包括可释放的脲连接体的含芳香胺化合物的聚合缀合物.pdf

本发明涉及包括含胺化合物和生物活性剂的可释放的脲连接体系。尤其是，本发明涉及基于分子内环化辅助的可释放的脲连接到含芳香胺的化合物的可逆释放的连接体，本发明也涉及基于吲哚酮的酪氨酸激酶抑制剂的聚合缀合物。

权利要求书
1.  式(I)化合物，包括：

其中
D是连接有胺的生物活性部分或连接有羟基的生物活性部分；
Y1是O，S，或NR5；
R1是氢、C1-6烷基或芳基；
Ra1，Ra2，Rb1，Rb2，Rc1，Rc2，Rd1，和Rd2，每次出现时，独立选自氢、OH、C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6
炔基、C1-6烷氧基、C3-8环烷基、芳基、C(O)-R6、靶向基团、基本上无抗原的聚合物，和

或Ra1、Rb1、Rc1和Rd1中的两个形成4-8元碳环或杂环，可选的，Ra1、Rb1、Rc1和Rd1中的两个形成双键；
T1选自氢、C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6炔基、C3-8环烷基、芳基、离去基团、功能基团、靶向基
团和

T2选自氢、C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6炔基、C3-8环烷基、芳基、功能基团和靶向基团；
Y2是O、S或NR7；
L在每次出现时，为相同或不同的双官能连接部分；
T3选自氢、OH、胺、卤素、C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6炔基、C1-6烷氧基、C3-8环烷基、芳基、离去基团、功能基团、靶向基团和基本上无抗原的聚合物；
R5和R7独立为氢、C1-6烷基、或芳基；
R6是OH、C1-6烷基、芳基、C1-6烷氧基或芳氧基；
(a)、(b)、(c)和(d)独立为0或1，和(a)、(b)、(c)和(d)的和是1、2、3或4；和
(e1)是0或1；
(e2)是0或约1-6的正整数；和条件是当T2是氢时，T1为
或离去基团，其中L含可释放的连接体，和(e2)是约1-6的正整数；
和
条件是当T1和T2都是氢时，Ra1、Ra2、Rb1、Rb2、Rc1、Rc2、Rd1和Rd2，在每次出现时，不同为氢。

2.  权利要求1的化合物具有的结构式为：


3.  权利要求1的化合物具有的结构式为：

其中T1选自氢、C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6炔基、C3-8环烷基、芳基、离去基团、功能基团、靶向基团、
——[L]e2——T3and

4.  权利要求3的化合物，其中T1选自离去基团、功能基团、靶向基团、
——[L]e2——T3和
其中T3选自氢、OH、卤素、C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6炔基、C1-6烷氧基、C3-8环烷基、芳基、离去基团、功能基团、靶向基团和基本上无抗原的聚合物。

5.  权利要求3的化合物，其中Ra1、Ra2、Rb1、Rb2、Rc1、Rc2、Rd1和Rd2中的一个选自氢、OH、
C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6炔基、C1-6烷氧基、C3-8环烷基、芳基、C(O)-R6和靶向基团。

6.  权利要求1的化合物具有的结构式为：
其中
Ra1、Ra2、Rb1、Rb2、Rc1、Rc2、Rd1和Rd2中的一个选自靶向基团、基本上无抗原的聚合物和

其中当(e1)和(e2)都是0时，T3不为氢；和
T3选自氢、OH、胺、卤素、C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6炔基、C1-6烷氧基、C3-8环烷基、芳基、离去基团、功能基团、靶向基团和基本上无抗原的聚合物。

7.  权利要求1的化合物，其中D是含芳香胺的生物活性剂，胺连接到C(＝Y1)。

8.  权利要求7的化合物，其中D是含吲哚酮的生物活性剂、含吲哚的生物活性剂、含嘌呤的生物活性剂或含嘧啶的生物活性剂。

9.  式(I’)的化合物包括：

其中
D1是含吲哚酮的激酶抑制剂，其中D1通过吲哚酮的胺连接；
R是基本上无抗原的聚合物；
L在每次出现时，为相同或不同的双功能连接体；
R6和R7独立为氢或C1-4烷基；
Y1是O、S或NH；Y2是O、S或NH；(x)是0或1；和
(p)是0或约1-6的正整数。

10.  权利要求9的化合物，其中化合物具有的结构式为：

其中
R是基本上无抗原的聚合物；
L在每次出现时，为相同或不同的双功能连接体；
R1和R2独立选自氢、卤素、烷基、烷基硫基、硝基、三卤代甲基、羟基、羟基烷基、烷氧基、氰基、芳基、-C(O)R11、NR12R13、-NR12C(O)R13、-SO2R12和-S(O)2NR12R13，
其中R11选自烷基、氨基、羟基、烷氧基、芳基、芳氧基和氨基烷基氨基；和
R12和R13独立选自氢、烷基和芳基；
R3选自氢、烷基、羟基烷基、氨基烷基、-C(O)R11和芳基；
R4选自氢、烷基、-C(O)R11和芳基；
R5选自氢、-CH2CH2COOH、-COR14和-CH2CH2C(O)NR15R16，其中
(a)当R5是-COR14时，R14选自烷基、烷氧基、羟基、芳基、芳氧基、烷基氨基、二烷基氨基和-NR31R32，
其中R31是氢或烷基；和R32选自氨基烷基、羟基烷基、乙酰基烷基、氰基烷基、羧基烷基和烷氧羰基烷基；和其中氨基烷基中的烷基可选地被一个或多个羟基取代；和
(b)当R5是-CH2CH2C(O)NR15R16时，
(i)R15是氢或C1-4烷基；和R16是-A1-NR33R34，
其中R33和R34独立为氢或C1-4烷基；和A1是(CH2)a1、(CH2)a2-A2-(CH2)a3或(CH2CH2O)a4CH2CH2，其中(a1)是约2-10的整数；(a2)和(a3)独立选自约1-6的整数；A2是CH＝CH、亚苯基、亚联苯基、环己烯基或哌嗪烯基(piperazinylene)；和(a4)是1、2或3；或
(ii)R15和R16一起形成-A3-NR35-A4-，
其中R35是氢或C1-4烷基，和A3和A4独立为(CH2)a5或(CH2CH2O)a6CH2CH2，其中(a5)是约2-6的整数；和(a6)是1、2或3；或
(iii)R15和R16连同它们连接的氮原子形成哌啶基，其中哌啶基在4位具有式-A5-R36的取代基，其中A5是C1-4亚烯基；和R36是哌啶-4-基；或
(iv)R15和R16连同它们连接的氮原子形成吡咯烷基，哌啶基或吗啉基；或
R4和R5一起形成-(CH2)4-或-(CH2)a7CO(CH2)a8-，其中(a7)是0、1、2或3；(a8)是0、

1、  2或3，条件是(a7)和(a8)的和为3；
R6和R7独立为氢或C1-4烷基；
Y1是O、S或NH；Y2是O、S或NH；(x)是0或1；和
(p)是0或约1-6的正整数。

11.  权利要求1或9的化合物，其中基本上无抗原的聚合物为聚环氧烷烃。

12.  权利要求11的化合物，其中聚环氧烷烃选自聚乙二醇、聚丙二醇和其混合物。

13.  权利要求11的化合物，其中聚环氧烷烃包括结构式为-(CH2CH2O)n-的聚乙二醇，其中(n)是约10-2,300的整数。

14.  权利要求11的化合物，其中聚环氧烷烃包括结构式如下的聚乙二醇：
-[C(＝O)]f2-(CH2)f1-M1-CH2CH2(OCH2CH2)n-
其中
M1是O、S或NH；
(f1)是0或约1-10的正整数；
(f2)是0或1；和
(n)是约10-2,300的正整数。

15.  权利要求11的化合物，选自：


(IIIh)Z-[C(＝O)]f2-(CH2)f1-M1-CH2CH2-O-(CH2CH2O)n-CH2CH2-M1-(CH2)f1-[C(＝O)]
f2-Z，和
(IIIi)A-(CH2CH2O)n-CH2CH2-M1-(CH2)f1-[C(＝O)]f2-Z，其中
A是羟基、NH2、CO2H或C1-6烷氧基；
M1是O、S或NH；
Y3是O、NR51、S、SO或SO2；
Y4和Y5独立为O、S或NR51；
R51在每次出现时，独立为氢、C1-8烷基、C1-8支链烷基、C1-8取代的烷基、芳基或芳烷基；
Z，在每次出现时，独立选自OH、离去基团、靶向基团、C1-8烷基、C1-8烷氧基、芳基、

其中
T2选自氢、C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6炔基、C3-8环烷基和芳基；
(b1)和(b2)独立为0或正整数；
(b3)是0或1；
(b4)是正整数；
(f1)是0或约1-10的正整数；
(f2)是0或1；
(z1)是0或1-约27的正整数；
(n)是约10-2,300的正整数，以便化合物的聚合部分具有约2,000-约100,000道尔顿的总数均分子量；
(x)是0或1；和
(p)是0或约1-6的正整数，优选1，2，3；

16.  权利要求1或9的化合物具有以下结构式：

其中
M1是O，S，或NH；
(f1)是0或约1-10的正整数；
(f2)是0或1；
(z1)是0或1-约27的正整数；
(n)是约10-2,300的正整数；和
Z，在每次出现时，独立为OH、离去基团、靶向基团、C1-8烷基、C1-8烷氧基、芳基，


其中
T2选自氢、C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6炔基、C3-8环烷基和芳基；

17.  权利要求1或9的化合物，其中L是L1，选自
-[C(＝O)]v(Y21)u1(CR21R22)t1(Y22)u2-，
-[C(＝O)]v(Y21)u1(CR23R24O)t3-，
-[C(＝O)]v(Y21)u1(CR23R24O)t3(CR21R22)t1(Y22)u2-，
-[C(＝O)]v(Y21)u1(CR21R22)t1(CR23R24O)t3-，
-[C(＝O)]v(Y21)u1(CR21R22)t1Y23(CR21R22)t2-，
-[C(＝O)]v(Y21)u1(CR25R26CR27R28O)t4-，
-[C(＝O)]v(Y21)u1(CR25R26CR27R28O)t4(CR21R22)t1(Y22)u2-，
-[C(＝O)]v(Y21)u1(CR21R22)t1(CR25R26CR27R28O)t4-，
-[C(＝O)]v(Y21)u1(CR21R22)t1Y23(CR25R26CR27R28O)t4-，


其中
R21-R30独立选自氢、氨基、取代的氨基、叠氮基、羧基、氰基、卤素、羟基、硝基、硅醚、磺酰基、巯基、C1-6烷基巯基、芳基巯基、取代的芳基巯基、取代的C1-6烷基硫基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-19支链烷基、C3-8环烷基、C1-6取代的烷基、C2-6取代的烯基、C2-6取代的炔基、C3-8取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、C1-6杂烷基、取代的C1-6杂烷基、C1-6烷氧基、芳氧基、C1-6杂烷氧基、杂芳氧基、C2-6烷酰基、芳基羰基、C2-6烷氧羰基、芳氧羰基、C2-6烷酰氧基、芳羰氧基、C2-6取代的烷酰基、取代的芳羰基、C2-6取代的烷酰氧基、取代的芳氧羰基、C2-6取代的烷酰氧基、取代的和芳羰氧基；
Y21是O、S或NR29；
Y22和Y23独立为O、S或NR29；
(t1)和(t2)独立为正整数；
(t3)是正整数；
((t4)是正整数；
(u1)和(u2)独立为0或1；和
(v)是0或1，
条件是当(e1)是正整数时，在第一个邻近C(＝Y2)的L1中，(v)是0。

18.  权利要求1或9的化合物，其中L是L2，为氨基酸或氨基酸衍生物或肽的残基，C(＝Y2)和L2选自2-氨基己二酸、3-氨基己二酸、β-丙氨酸、β-氨基丙酸、2-氨基丁酸、4-氨基丁酸、4-氨基丁酸，6-氨基己酸、2-氨基庚酸、2-氨基异丁酸、3-氨基异丁酸、2-氨基庚二酸、2，4-氨基丁酸、锁链素、2，2-二氨基庚二酸、2，3-二氨基丙酸、N-乙基氨基乙酸、N-乙基天冬酰胺、3-羟基脯氨酸、4-羟基脯氨酸、异锁链素、别-异亮氨酸、N-甲基氨基乙酸、肌氨酸、N-甲基-异亮氨酸、6-N-甲基-赖氨酸、N-甲基缬氨酸、正缬氨酸、正亮氨酸和鸟氨酸。

19.  权利要求1或9的化合物，其中L是L3，结构式为：


其中
Y11是O或S；
Y12是O、S或NH，条件是当Y12是NH和(s6)为正整数时，L11为Gly-Phe-Leu-Gly、
Ala-Leu-Ala-Leu、Phe-Lys或Val-Cit；
Y13是O、S或NR67；
L11和L13独立为双官能连接部分，与L1和L2的定义相同；
L12是
-C(O)CR76R77OCR76R77C(O)-；
-C(O)CR76R77NR78CR76R77C(O)-；
-C(O)CR76R77SCR76R77C(O)-或
-C(O)(CR76R77)s11C(O)-；
L14为双官能连接部分，与L1和L2的定义相同；
R61、R62、R67、R71、R72、R73和R74独立选自氢、C1-6烷基、C3-12支链烷基、C3-8环烷基、C1-6取代的烷基、C3-8取代的环烷基、芳基、取代的芳基、芳烷基、C1-6杂烷基、取代的C1-6杂烷基；
R63、R64、R65和R66独立选自氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、苯氧基、C1-8杂烷基、C1-8杂烷氧基、取代的C1-6烷基、C3-8环烷基、C3-8取代的环烷基、芳基、取代的芳基、芳烷基、卤素-、硝基-、氰基-、羧基-、C1-6羧基烷基和C1-6烷基羰基；
R68、R69和R70独立选自C1-6烷基、C3-12支链烷基、C3-8环烷基、C1-6取代的烷基、C3-8取代的环烷基、芳基、取代的芳基、芳烷基、C1-6杂烷基、取代的C1-6杂烷基、C1-6烷氧基、苯氧基和C1-6杂烷氧基；
R75是H，-C(＝O)-R79，其中R79，在每次出现时，为相同或不同的烷基，
或靶向基团；
R76、R77和R78独立选自H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6杂烷基和芳基；
R80，在每次出现时，独立选自SO3H、NO2、F、Cl、Br、I、CN、C(O)-R79、COOH、COOR79、CHO、
COR、N(R)+、CF和CCl；
Ar为包含在式(I)化合物中的一部分时，形成芳香或杂芳香烃基；
(s1)、(s2)、(s3)和(s4)独立为0或1；
(s5)是约1-6的正整数；
(s6)是0或1；(s7)是0、1或2；(s8)是1、2或3；(s9)是0或1；
(s10)是0或约1-6的正整数；(s11)和(s12)独立为0、1或2；和(s13)是正整数。

20.  权利要求19的化合物，其中，当Y12是NH时，Y12-C(＝Y13)连同邻近Y12-C(＝Y13)的L11形成-NH-C(＝O)-Gly-Leu-Phe-Gly(NH)-，-NH-C(＝O)-Leu-Ala-Leu-Ala(NH)-，-NH-C(＝O)-Lys-Phe(NH)-，或-NH-C(＝O)-Cit-Val(NH)-。

21.  权利要求19的化合物，其中C(＝Y2)连同L3-T3选自：



22.  权利要求1或9的化合物，其中聚合物具有约2,000-约100,000道尔顿的总数均分子量。

23.  权利要求1或9的化合物，其中聚合物具有约5,000-约60,000道尔顿的总数均分
子量。

24.  权利要求1或9的化合物，其中聚合物具有约5,000-约25,000道尔顿或者约
20,000-约45,000道尔顿的总数均分子量。

25.  权利要求1的化合物选自：


26.  权利要求25的化合物选自：


27.  权利要求25的化合物，其选自：


28.  权利要求1的式(I)化合物，选自：



其中(n)为约10-2,300的整数。

29.  权利要求9的式(I’)化合物，选自：




30.  一种递送含芳香胺的生物活性剂到哺乳动物体内的方法，包括：
(a)形成含芳香胺化合物的生物活性剂的聚合缀合物；和
(b)将缀合物给予需要的哺乳动物，
其中缀合物由权利要求1的式(I)或权利要求9的式(I’)表示。

31.  一种递送吲哚酮衍生物到哺乳动物体内的方法，包括：(a)形成基于吲哚酮的酪氨酸激酶抑制剂的聚合缀合物；和(b)将缀合物给予需要的哺乳动物，
其中缀合物由权利要求1的式(I)或权利要求9的式(I’)表示。

32.  一种抑制哺乳动物血管再生或血管生成活性的方法，包括：
将权利要求1或9的化合物或其药用盐给予需要的哺乳动物，其中D或D1为基于吲哚酮的酪氨酸激酶抑制剂。

33.  权利要求32的方法，其中血管再生是肿瘤血管的再生或依赖肿瘤的血管再生。

34.  权利要求32的方法，其中式(I)或式(I’)的化合物每次给予的剂量为约
70-150mg/m3，所给予的量以基于吲哚酮的酪氨酸激酶抑制剂为依据。

35.  权利要求32的方法，其中给药的步骤包括通过哺乳动物的血流给药。

36.  一种治疗哺乳动物肿瘤的方法，包括将权利要求1或9的化合物给予需要的哺乳动物，其中D或D1为基于吲哚酮的酪氨酸激酶抑制剂。

37.  权利要求36的方法，其中肿瘤是依赖血管再生的肿瘤。

38.  一种抑制哺乳动物中肿瘤细胞生长或增生的方法，包括将权利要求1或9的化合物给予需要的哺乳动物，其中D或D1为基于吲哚酮的酪氨酸激酶抑制剂。

39.  权利要求1或9的化合物用于制备药物组合物。

说明书包括可释放的脲连接体的含芳香胺化合物的聚合缀合物
[0001] 相关申请的交叉引用
[0002] 本申请要求2009年12月31日申请的美国临时专利申请序号61/291,756和
61/291,614的优先权，其内容引入本文作为参考。
发明领域
[0003]本发明涉及可释放脲的连接体系统，该系统包括含胺的化合物和生物活性剂。特别地，本发明涉及基于分子内环化辅助的可释放的脲连接到含芳香胺的化合物的可逆释放的连接体，本发明还涉及基于吲哚酮的酪氨酸激酶抑制剂的聚合缀合物。
[0004] 发明背景
[0005] 过去，报道了许多有治疗活性前景的药用物质。然而，许多有生物活性的化合物在水中不溶和/或在体内快速降解。人们已经做了很多尝试来改善这些药用物质的药学性质。其中解决途径之一是化合物上连接一个修饰物来提供所需的性质，然后最后释放生物活性的母体化合物。例如，药用物质包含在前药中，一旦给药后，在体内重新产生母药。[0006] 在一些情况下，比如含胺的化合物，药用物质通过一个耐水解连接体连接到修饰物上，所得的化合物从体内消除，然后在体内产生足够量的生物活性的母体化合物。
[0007] 因此，为技术人员提供可选的和/或改进的技术用于可逆的能释放的连接到生物活性物质(包括含胺化合物)将是有利的。
[0008] 发明概述
[0009] 本发明涉及包括含胺化合物的能释放的脲连接体。一方面，提供了式(I)的化合物，包括：
[0010]

[0011] 其中
[0012] D是连有胺的生物活性部分或连有羟基的生物活性部分；
[0013] Y1是O、S或NR5；
[0014] R1是氢、C1-6烷基或芳基；
[0015] Ra1、Ra2、Rb1、Rb2、Rc1、Rc2、Rd1和Rd2分别独立选自H、OH、C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6炔基、C1-6烷氧基、C3-8环烷基、芳基、C(O)-R6、靶向基团、基本无抗原的聚合物和
[0016] 或
[0017] Ra1、Rb1、Rc1和Rd1中的两个形成4-8碳环或杂环，可选的，Ra1、Rb1、Rc1和Rd1中的两个形成双键；
[0018] T1选自氢、C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6炔基、C3-8环烷基、芳基、离去基团、功能基团、靶
向基团和
[0019]

[0020]T2选自氢、C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6炔基、C3-8环烷基、芳基、功能基团和靶向基团；
[0021]Y2是O、S或NR7；
[0022]L在每次出现的时候，为相同或不同的双官能连接部分；
[0023] T3选自氢、OH、胺、卤素、C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6炔基、C1-6烷氧基、C3-8环烷基、芳基、离去基团、功能基团和基本无抗原的聚合物；
[0024]R5和R7独立为氢，C1-6烷基或芳基；
[0025]R6是OH、C1-6烷基、芳基、C1-6烷氧基或芳氧基；
[0026](a)、(b)、(c)和(d)独立为0或1，以及(a)、(b)、(c)和(d)的总和是1、2、3或
4；以及
[0027](e1)是0或1；
[0028](e2)是0或1-6的正整数；条件是当T2不是氢时，T1为
[0029] 其中L含可释放的连接体和(e2)是1-6的正整数；和条件是当T1和T2都是氢时，Ra1、Ra2、Rb1、Rb2、Rc1、Rc2、Rd1和Rd2在每次出现的时候，不全是氢。[0030] 本发明的上述化合物中，含胺的生物活性剂通过胺连接到C(＝Y1)。
[0031] 一方面，本发明提供了含吲哚酮的酪氨酸激酶抑制剂的聚合缀合物。本发明一方面，提供了式(I’)的化合物：
[0032]

[0033]其中
[0034]D1是含吲哚酮的抑制剂，其中D1通过吲哚酮胺连接；
[0035]R是基本上无抗原的聚合物；
[0036]L在每次出现的时候，是相同或不同的双功能连接体；
[0037]R6和R7独立为氢或C1-4烷基；
[0038]Y1是O、S或NH；[0039]Y2是O、S或NH；[0040](x)is0或1；和
[0041](p)是0或1-6的正整数。
[0042]本发明还提供了化合物的制备和使用方法，以及使用本发明化合物的治疗方法。[0043]在另一个实施方案中，本发明提供了用于含胺化合物的特有可逆能释放的连接体体系。含胺化合物以及这里所述的连接体形成一个脲连接，经过分子内环化作用重新产生含胺的母体化合物。
[0044]从接下来的描述和附图中可看出本发明的优势非常明显。
[0045]本发明的一个优势在于分子内环化作用引发的可释放的脲连接体系统可用于含胺化合物的修饰，正如技术人员所预期的。在一个实例中，本发明可用作制备含胺化合物的前药。本发明将含胺化合物与聚合物缀合，与母体化合物相比，能够增溶不溶的含胺化合物和延长它们的半衰期。
[0046] 本发明的另一个优势在于能够将额外可选的能释放的连接体加入到分子内环化作用辅助的可释放的脲连接体系统。额外可释放的连接体的释放能引发和/或调节本发明分子内环化作用的开始。例如，基于一个苄基消除的可释放的连接体能够促进本发明的分子内环化作用，从而产生母体化合物。双连接体系统能够调节母体化合物再生的水解速率。[0047] 进一步的，本发明提供了一种递送吲哚酮衍生物到哺乳动物中的方法。所述方法包括(a)形成一个基于吲哚酮酪氨酸激酶抑制剂的聚合缀合物；和(b)该缀合物给予需要治疗的哺乳动物，其中缀合物由式(I)所示。
[0048]本发明的一个优势在于本文描述的化合物提供了一种将含吲哚酮酪氨酸激酶抑制剂用于肿瘤治疗的方法。化合物使用多臂PEGs通过许多连接体来装入多个个体的药物分子。母药的水解和药物的再生可由技术人员按照需要进行调节。含吲哚酮酪氨酸激酶抑制剂的聚合缀合物也可与药用赋形剂做成制剂。通过这种方式，可增加含吲哚酮药物的溶解性和生物利用度。
[0049] 本发明的另一个优势还在于提供了一种改善含吲哚酮酪氨酸激酶抑制剂的药代动力学性质的方法。根据本发明，基于吲哚酮的酪氨酸激酶抑制剂的水溶性的高分子量聚合缀合物及其相关类似物给予基于吲哚酮酪氨酸激酶抑制剂化合物改善的生物利用度。[0050] 本发明进一步的优势在于可将本文描述的化合物与其它抗肿瘤疗法联合同时或者顺序给予患者达到增效作用。
[0051]本发明中，术语“残基”应理解为它所指化合物的一部分，即含胺的化合物、含吲哚酮的酪氨酸激酶抑制剂、双功能连接体、氨基酸、聚乙二醇等与另一个化合物经过取代反应后保留的部分。
[0052]本发明中，术语“聚合残基”、“含残基的聚合物”或“PEG残基”应理解为聚合物或
PEG与例如双功能连接体(比如氨基酸)反应后留下的部分。
[0053] 本发明中，术语“烷基”是指饱和脂肪族烃，包括直链、支链和环烷基。术语“烷基”也包括烷基-硫-烷基，烷氧基烷基，环烷基烷基，杂环烷基和C1-6烷基羰基烷基。优选的，烷基基团具有1-12个碳。较优选的，为1-7个碳原子的低级烷基，更优选的为1-4个碳原子的烷基。烷基基团可被取代或不被取代。当烷基被取代时，取代基优选包括卤素、氧、叠氮基、硝基、氰基、烷基、烷氧基、烷-硫、烷-硫-烷基、烷氧基烷基、烷基氨基、三卤代甲基、羟基、巯基、羟基、氰基、硅烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、杂芳基、烯基、炔基、C1-6烃基(C1-6hydrocarbonyl)、芳基和氨基。
[0054]本发明中，术语“取代的”是指用卤素、氧、叠氮基、硝基、氰基、烷基、烷氧基、烷基-硫、烷基-硫-烷基、烷氧基烷基、烷基氨基、三卤代甲基、羟基、巯基、羟基、氰基、硅烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、杂芳基、烯基、炔基、C1-6烷基羰基烷基、芳基和氨基基团中的一个加入到功能基团或化合物中，或者更换功能基团或化合物中所含的一个或多个原子。
[0055] 本发明中，术语“烯基”是指含至少一个碳-碳双键的基团，包括直链、支链和环状基团。优选的，烯基具有约2-12个碳原子。较优选的，为约2-7个碳原子的低级烯基，更优选的，为约2-4个碳原子。烯基基团可被取代或不被取代，当被取代时，取代基包括卤素、氧、叠氮基、硝基、氰基、烷基、烷氧基、烷基-硫、烷基-硫-烷基、烷氧基烷基、烷基氨基、三卤代甲基、羟基、巯基、羟基、氰基、硅烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、杂芳基、烯基、炔基、C1-6烃基(C1-6hydrocarbonyl)、芳基和氨基基团。
[0056] 本发明中，术语“炔基”是指含至少一个碳-碳三键的基团，包括直链、支链和环状基团。优选的，炔基基团具有约2-12个碳原子。较优选的，具有约2-7个碳原子的低级炔基。更优选的，具有约2-4个碳原子。炔基基团可被取代或不被取代。当被取代时，取代基包括卤素、氧、叠氮基、硝基、氰基、烷基、烷氧基、烷基-硫、烷基-硫-烷基、烷氧基烷基、烷基氨基、三卤代甲基、羟基、巯基、羟基、氰基、硅烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、杂芳基、烯基、炔基、C1-6烃基(C1-6hydrocarbonyl)、芳基和氨基基团。炔基的实例包括炔丙基、丙炔和3-己炔。
[0057]本发明中，术语“芳基”是指含至少一个芳香环的芳烃环体系。可选的，芳香环为稠合的或连接到其它芳烃环或非芳烃环。芳基基团的例子包括，例如苯基、萘基、1，2，3，4-四氢萘和二苯基。优选的芳基基团的例子包括苯基和萘基。
[0058]本发明中，术语“环烷基”是指C3-8环烃。环烷基的例子包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。
[0059]本发明中，术语“环烯基”是指含至少一个碳-碳双键的C3-8环烃。环烯基的例子包括环戊烯基、环戊二烯基(cyclopentadienyl)、环己烯基、1，3-环己二烯基、环庚烯基和环辛烯基。
[0060]本发明中，术语“环烷基烷基”是指被一个C3-8环烷基取代的烷基基团。环烷基烷基的例子包括环丙基甲基和环戊基乙基。
[0061]本发明中，术语“烷氧基”是指烷基的碳原子通过氧桥连接到母体分子部分。烷氧基的例子包括，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基和异丙氧基。
[0062]本发明中，“烷基芳基”是指被一个烷基基团取代的芳基。
[0063]本发明中，芳烷基是指被一个芳基基团取代的烷基基团。
[0064]本发明中，术语“烷氧基烷基”是指被一个烷氧基基团取代的烷基基团。
[0065]本发明中，术语“氨基”是指正如本领域人员已知的通过有机基团取代氨中一个或多个氢的含N基团。例如，术语“酰基氨基”和“烷基氨基”分别是指具有酰基和烷基取代基的特定N-取代的有机基团。
[0066]本发明中，术语“卤素”是指氟、氯、溴和碘。
[0067]本发明中，术语“杂原子”是指N、O、和S。
[0068]本发明中，术语“杂环烷基”是指含至少一个选自N、O和S的杂原子的非芳香环体系。可选的，杂环烷基环可以是稠合的或连接到其它杂环烷基环和/或非芳香烃环。优选的杂环烷基具有3-7元环。杂环烷基的例子包括，例如哌嗪、吗啉、哌啶、四氢呋喃、吡咯烷和吡唑。优选的杂环烷基包括哌啶基、哌嗪基、吗啉基和吡咯烷基。
[0069] 本发明中，术语“杂芳基”是指含至少一个选自N、O和S的杂原子的芳香环体系。杂芳基环可以是稠合的或连接到一个或多个杂芳基环、芳香或非芳香的烃环、或杂环烷基
环。杂芳基的例子包括，例如吡啶、呋喃、噻吩、5，6，7，8-四氢异喹啉和嘧啶。杂芳基优选的实例包括噻吩基、苯并噻吩基、吡啶基、喹啉基、吡嗪基、嘧啶基、咪唑基、苯并咪唑基、呋喃基、苯并呋喃基、噻唑基、苯并噻唑基、异噁唑基、噁二唑基、异噻唑基、苯并异噻唑基、三唑基、四唑基、吡咯基、吲哚基、吡唑基和苯并吡唑基。
[0070]在一些实施方案中，取代的烷基包括羧基烷基、氨基烷基、二烷基氨基、羟基烷基和巯基烷基，取代的烯基包括羧基烯基、氨基烯基、二烯基氨基、羟基烯基和巯基烯基，取代的炔基包括羧基炔基、氨基炔基、二炔基氨基、羟基炔基和巯基炔基，取代的环烷基包括例如4-氯环己基，芳基包括例如苯基和萘基的基团，取代的芳基包括例如3-溴代苯基，芳烷基包括例如甲苯基的基团，杂烷基包括例如乙基噻吩基，取代的杂烷基包括例如3-甲氧基噻吩基，烷氧基包括甲氧基，以及苯氧基包括例如3-硝基苯氧基。
[0071]本发明中“，正整数”应理解为含一个等于或大于1的整数，本领域技术人员可以理解的在合理范围内的数。
[0072]本文中，术语“连接”应理解为包括一个基团共价(优选)或非共价结合到另一个基团，即由于化学反应的结果。
[0073]本文中术语“有效量”和“足够量”表示能达到预期的效果或治疗效果的量，与本领域的普通技术人员所理解的效果一样，给予每个哺乳动物或人类患者的有效量对技术人员而言很容易确定，能提供所需的临床应答而避免与良好操作不一致的令人不满意的效果的一定范围内的剂量。下文提供了剂量范围。
[0074]本文中，除非另有说明，术语“癌”和“肿瘤”可交替使用。除非另有说明，“癌”包括恶性和/或转移性癌。
[0075]附图简要说明
[0076] 图1示意说明制备实施例5-7中描述的化合物5a-c的反应流程。[0077] 图2示意说明制备实施例8-9中描述的化合物8的反应流程。[0078] 图3示意说明制备实施例10中描述的化合物10a-c的反应流程。[0079] 图4示意说明制备实施例11-13中描述的化合物15的反应流程。[0080] 图5示意说明制备实施例14中描述的化合物17a-d的反应流程。[0081] 图6示意说明制备实施例15中描述的化合物19a-d的反应流程。[0082] 图7示意说明制备实施例16-18中描述的化合物23的反应流程。[0083] 图8示意说明制备实施例19中描述的化合物25a-d的反应流程。[0084] 图9示意说明制备实施例20中描述的化合物27a-d的反应流程。
[0085] 图10示意说明制备实施例21-23中描述的化合物34a-b的反应流程。[0086] 图11示意说明制备实施例24-26中描述的化合物39的反应流程。[0087] 图12示意说明制备实施例27-29中描述的化合物44a-b的反应流程。[0088] 图13示意说明制备实施例30-32中描述的化合物48a-d的反应流程。[0089] 图14示意说明制备实施例33中描述的化合物50a-h的反应流程。[0090] 图15示意说明制备实施例34-35中描述的化合物53的反应流程。[0091] 图16示意说明制备实施例36中描述的化合物54的反应流程。
[0092]图17示意说明制备实施例37-38中描述的化合物56的反应流程。
[0093]图18示意说明制备实施例39-42中描述的化合物60的反应流程。
[0094]图19示意说明制备实施例43中描述的化合物61的反应流程。[0095]图20示意说明制备实施例44中描述的化合物62的反应流程。[0096]发明详述
[0097]A.概述
[0098]在本发明的一个实施方案中，提供了式(I)的化合物：
[0099]

[0100]其中
[0101]D是连接有胺的生物活性部分或是连接有羟基的生物活性部分；
[0102]Y1是O、S或NR5；
[0103]R1是氢、C1-6烷基或芳基；
[0104]Ra1、Ra2、Rb1、Rb2、Rc1、Rc2、Rd1和Rd2每次出现时，独立选自氢、OH、C1-6烷基、C1-6烯基、
C1-6炔基、C1-6烷氧基、C3-8环烷基、芳基、C(O)-R6、靶向基团、基本无抗原的聚合物，和
[0105]

[0106]或Ra1、Rb1、Rc1和Rd1中的两个形成一个4-8碳环或杂环，可选的，Ra1、Rb1、Rc1和Rd1
中的两个形成一个双键；
[0107] T1选自氢、C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6炔基、C3-8环烷基、芳基、离去基团、功能基团、靶向基团和
[0108](例如)；
[0109]T2选自氢、C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6炔基、C3-8环烷基、芳基、功能基团和靶向基团；
[0110]Y2是O、S或NR7；
[0111] L，每次出现时，是相同或不同的双官能连接部分，是一个固定的或可释放的连接体；
[0112] T3选自氢、OH、胺、卤素、C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6炔基、C1-6烷氧基、C3-8环烷基、芳基、离去基团、功能基团、靶向基团和基本上无抗原的聚合物；
[0113]R5和R7独立为氢、C1-6烷基或芳基；
[0114]R6是OH、C1-6烷基、芳基、C1-6烷氧基或芳氧基；
[0115] (a)、(b)、(c)和(d)独立为0或1，和(a)、(b)、(c)和(d)的总和是1、2、3或4，优选2；和
[0116](e1)是0或1，优选1；
[0117](e2)是0或约1-6的正整数(例如1、2、3、4、5、6)；和条件是当T2不为氢时，T1为
[0118]或离去基团，其中L含一个可释放的连接子体和(e2)是约1-6
的正整数；和条件是当T1和T2都是氢时，Ra1、Ra2、Rb1、Rb2、Rc1、Rc2、Rd1和Rd2在每次出现时，不同时为氢。
[0119] 这时，当T1和T2各自是氢，和剩下的Ra1、Ra2、Rb1、Rb2、Rc1、Rc2、Rd1和Rd2在每次出现的时候都是氢时，NT1T2部分未连接到位于C(＝Y1)远端的碳原子上。
[0120] 根据本发明，基于分子内环化辅助的可释放的脲连接体的含可逆连接体的化合物具有如下的分子式：
[0121]

[0122]式(Ia)表示的化合物中，当T2不为氢时，L包括一个可释放的连接子和(e2)是正整数。当T2为氢时，L基团，在每次出现的时候，可以是一个固定的或可释放的双功能连接体。
[0123]在某些方面，本发明中提供的化合物具有的结构式为：
[0124]

[0125] 其中T1选自氢、C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6炔基、C3-8环烷基、芳基、离去基团、功能基团、靶向基团、
[0126] ——[L]e2——T3和
[0127] 这时，T2是氢和L连接子可为固定的或可释放的双功能连接体。优选的，T1为离去基团、功能基团、靶向基团、
[0128] ——[L]e2——T3和
[0129] 其中T3选自氢、OH、卤素、C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6炔基、C1-6烷氧基、C3-8环烷基、芳基、离去基团、功能基团、靶向基团和基本上无抗原的聚合物。
[0130] 在一个特别的实施方案中，Ra1、Ra2、Rb1、Rb2、Rc1、Rc2、Rd1和Rd2中的一个或多个在每次出现时是相同或不同的，选自氢、OH、C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6炔基、C1-6烷氧基、C3-8环烷基、芳基、C(O)-R6和靶向基团。在一个特别的实施方案中，T3包括基本上无抗原的聚合物。[0131] 在某些方面，本发明中提供的化合物具有的结构式为：
[0132]

[0133] 其中
[0134] Ra1、Ra2、Rb1、Rb2、Rc1、Rc2、Rd1和Rd2中的一个或多个(例如1、2)，选自靶向基团、基本上无抗原的聚合物和
[0135] 和
[0136]T3选自氢、OH、胺、卤素、C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6炔基、C1-6烷氧基、C3-8环烷基、芳基、离去基团、功能基团、靶向基团和基本上无抗原的聚合物，其中当(e1)和(e2)每个为0时，T3不是氢(优选的，不是氢或C1-6烷基)。
[0137] 上述化合物中T1和T2都是氢。优选的，Ra1、Ra2、Rb1、Rb2、Rc1、Rc2、Rd1和Rd2中的一个或多个(例如1、2)为
[0138]

[0139] 其中T3选自氢、C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6炔基、C1-6烷氧基、C3-8环烷基、芳基、离去基团、功能基团、靶向基团和基本上无抗原的聚合物，优选基本无抗原的聚合物。
[0140] 本发明的一个方面，提供了式(I’)的化合物：
[0141]

[0142] 其中
[0143] D1为含吲哚酮的激酶抑制剂，其中D1通过吲哚酮胺连接；
[0144] R为基本无抗原的聚合物；
[0145]L，在每次出现的时候，是相同或不同的双功能连接体；
[0146]R6和R7独立为氢或C1-4烷基；
[0147]Y1是O、S或NH，优选O；[0148]Y2是O、S或NH，优选O；[0149](x)是0或1，优选0；和
[0150](p)是0或从约1-6的正整数，优选1、2、3。
[0151]在某些方面，化合物的结构式为：
[0152]

[0153]在一个优选的方面，本发明提供了式(II’)的化合物：
[0154]

[0155]其中
[0156]R是基本上无抗原的聚合物；
[0157]L，在每次出现的时候，是相同或不同的双功能连接体；
[0158] R1和R2独立选自氢、卤素、烷基、烷硫基、硝基、三卤代甲基、羟基、羟基烷基、烷氧基、氰基、芳基、-C(O)R11、NR12R13、-NR12C(O)R13、-SO2R12和-S(O)2NR12R13，
[0159]其中R11选自烷基、氨基、羟基、烷氧基、芳基、芳氧基和氨基烷基氨基；和
[0160]R12和R13独立选自氢、烷基和芳基；
[0161]R3选自氢、烷基(优选甲基)、羟基烷基、氨基烷基、-C(O)R11和芳基；
[0162]R4选自氢、烷基(优选甲基)、-C(O)R11和芳基；
[0163]R5选自氢、-CH2CH2COOH、-COR14和-CH2CH2C(O)NR15R16，，其中
[0164] (a)当R5为-COR14时，R14选自烷基、烷氧基、羟基、芳基、芳氧基、烷基氨基、二烷基氨基和-NR31R32，
[0165] 其中R31是氢或氨基；和R32选自氨基烷基、羟基烷基、乙酰基烷基、氰基烷基、羧基烷基和烷氧基羰基烷基；和其中氨基烷基中的烷基可选地被一个或两个羟基基团取代；和[0166] (b)当R5is-CH2CH2C(O)NR15R16时，
[0167](i)R15是氢或C1-4烷基；和R16是-A1-NR33R34，
[0168]其中R33和R34独立为氢或C1-4烷基；和A1是(CH2)a1、(CH2)a2-A2-(CH2)a3或(CH2CH2O)a4CH2CH2，其中(a1)是约2-10的整数(例如2、3、4、5、6、7、8)；(a2)和(a3)独立选自约1-6的整数(例如1、2、3、4、5、6)；A2是CH＝CH、亚苯基、亚联苯基、环己烯基或哌嗪烯基；和(a4)是1、2或3；或
[0169](ii)R15和R16一起形成-A3-NR35-A4-，
[0170]其中R35是氢或C1-4烷基；和A3和A4独立为(CH2)a5或(CH2CH2O)a6CH2CH2，其中(a5)
是约2-6的整数(例如2、3、4、5、6)；和(a6)是1、2或3；或
[0171] (iii)R15和R16连同它们连接的氮原子形成哌啶基，其中哌啶基在4位具有一个式-A5-R36的取代基，其中A5是C1-4亚烯基；和R36是哌啶-4-基；或
[0172](iv)R15和R16连同它们连接的氮原子形成吡咯烷基、哌啶基或吗啉基；或
[0173]R4和R5一起形成-(CH2)4-或-(CH2)a7CO(CH2)a8-，其中(a7)是0、1、2或3；(a8)是
0、1、2或3，条件是(a7)和(a8)的总和为3；
[0174]R6和R7独立为氢或C1-4烷基；
[0175]Y1是O、S或NH，优选O；[0176]Y2是O、S或NH，优选O；[0177](x)是0或1；和
[0178](p)是0或约1-6的正整数，优选1、2、3。
[0179]在一个实施方案中，提供的式(I)的化合物中R1和R2独立为氢、甲基或乙基；R3和
R4都为甲基；和R5是氢或-CH2CH2COOH。
[0180]本发明描述的化合物包括聚合物。含聚合物的化合物选自：
[0181]

[0182]

[0183]
[0184] (IIIh)Z-[C(＝O)]f2-(CH2)f1-M1-CH2CH2-O-(CH2CH2O)n-CH2CH2-M1-(CH2)f1-[C(＝
O)]f2-Z，和
[0185] (IIIi)A-(CH2CH2O)n-CH2CH2-M1-(CH2)f1-[C(＝O)]f2-Z，
[0186] 其中
[0187] A是羟基、NH2、CO2H、或C1-6烷氧基；
[0188] M1是O、S或NH；
[0189] Y3是O、NR51、S、SO或SO2；
[0190] Y4和Y5独立为O、S或NR51；
[0191] R5，在每次出现的时候，独立为氢、C1-8烷基、C1-8支链烷基、C1-8取代的烷基、芳基或芳烷基；
[0192] Z，在每次出现的时候，独立为OH、离去基团、靶向基团、C1-8烷基、C1-8烷氧基、芳基、
[0193]

[0194]

[0195] 其中，T2选自氢、C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6炔基、C3-8环烷基和芳基；
[0196] (b1)和(b2)独立为0或正整数，优选0或从约1-5的整数(例如1、2、3、4、5)；
[0197] (b3)是0或1；
[0198] (b4)是正整数，优选，1-10的整数(例如1、2、3、4、5，6)；
[0199] (f1)是0或约1-10的正整数，优选0、1、2或3，较优选为0或1；
[0200] (f2)是0或1，优选1；
[0201] (z1)是0或约1-27的正整数，优选约1-13的整数(例如1、5、13)；
[0202] (n)是约10-2,300的正整数，以便化合物的聚合部分具有约2,000-100,000道尔顿的总数平均分子量；
[0203] (x)是0或1；
[0204] (p)是0或约1-6的正整数，优选1、2、3；
[0205] 和
[0206] 所有其它变量与上面定义的相同；
[0207] 条件是一个或多个Z是(IVa)、(IVb)、(IVc)、(IVd)、(IVe)或(IVf)。
[0208] 本发明描述的式(I)化合物包括：
[0209]

[0210] 在一个特别的实施方案中，R1是氢，和化合物选自：
[0211]

[0212] 在一个优选的实施方案中，Z在每次出现的时候为：
[0213]

[0214] 在一个特别的实施方案中，提供了式(I)的化合物，其中Z为
[0215]

[0216] 例如，Z选自：
[0217]

[0218] 在一个优选的实施方案中，本文描述的化合物具有结构
[0219]

[0220] 其中
[0221] M1是O、S或NH；
[0222] (f1)是0或从约1-10的正整数；
[0223](f2)是0或1；
[0224](z1)是0或1-约27的正整数；
[0225](n)是约10-2,300的正整数；和
[0226]Z，在每次出现的时候，独立为OH、离去基团、靶向基团、C1-8烷基、C1-8烷氧基、芳基或
[0227]

[0228]条件是一个或多个(多达4)Z是
[0229]

[0230]优选的，聚合物的聚合度为约28-341，使得聚合物具有约5,000Da-约60,000Da的总数平均分子量。优选的，约114-139聚合度，从而聚合物具有约20,000Da-约42,000Da的总数平均分子量。在本发明的一个特别优选的实施方案中，(n)为约227，提供具有约
40,000Da总数平均分子量的聚合部分。
[0231]B.含芳香胺的生物活性剂
[0232]根据本发明，生物活性剂可为含羟基或胺的化合物，包括药学活性剂(平均分子量低于约1,500道尔顿的小分子(例如，小于约1,000道尔顿)、肽、蛋白、核苷酸等)。本发明可用于修饰含乙烯胺的化合物，优选的，本发明可用于提供给含芳香胺的化合物可逆能释放的连接体。含芳香胺的化合物是指含胺连接到乙烯基的分子，优选为包括一个杂芳基环的芳环的一部分，结构式为：
[0233]其中R’可为氢、烷基、芳基或酰基。
[0234]一个优选的方面，包含的生物活性化合物是含芳香胺的生物活性剂，优选含杂芳香胺的化合物。例如，生物活性剂包括，但不限于，含吲哚酮生物活性剂(例如SU5416和衍生物)、含吲哚的生物活性剂、含嘌呤的生物活性剂(例如东洋霉素)、含嘧啶的生物活性剂。本领域已知的其它含芳香胺的化合物也考虑在本文描述化合物的范围内。
[0235]含芳香胺的生物活性剂中，非限制性的实例如下所示：
[0236] (i)含吲哚酮的生物活性剂是指具有下式结构的分子：
[0237]

[0238] (ii)含吲哚的生物活性剂是指下式结构的分子：
[0239]

[0240] (iii)含嘌呤的生物活性剂是指下式结构的分子：
[0241]

[0242] (iv)含嘧啶的生物活性剂是指具有下式结构的的分子：
[0243][0244]
[0245] 上述实例中，箭头表示根据本发明，能连接到可释放连接体的芳香胺。
[0246] 根据本发明，芳香胺(例如吲哚-胺，嘌呤-胺，嘧啶-胺和吲哚-胺)连接到式
(I)的C(＝Y1)。
[0247] 在一些方面，本文描述的化合物使用了基于吲哚酮的酪氨酸激酶抑制剂。这时，术语“2-吲哚酮”、“吲哚-2-酮”、“2-羟吲哚”被交替使用。
[0248] 包含在本发明中的一些含吲哚酮的酪氨酸激酶抑制剂，在吲哚酮的3位具有5元
的杂芳环基团(例如吡咯)或者为六元的芳环基团(例如苯基)。例如，基于吲哚酮和类似物的某些酪氨酸激酶抑制剂的通式结构具有的核心结构为：
[0249]

[0250]从这些核心结构已经制备得到一些类似物。
[0251]本发明的一个实施方案中，使用了结构如下的含吲哚酮的酪氨酸激酶抑制剂：
[0252]

[0253]其中
[0254] R101和R102独立选自氢、卤素、烷基、烷基硫、硝基、三卤代甲基、羟基、羟基烷基、烷氧基、氰基、芳基、-C(O)R11、NR12R13、-NR12C(O)R13、-SO2R12和-S(O)2NR12R13，
[0255]其中R11选自烷基、氨基、羟基、烷氧基、芳基、芳氧基和氨基烷基氨基；和R12和R13
独立选自氢、烷基和芳基；
[0256]R103选自氢、烷基(优选甲基)、羟基烷基、氨基烷基、-C(O)R11和芳基；
[0257]R104选自氢、烷基(优选甲基)、-C(O)R11和芳基；和
[0258]R105选自氢、-CH2CH2COOH、-COR14和-CH2CH2C(O)NR15R16，其中
[0259] (a)当R5为-COR14时，R14选自烷基、烷氧基、羟基、芳基、芳氧基、烷基氨基、二烷基氨基和-NR31R32，
[0260] 其中R31是氢或烷基；和R32选自氨基烷基、羟基烷基、乙酰基烷基、氰基烷基、羧基烷基和烷氧基羰基烷基；和其中氨基烷基中的烷基可选地被一个或两个羟基取代；和
[0261](b)当R5是-CH2CH2C(O)NR15R16，
[0262](i)R15是氢或C1-4烷基；和R16为-A1-NR33R34，
[0263]其中R33和R34独立为氢或C1-4烷基；和A1是(CH2)a1、(CH2)a2-A2-(CH2)a3或(CH2CH2O)a4CH2CH2，其中(a1)是约2-10的整数(例如2、3、4、5、6、7、8)；(a2)和(a3)独立选自约1-6的整数(例如1、2、3、4、5、6)；A2是CH＝CH、亚苯基、亚联苯基、环己烯基或哌嗪烯基；和(a4)是1、2或3；或
[0264](ii)R15和R16一起形成-A3-NR35-A4-，
[0265]其中R35是氢或C1-4烷基；和A3和A4独立为(CH2)a5或(CH2CH2O)a6CH2CH2，，其中(a5)
是约2-6的整数(例如2、3、4、5、6)；和(a6)是1、2或3；或
[0266] (iii)R15和R16连同它们连接的氮原子形成哌啶基，其中在哌啶基的4位有一个-A5-R36的取代基，其中A5是C1-4亚烯基；和R36是哌啶-4-基；或
[0267] (iv)R15和R16连同它们连接的N原子形成吡咯烷基、哌啶基或吗啉基；或
[0268] R104和R105一起形成-(CH2)4-或-(CH2)a7CO(CH2)a8-，其中(a7)是0、1、2或3；(a8)
是0、1、2或3，条件是(a7)和(a8)的总和为3。
[0269] 在一些优选的实施方案中，提供的基于吲哚酮的酪氨酸激酶中R101和R102独立为氢、甲基或乙基；R103和R104都是甲基；和R105是氢或-CH2CH2COOH。
[0270] 含吲哚酮的生物活性剂的代表性举例包括：
[0271]

[0272]

[0273]

[0274]技术人员应当意识到在吲哚酮的3位和/或5位有其它的取代基是可能的。酪氨酸激酶抑制剂的更多详细信息，包括基于吲哚酮的酪氨酸激酶抑制剂和类似物，在例如U.S.专利号5,792,783、5,834,504、5,883,113、5,883,116、5,886,020、6,686,362、
6,797,725、6,927,293、7,053,114、7,060,703、7,186,723、7,223,783中进行了描述，全部内容引入本文作为参考。也可参见Connell，ExpertOpin.Ther.Patents，2003，13：
737-749；Deprimoetal.，2003，BMCCancer，3：3；Itokawa，etal.，2002，MolecularCancerTherapeutics，1：295-302；Fiedleretal.，20003，Blood，102：2763-2767；和Mendeletal.，2000，ClinicalCancerResearch，6：4848-4858，所有内容引入本文作为参考。其它有用的基于吲哚酮的酪氨酸激酶抑制剂也在Sunetal.，J.Med.Chem2000，
43：2655-2663；Antonianetal.，2000，28：1505-1512；DumasJ，Exp.Opin.Ther.Patents，
2001，11：405-429中进行了描述，其内容引入本文作为参考。
[0275] 苯基或吡咯取代的2-吲哚酮衍生物是受体酪氨酸激酶抑制剂，可用于治疗对受体酪氨酸激酶抑制剂应答的疾病，例如增生性疾病(例如癌)。化合物能够控制和/或调节包括KDR/FLK-1受体信号转导在内的酪氨酸激酶信号转导。化合物可以控制，调节和/或抑制血管生成和/或血管再生。基于吲哚酮的酪氨酸激酶抑制剂和相关类似物是潜在的抗癌药或抗肿瘤药。然而，吲哚酮类似物中许多化合物在水溶液中不溶，生物利用度差。[0276] 在另外一个实施方案中，生物活性剂是含吲哚的化合物。一些优选的化合物包括，但不限于，CDK抑制剂例如paullone。paullone的结构如下所示
[0277]

[0278]其它已知的paullone家族的衍生物，例如那些在Leostetal.，2000，Eur.J.Biochem，267：5983-5994和WO99/65910中发现的衍生物，认为是合适的化合物。前面提到的每篇文献都引入本文作为参考。也可参见US专利号7,393,953，其内容引入本文作为参考。
[0279]另外，其它化合物也适合本发明，包括那些具有下面所示通式结构的化合物：
[0280]

[0281]

[0282] 其中直线表示可能的取代位点。
[0283] 含吲哚或类吲哚部分的生物活性化合物的实例包括，但不限于：
[0284] ■抗癌药例如
[0285]

[0286] ■血管舒张药，β-肾上腺素阻断剂例如
[0287]

[0288] ■α2肾上腺素拮抗剂例如
[0289]

[0290] ■多巴胺激动剂/拮抗剂混合体例如
[0291]

[0292] ■钙通道阻滞药例如
[0293]

[0294] ■范围广泛的血清素激活的、多巴胺能的和α-肾上腺素的活性化合物例如
[0295]

[0296] ■血清素前体，抗抑郁药例如
[0297]

[0298] ■强效5-HT1c色胺受体拮抗剂例如
[0299]

[0300]■高选择性的、非肽δ-阿片样物质拮抗剂例如
[0301]

[0302]■抗高血压药例如
[0303]

[0304]■植物生长调节剂例如
[0305]

[0306]■高选择性κ-阿片样物质拮抗剂例如
[0307]

[0308]和其它选自蒽环化合物和相关抗代谢的化合物。
[0309]为了描述的方便，但是不意味对本发明的限制，说明书中将SU5416(Semaxanib)称之为基于吲哚酮的酪氨酸激酶和优选的示例化合物。可以理解的是，所要求的发明包括所有其它的衍生物和类似物，只要该化合物具有连接到可释放的脲连接体的芳香胺，或者
是具有芳香胺基团(作为通过连接体连接到聚合物的连接点)的吲哚酮。术语“2-吲哚酮”、“吲哚-2-酮”和“2-羟吲哚”交替使用。
[0310] C.双功能连接体(L)：L1，L2&L3
[0311] 根据本发明，双官能连接部分，L，描述为L，L1，L2或L3，包含在本文提供的化合物中，包括：
[0312] -[C(＝O)]v(Y21)u1(CR21R22)t1(Y22)u2-，
[0313] -[C(＝O)]v(Y21)u1(CR23R24O)t3-，
[0314] -[C(＝O)]v(Y21)u1(CR23R24O)t3(CR21R22)t1(Y22)u2-，
[0315] -[C(＝O)]v(Y21)u1(CR21R22)t1(CR23R24O)t3-，[0316] -[C(＝O)]v(Y21)u1(CR21R22)t1Y23(CR21R22)t2-，[0317] -[C(＝O)]v(Y21)u1(CR25R26CR27R28O)t4-，
[0318] -[C(＝O)]v(Y21)u1(CR25R26CR27R28O)t4(CR21R22)t1(Y22)u2-，
[0319] -[C(＝O)]v(Y21)u1(CR21R22)t1(CR25R26CR27R28O)t4-，
[0320] -[C(＝O)]v(Y21)u1(CR21R22)t1Y23(CR25R26CR27R28O)t4-，
[0321]

[0322] 优选连接到含S的部分，例如PEG-SH，
[0323] 其中
[0324]R21-R30独立选自氢、氨基、取代的氨基、叠氮基、羧基、氰基、卤素、羟基、硝基、硅醚、磺酰基、巯基、巯基、C1-6烷基巯基、芳基巯基、取代的芳基巯基、取代的C1-6烷基硫、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-19支链烷基、C3-8环烷基、C1-6取代烷基、C2-6取代烯基、C2-6取代炔基、C3-8取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、C1-6杂烷基、取代的C1-6杂烷基、C1-6烷氧基、芳氧基、C1-6杂烷氧基、杂芳氧基、C2-6烷酰基、芳基羰基、C2-6烷氧羰基、芳氧羰基、C2-6烷酰氧基、芳基羰氧基、C2-6取代的烷酰基、取代的芳基羰基、C2-6取代的烷酰基
氧基、取代的芳氧基羰基、C2-6取代的烷酰基氧基、取代的和芳基羰基氧基，优选氢、羟基、胺和烷基；
[0325] Y21是O、S或NR29；
[0326] Y22和Y23独立为O、S或NR29；
[0327] (t1)和(t2)独立为正整数，优选约1-10的整数(例如1、2、3、4、5、6)；
[0328] (t3)是正整数，优选约1-10的整数(例如1、2、3、4、5、6)；[0329] (t4)是正整数，优选约1-6的整数(例如1、2、3、4、5、6)；[0330] (u1)和(u2)独立为0或1；和
[0331] (v)是0或1，
[0332] 条件是当(e1)是正整数时，第一个邻近C(＝Y2)的L1中(v)是0。
[0333] 当(t1)或(t2)等于或大于2时，C(R21)(R22)每次出现时，是相同或不同的。
[0334] 当(t3)等于或大于2时，C(R23)(R24)O每次出现时，是相同或不同的。
[0335] 当(t4)等于或大于2时，C(R25)(R26)C(R27)(R28)O每次出现时，是相同或不同的。
[0336] 在某些实施方案中，本文描述的化合物中包含的L1可选自：
[0337] -[C(＝O)]v(Y21)u1(CR21R22)t1(Y22)u2-，其中当Y21和Y22都是NR29，和(u1)和(u2)都为1时，(t1)不是约1-4的整数；
[0338] -[C(＝O)]v(Y21)u1(CR23R24O)t3(CR21R22)t1(Y22)u2-，其中当Y21和Y22都是NR29，和(u1)
和(u2)都为1时，(t1)和(t3)不同时为1；
[0339] -[C(＝O)]v(Y21)u1(CR21R22)t1Y23(CR21R22)t2-，其中当Y21和Y23都是NR29时，(t1)不为1-4的整数；
[0340] -[C(＝O)]v(Y21)u1(CR25R26CR27R28O)t4(CR21R22)t1(Y22)u2-，其中当Y21和Y22都是NR29，和(u1)和(u2)都为1时，(t1)和(t4)不同时为1；
[0341] -[C(＝O)]v(Y21)u1(CR21R22)t1Y23(CR25R26CR27R28O)t4-，其中当Y21和Y23都为NR29，和
(u1)是1时，(t1)不为1-4的整数；
[0342]当Y21是NR29，和(u1)和(t1)都是1时，其中R30相对于[C(＝O)]vY21(CR21R22)t1在邻位时不为NHR41或CR42R43NHR41；和当Y21是NR29，(u1)是1和(t1)是2时，其中R30相对于[C(＝O)]vY21(CR21R22)t1在邻位时不为NHR41；
[0343] 当Y23是NR29时，其中R30相对于[C(＝O)]
vY23在邻位时，不为NHR41、CR42R43NHR41或(CR42R43)2NHR41；
[0344] 当Y22是NR29，和(u1)和(t1)都是1时，其
中R30相对于[C(＝O)]vY21(CR21R22)t1位于邻位时，不为NHR41或CR42R43NHR41；和当Y21是NR29，
(u1)是1，和(t1)是2时，其中R30相对于[C(＝O)]vY21(CR21R22)t1在邻位时不为NHR41；和
[0345] 当Y23是NR29时，其中R30相对于[C(＝O)]vY23在邻
位时，不为NHR41、CR42R43NHR41或(CR42R43)2NHR41，
[0346] 其中R41-R43独立为氢或烷基。
[0347] 在本文描述的化合物中合适的L1可选自：
[0348] -[C(＝O)]v(CR21R22)t1-，[0349] -[C(＝O)]v(CR22R23)t1O-，[0350] -[C(＝O)]v(CR22R23)t1NR29-，[0351] -[C(＝O)]vO(CR21R22)t1-，[0352] -[C(＝O)]vO(CR21R22)t1O-，[0353] -[C(＝O)]vO(CR21R22)t1NR29-，[0354] -[C(＝O)]vNR29(CR22R23)t1-，[0355] -[C(＝O)]vNR29(CR22R23)t1O-，
[0356] -[C(＝O)]vNR29(CR22R23)t1NR29-，
[0357] -[C(＝O)]vS(CR21R22)t1-，[0358] -[C(＝O)]vS(CR21R22)t1O-，[0359] -[C(＝O)]vS(CR21R22)t1NR29-，[0360] -[C(＝O)]v(CR23R24O)t3-，[0361] -[C(＝O)]vO(CR23R24O)t3-，[0362] -[C(＝O)]vNR29(CR23R24O)t1-，
[0363] -[C(＝O)]v(CR23R24O)t3(CR21R22)t1-，[0364] -[C(＝O)]vO(CR23R24O)t3(CR21R21)t1-，[0365] -[C(＝O)]vNR29(CR23R24O)t3(CR21R22)t1-，[0366] -[C(＝O)]v(CR23R24O)t3(CR21R22)t1O-，[0367] -[C(＝O)]v(CR23R24O)t3(CR21R22)t1NR29-，[0368] -[C(＝O)]vO(CR23R24O)t3(CR21R22)t1O-，[0369] -[C(＝O)]vO(CR23R24O)t3(CR21R22)t1NR29-，[0370] -[C(＝O)]vNR29(CR23R24O)t3(CR21R22)t1O-，
[0371] -[C(＝O)]vNR29(CR23R24O)t3(CR21R22)t1NR29-，
[0372] -[C(＝O)]v(CR21R22)t1(CR23R24O)t3-，[0373] -[C(＝O)]vO(CR21R22)t1(CR23R24Ot3-，[0374] -[C(＝O)]vNR29(CR21R22)t1(CR23R24O)t3-，[0375] -[C(＝O)]v(CR21R22)t1O(CR21R22)t2-，[0376] -[C(＝O)]v(CR21R22)t1NR29(CR21R22)t2-，[0377] -[C(＝O)]v(CR21R22)t1S(CR21R22)t2-，[0378] -[C(＝O)]vO(CR21R22)t1O(CR21R22)t2-，[0379] -[C(＝O)]vO(CR21R22)t1NR29(CR21R22)t2-，[0380] -[C(＝O)]vO(CR21R22)t1S(CR21R22)t2-，
[0381] -[C(＝O)]vNR29(CR21R22)t1O(CR21R22)t2-，[0382] -[C(＝O)]vNR29(CR21R22)t1NR29(CR21R22)t2-，[0383] -[C(＝O)]vNR29(CR21R22)t1S(CR21R22)t2-，[0384] -[C(＝O)]v(CR25R26CR27R28O)t4-，
[0385] -[C(＝O)]vO(CR25R26CR27R28O)t4-，
[0386] -[C(＝O)]vNR29(CR25R26CR27R28O)t4-，
[0387] -[C(＝O)]v(CR25R26CR27R28O)t4(CR21R22)t1-，[0388] -[C(＝O)]v(CR25R26CR27R28O)t4(CR21R22)t1O-，[0389] -[C(＝O)]v(CR25R26CR27R28O)t4(CR21R22)t1NR29-，[0390] -[C(＝O)]vO(CR25R26CR27R28O)t4(CR21R22)t1-，[0391] -[C(＝O)]vO(CR25R26CR27R28O)t4(CR21R22)t1O-，[0392] -[C(＝O)]vO(CR25R26CR27R28O)t4(CR21R22)t1NR29-，[0393] -[C(＝O)]vNR29(CR25R26CR27R28O)t4(CR21R22)t1-，[0394] -[C(＝O)]vNR29(CR25R26CR27R28O)t4(CR21R22)t1O-，
[0395] -[C(＝O)]vNR29(CR25R26CR27R28O)t4(CR21R22)t1NR29-，
[0396] -[C(＝O)]v(CR21R22)t1(CR25R26CR27R28O)t4-，[0397] -[C(＝O)]vO(CR21R22)t1(CR25R26CR27R28O)t4-，[0398] -[C(＝O)]vNR29(CR21R22)t1(CR25R26CR27R28O)t4-，[0399] -[C(＝O)]v(CR21R22)t1O(CR25R26CR27R28O)t4-，[0400] -[C(＝O)]v(CR21R22)t1S(CR25R26CR27R28O)t4-，[0401] -[C(＝O)]v(CR21R22)t1NR29(CR25R26CR27R28O)t4-，[0402] -[C(＝O)]vO(CR21R22)t1O(CR25R26CR27R28O)t4-，[0403] -[C(＝O)]vO(CR21R22)t1S(CR25R26CR27R28O)t4-，[0404] -[C(＝O)]vO(CR21R22)t1NR29(CR25R26CR27R28O)t4-，[0405] -[C(＝O)]vNR29(CR21R22)t1O(CR25R26CR27R28O)t4-，[0406] -[C(＝O)]vNR29(CR21R22)t1S(CR25R26CR27R28O)t4-，
[0407] -[C(＝O)]vNR29(CR21R22)t1NR29(CR25R26CR27R28O)t4-，
[0408]

[0409]

[0410]在某些实施方案中，L1基团可选自：
[0411]-[C(＝O)]vNR29(CR22R23)t1NR29-，其中(t1)不为1-4的整数；
[0412]-[C(＝O)]vNR29(CR23R24O)t3(CR21R22)t1NR29-，其中(t1)和(t3)不均为1；
[0413]-[C(＝O)]vNR29(CR21R22)t1NR29(CR21R22)t2-，其中(t1)不为1-4的整数；
[0414]-[C(＝O)]vNR29(CR25R26CR27R28O)t4(CR21R22)t1NR29-，其中(t1)和(t4)不均为1；
[0415]-[C(＝O)]vNR29(CR21R22)t1NR29(CR25R26CR27R28O)t4-，其中(t)不为1-4的整数；
[0416]当(t1)是1时，其中R30相对于[C(＝O)]vNR29(CR21R22)t1在邻位时，不为NHR41或CR42R43NHR41；当(t1)是2时，R30相对于[C(＝O)]vNR29(CR21R22)t1在邻位时不为NHR41；
[0417] 其中R30相对于[C(＝O)]vNR29在邻位时，不为NHR41、CR42R43NHR41或(CR42R43)2NHR41；和
[0418]当(t1)是1时，其中R30相对于
[C(＝O)]vNR29(CR21R22)t1在邻位时，不为NHR41或CR42R43NHR41；当(t1)是2时，R30相对于
[C(＝O)]vNR29(CR21R22)t1在邻位时不为NHR41。
[0419]在一个特定的实施方案中，非限制性的，C(＝Y2)连同L1形成下述的基团：
[0420]-C(＝O)O(CH2CH2O)(CH2)2NH-，
[0421]-C(＝O)O(CH2)3NH-，和
[0422]-C(＝O)NH(CH2CH2O)2(CH2)2NH-。
[0423]本发明进一步的和/或可选的方面，双官能连接部分基团(L2)包括氨基酸。氨基酸可选自任何已知天然产生的L-氨基酸，举几个例子，例如丙氨酸，缬氨酸，亮氨酸，异亮氨酸，甘氨酸，丝氨酸，苏氨酸，甲硫氨酸，半胱氨酸，苯基丙氨酸，酪氨酸，色氨酸，天冬氨酸，谷氨酸，赖氨酸，精氨酸，组氨酸，脯氨酸和/或其组合。或者，L可为肽残基。肽的大小可变，例如，约2-10个氨基酸残基(例如2、3、4、5或6)。
[0424] 天然产生的氨基酸的衍生物和类似物，以及许多本领域已知的非天然产生的氨基酸(D或L)，疏水或亲水的，也包括在本发明的范围内。列举的氨基酸类似物和衍生物包括：[0425] 2-氨基己二酸，3-氨基己二酸，β-丙氨酸，β-氨基丙酸，2-氨基丁酸，4-氨基丁酸，哌啶酸，6-氨基己酸，2-氨基heptanoicacid，2-氨基异丁酸，3-氨基异丁酸，2-氨基庚二酸，2，4-氨基丁酸，锁链素(desmosine)，2，2-二氨基庚二酸，庚二酸，2，3-二氨基丙酸，N-乙基甘氨酸，N-乙基天冬酰胺，3-羟基脯氨酸，4-羟基脯氨酸，异锁链素，别-异亮氨酸，N-甲基甘氨酸或肌氨酸，N-甲基异亮氨酸，6-N-甲基赖氨酸，N-甲基缬氨酸，正缬氨酸，正亮氨酸，鸟氨酸，和其它的类似物和衍生物，太多了以至于无法一一提及，63Fed.Reg.，
29620，29622中列举的引入本文作为参考。一些优选的L基团包括甘氨酸、丙氨酸、甲硫氨酸或肌氨酸。
[0426]在某些实施方案中，当T2是氢时，-NT2-C(＝Y2)连同第一个邻近C(＝Y2)的L2形成可释放的连接部分：-NH-C(＝O)-Gly-Leu-Phe-Gly(NH)-(SEQIDNO：7)，-NH-C(＝O)-Leu-Ala-Leu-Ala(NH)-(SEQIDNO：8)，-NH-C(＝O)-Lys-Phe(NH)-，或-NH-C(＝O)-Cit-Val(NH)-。所述氨基酸的方向为C-末端到N-末端。当从C-末端到N-末端描述氨基酸时，N-末端用(NH)表示。
[0427] 另一方面，双功能连接体可包括一个可释放的连接体L3。合适的可释放的连接体的实例的结构式为；
[0428]

[0429]

[0430] 其中
[0431] Y11是O或S；
[0432] Y12是O、S或NH，条件是当Y12是NH和(s6)是1时，L11是Gly-Phe-Leu-Gly(SEQIDNO：7)、Ala-Leu-Ala-Leu(SEQIDNO：8)、Phe-Lys或Val-Cit；
[0433] Y13是O、S或NR67；
[0434] L11和L13独立为双官能连接部分，与L1和L2的定义相同，(条件是当(s9)是1时，第一个L13中(v)为0；当(s9)是0时，第一个L13中(v)是1；在邻近C(＝Y13)的L11中(v)是0)；
[0435] L12是
[0436] -C(O)CR76R77OCR76R77C(O)-；[0437] -C(O)CR76R77NR78CR76R77C(O)-；[0438] -C(O)CR76R77SCR76R77C(O)-或[0439] -C(O)(CR76R77)s11C(O)-；
[0440] L14是双官能连接部分，与L1和L2的定义相同，优选为(CR21R22)2NH，条件是在邻近
S-S的L14中(v)是0；
[0441] R61、R62、R67、R71、R72、R73和R74独立选自氢、C1-6烷基、C3-12支链烷基、C3-8环烷基、C1-6取代的烷基、C3-8取代的环烷基、芳基、取代的芳基、芳烷基、C1-6杂烷基、取代的C1-6杂烷基，优选氢和C1-6烷基；
[0442] R63、R64、R65和R66独立选自氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、苯氧基、C1-8杂烷基、C1-8杂烷氧基、取代的C1-6烷基、C3-8环烷基、C3-8取代的环烷基、芳基、取代的芳基、芳烷基、卤素-、硝
基、氰基、羧基、C1-6羧基烷基和C1-6烷基羰基；
[0443]R68、R69和R70独立选自C1-6烷基、C3-12支链烷基、C3-8环烷基、C1-6取代的氨基、C3-8取代的环烷基、芳基、取代的芳基、芳烷基、C1-6杂烷基、取代的C1-6杂烷基、C1-6烷氧基、苯氧基和杂烷氧基；
[0444]R75是H、-C(＝O)-R79，其中R79每次出现时，是相同或不同的烷基、
[0445]

[0446]靶向基团；
[0447] R76、R77和R78独立选自氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6杂烷基和芳基；[0448] R80每次出现时，独立选自SO3H、NO2、F、Cl、Br、I、CN、C(O)-R79、COOH、COOR79、CHO、COR、N(R)+、CF和CCl；
[0449]当Ar作为一部分包含于式(I)中时，形成芳香或杂芳香烃；
[0450](s1)、(s2)、(s3)和(s4)独立为0或1；
[0451](s5)是正整数，优选约1-6的整数(例如1、2、3、4、5、6)；
[0452](s6)是0或1；
[0453](s7)是0、1或2；
[0454](s8)是1、2或3，优选2；
[0455](s9)是0或1；
[0456](s10)是0或1-6的正整数(例如1、2、3、4、5、6)；
[0457](s11)和(s12)独立为0、1或2，和优选的，(s11)和(s12)的和等于或大于1；和
[0458](s13)是正整数。
[0459]在进一步的实施方案中，式(I)化合物中L是L3，L11和L13独立为双官能连接部分，与L1和L2的定义相同；当(s9)是1时，第一个L13中(v)是0；当(s9)是0时，第一个L13中(v)是1。
[0460]这时，C(＝Y1)连同L3或C(＝Y2)连同L3-T3选自：
[0461]

[0462]

[0463]这时，当Y12是NH时，Y12-C(＝Y13)连同邻近Y12-C(＝Y13)的L11形成-NH-C(＝O)-Gly-Leu-Phe-Gly(NH)-(SEQIDNO：7)，-NH-C(＝O)-Leu-Ala-Leu-Ala(NH)-(SEQIDNO：8)，-NH-C(＝O)-Lys-Phe(NH)-，或-NH-C(＝O)-Cit-Val(NH)-。所示氨基酸的方向为C-末端到N-末端。
[0464]-C(＝Y2)-L3-T3或-C(＝Y1)-[L]p-R的实例选自：
[0465]

[0466]

[0467]

[0468]

[0469]其中
[0470]T3选自氢、C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6炔基、C3-8环烷基、芳基、离去基团、功能基团、靶向基团和基本上无抗原的聚合物，例如聚乙烯的结构为：-[C(＝O)f2-(CH2)f1-M1-CH2CH2(OCH2CH2)n-；
[0471]M1是O或NH；
[0472]J是O、S或NR81；
[0473] R81选自氢、C1-6烷基、C3-12支链烷基、C3-8环烷基、C1-6取代的烷基、C3-8取代的环烷基、芳基、取代的芳基、芳烷基、C1-6杂烷基和取代的C1-6杂烷基；
[0474](f1)是0、1、2或3；
[0475](f2)是0或1；和
[0476](n)是约10-2,300的正整数。
[0477]双功能连接体的组合，包括可释放的连接体，包括在本发明的范围内。所述的组合包括允许的连接体变量和取代基的组合，以得到稳定式(I)化合物。在一个实施例中，变量的数值和取代基的组合不允许羰基基团与羰基基团直接相邻。在另一个实施例中，数值和取代基的组合不允许氧、氮、羰基与S-S直接相邻。
[0478]本发明的一些方面，式(I)的化合物包括1-6个双官能连接体的单元(例如1、2、
3、4、5或6)。本发明优选的一些方面，化合物包括1个双官能连接体单元，因此(e2)是0
或1。
[0479]Greenwaldetal.(Bioorganic&MedicinalChemistry，1998，6：551-562)的表
1中发现了其它的连接体，U.S.专利号5,965,119、6,180,095、6,214,330和6,303,569，所有内容引入本文作为参考。
[0480]D.基本上无抗原的聚合物
[0481]本发明另一方面提供了含聚合物的本文描述的化合物。包含在本文描述的化合物内的聚合物优选为水溶性和基本上无抗原，例如，包括聚亚烷基氧化物(PAO’s)。本文描述的化合进一步包括线性、支链或多-臂聚亚烷基氧化物。本发明优选的一个方面，聚亚烷基氧化物包括聚乙二醇和聚丙二醇。更优选的，聚亚烷基氧化物包括聚乙二醇(PEG)。
[0482]聚亚烷基氧化物的总数均分子量为约2,000-100,000道尔顿，优选约
5,000-60,000道尔顿。聚亚烷基氧化物可更优选为约5,000-25,000或者约20,000-45,000道尔顿。在一些优选的实施方案中，本文描述的化合物包括具有约30,000-45,000道尔顿总数均分子量的聚亚烷基氧化物。在一个特定的实施方案中，聚合部分具有约40,000道尔顿的总数均分子量。
[0483]PEG通常用以下结构式表示：
[0484]-(CH2CH2O)n-
[0485]其中(n)是约10-2300的正整数，从而本文描述化合物的聚合部分具有约
2,000-100,000道尔顿的数均分子量。(n)代表聚合物的聚合度，取决于聚合物的分子量。
[0486] 或者，聚乙二醇可由以下结构式表示：[0487] -[C(＝O)]f2-(CH2)f1-M1-CH2CH2(OCH2CH2)n-[0488] 其中
[0489]M1是O、S或NH；
[0490](f1)是0或约1-10的正整数，优选0、1、2或3，更优选0或1；
[0491](f2)是0或1；和
[0492](n)是约10-2,300的正整数。
[0493]在另一个实施方案中，聚乙二醇(PEG)残基可用下面的结构式表示：
[0494]-Y71-(CH2CH2O)n-CH2CH2Y71-，
[0495]-Y71-(CH2CH2O)n-CH2C(＝Y72)-Y71-，
[0496] -Y71-C(＝Y72)-(CH2)a11-Y73-(CH2CH2O)n-CH2CH2-Y73-(CH2)a11-C(＝Y72)-Y71-和[0497] -Y71-(CR71R72)a11-Y73-(CH2)b11-O-(CH2CH2O)n-(CH2)b11-Y73-(CR71R72)a11-Y71-，[0498] 其中：
[0499] Y71和Y73独立为O、S、SO、SO2、NR73或一个键；
[0500] Y72是O、S或NR74；
[0501] R71-74独立选自氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-19支链烷基、C3-8环烷基、C1-6取代的烷基、C2-6取代的烯基、C2-6取代的炔基、C3-8取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、C1-6杂烷基、取代的C1-6杂烷基、C1-6烷氧基、芳氧基、C1-6杂烷氧基、杂芳氧基、C2-6烷酰基(alkanoyl)、芳基羰基、C2-6烷氧羰基、芳氧羰基、C2-6烷酰氧基(alkanoyloxy)、芳羰氧基、C2-6取代的烷酰基、取代的芳基羰基、C2-6取代的烷酰氧基、取代的芳氧羰基、C2-6取代的烷酰氧基和取代的芳羰氧基，优选氢、甲基或丙基；
[0502] (a11)和(b11)独立为0或正整数，优选0或约1-6的正整数(例如1、2、3、4)，和更优选为1；和
[0503] (n)是约10-2300的整数。
[0504]PEG的终端(A基团)可以氢、NH2、OH、CO2H、C1-6烷基(例如甲基、乙基、丙基)、C1-6烷氧基(例如甲氧基、乙氧基、丙氧基)、酰基或芳基结束。在一个实施方案中，PEG的末端羟基基团被甲氧基或甲基取代。在一个优选的实施方案中，本文描述的化合物中所使用的PEG是甲氧基PEG。
[0505] 包含于式(I)或式(I’)化合物中合适的聚合物对应于具有如下结构的聚合物体系(Va)-(Vh)：
[0506]

[0507]

[0508] (Vh)-[C(＝O)]f2-(CH2)f1-M1-CH2CH2-O-(CH2CH2O)n-CH2CH2-M1-(CH2)f1-[C(＝O)]
f2-，
[0509] 其中
[0510] A是羟基、NH2、CO2H或C1-6烷氧基；
[0511] M1是O、S或NH；
[0512] Y3是O、NR51、S、SO或SO2；
[0513] Y4和Y5独立为O，S或NR51；和
[0514] R51每次出现时，独立为氢、C1-8烷基、C1-8支链烷基、C1-8取代的烷基、芳基或芳烷基。
[0515] U.S.专利5,643,575、5,919,455、6,113,906和6,566,506描述了支链或U-PEG衍生物，其内容引入本文作为参考。
[0516]本文描述的与化合物缀合之前的多臂聚合物包括多臂PEG-OH或“星状-PEG”例如在NOFCorp.DrugDeliverySystemcatalog，Ver.8，April2006中描述的产物，其公开的内容引入本文作为参考。具体地，这样的PEG具有如下结构：
[0517]

[0518]其中：
[0519] (n)是约4-455的整数；和至多3个残基的末端部分含甲基或其它低级烷基帽子。[0520] 在一个实施方案中，聚合物的聚合度(n)为约28-341，提供的聚合物具有约5,000Da-60,000Da的总数均分子量，和优选为约114-239，提供的聚合物具有约
20,000Da-42,000Da的总数均分子量。(n)代表聚合物中重复单元的数目，依赖于聚合物的分子量。在一个特定的实施方案中，(n)为约227，提供的聚合部分具有约40,000Da的总数均分子量。
[0521] 在某些实施方案中，PEG的四个臂都能转变为合适的活化基团，便于连接到其它分子上(例如双官能连接体)。转化前这些化合物包括：
[0522]

[0523]

[0524]

[0525]PEG可直接或通过连接体部分缀合到本文描述的化合物。使用U.S.专利
5,122,614和5,808,096中描述的活化技术和本领域技术人员不需要过度实验的其它技术，可将聚合物转变为具有适当活性的聚合物，用于与化合物的缀合。
[0526]可用于制备式(I)化合物的活化的PEGs的实例包括，例如甲氧基聚乙二醇-琥珀酸酯，甲氧基聚乙二醇-琥珀酰亚胺琥珀酸酯(mPEG-NHS)，甲氧基聚乙二醇-乙酸(mPEG-CH2COOH)，甲氧基聚乙二醇-胺(mPEG-NH2)，和甲氧基聚乙二醇-三氟乙基磺酸酯(mPEG-TRES)。
[0527]某些方面，具有末端羧酸基团的聚合物可用于本文描述的化合物中。U.S专利申请号11/328,662描述了制备高纯度具有末端羧酸聚合物的方法，其内容引入本文作为参考。[0528]或者，具有末端胺基团的聚合物可用于制备本文描述的化合物。U.S专利
7,569,657和7,868,131描述了高纯度含末端胺聚合物的制备方法，其内容引入本文作为参考。
[0529]另一方面，本发明的聚合物质优选为在室温下是水溶性的。这些聚合物非限制性的举例包括聚乙烯氧化物均聚物，例如聚乙二醇(PEG)、聚丙二醇或聚乙烯多元醇(polyoxyethylenatedpolyols)，及其共聚物和嵌段共聚物，前提是保持嵌段共聚物的水溶性。
[0530]在进一步的实施方案中，作为PAO聚合物(例如PEG)的替代物，可使用一个或多个有效地无抗原物质例如右旋糖苷、聚乙烯醇、碳水化合物聚合物(carbohydrate-basedpolymers)、羟丙甲丙烯酰胺(HPMA)、聚亚烷基氧化物和/或其共聚物。可用于替代PEG的合适的聚合物的实例包括，但不限于，聚乙烯吡咯烷酮、聚甲基噁唑啉、聚乙基噁唑啉、聚羟丙基甲基丙烯酰胺、聚甲基丙烯酰胺和聚二甲基丙烯酰胺、聚乳酸、聚羟基乙酸和衍生化的纤维素，例如羟甲基纤维素或羟乙基纤维素。也可参见共同转让的U.S专利6,153,655，其内容引入本文作为参考。普通技术人员可以理解的是，可采用与本文描述的用于PAO′s(例如PEG)的同样类型的活化。进一步地，本领域的技术人员会意识到在先的列举仅仅是起说明作用的，具有本文描述特性的所有聚合物质都包括在本发明内。本发明所述的“基本上或有效地无抗原”是指本领域理解的在哺乳动物中无毒的和不引起可预见免疫应答的聚合材料。
[0531]E.靶向基团
[0532] 另一方面，本文描述的化合物包括组织型特定细胞的靶向配体。不需要过度试验，本领域已知的任何技术可用于靶向基团与式(I)化合物的缀合。
[0533] 例如，靶向物质可连接到本文描述的化合物上，从而引导缀合物到体内的靶区域。本文描述化合物的靶向转运增强了本文所述化合物的细胞摄取，从而改善了治疗效果。在某些方面，一些细胞渗透肽可用许多靶向肽来替代，从而靶向转运至肿瘤位点。
[0534]在一个实施方案中，靶向部分，例如单链抗体(SCA)或单链抗原结合的抗体，单克隆抗体，细胞粘着肽例如RGD肽和选择蛋白，细胞渗透肽(CPPs)例如TAT，Penetratin和
(Arg)9，受体配体，靶向碳水化合物分子或凝集素，使得本文描述的化合物特定地指向靶区域。参见JPharmSci.2006Sep；95(9)：1856-72靶向药物递送的细胞黏附分子，其内容引入本文作为参考。
[0535] 合适的靶向部分包括单链抗体(SCA’s)或抗体单链可变区(sFv)。SCA含能结合或识别目标肿瘤细胞的特定分子的抗体区域。
[0536]术语“单链抗体”(SCA)，“单链抗原结合分子或抗体”或″单链Fv″(sFv)可交替使用。单链抗体对抗原具有结合亲和力。单链抗体(SCA)或单链Fvs能够而且已经用一些方法构建得到。在共同转让的U.S专利申请10/915,069和U.S.专利6,824,782中描述了单链抗原结合蛋白的原理和制备方法，其内容引入本文作为参考。
[0537] 典型地，可从文献中已知缩写的单克隆抗体中选择SCA或Fv区域，26-10，MOPC315，741F8，520C9，McPC603，D1.3，murinephOx，humanphOx，RFL3.8sTCR，1A6，Se155-4，18-2-3，4-4-20，7A4-1，B6.2，CC49，3C2，2c，MA-15C5/K12Go，Ox，etc.(参 见，Huston，J.S.etal.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA85：5879-5883(1988)；Huston，J.S.etal.，SIMNews38(4)(Supp)：11(1988)；McCartney，J.etal.，ICSUShortReports10：
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Gene114：235-237(1992)；Takkinen，K.etal.，ProteinEngng.4：837-841(1991)；Dreher，M.L.etal.，J.Immunol.Methods139：197-205(1991)；Mottez，E.etal.，Eur.J.Immunol.21：467-471(1991)；Traunecker，A.etal.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA88：
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[0539]在一个优选的实施方案中，可用于本文描述化合物中的靶向物质包括单链抗体(SCA)、RGD肽、选择蛋白、TAT、penetratin、(Arg)9、叶酸、大茴香酸等，这些物质中一些优选的结构为：
[0540]C-TAT：(SEQIDNO：1)CYGRKKRRQRRR；[0541]C-(Arg)9：(SEQIDNO：2)CRRRRRRRRR；[0542]RGD可为线性的或环状的：
[0543]

[0544] 叶酸为下面结构的残基
[0545]

[0546] Anisamide为p-MeO-Ph-C(＝O)OH。
[0547] Arg9可包含用于缀合的半胱氨酸，例如CRRRRRRRRR和TAT可在肽例如
CYGRKKRRQRRRC的末端再增加一个半胱氨酸。
[0548] 本发明中，说明书和附图中所用的缩写代表下面的结构：
[0549] (i)线性RGD(SEQIDNO：3)＝RGDC；
[0550] (ii)环状RGD(SEQIDNO：4和SEQIDNO：5)＝c-RGDFC或c-RGDFK；和
[0551] (iii)RGD-TAT(SEQIDNO：6)＝CYGRKKRRQRRRGGGRGDS-NH2；和
[0552] 或者，靶向基团包括糖和碳水化合物，例如半乳糖，半乳糖胺，和N-乙酰基半乳糖胺；激素类例如雌激素，睾丸激素，黄体酮，糖皮质激素，肾上腺素，胰岛素，胰高血糖素，氢化可的松，维生素D，甲状腺激素，视黄酸，和生长激素；生长因子例如VEGF，EGF，NGF和PDGF；神经传递素例如GABA，谷氨酸，乙酰胆碱；NOGO；三磷酸肌醇；肾上腺素；去甲肾上腺素；一氧化氮，肽，维生素例如叶酸和维生素B6，药物，抗体和体内或体外能与细胞表面受体相互作用的任何其它分子。
[0553] F.离去基团和功能基团
[0554]本发明的一些方面，提供了合适的离去基团，包括但不限于卤素(Br，Cl)、活性碳酸盐、羰基咪唑、环状亚胺硫酮(cyclicimidethione)、氯甲酸酯、异氰酸酯、N-羟基琥珀酰亚胺、氯甲酸酯、对一硝基苯酚(PNP)、N-羟基邻二甲酰亚胺、N-羟基苯并三唑基(N-HOBT)、甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、三氟乙基磺酸酯、间硝基苯磺酸酯、C1-C6烷氧基、C1-C6烷酰氧基、芳基羰基氧基、邻-硝基苯氧基、N-羟基苯并三唑基、咪唑、五氟苯氧基、1，3，5-三氯苯氧基和1，3，5-三氟苯氧基或那些本领域人员显而易见的合适的离去基团，在一个实施方案中，T1基团可为羰基咪唑、氯甲酸酯或PNP。
[0555]本发明所述的离去/活性基团应当理解为那些能够与预期靶点中发现的亲核试剂反应的基团。即双官能间隔基、靶向部分、聚合物、诊断剂、中间体等。因此靶点含有用于置换的基团，例如OH，NH2或SH基团。
[0556] 在一些实施方案中，功能基团包括顺丁烯二酰亚氨基、乙烯基、砜的残基、氨基、羧基、巯基、酰肼、肼甲酸酯等等，这些功能基团能进一步缀合到聚合物。
[0557] 在本发明一些优选的实施方案中，离去/活性基团可选自羰基咪唑、氯甲酸酯、异氰酸酯、PNP、甲苯磺酸盐、N-HOBT和N-羟基琥珀酰亚胺基。
[0558] G.诊断剂
[0559] 本发明另一方面提供了任选地诊断标记连接到本文描述化合物而制备的化合物，其中标记为诊断或成像目的而选择。
[0560] 本文描述的化合物可被标记。合适的标记包括，例如，生物素化的化合物，荧光化合物，和放射标记的化合物。任何合适的部分(例如氨基酸残基)连接到本领域常规的发射同位素、射线不透性标记、磁共振标记或其它适合磁共振成像的非放射性同位素标记、荧光型标记、显示可见颜色和/或紫外下能发荧光的标记中的任何一个，可制备得到合适的标记，在红外或电化学刺激下，用于外科手术中肿瘤组织的成像等等。诊断标记整合到和/或连接到治疗部分(生物活性剂)，可监测动物或人类患者体内治疗活性物质的分布。[0561] 按照本领域已知的方法，与任何合适的标记，包括例如放射性同位素标记，可容易地制备本发明标记的缀合物。简单列举这些同位素标记的例子，包括131碘，125碘，99m锝和
/或111铟，可制备得到放射免疫闪烁物质，用于体内肿瘤细胞的选择性摄取。例如，公开了
许多将肽连接到Tc-99m的本领域公知的方法，通过举例的方式，在U.S.专利5,328,679、
5,888,474、5,997,844和5,997,845中进行了描述，所有内容引入本文作为参考。
[0562]H.分子内环化辅助脲连接体的消除和母体药物的再生
[0563]根据本发明，连接到生物活性剂的含脲连接体在体内经过分子内环化，消除含脲的连接体，通过诱导效应例如邻位促进产生母体化合物。例如，本发明的C(＝Y1)-NR1-[CRa1Ra2]a-[CRb1Rb2]b-[CRc1Rc2]c-[CRd1Rd2]d-NT1T2部分形成4-7元杂环的过渡结构(优选五元杂环过渡结构)，再次生成母体化合物，即含芳香胺的生物活性部分。代表性反应的示例如下所示：
[0564]

[0565]其中Y1为O；R1为H；NT1T2为NH2；和D为含胺的靶向部分(即SU5416)。
[0566]化合物包含-NH-，引发了自环化，再次产生母体药物。
[0567]可设计本发明的化合物，使其在体内水解的t1/2小于代谢的t1/2。可调节水解速率，使得代谢之前足够量的生物活性母体化合物被释放。在这方面，Inthisaspect，本文描述的化合物可包括聚合物来延长水解前化合物的循环时间。在一个实施方案中，化合物包括：
[0568]

[0569]在另一方面，脲连接体的消除可由另外的裂解引发。最初的裂解可建立在酶(例如酯酶)或pH引发的另一个裂解的基础上。化合物是稳定的，直到给予哺乳动物后，在体
内发生了首次裂解。最初的裂解提供了-NH-，然后继续自环化，再次产生生物活性的母体化合物。一旦发生首次裂解，所得到的化合物经过脲连接体的消除，产生目标药物。这些裂解反应的示例性实例如下所示：
[0570]

[0571]具有可选择的前药系统的一个实施方案包括但不限于：
[0572]

[0573]I.式(I)化合物的合成
[0574]通常，本文描述的化合物通过含芳香胺化合物(例如SU5416)与双官能连接体耦联形成脲连接体，接着在足够形成式(I)化合物的条件下，1或多当量的所得中间体与活性聚合物反应得到。代表性化合物的合成在实施例中进行了详细解释。然而，本文描述的化合物可通过若干方法制备。
[0575] 在一个实施方案中，含芳香胺的化合物(例如SU5416)在碱性条件下，用氯甲酸酯或羰基二咪唑活化。活化的化合物与单保护双功能连接体的氨基部分反应，形成脲连接体。所得的中间体化合物的氨基保护剂脱除，进一步的，该化合物与活化的聚合物例如SC-PEG或PEG-COOH反应形成含可释放脲连接体系的聚合化合物。例如图1所示的化合物，化合物
1的胺在碱性条件下，与酰化剂例如羰基二咪唑(CDI)反应活化。然后，活化的化合物(化合物2)与胺单保护的双功能连接体(化合物3)反应。脱保护后，在碱性条件下，保护的双功能连接体-SU5416中间体与活化的聚合物耦联，形成含可释放脲连接体系的聚合缀合物。
[0576] 酰化剂的非限制性列举包括碳酰氯、三光气、二琥珀酰亚胺碳酸酯、羰基二咪唑、对硝基苯基氯甲酸酯、N-氯羰氧基邻苯二甲酰亚胺和二苯二酰亚氨碳酸酯。
[0577]或者，含芳香胺的化合物(例如含吲哚酮的酪氨酸激酶抑制剂)首先用强碱例如KOH或叔丁醇钾处理，化合物的氮脱质子化。脱质子化的化合物与活化的单保护双功能酰基连接体反应。所得的中间体用酸脱保护，然后在耦联条件下，与活化的聚合物反应形成含可释放脲连接体的聚合缀合物。
[0578]更具体的，本文描述的方法包括：
[0579] 1)1当量的含芳香胺的化合物(例如SU5416)用例如KOH或叔丁醇钾的强碱处理，得到氮阴离子，接着与活化的双功能连接体反应，形成含芳香胺化合物的酰基衍生物，或[0580] 在碱的存在下，1当量的含芳香胺的化合物与1或多当量的含活化胺基团(例如异氰酸酯)的双功能连接体反应，形成含芳香胺化合物的酰基衍生物；
[0581]其中，双功能连接体含被保护的第二功能基团；
[0582]2)用强酸或碱脱除双功能连接体的第二功能基团；和
[0583] 3)在惰性溶剂例如DCM(或DMF、氯仿、甲苯或其混合物)中，碱的存在下，所得的含芳香胺化合物-双功能连接体中间体与活化的聚合物(例如PEHG-琥珀酰亚胺碳酸酯)反应；或PEG-羧酸在耦合试剂，例如1，(3-二甲基氨基丙基)3-乙基碳二亚胺(EDC)，PPAC(或1，3-二异丙基碳二亚胺(DIPC)，任何合适的二烷基碳二亚胺，Mukaiyama试剂，(例如2-卤素-1-烷基-吡啶卤化盐)或丙基膦酸环酐(PPACA)，等)的存在下，与合适的碱例如DMAP在0℃-22℃下反应。
[0584]活化的聚合物，即，含1-4个末端羧基的聚合物，可通过具有末端羟基的NOFSunbright-type、星型的、或其它支链聚合物转变为相应的羧酸衍生物而制备得到，使用US专利号5,605,976中描述的技术，其内容引入本文作为参考。
[0585] 根据本发明制备得到的化合物包括：
[0586]

[0587]

[0588] 在一个实施方案中，生物活性剂是基于吲哚酮的酪氨酸激酶抑制剂，例如
SU5416(Semaxanib)。化合物的实例包括：
[0589]

[0590] 例如，按照本文描述方法制备得到的式(I)化合物有：
[0591]

[0592]

[0593] 为了描述的方便，但不起限制作用，仅表示了四臂PEG的一个臂。四臂PEG的一个臂，至多四个臂都可与生物活性物质(例如SU5416)缀合。
[0594] 按照本文描述的方法制备得到化合物的非限制性举例包括：
[0595]

[0596] 其中Z选自以下：
[0597]

[0598]

[0599]其中(m)是1，2，或3。
[0600]优选的，聚合物的四个臂通过连接体缀合到吲哚酮或其衍生物上。上述方法制备得到的本发明的化合物进行HPLC分析，结果表明平均约4个吲哚酮或其衍生物缀合到一个PEG分子上(重量百分比为约2％)。
[0601]优选的实施方案包括具有如下结构的化合物：
[0602]

[0603]

[0604]

[0605]

[0606] 其中(n)是约10-2,300的整数，聚合物部分的总分子量为约40,000道尔顿。肽的N-末端，例如-GLFG-(SEQIDNO：7)，指定为-NH-和C-末端指定为C(＝O).因此，-C(＝O)-GLFG-NH-或-HN-GFLG-C(＝O)-是肽GLFG的残基，从C-末端N-末端为-Gly-Leu-Phe-Gly-。
[0607] J.组合物/制剂
[0608] 含本发明化合物的药物组合物可通过本领域已知的方法制备，例如，使用多种已知的混合、溶解、制粒、磨细、乳化、包封、诱捕或冻干方法。化合物与一种或多种包含赋形剂和助剂的生理上可接受的载体一起可制备成组合物，从而方便了活性化合物制备成药学上可用的制剂。合适的制剂依赖于所选的给药途径。本发明的许多方面优选肠胃外途径给药。[0609] 关于注射，包括但不限于，静脉注射、肌内注射和皮下注射，本发明的化合物可在水溶液中，优选在生理相容的缓冲液例如生理盐水缓冲液，或极性溶剂(包括但不限于吡咯烷酮或二甲亚砜)中制成制剂。
[0610]本文所述的化合物也可制备用于肠胃外给药，例如通过弹丸注射或持续注入。注射剂可为单剂量形式，例如装在安瓿瓶中或多剂量容器中。有用的组合物包括但不限于混悬液、溶液或者以油或水为溶剂的乳剂，也可含例如悬浮剂、稳定剂和/或分散剂的添加剂。用于胃肠外给药的药物组合物包括水溶结构(例如但不限于活性化合物的盐(优选的))的水溶液。另外，活性化合物的悬浮液可在亲脂性溶剂中制得。合适的亲脂性溶剂包括脂肪油(例如芝麻油)、合成的脂肪酸酯(例如油酸乙酯和甘油三酯)或例如脂质体的材料。注射水悬浮液可含增加悬浮液粘度的物质，例如羧甲基纤维素钠、山梨糖醇或右旋糖酐。可选的，悬浮液也可含有合适的稳定剂和/或增加化合物溶解度的物质，从而可制备得到高浓度的溶液。或者，活性成分以粉末形式，使用前，与合适的溶剂，例如在无菌无抗原的水中复溶。
[0611] 关于口服给药，本文描述的化合物与本领域中已知的药学上可接受的载体混合可制备得到组合物，这些载体使得本发明的化合物能制备成片剂、丸剂、锭剂、糖衣丸、胶囊、液体制剂、凝胶剂、糖浆、糊剂、浆剂、溶液剂、悬浮液、浓溶液和稀释在患者饮用水中的悬浮液、用于稀释在患者食物中的预混合制剂等等，用于患者口服摄取。用于口服的药物制剂可使用固体赋形剂制备得到，可选的，研磨所得的混合物，制成颗粒，然后如果需要的话，加入其它合适的辅料，即可得到片剂或糖衣丸的片芯。详细地，合适的辅料有：填充剂，例如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨醇；纤维素，例如玉米淀粉、小麦淀粉、米淀粉和马铃薯淀粉；以及其它例如凝胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羟丙甲纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)的物质。如果需要的话，可加入崩解剂，例如交联聚维酮、琼脂或褐藻酸。也可使用盐例如海藻酸钠。
[0612] 关于吸入给药，使用增压容器或喷雾器和合适的推进物，本发明的化合物可方便地以气雾剂的形式给药。
[0613] 例如，使用常规的栓剂基质(例如可可油或其它甘油酯)，化合物也可制备成直肠制剂，例如栓剂或灌肠剂。
[0614]除了前面描述的制剂外，化合物也可制备成储库制剂。如此长时间作用的制剂可通过植入给药(例如皮下或肌肉)，或者通过肌肉注射给药。本发明化合物可与合适的聚合或者疏水材料(例如，与药学上可接受的油形成乳剂)，与离子交换树脂，或者是作为难溶的衍生物，例如但不限于难溶的盐，制备成适合上述给药途径的储库制剂。
[0615]也可使用其它的药物传递系统，例如脂质体和乳剂。
[0616]此外，化合物也可使用缓释系统传递，例如含治疗剂的固体疏水性聚合物的半渗透基质。已经确定了一些缓释材料，这些材料对本领域的技术人员而言是熟知的。可能依赖于它们的化学性质，缓释胶囊持续释放化合物的时间从几周到超过100天不等。依据特定化合物的化学性质和生物稳定性，可采用另外的稳定性策略。
[0617]K.式(I)化合物的用途
[0618] 一方面，本发明的化合物可用于把含芳香胺的生物活性剂递送到哺乳动物体内。本发明的方法包括将本文描述的化合物给予需要的哺乳动物。根据本发明的一个实施方案，包括
[0619](a)形成含芳香胺生物活性剂的聚合缀合物；和
[0620](b)将缀合物给予需要的哺乳动物，
[0621]其中缀合物用式(I)表示。
[0622] 在一个特定的实施方案中，本发明提供了递送吲哚酮衍生物到哺乳动物的方法，其包括：
[0623](a)形成基于吲哚酮酪氨酸激酶抑制剂的聚合缀合物；和
[0624](b)将缀合物给予需要其的哺乳动物，
[0625]其中缀合物用式(I)表示。
[0626]本发明另一方面提供了治疗哺乳动物中各种医学疾病的方法。
[0627]在一个实施方案中，提供了治疗患有恶性肿瘤或癌症患者的方法，包括将治疗有效量的含本文描述化合物的药物组合物给予需要的患者，其中D为生物活性部分。治疗的肿瘤可为下述的一种或多种：实体瘤、淋巴瘤、小细胞肺癌、急性粒细胞性白血病(AML)、急性淋巴细胞性白血病(ALL)、胰腺癌、成胶质细胞瘤、卵巢癌、胃癌、结直肠癌、前列腺癌、子宫癌、脑瘤、KB癌、肺癌、结肠癌、表皮癌等。本发明的化合物可用于治疗肿瘤疾病，减少肿瘤负荷，防止肿瘤的转移和防止在哺乳动物中肿瘤生长的复发。
[0628] 这里，治疗应理解为抑制、减少、改善和阻止肿瘤的生长、肿瘤的负荷和转移，肿瘤的缓解，或防止肿瘤的复发，和/或结束治疗后患者中肿瘤的生长。
[0629]当患者取得阳性治疗结果时，认为是起到治疗作用。例如，当肿瘤生长减少了至少
20％，或优选30％，更优选40％或更高(例如50％)，包括与缺乏本文描述的治疗相比，本领域技术人员预期的其它临床标志实现时，都应当认为是成功的治疗。
[0630]在某些方面，依据RECIST指南规定的临床应答可能是有用的。完全应答(CR)定义为肿瘤明显的和可评价的临床迹象完全消失。部分应答(PR)定义为所有明显的肿瘤区域尺寸至少减少50％。进行性疾病(PD)定义为所有明显的肿瘤区域尺寸增加大于25％(与基线或最佳应答相比)。病情稳定(SD)定义为肿瘤既不足够缩小到满足PR的条件，也没有足够增加到满足PD的条件。当达到CR，PR和/或SD时，认为产生了治疗作用。
[0631] 在另一个进一步的实施方案中，本发明提供了治疗依赖酪氨酸激酶疾病的方法，包括本发明的化合物给予需要其的患者，其中D为酪氨酸激酶抑制剂，例如基于吲哚酮的酪氨酸激酶抑制剂。在一个优选的实施方案中，D为SU5416。
[0632] 术语“依赖酪氨酸激酶的疾病”是指依赖于一个或多个酪氨酸激酶异常活性的病理状态。异常酪氨酸激酶活性与例如不受控制的血管再生和/或血管生成的疾病有关。与异常酪氨酸激酶活性有关的疾病包括肿瘤细胞的增生，支持实体瘤生长的病理性新生血管形成，眼新生血管形成(糖尿病视网膜病，年龄相关的黄斑部退化等等)，和炎症(牛皮癣，风湿性关节炎等等)。酪氨酸激酶相关的疾病通常与酪氨酸激酶催化活性的增加有关，其中酪氨酸激酶可为受体蛋白酪氨酸激酶，和非受体或细胞酪氨酸激酶。
[0633] 本发明的另一个实施方案中，提供了调节/抑制哺乳动物血管再生或生血管活性的方法。血管再生是肿瘤血管再生或依赖肿瘤的血管再生。
[0634]在进一步的实施方案中，与正常受试者相比，本文描述的方法在治疗患有与异常高水平VEGF表达有关疾病的患者中是有用的。VEGF表达的水平可通过本领域已知的技术来测定，包括测量VEGFmRNA表达。
[0635] 在本发明的许多方面，所述的方法为将式(I)化合物或其药用盐用于需要其的哺乳动物中，其中D是基于吲哚酮的酪氨酸激酶抑制剂。
[0636]在一个实施方案中，本文描述的方法使用了SU5416。SU5416抑制Flt-1酪氨酸激酶活性和KDR/Flk-1酪氨酸激酶活性。SU5416是肿瘤血管再生的强效抑制剂。SU5416抑制Flt-1酪氨酸激酶活性和KDR/Flk-1酪氨酸激酶活性。
[0637]治疗有效量表示能有效阻止、缓解或改善疾病症状，或延长接受本文描述化合物治疗的受试者生存期的化合物的量。对于本文描述方法中使用的化合物而言，治疗有效量可从最初的体外试验来估算。因此，为了获得包含有效剂量的循环浓度范围，设计的剂量可用于动物模型中。这些信息可用于更准确地确定在患者中有效的剂量。
[0638]组合物的量，例如，作为前药给药，取决于本文包含的母药分子。通常，治疗方法中使用的前药的量是在哺乳动物中能有效地达到预期治疗效果的量。自然地，各种前药化合物的剂量根据母体化合物、体内水解速率，聚合物的分子量等的不同而不同。此外，当然，随着剂型和给药途径的不同，剂量会变化。
[0639] 一般而言，基于吲哚酮的酪氨酸激酶抑制剂每次给予哺乳动物的量约为10-55mg/kg。例如，基于吲哚酮的酪氨酸激酶抑制剂例如SU5416可给予的量每天约为15-25mg/kg，或者约50mg/kg，每周两次或三次。
[0640]或者，基于吲哚酮酪氨酸激酶抑制剂每次给予的量约为30-150mg/m3(例如，约
50-150mg/m3，约70-150mg/m3，约100-150mg/m3)。在一个实施方案中，SU5416以约145mg/
m3的单次剂量，一周两次静脉给予患者。
[0641] 治疗标准可建立在单剂量治疗标准基础上，或者分成多剂量作为数周治疗标准的一部分给药。本发明也包括给予一个或多个周期的治疗，直到获得预期的临床结果。[0642] 本发明中，上述给定的重量表示存在于式(I)化合物中的再生的生物活性母体化合物的重量，其中本文描述的方法中使用了式(I)化合物。
[0643]上面所述的范围是示例性的，那些本领域的技术人员根据临床实验和治疗适应症可确定所选前药的最优剂量。而且，考虑到患者的身体状况，医生可选择确切的剂型，给药途径和剂量。精确的剂量取决于疾病的阶段和严重性，本领域的普通技术人员也会考虑接受治疗的患者的个人特征。
[0644]另外，使用本领域已知的方法，通过标准的制药程序，在细胞培养物或实验动物中可确定本文描述化合物的毒性和疗效。
[0645]进一步的，本发明包括将本文描述的化合物与其它抗肿瘤疗法(例如放射疗法或使用其它化疗剂的化学疗法)联合达到协同或者附加的效果。因此，本文描述的化合物可在其它抗肿瘤疗法之前，期间或之后给药。一个实施方案包括，在肿瘤治疗中同时给予本文描述的化合物和放射疗法。
实施例
[0646]下面的实施例用于进一步说明本发明，但是不意味着以任何方式来限制本发明的有效范围。实施例中列举的加下划线和粗体的数字与那些附图中表示的一致。总的方法.所有的反应都在干燥的氮气或氩气下进行。市售的试剂不经进一步纯化直接使用。所有的PEG化合物在使用前经真空下干燥或共沸蒸馏(甲苯)。
[0647]缩写.DCM(二氯甲烷)，DIEA(N，N-二异丙基乙胺)，DMAP(4-(二甲基氨基)吡啶)，
DMF(N，N-二甲基甲酰胺)，DSC(N，N′-二琥珀酰亚胺碳酸酯)，EDC(1-乙基-3-(3-二甲
基氨基丙基)碳二亚胺)，IPA(2-丙醇)，TBDMS-C1(叔丁基二甲基氯硅烷)，TFA(三氟乙酸)，TEAA(四乙基醋酸铵).
[0648]实施例1.常规NMR方法
[0649]使用VarianMercuryVX-300仪器测得1H谱，除非另有说明，使用氘代氯仿作为溶剂。使用VarianMercuryVX-300以75.46MHz的频率测得13CNMR谱。化学位移(δ)用相对于四甲基硅烷(TMS)到低磁场位移的百万分之一(ppm)表示，耦合常数(J值)单位为赫兹(Hz)。
[0650]实施例2.HPLC方法.
[0651]使用体积排阻柱(PolySep-GFC-P3000，Phenomenex)在恒溶剂条件下，1∶1(v/v)的甲醇-水混合物作为流动相，进行分析HPLC测定。使用UV检测器监测280nm处的洗脱峰。为了检测任何游离PEG的出现，以及证实PEG化缀合物的存在，使用了蒸发光散射检测器，Model5000ELSD(Alltech)。基于ELSD和UV分析，所有最终的PEG化产物都不含原药，HPLC测定的纯度≥95％。
[0652]实施例3.PEG缀合物中母体分子含量的分析
[0653] 研究了包含于聚合缀合物中含芳香胺化合物的量，在0.02μmol/mL-0.10μmol/mL的5个不同浓度下，测定了在280nm处含芳香胺化合物(例如SU5416)在90％甲醇水溶液(v/v)中的UV吸收。从吸光度对比浓度的标准曲线，计算吸收系数(ε)(280nm，1.0cm光程，1mg/mL的O.D.)。含芳香胺化合物的PEG化缀合物溶解于90％乙醇水溶液(v/v)中，近似浓度为0.006μmol/mL(基于40,000MW)，测定了在280nm处化合物的紫外吸收。根据测得的值和吸收系数(ε)测定了测试样品中含芳香胺化合物的浓度。
[0654]实施例4.式(I)化合物的水解速率
[0655]使用C8反相柱(ZorbaxSB-C8)，流动相由(a)0.1M三乙基乙酸铵缓冲液和(b)乙腈组成，进行梯度洗脱，来测定水解速率。流速为1mL/分钟，使用UV检测器在280nm处监测含芳香胺化合物(例如SU5416)的色谱。对于血浆中的水解，试验化合物溶解于乙腈中，浓度为20mg/mL。溶液分装入小瓶中，每瓶100μL，真空除去溶剂，100μL血浆加入到残留物中，然后涡旋10秒钟，溶液在37℃下培养一段时间。间隔合适的时间，甲醇-乙腈的混合物(1∶1，v/v，400μL)加入小瓶中，涡旋一分钟，然后用0.45mm滤过膜(可选地，用
0.2mm滤过膜二次过滤)过滤。取40μL的滤液注射进HPLC，依据峰面积计算母体化合物和聚合缀合物的量，从聚合缀合物消失的线性回归分析来计算在不同媒介中每个试验化合物的半衰期。
[0656]实施例5：化合物2的制备
[0657]化合物1(200mg，0.836mmol)溶于2mLDMF和2mLDCM中，接着加入CDI(271mg，
1.67mmol)，DMAP(101mg，0.836mmol)和吡啶(135μL，1.672mmol)。反应混合物在室温下搅拌过夜，分离得到产物，不经进一步纯化直接使用。
[0658]实施例6：化合物4的制备
[0659]化合物4a：化合物2(1mmol)，化合物3a(2mmol)，吡啶(2mmol)，和DMAP(2mmol)的混合物在无水DCM(20mL)和DMF(20mL)中室温搅拌过夜，HPLC监测反应进程，过滤，滤液用NaHCO3洗涤两次，有机层用无水硫酸镁干燥，真空除去溶剂，残留物经硅胶柱层析纯化，分离出产物。
[0660]化合物4b：采用与制备化合物10a相同的条件，从化合物3b制备得到化合物4b。[0661]化合物4c：采用与制备化合物10a相同的条件，从化合物3b制备得到化合物4c。[0662]实施例7：化合物5的制备
[0663]化合物5a：化合物4a(0.744mmol)溶解于2mL的无水DCM中，接着在0℃下滴加
1mL的TFA，在0℃-室温下搅拌30分钟，真空浓缩得到产物，不需要进一步纯化直接使用。[0664]化合物5b：采用与制备化合物10a相同的条件，从化合物4b制备得到化合物5b。[0665]化合物5c：采用与制备化合物10a相同的条件，从化合物4b制备得到化合物5c。[0666]实施例8：化合物7的制备
[0667]化合物2(135mg，0.405mmol)溶解于0.5mLDMF和5mLDCM中，接着加入化合物f
6(306mg，1.62mmol)，DMAP(98mg，0.810mmol)和吡啶(32μL，0.405mmol)。室温搅拌过夜，真空浓缩，残留物用乙酸乙酯-己烷(1∶3，v/v)柱层析纯化，得到产物(90mg)。产物的结构经1H和13CNMR确证。
[0668]实施例9：化合物8的制备
[0669] 化合物7(280mg，0.618mmol)溶解于4mL的DCM中，冰浴冷却，接着在0℃下，滴加1mL的TFA。反应混合物在0℃下搅拌15分钟，在室温下搅拌1小时。真空浓缩得到
210mg(75％收率)的产物。不需进一步纯化直接使用。产物的结构经1H和13CNMR纯化。
[0670]实施例10：化合物10的制备
[0671] 化合物10a：化合物9(4-臂PEG-甲苯磺酸盐，Mw.40,000，3.0g，0.075mmol)加入到化合物5a(0.9mmol)的无水DCM(30mL)和无水DMF(3mL)混合溶剂的溶液中，接着在0℃下加入DMAP(0.1mmol)和DIEA(0.9mmol)。反应混合物在0℃-室温下搅拌过夜，真空浓缩。所得残留物用IPA重结晶得到产物。
[0672]化合物10b：采用与制备化合物10a相同的条件，从化合物5b制备得到化合物
10b。
[0673]化合物10c：采用与制备化合物10a相同的条件，从化合物5b制备得到化合物
10c。
[0674]实施例11：化合物12的制备
[0675]化合物11(614.5mg，3.26mmol)，化合物2(500mg，1.55mmol)和DIEA(388.6mg)的混合物在无水DCM(50mL)和无水DMF(10mL)中室温搅拌过夜，过滤，滤液用0.2NHCl洗涤两次。有机层用无水硫酸镁干燥，真空除去溶剂，所得残留物经硅胶柱层析得到156mg的产物。产物的结构经13CNMR确证。
[0676]实施例12：化合物14的制备
[0677] 化合物12和化合物13(4-臂PEG-胺，Mw.40,000，1.0g，0.025mmol)溶解于无水DCM(10mL)和无水DMF(1mL)中，在0-5℃下加入EDC(48mg，0.25mmol)和DMAP(48.8mg，
0.4mmol)。反应混合物在0℃-室温下搅拌过夜，真空除去溶剂，所得残留物用乙醚/DCM和
IPA/乙腈重结晶得到产物(880mg)。产物的结构经13CNMR确证。
[0678]实施例13：化合物15的制备
[0679]化合物14(500mg)溶解于无水DCM(2mL)中，4NHCl的二氧杂环乙烷(2mL)溶液加入其中，在室温下搅拌2小时，HPLC监测反应，加入无水乙醚，使粗产物沉淀，用乙醚-DCM重结晶得到产物(410mg)。产物的结构经13CNMR确证。
[0680]实施例14：化合物17的制备
[0681]化合物17a：采用与制备化合物17d相同的条件，从化合物5a制备得到化合物
17a。
[0682]化合物17b：采用与制备化合物17d相同的条件，从化合物5b制备得到化合物
17b。
[0683]化合物17c：采用与制备化合物17d相同的条件，从化合物5c制备得到化合物
17c。
[0684]化合物17d：在0℃下，化合物16(Mw.40,000，3.0g，0.075mmol)加入到化合物8(0.9mmol)的无水DCM(30mL)和无水DMF(3mL)混合溶剂的溶液中，接着加入DMAP(0.1mmol)和DIEA(0.9mmol)。在0℃-室温下搅拌过夜，真空浓缩。所得的残留物用IPA重结晶得到产物。产物的结构经13CNMR确证。
[0685]实施例15：化合物19的制备
[0686]化合物19a：采用与制备化合物19d相同的条件，从化合物5a制备得到化合物
19a。
[0687]化合物19b：采用与制备化合物19d相同的条件，从化合物5b制备得到化合物
19b。
[0688]化合物19c：采用与制备化合物19d相同的条件，从化合物5c制备得到化合物
19c。
[0689]化合物19d：在0℃下，化合物18(MW.40,000，3.0g，0.075mmol)加入到化合物8(0.9mmol)的无水DCM(30mL)和无水DMF(3mL)混合溶剂的溶液中，接着加入DMAP(0.1mmol)和DIEA(0.9mmol)。在0℃-室温下搅拌过夜，真空浓缩。所得的残留物用IPA重结晶得到产物。产物的结构经13CNMR确证。
[0690]实施例16：化合物21的制备
[0691] 采用与制备化合物12相同的条件，化合物2和化合物20反应制备得到化合物21。产物的结构经13CNMR确证。
[0692]实施例17：化合物22的制备
[0693]采用与制备化合物14相同的条件，化合物13和化合物21反应制备得到化合物
22。产物的结构经13CNMR确证。
[0694]实施例18：化合物23的制备
[0695] 采用与制备化合物15相同的条件，从化合物22制备得到化合物23。其结构经13CNMR确证。
[0696]实施例19：化合物25的制备
[0697]化合物25a：采用与制备化合物25d相同的条件，从化合物5a制备得到化合物
25a。
[0698]化合物25b：采用与制备化合物25d相同的条件，从化合物5b制备得到化合物
25b。
[0699]化合物25c：采用与制备化合物25d相同的条件，从化合物5c制备得到化合物
25c。
[0700]化合物25d：化合物8(0.2mmol)和化合物24(MW.40,000，1.0g，0.025mmol)
溶于无水DCM(10mL)和无水DMF(1mL)中，在0-5℃下，加入EDC(48mg，0.25mmol)和DMAP(48.8mg，0.4mmol)。然后，在0℃-室温下，搅拌过夜。真空除去溶剂，所得的残留物用乙醚/DCM和IPA/乙腈重结晶得到产物(880mg)。其结构经13CNMR确证。
[0701] 实施例20：化合物27的制备
[0702] 化合物27a：采用与制备化合物25d相同的条件，从化合物5a制备得到化合物
27a。
[0703] 化合物27b：采用与制备化合物25d相同的条件，从化合物5b制备得到化合物
27b。
[0704] 化合物27c：采用与制备化合物25d相同的条件，从化合物5c制备得到化合物
27c。
[0705] 化合物27d：化合物8(0.2mmol)和化合物26(MW.40,000，0.025mmol)溶解于无水DCM(10mL)和无水DMF(1mL)中，在0-5℃下，加入EDC(48mg，0.25mmol)和DMAP(48.8mg，
0.4mmol)。在0℃-室温下搅拌过夜，真空除去溶剂，所得的残留物用乙醚/DCM和IPA/乙腈重结晶得到产物。结构经13CNMR确证。
[0706] 实施例21：化合物31a和31b的制备
[0707] 三光气(1.22mmol)加入到化合物29a或29b(3.05mmol)的无水DCM(4mL)溶液中，接着，在0℃下，加入DMAP(6.12mmol)的无水DCM(4mL)溶液。含化合物30a或30b的混合物搅拌2小时，在0℃下，加入到SU5416(化合物1，243mg，1.02mmol)和KOH粉末(28.3mg，
0.504mmol)和DMF/THF(6mL，1∶1，v/v)的混合物中，在冰浴中，搅拌2小时，真空浓缩。残留物用硅胶柱层析纯化分别得到化合物31a或31b，洗脱剂为乙酸乙酯-己烷(3∶7，v/v)，产物的结构经13CNMR确证。
[0708] 实施例22：化合物32a和32b的制备
[0709]化合物31a或31b(0.744mmol)溶解于无水DCM(6mL)中，接着在0℃下，滴加TFA(3mL)。在0℃-室温下，搅拌约30分钟。HPLC监测反应。反应一旦结束，加入无水乙醚，使产物沉淀。过滤收集产物，用无水乙醚洗涤，室温下真空干燥，得到粗产物。粗产物不经进一步纯化直接使用。
[0710] 实施例23：化合物34a和34b的制备
[0711] 采用与化合物34b相同的条件，化合物33和化合物32a制备得到化合物34a。[0712] 化合物34b：在0℃下，DMAP(0.05mmol)和DIEA(0.2mmol)加入到化合物33(4-臂SC-PEG，Mw.40,000，1.0g，0.025mmol)和化合物32b(0.245mmol)的无水DCM(20mL)溶液中，反应混合物在0℃-室温下搅拌过夜。加入无水乙醚，使粗产物沉淀，真空过滤收集，用IPA/DMF重结晶两次得到化合物34b，相应地(收率，0.95g)。产物的结构经13CNMR确证。[0713] 实施例24：化合物37的制备
[0714] 在0℃下，DMAP(184.7mg，1.5mmol)加入到BOC-ext-OH(化合物35，313.9mg，
1.5mmol)，三光气(149.4mg，0.504mmol)的无水DCM(2mL)溶液中，搅拌2小时。所得的溶液加入到SU5416钾盐(化合物2，100mg，0.420mmol)的DMF/THF(1∶1，v/v，6mL)溶液中，SU5416用KOH粉末(28.3mg，0.504mmol)处理1小时可制备得到化合物28。在0℃下，反应混合物搅拌约1小时，用0.1NHCl洗涤两次。有机层用无水MgSO4干燥，真空出去溶剂。残留物用50％乙酸乙酯的己烷溶液柱层析纯化，得到200mg产物。产物的结构用LC-MS和
13C，1HNMR确证。
[0715]实施例25：化合物38的制备
[0716]化合物37(337mg，0.744mmol)溶解于2mL无水DCM中，然后在0℃下，滴加1mL的TFA。反应混合物在0℃-室温下搅拌30分钟，真空浓缩得到产物，不经进一步纯化直接使用。
[0717]实施例26：化合物39的制备.
[0718]化合物38(0.412mmol)溶解于30mLDCM中，然后在0℃下，加入DIEA(0.061mL，
0.35mmol)，DMAP(8.5mg，0.07mmol)和化合物33(1.3g，0.035mmol)。反应混合物逐渐升温至室温过夜，加入乙醚得到固体产物，固体用IPA/DMF重结晶两次得到产物(1.2g)，其结构用13CNMR确证。
[0719]实施例27：化合物42a和42b的制备
[0720]采用与制备化合物42b相同的条件，由化合物1和化合物41a制备得到化合物
42a。
[0721] 化合物42b：在0℃下，向三光气(257.04mg，2.6mmol)的无水THF(4.4mL)溶液中加入TEA(595μL，4.3mmol)，所得的混合物在0℃下搅拌15分钟。在0℃下，加入化合物
1(476mg，2.0mmol)，所得的混合物在0℃-室温下搅拌过夜。加入化合物41b(8mmol)和吡啶(8mmol)，然后在室温下搅拌约3小时。HPLC监测反应进程。真空浓缩反应混合物，所得残留物用己烷-乙酸乙酯(7∶3-1∶1，v/v)硅胶柱层析纯化得到产物。
[0722]实施例28：化合物43a和43b的制备
[0723]采用与制备化合物43b相同的条件，由化合物42a制备得到化合物43a。
[0724]化合物43b：化合物42b(160mg，0.311mmol)溶解于3.5mL的无水DCM中，然后在
0℃下，滴加1.75mL的TFA。反应混合物在0℃-室温下搅拌30分钟，真空浓缩得到产物。产物的结构用13C和1HNMR确证。所得产物不经进一步纯化直接使用。
[0725]实施例29：化合物44a和44b的制备
[0726]采用与制备化合物44b相同的条件，由化合物43a制备得到化合物44a。
[0727]化合物44b：化合物43b(0.315mmol)溶解于无水二氯甲烷(15mL)和无水
DMF(1.5mL)的混合溶剂中，然后在0℃下，加入DIEA(0.115mL，0.663mmol)、DMAP(0.6mg，
0.006mmol)和化合物33(1.6g，0.040mmol)。反应混合物在0℃-室温下搅拌过夜，加入无水乙醚，粗产品沉淀出来，用真空过滤收集，在IPA/DMF重结晶两次，得到产物(收率，1.2g)。产物的结构用13CNMR确证。
[0728]实施例30：化合物46a-d的制备
[0729] 化合物46a：化合物1(200mg，0.84mmol)和BocGly-OH(45a，294mg，1.68mmol)溶解于DCM(8mL)和DMF(2mL)中，所得的混合物冷却到0-5℃。加入EDC(363mg，1.89mmol)和DMAP(461mg，3.78mmol)。反应混合物在0℃-室温下搅拌，HPLC监测反应。一旦反应结束，反应混合物用1％NaHCO3洗涤两次，用0.2NHCl洗涤三次。有机层用无水Na2SO4干燥，真空完全除去溶剂，得到0.326g(98％)的产物：13CNMRδ169.48，167.34，155.05，138.15，
134.79，134.42，126.89，126.39，125.44，124.10，123.56，115.91，115.62，113.30，108.62，
79.66，47.40，28.80，28.13，14.57，12.26。
[0730]采用与制备化合物46a相同的条件，由化合物1和Boc-Ala-OH(化合物45b)制备
得到化合物46b。
[0731] 采用与制备化合物46a相同的条件，由化合物1和Boc-Phe-OH(化合物45c)制备得到化合物46c。产物的结构用13CNMR(DMSO-d)确证。
[0732] 采用与制备化合物46a相同的条件，由化合物1和Boc-Leu-OH(化合物45d)制备得到化合物46d。
[0733]实施例31：化合物47a-d的制备
[0734]化合物47a：化合物46a(0.300g，0.76mmol)悬浮于DCM(3.5mL)中，所得的溶液冷却至0℃，然后加入TFA(1.75mL)。反应混合物在0℃下搅拌约30分钟，HPLC检测反应。一旦反应结束，在冰水中真空浓缩反应混合物。加入冷乙醚，固体沉淀出来，轻轻倒出溶剂，固体用冷乙醚洗涤两次。用PO真空干燥产物，得到0.246g(79％)的产物：13CNMR(DMSO-d6)δ165.94，165.01，137.83，134.53，132.64，125.75，125.38，123.93，123.29，
123.23，115.31，113.65，112.43，106.21，43.26，12.51，10.26。
[0735]采用与制备化合物47a相同的条件，由化合物46b制备得到化合物47b。
[0736] 采用与制备化合物47a相同的条件，由化合物46c制备得到化合物47c，产物的结构用13CNMR(DMSO-d)确证。
[0737]采用与制备化合物47a相同的条件，由化合物46d制备得到化合物47d。
[0738]实施例32：化合物48a-d的制备
[0739] 化合物48a：化合物33(2.6g，0.064mmol)和化合物47a(0.209g，0.512mmol)溶解于无水DCM(26mL)和无水DMF(2.6mL)的混合溶剂溶剂中。室温下，加入DIEA(0.188mL，
0.139g，1.08mmol)和DMAP(0.001g，0.010mmol)，反应混合物在室温下搅拌过夜，真空浓缩。加入无水乙醚，粗产物沉淀出来，通过真空过滤收集，在5.2mL乙腈/100mLIPA、以及
2mLDMF/0.5mL乙腈/100mLIPA中重结晶，真空过滤收集产物，在35℃下真空干燥得到
2.37g(90％)的产物：13CNMRδ169.62，167.96，155.98，138.56，134.96，134.82，127.07，
126.56，125.65，124.35，123.10，116.08，115.73，113.50，108.54，78.01，77.43，76.08，
69.26-71.08(PEG)，64.01，47.20，13.96，11.59。
[0740]采用与制备化合物48a相同的条件，由化合物47b和化合物33制备得到化合物
48b。
[0741]采用与制备化合物48a相同的条件，由化合物47c和化合物33制备得到化合物
48c，收率87％：13CNMRδ11.71，14.09，30.82，38.68，56.04，63.99，69.27-70.32(PEG)，
71.13，78.08，108.74，113.64，115.89，116.18，124.22，124.46，125.69，126.60，127.20，
128.02，129.26，135.06，135.24，135.87，138.68，155.44，167.65，172.42。
[0742]采用与制备化合物48a相同的条件，由化合物47d和化合物33制备得到化合物
48d。
[0743]实施例33：化合物50a-h的制备
[0744]采用与制备化合物50b的相同条件，化合物50a和50c，50d，50e，50f，50g，和50h
分别由32a，38，43a，43b，47a，47b，和47c制备得到。
[0745]化合物37b：化合物49(4-臂PEG酸，MW.40,000，1.0g，0.025mmol)在甲苯中共沸
1小时，真空浓缩。所得的残留物溶解于无水DCM(20mL)中，用冰浴冷至0℃。在0℃下，
EDC(38.4mg，0.2mmol)、DMAP(49mg，0.4mmol)和化合物32b(0.25mmol)加入到溶液中，混合
物在0℃到室温下搅拌过夜。加入无水乙醚，粗产物沉淀出来，通过真空过滤收集，在IPA/DMF中重结晶两次得到产物(0.95g)。产物的结构用13CNMR确证。
[0746]实施例34：化合物52的制备
[0747]化合物33(3.0g，0.075mmol)加入到5-氨基-2-戊醇(化合物51，92.7mg，
0.9mmol)的无水DCM(30mL)和无水DMF(3mL)混合溶剂的溶液中，然后加入DIEA(116mg，
0.9mmol)。反应混合物在室温下搅拌过夜，真空浓缩。所得的残留物从IPA中重结晶，得到产物(2.75g，92％收率)。产物的结构用13CNMR确证。
[0748]实施例35：化合物53的制备
[0749]室温下，三光气(58.1mg，0.20mmol)和吡啶(0.0475mL，0.59mmol)加入到化合物
52(2.35g，0.059mmol)的无水氯仿(25mL)溶液中。反应混合物在30℃下搅拌约4小时，然后加入NHS(94.6mg，0.82mmol)和吡啶(0.0665mL，0.82mmol)。混合物在30℃下搅拌约48小时，真空浓缩。所得的残留物从乙醚-DCM和IPA-乙腈中重结晶，得到产物(2.1g，89％收率)。产物的结构用13CNMR确证。
[0750]实施例36：化合物54的制备
[0751]SU5416(化合物1，71.4mg，0.3mmol)和KOH粉末(20.2mg，0.36mmol)与DMF/THF(5mL，1∶1，v/v)混合，在0℃下搅拌1小时，形成化合物28。所得的混合物加入到化合物53(1.0g，0.025mmol)的无水二氯甲烷(10mL)溶液中，所得的混合物在室温下搅拌过夜。真空除去溶剂，所得的残留物从乙醚-DCM和IPA-乙腈重结晶得到产物(553mg，55％收率)。产物的结构用13CNMR确证。
[0752]实施例37：化合物55的制备
[0753]SU5416(化合物1，110mg，0.3mmol)，甲醛(～37wt％在水中，8mL)，和氢氧化铵(28-30wt％ACS试剂级，2mL)的混合物在50℃下搅拌约5小时，冷却至室温。沉淀形成，真空过滤分离，然后用水洗涤几次。固体溶解于氯仿中，真空浓缩，在40℃下真空干燥，得到产物，收率95％。产物的结构用13C和1HNMR确证。
[0754]实施例38：化合物56的制备.
[0755]化合物33(1.0g，0.025mmol)和化合物55(80.1mg，0.3mmol)溶解于无水二氯甲烷(9mL)和无水DMF(1mL)的混合溶剂中，然后加入DIEA(0.087mL，0.5mmol)。反应混合物在室温下搅拌过夜，真空浓缩。所得的残留物从二氯甲烷-乙醚和IPA-乙腈中重结晶，得到产物(814mg，81％收率)。产物的结构用13CNMR确证。
[0756]实施例39：化合物57的制备.
[0757]SU5416(化合物1，110mg，0.3mmol)和甲醛(～37wt％在水中，10mL)的混合物在
50℃下搅拌约5小时，冷却至室温。形成沉淀，真空过滤分离，用水洗涤几次。所得的固体溶解在氯仿中，真空浓缩，在40℃下真空干燥，得到产物。
[0758]实施例40：化合物58的制备.
[0759]采用与制备化合物46b相同的条件，由化合物57和Boc-Ala-OH(化合物45b)制备得到化合物58。
[0760]实施例41：化合物59的制备
[0761]采用与制备化合物47b相同的条件，由化合物58制备得到化合物59。
[0762]实施例42：化合物60的制备.
[0763]采用与制备化合物56相同的条件，由化合物33和化合物59制备得到化合物60。
[0764]实施例43：化合物61的制备.
[0765] SU5416(化合物1，71.4mg，0.3mmol)和KOH粉末(20.2mg，0.36mmol)与DMF/THF(5mL，1∶1，v/v)混合，0℃下搅拌1小时形成化合物28。所得的混合物加入到化合物
16(1.0g，0.025mmol)的无水二氯甲烷(10mL)溶液中，室温下搅拌过夜。真空除去溶剂，所得的残留物用乙醚-二氯甲烷和IPA-乙腈重结晶，得到产物。
[0766]实施例44：化合物62的制备.
[0767]采用与制备化合物54相同的条件，由化合物33和化合物28制备得到化合物62。
[0768]实施例45：母体分子从式(I)或式(I’)化合物的再生
[0769]按照例如实施例4所述的步骤，通过HPLC监测在PBS和大鼠血浆中聚合缀合物的消失和母体分子的出现来测定水解速率，此外，使用实施例3所述的步骤，测定母体分子(例如SU5416)在聚合缀合物中量，以％wt/wt表示，结果如下。
[0770] 按照例如实施例4所述的步骤，通过HPLC监测在PBS和大鼠血浆中聚合缀合物的消失和母体分子的出现来测定水解速率。
[0771]表1.
[0772]
化合物编号
血浆中的T1/2
PBS中的T1/2
负载效率(％w/w)

15
56h
＞72h
ND

17d
7h
＞72h
ND

23
57h
＞72h
ND

25d
＞72h
＞72h
ND

27d
＞72h
＞72h
ND

34a
55min
＞72h
2.13

34b
1.3h
＞72h
2.30

39
2.3min
＞72h
2.31

44b
＞72h
＞72h
1.95

48a
＜1min
28h
1.86

48c
7.5min
＞24h
1.91

48d
2.7min
2.7h
2.95

50b
29min
＞72h
2.22


62
1.15h
＞72h
2.40

[0773] ND：不确定
[0774] 水解结果表明，本发明的化合物在PBS中稳定，但是以不同的速率释放母体分子
SU5416。
[0775] 负载效率表明约4当量的SU5414缀合到1当量的四臂聚合物。
[0001]

[0002]