53(t，J＝7.5Hz，
2H)，2.32(t，J＝7.5Hz，2H)，2.30(t，J＝7.5Hz，4H)，1.78–1.70(m，2H)，1.67–1.55(m，6H)，
1.43–1.20(m，56H)，0.93(s，9H)，0.87(t，J＝6.8Hz，6H)，0.09(s，6H)。
av)10-(4-(羟基甲基)苯基)癸二酸1-(1,3-双(棕榈酰氧基)丙-2-基)酯(XLIX)
将10-樟脑磺酸(2.1mg，8.91μmol)加入在CH2Cl2(0.8mL)和MeOH(0.8mL)中的TBS醚
XLVIII(57.8mg，59.4μmol)中，将该混合物在室温搅拌2小时。用CH2Cl2(20mL)稀释该反应体
系，用饱和NaHCO3水溶液和盐水(各20mL)洗涤有机相，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到粗产物。
通过硅胶色谱法纯化(25％-35％乙酸乙酯/己烷)，得到醇XLIX(46.9mg，92％)，为无色固
体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.41–7.32(m，2H)，7.10–7.01(m，2H)，5.25(m，1H)，4.67
(s，2H)，4.28(dd，J＝11.9，4.3Hz，2H)，4.14(dd，J＝11.9，5.9Hz，2H)，2.54(t，J＝7.5Hz，
2H)，2.31(t，J＝7.5Hz，2H)，2.30(t，J＝7.5Hz，4H)，1.89(br s，1H)，1.78–1.70(m，2H)，
1.65–1.55(m，6H)，1.46–1.20(m，56H)，0.87(t，J＝6.9Hz，6H)。
aw)10-(4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲-基)苯-基)癸二酸1-(1,3-双(棕榈
酰氧基)丙-2-基)酯(L)
在0℃将氯甲酸4-硝基苯酯(13.9mg，69.1μmol)和吡啶(7.8μL，96.0μL)加入在
CH2Cl2(2mL)中的醇XLIX(33.0mg，38.4μmol)中，将该混合物在0℃搅拌20分钟，然后在室温
搅拌2.5小时。用CH2Cl2(20mL)稀释该反应体系，用饱和NaHCO3水溶液和盐水(各20mL)洗涤
有机相，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到粗产物。通过硅胶色谱法纯化(10％-20％乙酸乙酯/
己烷)，得到PNP碳酸酯L(38.7mg，98％)，为无色固体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.30–8.23(m，2H)，7.49–7.43(m，2H)，7.41–7.35(m，2H)，
7.15–7.09(m，2H)，5.28(s，2H)，5.26(m，1H)，4.30(dd，J＝11.9，4.3Hz，2H)，4.15(dd，J＝
11.9，5.9Hz，2H)，2.56(t，J＝7.5Hz，2H)，2.32(t，J＝7.5Hz，2H)，2.31(t，J＝7.5Hz，4H)，
1.79–1.71(m，2H)，1.66–1.55(m，6H)，1.45–1.20(m，56H)，0.87(t，J＝6.9Hz，6H)。
ax)10-(4-((((((8R,9S,10R,13S,14S,17S)-10,13-二-甲基-3-氧代-2,3,6,7,8,
9,10,11,12,13,14,15,16,17-十四氢-1H-环戊并[a]-菲-17-基)氧基)羰基)氧基)甲基)苯
基)癸二酸1-(1,3-双(棕榈酰氧基)丙-2-基)酯(28)
将4-(二甲氨基)吡啶(DMAP，6.2mg，50.8μmol)和DIPEA(0.16M的CH2Cl2溶液，80.0μ
L，12.7μmol)加入睾酮(11.7mg，40.6μmol)和PNP碳酸酯L(26.0mg，25.4μmol)在CH2Cl2
(0.8mL)中的溶液中，将该混合物在室温搅拌4天和20小时。用CH2Cl2(20mL)稀释该反应体
系，用饱和NaHCO3水溶液和盐水(各2×15mL)洗涤，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到粗产物。通
过硅胶色谱法纯化(10％-20％乙酸乙酯/己烷)，得到化合物28(9.8mg，33％)，为无色固体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.43–7.38(m，2H)，7.10–7.05(m，2H)，5.73(s，1H)，5.26
(m，1H)，5.12(s，2H)，4.52(dd，J＝8.9，7.8Hz，1H)，4.29(dd，J＝11.9，4.3Hz，2H)，4.14(dd，
J＝11.9，5.9Hz，2H)，2.54(t，J＝7.5Hz，2H)，2.47–2.17(m，11H)，2.02(m，1H)，1.89–1.81
(m，2H)，1.78–1.54(m，12H)，1.47–1.19(m，59H)，1.18(s，3H)，1.10–0.93(m，4H)，0.87(t，J
＝6.8Hz，6H)，0.85(s，3H)。
ay)10-(4-(((((1S,4S)-4-(3,4-二氯苯基)-1,2,3,4-四氢萘-1-基)(甲基)氨基
甲酰基)氧基)甲基)苯基)癸二酸1-(1,3-双(棕榈酰氧基)丙-2-基)酯(6)
将4-(二甲氨基)吡啶(DMAP，6.3mg，51.2μmol)和DIPEA(0.59M的CH2Cl2溶液，10.0μ
L，5.9μmol)加入盐酸舍曲林(10.0mg，29.3μmol)和PNP碳酸酯L(15.0mg，14.6μmol)在CH2Cl2
(0.6mL)中的溶液中，将该混合物在室温搅拌18小时。用CH2Cl2(25mL)稀释该反应体系，用饱
和NaHCO3水溶液(3×20mL)和盐水(20mL)洗涤，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到粗产物。通过硅
胶色谱法纯化(3％-6％乙酸乙酯/甲苯)，得到化合物6(11.3mg，65％)，为无色固体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.46–7.28(m，3.5H)，7.25–7.16(m，2.5H)，7.12–7.02(m，
3H)，6.95(d，J＝7.2Hz，1H)，6.81(m，1H)，5.51(m，0.6H)，5.36(m，0.4H)，5.27(m，1H)，5.20
(s，2H)，4.29(dd，J＝11.9，4.3Hz，2H)，4.19(m，1H)，4.15(dd，J＝11.9，5.6Hz，2H)，4.15
(dd，J＝11.6，5.6Hz，1H)，2.73(s，1.2H)，2.69(s，1.8H)，2.59–2.52(m，2H)，2.36–2.24(m，
7H)，2.00(m，1H)，1.83–1.69(m，4H)，1.66–1.55(m，6H)，1.45–1.19(m，56H)，0.88(t，J＝
6.9Hz，6H)。注意：级分整合反映出存在～3：2的旋转异构体混合物，这归因于受限的围绕N-
甲基氨基甲酸酯官能团的旋转。
实施例8.用于制备式(I)的化合物的方法，其中Z表示C(O)R3，且R3表示翻转酯自我
毁灭的基团，且L表示X'，其中X'是O、S或N(R4)。
方案9：带有翻转酯自我毁灭(FSI)的连接基的化合物的合成
设计翻转酯的自我毁灭的(FSI)基团，以通过环化机制释放游离药物活性剂。可以
通过使药物活性剂(A-X’H)与4-溴丁酸(XXII)偶合合成FSI前药，得到溴化物LII。使用衍生
自酸-TG IV的羧酸酯置换溴化物LII生成目标FSI前药LIII中的期望的酯键。
az)4-溴丁酸(8R,9S,10R,13S,14S,17S)-10,13-二甲基-3-氧代-2,3,6,7,8,9,
10,11,12,13,14,15,16,17-十四氢-1H-环戊并[a]菲-17-基酯(LII)
将4-(二甲氨基)吡啶(DMAP，15.5mg，0.130mmol)和DCC(43.8mg，0.210mmol)加入
睾酮(29.9mg，0.100mmol)和4-溴丁酸(XXII)(21.0mg，0.130mmol)在CH2Cl2(3mL)中的溶液
中，将该混合物在室温搅拌24小时。再加入0.6eq.酸、1eq.DCC、0.6eq.DMAP，将该混合物在
室温再搅拌2天。用CH2Cl2(10mL)稀释该反应体系，加入硅胶，减压浓缩该混合物。通过硅胶
色谱法纯化(25％乙酸乙酯/己烷)，得到溴化物LII(26.7mg，59％)，为无色固体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.73(s，1H)，4.62(dd，J＝9.1，7.9Hz，1H)，3.47(t，J＝
6.5Hz，2H)，2.50(td，J＝7.1，1.0Hz，2H)，2.47–2.23(m，4H)，2.22–2.13(m，3H)，2.06–1.99
(m，1H)，1.85(m，1H)，1.78(m，1H)，1.74–1.63(m，2H)，1.61–1.53(m，2H)，1.52–1.32(m，3H)，
1.23–1.15(m，1H)，1.19(s，3H)1.11–0.91(m，3H)，0.83(s，3H)。
ba)5-(4-(((8R,9S,10R,13S,14S,17S)-10,13-二甲基-3-氧代-2,3,6,7,8,9,10,
11,12,13,14,15,16,17-十四氢-1H-环戊并[a]菲-17-基)氧基)-4-氧代丁基)3-甲基戊二
酸1-(1,3-双(棕榈酰氧基)丙-2-基)酯(29)
将1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯(DBU)(19μL，125.7μmol)加入酸-TG IV
(43.8mg，62.9μmol)、溴化物LII(27.5mg，62.9μmol)和碘化四丁基铵(TBAI，11.6mg，31.4μ
mol)在甲苯(3mL)中的混悬液中，将该混合物回流加热6小时。将该反应体系冷却至室温，然
后用乙酸乙酯(10mL)和水(10mL)稀释，用(3×10mL)乙酸乙酯萃取水层。用水(20mL)和盐水
(20mL)洗涤合并的有机萃取物，干燥(MgSO4)，减压浓缩，得到粗产物。进行硅胶色谱法
(15％-35％乙酸乙酯/己烷)，得到化合物29(18.6mg，28％)，为无色固体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.72(s，1H)，5.26(m，1H)，4.61(dd，J＝9.1，7.9Hz，1H)，
4.29(ddd，J＝11.9，4.3，1.6Hz，2H)，4.12(m，4H)，2.50–2.12(m，16H)，2.03–1.92(m，3H)，
1.84(m，1H)，1.77(m，1H)，1.74–1.54(m，8H)，1.53–1.32(m，2H)，1.31–1.21(m，49H)，1.18
(s，3H)，1.16(m，1H)，1.10–1.01(m，2H)，1.02(d，J＝6.5Hz，3H)，0.95(m，1H)，0.87(t，J＝
6.9Hz，6H)，0.83(s，3H)。
实施例8.大鼠中的淋巴转运研究
为了证实本发明中所述的前药能够促进转运入淋巴，在大鼠中进行研究，其中给
肠系膜淋巴管插套管以能够连续采集肠系膜淋巴。然后将包含所关注的化合物的脂质制剂
施用于动物，采集淋巴，随后对淋巴中的药物浓度定量。
如上所述制备本发明的化合物或对照化合物的以脂质为基质的制剂(Trevaskis，
N.L.等人，Pharmaceutical Research，2005，22(11)，1863-1870)。简言之，将约2mg的化合
物(在化合物35和化合物1的情况中为1mg)、40mg油酸和25mg吐温80在玻璃小瓶中混合，直
到平衡(适度加热(低于50℃)可以应用短期)。随后将由5.6mL(磷酸缓冲盐水(PBS，pH 7.4)
组成的水相加热到脂质相中(在对照化合物的情况中，包括麦考酚酸、酒石酸美托洛尔、阿
托伐他汀钙、阿司匹林和盐酸舍曲林，将化合物各自溶于PBS而非脂质相，用于制备包含对
照化合物的制剂)，通过在室温下用超声处理机超声处理乳化该制剂2分钟，所述超声处理
机安装有以240μm振幅和20kHz频率运行的3.2毫米微探头尖。使用HPLC-MS验证全部制剂中
的化合物浓度。
选择雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠用于淋巴转运研究，其中药物活性剂为麦考酚
酸(MPA)、美托洛尔(MET)、阿托伐他汀(ATV)、舍曲林(SER)或塞来昔布(CEL)。选择雌性SD大
鼠用于其中睾酮为药物活性剂的研究。这必须消除雄性大鼠中相对高和可变水平的内源性
睾酮，它可干扰外源性施用的睾酮的定量。将大鼠(240-320g)维持标准膳食并且禁食过夜，
可以自由引水，然后进行实验。在37℃将麻醉的大鼠置于加热垫上，如上所述(Edwards等人
Advanced Drug Delivery Reviews2001，50(1)，45-60)将套管插入十二指肠(用于制剂施
用和再水化)、肠系膜淋巴管(用于淋巴采集)和颈动脉(用于采血)。术后，将大鼠通过以
2.8mL/h十二指肠输注生理盐水再水化0.5h。将脂质制剂以2.8mL/h输注入十二指肠2h，此
后，将输注改变为2.8mL/h生理盐水，用于其余的实验。将淋巴连续采集6－8h，进入预先称
重的包含10μL 1,000IU/mL肝素的埃彭道夫管。每小时改变1次采集管，通过重量分析法测
定淋巴流量。将每小时的淋巴样品的等分部分储存在-80℃，然后测定。
将淋巴中的药物浓度表示为总药物且包括游离药物和与不同甘油酯连接的药物。
通过水解淋巴(以从任意再酯化的甘油酯中释放药物)测定，然后评价游离药物。
根据采集的淋巴体积和淋巴中测定的浓度的乘积计算每小时采集期间转运入淋
巴的MPA、TST、MET、ATV、SER或CEL衍生物。图1示例了十二指肠内输注制剂0－2h后麻醉的肠
系膜淋巴管插管的雌性SD大鼠中累积总的睾酮相关衍生物的淋巴转运(所施用剂量的％)
与时间的关系。每种制剂包含2mg示例性的化合物或对照品十一酸睾酮(TU)，它们均分散于
40mg油酸、25mg吐温80和5.6ml PBS中。对于上述由Scriba等人所述的化合物TU(n＝4)和化
合物11(n＝3)和化合物10和化合物14n＝1，将数据表示为平均值±SEM，其中睾酮与甘油三
酯单元通过琥珀酸偶联(化合物41，n＝4)。嵌入的图表示棒形图形式的终点数据点(转运入
淋巴的累积％剂量，历时8h)。正如从图1和表7中显而易见的，示例性化合物各自显著地增
强了睾酮递送至肠淋巴，约为对照TU的7-9倍。
表7.十二指肠内输注给麻醉的肠系膜淋巴管插管的大鼠后总化合物(所施用剂量
的％)的淋巴转运(数据表示为平均值±SEM，此时n≥3)。
图2示例了十二指肠内输注制剂0－2h后麻醉的肠系膜淋巴管插管的雄性SD大鼠
中累积包含总MPA的化合物的淋巴转运(所施用剂量的％)与时间的关系。制剂包含2mg单独
的示例性的化合物或MPA，它们均分散于40mg油酸、25mg吐温80和5.6ml PBS中。将数据表示
为平均值±SEM。得自动物的数据：n＝5，MPA；n＝3，化合物30、化合物34；n＝6，化合物31；n
＝4，化合物32、化合物33和化合物35。嵌入的图表示棒形图形式的终点数据点(转运入淋巴
的累积％剂量，历时8h)。
图2和表8示例本发明的化合物显著地增加MPA的淋巴转运，与单独的MPA相比增加
43～132倍。延伸连接基长度增强了MPA的转运，其中化合物30将MPA的淋巴转运改善了施用
剂量的7.1％，而化合物34增强了转运至22.1％。连接基长度与转运增加之间的相关性可能
归因于单酸甘油酯中间体易于再酯化，因为烷基链越长，则更易于接近模拟因天然甘油三
酯消化产生的单酸甘油酯。有意义地，进一步观察到增加连接基长度无效，且施用化合物35
(其中-Y–是C20烷基)导致淋巴转运低于使用化合物34(其中-Y–是C14烷基)得到的结果。正
如可以从图3和表8中看出的，用硫酯替代药物活性剂与连接基之间的酯键不会改变得到的
化合物的淋巴转(参见，例如化合物31和化合物40)。
表8.给麻醉的肠系膜淋巴管插管的大鼠十二指肠内输注后中总化合物的淋巴转
运(所施用剂量的％)(数据表示为平均值±SEM)。
正如从图4、图19和表9中显而易见的，用α或β甲基防止酯连接至甘油酯亚单位可
以增加化合物的管腔稳定性并且促进淋巴转运。当与其直链对应物化合物10或化合物13相
比时，化合物18中的β甲基支链或化合物16中的α甲基支链显著地稳定胃肠液中的单酸甘油
酯中间体(参见图19)。这使得单酸甘油酯-模拟中间体更易于被吸收，并且在肠细胞中再酯
化，因此在淋巴药物转运中显著增加。
表9.给麻醉的肠系膜淋巴管插管的大鼠十二指肠内输注后中总化合物的淋巴转
运(所施用剂量的％)(数据表示为平均值±SEM，此时n≥3；或平均值±范围，此时n＝2)。
类似地，间隔基中具有甲基取代的TG模拟前药(连接烷基间隔基至甘油酯骨架的
α-或β-酯键)改善了MPA在GI腔中的稳定性(图23)，并且导致MPA的体内淋巴转运的倾向于
更好的趋势(图5和表10)。图5和表10示例与化合物31(8.2％)相比化合物36(9.1％)和化合
物38(12.1％)的淋巴转运改善，且化合物37(12.6％)和化合物39(28.4％)导致淋巴转运分
别高于化合物32(9.6％)和化合物34(22.1％)。
表10.给麻醉的肠系膜淋巴管插管的大鼠十二指肠内输注后中总MPA相关衍生物
的淋巴转运(所施用剂量的％)(数据表示为平均值±SEM)。
当与在1’(或3’)位上缀合或通过醚键连接的化合物相比，本发明在甘油三酯2’位
上通过酯键缀合的化合物更有效地促进淋巴转运。
本发明的发明人的数据揭示出位置和官能团特异性对于MPA前药的有效淋巴靶向
而言是重要的。在图6和表11中，本发明的化合物例如化合物30和化合物32成功地将MPA淋
巴收率提高43～60倍。相反，化合物(其中MPA直接缀合在甘油单元的1’(或3’)位(化合物
42))、化合物(其中MPA-连接基部分通过醚键缀合至甘油单元，其中-Y-的等效物是C4烷基
(化合物43)或C6烷基(化合物44)或化合物(其中MPA通过醚键缀合在甘油单元的1’位上，
且–Y-的等效物是C8烷基(化合物45)对于淋巴转运而言是不良底物，导致淋巴转运与单独
的MPA的淋巴转运类似。
表11.给麻醉的肠系膜淋巴管插管的大鼠十二指肠内输注后总MPA相关衍生物的
淋巴转运(所施用剂量的％)(数据表示为平均值±SEM)。
图7－11和表12提供了额外的证据，即TG模拟前药策略可以扩展至除MPA和睾酮以
外的化合物。所述图呈现了给麻醉的肠系膜淋巴管插管的大鼠ID输注后中总化合物的淋巴
转运(剂量的％)。数据显示MET(图7)、ATV(图8)和ASP(图9)的淋巴转运在分别施用化合物
3、9和8之后得到提高。
图10提供了本发明进一步的证据，并且示例除羧酸终止的药物例如MPA和羟基终
止的药物例如TST的实例外，例如胺终止的药物例如舍曲林(SER)的淋巴药物转运也可以通
过形成在药物与甘油酯之间并入自我毁灭的连接基的甘油酯模拟前药得以提高。图10呈现
了给麻醉的肠系膜淋巴管插管的大鼠ID输注后中总化合物的淋巴转运(剂量的％)(数据表
示为并入三甲基锁自我毁灭的基团和药物活性剂舍曲林的化合物1的平均值±范围(n＝
2)，导致总舍曲林衍生物在淋巴中的转运为41.0±7.0％。类似地，当与单独的药物相比时，
修饰以包括对羟基苯甲酸酯自我毁灭基团(化合物6)或乙缩醛自我毁灭的基团和甲基的组
合保护与甘油酯的酯键(化合物7)提供了在淋巴药物转运中的增强。作为另一个实例，即包
含胺的前药的三甲基锁自我毁灭的前药，非甾类抗炎药塞来昔布(CEL，化合物5)的前药的
淋巴转运如图11中所示。
表12.给麻醉的肠系膜淋巴管插管的大鼠十二指肠内输注后总药物的淋巴转运
(所施用剂量的％)(数据表示为平均值±SEM，此时n≥3；或平均值±范围，此时n＝2)。
实施例9.大鼠和狗中的药物动力学(PK)研究
为了评价本发明的化合物的口服生物利用度，在大鼠和狗中进行药物动力学研
究。在大鼠研究中，麻醉雌性(用于睾酮相关研究)或雄性(用于阿法沙龙相关研究)
Sprague-Dawley大鼠(240-320g)，并且给颈动脉插套管，然后施药。然后使大鼠恢复意识并
且禁食过夜，然后开始可自由引水的实验。第二天早晨，通过经口管饲法施用脂质制剂中的
化合物(除外阿法沙龙(ALP)和化合物2)，所述脂质制剂包含分散于2mL PBS中的1-2mg化合
物、40mg油酸和25mg吐温80(如上述对大鼠中的淋巴转运研究所述，差别仅在于小体积的
PBS用于此处的有意识研究)。ALP的口服制剂包含悬浮于盐水中1mL 0.5％(w/v)羧甲基纤
维素和0.4％(v/v)吐温80的7.5mg ALP)。化合物2的口服制剂包含分散于1mL PBS中的3mg
化合物、20mg油酸和12.5mg吐温80。从施用前5min到给药后24h从颈动脉套管中采集血样并
且以5000rpm离心5min以分离血浆。在血样采集期间，大鼠在施药后可以随时自由引水，但
保持禁食再经过8小时。将血浆样品储存在-80℃下，然后通过HPLC-MS-MS测定。在这种情况
中，测定样品的游离药物(即无甘油酯连接的药物)并且在测定前不水解(因为就此而言，使
用淋巴样品)。该数据因此反映出药物转运入淋巴且然后在体循环中从再酯化的药物-甘油
酯复合物中释放。
为了进行狗的研究，使雌性灰狗保持在大的动物研究设施中至少5天，然后开始研
究。使狗适应至少4天，然后开始本研究。使狗禁食12h，直到施药前30min为止。为了进行喂
食状态的研究(n＝4，TU或化合物13)，狗接受680g包含5％脂肪的标准商业狗食30分钟，然
后施药。在禁食的研究中(n＝1，化合物13)，狗保持禁食，直到给药后4h之后为止。在本研究
的自始至终对于全部的狗均可自由取水。在本研究的当天，将20号静脉内导管插入头静脉
以采血样。在插套管后使狗自由运动(无约束)。为了进行喂食状态的研究，给予狗安特尔
(Andriol Testocaps)(商业化TU产品)或化合物13。安特尔由Merck Sharp&Dohme(澳大利
亚)Pty Limited提供并且将其配制成软胶囊，其包含12.0％(w/w)TU在丙二醇单月桂酸甘
油酯(lauroglycol)FCC/蓖麻油[40：60％(w/w)]中的溶液，其中单个胶囊组成为40mg TU、
丙二醇单月桂酸甘油酯FCC、蓖麻油、明胶、甘油和日落黄(E110)。将化合物13制备成基于长
链脂质的自乳化递药系统(SEDDS)，其由30.5％w/w大豆油、30.5％w/w Maisine 35-1、
31.6％w/w Cremophor EL和7.4％w/w乙醇组成。将制剂填充入硬胶囊。将包含80mg TU的安
特尔的2粒胶囊或包含总剂量为90mg化合物13的溶于2g SEDDS制剂的化合物13的2粒胶囊
施用于喂食的灰狗，通过将所述胶囊尽可能地置于咽后部、关闭口腔并且摩擦咽喉以刺激
吞咽来进行。随后，通过注射器经口施用50mL水。也给禁食的狗施用2粒化合物13的制剂用
于禁食状态研究。在经口施用后，从施用前5min到给药后10小时通过头静脉套管取血样(各
自约3mL)。通过在每次抽取血样后流过小体积的肝素化盐水(1-2IU/mL)维持导管的开放
性。通过静脉穿刺取24h时的血样。通过离心分离血浆并且将血浆样品的等分部分各自转入
埃彭道夫管，且储存在-80℃下，然后通过LC-MS-MS分析。
图12示例给有意识的颈动脉插管的雌性SD大鼠经口管饲制剂后剂量归一化睾酮
血浆浓度。制剂包含1mg TU或2mg本发明的化合物，它们均包含分散于40mg油酸、25mg吐温
80和2ml PBS中的睾酮。将剂量校准至2mg/kg等效物剂量的睾酮。对于全部组(对于每个组，
n＝4或3)，数据显示为平均值±SEM。嵌入的图是棒形图形式的睾酮的剂量归一化血浆
AUC0-24h(nmol×h/L)的示意图。
本发明带有大于C5的连接基长度的化合物导致施用后睾酮的全身暴露(口服生物
利用度)明显增加。这通过图12和表13显示，其中尽管全部4种化合物的淋巴转运类似，但是
经口施用化合物11、化合物13或化合物14后母体睾酮的全身暴露大于化合物41或化合物10
施用后10-倍(剂量归一化睾酮血浆AUC0-24h)(并且高于获得的TU～12-27倍)(参见图1和表
7)。在这种情况中，较长的连接基显然度与增强的药物释放而言是关键。
表13.给有意识的颈动脉插管的SD雌性大鼠经口施用所述化合物后的药物动力学
参数(将剂量校准至2mg/kg等效物睾酮剂量且数据表示为平均值±SEM)。
本发明的化合物在促进睾酮全身暴露中的用途也在不同动物、在狗中得以证实。
这通过图13和表14显示。与大鼠的数据一致，在经口施用化合物13后母体睾酮的全身暴露
明显大于(约8倍，剂量归一化睾酮血浆AUC0-24h)施用TU后得到的全身暴露。注意，化合物
13暴露的增加显然不受与食物共同施用影响。
表14.给有意识的喂食或禁食状态的灰狗经口施用睾酮前药后的药物动力学参数
(将剂量校准至2mg/kg等效物睾酮剂量)。数据表示为平均值±SEM：TU(n＝4)和化合物13(n
＝4)，在喂食状态；以及n＝1，化合物13，在禁食状态。
带有与被α或β甲基保护的甘油酯的酯键的化合物增加长链类似物的睾酮的口服
生物利用度。
正如从图4和表9中显而易见的，甲基支链TG模拟前药通过稳定MG中间体有利于睾
酮的淋巴转运。然而，甲基修饰也可能减少母体睾酮从前药分子中的系统性释放。正如图14
和表15中所示，例如，在施用化合物18后，血浆中睾酮的全身暴露低于其直链对应物化合物
10，不过，化合物18的淋巴转运约为2倍以上(参见表9)。
为了改善淋巴转运并且还允许全身睾酮释放，发明人已经发现，甲基取代与较长
烷基链长的组合弱化了对于具有α或β甲基的化合物观察到的暴露减少。可以从图14和表15
中看出，如果甲基修饰后-Y–增加至C8烷基，则当与直链(化合物13)比较时，血浆中游离睾
酮的释放对于β甲基化的类似物而言时类似的，且释放显然在一定程度上延迟，从而提供了
潜在的延长释放。
表15.给有意识的颈动脉插管的SD雌性大鼠经口施用化合物后的药物动力学参数
(将剂量校准至2mg/kg等效物睾酮剂量且数据表示为平均值±SEM)。
在药物活性剂与连接基之间并入自我毁灭的基团的化合物有利于母体药物在全
身系统中释放，以达到高于酯连接的化合物的口服生物利用度。
正如在图15和表16中看出的，在经口施用化合物22和化合物26(具有三甲基锁自
我毁灭的基团)后，睾酮在血浆中的全身暴露高于分别施用化合物11和化合物13(不带有自
我毁灭的连接基的等效化合物，且得到化合物13是预先最佳性能执行前药之一)后得到的
结果。当与TU比较时，睾酮的血浆AUC约高于施用化合物22后40倍，并且约高于施用化合物
26后90倍。类似地，添加三甲基锁自我毁灭的基团至β-甲基保护的睾酮前药(其中淋巴转运
高(图4)，但系统性释放不完全(图15))对于化合物25和27导致全身暴露明显增加(约高于
TU 60-100倍)。
表16.给有意识的颈动脉插管的SD雌性大鼠经口施用所述化合物后的药物动力学
参数(将剂量校准至2mg/kg等效物睾酮剂量且数据表示为平均值±SEM，此时n≥3；或平均
值±范围，此时n＝2)。
另外明显的是，三甲基锁自我毁灭的基团并非是唯一有效的自我毁灭的基团，而
其它实例类似地有效。例如，在图16和表17中，化合物21(具有乙缩醛自我毁灭的基团)导致
全身睾酮水平高于化合物11。当添加乙缩醛自我毁灭的基团至β甲基保护的C5前药时，这种
作用甚至更为显著(化合物23与化合物18比较)，其中当与TU比较时，自我毁灭的类似物导
致睾酮的全身暴露增加90倍。
表17.给有意识的颈动脉插管的SD雌性大鼠经口施用所述化合物后的药物动力学
参数(将剂量校准至2mg/kg等效物睾酮剂量且数据表示为平均值±SEM)。
在自我毁灭的基团的潜在有益性的另一个示例中，图17和表18中的数据提供了翻
转酯自我毁灭的基团(FSI)的用途证据。化合物29的数据显示，当与直链前药(化合物10)和
β甲基保护的化合物(化合物18)比较时，翻转酯基团插入C5β甲基睾酮前药导致经口施用后
全身睾酮水平显著增加。当与TU比较时，添加对羟基苄基羰基(PHB)自我毁灭的基团(化合
物28)也导致睾酮暴露增加，但有效性低于其它自我毁灭的基团。
表18.给有意识的颈动脉插管的SD雌性大鼠经口施用所述化合物后的药物动力学
参数(将剂量校准至2mg/kg等效物睾酮剂量且数据表示为平均值±SEM)。
进一步显而易见，本发明的化合物能够促进非睾酮的药物的全身暴露，例如阿法
沙龙(ALP)，即另一种具有高首过效应的药物(图18和表19)。图18示例给有意识的颈动脉插
管的雄性SD大鼠经口管饲制剂后的ALP血浆浓度。制剂包含盐水中的1mL 0.5％(w/v)羧甲
基纤维素和0.4％(v/v)吐温80中的7.5mg ALP或分散于20mg油酸、12.5mg吐温80和1ml PBS
中的3mg化合物2。数据显示为平均值±SEM(对于化合物2组(n＝4)；以及n＝1，对于对照化
合物ALP组)。在经口施用混悬液制剂中的ALP后，血浆浓度极低(低于量化限制(LOD，10ng/
mL))，最可能的原因是ALP过度的首过代谢。数据在图18中显示为定性指示，即得到它们低
于测定的量化限制。相反，当与对照化合物ALP比较时，化合物2导致ALP的全身暴露(口服生
物利用度)显而易见地明显增加，不过，相对生物利用度的定量比较是不可能的，这归因于
ALP施用后ALP极低的暴露。
表19.给有意识的颈动脉插管的SD雄性大鼠经口施用所述化合物后ALP的药物动
力学参数(将剂量校准至25mg/kg，ALP组；以及4mg/kg等效物ALP，化合物2组)。数据表示为
平均值±SEM：化合物2组(n＝4)；n＝1，ALP组。
实施例10.大鼠消化分泌液或猪胰腺脂肪酶导致的化合物体外水解
通过与大鼠消化分泌液一起温育对MPA相关化合物进行体外水解。大鼠消化分泌
液通过在导管进入十二指肠前(即低于胰腺分泌进入点)即刻给常用胆汁-胰管插套管采集
自麻醉大鼠。这能够同时采集胆汁和胰液。将消化分泌液连续采集2h，在此期间，将空白脂
质制剂(如大鼠淋巴转运研究中所述制备，但不添加药物)以2.8ml/h的速率输注入十二指
肠，以模拟施药后的情况。将胆汁和胰液维持在37℃并且在采集0.5h内十一，用于体外前药
水解实验。通过将0.375mL大鼠消化分泌液与0.625ml载药的脂质制剂(如大鼠淋巴转运研
究中所述制备)一起温育(在37℃)进行水解实验。消化分泌液与制剂的体积比模拟胆汁和
胰液的流速(～1.5mL/h)和体内淋巴转运研究过程中十二指肠内制剂的输注速率(2.8mL/
h)。将10μL等分部分(在0、2、5、10、15、30、60、90、120、180min取的样品)加入990μL乙腈：水
(4：1，v/v)中以终止脂解，涡旋1min并且以4500g离心5分钟，以沉淀蛋白质，然后分析。通过
HPLC-MS分析上清液的残留化合物浓度，并且分析化合物水解的潜在产物。
为了提供较高流通量实验，除非另有描述，否则通过与猪胰脂肪酶一起温育进行
TST相关化合物的体外水解。这提供了胰酶的更可再生的来源，有利于提高实验的流通量，
并且还是比采集的大鼠酶更大的挑战(因为大鼠肠液中的酶活性低)。简言之，在水解实验
前，通过将1g猪胰酶分散于5ml脂解缓冲液和16.9μl 5M NaOH中制备胰脂肪酶溶液。将该混
悬液充分混合并且在5℃以3500rpm离心15分钟，得到上清液。用NaOH调整至pH 6.5的
0.474g三-马来酸盐(2mM)、0.206g CaCl2.H2O(1.4mM)和8.775g NaCl(150mM)制备1000ml量
的脂解缓冲液。为了评价前药在肠中水解的潜能，将20μl前药溶液(1mg/ml溶于乙腈)、900μ
l模拟肠胶束溶液[用0.783g NaTDC(3mM)和0.291g磷酯酰胆碱(0.75mM)在500ml脂解缓冲
液中制备]和100μl酶溶液在37℃下温育。在温育后0、5、10、15、30、60、90、120和180分钟取
20μl温育溶液的样品，并且加入180μl ACN中以终止脂解。涡旋该混合物并且以5000rpm离
心5分钟，以沉淀蛋白质，然后分析。通过HPLC-MS分析上清液的残留化合物浓度，并且分析
化合物水解的潜在产物。
在与消化酶一起温育时，前药的单酸甘油酯形式极为快速地形成。模拟肠条件中
的稳定性因此根据通过肠消化过程生成的单酸甘油酯形式的稳定性得到更好地评价。单酸
甘油酯形式必须保持完整地被吸收并且在肠相比中再酯化，然后进入淋巴。化合物10(n＝
3)与化合物18(n＝1)和化合物13(n＝3)与化合物16(n＝3)的单酸甘油酯形式在体外与新
鲜采集的大鼠胆汁和胰液(BPF)(化合物10和18)或猪胰脂肪酶(化合物13和16)一起温育过
程中的稳定性特征显示在α或β碳上包含甲基明显地增加单酸甘油酯中间体的稳定性(图
19)。当与化合物10比较时，这与化合物18的淋巴转运增加和图4中化合物16的高度淋巴转
运一致。
图20－22提供了甲基取代以改善睾酮前药包括包含自我毁灭的连接基的前药的
腔稳定性的其它证据，其中自我毁灭的基团预期可以降低腔稳定性。例如，在图20中，化合
物11或化合物13的单酸甘油酯形式在体外脂解试验中并非高度稳定，且这对于三-甲基锁
自我毁灭的类似物(化合物22和化合物26)而言是类似的或更差。相反，甲基取代的单酸甘
油酯(化合物25和化合物27)在体外水解攻击中明显是稳定的且导致睾酮暴露增加(图15)。
在图21中，对于乙缩醛自我毁灭的前药而言，类似的比较显而易见，其中化合物21
(带有自我毁灭的连接基)的腔稳定性低于化合物11，而化合物24具有比化合物13差的稳定
性。化合物23中的乙缩醛自我毁灭基团+β甲基保护的组合导致腔稳定性(图21)和体内暴露
(图16)显著增强。
对于翻转至自我毁灭的基团，插入自我毁灭基团+β甲基取代的组合(化合物29)导
致腔稳定性比无自我毁灭基团的直链对应物(化合物10)增加(图22)和体内睾酮暴露显著
增加(图17)。
类似地，化合物31(n＝5)、化合物32(n＝4)、化合物34(n＝1)、化合物36(n＝2)、化
合物37(n＝1)、化合物38(n＝1)和化合物39(n＝1)的单酸甘油酯形式在体外与新鲜采集的
大鼠胆汁和胰液(BPF)一起温育过程中的稳定性特征比较示例在图23对于MPA衍生物的描
述中。数据表示为平均值±SEM，此时n≥3；或平均值±范围，此时n＝2。
当与直链对应物比较时，具有连接基上带有甲基取代的化合物(连接烷基至甘油
酯骨架的α-或β-酯键)有效地减少了单酸甘油酯中间体在胃肠(GI)腔中的降解，导致体内
淋巴转运增加。
化合物36以及化合物38与化合物31、化合物37与化合物32和化合物39与化合物34
的单酸甘油酯消化产物的降解特性比较揭示出稳定性方面的显著性差异。前药在GI腔中的
稳定性优化还导致更好的体内淋巴转运趋势。图5和表10显示化合物36(9.1％)或化合物38
(12.1％)的淋巴转运优于化合物31(8.2％)；化合物37(12.6％)导致转运高于化合物32
(9.6％)；且化合物39(28.4％)导致转运高于化合物34(22.1％)。
数据还证实包含直链连接基的前药的单酸甘油酯(MG)中间体(例如化合物31和化
合物32)在BPF中的降解相对快速。可能是这些MG中间体的不稳定性因通过水解酶例如单酰
基甘油脂酶和胰脂肪酶分解导致。这因此降低了被吸收和因再酯化被利用的药物缀合的
MG-样中间体的利用度。最终，这减少了药物的淋巴转运。防止MG中间体降解因此可以增强
淋巴药物转运。这可以在结构上(例如并入α或β甲基取代)或通过共同施用酶抑制剂实现，
例如，图24和表20中的数据显示，通过与单酰基甘油脂酶抑制剂(JZL184)和胰脂肪酶抑制
剂(奥利司他)共同施用，化合物32的剂量的淋巴转运从9.6％增加至18.8％(p<0.05)。
表20.给麻醉的肠系膜淋巴管插管的大鼠十二指肠内输注后总化合物的淋巴转运
(所施用剂量的％)(数据表示为平均值±SEM)。
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