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CRTH2拮抗剂的微粒
    【技术领域】

    本发明提供了无定形或晶体形式的{4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基}乙酸的微粒，及其制备方法和药物组合物。本发明还提供了将其用于治疗、预防或改善CRTH2-介导的病症或疾病的一种或多种症状的方法。

    背景技术

    CRTH2是在Th2细胞、嗜曙红细胞和嗜碱细胞上表达的G蛋白-偶联的化学吸引剂受体(Nagata等人，J.Immunol.1999，162，1278-1286；Hirai等人，J.Exp.Med.2001，193，255-261)。由肥大细胞生成的主要炎症介质前列腺素D₂(PGD₂)是CRTH2的天然配体。最近，已经发现由PGD₂诱导的CRTH2激活会诱导Th2细胞和嗜曙红细胞的迁移和激活，这表明CRTH2可能在过敏性疾病中具有促炎作用(Hirai等人，J.Exp.Med.2001，193，255-261；Gervais等人，J.Allergy Clin.Immunol.2001，108，982-988)。还发现，在特应性皮炎患者中表达CRTH2的循环T细胞出现增加，CRTH2与该疾病的严重性具有关联(Cosmi等人，Eur.J.Immunol.2000，30，2972-2979；Iwazaki等人，J.Investigative Dermatology 2002，119，609-616)。PGD₂在引发和维持过敏性炎症中的作用在小鼠哮喘模型中得到了进一步的证明，该模型显示通过PGD₂合成酶在体内过量生成PGD₂可加剧气道炎症(Fujitani等人，J.Immunol.2002，168，443-449)。因此，CRTH2拮抗剂在CRTH2-介导的病症或疾病(如过敏性鼻炎、过敏性哮喘、支气管收缩、特应性皮炎或全身性炎性疾病)的治疗中具有潜在用途。

    发明简述

    本发明提供了呈无定形形式或者I型或II型结晶形式的具有式I的{4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟-甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基}乙酸的微粒：

    

    该式I化合物被鉴定为CRTH2拮抗剂(WO 2004/0022218)。

    在一实施方式中，所述{4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基}乙酸的微粒为I型，其具有基本如图1所示的X-射线粉末衍射图谱，或者基本如图2所示的差示扫描量热法热谱图。

    在另一实施方式中，所述{4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基}乙酸的微粒为II型，其具有基本如图6所示的X-射线粉末衍射图谱。

    在另一实施方式中，所述{4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基}乙酸的微粒为无定形的。

    此外还提供了药物组合物，其包含呈无定形形式、I型或II型结晶形式的4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基}乙酸的微粒或其混合物，以及一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂。

    进一步提供了治疗、预防或改善CRTH2-介导的病症或疾病的一种或多种症状的方法，其包括施用呈无定形形式、I型或II型结晶形式的4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基}乙酸的微粒或其混合物。

    此外，还提供了制备呈无定形形式或者I型或II型结晶形式的4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基}乙酸的微粒的方法。

    【附图说明】

    图1显示了I型晶体形式的{4，6-双(二甲基-氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基}乙酸的微粒的X-射线粉末(XRP)衍射图。

    图2显示了I型所述式I的酸的微粒的差示扫描量热法(DSC)热谱图。

    图3显示了I型所述式I的酸的微粒的热解重量(TG)热谱图。

    图4显示了I型所述式I的酸的微粒在2,500(A)、5,000(B)和10,000(C)的放大倍数下的扫描电子显微(SEM)照片。

    图5显示了I型所述式I的酸的微粒的颗粒尺寸分布图。

    图6显示了II型所述式I的酸的微粒的XRP衍射图。

    图7显示了II型所述式I的酸的微粒在370(A)、2,000(B)、5,500(C)和10,000(D)的放大倍数下的SEM照片。

    图8显示了通过I型和II型微粒之间的相平衡获得的I型的所述酸的微粒的XRP衍射图。

    图9显示了无定形形式的式I的酸的XRP衍射图。

    图10显示了在使用CRTH2-转染细胞的竞争性放射性配体结合测定中式I的{4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基}乙酸的剂量应答曲线。

    图11显示了在使用DP1-转染细胞的竞争性放射性配体结合测定中式I的{4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基}乙酸(▲)和DPI-选择性拮抗剂BWA 868C(■)的剂量应答曲线。

    发明详述

    为了有利于理解本发明的公开，下文定义了一系列术语。

    除非另行指明，此处所用的单数形式的“一个”、“一种”和“该”可表示复数个物品。一般而言，此处所用的命名法和此处所述的有机化学、医药化学和药理学中的实验步骤均为本领域公知和常用。除非另行指明，此处所用的所有技术和科学术语通常与本公开所属领域的普通技术人员的一般理解具有相同的含义。对于此处一个术语存在多个定义的情况，除非另行指明，应采用本节所用定义。

    术语“抗溶剂”指被添加至溶剂以减少化合物在该溶剂中的溶解度，从而导致该化合物沉淀的液体。

    术语“个体”指动物，包括但不限于灵长动物(例如，人)、牛、绵羊、山羊、马、狗、猫、兔、大鼠或小鼠。典型地，术语“个体”和“患者”在此可互换使用以表示，例如，哺乳动物个体，特别是人类个体。

    术语“治疗”意在包括缓解或消除病症或疾病或者与该病症或疾病相关的一种或多种症状；或者缓解或消除该病症或疾病本身的病因。

    术语“预防”指延缓或防止疾病和/或其伴随症状发作，阻碍个体患病或减少个体患病风险的方法。

    术语“治疗有效量”指在施用时足以防止或在一定程度上减轻待治疗病症或疾病的一种或多种症状的进展的化合物的量。术语“治疗有效量”还指可引发研究者、兽医、医师或临床医生所希望的组织、系统、动物或人的生物或医学应答的化合物的量。

    术语“药学上可接受的载体”、“药学上可接受的赋形剂”、“生理学上可接受的载体”或“生理学上可接受的赋形剂”指药学上可接受的材料、组合物或运载体，例如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、溶剂或胶囊化材料。每种组分在与药物制剂的其它成分相容的意义上必须是“药学上可接受的”。它还必须适合用于与人和动物的组织或器官接触而没有过度的毒性、刺激性、过敏性应答、免疫原性或其它问题或并发症，具有合理的受益/风险比例。

    在涉及生物材料(例如核酸分子、多肽、宿主细胞等)时使用的术语“天然存在”或“天然的”指在自然界中发现且未经人操作过的材料。类似地，“非天然存在”或“非天然的”指在自然界中未发现的或被人进行过结构修饰或合成的材料。

    术语“CRTH2指CRTH2受体蛋白或其变体，其能够在体外或体内介导对PGD₂的细胞应答。CRTH2变体包括基本与天然CRTH2同源的蛋白，即与天然CRTH2的氨基酸序列相比具有一个或多个天然或非天然存在的氨基酸缺失、插入或替换的蛋白(例如，CRTH2衍生物、同系物和片段)。CRTH2变体的氨基酸序列与天然CRTH2具有至少约80％、至少约90％或至少约95％的一致性。

    术语“其它PGD₂受体”指非CRTH2的前列腺素类受体蛋白或其变体，其能够在体外或体内介导对PGD₂的细胞应答。“其它PGD₂受体”可对PGD₂(例如，DP)或其它一种或多种其它的前列腺素类具有选择性。“其它PGD₂受体”变体包括与相应非CRTH2的天然前列腺素类受体基本同源的蛋白，即具有一个或多个天然或非天然存在的氨基酸缺失、插入或替换的蛋白(例如，非CRTH2的天然前列腺素类受体的衍生物、同系物和片段)。天然“其它PGD₂受体”的变体的氨基酸序列与相应的天然“其它PGD₂受体”具有至少约80％、至少约90％或至少约95％的一致性。

    术语“CRTH2拮抗剂”指例如部分或完全阻断、减少、防止、抑制或下调CRTH2活性和/或一种或多种其它PGD₂受体活性的化合物。术语“CRTH2拮抗剂”还指与CRTH2或一种或多种其它PGD₂受体相结合、延缓其激活、使其失活或减敏的化合物。CRTH2拮抗剂可通过干扰PGD₂与CRTH2或一种或多种其它PGD₂受体的相互作用而产生作用。

    术语“CRTH2-介导的病症或疾病”和“CRTH2介导的不适、病症或疾病”指以不适当的(例如，小于或大于正常的)CRTH2活性为特征的不适、病症或疾病。不适当的CRTH2功能活性可引起通常不表达CRTH2的细胞表达CRTH2，提高CRTH2表达或胞内激活度，从而导致例如炎性和免疫相关的病症或疾病；或者可引起CRTH2表达的减少。CRTH2介导的不适、病症或疾病可由不适当的CRTH2活性完全或部分介导。具体而言，在CRTH2介导的不适、病症或疾病中，对CRTH2或一种或多种其它PGD₂受体的调节会对潜在不适或病症产生一些效果，例如，CRTH2拮抗剂或激动剂会导致至少部分待治疗患者的一些改善。

    术语“叩击体积密度”指在叩击的帮助下得到的致密填充状态的体积密度，例如通过将装填了样本的容器从预定高度反复落下以向该容器底部提供轻微冲击。叩击体积密度可通过，例如Powder Tester PT-D(HosokawaMicron Corporation，日本大阪)进行测定。

    术语“均匀系数”指体现了微粒的颗粒尺寸分布均匀度的参数，并被定义为从颗粒分布曲线获得的60％的颗粒尺寸除以10％的颗粒尺寸后所得的值。当颗粒尺寸分布越均匀，均匀系数越接近1。

     微粒

    本发明提供了无定形形式或者I型或II型结晶形式的4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基}乙酸的微粒。该式I的酸的微粒可通过本领域技术人员已知的多种方法进行表征，包括单晶X-射线衍射、X-射线粉末衍射(XRPD)、显微术(例如扫描电镜(SEM))、热分析(例如，差示扫描量热法(DSC)、热解重量分析(TGA)和热载台显微术)以及光谱学(例如，红外、拉曼、固态核磁共振)。颗粒尺寸和尺寸分布可通过常规方法测定，例如激光散射技术。该式I的酸的微粒的纯度可通过标准分析方法测定，例如薄层色谱(TLC)、凝胶电泳、气相色谱、高效液相色谱(HPLC)和质谱(MS)。

    在一实施方式中，{4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基}乙酸的微粒为I型结晶。在一实施方式中，该I型的微粒具有基本如图1所示的X-射线粉末衍射图谱。在另一实施方式中，该I型的微粒具有在约9.8、13.1、22.0和26.4°的2θ角处的特征XRP衍射峰。在另一实施方式中，该I型的微粒具有在约9.8、13.1、22.0或26.4°的2θ角处的特征XRP衍射峰。在另一实施方式中，该I型的微粒具有在约22.0°的2θ角处的特征XRP衍射峰。在另一实施方式中，该式I的微粒具有基本如图2所示的差示扫描量热法热谱图。在另一实施方式中，该I型的微粒具有峰值温度为约224℃且起始温度为约220℃的吸热的DSC热谱图。在另一实施方式中，该I型的微粒的结晶形态基本为针状(图4)。在另一实施方式中，该I型的微粒具有在室温下约3μg/mL的水溶性。

    在一实施方式中，所述I型的微粒具有约0.1至约150μm、约0.5至约100μm、约1至约50μm、约1至约25μm、约1至约20μm、约1至约10μm、约2至约10μm或约2至约7.5μm范围内的平均颗粒尺寸。在另一实施方式中，该I型的微粒通过均匀系数测定具有约1至约20、约1至约10、约2至约5或约3至约4范围内的均匀颗粒尺寸分布。在另一实施方式中，该I型的微粒具有约0.1至约1.0、约0.15至0.8、约0.2至约0.6、约0.25至约0.5或约0.3至约0.4g/mL范围内的叩击体积密度。

    具有该种颗粒特性的微粒可通过本发明所述的制备方法直接制备。或者，该种尺寸的微粒还可采用任意常规的颗粒加工方法(例如，研磨、微粉化或制粒)制备。本发明所提供的所述I型的微粒适于直接将所述式I的酸制备为治疗产品，从而简化生产工艺，并消除了常规颗粒加工方法所伴有的风险，例如不期望的多形体转化。

    在某些实施方式中，所述I型的式I的酸的微粒可包含按重量计不少于约95％、不少于约97％、不少于约98％、不少于约99％或不少于约99.5％的所述式I的酸。该微粒还可包含按重量计不少于约90％、不少于约95％、不少于约98％、不少于约99％或不少于约99.5％的所述I型的微粒。

    在某些的实施方式中，所述I型的式I的酸的微粒具有按重量计不大于约5％、不大于约2％、不大于约1％、不大于约0.9％、不大于0.8％、不大于约0.7％、不大于约0.6％、不大于约0.5％、不大于约0.4％、不大于约0.3％、不大于约0.2％、不大于约0.1％、不大于约0.05％或不大于约0.01％的残留有机溶剂含量。

    在某些的实施方式中，所述I型的式I的酸的微粒具有不大于约100,000ppm、不大于约10,000ppm、不大于约5,000ppm、不大于约4,000ppm、不大于约3,000ppm、不大于2,000ppm、不大于约1,000ppm、不大于约500ppm或不大于约100ppm的残留甲醇含量。

    在另一实施方式中，所述{4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基}乙酸的微粒为II型结晶。该II型的微粒具有基本如图6所示的X-射线粉末衍射图谱。该II型的微粒具有在约31.7°的2θ角处的特征XRP衍射峰。

    在一实施方式中，所述II型的微粒具有约0.1至约150μm、约0.5至约100μm、约1至约50μm、约1至约25μm、约1至约20μm、约1至约10μm、约1至约5μm或约2至约5μm范围内的平均颗粒尺寸。在另一实施方式中，该II型的微粒通过均匀系数测定具有约1至约20、约1至约10、约2至约5或约3至约4范围内的均匀颗粒尺寸分布。在另一实施方式中，该II型的微粒具有约0.1至约1.0、约0.15至0.8、约0.2至约0.6、约0.25至约0.5或约0.3至约0.4g/mL范围内的叩击体积密度。

    具有该种颗粒特性的微粒可通过本发明所述的制备方法直接制备。或者，该种尺寸的微粒还可采用任意常规方法(例如，研磨、微粉化或制粒)制备。

    在某些的实施方式中，所述II型的式I的酸的微粒可包含按重量计不少于约95％、不少于约97％、不少于约98％、不少于约99％或不少于约99.5％的所述式I的酸。该微粒还可包含按重量计不少于约90％、不少于约95％、不少于约98％、不少于约99％或不少于约99.5％的所述II型的微粒。

    在某些的实施方式中，所述II型的式I的酸的微粒具有按重量计不大于约5％、不大于约2％、不大于约1％、不大于约0.9％、不大于0.8％、不大于约0.7％、不大于约0.6％、不大于约0.5％、不大于约0.4％、不大于约0.3％、不大于约0.2％、不大于约0.1％、不大于约0.05％或不大于约0.01％的残留有机溶剂含量。

    在另一实施方式中，所述{4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基}乙酸的微粒为无定形的。该无定形的微粒具有基本如图9所示的X-射线粉末衍射图谱，其没有I型和/或II型微粒的特征XRP衍射峰。在一实施方式中，该无定形的微粒可包含按重量计不少于约95％、不少于约97％、不少于约98％、不少于约99％或不少于约99.5％的所述式I的酸。在另一实施方式中，该微粒还可包含按重量计不少于约90％、不少于约95％、不少于约98％、不少于约99％或不少于约99.5％的该无定形微粒。

    在某些的实施方式中，所述式I的酸的无定形微粒具有按重量计不大于约5％、不大于约2％、不大于约1％、不大于约0.9％、不大于0.8％、不大于约0.7％、不大于约0.6％、不大于约0.5％、不大于约0.4％、不大于约0.3％、不大于约0.2％、不大于约0.1％、不大于约0.05％或不大于约0.01％的残留有机溶剂含量。

    应当理解，X-射线粉末衍射图谱的峰的数值可在不同的机器或不同的样本间略有差别，因此所引用的数值不应解释为是绝对的，而是具有可允许的可变率，例如0.1°，该可变率被美国药典(2007版，第387-389页)推荐。

     制备方法

    本发明还提供了呈无定形形式、I型或II型结晶形式的所述式I的酸的微粒的制备方法。该方法包括将所述式I的酸与溶剂接触的步骤，其中无定形形式或者I型或II型结晶形式的所述式I的酸的微粒可从溶液中形成或者可从一种固体形式转化为另一种固体形式。该方法可进一步包括分离步骤，其中所述微粒通过常规方法分离，例如先过滤和离心，然后用溶剂洗涤，随后干燥(例如，真空炉干燥、空气干燥或干燥剂干燥)。

    用于制备无定形形式或者I型或II型结晶形式的微粒的合适溶剂包括但不限于：烃，包括石油醚、戊烷、己烷、庚烷、辛烷、异辛烷、环戊烷、环己烷、甲基环己烷、苯、甲苯、二甲苯、四氢萘和异丙苯；氯化烃，包括二氯甲烷(DCM)、1，2-二氯乙烷、1，1-二氯乙烯、1，2-二氯乙烯、氯仿、三氯乙烷、三氯乙烯、四氯化碳、氯苯和三氟甲基苯；醇，包括甲醇、乙醇、异丙醇(IPA)、1-丙醇、1-丁醇、2-丁醇、叔丁醇、3-甲基-1-丁醇、1-戊醇、2-甲氧乙醇、2-乙氧基乙醇和乙二醇；醚，包括二乙醚、二异丙醚、甲基叔丁基醚(MTBE)、二苯基醚、1，2-二甲氧基乙烷、二(2-甲氧基乙基)醚、1，1-二甲氧基甲烷、2，2-二甲氧基丙烷和苯甲醚；酮，包括丙酮、丁酮、甲基乙基酮(MEK)、甲基异丙基酮、甲基丁基酮和甲基异丁基酮(MIBK)；酯，包括乙酸甲酯、甲酸乙酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸异丙酯、乙酸异丁酯和乙酸丁酯；碳酸酯，包括碳酸次乙酯和碳酸次丙酯；酰胺，包括甲酰胺、N，N-二甲基甲酰胺(DMF)和N，N-二甲基乙酰胺；腈，包括乙腈(ACN)；亚砜，例如二甲亚砜(DMSO)；砜，如环丁砜；硝基化合物，如硝基甲烷和硝基苯；杂环，如N-甲基吡咯烷酮、2-甲基四氢呋喃、四氢呋喃(THF)、二噁烷和吡啶；羧酸，如乙酸、四氯乙酸和三氟乙酸；磷酰胺，如六甲基磷酰胺；二硫化碳；水；及其混合物。

    所述I型结晶形式的式I的酸的微粒可用所述式I的酸在溶剂中的溶液或浆液通过常规方法制备，该方法包括但不限于：冷却、冷冻、溶剂蒸发或添加抗溶剂。

    在一实施方式中，制备所述I型的微粒的方法包括如下步骤：(a)在第一温度下制备所述式I的酸在溶剂中的溶液；和(b)在第二温度下生成所述I型的微粒。为了加速该I型的微粒的形成，该方法还可包括在步骤(b)之前在所述溶液中用所述I型结晶接种的接种步骤。该方法进一步包括本发明所述的分离步骤。

    所述溶液可由所述式I的酸的任意形式制备，包括但不限于油、半固体、固体(例如无定形形式或者I或II型)或其混合物。步骤(a)的所述溶液可以制备为在第一温度下饱和或接近饱和的溶液。该饱和或接近饱和的溶液可通过将足量的所述式I的酸在高于第一温度的温度下溶解于所述溶剂中制备，从而，当将该溶液冷却至该第一温度时，获得饱和或接近饱和的溶液。该式I的酸的足量可根据在第一温度下所述I型的微粒在所述溶剂中的溶解度来进行估计，该溶解度可通过本领域技术人员已知的方法测定。

    所述第一温度可在从室温至该溶剂的沸点的范围内，例如，约20至约200℃、约20至约150℃或约20至约100℃。所述第二温度可在约-100至约100℃、约-50至约50℃、约-10至约30℃、约20至约200℃、约20至约150℃或约20至约100℃的范围内。该第一温度可高于或低于或者等于该第二温度。为了使所述方法的产量和效率最大化，该第二温度通常设定为低于第一温度。

    在一实施方式中，所述I型的微粒可通过在第二温度下从所述溶液中蒸发所述溶剂后形成。可通过加热该溶液和/或使该溶液真空来促进该溶剂蒸发。在一实施方式中，该溶剂为乙腈、二氯甲烷、DMF、1，4-二噁烷、甲醇、2-甲氧乙醇、MIBK、丙酮、1-丁醇、MTBE、DMSO、乙醇、乙酸乙酯、乙酸异丁酯、乙酸异丙酯、1-丙醇、IPA、MEK、THF或其混合物。

    在另一实施方式中，所述I型的微粒可通过将所述溶液冷却至所述第二温度形成。在该情况下，该第二温度被设定为低于所述第一温度。在一实施方式中，所述溶剂为DMF、1，4-二噁烷、甲醇、2-甲氧乙醇、1-丁醇、1-丙醇、IPA、MEK、THF或其混合物。

    在另一实施方式中，所述I型的微粒可通过在所述第二温度下向所述溶液添加抗溶剂形成。

    合适的抗溶剂包括但不限于：烃类，包括石油醚、戊烷、己烷、庚烷、辛烷、异辛烷、环戊烷、环己烷、甲基环己烷、苯、甲苯、二甲苯、四氢萘和异丙苯；氯化烃类，包括二氯甲烷(DCM)、1，2-二氯乙烷、1，1-二氯乙烯、1，2-二氯乙烯、氯仿、三氯乙烷、三氯乙烯、四氯化碳、氯苯和三氟甲基苯；醇类，包括异丙醇(EPA)、1-丙醇、1-丁醇、2-丁醇、叔丁醇、3-甲基-1-丁醇、1-戊醇、2-乙氧基乙醇和乙二醇；醚类，包括二乙醚、二异丙醚、甲基叔丁基醚(MTBE)、二苯基醚、1，2-二甲氧基乙烷、二(2-甲氧基乙基)醚、1，1-二甲氧基甲烷、2，2-二甲氧基丙烷和苯甲醚；酮类，包括丁酮、甲基异丙基酮、甲基丁基酮和甲基异丁基酮(MIBK)；酯类，包括乙酸甲酯、甲酸乙酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸异丙酯、乙酸异丁酯和乙酸丁酯；碳酸酯类，包括碳酸次乙酯和碳酸次丙酯；硝基化合物，包括硝基甲烷和硝基苯；杂环类；二硫化碳；水；及其混合物。

    当两种溶剂被用作溶剂/抗溶剂对时，所述式I的酸在溶剂中比在抗溶剂中具有更高的溶解度。任选地，在溶剂/抗溶剂对中的溶剂和抗溶剂是至少部分混溶的。在一实施方式中，该溶剂为THF、甲氧乙醇、DMSO、DMF或其混合物；而该抗溶剂为己烷、MTBE、甲苯水或其混合物。在另一实施方式中，该溶剂/抗溶剂对为THF/己烷、THF/水、DME/MTBE或DMF/水。

    在另一实施方式中，所述I型的微粒可通过在第二温度下将所述溶液添加到抗溶剂中形成。在一实施方式中，所述溶剂为THF、甲氧乙醇、DMSO、DMF或其混合物；而该抗溶剂为己烷、MTBE、甲苯、乙酸异丙酯、水或其混合物。在另一实施方式中，该溶剂/抗溶剂对为THF/己烷、THF/水、2-甲氧乙醇/己烷、DMSO/水或DMF/水。

    在另一实施方式中，制备所述I型的微粒的方法包括如下步骤：(a)在第一温度下制备式所述I的酸在溶剂中的浆液；和(b)通过将该浆液暴露至第二温度下生成所述I型的微粒。该浆液可由所述式I的酸的任意形式制备，包括但不限于，油、半固体、固体(例如无定形形式或者I或II型)或其混合物。该方法进一步包括本发明所述的接种步骤和/或分离步骤。

    所述第一和第二温度以及所述溶剂如本发明所定义。在一实施方式中，该溶剂为乙腈、氯仿、二氯甲烷、DMF、1，4-二噁烷、甲醇、2-甲氧乙醇、MIBK、甲苯、己烷、丙酮、1-丁醇、MTBE、DMSO、乙醇、乙酸乙酯、甲酸乙酯、庚烷、乙酸异丁酯、乙酸异丙酯、1-丙醇、IPA、MEK、THF、水或其混合物。

    在另一实施方式中，制备所述I型的微粒的方法包括如下步骤：(a)在第一温度下制备所述式I的酸在溶剂中的溶液；(b)通过将该溶液冷却至第二温度形成浆液；和(c)通过将该浆液暴露至一个或多个加热和冷却循环生成所述I型的微粒。该方法进一步包括本发明所述的接种步骤和/或分离步骤。

    所述第一和第二温度以及所述溶剂如本发明所定义。在一实施方式中，该溶剂为乙腈、1，4-二噁烷、2-甲氧乙醇、MIBK、丙酮、1-丁醇、乙醇、1-丙醇、IPA、MEK、THF、水/THF(3∶7，v/v)或其混合物。该加热和冷却循环在约-50至约120℃、约-50至约100℃、约-20至约80℃、约0至约80℃、约10至约80℃、从20至约80℃、约20至约60℃或约20至约50℃的温度范围内进行。

    所述II型结晶形式的式I的酸的微粒可用所述式I的酸在溶剂中的溶液或浆液通过常规方法制备，该方法包括但不限于：冷却、冷冻、溶剂蒸发或添加抗溶剂。

    在一实施方式中，制备所述II型的微粒的方法包括如下步骤：(a)在第一温度下制备所述式I的酸在溶剂中的溶液；和(b)在第二温度下生成所述II型的微粒。为了加速该II型的微粒的形成，该方法还可包括在步骤(b)之前在所述溶液中用该II型结晶接种的接种步骤。该方法进一步包括本发明所述的分离步骤。

    所述溶液可由所述式I的酸的任意形式制备，包括但不限于油、半固体、固体(例如无定形形式或者I或II型)或其混合物。步骤(a)的溶液可以制备为在第一温度下饱和或接近饱和的溶液。该饱和或接近饱和的溶液可通过将足量的所述式I的酸在高于第一温度的温度下溶解于所述溶剂中来制备，从而，在该溶液冷却至该第一温度时，获得该饱和或接近饱和的溶液。该式I的酸的足量可根据在第一温度下II型微粒在该溶剂中的溶解度来进行估计，该溶解度可通过本领域技术人员已知的方法测定。

    在一实施方式中，所述II型的微粒可通过在第二温度下从所述溶液中蒸发溶剂后形成。可通过加热该溶液和/或使该溶液真空来促进溶剂蒸发。在一实施方式中，该溶剂为DMF、1，4-二噁烷、甲醇、2-甲氧乙醇、1-丁醇、1-丙醇、IPA、MEK、THF或其混合物。

    在另一实施方式中，所述II型的微粒可通过将所述溶液冷却至第二温度形成。

    在另一实施方式中，所述II型的微粒可通过在第二温度下向所述溶液添加抗溶剂形成。在一实施方式中，所述溶剂为THF、甲氧乙醇、DMSO、DMF或其混合物；而该抗溶剂为己烷、MTBE、甲苯水或其混合物。

    在另一实施方式中，所述II型的微粒可通过在第二温度下将所述溶液添加至抗溶剂形成。在一实施方式中，所述溶剂为THF、甲氧乙醇、DMSO、DMF和其混合物；而该抗溶剂为己烷、MTBE、甲苯水和其混合物。在另一实施方式中，该溶剂/抗溶剂对为DMF/MTBE。

    在另一实施方式中，制备所述II型的微粒的方法包括如下步骤：(a)在第一温度下制备所述式I的酸在溶剂中的浆液；和(b)通过将该浆液暴露至第二温度下生成所述II型的微粒。该浆液可由式I的酸的任意形式制备，包括但不限于油、半固体、固体(例如无定形形式或者I或II型)或其混合物。该方法进一步包括本发明所述的接种步骤和/或分离步骤。

    所述第一和第二温度以及所述溶剂如本发明所定义。在一实施方式中，该溶剂为乙腈、氯仿、二氯甲烷、DMF、1，4-二噁烷、甲醇、2-甲氧乙醇、MIBK、甲苯、己烷、丙酮、1-丁醇、MTBE、DMSO、乙醇、乙酸乙酯、甲酸乙酯、庚烷、乙酸异丁酯、乙酸异丙酯、1-丙醇、IPA、MEK、THF、水或其混合物。

    所述无定形的式I的酸的微粒可用式I的酸在溶剂中的溶液或浆液通过常规方法制备，该方法包括但不限于：冷却、冷冻、溶剂蒸发或添加抗溶剂。

    在一实施方式中，制备所述无定形的式I的酸的微粒的方法包括如下步骤：(a)在第一温度下制备所述式I的酸在溶剂中的溶液；和(b)在第二温度下生成所述无定形微粒。该方法还可包括本发明所述的分离步骤。

    所述溶液可由式I的酸的任意形式制备，包括但不限于油、半固体、固体(例如无定形形式或者I或II型)或其混合物。步骤(a)的溶液可以制备为在第一温度下饱和或接近饱和的溶液。该饱和或接近饱和的溶液可通过将足量的所述式I的酸在高于第一温度的温度下溶解于所述溶剂中来制备，从而，当该溶液冷却至该第一温度时，获得该饱和或接近饱和的溶液。该式I的酸的足量可根据在第一温度下所述无定形微粒在溶剂中的溶解度来进行估计，该溶解度可通过本领域技术人员已知的方法测定。

    在一实施方式中，所述无定形微粒可通过在第二温度下从所述溶液中蒸发溶剂后形成。可通过加热该溶液和/或使该溶液真空来促进溶剂蒸发。在一实施方式中，该溶剂为甲酸乙酯、乙酸异丁酯、MTBE或其混合物。

    在另一实施方式中，所述无定形微粒可通过将所述溶液冷却至第二温度形成。在一实施方式中，所述溶剂为MEK。

    在另一实施方式中，所述无定形微粒可通过在第二温度下向所述溶液添加抗溶剂形成。在一实施方式中，所述溶剂为THF、甲氧乙醇、DMSO、DMF或其混合物；而该抗溶剂为己烷、MTBE、甲苯、水或其混合物。在另一实施方式中，该溶剂/抗溶剂对为THF/己烷或DMSO/水。

    在另一实施方式中，所述无定形微粒可通过在第二温度下将所述溶液添加至抗溶剂形成。在一实施方式中，所述溶剂为THF、甲氧乙醇、DMSO、DMF或其混合物；而该抗溶剂为己烷、MTBE、甲苯水或其混合物。在另一实施方式中，该溶剂/抗溶剂对为THF/己烷或DMSO/水。

    在另一实施方式中，制备所述无定形的式I的酸的微粒的方法包括如下步骤：(a)在第一温度下制备所述式I的酸在溶剂中的浆液；和(b)在第二温度下通过相转化生成所述无定形微粒。该浆液可由所述式I的酸的任意形式制备，包括但不限于油、半固体、固体(例如无定形形式或者I或II型)或其混合物。该第一和第二温度以及该溶剂如本发明所定义。在一实施方式中，该溶剂为氯仿、己烷、MTBE、甲酸乙酯、庚烷、IPA、水或其混合物。

    其它的微粒形成方法也可用于制备所述无定形形式或者I型或II型结晶形式的式I的酸的微粒，这些方法包括喷雾干燥、滚筒干燥、冷冻干燥和熔体结晶。

     药物组合物

    本发明还提供了药物组合物，其包含作为活性药物成分的呈无定形形式或者I型或II型结晶形式的{4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基}乙酸，或其药学上可接受的水合物或溶剂化物的微粒，以及一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂。赋形剂的选择很大程度上依赖于某些因素，例如具体施用模式、赋形剂对该活性成分的溶解度和稳定性的影响以及该剂型的性质。

    本发明所提供的药物组合物可作为单位剂型或多重剂型提供。本文所用的单位剂型指本领域已知的适合施用至人和动物个体并单独包装的物理分散单元。每个单位剂型包含了足以生成所需治疗效果的预定量的活性成分，以及所需的药物载体或赋形剂。单位剂型的范例包括安瓿和注射器以及单独包装的片剂和胶囊。单位剂型可部分施用或者施用多份。多重剂型是包装在单个容器中的多个相同单位剂型，以分离的单位剂型施用。示范性的多重剂型包括小瓶，片剂或胶囊的瓶子，或品脱或加仑瓶。

    本发明所提供的所述式I的酸的微粒可单独施用，或与本发明所提供的一种或多种其它化合物、一种或多种其它活性成分联合施用。本发明所提供的药物组合物可配制为各种用于口服、肠胃外和局部施用的剂型。该药物组合物还可配制为改良释放的剂型，包括延缓、扩大、延长、持续、脉动、受控、加速和快速、靶向、程序释放以及胃潴留的剂型。这些剂型可参照本领域技术人员已知的常规方法和技术制备(参见Remington：TheScience and Practice of Pharmacy，同上；Modified-Release Drug DeliverTechnology，Rathbone等人编，Drugs and the Pharmaceutical Science，MarcelDekker，Inc.：New York，NY，2002；Vol.126)。

    本发明所提供的药物组合物可以施用一次或以一定时间间隔施用多次。应理解，确切的剂量和治疗时间可随着待治疗患者的年龄、体重和状况而变化，并可通过已知的测试方案经验地确定或可从体内或体外测试或诊断数据推断得到。进一步地应该理解，对于具体的个体，特定的给药方案应当根据个体需求和施用或指导施用该剂型的人员的专业判断随时间进行调整。

    A.口服施用

    本发明所提供的药物组合物可作为用于口服施用的固体、半固体或液体剂型提供。此处所用的口服施用还包括口腔、舌部和舌下施用。合适的口服剂型包括但不限于：片剂、胶囊、丸剂、锭剂、糖锭、软锭剂、扁囊剂、弹丸剂、含药口香糖、颗粒、散装粉剂、泡腾或非泡腾粉末或颗粒、溶液、乳剂、悬浮液、溶液、糯米纸囊剂、喷剂、酏剂和糖浆。除了所述活性成分，该药物组合物还可包含一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂，包括但不限于结合剂、填充剂、稀释剂、崩解剂、润湿剂、润滑剂、助流剂、着色剂、染料迁移抑制剂、甜味剂以及调味剂。

    结合剂和造粒剂使得片剂粘合在一起，以确保片剂在压缩后保持完整。合适的结合剂或造粒剂包括但不限于：淀粉，例如玉米淀粉、马铃薯淀粉以及预磨淀粉(例如，STARCH 1500)；明胶；糖，例如蔗糖、葡萄糖、葡聚糖、糖蜜以及乳糖；天然和合成胶，例如阿拉伯胶、藻酸、藻酸盐、爱尔兰藓萃取物、Panwar胶、印度树胶、依莎贝果壳的胶、羧甲基纤维素、甲基纤维素、聚乙烯吡咯酮(PVP)、硅酸镁铝、落叶松阿拉伯半乳聚糖、粉状黄芪胶、以及瓜尔胶；纤维素，例如乙基纤维素、纤维素醋酸酯、羧甲基纤维素钙、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟乙基纤维素(HEC)、羟丙基纤维素(HPC)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)；微晶纤维素，例如AVICEL-PH-101、AVICEL-PH-103、AVICELRC-581、AVICEL-PH-105(FMC Corp.，MarcusHook，PA)；及其混合物。合适的填充剂包括但不限于滑石、碳酸钙、微晶纤维素、粉状纤维素、葡聚糖、高岭土、甘露糖醇、硅酸、山梨糖、淀粉、预胶化淀粉及其混合物。结合剂和填充剂可以以本发明所提供的药物组合物的重量的约50至约99％的量存在。

    合适的稀释剂包括但不限于磷酸钙、硫酸钙、乳糖、山梨糖醇、蔗糖、肌醇、纤维素、高岭土、甘露糖醇、氯化钠、干淀粉以及粉状糖。某些稀释剂，例如甘露糖醇、乳糖、山梨糖醇、蔗糖和肌醇，以足量存在时可使得部分压制片剂能够在嘴中通过咀嚼崩解。该种压制片剂可被用作咀嚼片。

    合适的崩解剂包括但不限于：琼脂；斑脱土；纤维素，例如甲基纤维素和羧甲基纤维素；木制品；天然海绵；阳离子交换树脂；海藻酸；胶，例如瓜尔胶和硅酸镁铝HV；柑桔渣；交联纤维素，例如交联甲羧纤维素；交联聚合物，例如交聚维酮；交联淀粉；碳酸钙；微晶纤维素，例如淀粉羟乙酸钠；聚克立林钾；淀粉，例如玉米淀粉，马铃薯淀粉，木薯淀粉以及预胶化淀粉；粘土；褐藻酸(aligns)；及其混合物。崩解剂在本发明所提供的药物组合物中的量可随着制剂类型而变化，并可被本领域普通技术人员所轻易识别。本发明所提供的药物组合物可包含以重量计约0.5至约15％或约1至约5％的崩解剂。

    合适的润滑剂包括但不限于：硬脂酸钙；硬脂酸镁；矿物油；轻矿物油；甘油；山梨糖醇；二醇类，如甘油山嵛酸酯和聚乙二醇(PEG)；硬脂酸；月桂酸酯硫酸钠；滑石；氢化植物油，包括花生油、棉籽油、向日葵油、芝麻油、橄榄油、玉米油、以及大豆油；硬脂酸锌；油酸乙酯；月桂酸乙酯；琼脂；淀粉；石松子；硅石或硅胶，例如200(W.R.Grace Co.，Baltimore，MD)和CAB-O-(Cabot Co.，Boston，MA)；及其混合物。本发明所提供的药物组合物可包含以重量计约0.1至约5％的润滑剂。

    合适的助流剂包括胶体二氧化硅、CAB-O-(Cabot Co.，Boston，MA)和无石棉滑石。着色剂包括任意经批准的、被认证的水溶性FD&C染料和在水合氧化铝上悬浮的水不溶性FD&C染料和色淀及其混合物。色淀将水溶性染料吸附在含水重金属氧化物上的组合，其形成了染料的不溶性形式。调味剂包括从水果等植物中提取的天然调味料，以及能产生愉快味觉的合成化合物的混合物，例如薄荷和水杨酸甲酯。甜味剂包括蔗糖、乳糖、甘露糖醇、糖浆、甘油和人工增甜剂，例如糖精和阿司帕坦。合适的乳化剂包括明胶、阿拉伯胶、黄芪胶、斑脱土和表面活性剂，例如聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯(20)、聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯(80)、以及三乙醇胺油酸酯。悬浮剂和分散剂包括羧甲基纤维素钠、胶质、黄芪胶、硅酸镁铝、阿拉伯胶、羰甲基纤维素钠、羟丙基甲基纤维素、以及聚乙烯吡咯烷酮。防腐剂包括甘油、对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯、苯甲酸、苯甲酸钠和乙醇。润湿剂包括丙二醇单硬脂酸酯、山梨糖醇酐单油酸酯、二甘醇单月桂酸酯和聚氧乙烯月桂酸醚。溶剂包括甘油、山梨醇、乙醇和糖浆。用于乳剂的非水性液体的范例包括矿物油和棉花籽油。有机酸包括柠檬酸和酒石酸。二氧化碳源包括重碳酸钠和碳酸钠。

    应当理解，许多载体和赋形剂可具有多种功能，即使在相同的制剂内。

    本发明所提供的药物组合物可作为压制片剂、研制片剂、咀嚼糖锭、快速溶解片剂、复压片剂或者肠衣片剂、糖衣或膜衣片剂提供。肠衣片剂是涂覆了能够耐受胃酸作用但在肠内溶解或崩解的物质，从而可以在胃的酸性环境中保护活性成分的压制片剂。肠衣包括但不限于脂肪酸、脂肪、苯基水杨酸酯、蜡、虫胶、氨化虫胶和醋酸纤维素邻苯二甲酸酯。糖衣片剂为包覆了糖衣的压制片剂，糖衣有助于掩盖不好的味道或气味并防止片剂氧化。膜衣片是包覆了薄层或水溶性物质膜的压制片剂。膜衣包括但不限于羟乙基纤维素、羧甲基纤维素钠、聚乙二醇4000和醋酸纤维素邻苯二甲酸。膜衣可带来与糖衣相同的总体特征。复压片为通过一次以上的压制循环制备的压制片剂，其包括分层片和压制包衣片或干包衣片。

    所述片剂剂型可用呈粉状、结晶或颗粒形式的活性成分单独或联合一种或多种本发明所述的载体或赋形剂(包括结合剂、崩解剂、控释聚合物、润滑剂、稀释剂和/或看色剂)制备而成。调味和甜味剂对于形成咀嚼片和锭剂是特别是有用的。

    本发明所提供的药物组合物可作为软或硬胶囊提供，该软或硬胶囊可由明胶、甲基纤维素、淀粉或藻酸钙制成。该硬明胶胶囊(也称为干填充胶囊(DFC))由两部分组成，一个部分滑动覆盖另一部分，从而完全封装所述活性成分。软弹性胶囊(SEC)是软的、球状壳，例如明胶壳，其通过添加甘油、山梨醇或类似多元醇被塑化。软明胶壳可包含防腐剂以预防微生物生长。合适的防腐剂已本发明已有描述，包括对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯，和山梨酸。本发明所提供的液体、半固体和固体剂型可包封在胶囊中。合适的液体和半固体剂型包括在碳酸次丙酯、植物油或甘油三酸酯中的溶液和悬浮液。包含该种溶液的胶囊参照美国专利4,328,245、4,409,239和4,410,545所述进行制备。该胶囊还可通过本领域技术人员已知的方式包衣，从而限制或维持活性成分的分解。

    本发明所提供的药物组合物可以以液体和半固体剂型提供，包括乳剂、溶液、悬浮液、酏剂和糖浆。乳剂是一种两相体系，其中一种液体以细小颗粒形式完全分散在另一种液体中，其可以是水包油或油包水。乳剂可包含药学上可接受的非水性液体或溶剂、乳化剂和防腐剂。悬浮液可包含药学上可接受的悬浮剂和防腐剂。水性醇溶液可包含药学上可接受的缩醛，例如低级烷基醛的二(低级烷基)缩醛(术语“低级”指具有1至6个碳原子的烷基)，例如乙醛二乙缩醛；以及具有一个或多个羟基基因的与水混溶的溶剂，例如丙二醇和乙醇。酏剂是透明的、增甜的水醇溶液。糖浆为糖(例如，蔗糖)的浓缩水溶液，还可能包含防腐剂。对于液体剂型，例如，在聚乙二醇中的溶液，可以用足量的药学上可接受的液体载体(例如水)稀释，从而便于量取施用。

    其它有用的液体和半固体剂型包括但不限于包含本发明所提供的活性成分，以及二烷基化的单或多烷撑二醇，包括1，2-二甲氧基甲烷、二甘醇二甲醚、三甘醇二甲醚、四乙醇二甲醚、聚乙二醇-350-二甲醚、聚乙二醇-550-二甲醚、聚乙二醇-750-二甲醚(其中350、550和750指聚乙二醇大约的平均分子量)的剂型。这些制剂可进一步包含一种或多种抗氧化剂，例如丁基化的羟基甲苯(BHT)、丁基化的羟基苯甲醚(BHA)、没食子酸丙酯、维生素E、氢醌、羟基香豆素、乙醇胺、卵磷脂、脑磷脂、抗坏血酸、羟基丁二酸、山梨糖醇、磷酸、重亚硫酸盐、焦亚硫酸钠、硫二丙酸及其酯以及二硫代氨基甲酸酯。

    本发明所提供的用于口服施用的药物组合物还可以以脂质体、微团、微球体或纳米系统的形式提供。微团剂型可如美固专利6,350,458所述进行制备。

    本发明所提供的药物组合物还可以作为非泡腾的或泡腾的、将被复原为液体剂型的颗粒和粉末的形式提供。用于该非泡腾颗粒或粉末的药学上可接受的载体和赋形剂可包括稀释剂、甜味剂和润湿剂。用于该泡腾颗粒或粉末的药学上可接受的载体和赋形剂可包括有机酸和二氧化碳源。

    着色剂和调味剂可用于上述所有剂型。

    本发明所提供的药物组合物可配制为直接的或改良的释放剂型，包括延缓的、持续的、脉冲的、受控的、靶向的和程序的释放形式。

    本发明所提供的药物组合物可与其它不损害所需治疗作用的活性成分或与补充所需作用的物质如抗酸剂、质子泵抑制剂和H2-受体拮抗剂联合配制。

    B.肠胃外施用

    本发明所提供的药物组合物还可通过肠胃外注射、输注或灌输施用，从而进行局部或全身施用。此处所用的肠胃外施用包括静脉内、动脉内、腹膜内、囊内、心室内、尿道内、胸骨内、颅内、肌肉内、滑膜内以及皮下施用。

    本发明所提供的药物组合物可以配制成任意适合肠胃外施用的剂型，包括溶液、悬浮液、乳剂、微团、脂质体、微球体、纳米系统和适于在注射前在液体中形成溶液或悬浮液的固体形式。这些剂型可参照药物科学领域技术人员已知的常规方法制备(参见前述Remington：The Science andPractice of Pharmacy)。

    用于肠胃外施用的药物组合物可包括一种或多种药学上可接受的载体和赋形剂，包括但不限于水性运载体、与水混溶的运载体、非水性运载体、对抗微生物生长的抗菌剂或防腐剂、稳定剂、助溶剂、等张剂、缓冲剂、抗氧化剂、局部麻醉剂、悬浮剂和分散剂、润湿剂或乳化剂、络合剂、多价螯合或螯合剂、冷冻保护剂、冻干保护剂、增稠剂、pH调节剂和惰性气体。

    合适的水性运载体包括但不限于水、盐水、生理盐水或磷酸盐缓冲盐水(PBS)、氯化钠注射液、林格注射液、等张葡聚糖注射液、无菌水注射液、葡聚糖和乳酸化林格注射液。非水性运载体包括但不限于植物来源的不挥发性油、蓖麻油、玉米油、棉籽油、橄榄油、花生油、薄荷油、红花油、芝麻油、大豆油、氢化植物油、氢化大豆油以及椰油的中链甘油三酸酯和棕榈籽油。与水混溶的运载体包括但不限于乙醇、1，3-丁二醇、液体聚乙二醇(例如，聚乙二醇300和聚乙二醇400)、丙二醇、甘油、N-甲基-2-吡咯烷酮、二甲基乙酰胺和二甲亚砜。

    合适的抗菌剂或防腐剂包括但不限于苯酚、甲酚、汞制剂、苄醇、氯丁醇、对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯、硫柳汞、杀藻胺、氯化苄乙氧铵、对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯以及山梨酸。合适的等张剂包括但不限于氯化钠、甘油和葡聚糖。合适的缓冲剂包括但不限于磷酸盐和柠檬酸盐。合适的抗氧化剂如本发明所述，包括重亚硫酸盐和焦亚硫酸钠。合适的局部麻醉剂包括但不限于盐酸普鲁卡因。合适的悬浮剂和分散剂如本发明所述，包括羧甲基纤维素钠、羟丙级甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷酮。合适的乳化剂包括如本发明所述的那些，包括聚氧乙烯山梨醇单月桂酸酯、聚氧乙烯山梨醇单月桂酸酯80以及油酸三乙醇胺。合适的多价螯合或螯合剂包括但不限于EDTA。合适的pH调节剂包括但不限于氢氧化钠、盐酸、柠檬酸和乳酸。合适的络合剂包括但不限于环式糊精，包括α-环式糊精、β-环式糊精、羟丙基-β-环式糊精、硫丁醚-β-环式糊精以及硫丁醚7-β-环式糊精(CyDex，Lenexa，KS)。

    本发明所提供的药物组合物可配制成单剂量或多剂量施用。单剂量制剂可包装在安瓿，小瓶或注射器中。多剂量肠胃外制剂必须包含抑菌或抑真菌浓度的抗菌剂。如本领域已知和实践的，所有的肠胃外制剂必须是无菌的。

    在一实施方式中，所述药物组合物被提供成随时可用的无菌溶液。在另一实施方式中，该药物组合物被提供成无菌干可溶产物，包括冻干粉和皮下注射用片剂，其可在使用前用运载体复原。在另一实施方式中，该药物组合物被提供成随时可用的无菌悬浮液。在另一实施方式中，该药物组合物被提供成无菌干不溶性产物，其可在使用前用运载体复原。在另一实施方式中，该药物组合物被提供为随时可用的无菌乳剂。

    本发明所提供的药物组合物可配制为直接的或改良的释放剂型，包括延缓的、持续的、脉冲的、受控的、靶向的和程序的释放形式。

    所述药物组合物可被配制为悬浮液、固体、半固体或摇溶液体，用于作为植入储藏剂施用。在一实施方式中，本发明所提供的药物组合物分散在固相内部基质中，该内部基质被外部聚合膜围绕，该膜不溶于体液，但允许药物组合物中的活性成分通过其扩散。

    合适的内部基质包括聚甲基丙烯酸甲酯，聚丁基丙烯酸甲酯，塑化或未塑化聚氯乙烯，塑化尼龙，塑化聚乙醇对苯二酸酯，天然橡胶，聚异戊二烯，聚异丁烯，聚丁二烯，聚乙烯，乙烯醋酸乙烯共聚物，硅橡胶，聚二甲基硅氧烷，碳酸盐岩有机硅共聚物，亲水聚合物例如丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯的水凝胶，胶原蛋白，交联聚乙烯醇和部分交联水解聚醋酸乙烯酯。

    合适的外部聚合膜包括聚乙烯，聚丙烯，乙烯/丙烯共聚物，乙烯/丙烯酸乙酯共聚物、乙烯/醋酸乙烯酯共聚物、硅酮橡胶、聚二甲基硅氧烷，氯丁橡胶，氯化聚乙烯，聚氯乙烯，氯乙烯与醋酸乙烯酯共聚物，偏二氯乙烯，乙烯和丙烯，离子聚对苯二甲酸乙二醇酯，丁基橡胶，环氧氯丙烷橡胶，乙烯/乙烯醇共聚物，乙烯/醋酸乙烯/乙烯醇三聚物，以及乙烯/乙烯氧基醇共聚物。

    C.局部施用

    本发明所提供的药物组合物可局部施用至皮肤、孔口或粘膜。此处所用的局部施用包括皮肤(内)、结膜、角膜内、眼内、眼部、耳部、透皮、鼻部、阴道、尿道、呼吸道和直肠施用。

    本发明所提供的药物组合物可配制为适于局部施用以产生局部或全身效果的任意剂型，包括乳剂、溶液、悬浮液、乳膏、凝胶、水凝胶、软膏、粉剂、敷料、酏剂、洗剂、悬浮液、酊剂、糊剂、泡沫剂、膜、气雾剂、灌洗剂、喷剂、栓剂、绷带、皮肤贴剂。本发明所提供的药物组合物的局部制剂还可包括脂质体、微团、微球体、纳米系统及其混合物。

    用于本发明所提供的局部制剂的药学上可接受的载体和赋形剂包括但不限于水性运载体、与水混溶的运载体、非水性运载体、对抗微生物生长的抗菌剂或防腐剂、稳定剂、助溶剂、等张剂、缓冲剂、抗氧化剂、局部麻醉剂、悬浮剂和分散剂、润湿剂或乳化剂、络合剂、多价螯合或螯合剂、渗透促进剂、冷冻保护剂、冻干保护剂、增稠剂和惰性气体。

    所述药物组合物还可通过电穿孔、离子电渗、超声透入、超声促透以及显微针或无针注射如POWDERJECT^TM(Chiron Corp.，Emeryville，CA)和BIOJECT^TM(Bioject Medical Technologies Inc.，Tualatin，OR)局部施用。

    本发明所提供的药物组合物还可以以软膏、乳膏和凝胶的形式提供。合适的软膏运载体包括油质的或碳氢化合物基质，包括例如猪脂、苯甲酸猪脂、橄榄油、棉籽油和其它的油，白凡士林；可乳化或吸收的基质，例如亲水凡士林、硫酸羟基硬脂精以及无水羊毛脂；可用水去除的基质，例如亲水软膏；水溶性软膏基质，包括各种分子量的聚乙二醇；乳化基质，其为油包水(W/O)或水包油(O/W)乳剂，包括十六烷醇、单硬脂酸甘油酯、羊毛脂和硬脂酸(参见Remington：The Science and Practice of Pharmacy)。这些运载体为软化剂，但通常需要添加抗氧化剂和防腐剂。

    合适的乳膏可以是水包油或油包水的。乳膏运载体可以是可水洗的，且可包含油相、乳化剂和水相。油相也被称为“内”相，其通常由凡士林和脂肪醇如十六烷醇或硬脂醇组成。水相通常(尽管并非必须)在体积上超过油相，并通常包含湿润剂。乳膏制剂中的乳化剂可以是非离子型、阴离子型、阳离子型或两性离子表面活性剂。

    凝胶为半固体的悬浮型系统。单相凝胶包含在液体载体中基本均匀分布的有机大分子。合适的胶凝剂包括交联丙烯酸聚合物，例如卡波姆、羧聚烷撑、亲水聚合物，例如聚氧化乙烯、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物以及聚乙烯醇；纤维质聚合物，例如羟丙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、邻苯二甲酸和甲基纤维素；树胶，例如黄芪胶和黄原胶；海藻酸钠；以及明胶。为了制备均匀的凝胶，可添加分散剂如醇或甘油，或者可通过研碎、机械混合和/或搅拌分散胶凝剂。

    本发明所提供的药物组合物可以以栓剂、阴道药栓、杆剂、泥敷剂或泥罨剂、糊剂、粉末、敷料、乳膏、膏药、避孕剂、软膏、溶液、乳剂、悬浮液、止血栓、凝胶、泡沫、喷剂或灌肠剂的形式通过直肠、尿道、阴道或阴道周围施用。这些剂型可采用如上所述的Remington：The Science andPractice of Pharmacy所述的常规方法制备。

    直肠、尿道和阴道栓剂是插入身体孔口的固体实体，其在常温下为固体，但在体温下溶解或软化以在孔口内释放活性成分。可用于直肠和阴道栓剂的药学上可接受的载体包括运载体，例如硬化剂，其在与本发明所提供的药物组合物一起配制时形成在体温左右的熔点；以及本发明所述的抗氧化剂，包括重亚硫酸盐和焦亚硫酸钠。合适的运载体包括但不限于可可脂(可可油)，甘油-明胶，carbowax(聚乙二醇)，鲸蜡油，石蜡，白蜡和黄蜡以及脂肪酸的单、双和三甘油三酸酯的合适混合物，水凝胶，例如聚乙烯醇、羟乙基甲基丙烯酸酯、聚丙烯酸；甘油明胶。可使用各种运载体的组合。直肠和阴道栓剂可通过压缩法或通过制模进行制备。直肠和阴道栓剂的典型重量为2-3g。

    本发明所提供的药物组合物可以以溶液、悬浮液、软膏、乳剂、成凝胶溶液、用于溶液的粉末、凝胶、眼插入物和植入物的形式眼部施用。

    本发明所提供的药物组合物可通过鼻内或吸入而施用至呼吸道。该药物组合物可以以气雾剂或溶液的形式提供，以使用压力容器、泵、喷射器、雾化器(例如利用电流体动力学生成细微薄雾的雾化器)或喷雾器单独或与合适的助推剂(例如1，1，1，2-四氟乙烷或1，1，1，2，3，3，3-七氟丙烷)组合进行传递。该药物组合物还可以单独地或与惰性载体(乳糖或磷脂)组合作为吸入干粉，和鼻滴剂提供。为了进行鼻内使用，该粉末可包含生物粘附剂，包括壳聚糖或环化糊精。

    可用于压力容器、泵、喷射器、雾化器或喷雾器的溶液或悬浮液可配制为包含乙醇、乙醇水溶液或用于分散、溶解或延长释放本发明所提供的活性成分的合适替代试剂、作为溶剂的推进剂；和/或表面活性剂，例如去水山梨糖醇三油酸酯、油酸或寡聚乳酸。

    本发明所提供的药物组合物可被微粒化成通过吸入传递的合适大小，例如50微米或更小，或者10微米或更小。该种大小的颗粒可通过本领域技术人员已知的研粉方法制备，该方法包括螺旋喷流研磨、流化床喷流研磨、超临界流体处理形成纳米颗粒、高压匀浆或喷雾干燥。

    在吸入器、吹入器中使用的胶囊、发泡药和药筒可被配制以包含本发明所提供的药物组合物的粉末混合物；合适的粉末基质，如乳糖或淀粉；以及性能调节剂，例如1-亮氨酸、甘露糖醇或硬脂酸镁。该乳糖可以是无水乳糖或单水合乳糖。其它合适的赋形剂包括葡聚糖、葡萄糖、麦芽糖、山梨糖醇、木糖醇、果糖、蔗糖和海藻糖。本发明所提供的用于吸入/鼻内施用的药物组合物可进一步包含合适的调味剂如薄荷醇和左薄荷脑，或者甜味剂如糖精或糖精钠。

    本发明所提供的用于局部施用的药物组合物可配制为直接的或改良的释放剂型，包括延缓的、持续的、脉冲的、受控的、靶向的和程序的释放形式。

    D.改良释放

    本发明所提供的药物组合物可配制为改良释放剂型。本文所用的术语“改良释放”指活性成分释放的速率和位置与以相同途径施用的即刻剂型不同的剂型。改良释放剂型包括延缓、延长、扩大、持续、脉动或脉冲、受控、加速或快速、靶向、程序释放，以及胃潴留的剂型。改良释放剂型中的药物组合物可通过本领域技术人员已知的各种改良释放装置(modifiedrelease devices)和方法制备，包括但不限于：基体控释装置、渗透控式装置、多粒子控释装置、离子交换树脂、肠衣、多层涂层、微球体、脂质体及其组合。活性成分的释放速率还可通过改变活性成分的颗粒大小和多形体来进行改良。

    改良释放的例子包括但不限于，描述于美国专利中3,845,770、3,916,899、3,536,809、3,598,123、4,008,719、5,674,533、5,059,595、5,591,767、5,120,548、5,073,543、5,639,476、5,354,556、5,639,480、5,733,566、5,739,108、5,891,474、5,922,356、5,972,891、5,980,945、5,993,855、6,045,830、6,087,324、6,113,943、6,197,350、6,248,363、6,264,970、6,267,981、6,376,461、6,419,961、6,589,548、6,613,358和6,699,500的那些。

    1.基体控释装置

    在改良释放剂型中的本发明所提供的药物组合物可采用本领域技术人员已知的基体控释装置制备(参见Takada等人in″Encyclopedia ofControlled Drug Delivery，″Vol.2，Mathiowitz编，Wiley，1999)。

    在一实施方式中，在改良释放剂型中的本发明所提供的药物组合物可采用易蚀基体装置配制，该易蚀基体装置为水可膨胀的、易蚀的或可溶性的聚合物，包括合成聚合物和天然存在聚合物和衍生物，例如多糖和蛋白。

    可用于形成易蚀基体的材料包括但不限于：几丁质、壳聚糖、葡聚糖和支链淀粉；琼脂胶、阿拉伯树胶、梧桐胶、卡罗布胶、黄芪树胶、角叉菜胶、印度树胶、瓜尔胶、黄原胶和硬葡聚糖；淀粉，例如糊精和麦芽糖糊精；亲水胶体，例如果胶；磷脂，例如卵磷脂；海藻酸盐；藻酸丙二醇酯；明胶；胶原质；以及有纤维质材料，例如乙级纤维素(EC)、甲基乙烯纤维素(MEC)、羧甲基纤维素(CMC)、CMEC、羟乙基纤维素(HEC)、羟丙基纤维素(HPC)、醋酸纤维素(CA)、丙酸纤维素(CP)、丁酸纤维素(CB)、醋酸丁酸纤维素(CAB)、CAP、CAT、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、HPMCP、HPMCAS、醋酸偏三苯酸羟丙基甲基纤维素(HPMCAT)以及乙基羟基乙基纤维素(EHEC)；聚乙烯吡咯烷酮；聚乙烯醇；聚醋酸乙烯酯；甘油脂肪酸酯；聚丙烯酰胺；聚丙烯酸；乙基丙烯酸或甲基丙烯酸共聚物(Rohm America，Inc.，Piscataway，NJ)；聚(2-羟乙基-甲基丙烯酸酯)；聚乳酸；L-谷氨酸和乙基-L-谷氨酰胺的共聚物；可降解的乳酸-羟基乙酸共聚物；聚-D-(-)-3-羟基丁酸；以及其它的丙烯酸衍生物，例如丁基甲基丙烯酸酯、甲基甲基丙烯酸酯、乙基甲基丙烯酸酯、乙基丙烯酸酯、(2-二甲氨基乙基)甲基丙烯酸酯和(三甲氨基乙基)氯化甲基丙烯酸酯的同聚物和共聚物。

    在另一实施方式中，所述药物组合物与非易蚀基体装置一起配制。该活性成分溶解或分散于惰性基体中，并在施用时主要通过扩散通过该惰性基体而被释放。适合用作非易蚀基体装置的材料包括但不限于：不溶性塑料，例如聚乙烯、聚丙烯、聚异戊二烯、聚异丁烯、聚丁二烯、聚甲基甲基丙烯酸酯、聚丁基甲基丙烯酸酯、氯化聚乙烯、聚氯乙烯、甲基丙烯酸酯-甲基甲基丙烯酸酯共聚物、乙烯-醋酸乙烯酯共聚物、乙烯/丙烯共聚物、乙烯/丙烯酸乙酯共聚物、乙烯基氯与醋酸乙烯酯共聚物、偏二氯乙烯、乙烯和丙烯、离子聚对苯二甲酸乙二醇酯、丁基橡胶、环氧氯丙烷橡胶、乙烯/乙烯醇共聚物、乙烯/醋酸乙烯/乙烯醇三聚物，以及乙烯/乙烯氧基醇共聚物、聚氯乙烯、塑化尼龙、塑化聚乙醇对苯二酸酯、天然橡胶、硅橡胶、聚二甲基硅氧烷、碳酸盐岩有机硅共聚物，以及亲水聚合物，例如乙烯纤维素、醋酸纤维素、交聚维酮和部分交联的水解聚乙酸乙烯酯；以及脂肪化合物，例如马西棕榈蜡、微晶蜡和甘油三酸酯。

    在基体控释系统中，可控制所需的释放动力学，例如，通过所采用的聚合物类型、聚合物粘度、聚合物和/或活性成分的颗粒大小、活性成分相对聚合物的比例以及组合物中的其它赋形剂进行控制。

    在改良释放剂型中的本发明所提供的药物组合物可通过本领域技术人员已知的方法制备，这些方法包括直接压制、干法或湿法造粒后压制、熔解造粒后压制。

    2.渗透控释装置

    在控释剂型中的本发明所提供的药物组合物可采用渗透控释装置制备，该装置包括单室系统、双室系统、不对称膜技术(AMT)和挤出核系统(ECS)。一般而言，该种装置具有至少两个组件：(a)包含了活性成分的核；和(b)包封该核的具有至少一个传递端的半透膜。该半透膜控制水从所用水性环境流入该核，从而通过挤出通过该传递端而释放药物。

    除了活性成分，所述渗透装置的核任选地包含渗透剂，其为从所用环境向该装置的核输送水提供驱动力。一类渗透剂为水可膨胀的亲水聚合物，其也称为“渗透聚合物(osmopolymer)”和“水凝胶”，包括但不限于：亲水乙烯基和丙烯酸聚合物，多糖如藻酸钙、聚氧乙烯(PEO)、聚乙二醇(PEG)、聚丙二醇(PPG)、聚(2-羟乙基甲基丙烯酸酯)、聚(丙烯)酸、聚(甲基丙烯)酸、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、交联PVP、聚乙烯醇(PVA)、PVA/PVP共聚物、PVA/PVP与疏水单体如甲基丙烯酸甲酯和醋酸乙烯酯的共聚物、含大型PEO嵌段的亲水聚氨酯、交联甲羧纤维素钠、角叉菜胶、羟乙基纤维素(HEC)、羟丙基纤维素(HPC)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、羧甲基纤维素(CMC)以及羧乙基纤维素(CEC)、藻酸钠、聚卡波非、明胶、黄原胶以及淀粉羟乙酸钠。

    渗透剂的其它类别为酶原(osmogens)，其能够吸入水而形成跨所述外周涂层屏障的渗透压梯度。合适的酶原包括但不限于：无机盐，例如硫酸镁、氯化镁、氯化钙、氯化钠、氯化锂、硫酸钾、磷酸钾、碳酸钠、硫酸钠、硫酸锂、氯化钾以及硫酸钠；糖，例如萄聚糖、果糖、葡萄糖、肌醇、乳糖、麦芽糖、甘露糖醇、棉子糖、山梨糖醇、蔗糖、海藻糖和木糖醇；有机酸，例如抗坏血酸、苯甲酸、富马酸、柠檬酸、马来酸、癸二酸、山梨酸、己二酸、依地酸、谷氨酸、对甲苯磺酸、丁二酸和酒石酸；脲；及其混合物。

    可使用不同溶解速率的渗透剂来影响活性成分从所述剂型中传递的最初速度。例如，无定形糖，如Mannogeme EZ(SPI Pharma，Lewes，DE)可用于在前数小时期间提供更快速的传递以立即生成所需的治疗效果，并在更长的时间段内逐渐和持续地释放剩余量以维持所需的治疗或预防效果水平。在该情况下，该活性成分以替代被代谢或排泄的活性成分的量的速率释放。

    所述核还可包含本发明所述的多种其它赋形剂和载体，以增强该剂型的性能或促进加工稳定性。

    可用于形成所述半透膜的材料包括在生理相关pH下为水透过性和水不溶性的或易于通过化学变化(例如交联)改变为水不溶性的各种级别的丙烯酸、乙烯基、醚、聚酰胺、聚酯和纤维质衍生物。可用于形成所述涂层的合适聚合物的范例包括塑化的、非塑化的以及强化的醋酸纤维素(CA)、二乙酸纤维素、三乙酸纤维素、丙酸CA、硝酸纤维素、醋酸丁酸纤维素(CAB)、乙基氨基甲酸CA、CAP、甲基氨基甲酸CA、琥珀酸CA、醋酸偏苯三酸纤维素(CAT)、二甲氨基醋酸CA、碳酸乙酯CA、氯醋酸CA、草酸乙酯CA、磺酸甲酯CA、磺酸丁酯CA、对甲苯磺酸酯CA、醋酸琼脂、三乙酸直链淀粉、醋酸β葡聚糖、三乙酸β葡聚糖、二乙酸甲酯乙醛、卡罗布胶的三乙酸酯、羟基化乙烯-醋酸乙烯酯、EC、PEG、PPG、PEG/PPG共聚物、PVP、HEC、HPC、CMC、CMEC、HPMC、HPMCP、HPMCAS、HPMCAT、聚(丙烯)酸和酯以及聚(甲基丙烯)酸和酯及其共聚物、淀粉、葡聚糖、糊精、壳聚糖、胶原质、明胶、聚烯烃、聚醚、聚砜、聚醚砜、聚苯乙烯、聚卤代乙烯、聚乙烯酯和醚、天然蜡和人工蜡。

    半透膜还可以是疏水微孔膜，其中该孔基本被气体填充且不被水性介质湿润，但可透过水蒸气，如美国专利5,798,119所述。该种疏水但可透过水蒸气的膜通常由疏水聚合物如聚烯烃、聚乙烯、聚丙烯、聚四氟乙烯、聚丙烯酸衍生物、聚醚、聚砜、聚醚砜、聚苯乙烯、聚卤代乙烯、聚偏二氟乙烯、聚乙烯酯和醚、天然蜡和人工蜡所组成。

    所述半透膜上的传递端可在涂层后通过机械或激光钻孔形成。传递端还可通过腐蚀水溶性材料塞子或通过破坏所述核中的缺口上的膜的更薄部分原位形成。此外，对于美国专利5,612,059和5,698,220公开的不对称膜涂层类型，传递端可在涂层过程中形成。

    所释放的活性成分的总量和释放的速率可大体上通过半透膜的厚度和孔隙度、核的组成以及传递端的数量、大小和位置进行调节。

    在渗透控释剂型中的所述药物组合物可进一步包含附加的本发明所述的常规赋形剂，以促进该制剂的性能或加工。

    所述渗透控释剂型可参照本领域技术人员已知的常规方法和技术制备(参见Remington：The Science and Practice of Pharmacy；Santus和Baker，J.Controlled Release 1995，35，1-21；Verma等人，Drug Development andIndustrial Pharmacy 2000，26，695-708；Verma等人，J.Controlled Release2002，79，7-27)。

    在某些的实施方式中，本发明所提供的药物组合物被配制为AMT控释剂型，其包含不对称渗透膜，该膜覆盖含有活性成分和其它药学上可接受的赋形剂的核。参见美国专利5,612,059和WO 2002/17918。该AMT控释剂型可根据本领域技术人员已知的常规方法和技术制备，包括直接压制、干法造粒、湿法造粒和浸渍涂层法。

    在某些的实施方式中，本发明所提供的药物组合物被配制为ESC控释剂型，其包含了渗透膜，该膜覆盖了含有活性成分、羟乙基纤维素和其它药学上可接受的赋形剂的核。

    3.多粒子控释装置

    在改良释放剂型中的本发明所提供的药物组合物可通过多粒子控释装置制备，该多粒子控释装置包含直径范围在约10μm至约3mm、约50μm至约2.5mm或约100μm至约1mm的大量粒子、颗粒或弹丸剂。这种大量颗粒可通过本领域技术人员已知的方法制备，包括通过湿法和干法造粒、挤出/滚圆、碾压、熔解-冷冻和喷涂种核制备。例如，参见MultiparticulateOral Drug Delivery；Marcel Dekker：1994和Pharmaceutical PelletizationTechnology，Marcel Dekker：1989。

    本发明所述的其它赋形剂可与所述药物组合物混合以帮助所述多粒子的加工和形成。所得的颗粒本身可构成所述多粒子装置或者可用各种成膜材料(例如肠聚合物、水中膨胀和水溶性聚合物)涂覆。该多粒子可进一步加工为胶囊或片剂

    4.靶向传递

    本发明所提供的药物组合物还可配制成靶向待治疗个体的特定组织、受体或身体的其它区域，包括脂质体、重新包封的红细胞和基于抗体的传递系统。范例包括但不限于美国专利6,316,652、6,274,552、6,271,359、6,253,872、6,139,865、6,131,570、6,120,751、6,071,495、6,060,082、6,048,736、6,039,975、6,004,534、5,985,307、5,972,366、5,900,252、5,840,674、5,759,542和5,709,874。

     使用方法

    在一实施方式中，本发明提供了通过向患有或易患与CRTH2和/或一种或多种其它PGD₂受体相关的病症或疾病的个体施用治疗有效量的呈无定形形式或I型或II型结晶形式的{4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基}乙酸的微粒来治疗、预防或改善该疾病或病症的一种或多种症状的方法。

    在另一实施方式中，本发明提供了治疗、预防或改善对CRTH2和/或一种或多种其它PGD₂受体的调节敏感的疾病或病症的一种或多种症状的方法，其包括向患有或易患该病症或疾病的个体施用治疗有效量的呈无定形形式或I型或II型结晶形式的{4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基)乙酸的微粒。

    在另一实施方式中，本发明提供了治疗、预防或改善由CRTH2和/或一种或多种其它PGD₂受体介导的疾病或病症的一种或多种症状的方法，其包括向患有或易患该病症或疾病的个体施用治疗有效量的呈无定形形式或I型或II型结晶形式的{4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基)乙酸的微粒。

    在另一实施方式中，本发明提供了治疗、预防或改善与嗜曙红细胞相关的疾病的一种或多种症状的方法，其包括向患有或易患该病症或疾病的个体施用治疗有效量的呈无定形形式或I型或II型结晶形式的{4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基)乙酸的微粒。

    在另一实施方式中，本发明提供了治疗、预防或改善与嗜碱细胞相关的疾病的一种或多种症状的方法，其包括向患有或易患该病症或疾病的个体施用治疗有效量的呈无定形形式或I型或II型结晶形式的{4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基)乙酸的微粒。

    在另一实施方式中，本发明提供了治疗、预防或改善炎症性疾病的一种或多种症状的方法，其包括向患有或易患该病症或疾病的个体施用治疗有效量的呈无定形形式或I型或II型结晶形式的{4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)-苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基}乙酸的微粒。

    可通过本发明所提供的微粒治疗的病症和疾病包括但不限于：(1)炎性或过敏性疾病，包括全身性过敏反应和超敏感性疾病、特应性皮炎、荨麻疹、药物过敏、昆虫叮咬过敏、食物过敏(包括脂泻病等)以及肥大细胞病；(2)炎性肠道疾病，包括克隆氏病(Crohn’s disease)、溃疡性结肠炎、回肠炎以及肠炎；(3)血管炎和白塞综合征(Behcet syndrome)；(4)牛皮癣和炎性皮肤病，包括皮肤炎、湿疹、特应性皮炎、过敏性接触性皮炎、荨麻疹；包括来自于人乳头瘤病毒、HIV或RLV感染的病毒性皮肤病变；细菌、真菌和其它寄生虫皮肤病变以及皮肤红斑狼疮；(5)哮喘和呼吸道过敏性疾病，包括过敏性哮喘、运动诱发的哮喘、过敏性鼻炎、中耳炎、过敏性结膜炎、超敏性肺病以及慢性阻塞性肺病；(6)自身免疫病，包括关节炎(包括风湿性和牛皮癣)、全身性红斑狼疮、I型糖尿病、重症肌无力、多发性硬化、Graves病以及血管球性肾炎；(7)移植排斥(包括同种异体移植排斥和移植物抗宿主病)例如植皮排斥、实质器官移植排斥、骨髓移植排斥；(8)发烧；(9)心血管疾病，包括急性心力衰竭、低血压、高血压、心绞痛、心肌梗死、心肌症、充血性心力衰竭、动脉硬化症、冠状动脉病、再狭窄以及血管狭窄；(10)脑血管障碍，包括外伤性脑损伤、中风、缺血性再灌注损伤和动脉瘤；(11)乳腺、皮肤、前列腺、子宫颈、子宫、卵巢、睾丸、膀胱、肺、肝、喉头、口腔、结肠和胃肠道(例如，食道、胃、胰腺)、脑、甲状腺、血液以及淋巴系统的癌症；(12)纤维化、结缔组织疾病以及肉状瘤病，(13)生殖器和生殖性病症，包括勃起机能障碍；(14)胃肠道障碍，包括胃炎、溃疡、恶心、胰腺炎以及呕吐；(15)神经性疾病，包括阿尔茨海默氏病；(16)睡眠障碍，包括不眠症、嗜眠发作、睡眠无呼吸综合征以及Pickwick综合症；(17)疼痛；(18)肾病；(19)眼部疾病，包括青光眼；和(20)传染病，包括HIV.

    在某些的实施方式中，所述疾病选自哮喘、过敏性哮喘、运动诱发的哮喘、过敏性鼻炎、长期性过敏性鼻炎、季节性过敏性鼻炎、特应性皮炎、接触性超敏、接触性皮炎、结膜炎、过敏性结膜炎、嗜酸细胞性支气管炎、食物过敏、嗜酸细胞性胃肠炎、炎性肠道疾病、溃疡性结肠炎、克隆氏病、肥大细胞病、高IgE综合症、系统性红斑狼疮、牛皮癣、痤疮、多发性硬化、同种异体移植排斥、再灌注损伤、慢性阻塞性肺病、Churg-Strauss综合症、窦炎、嗜碱性细胞白血病、慢性荨麻疹、嗜碱性白细胞增多症、牛皮癣、湿疹、COPD(慢性阻塞性肺病)、关节炎、风湿性关节炎、牛皮癣关节炎和骨关节炎。

    在某些的实施方式中，所述疾病为哮喘、运动诱发的哮喘、过敏性鼻炎、特应性皮炎、慢性阻塞性肺病或过敏性结膜炎。

    在某些的实施方式中，所述疾病为Churg-Strauss综合症或窦炎。

    根据待治疗的疾病和个体的状态，本发明所提供的微粒或组合物可通过口服、肠胃外(例如，肌肉内、腹腔内、静脉内、ICV、脑池内注射或灌注、皮下注射，或植入)、吸入、鼻部、阴道、直肠、舌下或局部(例如，透皮或局部)施用途径施用，或者单独或与适于每种施用途径的药学上可接受的载体、佐剂和运载体联合配制为合适剂量单位。此外还提供了储藏剂形式的本发明所提供的微粒，其中所述活性成分在预定的时间段内释放。

    在哮喘、过敏性鼻炎、湿疹、牛皮癣、特应性皮炎、发烧、败血病、全身性红斑狼疮、糖尿病、风湿性关节炎、多发性硬化、动脉硬化症、移植排斥、炎性肠道疾病、癌症或其它与CRTH2和/或一种或多种其它PGD₂受体相关的病症、病症或疾病的治疗、预防或改善中，合适的剂量水平通常为约0.001-约100mg/kg患者体重/天(mg/kg每天)、约0.01-约75mg/kg每天、约0.1-约50mg/kg每天、约0.5-约25mg/kg每天或约1-约20mg/kg每天，其可以以单一或多次剂量施用。在该范围内，剂量可以是0.005-0.05、0.05-0.5或0.5-5.0、1-15、1-20或1-50mg/kg每天。在某些的实施方式中，该剂量水平为约0.001-100mg/kg每天。在某些的实施方式中，该剂量水平为约0.01-约75mg/kg每天。在某些的实施方式中，该剂量水平为约0.1-约50mg/kg每天。在某些的实施方式中，该剂量水平为约0.5-约25mg/kg每天。在某些的实施方式中，该剂量水平为约1-约20mg/kg每天。

    对于口服施用，所述药物组合物可提供为含有1.0-1,000mg活性成分，特别是约1、约5、约10、约15、约20、约25、约50、约75、约100、约150、约200、约250、约300、约400、约500、约600、约750、约800、约900和约1,000mg活性成分的片剂，以得到调节待治疗患者的症状的剂量。该组合物可以以1-4次每天(包括每天一次、两次、三次和四次)的方案施用。

    然而，可以理解，对具体患者的特定剂量水平和给药频率可以变化，并取决于多种因素，包括所用特定化合物的活性、该化合物的代谢稳定性和作用时间、年龄、体重、总体健康、性别、饮食、施用模式和时间、排泄速率、药物组合、具体病症的严重性以及接受治疗的宿主。

    还提供了调节CRTH2和/或一种或多种其它PGD₂受体的方法，其包括将该受体与本发明所提供的一种或多种固体形式的微粒相接触。在一实施方式中，该受体由细胞表达。

    本发明所提供的微粒还可与其它药剂合并或联用，所述药剂可用于治疗、预防或改善能使用本发明所提供的微粒的疾病或病症(包括哮喘、过敏性鼻炎、湿疹、牛皮癣、特应性皮炎、发烧、败血病、全身性红斑狼疮、糖尿病、风湿性关节炎、多发性硬化、动脉硬化症、移植排斥、炎性肠道疾病、癌症以及上述病变)的一种或多种症状。

    该种其它药剂或药物可以以其常用的途径和量与本发明所提供的微粒同时或先后施用。当本发明所提供的微粒与一种或多种其它药物同时使用时，可以使用除了本发明所提供的微粒外还含有该种其它药物的药物组合物，但这并非必须。因此，本发明所提供的药物组合物包括除了包含本发明所提供的微粒外还包含一种或多种其它活性成分或治疗剂的药物组合物。

    本发明所提供的微粒与所述第二活性成分的重量比可以变化，并取决于每种成分的有效剂量。一般而言，使用每种成分的有效剂量。因此，例如，当本发明所提供的微粒与NSAID组合时，该微粒与该NSAID的重量比可在约1000∶1至约1∶1000或约200∶1至约1∶200范围内。本发明所提供的微粒与其它活性成分的组合通常也在前述范围内，但在每种情况下，应使用每种活性成分的有效剂量。

    实施例

    所述式I的酸的微粒在以下实施例中通过X-射线粉末衍射(XRPD)、差示扫描量热法(DSC)、热重量分析(TGA)和扫描电镜(SEM)进行表征。

    X-射线粉末衍射数据采用Rigaku MiniFlex X-射线粉末衍射仪(RigakuAmericas，The Woodlands，TX)进行记录。辐射为CuKa(40kV，40mA)。数据在室温下在3-45度的2θ角范围内以每步0.02度和每步0.6秒进行采集。样本在玻璃样本架上制备为无溶剂的粉末材料薄层。

    差示扫描量热法采用Mettler 850，TA 2920进行。样本被置于密封铝盘中，并以空铝盘作为参照进行分析。采用10℃/min的加热速率，温度范围为从30℃至280℃。

    热重量分析也在Mettler 850，TA 2920上进行。样本被置入陶瓷或铝制样本盘中。采用20℃/min的加热速率，温度范围为从20℃至600℃。

     实施例1

     {4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基}乙酸溶解度测定

    式I的{4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)-苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基}乙酸在表1所列举的溶剂中的饱和溶液可用主要为I型的该种酸同时在25和50℃下制备。各饱和溶液的浓度可通过HPLC测定，结果总结于表1中。

     实施例2

     式I的{4.6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基}乙酸的制备

    将含于甲醇的{4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基}乙酸的浆液在室温下搅拌过夜。然后过滤微粒，用己烷洗涤，并干燥。

    该微粒的X-射线粉末衍射图谱显示于图1。该微粒在约9.8、13.1、22.0和26.4°2θ处显示有特征XRP衍射峰，这表明该微粒为结晶。如图4所示，该微粒是大小为约1至约5μm的长针状结晶。

    该微粒的差示扫描量热法热谱图显示于图2。该微粒显示了峰值温度为约223.8℃且起始温度为约220.2℃的吸热。

    式I微粒的热重量分析热谱图显示于图3。该微粒非常稳定，并在约200℃下分解之前未显示出明显的重量损失。

    式I的微粒的平均颗粒尺寸和颗粒尺寸分布采用Microtrac S3000(Microtrac Inc.，Montgomeryville，PA)测定。结果显示于图5并总结于表2。式I的微粒的平均颗粒尺寸(MV)为6.495μm，均匀系数为3.24。

    表1.溶解度

    

    

    表2.颗粒尺寸分布

       百分位数  颗粒尺寸  (μm)  10  1.807  20  2.393  30  3.004  40  3.713  50  4.627  60  5.852  70  7.498

       百分位数  颗粒尺寸  (μm)  80  9.825  90  13.70  95  17.57

     实施例3

     式II的{4.6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基}乙酸的制备

    用主要为I型的所述酸制备含于DMF(0.5mL)的{4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基}乙酸(50mg)的溶液。将该溶液在室温下添加至8mLMTBE。室温下再搅拌15分钟后，该混合物变成浆液。然后过滤微粒，用己烷洗涤，并于燥。

    该微粒的X-射线粉末衍射图谱显示于图6。该微粒在约31.7°2θ处显示了特征XRP衍射峰，这表明该微粒为不同于所述I型的结晶形式(II型)。II型的微粒的结晶形态如图7所示。

     实施例4

     相平衡

    基于实施例1中测定的{4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基}乙酸在不同溶剂中的溶解度，将主要为所述I型的酸的微粒在25或50℃下暴露至表3所列举的溶剂中足够长的时间。将该微粒过滤并干燥，然后采用XRPD分析。该结果总结于表3。

     实施例5

     I型和II型之间的相平衡

    如实施例2所述，II型的颗粒被制备为浆液。简单而言，将{4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)-嘧啶-5-基}乙酸(50mg)的DMF(0.5mL)溶液添加至8mL MTBE以生成II型的微粒的浆液。然后向该浆液加入I型的微粒(20mg)，并将所得的浆液室温搅拌过夜。然后过滤微粒，用己烷洗涤，并干燥。使用XRPD分析该微粒。XRP衍射图显示于图8，显示相平衡之后的微粒为I型。

     实施例6

     通过溶剂蒸发形成微粒

    基于实施例1中测定的{4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基}乙酸在不同溶剂中的溶解度，将主要为I型的所述酸溶解于表4所列举的溶剂系统中。在25或50℃下将溶剂从溶液中蒸发。过滤收集所的的微粒，并使用XRPD分析。该结果总结于表4。

    表3.相平衡后的结晶形式

    

    

    a.NA：未获得。该样本来生成任意或足量固体。

     实施例7

     通过添加抗溶剂形成微粒

    用主要为I型的所述酸制备在表5所列举的溶剂中的所述式I的酸饱和溶液。然后向该饱和溶液添加抗溶剂以诱导沉淀。THF、2-甲氧乙醇、DMSO和DMF被用作溶解所述I型微粒的溶剂，而己烷、MTBE、甲苯和水被用作抗溶剂。过滤收集所的的微粒，并使用XRPD分析。该结果总结于表5。

     实施例8

     通过添加反向抗溶剂形成微粒

    用主要为I型的所述酸制备在表6所列举的溶剂中的所述式I的酸的饱和或接近饱和溶液。然后将该溶液各自添加至更大体积的可混溶抗溶剂中。THF、2-甲氧乙醇、DMSO和DMF被用作溶解所述微粒的溶剂，而己烷、MTBE、甲苯和水被用作抗溶剂。过滤收集所的的微粒，并使用XRPD分析。该结果总结于表6。

     实施例9

     通过淬灭冷却(Quench Cool)形成微粒

    用主要为I型的所述酸在约30-50℃下制备在表7所列举的溶剂中的所述式I的酸的饱和溶液。将该溶液在丙酮/冰浴中淬灭冷却。过滤收集所的的微粒，并使用XRPD分析。该结果总结于表7。

    表4.溶剂蒸发形成的结晶形式

    

    a.NA：未获得。该样本来生成任意或足量固体。

    表5.添加抗溶剂形成的结晶形式

       溶剂  抗溶剂  多晶型物  THF  己烷  I型  THF  MTBE  NA^a  THF  甲苯  NA  THF  水  I型  2-甲氧乙醇  己烷  NA  2-甲氧乙醇  MTBE  NA  2-甲氧乙醇  甲苯  NA  2-甲氧乙醇  水  NA  DMSO  己烷  NA  DMSO  MTBE  NA  DMSO  甲苯  NA  DMSO  水  大多数为无  定形  DMF  己烷  NA  DMF  MTBE  少量(？)  DMF  甲苯  NA  DMF  水  I型

    a.NA：未获得。该样本未生成任意或足量固体。

     实施例10

     通过加热和冷却循环形成微粒结晶

    用主要为I型的所述酸在约30-50℃下制备在表8所列举的溶剂中的所述式I的酸的饱和溶液。使用程序控制循环浴缓慢冷却该溶液以形成浆液。然后先将所得的浆液在2小时中加热至50℃，然后在2小时中冷却至25℃。将该加热和冷却过程重复过夜。然后过滤收集所的的微粒，并使用XRPD分析。该结果总结于表8。

    表6.添加反向抗溶剂形成的结晶形式

       溶剂  抗溶剂  多晶型物  THF(1mL)  己烷(4mL)  I型  THF(0.5mL)  MTBE(8mL)  NA^a  THF(0.5mL)  甲苯(8mL)  NA  THF(0.5mL)  水(4mL)  I型  2-甲氧乙醇(0.5mL)  己烷(8mL)  I型  2-甲氧乙醇(0.5mL)  MTBE(8mL)  NA  2-甲氧乙醇(0.5mL)  甲苯(8mL)  NA  2-甲氧乙醇(0.5mL)  水(8mL)  NA  DMSO(0.5mL)  己烷(8mL)  NA  DMSO(0.5mL)  MTBE(8mL)  少量(？)  DMSO(0.5mL)  甲苯(8mL)  NA  DMSO(1mL)  水(4mL)  I型  DMF(0.5mL)  己烷(8mL)  NA  DMF(0.5mL)  MTBE(8mL)  II型  DMF(0.5mL)  甲苯(8mL)  NA  DMF(1mL)  水(4mL)  I型

    a.NA：未获得。该样本未生成任意或足量固体。

    表7.快速冷却结晶形式

       溶剂  多晶型物  DMF  NA^a

       溶剂  多晶型物  1，4-二噁烷  NA  2-甲氧乙醇  NA  乙腈  I型  甲醇  I型  正丁醇  NA  1-丙醇  I型  异丙醇  NA  MEK  I型  THF  NA

    a.NA：未获得。该样本来生成任意或足量固体。

    表8.蒸发结晶形式

       溶剂  多晶型物  乙腈  I型  1，4-二噁烷  I型  2-甲氧乙醇  I型  MIBK  I型  丙酮  I型  正丁醇  I型  乙醇  I型  1-丙醇  I型

       溶剂  多晶型物  异丙醇  I型  水/THF(3∶7，v/v)  I型  MEK  I型  THF  I型

     实施例11

     竞争性放射性配体结合测定

    采用表达CRTH2或DPI的稳定转染的细胞系通过竞争性放射性配体结合测定评估本发明所提供的{4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基}乙酸的胺盐的结合亲和性和选择性。

    前列腺素D₂和13，14-二氢-15-酮PGD₂获自Cayman Chemical(AnnArbor，MI)。具有160 Ci/mmol比活的放射性标记PGD₂(5，6，8，9，12，14，15-³H(N))获自PerkinElmer(Boston，MA)。细胞培养基RPMI1640、HEPES缓冲液、磷酸盐缓冲盐水(PBS)、L-谷氨酰胺和亲霉素-链霉素溶液获自Mediatech Inc.(Herndon，VA)。胎牛血清(FCS)获自Cambrex(Walkersville，MD)。嘌呤霉素获自Invitrogen(San Diego，CA)。聚(乙亚胺)(PEI)获自Acros Organics(Morris Plains，NJ)。纯化的单克隆大鼠抗人CRTH2抗体(BM 16)、大鼠IgG2α，κ(克隆R35-95)和山羊抗大鼠Ig-FITC获自BectonDickinson Biosciences(San Diego，CA)。BSA(V部分)和叠氮化钠获自SigmaChemical Company(St.Loui s)。

    参照Sugimoto等人(J.Pharm.Exp.Therap.2003，305，347-352)所述的步骤生成CRTH2和DPI稳定细胞系。将这些细胞系维持在含有HEPES缓冲液(25mM)、FCS(10％)、L-谷氨酰胺(2mM)、青霉素(10IU/mL)、链霉素(100μg/mL)和嘌呤霉素(1μg/mL)的RPMI 1640培养基中。

    在培养过程中和每次竞争性放射性配体结合测定前周期性监测转染细胞系上的CRTH2表面表达。将CRTH2表达细胞和未转染细胞在冰上与纯化抗CRTH2抗体(克隆BM16)或同工型对照抗体(大鼠IgG2α，κ)孵育15分钟。然后用2mL FACS缓冲液(含1％BSA(V部分)和0.1％叠氮化钠的PBS)洗涤细胞。随后将细胞在冰上与FITC-结合的抗大鼠抗体(山羊抗大鼠Ig-FITC)孵育。用冷FACS缓冲液洗涤后，用FACScan II分析仪和CellQuest软件(均来自Becton Dickinson(Mountain View，CA))分析细胞。

    受体转染子的功能还可通过如Sugimoto等人，J.Pharm.Exp.Therap.2003，305，347-352；Sugimoto等人，Eur.J.Pharmacol.2005，524，30-37所述直接测量响应PGD₂的钙代谢作用来评估。

    放射性配体结合分析参照Sugimoto等人(J.Pharm.Exp.Therap.2003，505，347-352；Eur.J.Pharmacol.2005，524，30-37)的方法实施。将测试化合物以100mM的浓度溶解于DMSO作为储备溶液。在测定前用10μM于结合缓冲液中作系列稀释。将转染细胞在室温下以4×10⁶/mL的浓度重悬浮于结合缓冲液(50mM Tris-HCl、40mM MgCl₂和0.1％牛血清白蛋白，pH 7.4)中。然后通过添加50μL的细胞悬浮液将转染细胞接种在U形底聚丙烯96孔板(Fisher)上，然后添加10μL ³H-PGD₂、10μL系列浓度的测试化合物溶液或对照、30μL结合缓冲液，以使终体积为100μL。³H-PGD₂在每个微孔中的终浓度为1nM。轻柔震荡下室温孵育1小时后，将细胞悬浮液转移至过滤板(Millipore，MA)，该过滤板用0.5％PEI缓冲液预先湿润。用结合缓冲液洗涤该细胞团三次，使该板空气干燥。向每个微孔添加闪烁体(50μL；Microscint^TM 20，Perkin Elmer，Boston，MA)，并在TopCount(PackardBioscience，Meriden，CT)上测量放射活性。使用Prizm^TM图形程序(GraphPadSoftware Inc.，San Diego，CA)分析数据。如图10和11所示，I型{4，6-双(二甲氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯甲酰氨基)苄基)嘧啶-5-基}乙酸对CRTH2具有较高的亲和性和结合选择性。

    提供上述实施例的目的在于向本领域普通技术人员完整公开和描述如何制备和使用这些实施方式，而非意图限制本公开的范围。本领域技术人员显而易见地对实施本公开的如上描述的模式的修改也落入本发明权利要求书的范围之内。本说明书中所引用的所有出版物、专利和专利申请均通过引用并入本文，其引用程度如同每一个单独的出版物、专利和专利申请均被特别地和单独地引用一样。