二肽基肽酶IV的吡咯并吡啶类抑制剂及方法.pdf

本发明提供式(I)的化合物，其中R、X、Y、Z、A及n如说明书中所定义，该化合物为二肽基肽酶IV的抑制剂，且因此适用于治疗糖尿病及相关疾病。

权利要求书
1.  一种式(I)的化合物：

或其药学上可接受的盐及其前药酯类及其所有立体异构体，其中：
表示I的5元环中的一个或两个双键，且I的6元环为芳族环；
n为1或2；
R为选自以下基团的官能团：氢(H)、卤素、CF3、氰基(CN)、氨基、经取代的氨基、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基、双环烷基、双环烷基烷基、烷硫基烷基、芳基烷硫基烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、环杂烷基及环杂烷基烷基，其中任一该官能团任选可经一至三个选自以下基团的取代基(若可能)取代：氢、卤素、烷基、多卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、多卤代烷氧基、烷氧羰基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基、多环烷基、杂芳氨基、芳氨基、环杂烷基、环杂烷基烷基、羟基、羟基烷基、硝基、氰基、氨基、经取代的氨基、烷氨基、二烷氨基、硫醇基、烷硫基、烷羰基、酰基、烷氧羰基、氨基羰基、炔氨基羰基、烷氨基羰基、烯氨基羰基、烷基羰氧基、烷基羰氨基、芳基羰氨基、烷基磺酰基氨基、烷氨基羰氨基、烷氧基羰氨基、烷基磺酰基、氨基磺酰基、烷基亚磺酰基、磺酰氨基及磺酰基；
X与Z相同或相异，且独立地选自CH2、CH、C＝O、C＝CR3R4、C＝S、C＝NR3及CR3R4，其中R3与R4为烷基或芳基；
A为选自以下基团的官能团：氢(H)、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基、双环烷基、双环烷基烷基、烷硫基烷基、芳基烷硫基烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、环杂烷基、环杂烷基烷基、O-R1、氰基、氨基、-C(O)-OH、-C(O)-NR1R2、-C(O)-OR1、S(O)m-R1、-S(O)2NR1R2、-NR1R2、-NR1-C(O)R2、-NR1-SO2R2，其中任一该官能团任选可经一至三个独立选自以下基团的取代基(若可能)取代：氢、卤素、烷基、多卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、多卤代烷氧基、羧基、烷氧羰基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基、多环烷基、杂芳氨基、芳氨基、环杂烷基、环杂烷基烷基、环杂烷氨基羰基、环杂烷基羰基、杂芳氨基羰基、环杂烷基(烷基)氨基羰基、环烷基磺酰基(烷基)氨基、卤代磺酰基(烷基)氨基、羟基、羟基烷基、硝基、氰基、氨基、经取代的氨基、烷氨基、二烷氨基、硫醇基、烷硫基、烷羰基、酰基、烷氧羰基、氨基羰基、炔氨基羰基、烷氨基羰基、二烷氨基羰基(其中该烷基相同或相异)、烯氨基羰基、烷基羰氧基、烷基羰氨基、芳基羰氨基、烷基磺酰基氨基、烷氨基羰氨基、烷氧基羰氨基、烷基磺酰基、氨基磺酰基、烷基亚磺酰基、磺酰氨基及磺酰基；
m为0、1或2；
R1与R2相同或相异，且：
(i)各独立为选自以下基团的官能团：氢(H)、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基、双环烷基、双环烷基烷基、烷硫基烷基、芳基烷硫基烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、环杂烷基及环杂烷基烷基，其中任一官能团任选可经一至三个独立选自以下基团的取代基(若可能)取代：氢、卤素、烷基、多卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、多卤代烷氧基、烷氧羰基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基、多环烷基、杂芳氨基、芳氨基、环杂烷基、环杂烷基烷基、羟基、羟基烷基、硝基、氰基、氨基、经取代的氨基、烷氨基、二烷氨基、硫醇基、烷硫基、烷羰基、酰基、烷氧羰基、氨基羰基、炔氨基羰基、烷氨基羰基、烯氨基羰基、烷基羰氧基、烷基羰氨基、芳基羰氨基、烷基磺酰基氨基、烷氨基羰氨基、烷氧基羰氨基、烷基磺酰基、氨基磺酰基、烷基亚磺酰基、磺酰氨基及磺酰基；或
(ii)NR1R2中的R1与R2可一同形成5元或6元饱和或部分不饱和的环系统，其选自杂环烷基、杂双环烷基、杂芳基及双环杂芳基，其中该环系统任选可经一至三个独立选自以下基团的取代基(若可能)取代：氢、卤素、烷基、多卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、多卤代烷氧基、烷氧羰基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基、多环烷基、杂芳氨基、芳氨基、环杂烷基、环杂烷基烷基、羟基、羟基烷基、硝基、氰基、氨基、经取代的氨基、烷氨基、二烷氨基、硫醇基、烷硫基、烷羰基、酰基、烷氧羰基、氨基羰基、炔氨基羰基、烷氨基羰基、烯氨基羰基、烷基羰氧基、烷基羰氨基、芳基羰氨基、烷基磺酰基氨基、烷氨基羰氨基、烷氧基羰氨基、烷基磺酰基、氨基磺酰基、烷基亚磺酰基、磺酰氨基及磺酰基；且
Y为芳基或杂芳基，其中该芳基或杂芳基任选可经1-5个独立选自以下基团的取代基取代：氢、卤素、烷基、多卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、多卤代烷氧基、烷氧羰基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基、多环烷基、杂芳氨基、芳氨基、环杂烷基、环杂烷基烷基、羟基、羟基烷基、硝基、氰基、氨基、经取代的氨基、烷氨基、二烷氨基、硫醇基、烷硫基、烷羰基、酰基、烷氧羰基、氨基羰基、炔氨基羰基、烷氨基羰基、烯氨基羰基、烷基羰氧基、烷基羰氨基、芳基羰氨基、烷基磺酰基氨基、烷氨基羰氨基、烷氧基羰氨基、烷基磺酰基、氨基磺酰基、烷基亚磺酰基、磺酰氨基及磺酰基。

2.  如权利要求1的化合物，其具有以下结构：


3.  如权利要求1的化合物，其具有以下结构：


4.  如权利要求1的化合物，其具有以下结构：


5.  如权利要求1的化合物，其具有以下结构：


6.  如权利要求1的化合物，其选自










7.  一种包含如权利要求1的化合物及其药学上可接受的载体的药物组合物。

8.  一种包含如权利要求1的化合物及其药学上可接受的盐的药物组合物。

9.  一种包含如权利要求1的化合物及其药学上可接受的前药的药物组合物。

10.  一种药物组合物，其包含作为游离碱呈外消旋或纯手性形式的权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐或其前药。

11.  一种外消旋或纯手性中间物，其包含：


12.  一种药物组合物，其包含如权利要求1的式I的化合物及至少一种选自抗糖尿病剂、抗肥胖剂、抗高血压剂、抗动脉粥样硬化剂及降血脂剂的治疗剂。

13.  如权利要求8的药物组合物，其中该治疗剂为抗糖尿病剂。

14.  如权利要求9的组合，其中该抗糖尿病剂为至少一种选自以下的药剂：双胍、磺酰脲、葡萄糖苷酶抑制剂、PPARγ激动剂、PPARα/γ双重激动剂、aP2抑制剂、SGLT2抑制剂、胰岛素致敏剂、高血糖素样肽-1(GLP-1)、胰岛素及氯茴苯酸。

15.  如权利要求10的组合，其中该抗糖尿病剂为至少一种选自以下的药剂：二甲双胍、格列本脲、格列美脲、格列吡特(glipyride)、格列吡嗪、氯磺丙脲、格列齐特、阿卡波糖、米格列醇、吡格列酮、曲格列酮、罗格列酮、胰岛素、伊沙丽他酮、瑞格列奈及那格列奈。

16.  如权利要求9的组合，其中该式I的化合物和该抗糖尿病剂的重量比为约0.01至约300∶1。

17.  如权利要求8的组合，其中该抗肥胖剂为至少一种选自以下的药剂：β3肾上腺素能激动剂、脂肪酶抑制剂、血清素(及多巴胺)再吸收抑制剂、甲状腺受体β化合物、PPAR激动剂及厌食剂。

18.  如权利要求13的组合，其中该抗肥胖剂为至少一种选自以下的药剂：奥利司他、西布曲明、托吡酯、睫状体神经营养因子、右旋安非他命、苯丁胺、苯丙醇胺及马吲哚。

19.  如权利要求8的组合，其中该降血脂剂为至少一种选自以下的药剂：MTP抑制剂、胆固醇酯转移蛋白、HMG CoA还原酶抑制剂、角鲨烯合成酶抑制剂、纤维酸衍生物、LDL受体活性的上调节剂、PPAR激动剂、脂肪氧合酶抑制剂及ACAT抑制剂。

20.  如权利要求15的组合，其中该降血脂剂为至少一种选自以下的药剂：普伐他汀、洛伐他汀、斯伐他汀、阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、尼伐他汀、维萨斯他汀、非诺贝特、吉非罗齐、氯贝特及阿伐麦布。

21.  如权利要求8的组合，其中该式I的化合物和该降血脂剂的重量比为约0.01至约100∶1。

22.  一种治疗或延缓以下各病症发展或发作的方法：糖尿病、糖尿病性视网膜病、糖尿病性神经病、糖尿病性肾病、伤口愈合、胰岛素耐受性、高血糖症、高胰岛素血症、X综合征、糖尿病并发症、游离脂肪酸或甘油的高血液含量、血脂障碍、高脂血症、肥胖症、高甘油三酯血症、动脉粥样硬化或高血压，该方法包括将治疗有效量的如权利要求1的化合物给予至需要治疗的哺乳动物。

23.  如权利要求18的方法，其还包括同时或依次给予治疗有效量的至少一种其他治疗剂，该至少一种其他治疗剂选自抗糖尿病剂、抗肥胖剂、抗高血压剂、抗动脉粥样硬化剂、用于抑制移植中同种异体移植物排斥的药剂及降血脂剂。

24.  一种抑制DPP-IV的药物组合物，其含有如权利要求1的化合物。

25.  一种抑制DPP-IV的方法，包括给予包含如权利要求1的化合物的药物组合物。

说明书二肽基肽酶IV的吡咯并吡啶类抑制剂及方法
本申请要求2005年5月20日提交的美国临时申请No.60/682968的优先权的利益，该临时申请的全部公开内容在此加入作为参考。
【技术领域】
本发明涉及二肽基肽酶IV(DPP-4)的吡咯并吡啶类抑制剂，和通过单独使用该吡咯并吡啶类抑制剂，或与其他类型的治疗剂组合使用来治疗多发性疾病或病症的方法。
【背景技术】
二肽基肽酶IV(DPP-4)为位于多种组织(肠、肝、肺、肾)以及循环T-淋巴细胞上的膜结合非典型丝氨酸氨基二肽酶(其中该酶称为CD-26)。其负责活体内代谢性分裂某些内生肽(GLP-1(7-36)，高血糖素)且已证明其在活体外具有抗多种其他肽(GHRH、NPY、GLP-2、VIP)的解蛋白活性。
GLP-1(7-36)为通过后转译处理小肠内的前高血糖素(proglucagon)所获得的30氨基酸肽。GLP-1(7-36)在活体内具有多重作用，包括刺激胰岛素分泌、抑制高血糖素分泌、促进饱食及减慢胃排空。基于其生理学概况，预期GLP-1(7-36)的作用有益于预防及治疗II型糖尿病及潜在性肥胖症。为支持该主张，将GLP-1(7-36)外生性给予至糖尿病患者已证明在该患者群体中的功效。令人遗憾地，GLP-1(7-36)在活体内快速降解，且显示在活体内具有较短的半衰期(t1/2≈1.5分钟)。基于遗传繁殖DPP-4 KO小鼠的研究及选择性DPP-4抑制剂的活体内/活体外研究，已显示DPP-4为GLP-1(7-36)的活体内初级降解酶。DPP-4可使GLP-1(7-36)有效降解为GLP-1(9-36)，经推测GLP-1(9-36)充当GLP-1(7-36)的生理学拮抗物。因此，DPP-4的活体内抑制应增强GLP-1(7-36)的内生含量并减弱其拮抗物GLP-1(9-36)的形成，从而用于改善糖尿病病况。
【发明内容】
根据本发明，提供式(I)的化合物：

其中：
表示该5元环中的一个或两个双键，条件为该6元环为芳族环；
n为1或2；
R为选自以下基团的官能团：氢(H)、卤素、CF3、氰基(CN)、氨基、经取代的氨基、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基、双环烷基(bicycloalkyl)、双环烷基烷基(bicycloalkylalkyl)、烷硫基烷基、芳基烷硫基烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、环杂烷基及环杂烷基烷基，其中任一该官能团任选可经一至三个选自以下基团的取代基(若可能)取代：氢、卤素、烷基、多卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、多卤代烷氧基、烷氧羰基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基、多环烷基(polycycloalkyl)、杂芳氨基、芳氨基、环杂烷基、环杂烷基烷基、羟基、羟基烷基、硝基、氰基、氨基、经取代的氨基、烷氨基、二烷氨基、硫醇基、烷硫基、烷羰基、酰基、烷氧羰基、氨基羰基、炔氨基羰基、烷氨基羰基、烯氨基羰基、烷基羰氧基、烷基羰氨基、芳基羰氨基、烷基磺酰基氨基、烷氨基羰氨基、烷氧基羰氨基、烷基磺酰基、氨基磺酰基、烷基亚磺酰基、磺酰氨基及磺酰基；
X与Z相同或相异，且其独立地选自CH2、CH、C＝O、C＝CR3R4、C＝S、C＝NR3及CR3R4，其中R3与R4为烷基或芳基；
A选自以下基团的官能团：氢(H)、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基、双环烷基、双环烷基烷基、烷硫基烷基、芳基烷硫基烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、环杂烷基、环杂烷基烷基、O-R1、氰基、氨基、-C(O)-OH、-C(O)-NR1R2、-C(O)-OR1、S(O)m-R1、-S(O)2NR1R2、-NR1R2、-NR1-C(O)R2、-NR1-SO2R2，其中任一该官能团任选可经一至三个选自以下基团的取代基(若可能)取代：氢、卤素、烷基、多卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、多卤代烷氧基、羧基、烷氧羰基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基、多环烷基、杂芳氨基、芳氨基、环杂烷基、环杂烷基烷基、环杂烷氨基羰基、环杂烷基羰基、杂芳氨基羰基、环杂烷(烷基)氨基羰基、环烷磺酰(烷基)氨基、卤代磺酰基(烷基)氨基、羟基、羟基烷基、硝基、氰基、氨基、经取代的氨基、烷氨基、二烷氨基、硫醇基、烷硫基、烷羰基、酰基、烷氧羰基、氨基羰基、炔氨基羰基、烷氨基羰基、二烷氨基羰基(其中该烷基相同或相异)、烯氨基羰基、烷基羰氧基、烷基羰氨基、芳基羰氨基、烷基磺酰基氨基、烷氨基羰氨基、烷氧基羰氨基、烷基磺酰基、氨基磺酰基、烷基亚磺酰基、磺酰氨基及磺酰基；
m为0、1或2；
R1与R2相同或相异，且：
(i)各独立为选自以下基团的官能团：氢(H)、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基、双环烷基、双环烷基烷基、烷硫基烷基、芳基烷硫基烷基、环烯基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、环杂烷基及环杂烷基烷基，其中任一官能团任选可经一至三个选自以下基团的取代基(若可能)取代：氢、卤素、烷基、多卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、多卤代烷氧基、烷氧羰基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基、多环烷基、杂芳氨基、芳氨基、环杂烷基、环杂烷基烷基、羟基、羟基烷基、硝基、氰基、氨基、经取代的氨基、烷氨基、二烷氨基、硫醇基、烷硫基、烷羰基、酰基、烷氧羰基、氨基羰基、炔氨基羰基、烷氨基羰基、烯氨基羰基、烷基羰氧基、烷基羰氨基、芳基羰氨基、烷基磺酰基氨基、烷氨基羰氨基、烷氧基羰氨基、烷基磺酰基、氨基磺酰基、烷基亚磺酰基、磺酰氨基及磺酰基；或
(ii)NR1R2中的R1与R2可一同形成5元或6元饱和或部分不饱和的环系统，其选自杂环烷基、杂双环烷基、杂芳基及双环杂芳基，其中该环系统任选可经一至三个选自以下基团的取代基(若可能)取代：氢、卤素、烷基、多卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、多卤代烷氧基、烷氧羰基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基、多环烷基、杂芳氨基、芳氨基、环杂烷基、环杂烷基烷基、羟基、羟基烷基、硝基、氰基、氨基、经取代的氨基、烷氨基、二烷氨基、硫醇基、烷硫基、烷羰基、酰基、烷氧羰基、氨基羰基、炔氨基羰基、烷氨基羰基、烯氨基羰基、烷基羰氧基、烷基羰氨基、芳基羰氨基、烷基磺酰基氨基、烷氨基羰氨基、烷氧基羰氨基、烷基磺酰基、氨基磺酰基、烷基亚磺酰基、磺酰氨基及磺酰基；且
Y为芳基或杂芳基，其中该芳基或杂芳基任选可经一至五个选自以下基团的取代基(若可能)取代：氢、卤素、烷基、多卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、多卤代烷氧基、烷氧羰基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基、多环烷基、杂芳氨基、芳氨基、环杂烷基、环杂烷基烷基、羟基、羟基烷基、硝基、氰基、氨基、经取代的氨基、烷氨基、二烷氨基、硫醇基、烷硫基、烷羰基、酰基、烷氧羰基、氨基羰基、炔氨基羰基、烷氨基羰基、烯氨基羰基、烷基羰氧基、烷基羰氨基、芳基羰氨基、烷基磺酰基氨基、烷氨基羰氨基、烷氧基羰氨基、烷基磺酰基、氨基磺酰基、烷基亚磺酰基、磺酰氨基及磺酰基。
以上式I的定义包括式I的所有药学上可接受的盐、立体异构体及前药酯类。
式I的化合物具有活体内作为DPP-4抑制剂的活性，且适用于治疗糖尿病以及糖尿病的微血管及大血管并发症，诸如视网膜病、神经病、肾病及伤口愈合。该疾病及病症有时亦称为″糖尿病并发症″。
本发明提供提供式I的化合物、使用该化合物的药物组合物以及使用该化合物的方法。具体而言，本发明提供包含单独使用或与药学上可接受的载体组合的治疗有效量的式I的化合物的药物组合物。
本发明进一步提供一种治疗或延缓包括糖尿病并发症(包括视网膜病、神经病、肾病及延迟性伤口愈合(delayed wound healing))的糖尿病、尤其II型糖尿病，以及相关疾病(诸如胰岛素耐受性(insulin resistance)(葡萄糖体内平衡受损)、高血糖症(hyperglycemia)、高胰岛素血症(hyperinsulinemia)、脂肪酸或甘油的高血液含量(elevated blood levels of fatty acids or glycerol)、肥胖症(obesity)、包括高甘油三酯血症(hypertriglyceridemia)的高脂血症(hyperlipidemia)、X综合征(Syndrome X)、血脂障碍(dyslipidemia)、动脉粥样硬化(atherosclerosis)及高血压(hypertension))的发展或发作以及增加高密度脂蛋白含量的方法，其中将治疗有效量的式I的化合物给予至需要治疗的哺乳动物，诸如人类患者。
本发明的化合物可单独使用、与本发明的其他化合物组合使用或与本文中所述治疗范围内的一种或多种其他药剂组合使用。
此外，本发明提供一种治疗糖尿病与如上文及下文所限定的相关疾病的方法，其中将治疗有效量的式I的化合物与至少一种其他类型的治疗剂(诸如抗糖尿病剂和/或降血脂剂)的组合给予至需要治疗的人类患者。
通常，采用式(I)的化合物与抗糖尿病剂或其他类型的治疗剂(视其施药方式而定)的重量比在约0.01∶1至约500∶1、优选约0.1∶1至约100∶1、更优选约0.2∶1至约10∶1的范围内。
本发明的特定实施方案包括具有以下结构的式I的化合物：

本发明的其他实施方案包括具有以下结构的式I的化合物：









此外，根据本发明，提供具有以下结构的新型外消旋或纯手性中间物：


【具体实施方式】
本发明的式(I)的化合物可以如以下反应方案及其说明所示来制备，亦可使用本领域技术人员可使用的相关公开文献的程序制备。这些反应的示例性试剂及程序示于下文及操作实施例中。
方案1

方案1提供制备式(10)的氨基甲基二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮的通用路线。可使式(1)的氯酮(自商业来源获得)与醛(2)反应以形成共轭酯(3)，其与烯胺(4)反应后可产生式(5)的二氢吡啶。式(4)的烯胺可自商业来源获得或可通过使相应的乙酰乙酸酯与氨反应而制备。可以MnO2、HNO3或本领域已知的其他方法将二氢吡啶(5)氧化至吡啶(6)。在加热或微波加热条件下使氯甲基吡啶(6)与苯胺或式(7)的胺A-NH2(其中A如式I所定义的)反应可产生二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮(8)。使用本领域已知的任一方法可使酯(8)转化为伯醇(9)。例如，当R2＝Me时，可以诸如LiBH4的适当氢化物还原剂还原酯(8)。当R2＝PhCH2时，可先使酯(8)氢解成酸，转化为诸如混合酐的活化酯，然后以诸如NaBH4的还原剂还原。接着使用诸如CH3SO2Cl或SOCl2的试剂将所产生醇(9)转化为氯化物或甲磺酸盐。接着通过使前驱物氯化物或甲磺酸盐与NH3/MeOH在加热或微波加热条件下反应可获得所需伯胺(10)。
方案2描述制备式(18)的二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-7-酮的路线。
方案2

可使式(11)的丙烯酸酯与式(7)的胺或苯胺及式(12)所示类型的草酸二烷基酯缩合以产生二氧杂吡咯烷羧酸酯(13)。在酸存在下(13)与醛(2)反应可产生式(14)的共轭酮。经由式(14)与烯胺(4)的缩合反应可获得二氢吡啶(15)。可以MnO2、HNO3或本领域已知的其他方法使二氢吡啶(15)氧化为吡啶(16)。遵循与方案1所述的顺序类似的顺序可完成酯(16)至伯胺(18)的转化。
方案3中描述制备式(18)的二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-7-酮的替代方法。
方案3

遵循与方案2所示类似的顺序由丙烯酸酯(11)、草酸二烷基酯(12)及胺P1-NH2(19)制备伯胺(25)。P1可为可自内酰胺(26)除去的4-甲氧基苄基、4-甲氧基苯基或任何适当的保护基。可以诸如叔丁氧羰基的适当保护基(P2)保护伯胺以产生经有差别保护的氨基内酰胺(26)。使P1基团去保护产生内酰胺(27)。可使内酰胺(27)与硼酸(28)偶合以产生内酰胺(29)，使P2基团去保护后产生伯胺(18)。或者，可使用本领域已知的其他偶合方法将内酰胺(27)转化为经取代的内酰胺(29)。
方案4提供制备式(32)的吡咯并[3，4-b]吡啶的路线。可将酯(16)上的内酰胺羰基(lactam carbonyl)选择性还原为吡咯并吡啶酯(30)。适当还原剂的实例为DIBAL-H。进一步还原吡咯并吡啶(30)可产生醇(31)，其进而可以如前所述被官能化为伯胺(32)。
方案4

方案5中显示6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶(34)的通用合成。
方案5

以诸如LAH的还原剂可将内酰胺-酯(16)还原为6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶醇(33)。可以如前所述进一步官能化以产生伯胺(34)。
方案6描述制备式(35)的5，6-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-7-酮的路线。
方案6

使内酰胺(27)中的P1基团去保护可产生内酰胺-胺(35)。当P1＝4-甲氧基苯基或4-甲氧基苄基时，去保护可在硝酸铈铵存在下进行。
方案7

以诸如NaH的碱使内酰胺(27)去质子化，接着以诸如烷基卤、芳基及烷基磺酰氯、异氰酸芳酯及异氰酸烷基酯及烷氧羰基甲基卤化物的适当亲电子试剂加以处理，可产生经取代的内酰胺(29)，将其去保护后可产生相应的伯胺(18)。或者，可对酯(23)进行碱介导的官能化，接着可以使用与方案3中所示顺序类似的顺序使其转化成相应的伯胺。
方案8

方案8提供制备式(35)的氨基甲基二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮的通用路线。氯甲基吡啶(6)与式(30)(其中R8与R9可为C1-C6烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、环烷基(3-6元)或F基)的经适当保护的氨基酸酯在加热或微波加热条件下反应，可产生二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮(31)且可如方案1将其进一步加以处理以获得化合物(33)。可使用常规保护-去保护方法获得N-保护酸(34)，该酸在适当偶合剂存在下可与伯胺或仲胺偶合并接着经N-去保护，产生酰胺-胺(35)。通过分离终产物(35)或任一中间物(诸如(6)或醇(32))可获得该纯对映异构形式的酰胺-胺(35)。
方案9

如方案9中所示，或者遵循类似于方案8中所示的顺序可由经酰胺取代的烷基胺(36)制得酰胺-胺(35)。通过分离终产物(35)或任一中间物(诸如(6)或醇(38))可获得该纯对映异构形式的酰胺-胺(35)。
相应的氨基甲基二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-7-酮(36)

可通过与方案8及9中对于氨基甲基二氢吡咯并并[3，4-b]吡啶-5-酮(35)所述类似的方法从二酯(37)或酰胺-酯(38)出发获得。

使用方案7从经适当保护的氨基酸酯出发可获得二酯(37)。
方案10

或者可使用方案10中所示的顺序制备诸如(10)或(35)的胺。可以与方案1中所示方式类似的方式制备中间物(42)，并接着使其还原以产生伯胺(10)或(35)。
另外，使用本领域已知的方法，经由同系化(homologation)相应羧酸(例如8或16，其中R2＝H)可制备n＝2的化合物I。此外，使用劳森(Lawesson)试剂可由适当内酰胺中间物(例如8或16，其中R2＝烷基、苄基或适当保护基)制备相应的硫羰基类似物(化合物I，X或Z为C＝S)(参见例如J.Org.Chem.1992，57(14)，4000-4005；J.Org.Chem.1990，55(9)，2694-2702)。在POCl3存在下通过使相应内酰胺(其中X或Z为C＝O)与烷基胺或芳胺缩合可制备5-或7-烷氨基或芳氨基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-基)甲胺(化合物I，X或Z为C＝NR3)(参见例如Ukrainskii Khimicheskii Zhurnal 1984，50(11)，1198-1203)。
使用本领域已知的方法可将以阻转异构体形式存在的所有产物胺分离成单独的对映异构体。例如，通过结晶非对映异构体盐(酒石酸或N-保护氨基酸，参见例如Eliel，Ernest L；Wilen，Samuel H.Doyle，Michael P.BasicOrganic Stereochemistry，Wiley，2001)、手性制备型HPLC、手性超临界流层析、使用酶、使用手性衍生剂(derivatizing agent)(参见例如J.Org.Chem.1983，48(15)，2520-2527)或制备及层析分离非对映异构体衍生物来分离。或者，可对合成这些产物胺中的任一中间物应用该方法。
定义
除非在具体实例另有限定，以下定义应用于整个本说明书中所使用的术语。
除非另有说明，本文中单独或作为其他基团一部分所使用的术语″烷基″或″alk″包括具有指定碳原子数的支链及直链饱和脂族烃基。具体而言，除非另有说明，″烷基″指优选具有1至40个碳原子、更优选1至10个碳原子、甚至更优选1至6个碳原子的单基支链或非支链饱和烃链，诸如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、正己基、正辛基、正癸基、正十二烷基、2-乙基十二烷基、十四烷基及类似基团。除非烷基取代基的定义另有限定，该烷基任选可经一个或多个选自诸如以下各基团的取代基取代：卤素、烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、芳基(芳基)或二芳基、芳基烷基、芳基烷氧基、烯基、环烷基、环烷基烷基、环烷基烷氧基、氨基、羟基、羟基烷基、酰基、杂芳基、杂芳氧基、杂芳基烷基、杂芳基烷氧基、芳氧基烷基、烷硫基、芳基烷硫基、芳氧基芳基、烷基酰氨基、烷酰基氨基、芳基羰氨基、芳基磺酰基、烷基磺酰基、环烷基磺酰基、硝基、氰基、硫醇基、卤代烷基、三卤代烷基和/或烷硫基。
除非另有说明，本文中单独或作为其他基团一部分所使用的术语″环烷基″或″碳环″包括含有1至3个环的饱和或部分不饱和(含有1或2个双键)环状烃基团，包括总共含有3至20个成环碳原子、优选3至10个成环碳原子的单环烷基、双环烷基及三环烷基，且该环状烃基团可稠合1或2个如对于芳基所描述的芳族环，该环状烃基团包括例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环癸基及环十二烷基、环己烯基、

任意该基团任选可经一个或多个取代基(诸如本文中对于烷基或芳基所描述的取代基)取代。
本文中单独或作为其他基团一部分所使用的术语″芳基″或″Ar″指具有5至20个碳原子、单环(例如苯基)或多重缩合(稠合)环(例如萘基或蒽基)的不饱和芳族碳环基团。代表性实例包括(但不限于)芳基，诸如苯基、萘基、四氢萘基、茚满及联苯基。除非芳基取代基的定义另有限制，该芳基任选可经一个或多个选自以下基团的取代基取代：氢、卤素、卤代烷基、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烯基、三氟甲基、三氟甲氧基、炔基、环烷基-烷基、环杂烷基、环杂烷基烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基、芳氧基、芳氧基烷基、芳基烷氧基、芳硫基、芳基偶氮基、杂芳基烷基、杂芳基烯基、杂芳基杂芳基、杂芳氧基、羟基、硝基、氰基、氨基、任意本文所述的烷基取代基或经取代的氨基(其中该氨基包括1或2个取代基(其为烷基、芳基或定义中所提及的任意其他芳基化合物))、硫醇基、烷硫基、芳硫基、杂芳硫基、芳硫烷基、烷氧基芳硫基、烷羰基、芳羰基、烷基-氨基羰基、芳氨基羰基、烷氧基羰基、氨基羰基、烷基羰氧基、芳基羰氧基、烷基羰氨基、芳基羰氨基、烷基磺酰基、环烷基磺酰基、芳基亚磺酰基、芳基亚磺酰基烷基、芳基磺酰氨基或芳基磺酰氨基羰基和/或本文所列举的任意烷基取代基。
除非另有说明，如本文单独或作为其他基团一部分所使用的术语″环杂烷基″、″杂环″或″杂环基″指具有1至40个碳原子及1至10个杂环原子、优选1至4个杂环原子(选自氮、硫、磷和/或氧)的单环、多重稠合环或多共价方式连接的环的饱和或不饱和基团。优选地，″杂环″或″杂环基″意指稳定5至7元单环或双环或7至10元双环杂环，其可为饱和、部分不饱和或芳族杂环，且其包含碳原子及1至4个独立选自氮、氧及硫的杂原子，且其中该氮及硫杂原子任选可经氧化且该氮杂原子任选可经季铵化，且该基团包括任意以上所定义的杂环与苯环稠合的双环基团。杂环基可在碳或氮、硫、磷和/或氧杂原子上经诸如(但不限于)本文中对于烷基或芳基所述的取代基取代，只要所产生的化合物稳定。例如：

类似基团。
本文中单独或作为其他基团一部分所使用的″杂芳基″包含不饱和杂环基。杂芳基的实例包括：含有1至4个氮原子的不饱和3至6元杂单环基，例如吡咯基、吡咯啉基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、嗒嗪基、三唑基(例如4H-1，2，4-三唑基、1H-1，2，3-三唑基、2H-1，2，3-三唑基等)、四唑基(例如1H-四唑基、2H-四唑基等)等；含有1至5个氮原子的不饱和稠合杂环基，例如吲哚基、异吲哚基、吲嗪基、苯并咪唑基、喹啉基、异喹啉基、吲唑基、苯并三唑基、四唑嗒嗪基(例如四唑[1，5-b]嗒嗪基等)等；含有氧原子的不饱和3至6元杂单环基团，例如哌喃基、呋喃基等；含有硫原子的不饱和3至6元杂单环基团，例如噻吩基等；含有1至2个氧原子及1至3个氮原子的不饱和3至6元杂单环基团，例如唑基、异唑基、二唑基(例如1，2，4-二唑基、1，3，4-二唑基、1，2，5-二唑基等)等；含有1至2个氧原子及1至3个氮原子的不饱和稠合杂环基(例如苯并唑基、苯并二唑基等)；含有1至2个硫原子及1至3个氮原子的不饱和3至6元杂单环基团，例如噻唑基、噻二唑基(例如1，2，4-噻二唑基、1，3，4-噻二唑基、1，2，5-噻二唑基等)等；含有1至2个硫原子及1至3个氮原子的不饱和稠合杂环基(例如苯并噻唑基、苯并噻二唑基等)及类似基团。此外，杂芳基的实例包括以下基团：

及类似基团。除非杂芳基取代基的定义另有限制，该杂芳基任选可经一个或多个取代基(诸如本文中对于烷基或芳基所述的那些取代基)取代。
除非另有说明，本文中单独或作为其他基团一部分所使用的术语″烯基″指正链中具有2至20个碳、优选2至12个碳且更优选1至8个碳、正链中包括1至6个双键的直链或支链基团，诸如乙烯基、2-丙烯基、3-丁烯基、2-丁烯基、4-戊烯基、3-戊烯基、2-己烯基、3-己烯基、2-庚烯基、3-庚烯基、4-庚烯基、3-辛烯基、3-壬烯基、4-癸烯基、3-十一烯基、4-十二烯基、4，8，12-十四碳三烯基及类似基团。该烯基任选可经一个或多个取代基(诸如对于烷基所公开的那些取代基)取代。
除非另有说明，本文中单独或作为其他基团一部分所使用的术语″炔基″指正链中具有2至20个碳、优选2至12个碳且更优选2至8个碳、正链中包括一个三键的直链或支链基团，诸如2-丙炔基、3-丁炔基、2-丁炔基、4-戊炔基、3-戊炔基、2-己炔基、3-己炔基、2-庚炔基、3-庚炔基、4-庚炔基、3-辛炔基、3-壬炔基、4-癸炔基、3-十一炔基、4-十二炔基及类似基团。该炔基任选可经一个或多个取代基(诸如对于烷基所公开的那些取代基)取代。
本文中单独或作为其他基团一部分所使用的术语″环烯基″指含有3至12个碳、优选5至10个碳及1或2个双键的部分不饱和环状烃。示例性环烯基包括环丁烯基、环戊烯基、环己烯基、环庚烯基、环辛烯基、环己二烯基及环庚二烯基。该环烯基任选可经一个或多个取代基(诸如对于烷基所公开的那些取代基)取代。
本文中单独或作为其他基团一部分所使用的术语″双环烷基″包括饱和双环基团，诸如(不限于)[3.3.0]双环辛烷、[4.3.0]双环壬烷、[4.4.0]双环癸烷(十氢萘)、[2.2.2]双环辛烷等。
本文中单独或作为其他基团一部分所使用的术语″多环烷基″包括两个或两个以上如本文中所定义的环烷基环系统，其中至少一个碳原子为至少两个单独可确认的环系统的部分。多环烷基可包含两个碳原子之间的桥联，该多环烷基例如为双环[1.1.0]丁基、双环[3.2.1]辛基、双环[5.2.0]壬基、三环[2.2.1.0.1]庚基、降冰片基及蒎烷基(pinanyl)。多环烷基可含有一个或多个稠合环系统，例如十氢萘基(来源于十氢萘的基团)及全氢蒽基。多环烷基可含有螺环连接(spiro union)，其中单个原子为两个环的唯一共用原子，该多环烷基例如为螺[3.4]辛基、螺[3.3]庚基及螺[4.5]癸基。
本文中单独或作为其他基团一部分所使用的术语″卤素″或″卤代″指氯、溴、氟及碘以及CF3。
本文中单独或作为其他基团一部分所使用的术语″烷氧基″指经由如本文中所定义的烷基附接至母分子部分的如本文中所定义的烷基。
本文中单独或作为其他基团一部分所使用的术语″卤代烷氧基″指进一步经一个或多个卤原子(诸如氟、氯或溴)取代以提供卤代烷氧基的如本文所定义的烷氧基。实例包括(但不限于)氟代甲氧基、氯代甲氧基、三氟甲氧基、三氟甲氧基、氟代乙氧基及氟丙氧基。
本文中单独或作为其他的部分所使用的术语″酰基″，如本文中所定义，指键连至羰基()的有机基团；酰基实例包括附接至羰基的取代基，诸如烷酰基、烯酰基、芳酰基、芳烷酰基、杂芳酰基、环烷酰基、环杂烷酰基及类似基团。
本文中单独或作为其他基团一部分所使用的术语″环烷基烷基″、″芳基烷基″、″环杂烷基″、″双环烷基烷基″或″杂芳基烷基″指如本文所定义的环烷基、芳基、环杂基、双环烷基或杂芳基经由如本文所定义的烷基附接至母分子部分。芳基烷基的代表性实例包括(但不限于)苄基、2-苯基乙基、3-苯基丙基及类似基团。
本文中单独或作为其他基团一部分所使用的术语″环杂烷基烷基″指经由C原子或杂原子键连接至(CH2)r链(其中″r″可为1至10)的如本文中所定义的环杂烷基。
本文中单独或作为其他基团一部分所使用的术语″多卤代烷基″指具有2至9个、优选2至5个卤素取代基的如以上所定义的″烷基″，诸如CF3CH2、CF3或CF3CF2CH2。
如本文中所使用的术语″多卤代烷氧基″指具有2至9个、优选2至5个卤素取代基的如上文所定义的″烷氧基″，诸如CF3CH2O-、CF3O-或CF3CF2CH2O-。
本文中单独或作为其他基团一部分所使用的术语″硫醇基″或″硫基″，指(-S)或(-S-)。
术语″烷硫基″或″芳基烷硫基″指经由硫醇基附接至母分子部分的如本文中所定义的烷基或/和芳基烷基。
术语″烷硫基烷基″或″芳基烷硫基烷基″指经由烷基连接至母分子部分的如本文所定义的烷硫基或/和芳基烷硫基。
本文中单独或作为其他基团一部分所使用的术语″羟基″为--OH基团。
本文中单独或作为其他基团一部分所使用的术语″羟基烷基″指经由如本文中所定义的烷基附接至母分子部分的如本文所定义的羟基。
本文中单独或作为其他基团一部分所使用的术语″氰基″为--CN基团。
如本文中所使用的术语″硝基″指--NO2基团。
术语″亚磺酰基″，无论单独使用或与其他术语相连使用，诸如烷基亚磺酰基，均分别表示二价基团--S(O)--。
本文中单独或作为其他基团一部分所使用的术语″烷基亚磺酰基″指经由如本文中所定义的亚磺酰基附接至母分子部分的如本文所定义的烷基。
本文中单独或作为其他基团一部分所使用的术语″磺酰基″为SO2基团。
如本文中所使用的术语″烷基磺酰基″或″氨基磺酰基″指经由如本文中所定义的磺酰基附接至母分子部分的如本文中所定义的烷基或氨基。
如本文中所使用的术语″氨基″指-NH3基团或胺键：-NRa-，其中Ra可如以下在″经取代的氨基″的定义中所描述。
本文中单独或作为其他基团一部分所使用的术语″经取代的氨基″指经1个或2个取代基所取代的氨基。例如，NRaRb，其中Ra与Rb可相同或相异，且例如选自氢、烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、芳基、杂芳基、杂环基、芳基烷基、杂芳基烷基、环杂烷基、环杂烷基烷基、环烷基烷基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基烷基或硫代烷基。该取代基任选可进一步经如以上所列举的任意烷基取代基取代。此外，氨基取代基可与它们所连接的氮原子一同形成任选经烷基、烷氧基、烷硫基、卤素、三氟甲基或羟基取代的1-吡咯烷基、1-哌啶基、1-吖庚因基、4-吗啉基、4-硫杂吗啉基、1-哌嗪基、4-烷基-1-哌嗪基、4-芳基烷基-1-哌嗪基、4-二芳基烷基-1-哌嗪基、1-吡咯烷基、1-哌啶基或1-吖庚因基。
本文中单独或作为其他基团一部分所使用的术语″二烷氨基″指具有2个烷基取代基的经取代的氨基。例如，NRaRb，其中Ra与Rb分别为如本文所定义的烷基。
如本文所使用的术语″羰基″指-C(O)-基团。
如本文所使用的术语″氨基羰基″、″烷基羰基″、″烷氧羰基″、″芳羰基″、″炔氨基羰基″、″烷氨基羰基″及″烯氨基羰基″指经由如本文所定义的羰基附接至母分子部分的如本文所定义的氨基、烷基、烷氧基、芳基、炔氨基、烷氨基或烯氨基。
如本文中所使用的术语″杂芳基氨基″、″芳氨基″、″烷氨基″、″烷基羰氨基″、″芳基羰氨基″、″烷基磺酰基氨基″、″烷氨基羰氨基″或″烷氧基羰氨基″指经由如本文所定义的氨基附接至母分子部分的如本文所定义的杂芳基、芳基、烷基、烷羰基、芳羰基、烷基磺酰基、烷氨基羰基或烷氧羰基。
术语″磺酰氨基″指--S(O)2--NRaRb，其中Ra与Rb如上文对于″经取代的氨基″所定义。
如本文中所使用的术语″烷基羰氧基″，指″烷基-CO--O--″，其中烷基如上文所定义。
″任选″或″任选地″意指随后所描述的事件或情形可发生或可不发生，且意指该描述包括(但不限于)该事件或情形发生的实例及其不发生的实例。例如，任选经取代的烷基意指烷基可经或可不经那些在经取代烷基的定义中所列举的基团取代。
如本文中所使用的″经取代″，无论表达或暗示，且无论之前是否冠有″任选″，均意指所指定原子(C、N等)上的任何一个或多个氢被选自所示的基团置换，条件为不超过指定原子的正常化合价且该取代产生稳定化合物。例如，若CH2经酮基取代基(＝O)取代时，则该原子上2个氢原子被置换。只有当组合产生稳定化合物时，取代基和/或变体的组合才容许。此外，当给定结构中一个以上位置可经选自特定基团的取代基取代时，该取代基在每一位置可相同或相异。
术语″前药″表示在给予至受检者时通过代谢或化学过程经受化学转化以产生式(I)的化合物和/或其盐和/或其溶剂化物的化合物。例如，含有羧基的化合物可形成充当前药的生理学可水解酯，其在体内被水解，产生式(I)化合物本身。因为许多情况中水解主要在消化酶的影响下发生，所以该前药优选口服给药。若酯本身为活性的，或在水解发生于血液的那些情况中，则可使用非经肠给药方式。式(I)的化合物的生理学可水解酯的实例为例如乙酸酯、特戊酸酯、甲基碳酸酯及苯甲酸酯，且包括C1-6烷基苄基、4-甲氧基苄基、二氢茚基、酞酰基、甲氧基甲基、C1-6烷酰氧基-C1-6烷基(例如乙酰氧甲基、特戊酰氧甲基或丙酰氧甲基)、C1-6烷氧羰氧基-C1-6烷基(例如甲氧羰氧基甲基或乙氧羰氧基甲基)、甘氨酰氧基甲基、苯基甘氨酰氧基甲基、(5-甲基-2-酮基-1，3-二氧杂戊烯-4-基)-甲基；及例如青霉素与头孢菌素技术中所使用的其他熟知的生理学可水解酯。该酯可通过本领域已知的常规技术来制备。
前药酯实例包括以下基团：(1-烷酰氧基)烷基，诸如
或
其中Rz、Rt及Ry为H、烷基、芳基或芳基烷基；然而，RzO不可为HO。该前药酯的实例包括
CH3CO2CH2-，，t-C4H5CO2CH2-，或
合适的前药酯的其他实例包括


其中Rz可为H、烷基(诸如甲基或叔丁基)、芳基烷基(诸如苄基)或芳基(诸如苯基)；Rv为H、烷基、卤素或烷氧基；Ru为烷基、芳基、芳基烷基或烷氧基，且n1为0、1或2。
对于前药衍生物的其他实例，参见：
a)Design of Prodrugs，H.Bundgaard编辑(Elsevier，1985)及Methods inEnzymology，第112卷，第309-396页，K.Widder等人编辑(Academic Press，1985)；
b)A Textbook of Drug Design and Development，edited byKrosgaard-Larsen与H.Bundgaard编辑，第5章，″Design and Application ofProdrugs，″(H.Bundgaard)，第113-191页(1991)；
c)H.Bundgaard，Advanced Drug Delivery Reviews，第8卷，第1-38页(1992)；及
d)The Practice of Medicinal Chemistry，Wermuth等人，第31章(AcademicPress 1996)。
所有以上参考文献均以引用的方式并入本文中。
术语″互变异构体″指式(I)的化合物及其盐可以其互变异构形式存在，其中氢原子得以转移至分子的其他部分且分子的原子之间的化学键因此而重排。应了解，所有互变异构形式(只要其可存在)均包括于本发明内。
术语药学上可接受的″盐″及″盐类″亦包括酸加成盐。其可由以下各酸形成：例如，强无机酸，诸如无机酸，例如硫酸、磷酸或诸如HCl或HBr的氢卤酸；强有机羧酸，诸如未经取代或经例如卤素取代的1至4个碳原子的烷羧酸，例如乙酸，诸如饱和或不饱和二羧酸，例如草酸、丙二酸、琥珀酸、顺丁烯二酸、反丁烯二酸、邻苯二甲酸或对苯二甲酸，诸如羟基羧酸，例如抗坏血酸、羟基乙酸、乳酸、苹果酸、酒石酸或柠檬酸，诸如氨基酸，例如天冬氨酸或谷氨酸或离氨酸或精氨酸；或苯甲酸；或有机磺酸，诸如未经取代或经例如卤素取代的(C1-C4)烷基或芳基磺酸，例如甲磺酸或对甲苯磺酸。
混合物形式或纯净形式或基本纯净形式的本发明化合物的所有立体异构体均涵盖于本发明中。本发明的化合物可在任一碳原子(包括任一取代基或R取代基)处具有非对称中心。因此，式I的化合物可以对映异构或非对映异构形式或以其混合形式存在。制备方法可利用外消旋体、对映异构体或非对映异构体作为起始物质。当制备非对映异构产物或对映异构产物时，可通过常规方法例如层析或分步结晶将其分离。
本发明的化合物可成游离或溶剂化物(例如水合物)形式。
统称为″糖尿病并发症″的病况、疾病及病态包括视网膜病、神经病及肾病、勃起功能障碍、延迟性伤口愈合及糖尿病的其他已知的并发症。
给予本发明的治疗剂包括给予治疗有效量的本发明的药剂。本文中所使用的术语″治疗有效量″指通过给予本发明的组合物治疗或预防可治疗的病况的治疗剂用量。此量为足以表现可检测的治疗或预防或改善效果的量。该效果可包括，例如本文中所列举的病况的治疗或预防。适于受检者的准确有效量取决于受检者大小及健康程度、所治疗的病况的性质及程度、治疗医师的建议及对于给药所选的疗法或疗法的组合。因此，预先指定准确有效量并不适用。
如本文中所使用的术语″其他类型的治疗剂″包括(但不限于)一种或多种抗糖尿病剂(除式I的DPP-IV外)、一种或多种抗肥胖剂、一种或多种抗高血压剂、一种或多种抗血小板剂、一种或多种抗动脉粥样硬化剂和/或一种或多种降血脂剂(包括抗动脉粥样硬化剂)。
效用与组合
A.效用
本发明的化合物具有作为在哺乳动物的各种组织(诸如肠、肝、肺及肾)中所发现的二肽基肽酶IV的抑制剂的活性。经由活体内抑制二肽基肽酶IV，本发明的化合物具有增强GLP-1(7-36)的内生含量并减弱其拮抗物GLP-1(9-36)形成的能力。
因此，可将本发明的化合物给予至优选为人类的哺乳动物以便治疗各种病况及病症，包括(但不限于)治疗或延缓糖尿病(优选II型，葡萄糖耐量降低(impaired glucose tolerance)、胰岛素耐受性及诸如肾病、视网膜病、神经病及白内障的糖尿病并发症)、高血糖症、高胰岛素血症、异常血脂症、高胆固醇血症、游离脂肪酸或甘油的高血液含量、高脂血症、高甘油三酯血症、肥胖症、伤口愈合、组织局部缺血、动脉粥样硬化及高血压的发展或发作。亦可利用本发明的化合物增加高密度脂蛋白(HDL)的血液含量。
此外，使用本发明的化合物可治疗如Johannsson J.Clin.Endocrinol.Metab.82，727-34(1997)中所详述的统称为″X综合征″或代谢性综合征的病况、疾病及病态。
B.组合
本发明在其范畴内包括包含单独或与医药载剂或稀释剂组合的作为活性成分的治疗有效量的至少一种式I的化合物的药物组合物。本发明的化合物任选可单独、与本发明的其他化合物组合或与一种或多种其他治疗剂(例如抗糖尿病剂或其他医药活性物质)组合使用。
适合与本发明的化合物组合的其他″治疗剂″包括(但不限于)适用于治疗前述病症的已知治疗剂，该治疗剂包括：抗糖尿病剂、抗高血糖剂、降血脂剂、抗肥胖剂、抗高血压剂及食欲抑制剂。适合与本发明的化合物组合的其他治疗剂包括治疗不孕症的药剂、治疗多囊性卵巢综合征的药剂、治疗发育病症和/或脆弱(frailty)的药剂、抗关节炎剂、预防移植中同种异体移植物排斥的药剂、治疗自体免疫疾病的药剂、抗AIDS药剂、治疗炎性肠病/综合征的药剂、治疗神经性厌食症的药剂及抗骨质疏松症药剂。
适于与本发明的化合物组合使用的抗糖尿病药剂的实例包括双胍(例如二甲双胍或苯乙双胍)、葡萄糖苷酶抑制剂(例如阿卡波糖(acarbose)或米格列醇(miglitol))、胰岛素(包括胰岛素促分泌素或胰岛素致敏剂)、氯茴苯酸(meglitinide)(例如瑞格列奈(repaglinide))、磺酰脲(例如格列美脲(glimepiride)、格列本脲(glyburide)、格列齐特(gliclazide)、氯磺丙脲及格列吡嗪(glipizide))、双胍/格列本脲组合物(例如Glucovance)、噻唑烷二酮(例如曲格列酮(troglitazone)、罗格列酮(rosiglitazone)及吡格列酮(pioglitazone))、PPAR-α激动剂、PPAR-γ激动剂、PPARα/γ双重激动剂、PPAR-δ激动剂、PPARα/γ/δ三重激动剂、肝糖磷酸化酶(glycogen phosphorylase)抑制剂、脂肪酸结合蛋白(aP2)的抑制剂、高血糖素样肽-1(GLP-1)或GLP-1受体的其他激动剂、STLT2抑制剂及其他二肽基肽酶IV(DPP4)抑制剂。
其他合适的噻唑烷二酮包括Mitsubishi的MCC-555(公开于美国专利第5,594,016号)、 Glaxo-Wellcome的GL-262570、恩格列酮(englitazone)(CP-68722，Pfizer)或达格列酮(darglitazone)(CP-86325，Pfizer，伊沙丽他酮(isaglitazone)(MIT/J&J))、JTT-501(JPNT/P&U)、L-895645(Merck)、R-119702(Sankyo/WL)、NN-23 44(Dr.Reddy/NN)或YM-440(Yamanouchi)。
PPAR-α激动剂、PPAR-γ激动剂、PPAR-δ激动剂及PPAR α/γ双重激动剂的实例包括木拉格里特(muraglitizar)、皮里格里特(peliglitazar)、AR-HO39242(Astra/Zeneca)、GW-409544(Glaxo-Wellcome)、GW-501516(Glaxo-Wellcome)、LY-919818(Lilly/Ligand)、KRP297(KyorinMerck)，以及Murakami等人，″A NovelInsulin Sensitizer Acts As a Coligand forPeroxisome Proliferation-Activated Receptor Alpha(PPAR alpha)and PPARgamma.Effect on PPAR alpha Activation on Abnormal Lipid Metabolism inLiver of Zucker Fatty Rats″，Diabetes 47，1841-1847(1998)，WO 01/21602及美国专利6,653,314中所公开的那些激动剂，该公开内容通过引用并入本文中，那些激动剂的使用剂量如该公开内容所述，其作为优选而指定的化合物优选用于本文中。
合适的aP2抑制剂包括美国申请第09/391,053号(1999年9月7日申请)及美国申请第09/519,079号(2000年3月6日申请)中所公开的那些抑制剂，其使用剂量如本文中所述。
合适的其他DPP4抑制剂包括萨克格里亭(saxagliptin)；WO99/38501、W099/46272、W099/67279(PROBIODRUG)、W099/67278(PROBIODRUG)、W099/61431(PROBIODRUG)中所公开的那些抑制剂；如Hughes等人，Biochemistry，38(36)，11597-11603，1999中所公开的NVP-DPP728A((1-[[[2-[(5-氰基吡啶-2-基)氨基]乙基]氨基]乙酰基]-2-氰基-(S)-吡咯烷))(Novartis)；TSL-225(色氨酰基-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸)(Yamada等人，Bioorg.&Med.Chem.Lett.8(1998)1537-1540中所公开)；2-氰基四氢吡咯(2-cyanopyrrolidides)及4-氰基四氢吡咯(如Ashworth等人，Bioorg.&Med.Chem.Lett.第6卷，第22期，第1163-1166页及第2745-2748页(1996)中所公开)；美国申请第10/899641号、WO 01/868603及美国专利第6,395,767号中所公开的化合物，使用剂量如以上参考文献中所述。
其他合适的氯茴苯酸包括那格列奈(Novartis)或KAD1229(PF/Kissei)。
适于与本发明的化合物组合使用的抗高血糖剂的实例包括高血糖素样肽-1(GLP-1)，诸如GLP-1(1-36)酰胺、GLP-1(7-36)酰胺、GLP-1(7-37)(如美国专利第5,614,492号中所公开)；以及依森泰德(exenatide)(Amylin/Lilly)；LY-315902(Lilly)；MK-0431(Merck)；里拉格泰德(liraglutide)(NovoNordisk)；ZP-10(Zealand Pharmaceuticals A/S)；CJC-1131(Conjuchem Inc)及WO03/033671中所公开的化合物。
适于与本发明的化合物组合使用的降血脂剂的实例包括一种或多种MTP抑制剂、HMG CoA还原酶抑制剂、角鲨烯合成酶抑制剂、纤维酸衍生物、ACAT抑制剂、脂肪氧合酶抑制剂、胆固醇吸收抑制剂、回肠Na+/胆酸共输送抑制剂(co-transporter inhibitor)、LDL受体活性的上调节剂(up-regulator)、胆酸多价螯合剂、胆固醇酯转移蛋白(例如CETP抑制剂，诸如CP-529414(Pfizer)及JTT-705(Akros Pharma))、PPAR激动剂(如上文所述)和/或烟碱酸及其衍生物。
如上文所述可使用的MTP抑制剂包括美国专利第5,595,872号、美国专利第5,739,135号、美国专利第5,712,279号、美国专利第5,760,246号、美国专利第5,827,875号、美国专利第5,885,983号及美国专利第5,962,440号中所公开的那些抑制剂。
可与一种或多种式I的化合物组合使用的HMG CoA还原酶抑制剂包括美伐他汀(mevastatin)及如美国专利第3,983,140号中所公开的相关化合物、洛伐他汀(lovastatin)(莫维诺林(mevinolin))及如美国专利第4,231,938号的相关化合物、普伐他汀(pravastatin)及如美国专利第4,346,227号中所公开的相关化合物、斯伐他汀(simvastatin)及如美国专利第4,448,784号与第4,450,171号所公开的相关化合物。可在本文中使用的其他HMG CoA还原酶抑制剂包括(但不限于)公开于美国专利第5,354,772号中的氟伐他汀(fluvastatin)；如美国专利第5,006,530号及第5,177,080号中所公开的西立伐他汀(cerivastatin)；如美国专利第4,681,893号、第5,273,995号、第5,385,929号及第5,686,104号中所公开的阿托伐他汀(atorvastatin)；如美国专利第5,011,930号中所公开的阿他伐他汀(atavastatin)(Nissan/Sankyo的尼伐他汀(nisvastatin)(NK-104))；如美国专利第5,260,440号中所公开的维萨斯他汀(visastatin)(Shionogi-Astra/Zeneca(ZD-4522))；及美国专利第5,753,675号中所公开的相关抑制素化合物；如美国专利第4,613,610号中所公开的甲羟戊酸内酯(mevalonolactone)衍生物的吡唑类似物；如PCT申请WO 86/03488中所公开的甲羟戊酸内酯衍生物的茚类似物；如美国专利第4,647,576号中所公开的6-[2-(经取代的吡咯-1-基)-烷基]哌喃-2-酮及其衍生物；Searle的SC-45355(3-取代的戊二酸衍生物)二氯乙酸酯；如PCT申请WO 86/07054中所公开的甲羟戊酸内酯的咪唑类似物；如法国专利第2,596,393号中所公开的3-羧基-2-羟基-丙烷-磷酸衍生物；如欧洲专利申请第0221025号中所公开的2，3-二取代的吡咯、呋喃及噻吩衍生物；如美国专利第4,686,237号中所公开的甲羟戊酸内酯的萘基类似物；诸如美国专利第4,499,289号中所公开的八氢萘；如欧洲专利申请第0142146 A2号中所公开的莫维诺林(洛伐他汀)的酮类似物；及如美国专利第5,506,219号及第5,691,322号中所公开的喹啉与吡啶衍生物。
优选的降血脂剂为普伐他汀、洛伐他汀、斯伐他汀、阿托伐他汀、氟伐他汀、西立伐他汀、阿他伐他汀及ZD-4522。
此外，适用于抑制HMG CoA还原酶的膦酸化合物(诸如GB 2205837中所公开的那些化合物)适合与本发明的化合物组合使用。
适用于本文中的角鲨烯合成酶抑制剂包括(但不限于)美国专利第5,712,396号中所公开的α-膦酸基-磺酸酯；Biller等人，J.Med.Chem.1988，第31卷，第10期，第1869-1871页所公开的那些抑制剂，包括类异戊二烯(氧膦基-甲基)膦酸酯；以及其他已知的角鲨烯合成酶抑制剂，例如如美国专利第4,871,721号及第4,924,024号及Biller，S.A.Neuenschwander，K.Ponpipom，M.M.及Poulter，CD.Current Pharmaceutical Design，2，1-40(1996)中所公开的角鲨烯合成酶抑制剂。
此外，适用于本文中的其他角鲨烯合成酶抑制剂包括P.Ortiz deMontellano等人，J.Med.Chem.1977，20，243-249所公开的类萜焦磷酸酯；Corey及Volante，J.Am.Chem.Soc，1976，98，1291-1293所公开的二磷酸法尼酯(farnesyl diphosphate)类似物A及前角鲨烯焦磷酸酯(PSQ-PP)类似物；McClard，R.W.等人，J.A.C.S.1987，109，5544所报导的氧膦基膦酸酯；及Capson，T.L，博士论文，1987年6月，Dept.Med.Chem.U of Utah，摘要，目录，第16、17、40-43、48-51页，概述中所报导的环丙烷类。
可与式I的化合物组合使用的纤维酸衍生物包括非诺贝特(fenofibrate)、吉非罗齐(gemfibrozil)、氯贝特(clofibrate)、苯扎贝特(bezafibrate)、环丙贝特(ciprofibrate)、克利贝特(clinofibrate)等、普罗布考(probucol)、及相关化合物，如美国专例第3,674,836号中所公开的，优选为普罗布考和吉非罗齐；胆酸螯合剂为诸如消胆胺(cholestyramine)、考来替泊(colestipol)及DEAE-Sephadex(Secholex，Policexide)以及保脂妥(lipostabil)(Rhone-Poulenc)、Eisai E-5050(N-取代的乙醇胺衍生物)、伊马昔尔(imanixil)(HOE-402)、四氢脂抑素(tetrahydrolipstatin)(THL)、豆甾烷基磷酸胆碱(istigmastanylphos-phorylcholine)(SPC，Roche)、氨基环糊精(TanabeSeiyoku)、Ajinomoto AJ-814(薁衍生物)、甲亚油酰胺(melinamide)(Sumitomo)、Sandoz 58-035、美国Cyanamid CL-277,082及CL-283,546(二取代的脲衍生物)、烟碱酸、阿西莫司(acipimox)、阿昔呋喃(acifran)、新霉素(neomycin)、对氨基水杨酸、阿司匹林(aspirin)、诸如美国专利4,759,923中所公开的聚(二烯丙基甲胺)衍生物、诸如美国专利第4,027,009中所公开的季胺聚(二烯丙基二甲基氯化铵)及紫罗烯类(ionenes)及其他已知的降血清胆固醇药剂。
可与式I的化合物组合使用的ACAT抑制剂包括以下各文献中所公开的那些抑制剂：Drugs of the Future 24，9-15(1999)，(Avasimibe)；″The ACATinhibitor，C1-1011 is effective in the prevention and regression of aortic fattystreak area in hamsters″，Nicolosi等人，Atherosclerosis(Shannon，Irel).(1998)，137(1)，77-85；″The pharmacological profile of FCE 27677：a novel ACATinhibitor with potent hypolipidemic activity mediated by selective suppression ofthe hepatic secretion of ApoB100-containing lipoprotein″，Ghiselli，Giancarlo，Cardiovasc.Drug Rev.(1998)，16(1)，16-30；″RP 73163：a bioavailablealkylsulfinyl-diphenylirmdazole ACAT inhibitor″，Smith，C等人，Bioorg.Med.Chem.Lett.(1996)，6(1)，47-50；″ACAT inhibitors：physiologic mechanisms forhypolipidemic and anti-atherosclerotic activities in experimental animals″，Krause等人，编者：Ruffolo，Robert R.Jr.Hollinger，Mannfred A.Inflammation：Mediators Pathways(1995)，173-98，出版者：CRC，Boca Raton，Fla.″ACAT inhibitors：potential anti-atherosclerotic agents″，Sliskovic等人，Curr.Med.Chem.(1994)，1(3)，204-25；″Inhibitors of acyl-CoA：cholesterolO-acyl transferase(ACAT)as hypocholesterolemic agents.6. The firstwater-soluble ACAT inhibitor with lipid-regulating activity.Inhibitors ofacyl-CoA：cholesterol acyltransferase(ACAT).7.Development of a series ofsubstituted  N-phenyl-N′-[(1-phenylcyclopentyl)methyl]ureas with enhancedhypocholesterolemic activity″，Stout等人，Chemtracts：Org.Chem.(1995)，8(6)，359-62，或TS-962(Taisho Pharmaceutical Co.Ltd)。
降血脂剂可为LD2受体活性的上调节剂，诸如MD-700(TaishoPharmaceutical Co.Ltd)及LY295427(Eli Lilly)。
适合与本发明的化合物组合使用的合适的胆固醇吸收抑制剂的实例包括SCH48461(Schering-Plough)以及Atherosclerosis 115，45-63(1995)及J.Med.Chem.41，973(1998)中所公开的那些抑制剂。
适合与本发明的化合物组合使用的合适的回肠Na+/胆酸共输送抑制剂的实例包括如Drugs of the Future，24，425-430(1999)中所公开的化合物。
可与式I的化合物组合使用的脂肪氧合酶抑制剂包括：15-脂肪氧合酶(15-LO)抑制剂，诸如如WO 97/12615中所公开的苯并咪唑衍生物；如WO97/12613中所公开的15-LO抑制剂；如WO 96/38144中所公开的异噻唑酮；及如以下文献中所公开的15-LO抑制剂：Sendobry等人″Attenuation ofdiet-induced atherosclerosis in rabbits with a highly selective 15-lipoxygenaseinhibitor lacking significant antioxidant properties″，Brit.J.Pharmacology(1997)120，1199-1206及Comicelli等人，″15-Lipoxygenase and its Inhibition：ANovel Therapeutic Target for Vascular Disease″，Current Pharmaceutical Design，1999，5，11-20。
适合与本发明的化合物组合使用的抗高血压剂的实例包括β肾上腺素能阻断剂、钙通道阻断剂(L-型及T-型；例如地尔硫卓(diltiazem)、维拉帕米(verapamil)、硝苯地平(nifedipine)、氨氯地平(amlodipine)及米比法第(mybefradil))、利尿剂(例如氯噻嗪、氢氯噻嗪、氟噻嗪、氢氟噻嗪、苄氟噻嗪、甲氯噻嗪、三氯噻嗪、多噻嗪、苄噻嗪、依他尼酸(ethacrynic acid)吹库瑞那吩(tricrynafen)、氯噻酮、呋塞米(furosemide)、木索亚胺(musolimine)、布美他尼(bumetanide)、三氨蝶呤(triamtrenene)、阿米洛利(amiloride)、螺内酯)、肾素抑制剂、ACE抑制剂(例如卡托普利(captopril)、佐芬普利(zofenopril)、福辛普利(fosinopril)、依那普利(enalapril)、赛拉普利(ceranopril)、丝拉普利(cilazopril)、地拉普利(delapril)、喷托普利(pentopril)、喹那普利(quinapril)、雷米普利(ramipril)、赖诺普利(lisinopril))、AT-1受体拮抗剂(例如氯沙坦(losartan)、伊贝沙坦(irbesartan)、缬沙坦(valsartan))、ET受体拮抗剂(例如塞塔生坦(sitaxsentan)、阿特生坦(atrsentan)及美国专利第5,612,359号与第6,043,265号中所公开的化合物)、ET/AII双重拮抗剂(例如WO00/01389中所公开的化合物)、中性内肽酶(NEP)抑制剂、血管肽酶抑制剂(NEP-ACE双重抑制剂)(例如奥马曲拉(omapatrilat)及吉莫曲拉(gemopatrilat))及硝酸盐。
适合与本发明的化合物组合使用的合适的抗肥胖剂的实例包括：β3肾上腺素能激动剂、脂肪酶抑制剂、血清素(及多巴胺(dopamine))再吸收(reuptake)抑制剂、甲状腺受体β药物、5HT2C激动剂(诸如ArenaAPD-356)、MCHR1拮抗剂(诸如Synaptic SNAP-7941及Takeda T-226926)、黑色素皮质素受体(MC4R)激动剂、黑色素凝集激素受体(MCHR)拮抗剂(诸如SynapticSNAP-7941及Takeda T-226926)、甘丙肽受体抑制剂、食欲肽拮抗剂、CCK激动剂、NPY1或NPY5拮抗剂、NPY2与NPY4调节剂、促皮质素释放因子激动剂、组胺受体-3(H3)调节剂、11-β-HSD-1抑制剂、脂联素(adinopectin)受体调节剂、单胺再吸收抑制剂或释放剂、睫状神经细胞营养因子(CNTF，诸如Regeneron的AXOKINE)、BDNF(脑源性神经营养因子)、瘦素及瘦素受体抑制剂、大麻素-1受体拮抗剂(诸如SR-141716(Sanofi)或SLV-319(Solvay))和/或厌食剂。
任选可与本发明的化合物组合使用的β3肾上腺素能激动剂包括AJ9677(Takeda/Dainippon)、L750355(Merck)或CP331648(Pfizer)或如美国专利第5,541,204号、第5,770,615号、第5,491,134号、第5,776,983号及第5,488,064号中所公开的其他已知的β3激动剂。
任选可与本发明的化合物组合使用的脂肪酶抑制剂的实例包括奥利司他(orlistat)或ATL-962(Alizyme)。
任选可与本发明的化合物组合使用的血清素(及多巴胺)再吸收抑制剂(或血清素受体激动剂)可为BVT-933(Biovitrum)、西布曲明(sibutramine)、托吡酯(topiramate)(Johnson&Johnson)或睫状体神经营养因子(axokine)(Regeneron)。
任选可与本发明的化合物组合使用的甲状腺受体β化合物的实例包括甲状腺受体配位体，诸如WO97/21993(U.Cal SF)、WO99/00353(KaroBio)与WO00/039077(KaroBio)中所公开的那些化合物。
任选可与本发明的化合物组合使用的单胺再吸收抑制剂包括氟苯丙胺(fenfluramine)、右芬氟拉明(dexfenfluramine)、氟伏沙明(fluvoxamine)、氟西汀(fluoxetine)、帕罗西汀(paroxetine)、舍曲林(sertraline)、氯苯丁胺(chlorphentermine)、氯福雷司(cloforex)、氯特胺(clortermine)、匹西雷司(picilorex)、西布曲明(sibutramine)、右旋安非他命(dexamphetamine)、苯丁胺(phentermine)、苯丙醇胺或马吲哚(mazindol)。
任选可与本发明的化合物组合使用的厌食剂包括托吡酯(Johnson&Johnson)、右旋安非他命、苯丁胺、苯丙醇胺或马吲哚。
上述专利及专利申请均以通过引用并入本文中。
当以上其他治疗剂与本发明的化合物组合使用时，该治疗剂可以例如Physician′s Desk Reference中、如以上所列举的专利中所指示的那些量使用，或另外以本领域技术人员确定的量使用。
若本发明的化合物与一种或多种其他治疗剂同时或相继组合使用，则以下组合比率及剂量范围为优选。
若其他抗糖尿病剂为双胍，则式I的化合物可与双胍以约0.01∶1至约100∶1、优选约0.1∶1至约5∶1范围内的重量比使用。
式I的化合物可与葡萄糖苷酶抑制剂以约0.01∶1至约100∶1、优选约0.5∶1至约50∶1范围内的重量比使用。
式I的化合物可与磺酰脲以约0.01∶1至约100∶1、优选约0.2∶1至约10∶1范围内的重量比使用。
式I的化合物可与噻唑烷二酮以约0.01∶1至约100∶1、优选约0.2∶1至约10∶1范围内的重量比使用。
若存在噻唑烷二酮抗糖尿病剂，则其可以约0.01至2000毫克/日范围内的量使用，其可以单次剂量或分次剂量每日1至4次给药。
任选地，可以低于约150mg的量将磺酰脲及噻唑烷二酮与式I的化合物一起并入单一片剂。
若存在二甲双胍，则二甲双胍或其盐可以约500毫克/日至约2000毫克/日范围内的量使用，其可以单次剂量或分次剂量每日1至4次给药。
若存在GLP-1肽，则GLP-1肽可以口腔含剂制剂形式通过鼻给药或非经肠方式给药，如美国专利第5,346,701号(TheraTech)、第5,614,492号及5,631,224中所述，该专利均以引用的方式并入本文中。
式I的化合物以与氯茴苯酸、PPAR-γ激动剂、PPAR-α/γ双重激动剂、PPAR-δ激动剂、PPAR-α/γ/δ三重激动剂、aP2抑制剂或其他DPP4抑制剂在约0.01∶1至约100∶1、优选约0.2∶1至约10∶1范围内的重量比使用。
本发明的式I的化合物通常以与降血脂剂(存在)在约500∶1至约1∶500、优选约100∶1至约1∶100范围内的重量比使用。
对于口服给药而言，以约0.01mg/kg至约500mg且优选约0.1mg至约100mg范围内的量、每日1至4次使用MTP抑制剂可获得满意结果。
诸如片剂或胶囊的优选口服剂型含有约1mg至约500mg、优选约2mg至约400mg，且更优选约5mg至约250mg含量的MTP抑制剂，每日1至4次给药。
对于口服给药而言，以约1mg至2000mg且优选约4mg至约200mg范围内的量使用HMG CoA还原酶抑制剂可获得满意结果。
诸如片剂或胶囊的优选口服剂型含有约0.1mg至约100mg、优选约5mg至约80mg且更优选约10mg至约40mg含量的HMG CoA还原酶抑制剂。
角鲨烯合成酶抑制剂可以约10mg至约2000mg且优选约25mg至约200mg范围内的剂量使用。
诸如片剂或胶囊的优选口服剂型含有约10mg至约500mg、优选约25mg至约200mg含量的角鲨烯合成酶抑制剂。
对于本文中所述任一用途，式I的化合物可以含有非毒性、药学上可接受载剂或稀释剂的剂量单位制剂形式通过任何合适的方式给药，例如经口，诸如以片剂、胶囊、粒剂或粉剂的形式；经舌下；含服；非经肠，诸如通过皮下、静脉内、肌肉内或胸骨内注射或输注技术(例如作为无菌注射水溶液或非水溶液或悬浮液)；经鼻，包括给予至鼻膜，诸如通过吸入喷雾；经局部，诸如以乳霜或药膏的形式；或经直肠，诸如以栓剂形式。
在实施用于治疗本文中所公开的任意疾病(诸如糖尿病及相关疾病)的本发明的优选方法中，将使用与药物载剂或稀释剂联合的含有一种或多种式I的化合物、有或无其他抗糖尿病剂和/或抗高脂血剂和/或其他类型的治疗剂的药物组合物。使用适于所需给药方式的类型的常规固体或液体载剂或稀释剂及药物添加剂(诸如药学上可接受的载体、赋形剂、粘合剂等)可以配制该药物组合物。可通过经口途径，例如以片剂、胶囊、丸粒、粒剂或粉剂形式将该化合物给予至包括人类、猴、犬等的哺乳动物种；或可通过非经肠途径以可注射制剂的形式将其给要；或经鼻内或以透皮贴剂的形式将其给予。典型的固体制剂将含有约0.1mg至约500mg的式I的化合物。成人剂量优选为1毫克/日至2,000毫克/日，其可以单次剂量或以分次剂量的形式每日1-4次给药。
可通过在无菌条件下将250mg式I的化合物放置于小瓶内、无菌条件下冷冻干燥并密封制备典型的可注射制剂。使用时，使瓶中内含物与2mL生理盐水混合，以制备可注射制剂。
应了解，用于任何特定受检者的具体剂量水平及给药频率可变化且取决于以下各种因素，包括：所使用的特定化合物的活性；该化合物的代谢稳定性及作用时间长短；受检者的种属、年龄、体重、一般健康状况、性别及饮食；给药方式及时间；排泄率；药物组合及特定病况的严重程度。
通过使用测量适当底物或假底物的DPP-4介导裂解抑制程度的活体外检验系统，可测定本发明的化合物的DPP-4抑制活性。本发明的DPP-4抑制剂的抑制常数(Ki值)可通过以下实验部分中所述方法测定。
人类DPP-4的克隆、表达及纯化
为产生人类DPP-4，基于人克隆的核苷酸序列(保藏登记号M74777)，使用两种引物ACGCCGACGATGAAGACA及AGGTAAAGAGAAACATTGTT在来自胎盘(Clontech)的人类cDNA上进行PCR(红标(Red-tag)聚合酶，Sigma)。将PCR产物克隆入pcDN4/HisMax TOPO载体(Invitrogene)。对于CHO-DG44细胞的稳定转染而言，使用引物GGTACCAGCGCAGAGGCTT及CTCGAGCTAAGGTAAAGAGAAACATTG再对DPP4进行PCR，以产生KpnI与XhoI位点。使用KpnI与XhoI位点提取N-末端His标记基因。可通过肠激酶裂解并切下的His标记得以包括在内从而可使用TALON亲和管柱加以纯化。接着将该基因接入pD16载体的KpnI与XhoI位点以便稳定转染。使用电穿孔法通过将表达载体转染入中国仓鼠卵巢(CHO-DG44)细胞来产生稳定细胞株。在补充有HT(甘氨酸、次黄嘌呤与胸苷，Invitrogene)、谷氨酰胺及重组胰岛素(ICN)的PFCHO培养基中生长CHO-DG44细胞株。接着收集1×107细胞/毫升，使用电穿孔在300V下转染60μg DNA，然后将其转移至T75烧瓶中。转染后第三天，除去HT补充物，并以甲胺喋呤(MTX，10nM，ICN)开始选择。又过10天后，将细胞装板于96孔板的各个孔中。每隔10天，将MTX浓度增加2或3倍，直至最高400nM。基于被表达的蛋白的产量及活性选择最终的稳定细胞株。
尝试使用Talon树脂纯化重组DPP-4效果不佳，导致产量少，大部分DPP活性通过管柱。因此，使用常规阴离子交换(Sepharose Q)、凝胶过滤(S-200)及高分辨率MonoQ管柱对蛋白进行进一步纯化。最终蛋白在SDS-PAGE凝胶上产生单条带。氨基酸序列分析表明试样中的两个DPP-4群。一部分蛋白具有自N-末端所截断的27个氨基酸，而另一部分缺乏N-末端37个氨基酸。此说明分离期间，整个跨膜区(包括His标记)已通过CHO细胞中所存在的蛋白酶除去。使用Bradford染色法测量蛋白总浓度，并以先前表征的抑制剂(Ki＝0.4nM)滴定该酶来测定活性DPP-4的量。抑制或催化期间未观察到两相特征，说明两个蛋白群在功能上相同。
DPP-4抑制性检验
在稳态条件下，在裂解假底物Gly-Pro-pNA时通过在405nm根据吸光度增加来测量对DPP-4活性的抑制作用。使用Thermomax板读取器在96孔板中进行检验。通常，反应含有100μl ATE缓冲剂(100mM Aces、52mM Tris、52mM乙醇胺，pH 7.4)、0.45nM酶、120μM或1000μM底物(S＜Km及S＞Km，Km＝180μM)及可变浓度的抑制剂。为确保用于缓慢结合抑制剂的稳态条件，在添加底物前，以该化合物将酶预培育40分钟，以开始反应。所有系列的抑制剂稀释物均在DMSO中且最终溶剂浓度不超过1％。
通过将抑制数据与结合等温线拟合来评定抑制剂效能。

其中vi为不同浓度抑制剂I下的起始反应速度；v为在不存在抑制剂的情况下的对照速度，值域为未经抑制的速度与背景之间的差值；背景为在不存在酶的情况下底物自发水解的速率；n为Hill系数。
将各底物浓度下经计算的IC50根据下式转化为呈现竞争性抑制作用的Ki：
Ki=IC50(1+SKm).---(2)]]>
如通过自高及低底物浓度下进行检验获得的Ki值的极优一致性所判断，所有抑制剂均为竞争性的。在低底物浓度下的IC50接近于检验中所使用的酶浓度的情况中，将数据拟合Morrison方程式1，以说明游离抑制剂的损耗：
viv0=1-(E+I+IC50)-(E+I+IC50)2-4EI2E---(3)]]>
其中vi与v0为存在与不存在抑制剂的情况下所量测的稳态速度，E为酶浓度。
使用方程式(2)进一步将各IC50精算(refine)成Ki，以说明检验中的底物浓度。
1Morrison，JF，Walsh，CT.Advances in Enzymology.61(1988)，201-206.
缩写
本文的实施例及别处中使用以下缩写：
Ph＝苯基
Bn＝苄基
i-Bu＝异丁基
Me＝甲基
Et＝乙基
pr＝丙基
Bu＝丁基
Boc或BOC＝叔丁氧基羰基
Cbz＝苯甲氧羰基或苄氧羰基或苄酯基
HOAc或AcOH＝乙酸
DMF＝N，N-二甲基甲酰胺
DMSO＝二甲亚砜
EtOAc＝乙酸乙酯
Hex＝己烷
CHCl3＝氯仿
CH2Cl2＝二氯甲烷
THF＝四氢呋喃
TFA＝三氟乙酸
Pd/C＝碳载钯
LiBFH4＝硼氢化锂
NaBH4＝硼氢化钠
MsCl＝甲磺酰氯
DIBAL-H＝氢化二异丁基铝
TEA＝三乙胺
min＝分钟
h或hr＝小时
L＝升
mL＝毫升
μL＝微升
g＝克
mg＝毫克
mol＝摩尔
mmol＝毫摩尔
meq＝毫当量
rt＝室温
sat或sat′d＝饱和
aq.＝水性
TLC＝薄层层析
Rt＝停留时间
mp＝熔点
HPLC＝高效液相层析
PrepHPLC＝制备性HPLC
溶剂A(制备性HPLC)：90％H2O/10％MeOH+0.1％TFA
溶剂B(制备性HPLC)：90％MeOH/10％H2O+0.1％TFA
LC/MS＝高效液相层析/质谱
MS或Mass Spec＝质谱
HRMS＝高分辨率质谱
NMR＝核磁共振
equiv＝当量
实施例
提供以下实施例以便更详细地描述本发明。阐明用于实施本发明当前所涵盖的最佳方式的这些实施例，旨在说明本发明而非限制本发明。
一般而言，本发明的优选化合物，诸如以下实施例中所公开的特定化合物，已确定可抑制浓度等于或显著大于10μM、优选为5μM、更优选为3μM的二肽基肽酶IV的酶促活性，由此证明本发明的化合物有用作二肽基肽酶IV的有效抑制剂的效用。可计算效能并将其表达为抑制常数(Ki值)或IC50(抑制浓度50％)值，该效能指使用本文中描述的活体外检验系统所量测的活性。
实施例1：
3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-苯基-6，7-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮

实施例1A：2-(氯甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-5-(2-甲氧基-2-酮基乙基)-6-甲基-1，4-二氢吡啶-3-羧酸乙酯

在环境温度下将2，4-二氯苯甲醛(2.3g，12.9mmol)、4-氯-3-酮基丁酸乙酯(2.2g，12.9mmol)、苄胺(80.0mg，0.8mmol)及乙酸(55.0mg，0.9mmol)于异丙醇(15mL)中的混合物搅拌65h。将3-氨基丁烯酸甲酯(1.6g，14.4mmol)添加至反应混合物中并在环境温度下继续搅拌24h。以浓HCl(1mL)中止反应，并在环境温度下将混合物搅拌2h。接着在真空中浓缩反应混合物，以二乙醚稀释，过滤且蒸发。通过急骤层析(120g管柱，0至100％EtOAc/己烷)纯化残余物，得到黄色粘性油状的实施例1A(4.2g，79％产率)。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ 1.22(t，J＝7.5Hz，3H)，2.36(s，3H)，3.63(s，3H)，4.11(q，J＝7.2Hz，2H)，4.86及4.97(ABq，J＝14.0Hz，2H)，5.40(s，1H)，6.40(宽单峰，1H)，7.13(dd，J＝8.4，2.2Hz，1H)，7.26-7.31(m，2H)。[M+H]+＝418.2。
实施例1B：2-(氯甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-6-甲基吡啶-3，5-二羧酸3-乙酯5-甲酯

将实施例1A(3.4g，8.1mmol)溶解于乙酸(15mL)及70％硝酸/水(15mL)中。在环境温度下将反应混合物搅拌72h。通过急骤层析(120g管柱，0-100％EtOAc/己烷)纯化粗产物(3.7g)以得到淡黄色油状的实施例1B(1.9g，57％产率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.02(t，J＝7.7Hz，3H)，2.66(s，3H)，3.60(s，3H)，4.10(q，J＝7.0Hz，2H)，4.80及4.93(ABq，J＝11.0Hz，2H)，7.13(d，J＝7.0Hz，1H)，7.26-7.33(m，1H)，7.45(s，1H)。[M+H]+＝415.91。
实施例1C：4-(2，4-二氯苯基)-2，7-二甲基-5-酮基-6-苯基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-羧酸甲酯

方法1：将实施例1B(241mg，0.6mmol)与苯胺(60mg，0.6mmol)于乙醇(10mL)中的混合物回流72h。在真空中将混合物浓缩。通过急骤层析(40g管柱，0至100％EtOAc/己烷)纯化残余物以得到实施例1C(166mg，67％产率)。
方法2：在微波中将实施例1B(671mg，1.6mmol)与苯胺(168mg，1.8mmol)于乙醇(5mL)中的混合物加热至175℃历时45分钟。通过急骤层析(120g管柱，0-100％EtOAc/己烷)纯化反应以得到淡褐色固体状的实施例1C(485mg，71％产率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.77(s，3H)，3.64(s，3H)，4.88及5.00(ABq，J＝17.6Hz，2H)，7.13-7.20(m，2H)，7.33(dd，J＝8.4，2.2 Hz，1H)，7.36-7.44(m，2H)，7.53(d，J＝1.8Hz，1H)，7.79(d，J＝7.9Hz，2H)。[M+H]+＝472.99。
实施例1D：4-(2，4-二氯苯基)-3-(羟甲基)-2，7-二甲基-6-苯基-6，7-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮

程序#1：向实施例1C(160mg，0.4mmol)于THF(10mL)的溶液中添加2 MLiBH4/THF(0.4mL，0.8mmol)。将混合物在环境温度下搅拌，且通过HPLC与LC/MS跟踪反应。额外添加2 M LiBH4/THF(0.8mL，1.6mmol)，并将混合物加热至50℃且搅拌18h。以饱和NaHCO3水溶液中止反应，接着以EtOAc稀释。以EtOAc萃取水层。以盐水洗涤经合并的有机层，干燥(Na2SO4)，并在真空中蒸发。通过急骤层析(40g管柱，0至100％EtOAc/己烷)纯化残余物以得到淡黄色油状的实施例1D(11.5mg，8％产率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 2.89(s，3H)，4.46及4.60(ABq，J＝11.9 Hz，2H)，4.85及4.90(ABq，J＝17.2Hz，2H)，7.16(t，J＝7.5Hz，IH)，7.21(d，J＝7.9Hz，1H)，7.33-7.43(m，3H)，7.56(d，J＝1.8Hz，1H)，7.77(d，J＝7.9Hz，2H)。[M+H]+＝399.20。
程序#2：在环境温度下将实施例1C(183mg，0.43mmol)与氢氧化锂(约200mg)于THF/H2O(4mL)中的混合物搅拌18h。接着将反应物于微波中在120℃加热1h。以1 N HCl中止反应，并将其萃取至EtOAc中。以盐水洗涤经合并的有机层，干燥(Na2SO4)且蒸发，以得到淡黄色固体状的粗酸产物(34mg，19％产率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.80(s，3H)，4.85及4.95(ABq，J＝17.6Hz，2H)，7.15(t，J＝7.5Hz，1H)，7.20(d，J＝7.9Hz，1H)，7.30(dd，J＝8.9，1.8Hz，1H)，7.37(t，J＝7.9Hz，2H)，7.49(d，J＝2.2Hz，1H)，7.76(d，J＝7.9Hz，2H).[M+H]+＝412.81。
向该酸(25mg，0.06mmol)于THF的溶液中添加氯甲酸乙酯(24μL，0.25mmol)，之后添加三乙胺(50μL，0.36mmol)。立刻看到沉淀。在环境温度下将混合物搅拌2h，并接着过滤且以THF(1mL×2)洗涤。将H2O(0.3mL)中的NaBH4(11mg，0.29mmol)逐滴添加至滤出液中。在环境温度下将混合物搅拌18h，且将其以EtOAc/H2O稀释。以盐水洗涤有机层，干燥(Na2SO4)，且蒸发以得到无色油状的粗实施例1D(11.5mg)。
实施例1E与1F：3-(氯甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2，7-二甲基-6-苯基-6，7-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮；与甲磺酸(4-(2，4-二氯苯基)-2，7-二甲基-5-酮基-6-苯基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-基)甲酯

程序#1：将甲磺酰氯(10mg，0.09mmol)添加至实施例1D(11.5mg，0.03mmol)与三乙胺(15mg，0.15mmol)于二氯甲烷(2mL)的溶液中。在环境温度下将混合物搅拌1h。将溶剂蒸发，并通过急骤层析(4g管柱，0至100％EtOAC/己烷)纯化残余物以得到实施例1E(5mg，42％产率)与1F(4mg，29％产率)的混合物。
实施例1E：1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 2.89(s，3H)，4.31及4.56(ABq，J＝11.9Hz，2H)，4.87及4.93(ABq，J＝17.6 Hz，2H)，7.16(t，J＝7.5Hz，1H)，7.29(d，J＝8.4Hz，1H)，7.38(t，J＝7.9Hz，2H)，7.42(dd，J＝8.1，2.0Hz，1H)，7.57(d，J＝2.2Hz，1H)，7.78(d，J＝7.9Hz，2H)。[M+H]+＝417.18。
实施例1F：1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 2.89(s，3H)，2.90(s，3H)，4.89及4.95(ABq，J＝17.6Hz，2H)，4.99及5.21(ABq，J＝11.0Hz，2H)，7.18(t，J＝7.0Hz，1H)，7.23(d，J＝8.4Hz，1H)，7.34-7.45(m，3H)，7.58(宽单峰，1H)，7.78(d，J＝8.8Hz，2H)。[M+H]+＝477.24。
程序#2：将甲磺酰氯(15μL，0.19mmol)添加至实施例1D(11.5mg，0.03mmol)与三乙胺(30μL，0.22mmol)于二氯甲烷(2mL)的溶液中。在环境温度下将混合物搅拌4h。蒸发溶剂，且通过急骤层析(4g管柱，0至100％EtOAC/己烷)纯化残余物以得到无色油状的实施例1E(4mg，33％)。
实施例1G：3-(迭氮基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2，7-二甲基-6-苯基-6，7-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮

将迭氮化钠(各5mg、0.08mmol)添加至含有于DMF(各5mL)中的实施例1E(5mg，0.01mmol)与1F(4mg，0.01mmol)的单独烧瓶中。在环境温度下将混合物搅拌18h。以EtOAc及水稀释反应。以盐水洗涤有机层，干燥(Na2SO4)，并在真空中将其蒸发。合并粗产物并通过急骤层析(4 g管柱，0至100％EtOAc/己烷)纯化以得到白色固体状的实施例1G(5mg，58％产率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 2.85(s，3H)，4.24及4.31(ABq，J＝13.6 Hz，2H)，4.88及4.93(ABq，J＝17.6Hz，2H)，7.17(t，J＝7.5Hz，1H)，7.21(d，J＝7.9Hz，1H)，7.38(t，J＝8.1Hz，2H)，7.42(dd，J＝8.4，2.2Hz，1H)，7.58(d，J＝2.2Hz，1H)，7.78(d，J＝7.9Hz，2H)。[M+H]+＝424.19。
实施例1.3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-苯基-6，7-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

程序#1：将聚合物结合三苯膦(28mg，0.08mmol)添加至迭氮化物1G(5mg，0.01mmol)于THF/H2O(1.5mL)中的混合物中。在环境温度下将混合物搅拌18h，且接着过滤并蒸发。通过制备性HPLC(YMC ODS 20×100mm，10min梯度，30至100％B/A，20ml/min)纯化残余物，以得到无色油状实施例1(1.5mg，32％产率)。1H NMR(400MHz，CDCl3+CD3OD作为共溶剂)δ2.83(s，3H)，3.88及4.10(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.85及4.90(ABq，J＝18.5Hz，2H)，7.14(t，J＝7.0Hz，1H)，7.24-7.27(m，1H)，7.34(t，J＝7.9Hz，2H)，7.40(dd，J＝8.1，2.0Hz，1H)，7.55(d，J＝1.8Hz，1H)，7.70(d，J＝8.8Hz，2H)。HRMS：对于C21H18Cl2N3O，计算值：398.0827，实验值：398.0812。[M+H]+＝398.20。
程序#2：将实施例1E(4mg，0.0096mmol)与7 M NH3于MeOH(4mL)中的混合物在微波中100℃下加热15min。将溶剂蒸发，且以EtOAc及饱和NaHCO3水溶液处理(take up)残余物。以盐水洗涤有机层，将其干燥(Na2SO4)，并蒸发。通过制备性HPLC(YMC ODS 20×100mm，10min梯度，30至100％B/A)纯化残余物，以得到为TFA盐的实施例1(5.8mg，定量)。
实施例2
3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-6-(4-甲氧基苯基)-2-甲基-6，7-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮

实施例2A：(Z)-3-氨基丁-2-烯酸苄酯

在环境温度下将乙酰乙酸苄酯(4.6g，24mmol)及乙酸铵(9.2g，119.5mmol)于甲醇(30mL)中的混合物搅拌72h。将溶剂蒸发，且以CHCl3/H2O处理残余物。以盐水洗涤经合并的有机层，将其干燥(Na2SO4)，且蒸发，得到金黄色油状的实施例2A(4.3g，90％产率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.91(s，3H)，4.60(s，1H)，5.12(s，2H)，7.24-7.40(m，5H)。
实施例2B：(Z)-2-(2，4-二氯亚苄基)-4-氯-3-酮基丁酸乙酯

在环境温度下将2，4-二5氯苯甲醛(4.6g，26.1mmol)、4-氯-3-酮基丁酸乙酯(4.5g，27.4mmol)、苄胺(165mg，1.5mmol)及乙酸(118mg，2.0mmol)于异丙醇(30mL)中的溶液搅拌96h。将混合物以异丙醇稀释，得到50mL总体积，并作为储备溶液(0.52mmol/mL)储存。
实施例2C：6-(氯甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-1，4-二氢吡啶-3，5-二羧酸3-苄酯5-乙酯

在环境温度下将储备溶液2B(25mL，13mmol)及实施例2A(2.8g，14.5mmol)于异丙醇(3mL)中的混合物搅拌18h。以浓HCl(8mL)中止反应，并在环境温度下将混合物搅拌2h。接着在真空中浓缩反应，将其以二乙醚稀释，过滤且蒸发。通过急骤层析(120g管柱，EtOAc/己烷)纯化残余物，得到黄色粘性油状的实施例2C(4.2g，65％产率)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.19(t，J＝7.0Hz，3H)，2.35(s，3H)，4.05-4.15(m，2H)，4.82及4.97(ABq，J＝14.1Hz，2H)，5.07及5.11(ABq，J＝12.3Hz，2H)，5.41(s，1H)，6.37(宽单峰，1H)，7.07(dd，J＝8.4，2.2Hz，1H)，7.1 6-7.32(m，5H)，7.35-7.38(m，2H)。
实施例2D：6-(氯甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基吡啶-3，5-二羧酸3-苄酯5-乙酯(新型中间物)

将实施例2C(4.1mg，8.2mmol)溶解于乙酸(30mL)及70％硝酸/水(25mL)中。在环境温度下将反应混合物搅拌18h。通过急骤层析(120g管柱，0-100％EtOAc/己烷)纯化粗产物(4.2g)，得到淡黄色油状的实施例2D(2.7g，68％产率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 0.98(t，J＝7.3Hz，3H)，2.65(s，3H)，4.05(q，J＝7.0Hz，2H)，4.77及4.92(ABq，J＝11.0Hz，2H)，5.04(s，2H)，7.01(d，J＝8.35Hz，1H)，7.07(dd，J＝8.4，2.2Hz，1H)，7.10-7.14(m，2H)，7.21(d，J＝2.2Hz，1H)，7.28-7.28(m，3H)。[M+H]+＝491.98。
实施例2E：4-(2，4-二氯苯基)-6-(4-甲氧基苯基)-2-甲基-5-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-羧酸苄酯

将实施例2D(199mg，0.4mmol)与4-甲氧基苯胺(61mg，0.5mmol)于乙醇(3mL)中的混合物在微波中175℃下加热15min。蒸发溶剂，且通过急骤层析(12g管柱，EtOAc/己烷)纯化残余物，得到金黄色油状的实施例2E(114.6mg，53％产率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.76(s，3H)，3.79(s，3H)，4.81及4.90(ABq，J＝17.6Hz，2H)，5.05及5.11(ABq，J＝11.9Hz，2H)，6.89(d，J＝9.2Hz，2H)，7.03(d，J＝8.4Hz，1H)，7.08-7.16(m，3H)，7.28-7.38(m，4H)，7.66(d，J＝9.2Hz，2H)。[M+H]+＝533.06。
实施例2F：4-(2，4-二氯苯基)-6-(4-甲氧基苯基)-2-甲基-5-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-羧酸

在H2(g)气囊(balloon)下在环境温度下将实施例2E(114.6mg，0.2mmol)与10％Pd/C(44mg)于乙酸乙酯(15mL)中的混合物搅拌5h。将反应物过滤，蒸发且继续用于下一反应无需进一步纯化。
实施例2G：4-(2，4-二氯苯基)-3-(羟甲基)-6-(4-甲氧基苯基)-2-甲基-6，7-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮

向酸2F(114mg，0.3mmol)于THF(10mL)的溶液中添加氯甲酸乙酯(50μL，0.5mmol)，之后添加三乙胺(150μL，1.1mmol)。在环境温度下将混合物搅拌2h，并过滤。将NaBH4(50mg，1.3mmol)添加至滤出液中，且在环境温度下将混合物搅拌18h。以饱和NaHCO3水溶液中止反应，并将其萃取至EtOAc中。以盐水洗涤经合并的有机层，干燥(Na2SO4)，并蒸发。通过急骤层析(12g管柱，EtOAc/己烷)纯化残余物，得到白色固体状的实施例2G(10.5mg，10％产率)。[M+H]+＝429.10。
实施例2H：3-(氯甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-6-(4-甲氧基苯基)-2-甲基-6，7-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮

将三乙胺(25μL，0.18mmol)及甲磺酰氯(20μL，0.26mmol)添加至醇2G(10mg，0.02mmol)于二氯甲烷(4mL)的溶液中。在环境温度下将混合物搅拌18h并蒸发。通过急骤层析(4g管柱，EtOAc/己烷)纯化残余物，得到无色油状的实施例2H(7mg，67％产率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.89(s，3H)，3.80(s，3H)，4.31及4.56(ABq，J＝11.9Hz，2H)，4.82及4.89(ABq，J＝17.1Hz，2H)，6.87-6.94(m，2H)，7.29(d，J＝7.9Hz，1H)，7.4 1(dd，J＝7.9，1.8Hz，1H)，7.56(d，J＝1.8Hz，1H)，7.63-7.70(m，2H)。[M+H]+＝446.90。
实施例2：3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-6-(4-甲氧基苯基)-2-甲基-6，7-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

将氯化物2H(7mg，0.02mmol)与7 M NH3于MeOH(4mL)中的混合物在微波中100℃下加热15min。在真空中除去溶剂，且通过制备性HPLC(Phenomenex，10min梯度，30至100％B)纯化残余物，得到为TFA盐的实施例2(6.7mg，79％产物)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.86(s，3H)，3.80(s，3H)，3.97及4.20(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.96及5.01(ABq，J＝18.0Hz，2H)，6.94-7.00(m，2H)，7.36(d，J＝8.4Hz，1H)，7.54(dd，J＝8.4，2.2Hz，1H)，7.59-7.65(m，2H)，7.72(d，J＝1.8Hz，1H)。HRMS：对于C22H20Cl2N3O2，计算值：428.0933，实验值：428.0943。[M+H]+＝428.10。
实施例3
3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-6-(2-甲氧基苯基)-2-甲基-6，7-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

除以2-甲氧基苯胺替换步骤2E中的4-甲氧基苯胺之外，使用以上实施例2所述的相同方法制备实施例3。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.87(s，3H)，3.83(s，3H)，3.99及4.22(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.85-4.95(m，2H)，7.01(宽三峰，J＝7.5Hz，1H)，7.14(宽双峰，J＝8.4Hz，1H)，7.32(dd，J＝7.9，1.8Hz，1H)，7.34-7.40(m，2H)，7.52(dd，J＝8.4，2.2Hz，1H)，7.69(d，J＝2.2Hz，1H)。HRMS：对于C22H20Cl2N3O2，计算值：428.0933，实验值：428.0937。[M+H]+＝428.12。
在ChiralcelOJ，20μ，5×50cm管柱上使用含15％EtOH-MeOH(50％)的庚烷等度梯度(isocratic gradient)分离实施例3，得到各个对映异构体。
实施例3-1(对映异构体A；移动较快)：[α]D25+8.2°；手性分析HPLC[ChiralcelOJ 4.6×250mm；含15％EtOH-MeOH(1∶1；含有0.1％DEA)的庚烷(含有0.1％DEA)]所得纯度＞98％。
实施例3-2(对映异构体B；移动较慢)：[α]D25-8.0°；手性分析HPLC[ChiralcelOJ 4.6×250mm；含15％EtOH-MeOH(1∶1；含有0.1％DEA)的庚烷(含有0.1％DEA)]所得纯度＞98％。
实施例4
3-(氨基甲基)-6-苄基-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6，7-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

除以苯甲胺替换步骤2E中的4-甲氧基苯胺之外，使用以上实施例2所述相同方法制备实施例4。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 2.81(s，3H)，3.96及4.19(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.40(s，2H)，4.69及4.74(ABq，J＝14.9Hz，2H)，7.25-7.40(m，6H)，7.54(dd，J＝7.9，1.8Hz，1H)，7.71(d，J＝2.2Hz，1H)。HRMS：对于C22H20Cl2N3O，计算值：412.0983，实验值：412.0995。[M+H]+＝412.13。
实施例5
3-(氨基甲基)-6-苄基-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-7-酮

实施例5A：1-苄基-4，5-二酮基吡咯烷-3-羧酸乙酯

在室温下将苄胺(3.63g，33.0mmol)、乙酸乙酯(3.6mL，33.0mmol)于EtOH(10mL)中的混合物搅拌16h。添加草酸二乙酯(4.5mL，33mmol)与新制备的EtOH中的乙醇钠溶液(由0.9g金属钠(39.0mmol)于10mL EtOH中所制备)。将混合物加热回流1h，且使其固化。在真空中将挥发物除去。以H2O(50mL)稀释粗产物，并通过添加浓HCl将混合物的pH值调节到1。将混合物过滤，得到白色固体状的实施例5A(7.7g，88％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ1.26(t，J＝7.1Hz，3H)，3.89(s，3H)，4.22(q，J＝7.1Hz，2H)，4.65(s，2H)，7.20-7.40(m，5H)。[M+Na]+＝284.23。
实施例5B：(E)-4-(2，4-二氯亚苄基)-1-苄基吡咯烷-2，3-二酮

将实施例5A(1.3g，4.9mmol)、2，4-二氯苯甲醛(0.86g，4.9mmol)于EtOH(20mL)/20％HCl水溶液(50mL)中的混合物加热回流4h。在冷却至环境温度后，将水层倾析(decant)。收集所获得的小块固体，并自EtOAc中进一步再结晶，得到亮黄色固体状的实施例5B(0.84g，48％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.31(d，J＝2.2Hz，2H)，4.79(s，2H)，7.20-7.42(m，7H)，7.51(d，J＝2.2Hz，1H)，8.01(m，1H)。[M+H]+＝345.97。
实施例5C：6-苄基-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-4，5，6，7-四氢-1H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-羧酸乙酯

将实施例5B(1.75g，50mmol)、β-氨基巴豆酸乙酯(0.685g，53mmol)于乙酸(4mL)中的经搅拌的混合物加热至回流，历时1.5h。在减压下将挥发物除去。以EtOAc(20mL)洗涤粗反应产物，并将其过滤，得到白色固体状的实施例5C(1.62g，70％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 0.87(t，J＝7.5Hz，3H)，2.36(s，3H)，3.46(d，J＝18.9Hz，1H)，3.70-3.85(m，3H)，4.35及4.59(ABq，J＝15.2Hz，2H)，5.30(s，1H)，7.10-7.32(m，6H)，7.37(dd，J＝8.3，1.8Hz，1H)，7.49(d，J＝1.8Hz，1H)，9.31(s，1H)。[M+H]+＝457.29。
实施例5D：6-苄基-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-羧酸乙酯

将实施例5C(1.55g，34mmol)于1 N硝酸水溶液(12.5mL)中的经搅拌的混合物加热至回流，历时0.5h，且接着冷却至RT。将水层倾析。将剩余固体残余物溶解于EtOAc(50mL)。将有机层以H2O(10mL)、盐水洗涤，将其干燥(MgSO4)，过滤，且在减压下浓缩，得到浅褐色固体状实施例5D(1.5g，97％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 0.94(t，J＝7.5Hz，3H)，2.75(s，3H)，3.94及4.10(ABq，J＝18.0Hz，2H)，4.02(q，J＝7.1Hz，2H)，4.61及4.89(ABq，J＝15.0Hz，2H)，7.07(d，J＝8.3Hz，1H)，7.15-7.30(m，6H)，7.43(d，J＝1.8Hz，1H)。[M+H]+＝455.29。
实施例5E：6-苄基-4-(2，4-二氯苯基)-3-(羟甲基)-2-甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-7-酮

向实施例5D(0.75g，1.64mmol)于THF(15mL)中的经搅拌溶液中添加LiBH4(于THF中的2M溶液，1.23mL，2.46mmol)。在室温下搅拌16h后，添加另一份LiBH4(于THF中的2 M溶液，1.00mL，2.0mmol)。在室温下另外搅拌48h后，通过添加饱和NaHCO3溶液(10mL)来中止反应。将所得混合物以EtOAc(125mL)稀释，以H2O洗涤并浓缩。通过急骤层析法(硅胶，EtOAc/己烷＝1∶1至EtOAc/MeOH＝95∶5)来纯化粗反应产物，得到固体状实施例5E(0.23 g，34％)。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ 2.87(s，3H)，3.87及3.95(ABq，J＝17.6Hz，2H)，4.42及4.61(ABq，J＝12.0Hz，2H)，4.67及4.90(ABq，J＝14.5Hz，2H)，7.1-7.30(m，7H)，7.52(d，J＝2.2Hz，1H)。[M+H]+＝413.27。
实施例5：3-(氨基甲基)-6-苄基-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-7-酮.HCl盐

向实施例5E(88mg，0.21mmol)于CH2Cl2(1mL)中的经搅拌溶液中添加MsCl(28μL，0.36mmol)与Et3N(60μL，0.43mmol)。在环境温度下将反应混合物维持2.5h并浓缩，得到粗产物，使粗产物经受急骤层析(硅胶，EtOAc/己烷＝1∶2至100％EtOAc)，得到氯化物中间物(74mg，80％)。将密封管中的氯化物(72mg，0.17mmol)与7 N氨于MeOH(7mL)中的混合物在微波反应器中50℃下照射15min。冷却至环境温度后，在真空中将挥发物除去。通过反相制备性HPLC来纯化粗产物以提供纯产物。将此产物再溶解于CH2Cl2(3mL)中，且添加二烷(30μL)中的4 N HCl。将溶剂蒸干，得到白色固体状的3-(氨基甲基)-6-苄基-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-7-酮(实施例5)，HCl盐(57mg，2步骤，60％)。1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ2.83(s，3H)，3.98及4.19(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.03及4.12(ABq，J＝18.5Hz，2H)，4.75及4.81(ABq，J＝14.7Hz，2H)，7.24-7.34(m，5H)，7.37(d，J＝8.3Hz，1H)，7.54(dd，J＝8.3，2.0Hz，1H)，7.74(d，J＝2.0Hz，1H)。HPLC PhenomenexLUNA C-18 4.6×50mm，0至100％B历时4分钟，保持时间1分钟，A＝90％水、10％甲醇、0.1％TFA，B＝10％水、90％甲醇、0.1％TFA，Rt＝3.27min，99％均质性指数。LCMS：对于C22H19Cl2N3O，计算值：411.09，实验值：411.95[M+H]+。HRMS：对于C22H20Cl2N3O，计算值：412.0983，实验值：412.0998[M+H]+。
实施例6
6-(4-甲氧基苄基)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-7-酮.HCl盐

除以4-甲氧基苄胺替换步骤5A中的苄胺之外，使用以上实施例5所述的相同方法制备实施例6。1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ 2.84(s，3H)，3.75(s，3H)，3.98及4.19(ABq，J＝14.5Hz，2H)，3.99及4.09(ABq，J＝18.0Hz，2H)，4.68及4.75(ABq，J＝14.7Hz，2H)，6.87(d，J＝8.8Hz，2H)，7.21(d，J＝8.8Hz，2H)，7.37(d，J＝8.3Hz，1H)，7.56(dd，J＝8.3，1.8Hz，1H)，7.76(d，J＝1.8Hz，1H)。Phenomenex LUNA C-18 4.6×50mm，0至100％B历时4分钟，保持时间1分钟，A＝90％水、10％甲醇、0.1％TFA，B＝10％水、90％甲醇、0.1％TFA，Rt＝3.27min，99％均质性指数。LCMS：对于C23H21Cl2N3O2，计算值：441.10，实验值：442.17[M+H]+。HRMS：对于C23H22Cl2N3O2，计算值：442.1089，实验值：442.1101[M+H]+。
实施例7
(6-苄基-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-基)甲胺

实施例7A：6-苄基-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-羧酸乙酯

向实施例5D(0.102g，0.223mmol)于THF(10mL)的溶液中添加DIBAL-H溶液(1.5mL，1.5 M于甲苯中，1.0mmol)。在RT下将混合物搅拌1.5h，并以饱和NaHCO3溶液中止反应，之后使其在水(5mL)与EtOAc(150mL)之间分溶。将有机相干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。将残余物层析(SiO2；EtOAc)，得到黄色泡沫体状所需化合物(55 mg；63％)。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ0.91(t，J＝7.1Hz，3H)，2.62(s，3H)，4.01(q，J＝7.1Hz，2H)，5.23(s，2H)，6.64(d，J＝2.2Hz，1H)，7.01-7.30(m，8H)，7.44(d，J＝1.8Hz，1H)。[M+H]+＝439.24。
实施例7B：(6-苄基-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-基)甲醇

向实施例7A(55mg，0.125mmol)于THF(15mL)的溶液中添加LAH溶液(0.4mL，1 M于THF中，0.4mmol)。在RT下将混合物搅拌1.5h，并以饱和NaHCO3溶液(1.5mL)中止反应，之后以EtOAc(15mL)将其萃取。将有机相干燥(MgSO4)并在真空中将其浓缩。将残余物层析(SiO2；EtOAc)，得到黄色固体状所需化合物(32mg；64％)。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ 2.78(s，3H)，4.43及4.52(ABq，J＝11.9Hz，2H)，5.28(s，2H)，6.55(d，J＝2.2Hz，1H)，7.06-7.38(m，2H)，7.20-7.38(m，6H)，7.53(d，J＝1.8Hz，1H)。[M+H]+＝397.17。
实施例7：(6-苄基-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-基)甲胺.HCl盐

向实施例7B(32mg，0.08mmol)于CH2Cl2(0.5mL)中的经搅.拌溶液中添加MsCl(12μL，0.16mmol)与Et3N(32μL，0.213mmol)。在环境温度下将反应物维持0.5h并浓缩，得到粗产物，将粗产物急骤层析(硅胶，EtOAc/己烷＝1∶1至100％EtOAc)，得到氯化物中间物(21mg)。将所得的氯化物(21mg，0.05mmol)与7 N氨于MeOH(4mL)中的混合物于密封管中在微波反应器中100℃下照射5min。冷却至环境温度后，在真空中将挥发物除去。通过反相制备性HPLC来纯化粗产物，得到纯产物。将此产物再溶解于CH2Cl2(1mL)中，且添加于二烷(20μL)中的4 N HCl。将溶剂蒸干，得到黄色固体状的(6-苄基-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-基)甲胺(实施例3).HCl盐(5.6mg，步骤，15％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 2.78(s，3H)，4.05及4.27(ABq，J＝13.9Hz，2H)，5.54(s，2H)，7.30-7.38(m，5H)，7.53(d，8.3Hz，1H)，7.58(d，J＝2.2Hz，1H)，7.67(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.77(d，J＝2.2Hz，1H)，7.85(d，J＝2.2Hz，1H)。HPLC Phenomenex LUNA C-18 4.6×50 mm，0至100％B历时4分钟，保持时间1分钟，A＝90％水、10％甲醇、0.1％TFA，B＝10％水、90％甲醇、0.1％TFA，Rt＝2.75min，99％均质性指数(homogeneityindex)。LCMS：对于C22H19Cl2N3，计算值：395.10，实验值：395.94[M+H]+。HRMS：对于C22H20Cl2N3：计算值：396.1034，实验值：396.1022[M+H]+。
实施例8
3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-苯基-5，6-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-7-酮.HCl盐

实施例8A：4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-羧酸乙酯(新型中间物)

向实施例6D(100mg，0.21mmol，以与实施例5D类似的方式制备)

实施例6D
于CH3CN(3mL)的溶液中添加硝酸铈铵(0.232g，0.42mmol)于H2O(1.5mL)中的水溶液。在0℃下将反应混合物搅拌20min，接着以EtOAc(30ml)稀释。以饱和亚硫酸钠水溶液(15mL)洗涤有机相，干燥(MgSO4)，并在真空中浓缩，得到粗残余物，将其层析(SiO2；EtOAc至EtOAc/MeOH＝95∶5)，得到固体状实施例8A(28mg，38％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 2.71(s，3H)，3.58(s，3H)，4.05及4.26(ABq，J＝17.1Hz，2H)，7.09(d，J＝8.3Hz，1H)，7.25(bs，1H)，7.28(d，J＝2.2Hz，1H)，7.39(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，[M+H]+＝351.06。
实施例8B：4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-6-苯基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-羧酸甲酯

向实施例8A(28mg，0.079mmol)于二氯甲烷(1.5mL)中的溶液添加苯基硼酸(30mg，0.25mmol)、Cu(OAc)2(15.6mg，0.08mmol)、Et3N(33.2μL，O.238mmol)、吡啶(25μL，0.31mmol)及分子筛(50mg，在400℃预干燥隔夜)。将小瓶封住，并使空气通入反应混合物中，在RT下将其搅拌1.5h。在真空中除去挥发物，并层析(SiO2；1∶1己烷∶EtOAc至EtOAc)残余物，得到固体状实施例8B(24mg，70％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.74(s，3H)，3.60(s，3H)，4.45及4.64(ABq，J＝17.0Hz，2H)，7.14(d，J＝8.3Hz，2H)，7.30-7.38(m，3H)，7.52(d，J＝2.2Hz，1H)，7.76(dd，J＝8.3，2.2Hz，2H)。[M+H]+＝427.08。
实施例8C：4-(2，4-二氯苯基)-3-(羟甲基)-2-甲基-6-苯基-5，6-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-7-酮

向实施例8B(24mg，O.056mmol)于THF(1.5mL)中的经搅拌溶液中添加LiBH4(O.03mL，2 M于THF中的溶液，0.06mmol)及MeOH(15μL)。在室温下搅拌15min后，通过添加饱和NaHCO3溶液(1mL)来中止反应。将反应混合物以EtOAc(10mL)稀释，以H2O洗涤且浓缩。通过由Et2O研磨纯化粗反应产物，得到白色固体状实施例8C(17mg，77％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ2.84(s，3H)，4.39及4.46(ABq，J＝16.7Hz，2H)，4.40(dd，J＝11.8，6.6Hz，1H)，4.57(dd，J＝11.8，4.8Hz，1H)，7.11(t，J＝7.5Hz，1H)，7.24(d，J＝8.3Hz，1H)，7.32(dd，J＝8.3，7.5Hz，2H)，7.38(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.55(d，J＝2.2H，1H)，7.74(d，J＝7.5Hz，2H)，[M+H]+＝399.06。
实施例8：3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-苯基-5，6-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-7-酮.HCl盐

向实施例8C(17mg，0.043mmol)于CH2Cl2(1mL)中的经搅拌溶液中添加MsCl(21μL，0.26mmol)与Et3N(60μL，0.32mmol)。使反应在环境温度下维持4h，并浓缩，得到粗产物，将其以EtOAc(10mL)稀释并以0.1N HCl水溶液(2mL)洗涤。将有机相干燥(MgSO4)，并在真空中浓缩，得到氯化物中间物。将所得氯化物与7 N氨于MeOH(3mL)中的混合物于密封管中在微波反应器中100℃下照射15min。冷却至环境温度后，在真空中将挥发物除去。通过反相制备性HPLC来纯化粗产物以提供纯产物。将此产物再溶解于CH2Cl2(2mL)中，且添加二烷(10μL)中的4 N HCl。将溶剂蒸干，得到白色固体状的3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-苯基-5，6-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-7-酮(实施例8).HCl盐(5.1 mg，2步骤，28％)。1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ 2.87(s，3H)，4.04及4.24(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.63及4.78(ABq，J＝17.0Hz，2H)，7.22(t，J＝7.5Hz，1H)，7.42(dd，J＝8.4，7.5Hz，2H)，7.51(d，J＝8.4Hz，1H)，7.63(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.81-7.85(m，3H)。HPLCPhenomenex LUNA C-18 4.6×50mm，0至100％B历时4分钟，保持时间1分钟，A＝90％水、10％甲醇、0.1％TFA，B＝10％水、90％甲醇、0.1％TFA，Rt＝3.30min，99％均质性指数。LCMS：对于C21H17Cl2N3O，计算值：397.08，实验值：398.06[M+H]+。HRMS：对于C21H18Cl2N3O2，计算值：398.0827，实验值：398.0826[M+H]+。
实施例9
3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-6-(2-甲氧基苯基)-2-甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-7-酮.HCl盐

除以2-甲氧基苯基硼酸替换步骤8B中的苯基硼酸之外，使用以上实施例8所述的相同方法制备实施例9。1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ 2.89(s，3H)，3.80(s，3H)，4.04及4.26(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.51及4.61(ABq，J＝18.0Hz，2H)，7.00-7.17(m，2H)，7.35-7.43(m，2H)，7.50(d，J＝8.3Hz，1H)，7.59(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.79(d，J＝2.2Hz，1H)。LCMS：对于C22H19Cl2N3O2，计算值：427.09，实验值：427.94[M+H]+。HRMS：对于C22H19Cl2N3O2，计算值：428.0933，实验值：428.0946[M+H]+。
在ChiralcelOJ，20μ，5×50cm管柱上使用含15％EtOH-MeOH(50％)(含有0.1％二乙胺)的庚烷(含有0.1％二乙胺)等度梯度分离实施例9，得到各个对映异构体。
实施例9-1(对映异构体A；移动较快)：[α]D25-15.8°(c＝0.2，MeOH)；手性分析HPLC[ChiralcelOJ 4.6×250mm；含15％EtOH-MeOH(1∶1；含有0.1％DEA)的庚烷(含有0.1％DEA)]的纯度：88％ee。
实施例9-2(对映异构体B；移动较快)：[α]D25+17.9°(c＝0.2，MeOH)；手性分析HPLC[ChiralcelOJ 4.6×250mm；含15％EtOH-MeOH(1∶1；含有0.1％DEA)的庚烷(含有0.1％DEA)]所得的纯度：93％ee。
实施例10
(6-苄基-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-基)甲胺.HCl盐

实施例10A：(6-苄基-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-基)甲醇

在0℃下，向实施例5D(0.360g，0.79mmol)于THF(3.5mL)的溶液中添加LAH溶液(5mL，1 M于THF中，5mmol)。将混合物温热至RT并在RT下搅拌1.5h，之后将其在水(5mL)与EtOAc(150mL)之间分溶。将有机相干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。将残余物层析(SiO2，自100％己烷至100％EtOAc的连续梯度历时3min，100％EtOAc历时5min)，得到固体状实施例10A(0.151g；48％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.78(s，3H)，4.20-4.60(m，6H)，4.71及4.84(ABq，J＝15.8Hz，2H)，7.19(d，J＝7.9Hz，1H)，7.47-7.53(m，6H)，7.78(d，J＝1.8Hz，1H)。[M+H]+＝398.88。
实施例10：(6-苄基-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-基)甲胺.HCl盐

向实施例10A(50mg，0.13mmol)于CH2Cl2(1.5mL)中的经搅拌溶液中添加MsCl(28μL，0.36mmol)与Et3N(53μL，0.39mmol)。将反应物在环境温度下维持2.5h并浓缩，得到粗产物，将粗产物急骤层析(硅胶，100％EtOAc至EtOAc/MeOH＝95∶5)得到氯化物中间物。将所得氯化物与7 N氨于MeOH(3mL)中的混合物于密封管中在微波反应器中100℃下照射15min。冷却至室温后，在真空中除去挥发物。通过反相制备性HPLC来纯化粗产物以提供纯产物。将此产物再溶解于CH2Cl2(3mL)，且添加二烷(40μL)中的4 N HCl。将溶剂蒸干，得到白色固体状的(6-苄基-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-基)甲胺(实施例10).HCl盐(21.1mg，2步骤，35％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 2.75(s，3H)，3.89及4.15(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.43及4.56(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.63(s，2H)，4.75(s，2H)，7.43(d，J＝8.3Hz，1H)，7.47-7.53(m，3H)，7.54-7.58(m，2H)，7.69(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.78(d，J＝2.2Hz，1H)。HPLC Phenomenex LUNA C-18 4.6×50mm，0至100％B历时4分钟，保持时间1分钟，A＝90％水、10％甲醇、0.1％TFA，B＝10％水、90％甲醇、0.1％TFA，Rt＝2.10min，99％均质性指数。LCMS：对于C22H21Cl2N3，计算值：397.11，实验值：398.09[M+H]+。HRMS：对于C22H22Cl2N3，计算值：398.1191，实验值：398.1175[M+H]+。
实施例11

实施例11A：(6-(4-甲氧基苄基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-基)甲基氨基甲酸叔丁酯(新型中间物)

向实施例6(2.41g，5.47mmol)于THF(50mL)中的混合物中添加饱和NaHCO3水溶液(15mL)、H2O(5mL)及Boc2O(1.79g，8.20mmol)。在RT下将所得混合物搅拌过夜，以EtOAc(100mL)稀释并另外搅拌5min。将有机层分离并在真空中将其蒸发，得到粗产物，将其自EtOAc/己烷中再结晶得到白色固体状的实施例11A(2.33g，79％)。
实施例11B：(4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-基)甲基氨基甲酸叔丁酯

向实施例11A(1.99g，3.68mmol)于CH3CN(80mL)中的混合物中添加硝酸铈铵(5.76g，10.51mmol)。在RT下将所得混合物搅拌6h并接着将其放置于冰箱中隔夜。将固体过滤并以H2O(20mL)洗涤。将固体进一步分散于EtOAc(80mL)中，超声波处理，并过滤，得到浅褐色固体状所需产物(实施例11B)。将滤出液浓缩，以EtOAc(30mL)处理，并过滤得到第二份实施例11B(总计1.44g，93％)。
实施例11C：(6-(4-氯苯基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-基)甲基氨基甲酸叔丁酯

在75℃下将实施例11B(29.8mg，0.071mmol)、4-氯苯基硼酸(45mg，0.288mmol)、Cu(OAc)2(24mg，0.132mmol)、Et3N(45μL，0.324mmol)、吡啶(60μL，0.743mmol)及二氯乙烷(1mL)的混合物加热1.5h。真空浓缩，之后急骤层析(50％至100％EtOAc/己烷)，得到实施例11 C，通过自MeOH中再结晶将其进一步纯化得到23mg(61％)固体。
实施例11：3-(氨基甲基)-6-(4-氯苯基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-7-酮.HCl盐

向实施例11C(20mg，0.038mmol)于CH2Cl2(1.2mL)的溶液中添加TFA(0.8mL)并将所得混合物搅拌3h。将反应混合物蒸干，再溶解于CH2Cl2(1mL)中，且添加4 N HCl/二烷(40μL)。将溶剂蒸发且用醚研磨残余物，得到实施例11(10.0mg，57％)。1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ2.78(s，3H)，3.96及4.17(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.55及4.69(ABq，J＝17.1 Hz，2H)，7.30-7.35(m，2H)，7.40-7.45(m，1H)，7.55(dd，J＝8.3，1.8Hz，1H)，7.74(d，J＝1.8Hz，1H)，7.76-7.81(m，2H)。LCMS：对于C21H16Cl3N3O，计算值：431.04，实验值：431.98[M+H]+。HRMS：对于C21H17Cl2N3O，计算值：432.0437，实验值：432.0435[M+H]+。
实施例12
3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-6]吡啶-7-酮.HCl盐

向实施例11B(8.9mg，0.021mmol)于CH2Cl2(1mL)中的混合物中添加TFA(0.5mL)并在RT下将所得混合物搅拌3h。在真空中蒸发反应混合物，将残余物再溶解于CH2Cl2(1mL)，且添加4 N HCl/二烷(40μL)。将溶剂蒸干得到白色固体状的实施例12(7.24mg，96％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ2.76(s，3H)，3.92及4.14(ABq，J＝14.0Hz，2H)，4.00及4.13(ABq，J＝18.8Hz，2H)，7.38(d，J＝8.3Hz，1H)，7.51(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.70(d，J＝1.6Hz，1H)。LCMS：对于C15H13Cl2N3O，计算值：321.04，实验值：322.02[M+H]+。HRMS：对于C15H14Cl2N3O，计算值：322.0514，实验值：322.0524[M+H]+。
实施例13：
3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-对甲苯基-5，6-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-7-酮.HCl盐

除以4-甲基苯基硼酸替换步骤11C中的4-氯苯基硼酸之外，使用以上实施例11所述的相同方法制备实施例13。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ2.24(s，3H)，2.81(s，3H)，3.96及4.20(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.53及4.68(ABq，J＝17.6Hz，2H)，7.13-7.18(m，2H)，7.47-7.50(m，1H)，7.55(dd，J＝7.9，1.8Hz，1H)，7.58-7.63(m，2H)，7.73(d，J＝1.8Hz，1H)。LCMS：对于C22H19Cl2N3O，计算值：411.09，实验值：412.04[M+H]+。HRMS：对于C22H20Cl2N3O，计算值：412.0983，实验值：412.0993[M+H]+。
实施例14
3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-6-(4-甲氧基苯基)-2-甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-7-酮.HCl盐

除以4-甲氧基苯基硼酸替换步骤11C中的4-氯苯基硼酸之外，使用以上实施例11所述的相同方法制备实施例14。1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ 2.86(s，3H)，3.79(s，3H)，4.03及4.25(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.58及4.74(ABq，J＝17.6Hz，2H)，6.90-7.00(m，2H)，7.51(d，J＝8.3Hz，1H)，7.63(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.68-7.71(m，2H)，7.81(d，J＝2.2Hz，1H)。LCMS：  对于C21H16Cl3N3O，计算值：427.09，实验值：428.05[M+H]+。HRMS：对于C21H17Cl3N3O，计算值：428.0933，实验值：428.0941[M+H]+。
实施例15
3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-6-(4-氟苯基)-2-甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-7-酮.HCl盐

除以4-氟苯基硼酸替换在步骤11C中的4-氯苯基硼酸之外，使用以上实施例11所述的相同方法制备实施例15。1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ 2.89(s，3H)，4.05及4.27(ABq，J＝14.3Hz，2H)，4.64及4.80(ABq，J＝17.6Hz，2H)，7.12-7.18(m，2H)，7.54(d，J＝8.3Hz，1H)，7.63(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.82(d，J＝1.6Hz，1H)，7.83-7.87(m，2H)。LCMS：对于C21H16Cl2N3OF，计算值：415.07，实验值：416.02[M+H]+。HRMS：对于C21H17Cl2N3OF，计算值：416.0733，实验值：416.0743[M+H]+。
实施例16
4-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)苯甲腈.HCl盐

除以4-氰基苯基硼酸替换在步骤11C中的4-氯苯基硼酸之外，使用以上实施例11所述的相同方法制备实施例16。1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ2.87(s，3H)，4.04及4.24(ABq，J＝14.2Hz，2H)，4.69及4.82(ABq，J＝17.1Hz，2H)，7.50(d，J＝8.3Hz，1H)，7.64(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.74-7.78(m，2H)，7.84(d，J＝2.2Hz，1H)，8.10-8.15(m，2H)。LCMS：对于C22H16Cl2N4O，计算值：422.07，实验值：422.93[M+H]+。HRMS：对于C22H17Cl2N4O，计算值：423.0779，实验值：423.0790[M+H]+。
实施例17
3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-邻甲苯基-5，6-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-7-酮.HCl盐

除以2-甲基苯基硼酸替换在步骤8B中的苯基硼酸之外，使用以上实施例8所述的相同方法制备实施例17。1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ 2.20(s，3H)，2.88(s，3H)，4.04及4.25(ABq，J＝14.2Hz，2H)，4.50及4.65(ABq，J＝18.0Hz，2H)，7.25-7.40(m，4H)，7.51(d，J＝8.3Hz，1H)，7.60(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.79(d，J＝2.2Hz，1H)，8.10-8.15(m，2H)。LCMS：对于C22H19Cl2N3O，分析计算值：411.09，实验值：412.04[M+H]+。HRMS：对于C22H20Cl2N3O，计算值：412.0983，实验值：412.0982[M+H]+。
实施例18
3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(2-(甲硫基)苯基)-5，6-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-7-酮.HCl盐

除以2-甲硫基苯基硼酸替换在步骤8B中的苯基硼酸之外，使用以上实施例8所述的相同方法制备实施例18。1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ2.43(s，3H)，2.88(s，3H)，4.03及4.25(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.52及4.58(ABq，J＝17.6Hz，2H)，7.24-7.35(m，2H)，7.42-7.46(m，2H)，7.48(d，J＝8.3Hz，1H)，7.60(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.79(d，J＝2.2Hz，1H)。LCMS：对于C22H19Cl2N3OS，计算值：443.06，实验值：444.01[M+H]+。HRMS：对于C22H19Cl2N3OS，计算值：444.0704，实验值：444.0695[M+H]+。
实施例19
3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-6-(3-甲氧基苯基)-2-甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-7-酮.HCl盐

除以3-甲氧基苯基硼酸替换在步骤11C中的4-氯苯基硼酸之外，使用以上实施例11所述的相同方法制备实施例19。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ2.86(s，3H)，3.80(s，3H)，4.03及4.24(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.62及4.76(ABq，J＝17.5Hz，2H)，6.80(dt，J＝7.0，2.2Hz，1H)，7.26-7.35(m，2H)，7.50(d，J＝8.3Hz，1H)，7.56-7.60(m，1H)，7.63(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.82(d，J＝2.2Hz，1H)。LCMS：对于C22H19Cl2N3O2，计算值：427.09，实验值：428.04[M+H]+。HRMS：对于C22H20Cl2N3O2，计算值：428.0933，实验值：428.0935[M+H]+。
实施例20
3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6，7-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

除以MeOH中的7 N NH3替换在步骤2E中的4-甲氧基苯胺之外，使用以上实施例2所述的相同方法制备实施例20。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ 2.84(s，3H)，3.95及4.19(ABq，J＝14.9Hz，2H)，4.49(s，2H)，7.33(d，J＝8.4Hz，1H)，7.48-7.55(m，1H)，7.66-7.72(m，1H)。HRMS：对于C15H14Cl2N3O，计算值：322.0514，实验值：322.0512。[M+H]+＝322.03。
实施例21
3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-6-(2-甲氧基乙基)-2-甲基-6，7-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

除以2-甲氧基乙胺替换在步骤2E中的4-甲氧基苯胺之外，使用以上实施例2所述的相同方法制备实施例21。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.83(s，3H)，3.34(s，3H)，3.58-3.63(m，2H)，3.65-3.78(m，2H)，3.95及4.18(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.62(s，2H)，7.33(d，J＝8.4 Hz，1H)，7.52(dd，J＝8.1，2.0Hz，1H)，7.70(d，J＝2.2Hz，1H)。HRMS：对于C18H20Cl2N3O2，计算值：380.0933，实验值：380.0941。[M+H]+＝379.91。
实施例22
3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2，6-二甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-7-酮.HCl盐

实施例22A：4-(2，4-二氯苯基)-2，6-甲基-7-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-羧酸甲酯

向实施例8A(50mg，0.14mmol)于DMF(0.8mL)中的混合物中添加95％NaH(6.2mg，0.26mmol)并在室温下将所得混合物搅拌15min。将反应混合物搅拌5h并接着以NH4Cl水溶液中止反应。将混合物以EtOAc(×2)萃取，且在真空中蒸发有机层得到粗产物混合物，通过急骤层析(50至100％EtOAc/己烷)将其纯化，得到37mg(71％)无色油状实施例22A。
实施例22：3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2，6-二甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-7-酮，TFA盐

使用与实施例8B转化为实施例8所使用的顺序类似的顺序将实施例22A转化为实施例22。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ 2.80(s，3H)，3.14(s，3H)，3，98及4.16(ABq，J＝14.4Hz，2H)，4.13及4.24(ABq，J＝18.0Hz，2H)，7.41(d，J＝8.3Hz，1H)，7.56(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.75(d，J＝2.2Hz，1H)。LCMS：对于C16H15Cl2N3O，分析计算值：335.06，实验值：336.06[M+H]+。HRMS：对于C16H15Cl2N3O，分析计算值：336.0670，实验值：336.0684[M+H]+。
实施例23
2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙酸甲酯，TFA盐

实施例23A：2-(3-((叔丁氧羰基)甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙酸甲酯

向实施例11B(50mg，0.12mmol)于DMF(1mL)中的混合物中添加95％NaH(2.8mg，0.11mmol)并在室温下将所得混合物搅拌10min，且接着以超声波处理30秒。接着添加溴乙酸甲酯(0.025mL，0.26mmol)并在室温下将所产生的混合物搅拌过夜。以2滴1NHCl中止反应混合物，并在真空中蒸发混合物。以EtOAc(10mL)处理残余物并以H2O(2mL)洗涤。分离有机层并在真空中将其蒸发，得到粗产物混合物，通过急骤层析(100％EtOAc至10％MeOH/EtOAc)将其纯化，得到无色油状的实施例23A(21mg，36％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 2.84(s，3H)，3.73(s，3H)，4.02及4.25(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.25及4.34(ABq，J＝17.6Hz，2H)，4.39及4.45(ABq，J＝18.0Hz，2H)，7.45(d，J＝8.3Hz，1H)，7.57(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.79(d，J＝2.2Hz，1H)。LCMS：对于C18H17Cl2N3O3，分析计算值：393.06，实验值：394.06[M+H]+。
实施例23：2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙酸甲酯，TFA盐

向实施例23A(21mg，0.042mmol)于CH2Cl2(0.7mL)的溶液中添加TFA(0.3mL)并将所产生的混合物搅拌2h。将溶剂除去，并通过制备性HPLC(Phenomenex，10min梯度，30至100％B)纯化残余物，得到白色粉末状的实施例23，TFA盐(16.8mg，71％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ。HRMS：对于C18H18Cl2N3O3，计算值：394.0725，实验值：394.0728[M+H]+；[M+H]+＝394.06。
实施例24
3-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)苯甲腈.HCl盐

除了以3-氰基苯基硼酸替换在步骤11C中的4-氯苯基硼酸之外，使用以上实施例11所述的相同方法制备实施例24。1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ2.88(s，3H)，4.04及4.26(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.70及4.84(ABq，J＝17.1Hz，2H)，7.53(d，J＝8.3Hz，1H)，7.54-7.62(m，2H)，7.64(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.82(d，J＝2.2 Hz，1H)，8.12(dt，J＝8.8，1.8Hz，1H)，8.38-8.42(m，1H)。LCMS：对于C22H16Cl2N4O，分析计算值：422.07，实验值：423.04[M+H]+。HRMS：对于C22H17Cl2N4O，分析计算值：TBD，实验值：TBD[M+H]+。
实施例25
2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙酸，TFA盐

向实施例23A(50mg，0.10mmol)于THF(1mL)的溶液中添加LiOH水溶液(14mg于0.8mL H2O中，0.33mmol)，并将所产生的混合物搅拌2h。以1 NHCl水溶液将混合物酸化至pH＝4。在真空中将有机挥发物除去，且以EtOAc(5ml)萃取水相。在真空中浓缩有机萃取物得到羧酸。
向此羧酸于CH2Cl2(1mL)中的混合物中添加TFA(0.35mL)，并将所产生的混合物搅拌2h。将溶剂除去，并通过制备性HPLC(Phenomenex，10min梯度，15至100％B)纯化残余物，得到白色粉末状的实施例25，TFA盐(9.1mg，18％)。1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ2.84(s，3H)，4.00及4.22(ABq，J＝14.5 Hz，2H)，4.26及4.34(ABq，J＝18.0Hz，2H)，4.36及4.42(ABq，J＝18.1Hz，2H)，7.44(d，J＝8.3Hz，1H)，7.60(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.80(d，J＝2.2Hz，1H)。LCMS：对于C17H15Cl2N3O3，分析计算值：379.05，实验值：380.00[M+H]+。HRMS：对于C17H16Cl2N3O3，分析计算值：TBD，实验值：TBD[M+H]+。
实施例26
3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-6-(2-羟乙基)-2-甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-7-酮，TFA盐

向实施例22A(172mg，0.15mmol)于THF(3.5mL)的溶液中添加2 MLiBH4/THF(0.2mL，0.4mmol)。在室温下将混合物搅拌2h，接着以饱和NaHCO3水溶液(0.5mL)中止。以EtOAc(8mL)萃取反应混合物。在真空中浓缩有机萃取物。层析(SiO2；EtOAc)残余物，得到无色泡沫体状的所需醇产物部分A(96mg；42％)。
向此醇产物(35mg，0.075mmol)于CH2Cl2(1mL)中的混合物中添加TFA(0.5mL)，并将所产生的混合物搅拌2h。除去溶剂，并通过制备性HPLC(Phenomenex，10min梯度，20至100％B)纯化残余物，得到白色粉末状的实施例26，TFA盐(9.0mg，25％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 2.83(s，3H)，3.69-3.73(m，2H)，3.74-3.79(m，2H)，4.01及4.23(ABq，J＝14.8Hz，2H)，4.28及4.37(ABq，J＝18.1Hz，2H)，7.45(d，J＝8.3Hz，1H)，7.59(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.80(d，J＝2.2Hz，1H)。LCMS：对于C17H17Cl2N3O2，分析计算值：365.07，实验值：366.05[M+H]+。HRMS：对于C17H18Cl2N3O2，分析计算值：TBD，实验值：TBD[M+H]+。
实施例27
3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-6-(2-羟乙基)-2-甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-7-酮，TFA盐

在环境温度下将实施例26部分A化合物(420mg，0.875mmol)、Ag2O(0.75g，3.25mmol)、碘甲烷(0.55mL，8.74mmol)于CH3CN(10ml)中的混合物搅拌5天。经由过滤除去固体残余物。将滤出液浓缩并层析(SiO2；EtOAc)，得到无色泡沫体状的所需甲醚(methyl ether)产物(103mg，24％)。
向此甲醚产物(103mg，0.21mmol)于CH2Cl2(1.4mL)中的混合物中添加TFA(0.6mL)，并将所产生的混合物搅拌2h。将溶剂除去，并通过制备性HPLC(Phenomenex，10min梯度，20至100％B)纯化残余物，得到白色粉末状的实施例27，TFA盐(17.3mg，16％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 2.83(s，3H)，3.30(s，3H)，3.61(t，J＝5.3Hz，2H)，3.78(t，J＝5.3Hz，2H)，4.02及4.25(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.24及4.34(ABq，J＝18.3Hz，2H)，7.46(d，J＝8.3Hz，1H)，7.58(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.77(d，J＝2.2Hz，1H)。LCMS：对于C18H19Cl2N3O2，分析计算值：379.09，实验值：380.11[M+H]+。HRMS：对于C18H20Cl2N3O2，分析计算值：380.0933，实验值：380.0938[M+H]+。
实施例28
2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙酸甲酯，TFA盐

实施例28A：

除以2-(3-(氯甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙酸甲酯替换3-(氯甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2，7-二甲基-6-苯基-6，7-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮之外，使用以上实施例1G所述的相同方法制备实施例28A。1H NMR(400 MHz，CDCl3)：δ 2.82(s，3H)，3.74(s，3H)，4.25及4.42(ABq，J＝17.6Hz，2H)，4.24及4.31(ABq，J＝13.6Hz，2H)，4.56及4.61(ABq，J＝17.6Hz，2H)，7.19(d，J＝8.4Hz，1H)，7.40(dd，J＝8.4，2.2Hz，1H)，7.55(d，J＝2.2Hz，1H)。LCMS：420.03[M+H]+。
实施例28

在室温下将实施例28A(15mg，0.036mmol)、Ph3P(23mg，2.5mmol)、THF(1mL)及H2O(0.5mL)搅拌4 h。将反应混合物过滤，以MeOH洗涤，蒸发，并通过制备性HPLC(Phenomenex LUNA 5μC18(2)21.2×100mm；8min梯度；20至100％B；20mL/min)纯化残余物，得到无色油状的实施例28 TFA盐(1.94mg，10％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ2.85(s，3H)，3.75(s，3H)，3.97及4.20(ABq，J＝14.4Hz，2H)，4.33及4.41(ABq，J＝17.9Hz，2H)，4.62(s，2H)，7.33(d，J＝8.3Hz，1H)，7.52(dd，J＝8.3，2.0Hz，1H)，7.69(d，J＝2.0Hz，1H)。LCMS：394.01[M+H]+。HRMS：对于C18H18Cl2N3O3，计算值：394.0725，实验值：394.0727[M+H]+。
实施例29
3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-6-(3-甲氧基丙基)-2-甲基-6，7-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

除以3-甲氧基丙胺替换在步骤2E中的4-甲氧基苯胺之外，使用以上实施例2所述的相同方法制备实施例29。1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ1.85-1.95(m，2H)，2.83(s，3H)，3.27(s，3H)，3.41(t，J＝5.9Hz，2H)，3.63(t，J＝7.0Hz，2H)，3.94及4.13(ABq，J＝14.4Hz，2H)，4.53及4.58(ABq，J＝18.5Hz，2H)，7.33(d，J＝7.9Hz，1H)，7.52(dd，J＝8.4，2.2Hz，1H)，7.69(d，J＝2.2Hz，1H)。LCMS：394.10[M+H]+。HRMS：对于C19H22Cl2N3O2，分析计算值：394.1089，实验值：394.1099[M+H]+。
实施例30
3-(氨基甲基)-4-((S)-2，4-二氯苯基)-6-((S)-1-甲氧基丙-2-基)-2-甲基-6，7-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐[异构体A]

除以(S)-1-甲氧基丙-2-胺替换在步骤2E中的4-甲氧基苯胺之外，使用以上实施例2所述的相同方法制备实施例30。通过制备性HPLC(Phenomenex，10min梯度，10至100％B)分离非对映异构体混合物，得到白色粉末状的实施例30，TFA盐及实施例31，TFA盐。由实验指定立体化学构型(stereochemical assignment tentative)。
实施例30：1H NMR(400MHz，CD3OD)δ1.26(d，J＝7.0Hz，3H)，2.83(s，3H)，3.32(s，3H)，3.49(dd，J＝10.1，4.4Hz，1H)，3.59(dd，J＝12.1Hz，7.9Hz，1H)，3.95及4.18(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.52-4.54(m，1H)，4.50及4.55(ABq，J＝18.9Hz，2H)，7.32(d，J＝8.4Hz，1H)，7.52(dd，J＝8.4，1.8Hz，1H)，7.70(d，J＝2.2Hz，1H)。LCMS：394.10[M+H]+。HRMS：对于C19H22Cl2N3O2，计算值：394.1089，实验值：394.1104[M+H]+。
实施例31
3-(氨基甲基)-4-((R)-2，4-二氯苯基)-6-((S)-1-甲氧基丙-2-基)-2-甲基-6，7-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐[异构体B]

1H NMR(400MHz，CD3OD)δ1.27(d，J＝7.0Hz，3H)，2.83(s，3H)，3.31(s，3H)，3.49(dd，J＝10.1，4.4Hz，1H)，3.59(dd，J＝10.1Hz，7.9Hz，1H)，3.94及4.18(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.46-4.55(m，1H)，4.48及4.57(ABq，J＝18.5Hz，2H)，7.33(d，J＝8.4Hz，1H)，7.52(dd，J＝8.4，2.2Hz，1H)，7.70(d，J＝2.2Hz，1H)。LCMS：394.10[M+H]+.HRMS：对于C19H22Cl2N3O2，计算值：394.1089，实验值：394.1073[M+H]+。
实施例32
3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-羧酸乙酯，TFA盐

实施例32A：(4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-基)甲基氨基甲酸叔丁酯

在RT下将实施例20(47mg，0.096mmol)、1 M Boc2O/THF(0.18mL，0.18mmol)、NaHCO3(160mg，1.9mmol)与THF(5mL)的混合物搅拌过夜，以EtOAc及水处理，且将其转移至分离漏斗。将水层以EtOAc(×2)萃取，以盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并蒸发得到粗产物32A，其可不经纯化而用于下一步骤。[M+H]+＝422.15。
实施例32B：3-((叔丁氧基羰基氨基)甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-羧酸乙酯

向以上粗产物、实施例32A于CH2Cl2(5mL)的溶液中添加Et3N(0.1mL，0.72mmol)，之后添加EtOCOCl(0.04mL，0.42mmol)，且在RT下将混合物搅拌过夜。LC指示转化率为约10％。添加DMAP(10mg)，之后再添加EtOCOCl(0.1mL，1.05mmol)，且在RT下将混合物搅拌过夜。蒸发且急骤层析(40g二氧化硅，0％至100％EtOAc/己烷)，产生18.5mg无色油状的实施例32B(2步骤，39％)。[M+H]+＝494.22。
实施例32：3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-羧酸乙酯，TFA盐

向实施例32B(18mg，0.046mmol)于CH2Cl2(1mL)的溶液中逐滴添加TFA(1mL)并在RT下将混合物搅拌1h。将混合物蒸发并通过制备性HPLC(Phenomenex LUNA 5μCl8(2)21.2×100mm；8min梯度；0％至100％B；20mL/min)纯化，得到16.8mg(91％)白色粉末。1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ1.35(t，J＝7.3Hz，3H)，2.86(s，3H)，3.97及4.19(ABqJ＝14.5 Hz，1H)，4.33(q，J＝7.0Hz，2 H)，4.84-4.95(m，2H)，7.32(d，J＝7.9Hz，1H)，7.54(dd，J＝8.4，2.2Hz，1H)，7.72(d，J＝2.2Hz，1H)。HRMS：对于C18H18Cl2N3O3，计算值：394.0725，实验值：394.0726[M+H]+。
实施例33
(1R，2S)-2-((S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)环戊腈，TFA盐及(1R，2S)-2-((R)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)环戊腈，TFA盐

实施例33A：(1R，2S)-2-((S)-4-(2，4-二氯苯基)-3-(羟甲基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)环戊烷甲酰胺及(1R，2S)-2-((R)-4-(2，4-二氯苯基)-3-(羟甲基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)环戊烷甲酰胺

遵循与实施例2G类似的顺序，自实施例2D(外消旋体)与(±)-顺-2-氨基环戊烷甲酰胺制备为非对映异构体混合物的实施例33A。[M+Na]+＝456.2。
实施例33B：(1R，2S)-2-((R)-3-(氯甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)环戊腈及(1R，2S)-2-((S)-3-(氯甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)环戊腈

使实施例33A(0.22mmol)的混合物进行如实施例2H中的氯化，得到氯化物的非对映异构混合物(实施例33B)，其中伯酰胺亦得以脱水形成腈。非对映异构体1：[M+H]+＝434.12。非对映异构体2：[M+H]+＝434.13。
实施例33：(1R，2S)-2-((S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)环戊腈，TFA盐及(1R，2S)-2-((R)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)环戊腈，TFA盐

如实施例33B中的氨解作用产生胺的非对映异构混合物(实施例33)。1HNMR(400 MHz，CD3OD)δ1.66-1.84(m，1H)，1.97-2.27(m，5 H)，2.85(s，3H)，3.35-3.47(m，J＝6.6Hz，1H)，3.94及4.21(ABq，J＝14.5Hz，1H)，4.64-4.78(m，4 H)，7.36(d，J＝8.4Hz，1H)，7.54(dd，J＝8.4，1.8Hz，1H)，7.71(d，J＝2.2Hz，1H)。HRMS：对于C21H21Cl2N4O，计算值：415.1092，实验值：415.1085[M+H]+。
实施例34
(1S，2R)-2-((S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)环戊腈，TFA盐及(1S，2R)-2-((R)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)环戊腈，TFA盐

除使用来自于实施例33B的非对映异构体2之外，如以上实施例33制备实施例34。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ1.66-1.80(m，1H)，1.99-2.26(m，5H)，2.84(s，3H)，3.38-3.49(m，J＝6.6Hz，1H)，3.98及4.17(d，J＝14.5Hz，1H)，4.68(d，J＝18.0Hz，1H)，4.75(d，J＝18.0Hz，1H)，7.32(d，J＝8.4Hz，1H)，7.52(dd，J＝8.4，2.2Hz，1H)，7.71(d，J＝1.8Hz，1H)。HRMS：对于C21H21Cl2N4O，计算值：415.1092，实验值：415.1084[M+H]+。
实施例35
(1R，3S)-3-((S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)环戊烷羧酸甲酯，TFA盐及(1R，3S)-3-((R)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)环戊烷羧酸甲酯，TFA盐

使用与实施例2所用的顺序类似的顺序，由(1R，3S)-3-氨基环戊烷羧酸甲酯与外消旋实施例2D制备为非对映异构体混合物的实施例35。1H NMR(400MHz，CD3OD，外消旋体)δ 1.75-2.10(m，5H)，2.14-2.32(m，1H)，2.83(s，3H)，2.89-3.02(m，1H)，3.67/3.69(s，3H)，3.94及4.18(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.49-4.67(m，2H)，7.31(d，J＝8.4Hz，1H)，7.52(dd，J＝8.4，1.8Hz，1H)，7.69(d，J＝2.2Hz，1H)。HRMS：对于C22H24Cl2N3O3，计算值：448.1195，实验值：448.1203[M+H]+。
实施例36
3-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)丙酸，TFA盐

实施例36A：6-(3-叔丁氧基-3-酮基丙基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-羧酸乙酯

将外消旋实施例2D(308mg，0.625mmol)、3-氨基丙酸叔丁酯盐酸盐(143mg，0.79mmol)、Et3N(0.25mL，1.8mmol)与DMA(5mL)的混合物在微波反应器中100℃下加热30min。将反应混合物以EtOAc(30mL)稀释，以H2O(30mL×2)、盐水(30mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤且蒸发，得到残余物，通过急骤层析(40g二氧化硅，0％至100％EtOAc/己烷)将该残余物纯化，得到无色油状的实施例36A(226mg，65％)。
实施例36B：3-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)丙酸叔丁酯

遵循与实施例2所述顺序类似的顺序，自呈游离碱形式的粗实施例36A获得实施例36B。
实施例36：3-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)丙酸，TFA盐

向粗实施例36B(0.17mmol)于CH2Cl2(5mL)的溶液中逐滴添加TFA(1mL)并在RT下将混合物搅拌2h。将混合物蒸发并通过制备性HPLC(Phenomenex LUNA 5μCl8(2)21.2×100mm；8min梯度；0％至100％B；20mL/min)纯化，得到60.5mg(最后2步骤，70％)的白色粉末。1H NMR(400MHz，CD3OD，外消旋体)δ2.67(t，J＝6.8Hz，2H)，2.83(s，3H)，3.73-3.85(m，2H)，3.94及4.18(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.62(s，2H)，7.32(d，J＝8.4Hz，1H)，7.52(dd，J＝8.1，2.0Hz，1H)，7.70(d，J＝1.8Hz，1H)。HRMS：对于C18H18Cl2N3O3，计算值：394.0725[M+H]+，实验值：394.0735[M+H]+。
实施例37
(S)-3-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)丙酸，TFA盐

实施例37A：(S)-6-(氯甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基吡啶-3，5-二羧酸-3-苄酯5-乙酯(新型中间物)

使用超临界流层析法(SFC)将实施例2D分离成单独的阻转异构体。条件：Whelk 0-1 SS，500×20mm，10微米；35℃；5％IPA，0.1％DEA于SFC-CO2中；100巴；60mL/min；220nm。移动较快异构体：实施例37A。[α]d25+54.45°(c10.21mg/mL，CHCl3)。
实施例37B：(R)-6-(氯甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基吡啶-3，5-二羧酸-3-苄酯5-乙酯(新型中间物)

获自以上SFC分离的移动较慢异构体。[α]d25-52.87°(c 10.21mg/mL，CHCl3)。
实施例37：(S)-3-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)丙酸，TFA盐

除使用实施例37A而非外消旋实施例2D之外，使用实施例36所描述的顺序制备实施例37。
实施例38
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-6-(2-甲氧基乙基)-2-甲基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

除使用实施例37A而非外消旋实施例2D之外，使用实施例21所描述的顺序制备实施例38。手性HPLC(Chiralpak AS 4.6×250mm，含5％EtOH-MeOH(1∶1)的庚烷(含有0.1％DEA))：Rt＝14.3min，＞97％ee。1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ 2.83(s，3H)，3.34(s，3H)，3.60(t，J＝5.3Hz，2H)，3.65-3.80(m，2H)，3.95及4.18(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.62(s，2H)，7.33(d，J＝8.4Hz，1H)，7.52(dd，J＝8.1，2.0Hz，1H)，7.69(d，J＝2.2Hz，1H)。HRMS：对于C18H20Cl2N3O2，计算值：380.0933，实验值：380.0929[M+H]+。
实施例39
(R)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-6-(2-甲氧基乙基)-2-甲基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

除使用实施例37B而非外消旋实施例2D之外，使用实施例21所描述的顺序制备实施例39。手性HPLC(Chiralpak AS 4.6×250mm，含5％EtOH-MeOH(1∶1)的庚烷(含有0.1％DEA))：Rt＝16.2min，＞97％ee。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ2.83(s，3H)，3.34(s，3H)，3.60(t，J＝5.1Hz，2H)，3.65-3.80(m，2H)，3.95及4.19(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.62(s，2H)，7.33(d，J＝8.4Hz，1H)，7.52(dd，J＝8.4，2.2Hz，1H)，7.69(d，J＝1.8Hz，1H)。HRMS：对于C18H20Cl2N3O2，计算值：380.0933，实验值：380.0931[M+H]+。
实施例40
N-(S)-1-(3-((S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)丙酰基)吡咯烷-3-基)乙酰胺，TFA盐

实施例40A：(S)-3-(3-((叔丁氧基羰氨基)甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)丙酸

向实施例37，TFA盐(82mg，0.16mmol)、饱和NaHCO3水溶液(1mL)与THF(5mL)的混合物中添加Boc2O(50mg，0.23mmol)，且在RT下将所产生的混合物搅拌过夜，以EtOAc(25mL)及1 N HCl(25mL)稀释，且将其转移至分离漏斗。以EtOAc(25mL×2)萃取水层，以盐水洗涤有机层，干燥(Na2SO4)，过滤且蒸发，得到93mg粗实施例40A。[M+H]+＝494.27。
实施例40B：((S)-6-(3-((S)-3-乙酰氨基吡咯烷-1-基)-3-酮基丙基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-基)甲基氨基甲酸叔丁酯

向粗实施例40A(约0.05mmol)于THF(3mL)的溶液中添加PyBOP(54mg，0.104mmol)，之后添加(3S)-(-)-乙酰氨基吡咯烷与DIEA(0.05mL，0.287mmol)，且在RT下将所产生的混合物搅拌过夜。将混合物以EtOAc稀释，以1 N HCl、盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，且蒸发得到残余物，通过制备性HPLC(Phenomenex LUNA 5μ Cl8(2)21.2×100mm；8min梯度；40％至100％B；20mL/min)将其纯化，得到32mg(对于最后2步骤均约为100％)无色油。
实施例40：N-((S)-1-(3-((S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)丙酰基)吡咯烷-3-基)乙酰胺，TFA盐

向实施例40B(32mg，0.053mmol)于CH2Cl2(3mL)的溶液中逐滴添加TFA(1mL)并在RT下将混合物搅拌过夜。蒸发，之后通过制备性HPLC(Phenomenex LUNA 5μC18(2)21.2×100mm；8min梯度；0％至100％B；20mL/min)纯化，得到19.1mg(58％)白色粉末。1H NMR(400MHz，CD3OD)旋转异构体，δ1.85及1.87(两个单峰，3H)，1.90-2.23(m，1H)，2.63-2.75(m，2H)，3.34-3.46(m，1H)，3.5 1-3.62(m，1H)，3.65-3.82(m，1H)，3.85-3.98(m，2H)，4.17及4.1 8(ABq的部分，J＝14.5Hz，1H)，4.25-4.36(m，1H)，4.56-4.72(m，1H)，7.319/7.322(d，J＝8.40Hz，1H)，7.50-7.54(m，1H)，7.69-7.71(m，1H)。HRMS：对于C24H28Cl2N5O3，计算值：504.1569，实验值：504.1551[M+H]+。
实施例41
(S)-3-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)-N，N-二乙基丙酰胺，TFA盐

使用与实施例40所述顺序类似的顺序由实施例40A与Et2NH制备实施例41。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ1.06(t，J＝7.0Hz，3H)，1.14(t，J＝7.0Hz，3H)，2.54-2.80(m，2H)，2.83(s，3H)，3.32-3.38(m，4H)，3.82(t，J＝6.8Hz，2H)，3.94及4.18(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.60及4.65(ABq，J＝18.9Hz，2H)，7.32(d，J＝8.40Hz，1H)，7.51(dd，J＝8.1，2.0Hz，1H)，7.69(d，J＝1.8Hz，1H)。HRMS：对于C22H27Cl2N4O2，计算值：449.1511，实验值：449.1506[M+H]+。
实施例42
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-6-(2-异丙氧基乙基)-2-甲基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

使用与实施例38所述顺序类似的顺序，由实施例36A及2-异丙氧基乙胺制备实施例42。1H NMR(400 MHz，CD3OD)1.11(d，J＝6.2Hz，6H)，2.84(s，3H)，3.54-3.74(m，5H)，3.95及4.19(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.63及4.68(ABq，J＝18.9Hz，2H)，7.33(d，J＝7.90Hz，1H)，7.52(dd，J＝8.4，2.2Hz，1H)，7.69(d，J＝2.2 Hz，1H)。HRMS：对于C20H24Cl2N3O2，计算值：408.1246，实验值：408.1237[M+H]+。
实施例43
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(((R)-四氢呋喃-2-基)甲基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

使用与实施例38所述顺序类似的顺序，由实施例36A及(R)-(四氢呋喃-2-基)甲胺制备实施例43。1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ 1.53-1.65(m，1H)，1.83-1.94(m，2H)，1.95-2.06(m，1H)，2.83(s，3H)，3.52(dd，J＝14.1hz，7.9Hz，1H)，3.66-3.76(m，2H)，3.82-3.90(m，1H)，3.95及4.18(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.06-4.15(m，1H)，4.60及4.71(ABq，J＝18.9Hz，2H)，7.33(d，J＝7.91Hz，1H)，7.52(dd，J＝8.1，2.0Hz，1H)，7.69(d，J＝1.8Hz，1H)。HRMS：对于C20H22Cl2N3O2，计算值：406.1089，实验值：406.1085[M+H]+.[α]D25-15.08°(c1.9mg/mL，EtOH)。
实施例44
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(((S)-四氢呋喃-2-基)甲基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

使用与实施例38所述顺序类似的顺序，由实施例36A及(S)-(四氢呋喃-2-基)甲胺制备实施例44。1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ 1.53-1.65(m，1H)，1.83-1.94(m，2H)，1.95-2.06(m，1H)，2.83(s，3H)，3.49(dd，J＝14.5Hz，7.7 Hz，1H)，3.66-3.76(m，2H)，3.82-3.90(m，1H)，3.95及4.19(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.06-4.15(m，1H)，4.63及4.71(ABq，J＝18.9Hz，2H)，7.34(d，J＝7.91Hz，1H)，7.51(dd，J＝8.4，1.8Hz，1H)，7.68(d，J＝2.2Hz，1H)。HRMS：对于C20H22Cl2N3O2，计算值：406.1089，实验值：406.1092[M+H]+.[α]D25+10.27°(c2.2mg/mL，EtOH)。
实施例45
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(2-(2，2，2-三氟乙氧基)乙基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

使用与实施例38所述顺序类似的顺序，由实施例36A及2-(2，2，2-三氟乙氧基)乙胺制备实施例45。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 2.84(s，3H)，3.73-3.78(m，2H)，3.84(t，J＝3.84hz，2H)，3.84(t，J＝5.1Hz，2H)，3.91-4.00(m，2H)，4.19(Abq的部分，J＝14.5Hz，1H)，4.64(s，2H)，7.34(d，J＝8.4Hz，1H)，7.51(dd，J＝8.4，2.2Hz，1H)，7.68(d，J＝1.8Hz，1H)。HRMS：对于C19H19Cl2F3N3O2，计算值：448.0806，实验值：448.0798[M+H]+。
实施例46
(R)-2-((S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)丙酸，TFA盐

使用与实施例38所述顺序类似的顺序，由实施例36A及(R)-2-氨基丙酸叔丁酯制备实施例46，之后如实施例40中所述，TFA-介导裂解叔丁酯。1HNMR(400 MHz，CD3OD)可能的旋转异构体；主要旋转异构体的数据：δ1.60(d，J＝7.5Hz，3H)，2.85(s，3H)，3.95及4.21(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.56-4.68(m，2H)，4.90(q，J＝7.5Hz，1H)，7.35(d，J＝8.4Hz，1H)，7.51(dd，J＝8.4，2.2Hz，1H)，7.68(d，J＝2.2Hz，1H)。[M+H]+＝394.23。
实施例47
(R)-2-((S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)-N，N-二乙基丙酰胺，TFA盐

使用与实施例40所述顺序类似的3步骤顺序，由实施例46及Et2NH制备实施例47。1H NMR(400MHz，CD3OD)可能的旋转异构体；主要旋转异构体的数据：δ1.09(t，J＝7.3Hz，3H)，1.20(t，J＝7.0Hz，3H)，1.52(d，J＝7.0Hz，3H)，2.84(s，3H)，3.18-3.28(m，4H)，3.93及4.20(ABq，J＝14.5 Hz，2H)，4.67及4.80(ABq，J＝18.0Hz，2H)，5.24(q，J＝7.0Hz，1H)，7.33(d，J＝8.4Hz，1H)，7.52(dd，J＝8.4，2.2Hz，1H)，7.69(d，J＝2.2Hz，1H)。HRMS：对于C22H27Cl2N4O2，计算值：449.1511，实验值：449.1524[M+H]+。
实施例48
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-((1-甲基-1H-吡唑-3-基)甲基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

使用与实施例38所述顺序类似的顺序，由实施例36A及(1-甲基-1H-吡唑-3-基)甲胺制备实施例48。1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ 2.82(s，3H)，3.34(s，2H)，3.85(s，3H)，3.95及4.19(ABq，J＝14.1Hz，2H)，4.66及4.72(ABq，J＝15.2Hz，2H)，6.18(d，J＝2.2Hz，1H)，7.35(d，J＝8.4Hz，1H)，7.48-7.57(m，1H)，7.70(d，J＝2.2Hz，1H)。HRMS：对于C20H20Cl2N5O2，计算值：416.1045，实验值：416.1046[M+H]+。
实施例49
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-((1-甲基-1H-吡唑-3-基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

使用与实施例38所述顺序类似的顺序，由实施例36A及1-甲基-1H-吡唑-3-胺制备实施例49。1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ2.86(s，3H)，3.86(s，3H)，3.97及4.20(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.98(br s，2H)，6.65(d，J＝2.2Hz，IH)，7.36(d，J＝8.4Hz，IH)，7.52(d，J＝2.6Hz，1H)，7.55(dd，J＝8.4，2.2Hz，1H)，7.73(d，J＝1.8Hz，1H)。HRMS：对于C19H18Cl2N5O，计算值：402.0888，实验值：402.0891[M+H]+。
实施例50
(S)-3-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)-N，N-二甲基乙酰胺，TFA盐

程序A：
实施例50A：6-(2-叔丁氧基-3-酮基乙基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-羧酸苄酯

将6-(氯甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基吡啶-3，5-二羧酸3-苄酯5-乙酯(10.59g，21.43mmol)、甘氨酸叔丁酯盐酸盐(8.26g，49.29mmol)及三乙胺(8.94mL，64.29mmol)于N，N-二甲基乙酰胺(200mL)中的混合物加热至100℃历时2h，且接着冷却至环境温度。将所产生的混合物分在EtOAc与H2O之间分溶，且进一步以EtOAc(2X)萃取水层。将经合并的有机萃取物以H2O及盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，并在减压下蒸发。通过急骤层析(330g管柱，0至100％EtOAc/己烷)纯化残余物得到亮黄色固体状的实施例50A(9.34g，77.2％产率)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ 1.44(s，9H)，2.74(s，3H)，4.13及4.29(ABq，J＝17.6Hz，2H)，4.56(s，2H)，5.05及5.07(ABq，J＝11.8，2H)，7.00(d，J＝8.3Hz，1H)，7.06-7.16(m，2H)，7.21-7.40(m，5 H)。[M+H]+＝541.2。
实施例50B：6-(2-叔丁氧基-3-酮基乙基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-羧酸

在环境温度下在氢(气囊)存在下将实施例50A(9.33g，17.23mmol)及10％碳载钯(1.36g)于EtOAc(150mL)中的混合物搅拌2h。将反应混合物经硅藻土垫过滤，且以MeOH及CH2Cl2洗涤。将滤出液在减压下蒸发，得到暗黄色固体状的粗实施例50B(8.13g，100％产率)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ1.45(s，9H)，2.75(s，3H)，4.23及4.28(ABq，J＝18.0Hz，2H)，4.63及4.58(ABq，J＝18.0Hz，2H)，7.27(d，J＝8.4Hz，1H)，7.39(dd，J＝8.1，2.0Hz，1H)，7.55(d，J＝2.2Hz，1H)。[M+H]+＝451.2。
实施例50C：2-(4-(2，4-二氯苯基)-3-(羟甲基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙酸叔丁酯

在环境温度下向实施例50B(1.18g，2.5mmol)及三苯基膦树脂(5.07g，7.5mmol)于CH2Cl2(80mL)中的经搅拌混合物中逐滴添加三氯乙腈(0.75mL，7.5mmol)。在环境温度下将混合物搅拌2.5h，且另外添加三苯基膦树脂(0.33g，0.5mmol)与三氯乙腈(50μL，0.5mmol)。30min后，将混合物过滤，且在真空中将滤出液浓缩，得到亮黄色固体状的2-(3-(氯羰基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙酸叔丁酯(1.12g)，其可直接用于后续反应。
在0℃下在5min期间向以上酰基氯(0.93g，1.98mmol)于THF(30mL)的溶液中逐滴添加三-叔丁氧基氢化铝锂。在0℃下将混合物搅拌20min，以H2O(1.3mL)中止，且在真空中浓缩。通过急骤层析(40g管柱，0至100％EtOAc/己烷)纯化残余物得到白色固体状实施例50C(690.4mg，2步骤，80％)。1H NMR(500MHz，CD3OD)δ 1.45(s，9H)，2.84(s，3H)，4.20及4.26(ABq，J＝17.6，2H)，4.32及4.58(ABq，J＝12.1Hz，2H)，4.56(s，2H)，7.32(d，J＝8.3Hz，1H)，7.44(d，J＝8.3Hz，1H)，7.59(s，1H)。[M+H]+＝437.2。
实施例50C的异构体A与异构体B：(R)-2-(4-(2，4-二氯苯基)-3-(羟甲基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙酸叔丁酯及(S)-2-(4-(2，4-二氯苯基)-3-(羟甲基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙酸叔丁酯

异构体A    异构体B
通过超临界流层析法(ChiralpakAD 250×4.6mm ID；10μm；35℃；流速：2.0mL/min；移动相：CO2/IPA∶82/18；注射体积：5μL；检测器波长：220nm)分离实施例50C(5.7g)，得到白色固体状的异构体A(2.43g，RT＝5.1min，100％ee)与异构体B(2.55 g，RT＝7.1min，100％ee)。
实施例50D：(R)-2-(3-(氯甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙酸叔丁酯

在0℃向实施例50C(异构体B，763mg，1.74mmol)及Et3N(0.97mL，6.98mmol)于CH2Cl2(15mL)中的混合物中逐滴添加甲磺酰氯(0.41mL，5.24mmol)。在环境温度下将经搅拌的混合物维持隔夜，且在减压下蒸发。将残余物在EtOAc与H2O之间分溶，且进一步以EtOAc(2X)萃取水层。将经合并的有机萃取物以盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，并在真空中将其浓缩。将粗产物层析(40g管柱，0至100％EtOAc/己烷)得到白色固体状实施例50D(785.7mg，99％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ 1.45(s，9H)，2.86(s，3H)，4.14及4.29(ABq，J＝17.6，2H)，4.31(ABq的部分，J＝7.1，1H)，4.52-4.60(m，3H)，7.27(d，J＝8.3，1H)，7.39(dd，J＝8.3，2.2 Hz，1H)，7.54(d，J＝1.7，1H)。[M+H]+＝455.1。
实施例50E：(S)-2-(3-((叔丁氧基羰氨基)甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙酸(新型中间物)

在50℃下将MeOH(140mL)中的7 M NH3中的实施例50D(784mg，1.72mmol)的溶液加热50min，冷却且浓缩得到亮橙色粘性固体状的粗(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙酸叔丁酯(1.81g)。
向于CH2Cl2(8.0mL)中的以上物质中添加TFA(5.0mL)，且在环境温度下将所产生的混合物搅拌3h，并在减压下蒸发。使残余物与乙醇共蒸发数次，得到黄色固体状的粗(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙酸。
将黄色固体溶解于THF(35mL)与饱和NaHCO3水溶液(20mL)中，之后添加二-叔丁基二碳酸酯(1.28g，5.85mmol)。在环境温度下将经搅拌混合物维持2.5h，且接着以1 N HCl将pH调节至3。以EtOAc(2X)萃取水层。将经合并的有机萃取物以盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，且在减压下蒸发，得到亮黄色固体状的粗实施例50E(1.375g)，其不经进一步纯化便可用于下一步骤。[M+H]+＝480.2。
实施例50：(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)-N，N-二甲基乙酰胺，TFA盐

向实施例50E(100.9mg，0.21mmol)于THF(5.0mL)的溶液中添加苯并三唑-1-基氧基三吡咯烷基鏻六氟磷酸盐(163.9mg，0.315mmol)、N，N-二异丙基乙胺(0.15mL，0.84mmol)及2 M NHMe2/THF(0.157mL，0.315mmol)。在环境温度下将反应混合物搅拌2.5h并蒸发。将残余物在EtOAc与H2O之间分溶，且进一步以EtOAc(2X)萃取水层。将经合并的有机萃取物以H2O及盐水洗涤，以(Na2SO4)干燥，且在减压下蒸发，得到亮橙色固体状的(S)-(4-(2，4-二氯苯基)-6-(2-(二甲氨基)-2-酮基乙基)-2-甲基-5-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-基)甲基氨基甲酸叔丁酯(186.1mg)。
将以上粗产物溶解于CH2Cl2(1.5mL)中，之后添加TFA(0.8mL)。在环境温度下将反应混合物搅拌2.5h且在真空中浓缩。通过制备性HPLC(YMC S5ODS 30×100mm，12min梯度，0至80％溶剂B，40mL/min)纯化残余物，得到白色粉末状的实施例50，TFA盐(78.9mg，98.2％ee，2步骤产率均为70％)。1H NMR(500MHz，CD3OD)δ 2.83(s，3H)，2.94(s，3H)，3.07(s，3H)，3.95及4.19(ABq，J＝14.3Hz，2H)，4.39及4.51(ABq，J＝17.0Hz，2H)，7.33(d，J＝8.3Hz，1H)，7.51(d，J＝8.3Hz，1H)，7.69(s，1H)。HRMS：对于C19H21Cl2N4O2，计算值：407.1042，实验值：407.1046[M+H]+。
程序B：作为选择，可以使用实施例77所述的程序制备实施例50。
程序C：亦可通过Berger SFC在ChirapakAD-H，5μ，30×250mm管柱，使用含有0.1％二乙胺的25％EtOH/75％CO2的等度梯度分离外消旋体得到各个对映异构体，来获得实施例50。
实施例50：(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)-N，N-二甲基乙酰胺，TFA盐

实施例50(对映异构体B；移动较慢)：通过手性分析HPLC：Berger SFC分析[ChiralpakAD 4.6×250 mm；含有0.1％DEA的25％EtOH/75％CO2]所得的纯度：＞99％ee。LCMS：对于C19H20Cl2N4O2，分析计算值：406.08，实验值：407.55[M+H]+。
使用以上实施例50所述的程序A，制备以下化合物(实施例51至65)：
实施例51
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(2-(4-吗啉基哌啶-1-基)-2-酮基乙基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

1H NMR(500MHz，CD3OD)δ 1.53-1.69(m，1H)，1.71-1.83(m，1H)，2.10-2.31(m，2H)，2.71(t，J＝12.6Hz，1H)，2.85(s，3H)，3.10-3.26(m，3H)，3.44-3.56(m，3H)，3.71-3.88(m，2H)，3.96及4.21(ABq，J＝14.3Hz，2H)，4.02-4.17(m，3H)，4.35-4.69(m，5H)，7.36(d，J＝8.3Hz，1H)，7.51(d，J＝8.3Hz，1H)，7.68(s，1H)。HRMS：对于C26H32Cl2N5O3，计算值：532.1882，实验值：532.1869[M+H]+。
实施例52
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(2-吗啉基-2-酮基乙基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

1H NMR(500MHz，CD3OD)δ 2.75(s，3H)，3.45(宽单峰，4 H)，3.57(宽双峰，dd，J＝18.2，4.4Hz，4 H)，3.86及4.11(ABq，J＝14.6Hz，2H)，4.33-4.42(ABq，J＝16.8Hz，2H)，4.50(s，2H)，7.24(dd，J＝8.2，3.3Hz，1H)，7.42(dd，J＝8.2，2.2Hz，1H)，7.59(s，1H)。HRMS：对于C21H23Cl2N4O3，计算值：449.1147，实验值：449.1135[M+H]+。
实施例53
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(2-酮基-2-(4-(2-(吡咯烷-1-基)乙基)哌嗪-1-基)乙基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

1H NMR(500MHz，CD3OD)δ 2.02(宽单峰，4H)，2.75(s，3H)，2.78-3.58(m，12H)，3.69(宽单峰，4H)，3.87及4.11(ABq，J＝14.3Hz，2H)，4.38及4.45(ABq，J＝16.9Hz，2H)，4.50(s，2H)，7.26(d，J＝8.3Hz，1H)，7.42(d，J＝8.3Hz，1H)，7.59(s，1H)。HRMS：对于C27H35Cl2N6O2，计算值：545.2199，实验值：545.2201[M+H]+。
实施例54
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(2-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基)-2-酮基乙基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

1H NMR(500MHz，CD3OD)δ1.42-1.58(m，1H)，1.59-1.72(m，1H)，1.90-2.11(m，2H)，2.62(t，J＝12.9Hz，1H)，2.75(s，3H)，2.85(s，3H)，3.08(t，J＝12.9Hz，1H)，3.23-3.57(m，9 H)，3.87及4.11(ABq，J＝14.3Hz，2H)，3.98(d，J＝14.3Hz，1H)，4.27-4.58(m，5H)，7.26(d，J＝8.3Hz，1H)，7.41(d，J＝8.3Hz，1H)，7.59(s，1H)。HRMS：对于C27H35Cl2N6O2，计算值：545.2199，实验值：545.2199[M+H]+。
实施例55
(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)-N-乙基-N-二甲基乙酰胺，TFA盐

1H NMR(500MHz，CD3OD)δ1.10及1.23(t，J＝7.15，3H，旋转异构体)，2.84(s，3H)，2.92及3.05(s，3H，旋转异构体)，3.35-3.49(m，2H)，3.96及4.20(ABq，J＝14.6Hz，2H)，4.34-4.64(m，4H)，7.34(d，J＝8.3Hz，1H)，7.51(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.68(d，J＝1.7Hz，1H)。HRMS：对于C20H23Cl2N4O2，计算值：421.1198，实验值：421.1200[M+H]+。
实施例56
(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)-N-甲基-N-丙基乙酰胺，TFA盐

1H NMR(500MHz，CD3OD)δ 0.88及0.96(t，J＝7.3Hz，3H，旋转异构体)，1.56及1.68(q，J＝7.2Hz，2H，旋转异构体)，2.84(s，3H)，2.92及3.06(s，3H，旋转异构体)，3.26-3.41(m，2H)，3.96及4.20(ABq，J＝14.3Hz，2H)，4.33-4.61(m，4H)，7.34(d，J＝7.7Hz，1H)，7.51(d，J＝8.3Hz，1H)，7.68(s，1H)。HRMS：对于C21H25Cl2N4O2，计算值：435.1355，实验值：435.1368[M+H]+。
实施例57
(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)-N，N-二乙基乙酰胺，TFA盐

1H NMR(500MHz，CD3OD)δ 1.12(t，J＝7.2Hz，3H)，1.24(t，J＝7.2Hz，3H)，2.84(s，3H)，3.34-3.48(m，4 H)，3.96及4.20(ABq，J＝14.3Hz，2H)，4.40及4.52(ABq，J＝16.7Hz，2H)，4.61(s，2H)，7.34(d，J＝8.3Hz，1H)，7.51(d，J＝8.3 Hz，1H)，7.69(s，1H)。HRMS：对于C21H25Cl2N4O2，计算值：435.1355，实验值：435.1366[M+H]+。
实施例58
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(2-酮基-2-(吡咯烷-1-基)乙基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

1H NMR(500MHz，CD3OD)δ 1.83-1.95(m，2H)，1.96-2.09(m，2H)，2.84(s，3H)，3.43(t，J＝6.9Hz，2H)，3.52(t，J＝6.9Hz，2H)，3.96及4.20(ABq，J＝14.3Hz，2H)，4.33及4.44(ABq，J＝17.1Hz，2H)，4.62(s，2H)，7.34(d，J＝8.3Hz，1H)，7.51(d，J＝8.3Hz，1H)，7.69(s，1H)。HRMS：对于C21H23Cl2N4O2，计算值：433.1198，实验值：433.1194[M+H]+。
实施例59
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(2-酮基-2-(哌啶-1-基)乙基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

1H NMR(500MHz，CD3OD)δ 1.55(m，2H)，1.65(m，J＝24.2，3.9Hz，4H)，2.84(s，3H)，3.47(t，J＝5.3，2H)，3.52(t，J＝5.0，2H)，3.96及4.20(ABq，J＝14.6Hz，2H)，4.41及4.50(ABq，J＝16.8Hz，2H)，4.59(s，2H)，7.34(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.51(dd，J＝8.3，1.7Hz，1H)，7.68(s，1H)。HRMS：对于C22H25Cl2N4O2，计算值：447.1355，实验值：447.1362[M+H]+。
实施例60
(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)-N-异丙基-N-甲基乙酰胺，TFA盐

1H NMR(400MHz，溶剂)δ 1.11，1.13及1.24(旋转异构体，d，J分别等于3.5，3.5及6.6Hz，总计6 H)，2.79及2.91(s，3H，旋转异构体)，2.84(s，3H)，3.96及4.20(ABq，J＝14.50Hz，2H)，4.13及4.73(m，1H，旋转异构体)，4.33及4.55(m，2H).4.50(s，2H)，7.34(d，J＝7.91Hz，1H)，7.52(dd，J＝8.4，2.2Hz，1H)，7.69(d，J＝2.2Hz，1H)。HRMS：对于C21H25Cl2N4O2，计算值：435.1355，实验值：435.1365[M+H]+。
实施例61
(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)-N-异丙基-N-(1，3-二甲基-1H-吡唑-5-基)乙酰胺，TFA盐

1H NMR(500MHz，CD3OD)δ 2.19(s，3H)，2.85(s，3H)，3.67(s，3H)，3.97及4.21(ABq，J＝14.6Hz，2H)，4.41及4.52(ABq，J＝17.0Hz，2H)，4.67(s，2H)，6.14(s，1H)，7.35(d，J＝8.3Hz，1H)，7.51(d，J＝8.3Hz，1H)，7.69(s，1H)。HRMS：对于C22H23Cl2N6O2，计算值：473.1260，实验值：473.1269[M+H]+。
实施例62
(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)-N-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)乙酰胺，TFA盐

1H NMR(500MHz，CD3OD)δ1.34(t，J＝7.2Hz，3H)，2.85(s，3H)，3.97及4.20(ABq，J＝14.8Hz，2H)，4.05(q，J＝7.2Hz，2H)，4.43及4.53(ABq，J＝17.1Hz，2H)，4.68(s，2H)，6.24(s，1H)，7.34(d，J＝8.3Hz，1H)，7.42(s，1H)，7.52(d，J＝8.3Hz，1H)，7.70 (s，1H)。HRMS：对于C22H23Cl2N6O2，计算值：473.1260，实验值：473.1276[M+H]+。
实施例63
(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)-N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)乙酰胺，TFA盐

1H NMR(500MHz，CD3OD)δ2.85(s，3H)，3.72(s，3H)，3.96及4.20(ABq，J＝14.3Hz，2H)，4.44及4.53(ABq，J＝17.3 Hz，2H)，4.68(s，2H)，6.25(s，1H)，7.35(d，J＝8.2Hz，1H)，7.39(s，1H)，7.51(dd，J＝8.2，2.20Hz，1H)，7.70(d，J＝2.2Hz，1H)。HRMS：对于C21H21Cl2N6O2，计算值：459.1103，实验值：459.1105[M+H]+。
实施例64
(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)-N-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)乙酰胺，TFA盐

1H NMR(500MHz，CD3OD)δ 2.85(s，3H)，3.77(s，3H)，3.96及4.20(ABq，J＝14.3Hz，2H)，4.35及4.47(ABq，J＝17.1Hz，2H)，4.66(s，2H)，6.44(宽单峰，1H)，7.35(d，J＝8.3Hz，1H)，7.44(宽单峰，1H)，7.50(d，J＝8.3Hz，1H)，7.67(s，1H)。HRMS：对于C21H21Cl2N6O2，计算值：459.1103，实验值：459.1118[M+H]+。
实施例65
(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H-基)-N-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)甲基)乙酰胺，TFA盐

1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 2.74(s，3H)，3.73(s，3H)，3.86及4.10(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.11及4.23(ABq，J＝16.7Hz，2H)，4.26(s，2H)，4.52(s，2H)，6.10(d，J＝2.20Hz，1H)，7.24(d，J＝8.4Hz，1H)，7.37-7.46(m，2H)，7.59(d，J＝1.8Hz，1H)。HRMS：对于C22H23Cl2N6O2，计算值：473.1260，实验值：473.1248[M+H]+。
实施例66
2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙酸，TFA盐

将MeOH(1.25mL)中的7 M NH3中的实施例50D(外消旋体，31.3mg，0.068mmol)的溶液于微波中100℃下加热15min，冷却且在减压下蒸发。将残余物溶解于CH2Cl2(0.5mL)中，之后添加TFA(0.13mL)，且在环境温度下将所产生的混合物搅拌2.5h并在真空中浓缩。通过制备性HPLC(Phenomenex Luna 5μ C18，21.2×100mm，18min梯度，0至80％溶剂B，40mL/min)将粗产物纯化，得到白色固体状的实施例XX，TFA盐(17.2mg，51.2％产率)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 2.75(s，3H)，3.86及4.10(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.19及4.27(ABq，J＝18.0Hz，2H)，4.53(s，2H)，7.24(d，J＝8.4Hz，1H)，7.42(dd，J＝8.4，2.2Hz，1H)，7.60(d，J＝2.2Hz，1H)。[M+H]+＝380.12。
实施例67与68
(R)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙酸，TFA盐及(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙酸，TFA盐

实施例67          实施例68
实施例67A与68A：(R)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙酸叔丁酯及(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙酸叔丁酯

实施例67A    实施例68A
将MeOH(10mL)中的7 M NH3中的实施例50D(外消旋体，393.4mg，0.863mmol)的溶液于微波中100℃下加热20min，冷却且在减压下浓缩。通过手性管柱(Chiralpak，5cm×50cm，20μ)以12至25％溶剂B(溶剂A＝庚烷+0.1％DEA，溶剂B＝IPA+0.1％DEA)洗脱分离残余物，得到无色固体状的实施例2A、异构体A(84.7mg，98％ee)及异构体B(97.8mg，98％ee)。
实施例67与68：(R)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙酸，TFA盐及(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙酸，TFA盐

实施例67    实施例68
实施例67：在环境温度下将实施例67A(28 mg，0.06mmol)与TFA(0.26mL)于CH2Cl2(1mL)中的混合物搅拌3h，且在减压下蒸发。通过制备性HPLC(Phenomenex Luna 5μ，C18，21.2×100mm，18min梯度，0至80％溶剂B，40mL/min)纯化残余物，得到白色固体状的实施例67、异构体A TFA盐(21.8mg，72％产率)。1H NMR(500MHz，CD3OD)δ2.75(s，3H)，3.86及4.10(ABq，J＝14.6Hz，2H)，4.18-4.26(ABq，J＝18.2Hz，2H)，4.53(s，2H)，7.24(d，J＝8.3Hz，1H)，7.42(d，J＝8.3 Hz，1H)，7.60(s，1H)。[M+H]+＝380.2。
实施例68：在环境温度下将实施例68A(27mg，0.06mmol)与TFA(0.4mL)于CH2Cl2(2mL)中的混合物搅拌2.5h，且在减压下蒸发。通过制备性HPLC(Phenomenex Luna 5μ，C18，21.2×100mm，18min梯度，0至80％溶剂B，40mL/min)纯化残余物，得到白色固体状的实施例68、异构体B TFA盐(21.3mg，71.8％产率)。1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ 2.75(s，3H)，3.86及4.10(ABq，J＝14.30Hz，2H)，4.19-4.26(ABq，J＝18.0 Hz，2H)，4.53(s，2H)，7.24(d，J＝8.3 Hz，1H)，7.42(d，J＝8.3Hz，1H)，7.60(s，1H)。HRMS：对于C17H16Cl2N3O3，计算值：380.0569，实验值：380.0558[M+H]+。
实施例69
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(2-(5-(甲磺酰基)吲哚啉-1-基)-2-酮基乙基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

在环境温度下将实施例50E(31.4mg，0.065mmol)、EDCI(49.8mg，0.26mmol)、HOAT(13.3mg，0.097mmol)与5-(甲磺酰基)吲哚啉(16.7mg，0.084mmol)的混合物搅拌1h，且在减压下蒸发。将残余物在EtOAc与H2O之间分溶，且进一步以EtOAc萃取水层。将经合并的有机层以盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，并在真空中将其浓缩。接着将残余物溶解于CH2Cl2(1.0mL)中，之后添加TFA(0.5mL)。在环境温度下将反应混合物搅拌3h且在真空中浓缩。通过制备性HPLC(Phenomenex Luna 5μ，C18，21.2×250mm，15min梯度，30至90％溶剂B，40mL/min)纯化粗产物，得到白色粉末状的实施例69，TFA盐(3.5mg，2步骤中产率均为8％)。1H NMR(500MHz，CD3OD)δ 2.77(s，3H)，2.99(s，3H)，3.25(t，J＝8.5Hz，2H)，3.88及4.12(ABq，J＝14.3 Hz，2H)，4.18(t，J＝8.5Hz，2H)，4.44及4.55(ABq，J＝16.0Hz，2H)，4.58(s，2H)，7.26(d，J＝8.3Hz，1H)，7.43(d，J＝8.3Hz，1H)，7.60(s，1H)，7.66(d，J＝8.3Hz，1H)，7.71(s，1H)，8.13(d，J＝8.8Hz，1H)。HRMS：对于C26H25Cl2N4O4S，计算值：559.0974，实验值：559.0985[M+H]+。
使用实施例69中所述的程序，制备以下化合物(实施例70至75)：
实施例70
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-6-(2-(4-异丙基哌嗪-1-基)-2-酮基乙基)-2-甲基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

1H NMR(500MHz，CD3OD)δ 1.37(d，J＝6.6Hz，6 H)，2.84(s，3H)，2.98-3.15(m，2H)，3.19-3.35(m，1H)，3.39-3.63(m，4 H)，3.96及4.20(ABq，J＝14.6Hz，2H)，4.14-4.25(m，1H)，4.37-4.73(m，5H)，7.35(d，J＝8.3Hz，1H)，7.51(d，J＝8.3Hz，1H)，7.68(s，1H)。HRMS：对于C24H30Cl2N5O2，计算值：490.1777，实验值：490.1759[M+H]+。
实施例71
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(2-酮基-2-(4-(嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ2.75(s，3H)，3.48-3.61(m，4 H)，3.74(t，J＝5.0Hz，2H)，3.81(t，J＝4.4Hz，2H)，3.87及4.11(ABq，J＝14.8Hz，2H)，4.39及4.49(ABq，J＝17.0Hz，2H)，4.52(s，2H)，6.57(t，J＝5.0Hz，1H)，7.25(d，J＝8.3Hz，1H)，7.42(d，J＝8.3Hz，1H)，7.60(s，1H)，8.27(d，J＝5.0Hz，2H)。HRMS：对于C25H26Cl2N7O2，计算值：526.1525，实验值：526.1512[M+H]+。
实施例72
(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)-N，N-二丙基乙酰胺，TFA盐

1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 0.78(t，J＝7.5Hz，3H)，0.87(t，J＝7.5Hz，3H)，1.39-1.52(m，2H)，1.53-1.67(m，2H)，2.74(s，3H)，3.15-13.25(m，4 H)，3.86及4.10(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.31及4.44(ABq，J＝16.7Hz，2H)，4.51(s，2H)，7.24(d，J＝7.9Hz，1H)，7.42(dd，J＝8.1，1.10Hz，1H)，7.59(d，J＝1.3Hz，1H)。HRMS：对于C23H29Cl2N4O2，计算值：463.1668，实验值：463.1672[M+H]+。
实施例73
(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)-N-(四氢-2H-哌喃-4-基)乙酰胺，TFA盐

1H NMR(400MHz，CD3OD)δ1.32-1.50(m，2H)，1.65-1.81(m，2H)，2.74(s，3H)，3.36(t，J＝11.4Hz，2H)，3.71-3.93(m，4H)，4.00-4.30(m，3H)，4.52(s，2H)，7.24(d，J＝7.9Hz，1H)，7.42(dd，J＝8.1，2.0Hz，1H)，7.60(d，J＝2.2，1H)。HRMS：对于C22H25Cl2N4O3，计算值：463.1304，实验值：463.1306[M+H]+。
实施例74
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-6-(2-(4，4-二甲基唑烷-3-基)-2-酮基乙基)-2-甲基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

1H NMR(500MHz，CD3OD)δ1.35(d，J＝5.5Hz，6 H)，2.75(s，3H)，3.67(s，2H)，3.87及4.11(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.08及4.20(ABq，J＝16.8Hz，2H)，4.51(s，2H)，4.97(s，2H)，7.25(d，J＝8.3Hz，1H)，7.42(dd，J＝8.3，1.6Hz，1H)，7.59(d，J＝1.6Hz，1H)。HRMS：对于C22H25Cl2N4O3，计算值：463.1304，实验值：463.1390[M+H]+。
实施例75
(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)-N-甲基乙酰胺，TFA盐

1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 2.63(s，3H)，2.74(s，3H)，3.86及4.11(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.08及4.20(ABq，J＝16.8Hz，2H)，4.50(s，2H)，7.25(d，J＝8.3Hz，1H)，7.42(dd，J＝8.3，1.6Hz，1H)，7.59(d，J＝1.6Hz，1H)。HRMS：对于C18H19Cl2N4O2，计算值：393.0885，实验值：393.0894[M+H]+。
实施例76
(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)-N，N-二异丙基乙酰胺，TFA盐

在环境温度下向实施例50E(173.4mg，0.152mmol)及三苯基膦树脂(0.31g，0.458mmol)于CH2Cl2(4mL)中的经搅拌混合物中逐滴添加三氯乙腈(45.9μL，0.458mmol)。在环境温度下将经搅拌的混合物维持2.5h，且接着冷却至0℃，之后添加二异丙胺(64.2μL，0.458mmol)及Et3N(63.8μL，0.458mmol)。在0℃下将经搅拌的混合物维持35min，且环境温度下另外维持30min，并过滤。接着在真空中浓缩滤出液，且将残余物溶解于CH2Cl2(2.0mL)中，之后添加TFA(0.7mL)。在环境温度下将反应混合物搅拌2.5h且在真空中浓缩。通过制备性HPLC(Phenomenex Luna 5μ，21.2×250mm，14min梯度，10至90％溶剂B，40mL/min)纯化粗产物，得到白色粉末状的实施例4，TFA盐(12.4mg，14％产率)。1H NMR(500MHz，CD3OD)δ1.11-1.21(m，6H)，1.27(q，J＝6.6Hz，6 H)，2.75(s，3H)，3.42-3.52(m，1H)，3.86及4.10(ABq，J＝14.6Hz，2H)，3.89-3.98(m，1H)，4.26及4.38(ABq，J＝16.8Hz，2H)，4.49(s，2H)，7.25(d，J＝8.3Hz，1H)，7.42(d，J＝8.3Hz，1H)，7.59(s，1H)。HRMS：对于C23H29Cl2N4O2，计算值：463.1668，实验值：463.1656[M+H]+。
实施例77
(S)-2-(((S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H-基)甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯，TFA盐

实施例77A：(R)-6-(((S)-1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-基)甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-苄酯

将(S)-6-(氯甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基吡啶-3，5-二羧酸3-苄酯5-乙酯(248mg，0.503mmol)、(S)-2-(氨基甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(231.7mg，1.157mmol)及三乙胺(161μL，1.157mml)于N，N-二甲基乙酰胺(10mL)中的混合物加热至100℃历时3h，且接着冷却至环境温度。将所产生的混合物在EtOAc与H2O之间分溶，且进一步以EtOAc(2X)萃取水层。将经合并的有机萃取物以H2O及盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，并在减压下蒸发。通过急骤层析(40g管柱，0至100％EtOAc/己烷)纯化残余物，得到亮黄色固体状的实施例77A(240.4mg，78％产率)。[M+H-Boc]+＝510.2。
实施例77B：(R)-6-(((S)-1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-基)甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-羧酸

在环境温度下在氢(气囊)下将实施例77A(235.9mg，0.386mmol)及10％碳载钯(47mg)于EtOAc(8mL)中的经搅拌的混合物保持3h。将反应混合物经硅藻土垫过滤，以MeOH及CH2Cl2将其洗涤。在减压下将滤出液蒸发，得到亮黄色固体状的粗实施例77B(200.7mg，100％产率)。[M+H-Boc]+＝420.1。
实施例77C：(S)-2-(((S)-4-(2，4-二氯苯基)-3-(羟甲基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯

在环境温度下向实施例77B(200mg，0.384mmol)及三苯基膦树脂(1.04g，1.536mmol)于CH2Cl2(10mL)中的经搅拌的混合物中逐滴添加三氯乙腈(0.15mL，1.536mmol)。在环境温度下将经搅拌的混合物维持1.5h并过滤。在真空中浓缩滤出液得到粗(S)-2-(((R)-3-(氯羰基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯，其可直接用于后续反应。
在0℃下，向以上酰基氯于THF(7mL)的溶液中逐滴添加三-叔丁氧基氢化铝锂(1.15mL，1.15mmol)。在0℃下将混合物搅拌45min，以H2O(0.2mL)中止，且在真空中浓缩。通过急骤层析(12g管柱，0至100％EtOAc/己烷)纯化残余物可得到亮橙色固体状实施例77C(137.2mg，2步骤中均为70％)。[M+H-Boc]+＝406.2。
实施例77D：(S)-2-(((R)-3-(氯甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯

在0℃下向实施例77C(40mg，0.079mmol)及Et3N(44μL，0.316mmol)于CH2Cl2(1.5mL)中的混合物中逐滴添加甲磺酰氯(18.3μl，0.237mmol)。在环境温度下将经搅拌的混合物维持隔夜，且在减压下将其蒸发。将残余物在EtOAc与H2O之间分溶，且进一步以EtOAc(2X)萃取水层。将经合并的有机萃取物以盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，并在真空中浓缩。将粗产物层析(4g管柱，0至100％EtOAc/己烷)得到无色固体状实施例77D(41.2mg，99.4％)。[M+H-Boc]+＝424.1。
实施例77：(S)-2-(((S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H-基)甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯，TFA盐

将MeOH(4mL)中的7 M NH3中的实施例77D(40mg，0.076mmol)的溶液于微波中100℃下加热15min，冷却且在真空中浓缩。通过制备性HPLC(Luna5μ C18，30×100mm，10min梯度，0至100％溶剂B，40mL/min)纯化残余物，得到白色粉末状的实施例77，TFA盐(36.5mg，77.5％产率)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ1.38(s，9H)，1.69-1.98(m，4H)，2.84(s，3H)，3.25-3.39(m，2H)，3.52-3.68(m，2H)，3.95(ABq的部分，J＝14.5Hz，1H)，4.10-4.26(m，2H)，4.46-4.77(m，2H)，7.26-7.42(m，1H)，7.52(dd，J＝8.1，2.0Hz，1H)，7.69(d，J＝1.8Hz，1H)。HRMS：对于C25H31Cl2N4O3，计算值：505.1773，实验值：505.1783[M+H]+。
使用实施例77中所描述的程序制备实施例50及78：
实施例50
(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)-N，N-二甲基乙酰胺，TFA盐

实施例78
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(唑-2-基甲基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

1H NMR(500MHz，CD3OD)δ2.74(s，3H)，3.86及4.10(ABq，J＝14.3Hz，2H)，4.53及4.57(ABq，J＝19.0Hz，2H)，4.75及4.83(ABq，J＝16.5Hz，2H)，7.03(s，1H)，7.25(d，J＝8.3Hz，1H)，7.41(dd，J＝8.3，2.20Hz，1H)，7.59(d，J＝1.7Hz，1H)，7.79(s，1H)。HRMS：对于C19H17Cl2N4O2，计算值：403.0729，实验值：403.0715[M+H]+。
实施例79
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(S)-吡咯烷-2-基甲基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

在环境温度下将实施例77(28mg，0.055mmol)与TFA(0.7mL)于CH2Cl2(1.0中的混合物搅拌1h，且在减压下将其蒸发。通过制备性HPLC(Luna 5μ C18(2)，30×100mm，10min梯度，0至60％溶剂B，40mL/min)纯化残余物，得到白色固体状的实施例6，TFA盐(15.9mg，45.7％产率)。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ1.59-1.75(m，1H)，1.83-2.05(m，2H)，2.07-2.18(m，1H)，2.75(s，3H)，3.10-3.30(m，2H)，3.64-3.98(m，4 H)，4.12(ABq的部分，J＝14.1Hz，1H)，4.50及4.61(ABq，J＝18.0Hz，2H)，7.26(d，J＝8.4Hz，1H)，7.42(dd，J＝8.1，2.0Hz，1H)，7.60(d，J＝2.20Hz，1H)。HRMS：对于C20H23Cl2N4O，计算值：405.1249，实验值：405.1256[M+H]+。
实施例80
(S)-3-(氨基甲基)-6-(((S)-1-(环丙磺酰基)吡咯烷-2-基)甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

实施例80A：(S)-4-(2，4-二氯苯基)-3-(羟甲基)-2-甲基-6-((S)-吡咯烷-2-基甲基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

在环境温度下将实施例77C(84mg，0.166mmol)与TFA(0.7mL)于CH2Cl2(1.5中的混合物搅拌3h，且在减压下将其蒸发。将残余物与乙醇(3X)共蒸发，得到橙色油状的实施例80A(123.7mg)，其不经纯化便可用于下一步骤。[M+H]+＝406.2。
实施例80B：(R)-3-(氯甲基)-6-(((S)-1-(环丙磺酰基)吡咯烷-2-基)甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮

在0℃下向实施例80A(123mg，0.166mmol)及Et3N(230.9μL，1.66mmol)于CH2Cl2(2.5mL)的溶液中添加CH2Cl2(0.5mL)中的环丙磺酰氯(23.3mg，0.166mmol)。在环境温度下将经搅拌的混合物维持2.5h，之后添加甲磺酰氯(32μL，0.415mmol)。在环境温度下将所产生的混合物维持隔夜，且在减压下将其蒸发。将残余物溶解于EtOAc中，以盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，并在真空中将其浓缩。将粗产物层析(12g管柱，0至100％EtOAc/己烷)得到无色固体状的实施例80B(55.2mg，62.9％)。[M+H]+＝528.1。
实施例80：(S)-3-(氨基甲基)-6-(((S)-1-(环丙磺酰基)吡咯烷-2-基)甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

将MeOH(5mL)中的7 M NH3中的实施例80B(55mg，0.104mmol)的溶液于微波中100℃下加热15min，冷却且在真空中浓缩。通过制备性HPLC(Luna5μC18(2)，30×100mm，12min梯度，0至80％溶剂B，40mL/min)纯化残余物，得到白色粉末状的实施例80，TFA盐(44.9mg，69.2％产率)。1H NMR(500MHz，CD3OD)δ0.81-0.97(m，4H)，1.65-1.74(m，1H)，1.81-1.93(m，2H)，1.91-2.03(m，1H)，2.33-2.50(m，1H)，2.73(s，3H)，3.24-3.31(m，1H)，3.34-3.61(m，3H)，3.85(ABq的部分，J＝14.3Hz，1H)，4.06-4.18(m，2H)，4.50-4.66(m，2H)，7.24(d，J＝8.3Hz，1H)，7.42(d，J＝8.3Hz，1H)，7.59(s，1H)。HRMS：对于C23H27Cl2N4O3S，计算值：509.1181，实验值：509.1190[M+H]+。
实施例81
(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙酸甲酯，TFA盐

在ChiralcelOJ，20μ，5×50cm管柱上使用含15％EtOH-MeOH(50％)(含有0.1％二乙胺)的庚烷(含有0.1％二乙胺)等度梯度分离出外消旋实施例23，得到各个对映异构体。
实施例81(对映异构体A；移动较慢)：通过手性分析HPLC[ChiralcelOJ4.6×250mm；含20％EtOH-MeOH(1∶1；含有0.1％DEA)的庚烷(含有0.1％DEA)]所得的纯度：RT＝18.22min；＞97％ee。
实施例82
(R)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙酸甲酯，TFA盐

实施例82(对映异构体B；移动较快)：通过手性分析HPLC[ChiralcelOJ4.6×250mm；含15％EtOH-MeOH(1∶1；含有0.1％DEA)的庚烷(含有0.1％DEA)]所得的纯度：RT＝15.8min；＞97％ee。
实施例83
(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7G)-基)-乙酸，TFA盐

向实施例81(20mg，0.05mmol)于THF(0.7mL)的溶液中添加LiOH水溶液(4.5mg于0.5mL H2O中，0.107mmol)，并将所产生的混合物搅拌2h。以1N HCl水溶液将混合物酸化至pH＝4。在真空中将有机挥发物除去，且以EtOAc(5mL)萃取水相。将有机萃取物在真空中浓缩，得到粗产物，通过制备性HPLC(Phenomenex，10min梯度，15至100％B)将其纯化，得到白色粉末状的实施例83，TFA盐(7.1mg，28％)。Phenomenex LUNA C-18 4.6×50mm，0-100％历时10min，A＝90％水、10％乙腈、0.1％TFA，B＝10％水、90％乙腈、0.1％TFA)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 2.75(s，3H)，3.91及4.12(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.16及4.23(ABq，J＝16.3Hz，2H)，4.26及4.32(ABq，J＝16.0Hz，2H)，7.34(d，J＝8.3Hz，1H)，7.51(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.71(d，J＝2.2Hz，1H)。[α]D25+5.84°(c＝0.1，MeOH)；LCMS：对于C17H15Cl2N4O2，分析计算值：379.05，实验值：380.18[M+H]+。
实施例84
(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)-乙酰胺，TFA盐

实施例84A：(S)-2-(3-((叔丁氧基羰氨基)甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙酸甲酯

向实施例81(37mg，0.094mmol)于THF(3mL)中的混合物中添加饱和NaHCO3水溶液(2mL)及Boc2O(50mg，0.23mmol)。在RT下将所产生的混合物搅拌2h，以EtOAc(8mL)及H2O(2mL)稀释。将混合物另外搅拌5min。将有机层分离且在真空中蒸发，得到实施例84A。
实施例84B：(S)-(6-(2-氨基-2-酮基乙基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-基)甲基氨基甲酸叔丁酯

将密封管中的实施例84A(30mg，0.06mmol)与7N氨于MeOH(1mL)中的溶液在微波反应器中100℃下照射10min。冷却至环境温度后，在真空中将挥发物除去得到粗酰胺产物。在密封管中将该产物与7 N氨在MeOH(2mL)中混合，接着在微波反应器中100℃下另外照射10min。冷却至环境温度后，在真空中将挥发物除去得到实施例84B。
实施例84：(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙酰胺，TFA盐

向实施例84B产物于CH2Cl2(1mL)中的溶液添加TFA(0.5mL)，并将所产生的混合物搅拌1h。将溶剂除去，并通过制备性HPLC(Phenomenex，10min梯度，15至100％B)纯化残余物，得到白色粉末状的实施例84，TFA盐(12mg，39％)。Phenomenex LUNA C-18 4.6×50mm，0-100％历时10min，A＝90％水、10％甲醇、0.1％TFA，B＝10％水、90％甲醇、0.1％TFA)。[α]D25+6.3°(c＝0.1，MeOH)；通过手性分析HPLC[ChiralcelOJ 4.6×250mm，含15％EtOH-MeOH(1∶1；含有0.1％DEA)的庚烷(含有0.1％DEA)]所得的纯度：＞98％ee。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 2.84(s，3H)，4.02及4.24(ABq，J＝14.1Hz，2H)，4.24及4.33(ABq，J＝18.5Hz，2H)，4.28及4.35(ABq，J＝17.0Hz，2H)，7.45(d，J＝8.3Hz，1H)，7.59(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.78(d，J＝2.2Hz，1H)。LCMS：对于C17H16Cl2N4O2，分析计算值：378.07，实验值：379.12[M+H]+。HRMS：对于C17H18Cl2N4O2，分析计算值：379.0729，实验值：379.0732[M+H]+。
实施例85
(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)-N-甲基乙酰胺，TFA盐

实施例85A：(S)-(4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(2-(甲氨基)-2-酮基乙基)-7-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-基)甲基氨基甲酸叔丁酯

将密封管中的实施例84A(16mg，0.032mmol)、甲胺(0.4mL，40重量％于H2O水中)与MeOH(0.6mL)的混合物在微波反应器中100℃下照射20min。冷却至环境温度后，在真空中将挥发物除去得到粗酰胺产物。
实施例85：(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)-N-甲基乙酰胺，TFA盐

向实施例85A产物于CH2Cl2(1mL)的溶液中添加TFA(0.5mL)，并将所产生的混合物搅拌1h。将溶剂除去，并通过制备性HPLC(Phenomenex，10min梯度，15至100％B)纯化残余物，得到白色粉末状的实施例85，TFA盐(11mg，66％)。Phenomenex LUNA C-18 4.6×50mm，0-100％历时10min，A＝90％水、10％甲醇、0.1％TFA，B＝10％水、90％甲醇、0.1％TFA)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 2.72(s，3H)，2.84(s，3H)，4.01及4.27(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.23及4.33(ABq，J＝18.1Hz，2H)，4.27及4.31(ABq，J＝16.0Hz，2H)，7.45(d，J＝8.3Hz，1H)，7.58(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.78(d，J＝2.2Hz，1H)。[α]D25+23.8°(c＝0.1，MeOH).LCMS：对于C18H18Cl2N4O2，分析计算值：392.08，实验值：393.16[M+H]+。HRMS：对于C18H20Cl2N4O2，分析计算值：393.0885，实验值：393.0882[M+H]+。通过手性分析HPLC[ChiralcelOJ 4.6×250mm，庚烷(含有0.1％DEA)中的20％EtOH-MeOH(1∶1；含有0.1％DEA)]所得的纯度：RT＝12.16min；＞97％ee。
实施例86
(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)-N，N-二甲基乙酰胺，TFA盐

实施例86A：(S)-2-(3-((叔丁氧基羰氨基)甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙酸

向实施例84A(130mg，0.26mmol)于THF(3mL)的溶液中添加LiOH水溶液(19mg于2mL H2O中，0.45mmol)，并将所产生的混合物搅拌2h。以1 NHCl水溶液将混合物酸化至pH＝4。在真空中将有机挥发物除去，且以EtOAc(20ml)萃取水相。在真空中将有机萃取物浓缩，得到实施例86A(125mg，99％)。
实施例86B：(S)-(4-(2，4-二氯苯基)-6-(2-(二甲氨基)-2-酮基乙基)-2-甲基-7-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-基)甲基氨基甲酸叔丁酯

向实施例86A(21mg，0.044mmol)、PyBOP(34mg，0.065mmol)、二甲胺(0.1mL，2 M于THF中)于THF中的混合物中添加二异丙基乙基胺(0.03mL，0.17mmol)。在环境温度下将混合物搅拌过夜。除去溶剂，并通过制备性HPLC(Phenomenex，10min梯度，15至100％B)纯化残余物，得到白色固体状的实施例86B(17.4mg，78％)。Phenomenex LUNA C-18 4.6×50mm，0-100％历时10min，A＝90％水、10％甲醇、0.1％TFA，B＝10％水、90％甲醇、0.1％TFA)。实验值：507.29[M+H]+。
实施例86：(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)-N，N-二甲基乙酰胺，TFA盐

向实施例86B于CH2Cl2(1mL)的溶液中添加TFA(0.3mL)，并将所产生的混合物搅拌2h。将溶剂除去，并通过制备性HPLC(Phenomenex，10min梯度，15至100％B)纯化残余物，得到白色粉末状的实施例86，TFA盐(10.4mg，58％)。Phenomenex LUNA C-184.6×50mm，0-100％，历时10min，A＝90％水、10％甲醇、0.1％TFA，B＝10％水、90％甲醇、0.1％TFA)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 2.84(s，3H)，2.93(s，3H)，3.09(s，3H)，4.02及4.27(ABq，J＝14.0Hz，2H)，4.23及4.30(ABq，J＝18.0Hz，2H)，4.48及4.56(ABq，J＝17.0Hz，2H)，7.45(d，J＝8.3 Hz，1H)，7.58(dd，J＝8.3，2.2 Hz，1H)，7.78(d，J＝2.2Hz，1H)。[α]D25+12.0°(c＝0.1，MeOH)。LCMS：对于C19H20Cl2N4O2，分析计算值：406.10，实验值：407.19[M+H]+。HRMS：对于C19H21Cl2N4O2，分析计算值：407.1042，实验值：407.1031[M+H]+。
实施例87
(S)-6-(2-(4-乙酰基哌嗪-1-基)-2-酮基乙基)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-7-酮，TFA盐

除以1-乙酰基哌嗪替换在步骤86B中的二甲胺之外，使用以上实施例86所述相同的方法制备实施例87。1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ 2.12(s，1.5H)，2.13(s，1.5H)，2.84(m，3H)，3.50-3.72(m，8H)，4.02及4.27(ABq，J＝14.0Hz，2H)，4.23及4.33(ABq，J＝18.0Hz，2H)，4.52及4.63(ABq，J＝17.0Hz，2H)，7.45(d，J＝8.3Hz，1H)，7.58(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.78(d，J＝2.2Hz，1H).[α]D25+16.5°(c＝0.1，MeOH)。LCMS：对于C23H25Cl2N5O3，分析计算值：489.13，实验值：490.31[M+H]+。HRMS：对于C23H26Cl2N5O3，分析计算值：490.1413，实验值：490.1416[M+H]+。
实施例88
(S)-1-(2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙酰基)哌啶-4-甲酰胺，TFA盐

除以哌啶-4-甲酰胺替换在步骤86B中的二甲胺之外，使用以上实施例86所述的相同方法制备实施例88。1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ1.45-1.95(m，4H)，2.40-2.55(m，2H)，2.86(s，3H)，3.10-3.22(m，1H)，3.90-4.65(m，8H)，7.45(d，J＝8.3Hz，1H)，7.59(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.78(d，J＝2.2Hz，1H)。[α]D25+15.1°(c＝0.1，MeOH)。LCMS：对于C23H25Cl2N4O3，分析计算值：489.13，实验值：490.30[M+H]+。HRMS：对于C23H26Cl2N5O3，分析计算值：490.1413，实验值：490.1405[M+H]+。
实施例89
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(2-(4-(甲磺酰基)哌嗪-1-基)-2-酮基乙基)-5，6-二氢吡咯并[3，4-b]吡啶-7-酮，TFA盐

除以1-(甲磺酰基)哌嗪替换在步骤86B中的二甲胺之外，使用以上实施例86所述的相同方法制备实施例89。1H NMR(400MHz，丙酮-d6)δ 2.72(s，3H)，2.81(s，3H)，3.10-3.18(m，2H)，3.22-3.30(m，2H)，3.55-3.62(m，2H)，3.65-3.73(m，2H)，4.16(S，2H)，4.44及4.55(ABq，J＝16.7Hz，2H)，4.68及5.13(ABq，J＝15.8Hz，2H)，7.55(dd，J＝8.3，2.0Hz，1H)，7.74(d，J＝2.0Hz，1H)，7.77(d，J＝8.3Hz，1H)。[α]D25+16.3°(c＝0.1，MeOH)。LCMS：对于C22H25Cl2N5O3S，分析计算值：525.10，实验值：526.22[M+H]+。HRMS：对于C22H26Cl2N5O3S，分析计算值：526.1069，实验值：526.1093[M+H]+。
实施例90
(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)-N，N-二乙基乙酰胺，TFA盐

除以二乙胺替换在步骤86B中的二甲胺之外，使用以上实施例86所述的相同方法制备实施例90。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ 1.10(t，J＝7.0Hz，3H)，1.26(t，J＝7.0Hz，3H)，2.84(s，3H)，3.38(q，J＝7.0Hz，2H)，3.43(q，J＝7.0Hz，2H)，4.06及4.26(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.24及4.31(ABq，J＝18.0Hz，2H)，4.47及4.58(ABq，J＝17.0Hz，2H)，7.45(dd，J＝8.3，2.0Hz，1H)，7.59(d，J＝2.0Hz，1H)，7.79(d，J＝8.3Hz，1H)。[α]D25+19.4°(c＝0.1，MeOH)。LCMS：对于C21H25Cl2N4O2，分析计算值：434.13，实验值：435.25[M+H]+。HRMS：对于C21H25Cl2N4O2，分析计算值：435.1355，实验值：435.1341[M+H]+。
实施例91
(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)-N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)乙酰胺，TFA盐

除以3-氨基-2-甲基吡唑替换在步骤86B中的二甲胺之外使用以上实施例86所述的相同方法制备实施例91。1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ 2.85(s，3H)，3.76(s，3H)，4.06及4.26(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.28及4.40(ABq，J＝18.0Hz，2H)，4.42及4.51(ABq，J＝17.1Hz，2H)，6.39(d，J＝2.2Hz，1H)，7.41(d，J＝2.2Hz，1H)，7.46(dd，J＝8.3，2.0Hz，1H)，7.56(d，J＝2.0Hz，1H)，7.76(d，J＝8.3Hz，1H)。[α]D25+31.9°(c＝0.1，MeOH)。LCMS：对于C21H16Cl2N6O2，分析计算值：458.10，实验值：459.25[M+H]+。HRMS：对于C21H17Cl2N6O2，分析计算值：459.1103，实验值：459.1113[M+H]+。
实施例92
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(2-酮基-2-(吡咯烷-1-基)乙基)-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-(6H)-酮，TFA盐

除以吡咯烷替换在步骤86B中的二甲胺之外，使用以上实施例86所述的相同方法制备实施例92。1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ1.80-2.05(m，4H)，2.84(s，3H)，3.35-3.58(m，4H)，4.01及4.24(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.28及4.34(ABq，J＝17.5Hz，2H)，4.40及4.49(ABq，J＝17.0Hz，2H)，7.45(d，J＝2.2Hz，1H)，7.58(dd，J＝8.3，2.0Hz，1H)，7.78(d，J＝8.3Hz，1H)。[α]D25+24.1°(c＝0.1，MeOH)。LCMS：对于C21H23Cl2N4O2，分析计算值：432.11，实验值：433.22[M+H]+。HRMS：对于C21H24Cl2N4O2，分析计算值：433.1198，实验值：433.1204[M+H]+。
实施例93
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(2-吗啉基-2-酮基乙基)-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-7(6H)-酮，TFA盐

除以吗啉替换在步骤86B中的二甲胺之外，使用以上实施例86所述的相同方法制备实施例93。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 2.84(s，3H)，3.50-3.73(m，8H)，4.01及4.24(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.22及4.30(ABq，J＝17.6Hz，2H)，4.50及4.58(ABq，J＝17.2Hz，2H)，7.44(d，J＝2.2Hz，1H)，7.60(dd，J＝8.3，2.0Hz，1H)，7.79(d，J＝8.3Hz，1H)。[α]D25+24.3°(c＝0.1，MeOH)。LCMS：对于C21H23Cl2N4O2，分析计算值：448.11，实验值：449.23[M+H]+。HRMS：对于C21H23Cl2N4O2，分析计算值：449.1147，实验值：449.1144[M+H]+。
实施例94
(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)-N-(吡啶-3-基甲基)乙酰胺，TFA盐

除以3-(氨基甲基)吡啶替换在步骤86B中的二甲胺之外，使用以上实施例86所述的相同方法制备实施例94。1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ 2.84(s，3H)，4.01及4.23(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.27及4.37(ABq，J＝18.0Hz，2H)，4.36及4.40(ABq，J＝17.0Hz，2H)，4.55(m，2H)，7.44(d，J＝2.2 Hz，1H)，7.61(dd，J＝8.3，2.0Hz，1H)，7.79(d，J＝8.3Hz，1H)，7.86(dd，J＝7.9，5.8 Hz，1H)，8.30-8.37(m，1H)，8.64-8.68(m，1H)，8.70-8.73(m，1H)。[α]D25+16.3°(c＝0.1，MeOH)。LCMS：对于C23H21Cl2N5O2，分析计算值：469.11，实验值：470.26[M+H]+。
实施例95
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-酮基乙基)-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-7(6H)-酮，TFA盐

除以1-甲基哌嗪替换在步骤86B中的二甲胺之外，使用以上实施例86所述的相同方法制备实施例95。1H NMR(400 MHz，丙酮-d6)δ 2.78(s，3H)，2.96(s，3H)，3.02-3.90(m，8H)，4.10-4.80(m，4H)4.82及5.24(ABq，J＝15.8Hz，2H)，7.59(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.70(d，J＝8.3Hz，1H)，7.76(d，J＝2.2Hz，1H)。LCMS：对于C23H25Cl2N4O2，分析计算值：461.14，实验值：462.24[M+H]+。
实施例96
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-6-(2-(4-乙基哌嗪-1-基)-2-酮基乙基)-2-甲基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-7(6H)-酮，TFA盐

除以1-乙基哌嗪替换在步骤86B中的二甲胺之外，使用以上实施例86所述的相同方法制备实施例96。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 1.36(t，J＝7.1Hz，3H)，2.85(s，3H)，3.24(q，J＝7.1Hz，2H)，3.00-3.55(m，8H)，4.02及4.23(ABq，J＝14.5 Hz，2H)，4.21及4.30(ABq，J＝18.0Hz，2H)，4.40-4.75(m，2H)，7.45(d，J＝8.3Hz，1H)，7.59(dd，J＝8.3，2.0Hz，1H)，7.79(d，J＝2.0Hz，1H)。LCMS：对于C23H27Cl2N5O2，分析计算值：475.15，实验值：476.27[M+H]+。
实施例97
(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-7-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)-N-甲基-N-(1-甲基哌啶-4-基)乙酰胺，TFA盐

除在步骤97B中以1-甲基-4-(甲氨基)哌啶替换二甲胺之外，使用以上实施例86所述的相同方法制备实施例97。1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ1.70-2.20(m，3H)，2.75-3.00(m，9H)，3.05-3.20(m，2H)，3.50-3.70(m，2H)，3.90-4.70(m，8H)，7.45(d，J＝8.3Hz，1H)，7.59(dd，J＝8.3，2.0Hz，1H)，7.79(d，J＝2.0Hz，1H)，[α]D25+16.3°(c＝0.1，MeOH)。LCMS：对于C24H29Cl2N5O2，分析计算值：489.17，实验值：490.29[M+H]+。
实施例98
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-6-(4-甲氧基苄基)-2-甲基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-7(6H)-酮，TFA盐

实施例98A：(R)-4-(2，4-二氯苯基)-6-(4-甲氧基苄基)-2-甲基-7-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-羧酸乙酯

通过手性SFC分离(HPLC：ChiralpackAD 4.6×250mm；20％IPA/80％CO2)获得。实施例98A为较快洗脱的对映异构体。
实施例98：(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-6-(4-甲氧基苄基)-2-甲基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-7(6H)-酮，TFA盐

使用与用于实施例5的程序类似的程序由实施例98A制备实施例98。[α]d25+6.64°(c＝0.1，MeOH)；通过手性分析HPLC[ChiralcelOJ 4.6×250mm；于庚烷中的20％EtOH-MeOH(1∶1)]所得的纯度：91％ee。LCMS：对于C23H21Cl2N3O2，分析计算值：441.10，实验值：442.34[M+H]+。
实施例99
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(((S)-四氢呋喃-2-基)甲基)-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-7(6H)-酮，TFA盐

除在步骤5A中使用(S)-(+)-四氢糠胺而非苄胺外，使用实施例5所述的相同方法制备实施例99。在ChiralcelOJ，20μ，5×50cm管柱上使用含5％至15％EtOH-MeOH(50％)的庚烷(含有0.1％二乙胺)等度梯度分离所获得的非对映异构体混合物，得到各个非对映异构体。
实施例99(非对映异构体A；移动较快)：[α]D25+17.8°(c＝0.085，MeOH)；通过手性分析HPLC[ChiralcelOJ 4.6×250mm；含1 5％EtOH-MeOH(1∶1；含有0.1％DEA)的庚烷(含有0.1％DEA)]所得的纯度：90％ee。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 1.55-170(m，1H)，1.80-1.93(m，2H)，1.98-2.10(m，1H)，2.83(s，3H)，3.50-3.85(m，4H)，3.95-4.50(m，5H)，7.41-7.49(m，1H)，7.56-7.63(m，1H)，7.77-7.80(m，1H)。LCMS：对于C20H21Cl2N3O2，分析计算值：405.10，实验值：406.13[M+H]+。HRMS：对于C21H21Cl2N3O2，分析计算值：405.1010，实验值：406.1094[M+H]+。
实施例100
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(((S)-四氢呋喃-2-基)甲基)-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-7(6H)-酮，TFA盐

实施例100(对映异构体B；移动较慢)：[α]D25+24.75°(c＝0.0985，MeOH)；通过手性分析HPLC[ChiralcelOJ 4.6×250 mm；含15％EtOH-MeOH(1∶1；含有0.1％DEA)的庚烷(含有0.1％DEA)]所得的纯度：94％ee。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 1.55-1.68(m，1H)，1.85-1.95(m，2H)，2.00-2.10(m，1H)，2.84(s，3H)，3.50-3.85(m，4H)，4.02及4.24(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.08-4.18(m，1H)，4.32(s，2H)，7.45(d，J＝8.3Hz，1H).7.59(dd，J＝8.3，2.0Hz，1H)，7.79(d，J＝2.0Hz，1H)。LCMS：对于C20H21Cl2N3O2，分析计算值：405.10，实验值：406.11[M+H]+。HRMS：对于C21H21Cl2N3O2，分析计算值：405.1010，实验值：406.1081[M+H]+。
实施例101
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-((5-甲基异唑-3-基)甲基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

除使用(5-甲基-3-异唑基)甲胺而非3-氨基丙酸叔丁酯外，使用与以上实施例37所述的相同方法制备实施例101。1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ2.38(s，3H)，2.82(s，3H)，3.94及4.18(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.57(s，2H)，4.72及4.78(ABq，J＝15.8Hz，2H)，6.08(s，1H)，7.32(d，J＝8.3Hz，1H)，7.53(dd，J＝8.3，2.0Hz，1H)，7.71(d，J＝2.0Hz，1H)。LCMS：对于C20H18Cl2N4O2，分析计算值：416.08，实验值：417.15[M+H]+。HRMS：对于C20H18Cl2N4O2，分析计算值：416.0807，实验值：417.0869[M+H]+。
实施例102
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-6-((1，5-二甲基-1H-吡唑-3-基)甲基)-2-甲基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

除使用1，5-二甲基-1H-吡唑-3-基甲基胺而非3-氨基丙酸叔丁酯之外，使用与以上实施例37所述的相同方法制备实施例102。1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ 2.23(s，3H)，2.81(s，3H)，3.72(s，3H)，3.93及4.17(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.45(s，2H)，4.58及4.64(ABq，J＝15.0Hz，2H)，5.97(s，1H)，7.33(d，J＝8.3Hz，1H)，7.51(dd，J＝8.3，2.0Hz，1H)，7.68(d，J＝2.0Hz，1H)。LCMS：对于C21H21Cl2N5O，分析计算值：429.11，实验值：430.21[M+H]+。HRMS：对于C21H21Cl2N5O，分析计算：429.1123，实验值：430.1220[M+H]+。
实施例103
(S)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-6-((1-乙基-1H-吡唑-5-基)甲基)-2-甲基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

除使用(1-乙基-1H-吡唑-5-基)甲基胺而非3-氨基丙酸叔丁酯外，使用与以上实施例37所述的相同方法制备实施例103。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ1.22(t，J＝8.3Hz，3H)，2.81(s，3H)，3.95及4.18(ABq，J＝14.5Hz，2H)，4.16(q，J＝8.3Hz，2H)，4.42及4.48(ABq，J＝15.0Hz，2H)，4.78及4.88(ABqJ＝15.8Hz，2H)，6.33(d，J＝1.7Hz，1H)，7.32(d，J＝8.3Hz，1H)，7.45(d，J＝1.7Hz，1H)，7.53(dd，J＝8.3，2.0Hz，1H)，7.71(d，J＝2.0Hz，1H)。LCMS：对于C21H21Cl2N5O，分析计算值：429.11，实验值：430.12[M+H]+。HRMS：对于C21H21Cl2N5O，分析计算：429.1123，实验值：430.1212[M+H]+。
实施例104
(S)-(6-(2-氨基-2-酮基乙基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-基)甲基氨基甲酸叔丁酯

向实施例50E(70mg，0.146mmol)、HOBT.H2O(29.6mg，0.218mmol)、氯化铵(15.6mg，0.292mmol)于DMF(0.5mL)中的混合物中添加EDCI(42mg，0.218mmol)、二异丙基乙胺(0.101mL，0.58mmol)。在环境温度下将混合物搅拌过夜，接着以EtOAc(10mL)及H2O(2.5mL)稀释。将有机层分离且在真空中蒸发，得到产物粗实施例104。
实施例105
(S)-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)-乙酰胺，TFA盐

向实施例104产物于CH2Cl2(1mL)的溶液中添加TFA(0.5mL)，并将所产生的混合物搅拌3h。将溶剂除去，并通过制备性HPLC(Phenomenex Axia，8min梯度，0至100％B)纯化残余物，得到白色粉末状的实施例105，TFA盐(8.6mg，12％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 2.76(s，3H)，3.88及4.12(ABq，J＝15.0Hz，2H)，4.13及4.24(ABq，J＝17.2Hz，2H)，4.54(s，2H)，7.26(d，J＝8.3Hz，1H)，7.45(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.62(d，J＝2.2Hz，1H)。LCMS：对于C17H16Cl2N4O2，分析计算值：378.06，实验值：379.00[M+H]+，HRMS：对于C17H16Cl2N4O2，分析计算值：378.0650，实验值：379.0739[M+H]+。
实施例106
3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(四氢-2H-哌喃-4-基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

实施例106A：4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-6-(四氢-2H-哌喃-4-基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-羧酸苄酯

向实施例2D(0.38g，0.76mmol)于10mL无水乙醇的溶液中添加4-氨基四氢哌喃(0.18g，1.8mmol)。在微波中150℃下将反应物在密封小瓶内加热30min。将反应物以乙酸乙酯稀释，以1 N HCl、饱和NaHCO3水溶液及盐水洗涤，干燥(MgSO4)且浓缩成泡沫体。通过急骤层析(以2∶1 EtOAc/己烷洗脱)纯化残余物，得到230mg(60％)白色固体状实施例106A。LRMS(ESI)：511.2/513.2[M+H]+。
实施例106B：4-(2，4-二氯苯基)-3-(羟甲基)-2-甲基-6-(四氢-2H-哌喃-4-基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮

在环境温度下，在H2(1大气压，通过气囊维持)下将实施例106A(230mg，0.45mmol)与10％Pd/C(100mg)于20mL乙酸乙酯中的混合物搅拌8h。将混合物经由硅藻土垫过滤且浓缩，得到可直接使用的羧酸。向此酸(130mg，0.31mmol)于6mL THF的溶液中添加氯甲酸乙酯(45μL，0.47mmol)及三乙胺(110μL，0.77mmol)，且在环境温度下将混合物搅拌1h。将混合物过滤以除去不溶物，且接着添加于最少量水中的硼氢化钠(18mg，0.47mmol)。在环境温度下将混合物搅拌18h。以1 N HCl中止反应，以乙酸乙酯萃取，且将有机物以盐水洗涤，干燥(MgSO4)并浓缩。通过急骤层析(以10％MeOH/EtOAc洗脱)纯化残余物，得到40mg(32％)油状实施例106B。LRMS(ESI)：407.2/409.2[M+H]+。
实施例106：3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(四氢-2H-哌喃-4-基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮盐酸盐

向实施例106B(33mg，0.08mmol)于2mL CH2Cl2的溶液中添加三乙胺(33μL，0.24mmol)与甲磺酰氯(19μL，0.24mmol)。在环境温度下将混合物搅拌18h。将混合物在密封小瓶内加热2h，以使反应完全进行至氯化物阶段。将混合物以乙酸乙酯稀释，以1 N HCl及盐水洗涤，干燥(MgSO4)且浓缩，得到可直接使用的氯化物。向2mL甲醇中的此氯化物(25mg，0.06mmol)中添加氨(6mL甲醇中的2 M NH3，12mmol)，且将混合物在微波中100℃下加热15min。以饱和NaHCO3水溶液稀释混合物，且以CH2Cl2将其萃取两次。将有机物干燥(Na2SO4)且浓缩。以乙醇/醚处理残余物，且接着添加HCl(33μL于二烷中的4 N HCl，0.14mmol)。将所产生的浆液浓缩至干，且用醚将固体研磨(triturate)两次并在真空中将其干燥。将固体以蒸馏水处理，过滤，且隔夜冻干，得到10mg(50％)白色粉末状的实施例106。1H NMR(DMSO-D6)：δ8.31(宽单峰，3H)，7.79(d，1H，J＝1.7Hz)，7.56(dd，1H，J＝8.2，2.2Hz)，7.47(d，1H，J＝8.2Hz)，4.54(ABq，2H)，4.15-4.05(m，2H)，3.95-3.88(m，2H)，3.62-3.55(m，1H)，3.40-3.30(m，2H)，2.79(s，3H)，1.82-1.72(m，2H)，1.65-1.57(m，2H)。LRMS(ESI)：406.2/408.2[M+H]+。
实施例107
3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(四氢-2H-哌喃-4-基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮盐酸盐

实施例107A：2-(氯甲基)-5-氰基-4-(2，4-二氯苯基)-6-甲基烟碱酸乙酯(新型中间物)

向2，4-二氯苯甲醛(3.1g，17.8mmol)于30mL异丙醇的溶液中添加4-氯乙酰乙酸乙酯(3.22g，19.6mmol)、苄胺(100μL，0.89mmol)及乙酸(76μL，1.36mmol)。在环境温度下将混合物搅拌2天。接着添加3-氨基巴豆腈(1.61g，19.6mmol)，且在环境温度下将混合物搅拌24h。混合物变为稠浆液。另外以15mL异丙醇稀释混合物，且接着添加10mL 12 N HCl。在环境温度下将反应物搅拌3h，直至混合物均匀。将反应物以H2O稀释，并以乙酸乙酯萃取。将有机物以饱和NaHCO3水溶液及盐水洗涤，干燥(MgSO4)，经硅胶垫过滤，且浓缩，得到可直接使用的二氢吡啶。以60mL冰乙酸处理残余物(6.5g，17.8mmol)，且接着添加25mL 70％HNO3。在环境温度下将混合物搅拌4h。将混合物小心倒入H2O中，且以乙酸乙酯萃取两次。将有机物以饱和NaHCO3水溶液及盐水洗涤，干燥(MgSO4)并浓缩。通过急骤层析(以6∶1己烷/EtOAc洗脱)纯化残余物，得到油状实施例107A(2.2g，32％)，其经静置可缓慢固化。LRMS(ESI)：383.1/385.1[M+H]+。
实施例107B：4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-6-(四氢-2H-哌喃-4-基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-腈

向实施例107A(290mg，0.76mmol)于8mL无水乙醇的溶液中添加4-氨基四氢哌喃(168mg，1.66mmol)。在微波中150℃下将反应物在密封小瓶内加热30min。将反应物以乙酸乙酯稀释，以1 N HCl、饱和NaHCO3水溶液及盐水洗涤，干燥(MgSO4)，经硅胶垫过滤，且浓缩以提供270mg(88％)白色固体状的实施例107B，其足够纯净可不经纯化而使用。LRMS(ESI)：402.2/404.2[M+H]+。
实施例107C：将4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-6-(四氢-2H-哌喃-4-基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-腈手性分离成单独的阻转异构体

通过手性HPLC(Chiralcel AD管柱，20μ，5×50cm管柱，以30％i-PrOH/庚烷洗脱)分离0.40g外消旋实施例107B的试样以提供两种单独的阻转异构体。
实施例107C-1(阻转异构体1；移动较快)：165mg，通过手性分析HPLC[Chiralcel AD 4.6×250mm；30％i-PrOH/庚烷；停留时间6.8min]所得的纯度：＞99％ee。
实施例107C-2(阻转异构体2；移动较慢)：160mg，通过手性分析HPLC[Chiralcel AD 4.6×250mm；30％i-PrOH/庚烷；停留时间14.8min]所得的纯度：＞99％ee。
实施例107：3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(四氢-2H-哌喃-4-基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮盐酸盐

向配有螺旋盖的厚壁试管内的10mL THF中的实施例107C-1(100mg，0.25mmol)的溶液中添加湿RaNi(约300mg，2400级(于水中)，增湿)，之后添加肼(117μL，3.7mmol)。将试管紧紧盖住。观察到气体生成。在环境温度下将混合物搅拌4h。将混合物经硅藻土垫过滤且在真空中浓缩。通过反相制备性HPLC(以溶剂梯度0％MeOH/H2O+0.1％TFA至100％MeOH+0.1％TFA洗脱)纯化残余物。合并净洗脱级分，以饱和NaHCO3游离碱化(free-base)，且以CH2Cl2萃取两次。将经合并的有机物干燥(Na2SO4)且浓缩。以8∶1 Et2O/EtOH处理残余物，且接着添加二烷(50μL)中的4 NHCl。将所产生的白色沉淀物过滤，以醚洗涤且在真空中干燥。将固体溶解于1mL水中，过滤，且冻干，得到白色固体状的实施例107的标题化合物(25mg，23％)。1H NMR(DMSO-D6)：δ 8.35(宽单峰，3H)，7.78(d，1H，J＝1.7Hz)，7.56(dd，1H，J＝8.2，2.2Hz)，7.49(d，1H，J＝8.2Hz)，4.54(ABq，2H)，4.1 5-4.05(m，2H)，3.95-3.88(m，2H)，3.60-3.54(m，1H)，3.40-3.30(m，2H)，2.79(s，3H)，1.82-1.72(m，2H)，1.65-1.57(m，2H)。LRMS(ESI)：406.2/408.2[M+H]+。
实施例108
3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(四氢-2H-哌喃-4-基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮盐酸盐

遵循实施例107中所述程序，将实施例107C-2(阻转异构体2，68mg，0.17mmol)转化为白色固体状的实施例108的标题化合物(30mg，40％)。1HNMR(DMSO-D6)：δ 8.31(宽单峰，3H)，7.79(d，1H，J＝1.7Hz)，7.56(dd，1H，J＝8.2，2.2Hz)，7.49(d，1H，J＝8.2Hz)，4.54(ABq，2H)，4.1 5-4.05(m，2H)，3.95-3.88(m，2H)，3.60-3.54(m，1H)，3.40-3.30(m，2H)，2.79(s，3H)，1.82-1.72(m，2H)，1.65-1.57(m，2H)。LRMS(ESI)：406.2/408.2[M+H]+。
实施例109
3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(四氢-1，1-二酮基-2H-硫哌喃-4-基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮盐酸盐

实施例109A：4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-6-(四氢-2H-硫哌喃-4-基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-羧酸苄酯

向实施例2D(0.63g，1.28mmol)于10mL无水乙醇的溶液中添加4-氨基四氢硫哌喃(0.5g，4.3mmol)。在微波中150℃下将反应物在密封小瓶内加热30min。将反应物以乙酸乙酯稀释，以1 N HCl、饱和NaHCO3水溶液及盐水洗涤，干燥(MgSO4)且浓缩成泡沫体。通过急骤层析(以2∶1 EtOAc/己烷洗脱)纯化残余物，得到375mg(56％)白色固体状实施例109A。LRMS(ESI)：527.2/529.2[M+H]+。
实施例109B：4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-6-(四氢-1，1-二酮基-2H-哌喃-4-基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-羧酸苄酯

向实施例109A(0.20g，0.38mmol)于10mL二氯甲烷的溶液中添加间氯过苯甲酸(206mg约70％纯的m-CPBA，约0.83mmol)。在环境温度下将反应物搅拌2h。将反应物以EtOAc稀释，以饱和NaHCO3水溶液及盐水洗涤，干燥(MgSO4)，经硅胶垫过滤，且在真空中浓缩以提供210mg(98％)的实施例109B，其足够纯可不经纯化而使用。LRMS(ESI)：559.2/561.2[M+H]+。
实施例109：3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(四氢-1，1-二酮基-2H-硫哌喃-4-基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮盐酸盐

遵循实施例106中所述程序，将实施例109B(210mg，0.38mmol)转化为白色固体状的实施例109的标题化合物。1H NMR(DMSO-D6)：δ8.28(宽单峰，3H)，7.79(d，1H，J＝2.2Hz)，7.56(dd，1H，J＝8.2，1.7Hz)，7.46(d，1H，J＝8.3Hz)，4.58(ABq，2H)，4.3 1-4.23(m，1H)，4.12-4.05(m，1H)，3.60-3.54(m，1H)，3.40-3.30(m，2H)，3.12-3.07(m，2H)，2.78(s，3H)，2.30-2.20(m，2H)，2.05-1.96(m，2H)。LRMS(ESI)：454.2/456.2[M+H]+。
实施例110
6-(2-氨基乙基)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮盐酸盐

实施例110A：6-(2-叔丁氧基羰氨基)乙基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-羧酸苄酯

将实施例2D(2.56g，5.21mmol)、叔丁基-N-(2-氨基乙基)氨基甲酸酯(0.92g，5.73mmol)及三乙胺(1.08mL，7.82mmol)于乙腈(150mL)中的混合物在密封小瓶中在110℃下加热3h。将溶剂蒸发，且通过急骤层析(以0至100％EtOAc/己烷洗脱)纯化残余物，得到2.45g(83％)白色固体状实施例110A。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ1.34(s，9H)，2.73(s，3H)，3.36(m 2H)，3.65(m 2H)，4.51(ABq，2H)，5.09(ABq，2H)，6.98(d，1H)，7.11(m，3H)，7.28(m，4H)。LRMS(ESI)：470.2(M+H-BOC)+。
实施例110B：6-(2-叔丁氧基羰氨基)乙基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-羧酸

在环境温度下，在H2(1atm，通过气囊维持)下将实施例110A(2.45g，4.30mmol)与10％Pd/C(122mg)于120mL甲醇中的混合物搅拌2h。将混合物经硅藻土垫过滤且浓缩，得到2.08g(100％)固体状的实施例110B，其不经纯化便可用于下一反应。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ1.34(s，9H)，2.74(s，3H)，3.36(m 2H)，3.65(m 2H)，4.50(ABq，2H)，7.14(d，1H，J＝8.0Hz)，7.28(m，1H)，7.48(s，1H)。LRMS(ESI)：480.2[M+H]+。
实施例110C：2-(4-(2，4-二氯苯基)-3-(羟甲基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙基氨基甲酸叔丁酯

向实施例110B(2.04g，4.13mmol)于60mL CH2Cl2的溶液中添加DMF(5滴)与草酰氯(2M于CH2Cl2中，4.13mL，8.26mmol)。在环境温度下将混合物搅拌1h。将溶剂蒸发，且将残余物溶解于THF(60mL)中，将所产生的溶液冷却至-78℃，且添加LAH(1 M于THF中，4.1mL，4.1mmol)。搅拌15min。将反应以0.1 N HCl水溶液中止且将其萃取至EtOAc中。将经合并的有机层以水及盐水洗涤，干燥(MgSO4)且蒸发，通过急骤层析(以0-100％EtOAc/己烷洗脱)纯化残余物，得到2.45g(83％)固体状的实施例110C。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ1.36(s，9H)，2.86(s，3H)，3.39(m 2H)，3.67(m 2H)，4.46-4.58(m，4H)，7.19(d，1H，J＝8.0Hz)，7.28(dd，1H，J＝8.0，1.4Hz)，7.54(s，1H)。LRMS(ESI)：466.3[M+H]+。
实施例110D：2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙基氨基甲酸叔丁酯

向实施例110C(30mg，0.065mmol)于1.5mL二氯甲烷的溶液中添加三乙胺(26μL，0.19mmol)及甲磺酰氯(15μL，0.19mmol)。将混合物回流1h。蒸发溶剂，且通过急骤层析(以0-100％EtOAc/己烷洗脱)纯化残余物，得到氯化物中间物。将所得氯化物与7 N氨于MeOH(1mL)中的混合物于密封管中在微波反应器中120℃下照射20min。将溶剂蒸发，且通过急骤层析(以0-10％MeOH/CH2Cl2洗脱)纯化残余物，得到12mg(2步骤，59％)油状实施例110D。LRMS(ESI)：365.2(M+H-BOC)+。
实施例110：6-(2-氨基乙基)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮，TFA盐

在环境温度下将1ml于CH2Cl2中的40％TFA中的实施例110D(10mg，0.02mmol)搅拌60min。将溶剂蒸发，并通过制备性HPLC(Phenomenex，10min梯度，20至100％B)纯化残余物且隔夜冻干，得到4.9mg(38％)为TFA盐的实施例110。LRMS(ESI)：365.2[M+H]+。
实施例111
2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙基氨基甲酸乙酯，TFA盐

实施例111A与111B：将2-(4-(2，4-二氯苯基)-3-(羟甲基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙基氨基甲酸叔丁酯手性分离为单独的阻转异构体

实施例111A    实施例111B
通过手性HPLC(Chiralcel OD管柱，20μ，5×50cm管柱，以0-10％i-PrOH/庚烷洗脱)分离1.95g外消旋实施例110C的试样，得到两种单独的阻转异构体。
实施例111A(阻转异构体1；移动较快)：740mg，通过手性分析HPLC[Chiralcel OD 4.6×250mm；12％i-PrOH/庚烷；停留时间6.5min]所得的纯度：＞99％ee。
实施例111B(阻转异构体2；移动较慢)：662mg，通过手性分析HPLC[Chiralcel OD 4.6×250mm；12％i-PrOH/庚烷；停留时间11.0min]所得的纯度：＞99％ee。
实施例111：2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙基氨基甲酸乙酯TFA盐

在环境温度下将1，4-二烷中的1mL 4 M HCl中的实施例111B(58mg，0.12mmol)搅拌15min。在真空中将混合物浓缩。将残余物溶解于2ml CH2Cl2中，且将Et3N(25μL，0.18mmol)及氯甲酸乙酯(13μL，0.13mmol)添加至溶液中。在环境温度下将所产生的混合物搅拌15min。将混合物经SiO2胶垫过滤。将溶剂蒸发，且以3mL CH2Cl2中的MsCl(19μL，0.24mmol)及Et3N(50mL，0.36mmol)处理残余物。在50℃下将反应物搅拌1h并浓缩，得到粗产物，将粗产物急骤层析(硅胶，0-15％EtOAc/CH2Cl2)得到氯化物中间物。将所得氯化物与2N氨于MeOH(2mL)中的混合物于密封管中在微波反应器中100℃下照射16min。在真空中将挥发物除去，并通过制备性HPLC(Phenomenex，10min梯度，20至100％B)纯化残余物且隔夜冻干，得到12mg(3步骤18％)为TFA盐的实施例111。1H NMR(400MHz，DMSO-D6)：δ1.08(m，3H)，2.76(s，3H)，3.19(m 2H)，3.48(m 2H)，3.88(m，4H)，4.55(Abq，2H)，7.18(s，1H).7.39(d，1H，J＝4.0Hz)，7.57(d，1H，J＝4.0Hz)，7.80(s，1H)，8.12(s，2H)。LRMS(ESI)：437.2[M+H]+。
实施例112
N-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙基)乙酰胺TFA盐

除以乙酰氯替换氯甲酸乙酯之外，使用以上实施例111所述的相同方法制备实施例112。LRMS(ESI)：407.2[M+H]+。
实施例112-1
N-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙基)乙酰胺TFA盐

除以乙酰氯替换氯甲酸乙酯且以实施例111A替换实施例111B之外，使用以上实施例112所述的相同方法制备实施例112-1。LRMS(ESI)：407.2[M+H]+。
实施例113
3-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙基)唑烷-2-酮盐酸盐

在环境温度下将1，4-二烷中的1mL 4 M HCl中的实施例111B(78mg，0.17mmol)搅拌15min。在真空中将混合物浓缩。将残余物溶解于2ml甲醇中，将K2CO3(230mg，1.7mmol)及氯甲酸2-溴甲酯(46mg，0.25mmol)添加至溶液中。在环境温度下将所产生的混合物搅拌15min。将混合物经SiO2胶垫过滤。将溶剂蒸发，且以3mL CH2Cl2中的MsCl(0.13mL，1.70mmol)及Et3N(0.23mL，1.70mmol)处理残余物。在环境温度下将反应物维持12h并浓缩，得到粗产物，将粗产物急骤层析(硅胶，100％EtOAc)得到氯化物中间物。将所得氯化物与2N氨于MeOH(3mL)中的混合物于密封管中在微波反应器中100℃下照射20min。在真空中将挥发物除去。将粗产物通过急骤层析(以0-10％MeOH/CH2Cl2洗脱)纯化，以MeOH中的2 N HCl处理，且蒸发，得到10.1mg(4步骤，13％)固体状的实施例113。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 2.82(s，3H)，3.51-3.76(m 8H)，4.22(m 2H)，4.50(m，2H)，7.14(d，1H，J＝8.3Hz)，7.35(dd，1H，J＝8.3，1.7Hz)，7.54(d，2H，J＝1.3Hz)。LRMS(ESI)：435.1[M+H]+。
实施例114
3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(2-(2-酮基吡咯烷-1-基)乙基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮TFA盐

除以4-溴丁酰氯替换氯甲酸2-溴甲酯之外，使用以上实施例113所述的相同方法制备实施例114。LRMS(ESI)：433.2[M+H]+。
实施例115
N-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙基)环丙磺酰胺盐酸盐

在环境温度下将1，4-二烷中的1mL 4 M HCl中的实施例111B(70mg，0.15mmol)搅拌15min。在真空中将混合物浓缩。将残余物溶解于2ml CH2Cl2中，且将Et3N(0.2mL，1.5mmol)及环丙磺酰氯(25mg，0.18mmol)添加至溶液中。在环境温度下将所产生的混合物搅拌6h。添加MsCl(92μL，1.2mmol)。在环境温度下将反应物维持1h并浓缩，得到粗产物，将粗产物急骤层析(硅胶，100％EtOAc)得到氯化物中间物。将所得氯化物与2 N氨于MeOH(2mL)中的混合物于密封管中在微波反应器中140℃下照射30min。在真空中将挥发物除去。将粗产物通过急骤层析(以0-10％MeOH/CH2Cl2洗脱)纯化，以MeOH中的2 N HCl处理，且蒸发，得到18mg(4步骤，24％)固体状的实施例115。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 0.92(m，2H)，1.11(d，2H，J＝2.7Hz)，2.35(m 1H)，2.84(s，3H)，3.44(宽单峰，2H)，3.66-3.78(m，4H)，4.51(s，2H)7.16(d，IH，J＝8.2Hz)，7.35(dd，1H，J＝8.3，1.6Hz)，7.54(d，2H，J＝1.6Hz)。LRMS(ESI)：469.1[M+H]+。
实施例116
N-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙基)苯磺酰胺盐酸盐

除以苯磺酰氯替换环丙磺酰氯之外，使用以上实施例115所述的相同方法制备实施例116。1H NMR(400 MHz，CDCl3)：δ 2.84(s，3H)，3.24(m，2H)，3.66(m，3H)，3.76(d，1H，J＝13.8Hz)，4.34(ABq，2H)，7.15(d，1H，J＝8.3Hz)，7.40(m，3H)，7.54(m，2H)，7.79(d，2H，J＝7.1Hz)。LRMS(ESI)：505.1[M+H]+。
实施例117

在环境温度下将1，4-二烷中的1mL 4 M HCl中的实施例111B(85mg，0.18mmol)搅拌15min。在真空中将混合物浓缩。将残余物溶解于2ml THF中，将t-BuONa(86mg，0.9mmol)及3-环丙磺酰氯(39mg，0.22mmol)添加至溶液中。在环境温度下将所产生的混合物搅拌1h。将混合物经SiO2胶垫过滤。将溶剂蒸发，且以5mL CH2Cl2中的MsCl(0.08mL，1.0mmol)及Et3N(0.14mL，1.0mmol)处理残余物。在环境温度下将反应物维持3 h并浓缩，得到粗产物，将粗产物急骤层析(硅胶，100％EtOAc)得到氯化物中间物(43 mg，48％)。将所得氯化物与2 N氨于MeOH(3mL)中的混合物于密封管中在微波反应器中120℃下照射20min。在真空中将挥发物除去。将粗产物通过急骤层析(以0-10％MeOH/CH2Cl2洗脱)纯化，以MeOH中的2 N HCl处理，且蒸发，得到12 mg(30％)固体状的实施例117。1H NMR(400 MHz，CDCl3)：δ 2.27(m，2H)，2.83(s，3H)，3.02(m，2H)，3.27(m，2H)，3.35(m，2H)，3.61-3.78(m，4H)，4.53(ABq，2H)，7.14(d，1H，J＝8.3Hz)，7.36(dd，1H，J＝7.7，1.6Hz)，7.53(d，1H，J＝1.7Hz)。LRMS(ESI)：469.1[M+H]+。
实施例118
2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯

实施例118A：6-(2-叔丁氧羰基(甲基)氨基)乙基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-羧酸苄酯

除以2-氨基乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯替换2-氨基乙基氨基甲酸叔丁酯之外，使用以上实施例110A所述的相同方法制备实施例118A。LRMS(ESI)：584.3[M+H]+。
实施例118B：6-(2-叔丁氧羰基(甲基)氨基)乙基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-羧酸

除以实施例118A替换实施例110A之外，使用以上实施例110B所述的相同方法制备实施例118B。LRMS(ESI)：394.2(M+H-BOC)+。
实施例118C：2-(4-(2，4-二氯苯基)-3-(羟甲基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯

除以实施例118B替换实施例110B之外，使用以上实施例110C所述的相同方法制备实施例118 C。LRMS(ESI)：380.2/480.2(M+H-BOC/M+H)+。
实施例118D与118E：将2-(4-(2，4-二氯苯基)-3-(羟甲基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯手性分离为单独的阻转异构体

实施例118D    实施例118E
通过手性HPLC(Chiralcel OD管柱，20μ，5×50cm管柱，以0-10％i-PrOH/庚烷洗脱)分离875mg外消旋实施例118C的试样，得到两种单独的阻转异构体。
实施例118D(阻转异构体1；移动较快)：248mg，通过手性分析HPLC[Chiralcel OD 4.6×250mm；12％i-PrOH/庚烷；停留时间11.5min]所得的纯度：＞99％ee。
实施例111E(阻转异构体2；移动较慢)：240mg，通过手性分析HPLC[Chiralcel OD 4.6×250mm；12％i-PrOH/庚烷；停留时间17.5min]所得的纯度：＞99％ee。1H NMR(400 MHz，CDCl3)：δ 1.35(s，9H)，2.85(m，6H)，3.54(m，2H)，3.69(宽单峰，2H)，4.45-4.50(m，4H)，7.17(d，1H，J＝8.3Hz)，7.36(dd，1H，J＝8.3，1.7Hz)，7.53(d，1H，J＝1.7Hz)。LRMS(ESI)：380.2/480.2[M+H]+。
实施例118：2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯

除以实施例118E替换实施例110C之外，使用以上实施例110D所述的相同方法制备实施例118。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 1.35(s，9H)，2.83(s，3H)，2.86(s，3H)，3.45(m，1H)，3.691-3.77(m，3H)，4.48(m，2H)，7.12(d，1H，J＝8.3Hz)，7.36(dd，1H，J＝8.3，2.2Hz)，7.53(d，1H，J＝2.2Hz)。LRMS(ESI)：379.2/479.2[M+H]+。
实施例119
3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(2-(甲氨基)乙基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮盐酸盐

在环境温度下将1，4-二烷中的1mL 4 M HCl中的实施例118(15.8mg，0.03mmol)搅拌15min。在真空中将混合物浓缩蒸发，得到13.2mg(98％)黄色固体状的实施例119。NMR(400MHz，DMSO-D6)：δ 2.81(s，3H)，3.15(d，2H，J＝5.5Hz)，3.56(m，1H)，3.70(m，1H)，3.79(m，1H)，4.07(m，1H)，4.61(m，5H)，7.56(s，2H)，7.77(s，1H)，8.58(s，2H)，9.05(m，1H)。LRMS(ESI)：379.2[M+H]+。
实施例120
N-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙基)-N-甲基乙磺酰胺盐酸盐

实施例120A：3-(氯甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(2-(甲氨基)乙基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮盐酸盐

向实施例118E(240mg，0.50mmol)于5mL CH2Cl2的溶液中添加Et3N(0.7mL，5mmol)与甲磺酰氯(0.39mL，5mmol)。在环境温度下将所产生的混合物搅拌过夜。在真空中将混合物浓缩。将残余物急骤层析(硅胶，100％EtOAc)，得到固体，在环境温度下将其在10ml于1，4-二烷中的4 N-HCl中搅拌30min，将反应混合物浓缩，得到186mg(86％)固体状的实施例120A，其足够纯净可不经纯化而使用。LRMS(ESI)：398.1/400.1[M+H]+。
向实施例120A(40mg，0.09mmol)于2mL CH2Cl2的溶液中添加Et3N(0.13mL，0.93mmol)与乙磺酰氯(100mg，0.93mmol)。在环境温度下将所产生的混合物搅拌过夜。将反应物浓缩，得到粗产物，将其急骤层析(硅胶，100％EtOAc)得到氯化物中间物。将所得氯化物与2 N氨于MeOH(2mL)中的混合物于密封管中在微波反应器中120℃下照射15min。在真空中将挥发物除去。将粗产物通过急骤层析(以0-10％MeOH/CH2Cl2洗脱)纯化，以MeOH中的2 N HCl处理，且蒸发，得到11mg(2步骤，24％)固体状的实施例120。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 1.25(m，3H)，2.83(s，3H)，2.90(s，3H)，2.94(m，2H)，3.61-3.80(m，4H)，4.52(s，3H)，7.14(d，1H，J＝8.3Hz)，7.36(dd，1H，J＝2.2，8.2Hz)，7.53(d，1H，J＝1.6Hz)，LRMS(ESI)：471.1[M+H]+。
实施例121
N-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙基)-N-甲基甲磺酰胺TFA盐

除以甲磺酰氯替换乙磺酰氯之外，使用以上实施例120所述的相同方法制备实施例121，且获得TFA盐而非HCl盐。1H NMR(400 MHz，DMSO-D6)：δ2.73(s，3H)，2.76(s，3H)，2.82(s，3H)，3.28(m，2H)，3.63(m，3H)，4.08(m，1H)，4.55(s，2H)，7.40(d，1H，J＝2.2Hz)，7.55(dd，1H，J＝1.7，8.3Hz)，7.79(d，1H，J＝2.0Hz)，8.2(s，2H)。LRMS(ESI)：457.2[M+H]+。
实施例122
N-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙基)-N-甲基环丙烷磺酰胺盐酸盐

除以环丙烷磺酰氯替换乙磺酰氯之外，使用以上实施例120所述的相同方法制备实施例122。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 0.93-1.26(m，4H)，2.22(m，1H)，2.83(s，3H)，2.90(s，3H)，3.48(m，2H)，3.61-3.78(，4H)，4.52(s，2H)，7.15(d，1H，J＝8.3Hz)，7.35(dd，1H，J＝8.3，1.6Hz)，7.53(d，1H，J＝1.7Hz)，LRMS(ESI)：483.1[M+H]+。
实施例123
N-2-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)乙基)-1，1，1-三氟-N-甲基甲磺酰胺盐酸盐

除以三氟乙酸酐替换乙磺酰氯之外，使用以上实施例120所述的相同方法制备实施例123。LRMS(ESI)：511.1[M+H]+。
实施例124
3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(哌啶-4-基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮TFA盐

实施例124A：6-(1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-羧酸苄酯

将实施例2D(1.60g，3.26mmol)、4-氨基-1-N-BOC-哌啶(716mg，3.58mmol)及三乙胺(0.68mL，4.89mmol)于乙腈(100mL)中的混合物在密封小瓶中在110℃下加热3h。将溶剂蒸发，且通过急骤层析(以0-100％EtOAc/己烷洗脱)纯化残余物，得到1.32g(66％)固体状实施例124A。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ1.46(s，9H)，1.60-1.88(m，5H)，2.73(s，3H)，2.75(m，2H)，4.20-4.42(m，4H)，5.10(m，2H)，7.00-7.11(m，4H)，7.30(m，4H)，LRMS(ESI)：554.2(M+H-t-Bu)+。
实施例124B：6-(1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-羧酸

在环境温度下，在H2(1atm，通过气囊维持)下将实施例124A(1.32g，2.17mmol)与10％Pd/C(66mg)于90mL甲醇中的混合物搅拌2h。将混合物经硅藻土垫过滤且浓缩，得到1.10g(98％)固体状的实施例124B，其足够纯净，可不经纯化而使用。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 1.46(s，9H)，1.63-1.81(m，4H)，2.75(m，4H)，3.46(s，2H)，4.20-4.43(m，4H)，7.16(d，1H)，7.27(d，1H)，7.46(s，1H)。LRMS(ESI)：464.1(M+H-t-Bu)+。
实施例124C：4-(4-(2，4-二氯苯基)-3-(羟甲基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

向实施例124B(1.38g，2.66mmol)于80mL CH2Cl2的溶液中添加DMF(3滴)与草酰氯(2 M于CH2Cl2中，1.4mL，2.80mmol)。在环境温度下将混合物搅拌1h。添加三乙胺(0.74mL，5.32mmol)。将溶剂蒸发，且通过急骤层析(以0-100％EtOAc/己烷洗脱)将残余物纯化，得到固体，将该固体溶解于THF(100mL)中，将所产生的溶液冷却至-78℃，且添加LAH(1 M于THF中，2.7mL，2.7mmol)。搅拌30min。将反应溶液经SiO2胶垫过滤。在真空中将挥发物除去，得到1.38g油状的粗实施例124C。LRMS(ESI)：450.2(M+H-t-Bu)+。
实施例124D与124E：将4-(4-(2，4-二氯苯基)-3-(羟甲基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯手性分离成单独的阻转异构体

实施例124D    实施例124E
通过手性HPLC(Chiralcel OD管柱，20μ，5×50cm管柱，以0-20％i-PrOH/庚烷洗脱)分离1.38g粗外消旋实施例124C的试样，得到两种单独的阻转异构体。
实施例124D(阻转异构体1；移动较快)：313mg，通过手性分析HPLC[Chiralcel OD 4.6×250mm；20％i-PrOH/庚烷；停留时间7.7min]所得的纯度：＞99％ee。
实施例124E(阻转异构体2；移动较慢)：292mg，通过手性分析HPLC[Chiralcel OD 4.6×250mm；20％i-PrOH/庚烷；停留时间11.6min]所得的纯度：＞99％ee。
实施例124：3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(哌啶-4-基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮TFA盐

向实施例124E(50mg，0.10mmol)于2mL CH2Cl2的溶液中添加Et3N(43μL，0.3mmol)与甲磺酰氯(23μL，0.3mmol)。将所产生的混合物回流1h。将反应物浓缩，得到粗产物，将粗产物急骤层析(硅胶，100％EtOAc)得到氯化物中间物。将所得氯化物与2 N氨于MeOH(2mL)中的混合物于密封管中在微波反应器中在100℃下照射15min。在真空中将挥发物除去。将残余物在2ml TFA/CH2Cl2(1∶1)中搅拌15min。将混合物浓缩，并通过制备性HPLC(Phenomenex，10min梯度，20至100％B)纯化残余物且将其隔夜冻干，得到22 mg(40％)为TFA盐的实施例124。1H NMR(400MHz，DMSO-D6)：δ1.79(m，2H)，1.91(m，2H)，2.7(3，3H)，2.95(宽单峰，2H)，3.32(d，2H)，3.59(d，1H)，4.12(m，2H)，4.45(m，2H)，7.38(d，1H)，7.49(d，1H)，7.72(s，1H).LRMS(ESI)：405.2[M+H]+。
实施例125
3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6-(1-(甲磺酰基)哌啶-4-基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮TFA盐

在环境温度下将2ml TFA/CH2Cl2(1∶1)中的实施例124E(50mg，0.10mmol)搅拌30min。在真空中将混合物浓缩。将残余物溶解于2ml CH2Cl2、Et3N(43μL，0.3mmol)及甲磺酰氯(23μL，0.3mmol)。将所产生的混合物回流1h。将反应物浓缩，得到粗产物，将粗产物急骤层析(硅胶，100％EtOAc)得到氯化物中间物。将所得氯化物与2 N氨于MeOH(2mL)中的混合物于密封管中在微波反应器中在100℃下照射15min。在真空中将挥发物除去。通过制备性HPLC(Phenomenex，10min梯度，20至100％B)纯化残余物且将其隔夜冻干，得到8mg(3步骤，13％)为TFA盐的实施例125。LRMS(ESI)：483.2[M+H]+。
实施例126
6-(1-乙酰基哌啶-4-基)-3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮TFA盐

在环境温度下将2ml TFA/CH2Cl 2(1∶1)中的实施例124E(50mg，0.10mmol)搅拌30min。在真空中将混合物浓缩。将残余物溶解于2ml CH2Cl2、Et3N(27μL，0.2mmol)及乙酰氯(8μL，0.1mmol)中。将所产生的混合物回流30min。将反应物浓缩得到粗产物，将该粗产物急骤层析(硅胶，100％EtOAc)得到中间物，将该中间物溶解于2ml CH2Cl2中，添加Et3N(43μL，0.3mmol)及甲磺酰氯(23μL，0.3mmol)。将所产生的混合物回流1h。将反应物浓缩，得到粗产物，将该粗产物急骤层析(硅胶，100％EtOAc)得到氯化物中间物。将所得氯化物与2N氨于MeOH(2mL)中的混合物于密封管中在微波反应器中在100℃下照射15min。在真空中将挥发物除去。通过制备性HPLC(Phenomenex，10min梯度，20至100％B)纯化残余物且将其隔夜冻干，得到4mg(4步骤，7％)为TFA盐的实施例126。LRMS(ESI)：447.2[M+H]+。
实施例127 
4-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)哌啶-1-羧酸乙酯TFA盐

除以氯甲酸乙酯替换乙酰氯之外，使用以上实施例126所述的相同方法制备实施例127。LRMS(ESI)：477.2[M+H]+。
实施例128
3-(氨基甲基)-6-((S)-1-(环丙基磺酰基)吡咯烷-3-基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮盐酸盐

实施例128A：6-((S)-1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-3-基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-羧酸苄酯

除以(S)-(-)-1-BOC-3-氨基吡咯烷替换4-氨基-1-N-BOC-哌啶之外，使用以上实施例124所述的相同方法制备实施例128A。LRMS(ESI)：540.2(M+H-t-Bu)+。
实施例128B：6-((S)-1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-3-基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-3-羧酸

除以实施例128A替换实施例124A之外，使用以上实施例124B所述的相同方法制备实施例128B。LRMS(ESI)：406.1/450.1(M+H-BOC/M+H-t-Bu)+。
实施例128C：4-(3-(2，4-二氯苯基)-3-(羟甲基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯

除以实施例128B替换实施例124B之外，使用类似于实施例124C的程序制备实施例128C。
实施例128D与128E：3-((S)-4-(2，4-二氯苯基)-3-(羟甲基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯

除以实施例128C替换实施例124C外，使用以上实施例124C所述的相同方法制备实施例128D与128E。急骤层析(硅胶，0-100％EtOAc)产生两种单独的阻转异构体。
实施例128D(阻转异构体1；移动较快)：158mg，通过手性分析HPLC[Chiralcel OD 4.6×250mm；15％i-PrOH/庚烷；停留时间11.5min]所得的纯度：＞99％ee。1H NMR(400 MHz，CDCl3)：δ1.45(s，9H)，1.47(m，2H)，2.10(宽单峰，1H)，2.23(宽单峰，1H)，2.86(s，3H)，3.42(m，2H)，3.61(m，2H)，4.47(m，3H)，4.58(d，1H)，4.86(m，1H)，7.17(d，1H，J＝8.0)，7.36(m，1H)，7.54(s，1H)。LRMS(ESI)：436.1[M+H]+。
实施例128E(阻转异构体2；移动较慢)：170mg，通过手性分析HPLC[Chiralcel OD 4.6×250mm；15％i-PrOH/庚烷；停留时间16.3min]所得的纯度：
实施例128：3-(氨基甲基)-6-((S)-1-(环丙基磺酰基)吡咯烷-3-基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮盐酸盐

除以实施例128D替换实施例111B之外，使用以上实施例115所述的相同方法制备实施例128。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ 1.00(m，2H)，1.20(m，2H)，2.17(s，1H)，2.35(m，2H)，2.83(s，3H)，3.47(m，2H)，3.63-3.78(m，4H)，4.51(ABq，2H)，4.96(m，IH)，7.15(d，1H，J＝8.3)，7.36(dd，H，J＝8.2，2.2Hz)，7.54(d，1H，J＝1.7Hz)。LRMS(ESI)：495.0[M+H]+。
实施例129
3-((S)-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)吡咯烷-1-基磺酰基)苯甲腈盐酸盐

除以实施例128D替换实施例111B且以4-氰基苯磺酰氯替换环丙烷磺酰氯之外，使用以上实施例115所述的相同方法制备实施例129。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ2.02-2.20(m，2H)，2.84(s，3H)，3.20(m，1H)，3.45(m，2H)，3.63(m，2H)，3.74(m，1H)，4.31(d，2H，J＝4.9Hz)，4.75(m，1H)，7.10(d，1H，J＝7.7Hz)，7.35(dd，H，J＝7.7，1.7Hz)，7.55(d，1H，J＝1.4Hz)，7.82(d，2H，J＝8.2Hz)，7.93(d，2H，J＝8.2Hz)，LRMS(ESI)：556.0/558.0[M+H]+。
实施例130
3-((S)-(3-(氨基甲基)-4-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5-酮基-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6(7H)-基)吡咯烷-1-羧酸乙酯盐酸盐

除以实施例128D替换实施例111B且以氯甲酸乙酯替换环丙烷磺酰氯之外，使用以上实施例115所述的相同方法制备实施例130。LRMS(ESI)：463.0[M+H]+。