一种四方胃片的质量控制方法 【技术领域】
本发明涉及中成药的质量控制方法，具体地说，本发明涉及中成药四方胃片的质量控制方法。
背景技术
四方胃片是一种制酸止痛的中成药，在我国已上市多年，临床用于胃痛、胃酸过多、消化不良、胃及十二指肠溃疡疗效肯定。四方胃片由中药材海螵蛸、浙贝母、沉香、黄连、川楝子、柿霜、苦杏仁、延胡索、吴茱萸按中成药片剂的常规工艺制备而成。该产品的质量标准收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》中药成方制剂第14册，标准编号WS3-B-0911-91。该标准中仅有黄连和吴茱萸的薄层色谱法的定性鉴别方法，其专属性较差，且没有任何定量检测的方法，不利于控制四方胃片的产品质量。
【发明内容】
本发明的目的就是为了克服目前四方胃片质量标准中仅有两种药材的定性鉴别方法、专属性不强、不利于控制产品质量的缺点，提供一种专属性强，且更能准确控制产品质量的四方胃片的质量控制方法。
本发明是这样实现的。
本发明在原质量控制方法中增加了：(1)采用显微鉴定法鉴别四方胃片中含有浙贝母、海螵蛸、川楝子、苦杏仁；(2)采用薄层色谱法，以延胡索对照药材及延胡索乙素阳性对照，鉴别四方胃片中含有延胡索；(3)采用高效液相色谱法测定四方胃片中盐酸小檗碱的含量。
显微鉴定法鉴别四方胃片中含有浙贝母、海螵蛸、川楝子、苦杏仁的较佳条件是：取本品，稀甘油装片，置显微镜下观察：淀粉粒卵圆形，直径35～48μm，脐点点状、人字状或马蹄状，位于较小端，层纹细密(浙贝母)。不规则透明薄片或碎块，具细条纹或网状纹理(海螵蛸)。取本品，加稀盐酸适量，浸渍片刻，滤过，取适量滤渣用水合氯醛透化后装片，置显微镜下观察：种皮表皮细胞与红棕色素层细胞相连，表面观多角形，胞腔不明显，有较密颗粒状纹理(川楝子)。石细胞淡黄色或鲜黄色，贝壳形，壁较厚，较宽一边纹孔明显(苦杏仁)。
薄层色谱法鉴别四方胃片中含有延胡索的较佳条件是：取研碎，加甲醇，超声处理，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加水使溶解，加浓氨试液调至碱性，用乙醚振摇提取，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液。再取延胡索乙素对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，分别吸取供试品溶液和延胡索对照药材溶液，延胡索乙素对照品溶液，分别点于硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(9∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘缸中约3分钟后取出，挥尽板上吸附的碘后，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
高效液相色谱法测定四方胃片中盐酸小檗碱的含量的较佳条件是：
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙睛-0.03mol/L磷酸二氢钾(每100ml加十二烷基磺酸钠0.1g)(45∶55)为流动相；检测波长为265nm；理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于4000。
对照品溶液的制备 精密称取在105℃干燥5小时的盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含60μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备 取本品，除去薄膜衣，精密称定，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入盐酸-甲醇(1∶100)混合溶液，密塞，称定重量，超声处理，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液，转移至碱性氧化铝柱(100-200目，3g，内径1cm，干法装柱)上，用甲醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解并转移至量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每片含黄连以盐酸小檗碱(C20H18ClNO4 2H2O)计，应不得低于0.76mg。
该测定方法经过方法学验证，阴性样品对测定无干扰，盐酸小檗在0.06～1.8μl范围内呈现良好的线性关系，线性相关度为γ＝0.9939。本提取方法回收率为97.1％(n＝5)，RSD为1.6％。用本方法测定十批四方胃片样品，盐酸小檗碱含量结果如下：
批号 含量 批号 含量 4001 0.95 4009 2.04 4002 2.25 5004 2.45 4005 2.18 5009 1.80 4006 2.18 5010 1.61 4008 2.19 5012 1.89
本发明的黄连的鉴别方法，原采用乙醇提取其中的小檗碱，本发明可将其改为用浓盐酸-甲醇(体积比1∶100)的提取液，使得提取后为盐酸小檗碱。
本发明的吴茱萸的鉴别方法中，可增加吴茱萸次碱对照品，使得检测更具针对性，减少、避免假阳性结果的出现。
本发明的四方胃片的质量控制方法，既增加了定性鉴别方法又增加了有效成份的含量测定方法，提高了四方胃片质量控制方法的专属性和质量稳定性，确保了人们用药的安全性和有效性。本发明的四方胃片的质量控制方法，既可以用于控制四方胃片的质量，又可以用来控制相同处方的其他剂型如胶囊、颗粒等的质量。
【具体实施方式】
下面结合实施例对本发明作进一步说明。
取申请人生产的批号为5012的四方胃片。
【鉴别】(1)取本品，稀甘油装片，置显微镜下观察：淀粉粒卵圆形，直径35～48μm，脐点点状、人字状或马蹄状，位于较小端，层纹细密(浙贝母)。不规则透明薄片或碎块，具细条纹或网状纹理(海螵蛸)。取本品，加稀盐酸适量，浸渍片刻，滤过，取适量滤渣用水合氯醛透化后装片，置显微镜下观察：种皮表皮细胞与红棕色素层细胞相连，表面观多角形，胞腔不明显，有较密颗粒状纹理(川楝子)。石细胞淡黄色或鲜黄色，贝壳形，壁较厚，较宽一边纹孔明显(苦杏仁)。
(2)取本品1片，研碎，加盐酸-甲醇(1∶100)20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取黄连对照药材30mg，同法制成对照药材溶液，再取黄连小檗碱对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，分别吸取上述溶液各1μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨试液(12∶6∶3∶3∶1)为展开剂，置氨蒸气预饱和的层析缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同的亮黄色荧光斑点。
(3)取本品6片，研碎，加60％乙醇5ml，浸渍1小时，时时振摇，滤过，滤液作为供试品溶液。另取吴茱萸对照药材0.5g，同法制得对照药材溶液，再取吴茱萸次碱对照品适量，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，分别吸取供试品溶液和吴茱萸对照药材溶液5μl，吴茱萸次碱对照品溶液1ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯(4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％三氯化铝乙醇溶液，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(4)取本品2片，研碎，加甲醇10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加水10ml使溶解，加浓氨试液调至碱性，用乙醚振摇提取2次，每次15ml合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液。再取延胡索乙素对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，分别吸取供试品溶液和延胡索对照药材溶液各2μl，延胡索乙素对照品溶液1μl，分别点于硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(9∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘缸中约3分钟后取出，挥尽板上吸附的碘后，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
【检查】应符合片剂项下有关的各项规定(中国药典2005年版一部附录I D)。
【含量测定】照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙睛-0.03mol/L磷酸二氢钾(每100ml加十二烷基磺酸钠0.1g)(45∶55)为流动相；检测波长为265nm；理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于4000。
对照品溶液的制备 精密称取在105℃干燥5小时的盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含60μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备 取本品20片，除去薄膜衣，精密称定，研细，取约0.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入盐酸-甲醇(1∶100)混合溶液20ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率33kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液2ml，转移至碱性氧化铝柱(100-200目，3g，内径1cm，干法装柱)上，用甲醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每片含黄连以盐酸小檗碱(C20H18ClNO42H2O)计，为1.89mg。