牛血清白蛋白热乙醇法提取工艺 技术领域 本发明涉及一种从牛血清中提取白蛋白的方法，具体是一种牛血清白蛋白热乙醇法提取工艺。
背景技术 牛血清白蛋白用于诊断试剂的包膜，它的制备方法较多，但多数尚处于实验阶段，适用于中试和正式生产的有以下方法：(1)盐析法，分冷盐析法及热盐析法，冷盐析法的主要工艺流程是将新鲜牛血离心、加纯水、加硫酸铵、过滤、滤液透析脱盐、加聚乙二醇、透析液浓缩、冻干为成品；本方法用料多，加硫酸铵需牛血量的40～50％，加聚乙二醇为牛血量的2～4倍，加透析用的纯水需牛血量的20～40倍；费时，冷盐析法透析需48小时，脱水需24小时，整个工艺流程需5个工作日；收率低，一般为0.8～1.0％；以上三点使冷盐析法的生产效率低，成本较高。(2)有机溶剂沉淀法，以E.J.Cohn氏法最常用，但本方法需0℃～5℃低温进行，费时费力，单程需7日，收率不高，1％左右，其成本也较高。
发明内容 本发明的目的在于提供一种牛血清白蛋白热乙醇法提取工艺，它用料少，省时，收率高；用本工艺可较大幅度的降低成本。
本发明的技术方案如下：
本发明的工艺有以下步骤：
A、 分离血浆，取新鲜牛血放入带制冷功能的离心机中，加入血量
的10％的浓度为3.8％的枸橼酸钠，离心，温度在2℃以下，分
离血浆、血球，收集血浆，血球另用；
B、 提取，将血浆放入夹层反应罐内，夹层内加热水，边加热边加
入牛血清容积的0.2-0.3％的辛酸钠，缓慢搅拌，温度在55℃～
65℃，溶解后调PH值，加入浓度为1摩尔的盐酸，将PH调至
4.0～6.5，然后加入血清总量的5.5％的浓度为95％地乙醇，过
滤，滤渣弃之；
C、 脱盐和浓缩，将滤液用20000分子量以下的超滤器洗脱盐类及
其它小分子杂质，同时进行浓缩；
D、 冻干，将浓缩液按冻干曲线冻干，即将浓缩液迅速冷却至-40℃，
持续1小时左右，升到-25℃，持续10-20小时，再缓慢升温到
0℃，再持续1-4小时升到保存温度20℃，为成品。
上述的步骤B中的温度为55℃～60℃。
上述的提取的步骤B中的PH为4.5-6.0。
本工艺所用的枸橼酸钠为抗凝剂，辛酸钠为白蛋白的保护剂，使之在温度55℃以上不分解。
本发明的优点在于：1、用料少，本方法所用的枸橼酸钠、辛酸钠、盐酸、乙醇均较冷盐析法少，可节约投入。2、工艺流程短，全部提取流程只需24小时，比冷盐析法需5天提高生产效率5倍。3、本工艺的每一步都易于掌握，操作容易，适合大批量生产。4、收率高，一般在1.8-2.0％。5、成本低，比冷盐析法成本低50％，经济效益显著。6、质量好，在生产过程中只加少量抗凝剂和保护剂枸橼酸钠、辛酸钠，不含其它盐类及化学物质，其主要提取剂为乙醇，因而保证了成品质地的纯净，其质量检测结果见表1。
本发明的成品白蛋白经检验，质量完全符合行业质量标准。
检测：纯度用电泳法测定，溶液的澄明度用分光光度计403nm测定。
表1 本发明的牛血白蛋白的质检结果与质量标准对照表 检验项目本发明的白蛋白质量标准 外观白色或类白色结晶粉末白色或类白色结晶粉末 溶解实验2分钟内溶解，溶液澄明2分钟内溶解，溶液澄明 纯度白蛋白含量≥95白蛋白含量≥90 1％白蛋白溶液 403nm吸收值≤0.1≤0.35 冻干水分残余水分≤5.0％残余水分≤5.0％ 功能试验合格包被功能标准由表1可以看到其白蛋白的含量高于质量标准，1％白蛋白溶液403nm吸收值比标准低，其杂质少，澄明度高，其他指标符合标准，说明本工艺提取的牛血白蛋白质量好。
附图说明 图1是现有技术工艺流程图；
图2是本发明工艺流程图；
图3是本发明冻干曲线图。
具体实施方式 实施例1：
本发明的工艺有以下步骤：
A、分离血浆，取天然放牧的牛群新鲜牛血，经严格的检疫，确保无感染疾病，将牛血放入带制冷功能的离心机中，加入血量的10％的3.8％的枸橼酸钠，4000转/分离心，温度在2℃以下，分离血浆、血球，收集血浆，血球另用；
B、提取，将血浆放入夹层反应罐内，夹层中加热水，边加热边加入牛血清容积的0.2-0.3％的辛酸钠，缓慢搅拌，温度在55℃～60℃，溶解后调PH值，加入浓度为1摩尔的盐酸，将PH调至6，然后加入血清总量的5.5％的浓度为95％的乙醇，加热时间为25-40分钟；然后用帆布过滤，滤渣弃之；
C、脱盐和浓缩，将滤液用20000分子量以下的超滤器洗脱盐类及其它小分子杂质，同时进行浓缩；
D、冻干，按冻干曲线进行，即将浓缩液迅速冷却至-40℃，持续1小时左右，升到-25℃，持续10-20小时，再缓慢升温到0℃，再持续1-4小时升温到保存温度。为成品。
包装为密封瓶装或塑料袋装。本牛血白蛋白的保存温度为小于等于20℃。
本工艺所用的枸橼酸钠为抗凝剂，市售，辛酸钠为白蛋白的保护剂，北京化工厂出品，盐酸及乙醇为市售。