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1、(10)申请公布号 CN 103169978 A (43)申请公布日 2013.06.26 CN 103169978 A *CN103169978A* (21)申请号 201310114768.7 (22)申请日 2013.04.03 A61K 47/36(2006.01) A61K 39/395(2006.01) A61K 39/42(2006.01) A61K 9/08(2006.01) A61P 31/14(2006.01) A61P 31/20(2006.01) (71)申请人 江苏省农业科学院 地址 210014 江苏省南京市孝陵卫钟灵街 50 号 (72)发明人 邓碧华 卢宇 吕芳。
2、 张金秋 侯继波 (74)专利代理机构 南京汇盛专利商标事务所 ( 普通合伙 ) 32238 代理人 张立荣 (54) 发明名称 用于禽免疫球蛋白的温控缓释注射剂、 其制 备方法及其应用 (57) 摘要 本发明用于禽免疫球蛋白的温控缓释注射 剂、 其制备方法及其应用， 属于生物制品技术领 域。该温控缓释注射剂， 由以下成分组成 ： 壳聚糖 0.5%-5%， PEG60002%-20%， 磷酸氢二钾 2%-20%， 酸 0.1-2%， 余量为水。该温控缓释注射剂制备方法 为， 将壳聚糖溶解于含酸的水溶液， 加入 PEG6000 搅拌至溶解， 再加入磷酸氢二钾水溶液， 搅拌均匀 即得温控缓释注射剂。
3、。本发明还提供温控缓释注 射剂在制备禽免疫球蛋白的温控缓释注射液方面 的应用。本发明温控缓释注射剂能延缓禽免疫球 蛋白的释放时间， 延长机体吸收免疫球蛋白的时 间。温控缓释注射剂的制备方法简单， 容易操作， 无需精密仪器， 成本低， 使用方便。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 7 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书7页 (10)申请公布号 CN 103169978 A CN 103169978 A *CN103169978A* 1/1 页 2 1. 用于禽免疫球蛋白的温控缓释注射剂， 按照质量百分含量由以下成分组成 ： 壳。
4、聚糖 0.5%-5%， PEG6000 2%-20%， 磷酸氢二钾 2%-20%， 酸 0.1-2%， 余量为水。 2. 根据权利要求 1 所述用于禽免疫球蛋白的温控缓释注射剂， 其特征在于 ： 所述酸为 乙酸或盐酸 ； 所述壳聚糖的脱乙酰度为 80-95%， 粘均分子量为 14105。 3. 制备权利要求 1 或 2 所述温控缓释注射剂的方法， 其特征在于 ： 将壳聚糖溶解于含 酸的水溶液， 加入 PEG6000 搅拌至溶解， 再加入磷酸氢二钾水溶液， 搅拌均匀即得温控缓释 注射剂。 4. 根据权利要求 3 所述制备温控缓释注射剂的方法， 其特征在于所述含酸的水溶液为 乙酸水溶液， 其浓度为。
5、 0.1-0.5mol/L。 5. 根据权利要求 4 所述制备温控缓释注射剂的方法， 其特征在于所述磷酸氢二钾水溶 液的质量百分浓度为 30-60%。 6. 根据权利要求 5 所述制备温控缓释注射剂的方法， 其特征在于所述壳聚糖与含酸的 水溶液质量比为 1-10:100。 7. 根据权利要求 6 所述制备温控缓释注射剂的方法， 其特征在于 PEG6000 与含酸的水 溶液的质量比为 3-15:60。 8.权利要求1或2所述温控缓释注射剂在制备禽免疫球蛋白的温控缓释注射液方面的 应用。 9. 根据权利要求 8 所述应用， 其特征在于将禽免疫球蛋白与温控缓释注射剂按照体积 比为 1:3-5 混合，。
6、 搅拌均匀即得禽免疫球蛋白的温控缓释注射液。 10. 根据权利要求 9 所述应用， 其特征在于所述禽免疫球蛋白为抗新城疫禽免疫球蛋 白、 抗小鹅瘟禽免疫球蛋白和抗鸭病毒性肝炎禽免疫球蛋白。 权 利 要 求 书 CN 103169978 A 2 1/7 页 3 用于禽免疫球蛋白的温控缓释注射剂、 其制备方法及其应 用 技术领域 0001 本发明涉及生物制品领域， 具体涉及用于禽免疫球蛋白的温控缓释注射剂、 其 制备方法及其应用。 背景技术 0002 禽免疫球蛋白 （Egg Yolk Immunoglobulin） 是存在于卵黄中的免疫球蛋白， 它是 由母鸡血清中的免疫球蛋白转移而来。卵黄作为特异。
7、抗体 IgY 的来源有许多优点。如 ： 母 鸡易于饲养， 费用不高 ； 收集鸡蛋方便， 无需抽动物血， 无损伤， 符合现代动物保护规则 ； 产 生有效免疫反应所需抗原量小， 尤其是高度保守的哺乳动物蛋白质对种系发生学上距离较 远的禽类通常有较强的免疫原性。禽免疫球蛋白可以应用于临床疾病的治疗， 如鸡传染性 法氏囊病、 新城疫、 鸭瘟、 小鹅瘟、 猪瘟等等。在临床实践中， 禽免疫球蛋白的预防和治疗效 果非常理想， 同时卵黄抗体的制造工艺简单价廉， 在养禽业生产中用量很大， 发挥着十分重 要的作用。 0003 禽免疫球蛋白进入动物体内 7 天左右就会被机体代谢。出生 7 天的动物即使免疫 疫苗， 。
8、也不能产生抗体， 所以容易造成保护动物出现空白期。 因为有些疾病的发病期是动物 出生后 14 天左右， 所以必须重复接种传统的禽免疫球蛋白。这将会大大增加工人的工作量 和工作时间。 发明内容 0004 本发明的目的是解决禽免疫球蛋白在禽体内代谢时间短， 需要重复接种的缺陷， 提供用于禽免疫球蛋白的温控缓释注射剂。 0005 本发明的另一目的是提供温控缓释注射剂的制备方法， 该方法简单、 成本低。 0006 本发明的再一目的是提供温控缓释注射剂的应用。 0007 用于禽免疫球蛋白的温控缓释注射剂， 按照质量百分含量由以下成分组成 ： 壳聚 糖 0.5%-5%， PEG6000 2%-20%， 磷。
9、酸氢二钾 2%-20%， 酸 0.1-2%， 余量为水。 0008 所述酸为乙酸或盐酸 ； 所述壳聚糖的脱乙酰度为80-95%， 粘均分子量为14105。 0009 制备所述温控缓释注射剂的方法， 将壳聚糖溶解于含酸的水溶液， 加入 PEG6000 搅拌至溶解， 再加入磷酸氢二钾水溶液， 搅拌均匀即得温控缓释注射剂。 0010 所述含酸的水溶液为乙酸水溶液， 其浓度为 0.1-0.5mol/L。 0011 所述磷酸氢二钾水溶液的质量百分浓度为 30-60%。 0012 所述壳聚糖与含酸的水溶液质量比为 1-10:100。 0013 PEG6000 与含酸的水溶液的质量比为 3-15:60。 0。
10、014 所述温控缓释注射剂在制备禽免疫球蛋白的温控缓释注射液方面的应用。 将禽免 疫球蛋白与温控缓释注射剂按照体积比为 1:3-5 混合， 搅拌均匀即得禽免疫球蛋白的温控 缓释注射液。所述禽免疫球蛋白为抗新城疫禽免疫球蛋白、 抗小鹅瘟禽免疫球蛋白和抗鸭 说 明 书 CN 103169978 A 3 2/7 页 4 病毒性肝炎禽免疫球蛋白。 0015 有益效果 温控缓释注射剂中的壳聚糖能够吸附禽免疫球蛋白， 在 PEG6000 和磷酸氢二钾的作用 下， 能够在一定温度下形成固体凝胶状。含有禽免疫球蛋白的温控缓释注射剂接种至动物 体内， 迅速的在注射部位形成原位凝胶， 延长机体吸收免疫球蛋白的时间。
11、， 延长对机体的保 护期至 1215 天。本发明温控缓释注射剂的成分简单、 安全、 无毒。 0016 温控缓释注射剂的制备方法简单， 容易操作， 无需精密仪器， 成本低。 0017 温控缓释注射剂与禽免疫球蛋白只需要混合均匀即可使用， 不会影响禽免疫球蛋 白的活性， 而且操作简单、 方便。 0018 具体实施方式 ： 实施例 1 温控缓释注射剂的制备 本实施例中壳聚糖购自浙江金壳生物有限公司， 脱乙酰度 ： 85%， 粘均分子量 ： 3.7 1 05。 0019 PEG6000 购自天津市科密欧化学试剂有限公司。 0020 1. 壳聚糖水溶液配制 称取 2 克壳聚糖， 分别加入 100ml 不。
12、同浓度的盐酸、 乙酸、 草酸、 磷酸和柠檬酸水溶液 中， 不停搅拌， 观察壳聚糖的溶解情况， 结果如表 1 所示。从表 1 可以看出， 乙酸和盐酸水溶 液对壳聚糖有较好的溶解性。 0021 表 1 壳聚糖在不同酸的水溶液中的溶解情况 2. 温控缓释注射剂中各成分浓度的摸索 分别称取 1 克、 2 克、 2.5 克、 3 克壳聚糖， 加入 100ml 浓度为 0.1 mol/L 的乙酸水溶液 中， 搅拌至完全溶解， 得到浓度为10、 20、 25和30g/L的壳聚糖水溶液 ； 分别取9ml壳聚糖水 溶液， 加入不同质量 PEG6000 搅拌至溶解， 滴加 1ml 质量百分浓度为 50% 的磷酸氢。
13、二钾水溶 液， 搅拌均匀， 将混合物放入 37， 记录成胶时间。 0022 不同浓度壳聚糖水溶液与 PEG6000 混合， 但是不添加磷酸氢二钾水溶液， 体系不 能形成凝胶 ； 当壳聚糖水溶液浓度为 30g/L 时， 其本身黏度就很大， 室温下就容易凝结 ； 当 壳聚糖水溶液浓度为 10g/L 时， 体系不能形成凝胶。体系中的 PEG6000 可以大大缩短凝胶 时间。具体结果见表 2。从表 2 可以看出， 9ml 浓度为 20 g/L、 25g/L 的壳聚糖水溶液中添 加 0.5-1.5 g 的 PEG6000， 然后滴加 1ml 磷酸氢二钾水溶液， 形成的体系在 37条件下均能 形成凝胶， 。
14、且发明人经过多次实验发现， 该体系 30以下是液态， 在 30以上是固态的。 说 明 书 CN 103169978 A 4 3/7 页 5 0023 表 2 不同组成的体系在 37条件下形成凝胶的时间 （min） 3. 温控缓释注射剂的制备 称取 2.5 克壳聚糖， 加入 100ml 浓度为 0.1 mol/L 的乙酸水溶液中， 搅拌至完全溶解， 得到浓度为 25 g/L 的壳聚糖水溶液 ； 取 9ml 壳聚糖水溶液， 加入 1 克 PEG6000 搅拌至溶解， 滴加 1ml 质量浓度为 50% 的磷酸氢二钾水溶液， 搅拌均匀， 得到温控缓释注射剂 1。 0024 称取 2.5 克壳聚糖， 加。
15、入 100ml 浓度为 0.1 mol/L 的乙酸水溶液中， 搅拌至完全溶 解， 得到浓度为 25 g/L 的壳聚糖水溶液 ； 取 9ml 壳聚糖水溶液， 加入 0.5 克 PEG6000 搅拌至 溶解， 滴加 1ml 质量浓度为 50% 的磷酸氢二钾水溶液， 搅拌均匀， 得到温控缓释注射剂 2。 0025 称取 2.0 克壳聚糖， 加入 100ml 浓度为 0.1 mol/L 的乙酸水溶液中， 搅拌至完全溶 解， 得到浓度为 20 g/L 的壳聚糖水溶液 ； 取 9ml 壳聚糖水溶液， 加入 1.5 克 PEG6000 搅拌至 溶解， 滴加 1ml 质量浓度为 50% 的磷酸氢二钾水溶液， 。
16、搅拌均匀， 得到温控缓释注射剂 3。 0026 称取 2.5 克壳聚糖， 加入 100ml 浓度为 0.1 mol/L 的乙酸水溶液中， 搅拌至完全溶 解， 得到浓度为 25 g/L 的壳聚糖水溶液 ； 取 9ml 壳聚糖水溶液， 滴加 1ml 质量浓度为 50% 的 磷酸氢二钾水溶液， 搅拌均匀， 得到对比注射剂 1。 0027 取 9ml 浓度为 0.1 mol/L 的乙酸水溶液， 加入 1 克 PEG6000 搅拌至溶解， 滴加 1ml 质量浓度为 50% 的磷酸氢二钾水溶液， 搅拌均匀， 得到对比注射剂 2。 0028 实施例 2 抗新城疫禽免疫球蛋白缓释制剂的制备 壳聚糖 ： 脱乙酰。
17、度 95%， 粘均分子量 1.7105， 购自浙江金壳生物有限公司。 0029 1. 蛋鸡免疫 采用健康开产蛋鸡， 先后胸部肌肉多点注射新城疫活疫苗 （La Sota 株） 0.5ml， 间隔 14 天后免疫新城疫灭活疫苗 （La Sota 株） 1.0ml， 间隔 14 天后免疫新城疫灭活疫苗 （La Sota 株） 2.0ml。三次免疫后， 定期检查卵黄对新城疫病毒 La Sota 株的血凝抑制效价 （检测方法 参照 中国兽药典 2010 版本） ， 当 HI 效价达到 212， 开始收集高免鸡蛋。 0030 2. 制备抗新城疫禽免疫球蛋白的温控缓释注射液 消毒收集的高免鸡蛋， 采取手工或。
18、机械方式分离蛋清和卵黄。在 2 30环境中， 将 卵黄加入其体积7倍的酸性水溶液 （盐酸调节水至pH为45） 中， 搅拌混匀， 4静置8小时， 8000 转离心 30 分钟后取上清液。将上清液通过超滤仪 （超滤仪型号 MODEL No.XX814V230 ； 超滤膜堆， PLCHK-C 100KD， 购自 Millipore 公司） 浓缩 10 倍即得到抗新城疫禽免疫球蛋白 说 明 书 CN 103169978 A 5 4/7 页 6 溶液。 0031 将 1 体积份的抗新城疫禽免疫球蛋白溶液与 4 体积份的温控缓释注射剂 1 混合， 搅拌均匀得到抗新城疫禽免疫球蛋白温控缓释注射液 1， 简称。
19、为注射液 A-1。将 1 体积份的 抗新城疫禽免疫球蛋白溶液与4体积份的温控缓释注射剂2混合， 搅拌均匀， 得到抗新城疫 禽免疫球蛋白温控缓释注射液 2， 简称为注射液 A-2。将 1 体积份的抗新城疫禽免疫球蛋白 溶液与4体积份的温控缓释注射剂3混合， 搅拌均匀， 得到抗新城疫禽免疫球蛋白温控缓释 注射液 3, 简称为注射液 A-3。 0032 将 1 体积份的抗新城疫禽免疫球蛋白溶液与 4 体积份的对比注射剂 1 混合， 搅拌 均匀， 得到抗新城疫禽免疫球蛋白对比注射液 1, 简称为对比注射液 A-1。 0033 将 1 体积份的抗新城疫禽免疫球蛋白溶液与 4 体积份的对比注射剂 2 混合。
20、， 搅拌 均匀， 得到抗新城疫禽免疫球蛋白对比注射液 2, 简称为对比注射液 A-2。 0034 注射液A-1*的成分与注射液A-1相同， 不同之处在于 ： 注射液A-1*中使用的壳聚 糖的脱乙酰度为 95%， 粘均分子量是 1.7105。 0035 3. 保护期试验 取 3 日龄非免疫健康雏鸡 160 只， 随机分为 8 组， 每组 20 只。第 1 组每只颈部皮下注 射1ml注射液A-1 ； 第2组每只颈部皮下注射1ml注射液A-2 ； 第3组每只颈部皮下注射1ml 注射液 A-3 ； 第 4 组每只颈部皮下注射 1ml 抗新城疫免疫球蛋白普通制剂 （抗新城疫禽免疫 球蛋白溶液与生理盐水按。
21、照体积比 1:4 混合均匀） ； 第 5 组每只颈部皮下注射 1ml 对比注射 液 A-1 ； 第 6 组每只颈部皮下注射 1ml 对比注射液 A-2。第 7 组每只颈部皮下注射生理盐水 1ml。第 8 组每只颈部皮下注射 1ml 注射液 A-1*。分别于接种后第 5、 10、 15 和 20 天进行攻 毒检验， 每组随机取 5 只未攻毒的雏鸡， 颈部皮下注射新城疫强毒 （北京株， 购自中国兽药 检查所） ， 每只 0.2ml( 含 100LD50)， 观察 7 天。计算各组攻毒后的保护率， 结果见表 3。从表 3 可见， 雏鸡接种注射液 A-1 后第 5、 10、 15 和 20 天攻毒的保。
22、护率分别是 100%、 100%、 80% 和 40% ； 雏鸡接种注射液 A-2 后第 5、 10、 15 和 20 天攻毒的保护率分别是 100%、 80%、 20% 和 0% ； 雏鸡接种注射液 A-3 后第 5、 10、 15 和 20 天攻毒的保护率分别是 100%、 100%、 0% 和 0% ； 雏鸡 接种抗新城疫免疫球蛋白普通制剂后第 5、 10、 15 和 20 天攻毒的保护率分别是 100%、 20%、 0%和0% ； 雏鸡接种对比注射液A-1后第5、 10、 15和20天攻毒的保护率分别是100%、 60%、 0% 和 0% ； 雏鸡接种对比注射液 A-2 后第 5、 1。
23、0、 15 和 20 天攻毒的保护率分别是 100%、 0%、 0% 和 0% ； 雏鸡接种生理盐水后第5、 10、 15和20天攻毒的保护率分别是0%、 0%、 0%和0% ； 雏鸡接种 注射液 A-1* 后第 5、 10、 15 和 20 天攻毒的保护率分别是 100%、 80%、 80% 和 0%。本发明注射 液 A-1、 A-2 、 A-3 和 A-1* 对雏鸡的保护期能够达到 1015 天， 其中注射液 A-1 与 A-1* 效果 最佳 ； 注射液 A-1 与注射液 A-1* 相比， 成分相同， 不同之处仅在于壳聚糖的脱乙酰度 ； 注射 液 A-1 与免疫球蛋白普通制剂及对比注射液 。
24、A-1、 A-2 相比， 具有延长保护期的效果。与注 射液 A-1 相比， 对比注射液 A-1 中不含有 PEG6000， 对比注射液 A-2 中不含有壳聚糖。接种 了注射液 A-1 的雏鸡在第 10、 15 天攻毒后的保护率显著大于对比注射液 A-1 和对比注射液 A-2 产生的效果之和， 即说明本发明温控缓释注射剂由于其成分之间的协同效应， 可以延长 抗新城疫禽免疫球蛋白的释放时间， 从而延长保护期， 提高保护率。 0036 表 3 雏鸡攻毒保护结果 （存活数 / 攻毒数） 说 明 书 CN 103169978 A 6 5/7 页 7 实施例 3 抗鸭病毒性肝炎禽免疫球蛋白缓释制剂的制备 。
25、1 制剂制备 鸭病毒性肝炎强毒 R85952 株， 购自美国 ATCC（美国模式培养物集存库） 。 0037 鸭病毒性肝炎灭活抗原 ： 鸭病毒性肝炎强毒R85952株灭活后与3倍体积的白油乳 化制备的灭活苗。 0038 抗鸭病毒性肝炎禽免疫球蛋白溶液的制备 ： 鸭病毒性肝炎灭活抗原多次免疫开产 蛋鸡， 收集高免鸡蛋， 采取手工或机械方式分离蛋清和卵黄。在 2 30环境中， 将卵黄加 入其体积 7 倍的酸性水溶液 （盐酸调节水至 pH 为 45） 中， 搅拌混匀， 4静置 8 小时， 8000 转离心 30 分钟后取上清液。将上清液通过超滤仪 （超滤仪型号 MODEL No.XX814V230 。
26、； 超滤 膜堆， PLCHK-C 100KD， 购自 Millipore 公司） 浓缩 10 倍即得到抗鸭病毒性肝炎禽免疫球蛋 白溶液。 0039 1体积份抗鸭病毒性肝炎禽免疫球蛋白溶液与4体积份温控缓释注射剂1混合， 搅 拌均匀， 得抗鸭病毒性肝炎禽免疫球蛋白温控缓释注射液1， 简称为注射液B-1。 注射液B-1 对鸭病毒性肝炎 R85952 株的鸡胚中和价 （检测方法参照 中国兽药典 2010 版本） 达到 28。 0040 2. 保护期试验 取 3 日龄非免疫健康雏鸭 60 只， 随机分为 3 组， 每组 20 只。第 1 组每只颈部皮下注射 1ml 注射液 B-1 ； 第 2 组每只颈。
27、部皮下注射 1ml 抗鸭病毒性肝炎免疫球蛋白普通制剂 （抗鸭 病毒性肝炎禽免疫球蛋白溶液与生理盐按照体积比 1:4 混合均匀） 。第 3 组每只颈部皮下 注射生理盐水 1ml。分别于接种后第 5、 10、 15 和 20 天进行攻毒， 每组均随机取 5 只未攻毒 的雏鸭， 颈部皮下注射鸭病毒性肝炎强毒 （R85952 株） ， 每只 0.2ml( 含 100LD50)， 观察 7 天。 另取 10 只非免疫健康雏鸭为空白对照组， 不注射任何药品， 单独隔离饲养。记录空白对照 组的存活率及各组攻毒后的保护率。空白对照组的雏鹅全部存活。各组攻毒后的保护率见 表 4。从表 4 中可以看到， 接种注射。
28、液 B-1 的雏鸭第 5、 10、 15 和 20 天攻毒的保护率分别是 100%、 100%、 80% 和 80% ； 接种抗鸭病毒性肝炎免疫球蛋白普通制剂的雏鸭第 5、 10、 15 和 20 天攻毒的保护率分别是 100%、 20%、 0% 和 60% ； 接种生理盐水的雏鸭第 5、 10、 15 和 20 天攻毒 的保护率分别是 00%、 0%、 0% 和 80%。本发明注射液 B-1 对雏鸭的保护期为 15 天以上， 与常 规的免疫球蛋白比， 具有延长保护期的效果。 0041 表 4 雏鸭攻毒保护结果 （存活数 / 攻毒数） 说 明 书 CN 103169978 A 7 6/7 页 。
29、8 实施例 4 抗小鹅瘟禽免疫球蛋白缓释制剂的制备 1 制剂制备 小鹅瘟 ： 弱毒株 GD 株和强毒株 GB 株， 均为中国兽医药品监察所标准毒株。 0042 小鹅瘟灭活抗原 ： 小鹅瘟 GD 株灭活后与 3 倍体积的白油乳化后得到的灭活苗。 0043 抗小鹅瘟禽免疫球蛋白溶液的制备 ： 小鹅瘟灭活抗原多次免疫开产蛋鸡， 收集高 免鸡蛋， 采取手工或机械方式分离蛋清和卵黄。 在230环境中， 将卵黄加入其体积7倍 的酸性水溶液 （盐酸调节水至 pH 为 45） 中， 搅拌混匀， 4静置 8 小时， 8000 转离心 30 分钟 后取上清液。将上清液通过超滤仪 （超滤仪型号 MODEL No.X。
30、X814V230 ； 超滤膜堆， PLCHK-C 100KD， 购自 Millipore 公司） 浓缩 10 倍即得到抗小鹅瘟禽免疫球蛋白溶液。 0044 1体积份抗小鹅瘟禽免疫球蛋白溶液与4倍体积份温控缓释注射剂1混合， 搅拌均 匀， 得抗小鹅瘟禽免疫球蛋白温控缓释注射液 1， 简称为注射液 C-1。注射液 C-1 对小鹅瘟 GD 株的琼扩中和价 （检测方法参照 中国兽药典 2010 版本） 达到 24。 0045 2. 保护期试验 取 3 日龄非免疫健康雏鹅 60 只， 随机分为 3 组， 每组 20 只。第 1 组每只颈部皮下注射 1ml 注射液 C-1 ； 第 2 组每只颈部皮下注射 。
31、1ml 抗小鹅瘟免疫球蛋白普通制剂 （抗小鹅瘟禽 免疫球蛋白溶液与生理盐水按照体积比 1 ： 4 混合均匀得到） 。第 3 组每只颈部皮下注射生 理盐水 1ml。分别于接种后第 5、 7、 10 和 12 天进行攻毒检验， 每组均随机取 5 只未攻毒的雏 鹅， 颈部皮下注射小鹅瘟强毒 GB 株， 每只 0.2ml( 含 100LD50)， 观察 7 天。另取 10 只雏鹅为 空白对照组， 不注射任何药品， 单独隔离饲养。 记录对照组的存活情况及各组攻毒后的保护 结果。空白对照组的雏鹅全部存活。各组攻毒后的保护结果见表 5。从表 5 中可见， 第 1 组 雏鹅接种注射液 C-1 后第 5、 7、。
32、 10 和 12 天攻毒的保护率分别是 100%、 100%、 80% 和 100% ； 第 2 组雏鹅接种普通制剂后第 5、 7、 10 和 12 天攻毒的保护率分别是 100%、 20%、 0% 和 40% ； 第 3 组接种生理盐水的雏鹅第 5、 10、 15 和 20 天攻毒的保护率分别是 0%、 0%、 20% 和 40%。本发明 注射剂C-1对雏鹅的保护期为12天以上， 与常规的免疫球蛋白比， 具有延长保护期的效果。 0046 表 3 雏鹅攻毒保护结果 （存活数 / 攻毒数） 说 明 书 CN 103169978 A 8 7/7 页 9 说 明 书 CN 103169978 A 9 。