有恒定高暴露水平的奥曲肽贮库制剂本申请是中国专利申请200980150314.7的分案申请，原申请的申请日
是2009年12月14日，名称是“有恒定高暴露水平的奥曲肽贮库制剂”。
本发明涉及包含作为活性成分的奥曲肽或其可药用盐及某些线形聚丙
交酯-共-乙交酯聚合物(PLGA)的缓释制剂。
本发明的这些药物组合物意欲用于特别是肢端肥大患者的长期维持治
疗以及与恶性类癌瘤和作用于血管的肠肽瘤(血管活性肠肽瘤)有关的严重
腹泻和潮红的治疗。
肽类药物通常全身性施用，例如经胃肠道外施用。但是，胃肠道外施
用可能是疼痛的并可引起不适，尤其对于反复每日施用而言如此。为了将
给患者注射的次数减到最小，药物应当作为贮库制剂施用更有利。使用可
注射贮库制剂的共同缺点是在整个释放过程中血浆水平的波动，例如峰水
平高以及血浆水平接近于零。
本发明现提供了固体提供高暴露水平的改善的贮库制剂。另外，本发
明的贮库制剂迅速地达到暴露水平，即，具有短的迟滞相甚至没有迟滞相。
本发明的贮库制剂包含作为活性成分(原料药)的奥曲肽或其可药用盐。
奥曲肽是具有下式的促生长素抑制素类似物：
活性成分可以是奥曲肽的可药用盐形式，例如与如无机酸、聚合酸
(polymericacid)或有机酸形成的酸加成盐，例如与盐酸、乙酸、乳酸、枸
橼酸、富马酸、丙二酸、马来酸、酒石酸、门冬氨酸、苯甲酸、琥珀酸或
扑酸(双羟萘酸)形成的酸加成盐。酸加成盐可以作为单价或二价盐而存在，
这例如取决于加入的是1个还是2个酸当量。优选奥曲肽的扑酸单盐。
为了有效地控制肢端肥大患者的hGH和IGF-1水平，要求至少
1.5ng/ml、1.8ng/ml或2ng/ml的恒定高水平的奥曲肽血浆水平以控制疾病
(治疗靶血浆浓度)。已证实，建立一种能在延长的时间实现这样高的血
浆水平的PLGA贮库制剂是非常有挑战性的。迄今为止，所描述的奥曲肽
贮库制剂还没有能够在50天以上的延长的时间里在12mg/kg体重剂量的
家兔(雄性新西兰白兔(Hsdlf，新西兰)，到达时(Harlan荷兰)～3kg±20％)
中符合靶血浆水平。已描述了包含作为活性成分的奥曲肽或其可药用盐和
聚丙交酯-共-乙交酯聚合物(PLGA)的缓释制剂，例如，在GB2265311
或WO2007/071395中。但是，现有技术制剂显示出如图1中所述的批1-2
的长阶段的低水平(“迟滞相”)，和/或如图1中所述的批1-2和1-3的
扩散控释和溶蚀控释之间的“谷”。
现已出人意料地发现根据本发明，包含两种不同的具有丙交酯∶乙交酯
共聚单体(L∶G)比例75∶25和不同粘度的线形PLGA聚合物制剂提供了
有利的释放曲线，特别是在迟滞相或谷方面。已发现本发明的制剂能够在
例如至少50天的延长的时间段里提供至少1.5ng/ml、1.8ng/ml或2ng/ml
的持续高的奥曲肽血浆水平。因此，在持续时间里有利的释放曲线对缓释
制剂特别适宜，其与目前上市的每28天施用一次的奥曲肽缓释制剂(也称
作)相比，可应用更长时间。
一方面，本发明提供了包含L∶G比例均为75∶25但具有不同的固有粘
度的两种不同PLGA聚合物混合的奥曲肽贮库制剂。不同的聚合物优选具
有不同的端基，例如酯基和羧基端基。所述制剂在家兔中肌内(i.m.)注
射后在至少50天、优选至少2个月显示出恒定的高暴露。此外，本发明的
贮库制剂至达到治疗靶水平时显示出短的迟滞相。对于单次注射，本发明
制剂的在初始释放和达到治疗靶血浆浓度之间的典型迟滞相短于12天，例
如在4至12天或6至10天。
药物的粒度分布影响药物从贮库形式中的释放性质。用于制备贮库制
剂的药物是结晶或无定形粉末形式。优选粒度为约0.1微米至约15微米
(99％＞0.1微米，99％＜15微米)、优选1至小于约10微米(90％＞1微米，
90％＜10微米)的无定形粉末。药物优选经过微粉化过程以呈现所需的粒
度分布。
本发明还提供了包含作为活性成分的奥曲肽或其可药用盐的缓释药物
组合物(贮库制剂)，所述的奥曲肽或其可药用盐被加入在例如微粒、植入
物或半固体制剂形式的聚(丙交酯-共-乙交酯)(PLGA)的基质中。
根据本发明的药物组合物允许需要的患者(优选人)在至少45天、至
少50天、至少60天、至少75天、至少90天的时间段持续释放活性成分。
本发明的药物组合物允许在60至120天持续释放活性成分。在活性成分释
放期间，奥曲肽的血浆水平在治疗范围内。可以理解，奥曲肽的准确剂量
将取决于多种因素，包括所治疗的病症、所治疗病症的严重性、受治疗者
的体重和治疗的持续时间。本发明有利的释放特性允许本发明的药物组合
物与现有技术制剂相比有更长的施用间隔。迄今为止，尚没有比每28天一
次更长的给药间隔的奥曲肽贮库制剂被批准用于治疗。本发明的贮库制剂
目前由于其有利的释放特性，适于每2个月(例如每8周或每60天)、最
长每4个月(例如每16周或每120天)施用一次。在一个优选的实施方案
中，本发明的贮库制剂每3个月(例如每12周或每90天)施用一次。
出人意料的是，通过在本发明的药物组合物中使用2种不同的线形
PLGA可以显著减少血浆水平的波动。
药物被掺入到包含两种不同的线形聚丙交酯-共-乙交酯聚合物(PLGA)
的可生物降解的聚合物基质中。PLGA具有的丙交酯∶乙交酯单体的比例为
75∶25。
本发明的PLGA具有的分子量(Mw)范围为1,000至500,000Da，优选
5,000至100,000Da。聚合物的结构是线形的。
本发明的PLGA在氯仿中的固有粘度(IV)在0.9dl/g以下，优选在
0.8dl/g以下，优选在0.6dl/g以下，更优选在0.1-0.5dl/g。可以通过测定流
出时间(flowtime)的常规方法、如例如在“欧洲药典”(1997，第17-18页(毛
细管法))中描述的那样来测定固有粘度。除非另有说明，这些粘度已经于
25℃在氯仿中在0.1％的浓度下测定。
本发明的PLGA的端基可以但不限于是羟基、羧基、酯基等。
贮库制剂的药物含量(载药量)的范围为1％至30％，优选10％至25％，
更优选15％至20％。载药量被定义为作为游离碱的药物与PLGA制剂总
质量的重量比。
适宜的聚合物是众所周知的，但不限于可以作为如下商品自商业途径
得到的那些：勃林殷格翰国际公司(BoehringerIngelheim
PharmaGmbH&Co.KG)，殷格翰，德国；美国/都爱特
(DURECT)公司，Pelham，AL，美国；Lakeshore，Inc.，剑
桥，MA，美国；普拉克生物化学公司(PURACbiochemBV)，
Gorinchem，荷兰。本发明特别优选的聚合物是RG752H和
RG753S。
本发明的药物组合物可以在无菌条件或非无菌条件下制备并最终通过
γ照射进行灭菌。优选最后通过γ照射进行灭菌，从而产生具有尽可能高
的无菌保证的产品。
本发明的药物组合物还可以含有一种或多种0.1％至50％量的调节释
放行为的药物赋形剂。这类物质的实例有：聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、
羧甲基纤维素钠(CMC-Na)、糊精、聚乙二醇、适宜的表面活性剂如泊洛
沙姆(还称为(氧乙烯-氧丙烯)嵌段聚合物)、已知的且以商品名(例如
吐温20、吐温40、吐温60、吐温80、吐温65、吐温85、吐温21、吐温
61、吐温81)可市售得到的聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯、失水山梨醇脂肪
酸酯如已知的且以商品名司盘可市售得到的类型的那些、卵磷脂、无机盐
如碳酸锌、氢氧化镁、碳酸镁或鱼精蛋白如人鱼精蛋白或鲑鱼精蛋白或者
带有胺残基的天然或合成的聚合物如聚赖氨酸。
本发明的药物组合物可以就组成、分子量和/或聚合物结构而言不同的
聚合物的贮库制剂混合物或聚合物掺合物。聚合物掺合物在本文中被定义
为2种不同线形聚合物在同一植入物或微粒中的固体溶液或混悬剂。相比
而言，贮库制剂混合物在本文中被定义为两种具有不同组成的贮库制剂如
植入物或微粒或半固体制剂的混合物，每种贮库制剂含有一种或多种
PLGA。优选其中两种PLGA作为聚合物掺合物存在的药物组合物。
本发明的药物组合物可以是植入物、半固体(凝胶)、注射后可在原位
固化的液体溶液或混悬剂或者微粒的形式。优选微粒。包含奥曲肽或其可
药用盐的微粒的制备是已知的，例如在US5,445,832或US5,538,739中被公
开。
本发明的以下部分集中在聚合物微粒上，虽然这些描述同样可应用于
植入物、半固体和液体。
本发明的微粒可以具有的直径为数亚微米至数毫米，例如约0.01微米
至约2mm，例如约0.1微米至约500微米。对于药物微粒而言，直径最多
为约250微米，例如10至200微米，优选10至130微米，更优选10至
90微米。
本发明的微粒可以例如在预充式注射器或小瓶中与抗凝结剂混合或被
抗凝结剂包被或者被抗凝结剂层覆盖。适宜的抗凝结剂例如包括甘露醇、
葡萄糖、右旋糖、蔗糖、氯化钠或水溶性聚合物如聚乙烯醇、聚乙烯吡咯
烷酮或聚乙二醇，例如具有上述性质的那些。
更详细地对微粒描述了本发明的贮库制剂的制备方法。
微粒可以通过本领域已知的数种方法来制备，例如凝聚或相分离、喷
雾干燥、油包水(W/O)或水包油包水(W/O/W)或水包油包固体(S/O/W)乳化
/混悬法且然后进行溶剂提取或溶剂蒸发。乳化/混悬法是优选的方法，该方
法包括以下步骤：
(i)制备有机内相，包括
(ia)将一种或多种聚合物溶解在适宜的有机溶剂或溶剂混合物中；
任选将适宜的添加剂溶解/分散；
(ib)将药物在由步骤(ia)得到的聚合物溶液中溶解/混悬/乳化；
(ii)制备含有稳定剂和任选的、但优选的缓冲盐的水性外相；
(iii)将有机内相与水性外相混合，例如采用产生高剪切力的装置、例如
用转子-定子混合器(涡轮)或静态混合器将有机内相与水性外相混合，
以形成乳剂；和
(iv)通过溶剂蒸发或溶剂提取使微粒硬化；洗涤微粒，例如用水洗涤微粒；
收集微粒并干燥，例如冷冻干燥或在真空下干燥，将微粒过140μm筛。
适用于聚合物的有机溶剂例如包括乙酸乙酯、丙酮、THF、乙腈或卤
代烃如二氯甲烷、氯仿或六氟异丙醇。
适用于步骤(iib)的稳定剂的实例包括聚乙烯醇(PVA)，其量为0.1至
5％；羟乙基纤维素(HEC)和/或羟丙基纤维素(HPC)，其总量为0.01至5％；
聚乙烯吡咯烷酮；明胶，优选猪或鱼明胶。
最后可以通过γ照射将干燥的微粒组合物灭菌(过度杀灭灭菌)，任选
以散装或在装入最终容器中后灭菌，从而产生尽可能高的无菌保证。或者，
可以将散装灭菌的微粒重新混悬在适宜的溶媒中，将其作为混悬液装入适
宜的装置如双室注射器中，然后进行冷冻干燥。
含有微粒的本发明的药物组合物还可以含有溶媒以帮助重构。
在施用前，将微粒混悬在适于注射的溶媒中。优选所述的溶媒是含有
为了确保等张性和改善微粒的润湿性和沉降性质的药物赋形剂的水基溶
媒，所述的药物赋形剂例如有甘露醇、氯化钠、葡萄糖、右旋糖、蔗糖或
甘油、非离子型表面活性剂(例如泊洛沙姆、聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸
酯)、羧甲基纤维素钠(CMC-Na)、山梨醇、聚乙烯吡咯烷酮或单硬脂酸铝。
润湿剂和增粘剂可以以0.01至1％的量存在；加入适宜量的等张剂以确保
等张的可注射混悬液。
本发明还提供了根据本发明的药物组合物特别在肢端肥大患者的长期
维持治疗以及与恶性类癌瘤和作用于血管的肠肽瘤(血管活性肠肽瘤)有关
的严重腹泻和潮红的治疗中的用途。
本发明的药物组合物的功效可以在标准临床或动物研究中显示出。
本发明还提供了药盒，该药盒包含在任选装配有转移装置的小瓶中的
贮库制剂以及在安瓿、小瓶或预装注射器中的水基溶媒，或者该药盒作为
在双室注射器中被隔开的微粒和溶媒。
附图简述
图1显示了实施例1-1、1-2和1-3(制剂变体C、B、A和对比。奥曲
肽血清浓度在12mg/kg剂量肌内注射(i.m.)至家兔后的浓度对时间作图。
4只动物的均值和SD。
实验部分
以下实施例是说明性的，而非用于限制本文所述的本发明的范围。这
些实施例仅意欲提示实施本发明的方法。
实施例1：微粒的制备
将适宜量的PLGA聚合物溶解在适宜量的二氯甲烷中，得到如在表2
“PLGA浓度”一栏中规定的适宜的聚合物浓度。称取适宜量的药物，置
于玻璃烧杯中，将聚合物溶液倒在药物上以使所得微粒具有如在“载药量”
一栏中规定的载药量。
例如对于载药量为20％及聚合物浓度为20％的微粒而言，数量如下：
将3.547gPLGA聚合物溶解在17.7ml二氯甲烷中，得到20％(w/v)聚合物
溶液。称取1.453g奥曲肽扑酸盐(相当于1.00g＝20％奥曲肽游离碱)，置于
玻璃烧杯中，将聚合物溶液倒在药物上。
在用冰/水混合物冷却下用Ultra-Turrax转子-定子搅拌器在
20’000rpm下将混悬液匀化1分钟。该混悬液称为S/O混悬液。
将10.00g聚乙烯醇PVA18-88、3.62gKH2PO4和15.14gNa2HPO4溶
解在2.00L去离子水中，形成缓冲至pH7.4的0.5％PVA18-88溶液。
通过借助于软管泵(Perpex，Viton管)以10ml/min的速度将S/O混悬液
泵入涡轮中并通过用齿轮泵(带有泵头P140的IsmatecMV-Z/B)以200
ml/min的速度将水溶液泵入同一涡轮中。这两种溶液按照表2中的描述在
涡轮中混合。将匀化的S/O/W乳剂收集到预装有200ml缓冲PVA溶液的
2L玻璃烧杯中。
然后在5h内将S/O/W乳剂加热至45℃。将45℃的温度另外保持2
小时，然后将批料再次冷却至室温。在此过程中，通过真空除去逸出的二
氯甲烷，通过4桨螺旋桨式搅拌器以250rpm将批料搅拌。
结果，从S/O/W乳剂中形成了微粒。通过过滤(5μm)收集微粒。将它
们用200ml水洗涤5次，在20℃和0.030mbar下干燥36小时。通过140μm
筛分干燥的微粒，在氮气下将其装入玻璃小瓶中。将以这种方式制备的微
粒通过30kGy剂量的γ照射进行灭菌。
通过激光衍射测定微粒的粒度。使用超声将微粒重新混悬在石油溶剂
中。表2给出了超声处理120秒后的直径X90(所有颗粒有90％在该值以
下)。
用超声将微粒溶解在乙腈和甲醇的3∶2混合物中，用乙酸钠缓冲液
(pH4)进一步进行1∶1稀释，然后通过HPLC进行了微粒的含量测定。通
过离心将溶液从残余的颗粒物中除去。
表2：实施例1-1：两种线形PLGA(75∶25)混合制备的奥曲肽扑酸盐微粒。
对比实施例1-2和1-3：通过两种或三种线形PLGA混合制备的奥曲肽扑
酸盐微粒。
A：PLGA65：35酯0.6dL/g(％)
B：PLGA75：25酸0.2dL/g(％)
C：PLGA75：25酯0.4dL/g(％)
D：PLGA85：15酯0.6dL/g(％)
实施例2：载体组成A至G
将用量如表3中给出的CMC-Na、甘露醇和普朗尼克F68在磁力搅拌器
强烈搅拌下，溶于约15ml温度约为90℃的热的去离子水中。将得到的澄
明溶液冷却至20℃，并用去离子水定容至20.0ml。
表3：对微粒适用的载体(用量以g表示)
A
B
C
D
E
F
G
|
CMC-Na
0
0
0.05
0.14
0.28
0.35
0.40
甘露醇
0
1.04
0.99
0.90
0.76
0.74
0.68
普朗尼克F68
0.04
0.04
0.04
0.04
0.04
0.04
0.04
实施例3：微粒混悬液
在6R小瓶中将180mg实施例1-1、1-2或1-3的微粒混悬在1.0ml组
成D(表3)的载体中。通过手工振摇约30秒使混悬液匀化。可以使用20号
针头没有任何问题地将重构的混悬液注射。
实施例4：微粒的冷冻干燥
将180mg实施例1-1、1-2和1-3的微粒在1ml组成F(表3)的载体中
重构，通过搅拌1至12小时进行匀化，然后在冷冻干燥机中冷冻干燥。用
1ml纯水(注射用水)将冷冻干燥的微粒重构，产生润湿快速而良好的微粒，
可以使用20号针头没有任何问题地将其注射。
实施例5：体内释放性质(家兔)
将含有奥曲肽的微粒混悬在1ml适宜的水性载体中，将所得混悬液以
12mg/kg的剂量经肌内(i.m.)注射到雄性新西兰白兔中。对于每各剂型(受试
组)，使用了4只动物。在规定的时间段(表4中所示)后，取血浆样品并通
过放射免疫测定(RIA)分析奥曲肽的浓度。
表4：血浆水平(实施例1-1)