制备45环丙基氨基羰基2甲基苯基氨基5甲基N丙基吡咯并2,1F1,2,4三嗪6甲酰胺的盐的方法及在其中制备的新型稳定形式.pdf

本发明提供选择性制备新型稳定结晶盐形式的方法，即选择性且一致性地制备p38激酶抑制剂4-[[5-[(环丙基氨基)羰基]-2-甲基苯基]氨基]-5-甲基-N-丙基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-甲酰胺的N-1型甲磺酸盐及N-1型及N-4型盐酸盐的方法。该方法优选使用包括甲酸/丙酮及甲酸/甲基乙基酮的溶剂体系，其生成具有合适流动性质及所需粒度的晶体，也可使用例如N，N-二甲基甲酰胺及N，N-二甲基乙酰胺的溶剂。本发明也提供新型的上述游离碱的盐酸盐的N-1型晶体及N-4型晶体及甲磺酸盐的N-1型晶体，及包含这些新型形式的药物组合物及治疗包括类风湿性关节炎的p38激酶相关病症的方法。

权利要求书
1.  一种具有以下结构的化合物的盐形式的晶形


2.  一种具有以下结构的游离碱的盐酸盐的N-1晶形


3.  权利要求2的晶形，其特征在于晶胞参数大体上等于如下：得自单晶的晶胞尺寸：
a＝22.50(1)
b＝14.667(8)
c＝14.96(1)
α＝90°
β＝116.78(5)°
γ＝90°
空间群C2/c
分子/非对称单位1
其中所述晶形处于约-50℃；
室温时杂化的晶胞尺寸：
    晶胞参数    杂化    a()    22.73    b()    14.710    c()    15.04    α(°)    90    β(°)    117.13
    γ(°)    90    V()3    4475.02。

4.  权利要求2的晶形，其特征在于大体上与图1中所示一致的粉末X射线衍射图。

5.  权利要求2的晶形，其特征在于在大约室温包含以下2θ值(CuKαλ-1.5418)的粉末X射线衍射图：8.7±0.1、12.1±0.1、13.3±0.1、13.7±0.1、14.6±0.1、17.5±0.1、18.2±0.1、21.7±0.1、22.8±0.1及24.3±0.1。

6.  权利要求2的晶形，其特征在于大体上如表4列出的原子分数座标。

7.  权利要求2的晶形，其特征在于如图4所示的HCl盐N-1型的C-13SSNMR图及大体上如表3中列出的峰值。

8.  权利要求2的晶形，其特征在于大体上与图7中所示一致的差示扫描量热温谱图，其具有在约125℃至约225℃范围内的吸热。

9.  权利要求2的晶形，其特征在于与图10中所示一致的热重分析曲线，其在至多约100℃具有可忽略的失重，且在至多约225℃具有约8.2％的失重。

10.  一种具有以下结构的游离碱的N-1型甲磺酸盐


11.  权利要求10的晶形，其特征在于大体上与图3中所示一致的粉末X射线衍射图。

12.  权利要求10的晶形，其特征在于在室温包含以下2θ值(CuKαλ＝1.5418)的粉末X射线衍射图：10.7±0.1、11.7±0.1、13.3±0.1、14.0±0.1、15.2±0.1、19.8±0.1、21.0±0.1、22.0±0.1、23.0±0.1及24.4±0.1。

13.  权利要求10的晶形，其特征在于晶胞参数大体上等于如下：
晶胞尺寸：
a＝9.818(1)
b＝11.127(1)
c＝13.004(1)
α＝97.32(1)°
β＝110.17(1)°
γ＝111.48(1)°
空间群P-1
分子/非对称单位1
其中该晶形处于约+22℃。

14.  权利要求10的晶形，其特征在于大体上如表6列出的原子分数座标。

15.  权利要求10的晶形，其特征在于大体上与图9中所示一致的差示扫描量热温谱图，其具有峰值起始在约216℃的吸热。

16.  权利要求10的晶形，其特征在于与图12中所示一致的热重分析曲线，其在至多约150℃具有可忽略的失重。

17.  权利要求10的晶形，其特征在于如图6中所示的游离碱的N-1型MSA盐的C-13 SSNMR图及大体上如表3中列出的峰值。

18.  一种具有以下结构的游离碱的N-4型盐酸盐


19.  权利要求18的晶形，其特征在于晶胞参数大体等于如下：
晶胞尺寸：
a＝20.9498(5)
b＝13.8719(3)
c＝7.9133(2)
α＝90°
β＝100.052(1)°
γ＝90°
空间群P21/n
分子/非对称单位1
其中该晶形处于约+22℃。

20.  权利要求18的晶形，其特征在于大体上如表5列出的原子分数座标。

21.  权利要求18的晶形，其特征在于大体上与图2中所示一致的粉末X射线衍射图。

22.  权利要求18的晶形，在约室温其具有包含以下2θ值(CuKαλ＝1.5418)的粉末X射线衍射图：8.6±0.1、10.7±0.1、11.4±0.1、12.8±0.1、14.4±0.1、15.6±0.1、16.9±0.1、18.3±0.1、20.0±0.1及23.4±0.1。

23.  权利要求18的晶形，其特征在于大体上与图8中所示一致的差示扫描量热温谱图，其具有在约130℃至约220℃(可变)范围内的吸热。

24.  权利要求18的晶形，其特征在于与图11中所示一致的热重分析曲线，其在至多约125℃具有可忽略的失重。

25.  权利要求18的晶形，其特征在于如图5中所示的N-4型游离碱的C-13 SSNMR图及大体上如表3中列出的峰值。

26.  权利要求18的晶形，其平均粒度分布为95％＜60微米。

27.  一种制备权利要求2的N-1型晶形的具有以下结构的盐酸盐的方法

其包含
a)提供悬浮于或混合于有机溶剂中的具有以下结构的游离碱

b)使该游离碱与盐酸水溶液反应；
c)将权利要求2的所述游离碱的盐酸盐的N-1型晶体作为晶种加至该反应混合物；及
d)收集呈N-1型晶体的盐酸盐。

28.  权利要求27的方法，其中将该游离碱与：
a)四氢呋喃；或
b)N，N-二甲基甲酰胺混合，且将丙酮与该加晶种的反应混合物混合。

29.  权利要求27的方法，其中该盐酸盐的N-1型晶体的晶种通过以下步骤制备：
a)使该游离碱悬浮于有机溶剂中；
b)使该游离碱与HCl水溶液反应；及
c)收集N-1型晶体的晶种。

30.  一种制备权利要求10的具有以下结构的化合物的N-1型甲磺酸盐的方法

其包含
a)提供具有以下结构的游离碱的有机溶剂溶液

b)使该游离碱与甲磺酸反应；
c)将权利要求10的所述游离碱的N-1型甲磺酸盐的晶体作为晶种加至该反应混合物；及
d)收集N-1型甲磺酸盐的晶体。

31.  权利要求30的方法，其中该有机溶剂为N，N-二甲基甲酰胺、异丙醇或乙醇。

32.  权利要求30的方法，其中该有机溶剂为N，N-二甲基甲酰胺，其包括在加晶种前将丙酮加至该反应混合物的步骤。

33.  权利要求30的方法，其中该N-1型晶体的晶种通过以下步骤制备：
a)使该游离碱悬浮于异丙醇、乙醇、乙酸乙酯或乙腈中；
b)使该游离碱与甲磺酸反应；及
c)收集N-1型晶体。

34.  一种制备权利要求18的N-4型晶形的具有以下结构的游离碱的盐酸盐的方法

其包含
a)提供具有以下结构的游离碱的甲酸与甲基乙基酮浆液或甲酸与丙酮浆液

b)将盐酸水溶液加至步骤a)的浆液；
c)任选过滤该所得反应混合物；
d)使用与步骤a)中所用相同的溶剂，将该过滤的反应混合物加至权利要求18的所述游离碱的盐酸盐的N-4型晶体的晶种的甲基乙基酮或丙酮浆液；及
e)收集N-4型晶形的该游离碱的盐酸盐。

35.  一种制备权利要求18的N-4型晶形的具有以下结构的游离碱的盐酸盐的方法

其包含
a)提供具有以下结构的游离碱在甲酸与丙酮中的混合物或在甲酸与MEK中的混合物

b)将盐酸水溶液加至步骤a)的混合物；
c)将权利要求18的该游离碱的盐酸盐的N-4型晶体的晶种及丙酮或MEK加至步骤b)的反应混合物；及
d)收集N-4型晶形的该游离碱的盐酸盐。

36.  一种制备权利要求18的N-4型晶形的具有以下结构的游离碱的盐酸盐的方法

其包含
a)在约60℃至约65℃温度提供溶解在N，N-二甲基乙酰胺中的具有以下结构的游离碱的溶液

b)提供盐酸水溶液与冷丙酮或MEK的溶液；
c)将权利要求18的游离碱的N-4型盐酸盐的晶种加至该丙酮/HCl溶液；
d)边搅拌边将得自步骤a)的保持在约50℃至约65℃温度范围内的游离碱的N，N-二甲基乙酰胺溶液加至步骤c)的加晶种的冷丙酮或MEK/HCl溶液，以形成浆液；及
e)收集该游离碱的盐酸盐的N-4型晶体。

37.  一种制备权利要求18的N-4型晶形的具有以下结构的游离碱的盐酸盐的方法

其包含
a)提供溶解在N，N-二甲基乙酰胺中的具有以下结构的游离碱的溶液

b)将盐酸水溶液加至步骤a)的溶液以形成溶液；
c)将权利要求18的游离碱的N-4型盐酸盐的晶种及丙酮或MEK加至步骤b)的溶液；及
d)收集该游离碱盐酸盐的N-4型晶体。

38.  一种制备权利要求18的N-4型晶形的具有以下结构的盐酸盐的方法

其包含
a)提供悬浮在有机溶剂中的具有以下结构的游离碱

该有机溶剂为四氢呋喃、乙醇或丙酮；
b)使该游离碱与盐酸水溶液反应；
c)将权利要求18的所述游离碱的盐酸盐的N-4型晶体作为晶种加至该反应混合物；及
d)收集N-4型晶形的盐酸盐。

39.  一种制备权利要求18的具有以下结构的化合物的N-4型盐酸盐的方法

其包含
a)提供具有以下结构的游离碱的有机溶剂溶液

该有机溶剂为乙腈、THF、乙醇或丙酮；
b)用权利要求18的所述游离碱的N-4型盐酸盐的晶体的晶种处理该游离碱；及
c)收集N-4型盐酸盐的晶体。

40.  一种制备权利要求18的N4型晶形的具有以下结构的游离碱的盐酸盐的方法

其包含
a)提供溶解在甲酸中的具有以下结构的游离碱的溶液

b)提供盐酸水溶液与丙酮或MEK的溶液；
c)将权利要求18的游离碱的N-4型盐酸盐的晶种加至该丙酮或MEK/HCl溶液中；
d)边搅拌边将保持在约15℃至约25℃范围内的得自步骤a)的该游离碱的甲酸溶液加至步骤c)的加晶种的冷丙酮或MEK/HCl溶液中，以形成浆液；及
e)收集该游离碱盐酸盐的N-4型晶体。

41.  一种制备权利要求18的N-4型晶形的具有以下结构的游离碱的盐酸盐的方法

其包含
a)提供游离碱的N，N-二甲基甲酰胺悬浮液或溶液；
b)将盐酸水溶液加至步骤a)的悬浮液以形成溶液；
c)将丙酮或MEK加至步骤b)的溶液；
d)将权利要求18的游离碱的N-4型盐酸盐的晶种加至步骤c)的混合物；及
e)收集该游离碱盐酸盐的N-4型晶体。

42.  一种制备权利要求18的N-4型晶形的具有以下结构的游离碱的盐酸盐的方法

其包含
a)提供溶解在N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基甲酰胺/丙酮或N，N-二甲基甲酰胺/MEK中的该结构I游离碱的浆液；
b)将盐酸水溶液与丙酮或MEK的溶液加至步骤a)的浆液以形成溶液；
c)任选从步骤b)的溶液滤出不溶性固体；
d)将权利要求18的游离碱的N-4型盐酸盐的晶种的丙酮浆液加至步骤c)中所得的溶液；及
e)收集该游离碱I的盐酸盐的N-4型晶体。

43.  一种具有以下结构的游离碱的N-1型盐酸盐

其通过权利要求27的方法制备。

44.  一种具有以下结构的游离碱的N-1型甲磺酸盐

其通过权利要求30的方法制备。

45.  一种具有以下结构的游离碱的N-4型盐酸盐

其通过权利要求34的方法制备。

46.  一种具有以下结构的游离碱的N-4型盐酸盐

其通过权利要求35的方法制备。

47.  一种具有以下结构的N-4型盐酸盐

其通过权利要求36的方法制备。

48.  一种具有以下结构的N-4型盐酸盐

其通过权利要求37的方法制备。

49.  一种具有以下结构的N-4型盐酸盐

其通过权利要求38的方法制备。

50.  一种具有以下结构的N-4型盐酸盐

其通过权利要求39的方法制备。

51.  一种具有以下结构的N-4型盐酸盐

其通过权利要求40的方法制备。

52.  一种具有以下结构的N-4型盐酸盐

其通过权利要求41的方法制备。

53.  一种具有以下结构的N-4型盐酸盐

其通过权利要求42的方法制备。

54.  一种药物组合物，其包含至少一种权利要求1的化合物及可药用载体或稀释剂。

55.  一种药物组合物，其包含至少一种权利要求2的化合物及可药用载体或稀释剂。

56.  一种药物组合物，其包含至少一种权利要求18的化合物及可药用载体或稀释剂。

57.  一种治疗炎症病症的方法，其包括将权利要求18的药物组合物给予需要该治疗的患者。

58.  权利要求57的方法，其中炎症病症选自哮喘、成人呼吸窘迫综合征、慢性阻塞性肺病、慢性炎性肺病、糖尿病、炎性肠病、骨质疏松症、银屑病、移植物抗宿主病、动脉粥样硬化及关节炎，关节炎包括类风湿性关节炎、银屑病性关节炎、创伤性关节炎、风疹性关节炎、痛风性关节炎及骨关节炎。

说明书制备4-[[5-[(环丙基氨基)羰基]-2-甲基苯基]氨基]-5-甲基-N-丙基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-甲酰胺的盐的方法及在其中制备的新型稳定形式
【其它申请的引用】
本申请要求2005年4月18日提交的美国临时申请No.60/672255的优先权，在此引入该申请的公开内容作为参考。
【技术领域】
本发明涉及制备p38激酶抑制剂4-[[5-[(环丙基氨基)羰基]-2-甲基苯基]氨基]-5-甲基-N-丙基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-甲酰胺的新型稳定结晶盐形式的方法，所述新型稳定结晶盐形式包括游离碱的单盐酸盐的N-1型及N-4型晶形(crystal form)，及游离碱的甲磺酸盐的N-1型晶形，本发明涉及该新型N-1型及N-4型晶形，涉及包含该新型N-1型及N-4型晶形的药物组合物，且涉及使用该新型N-1(甲磺酸盐及盐酸盐)及N-4(盐酸盐)晶形治疗哺乳动物以抑制p38激酶的活性及治疗例如类风湿性关节炎的p38激酶相关病症的方法。
【背景技术】
多种细胞因子参与炎症应答，所述细胞因子包括IL-1、IL-6、IL-8及TNF-α。在多种疾病中牵涉细胞因子包括IL-1和TNF-α的过量生成，所述疾病尤其包括炎性肠病、类风湿性关节炎、银屑病、多发性硬化、内毒素休克、骨质疏松症、阿尔兹海默病(Alzheimer′s disease)及充血性心力衰竭[Henry等人，Drugs Fut.，24：1345-1354(1999)；Salituro等人，Curr.Med.Chem.，6：807-823(1999)]。人类患者的证据表明，细胞因子的蛋白拮抗剂在治疗慢性炎症疾病中有效，例如，TNF-α(Enbrel)的单克隆抗体[Rankin等人，Br.J.Rheumatol，34：334-342(1995)]及可溶性TNF-α受体-Fc融合蛋白(Etanercept)[Moreland等人.，Ann.Intern.Med.，130：478-486(1999)]。
响应于外界刺激例如促分裂原、传染性有机体或创伤，在多种细胞类型中进行TNF-α的生物合成。TNF-α产生的重要介质(mediator)为促分裂原活化蛋白(MAP)激酶，具体为p38激酶。这些激酶响应于多种应力刺激而被活化，包括但不限于致炎细胞因子、内毒素、紫外光及渗透压休克。p38的活化需要通过上游MAP激酶激酶(MKK3及MKK6)对在p38同功酶的Thr-Gly-Tyr基序特征内的苏氨酸及酪氨酸上进行双磷酸化。
已知存在四种p38的亚型，即p38-α、p38β、p38γ及p38δ。α及β亚型在发炎症细胞内表达，且为生成TNF-α的关键介质。在细胞中抑制p38α及p38β酶将导致TNF-α表达水平降低。同样，在患有炎症疾病的动物模型中给予p38α及p38β抑制剂已证明这些抑制剂对治疗这些疾病有效。因此，p38酶在由IL-1及TNF-α介导的炎症过程中起重要作用。所报导抑制p38激酶及细胞因子例如IL-1及TNF-α用于治疗炎症疾病的化合物披露于以下文献中：Scios，Inc的美国专利第6,277,989号及第6,130,235号；Vertex Pharmaceuticals Inc的美国专利第6,147,080号及第5,945,418号；Smith-Kline Beecham Corp.的美国专利第6,251,914号、第5,977,103号及第5,658,903号；G.D.Searle & Co.的美国专利第5,932,576号及第6,087,496号；Astra Zeneca的WO 00/56738及WO 01/27089；Johnson & Johnson的WO 01/34605；WO 00/12497(作为p38激酶抑制剂的喹唑啉衍生物)；WO 00/56738(用于相同目的的吡啶及嘧啶衍生物)；WO00/12497(讨论p38激酶抑制剂之间的相互关系)；及WO 00/12074(用作p38抑制剂的哌嗪及哌啶化合物)。
2003年4月22日提交的美国申请第10/420,399号(下文的10/420,399申请)披露了作为p38激酶抑制剂的化合物、其对映异构物、非对映异构物、盐及其溶剂化物，这些化合物可用于治疗p38激酶相关病症，包括类风湿性关节炎，这些化合物具有式(I)结构

其中
X选自-O-、-OC(＝O)-、-S-、-S(＝O)-、-SO2-、-C(＝O)-、-CO2-、-NR8-、-NR8C(＝O)-、-NR8C(＝O)NR9-、-NR8CO2-、-NR8SO2-、-NR8SO2NR9-、-SO2NR8-、-C(＝O)NR8-、卤素、硝基及氰基，或X不存在；
Z为-C(＝O)NR10-Bb、-(CH2)-C(＝O)NR10-Bc、-NR10aC(＝O)-Ba、-(CH2)-NR10aC(＝O)-Bc、-NR10aC(＝O)NR10-B、-NR10SO2-B、-SO2NR10-B、-C(＝O)-Ba、-CO2-Be、-OC(＝O)-Ba、-C(＝O)NR10-NR10a-Bd、-NR10CO2-Ba或-C(＝O)NR10-(CH2)C(＝O)Ba；
B为
(a)任选取代的环烷基、任选取代的杂环基或任选取代的杂芳基；或
(b)用一个R11及零至两个R12取代的芳基；
Ba为任选取代的烷基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的芳基或任选取代的杂芳基；
Bb为
(a)任选取代的环烷基、任选取代的杂环基或任选取代的杂芳基；
(b)用一个R11及零至两个R12取代的芳基；或
(c)-C(＝O)R13、-CO2R13、-C(＝O)NR13R13a；
Bc为任选取代的烷基、任选取代的烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的芳基或任选取代的杂芳基；
Bd为氢、-C(＝O)R13或-CO2R13；
Be为氢、任选取代的烷基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的芳基或任选取代的杂芳基；
R1及R5独立选自氢、烷基、取代的烷基、-OR14、-SR14、-OC(＝O)R14、-CO2R14、-C(＝O)NR14R14a、-NR14R14a、-S(＝O)R14、-SO2R14、-SO2NR14R14a、-NR14SO2NR14aR14b、-NR14aSO2R14、-NR14C(＝O)R14a、-NR14CO2R14a、-NR14C(＝O)NR14aR14b、卤素、硝基及氰基；
R2为氢或C1-4烷基；
R3为氢、甲基、全氟甲基、甲氧基、卤素、氰基、NH2或NH(CH3)；
R4选自：
(a)氢，若X为-S(＝O)-、-SO2-、-NR8CO2-或-NR8SO2-，则R4不为氢；
(b)任选独立用酮基和/或一至四个R17取代的烷基、烯基及炔基；
(c)芳基及杂芳基，其任一种可任选独立用一至三个R16取代；及
(d)杂环基及环烷基，其任一种可任选独立用酮基和/或一至三个R16取代；或
(e)若X为卤素、硝基或氰基，则R4不存在；
R6与苯环A的任意可用碳原子连接，且在各情况下其独立选自烷基、卤素、三氟甲氧基、三氟甲基、羟基、烷氧基、烷酰基、烷酰基氧基、巯基、烷硫基、脲基、硝基、氰基、羧基、羧基烷基、氨基甲酰基、烷氧羰基、烷基硫羰基、芳基硫羰基、芳基磺酰胺、烷基磺酰胺、磺酸、烷基磺酰基、磺酰氨基、苯基、苄基、芳氧基及苄氧基，其中各R6基团依次可用一至两个R18进一步取代；
R8及R9独立选自氢、烷基、取代的烷基、芳基、环烷基、杂环基及及杂芳基；
R10及R10a独立选自氢、烷基、取代的烷基、烷氧基及芳基；
R11选自：
(a)烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、-SO2烷基、环烷基、杂环基及杂芳基，其任何一种是可任选取代的；或
(b)卤基、氰基、氨基、烷基氨基及二烷基氨基；
R12选自烷基、R17及用酮基(＝O)和/或一至三个R17取代的C1-4烷基；
R13及R13a独立选自氢、任选取代的烷基、任选取代的环烷基及任选取代的芳基；
R14、R14a及R14b独立选自氢、烷基、取代的烷基、芳基、环烷基、杂环基及杂芳基，当R14与磺酰基例如-S(＝O)R14、-SO2R14及-NR14aSO2R14连接时，R14不为氢；
R16选自烷基、R17及用酮基(＝O)和/或一至三个R17所取代的C1-4烷基；
R17选自：
(a)卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、硝基、氰基、-SR23、-OR23、-NR23R24、-NR23SO2R25、-SO2R25、-SO2NR23R24、-CO2R23、-C(＝O)R23、-C(＝O)NR23R24、-OC(＝O)R23、-OC(＝O)NR23R24、-NR23C(＝O)R24、-NR23CO2R24；
(b)芳基或杂芳基，其任一种可任选用一至三个R26取代；或
(c)任选用酮基(＝O)和/或一至三个R26取代的环烷基或杂环基；
R18及R26独立选自C1-6烷基、C2-6烯基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、氰基、硝基、氨基、C1-4烷基氨基、氨基C1-4烷基、羟基、羟基C1-4烷基、烷氧基、C1-4烷基硫基、芳基、杂环基、(芳基)烷基、芳基氧基及(芳基)烷氧基；
R23及R24独立选自氢、烷基、烯基、取代的烷基、取代的烯基、芳基、环烷基、杂芳基及杂环基；
R25选自烷基、取代的烷基、芳基、杂芳基、环烷基及杂环基；以及m为0、1、2或3。
10/420,399申请进一步披露式(I)化合物可使用下列反应步骤制备：
方案1

方案1描述如下：
“市售化合物(1)可在加热条件下与乙二酰氯反应，随后进行真空浓缩，在碱例如二异丙胺存在的条件下，在有机溶剂例如二氯甲烷(DCM)中与胺B-NH2反应生成化合物(2)。在催化剂例如Pd存在的条件下，在室温在醇类溶剂例如乙醇中化合物(2)可与氢反应生成化合物(3)。化合物(3)随后可在方案2中使用，生成方案2的化合物(8)。”
方案2

方案2描述如下：
“3-甲基-1-吡咯-2，4-二乙基酯可在醚中与氯胺反应生成化合物(4)。化合物(4)与乙酸在甲酰胺中反应生成化合物(5)。化合物(5)可与DIPEA及POCl3在甲苯中反应生成化合物(6)。化合物(6)可与DIPEA及化合物(3)在DMF中反应生成化合物(7)。”化合物(7)在THF中用NaOH水解生成酸中间体7a，其在DMF中用HOBt、EDCI及合适的胺7b处理生成化合物8。
美国申请第10/420,399号也披露式(I)化合物形成可药用(即无毒、生理上可接受)盐。这些盐包括用多种有机酸及无机酸形成的盐，其包括用盐酸、氢溴酸、甲磺酸、硫酸、乙酸、三氟乙酸、草酸、马来酸、苯磺酸、甲苯磺酸形成的盐及多种其它盐(例如硝酸盐、磷酸盐、硼酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、琥珀酸盐、苯甲酸盐、抗坏血酸盐、水杨酸盐等)。该申请进一步披露这些酸盐可如本领域技术人员所知而形成。
包括在10/420,399申请所涵盖的多种化合物中的为具有以下结构的化合物：

其也称为4-[[5-[(环丙基氨基)羰基]-2-甲基苯基]氨基]-5-甲基-N-丙基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-甲酰胺或游离碱。
【发明内容】
根据本发明的一个方面，提供结构I游离碱的新型结晶盐形式

及选择性制备这些游离碱I的新型结晶盐形式的方法。
本发明的新型晶形包括游离碱I的盐酸盐的N-1型、游离碱I的盐酸盐的N-4型、游离碱I的甲磺酸(MSA)盐的N-1型、游离碱I的盐酸盐的SA-2溶剂化物、游离碱I的盐酸盐的SB-2溶剂化物及游离碱I的盐酸盐的H1.5-3倍半水合物(sesquihydrate)。优选的是游离碱I的盐酸盐的N-1型晶体及游离碱I的盐酸盐的N-4型晶体，两者分别在25℃及30℃在25％至75％RH下皆不具有吸湿性，且可以固态形式分离出并保持稳定。
已发现可一致地获得盐酸盐的N-4型。此外，本发明的方法制备的盐酸盐的粒度(D90＜30微米)是受到控制的并且是符合需要的，因此与先前方法相比，这个粒度是较小的并且是更符合需要的。
游离碱I的盐酸盐的N-1型从优选为THF的有机溶剂中结晶为小棒。在室温，实验室批量(lab batch)的游离碱I的盐酸盐的N-1型的PXRD图与杂化的PXRD图匹配。固态NMR也表明为单一相。使用DSC进行热分析表明N-1型在约125至约225℃范围内熔化，伴有歧化反应，在至多约100℃失重可忽略不计，且在至多约225℃失重为约8.2％的。
本文所用术语″熔化伴有歧化反应″指盐在熔化时发生分解。
本文可交换使用的术语″游离碱I的盐酸盐″、″游离碱I的氯化氢盐″或″盐酸盐″或″氢氯酸盐″指游离碱I的HCl盐。
吸湿性研究表明，N-1型盐酸盐在25℃在约25％至约75％RH范围内不具有吸湿性。
游离碱I的盐酸盐的N-4型从优选为DMF/丙酮的有机溶剂中结晶。实验室批量的盐酸盐的N-4型的PXRD图与由单晶结构模拟的图匹配。固态NMR也表示为单相。通过DSC及TGA进行热分析表明N-4型在约130至约220℃(可变)温度范围内熔化，伴有分解，且在至多约125℃失重可忽略不计。吸湿性研究表明，N-4型盐在30℃在约25％至约75％RH范围内不具有吸湿性。在室温，在THF、乙腈、丙酮及DMF/丙酮中的盐酸盐的N-1型及N-4型的浆化物转化为N-4型，表明N-4型为室温下的稳定形式。
N-4型盐优选具有95％＜60微米的平均粒度分布。
游离碱I的甲磺酸盐的N-1型从有机溶剂优选为DMF、DMF/丙酮或含水乙腈中结晶为具有整齐晶体结构的细长薄片即N-1。实验室批量的游离碱I的甲磺酸盐的N-1型的PXRD图与由单晶结构模拟的PXRD图匹配。固态NMR也表明为单相。通过DSC及TGA进行热分析表明当在216℃开始吸热时，游离碱I的甲磺酸盐的N-1型熔化，伴有分解，在至多约150℃失重可忽略不计。
该游离碱I的盐酸盐的SA-2溶剂化物为混合的溶剂化物(甲醇/水)。从甲基乙基酮/甲醇获得水合甲醇化物的单晶结构。该晶体在室温不稳定。
该游离碱I的盐酸盐的SB-2溶剂化物为混合的溶剂化物(异丙醇/水)。从异丙醇获得水合异丙醇化物的单晶结构。该晶体在室温不稳定。
该游离碱I的盐酸盐的H1.5-3型为从95％乙醇获得的呈片状的不稳定的倍半水合物形式。热台(Hot stage)表明，在约45℃去溶剂化且单晶在-50℃在干燥N2气流中不稳定。
游离碱I的盐酸盐的N-1型及游离碱I的盐酸盐N-4型是优选的。N-4型盐是最优选的形式。
根据本发明的游离碱I的盐的多种形式可使用多种技术表征，这些技术的操作是本领域技术人员所熟知的。可使用单晶X-射线衍射表征且区分这些形式，单晶X-射线衍射基于在固定分析温度对某一形式的单晶的晶胞(unitcell)进行测量。在Stout & Jensen的X-Ray Structure Determination：A PracticalGuide，Macmillan Co.，New York(1968)的第3章中提供关于晶胞的详细描述，该文献以引用的方式并入本文中。或者，可根据所观测的原子分数座标(fractional atomic coordinate)表征晶格内原子在空间关系中的独特排列。表征晶体结构的另一方法为通过粉末X-射线衍射分析，其中将实验的或所观测的衍射分布(profile)与代表纯粉末物质的模拟分布进行比较，两者均在相同的分析温度进行，将对主题形式的测量表征为-系列2θ值。
可使用表征形态的其它方法，例如固态核磁共振(SSNMR)、差示扫描量热及热重分析。也可组合使用这些参数来表征主题形态。
在本发明的一个方面中，游离碱I的盐酸盐的N-1型可通过大体上等于以下值的晶胞参数表征：
晶胞尺寸

空间群C2/c
分子/非对称单位1
在本发明的另一方面中，可通过大体如表4中所列出的原子分数座标表征N-1型HCl盐。
在本发明的另一方面中，可通过如图1中所示的模拟的、杂化的和观测的粉末X-射线衍射图表征游离碱I的盐酸盐的N-1型。
在本发明的另一方面中，可通过粉末X-射线衍射图表征N-1型HCl盐，其在室温左右具有以下2θ值(CuKαλ＝1.5418)8.7±0.1、12.1±0.1、13.3±0.1、13.7±0.1、14.6±0.1、17.5±0.1、18.2±0.1、21.7±0.1、22.8±0.1及24.3±0.1。
在本发明的另一方面中，可通过差示扫描量热温谱图表征N-1型HCl盐，如图7所示，其通常在约125℃至约225℃范围内出现吸热。
在本发明的另一方面中，可通过热重分析曲线表征N-1型，如图10所示，其在约100℃失重可忽略不计，在约225℃失重至多为约8.2％。
在本发明的另一方面中，可通过表3中所示的SSNMR化学位移及图4中所示的光谱表征游离碱I的盐酸盐的N-1型。
在本发明的另一方面中，可通过图13中所示的吸湿等温线表征N-1型HCl盐，其在25℃在25％至75％RH的范围内吸水量可忽略不计。
在本发明的另一方面中，游离碱I的盐酸盐的N-4型可通过大体上等于以下值的晶胞参数表征：
晶胞尺寸
a＝20.9498(5)
b＝13.8719(3)
c＝7.9133(2)
α＝90°
β＝100.052(1)°
γ＝90°
空间群P21/n
分子/非对称单位1
其中晶形处于约+22℃。
在本发明的另一方面中，可通过大体如表5中所列出的原子分数座标表征游离碱I的盐酸盐的N-4型。
在本发明的另一方面中，可通过如图2中所示的模拟的及观测的粉末X-射线衍射图表征游离碱I的盐酸盐的N-4型。
在本发明的另一方面中，可通过粉末X-射线衍射图表征游离碱I的盐酸盐的N-4型，其在室温左右具有以下2θ值(CuKαλ＝1.5418)8.6±0.1、10.7±0.1、11.4±0.1、12.8±0.1、14.4±0.1、15.6±0.1、16.9±0.1、20.0±0.1及23.4±0.1。
在本发明的另一方面中，可通过差示扫描量热温谱图表征游离碱I的盐酸盐的N-4型，如图8所示，其通常在约130至约220℃(可变)范围内出现吸热。
在本发明的另一方面中，可通过热重分析曲线表征游离碱I的盐酸盐的N-4型，如图11所示，其在至多约125℃失重可忽略不计。
在本发明的另一方面中，可通过表3中所示的SSNMR化学位移及图5中所示的光谱表征游离碱I的盐酸盐的N-4型。
在本发明的另一方面中，可通过图14中所示的吸湿等温线表征游离碱I的盐酸盐的N-4型，其在30℃在25％至75％RH的范围内吸水量可忽略不计。
在本发明的另一方面中，游离碱I的甲磺酸盐的N-1型可通过大体上等于以下值的晶胞参数表征：
晶胞尺寸
a＝9.818(1)
b＝11.127(1)
c＝13.004(1)
α＝97.32(1)°
β＝110.17(1)°
γ＝111.48(1)°
空间群P-1
分子/非对称单位1
其中晶形处于约+22℃。
在本发明的另一方面中，可通过大体如表6中所列出的原子分数座标表征游离碱I的N-1型MSA盐。
在本发明的另一方面中，可通过如图3中所示的模拟的及观测的粉末X-射线衍射图表征游离碱I的甲磺酸盐的N-1型。
在本发明的另一方面中，可通过粉末X-射线衍射图表征游离碱I的N-1型MSA盐，其在RT左右包含以下2θ值(CuKαλ＝1.5418)10.7±0.1、11.7±0.1、13.3±0.1、14.0±0.1、15.2±0.1、19.8±0.1、21.0±0.1、22.0±0.1、23.0±0.1及24.4±0.1。
在本发明的另一方面中，可通过差示扫描量热温谱图表征游离碱I的N-1型MSA盐，如图9所示，其吸热在约216℃出现峰值。
在本发明的另一方面中，可通过热重分析曲线表征游离碱I的N-1型MSA盐，如图12所示，其在至多约150℃失重可忽略不计。
在本发明的另一方面中，可通过如表3中所示的SSNMR化学位移及图6中所示的光谱表征游离碱I的N-1型MSA盐。
当通过TGA表征时，本文所用的术语″失重可忽略不计″表明存在纯净(非溶剂化)的晶形。
当通过吸湿等温线表征时，本文所用的术语″％吸水量可忽略不计″表明所测形式是非吸湿性的。
根据本发明的另一方面，提供制备呈N-1型晶形的游离碱I的盐酸盐的方法，其包括以下步骤：
a)提供悬浮于有机溶剂优选为四氢呋喃中的具有结构I的游离碱

b)使该游离碱I与盐酸水溶液反应；
c)将游离碱I的盐酸盐的N-1型晶种加至得自b)的反应混合物；及
d)收集呈N-1型晶形的盐酸盐。
用于制备呈N-1型晶形的游离碱I的盐酸盐的方法的可选择的优选实施方案包括以下步骤：
a)提供悬浮或溶解于N，N-二甲基甲酰胺或N，N-二甲基乙酰胺中的游离碱I；
b)使该游离碱I与盐酸水溶液反应；
c)将游离碱I的盐酸盐的N-1型晶种加至得自b)的反应混合物；
d)将丙酮或甲基乙基酮(MEK)加至得自c)的反应混合物；及
e)收集呈N-1型晶形的盐酸盐。
该HCl盐的N-1型晶种(在本发明的上述方法中所使用)可由以下步骤制备：
a)将游离碱I悬浮于有机溶剂例如四氢呋喃或乙腈中；
b)使该游离碱I与盐酸水溶液反应；及
c)收集呈N-1型晶形的盐酸盐。
此外，根据本发明的另一方面，提供制备具有结构I的游离碱的N-1型甲磺酸盐的优选方法，其包括以下步骤
a)提供具有结构I的游离碱的N，N-二甲基甲酰胺溶液；

b)使该游离碱与甲磺酸反应；
c)将丙酮加至该反应混合物；
d)将N-1型甲磺酸盐的晶体作为晶种加至该反应混合物；及
e)收集N-1型甲磺酸盐的晶体。
此外，根据本发明的另一方面，提供制备游离碱I的N-1型甲磺酸盐的优选方法，其包括以下步骤：
a)提供游离碱I的有机溶剂悬浮液例如DMF悬浮液、异丙醇悬浮液、乙醇悬浮液、乙酸乙酯悬浮液或乙腈悬浮液，优选为DMF悬浮液或乙腈悬浮液；
b)使该游离碱与甲磺酸反应；
c)将游离碱I的N-1型甲磺酸盐的晶体作为晶种加至该反应混合物；及
d)收集N-1型甲磺酸盐的晶体。
在本发明的上述方法中所使用的甲磺酸盐的N-1型晶种可由以下步骤制备：
a)将该游离碱I悬浮于有机溶剂例如DMF、异丙醇、乙醇、乙酸乙酯或乙腈，优选为DMF或乙腈中；
b)使该游离碱I与甲磺酸反应；及
c)收集呈N-1型晶形的甲磺酸盐。
另外，根据本发明的另一方面，提供选择性制备呈N-4型晶形的结构I游离碱的盐酸盐的优选方法，其包括以下步骤
a)提供结构I游离碱的甲酸与甲基乙基酮浆液或甲酸与丙酮浆液；

b)混合盐酸水溶液与步骤a)中的浆液；
c)任选过滤步骤b)的反应混合物；
d)(以所谓反向添加方式)将过滤的c)的反应混合物加至游离碱I的盐酸盐的N-4型晶体的晶种的甲基乙基酮浆液或丙酮浆液，优选使用与步骤a)相同的溶剂；及
e)收集呈N-4型晶形的游离碱的盐酸盐。
此外，根据本发明的另一方面，提供制备呈N-4型晶形的结构I游离碱的盐酸盐的优选方法，其包括以下步骤
a)提供结构I游离碱的甲酸与丙酮浆液或溶液或甲酸与甲基乙基酮(MEK)浆液或溶液；

b)(以所谓反向添加方式)将盐酸水溶液加至步骤a)的浆液或溶液；
c)任选过滤所得反应混合物；
d)任选添加丙酮至经过滤的反应混合物中；
e)将游离碱I的盐酸盐的N-4型晶体的晶种及丙酮或MEK加至步骤b)、c)及d)的反应混合物；及
f)收集呈N-4型晶形的游离碱的盐酸盐。
或者，可将游离碱的溶液加至丙酮或MEK、盐酸及盐酸盐的N-4型晶体的晶种的混合物，以使N-4型小晶体沉淀。
此外，根据本发明的另一方面，提供制备呈N-4型晶形的游离碱I的盐酸盐的优选方法，其包括以下步骤：
a)提供游离碱I的有机溶剂悬浮液或溶液优选为乙醇悬浮液或溶液、丙酮悬浮液或溶液或四氢呋喃悬浮液或溶液；
b)将盐酸水溶液加至步骤a)的悬浮液或溶液；
c)将游离碱I的盐酸盐的N-4型晶体的晶种加至步骤b)的反应混合物；及
d)收集呈N-4型晶形的游离碱I的盐酸盐。
在本发明的优选方法的另一实施方案中，呈N-4型晶形的游离碱I的盐酸盐通过以下步骤制备：
a)提供游离碱I的N，N-二甲基甲酰胺悬浮液或溶液；
b)将盐酸水溶液加至步骤a)的悬浮液，形成溶液；
c)将丙酮或MEK加至步骤b)的溶液；
d)将游离碱I的N-4型盐酸盐的晶种加至步骤c)的混合物；及
e)收集游离碱I的盐酸盐的N-4型晶体。
在本发明的另一实施方案中，提供制备呈N-4型晶形的游离碱I的盐酸盐的优选方法，其包括以下步骤：
a)提供游离碱I的N，N-二甲基乙酰胺溶液；
b)将盐酸水溶液加至步骤a)的溶液；
c)将游离碱I的盐酸盐的N-4型晶体的晶种加至步骤b)的反应混合物；
d)将丙酮或MEK加至步骤c)的反应混合物；及
e)收集呈N-4型晶形的游离碱I的盐酸盐。
在本发明的方法的另一实施方案中，提供制备呈N-4型晶形的游离碱I的盐酸盐的优选方法，其包括以下步骤：
a)提供盐酸盐的N-1型晶体的有机溶剂浆液例如乙腈浆液、四氢呋喃浆液、乙醇或丙酮浆液，及游离碱I的盐酸盐的N-4型晶体的晶种；
b)在约20至约50℃温度范围内加热步骤a)所得反应混合物；及
c)收集呈N-4型晶形的游离碱I的盐酸盐。
此外，根据本发明的另一方面，提供制备呈N-4型晶形的结构I游离碱的盐酸盐的优选方法，其包括以下步骤
a)提供结构I游离碱在约50至约75℃温度范围内溶解于N，N-二甲基乙酰胺中的溶液；
b)提供盐酸水溶液与冷却的丙酮或MEK的溶液；
c)将游离碱I的N-4型盐酸盐的晶种加至丙酮/HCl溶液或MEK/HCl溶液；
d)将得自步骤a)、保持在约60至约65℃温度范围内的游离碱I的N，N-二甲基乙酰胺溶液加至步骤c)的加晶种的及冷却的丙酮/HCl溶液或MEK/HCl溶液，同时加以搅拌，形成浆液；及
e)收集游离碱I的盐酸盐的N-4型晶体。
此外，根据本发明的另一方面，提供制备呈N-4型晶形的结构I游离碱的盐酸盐的优选方法，其包括以下步骤
a)提供结构I游离碱的N，N-二甲基甲酰胺浆液、N，N-二甲基甲酰胺/丙酮(最优选)浆液或N，N-二甲基甲酰胺/MEK浆液；
b)将盐酸水溶液与丙酮或MEK的溶液加至步骤a)的浆液，形成溶液；
c)任选从步骤b)的溶液滤出不溶性固体；
d)将游离碱I的N-4型盐酸盐的晶种的丙酮溶液加至丙酮/HCl溶液即步骤b)或c)的溶液；及
e)收集游离碱I的盐酸盐的N-4型晶体。
另外，根据本发明的另一方面，提供制备呈N-4型晶形的结构I游离碱的盐酸盐的优选方法，其包括以下步骤
a)提供结构I游离碱的N，N-二甲基甲酰胺浆液、N，N-二甲基甲酰胺/丙酮浆液或N，N-二甲基甲酰胺/MEK浆液；
b)将盐酸水溶液与丙酮或MEK的溶液加至步骤a)的浆液，形成溶液；
c)任选从步骤b)的溶液滤出不溶性固体；
d)将N-4型盐酸盐的晶种的丙酮浆液加至步骤c)所得的溶液；及
e)收集游离碱I的盐酸盐的N-4型晶体。
在本发明的上述方法中所使用的N-4型晶种可通过以下步骤制备：
a)将游离碱I悬浮于乙醇中；
b)使该游离碱I的悬浮液与盐酸水溶液反应；及
c)收集N-4型晶体的盐酸盐。
【附图说明】
图1显示4-[[5-[(环丙基氨基)羰基]-2-甲基苯基]氨基]-5-甲基-N-丙基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-甲酰胺的盐酸盐的N-1型晶体的计算的(模拟的)(-50℃)及杂化的(RT)及观测的(在室温进行实验的)粉末X-射线衍射图(CuKαλ＝1.5418)；
图2显示4-[[5-[(环丙基氨基)羰基]-2-甲基苯基]氨基]-5-甲基-N-丙基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-甲酰胺的盐酸盐的N-4型晶体的计算的(模拟的)(22℃)及观测的(在室温进行实验的)粉末X-射线衍射图(CuKαλ＝1.5418)；
图3显示4-[[5-[(环丙基氨基)羰基]-2-甲基苯基]氨基]-5-甲基-N-丙基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-甲酰胺的甲磺酸(MSA)盐的计算的(模拟的)(22℃)及观测的(在室温进行实验的)粉末X-射线衍射图(CuKαλ＝1.5418)；
图4显示4-[[5-[(环丙基氨基)羰基]-2-甲基苯基]氨基]-5-甲基-N-丙基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-甲酰胺的盐酸盐的N-1型晶体的C-13固态NMR；
图5显示4-[[5-[(环丙基氨基)羰基]-2-甲基苯基]氨基]-5-甲基-N-丙基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-甲酰胺的盐酸盐的N-4型晶体的C-13固态NMR；
图6显示4-[[5-[(环丙基氨基)羰基]-2-甲基苯基]氨基]-5-甲基-N-丙基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-甲酰胺的甲磺酸盐的N-1型晶体的C-13固态NMR；
图7显示4-[[5-[(环丙基氨基)羰基]-2-甲基苯基]氨基]-5-甲基-N-丙基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-甲酰胺的盐酸盐的N-1型晶体的差示扫描量热(DSC)温谱图；
图8显示4-[[5-[(环丙基氨基)羰基]-2-甲基苯基]氨基]-5-甲基-N-丙基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-甲酰胺的盐酸盐的N-4型晶体的差示扫描量热(DSC)温谱图；
图9显示4-[[5-[(环丙基氨基)羰基]-2-甲基苯基]氨基]-5-甲基-N-丙基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-甲酰胺的甲磺酸盐的N-1型晶体的差示扫描量热(DSC)温谱图；
图10显示4-[[5-[(环丙基氨基)羰基]-2-甲基苯基]氨基]-5-甲基-N-丙基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-甲酰胺的盐酸盐的N-1型晶体的热重分析(TGA)曲线；
图11显示4-[[5-[(环丙基氨基)羰基]-2-甲基苯基]氨基]-5-甲基-N-丙基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-甲酰胺的盐酸盐的N-4型晶体的热重分析(TGA)曲线；
图12为4-[[5-[(环丙基氨基)羰基]-2-甲基苯基]氨基]-5-甲基-N-丙基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-甲酰胺的甲磺酸盐的N-1型晶体的热重分析(TGA)曲线；
图13为4-[[5-[(环丙基氨基)羰基]-2-甲基苯基]氨基]-5-甲基-N-丙基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-甲酰胺的盐酸盐的N-1型晶体的吸湿等温线；及
图14为4-[[5-[(环丙基氨基)羰基]-2-甲基苯基]氨基]-5-甲基-N-丙基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-甲酰胺的盐酸盐的N-4型晶体的吸湿等温线。
【具体实施方式】
本发明至少部分地提供作为新型物质、尤其呈可药用形式的游离碱I的晶形。本文所用的术语″可药用″指具有以下特征的化合物、物质、组合物和/或剂型：在合理医学判断范围内适于与人及动物的组织接触而无过度毒性、刺激、过敏反应或其它问题并发症，这与合理的益处/风险比相称。在某些优选实施方案中，游离碱I的结晶盐形式大体上为纯净形式。本文所用的术语″大体上纯净″的意思是化合物具有大于约90％的纯度，包括例如约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％、约99％及约100％的纯度。
本文所用的术语″反向添加方式″指本发明的方法的步骤，其中将游离碱I与盐酸的浆液或溶液加至游离碱I的盐酸盐的N-4型晶体的晶种的浆液。
本文所用的术语″常规添加方式″指本发明的方法的步骤，其中将游离碱I的盐酸盐的N-4型晶体的晶种的浆液加至游离碱I与盐酸的浆液或溶液。
本文所用的″多晶形物″指化学成分相同但形成晶体的分子、原子和/或离子的空间排列不同的晶形。
本文所用的″溶剂化物″指分子、原子和/或离子的晶形，其进一步含有并入结晶结构中的一种或多种溶剂的分子。溶剂化物中的溶剂分子可以有序排列和/或无序排列而存在。溶剂化物可含有化学计量或非化学计量含量的溶剂分子。例如，可从溶剂化物的溶剂的部分损失获得具有非化学计量的溶剂分子的溶剂化物。
可提供的晶形样品具有大体上纯净的相均匀性，表示存在占主要量的单晶形及可选少量的一种或多种其它晶形。可通过如粉末X-射线衍射(PXRD)或固态核磁共振光谱(SSNMR)那样的技术，测定样品中一种以上晶形的存在。例如，在实验测量的PXRD图与模拟的PXRD图的比较中，额外峰的存在可表示样品中有一种以上的晶形。模拟的PXRD可由单晶X-射线数据计算。参见Smith，D.K.，″A FORTRAN Program for Calculating X-Ray PowderDiffraction Patterns，″Lawrence Radiation Laboratory，Livermore，California，UCRL-7196(1963年4月)。实验测量的PXRD图中的总峰值面积的10％以下优选5％以下更优选2％以下由模拟的PXRD图中不存在的额外峰引起，由此表明晶形具有大体纯净的相均匀性。实验测量的PXRD图中的总峰值面积的1％以下由模拟的PXRD图中不存在的额外峰引起，在此情况下，具有大体纯净的相均匀性的晶形是最优选的。
制备晶形的方式是本领域已知的。晶形可通过多种方法制备，包括例如从合适的溶剂中结晶或重结晶、升华、从熔化状态生长、从其它相进行固态转化、从超临界流体结晶及射流喷雾(jet spraying)。从溶剂混合物进行晶形的结晶或重结晶的技术包括例如蒸发溶剂、降低溶剂混合物的温度、将晶种加至分子和/或盐的过饱和溶剂混合物、对溶剂混合物进行冷冻干燥及将抗溶剂(反萃溶剂)加至溶剂混合物。
在Solid-State Chemistry of Drugs，S.R.Byrn，R.R.Pfeiffer及J.G.Stowell，第二版，SSCI，West Lafayette，Indiana(1999)中论述包括多晶形物的药物晶体、制备方法及药物晶体的表征。
对于使用溶剂的结晶技术而言，一种或多种溶剂的选择通常取决于一个或多个因素，如化合物的溶解度、结晶技术及溶剂的蒸气压。可将溶剂组合使用，例如，可将化合物溶解在第一溶剂中，得到溶液，接着添加抗溶剂以降低该化合物在溶液中的溶解度，形成晶体。抗溶剂为该化合物在其中具有低溶解度的溶剂。用于制备晶体的合适溶剂包括极性及非极性溶剂。
在一种制备晶体的方法中，将游离碱I或其盐悬浮在合适的溶剂中，并且/或搅拌，得到浆液，可对该浆液进行加热以促进溶解。本文所用的术语″浆液″指游离碱I或其盐的饱和溶液，其也可含有额外量的游离碱I或其盐，在指定温度得到游离碱I或其盐与溶剂的非均相混合物。就此而言合适的溶剂包括例如极性非质子性溶剂及极性质子性溶剂，及两种或两种以上本文所披露的溶剂的混合物。
可将晶种加至任意结晶混合物以促进结晶。对于技术人员显而易见的是，将添加晶种用作对特定晶形生长进行控制的方法或对结晶产物粒度分布进行控制的方法。因此，如例如在″Programmed cooling of batch crystallizers，″J.W.Mullin及J.Nyvlt，Chemical Engineering Science(1971)26：369-377中所述那样，所需晶种量的计算取决于可用晶种的尺寸及所需要的产物平均粒径。一般而言，需要小尺寸的晶种以有效地对晶体的批量生长进行控制。小尺寸的晶种可通过对大晶体进行筛分、研磨或微粒化或通过对溶液进行微结晶而生成。应注意对晶体进行研磨或微粒化不会导致所需晶形在结晶度上的任何改变(即变成非晶形或其它多晶形物)。
可在真空中对冷却的混合物进行过滤，并可用合适的溶剂(如冷的重结晶溶剂)对分离的固体进行洗涤，并在氮气净化条件下进行干燥以得到所需晶形。该分离的固体可用合适的光谱或分析技术加以分析，例如SSNMR、DSC、PXRD等，以确保形成产物的优选晶形。基于在结晶步骤中使用的游离碱I的重量，制备出来的所得晶形的重量通常大于约70重量％分离产率，但优选大于90重量％。若需要，可对该产物进行共研磨或使其通过筛网以对产品进行去块。
可从制备游离碱I的最终处理步骤的反应介质直接制备晶形。例如，这可通过以下方法实现：在最终处理步骤中使用游离碱I可从中结晶的溶剂或溶剂混合物。或者，可通过蒸馏或溶剂添加技术获得晶形。用于此目的的合适溶剂包括本文所述这些溶剂中的任意一种，包括质子性极性溶剂例如醇类及非质子性极性溶剂例如酮类。
根据通用的操作方法，可对反应混合物进行过滤以除去任何不需要的杂质、无机盐等，随后用反应或结晶溶剂进行洗涤。可对所得溶液进行浓缩以除去过量溶剂或气态组分。若使用蒸馏，则所收集馏出物的最终量可能出现变化，这取决于处理因素，其包括例如容器尺寸、搅拌性能等。根据通用的操作方法，在进行溶剂置换前可将反应溶液蒸馏至约{馏分(1/10)}初始体积。可根据标准处理技术对该反应进行取样和化验，以测定反应程度及产物的重量％。若需要，则可添加或除去额外反应溶剂，以优化反应浓度。优选地，将最终浓度调整为约50重量％，其通常为产生浆液的点。
优选将溶剂直接加至反应容器而不对反应混合物进行蒸馏。出于此目的的优选溶剂为最终掺入到如上所述的晶格中的溶剂，所述晶格与溶剂交换相关。尽管最终浓度可根据所需纯度、收集率等而变化，但溶液中游离碱I的最终浓度优选为约4％至约7％。在添加溶剂后，可对该反应混合物进行搅拌且同时加热。通过举例说明，可将该反应混合物搅拌约1小时，同时加热至约70℃。优选对该反应进行热过滤且用反应溶剂、所添加的溶剂或其组合物中的任一种进行洗涤。可将晶种加至任意结晶溶液以引起结晶。
可通过使用本领域技术人员所知的多种分析技术，将本文所述的多种形式彼此区分。这些技术包括但不限于固态核磁共振(SSNMR)光谱、X-射线粉末衍射(PXRD)、差示扫描量热(DSC)和/或热重分析(TGA)。
本领域技术人员应理解，可得到的X-射线衍射图具有测量误差，测量误差取决于所使用测量条件。特别是，众所周知X-射线衍射图中的强度可取决于所使用测量条件及晶体形状或形态而波动。应进一步理解，相对强度也可取决于实验条件而变化，因此不应考虑强度的准确等级。此外，常规X-射线衍射图的衍射角的测量误差通常为约0.2％或以下，优选为约0.1％(如下文中所讨论的)，且应将该测量误差的程度考虑成与上述衍射角相关。因此，应理解本发明的晶形不限于所提供的X-射线衍射图与本文所公开的附图中描绘的X-射线衍射图完全相同的晶形。所提供的X-射线衍射图与附图中所公开的X-射线衍射图大体相同的任何晶形都在本发明的范围中。确定X-射线衍射图大体相同的能力在本领域技术人员的能力范围内。
在执行制备游离碱I的盐酸盐的N-1型晶体的优选方法时，将游离碱I悬浮在有机溶剂中，该溶剂优选为四氢呋喃(THF)，但也可使用其它有机溶剂，例如N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、丙酮、乙醇、DMF和丙酮，或乙腈。所使用游离碱I的量处于每10毫升有机溶剂约0.4至约1.2克游离碱的范围内，优选为每10毫升有机溶剂约0.5至约1.0克游离碱。当丙酮与DMF一同使用时，所使用的丙酮与DMF的体积比应在约0.3∶1至约1∶1的范围内，优选为约0.4∶1至约0.6∶1。
将盐酸水溶液(以重量计约30至约40％HCl，优选为以重量计约35至约38％HCl)加至游离碱I的悬浮液，后者优选转化为澄清溶液。盐酸(HCl)与游离碱的摩尔比处于约1∶1至约5∶1的范围内，优选为约1.3∶1至约2.2∶1。
将由游离碱I的N-1型盐酸盐的晶体形成的晶种加至所得HCl盐溶液，其中所用N-1型晶体的晶种的量与起始游离碱I的摩尔比处于约0.001∶1至约0.2∶1范围内，优选为约0.01∶1至约0.05∶1。该溶液由此形成浆液，将其搅拌约5至约15小时、优选约5至约10小时，过滤，用THF或上述其它有机溶剂洗涤，在真空中干燥成游离碱I的HCl盐的N-1型晶体。
在执行制备游离碱I的盐酸盐的N-1型晶体的晶种的方法时，将游离碱I悬浮在有机溶剂中，该溶剂优选为四氢呋喃(THF)，但也可使用其它有机溶剂，例如乙腈。所使用游离碱I的量处于每10毫升有机溶剂约0.4至约1克游离碱的范围内，优选为每10毫升有机溶剂约0.5至约0.6克游离碱。
将盐酸水溶液(以重量计约30至约40％HCl，优选为以重量计约35至约38％HCl)加至游离碱I的悬浮液，后者优选转化为澄清溶液。盐酸与游离碱的摩尔比(HCl)处于约1∶1至约4∶1的范围内，优选为约1.3∶1至约2.8∶1。
该悬浮液变澄清，且在20至25℃将所得溶液搅拌约5至约15小时优选约5至约10小时、过滤、用THF或上述其它有机溶剂洗涤，在真空中干燥，得到游离碱I的HCl盐的N-1型晶体的晶种。
在执行制备游离碱I的甲磺酸盐的N-1型晶体的优选方法时，将游离碱I溶解在有机溶剂中，该溶剂优选为N，N-二甲基甲酰胺(DMF)，但也可使用其它有机溶剂，例如DMF/丙酮、异丙醇(IPA)、乙腈、THF、甲基乙基酮(MEK)、MTBE、甲苯或乙醇。所使用游离碱I的量处于每10毫升有机溶剂约1至约5克游离碱的范围内，优选为每10毫升有机溶剂约1.1至约4克游离碱。
将甲磺酸加至游离碱I的溶液。甲磺酸与游离碱的摩尔比处于约11至约21的范围内，优选为约1.1∶1至约1.3∶1。
将丙酮或其它有机溶剂例如甲基乙基酮(MEK)加至所得甲磺酸盐溶液，以使该有机溶剂与DMF的体积比处于约0.5∶1至约2∶1的范围内，优选为约1∶1至约1.7∶1。将由游离碱I的N-1型甲磺酸盐的晶体形成的晶种加至所得溶液，所用N-1型晶体的晶种的量与起始游离碱I的摩尔比处于约0.001∶1至约0.2∶1范围内，优选为约0.01∶1至约0.05∶1。该溶液由此形成浆液，将其搅拌约5至约15小时优选约5至约10小时、过滤、用丙酮或上述其它有机溶剂洗涤，在真空中干燥成游离碱I的甲磺酸盐的N-1型晶体。
在执行制备游离碱I的甲磺酸盐的N-1型晶体的晶种的优选方法时，将游离碱I悬浮在有机溶剂中，该溶剂优选为DMF/丙酮或DMF，但也可使用其它有机溶剂，例如乙酸乙酯、乙腈、异丙醇或乙醇。所使用游离碱I的量处于每10毫升有机溶剂约0.4至约0.8克游离碱的范围内，优选为每10毫升有机溶剂约0.5至约0.6克游离碱。
将甲磺酸加至游离碱I的悬浮液。甲磺酸与游离碱的摩尔比处于约1∶1至约3∶1的范围内，优选为约1.3∶1至约2.0∶1。
该悬浮液变澄清，在20至25℃将所得溶液搅拌约5至约15小时优选约5至约10小时、过滤、用乙醇、异丙醇或上述其它有机溶剂洗涤，在真空中干燥成游离碱I的甲磺酸盐的N-1型晶体的晶种。
在执行制备游离碱I的盐酸盐的N-4型晶体的优选方法时(使用反向添加方式，使用甲酸与丙酮或甲酸与MEK)，将在甲酸与丙酮或甲酸与甲基乙基酮(MEK)中浆化的游离碱I加至盐酸水溶液。所使用游离碱I的量处于每10毫升甲酸-丙酮或甲酸-MEK中约1至约5克游离碱的范围内，优选为每10毫升甲酸-丙酮或甲酸-MEK中约1.8至约2.5克游离碱。
该盐酸水溶液包含以重量计约15至约40％HCl，优选为以重量计约35至约38％HCl。
所用甲酸与丙酮或MEK的体积比处于约0.2∶1至约1∶1的范围内，优选为约0.35∶1至约0.6∶1。
盐酸(HCl)与游离碱I的摩尔比处于约1∶1至约2.5∶1的范围内，优选为约1.2∶1至约1.6∶1。
该反应混合物优选转化为澄清溶液，对其进行过滤以除去不溶性固体。
将所得HCl盐溶液滤液加至由游离碱I的盐酸盐的N-4型晶体形成的晶种的丙酮浆液或MEK浆液，同时在约10℃至约20℃温度范围内搅拌，所用N-4型晶体的晶种的量与起始游离碱I的摩尔比处于约0.0005∶1至约0.2∶1范围内，优选为约0.005∶1至约0.05∶1。将该混合物搅拌约1至约72小时优选约4至约18小时、过滤、用丙酮或MEK洗涤，在真空中干燥，得到游离碱的HCl盐的N-4型晶体。
在执行制备游离碱I的盐酸盐的N-4型晶体的优选方法时(使用常规添加方式及甲酸-丙酮或甲酸-MEK)，在甲酸-丙酮或甲酸-MEK中对游离碱进行搅拌，向其添加盐酸水溶液。所使用游离碱I的量处于每10毫升甲酸-丙酮或甲酸-MEK中约1至约4克游离碱的范围内，优选为每10毫升甲酸-丙酮或甲酸-MEK中约1.5至约2.5克游离碱。
该盐酸水溶液含有以重量计约15至约40％HCl，优选为以重量计约35至约38％HCl。
所用甲酸与丙酮或MEK的体积比处于约0.2∶1至约1∶1的范围内，优选为约0.35∶1至约0.6∶1。
盐酸(HCl)与游离碱的摩尔比处于约1.1∶1至约2.5∶1的范围内，优选为约1.2∶1至约1.6∶1。
该反应混合物优选转化为澄清溶液，对其进行过滤以除去不溶性固体。
向所得HCl盐溶液添加由游离碱I的N-4型盐酸盐的晶体形成的晶种及丙酮或MEK，同时搅拌，所用晶种的量与起始游离碱的摩尔比处于约0.0005∶1至约0.2∶1范围内，优选为约0.005∶1至约0.05∶1，所用丙酮或MEK的量与用于溶解游离碱I的丙酮或MEK的体积比处于约15∶1至约5∶1范围内，优选为约12∶1至约10∶1。
或者，可将游离碱的甲酸与丙酮溶液或甲酸与MEK溶液加至丙酮(或MEK)/HCl/N-4晶种混合物池，以使N-4型的小晶体沉淀。
在约10至约25℃温度将该混合物搅拌约2小时至约72小时优选约4至约16小时，过滤，用丙酮或MEK洗涤滤饼，将滤饼在真空中干燥成游离碱的HCl盐的N-4型晶体。
在执行制备游离碱I的盐酸盐的N-4型晶体的优选方法时，使用N，N-二甲基乙酰胺(DMA)-丙酮或DMA-MEK系统，在约50至约70℃温度范围内优选为约60至约65℃将游离碱溶解在DMA中，向其中添加盐酸水溶液。
该盐酸水溶液含有以重量计约30至约40％HCl，优选为以重量计约35至约38％HCl。
向所得HCl-游离碱I溶液添加由游离碱I的N-4型盐酸盐的晶体形成的晶种及丙酮或MEK。所用N-4型晶体的晶种与起始游离碱的摩尔比处于约0.001∶1至约0.2∶1的范围内，优选为约0.01∶1至约0.05∶1。
或者，可将游离碱I的溶液加至丙酮(或MEK)/HCl/N-4晶种池，以使N-4型小晶体沉淀。
所用DMA与丙酮或MEK的体积比处于约0.1∶1至约0.3∶1的范围内，优选为约0.15∶1至约0.25∶1。
在约10至约25℃温度，将所得混合物搅拌约5至约15小时优选约5至约6小时，过滤并将湿滤饼在真空中干燥成游离碱I的N-4型HCl盐。
所使用游离碱的量处于每10毫升DMA中约1至约4克游离碱的范围内，优选为每10毫升DMA-丙酮或DMA-MEK中约2至约3克游离碱。
盐酸(HCl)与游离碱的摩尔比处于约1∶1至约1.8∶1的范围内，优选为约1.2∶1至约1.6∶1。
在执行制备游离碱I的盐酸盐的N-4型晶体的优选方法时，使用DMF-丙酮或DMF-MEK系统，将游离碱I悬浮在DMF中，并将盐酸水溶液加至所得浆液。所用游离碱的量处于每10毫升DMF中约1至约5克游离碱的范围内，优选为每10毫升DMF中约1.5至约2.5克游离碱。
该盐酸水溶液含有以重量计约15至约40％HCl，优选为以重量计约35至约38％HCl。
盐酸(HCl)与游离碱的摩尔比处于约1∶1至约3∶1的范围内，优选为约1.1∶1至约2.2∶1。
该反应混合物优选转化为澄清溶液。向所得HCl盐溶液中添加丙酮或MEK，且将由游离碱的N-4型盐酸盐的晶体形成的晶种加至该溶液，或将在丙酮中呈浆液的游离碱的N-4型盐酸盐的晶种加至HCl溶液，其中所用晶种的量与起始游离碱的摩尔比处于约0.0005∶1至约0.2∶1范围内，优选为约0.005∶1至约0.05∶1。该溶液由此形成浆液，在约10至约25℃温度将其搅拌约1至约72小时优选约4至约16小时、过滤、用丙酮或MEK洗涤，在约40至约45℃温度将湿滤饼在真空中干燥成游离碱的HCl盐的N-4型晶体。
所用DMF与丙酮或MEK的体积比处于约1∶1至约5∶1的范围内，优选为约1.5∶1至约2∶1。
在执行制备游离碱I的盐酸盐的N-4型晶体的优选方法时(使用常规添加方式及乙醇或丙酮或THF)，将游离碱悬浮在有机溶剂中，将盐酸水溶液加至该有机溶剂，所述有机溶剂为乙醇、丙酮或THF。所使用游离碱I的量处于每10毫升有机溶剂约0.5至约2克游离碱的范围内，优选为每10毫升有机溶剂约0.6至约1.2克游离碱。
该盐酸水溶液含有以重量计约30至约40％HCl，优选为以重量计约35至约38％HCl。
盐酸(HCl)与游离碱的摩尔比处于约1∶1至约4∶1的范围内，优选为约1.2∶1至约2.5∶1。
该反应混合物优选转化为澄清溶液，对其进行过滤以除去不溶性固体。
向所得HCl盐溶液添加由游离碱I的N-4型盐酸盐的晶体形成的晶种，同时搅拌，所使用晶种的量与起始游离碱的摩尔比处于约0.001∶1至约0.2∶1范围内，优选为约0.01∶1至约0.05∶1。将该混合物搅拌约15至约200小时优选约15至约80小时、过滤、用乙醇、丙酮或THF洗涤滤饼，将该滤饼在真空中干燥成游离碱的HCl盐的N-4型晶体。
在使用N-1型晶体执行制备游离碱I的盐酸盐的N-4型晶体的优选方法时，在约30至约50℃温度范围内优选为约35至约45℃，使N-1型的游离碱I的盐酸盐在有机溶剂中形成浆液，所述有机溶剂为乙腈、THF、乙醇或丙酮。
将游离碱I的N-4型盐酸盐的晶体的晶种加至该浆液。所用N-4型晶体的晶种与起始游离碱的摩尔比处于约0.001∶1至约0.2∶1范围内，优选为约0.01∶1至约0.05∶1。
在约25至约45℃温度将所得浆液搅拌约90至约120小时优选约90至约100小时，过滤并用THF或丙酮洗涤湿滤饼，在真空中干燥成游离碱I的N-4型HCl盐。
所使用游离碱I的量处于每10毫升有机溶剂约0.5至约2克游离碱的范围内，优选为每10毫升有机溶剂约1至约1.5克游离碱。
在执行制备游离碱I的盐酸盐的N-4型晶体的晶种的优选方法时，将游离碱I悬浮在优选为无水乙醇的有机溶剂中。所使用游离碱I的量处于每10毫升有机溶剂约0.4至约0.7克游离碱的范围内，优选为每10毫升有机溶剂约0.5至约0.6克游离碱。
将盐酸水溶液(以重量计约30至约40％HCl，优选为以重量计约35至约38％HCl)加至游离碱I的悬浮液，后者优选转化为澄清溶液。盐酸(HCl)与游离碱的摩尔比处于约1∶1至约2∶1的范围内，优选为约1.1∶1至约1.5∶1。
该悬浮液变澄清，在约20至约25℃将所得溶液搅拌约20至约40小时优选约20至约24小时，将其过滤，用乙醇或上述其它有机溶剂洗涤，在真空中干燥成游离碱I的HCl盐的N-4型晶体的晶种。
在制备N-4型晶体的本发明方法中所使用的优选溶剂体系为甲酸/MEK体系，优选使用反向添加。
使用优选实施方案能够形成所需粒度(D90＜30微米)及流动性合适以便于制造的N-4型晶体。
已发现可在DMF/丙酮、DMA/丙酮、甲酸/丙酮及甲酸/MEK溶剂系统中始终如一地获得所需游离碱I的盐酸盐的N-4型晶体。然而，取决于所使用的方式及溶剂系统，可使用本发明的多种方法以选择性形成N-1型晶体或N-4型晶体。
可使用以下反应方案制备以下结构的游离碱I(也称为酰胺I)


该中间体C通过以下步骤制备：用环丙胺使4-甲基-3-硝基苯甲酰氯与酰酰胺化，随后进行催化还原及形成盐酸盐而获得中间体C。
中间体E的制备通过以下方法开始：以乙酰乙酸乙酯与二甲基甲酰胺二甲基乙缩醛进行缩合，随后与甘氨酸乙酯盐酸盐进行缩合以获得中间体E1

碱促进中间体E1的环化生成吡咯E2

使吡咯E2转化为1-氨基吡咯E3

随后使E3与甲酰胺缩合并进行酸催化的环化生成中间体D。对D进行氯化生成中间体E。
使中间体C与中间体E偶合得到中间体F，该中间体F经水解得到中间体G。使G与丙胺偶合得到游离碱I，其经历盐形成而生成形式为N-4型或N-1型晶体的所需盐。
在2003年4月22日提交的美国申请第10/420,399号中披露以上方法的全部公开内容，该申请以引用的方式并入本文中。
用于使酯F进行所需氨解得到游离碱I的一可选择的实施方案包括以下步骤：在维持反应温度处于约55至约60℃温度范围内的同时，用正丙胺及三甲基铝处理酯F，以形成游离碱I。
用于使酯F进行直接氨解得到酰胺I的另一可选择的实施方案包括以下步骤：在维持反应温度处于约80至约90℃温度范围内的同时，用正丙胺(在2，2，2-三氟乙醇存在的情况下)及正丁基锂处理酯F以形成游离碱I。
在一可选择的实施方案中，酯F可通过与强碱及正丙胺反应而直接进行氨解形成游离碱I。
可通过使用正丙胺及优选为正丁基锂的烷基锂处理酯F而进行以上直接氨解反应，以形成游离碱I。
实用性
本发明的新型盐形式(N-1及N-4)(包括盐酸盐的N-1及N-4型及甲磺酸盐的N-1型)是p38激酶活性的选择抑性制剂，且尤其是p38α及p38β亚型的选择性抑制剂。因此，本发明的新型盐形式具有对与p38激酶活性相关的病症进行治疗的实用性。在这些病症所包括的疾病中，细胞内信号传导是通过p38，细胞因子水平由此受到调变，所述疾病特别包括与细胞因子IL-1、IL-4、IL-8及TNF-α的过度生成相关的疾病。本文所用的术语″治疗″包含应答性及预防性措施之一或两者，例如将措施设计成抑制或延迟疾病或病症的发作；使症状或疾病状态完全或部分减轻；并且/或缓解、改善、减少或治愈疾病或病症和/或其症状。当本文提到对″p-38α/β激酶″的抑制作用时，这意味着p-38α和/或p-38B激酶受到抑制。因此，提到抑制p-38α/β激酶的IC50值，这意味着该化合物具有抑制p-38α及p-38β激酶的至少一种(或两者)的效能。
鉴于其作为p-38α/β激酶抑制剂的活性，本发明的新型盐形式可用于治疗与p-38相关的病症，这些病症包括但不限于炎性疾病、自身免疫性疾病、毁坏性骨病症、增生性病症、血管生成性病症、传染性疾病、神经退化性疾病(neurodegenerative disease)及病毒性疾病。
更具体地，可使用本发明的新型盐形式治疗的特定病症或疾病包括但不限于，胰腺炎(急性或慢性)、哮喘、变态反应、成人呼吸窘迫综合征、慢性阻塞性肺病、肾小球肾炎、类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮、硬皮病、慢性甲状腺炎、格雷夫斯病(Graves′disease)、自身免疫性胃炎、糖尿病、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性嗜中性白血球减少症、血小板减少症、异位性皮肤炎、慢性活动性肝炎、重症肌无力、多发性硬化症、炎性肠病、溃疡性结肠炎、克隆病(Crohn′s disease)、银屑病、移植物抗宿主病、内毒素所诱发的发炎性反应、结核病、动脉粥样硬化、肌肉变性(muscle degeneration)、恶病质、银屑病性关节炎、赖特尔综合症(Reiter′s syndrome)、痛风、创伤性关节炎、风疹性关节炎、急性滑膜炎、胰岛β细胞病；其特征为大量中性粒细胞浸润的疾病；类风湿性脊椎炎、痛风性关节炎及其它关节炎病症、脑型疟疾、慢性炎性肺病(chronic pulmonary inflammatory disease)、硅肺病、肺结节病(pulmonary sarcoidosis)、骨再吸收病、同种异体移植物排斥、归因于感染的发热及肌痛、继发于感染的恶病质(cachexia secondary to infection)、骨髓生成(myeloid formation)、瘢痕组织形成、溃疡性结肠炎、轻度瘫痪(pyresis)、流行性感冒、骨质疏松症、骨关节炎及多发性骨髓瘤相关性骨质病症、急性髓细胞性白血病(acute myelogenous leukemia)、慢性髓细胞性白血病、转移性黑素瘤、卡波西肉瘤(Kaposi′s sarcoma)、多发性骨髓瘤、败血症、败血症性休克及志贺氏细菌性痢疾(Shigellosis)；阿尔兹海默病、帕金森病(Parkinson′sdisease)、由跌打损伤引发的脑缺血或神经退化性疾病；血管生成性病症包括实体瘤、眼血管新生(ocular neovasculization)及婴儿血管瘤；病毒性疾病包括急性肝炎感染(包括甲型肝炎(hepatitis A)、乙型肝炎及丙型肝炎)、HIV感染及CMV视网膜炎、AIDS、ARC或恶性肿瘤及疱疹；中风、心肌缺血、中风心脏病发作的缺血、器官缺氧(organ hypoxia)、血管增生(vascular hyperplasia)、心脏及肾脏再灌注损伤、血栓症、心脏肥厚、凝血酶诱发血小板凝集、内毒素性血症和/或中毒性休克综合征及与前列腺素内过氧化酶合成酶-2相关的病症。
此外，本发明的新型盐p38抑制剂抑制可诱发促炎蛋白(pro-inflammatoryprotein)的表达，该蛋白质例如为前列腺素内过氧化物合成酶-2(PGHS-2)，也称为环氧化酶-2(COX-2)。因此，其它p38相关病症包括水肿、痛觉缺失、发热及疼痛，例如神经肌肉痛、头痛、由癌症引发的疼痛、牙痛及关节痛。本发明的盐形式也可用于治疗兽的病毒性感染，如慢病毒感染，包括但不限于马感染性贫血病毒，或逆转录病毒，包括猫免疫缺损病毒、牛免疫缺损病毒及犬免疫缺乏病毒。
当本文使用术语″p38相关病症″或″p38相关疾病及病症″时，其都意欲包含以上确定的似乎详细重复的所有病症，以及受p38激酶活性影响的任何其它病症。
本发明因此提供用于治疗该病症的方法，其包含将有效量的至少一种本发明的新型盐形式给予需要治疗的患者。治疗p38激酶相关病症的方法可包括将本发明的新型盐形式单独给予或彼此组合给予和/或与其它可用于治疗这些病症的合适治疗剂组合给予。这些其它治疗剂的实例包括如美国专利第4,200,750号中所公开的皮质甾类、咯利普兰(rolipram)、钙感光蛋白(calphotin)、CSAIDs、4-取代咪唑并[1，2-A]喹噁啉；白介素-10、糖皮质激素、水杨酸酯(盐)、氧化亚氮及其它免疫抑制剂；核转位抑制剂，例如脱氧精胍菌素(DSG)；非甾体抗炎药(NSAIDs)，例如布洛芬(ibuprofen)、塞来考昔(celecoxib)及罗非考昔(rofecoxib)；类固醇，例如泼尼松(prednisone)或地塞米松(dexamethasone)；抗病毒剂，例如阿巴卡韦(abacavir)；抗增殖剂，如甲胺喋呤(methotrexate)、来氟米特(leflunomide)、FK506(他克莫司(tacrolimus)、普乐可复(Prograf))；细胞毒药物，例如硫唑嘌呤(azathiprine)及环磷酰胺；TNF-α抑制剂，例如替尼达普(tenidap)、抗-TNF抗体或可溶性TNF受体，及雷帕霉素(rapamycin)(西罗莫司(sirolimus)或雷帕鸣(Rapamune))或其衍生物。
例如，当与本发明的新型盐形式组合使用时，上述其它治疗剂可以Physicians′Desk Reference(PDR)中所说明的量使用，或以本领域技术人员所确定的量使用。在本发明的方法中，这些其它治疗剂可在给予本发明的化合物之前、同时或之后给予。
本发明也提供药物组合物，其含有如上文所述能治疗p38激酶相关病症的本发明的新型盐形式，这些病症包括TNF-α、IL-1和/或IL-8介导的病症。
本发明的组合物可任选含有上述的其它治疗剂，并可通过以下方法配制：根据药物配制领域技术人员所熟知的技术，使传统的固体或液体载体或稀释剂以及类型适合于所需给药模式的药物添加剂(例如赋形剂、粘合剂、防腐剂、稳定剂、香料等)。
本发明的新型盐形式可通过任何适用于待治疗病症的方法给予，其可取决于对部位特定性治疗和所给药物量的需要。尽管已考虑其它给药模式，但对于皮肤相关疾病而言，局部给药通常是优选的，对于癌症或癌前病症而言，全身治疗是优选的。例如，化合物可经如下方式给予：口服给药，例如以片剂、胶囊、颗粒、粉末或包括糖浆的液体制剂形式；局部给药，例如以溶液、悬浮液、凝胶或软膏形式；舌下给药；口腔给药(bucally)；非经肠给药，例如通过皮下、静脉内、肌肉内或胸骨内注射或输注技术(例如以无菌注射水溶液或悬浮液或非水溶液或悬浮液形式)；经鼻给药，例如吸入喷雾剂；局部给药，例如以乳膏或软膏形式；经直肠给药，例如以栓剂形式；或以脂质体形式给药。可给予含有无毒、可药用载体或稀释剂的剂量单位制剂。化合物可以适于速释或缓释的形式给予。可用合适的药物组合物实现速释或缓释，或具体地，就缓释而言可用如皮下植入物或渗透泵那样的装置实现。
优选的是片剂。最优选的是含有游离碱I的N-4型盐酸盐的片剂。
用于局部给药的示例性组合物包括局部使用的载体，例如PLASTIBASE(用聚乙烯胶凝的矿物油)。
用于口服给药的示例性组合物包括悬浮液和速释片，这些悬浮液可含有例如适于大量给药的微晶纤维素、作为悬浮剂的褐藻酸或褐藻酸钠、作为粘度增强剂的甲基纤维素及本技术领域中已知的甜味剂及调味剂；这些速释片可含有例如微晶纤维素、磷酸二钙、淀粉、硬脂酸镁和/或乳糖和/或本技术领域中已知的其它赋形剂、粘合剂、增充剂、崩解剂、稀释剂及润滑剂。本发明的化合物也可通过以下方式给予：例如以模制、压制或冷冻干燥的片剂，进行舌下和/或口腔给药。示例性组合物可包括速溶稀释剂，例如甘露醇、乳糖、蔗糖和/或环糊精。这些制剂中也包括高分子量赋形剂，例如纤维素(AVICEL)或聚乙二醇(PEG)；有助于粘膜附着的赋形剂，例如羟丙基纤维素(HPC)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、羧甲基纤维素钠(SCMC)和/或马来酸酐共聚物(例如GANTREZ)；及用于控制释放的物质，例如聚丙烯酸共聚物(例如CARBOPOL 934)。出于易于制造及使用的目的，也可添加润滑剂、助流剂、香料、着色剂及稳定剂。
用于鼻气雾剂(nasal aerosol)或吸入给药的示例性组合物包括溶液，其可含有例如苯甲醇或其它合适的防腐剂、用于增强吸收和/或生物利用度的吸收促进剂和/或本领域中已知的其它增溶剂或分散剂。
用于非经肠给药的示例性组合物包括可注射溶液或悬浮液，其可含有例如合适的无毒、非经肠可接受的稀释剂或溶剂，例如甘露醇、1，3-丁二醇、水、林格溶液(Ringer′s solution)、等渗氯化钠溶液、或其它合适的分散剂或湿润剂及悬浮剂，包括合成甘油单酯或甘油二酯及包括油酸的脂肪酸。
用于直肠给药的示例性组合物包括栓剂，其可含有例如合适的无刺激性的赋形剂，例如可可脂、合成的甘油酯或聚乙二醇，这些赋形剂在常温为固体但在直肠腔内液化和/或溶解以释放出药物。
本发明的新型盐形式的有效量可由本领域技术人员确定，且其所包括的用于哺乳动物的示例性剂量为每日约0.05～100毫克/公斤体重的活性化合物，其可以单次剂量或以各个分份剂量例如每日1至4次的形式给予。应理解，对于任何特定对象而言，给药的具体剂量水平及频率皆可变化，且取决于多种因素，包括所使用的具体化合物的活性、该化合物的代谢稳定性及作用时长、对象的种属、年龄、体重、一般健康、性别及饮食、给药模式及时间、排泄率、药物合用及具体病症的严重程度。治疗的优选对象包括动物，最优选为哺乳类，例如人类及家畜类，例如狗、猫、马等。因此，当本文使用术语″对象″时，该术语意指包括所有受p38酶水平介导影响的对象，最优选为哺乳类。
本发明的新型盐形式包括本文实施例中所述化合物，已在以下所述的一种或多种检测中进行测试并已显示出作为p38α/β酶及TNF-α抑制剂的活性。
生物检测
p38激酶的生成
通过PCR对人p38α、p38β及p38γ同功酶的cDNA进行克隆。在pGEX表达载体(Pharmacia)中，对这些cDNA进行亚克隆。GST-p38融合蛋白在E.Coli中得以表达并通过使用谷胱甘肽琼脂糖的亲和色谱法从细菌沉淀中纯化。通过与组成性活性MKK6一起孵育，使p38融合蛋白活化。通过亲和色谱法将活性p38与MKK6分离。根据Raingeaud等人的[Mol.Cell.Biol，1247-1255(1996)]得到组成性活性MKK6。
通过LPS刺激的PBMC制备TNF-α
从健康志愿者获得肝素化人类全血。通过Ficoll-Hypaque密度梯度离心分离，从人类全血纯化外周血单核细胞(PBMC)，并以5×106/毫升的浓度，将其重新悬浮在检测介质(含有10％胎牛血清的RPMI介质)中。在室温将50μl细胞悬浮液与50μl测试化合物(在含有0.2％DMSO的检测介质中为4倍浓度)在96孔组织培养板中孵育5分钟。随后将100μl的LPS(200纳克/毫升原料)加至该细胞悬浮液，并在37℃将该板孵育6小时。孵育之后，将培养介质收集并在-20℃储存。使用标准ELISA试剂盒(Pharmingen-San Diego，CA)对介质中的TNF-α浓缩物进行定量。通过线性回归分析对TNF-α浓度及测试化合物的IC50值(以50％抑制LPS刺激的TNF-α生成的化合物浓度)进行计算。
p38检测
在V-底96-孔板中进行该检测。最终检测体积为60μl，其由以下组分制备：3份20μl酶添加物、底物(MBP及ATP)及检测缓冲剂(50mM Tris pH 7.5、10mM MgCl2、50mM NaCl及1mM DTT)中的测试化合物。将用细菌表达的活化p38与测试化合物预孵10分钟，随后开始与底物反应。在25℃将该反应孵育45分钟，通过向每份样品添加5μl 0.5M EDTA而终止反应。使用SkatronMicro96细胞收集器(Cell Harvester)(Skatron，Inc.)将反应混合物抽吸至预湿的滤垫上，随后用PBS洗涤。然后将该滤垫在微波炉中干燥1分钟，用MeltilLexA闪烁蜡(Wallac)处理，并在Microbeta闪烁计数器1450型(Wallac)上计数。使用Prizm(GraphPadSoftware)，通过非线性最小平方回归，对抑制数据进行分析。该检测中试剂的最终浓度为ATP为1μM、[γ-33P]ATP为3nM、MBP(Sigma，#M1891)为2微克/孔、p38为10nM及DMSO为0.3％。
通过LPS刺激的小鼠制备TNF-α
对小鼠(Balb/c雌性，6-8周龄，Harlan实验室；n＝8/治疗组)经腹膜内注射悬浮于无菌食盐水中的50ug/kg脂多醣(LPS；E coli菌株0111：B4，Sigma)。90分钟后，通过吸入CO2:O2使小鼠镇静，并获取血液样品。通过商品化ELISA检测，根据制造商的说明书(R&D Systems，Minneapolis，MN)，将血清分离并对TNF-α浓度进行分析。
在注射LPS之前多次口服给予测试化合物。在存在多种载体或增溶剂的情况下，这些化合物以悬浮液或溶液的形式服用。
缩写
为便于参考，在本文中，包括制备方法及下列实施例，使用以下缩写：
Ph＝苯基
Bz＝苄基
t-Bu＝叔丁基
Me＝甲基
Et＝乙基
Pr＝丙基
Iso-P＝异丙基
MeOH＝甲醇
EtOH＝乙醇
EtOAc＝乙酸乙酯
Boc＝叔丁氧基羰基
DCM＝二氯甲烷
DCE＝1，2-二氯乙烷
DMA＝N，N-二甲基乙酰胺
DMF＝N，N-二甲基甲酰胺
DMSO＝二甲亚砜
DTT＝二硫苏糖醇
TFA＝三氟乙酸
THF＝四氢呋喃
HATU＝O-(7-氮杂苯并三唑-1-基-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓六氟磷酸盐
KOH＝氢氧化钾
K2CO3＝碳酸钾
POCl3＝磷酰氯
EDC或EDCI＝1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐
DIPEA＝二异丙基乙胺
HOBt＝1-羟基苯并三唑水合物
m-CPBA＝间氯过苯甲酸
NaH＝氢化钠
NaOH＝氢氧化钠
Pd＝钯
Pd/C＝碳载钯
min＝分钟
μL＝微升
ng＝纳克
μM＝微摩尔浓度
nM＝纳摩尔浓度
mM＝毫摩尔浓度
L＝升
ml或mL＝毫升
μL或μl＝微升
g＝克
mg＝毫克
mol＝摩尔
mmol＝毫摩尔
meq＝毫当量
RT或rt室温(20至25℃)
ret.t.＝HPLC保留时间(分钟)
sat或sat′d＝饱和的
aq.＝含水的
TLC＝薄层色谱法
HPLC＝高效液相色谱法
RP HPLC＝反相HPLC
LC/MS＝高效液相色谱/质谱法
MS＝质谱法
NMR＝核磁共振
mp＝熔点
RH＝相对湿度
在实施例中，与HPLC数据相关的名称反映以下条件：
a.柱：YMC ODSA S-5 5u C18 4.6×50mm；溶剂：溶剂A＝10％MeOH/90％水/0.1％THF，及溶剂B＝90％MeOH/10％水/0.1％THF；方法：4分钟梯度；
b.柱：YMC s5 ODS 4.6×50mm；溶剂：溶剂A＝10％MeOH/90％水/0.2％H3PO4，及溶剂B＝90％MeOH/10％水/0.2％H3PO4；方法：4分钟梯度。
实施例
现通过以下可执行的实施例进一步描述本发明，这些可执行的实施例为本发明的优选实施例。在C18反相(RP)柱上，使用水MeOH混合物并以TFA作为缓冲溶液，进行HPLC纯化。这些实施例是说明性而非限制性的。可存在属于所附权利要求书限定的本发明的主旨及范围内的其它实施方案。
实施例1

步骤1：

在0℃将环丙胺(4.0毫升，57.7毫摩尔，1.7当量)逐滴加至3-氨基-4-甲基苯甲酸(5.12克，33.9毫摩尔，1.0当量)、EDC(9.97克，52.0摩尔，1.5当量)及4-(二甲氨基)吡啶(0.89克，7.3毫摩尔，0.2当量)的DMF(100毫升)溶液。搅拌15分钟后，将冷水浴除去并在室温将反应混合物搅拌过夜。在50℃减压除去挥发物。将残余物用水稀释并用DCM萃取(3次)。合并有机层，用硫酸钠干燥，并在真空中浓缩，得到油状物。通过使用DCM∶MeOH(20∶1)的硅胶色谱，得到化合物(1)(6.98克，108％产率)，为黄色油状物。HPLC保留时间＝0.637分钟、LC/MS(M+H)+＝191.09+。
步骤2：

a.

在室温将NaH或KOtBu(1.2当量)加至3-甲基-1-吡咯-2，4-二乙基酯(100毫克)(J.Heterocyclic Chem.，34卷(1997)，第177-193页；Heterocycles，50卷(1999)，第853-866页；Synthesis(1999)，第479-482页；大体而言，吡咯类的合成通过以下文献描述：由本文所引用的共同转让的专利文件及M.Suzuki、M.Miyoshi及K.Matsumoto，J.Org.Chem.1974，39(1980)的步骤)的DMF(0.44M)溶液。将该溶液搅拌30-45分钟。通过注射器添加在醚中的氯胺(约0.15M，1当量)。将该溶液搅拌1.5小时，或直至经HPLC分析判定起始物质已转化为产物。随后用Na2S2O3水溶液终止反应，并用EtOAc或Et2O进行萃取。该有机萃取物用水及盐水洗涤，随后用硫酸钠干燥。获得化合物a，产率＞90％。根据Nunn，J.Chem.Soc.(C)，(1971)第823页的方式制备醚中的NH2Cl。
b.

将乙酸(以重量计20％)加至化合物a(2克)的甲酰胺(8毫升)溶液，并在120℃将该混合物加热24小时。将该反应混合物冷却并添加水(32毫升)以使产物沉淀。通过过滤收集固体，并将其用EtOAc洗涤，得到化合物b(90％)，为黄色固体。
c.

在室温将磷酰氯(1.90毫升，20.4毫摩尔)及N，N-DIPEA(2.37毫升，13.6毫摩尔)相继逐滴加至化合物b氧代吡咯并三嗪(3.00克，13.6毫摩尔)的甲苯(45毫升)悬浮液。将所得混合物加热回流36小时，使其冷却至室温，随后将其倾入饱和碳酸氢钠溶液(150毫升)与甲苯(60毫升)的冰冷混合物中。将有机层分离并用甲苯(3×50毫升)将水层萃取。用饱和碳酸氢钠溶液及盐水洗涤合并的萃取物，并用无水MgSO4干燥。在真空中蒸发溶剂，得到化合物c(3.26克，100％产率)，为黄色固体。
步骤3

在室温将步骤1的产物(1.60克，8.40毫摩尔，1.6当量)及步骤2的产物(1.30克，5.40毫摩尔，1.0当量)的DMF(13毫升)溶液搅拌过夜。添加水并通过过滤收集沉淀物，将其用水洗涤，干燥。用二乙醚研磨，得到实施例1的标题化合物(1.70克，80％产率)，为灰白色固体。HPLC保留时间＝3.190分钟；LC/MS(M+H)+＝394.31+。
实施例1A

在60℃将实施例1标题化合物(0.86克，2.20毫摩尔，1.0当量)的THF(4.0毫升)溶液及1N NaOH水溶液(9.0毫升，4.1当量)搅拌过夜。冷却至室温后，将该反应混合物在真空中浓缩但不干燥。在0℃将1N盐酸水溶液加至该溶液，直至其为酸性，收集并干燥沉淀物，得到粗实施例1A标题化合物(0.51克，64.0％产率)。HPLC保留时间＝2.400分钟；LC/MS(M+H)+＝366.06+。随后用EtOAc将滤液萃取(3次)，并合并有机层、用硫酸钠干燥，在真空中浓缩，得到实施例1A化合物(0.035克，4.4％产率)，其为制备游离碱I中的中间体化合物。
实施例2

在室温将实施例1A标题化合物(0.026克，0.071毫摩尔，1.0当量)、EDC(0.021克，0.11毫摩尔，1.5当量)、HOBt(0.015克，0.11毫摩尔，1.5当量)、正丙胺(0.015毫升，0.15毫摩尔，2.1当量)及DIPEA(0.040毫升，0.23毫摩尔，3.2当量)的DMF(0.20毫升)溶液震荡过夜。添加水(1毫升)并通过过滤收集沉淀物，将其用水洗涤，干燥，得到实施例2标题产物(0.021克，70％产率)；HPLC保留时间＝2.883分钟；LC/MS(M+H)+＝421.18+。所获得的产物为结晶游离碱I。
实施例2A

将20.0克上述原料酸(其可如实施例1A中陈述而制备)(0.055摩尔，1当量，分子量365.39)、12.0克1-[3-二甲氨基丙基]-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDAC)(0.063摩尔，1.19当量，分子量191.71)、8.9克1-羟基苯并三唑水合物(HOBT)(0.058摩尔，1.06当量，分子量153.16)及120毫升N，N-二甲基甲酰胺(DMF)(6毫升/克)装入圆底烧瓶。在18-23℃将该浆液搅拌，其缓慢变为混浊溶液。在18-23℃搅拌该反应混合物直至原料酸小于或等于0.6％(HPLC的相对面积百分比)。随后将4.8克正丙胺(0.081摩尔，1.48当量，分子量59.11)与80毫升DMF(4毫升/克)的溶液加至反应，同时维持反应温度在35℃以下。丙胺添加完成后，在30-40℃搅拌该反应直至HOBT衍生物小于或等于0.2％(HPLC的相对面积百分比)。随后对该反应混合物进行精滤(polish filter)。随后将35毫升净化水(1.75毫升/克)加至所得游离碱I富集的反应混合物，同时保持温度为30-40℃。在30-40℃将所得浆液搅拌1-2小时。随后，在1小时以上的时间内添加205毫升净化水(10.25毫升/克)。在30-40℃将该浆液搅拌1小时，随后将其冷却至0-5℃。在0-5℃搅拌该浆液直至过滤的母液显示游离碱I的浓度小于或等于2毫克/毫升。随后将该浆液过滤，并用200毫升净化水(10毫升/克)洗涤接着用76毫升丙酮(3.79毫升/克)洗涤。在40-45℃将湿固体干燥，直至LOD小于或等于1％。将游离碱I分离，通常产率为89-95M％且纯度大于99％(HPLC的面积百分比)。
实施例3

方法A：
将正丙胺(6.5当量)的THF(20毫升/克的SM)溶液冷却至约-5℃，并用正丁基锂(6.1当量)的2.5M溶液缓慢处理。将该混合物搅拌10分钟。结束后，将实施例1化合物(1当量)的THF(14毫升/克的SM)浆液以导管引入预先形成的Li-NHPr溶液中。将该反应混合物加热至25℃并搅拌直至所有实施例1化合物都被消耗(约3小时)。在通过HPLC判定该反应完成之后，将该反应混合物冷却至约0℃并用乙酸(5毫升/克的SM)缓慢处理。随后将该浆液加热至约20℃并搅拌1小时。结束后，在真空下将溶剂蒸馏至最小体积，将浓缩的浆液用丙酮(10毫升/克的SM)和水(20毫升/克的SM)的溶液稀释。将该浆液搅拌1小时，冷却至约5℃。过滤浆液并用丙酮(5毫升/克的SM)洗涤滤饼。将该滤饼干燥，得到酰胺产物(通常为85％产率及99AP)。
方法B：
将正丙胺(20当量)的2，2，2-三氟乙醇(10毫升/克的SM)溶液用正丁基锂(1.5当量)的2.5M溶液缓慢处理。将该混合物搅拌5分钟。结束后，添加起始物质实施例1化合物(1当量)并将该反应混合物加热至90℃。将该反应混合物保持在90℃历时约24小时，然后使其冷却至约20℃。随后通过HPLC对该反应混合物进行分析。通常，分析显示仅有1.57A％的起始物质剩余。
方法C：
在20℃将正丙胺(2当量)的二氯甲烷(10毫升/克的SM)溶液用三甲基铝(4当量)的2.0M己烷溶液缓慢处理。将该混合物搅拌15分钟。结束后，添加起始物质实施例1的化合物(1当量)并将该反应混合物加热至60℃。使该反应混合物保持在60℃历时约24小时，然后使其冷却至约20℃。随后用HCl水溶液缓慢终止该反应混合物并通过HPLC进行分析。通常，分析显示具有96.8A％的酰胺产物及0.03A％的二丙基酰胺杂质。
在方法A、B及C中获得的产物各自为游离碱I的晶形。
实施例4
制备实施例2化合物的N-1型HCl盐的晶种
将50-60毫克实施例2的游离碱悬浮在1毫升THF或乙腈中。将15-30微升HCl溶液(37％水溶液)加至上述实施例2游离碱的悬浮液。该混合物转化为澄清溶液。在20℃将该溶液剧烈搅拌15小时。该溶液变混浊且转化为白色晶体浆液。将该浆液过滤并用冷THF洗涤，随后空气干燥或在40℃真空中干燥，得到白色粉末形式的产物，通过粉末X射线衍射将其鉴定为实施例2游离碱的N-1型HCl盐。
图1中显示实施例4N-1型盐酸盐的计算的、杂化的和观测的粉末X射线衍射图。
实施例5
得自THF的实施例2化合物的N-1型HCl盐
将4克实施例2游离碱悬浮在40毫升THF中。将1.8毫升HCl溶液(37％水溶液)(2.2摩尔当量)加至实施例2游离碱的悬浮液。该混合物转化为澄清溶液。将少量(10-50毫克)实施例2化合物HCl盐的N-1晶体作为晶种加至该溶液。在室温该溶液变混浊且转化为浆液。在20℃将该浆液搅拌15小时、过滤并用冷THF(约50毫升)洗涤，随后在45℃真空干燥，得到产率为95％的白色粉末形式的产物，鉴定其为实施例2游离碱的N-1型HCl盐。
图1中显示实施例5盐酸盐的粉末X射线衍射图。
通过物理数据表征的实施例2化合物的N-1型HCl盐
1.图1中显示N-1型HCl盐的模拟的、实验的及杂化的PXRD图。在室温的特征性PXRD峰值为8.7±0.1、12.1±0.1、13.3±0.1、13.7±0.1、14.6±0.1、17.5±0.1、18.2±0.1、21.7±0.1、22.8±0.1及24.3±0.1。
2.如通过DSC(图7)及TGA(图10)观测到的那样，该物质熔化，伴有歧化反应。通过DSC观测到，广泛吸热通常处于约125至约225℃的范围内。TGA显示在至多约100℃失重可忽略不计，及在至多225℃失重为约8.2％。图13中显示游离碱I的盐酸盐的N-1型晶体的吸湿等温线，其显示在25℃在约25至约75％RH的范围内吸水量可忽略不计。
3.元素分析计算值：C，59.65；H，6.14；N，18.97；Cl，8.00，实验值：C 59.42；H，6.17；N，18.87；Cl，7.93。
图6中显示实施例5盐酸盐N-1型的C-13 SSNMR光谱，其具有大体如表4中所示的峰值。
单晶X射线衍射测量HCl盐的N-1型
a：22.50(1)
b：14.667(8)
c：14.96(1)
V：4405(9)3
空间群：C2/c
D计算(g-cm-3)：1.336
α：90°
β：116.78(5)°
γ：90°
Z：8
V/Z：5513
温度(℃)：-50
R：0.10
R：残余率，经计算用于对结构因子的观测值与计算值之间的一致性进行评价，且用于解释模型的正确性。
V或Vc：晶胞体积
Z：每个晶胞中药物分子的数量
上述缩写也应用于实施例7及10中的表。
杂化的晶胞尺寸(cell dimension from hybrid)：
a：22.73
b：14.710
c：15.04
α：90
β：117.13
γ：90
V(3)：4475.02
实施例6
得自DMF/丙酮的实施例2化合物的N-1型HCl盐
在35-40℃将1克实施例2游离碱溶解在约20毫升DMF中。将1毫升HCl水溶液(以重量计37％)(约5摩尔当量)加至所得溶液。将实施例2化合物HCl盐的N-1型晶种加至该反应混合物，并在20℃搅拌该反应混合物。添加10毫升丙酮并在20℃将该混合物搅拌5-15小时。形成白色晶体浆液，将其过滤并用冷丙酮洗涤滤饼。在40-45℃真空干燥该湿滤饼，得到白色粉末形式的产物，鉴定其为实施例2游离碱的N-1型HCl盐。
图1中显示实施例6 HCl盐的计算的、杂化的和观测的粉末X射线衍射图。
实施例7
DMF/丙酮(优选)中的实施例2化合物的N-1型MSA盐
在室温将4克实施例2的游离碱溶解于30毫升DMF中。添加1.0毫升甲磺酸(MSA)。初始澄清的无色游离碱溶液转化为澄清黄色溶液。添加50毫升丙酮。将MSA盐形式的实施例2化合物的N-1型的晶种加至该溶液。在室温该溶液变混浊并转化为浆液。在室温将该浆液搅拌5小时、过滤并用冷丙酮(约50毫升)洗涤，在45℃真空干燥，得到产率为95％的白色粉末形式的产物，鉴定其为游离碱的N-1型MSA盐(1∶1盐)。
图3中显示实施例7 N-1型甲磺酸盐的计算的及观测的粉末X射线衍射图。
图6中显示实施例7 MSA盐N-1型的C-13 SSNMR光谱，其具有大体如表3中所示的峰值。
单晶X射线衍射测量MSA盐N-1型
a：9.818(1)
b：11.127(1)
c：13.004(1)
α：97.32(1)°
β：110.17(1)°
γ＝111.48(1)°
V：1187.5(2)3
空间群：P1bar
D计算(g-cm3)：1.403
Z：2
温度(℃)：+22
R：0.06
通过物理数据表征的MSA盐的N-1型多晶形物
1.图3中显示N-1型MSA盐的计算的PXRD图。该衍射图显示在室温的2θ值：10.7±0.1、11.7±0.1、13.3±0.1、14.0±0.1、15.2±0.1、19.8±0.1、21.0±0.1、22.0±0.1、23.0±0.1及24.4±0.1。
2.根据差示扫描量热分析(DSC)(图9)及热重分析(TGA)(图12)，通常，当在约216℃开始吸热时，该物质熔化，伴有分解。TGA显示在至多约150℃失重可忽略不计。
3.元素分析计算值：C，54.97；H，6.02；N，16.72；S，6.38，实验值：C 54.95；H，6.12；N，16.51；S，6.28。
实施例8
在异丙醇中制备实施例2化合物的N-1型MSA盐
将4.3克实施例2游离碱悬浮于40毫升异丙醇中。添加0.9毫升甲磺酸(约1.3当量)，同时搅拌。该悬浮液变澄清。在20℃搅拌该溶液，并将MSA盐形式的实施例2化合物的N-1型晶体的晶种加至该溶液。所得混浊溶液在10-20分钟内转化为浓稠浆液。在20℃将该浆液搅拌过夜，随后过滤并用冷异丙醇洗涤滤饼，并在45℃真空干燥，得到实施例2化合物的甲磺酸盐的N-1型晶体(1∶1盐)。
图3中显示实施例8 N-1型MSA盐的计算的及观测的粉末X射线衍射图。
实施例9
在乙醇中制备实施例2化合物的N-1型MSA盐
将10克实施例2游离碱悬浮于20毫升乙醇中。添加2毫升甲磺酸(约1.3当量)，同时搅拌。该悬浮液变澄清。在20℃搅拌该溶液，并将MSA盐形式的实施例2化合物的N-1型晶体的晶种加至该溶液。所得混浊溶液在10-20分钟内转化为浓稠浆液。在20℃将该浆液搅拌过夜，随后过滤并用冷乙醇洗涤滤饼，在45℃真空干燥，得到实施例2化合物甲磺酸盐的N-1型晶体(1∶1盐)。
图3中显示实施例9 N-1型MSA盐的计算的及观测的粉末X射线衍射图。
实施例10
制备实施例2化合物的N-4型HCl盐的晶种
将59毫克实施例2游离碱悬浮在约1毫升无水乙醇中。将约15微升HCl水溶液(以重量计37％)(1.3摩尔当量)加至该悬浮液。该悬浮液变为澄清溶液，将其在20℃剧烈搅拌至少一日。形成白色晶体浆液，将其过滤，收集滤饼并将滤饼用冷乙醇洗涤。将该湿滤饼在40℃进行真空干燥或空气干燥，得到白色固体形式的产物(1∶1盐)。
图2中显示该产物的粉末X射线衍射图。
实施例11
在甲基乙基酮-甲酸中制备实施例2化合物的HCl盐的N-4型晶体-反向添加
在室温将盐酸溶液(约37％，14.0克)加至实施例2游离碱(35.0克)的甲酸(51.2克，42毫升)-甲基乙基酮(MEK，56.4克，70毫升)浆液，得到澄清的溶液。过滤该溶液，除去不溶性固体，并用MEK-HCOOH(22毫升-12毫升)进行洗涤。将滤液缓慢加至实施例2化合物的HCl盐的N-4型晶体的晶种(285毫克)的MEK(665毫升)浆液，同时在10-12℃搅拌57分钟。在11-14℃将该混合物搅拌2小时。通过过滤收集白色固体并将其用MEK(300毫升)洗涤。将湿滤饼(46克)在约35℃真空干燥22小时，随后在50-60℃干燥3天，得到灰白色固体(35.2克，92％)，HPLC AP为99.63。形式：通过X射线粉末图确定为N-4。残余溶剂：MEK(1.68％)；HCOOH(0.08％)。粒度：D95(9.6微米)，D90(7.1微米)。D50(2.5微米)(1∶1盐)。
通过物理数据表征的N-4型多晶形物
1.图2中显示N-4型HCl盐的计算的PXRD图。该衍射图显示在室温的2θ值：8.6±0.1、10.7±0.1、11.4±0.1、12.8±0.1、14.4±0.1、15.6±0.1、16.9±0.1及23.4±0.1。
2.如DSC(图8)所示，该物质通常在约130至约220℃(可变)范围内熔化，伴有分解。热重分析(TGA)曲线(图11)显示在至多约125℃失重可忽略不计。图14中显示游离碱I的N-4型晶体的吸湿等温线，其显示在30℃在约25至约75％RH范围内吸水量可忽略不计。
3.元素分析计算值：C，59.65；H，6.14；N，18.97；Cl，8.00，实验值：C 59.64；H，6.16；N，18.84；Cl，7.93。
图5中显示实施例10 HCl盐N-4型的C-13 SSNMR光谱，其具有大体如表3中所示的峰值。
单晶X射线衍射测量HCl盐N-4型
a：20.9498(5)
b：13.8719(3)
c：7.9133(2)
α：90°
β：100.052(1)°
γ：90°
V：2264.4(1)3
空间群：P21/n
D计算(g-cm3)：1.2999
Z：4
温度(℃)：+22
R：0.06
实施例12
在丙酮-甲酸中制备实施例2化合物的HCl盐的N-4型晶体-反向添加
在室温将盐酸溶液(约37％，9.9克)加至实施例2游离碱(30.0克)的甲酸(54.8克，45毫升)-丙酮(71.2克，90毫升)浆液，得到澄清溶液。过滤该溶液，除去不溶性固体。将滤液缓慢加至实施例2游离碱的HCl盐的N-4晶体的晶种(300毫克)的丙酮(540毫升)浆液，同时在室温搅拌20分钟。在室温将该混合物搅拌20小时。通过过滤收集白色固体并将其用丙酮(320毫升)洗涤。将湿滤饼(37克)在约50℃真空干燥20小时，得到HPLC AP为99.61的灰白色固体(30.95克，94％)。形式：通过X射线粉末图确定为N-4。残余溶剂：丙酮(1.1％)；HCOOH(0.37％)。粒度：D95(76.4微米)，D90(50.8微米)。D50(6.1微米)(1∶1盐)。
图2中显示该产物的计算的及观测的粉末X射线衍射图。
实施例13
在甲酸与丙酮或甲酸与MEK中制备实施例2化合物的HCl盐的N-4型晶体
将盐酸溶液(约37％，14.0克)(1.6摩尔当量)加至实施例2游离碱(35克)的甲酸(52.5毫升)-丙酮(115.5毫升)(或MEK)溶液。将实施例2游离碱的HCl盐的N-4晶体的晶种加至该混合物。过滤该溶液，除去不溶性固体。将丙酮(630毫升)(或MEK)加至该混合物，并在10-20℃将该混合物再搅拌2-10小时。
或者，可将游离碱的溶液加至丙酮(或MEK)/HCl/N-4晶种混合物池，使N-4型小晶体沉淀。
通过过滤收集白色固体并将其用冷丙酮或MEK洗涤。将湿滤饼在40-45℃真空干燥，得到N-4型晶体，为白色固体。
图2中显示该产物的计算的及观测的粉末X射线衍射图。
实施例14
制备实施例2化合物的N-4型HCl盐(DMA/丙酮或DMA/MEK系统)
在65℃将45克实施例2游离碱溶解于180毫升DMA中。添加15克HCl溶液(37％)(1.4摩尔当量)。将240毫克N-4型实施例2 HCl盐的晶种加至该HCl溶液。添加900毫升丙酮或MEK，在20℃将该混合物搅拌5至6小时。
或者，可将游离碱的DMA溶液加至丙酮(或MEK)/HCl/N-4型晶种混合物池，使N-4型小晶体沉淀。
过滤该浆液，且用冷丙酮或MEK洗涤湿滤饼，在40-45℃真空干燥。获得产率为96％的白色结晶粉末(1∶1盐)。
图2中显示该产物的计算的及观测的粉末X射线衍射图。
实施例15
制备实施例2化合物的N-4型HCl盐(DMF-丙酮系统-最优选)
在20-25℃将盐酸溶液(约37％，25.4克)加至实施例2游离碱(81.0克)的二甲基甲酰胺(DMF)(612克，648毫升)浆液，经20-30分钟搅拌后得到澄清黄色溶液。随后对该溶液进行精滤，除去不溶性固体并用DMF(10-20毫升)洗涤。随后将N-4型实施例2 HCl盐的晶种(1.6克)的丙酮(769克，972毫升)浆液加至滤液，同时搅拌2-3分钟。添加之后立即开始结晶。在20-25℃将该浆液搅拌3.5小时。通过过滤收集白色固体并用丙酮(162毫升)洗涤。将湿滤饼(92克)在约45-50℃真空干燥16小时，得到HPLC AP为99.73的白色固体(85克，96％)。通过X射线粉末图确定为N-4型。通过GC，确定残余溶剂为：DMF(1％)；丙酮(1％)。粒度：D90(30-60微米)(1∶1盐)。
图2中显示该产物的计算的及观测的粉末X射线衍射图。
实施例16
制备实施例2化合物的N-4型HCl盐(在丙酮中)
将8.4克实施例2游离碱溶解于126毫升丙酮中。添加3.7毫升HCl溶液(37％)(2.2摩尔当量)。将N-4型实施例2 HCl盐的晶种加至丙酮/HCl溶液中，并在20-40℃将该混合物搅拌至少15小时。形成白色晶体浆液，将其过滤，并用冷丙酮洗涤湿滤饼，在40至45℃真空干燥，得到白色固体(1∶1盐)。
图2中显示实施例2化合物的盐酸盐的N-4型晶体的计算的及观测的粉末X射线衍射图。
实施例17
制备实施例2化合物的N-4型HCl盐(DMF-丙酮(最优选)或MEK系统)
将盐酸溶液(约37％，1.4-3.2毫升)(1.1-2.2摩尔当量)加至实施例2游离碱(7.3克)的约40毫升二甲基甲酰胺(DMF)(5-8毫升/克的游离碱)浆液，得到澄清溶液。添加60-80毫升丙酮或MEK。随后添加N-4型实施例2 HCl盐的晶种，并在20℃将该混合物搅拌3至15小时。形成白色固体晶体浆液，将其过滤并用丙酮洗涤滤饼。将湿滤饼(92克)在约40-45℃真空干燥，得到白色结晶粉末(95-96％产率)(1∶1盐)。
图2中显示该产物的计算的及观测的粉末X射线衍射图。
实施例18
在乙醇中制备实施例2化合物的HCl盐的N-4型晶体
将盐酸溶液(约37％，0.8毫升)加至实施例2游离碱(3克)的无水乙醇(约30毫升)浆液，得到澄清溶液。将实施例2游离碱的HCl盐的N-4晶体的晶种(50毫克)加至该混合物。在20-40℃将该混合物搅拌15小时。形成白色晶体浆液，将其过滤并用冷乙醇(100毫升)洗涤收集的滤饼。将湿滤饼在45-50℃真空干燥15小时，得到白色固体(1∶1盐)。
图2中显示实施例18的盐酸盐N-4型晶体的计算的及观测的粉末X射线衍射图。
实施例19
THF中的实施例2化合物的N-4型HCl盐
将1.2克实施例2游离碱悬浮于约10毫升THF中。添加0.5毫升HCl水溶液(37重量％)(2.2摩尔当量)。将HCl盐形式的实施例2化合物的N-4型的晶种加至该混合物，并在40℃将所得浆液搅拌4天或在20℃搅拌7天。过滤所得晶体浆液，用冷THF洗涤，在40-45℃真空干燥，得到产率为95％的白色粉末形式的产物，鉴定其为游离碱的N-4型HCl盐(1∶1盐)。
图2中显示实施例19 N-4型盐酸盐的计算的及观测的粉末X射线衍射图。
实施例20
通过浆化N-1型晶体制备实施例2化合物的HCl盐的N-4型晶体
在乙腈、THF或乙醇中，使如实施例4所述制备的干燥N-1型晶体与N-4型晶体的晶种一起浆化，在40℃将该悬浮液搅拌4天，冷却。过滤该浆液并用冷THF或丙酮洗涤滤饼。将湿滤饼在40-45℃真空干燥，得到白色结晶粉末，鉴定其为N-4型晶体(1∶1盐)。
图2中显示所得白色结晶粉末的计算的及观测的粉末X射线衍射图。
实施例21
制备实施例2游离碱的HCl盐的倍半水合物形式H1.5-3
将60毫克实施例2游离碱悬浮于1毫升乙醇中。将15微升HCl溶液(37％水溶液)(1.25摩尔当量)加至实施例2游离碱的悬浮液。该混合物转化为混浊溶液。将另外15微升HCl溶液(37％水溶液)(1.25摩尔当量)加至该悬浮液，该混浊溶液变澄清。在20℃将该溶液搅拌15小时。获得白色浆液。在环境状态(约20％及1大气压)对该浆液进行空气干燥，得到标题倍半水合物。
表9中显示该标题倍半水合物的原子分数座标。
实施例22
制备实施例2化合物的HCl盐的SA-2型溶剂化物
将15毫克实施例2化合物的HCl盐的N-4型晶体溶解于约1/2毫升1∶1的MEK/MeOH中。在室温使该样品蒸发，直至出现标题溶剂化物的晶体。
表7中显示该标题SA-2溶剂化物的原子分数座标。
实施例23
制备实施例2化合物的HCl盐的SB-2型溶剂化物
浓缩的溶液通过以下方法制备：对在异丙醇中的实施例2化合物的HCl盐的N-4型晶体进行加热，随后将其冷却至环境温度并缓慢蒸发，得到标题溶剂化物。
表8中显示该标题SB-2溶剂化物的原子分数座标。
实施例24
研究先前实施例中所制备的晶形
使用Bruker C2 GADDS(General Area Detector Diffraction System)获得X射线粉末衍射(PXRD)数据。该辐射为CuKα(40千伏，50毫安)。该样品探测器距离为15厘米。将粉末样品放置在直径为1毫米或更小的密封的玻璃毛细管中，在数据采集期间使该毛细管旋转。在样品曝光时间为至少2000秒的情况下采集3°≤2θ≤35°的数据。对所得二维衍射弧线(diffraction arc)进行积分，创建常规的一维PXRD图，在3至35度2θ范围内步长(step size)为0.02度2θ。
在Bruker-Nonius CAD4串行衍射仪(Bruker Axs，Inc.，Madison WI)上采集单晶X射线数据。通过设置为25高角度反射的实验用衍射仪所进行的最小平方分析，获得晶胞参数。以θ-2θ可变扫描技术在恒温使用CuKα辐射(λ＝1.5418)对强度进行测量，并仅以劳仑兹极化因子(Lorentz-polarization factor)对强度进行校正。在扫描的极端，对背景计数进行采集，持续扫描时间的一半。或者，使用CuKα辐射(λ＝1.5418)在Bruker-Nonius Kappa CCD 2000系统上采集单晶数据。通过Collect程序套装R.Hooft，Nonius B.V.(1998)中的HKL 2000软件包，对所测量强度数据进行索引及处理。当指明时，在数据采集期间，使晶体在牛津低温系统(Oxford cryogenic system)的冷流中冷却。
通过直接方法对该结构进行解析，并使用具有微小局部修改的SDP软件包SDP(Structure Determination Package、Enraf-Nonius，Bohemia，N.Y.)或结晶学软件包MAXUS(maXus溶液及精制软件套装：S.Mackay、C.J.Gilmore、C.Edwards、M.Tremayne、N.Stewart及K.Shankland)，根据所观测的反射，使所述结构精确。maXus为电脑程序，用于从衍射数据解析晶体结构及使其精确。
通过满矩阵最小平方法使衍生的原子参数(座标及温度因子)精确。精确过程中最小化的函数为∑W(|FO|-|FC|)2。将R定义为∑||F|-|F||/∑|FO|而RW＝[∑W(|FO|-|FC|)2/∑W|FO|2]1/2，其中w为基于观测强度误差的合适权重函数。在所有精确阶段都检查差异图谱(different map)。使用各向同性温度因子将氢原子引入理想位置，但不改变氢参数。
如文献(Yin.S.；Scaringe，R.P.；DiMarco，J.；Galella，M.及Gougoutas，J.Z.，American Pharmaceutical Review(2003)，6(2)，80)中所述生成″杂化″模拟粉末X射线图。通过使用CellRefine.xls程序使晶胞精确而获得室温晶胞参数。该程序的输入包括从实验的室温粉末图所获得的约10反射的2θ位置；基于低温采集的单晶数据指定相应Miller指数，hkl。通过将在低温测定的分子结构插入该程序第一步中所获得的室温晶胞中，计算(通过Alex或Lattice View的软件程序)新的(杂化的)PXRD。分子通过以下方式插入：保留分子的尺寸和形状，相对于晶胞初始状态，保留分子的位置，但使分子间距离随晶胞而扩大。
附图中所示PXRD图的在室温的特征性衍射峰位置(2θ±0.1度数)基于用衍射仪(CuKα)所采集的高品质图形，所述衍射仪带有旋转毛细管，而2θ用NIST或其它合适的标准校正。
所有固态C-13 NMR测量均使用Bruker DSX-400，400MHz NMR光谱仪进行。使用高功率质子解耦(proton decoupling)及TPPM脉冲序列及魔角旋转(magic-angle spinning)(MAS)为约12千赫的倾斜振幅交叉极化(RAMP-CP)获得高解析度光谱。(A.E.Bennett等人，J.Chem.Phys.(1995)，103，6951)，(G.Metz，X.Wu及S.O.Smith，J.Magn.Reson.A(1994)，110，219-227)。将约70毫克样品装入罐式氧化锆转子中，用于各实验。化学位移(δ)参考高频率共振为38.56ppm的外标金刚烷(W.L.Earl及D.L.Vander Hart，J.Magn.Reson.(1982)，48，35-54)。
在TA InstrumentsTMQ1000型中进行差示扫描量热(DSC)实验。在铝盘中称量样品(约2-6毫克)并以百分之一毫克的精度准确记录，随后转移至DSC。以50毫升/分钟的氮气净化该仪器。在室温与300℃之间以10℃/分钟的加热速率采集数据。以向下的吸热峰绘制曲线。
在TA InstrumentsTMQ500型中进行热重分析(TGA)实验。将样品(约10-30毫克)放置在预先称过皮重的铂盘中。通过该仪器准确测量样品重量并以千分之一毫克的精度记录。以100毫升/分钟的氮气净化该炉。在室温与300℃之间以10℃/分钟的加热速率采集数据。
使用约10毫克样品在VTI SGA-100对称气相分析器(Symmetric VaporAnalyzer)中采集吸湿等温线。在60℃将该样品干燥，直至获得0.0005重量％/分钟的损失速率历时10分钟。在25℃(对于游离碱I及N-1 HCl盐)或30℃(对于N-4 HCl盐)及3或4、5、15、25、35、45、50、65、75、85及95％RH，对样品进行测试。当达到0.0003重量％/分钟的速率历时35分钟或最大600分钟时，达到在各RH下的平衡。
制备游离碱I的多种晶形及其溶剂化物并将其列于表1中。本发明所有晶形的晶胞数据及其它性质均列出并概述于表2中。该晶胞参数从单晶X射线结晶学分析而获得。关于晶胞的详细说明可在Stout和Jensen的″X-Ray StructureDetermination：A Practical Guide″，(MacMillian，1968)的第3章中找到。
表1
形式描述N-1 HCl盐纯晶体N-4 HCl盐纯晶体N-1 MSA盐纯晶体SA-2水合甲醇化物晶体SB-2水合异丙醇化物晶体H1.5-3倍半水合物晶体
表2结晶数据晶胞参数

*由杂化(精确化)计算而生成
单个晶胞及杂化的晶胞参数大体如上所示
T(℃)为结晶数据的温度
Z′为各非对称单位(非晶胞)内游离碱I的分子数量
Vm为摩尔体积，V(晶胞)/(每个晶胞Z个药物分子)
SG为结晶学空间群
R为R-因子(精确化品质的量度)
多种晶形的原子分数座标大体如表4至9所示。
各形式的碳13 SSNMR化学位移大体如表3中所列出。
表3
各形式的碳13 SSNMR化学位移
    N-1 MSA    N-1 HCl    N-4 HCl    6    8.8    10.4    14.3    20.4    24.4    40.3    110.3    123.5    126    126.9    129.8    132.3    135.6    138.1    139.2    148.8    163.1    172.6    3    7.3    12.9    15.2    19.4    24.6    40.5    109.8    122.3    125    127.3    128.1    131.7    136.9    142.9    147.3    162.5    167.1    4.1    6.3    12.4    14.4    17.1    21    23.5    43.1    110    122.4    125.1    128.1    129.1    130.4    131.7    134.7    135.7    138.9    147.1    163.2    171.8
表4
在-50℃游离碱IHCl盐N-1型的位置参数及各向同性温度因子
名称xyzB(iso)CL1-0.12740.73160.19282.6O11-0.09110.33080.06313.0O250.07681.09320.19272.5N3-0.07890.5597-0.13601.4
N-4-0.07260.6044-0.21112.0N6-0.06270.7370-0.11092.0N-12-0.13380.2956-0.10162.4N-16-0.06700.73560.04171.5N280.11700.95870.25892.6C1-0.08980.4443-0.04931.3C2-0.08890.4657-0.13981.5C5-0.06320.6929-0.19632.5C7-0.06890.6963-0.03542.2C8-0.07550.5942-0.04801.7C9-0.08080.5253 0.00831.0C10-0.10550.3490-0.02431.8C13-0.15990.2059-0.08803.3C14-0.23730.2200-0.12256.2C15-0.26510.1334-0.10188.3C17-0.06100.83460.04711.7C18-0.00070.87100.11551.1C190.00470.96290.12641.0C20-0.04801.02060.07382.2C21-0.10860.98200.00942.3C22-0.11880.8899-0.00511.8C23-0.07690.53140.11172.5C240.06781.01080.19542.0C27-0.18470.8464-0.07302.9C290.17951.00020.33243.0C300.23510.99730.30465.6C310.23740.93760.38744.9H61-0.05630.8116-0.10632.8H121-0.14060.3168-0.17613.4H161-0.07140.69630.10142.5H2810.11090.88480.25533.6
表5
在室温游离碱IHCl盐N-4型的位置参数及各向同性温度因子
名称x yz B(iso)CL0.0341 0.71620.4308 5.5O10.1111 1.06170.3458 5.4O2-0.2021 0.5613-0.6888 6.5N-1-0.0710 0.50990.0187 5.0N2-0.0544 0.67370.0953 4.4N3-0.0913 0.5440-0.1460 4.2N-4-0.0762 0.8037-0.0894 4.3N50.1228 0.90010.3778 4.5N6-0.1487 0.4216-0.6361 5.1C1-0.0540 0.57680.1292 4.9C2-0.0752 0.7092-0.0651 3.8C3-0.1215 0.6429-0.3703 4.0C4-0.1318 0.5462-0.4222 4.0C5-0.1137 0.4874-0.2809 4.6C6-0.0956 0.6414-0.1958 3.7C7-0.0604 0.87530.0446 3.9C80.0035 0.88730.1212 3.9C90.0202 0.96260.2399 3.8C10-0.0285 1.02470.2755 4.4C11-0.0924 1.00890.1989 4.6C12-0.1101 0.93440.0833 4.3C130.0882 0.97950.3247 4.3C140.1885 0.90760.4700 4.8C160.2285 0.81800.4863 7.3C17-0.1632 0.5116-0.5947 4.6C18-0.1796 0.3769-0.7945 5.8C19-0.1408 0.2925-0.8428 7.6
C20-0.1734 0.2467 -1.0053 9.0C21-0.1342 0.7314 -0.4822 5.3C22-0.1802 0.9169 0.0035 6.0H11-0.0396 0.5549 0.2601 5.9H21-0.0375 0.7237 0.1998 5.4H41-0.0910 0.8303 -0.2198 5.3H510.1006 0.8297 0.3463 5.5H61-0.1122 0.3809 -0.5485 4.0H810.0407 0.8396 0.0891 4.8H101-0.0165 1.0872 0.3579 5.4H111-0.1294 1.0551 0.2302 5.4H1410.1928 0.9796 0.5314 5.9
表6
在室温游离碱IMSA盐N-1型的位置参数及各向同性温度因子
名称 xy z B(iso)S1 -0.2392-0.0718 0.2812 3.9O19 -0.34580.3140 0.5245 3.9O25 0.14950.5491 -0.1489 4.5O96 -0.0747-0.0117 0.2977 7.2O97 -0.31750.0086 0.2347 6.2O98 -0.3273-0.2110 0.2187 6.2N2 0.01590.2025 0.2128 3.5N-4 0.01340.1493 0.0309 4.3N5 0.08580.2860 0.0493 3.4N-10 0.13690.4167 0.3376 3.1N20 -0.41710.1644 0.3592 3.7N26 0.37070.6920 0.0118 3.9C1 0.09520.3375 0.2357 2.9C3 -0.01850.1153 0.1135 4.0
C6 0.1200 0.3448 -0.02873.8C7 0.1918 0.4820 0.01943.3C8 0.2006 0.5099 0.13083.1C9 0.1335 0.3851 0.14942.9C11 0.0777 0.3716 0.42022.8C12 -0.0828 0.3343 0.39483.0C13 -0.1378 0.3039 0.47672.8C14 -0.0287 0.3161 0.58463.3C15 0.1288 0.3502 0.60663.4C16 0.1867 0.3782 0.52563.2C17 0.3599 0.4139 0.55264.5C18 -0.3085 0.2627 0.45583.0C21 -0.5877 0.1142 0.32654.7C22 -0.6743 -0.0158 0.34946.0C23 -0.6918 -0.0137 0.23275.2C24 0.2358 0.5773 -0.04713.4C27 0.4320 0.7945 -0.04024.8C28 0.5627 0.7822 -0.07136.1C29 0.5061 0.6520 -0.15746.3C30 0.2560 0.6437 0.20984.3C99 -0.2317 -0.0630 0.41935.7H21 -0.0223 0.1622 0.27523.7H101 0.2234 0.5211 0.36093.3H201 -0.3748 0.1234 0.30444.1H261 0.4413 0.7077 0.10234.0
表7
在-50℃游离碱IHCl盐SA-2型的位置参数及各向同性温度因子
原子x y z占有率*B(iso)CL1-0.3428 0.2986 0.40574.0
O11 0.1415 -0.1288 0.0915 3.9O25 -0.1148 0.6339 0.9119 3.5O97 -0.1278 0.2166 0.2592 3.5O99 -0.6027 0.1956 0.2912 6.9N3 0.1841 0.0359 0.6720 2.1N-4 0.2227 0.0672 0.8548 3.0N6 0.1458 0.2173 0.8268 2.7N-12 0.2592 -0.1971 0.2792 2.7N-16 0.0417 0.2432 0.5638 2.2N26 -0.2462 0.5099 0.7277 2.9C1 0.1709 -0.0518 0.3977 1.9C2 0.2115 -0.0502 0.5723 2.1C5 0.2016 0.1581 0.9223 3.1C7 0.1021 0.1869 0.6506 1.8C8 0.1275 0.0916 0.5638 1.9C9 0.1185 0.0380 0.3895 2.3C10 0.1872 -0.1291 0.2423 2.3C13 0.2931 -0.2744 0.1384 3.6C14′ 0.4246 -0.2681 0.1706.4 3.2C14 0.3896 -0.2366 0.0787.6 5.5C15′ 0.4489 -0.1753 0.1127.44.9C15 0.5057 -0.1862 0.2099.66.8C17 0.0494 0.3502 0.64002.0C18 -0.0449 0.3928 0.68692.1C19 -0.0398 0.4954 0.75011.9C20 0.0607 0.5480 0.76192.8C21 0.1563 0.5053 0.71352.8C22 0.1506 0.4021 0.64862.3C23 0.0726 0.0704 0.22922.5C24 -0.1395 0.5477 0.79912.3
C27-0.3462 0.5629 0.7636 3.4C28-0.3912 0.5530 0.9148 5.9C29-0.4584 0.5075 0.7298 5.0C300.2530 0.3528 0.5864 4.2C98-0.5787 0.0988 0.2738 7.5H210.2597 -0.1054 0.6260 3.6H510.2303 0.1880 1.0674 4.2H1210.2948 -0.1958 0.4160 4.2H161-0.0156 0.2110 0.4308 3.8H261-0.2643 0.4358 0.6360 4.
除非另外说明，占有率为1
表8
在-50℃游离碱IHCl盐SB-2型的位置参数及各向同性温度因子
原子xy zB(iso)CL-0.31940.3110 0.39793.3O120.1098-0.1439 0.09402.8O25-0.13160.6306 0.89593.8O96-0.10830.2272 0.26123.0O99-0.56070.2241 0.34577.8N-10.17400.0347 0.67781.6N20.21040.0654 0.86321.8N-40.15320.2174 0.83232.6N-130.2301-0.2130 0.28141.9N-170.05170.2466 0.56511.8N24-0.24740.5107 0.71382.5C30.20100.1560 0.92562.9C50.10660.1875 0.65101.6C60.12350.0878 0.56641.7C70.11310.0337 0.39591.8
C80.1525-0.0608 0.4036 1.0C90.1907-0.0578 0.5837 2.0C100.06780.0602 0.2234 1.7C110.1616-0.1381 0.2479 1.4C140.2639-0.2961 0.1402 2.3C150.3837-0.2824 0.1328 5.6C160.4181-0.1943 0.1049 6.8C180.05630.3514 0.6400 1.1C190.15110.4008 0.6614 2.0C200.15240.4993 0.7188 2.5C210.04970.5468 0.7668 2.6C220.25340.3490 0.6029 3.5C23-0.04480.3958 0.6813 2.1C24-0.04090.4935 0.7394 1.3C26-0.34740.5677 0.7526 3.1C27-0.45380.5122 0.7195 3.2C28-0.38260.5649 0.9102 4.3C29-0.14690.5490 0.7925 2.3C96-0.50120.0658 0.2076 6.1C97-0.62460.0925 0.4159 6.4C98-0.52330.1304 0.3770 5.2H410.15220.2938 0.9032 3.6H1310.2640-0.2097 0.4205 2.9H171-0.00070.2159 0.4327 2.8H241-0.25810.4367 0.6200 3.5
表9
在-80℃游离碱IHCl盐H1.5-3型的位置参数及各向同性温度因子
名称 x y z占有率* B(iso)CL1 0.5892 0.3099 0.5880 8
 CL2 -0.0317 0.1959 -0.03524.6 O17 0.6731 0.0637 0.29453.4 O23 -0.1865 -0.0509 0.64843.9 O47 1.1805 0.5785 -0.19683.5 O53 0.3028 0.4127 0.16183.3 O97 0.2355 0.2145 0.36105.5 O98 0.1189 0.2770 0.19353.9 O99 0.4729 0.2641 0.32884.8 N-1 0.1843 0.2548 0.64203.2 N3 0.3402 0.2074 0.60472.7 N8 0.1235 0.1745 0.65542.7 N-10 0.3390 0.0760 0.60992.6 N-18 0.5571 0.1402 0.25502.8 N24 -0.1614 0.0332 0.80853.2 N31 0.6409 0.7268 0.11123.0 N33 0.8061 0.6873 0.08332.7 N38 0.5903 0.6475 0.13312.6 N-40 0.8226 0.5613 0.10342.6 N-48 1.0561 0.6489 -0.23972.8 N54 0.3170 0.5120 0.29943.0 C2 0.2863 0.2651 0.61683.0 C4 0.2817 0.1287 0.61582.3 C5 0.0769 0.0408 0.65132.8 C6 -0.0172 0.0656 0.68212.6 C7 0.0158 0.1492 0.68452.8 C9 0.1647 0.1094 0.63722.4 C11 0.4587 0.0958 0.58372.6 C16 0.5518 0.1136 0.67282.8 C15 0.6634 0.1255 0.64483.4 C14 0.6805 0.1203 0.53193.0
C13 0.58650.10610.44522.3C12 0.47560.09410.47082.2C17 0.60930.10150.32552.6C19 0.57000.14030.13623.1C20 0.68250.18910.09976.8C21 0.57630.21480.08246.5C23 -0.12880.01100.71083.0C25 -0.2663-0.01620.84934.0C26′ -0.26500.00380.96756.6C26 -0.2371-0.06990.94085.1C27 -0.1731-0.02301.05027.3C28 0.0758-0.04500.63813.4C32 0.74280.73990.08643.0C34 0.75680.60950.10162.3C35 0.55680.51460.14482.4C36 0.45880.53590.17212.4C37 0.48350.61860.16352.8C39 0.64010.58540.12332.3C41 0.94410.58780.08212.7C46 1.03420.60900.17372.8C45 1.14860.62990.15043.4C44 1.17090.62960.03993.1C43 1.08130.6114-0.05032.4C42 0.96690.5895-0.02892.4C47 1.11000.6117-0.16742.6C49 1.07020.6496-0.35863.4C50 1.17690.7051-0.39557.2C51 1.06310.7214-0.41426.4C53 0.35300.48070.21052.7C55 0.21960.46690.35263.8
C29 0.5327 0.1215 0.7946 4.2C56 0.2211 0.4943 0.4684.3 6.6C56 0.2588 0.4279 0.4564.7 5.1C57 0.3287 0.4873 0.5516 8.5C58 0.5668 0.4308 0.1444 3.1C59 1.0073 0.6093 0.2945 4.2H31 0.4308 0.2251 0.5859 3.4H101 0.2931 0.0142 0.6247 3.3H181 0.5061 0.1747 0.2849 3.3H331 0.8968 0.7077 0.0670 3.4H401 0.7829 0.4980 0.1201 3.5H481 1.0012 0.6813 -0.2112 3.5H541 0.3604 0.5746 0.3309 3.6H241 -0.1100 0.0910 0.8551 4.7
除非另外说明，占有率为1