二芳基硫醚衍生物及其加成盐和免疫抑制剂 【技术领域】
本发明涉及可用来作为免疫抑制剂的二芳基硫醚衍生物、其加成盐及其水合物。
背景技术
免疫抑制剂，作为慢性风湿性关节炎、肾炎、变形性膝关节炎、全身性红斑狼疮等自免疫疾病或炎症性肠疾病等慢性炎症性疾病、哮喘、皮炎等过敏性疾病的治疗药，在许多方面得到利用。尤其，伴随医疗技术的进步，组织或脏器等的移植手术的实施数目日益增多，在这样的近年来医疗现状下，怎么才能巧妙地控制移植后的排异反应是移植成功与否的关键，即使在这个领域，免疫抑制剂也能发挥十分重要的作用。
在脏器移植中，一直使用硫唑嘌呤或麦考酚酸mofetil为代表的代谢拮抗剂、环孢多肽A或他克莫司为代表的calcineurin抑制剂、泼尼松龙为代表的副肾皮质激素剂。然而，这些药剂要么效果不能令人满意，要么为了避免肾障碍等严重副作用也必须进行药物的血中浓度监测，在其效果或副作用方面也未必能令人满意。
进而，为了减轻免疫抑制剂的副作用以得到令人满意的免疫抑制作用，一般是使用作用机理不同的多种药剂的多剂并用疗法，也希望开发具有与上述免疫抑制剂不同作用机理的新型药剂。
本发明者等为了解决这样的课题，着眼于2-氨基-1，3-丙二醇衍生物，进行了新型免疫抑制剂的探索。
作为免疫抑制剂，2-氨基-1，3-丙二醇衍生物虽然已在国际公开序号WO 94/08943号(吉富制药公司、台糖公司)、特许公报平9-2579602号公报(吉富制药公司、台糖公司)中公开，但尚不知道本发明特征的、有二芳基硫醚基的2-氨基-1，3-丙二醇衍生物显示出优异的免疫抑制效果。
【发明内容】
本发明提供有优异免疫抑制作用、且副作用少的二芳基硫醚衍生物。
本发明者等反复锐意研究了作用机理与代谢拮抗剂或calcineurin抑制剂不同的免疫抑制剂，结果发现，结构与迄今为止已知的免疫抑制剂不同的新型二芳基硫醚衍生物、尤其一个芳基的对位上有含氨基丙二醇基的碳链、另一个芳基地间位上有取代基的化合物具有强烈免疫抑制作用，从而完成本发明。
即，本发明是一种免疫抑制剂，其有效成分是二芳基硫醚衍生物和药理学上可接受的盐及其水合物中至少一种以上，其特征在于用通式(1)表示
式中，R1表示卤素原子、三卤甲基、羟基、C1-7低级烷基、无取代或也可以有取代基的苯基、芳烷基、C1-4低级烷氧基、三氟甲氧基、苯氧基、环己基甲氧基、无取代或也可以有取代基的芳烷氧基、吡啶基甲氧基、肉桂酰氧基、萘基甲氧基、苯氧甲基、羟甲基、羟乙基、C1-4低级烷硫基、C1-4低级烷基亚磺酰基、C1-4低级烷基磺酰基、苄硫基、乙酰基、硝基、氰基，R2表示氢原子、卤素原子、三卤甲基、C1-4低级烷氧基、C1-7低级烷基、苯乙基、苄氧基、R3表示氢原子、卤素原子、三氟甲基、C1-4低级烷氧基、羟基、苄氧基、C1-7低级烷基、苯基、C1-4低级烷氧甲基，X表示S、SO、SO2、n表示1-4的整数。
更详细地说，是二芳基硫醚衍生物和药理学上可接受的盐及其水合物，其特征在于通式(1a)所示
式中，R2、R3和n同上述定义；和以二芳基硫醚衍生物和药理学上可接受的盐及其水合物中至少一种以上为有效成分的免疫抑制剂，其特征在于通式(1b)所示
式中，R2、R3和n同上述定义，R4表示氢原子、卤素原子、C1-7低级烷基、C1-4低级烷氧基、三氟甲基。
本发明中的上述通式(1)、通式(1a)和通式(1b)是新型化合物。本发明中的通式(1)所示化合物的药理学上可接受的盐可以列举盐酸盐、氢溴酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、甲烷磺酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐等酸加成盐。
附图简单说明
图1是显示试验化合物对小鼠皮肤移植模型的作用的图。
图2是显示试验化合物对小鼠皮肤移植模型的作用的图。
图3是显示试验化合物对小鼠皮肤移植模型的作用的图。
发明最佳实施形态
进而，在本发明的通式(1)中，“卤素原子”表示氟原子、氯原子、溴原子、碘原子，“三卤甲基”表示三氟甲基、三氯甲基，“C1-7低级烷基”可以列举例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、戊基、己基、庚基等直链或枝化的C1-7烃基。“也可以有取代基的苯氧基”可以列举苯环上的任意位置有氟原子、氯原子、溴原子、碘原子等卤素原子、三氟甲基、C1-4低级烷基、C1-4低级烷氧基者。“芳烷基”、“芳烷氧基”的“芳烷基”可以列举苄基、二苯甲基、苯乙基、苯丙基。进而，“C1-4低级烷氧基”、“C1-4低级烷硫基”、“C1-4低级烷基亚磺酰基”、“C1-4低级烷基磺酰基”等的低级烷基表示例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基等直链或枝化的C1-4烃基，“也可以有取代基的芳烷基”可以列举苯环上的任意位置有氟原子、氯原子、溴原子、碘原子等卤素原子、三氟甲基、C1-4低级烷基、C1-4低级烷氧基者。
按照本发明，上述通式(1)所示化合物可以经由诸如以下所示的路线制造：
合成路线1
在合成路线1中，通式(3)所示化合物
式中，R5表示C1-4低级烷基，Boc表示叔丁氧羰基，R1、R2、R3、X和n如上所述，可通过使通式(2)所示化合物
式中，Y表示氯原子、溴原子、碘原子，R1、R2、R3、X和n如上所述，与通式(5)所示化合物
式中，R5和Boc如上所述，在碱存在下相互作用来制造(第一步骤)。
反应可以用甲醇、乙醇、1，4-二噁烷、二甲基亚砜(DMSO)、N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、四氢呋喃(THF)等作为反应溶剂，在氢化钠、氢化钾、醇钠、醇钾等无机碱的存在下，作为反应温度在0℃-加热回流下、较好80℃-100℃进行。
在合成路线1中，通式(4)所示化合物
式中，R1、R2、R3、X、Boc和n如上所述，可以通过使以上式(3)所示化合物还原来制造(第二步骤)。
反应可以用硼烷(BH3)或9-硼杂双环[3.3.1]壬烷(9-BBN)等烷基硼烷衍生物、氢化二异丁基铝((iBu)2AlH)、硼氢化钠(NaBH4)、氢化铝锂(LiAlH4)等金属氢络合物、较好硼氢化锂，用THF或乙醇、甲醇等作为反应溶剂，在反应温度为0℃-加热回流下、较好在常温下进行。
在合成路线1中，通式(1)所示化合物
式中，R1、R2、R3、X和n如上所述，可通过使以上通式(4)所示化合物发生酸分解来制造(第三步骤)。
反应可以在乙酸、盐酸、氢溴酸、甲烷磺酸、三氟乙酸等无机酸或有机酸中、或在与甲醇、乙醇、THF、1，4-二噁烷、乙酸乙酯等有机溶剂的混合溶液中起作用、在反应温度为0℃-常温下进行。
进而，以上通式(3)中X为SO、SO2的化合物，即通式(6)所示化合物
式中，m表示1或2，R1、R2、R3、R5、Boc和n如上所述，也可以通过使通式(7)所示化合物氧化来制造
式中，R1、R2、R3、R5、Boc和n如上所述。
反应可以用1，4-二噁烷，DMSO、DMF、THF、二氯甲烷、氯仿等作为反应溶剂，用高锰酸钾或间氯过苯甲酸、过氧化氢作为氧化剂，在0℃-加热回流下、较好在常温下进行。
通式(1)的化合物中X为SO、SO2的化合物即通式(8)所示化合物
式中，R1、R2、R3、Boc、m和n如上所述，也可以用以下合成路线来制造
合成路线2
即，通过使通式(9)所示化合物
式中，R1、R2、R3、Boc和n如上所述，与通式(12)所示化合物
式中，R6、R7相同或不同，表示氢原子、C1-4低级烷基，或通式(13)所示化合物
式中，R8表示C1-4低级烷基，R6和R7如上所述，或通式(14)所示化合物起作用
式中，R9表示氯原子、三氟甲烷磺酰氧基，R6和R7如上所述，就可以制造通式(10)所示化合物
式中，Z表示碳原子、硅原子，R1、R2、R3、R6、R7、Boc和n如上所述。
通式(9)所示化合物与通式(12)或通式(13)所示化合物的反应可以在氯化锌等路易斯酸存在下、或樟脑磺酸、对甲苯磺酸、吡啶鎓对甲苯磺酸等酸催化剂的存在下，无溶剂或用DMF、THF、二氯甲烷作为反应溶剂，在反应温度为常温-100℃进行。
此外，与通式(14)的反应可以在三乙胺、吡啶、2，6-二甲基吡啶、咪唑等碱的存在下，用DMF、THF、二氯甲烷、氯仿、乙腈作为反应溶剂，在0℃-100℃的反应温度进行。
在合成路线2中，通式(11)所示化合物
式中R1、R2、R3、R6、R7、Z、Boc、m和n如上所述，可以通过使以上通式(10)所示化合物氧化来制造。
反应可以用1，4-二噁烷、DMSO、DMF、THF、二氯甲烷、氯仿等作为反应溶剂，用高锰酸钾、间氯过苯甲酸、过氧化氢作为氧化剂，在0℃-加热回流下、较好在常温下进行。
在合成路线2中，所述通式(8)所示化合物可以通过使所述通式(11)所示化合物酸分解或者脱甲硅烷基化后酸分解来制造。
反应可以在乙酸、盐酸、氢溴酸、甲烷磺酸、三氟乙酸等无机酸或有机酸中，或与甲醇、乙醇、THF、1，4-二噁烷、乙酸乙酯等有机溶剂的混合溶液中发生作用，在0℃-常温下的反应温度进行。
进而，在通式(11)的Z为硅原子的情况下，也可以用THF、DMF、1，4-二噁烷等作为溶剂，在0℃-常温下与氟化钾、氟化铯、氟化四丁铵作用后进行上述酸分解反应来合成。
实施例
以下用具体例说明本发明，但本发明不受这些具体例限定。
参考例1
2-氯-4-[3-(三氟甲基)苯硫基]苯甲醛
向2-氯-4-氟苯甲醛(1.15g)、3-(三氟甲基)苯硫酚(1.33g)的DMF(20mL)溶液中添加碳酸钾(2.76g)，在120℃加热搅拌1小时。反应液倾入水中、用乙酸乙酯萃取，依次用水、饱和食盐水洗涤后，用无水硫酸钠干燥。减压蒸出溶剂，残渣用硅胶柱色谱法(己烷∶乙酸乙酯＝10∶1)精制。得到目的物(1.96g)，呈淡黄色油状物。
参考例2-9
以下用各种苯硫酚和醛按照与上述同样的方法合成了表1中所示化合物。
表1
参考例 R1 R2 R3 参考例 R1 R2 R3
2 CF3 H H 6 MeO H H
3 CF3 H CF3 7 MeO H Cl
4 CF3 CF3 H 8 MeO H CF3
5 CF3 CF3 Cl 9 Cl Cl H
参考例10
2’-氯-4’-[3-(三氟甲基)苯硫基]肉桂酸乙酯
在氩气流下、在0℃、向二乙膦酰基乙酸乙酯(1.35mL)的THF(30mL)溶液中添加60％氢化钠(272mg)、搅拌30分钟后滴加参考例1的化合物(1.96g)的THF(15mL)溶液。在同温度搅拌2小时后加水、用乙酸乙酯萃取，依次用水、饱和食盐水洗涤后，用无水硫酸钠干燥。减压蒸出溶剂，残渣用硅胶柱色谱法(己烷∶乙酸乙酯＝10∶1)精制。得到目的物(1.72g)，呈无色油状物。
参考例11-18
用参考例2-9的化合物，按照与上述同样的方法，合成了表2中所示化合物。
表2
参考例 R1 R2 R3 参考例 R1 R2 R3
11 CF3 H H 15 MeO H H
12 CF3 H CF3 16 MeO H Cl
13 CF3 CF3 H 17 MeO H CF3
14 CF3 CF3 Cl 18 Cl Cl H
参考例19
2’-氯-4’-(3-三氟甲基苯硫基)二氢肉桂酸乙酯
将参考例10的化合物(1.72g)溶解于乙醇(70mL)中，在0℃搅拌下添加氯化铋(703mg)。少量分批添加硼氢化钠(673mg)之后在同温度搅拌1小时、在室温搅拌3小时。向反应液中加冰水、析出的不溶无机残渣用硅藻土(celite)滤出，用乙酸乙酯萃取。依次用水、饱和食盐水洗涤后、用无水硫酸钠干燥。减压蒸出溶剂，得到目的物(1.50g)，呈无色油状物。
参考例20-25
用参考例11、12、14-17的化合物，按照与上述同样的方法，合成了表3中所示化合物。
表3
参考例 R1 R2 R3 参考例 R1 R2 R3
20 CF3 H H 23 MeO H H
21 CF3 H CF3 24 MeO H Cl
22 CF3 CF3 Cl 25 MeO H CF3
参考例26
4’-(3-羟基苯硫基)二氢肉桂酸
在氩气气流下，向参考例23的化合物(3.20g)的二氯甲烷(50mL)溶液中添加1mol/L三溴化硼/二氯甲烷溶液(20mL)，原样搅拌8小时直至达到室温。向反应液中加水后用乙酸乙酯萃取。依次用水、饱和碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水洗涤后，用无水硫酸钠干燥。减压蒸出溶剂、残渣用硅胶柱色谱法(己烷∶乙酸乙酯＝2∶1)精制。得到目的物(2.00g)，呈无色粉末。
参考例27-28
用参考例24和25的化合物，同上述参考例26一样反应，合成了以下所示化合物。
参考例 R 参考例 R
27 Cl 28 CF3
参考例29
4’-(3-苄氧基苯硫基)二氢肉桂酸苄酯
参考例26的化合物(2.00g)溶解于DMF(30mL)中之后添加苄基溴(2.4mL)、碳酸钾(2.00g)、在60℃搅拌2小时。向反应液中加水、用乙酸乙酯萃取后、依次用水、饱和食盐水洗涤、用无水硫酸钠干燥。减压蒸出溶剂、残渣用硅胶柱色谱法(己烷∶乙酸乙酯＝5∶1)精制。得到目的物(2.29g)，呈无色油状物。
参考例30
4’-(3-苄氧基苯硫基)-2’-氯二氢肉桂酸苄酯
用参考例27的化合物，同以上参考例29一样进行，得到目的物，呈黄色油状物。
参考例31
4’-[3-(叔丁基·二甲基甲硅烷氧基)苯硫基]-2’-氯二氢肉桂酸甲酯
向参考例27的化合物(6.20g)的甲醇(70mL)溶液中滴加亚硫酰二氯之后，回流1小时。减压蒸出溶剂，得到无色油状物(5.80g)的甲酯衍生物。在0℃向这种酯(5.80g)的DMF(80mL)溶液中添加咪唑(1.57g)、叔丁基·二甲基·氯甲硅烷(3.47g)，搅拌7小时直至达到室温。向反应液中加水、用乙酸乙酯萃取。依次用水、饱和食盐水洗涤后用无水硫酸钠干燥。减压蒸出溶剂、残渣用硅胶柱色谱法(己烷∶乙酸乙酯＝5∶1)精制。得到目的物(7.26g)，呈无色油状物。
参考例32
4’-(3-苄氧基苯硫基)-2’-三氟甲基二氢肉桂酸乙酯
用参考例28的化合物的乙醇溶液，同参考例31一样，合成了乙酯后，继续进行同参考例29一样的操作，得到目的物，呈淡黄色油状物。
参考例33
4’-(3-氯苯硫基)二氢肉桂酸甲酯
在氩气气流下，将参考例18的化合物(3.60g)溶解于甲醇(50mL)申，在10℃搅拌，添加锰(500mg)。在同温度搅拌1小时后，进一步添加锰(250mg)、搅拌3小时。向反应液中加稀盐酸、用乙酸乙酯萃取、依次用水、饱和食盐水洗涤后用无水硫酸钠干燥。减压蒸出溶剂，得到目的物(3.13g)，呈淡黄色油状物。
参考例34
4’-(3-三氟甲基-5-甲基苯硫基)二氢肉桂酸甲酯
用参考例13的化合物，按照与上述参考例33同样的方法、。得到目的物，呈无色油状物。
参考例35
2’-氯-4’-(3-三氟甲基苯硫基)二氢肉桂醇
将参考例19的化合物(1.50g)溶解于THF(30mL)中，在0℃搅拌下，添加氢化铝锂(200mg)。30分钟后，加20％ NaOH水溶液，用硅藻土(celite)滤去析出的不溶无机残渣，用乙酸乙酯萃取。依次用水、饱和食盐水洗涤后用无水硫酸钠干燥。减压蒸出溶剂，得到目的物(1.38g)，呈无色油状物。
参考例36-45
用参考例20-22、24、29-34的化合物，按照与上述参考例35同样的方法，合成了表4中所示化合物。
表4
参考例 R1 R2 R3 参考例 R1 R2 R3
36 CF3 H H 41 PhCH2O H H
37 CF3 H CF3 42 PhCH2O H Cl
38 CF3 CF3 Cl 43 PhCH2O H CF3
39 CF3 Me H 44 t-BuMe2SiO H Cl
40 MeO H Cl 45 Cl H H
参考例46
2’-氯-4’-(3-三氟甲基苯硫基)二氢肉桂基碘
将参考例35的化合物(1.38g)溶解于THF(20mL)中，在0℃搅拌下添加咪唑(545mg)、三苯膦(2.10g)、碘(2.00g)。在同温度搅拌2小时、在室温搅拌1.5小时后，追加咪唑(160mg)、三苯膦(600mg)、碘(500mg)。原样搅拌过液，然后向反应液中加水、然后加硫代硫酸钠、用乙酸乙酯萃取。依次用水、饱和食盐水洗涤后，用无水硫酸钠干燥。减压蒸出溶剂，残渣用硅胶柱色谱法(己烷∶乙酸乙酯＝50∶1)精制。得到目的物(1.55g)，呈无色油状物。
参考例47-56
用参考例36-45的化合物，按照与上述参考例46同样的方法，合成了表5中所示化合物。
表5
参考例 R1 R2 R3 参考例 R1 R2 R3
47 CF3 H H 52 PhCH2O H H
48 CF3 H CF3 53 PhCH2O H Cl
49 CF3 CF3 Cl 54 PhCH2O H CF3
50 CF3 Me H 55 t-BuMe2SiO H Cl
51 MeO H Cl 56 Cl H H
参考例57
4’-(3-苄氧基苯硫基)-2’-氯苯乙基碘
参考例57-1
2’-氯-4’-(3-甲氧基苯硫基)苄基腈
与参考例35同样处理参考例7的化合物，得到醇衍生物后，使醇(5.64g)溶解于二氯甲烷(100mL)中，滴加三溴化磷(2.25mL)。在室温搅拌1小时后加冰水、用乙酸乙酯萃取，然后依次用水、饱和食盐水洗涤、用无水硫酸钠干燥。蒸出溶剂，得到淡黄色油状物。所得到的油状物、氰化钾(1.56g)的DMSO(25mL)、水(10mL)溶液在90℃搅拌5小时。向反应液中加水、用乙酸乙酯萃取，然后依次用水、饱和食盐水洗涤、用无水硫酸钠干燥。蒸出溶剂、残渣用硅胶柱色谱法(己烷∶乙酸乙酯＝10∶1)精制。得到所希望的氰化物(3.81g)，呈淡黄色油状物。
参考例57-2
2’-氯-4’-(3-甲氧基苯硫基)苯乙酸乙酯
上述氰化物(3.81g)、氢氧化钾(3.68g)的乙醇(80mL)、水(10mL)溶液加热回流6小时。冷却后滤去不溶物，滤液用稀盐酸中和。用乙酸乙酯萃取后，用水、饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。向蒸出溶剂得到的残渣中加入乙醇(50mL)、亚硫酰二氯(2mL)，在室温搅拌1小时后蒸出溶剂。残渣用硅胶柱色谱法(己烷∶乙酸乙酯＝10∶1)精制。得到所希望的乙酯形式(3.89g)，呈无色油状物。
参考例57-3
4’-(3-苄氧基苯硫基)-2’-氯苯乙酸乙酯
上述乙酯同参考例26一样处理后，像参考例57-2一样进行生成乙酯，然后同参考例29一样进行处理，得到苄基醚。
4’-(3-苄氧基苯硫基)-2’-氯苯乙基碘
以上述参考例57-3的化合物为原料，同参考例35一样反应，得到4’-(3-苄氧基苯硫基)-2’-氯苯乙醇后，同参考例46一样进行反应，得到目的物，呈无色油状物。
参考例58
1-(3-苄氧基苯硫基)-3-氯-4-碘丁基苯
参考例58-1
4-(3-苄氧基苯硫基)-2-氯苯乙醛
参考例57-3的化合物用碱水解后，与N，O-二甲基羟胺缩合得到酰胺形式后，同参考例35一样进行还原，得到醛形式，呈黄色油状物。
参考例58-2
4-[4-(3-苄氧基苯硫基)-2-氯苯基]丁酸乙酯
上述参考例58-1的化合物同参考例10一样处理，然后同参考例19一样处理，得到所希望的丁酸乙酯衍生物。
1-(3-苄氧基苯硫基)-3-氯-4-碘丁基苯
以上述参考例58-2的化合物为原料，同参考例57一样反应，得到目的物，呈无色油状物。
参考例59
4’-(3-苄氧基苯硫基)-2’-氯苄基溴
参考例59-1
2-氯-4-(3-羟基苯硫基)苯甲酸乙酯
用2-氯-4-氟苄腈代替2-氯-4-氟苯甲醛，同参考例1一样反应，得到2-氯-4-(3-甲氧基苯硫基)苄腈后，按照与参考例57-2同样的方法反应、水解，随后按照与参考例26同样的方法使甲氧基分解后进行酯化，得到目的物，呈黄色油状物。
参考例59-2
4’-(3-苄氧基苯硫基)-2’-氯苄基溴
参考例59-1的化合物同参考例29一样进行苄基醚化，然后同参考例35一样反应，转化成醇衍生物。随后，用四溴化碳代替碘进行与参考例46同样的反应，得到目的物，呈无色油状物。
实施例1
2-叔丁氧羰基氨基-5-[2-氯-4-(3-三氟甲基苯硫基)苯基]-2-乙氧羰基戊酸乙酯
在氩气气流下，在室温下，向2-叔丁氧羰基氨基丙二酸二乙酯(1.3mL)的THF(35mL)、DMF(4mL)溶液中添加叔丁醇钠(490mg)。在80℃搅拌20分钟后回到室温，滴加参考例46的化合物(1.55g)的THF(5mL)溶液。然后，加热回流5小时，将反应液倾入冰水中、用乙酸乙酯萃取。依次用水、饱和食盐水洗涤后、用无水硫酸钠干燥。减压蒸出溶剂、残渣用硅胶柱色谱法(己烷∶乙酸乙酯＝5∶1)精制。得到目的物(1.87g)，呈无色油状物。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.22-1.36(6H，m)，1.42(9H，s)，1.45-1.53(2H，m)，2.37(2H，br)，2.74(2H.t，J＝7.8Hz)，4.23(4H，m)，5.94(1H，s)，7.16-7.21(2H，m)，7.36-7.56(5H，m)。
实施例2-13
用参考例47-58的化合物，按照与上述实施例1同样的方法，合成了表6中所示化合物。
表6
实施例 R1 R2 R3 n 收率(％) 性状
2 CF3 H H 3 90 无色油状物
3 CF3 H CF3 3 53 淡黄色油状物
4 CF3 CF3 Cl 3 66 无色油状物
5 CF3 Me H 3 100 无色油状物
6 MeO H Cl 3 87 无色油状物
7 PhCH2O H H 3 - 无色油状物
8 PhCH2O H Cl 2 100 淡黄色油状物
9 PhCH2O H Cl 3 100 无色油状物
10 PhCH2O H Cl 4 100 无色油状物
11 PhCH2O H CF3 3 100 无色油状物
12 t-BuMe2SiO H Cl 3 - 无色油状物
13 Cl H H 3 82 无色油状物
-与下一步骤合并列于表7中。
实施例14
2-叔丁氧羰基氨基-2-乙氧羰基-5-[4-(3-三氟甲基苯基亚磺酰基)苯基]戊酸乙酯
将实施例2的化合物(1.50g)溶解于二氯甲烷(80mL)中，在0℃搅拌下，每批少量分批添加间氯过苯甲酸(450mg)。在同温度搅拌1小时、在室温搅拌2小时后，向反应液中加水、用乙酸乙酯萃取后，依次用饱和碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水洗涤、用无水硫酸钠干燥。减压蒸出溶剂，残渣用硅胶柱色谱法(己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)精制。得到目的物(1.10g)，呈黄色油状物。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.18-1.21(6H，m)，1.40(9H，s)，1.44-1.52(2H，m)，2.30(2H，br)，2.66(2H，t，J＝7.3Hz)，4.14-4.22(4H，m)，5.91(1H，br)，7.27(2H，d，J＝8.3Hz)，7.56(2H，d，J＝8.3Hz)，7.59(1H，t，J＝8.3Hz)，7.69(1H，d，J＝8.3Hz)，7.78(1H，d，J＝8.3Hz)，7.95(1H，s)。
实施例15
2-叔丁氧羰基氨基-5-[4-(3-三氟甲基-5-甲基苯基亚磺酰基)苯基]-2-乙氧羰基戊酸乙酯
用实施例5的化合物，与上述实施例14同样进行，得到目的物，呈无色油状物。
FABMS：600([M+H]+)
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.18-1.22(6H，m)，1.41(9H，s)，1.46-1.50(2H，m)，2.31(2H，br)，2.45(3H，s)，2.66(2H，t，J＝7.3Hz)，4.14-4.22(4H，m)，5.92(1H，br s)，7.27(2H，d，J＝7.8Hz)，7.48(1H，s)，7.55(2H，d，J＝7.8Hz)，7.62(1H，s)，7.70(1H，s)。
实施例16
2-叔丁氧羰基氨基-2-[2-氯-4-(3-三氟甲基苯硫基)苯基]丙基-1，3-丙二醇
将实施例1的化合物(1.87g)溶解于THF(30mL)中，在0℃搅拌下加硼氢化锂(675mg)。随后添加乙醇(5mL)、边徐徐升温到室温边搅拌过夜，然后向反应液中加冰水，减压蒸出有机溶剂。向残渣中加10％柠檬酸水调至pH3后、用乙酸乙酯萃取。依次用水、饱和食盐水洗涤后、用无水硫酸钠干燥、减压蒸出溶剂。残渣用硅胶柱色谱法(己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)精制，得到目的物(1.10g)，呈无色油状物。
FABMS：520([M+H]+)
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.43(9H，s)，1.62-1.65(4H，m)，2.72(2H，br)，3.31(2H，br)，3.57-3.62(2H，m)，3.81-3.85(2H，m)，4.93(1H，s)，7.20-7.27(3H，m)，7.38-7.55(4H，m)。
实施例17-30
用实施例2-15的化合物，按照与上述实施例16同样的方法，合成了表7中所示化合物。
表7
实施例 R1 R2 R3 X n 收率(％) 性状
17 CF3 H H S 3 89 无色粉末
18 CF3 H H SO 3 71 无色无定形物
19 CF3 H CF3 S 3 51 无色油状物
20 CF3 CF3 Cl S 3 66 无色无定形物
21 CF3 Me H S 3 81 无色粉末
22 CF3 Me H SO 3 65 无色粉末
23 MeO H Cl S 3 56 无色油状物
24 PhCH2O H H S 3 (45) 无色油状物
25 PhCH2O H Cl S 2 41 无色油状物
26 PhCH2O H Cl S 3 65 无色油状物
27 PhCH2O H Cl S 4 76 无色油状物
28 PhCH2O H CF3 S 3 66 无色油状物
29 t-BuMe2SiO H Cl S 3 (33) 无色油状物
30 Cl H H S 3 41 无色油状物
()表示从上一步骤算起的总收率。
实施例31
5-叔丁氧羰基氨基-2，2-二叔丁基-5-{3-[4-(3-氯苯硫基)苯基]丙基}-1，3，2-二氧硅杂环己烷
向实施例30的化合物(490mg)、2，6-二甲基吡啶(0.35mL)的DMF(15mL)溶液中，在0℃添加二(三氟甲烷磺酰氧基)·二叔丁基甲硅烷(0.55mL)。搅拌5小时直至室温后，将反应液倾入冰水中、用乙酸乙酯萃取。依次用水、饱和食盐水洗涤后、用无水硫酸钠干燥、减压蒸出溶剂。残渣用硅胶柱色谱法(己烷∶乙酸乙酯＝8∶1)精制，得到目的物(630mg)，呈无色粉末。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.05(9H，s)，1.06(9H，s)，1.43(9H，s)，1.57-1.62(4H，m)，2.58(2H，br)，3.89(2H，d，J＝10.7Hz)，4.22(2H，d，J＝10.7Hz)，4.92(1H，brs)，7.09-7.20(6H，m)，7.34(2H，d，J＝8.3Hz)。
实施例32
5-叔丁氧羰基氨基-2，2-二叔丁基-5-{3-[4-(3-氯苯磺酰基)苯基]丙基}-1，3，2-二氧硅杂环己烷
用上述实施例31的化合物，同实施例14一样进行氧化，得到目的物，呈无色粉末。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.04(9H，s)，1.05(9H，s)，1.41(9H，s)，1.55-1.57(4H，m)，2.63(2H，br)，3.86(2H，d，J＝11.2Hz)，4.19(2H，d，J＝11.2Hz)，4.92(1H，br)，7.29(2H，d，J＝8.3Hz)，7.44(1H，t，J＝8.3Hz)，7.50-7.53(1H，m)，7.80-7.85(1H，m)，7.84(2H，d，J＝8.3Hz)，7.91-7.92(1H，m)。
实施例33
5-叔丁氧羰基氨基-5-[4-(3-叔丁氧基·二甲基甲硅烷氧基苯硫基)-2-氯苯基]丙基-2，2-二甲基-1，3-二氧杂环己烷
向实施例29的化合物(1.88g)的DMF(30mL)溶液中添加2，2-二甲氧基丙烷(2.5mL)、对甲苯磺酸(100mg)，在80℃加热搅拌5小时。将反应液倾入水中、用乙酸乙酯萃取后依次用水、饱和食盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥、减压蒸出溶剂后，残渣用硅胶柱色谱法(己烷∶乙酸乙酯＝3∶1)精制，得到目的物(1.11g)，呈无色粉末。
实施例34
5-叔丁氧羰基氨基-5-[2-氯-4-(3-羟基苯硫基)苯基]丙基-2，2-二甲基-1，3-二氧杂环己烷
向上述实施例33的化合物(1.10g)的THF(20mL)溶液中添加1mol/L氟化四丁铵/THF溶液(5mL)。10分钟后，将反应液倾入水中、用乙酸乙酯萃取、依次用水、饱和食盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥、减压蒸出溶剂后，得到目的物(900mg)，呈无色粉末。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.39(9H，s)，1.40(3H，s)，1.41(3H，s)，1.60(4H，br s)，2.78(2H，br s)，3.64(2H，d，J＝11.7Hz)，3.83(2H，d，J＝11.7Hz)，4.89(1H，br)，7.27(1H，br)，6.53(1H，br)，6.65(1H，d，J＝6.9Hz)，6.85(1H，d，J＝8.3Hz)，7.11-7.16(2H，m)，7.26-7.28(1H，m)，7.45(1H，br s)。
实施例35
5-叔丁氧羰基氨基-5-[2-氯-4-(3-(3-氯苄氧基)苯硫基)苯基]丙基-2，2-二甲基-1，3-二氧杂环己烷
向实施例34的化合物(500mg)的DMF(10mL)溶液中添加碳酸钾(500mg)、间氯苄基溴(0.16mL)，在70℃搅拌1小时。将反应液倾入水中、用乙酸乙酯萃取、依次用水、饱和食盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥、减压蒸出溶剂后、残渣用硅胶柱色谱法(己烷∶乙酸乙酯＝3∶1)精制，得到目的物(520mg)，呈无色粉末。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.41(3H，s)，1.42(12H，s)，1.53-1.56(2H，m)，1.76(2H，br)，2.69(2H，t，J＝7.8Hz)，3.65(2H，d，J＝11.7Hz)，3.88(2H，d，J＝11.7Hz)，4.88(1H，br)，4.99(2H，s)，6.86(1H，dd，J＝8.3，2.0Hz)，6.92-6.95(2H，m)，7.11-7.16(2H，m)，7.21-7.32(5H，m)，7.40(1H，s)。
实施例36
2-氨基-2-[4-(3-苄氧基苯硫基)-2-氯苯基]丙基-1，3-丙二醇·盐酸盐
向实施例26的化合物(6.91g)的甲醇(150mL)溶液中添加含有3mol/L盐酸的乙酸乙酯(100mL)，在室温搅拌1小时。减压蒸出溶剂、向残渣中添加二氯甲烷∶甲烷＝1∶5的混合液、将结晶滤出。干燥后，得到目的物(5.75g)，呈无色粉末。
FABMS：458([M+H]+)
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.57(4H，br s)，2.64(2H，br s)，3.36-3.46(4H，m)，5.09(2H，s)，5.31(2H，t，J＝4.9Hz)，6.89(1H，d，J＝8.3Hz)，6.95(1H，t，J＝2.0Hz)，6.99(1H，dd，J＝8.3Hz，2.0Hz)，7.23(1H，dd，J＝7.8Hz，2.0Hz)，7.29(8H，m)，7.70(3H，br s)。
熔点132-133℃(EtOH-iPr2O)
元素分析值(％)：C25H28ClNO3S·HCl
C H N
计算值： 60.72 5.91 2.83
实测值： 60.71 5.85 2.91。
实施例37-45
用实施例16-24的化合物，按照与上述实施例36同样的方法，合成了表8中所示化合物。
表8
实施例 R1 R2 R3 X n 收率(％) 性状 FABMS 熔点℃
[M+H]+
37 CF3 H H S 3 94 无色粉末 386 140-143
38 CF3 H H SO 3 97 无色无定形 402
39 CF3 H Cl S 3 93 无色粉末 420 194-197
40 CF3 H CF3 S 3 83 无色粉末 453 107-112
41 CF3 CF3 Cl S 3 93 无色粉末 488 159-162
42 CF3 Me H S 3 86 无色粉末 400 117-119
43 CF3 Me H SO 3 88 无色无定形 416
44 MeO H Cl S 3 90 黄色粉末 382 98-100
45 PhCH2O H H S 3 100 无色粉末 424 97-100
实施例46黄色粉末
2-氨基-2-[4-(3-苄氧基苯硫基)-2-氯苯基]乙基-1，3-丙二醇·盐酸盐
用实施例25的化合物、按照与实施例36同样的方法，得到目的物，呈无色粉末。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.75-1.79(2H，m)，2.69-2.73(2H，m)，3.54(2H，s)，5.10(2H，s)，5.40(2H，t，J＝4.0Hz)，6.91(1H，dd，J＝8.3Hz，1.8Hz)，6.96(1H，t，J＝1.8Hz)，7.00(1H，dd，J＝8.3Hz，1.8Hz)，7.26(1H，dd，J＝8.8Hz，1.8Hz)，7.30-7.42(8H，m)，7.82(3H，br)。
FABMS：444([M+H]+)
熔点143-145℃(EtOH-iPr2O)
元素分析值(％)：C24H26ClNO3S·HCl
C H N
计算值： 60.00 5.66 2.92
实测值： 59.88 5.61 2.97。
实施例47-51
用实施例27、28、30、32、35的化合物，按照与上述实施例36同样的方法，合成了表9中所示化合物。
FABMS
实施例 R1 R2 R3 X n 收率(％) 性状 熔点℃
[M+H]+
47 PhCH2O H Cl S 4 88 无色粉末 472 91-93
48 PhCH2O H CF3 S 3 85 无色粉末 492 86-98
49 H Cl S 3 100 无色粉末 492 95-98
50 Cl H H S 3 77 无色粉末 352 122-12.5
51* Cl H H SO2 3 97 无色粉末 384 171-174
*Bu4NF处理后实施
实施例52
5-叔丁氧羰基氨基-5-[2-氯-4-(3-苄氧基苯硫基)苯基]甲基-2，2-二甲基-1，3-二氧杂环己烷
用参考例59的化合物、按照与实施例1同样的方法合成酯衍生物，然后用与实施例16同样的方法转化成二醇衍生物。然后按照与实施例35同样的操作，得到目的物，呈黄色油状物。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.43(6H，s)，1.46(9H，s)，3.23(2H，s)，3.83(2H，d，J＝11.7Hz)，3.89(2H，d，J＝11.7Hz)，4.84(1H，br s)，5.03(2H，s)，6.91(1H，ddd，J＝8.3Hz，2.4Hz，1.0Hz)，6.95-6.99(2H，m)，7.1 2(1H，dd，J＝8.3Hz，2.0Hz)，7.22-7.41(8H，m)。
实施例53
5-叔丁氧羰基氨基-5-[2-氯-4-(3-苄氧基苯基亚磺酰基)苯基]丙基-2，2-二甲基-1，3-二氧杂环己烷
用实施例26的化合物，与实施例35同样反应之后，与实施例14同样进行氧化，得到目的物，呈无色粉末。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.40(3H，s)，1.41(12H，s)，1.51-1.56(2H，m)，1.73-1.75(2H，m)，2.72(2H，t，J＝7.8Hz)，3.64(2H，d，J＝11.7Hz)，3.85(2H，d，J＝11.7Hz)，4.87(1H，br s)，5.09(2H，s)，7.05(1H，dd，J＝8.3Hz，2.9Hz)，7.19(1H，d，J＝8.3Hz)，7.22-7.42(9H，m)，7.59(1H，d，J＝2.9Hz)。
实施例54
5-叔丁氧羰基氨基-5-[2-氯-4-(3-苄氧基苯基磺酰基)苯基]丙基-2，2-二甲基-1，3-二氧杂环己烷
用实施例53的化合物，与实施例14同样进行氧化，得到目的物，呈无色粉末。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.40(3H，s)，1.41(12H，s)，1.53-1.60(2H，m)，1.73-1.75(2H，m)，2.74(2H，t，J＝7.3Hz)，3.64(2H，d，J＝11.7Hz)，3.84(2H，d，J＝11.7Hz)，4.87(1H，br s)，5.10(2H，s)，7.15(1H，dd，J＝7.8Hz，1.5Hz)，7.31-7.53(9H，m)，7.69(1H，dd，J＝7.8Hz，2Hz)，7.86(1H，d，J＝1.5Hz)。
实施例55-57
用实施例52-54的化合物，按照与实施例36同样的方法，合成了表10中所示化合物。
表10
实施例 R1 R2 R3 X n 收率(％) 性状 FABMS 熔点℃
[M+H]+
55 PhCH2O H Cl S 1 86 无色粉末 430 163-165
56 PhCH2O H Cl SO 3 85 淡褐色无定形 474
57 PhCH2O H Cl SO2 3 96 褐色粉末 490 60-62
以下用实验例显示证明本发明化合物的有用性的成绩。
实验例1试验化合物对于小鼠宿主对移植片排异反应的抑制作用
参照《移植(Transplantation)》第55卷第3期第578-591页(1993年)记载的方法进行。从9-11周龄BALB/c系雄性小鼠(CLEAJapan公司、Charles River Japan公司或Japan SLC公司)采集脾脏。将脾脏置于磷酸缓冲生理食盐水(PBS(-)，日水制药公司)或RPMI-1640培养基(GIBCO工业公司或岩城硝子公司)中，使之通过不锈钢筛网、或者先用2枚载玻片轻轻碾压然后通过细胞过滤器(70μm，Falcon公司)，制成脾细胞悬浮液。这种脾细胞悬浮液离心分离除去上清液后，添加氯化铵-Tris等张缓冲液使红血球溶血。用PBS(-)或RPMI-1640培养基进行3次离心洗涤之后，悬浮于RPMI-1640培养基中。向其中添加丝裂霉素C(协和发酵公司)使其最终浓度为25μg/mL，在37℃、5％ CO2下培养30分钟。用PBS(-)或RPMI-1640培养基进行3次离心洗涤后，悬浮于RPMI-1640培养基中使之达到2.5×108个/mL，以此作为刺激细胞悬浮液。用27G针和微量注射器(Hamilton公司)给7-9周龄C3H/HeN系雄性小鼠(CLEA Japan公司、Charles River Japan公司或Japan SLC公司)的右后肢爪垫部皮下注射刺激细胞悬浮液20μl(5×106个/只)。在正常对照组中只注射RPMI-1640培养基。4日后，摘除右膝下淋巴节，用MettlerAT201电子天平(Mettler Toledo公司)测定重量。从刺激细胞注射日起直至3日后1日1次共计4次连续向腹腔内注射试验化合物。在对照组中注射与试验化合物配制时使用的、组成相同的溶剂。结果列于表11中。
表11
实施例序号 给药量 (mg/kg) 抑制率 (％) 实施例序号 给药量 (mg/kg) 抑制率 (％) 36 37 38 39 41 42 43 0.03 10 10 0.3 3 10 10 85 92 56 83 89 76 64 45 46 47 48 49 51 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 10 101 80 87 48 63 50
实验例2试验化合物对于小鼠迟延型过敏反应的抑制作用
参照《酶学方法(Methods in Enzymology)》第300卷第345-363页(1999年)记载的方法进行。将1-氟-2，4-二硝基苯(DNFB，Nacalai Tesque公司)溶解于丙酮∶橄榄油(4∶1)混合液中，使之达到1％(v/v)。向6-8周龄的BALB/e系雄性小鼠(Japan SLC公司或Charles River Japan公司)的左右后肢爪垫部各涂布1％ DNFB 10μL，进行抗原敏化作用。这种抗原敏化作用连续进行2日、以此作为第0日和第1日。在第5日，用同抗原激惹耳部以引起迟延型过敏反应。首先，用度盘厚度计G(0.01-10mm，尾崎制作所)测定抗原激惹前的左右耳厚。然后，给药试验化合物。30分钟后，将溶解于丙酮∶橄榄油(4∶1)混合液中的0.2％(v/v)DNFB溶液10μL涂布在右耳表里、进行抗原激惹。左耳只用溶剂激惹。24小时后测定耳厚增加量，并以右耳与左耳的耳厚增加量之差作为各个体的数据。试验化合物溶解或悬浮于超纯水中之后，对小鼠以每10g体重各0.1mL的剂量经口给药。在对照组给药超纯水。结果列于表12中。
表12
实施例序号 给药量 (mg/kg) 抑制率 (％) 36 37 39 49 1 30 3 30 86 87 55 81
实验例3试验化合物对小鼠皮肤移植模型的作用
用小鼠皮肤移植模型，探讨了对排异反应的作用。移植实验参照Journal of Experimental Biology第28卷第3期第385-405页(1951年)记载的方法进行。
首先，从DBA/2系雄性小鼠背部剥离皮肤、去除脂肪层和浅层肌膜后，制作成直径8mm的圆形移植片。然后，用镊子将麻醇的BALB/c系雄性小鼠的背中皮肤镊起、用手术用小刀切开、制作直径约8mm的圆形移植床。将取自DBA/2小鼠的移植片置于BALB/c小鼠的移植床上，从上向下压紧、并在其上粘贴救急绊创膏。移植6日后取下绊创膏，此后每日观察移植片。以直至移植片完全脱落的日数为存活期，评价化合物的作用。试验化合物溶解于超纯水中，从移植当日算起1日1次经口给药。要说明的是，在对照组中同样给药超纯水。
结果显示于图1-图3中。
如上所述，通式(1)所示的本发明化合物已经在动物实验模型中确认了其有效性。
产业上利用的可能性
如上所述，本发明发现，新型二芳基硫醚衍生物、尤其一个芳基的对位有含氨基丙二醇基的碳链、另一个芳基的间位有取代基的二芳基硫醚衍生物，具有强烈的免疫抑制作用。有这样的免疫抑制作用的化合物可以用来作为脏器移植和骨髓移植中的排异反应的预防或治疗药、自免疫疾病的预防或治疗药、慢性关节风湿的预防或治疗药、牛皮癣或特应性皮炎的预防或治疗药、以及支气管哮喘或花粉症的预防或治疗药。