苯基-氧代-烷基-(4-哌啶基)苯甲酸酯衍生物 本发明涉及新的苯甲酸酯衍生物，含有这类新化合物的药物组合物，制备这些化合物和组合物的方法，以及它们作为药物的应用，特别是用于治疗涉及结肠能动性减弱的病症。
在我们的欧洲专利0,389,037-A中(1990年9月26日公布)，公开了N-(3-羟基-4-哌啶基)(二羟基苯并呋喃或二氢-2H-苯并吡喃)甲酰胺衍生物具有刺激胃肠能动性的性质。在我们的欧洲专利0,445,862-A中(1991年9月11日公布)，公开了N-(4-哌啶基)(二氢苯并呋喃或二氢-2H-苯并吡喃)甲酰胺衍生物也具有刺激胃肠能动性的性质。1993年3月4日公布的WO 93/03725(Smith-Kline Beecham)一般地提到使用通式为X-CO-Y-Z的酯作为5HT4受体拮抗剂，其中X可以是一个取代的苯基，Y可以是氧，Z可以是取代的哌啶基。1994年4月28日公布的WO 94/08995(SmithklineBeecham)一般地公开了取代的7-苯并呋喃羧酸酯也具有5HT4拮抗活性。后两个专利申请提到了5HT4拮抗化合物在治疗过敏性肠综合症(IBS)、特别是IBS的腹泻症状中的应用。
我们出乎意料地发现，本发明的新化合物显示出促进肠活动的作用。因此，本发明公开的化合物可用于治疗涉及肠(尤其是结肠)能动性减弱的病症。
本发明涉及具有以下化学式地新的苯甲酸酯衍生物，它们的N-氧化物形式，可药用的酸加成盐以及立体化学异构形式：其中：
R1是卤素或C1-6烷基磺酰氨基；
R2是氢，R3是C1-6烷基、C2-6链烯基或C2-6炔基；或者R2和R3一起形成一个化学式如下的二价基团：
-CH＝CH- (a)，
-(CH2)2- (b)，或
-(CH2)3- (c)；在式(a)、(b)或(c)的二价基团中，一个或二个氢原子可以被C1-6烷基取代；
ALK是C1-6链烷二基；
R4是氢或C1-6烷氧基；
R5、R6与R7各自独立地是氢、卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基；或者R5和R6一起也可以形成一个化学式如下的二价基团：
-O-(CH2)m-O- (f)；其中R8和R9各自独立地是氢或C1-6烷基；R10是氢、C1-6烷基羰基、C1-6烷氧基羰基；m是1或2。
正如在以上定义中和后文中所使用的，卤素是氟、氯、溴和碘的通称；C1-6烷基表示有1-6个碳原子的直链和支链的饱和烃基，例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、1-甲基乙基、2-甲基丙基等；C2-6链烯基表示有2-6个碳原子和1个双键的直链和支链的烃基，例如乙烯基、2-丙烯基、3-丁烯基、2-丁烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、3-甲基-2-丁烯基、3-己烯基等；C2-6炔基是指有2-6个碳原子和一个三键的直链和支链的烃基，例如乙炔基、2-丙炔基、3-丁炔基、2-丁炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、3-己炔基等；C1-6链烷二基代表有1-6个碳原子的二价的直链或支链烃基，例如亚甲基、1，2-乙二基、1，3-丙二基、1，4-丁二基、1，5-戊二基、1，6-己二基。
上述的可药用的酸加成盐意味着包括式(I)化合物能够形成的有治疗活性的无毒酸加成盐形式。通过用适当的酸处理碱形式的式(I)化合物，可以方便地得到盐。合适的酸包括无机酸，例如氢卤酸(如盐酸或氢溴酸)、硫酸、硝酸、磷酸及类似的酸；或有机酸，例如乙酸、丙酸、羟基乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸、丙二酸、丁二酸、马来酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、环己烷氨基磺酸、水杨酸、对氨基水杨酸、双羟萘酸及类似的酸。以上所用的加成盐-词也包括式(I)化合物及其盐能够形成的溶剂化物。这类溶剂化物的实例有水合物、醇化物等。相反，通过用碱处理，可以将盐形式转化成游离碱形式。
上面所用的“立体化学异构形式”一词是指式(I)化合物可能具有的所有可能的异构体形式。除非另外说明或指出，化合物的化学名称代表了所有可能的立体化学异构形式的混合物，该混合物含有基本分子结构的所有非对映异构体和对映异构体。更具体地说，形成立体结构的中心可以有R或S构型；在两价的环状(部分地)饱和基团上的取代基可以有顺式或反式构型，C2-6链烯基可以有E或Z构型。式(I)化合物的立体化学异构形式显然要包括在本发明的范围之内。
一些式(I)化合物还可以存在互变异构形式。以上化学式虽然未明确表示出这种形式，但它们也将包括在本发明的范围之内。例如，其中的R5和R6一起形成一个式(d)的两价基团、而且R8和R9均为氢的式(I)化合物可以以其相应的互变异构形式存在。
式(I)化合物的N-氧化物形式是指这样的式(I)化合物，其中一个或几个氮原子被氧化成所谓的N-氧化物，特别是其中的哌啶氮被N-氧化的N-氧化物。
R1宜为氟、氯或溴，优选R1为氯。
R3在不与R2合在一起时以C1-6烷基为宜，最好是甲基；当R2和R3合在一起时，优选为式(b)的二价基团；
AlK宜为1，2-乙二基、1，3-丙二基或1，4-丁二基，最好是1，3-丙二基；
R4以氢或甲氧基为宜；
R5、R6和R7宜为氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基或氯，优选甲基、甲氧基或氢；或者，当R5和R6合在一起时，优选为式(d)或(e)的二价基团，特别是式(d)基团。
有意义的式(I)化合物是其中的R1是氯的式(I)化合物。
更有意义的式(I)化合物是其中的R2和R3一起形成一个式(b)二价基团的那些式(I)化合物。
最有意义的式(I)化合物是其中的AlK为1，3-丙二基的那些有意义的化合物。
优选的化合物是其中的R5、R6和R7是甲氧基的那些最有意义的化合物。
优选的化合物还包括这样的最有意义的化合物其中的R7是氢、R5和R6合在一起构成一个其中的R8和R9为氢的式(d)基团。
最优选的化合物是：
其它的优选化合物是其中R5和R7是甲基、R6是甲氧基的那些最有意义的化合物。
4-氨基-5-氯-2，3-二氢-7-苯并呋喃羧酸顺-3-甲氧基-1-〔4-氧代-4-(3，4，5-三甲氧基苯基)丁基〕-4-哌啶酯；
4-氨基-5-氯-2，3-二氢-7-苯并呋喃羧酸1-〔4-氧代-4-(3，4，5-三甲氧基苯基)丁基〕-4-哌啶酯；
4-氨基-5-氯-2，3-二氢-7-苯并呋喃羧酸1-〔4-(2，3-二氢-2-氧代-1H-苯并咪唑-5-基)-4-氧代丁基〕-4-哌啶酯；和
4-氨基-5-氯-2，3-二氢-7-苯并呋喃羧酸1-〔4-(4-甲氧基-3，5-二甲基苯基)-4-氧丁基〕-4-哌啶酯；
它们的立体异构形式及其可药用的酸加成盐。
为了简化式(I)化合物及其某些中间体的结构表示，化学式如下的基团以后将用符号D表示。下述基团以后则用L表示
在以下的制备中，反应产物可以从反应混合物中分离出去，而且如果必要，可以按照工艺中通常已知的方法，例如萃取、蒸馏、结晶、研制和层析，将其进一步纯化。
式(I)化合物可以通过式(II)的吡啶用式(III)的一种中间体进行N-烷基化来制备。
式(III)中间体中的W1是一个合适的离去基团，例如卤素(如氯、溴或碘)或磺酰氧基(如甲磺酰氧基、甲苯磺酰氧基)及类似的离去基团。(II)与(III)的N-烷基化反应宜按照以下工艺上已知的烷基化步骤进行。
式(I)化合物也可以通过式(IV)的醇(其中R4和L的定义如上)与式(V)的羧酸(其中R1、R2和R3的定义如上)或其官能衍生物(如酰基卤化物、对称或混合的酸酐或酯、最好是活化的酯)按着工艺上已知的步骤进行酯化反应来制备。
在反应期间可能需要将式(V)中间体的氨基保护起来以避免不良的副反应。在酯化反应完成后将该氨基保护基除去。合适的保护基包括容易去除的基团，例如C1-4烷基羰基、C1-4烷氧基羰基、苯基甲基及类似的保护基团。
其中的R5和R6合在一起形成一个式(d)基团的式(I)化合物用式(I-d)表示，它可以通过式(VI)中间体与1，1′-羰基双-1H-咪唑或其官能衍生物按照工艺上已知的反应步骤进行反应来制备。
其中的R5和R6合在一起形成一个式(e)基团的式(I)化合物用化学式(I-e)表示，它可以通过其中的R8和R9都是氢的式(VI)中间体与式(VII)中间体按着工艺上已知的反应步骤进行反应来制备，上述的式(VI)中间体用化学式(VI-a)表示。
式(I)化合物也可以彼此相互转化。例如，其中的R10是氢的式(I)化合物可以通过工艺上已知的N-酰化反应转化成其中的R10是C1-6烷基羰基或C1-6烷氧基羰基的式(I)化合物。
其中的R3是C2-6链烯基或C2-6炔基的式(I)化合物可以用工艺上已知的氢化方法转化成其中的R3是相应的饱和烃基的式(I)化合物。
式(I)化合物也可以按照工艺上已知的将三价氮转化成其N-氧化物形式的步骤，转化成相应的N-氧化物形式。这种N-氧化反应一般可以通过式(I)起始物与合适的有机或无机过氧化物反应来进行。合适的无机过氧化物包括例如过氧化氢、碱金属或碱土金属过氧化物(例如过氧化钠、过氧化钾)；合适的有机过氧化物可以包括过氧酸，例如过苯甲酸或卤素取代的过苯甲酸(如3-氯过苯甲酸)、过氧链烷酸(如过乙酸)、烷基过氧化氢(如叔丁基过氧化氢)。合适的溶剂例如水、低级链烷醇(如乙醇等)、烃类(如甲苯)、酮类(如2-丁酮)、卤代烃类(如二氯甲烷)，以及这些溶剂的混合物。
式(II)中间体可以由式(VIII)的适当取代的哌啶与式(V)的中间体酸或其官能衍生物按照工艺上已知的成酯步骤反应，随后按工艺上已知步骤除去保护基P而衍生得到。P代表一个易去除的保护基团，例如C1-4烷基羰基、C1-4烷氧基羰基、苯基甲基及类似的保护基团。
式(V)的中间体酸的制备方法公开在欧洲专利0,389,038-A。
式(VI-a)中间体可以通过在对反应惰性的溶剂(例如四氢呋喃)中用合适的还原剂，例如铂/活性炭与氢的组合，将式(IX)中间体还原来制备。
式(IX)中间体可以按照与由中间体(II)和(III)制备式(I)化合物相类似的方式，将式(II)的哌啶用与式(X)中间体进行N-烷基化来制得，式(X)中的W1是一个适当的离去基团，例如卤原子。
其中的P1代表如上定义的P以及氢的式(VIII”)中间体，可以通过按工艺上已知的方法将式(XI)中间体还原来制备。具体地说，其中的R4是C1-6烷氧基的式(VIII”)中间体用化学式(VIII”-a)表示，而且其中的R4和羟基具有顺式构型，它可以通过在对反应隋性的溶剂(如四氢呋喃)中用还原剂，例如取代的硼氢化物(如三仲丁基硼氢化锂、三仲丁基硼氢化钾)、取代的氢化铝、三叔丁氧基氢化铝锂等，还原式(XI-a)中间体来制备。在较低温度下进行反应可能有利，最好是温度低于-70℃。利用立体化学上纯的试剂可以使上述还原以立体有择的方式进行。
(XI-a)：R4是C1-6烷氧基(VIII’-a)：R4是C1-6烷氧基
式(I)化合物或任何其它中间体的顺式和反式非对映体异构的消旋体，也可以利用工艺上已知的方法拆解成它们的旋光异构体，顺(+)、顺(-)、反(+)和反(-)。非对映异构体可以用物理分离方法分离，例如选择性结晶和层析技术(如反流分布法)，而对映异构体则可以利用它们与对映异构上纯的酸或其对映异构上纯的衍生物形成的非对映异构的盐的选择性结晶而彼此分开。
式(I)化合物和式(II)及式(VI)中间体、它们的N-氧化物形式、可药用的盐以及立体异构形式具有有利的刺激肠能动性的性质。特别是，本发明化合物对于小肠和大肠具有显著的增强能动性的作用。后一性能被在“豚鼠回肠同轴刺激”试验和“有知觉的狗的结肠能动性”试验中得到的结果所证实。所述的两个试验均在后文说明。化合物中有一些还在“狗的盐酸二甲苯甲脒脲试验”中显示出活性。
根据它们增强肠能动性的有用性能，可以将所述化合物配制成各种形式以便服用。
为制备本发明的药物组合物，将有效数量酸或碱加成盐形式的具体化合物作为活性成分与可药用的载体充分混合，载体可以根据所想服用的制剂的形式采取许多不同的形式。这些药物组合物最好是单位剂量形式，优选适合口服、直肠用药或非肠道注射的形式。例如，在制备口服剂量形式的组合物时，可以使用任何适用的药物介质，例如，在诸如悬浮液、糖浆、酏剂和溶液等口服液体制剂的情形使用水、二醇类、油、醇类等；或者在粉剂、丸剂、胶囊和片剂等情形使用固体载体，例如淀粉、糖、高岭土、润滑剂、粘合剂、崩解剂等。因此容易服用，片剂和胶囊代表了最方便的口服剂量单位形式，在这种情形显然使用固体药物载体。对于非肠道用药的组合物，载体通常包括灭菌的水，至少要占大部分，但是也可以包含其它组分，例如促进溶解的组分。可注射的溶液可以配制成其中的载体含有盐水溶液、葡萄糖溶液或者盐水与葡萄糖溶液的混合物。也可以配制成可注射的悬浮液，在这种情形可以使用合适的液体载体、悬浮剂等。在适合经皮给药的组合物中，载体中可任选地含有一种提高穿透性的试剂和/或一种合适的润湿剂，它们可以任选地与任何品种小比例的合适添加剂混合，这些添加剂对皮肤不应有明显的有害作用。所述添加剂可以使对皮肤用药变得容易，并且/或者有助于 所要组合物的配制。这些组合物可以以各种方式用药，例如经皮的贴剂、点斑剂，膏剂。式(I)、(II)或(VI)的酸加成盐由于其水溶解度高于相应的碱形式，所以显然更适合用于水基组合物的制备。
将上述药物组合物配制成剂量单位形式特别有利，因为这易于服用而且剂量均一。在本说明书和权利要求中所说的剂量单位形式是指适合作为单位剂量的物理上分离的单元，每个单元含有与所需的药物载体相结合的预定数量的活性组分，根据计算它能产生所要求的治疗作用。这种剂量单位形式的实例是药片(包括带印记的或有包衣的药片)、胶囊、药丸、粉末包装、糯米纸囊剂、注射溶液或悬浮液、一茶匙容量、一大汤匙容量等，以及它们的分离多重物。
由于具有刺激肠的系统能动性的能力，特别是增强结肠能动性的能力，目标化合物可用来使患有与能动性障碍有关的病症(例如小肠和大肠蠕动减弱本身或伴有胃腓空延迟)的对象肠通行正常化或得到改进。根据本发明化合物的这一用途，提供了一种治疗患有肠道系统活动性病症的温血动物的方法，这些病症包括便秘、假梗阻、肠张力缺乏、手术后肠张力缺乏、过敏性肠综合症(IBS)、药物诱发的通行延缓、特别是结肠通行能力减弱。所述方法包括对温血动物全身性施用对刺激肠是有效数量的式(I)化合物，它的N-氧化物，可药用的酸加成盐或可能的立体异构形式。因此，提供了式(I)化合物作为药物的应用，特别是式(I)化合物用于制造治疗与结肠能动性减弱有关的病症的药物。
一般认为，治疗上有效的数量是从每Kg体重约0.001mg至约10mg，优选从约0.02mg至约5mg。一种治疗方法还包括按照每天摄入2或4次的方案服用活性组分。
实验部分A.中间体的制备实施例1
a)在搅拌下将硼氢化钠(7.7g)分批加入到3-甲氧基-1-(苯基甲基)-4-哌啶酮(44.8g)在乙醇(610ml)中的溶液里。加完后，冷却至室温，继续在室温下搅拌3小时。将反应混合物浓缩至体积约为150ml。向浓缩物中加300ml水，蒸走所有残存的乙醇。冷却后，用乙醚萃取该混合物。萃取物用水洗、干燥过滤并蒸发。油质残余物用柱状色谱法在硅胶上纯化(洗脱剂：CHCl3/CH3OH，96/4)。收集纯级分，蒸走洗脱剂该残余物同柱状色谱法在硅胶上分离(洗脱剂：己烷CHCl3/(CH3OH/NH3)50/50/1)。收集第一级分蒸走洗脱剂得到11.5g(25.5％)反-3-甲氧基-1-(苯基甲基)-4-哌啶醇(中间体1)。收集第二级分，蒸走洗脱剂，得到7.7g(17.1％)顺3-甲氧基-1-(苯基甲基)-4-哌啶醇(中间体2)。
a1)将3-甲氧基-1-(苯基甲基)-4-哌啶酮(4.4g)在四氢呋喃中的溶液冷却到-75℃。逐滴加入三仲丁基硼氢化锂，将反应混合物在-70℃搅拌2小时。在室温逐滴加入10％乙酸(100ml)。蒸走有机溶剂。用NH4OH将水基残余物碱化，然后用二异丙醚萃取二次。分离出的有机层用水洗，用MgSO4干燥，过滤，蒸走溶剂。残余物用短柱色谱法在硅胶上纯化(洗脱剂：CH2C12/CH3OH，95/5渐升至98/2)，得到1.3g(29.4％)顺-3-甲氧基-1-(苯基甲基)-4-哌啶醇(中间体2)。
b)将11.5g中间体(2)和150ml甲醇的混合物在常压和室温下用2g钯/碳催化剂(10％)氢化。在吸收了计算数量的氢以后，滤出催化剂，蒸发滤液。残余物用柱状色谱法在硅胶上纯化(洗脱剂：CHCl3/(CH3OH/NH3)，85/15)。收集纯级分，蒸走洗脱剂，得到3.6g(53％)顺-3-甲氧基-4-哌啶醇为油质残余物(中间体3)。
a)将双(1，1′-二甲基乙基)二碳酸酯(65.5g)在CHCl3(100ml)中的溶液逐滴加到中间体(3)(34g)在氯仿(350ml)中的溶液里，在室温搅拌该反应混合物3小时。用水和氨水洗反应混合物，然后用水洗。分离出的有机层用MgSO4干燥，过滤，蒸走溶剂。将残余物(79g)用柱状色谱法在硅胶上纯化(洗脱剂：CH2Cl2/(CH3OH/NH3)，97/3渐升至95/5)。收集纯级分，蒸发溶剂，得到58g顺-4-羟基-3-甲氧基-1-哌啶羧酸(±)-1，1-二甲基乙基酯(96.4％粗品残余物)(中间体4)。
d)将4g氢化钠加到中间体(4)(19.4g)的四氢呋喃(400ml)溶液中。将混合物搅拌和回流3小时(溶液I)。将13.6g 1，1′-羰基双-1H-咪唑13.6g加到4-氨基-5-氯-2，3-二氢-7-苯并呋喃羧酸(18g)在乙腈(400ml)中的悬浮液里，将此混合物在室温下搅拌2小时。蒸走溶剂。将残余物溶解在四氢呋喃(400ml)中，得到溶液II。在室温下将溶液II倒入溶液I中，反应混合物在室温下搅拌2小时。蒸走溶剂。将残余物分配在CH2Cl2和水之间。分离出有机层，水层用CH2Cl2萃取2次。将分离出的有机层用MgSO4干燥，过滤，蒸走溶剂。残余物用短柱色谱法在硅胶上纯化(洗脱剂：CH2Cl2/CH3OH，98/2)。收集所要的级分，蒸走溶剂，得到32g 4-氨基-5-氯-2，3-二氢-7-苯并呋喃羧酸(±)-顺-1-〔(1，1-二甲基乙氧基)羰基〕-3-甲氧基-4-哌啶酯(87％)(中间体5)。
e)将中间体(5)(32g)在四氢呋喃(500ml)和盐酸(50ml)中的混合物搅拌回流30分钟。将反应混合物冷却，用NH4OH碱化。分离两层。水层用四氢呋喃萃取。将分离出的有机层蒸发。残余物用柱状色谱法在硅胶上纯化(洗脱剂：CH2Cl2/(CH3OH/NH3，93/7)。收集纯级分，蒸走溶剂。将残余物自乙腈中结晶。滤出沉淀物，80℃下真空干燥，得到6.4g 4-氨基-5-氯-2，3-二氢-7-苯并呋喃羧酸(±)-顺-3-甲氧基-4-哌啶酯(26％)(中间体6)。实施例2
a)将4-氨基-5-氯-2，3-二氢-7-苯并呋喃羧酸(4.3g)在亚硫酰氯(100ml)和CHCl3(200ml)中的混合物搅拌回流2小时。将混合物冷却，蒸走溶剂。加入甲苯，再蒸发，得到4.8g 4-氨基-5-氯-2，3-二氢-7-苯并呋喃碳酰氯(100％粗品残余物)(中间体7)。
b)将4-羟基-1-哌啶羧酸1，1-二甲基乙基酯(4.02g)和N，N-二甲基-4-哌啶胺(3.7g)在二氯甲烷(200ml)中的溶液在室温下搅拌。向该溶液中倒入中间体(7)(4.8g)在CH2Cl2(200ml)中的溶液。在室温下搅拌反应混合物3小时。用水、5％NaOH溶液洗该混合物，再用水洗。分离出有机层，用MgSO4干燥，过滤蒸走溶剂。残余物(7.4g)用柱状色谱法在硅胶上纯化(洗脱剂：CH2Cl2/CH3OH，98/2)。收集纯级分，蒸走溶剂，得到4.7g 4-〔〔(4-氨基-5-氯-2，3-二氢-7-苯并呋喃基)羰基〕氧〕-1-哌啶羧酸1，1-二甲基乙基酯(59％)(中间体8)。
c)将中间体(8)(7g)在四氢呋喃(20ml)和盐酸(20ml)中的混合物搅拌回流2小时。将反应混合物冷却，用NH4OH碱化。倾析倒出有机层，蒸走溶剂。残余物用柱状色谱法在硅胶上纯化(洗脱剂：CH2Cl2/(CH3OH/NH3，92/8)。收集纯级分，蒸走溶剂。残余物(5.5g)用高效液体色谱法纯化(柱：200g Kromasil；10μm；100A；洗脱剂：(0.5％乙酸铵水溶液)/甲醇，70/30)。收集纯级分，用NH3/CH2Cl2萃取。蒸发萃取液。残余物自乙腈中结晶。滤出沉淀物，70℃真空干燥，得到2.60g 4-氨基-5-氯-2，3-二氢-7-苯并呋喃羧酸-4-哌啶酯(54％)(中间体9)。实施例3
a)将按照美国专利3,657,267中所述制备的环丙基(4-氨基-3-硝基苯基(甲酮(80g)与浓盐酸(420ml)的混合物搅拌回流30分钟。将反应混合物冷却，加水。滤出沉淀物，用水洗，干燥，得到80g(84.5％)1-(4-氨基-3-硝基苯基)-4-氯-1-丁酮；熔点150℃(中间体10)。
b)将中间体(9)(14.8g)、中间体(10)(12.13g)和N，N-二乙基乙胺(8.3ml)在N，N-二甲基甲酰胺(150ml)中的混合物在约70℃搅拌20小时。蒸走溶剂残余物用水稀释，该混合物用CH2Cl2萃取2次。分离出的有机层用水洗，用MgSO4干燥，过滤，蒸走溶剂。残余物用柱状色谱法在硅胶上纯化(洗脱剂：CH2Cl2/CH3OH，90/10)。收集所要的级分，蒸走溶剂。残余物(10g)自二异丙醚中结晶。滤出沉淀并干燥之，得到8.3g(33％)4-氨基-5-氯-2，3-二氢-7-苯并呋喃羧酸1-〔4-(4-氨基-3-硝基苯基)-4-氧丁基〕-4-哌啶酯(中间体11)。
c)将中间体(11)(8.2g)在四氢呋喃(150ml)中的混合物用铂/活性碳(5％)(2g)作为催化剂氢化。在吸收了H2(3当量)之后，在硅藻土上滤除催化剂，将滤液蒸发。残余物用水稀释，混合物用CH2Cl2萃取2次。将分离出的有机层用水洗，用MgSO4干燥、过滤，将溶剂蒸发。残余物(8g)用柱状色谱在硅胶上纯化(洗脱剂：CH2Cl2/(CH3OH/NH3)，92/8)。收集纯级分，蒸走溶剂。残余物(7.5g)自CH3CN中结晶。滤出沉淀并干燥之，得到5.43g(70.5％)4-氨基-5-氯-2，3-二氢-7-苯并呋喃羧酸1-〔4-(3，4-二氨基苯基)-4-氧丁基〕-4-哌啶酯；熔点173.4℃(中间体12)。B.最终化合物的制备实施例4
将中间体(6)(2.3g)、4-氯-1-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1-丁酮(2g)、碳酸钠(2.1g)和碘化钾(催化数量)在4-甲基-2-戊酮(150ml，事先用MgSO4干燥)中的混合物搅拌回流过夜。将反应混合物冷却，用水洗，用MgSO4干燥，过滤，将滤液蒸发。残余物用柱状色谱法在硅胶上纯化(洗脱剂：CH2Cl2，渐升至CH2Cl2/(CH3OH/NH3，97/3)。收集纯级分，蒸走溶剂。将残余物溶于甲醇，用乙二酸(0.6g)将其转化成乙二酸盐。将混合物加热至沸，然后冷却，滤出沉淀，自2-丙醇中重结晶。将沉淀溶在氨水溶液/CH2Cl2中。分离出有机层，用MgSO4干燥，过滤，蒸走溶剂。将残余物在沸腾的二异丙醚中搅拌，冷却，滤出所形成的沉淀，在80℃下真空干燥，得到1.10g4-氨基-5-氯-2，3-二氢-7-苯并呋喃 羧酸(±)-顺-3-甲氧基-1-〔4-氧代-4-(3，4，5-三甲氧基苯基)丁基〕-4-哌啶酯(28％)；熔点132.3℃(化合物1)。
用类似的方式还制备了以下化合物：
4-氨基-5-氯-2，3-二氢-7-苯并呋喃羧酸1-〔4-氧代-4-(3，4，5-三甲氧基苯基)丁基〕-4-哌啶酯乙二酸酯(1∶1)；熔点177.8℃(化合物2)；
4-氨基-5-氯-2，3-二氢-7-苯并呋喃羧酸1-〔4-(4-乙基苯基)-4-氧丁基〕-4-哌啶酯；熔点121.3℃(化合物3)；
4-氨基-5-氯-2，3-二氢苯并呋喃羧酸1-〔4-(3，5-二氯苯基)-4-氧丁基〕-4-哌啶酯；熔点122.6℃(化合物4)；
4-氨基-5-氯-2，3-二氢-7-苯并呋喃羧酸1-〔4-(3，4-二甲氧基苯基)-4-氧丁基〕-4-哌啶酯；熔点156，3℃(化合物5)；
4-氨基-5-氯-2，3-二氢-7-苯并呋喃羧酸1-〔4-(4-甲氧基苯基)-4-氧丁基〕-4-哌啶酯；熔点136.4℃(化合物6)；
4-氨基-5-氯-2，3-二氢-7-苯并呋喃羧酸1-〔4-(4-甲氧基-3，5-二甲基苯基)-4-氧丁基〕-4-哌啶酯(E)-2-丁烯二酸盐(1∶1)；熔点171.2℃(化合物7)实施例5
在N2气流下将4-(4-羟基-1-哌啶基)-1-(3，4，5-三甲氧苯基)-1-丁酮(3.3g)加到氢化钠(0.4g)在四氢呋喃(100ml)中的溶液里(溶液I)。将5-氨基-6-氯-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃-8-羧酸(2.14g)和1，1’-羰基双-1H-咪唑(2g)在乙腈(100ml)的混合物在室温下搅动2小时，蒸走溶剂。残余物溶在四氢呋喃中(100ml)(溶液II)。在室温下将溶液(II)倒入溶液(I)中，将反应混合物在室温下搅拌4小时。蒸走溶剂。残余物用水稀释，用CH2Cl2萃取2次。分离出的有机层用水洗，用MgSO4干燥，过滤，蒸走溶剂。残余物用柱状色谱法在硅胶上纯化(洗脱剂：CH2Cl2/己烷/(CH3OH/NH3)，50/42/3)。收集所要的级分，蒸走溶剂。残余物(2.3g)用高效液相色谱法在硅胶上纯化(洗脱剂：CH2Cl2/CH3OH，90/10)。收集纯级分，蒸走溶剂。残余物(1.2g)自二异丙醚中结晶。滤出沉淀并干燥之，得到0.93g 5-氨基-6-氯-3，4-二氢-2H-苯并吡喃-8-羧酸1-〔4-氧代-4-(3，4，5-三甲氧苯基)丁基〕-4-哌啶酯(17％)；熔点112.7℃(化合物8)。
用类似的方式还制备了以下化合物：
4-氨基-5-氯-2，3-二氢-2，2-二甲基-7-苯并呋喃羧酸1-〔4-氧代-4-(3，4，5-三甲氧基苯基)丁基〕-4-哌啶酯；熔点154.2℃(化合物9)；
4-氨基-5-氯-2-甲氧基苯甲酸1-〔4-氧代-4-(3，4，5-三甲氧基苯基)丁基〕-4-哌啶酯；-水合物；熔点90℃(化合物10)；
4-氨基-5-氯-2-甲基-7-苯并呋喃羧酸1-〔4-氧代-4-(3，4，5-三甲氧基苯基)丁基〕-4-哌啶酯；熔点128.6℃(化合物11)。实施例6
将中间体(12)(2.4g)和几滴盐酸在50ml水中的混合物在室温下搅拌。加入2.5g异氰酸钾在50ml水中的溶液，将所形成的反应混合物搅拌回流2小时。将反应混合物冷却，用NH4OH碱化，然后用CH2Cl2萃取2次。分离出的有机层用MgSO4干燥，过滤，蒸走溶剂。将残余物(2.5g)与1，1’-羰基双-1H-咪唑(0.93g)在四氢呋喃(80ml)中混合。将反应混合物搅拌回流2小时。蒸走溶剂。残余物用水稀释，用CH2Cl2萃取此混合物2次。分离出的有机层用水洗，用MgSO4干燥，过滤，蒸走溶剂。残余物自2-丙醇/甲醇中结晶。滤出沉淀并干燥之，得到0.53g 4-氨基-5-氯-2，3-二氢-7-苯并呋喃羧酸1-〔4-(2，3-二氢-2-氧代-1H-苯并咪唑-5-基)-4-氧丁基〕-4-哌啶酯(21.2％)；熔点272.7℃(化合物12)。实施例7
将中间体(12)(1.8g)、(α-亚氨基-α-甲氧基甲基)甲酸甲酯(0.5g)和乙酸(0.75ml)在CHCl3(100ml)中的混合物搅拌回流2天。用NH4OH将反应混合物碱化。分离出有机层，水层用CH2Cl2萃取。合并的有机层用水洗，用MgSO4干燥，过滤，蒸走溶剂。残余物自甲醇中结晶二次。滤出沉淀干燥，得到0.4g 4-氨基-5-氯-2，3-二氢-7-苯并呋喃羧酸1-〔4-〔2-〔(甲氧基羰基)氨基〕-1H-苯并咪唑-5-基〕-4-氧丁基〕-4-哌啶酯-水合物(18.7％)；熔点201.6℃(化合物13)。C.药理实施例实施例8：豚鼠回肠同轴刺激。
将两种性别的Dunkin Hartley豚鼠(体重±500g)断头宰杀。取出回肠，用温热和氧化的krebs-Henseleit溶液清洗。将豚鼠的一段4.5cm长的无末端和无损伤的回肠加上1g的预加负载垂直悬挂在100ml Krebs-Henseleit溶液(37.5℃)中，鼓入95％O2和5％CO2混合气。利用两个铂电极在回肠段的整个长度上施加透壁刺激，阳极穿过回肠腔阴极放在溶液中。将制样用来自程控刺激器的单个矩形刺激波〔1毫秒，0.1赫兹；次极大响应(电流产生80％最大响应)〕进行刺激。等长地测量收缩。在30分钟的稳定期内，将肠段反复地拉伸至2g张力，以便得到1g的稳态张力。在进行电刺激之前，先给出乙酰胆碱的累积剂量响应曲线。电刺激在超极大电流下开始，以便确定抽搐响应的最大振幅。当这些响应稳定后，施加得到80％最大响应的次极大刺激，直到抽搐响应恒定至少15分钟，然后向溶液中加入单个剂量的试验化合物。将施用试验化合物5分钟后的抽搐响应的振幅与施用试验化合物之前的振幅相比较。化合物1、2、7和13在3×10-9M的浓度下抽搐响应的振幅增加5％以上。实施例9：有知觉的狗的结肠能动性
在通常的麻醉和无菌条件下，将等长张力传感器植入体重7-17kg的雌性猎兔犬体内。为研究结肠能动性，传感器缝合在距回盲瓣8、16、24和32cm处的结肠上。狗有至少两周的恢复期。在禁食±20小时后开始实验，在此期间水的供应不受限制。在实验期间，狗可在笼子里自由活动，采用遥测(无线)系统。笼子建在一间装有一个方向透光的玻璃的特殊房间里，即，观察人员可以看到狗，而狗不能看到观察者，通过这个系统可以观察狗的行为变化和确定排粪情况。来自传感器的信息以数字化的形式通过一个特别制造的发送器小盒传送。此小盒放在狗穿戴的的外套中。信号由每只笼子上方的麦克风接收并传送到中心计算机系统。这一试验中的参数之一是狗的排粪。在服用试验化合物之后的头三小时内，观察狗以确定是否和何时排粪。化合物1、2、5、6、12和13在0.31mg/kg的剂量下在头3个小时内诱发至少50％的试验动物排粪。D.组合物实施例
以下制剂示例说明了适合根据本发明对温血动物全身或局部用药的剂量单位形式的典型的药物组合物。
在所有这些实施例中使用的“活性组分”(A.I.)是指一种式(I)化合物，它的N-氧化物形式，可药用的酸加成盐或是立体化学异构形式。实施例10：口服的溶液
将9g 4-羟基苯甲酸甲酯和1g 4-羟基苯甲酸丙酯溶在4L沸腾的纯化过的水中。在3L此溶液中先溶解10g 2，3-二羟基丁二酸，然后溶解20g A.I.。将后一溶液与前一溶液的剩余部分合并，向其中加入12L的1，2，3-丙三醇和3L 70％山梨醇溶液。将40g糖精钠溶在0.5L水中，加入2mL覆盆子香精和2ml醋栗香精。将此溶液与前一溶液合并，加入适量的水至体积为20L，得到每茶匙(5ml)含5mg A.I.的口服溶液。将所形成的溶液装入适当的容器。实施例11：胶囊
将20g A.I.6g十二烷基硫酸钠、56g乳糖、0.8g胶体二氧化硅和1.2g硬脂酸镁激烈地一起搅拌。随后将形成的混合物装入1000只合适的硬明胶胶囊中，每只含20mg A.I.。实施例12：片剂包衣
制备片剂心
将100g A.I.、570g乳糖和200g淀粉的混合物充分混合，然后用5g十二烷基硫酸钠和10g聚乙烯吡咯烷酮在约200ml水中的溶液调湿。将湿粒混合物过筛、干燥、再过筛。然后加入100g微晶纤维素和15g氢化植物油。将其充分混合，压制成片，得到10000只药片，每片含10mg活性组分。
包衣
向10g甲基纤维素在75ml变性酒精中的溶液中加入5g乙基纤维素在150ml二氯甲烷中的溶液。然后加入75ml二氯甲烷和2.5ml 1，2，3-丙三醇。将10g聚乙二醇熔化并溶在75ml二氯甲烷中。将后一溶液加入前一溶液中，然后加入2.5g十八烷酸镁、5g聚乙烯吡咯烷酮和30ml色料浓悬浮液，将整个混合物均化。用这样得到的混合物在包衣装置中包覆片剂心。实施例13：可注射的溶液
将1.8g 4-羟基苯甲酸甲酯和0.2g 4-羟基苯甲酸丙酯溶在约0.5L注射用的沸水中。在冷却到约50℃之后，在搅拌下加入4g乳酸、0.05g丙二醇和4g A.I.。将溶液冷却到室温，补加适量的注射用水至体积为1L，得到每ml含4mg A.I.的溶液。将溶液过滤灭菌(美国药典XVIIp.811)，装入灭菌的容器中。实施例14：栓剂
将3g A.I.溶在3g 2，3-二羟基丁二酸在25ml聚乙二醇400中的溶液里。将12g表面活性剂和适量的甘油三酯(加至300g)一起熔化，然后与前一溶液充分混合。将这样得到的混合物在37～38℃倒入模具中，形成100只栓剂，每只含30mg活性组分。