改善皮沟密度的化妆品用组合物及化妆品.pdf

本发明的课题是提供一种改善皮沟密度的化妆品用组合物及化妆品。本发明的解决方案是本发明涉及一种化妆品用组合物及含有该化妆品用组合物的化妆品，其中该化妆品用组合物含有核蛋白和/或DNA或RNA用酶或水解处理后的分解产物；或含有从该分解产物中分离出的脱氧寡核苷酸、脱氧单核苷酸、寡肽、寡核苷酸、单核苷酸；或含有选自上述分解产物或化合物中至少2种混合物作为有效成分。由于脱氧寡核苷酸等有效成分分子量较小，经皮吸收较易，并且这些有效成分经皮吸收的时候能促进皮肤细胞再生或细胞活化，因此用于面部表皮时具有改善皮沟密度(皮肤纹理)、改善皮肤的水分保持能和皮脂量的平衡、进一步达到防止皱纹的效果。

权利要求书
1、  一种改善皮沟密度的化妆品用组合物，其含有将核蛋白和/或DNA通过酶分解处理或水解处理低分子化后得到的分解产物，所述分解产物中分子量为1000-3000的级分的含量为20-50％，
或所述组合物含有从上述核蛋白和/或DNA分解产物中分离出的脱氧寡核苷酸、脱氧单核苷酸或寡肽，
或所述组合物含有将RNA通过酶分解处理或水解处理低分子化后得到的分解产物，所述分解产物中分子量为1000-3000的级分的含量为20-50％，
或所述组合物含有从该RNA分解产物中分离出的寡核苷酸或单核苷酸，
或所述组合物含有选自上述核蛋白和/或DNA分解产物、上述RNA分解产物、脱氧寡核苷酸、脱氧单核苷酸、寡肽、寡核苷酸以及单核苷酸的至少2种的混合物。

2、  权利要求1所述的化妆品用组合物，其特征在于所述核蛋白和DNA是从鲑鱼、鳟鱼、鯟和鳕鱼等鱼类的鱼精得到的。

3、  权利要求1所述的化妆品用组合物，其特征在于所述RNA是从选自啤酒酵母、圆酵母、乳酵母及面包酵母的酵母得到的。

4、  含有权利要求1-3所述的化妆品用组合物的改善皮沟密度的化妆品。

说明书改善皮沟密度的化妆品用组合物及化妆品
技术领域
本发明涉及一种促进人皮肤(肌)细胞的再生或活化、改善皮沟密度(皮肤纹理)的化妆品用组合物，以及含有该化妆品用组合物的化妆品。
背景技术
通常认为肌肤粗糙和褐斑等是因为上年龄造成的激素平衡的影响、来自日光的紫外线的刺激、体内高浓度的过氧化物质对表皮造成的恶劣影响、皮脂分泌过剩、表皮血流量过少、营养不良、精神压力等多种原因引起的。
面部肌肤粗糙以及皱纹等是人们在美容上最关心的事情。近年来，不仅是面向女性的化妆品，而且面向男性的化妆品产品数量也呈现增加。由于面部是给他人第一印象的很重要的因素，无论是男女老少大部分人都希望有漂亮有张力的肌肤(真正美丽的肌肤)，因此，能改善肌肤粗糙及皱纹的化妆品是人们很关心的。
以往的化妆品大多通过加入甘油等保湿剂或油成分来尝试提高肌肤的保湿效果、使肌肤更多漂亮。最近，出于美化肌肤的目的，出现了含有具有抑制黑色素生成、促进骨胶原的生成作用的L-抗坏血酸及其衍生物等的化妆品。
另外，作为人们对健康的关心程度越来越高的反映，出现了使用脱氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA)或核蛋白质作为原料或有效成分的保健食品。为了使高分子量的核蛋白质具有水可溶性和易消化性，提出了将其低分子化的建议(专利文献1)。
脱氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA)或核蛋白质具有防止老化的效果已经是公知的，但还没有充分的证据证明其可以适用于化妆品。
专利文献1特开2004-16143号公报
发明内容
发明解决的问题
虽然肌肤粗糙及皱纹等肌肤问题的原因是面部皮肤老化、血流不畅、紫外线影响、压力等，但是皮肤细胞的新陈代谢低下、新细胞再生机能降低是直接的原因。
至今为止的化妆品没有发挥活动皮肤细胞新陈代谢机理的机能，而仅仅过分地追求肌肤的表面效果。因此，不能得到针对肌肤粗糙及皱纹褐斑等的充分效果。
另外，对于上述使用L-抗坏血酸及其衍生物的方法，由于其不稳定且防止紫外线炎症效果不充分，难以直接应用上述化合物含有的成分作为化妆品的有效成分。
换句话说，希望能获得提高人皮肤细胞再生能力和活化能力、促进新的皮肤细胞再生、防止肌肤粗糙或皱纹等、具有较高皮肤美肤效果的产品，而现有技术的化妆品中这些效果尚不充分。
因此，希望开发一种能活化细胞自体、使肌肤有活力的新的化妆品。
本发明人经过锐意研究得到一种改善人肌肤肌理的新的化妆品，其含有酶分解处理或水解处理核蛋白和/或DNA得到的含有脱氧寡核苷酸、脱氧单核苷酸或寡肽的分解产物，或含有酶分解处理或水解处理RNA得到的含有寡核苷酸或单核苷酸的分解产物，或含有上述的混合物。发现它们具有非常好的细胞再生和细胞活化效果，由此导致它们具有改善皮沟密度的效果、改善皮肤的水分保持能力和改善皮脂平衡的效果以及防止皱纹的效果，由此完成了本发明。
解决问题的技术方案
即，本发明的化妆品用组合物为改善皮沟密度的化妆品用组合物，其特征在于含有将核蛋白和/或DNA通过酶分解处理或水解处理低分子化后得到的分解产物，所述分解产物中分子量为1000-3000的级分的含量为20-50％，
或含有从上述核蛋白和/或DNA分产物中分离出的脱氧寡核苷酸、脱氧单核苷酸或寡肽，
或含有将RNA通过酶分解处理或水解处理低分子化后得到的分解产物，所述分解产物中分子量为1000-3000的级分的含量为20-50％，
或含有从该RNA分解产物中分离出的寡核苷酸或单核苷酸，
或含有选自上述核蛋白和/或DNA分解产物、上述RNA分解产物、脱氧寡核苷酸、脱氧单核苷酸、寡肽、寡核苷酸以及单核苷酸的至少2种的混合物。
本发明的化妆品用组合物优选的情况是，上述核蛋白和DNA优选从鲑鱼、鳟鱼、鯟和鳕鱼等鱼类的鱼精得到。
另外，上述RNA是从酵母得到的，优选是从选自啤酒酵母、圆酵母、乳酵母及面包酵母的酵母得到的。
进一步的，依据本发明的化妆品的特征在于含有上述改善皮沟密度的化妆品用组合物。
本发明的化妆品用组合物含有酶分解处理或水解处理核蛋白和/或DNA或RNA得到的分子量1000-3000部分含量为20-50％的小分子分解产物；或从该分解产物中分离出的脱氧寡核苷酸、脱氧单核苷酸、寡肽、寡核苷酸、单核苷酸；或选自上述分解产物或上述化合物的不少于2种的混合物作为有效成分。
所述分子量较小的脱氧寡核苷酸等经皮吸收较为容易，另外，它们经皮吸收的时候能有助于起到提高皮肤细胞再生能力或细胞活化能力的作用。因此，在用于面部表皮的情况中，能起到改善皮沟密度(皮肤纹理)、改善水分量和皮脂量的作用，进一步可起到改善皱纹的效果和美化皮肤的效果。
另外，本发明的化妆品由于含有上述化妆品用组合物，在用于面部表皮时其可以发挥该化妆品用组合物所具有的可很好地改善肌肤粗糙、防止皱纹的效果以及美化皮肤的效果。
附图说明
图1显示DNA的核酸酶处理物(分解产物)的脱氧寡核苷酸的HPLC分析例。
图2是示出30岁年龄段受试者在实验实施前和实验开始4周后的肌肤状态变化的相片。
图3是示出50岁年龄段受试者在实验实施前和实验开始4周后的肌肤状态变化的相片。
图4显示水分量和皮脂量的实验结果和各年龄层的平均值。
图5显示皮沟密度和皱纹的实验结果和各年龄层的的平均值。
图6显示核蛋白的核酸酶处理物(分解产物)的脱氧寡核苷酸的HPLC分析例。
图7显示RNA的核酸酶处理物(分解产物)的寡核苷酸的HPLC的分析例。
具体实施方式
通过酶分解处理或水解处理DNA，或酶分解处理或水解处理RNA，或酶分解处理或水解处理核蛋白能分别制得做为本发明的化妆品用组合物的有效成分和精制产品所使用的脱氧寡核苷酸或脱氧单核苷酸、寡核苷酸或单核苷酸和寡肽
DNA和核蛋白例如能从鱼类的鱼精(白子)中提取精制获得。上述鱼类可以是例如鲑鱼、鳟鱼、鯟和鳕鱼，特别优选鲑鱼。
下文中将更详细地对DNA进行说明。
本发明的化妆品用组合物的制造原料中DNA的形态可以是多样的，例如可以是双链、单链或环状的DNA。DNA的来源可以是动物、植物、微生物等多种生物。鱼类，特别是鲑鱼、鳟鱼、鯟和鳕鱼的鱼精，含有非常多的DNA，但是做为水产加工上的废弃物从来没有作为资源被有效利用，大多被废弃。因此，从使废弃物资源化的观点出发，希望能利用这些来源于鱼精的DNA。此外，还可以利用来自哺乳动物或鸟类，例如牛、猪、鸡等的胸腺的DNA。另外，还可以使用合成DNA。
此外，特开2005-245394号公报中记载了从鱼类鱼精制得DNA的提取和精制方法。
具体的方法是：首先粗粉碎鱼类鱼精，在DNA不分解的条件下用蛋白质分解酶(蛋白酶)对粗粉碎的鱼类鱼精进行处理，过滤酶处理后的溶液。用区分分子量为2,000-1,000,000的中空薄膜对滤液进行透析处理，除去分解后的蛋白质和离子类的同时，浓缩双链DNA。随后，从透析处理后的溶液中沉淀出DNA盐或浓缩溶液，回收这些沉淀物或浓缩物。
干燥通过上述方法得到的DNA盐获得粉末状DNA盐，其可用作本发明化妆品用组合物的制造原料。
RNA可从酵母获得，优选从选自啤酒酵母、圆酵母、乳酵母和面包酵母的酵母提取精制获得。
处理DNA和RNA的酶可以是例如核酸酶、尤其优选来自青霉菌的核酸酶。
寡肽可用蛋白酶和核酸酶水解鱼类鱼精等含有的核蛋白(核蛋白质)制得。
上述蛋白酶主要是胰蛋白酶。胰蛋白酶是具有较高特异性的丝氨酸蛋白酶，由于其选择性水解精氨酸和赖氨酸的羧基侧的肽键，适合可水解含精氨酸较多的鱼精蛋白((プロタミン))。此外上述蛋白酶还可以是胰蛋白酶加上其他蛋白酶，例如还可以含有糜蛋白酶等。适宜的蛋白酶可以是ノボザイムズジヤパン株式会社(旧ノボノルデイスクバイオイダストリ一株式会社)的蛋白酶。
上述核酸酶水解脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的3’，5’-磷酸二酯键，生成5’-(脱氧)-核苷酸寡聚体。对该核酸酶的性质没有特别限制，优选热稳定性好的。这样的核酸酶可以是例如天野酶(エンザイム)株式会社、西格玛公司的市售品。
使用上述的核酸酶水解DNA、RNA和核蛋白最重要的是进行反应的温度。反应温度必须在60-75℃的范围内，最优选70℃。假如用低于这种温度范围的温度进行反应，DNA、RNA和核蛋白的低分子分解反应不能充分进行，分解物不具有水溶性。另一方面，假如用高于这种温度范围的温度进行反应，低分子化将过度进行，有可能会失去核蛋白质(核蛋白)的良好的效果。
如上所述用核酸酶在60-75℃时水解DNA、RNA和核蛋白，能使其达到分子量为1000-3000级分含量为20-50％、分子量在1000以下级分的含量通常较分子量在1000-3000级分的量更多，例如能含有达到30-50％左右的低分子化程度。由此，制得水可溶性和经皮吸收性兼而有之的DNA、RNA和核蛋白分解产物。
在如上方法得到的核蛋白分解产物和DNA分解产物中，含有的主要部分或者大部分是低分子化后得到的脱氧寡核苷酸、脱氧单核苷酸和寡肽，并含有极少量部分的低分子化不充分的脱氧核苷酸等。
此外，同样处理得到的RNA分解产物中，含有的主要部分或者大部分是低分子化后得到的寡核苷酸、单核苷酸，并含有极部分的低分子化不充分的脱氧核苷酸等。
在由此得到的分解产物含有的核苷酸类(脱氧寡核苷酸、单核苷酸、寡核苷酸、单核苷酸)中，大部分乃至全部的由没有螺旋结构的单体、全部为单链的寡聚体以及只有一部分是双螺旋结构的寡聚体构成。换句话说，假设在上述小分子分解不彻底的情况中，上述分解产品含有的核苷酸类的双螺旋率不超过20％。
此外，为了水解处理核蛋白，可用蛋白酶处理得到寡肽以及用核酸酶处理得到寡核苷酸，但从操作上的便利性和最终产物的品质观点出发，优选最初用蛋白酶处理，随后用核酸酶处理。
本发明的化妆品用组合物的有效成分是酶分解处理或水解处理核蛋白和/或DNA得到的分解产物，或酶分解处理或水解处理RNA得到的分解产物，这些分解产物(无需精制)即可使用。上述分解产物中，例如，还可以含有氨基酸。
此外，本发明的化妆品用配方组合物中的有效成分可以是用常规分离方法和/或精制方法从核蛋白和/或DNA或RNA分解产物中分离和精制得到的以下化合物：脱氧寡核苷酸、脱氧单核苷酸、寡肽、寡核苷酸和单核苷酸。
这时，核蛋白、DNA和RNA的分解产物含有的，或从该分解产物用常用的分离方法和/或精制方法分离精制得到的脱氧寡核苷酸和寡核苷酸的链长优选是2-12。
上述分解产物和上述化合物可分别单独使用，或者至少2种混合使用。
在混合使用上述分解产物及上述化合物等的情况中，要选择适宜的混合比例。
这时，作为上述分解产物和上述化合物，需要含有链长为2-12的上述脱氧寡核苷酸或上述寡核苷酸中的至少任何一种，并且优选链长为2-12的上述脱氧寡核苷酸和上述寡核苷酸的含有总量是上述分解产物及上述化合物的总量的20％以上。
适当选择本发明的化妆品用配方组合物有效成分(上述分解产物和/上述化合物)的浓度。
此外，上述分解产物和上述化合物还可以与化妆品用组合物中常用的添加剂按照一定比例组合使用。
此外，本发明的化妆品含有上述化妆品用组合物。
本发明的化妆品采用的剂型可选择适用于皮肤的剂型。优选地，化妆品是化妆水、乳液、面霜、凝胶、啫喱、精华、糊、面膜、粉底等直接涂敷在肌肤上的形态。此外这种化妆品还可以用于处理面部皮肤之外的脖子、手脚等全身。
本发明的化妆品除了上述化妆品用组合物外还可配合使用公知的化妆品辅料。例如香料、保湿剂等，单独或组合后配合使用。
此外，本发明的化妆品还可配合使用药剂成分：维生素E或其衍生物，例如维生素E醋酸盐、乙酰胆碱衍生物等血管扩张剂；千金藤素等皮肤机能亢进剂；甘草酸或其衍生物；雌二醇、雌酮等女性激素剂；丝氨酸、蛋氨酸、精氨酸等氨基酸类；维生素A、维生素B1、维生素B6、生物素、泛酸或其衍生物等维生素类。所述药剂成分可以单独或组合使用。
另外，本发明的化妆品，如果需要的话，还可单独或组合使用化妆品、药品等皮肤外用剂中常规使用的添加剂，例如的油分、防腐剂、表面活性剂、分散稳定剂、增粘剂、湿润剂、紫外线吸收剂、抗氧化剂、pH调节剂、精制水和乙醇等。
实施例
根据以下示出的实施例和对照例更详细具体地说明本发明。下述实施例仅仅是说明本发明的目的，这些实施例不对本发明的保护范围做任何限定。
以下的实施例和对照例中各种成分的组合量，是相对于全体量的质量％。此外，在实施例中实验样品1-样品3(分别含有酶分解处理得到的DNA盐、DNA及核蛋白或RNA的分解产品)的量均以固体含量示出。
1、(脱氧)寡核苷酸的制备
用作为食品添加剂被认可的核酸酶(例如酶制剂核酸酶“amano”(天野エンザイム社制))限定分解来自鲑鱼鱼精的DNA。在电泳装置中分析生成的脱氧单核苷酸和脱氧寡核苷酸确定最适条件。
具体是，将温水调节到65℃左右，加入作为原料的粉末状DNA钠盐，搅拌，然后升温到70℃，适量加入相对于原料含量范围在0.05-0.25％的核酸酶，反应3小时。随后，85℃加热10分钟，使核酸酶灭活，离心分离，喷雾干燥上清液，得到含有脱氧寡核苷酸的干燥粉末(分解产物)。
2、(脱氧)寡核苷酸的分析
将温水调整到65℃左右，加入作为原料的来自鲑鱼鱼精的粉末状DNA钠盐，搅拌，然后升温到70℃，加入相对于原料含量为0.05％的酶制剂核酸酶“amano”(天野エンザイム社制)，反应3小时，得到分解产物。随后，85℃加热10分钟，使核酸酶灭活，用HPLC分析分解产物。
图1示出了分解产物的脱氧寡核苷酸的HPLC(高效液相)分析例。在图1中，5’-脱氧单核苷酸和3’-脱氧单核苷酸在峰20之前溶出，以后的比较大的峰，即峰26之后可以看作是脱氧寡核苷酸的吸收峰。另外峰41之后可以看作是分子量超过3000的分解产物的吸收峰。因此，通过计算峰26-41的峰强度，可得出在本实施例的分解产物总量中含有31％的脱氧寡核苷酸(分子量1000-3000)部分。
3、采用了(脱氧)寡核苷酸的化妆品的制备
上述制备方法得到的含有脱氧寡核苷酸的干燥粉末(分解产物)作为实验样品1，以下使用实验样品1来制备本发明的化妆品。作为对照的，制备不含有实验样品1的化妆品。其组成如下表1所示。
实施例1
向95％乙醇中加入精制水，再加入聚氧化乙烯(25摩尔)硬化蓖麻油乙醚、甘油、丙二醇，搅拌，加入实验样品1搅拌溶解，得到透明液状的实施例1的化妆品。
对照例1
用与实验样品1相同用量的甘油代替实验样品1使用，用实施例1的相同制法制得对照例1的化妆品。
表1：实施例1和对照例1的化妆品的组成
组合成分实施例1对照例1实验样品1(DNA盐分解产物)2.0-浓甘油2.0 4.0聚环氧乙烷(25摩尔)硬化蓖麻油乙醚2.0 2.0丙二醇5.0 5.0 95％乙醇1.0 1.0精制水余量余量
4、用皮肤照相分析系统评价皮肤状态
30岁年龄段和50岁年龄段的受试者在沐浴后在面部的左右脸上分别涂抹实施例1的化妆品和对照例1的化妆品，1g/1次/1日。
使用(株)インフオワ一ド的スキナナライザ一CS50系统装置来测定实验实施前(原始值)并评价涂抹4周后的部位的皮肤状态。
4-1、水分量和皮脂量的评价
用油分水分探测器测定水分量和皮脂量的状态。用探测器在左右脸颊上测定，并依据以下测定方法和评价标准来评价测定结果。
油分(皮肤表面分泌的皮脂量)
用探测器在恰当部位上碾压，测量由此得到的油分的折射率，评价其面积。将整个面部都被油分覆盖的状态记做“油分饱和状态(100)”，不存在任何油分的状态记做“油分零状态(0)”进行评价。
水分(身体表层的水分量)
用探测器在恰当部位上碾压，测量皮肤的静电容量以及水分值。将用生理盐水测定的状态记做“饱和状态(100)”，不存在任何水分的状态记做“零状态(0)”进行评价。
4-2、皮沟密度(皮肤纹理)的评价
用显微镜照相拍摄左右脸颊的皮沟密度状态，并将拍摄的相片用自动皮肤测定仪分析，评价。
分析方法是将照片(变换为黑白照片)中暗部记做皮沟和亮部记做皮丘，将明暗部分别处理后的结果与一边0.4mm的正三角形皮肤纹理模型(以颚下皮肤的状态作为参考得到)相比较，以模型为100来评价相片。
4-3、皱纹的评价
用整个面部摄影黑匣测定眼下皱纹的状态，并根据皮肤照片的分析进行评价。
根据照片(变换为黑白照片)，浓度明显倾斜变暗的部分即发现眼下的皱纹，计算皱纹的条数。
在下表2(受试者：30岁年龄段)和表3(受试者：50岁年龄段)中记载了上述实验的评价，并在图2和图3中示出了各受试者肌肤状态的变化(相片)。
此外，图4和图5中示出了上述实验结果的不同年龄阶层的平均值的图(曲线图)。
表2：实施例1和对照例1的化妆品的评价实验结果(30岁年龄段)

表3：实施例1和对照例1的化妆品的评价实验结果(50岁年龄段)

表2、表3、图4和图5示出了实施例1的结果：改善了30岁年龄段和50岁岁年龄段的受试者的水分量、皮脂量、皮沟密度，尤其地，实验开始前低于平均值的水分量(30岁年龄段、50岁年龄段)和皮沟密度(30岁年龄段)在4周后回复到平均值。此外，皱纹条数也在4周后减少到平均值或平均值附近。
此外，从图2和图3示出的照片可以目测确认皮沟密度(皮肤纹理)已有改善。
另一方面，在对照例1中，虽然通过配合的甘油等的保湿效果，较实验开始前(原始值)在一定程序是有所改善，但是较上述实施例1的改善效果来说有很大的区别。
5、DNA和核蛋白分解产物(实验样品2)或RNA分解产物(实验样品3)的制备及分析
将日生生物(株)制造的DNA和核蛋白作为有效成分，通过酶分解处理，获得分解产物，含有所述分解产物的制品作为实验样品2(即含有脱氧寡核苷酸、脱氧单核苷酸和寡肽)。此外，将日生生物(株)制造的RNA作为有效成分，通过酶分解处理，获得分解产物，含有所述分解产物的制品作为实验样品3(即含有寡核苷酸和单核苷酸)。
下文继续描述实验样品2和实验样品3的制备方法和分析结果。
5-1、实验样品2(DNA和核蛋白分解产物)的制备方法及分析
实验样品2可利用与实验样品1相同的制备方法制得，将酶分解处理DNA使其低分子化，获得的分解产物与将酶分解处理核蛋白使其低分子化，获得的分解产物等量混合。各分解产物的制备方法在下文中进行详细描述。
<DNA分解产物>
制备方法
用与上述“1、(脱氧)寡核苷酸的制备”相同的制备方法制得DNA分解产物。
结构和组成
用与上述“2、(脱氧)寡核苷酸的分析”相同的方法进行分析，在分解产物总体中含有31％脱氧寡核苷酸(分子量1000-3000)部分。
<核蛋白分解产物>
制备方法
在水中加入作为原料的来自鲑鱼鱼精的核蛋白(日生バイオ(株)制造)，加热至50℃，搅拌，加入相对于原料含量为0.065％的酶制剂蛋白酶(PTN)(ノボザイムズジヤパン(株)制)，反应4小时，加热至70℃，搅拌。接着，加入0.1％的酶制剂核酸酶“amino”(天野エンザイム社制)，反应3小时。随后，85℃加热10分钟，使核酸酶灭活，离心分离，用喷雾干燥法得到含脱氧寡核苷酸的干燥粉末(分解产物)。
结构和组成
用HPLC分析上述得到的分解产物。
图6示出了用HPLC(高效液相)分析分解产物的脱氧寡核苷酸的分析例。依据图6，保留时间在19-24分钟内的峰(峰1-峰4)是寡核苷酸的吸收峰。因此，计算峰1-峰4的强度，可得出在本实施例分解产物总量中含有33.4％的脱氧寡核苷酸(分子量1000-3000)部分。
5-2、实验样品3(RNA分解产物)的制备方法及分析
用与实验样品1相同的方法制备实验样品3，只是用RNA代替了DNA进行酶分解处理，进行低分子化获得分解产物，以下进行详细描述。
<RNA分解产物>
制备方法
将温水调节至70℃左右，加入作为原料的来自酵母的RNA(日生バイオ(株)制造)，搅拌，加热至70℃，加入相对于原料含量为0.05％的酶制剂核酸酶“amino”(天野エンザイム社制)反应3小时，搅拌。随后，85℃加热10分钟，使核酸酶灭活，离心分离，用喷雾干燥法得到含寡核苷酸的干燥粉末(分解产物)。
结构和组成
用HPLC分析上述得到的分解产物。
图7示出了用HPLC(高效液相)分析分解产物的寡核苷酸的分析例。依据图7，保留时间在13-24分钟内的峰(峰2-峰5)是寡核苷酸的吸收峰。因此，计算峰2-峰5的强度，可得出在本实施例分解产物总量中含有41.1％的寡核苷酸(分子量1000-3000)部分。
6、各类化妆品的制备
将日生生物(株)制造的DNA和核蛋白作为有效成分，通过酶分解处理，获得分解产物，含有所述分解产物的制品作为实验样品2(即含有脱氧寡核苷酸、脱氧单核苷酸和寡肽)。此外，将日生生物(株)制造的RNA作为有效成分，通过酶分解处理，获得分解产物，含有所述分解产物的制品作为实验样品3(即含有寡核苷酸和单核苷酸)。
用得到的实验样品2和实验样品3制备本发明的化妆品。此外，制造不含有实验样品2和实验样品3的对照例的化妆品作为对照。在下表4-7中示出了这些化妆品的组成。
此外，在括号内示出了以下化妆品使用的产品的来源。
6-1、凝胶状化妆品
实施例2(实施例2-1至2-3)
在搅拌精制水的同时缓慢加入Pemulen TR-1(日光ケミルズ(株))使之彻底分散，随后搅拌Ultrez-10(日光ケミルズ(株))使之分散，加入浓甘油作为凝胶基质。随后加热溶解混合レシノ一ルWS-50(日光ケミルズ(株))、加州希蒙得木种子油(ホホバ油)、角鲨烯、リアルカ一ブSR-1000(LIALCARB：日光ケミルズ(株))、AMITER MA-HD(日本エマルジヨン(株))和ロ一ズイビツプ油作为油性成分。随后分别加入セラリピツド W-2(日本エマルジヨン(株))、1，3-丁二醇（BG)、二缩二丙二醇(DPG)和2-苯氧乙醇，加热搅拌混合(300rpm，80℃，保持5分钟)，加入精制水充分搅拌。与上述油性成分充分混合成为组合物原液。
混合上述凝胶基质和组合物原液，加入乙醇，加入18％的氢氧化钠中和，搅拌混合。分别溶解混合了精制水的实验样品2、实验样品3和实验样品2与实验样品3的等量混合物(实验样品4)，配制出实施例2-1至2-3的凝胶状化妆品。
对照例2
除用2质量％的浓甘油代替实验样品2和实验样品3加入，添加至7质量％之外，用与实施例2-1、实施例2-2和实施例2-3相同的方法配制出对照例2的凝胶状化妆品。
6-2、乳液状化妆品
实施例3(实施例3-1至3-3)
在70℃时将浓甘油加入精制水中加热配制(水相)。另外，在70℃加热时向十六烷基醇、蜂蜡、凡士林、角鲨烯和二甲基聚硅氧烷中加入油酸酯和甘油硬脂酸酯。将其加入预先配制好的水相进行预乳化。进一步地，加入榅桲果(クインスシ一ド)提取液和乙醇，搅拌，用乳匀机(均质混和器)使乳化粒子均一化。
将该乳液状液体维持在40℃，使与精制水混合的实验样品2、实验样品3和实验样品2与实验样品3的等量混合物(实施样品4)分别溶解于其中，配制出实施例3-1至3-3的乳液状化妆品。
对照例3
除用2质量％的浓甘油代替实验样品2和实验样品3加入，添加至10质量％之外，用与实施例3-1至实施例3-3相同的方法配制出对照例3的乳液状化妆品。
6-3、化妆水状化妆品
实施例4(实施例4-1至4-3)
在室温中在精制水中溶解1，3-丁二醇、浓甘油、缓冲剂、防止褐色剂。此外，分别在乙醇中溶解油酸、山梨聚糖单月桂酸酯和混和了精制水的实验样品2、实验样品3和实验样品2与实验样品3的等量混合物(实验样品4)，搅拌各种混合物，配制出实施例4-1至4-3的化妆水状化妆品。
对照例4
除用2质量％的浓甘油代替实验样品2和实验样品3加入，添加至6质量％之外，用与实施例4-1至实施例4-3相同的方法配制出对照例4的化妆水状化妆品。
6-4、面霜状化妆品
实施例5(实施例5-1至5-3)
在精制水中依次溶解1，3-丁二醇、戊二醇、浓甘油、聚季铵盐，在80℃时加热作为水相。另外，混合硬脂酸聚甘油、硬脂酰醇、二十二烷基醇、鲨肝醇、棕榈酸甘油酯十六烷基、硬脂酸甘油、クロダラン SWL(クロ一ダジヤパン(株)、十六烷基酸棕榈酸异丙基、角鲨烯、肉豆蔻酸辛基十二烷基、澳大利亚坚果(マカダミアナツツ)油、甘油三辛酸酯、二甲聚硅氧烷，85℃加热搅拌，作为油相。向水相中加入油相，搅拌(300rpm)，用高粘度用乳匀机(均质混和器)(4000rpm)乳化。
将该乳化物质保持在40℃。在精制水中分别溶解氢氧化钠、柠檬酸钠和混合了精制水的实验样品2、实验样品3和实验样品2与实验样品3的等量混合物(实验样品4)，配制出实施例5-1至5-3的面霜状化妆品。
对照例5
除用2质量％的浓甘油代替实验样品2和实验样品3加入，添加至7质量％之外，用与实施例5-1至实施例5-3相同的方法配制出对照例5的化面霜状化妆品。
7、化妆品(凝胶、乳液、化妆水、面霜)的性能测试
根据实施例2-5和对照例2-5的化妆品，分别进行如下文所述评价。表4-表7中示出了结果。
7-1皮沟密度(皮肤纹理)的状态
中高年龄段受试者在沐浴后的左右半张脸上分别涂抹实施例2-5和对照例2-5的化妆品，约1g/1次/1天。
使用前述(株)インフオワ一ド的スキナナライザ一CS50系统装置如前所述来评价涂抹4周后的部位的皮肤的皮沟密度。
用下述判断标准进行评价。
++：与对照例相比，涂抹部分的皮沟密度的数值提高了10％(效果显著)
+：与对照例相比，涂抹部分的皮沟密度的数值提高了5-10％(有效)
±：与对照例相比，涂抹部分的皮沟密度的数值提高了0-5％(一般有效)
-：与对照例相比，涂抹部分的皮沟密度的数值相等或降低(无效)
7-2、改善肌肤粗糙的实验
以下肢肌肤粗糙的中高年龄段女性10名作为受试者，在沐浴后左右下肢不同地方分别涂抹实施例2-5的化妆品和对照例2-5的化妆品，约1g/1次/1天。
针对实验开始前与实验开始后1个月后的涂抹部分的皮肤的状态，根据以下判断标准，从皮肤的剥离状态和水分状态角度来判断实验结果。
7-2-1、皮肤剥离的判断标准和有效性的判断
根据以下判断基准判断实验实施前后皮肤的剥离状态。
0：无剥离  1：轻度剥离  2：中度剥离  3：重度剥离
根据上述判断标准，实验实施后如果较实施前是1级改善则判断为“一般有效”，2级以上改善则判断为“有效”、相同水平或恶化则判断为“无效”。
7-2-2、水分状态的判断标准
用湿度计测定1个月后的皮肤水分状态(保湿性)，根据以下标准进行判断。
<水分状态的判断标准>
++：涂抹部分的保湿性较实施前提高了5％(效果显著)
+：涂抹部分的保湿性较实施前提高了2-5％(有效)
±：涂抹部分的保湿性较实施前提高了0-2％(一般有效)
-：涂抹部分的保湿性较实施前没有提高或反而降低(无效)
7-3、试用的评价实验
中高年龄段的女性为实验对象单独盲检，来进行实施例2-5的化妆品及对照例2-5的化妆品的评价实验。此外，各化妆品的受试者分别是10名。受试者在使用前和使用1个月后填写调查表中“光滑度”、“皮肤纹理细腻度”2个问题。
根据回答的答案用下述判断标准判断实验结果。
++：较使用前有改善(有效)
+：较使用前有略微改善(一般有效)
±：较使用前相同或恶化(无效)
表4：实施例2和对照例2的凝胶状化妆品的组成及评价实验结果

表5：实施例3和对照例3的乳液状化妆品的组成及评价实验结果

表6：实施例4和对照例4的化妆水状化妆品的组成及评价实验结果

表7：实施例5和对照例5的化妆水状化妆品的组成及评价实验结果

表4至表7显示含有实验样品2、实验样品3或实验样品4(实验样品2与实验样品3的等量混合物)的实施例2至5的化妆品较不含有实验样品2-4的对照例2-5的化妆品在皮沟密度的状态上有明显改善。
另外，实施例2-5的化妆品在改善肌肤粗糙实验中得出显著有效的结果，并在试用评价实验中得到具有显著改善效果的实验结果。
另一方面，对照例2-5的化妆品在改善肌肤粗糙实验、试用评价实验中均认为没有改善效果，这证明含有实验样品2-4的化妆品的有效性。
此外，在上述实施例1-5中，使用实验样品1(DNA盐分解产物)、实验样品2(DNA和核蛋白分解产物)、实验样品3(RNA盐分解产物)和实验样品4(实验样品2和实验样品3的混合物)作为有效成分。另外，作为实验样品1至实验样品4的代替品，从其中分离精制得到的脱氧寡核苷酸、脱氧单核苷酸、寡肽、寡核苷酸或单核苷酸单独或组合使用作为有效成分，与实验样品1至实验样品4得到了相同的效果。
即，从本实施例可以看出，含有脱氧寡核苷酸等(脱氧寡核苷酸、脱氧单核苷酸、寡肽、寡核苷酸或单核苷酸中的至少一种)的产品被认为能在肌肤状态(水分量、皮脂量、皮沟密度、皱纹)方面具有改善效果。尤其是改善皮沟密度的实验结果给出了脱氧寡核苷酸等具有在细胞再生或活化细胞方面的能力的实验证据。
下面在实施例6至8中示出使用上述实验样品1至实验样品4的化妆品配方例。此外，此处所记载的“实验样品(类)”的表示单独选自实验样品1至实验样品3或选自实验样品2与实验样品3的等量混合物(实验样品4)。
任意的实施例均能改善皮肤水分量和皮脂量并能改善皮沟密度状态、减少皱纹，试用时确认其效果。
确认了具有改善肌肤光滑度和皮肤细腻度的效果。
实施例6：冷霜
表8冷霜配方
组成成分组合用量(质量％)固体石蜡5.0蜂蜡10.0凡士林15.0流动石蜡41.0甘油单硬脂酸酯2.0聚氧化乙烯(20摩尔)山梨聚糖单月桂酸酯2.0实验样品(类)1.0肥皂粉末0.1香料适量防腐剂适量抗氧化剂适量精制水余量
<制备方法>
在精制水中加入实验样品(类)、肥皂粉末，加热溶解，保持70℃(水相)。混合其他成分，加热融解，保持70℃(油相)。向水相中边搅拌缓慢加入油相，最后用乳匀机(均质混和器)均一乳化，乳化后充分搅拌乳化液的同时冷却到30℃，配制得到冷霜。
实施例7：粘性面膜(泥状包装)
表9粘性面膜配方
组成成分组成用量(质量％)实验样品(类)1.0高岭土25.0乙醇5.01，3-丁二醇10.0甘油5.0倍半硬脂酸PEG-20十六烷基葡萄糖4.0黄原胶0.1防腐剂适量精制水余量
<制备方法>
混合1，3-丁二醇、甘油、倍半硬脂酸PEG-20十六烷基葡萄糖、黄原胶、防腐剂和精制水，搅拌使全体均匀混合。
在用乳匀机(均质混和器)搅拌的同时，加入实验样品(类)和高岭土，使全体均一化，加入乙醇，搅拌混合，配制得到粘性面膜。
实施例8：粉底
表10：粉底配方
组成成分组合用量(质量％)实验样品(类)2.0油酸甘油适量二异硬脂酸三甘油适量环己烷辛基适量十六烷基醇适量微晶状体蛋白蜡适量流动石蜡适量三甲基硅氧酸液适量滑石适量氧化铁(染料)适量甘油适量磁酸镁适量杀菌剂、香料适量香料适量精制水余量
<制备方法>
加热溶解油酸甘油、二异硬脂酸三甘油、环己烷辛基、十六烷基醇、微晶状体蛋白蜡、流动石蜡、三甲基硅氧酸液、滑石和氧化铁，混合，得到(A)。混合甘油、硫酸镁和精制水，加热，加入(A)，混合后冷却。将实验样品(类)溶解在精制水中加入，随后加入杀菌剂和香料，配制得到基础粉底。