一种提取甘草地上部分总黄酮的方法 【技术领域】
本发明涉及一种提取甘草地上部分总黄酮的方法。
背景技术
中药甘草是豆科植物甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch.)、胀果甘草(Glycyrrhiza inflata Bat.)或光果甘草(Glycyrrhiza glabra L.)的干燥根和根茎，是使用频度最大，作用范围最广的中药，因此其市场需求非常大。但是多年来，由于人们的过度采挖，不仅严重破坏了我国植被资源，造成资源的急剧减少，同时造成大批量土壤沙化，生态环境也受到破坏。为此，国家出台了一系列政策来控制野生甘草的采挖，鼓励种植甘草。但是，在保护资源的同时，大家都忽视了如何让有限资源发挥更多效力的问题。因为根据中药的传统用法，甘草药用取的是地下部分，而地上部分是遗弃不用的，试想如果地上部分可以药用，一方面提高了资源的使用效率，避免了浪费，另一方面，因为地上部分可以创造价值，产生效益，而且较地下部分采收容易很多，这将必然导致采挖地下部分量的减少，间接起到保护资源和保护环境的效果。
【发明内容】
有鉴于此，发明人对甘草的地上部分进行了深入的研究，首先对其所含的黄酮类化合物进行了分析，甘草地上部分总黄酮中含有水仙甙、烟花甙、芸香甙、槲皮素、异槲皮甙、紫云英甙等成分，具有活血化瘀、抗溃疡、抗肿瘤等活性。并研制了提取和精制甘草地上部分总黄酮的方法，该总黄酮部分可广泛用于药物、化妆品以及食品添加剂的开发。
本发明的目的是提供一种提取甘草地上部分总黄酮的方法。
为实现上述目的，本发明包含有以下步骤：
A.将甘草地上部分以有机溶剂提取1～3次；
所述的有机溶剂是下列溶剂中地一种：a.直链脂肪醇，主要是甲醇、乙醇、丁醇等；b.丙酮；c.直链脂肪醇或丙酮与水的混合物，其中直链脂肪醇或丙酮的含量占10-90wt％。直链脂肪醇中，可以含有一个羟基，也可以含有多个羟基，比如乙二醇等。
B.合并提取液，回收其中的有机溶剂；
C.然后将去除有机溶剂的提取物静置，待沉淀完全后取上清液备用，或者离心去除沉淀，保留上清液备用；
D.取C中产生的上清液，通过树脂柱进行分离，水洗除去杂质后以步骤A中所述的三种有机溶剂中的任意一种进行洗脱，最后将洗脱液干燥即得总黄酮。
所述的提取过程可以是冷渗、温浸或回流中的任意一种。冷渗是指在常温条件下以6～15倍的溶剂(重量倍数)浸泡甘草地上部分，然后以渗漉的方法进行提取；温浸是指在温度为40～50℃下以6～15倍的溶剂(重量倍数)浸泡甘草地上部分并保温1～3小时；回流是指以6～15倍的溶剂(重量倍数)浸泡甘草地上部分并加热使溶剂回流并保持回流状态1～3小时。
所用的树脂柱，可以是苯乙烯骨架型或其它型大孔树脂中的一种。如：ADS-系列，HPD-系列，Amberlite XAD-系列，Diaion HP-系列以及D-101型，DA201型，DM-301型，NKA型，AB-8型，X-5型等。
本发明的优点是：
1.原料易得：甘草地上部分为尚未工业利用的植物部分，且由于甘草用量大，所以有大量的甘草地上部分需要利用；所用的有机溶剂，无论是直链脂肪醇还是丙酮，都是最常见的有机溶剂。
2.收率和总黄酮含量都比较高。收率可稳定在2.0％以上；甘草地上部分总黄酮含量则可以稳定在30～60％之间。
3.工艺相对比较简单。
【具体实施方式】
实施例1(回流提取)
将甘草地上部分5000克，以60公斤50wt％乙醇(其余为水)为溶剂回流提取3次；合并提取液，回收其中的乙醇；水溶液静置沉淀完全后分取上清液；然后将上清液以D-101型大孔树脂柱进行分离，水洗除去杂质后再以乙醇进行洗脱，最后将洗脱液干燥即得甘草地上部分总黄酮119克，收率为2.38％，其总黄酮含量为51％。
实施例2和3
其它条件与实施例1相同，将提取次数取为2次(实施例2)和1次(实施例3)。实施例2中，收率为2.26％，总黄酮含量为48％。实施例3中，收率为2.01％，总黄酮含量为41％。
实施例4(冷渗提取)
将甘草地上部分5000克以乙醇为溶剂提取3次，在温度为25℃下以40kg乙醇浸泡甘草地上部分，然后以渗漉的方法进行提取；合并提取液，回收其中的乙醇；水溶液离心，分取上清液；然后将上清液以DA201型大孔树脂柱进行分离，水洗除去杂质后再以乙醇进行洗脱，最后将洗脱液干燥即得甘草地上部分总黄酮103克，收率2.06％，总黄酮含量为45％。
实施例5(温浸提取)
将甘草地上部分5000克，以乙醇为溶剂提取3次；在温度为45℃下，以50kg乙醇浸泡甘草地上部分，并保温2小时；合并提取液，回收其中的乙醇；水溶液离心，分取上清液；然后将上清液以HP20型大孔树脂柱进行分离，水洗除去杂质后再以乙醇进行洗脱，最后将洗脱液干燥即得甘草地上部分总黄酮108克，收率为2.16％，总黄酮含量为50％。
实施例6～11
其它条件与实施例1相同，采用不同的溶剂，其结果见表1。实施例6～11效果较好，而采用氨水和水为溶剂的对比例1～3则效果不佳。
表1不同溶剂的提取效果表实例 溶剂 收率(％) 总黄酮含量(％)实施例1 50wt％乙醇、50wt％水 2.38 51实施例6 乙二醇 2.11 46实施例7 丁醇 2.07 45实施例8 丙酮 2.09 50实施例9 乙醇占10wt％的水溶液 2.01 33实施例10 乙醇 2.05 43实施例11 乙醇90wt％、水10wt％的混合物 2.16 50对比例1 氨水(PH＝8.0) 1.86 19对比例2 氨水(PH＝10.0) 1.97 20对比例3 水 1.59 17
实施例12
将甘草地上部分5000克，以乙醇为溶剂提取3次，在温度为45℃下以50kg乙醇浸泡甘草地上部分并保温2小时；合并提取液，回收其中的乙醇；水溶液静置沉淀完全，分取上清液；然后将上清液以D-101型大孔树脂柱进行分离，水洗除去杂质后再以丙酮进行洗脱，最后将洗脱液干燥即得甘草地上部分总黄酮107克，收率为2.14％，其总黄酮含量为50％。