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用作食欲肽拮抗剂的哌啶衍生物
    本发明涉及咪唑并吡啶基亚甲基取代的哌啶衍生物及其作为药物的用途。
     许多医学上显著的生物学过程受到参与涉及 G- 蛋白和 / 或第二信使的信号转导 途径的蛋白的调节。
     编码人 7- 跨膜 G- 蛋白偶联神经肽受体食欲肽 -1(HFGAN72) 的多肽和多核苷酸 已经被鉴定并公开于 EP875565、 EP875566 和 WO 96/34877。编码第二人食欲肽受体， 食欲 肽 -2(HFGANP) 的多肽和多核苷酸已经被鉴定且描述于 EP893498。
     编码对于食欲肽 -1 受体例如食欲肽 -A(Lig72A) 为配体的多肽的多肽和多核苷酸 公开于 EP849361。
     食欲肽配体和受体体系自从其被发现以来已经被充分的表征了 ( 参见例如 Sakurai， T. 等人 (1998)Cell， 92 第 573-585 页 ； Smart 等人 (1999)British Journal of Pharmacology 128 第 1-3 页 ； Willie 等人 (2001)Ann.Rev.Neurosciences 24 第 429-458 页； Sakurai(2007)Nature Reviews Neuroscience 8 第 171-181 页 ； Ohno 和 Sakurai(2008) Front.Neuroendocrinology 29 第 70-87 页 )。从这些研究中， 可以清楚地看到食欲肽和食 欲肽受体在哺乳动物中起很多重要的生理作用， 且开辟对于开发多种如下描述的疾病和病 症新的治疗方法的可能性。
     实验已经表明中枢给药配体食欲肽 -A 在 4 小时期间于自由喂养的大鼠中刺激 食物摄取。该增加比接受载体的对照大鼠大约高 4 倍。这些数据表明食欲肽 -A 可为食 欲的内源性调节剂 (Sakurai， T. 等人 (1998)Cell， 92 第 573-585 页 ； Peyron 等人 (1998) J.Neurosciences 18 第 9996-10015 页 ； Willie 等人 (2001)Ann.Rev.Neurosciences 24 第 429-458 页 )。因此， 食欲肽 -A 受体的拮抗剂可用于治疗肥胖和糖尿病。在其支持论据中， 已经表明食欲肽受体拮抗剂 SB334867 在大鼠中有效地降低了欣然进食 (hedonic eating) (White 等人 (2005)Peptides 26 第 2231-2238 页 )， 以及也在大鼠中减弱了高脂肪颗粒的 自我给药 (Nair 等人 (2008)British Journal of Pharmacology， 网上公开于 2008 年 1 月 28 日 )。
     对于治疗肥胖和其他进食障碍寻求新的治疗方法是一个重大的挑战。根据 WHO 定 义， 于西方社会中， 在 39 例研究中， 平均 35％的患者超重， 且另外的 22％临床型肥胖。据估 计在美国 5.7％的总的医疗保健费用是因为肥胖造成的。约 85％的 II 型糖尿病患者为肥 胖。对于所有的糖尿病患者饮食和运动是重要的。在西方国家中诊断的糖尿病发病率通常 为 5％， 且据估计有相等数量的未被诊断的患者。 肥胖和 II 型糖尿病的发病率在上升， 表明 当前治疗的不足， 其或者是无效的或者具有毒性危险包括心血管作用。使用磺酰基脲或胰 岛素治疗糖尿病可造成低血糖， 而二甲双胍引起 GI 副作用。已经表明对于 II 型糖尿病的 药物治疗不能降低该疾病的长期并发症。胰岛素敏化剂对于很多糖尿病是有用的， 然而它 们并不具有抗肥胖作用。
     除了在食物摄取中具有作用之外， 食欲肽体系也在睡眠和失眠中涉及到。大鼠 睡眠 /EEG 研究已经表明当在正常睡眠期开始时给药时， 中枢给药食欲肽 -A( 食欲肽受体 的激动剂 ) 造成了在唤醒上的剂量相关的增加， 很大程度上其代价为异相睡眠和慢波睡
     眠 2 的减少 (Hagan 等人 (1999)Proc.Natl.Acad.Sci.96 第 10911-10916 页 )。食欲肽体 系在睡眠和失眠中的作用已经明确确立 (Sakurai(2007)Nature Reviews Neuroscience 8 第 171-181 页 ； Ohno 和 Sakurai(2008)Front.Neuroendocrinology 29 第 70-87 页 ； Chemelli 等 人 (1999)Cell 98 第 437-451 页 ； Lee 等 人 (2005)J.Neuroscience 25 第 6716-6720 页 ； Piper 等人 (2000)European J Neuroscience 12 第 726-730 页， 以及 Smart 和 Jerman(2002)Pharmacology and Therapeutics 94 第 51-61 页 )。因此， 食欲肽受体的 拮抗剂可用于治疗睡眠障碍包括失眠。使用食欲肽受体拮抗剂如 SB334867 在大鼠中 ( 参 见例如 Smith 等人 (2003)Neuroscience Letters 341 第 256-258 页 ) 以及更多的最近在 犬类和人类 (Brisbare-Roch 等人 (2007)Nature Medicine 13(2) 第 150-155 页 ) 中的研 究进一步支持了该论点。
     此 外， 最 近 的 研 究 已 经 表 明 食 欲 肽 拮 抗 剂 在 治 疗 激 发 性 疾 病 (motivational disorders)， 如 与寻 觅奖赏行 为相关 的疾病 (disorders related to reward seeking behaviours) 例如药物成瘾和物质滥用 (Borgland 等人 (2006)Neuron 49(4) 第 589-601 页； Boutrel 等 人 (2005)Proc.Natl.Acad.Sci.102(52) 第 19168-19173 页 ； Harris 等 人 (2005)Nature 437 第 556-559 页 ) 中的作用。 国 际 专 利 申 请 WO99/09024、 WO99/58533、 WO00/47577 和 WO00/47580 公 开 了 苯 基脲衍生物以及 WO00/47576 公开了喹啉基肉桂酰胺衍生物， 作为食欲肽受体拮抗剂。 WO05/118548 公开了取代的 1， 2， 3， 4- 四氢异喹啉衍生物作为食欲肽拮抗剂。
     WO01/96302、 WO02/44172、 WO02/89800、 WO03/002559、 WO03/002561、 WO03/032991、 WO03/037847、 WO03/041711 和 WO08/038251、 WO09/003993、 WO09/003997 和 WO09/124956 均 公开环状胺衍生物。
     WO03/002561 公 开 了 N- 芳 酰 基 环 状 胺 衍 生 物 作 为 食 欲 肽 拮 抗 剂。 公 开 在 WO03/002561 中的化合物包括在 2- 位被二环的杂芳基甲基取代的哌啶衍生物。 我们现在已 经发现在 2- 位被咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基甲基取代的一些哌啶衍生物具有有利的性质， 包括相比现有技术的化合物例如具有增加的口服生物利用度和在生理学相关介质中明显 增加的溶解度。这些性质使得这些咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基甲基取代的哌啶衍生物成为 非常有吸引力的可能药物， 其可用于预防或治疗肥胖， 包括 II 型 ( 非胰岛素依赖型 ) 糖尿 病人中观察到的肥胖、 睡眠障碍、 焦虑、 抑郁症、 精神分裂症、 药物依赖 (drug dependency) 或强迫行为。另外， 这些化合物可用于治疗中风 (stroke)， 尤其是缺血性中风或出血性中 风， 和 / 或阻断催吐响应， 即， 用于治疗恶心和呕吐。
     因此， 本发明提供式 (I) 化合物或其药学上可接受的盐，
     其中 ：
     Ar 为被一个、 两个或三个独立地选自下列的基团所取代的吡啶基 ： C1-4 烷基、 卤 素、 C1-4 烷氧基、 卤代 C1-4 烷基、 卤代 C1-4 烷氧基、 氰基、 苯基或 5 或 6 元含有 1， 2 或 3 个选自 N、 O 或 S 的原子的杂环基， 该苯基或杂环基任选被 C1-4 烷基、 卤素、 C1-4 烷氧基、 卤代 C1-4 烷 基、 卤代 C1-4 烷氧基或氰基取代 ；
     R1 为 (C1-4) 烷基、 卤素、 卤代 (C1-4) 烷基、 (C1-4) 烷氧基、 卤代 (C1-4) 烷氧基、 (C1-4) 5 6 5 6 CN、 NR R ， 其中 R 为 H 或 (C1-4) 烷基且 R 为 H 或 (C1-4) 烷基 ； 烷基 -O-(C1-4) 烷基、
     R2 为 (C1-4) 烷基、 (C1-4) 链烯基、 HO(C1-4) 烷基、 卤素、 卤代 (C1-4) 烷基、 (C1-4) 烷氧 7 8 7 基、 卤代 (C1-4) 烷氧基、 (C1-4) 烷基 -O-(C1-4) 烷基、 CN、 NR R ， 其中 R 为 H 或 (C1-4)- 烷基且 8 R 为 H 或 (C1-4)- 烷基 ；
     R3 为 (C1-4) 烷基、 卤素、 卤代 (C1-4) 烷基、 (C1-4) 烷氧基、 卤代 (C1-4) 烷氧基、 (C1-4) 9 10 9 10 烷基 -O-(C1-4) 烷基、 CN、 NR R ， 其中 R 为 H 或 (C1-4)- 烷基且 R 为 H 或 (C1-4)- 烷基 ；
     R4 为 (C1-4) 烷基、 卤素、 卤代 (C1-4) 烷基、 (C1-4) 烷氧基、 卤代 (C1-4) 烷氧基、 (C1-4) 11 12 11 12 烷基 -O-(C1-4) 烷基、 CN、 NR R ， 其中 R 为 H 或 (C1-4)- 烷基且 R 为 H 或 (C1-4)- 烷基 ；
     n为0或1；
     p为0或1；
     q为0或1；
     r 为 0 或 1。
     在一个实施方案中， Ar 为被一个、 两个或三个独立地选自下列的基团所取代的吡 啶基 ： C1-4 烷基、 卤素、 C1-4 烷氧基、 卤代 C1-4 烷基、 卤代 C1-4 烷氧基、 氰基或苯基 ；
     R1 为 (C1-4) 烷基、 卤素、 卤代 (C1-4) 烷基、 (C1-4) 烷氧基、 卤代 (C1-4) 烷氧基、 (C1-4) 5 6 5 6 烷基 -O-(C1-4) 烷基、 CN、 NR R ， 其中 R 为 H 或 (C1-4) 烷基， 且 R 为 H 或 (C1-4) 烷基 ；
     R2 为 (C1-4) 烷基、 (C1-4) 链烯基、 HO(C1-4) 烷基、 卤素、 卤代 (C1-4) 烷基、 (C1-4) 烷氧 7 8 7 基、 卤代 (C1-4) 烷氧基、 (C1-4) 烷基 -O-(C1-4) 烷基、 CN、 NR R ， 其中 R 为 H 或 (C1-4)- 烷基， 且 8 R 为 H 或 (C1-4)- 烷基 ；
     R3 为 (C1-4) 烷基、 卤素、 卤代 (C1-4) 烷基、 (C1-4) 烷氧基、 卤代 (C1-4) 烷氧基、 (C1-4) 9 10 9 10 烷基 -O-(C1-4) 烷基、 CN、 NR R ， 其中 R 为 H 或 (C1-4)- 烷基， 且 R 为 H 或 (C1-4)- 烷基 ；
     R4 为 (C1-4) 烷基、 卤素、 卤代 (C1-4) 烷基、 (C1-4) 烷氧基、 卤代 (C1-4) 烷氧基、 (C1-4) 11 12 11 12 烷基 -O-(C1-4) 烷基、 CN、 NR R ， 其中 R 为 H 或 (C1-4)- 烷基， 且 R 为 H 或 (C1-4)- 烷基 ；
     n为0或1；
     p为0或1；
     q为0或1；
     r为0或1；
     或其药学上可接受的盐。
     在一个实施方案中， 该吡啶基通过在该吡啶基的 2 位上的碳与所述羰基碳之间所 形成的键连接至该羰基上。
     在一个实施方案中， 该吡啶基通过在该吡啶基的 3 位上的碳与所述羰基碳之间所 形成的键连接至该羰基上。
     在一个实施方案中， 该吡啶基通过在该吡啶基的 4 位上的碳与所述羰基碳之间所 形成的键连接至该羰基上。
     在一个实施方案中， 该吡啶基通过在该吡啶基的 1 位上的氮与所述羰基碳之间所 形成的键连接至该羰基上。
     在一个实施方案中， Ar 被一个 (C1-4) 烷基和一个 (C1-4) 烷氧基所取代。
     在另一个实施方案中， Ar 被一个甲基和一个 (C1-4) 烷氧基所取代。
     在一个实施方案中， Ar 被一个 (C1-4) 烷基和一个丙氧基、 乙氧基、 甲氧基、 甲基乙 氧基、 甲基丙氧基或环丙基甲氧基所取代。 在一个实施方案中， Ar 被一个甲基和一个丙氧基、 乙氧基、 甲氧基、 甲基乙氧基、 甲 基丙氧基或环丙基甲氧基所取代。
     在一个实施方案中， Ar 被一个 (C1-4) 烷基和一个苯基所取代。
     在一个实施方案中， Ar 被一个甲基和一个苯基所取代。
     在一个实施方案中， q 为 1， 且 R3 为烷基。
     在另一个实施方案中， q 为 1， 且 R3 为甲基。
     在一个实施方案中， p 为 1， 且 R2 为烷基。
     在另一个实施方案中， p 为 1， 且 R2 为甲基。
     在一个实施方案中， n 为 0， p 为 1， q 为 1， r 为 0， R2 为烷基， R3 为烷基， 且 Ar 被一 个 (C1-4) 烷基和一个 (C1-4) 烷氧基所取代。
     在另一个实施方案中， n 为 0， p 为 1， q 为 1， r 为 0， R2 为甲基， R3 为甲基， 且 Ar 被 一个甲基和一个丙氧基所取代。
     在一个实施方案中， 该吡啶基通过在该吡啶基的 2 位上的碳与所述羰基碳之间所 形成的键连接至该羰基上， n 为 0， p 为 1， q 为 1， r 为 0， R2 为烷基， R3 为烷基， 且 Ar 被一个 (C1-4) 烷基和一个 (C1-4) 烷氧基所取代。
     在另一个实施方案中， 该吡啶基通过在该吡啶基的 2 位上的碳与所述羰基碳之间 所形成的键连接至该羰基上， n 为 0， p 为 1， q 为 1， r 为 0， R2 为甲基， R3 为甲基， 且 Ar 被一 个甲基和一个丙氧基所取代。
     在一个实施方案中， 该吡啶基通过在该吡啶基的 2 位上的碳与所述羰基碳之间所 形成的键连接至该羰基上， n 为 0， p 为 1， q 为 0， r 为 1， R2 为 (C1-4) 烷基， R4 为卤素， 且 Ar 被一个 (C1-4) 烷基和一个苯基所取代。
     在另一个实施方案中， 该吡啶基通过在该吡啶基的 2 位上的碳与所述羰基碳之间 所形成的键连接至该羰基上， n 为 0， p 为 1， q 为 0， r 为 1， R2 为甲基， R4 为氟， 且 Ar 被一个 甲基和一个苯基所取代。
     在一个实施方案中， 该吡啶基通过在该吡啶基的 2 位上的碳与所述羰基碳之间所 形成的键连接至该羰基上， n 为 1， p 为 1， q 为 0， r 为 0， R1 为卤素， R2 为 (C1-4) 烷基， 且 Ar 被一个 (C1-4) 烷基和一个环丙氧基甲基所取代。
     在一个实施方案中， 该吡啶基通过在该吡啶基的 2 位上的碳与所述羰基碳之间所 形成的键连接至该羰基上， n 为 1， p 为 1， q 为 0， r 为 0， R1 为氯， R2 为甲基， 且 Ar 被一个甲 基和一个环丙氧基甲基所取代。
     在一个实施方案中， 本发明提供了选自下列的式 (I) 化合物 ：
     2-[((2S)-1-{[3-( 乙 氧 基 )-6- 甲 基 -2- 吡 啶 基 ] 羰 基 }-2- 哌 啶 基 ) 甲 基 ]-6- 氟 -8- 甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ；
     6- 氟 -8- 甲基 -2-{[(2S)-1-({6- 甲基 -3-[(2- 甲基丙基 ) 氧基 ]-2- 吡啶基 } 羰 基 )-2- 哌啶基 ] 甲基 } 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ；
     6， 8- 二甲基 -2-{[(2S)-1-({6- 甲基 -3-[(2- 甲基丙基 ) 氧基 ]-2- 吡啶基 } 羰 基 )-2- 哌啶基 ] 甲基 } 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ；
     8- 甲基 -2-[((2S)-1-{[6- 甲基 -3-( 丙氧基 )-2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌啶基 ) 甲 基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ； 2-{[(2S)-1-({3-[( 环丙基甲基 ) 氧基 ]-6- 甲基 -2- 吡啶基 } 羰基 )-2- 哌啶基 ] 甲基 }-8- 甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ；
     8- 甲 基 -2-{[(2S)-1-({6- 甲 基 -3-[(1- 甲 基 乙 基 ) 氧 基 ]-2- 吡 啶 基 } 羰 基 )-2- 哌啶基 ] 甲基 } 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ；
     2-[((2S)-1-{[4- 氯 -3-( 乙氧基 )-6- 甲基 -2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌啶基 ) 甲 基 ]-8- 甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ；
     7， 8- 二甲基 -2-{[(2S)-1-({6- 甲基 -3-[(2- 甲基丙基 ) 氧基 ]-2- 吡啶基 } 羰 基 )-2- 哌啶基 ] 甲基 } 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ；
     2-{[(2S)-1-({3-[( 环丙基甲基 ) 氧基 ]-6- 甲基 -2- 吡啶基 } 羰基 )-2- 哌啶基 ] 甲基 }-7， 8- 二甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ；
     2-[((2S)-1-{[3-( 乙氧基 )-6- 甲基 -2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌啶基 ) 甲基 ]-7， 8- 二甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ；
     7， 8- 二甲基 -2-[((2S)-1-{[6- 甲基 -3-( 丙氧基 )-2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌啶 基 ) 甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ；
     8- 氟 -2-[((2S)-1-{[6- 甲基 -3-( 丙氧基 )-2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌啶基 ) 甲 基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ；
     8- 氟 -2-{[(2S)-1-({6- 甲基 -3-[(2- 甲基丙基 ) 氧基 ]-2- 吡啶基 } 羰基 )-2- 哌 啶基 ] 甲基 } 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ；
     2-{[(2S)-1-({3-[( 环丙基甲基 ) 氧基 ]-6- 甲基 -2- 吡啶基 } 羰基 )-2- 哌啶基 ] 甲基 }-8- 氟咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ；
     6， 7- 二甲基 -2-{[(2S)-1-({6- 甲基 -3-[(2- 甲基丙基 ) 氧基 ]-2- 吡啶基 } 羰 基 )-2- 哌啶基 ] 甲基 } 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ；
     3- 氯 -2-{[(2S)-1-({3-[( 环丙基甲基 ) 氧基 ]-6- 甲基 -2- 吡啶基 } 羰基 )-2- 哌 啶基 ] 甲基 }-8- 甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ；
     3- 氯 -2-[((2S)-1-{[3-( 乙氧基 )-6- 甲基 -2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌啶基 ) 甲 基 ]-8- 甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ；
     2-{[(2S)-1-({3-[( 环丙基甲基 ) 氧基 ]-6- 甲基 -2- 吡啶基 } 羰基 )-2- 哌啶基 ] 甲基 }-3， 8- 二甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ；
     2-[((2S)-1-{[6- 乙基 -3-( 乙氧基 )-2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌啶基 ) 甲基 ]-7， 8- 二甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ；
     6- 氟 -8- 甲基 -2-({(2S)-1-[(6- 甲基 -3- 苯基 -2- 吡啶基 ) 羰基 ]-2- 哌啶基 } 甲基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ；
     7， 8- 二甲基 -2-[((2S)-1-{[6- 甲基 -3-(3- 甲基 -1， 2， 47， 8- 二甲基 -2-[((2S)-1-{[6- 甲基 -3-(5- 甲基 -1， 32-[((2S)-1-{[3-(5- 乙基 -1， 3-二唑 -5- 基 )-2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌啶基 ) 甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ；
     唑 -2- 基 )-2- 吡啶基 ]羰基 }-2- 哌啶基 ) 甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ；
     唑 -2- 基 )-6- 甲基 -2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌啶基 ) 甲基 ]-7， 8- 二甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ；
     7， 8- 二甲基 -2-[((2S)-1-{[6- 甲基 -3-(2- 嘧啶基 )-2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌啶 基 ) 甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ；
     7， 8- 二甲基 -2-[((2S)-1-{[6- 甲基 -3-(3- 甲基 -5- 异唑基 )-2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌啶基 ) 甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ；
     7， 8- 二甲基 -2-[((2S)-1-{[6- 甲基 -3-(4- 甲基 -1， 3- 噻唑 -2- 基 )-2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌啶基 ) 甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ； 和
     6- 氟 -8- 甲基 -2-[((2S)-1-{[6- 甲基 -3-(2- 嘧啶基 )-2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌 啶基 ) 甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ；
     或其药学上可接受的盐。
     当所述化合物单独含有 C1-4 烷基， 或形成更大基团 ( 例如 C1-4 烷氧基 ) 的部分时， 所述烷基可为直链、 支链或环状， 或其组合。 C1-4 烷基的实例为甲基或乙基。 C1-4 烷氧基的实 例为甲氧基。
     卤代 C1-4 烷基的实例包括三氟甲基 ( 即 -CF3)。
     C1-4 烷氧基的实例包括甲氧基和乙氧基。
     卤代 C1-4 烷氧基的实例包括三氟甲氧基 ( 即 -OCF3)。
     卤素或 “卤代” ( 当使用时， 例如在卤代 (C1-4) 烷基中 ) 是指氟、 氯、 溴或碘。
     应理解本发明包括上述列举的基团和取代基的所有组合。
     应理解对于在药物中使用， 式 (I) 化合物的盐应为药学上可接受的。合适的药 学上可接受的盐对本领域熟练技术人员是显而易见的。药学上可接受的盐包括 Berge， Bighley 和 Monkhouse J.Pharm.Sci(1977)66， pp 1-19 中所述的那些。该药学上可接受的 盐包括与无机酸和有机酸形成的酸加成盐， 无机酸例如盐酸、 氢溴酸、 硫酸、 硝酸或磷酸， 有 机酸例如琥珀酸、 马来酸、 乙酸、 富马酸、 柠檬酸、 酒石酸、 苯甲酸、 对甲苯磺酸、 甲磺酸或萘 磺酸。其他盐例如草酸盐或甲酸盐可用于例如式 (I) 化合物的分离， 并且包括在本发明的 范围内。
     某些式 (I) 化合物可与一当量或多当量的酸形成酸加成盐。本发明在其范围内包括所有可能的化学计量的和非化学计量的形式。
     式 (I) 化合物可以晶体或非晶体形式制备， 如果为晶体， 其可任选为溶剂合物， 如 水合物。本发明在其范围内包括化学计量学的溶剂合物 ( 如水合物 ) 以及含有可变量溶剂 ( 如水 ) 的化合物。
     应理解本发明包括式 (I) 化合物的药学上可接受的衍生物， 并且这些包括在本发 明的范围内。
     在此使用的 “药学上可接受的衍生物” 包括式 (I) 化合物的任何药学上可接受的 酯或此类酯的盐， 其给药至接受者后， 能够 ( 直接地或间接地 ) 提供式 (I) 化合物或其活性 代谢物或残余物。
     式 (I) 化合物为 S 对映异构体。若在式 (I) 化合物中存在另外的手性中心时， 本 发明在其范围内包括所有可能的对映异构体以及非对映异构体， 包括其混合物。不同的异 构体可通过常规的方法彼此相互分离或拆分， 或者任何给定的异构体可通过常规合成方法 或立体定向合成或不对称合成获得。本发明还包括任一互变异构体或其混合物。
     本发明还包括同位素 - 标记的化合物， 其与式 (I) 所述的那些化合物相同， 但事实 上其中一个或多个原子被具有不同于自然界中最常存在的原子质量或质量数的原子替换。 可掺入至本发明化合物中的同位素的实例包括氢、 碳、 氮、 氧、 氟、 碘和氯的同位素， 如 3H、 11 14 18 123 C、 C、 F、 I 或 125I。
     含有上述同位素和 / 或其它原子的其它同位素的本发明的化合物和所述化合物 的药学上可接受的盐在本发明的范围内。同位素标记的本发明的化合物， 如向其中已经掺 3 14 入放射性同位素如 H 或 C 的那些化合物， 在药物和 / 或底物组织分布测定中使用。氚即 3 14 H 和碳 -14 即 C 同位素由于它们易于制备和检测而特别优选。11C 和 18F 同位素在 PET( 正 电子发射断层照相术 ) 中尤其有用。
     由于式 (I) 化合物欲在药物组合物中使用， 容易理解， 它们各自优选以基本上纯 的形式提供， 例如纯度至少 60 ％， 更适宜地至少 75 ％， 以及优选至少 85 ％， 尤其优选至少 98％ (％为基于重量的百分比 )。制备的未纯化化合物可用于制备在药物组合物中使用的 更纯的形式。
     根据本发明另一方面， 本发明提供制备式 (I) 化合物和其衍生物的方法。下面的 方案详细描述了本发明化合物的一些合成路线。在下面方案中， 活性基团可使用保护基保 护并根据公知技术脱保护基。
     方案
     根据本发明的另一方面 (feature)， 提供了制备式 (I) 化合物或其盐的方法。 以下 是合成方案的一个实例， 其可用于合成本发明化合物。
     本领域熟练技术人员将理解一些本发明化合物可根据标准化学方法转化为本发 明其他化合物。
     用于该方案中的起始物料可市场上获得， 在文献中已知或可通过已知方法制备。 ((2S)-1-{[(1， 1- 二甲基乙基 ) 氧基 ] 羰基 }-2- 哌啶基 ) 乙酸购自 Neosystem Product list(BA19302)。
     药学上可接受的盐可通过与适宜的酸或酸衍生物反应方便地制备。
     本发明提供式 (I) 化合物或其药学上可接受的盐， 其在人药或兽药中使用。
     式 (I) 化合物或它们的药学上可接受的盐可用于治疗或预防其中需要人食欲肽 受体的拮抗剂的疾病或病症， 例如睡眠障碍， 其选自睡眠失调， 如原发性失眠 (307.42)、 原 发性睡眠过度 (307.44)、 发作性睡病 (347)、 与呼吸有关的睡眠障碍 (780.59)、 昼夜节律 睡眠障碍 (307.45) 和未另外指明的睡眠障碍 (307.47) ； 原发性睡眠障碍， 如异态睡眠， 如恶梦障碍 (307.47)、 夜惊症 (307.46)、 梦游症 (307.46) 和未有另外指明的异态睡眠 (307.47) ； 与其它精神障碍相关的睡眠障碍， 如与其它精神障碍相关的失眠 (307.42) 和 与其它精神障碍相关的睡眠过度 (307.44) ； 一般内科疾病导致的睡眠障碍， 尤其是与疾病 如神经障碍、 神经性疼痛、 下肢不宁综合征、 心脏病和肺病相关的睡眠疾病 ； 以及物质引起 的睡眠障碍， 包括亚型失眠型、 睡眠过度型、 异态睡眠型和混合型 ； 睡眠性呼吸暂停 (Sleep Apna) 和时差综合征 (Jet-Lag Syndrome)。 在一个实施方案中， 式 (I) 化合物或它们的药学上可接受的盐可用于治疗或预防 原发性失眠 (307.42)、 昼夜节律睡眠障碍 (307.45) 和未另外指明的睡眠障碍 (307.47)、 与 其它精神障碍相关的睡眠障碍， 如与其它精神障碍相关的失眠 (307.42) 和一般内科疾病 导致的睡眠障碍， 尤其是与疾病如神经障碍、 神经性疼痛、 下肢不宁综合征、 心脏病和肺病 相关的睡眠疾病 ； 以及物质引起的睡眠障碍， 包括亚型失眠型、 睡眠过度型、 异态睡眠型和 混合型。
     此外， 式 (I) 化合物或它们的药学上可接受的盐可用于治疗或预防其中需要人食 欲肽受体的拮抗剂的疾病或病症， 例如抑郁症和心境障碍 ( 心境障碍 ) 包括严重抑郁发作、 躁狂性发作、 混合型发作 (Mixed Episode) 和轻躁狂发作 ； 抑郁症包括严重的抑郁性障碍、 心境恶劣障碍 (300.4)、 未有另外说明的抑郁症 (311) ； 双相性精神障碍包括 I 型双相性精 神障碍、 II 型双相性精神障碍 ( 伴有轻躁狂发作的再发的严重抑郁发作 )(296.89)、 循环情 感性精神障碍 (301.13) 和未有另外说明的双相性精神障碍 (296.80) ； 其它心境障碍包括 由于一般内科疾病导致的心境障碍 (293.83)， 其包括具有抑郁特征、 具有主要抑郁样发作 (Major Depressive-like Episode)、 具有狂躁特征和具有混合特征的亚型 )， 物质引起的 心境障碍 ( 包括具有抑郁特征、 具有狂躁特征和具有混合特征的亚型 ) 和未有另外说明的 心境障碍 (296.90)。
     此外， 式 (I) 化合物或它们的药学上可接受的盐可用于治疗或预防其中需要人食 欲肽受体的拮抗剂的疾病或病症， 例如焦虑症包括惊恐发作 ； 惊恐性障碍， 包括无广场恐怖 症的惊恐性障碍 (300.01) 和具有广场恐怖症的惊恐性障碍 (300.21) ； 广场恐怖症 ； 无惊恐 性障碍病史的广场恐怖症 (300.22)、 特异恐怖症 (Specific Phobia)(300.29， 前称单纯恐 怖症 )， 包括亚型动物型 (Animal Type)、 自然环境型 (Naural Environment Type)、 血液注 射损伤型 (Blood-Injection-Injury Type)、 情景型 (Situaional Type) 和其他型 )、 社交 恐怖症 ( 社交焦虑症， 300.23)、 强迫性神经失调 (300.3)、 创伤后应激障碍 (309.81)、 急性 应激障碍 (308.3)、 广泛性焦虑症 (300.02)、 由一般内科疾病引起的焦虑症 (293.84)、 物质
     引起的焦虑症、 分离焦虑症 (309.21)、 具有焦虑症的适应性障碍 (309.24) 和未有另外说明 的焦虑症 (300.00)。
     此外， 式 (I) 化合物或它们的药学上可接受的盐可用于治疗或预防其中需要人食 欲肽受体的拮抗剂的疾病或病症， 例如物质关联疾病 (substance-related disorder) 包 括物质使用所致精神障碍 (SubstanceUse Disorders) 如物质依赖、 物质成瘾 (Substance Craving) 和物质滥用 ； 物质引起的障碍如物质中毒、 物质脱瘾 (Substance Withdrawal)、 物质引起的谵妄、 物质引起的持久性痴呆、 物质引起的持久性遗忘障碍、 物质引起的精神 障碍、 物质引起的心境障碍、 物质引起的焦虑性障碍、 物质引起的性功能障碍、 物质引起 的睡眠障碍和致幻剂引起的持久性知觉障碍 ( 幻觉重现 ) ； 酒精有关的障碍如酒精依赖 (303.90)、 酒精滥用 (305.00)、 酒精中毒 (303.00)、 戒酒 (Alcohol Withdrawal)(291.81)、 酒精中毒性谵妄、 酒精脱瘾性谵妄、 酒精引起的持久性痴呆 (Alcohol Induced Persisting Dementia)、 酒精引起的持久性遗忘障碍、 酒精所致的精神障碍、 酒精引起的心境障碍、 酒 精引起的焦虑性障碍、 酒精引起的性功能障碍、 酒精引起的睡眠障碍及未有另外说明的酒 精有关的病症 (291.9) ； 苯丙胺 ( 或苯丙胺类物质 ) 有关的障碍如苯丙胺依赖 (304.40)、 苯丙胺滥用 (305.70)、 苯丙胺中毒 (292.89)、 苯丙胺脱瘾 (292.0)、 苯丙胺中毒性谵妄、 苯 丙胺引起的精神障碍、 苯丙胺引起的心境障碍、 苯丙胺引起的焦虑性障碍、 苯丙胺引起的 性功能障碍、 苯丙胺引起的睡眠障碍及未有另外说明的苯丙胺有关的障碍 (292.9) ； 咖啡 因有关的障碍如咖啡因中毒 (305.90)、 咖啡因引起的焦虑性障碍、 咖啡因引起的睡眠障碍 和未有另外说明的咖啡因有关的障碍 (292.9) ； 大麻有关的障碍如大麻类依赖 (304.30)、 大麻滥用 (305.20)、 大麻中毒 (292.89)、 大麻中毒性谵妄、 大麻引起的精神障碍、 大麻引 起的焦虑性障碍及未有另外说明的大麻有关的障碍 (292.9) ； 可卡因有关的障碍如可卡因 依赖 (304.20)、 可卡因滥用 (305.60)、 可卡因中毒 (292.89)、 可卡因脱瘾 (292.0)、 可卡 因中毒性谵妄、 可卡因引起的精神障碍、 可卡因引起的心境障碍、 可卡因引起的焦虑性障 碍、 可卡因引起的性功能障碍、 可卡因引起的睡眠障碍及未有另外说明的可卡因有关的障 碍 (292.9) ； 致幻剂有关的障碍如致幻剂依赖 (304.50)、 致幻剂滥用 (305.30)、 致幻剂中 毒 (292.89)、 致幻剂引起的持久性知觉障碍 ( 幻觉重现 )(292.89)、 致幻剂中毒性谵妄、 致幻剂引起的精神障碍、 致幻剂引起的心境障碍、 致幻剂引起的焦虑性障碍及未有另外说 明的致幻剂有关的障碍 (292.9) ； 吸入剂有关的障碍如吸入剂依赖 (304.60)、 吸入剂滥用 (305.90)、 吸入剂中毒 (292.89)、 吸入剂中毒性谵妄、 吸入剂引起的持久性痴呆、 吸入剂引 起的精神障碍、 吸入剂引起的心境障碍、 吸入剂引起的焦虑性障碍及未有另外说明的吸入 剂有关的障碍 (292.9) ； 尼古丁有关的障碍如尼古丁依赖 (305.1)、 尼古丁戒断 (Nicotine Withdrawal)(292.0) 及未有另外说明的尼古丁有关的障碍 (292.9) ； 阿片样物质 (Opioid) 有关的障碍如阿片样物质依赖 (Opioid Dependence)(304.00)、 阿片样物质滥用 (Opioid Abuse)(305.50)、 阿 片 样 物 质 中 毒 (Opioid Intoxication)(292.89)、 阿片样物质脱瘾 (Opioid Withdrawal)(292.0)、 阿片样物质中毒性谵妄、 阿片样物质引起的精神障碍、 阿片 样物质引起的心境障碍、 阿片样物质引起的性功能障碍、 阿片样物质引起的睡眠障碍及未 有另外说明的与阿片样物质有关的障碍 (292.9) ； 苯环利定 ( 或苯环利定类物质 ) 有关的 障碍如苯环利定依赖 (304.60)、 苯环利定滥用 (305.90)、 苯环利定中毒 (292.89)、 苯环利 定中毒性谵妄、 苯环利定引起的精神障碍、 苯环利定引起的心境障碍、 苯环利定引起的焦虑性障碍及未有另外说明的苯环利定有关的障碍 (292.9) ； 镇静剂 -、 催眠药 - 或抗焦虑 药 - 有关的障碍如镇静剂、 催眠药或抗焦虑药依赖 (304.10)， 镇静剂、 催眠药或抗焦虑药 滥用 (305.40)， 镇静剂、 催眠药或抗焦虑药中毒 (292.89)， 镇静剂、 催眠药或抗焦虑药脱 瘾 (292.0)， 镇静剂、 催眠药或抗焦虑药中毒性谵妄， 镇静剂、 催眠药或抗焦虑药脱瘾性谵 妄 (Withdrawal Delirium)， 镇静剂 -、 催眠药 - 或抗焦虑药 - 持久性痴呆， 镇静剂 -、 催眠 药 - 或抗焦虑药 - 持久性遗忘障碍， 镇静剂 -、 催眠药 - 或抗焦虑药引起的精神障碍， 镇静 剂 -、 催眠药 - 或抗焦虑药引起的心境障碍， 镇静剂 -、 催眠药 - 或抗焦虑药引起的焦虑性障 碍， 镇静剂 -、 催眠药 - 或抗焦虑药引起的性功能障碍， 镇静剂 -、 催眠药 - 或抗焦虑药引起 的睡眠障碍和未有另外说明的镇静剂 -、 催眠药 - 或抗焦虑药 - 有关的障碍 (292.9) ； 多物 质有关的障碍 (Polysubstance-Related Disorder) 如多物质依赖 (304.80) ； 和其它 ( 或 未知 ) 物质有关的障碍如促蛋白合成类固醇、 硝酸盐吸入剂 (Nitrate Inhalants) 和氧化 亚氮相关的障碍。
     此外， 式 (I) 化合物或它们的药学上可接受的盐可用于治疗或预防其中需要人食 欲肽受体的拮抗剂的疾病或病症， 例如进食障碍 (feeding disorders) 如神经性贪食、 狂 食 (binge eating)、 肥胖， 包括在 II 型 ( 非 - 胰岛素 - 依赖性 ) 糖尿病患者中观察到的肥 胖。此外， 式 (I) 化合物或它们的药学上可接受的盐可用于治疗或预防其中需要人食欲肽 受体的拮抗剂的疾病或病症， 例如中风， 尤其是缺血性中风或出血性中风， 和 / 或阻断催吐 响应， 即恶心和呕吐。
     所 列 出 的 疾 病 后 面 在 括 号 中 的 数 字 指 的 是 其 在 DSM-IV ： Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders( 第 4 版， 由 American Psychiatric Association 出版 ) 中的分类号。本文中提到的疾病的各种亚型也预期作为本发明的一部 分。
     本发明还提供用于治疗需要该治疗的患者中需要人食欲肽受体的拮抗剂的疾病 或病症 ( 例如上述那些疾病和病症 ) 的方法， 其包括向所述受试者给药有效量的式 (I) 化 合物或其药学上可接受的盐。
     本发明还提供式 (I) 化合物或其药学上可接受的盐， 其用于治疗或预防需要人食 欲肽受体的拮抗剂的疾病或病症， 例如上述那些疾病和病症。
     本发明还提供式 (I) 化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗或预防需要 人食欲肽受体的拮抗剂的疾病或病症， 例如上述那些疾病和病症的药物中的用途。
     为了在治疗中使用， 本发明的化合物通常以药物组合物给药。本发明也提供药物 组合物， 其包含式 (I) 化合物或其药学上可接受的盐， 以及药学上可接受的载体。
     式 (I) 化合物或它们的药学上可接受的盐可通过任一适宜的方法给药， 例如通过 口服、 肠胃外、 口含、 舌下、 鼻内、 直肠或经皮给药， 且相应地配制 (adapt) 药物组合物。
     当口服给予时， 式 (I) 化合物或它们的活性的药学上可接受的盐可配制成液体或 固体， 例如糖浆、 悬浮液、 乳液、 片剂、 胶囊或锭剂。
     液体制剂通常由活性成分在适宜的液体载体中的悬浮液或溶液组成， 该液体载体 例如水性溶剂如水、 乙醇或甘油， 或非水性溶剂， 如聚乙二醇或油。 该制剂也可含有助悬剂、 防腐剂、 调味剂和 / 或着色剂。
     片剂形式的组合物可利用任何适宜的对于制备固体制剂常规使用的药物载体， 如硬脂酸镁、 淀粉、 乳糖、 蔗糖和纤维素而制备。
     胶囊形式的组合物可利用常规的包囊方法制备， 例如含有活性成分的小丸可利用 一般载体制备， 且然后填充于硬明胶胶囊中 ； 另一方面， 分散液或悬浮液可利用任何适宜的 药物载体， 例如水性胶、 纤维素、 硅酸盐或油而制备， 且然后将分散液或悬浮液填充至软明 胶胶囊中。
     典型的肠胃外组合物包括活性成分在无菌水性载体或肠胃外可接受的油 ( 例如 聚乙二醇、 聚乙烯基吡咯烷酮、 卵磷脂、 花生油或芝麻油 ) 中的溶液或悬浮液。另外， 可将溶 液冻干， 且然后在给药前使用适宜的溶剂重新配制。
     用于鼻内给药的组合物可方便地配制为气雾剂、 滴剂、 凝胶和粉剂。气雾剂通常 包含活性成分于药学上可接受的水性或非水性溶剂中的溶液或精细悬浮液， 且通常以于密 封容器中的单剂量或多剂量无菌形式存在， 该容器可以药筒的形式或再填充用雾化装置使 用。另一方面， 该密封容器可为一次性的配送装置如单剂鼻用吸入器或配备有计量阀的气 雾剂配送器。当剂型包括气雾剂配送器时， 其将包含推进剂， 其可为压缩气体如空气， 或有 机推进剂如氟氯烃或氟代烃。气雾剂剂型也可以为泵 - 雾化器的形式。
     适于口含或舌下给药的组合物包括片剂、 锭剂和软锭剂， 其中活性成分与载体如 糖和阿拉伯胶、 黄蓍胶， 或明胶和甘油一起配制。
     用于直肠给药的组合物适宜地为含有常规栓剂基质如可可脂的栓剂的形式。
     适于经皮给药的组合物包括软膏剂、 凝胶和贴片。
     在一个实施方案中， 该组合物为单位剂型如片剂、 胶囊或安瓿。
     所述组合物可包含 0.1 重量％至 100 重量％， 例如 10 至 60 重量％的活性物质， 取 决于给药方法。所述组合物可包含 0 重量％至 99 重量％， 例如 40 重量％至 90 重量％的载 剂， 取决于给药方法。所述组合物可包含 0.05mg 至 1000mg， 例如 1.0mg 至 500mg 的活性物 质， 取决于给药方法。所述组合物可包含 50mg 至 1000mg， 例如 100mg 至 400mg 的载剂， 取 决于给药方法。用于治疗上述病症的化合物的剂量将按通常方式根据所述病症的严重性、 患者的体重以及其他相似因素而改变。然而， 作为一般指导， 合适的单位剂量可为 0.05 至 1000mg， 更适合地为 1.0 至 500mg， 并且该单位剂量可以每日多次， 例如每日两次或三次给 药。该治疗可持续多周或多个月。
     食欲肽 -A(Sakurai， T. 等人 (1998)Cell， 92 第 573-585 页 ) 可用于抑制食欲肽 -1 或食欲肽 -2 受体的配体活化的化合物的筛选方法中。
     通常， 此类筛选方法涉及提供适宜的细胞 ( 其在表面上表达食欲肽 -1 或食欲肽 -2 受体 )。 此类细胞包括源自哺乳动物、 酵母、 果蝇或大肠杆菌的细胞。 具体地， 编码食欲肽 -1 或食欲肽 -2 受体的多核苷酸用于转染细胞以表达该受体。然后视需要将表达的受体与测 试化合物和食欲肽 -1 或食欲肽 -2 受体配体接触， 以观察功能响应的抑制。一种此类筛选 方法包括使用黑色素细胞， 其被转染以表达食欲肽 -1 或食欲肽 -2 受体， 如 WO 92/01810 中 所述。
     另一个筛选方法包括将编码食欲肽 -1 或食欲肽 -2 受体的 RNA 引入至爪蟾卵母细 胞 (Xenopus oocytes) 以短暂表达受体。然后将该受体卵母细胞与受体配体和测试化合物 接触， 接着在筛选认为通过配体抑制受体活化的化合物的情况下检测信号的抑制。
     另一个方法包括筛选通过测定标记的食欲肽 -1 或食欲肽 -2 受体配体与细胞的结合的抑制而抑制受体的活化的化合物， 该细胞在其表面上已经具有食欲肽 -1 或食欲肽 -2 受体 ( 视需要 )。该方法包括使用编码食欲肽 -1 或食欲肽 -2 受体的 DNA 转染真核细胞， 从 而使得该细胞在其表面上表达该受体， 以及细胞或细胞膜制剂与化合物在标记形式的食欲 肽 -1 或食欲肽 -2 受体配体存在下接触。该配体可含有放射性标记物。测量该标记的配体 结合至受体的量， 例如通过测量放射性。
     另一个筛选方法包括使用 FLIPR 设备用于高通量筛选测试化合物， 其通过影响食 欲肽 -1 或食欲肽 -2 受体配体与食欲肽 -1 或食欲肽 -2 受体 ( 视需要 ) 的相互作用， 抑制 细胞内钙离子或其他离子的运动。
     整篇说明书中以及所附权力要求书中， 除非内容另有需要， 术语 ‘包含’ 应理解为 指的是包括所述的整体或步骤或整体的部分 (group)， 但不排除任何其他整体或步骤或整 体的部分。
     在本说明书中所引用的所有出版物， 包括但不局限于专利和专利申请， 在此将它 们引入作为参考， 就像每个单独的出版物具体地和单独地在此被引入并充分阐述。
     下面的实施例示例性地说明了某些式 (I) 化合物或其盐的制备。描述 1-87 示例 性地说明了用于制备式 (I) 化合物或其盐的中间体的制备。
     在下列方法中， 在各起始物料后， 通常提供描述的参考文献。 其目的仅仅为本领域 的技术人员提供帮助。该起始物料不一定从所引用的文献制备。
     假定产物纯度为 100％计算产率， 如果没有相反说明。
     后 文 所 述 实 施 例 中 描 述 的 化 合 物 已 经 由 立 体 化 学 纯 的 (2S)-2-[2-( 甲 氧 基 )-2- 氧代乙基 ]-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯作为第一步骤进行制备。根据纯的构 型保留的假设， 对所述描述和实施例的化合物的立体化学进行了指定。
     化 合 物 使 用 ACD/Name PRO 6.02 化 学 命 名 软 件 命 名 (Advanced Chemistry Development Inc.， Toronto， Ontario， M5H2L3， Canada)。
     质子核磁共振 (NMR) 波谱在 Varian 仪器上以 400、 500 或 600MHz， 或在 Bruker 仪 器上以 400MHz 上记录。化学位移以 ppm(δ) 记录， 利用残余溶剂线作为内标。分裂模式指 定为 s， 单峰 ； d， 二重峰 ； t， 三重峰 ； q， 四重峰 ； m， 多重峰 ； b， 宽峰。NMR 波谱在 25 至 90℃的 温度范围内记录。当检测到多于一个构象异构体时， 通常记录最主要的一个异构体的化学 位移。
     除非另有指明， HPLC 分析说明如下 ： HPLC(walk-up) ： rt( 保留时间 ) ＝ x 分钟， 其在下列条件下进行 ： Agilent 1100 系列设备， 利用 Luna 3u C18(2)100A 柱 (50×2.0mm， 3μm 粒径 )[ 流动相和梯度 ： 100 ％ ( 水 +0.05 ％ TFA) 至 95 ％ ( 乙腈 +0.05 ％ TFA)， 经8 分钟。柱温＝ 40 ℃。流速＝ 1mL/ 分钟。UV 检测波长＝ 220nm]。其它 HPLC 分析， 通过 HPLC(walk-up， 3 分钟方法 ) 说明， 利用下列条件进行 ： 使用 Agilent Zorbax SB-C18 柱 (50×3.0mm， 1.8μm 粒径 )[ 流动相和梯度 ： 100％ ( 水 +0.05％ TFA) 至 95％ ( 乙腈 +0.05％ TFA)， 2.5min， 保持 0.5 分钟。柱温＝ 60℃。流速＝ 1.5mL/min。UV 检测波长＝ 220nm]。
     在所述化合物的特征分析中， “MS” 是指直接输注质谱 (Direct infusion Mass) 得 到的质谱或与 UPLC/MS 或 HPLC/MS 分析得到的峰有关的的质谱， 其中质谱仪如下所述。
     直接输注质谱 (MS) 在 Agilent MSD 1100 质谱仪上运行， 以 ES(+) 和 ES(-) 离子 化模式操作 [ES(+) ： 质量范围 ： 100-1000amu。输注溶剂 ： 水 +0.1 ％ HCO2H/CH3CN 50/50。ES(-) ： 质量范围 ： 100-1000amu。输注溶剂 ： 水 +0.05％ NH4OH/CH3CN 50/50]。
     伴 随 有 峰 的 MS 谱 图 是 在 结 合 到 Applied Biosystems API150EX 质 谱 仪 上 的 Perkin Elmer 200 系列的 HPLC 仪器上测定。
     在 Agilent LC/MSD 1100 质谱仪联用 HPLC 仪 Agilent 1100 系列上获得的峰相关 的 UV 和 MS 谱， 以阳离子或阴离子电喷雾离子化模式且在酸性和碱性梯度条件下操作 [ 酸 性梯度 LC/MS-ES (+ 或 -) ： 分析在 Supelcosil ABZ+Plus 柱 (33×4.6mm， 3μm) 上进行。 流 动相 ： A- 水 +0.1％ HCO2H/B-CH3CN。梯度 ( 标准方法 ) ： t ＝ 0 分钟 0％ (B)， 从 0％ (B) 至 95％ (B)， 经 5 分钟， 持续 1.5 分钟， 从 95％ (B) 至 0％ (B)， 经 0.1 分钟， 停止时间 8.5 分钟。 柱温＝室温。流速＝ 1mL/ 分钟。梯度 ( 快速方法 ) ： t ＝ 0 分钟 0％ (B)， 从 0％ (B) 至 95％ (B)， 经 3 分钟， 持续 1 分钟， 从 95％ (B) 至 0％ (B)， 经 0.1 分钟， 停止时间 4.5 分钟。柱温 ＝室温。流速＝ 2mL/ 分钟。碱性梯度 LC/MS-ES(+ 或 -) ： 分析如下进行 ： 在 XTerra MS C18 柱 (30×4.6mm， 2.5μm) 上。流动相 ： A-5mM NH4HCO3 水溶液 + 氨 (pH 10)/B-CH3CN。梯度 ： t ＝ 0 分钟 0％ (B)， 从 0％ (B) 至 50％ (B)， 经 0.4 分钟， 从 50％ (B) 至 95％ (B)， 经 3.6 分 钟， 持续 1 分钟， 从 95％ (B) 至 0％ (B)， 经 0.1 分钟， 停止时间 5.8 分钟。柱温＝室温。流 速＝ 1.5mL/ 分钟 ]。
     质量范围 ES(+ 或 -) ： 100-1000amu。UV 检测范围 ： 220-350nm。在描述的化合物的 分析性表征时， 通过 “LC-MS” 表明使用该方法。
     总离子流 (TIC) 和 DAD UV 色谱图 (chromatographic traces) 与和峰相关联的 MS 和 UV 谱一起在 UPLC/MS AcquityTM 系统上获得， 该系统配备有 2996PDA 检测器， 并联合 TM Waters Micromass ZQ 质谱仪， 其以阳离子或阴离子电喷雾模式操作 [LC/MS-ES(+ 或 -) ： TM 分析利用下列进行 ： Acquity UPLC BEH C18 柱 (50×21mm， 1.7μm 粒度 )， 柱温 40℃ ]。流 动相 ： A- 水 +0.1％ HCOOH/B-CH3CN+0.075％ HCOOH， 流速 ： 1.0mL/ 分钟， 梯度 ： t ＝ 0 分钟 3％ B， t ＝ 0.05 分钟 6％ B， t ＝ 0.57 分钟 70％ B， t ＝ 1.4 分钟 99％ B， t ＝ 1.45 分钟 3％ B)。 在所述化合物的分析表征中由 “UPLC” 表明使用该方法。
     [LC/MS-ES(+ 或 -) ： 分析利用下列进行 ： AcquityTMUpLC BEH C18 柱 (50×2.1mm， 1.7μm 粒度 ) 柱温 40℃ ]。流动相 ： A- 水 +0.1％ HCO2H/B-CH3CN+0.06％或 0.1％ HCO2H。梯 度： t ＝ 0 分钟 3％ B， t ＝ 1.5 分钟 100％ B， t ＝ 1.9 分钟 100％ B， t ＝ 2 分钟 3％ B， 停止 时间 2 分钟。柱温＝ 40℃。流速＝ 1.0mL/ 分钟。质量范围 ： ES(+) ： 100-1000amu 或 ES(+) ： 50-800amu。ES(-) ： 100-800amu。UV 检测范围 ： 210-350nm。在所述化合物的分析表征中由 “UPLC( 酸性 IPQC)” 表明使用该方法。
     [LC/MS-ES(+ 或 -) ： 分析利用下列进行 ： AcquityTMUpLC BEH C18 柱 (50×2.1mm， 1.7μm 粒度 ) 柱温 40℃ ]。流动相 ： A- 水 +0.1％ HCO2H/B-CH3CN+0.06％或 0.1％ HCO2H。梯 度： t ＝ 0 分钟 3％ B， t ＝ 0.05 分钟 6％ B， t ＝ 0.57 分钟 70％ B， t ＝ 1.06 分钟 99％ B， 持 续 0.389 分钟， t ＝ 1.45 分钟 3％ B， 停止时间 1.5 分钟。 柱温＝ 40℃。 流速＝ 1.0mL/ 分钟。 质量范围 ： ES(+) ： 100-1000amu 或 ES(+) ： 50-800amu， ES (-) ： 100-800amu。UV 检测范围 ： 210-350nm。在所述化合物的分析表征中由 “UPLC( 酸性 QC_POS_50-800 或 QC_POS_70_900 或 GEN_QC 或 FINAL_QC)” 表明使用该方法。
     [LC/MS-ES(+ 或 -) ： 分析利用下列进行 ： AcquityTMUpLC BEH C18 柱 (50×2.1mm， 1.7μm 粒度 ) 柱温 40℃ ]。流动相 ： A- 水 +0.1％ HCO2H/B-CH3CN+0.06％或 0.1％ HCO2H。梯度： t ＝ 0 分钟 3％ B， t ＝ 1.06 分钟 99％ B， t ＝ 1.45 分钟 99％ B， t ＝ 1.46 分钟 3％ B， 停止时间 1.5 分钟。柱温＝ 40℃。流速＝ 1.0mL/ 分钟。质量范围 ： ES(+) ： 100-1000amu。 ES(-) ： 100-800amu。UV 检测范围 ： 210-350nm。在所述化合物的分析表征中由 “UPLC( 酸性 GEN_QC_SS)” 表明使用该方法。
     总离子流 (TIC) 和 DAD UV 色谱图与和峰相关联的 MS 和 UV 波谱一起在 UPLC/MS TM Acquity 系统上获得， 该系统配备有 PDA 检测器， 并联合 Waters SQD 质谱仪， 其以阳离子 TM 或阴离子电喷雾模式操作 [LC/MS-ES(+ 或 -) ： 分析利用下列进行 ： Acquity UpLC BEH C18 柱 (50×2.1mm， 1.7μm 粒度 ) 柱温 40℃ ]。流动相 ： A-10mM 的 NH4HCO3 水溶液 ( 用氨水调 节至 pH10)/B-CH3CN。梯度 ： t ＝ 0 分钟 3％ B， t ＝ 1.06 分钟 99％ B 持续 0.39 分钟， t＝ 1.46 分钟 3％ B， 停止时间 1.5 分钟。柱温＝ 40℃。流速＝ 1.0mL/ 分钟。质量范围 ： ES(+) ： 100-1000amu 或 ES(+) ： 50-800amu。ES(-) ： 100-1000amu。UV 检测范围 ： 220-350nm。在所 述化合物的分析表征中由 “UPLC( 碱性 GEN_QC 或 QC_POS_50-800)” 表明使用该方法。
     除非另有说明， 制备型 LC-MS 纯化在 MDAP( 质谱检测自动纯化 (Mass Detector Auto Purification))Waters 仪器 (MDAP FractionLynx) 上进行。[LC/MS-ES(+) ： 分析使 用 Gemini C18AXIA 柱 (50×21mm， 5μm 粒径 ) 进行。流动相 ： A-NH4HCO3 溶液， 10mM， pH 10 ； B-CH3CN。流速 ： 17ml/ 分钟 ]。梯度在每次具体指定 ：
     制 备 型 LC-MS 纯 化 也 在 MDAP( 质 谱 检 测 自 动 纯 化 (Mass Detector Auto Purification))Waters 仪器上进行。在所述化合物的分析性表征中由 “FractionLynx” 标 明使用此方法。Sunfire Prep.C18OBD(150mm×30mm i.d.5μm 粒径 ) 在室温下。注射体积 为： 990μl。流动相 ： A ＝ 0.1 ％ v/v 的 HCO2H 的水溶液。B ＝ 0.1 ％ v/v 的 HCO2H 的 CH3CN 溶液。流速 ： 40ml/min。
     对于涉及微波辐射的反应， 使用 Personal Chemistry EmrysTM Optimizer。
     在很多制备中， 利用下列进行纯化 ： Biotage 人工快速层析 (Flash+)， Biotage 自 动快速层析 (Horizon， SP1 和 SP4)， Companion CombiFlash(ISCO) 自动快速层析， Flash Master Personal 或 Vac Master 系统。
     快速层析在 230-400 目硅胶 ( 由 Merck AG Darmstadt， Germany 提供 )， Varian Mega Be-Si 预装柱， 预装 Biotage 硅胶柱 ( 例如 Biotage SNAP 柱 )， KP-NH 预装快速柱或 ISCO RediSep Silica 柱上进行。
     SPE-SCX 柱为 Varian 提供的离子交换固相萃取柱。 用于 SPE-SCX 硅胶柱的洗脱剂 为 DCM 和 MeOH 或 ACN 或者 MeOH 然后为 2N 氨的 MeOH 溶液。收集的级分为用氨的 MeOH 溶 液洗脱的级分。
     SPE-Si 柱为 Varian 提供的二氧化硅固相萃取柱。
     下表列出所用的缩写 ：
     描述 描述 1 ： (2S)-2-[2-( 甲氧基 )-2- 氧代乙基 ]-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯(D1) ：
     将 ((2S)-1-{[(1， 1- 二 甲 基 乙 基 ) 氧 基 ] 羰 基 }-2- 哌 啶 基 ) 乙 酸 (1.00g， 4.11mmol)、 DIPEA(2.148ml， 12.33mmol) 和 TBTU(1.979g， 6.17mmol) 在 DMF(25ml) 中的混合 物在室温下搅拌 20 分钟， 形成褐色。 此后， 加入 MeOH(0.249ml， 6.17mmol)， 并将生成的溶液 在室温下搅拌 30 分钟。 将混合物转移到含有盐水 (20ml) 的分液漏斗中， 用 EtOAc(2×20ml) 萃取。将合并的有机层用水 / 冰 (5×20ml) 洗涤。将有机层干燥 (Na2SO4)， 过滤并浓缩。将 获得的粗产物通过快速硅胶色谱法 (Biotage SP1， Cy/EtOAc 由 100/0 至 85/15) 纯化。由 收集的级分得到标题化合物 D1(1.01g)， 为无色油状物。 1
     H-NMR(400MHz， CDCl3)δppm ： 4.67-4.75(m， 1H)， 3.96-4.05(m， 1H)， 3.67(s， 3H)，
     2.79(t， 1H)， 2.61(dd， 1H)， 2.53(dd， 1H)， 1.60-1.70(m， 6H)， 1.46(s， 9H)。
     描述 2 ： (2S)-2-(3- 溴 -2- 氧代丙基 )-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯 (D2) ：
     制备 (i)
     在 500ml 圆底烧瓶中， 在氮气下在室温下， 将 (2S)-2-[2-( 甲氧基 )-2- 氧代乙 基 ]-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯 D1(11.10g) 溶于 THF(100ml) 中， 得到淡黄色溶液。 将 该溶液冷却至 -78℃， 并滴加 Tebbe 试剂 (104ml 的 0.5M 的甲苯溶液， 51.80mmol)。将浓的 混合物用另外 70ml 的无水甲苯稀释。将生成的褐 - 橙色混合物于 -78℃搅拌 30 分钟， 然 后缓慢地温热至室温， 搅拌 2 小时。将反应混合物装填到滴液漏斗中， 然后滴加到含有大约 400ml 冰 - 冷却的 1MNaOH 水溶液的 2L 圆底烧瓶中。在淬灭结束时， 将生成的灰色悬浮液 用 EtOAc(250ml) 稀释， 并搅拌过夜。然后将生成的黄色悬浮液经古氏漏斗过滤， 并将盐用 EtOAc(500ml) 洗涤。然后分离各相， 并将有机层用盐水 (2×500ml) 洗涤。将有机相干燥 (Na2SO4)， 过滤并浓缩， 得到深橙色油状物。将残余物用 Et2O( 大约 500ml) 稀释。沉淀出一
     些盐， 将生成的悬浮液经古氏漏斗过滤。 将滤液真空浓缩， 得到 12.40g 的 (2S)-2-[2-( 甲氧 基 )-2- 丙烯 -1- 基 ]-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯， 为橙 - 褐色的粗的油状物。 该物质含 有一些残余的盐 ( 总的回收量高于理论量 )。 将该物质不需进一步纯化用于下一反应中， 假 定纯度为 88.7wt％。在 1L 圆底烧瓶中， 在氮气下在室温下， 将 (2S)-2-[2-( 甲氧基 )-2- 丙 烯 -1- 基 ]-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯 (12.40g， 43.10mmol) 溶于 THF(125ml) 和水 (35ml) 中， 得到淡黄色溶液。然后加入溶于约 100ml 的 THF 中的 NBS(7.67g， 43.10mmol)。 将生成的灰色混合物在室温下搅拌 1 小时。加入另外的溶于 50ml 的 THF 中的 NBS(1.50g， 0.2eq)， 并将反应混合物在室温下搅拌 1 小时。将混合物真空浓缩以除去 THF， 然后将其用 EtOAc( 约 500ml) 和水 (200ml) 稀释。分离各相， 将水层用 EtOAc(250ml) 反萃取。将合并 的有机层干燥 (Na2SO4)， 过滤并浓缩， 得到 17.80g 的褐色油状物。 将该物质通过快速硅胶色 谱法 (Biotage 75L， Cy/EtOAc 由 100/0 至 90/10) 纯化， 得到标题化合物 D2(6.00g)， 为黄 色油状物。MS ： (ES/+)m/z ： 342(M+Na， 100％ ) 和 344(M+Na， 100％ )， 264(M-tBu， 100％ ) 和 1 266(M-tBu， 100％ )。C13H22BrNO3 理论值 319。 H NMR(400MHz， CDCl3)δppm ： 4.72-4.79(m， 1H)， 3.91-4.10(m， 3H)， 2.77-2.97(m， 3H)， 1.49-1.75(m， 6H)， 1.46(s， 9H)。 另一种制备 (ii)
     用于制备 ((2S)-2-(3- 溴 -2- 氧代丙基 )-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯 )D2 的 另一种途径如下 ：
     将 搅 拌 下 的 DIPA(7.84ml， 56.00mmol) 的 THF(70ml) 溶 液 冷 却 至 0 ℃， 并滴 加 n-BuLi(35.70ml 的 1.6M 的 Cy 溶 液， 57.10mmol)。 向 冷 却 至 -90 ℃ 的 二 溴 甲 烷 (3.58ml， 51.30mmol) 的 THF(70ml) 溶 液 中 滴 加 先 前 制 备 的 LDA 溶 液。 搅 拌 5 分 钟 后， 将 (2S)-2-[2-( 甲氧基 )-2- 氧代乙基 ]-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯 D1(6.00g) 的 THF(47ml) 溶液滴加到该反应混合物中， 10 分钟后， 加入 n-BuLi(22.20ml 的 1.6M 的 Cy 溶 液， 35.50mmol)。5 分钟后， 通过套管 (cannula) 将生成的混合物加入至快速搅拌的冷却
     至 -78 ℃的 AcCl(35.00ml， 492mmol) 的无水 EtOH(230ml) 溶液中。将反应混合物在搅拌 下放置， 然后用 Et2O(400ml) 稀释。将混合物转移到分液漏斗中， 并用冷的 10％ H2SO4 水溶 液 (2×100ml)、 5％ NaHCO3 水溶液 (100ml) 和盐水 (100ml) 洗涤。将有机相干燥 (Na2SO4)， 过滤， 减压除去溶剂。通过快速硅胶色谱法 (Biotage SP140M， DCM) 纯化， 得到标题化合物 D2(1.14g)。
     另一种制备 (iii)
     在 氮 气 下， 在 1L 圆 底 烧 瓶 中， 将 二 氯 二 茂 钛 (60g， 0.24mol) 悬 浮 于 无 水 甲 苯 (300ml) 中， 冷却至 0℃。滴加甲基氯化镁 (3M 的 THF 溶液， 180ml， 0.54mol)( 用 45min)， 同 时保持内部温度低于 8℃。将生成的混合物于 0-5℃搅拌 1.5 小时， 然后通过吸管转移 ( 用 30 分钟 ) 到冰 - 冷却的 6％ w/w NH4Cl 水溶液 (180ml) 中， 同时保持内部温度低于 5℃。将 混合物于 0-5℃搅拌 1 小时。加入塞力特硅藻土 (15g)， 将混合物于 10℃搅拌 15 分钟， 然 后过滤， 用甲苯 (20ml) 洗涤。分离各相。将有机层用水 (180ml) 和盐水 (180ml) 洗涤， 干 燥 (Na2SO4)， 过滤， 然后在真空下蒸馏至 200ml。在氮气氛下， 将二甲基二茂钛的甲苯溶液 装填到 1L 圆底烧瓶中， 并加入 (2S)-2-[2-( 甲氧基 )-2- 氧代乙基 ]-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二 甲基乙基酯 D1(20g， 0.078mol)。将生成的混合物于 90℃搅拌 3 小时。加入甲苯 (500ml) 和异辛烷 (500ml)， 并将混合物通过塞力特硅藻土填料过滤以除去无机盐。然后进行 CUNO 过滤 (R55S 柱 ) 以除去最细粒度的固体。将生成的透明溶液真空浓缩， 得到橙色油状的 中间体 (2S)-2-{2-[( 甲氧基 ) 甲基 ]-2- 丙烯 -1- 基 }-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯 1 (13.60g)。 HPLC(walk-up) ： rt ＝ 4.69min。H-NMR(400MHz， CDCl3)δppm ： 4.42-4.58(m， 1H)， 3.94-4.08(m， 1H)， 3.88-3.93(m， 2H)， 3.53(s， 3H)， 2.79(t， 1H)， 2.42(dd， 1H)， 2.27(dd， 1H)， 1.50-1.70(m， 6H)， 1.46(s， 9H)。
     将 NBS(8.36g， 0.047mol) 分 批 加 入 至 (2S)-2-{2-[( 甲 氧 基 ) 甲 基 ]-2- 丙 烯 -1- 基 }-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯 (10g) 在 THF(70ml) 和 H2O(15ml) 中的混合 物中。将混合物用 TBME(100ml) 和水 (50ml) 稀释。将水相用 TBME(50ml) 反萃取。将收 集的有机相用 4％ w/w NaHCO3 水溶液洗涤 ( 两次 )， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并真空蒸发。将残 余的油状物通过硅胶填料 (20g， 甲苯 /EtOAc90/10) 过滤来纯化。通过硅胶填料 (50g， 甲 1 苯 /TBME 90/10) 再次过滤， 得到标题化合物 D2(7.80g)。 H-NMR(600MHz， DMSO-d6)δppm ： 4.50-4.64(m， 1H)， 4.35(s， 2H)， 3.70-3.88(m， 1H)， 2.86-3.01(m， 1H)， 2.65-2.82(m， 2H)， 1.42-1.60(m， 5H)， 1.35(s， 9H)， 1.14-1.28(m， 1H)。
     描述 3 ： (2S)-2-[(8- 甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ]-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯 (D3) ：
     在 50ml 圆底烧瓶中， 在室温下在氮气下， 将 (2S)-2-(3- 溴 -2- 氧代丙基 )-1- 哌 啶甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯 D2(0.12g) 溶于 DMF(2ml) 中， 得到淡黄色溶液。然后加入 3- 甲 基 -2- 吡啶胺 (0.0608g， 0.562mmol)， 并将生成的溶液于 80℃加热 45 分钟。将混合物冷却
     至室温， 并用盐水 (5ml) 和 Et2O(2ml) 稀释。分离各相， 并将水层用 Et2O(3×3ml) 萃取。将 合并的有机层干燥 (Na2SO4)， 过滤并浓缩， 得到 0.12g 的粗的淡黄色油状物， 其含有标题化 合物 D3。将该物质不需进一步纯化用于下一步骤中。MS ： (ES/+)m/z ： 330(M+1)。C19H27N3O2 理论值 329。
     描述 4 ： 8- 甲基 -2-[(2S)-2- 哌啶基甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (D4) ：
     在 100ml 梨 形 烧 瓶 中， 将 (2S)-2-[(8- 甲 基 咪 唑 并 [1， 2-a] 吡 啶 -2- 基 ) 甲 基 ]-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯 D3(1.70g) 溶于 DCM(30ml) 中， 得到黄色溶液， 将 其冷却至 0 ℃。滴加 TFA(5ml)， 并将生成的混合物在搅拌下放置过夜。将混合物真空蒸 发， 并将粗的深色油状物通过 SCX 柱洗脱。由收集的级分得到标题化合物 D4(1.05g)， 为 油 状 物。HPLC(walk-up) ： rt ＝ 1.85 分 钟。MS ： (ES/+)m/z ： 230(M+1)。C14H19N3 理 论 值 229。1H NMR(400MHz， CDCl3)δppm ： 7.94(d， 1H)， 7.41(s， 1H)， 6.94(d， 1H)， 6.66(t， 1H)， 2.89-3.06(m， 1H)， 2.93-3.01(m， 2H)， 2.71-2.79(m， 1H)， 2.58-2.67(m， 4H)， 1.85-1.95(bs， NH)， 1.75-1.84(m， 2H)， 1.58-1.64(m， 1H)， 1.22-1.55(m， 3H)。
     描述 5 ： (2S)-2-[(3- 碘 -8- 甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ]-1- 哌啶甲 酸 1， 1- 二甲基乙基酯 (D5) ：
     在室温下， 向 (2S)-2-[(8- 甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ]-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯 D3(0.135g) 的 DCM(50ml) 溶液中滴加 I2(12.91ml， 12.91mmol)(1M 的 DCM 溶液 )， 将生成的混合物在室温下搅拌 3 小时。加入 5％ NaHSO3 水溶液 (20ml)， 并将混 合物剧烈搅拌 10 分钟。分离有机相， 干燥， 过滤并浓缩， 得到黄色固体， 将其通过 Biotage SP4(NH 12+M 柱 ； 用 35CV 的 Cy/EtOAc 由 1/0 至 8/2 进 行 洗 脱 ) 纯 化， 得到标题化合物 D5(0.132g)。HPLC(walk up) ： rt ＝ 3.82min。MS ： (ES/+)m/z ： 456(M+1)。C19H26IN3O2 理 论
     值 455。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm ： 8.2-8.0(m， 1H)， 7.2-7.0(m， 1H)， 7.0-6.8(m， 1H)， 4.6-4.3(m， 1H)， 4.0-3.8(m， 1H)， 3.2-2.7(m， 3H)， 2.48-2.44(m， 3H)， 1.8-0.54(m， 15H)。
     描述 6 ： (2S)-2-[(3， 8- 二甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ]-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯 (D6) ：
     向 (2S)-2-[(3- 碘 -8- 甲 基 咪 唑 并 [1， 2-a] 吡 啶 -2- 基 ) 甲 基 ]-1- 哌 啶 甲 酸 1， 1- 二 甲 基 乙 基 酯 D5(0.100g) 和 四 ( 三 苯 基 膦 ) 合 钯 (0)(12.69mg， 10.98μmol) 在 DME(2ml) 中的混合物中加入甲基硼酸 (0.0197g， 0.329mmol)， 随后加入 0.5M NaOH 溶液 (0.878ml， 0.439mmol)。将生成的混合物在 110℃进行微波循环 40 分钟。将该反应倒入到 水 (2ml) 中， 并用 DCM(3×2ml) 萃取。分离有机相， 过滤， 干燥， 将溶剂蒸发。将褐色残余物 通过快速色谱法 (Biotage， NH 12+M ； 用 Cy/EtOAc 由 1/0 至 8/2 梯度洗脱 ) 纯化， 得到类无 色的油状标题化合物 D6(0.070g)。MS ： (ES/+)m/z ： 344(M+1)。C20H29N3O2 理论值 343.
     描述 7 ： 3， 8- 二甲基 -2-[(2S)-2- 哌啶基甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (D7) ：
     向 (2S)-2-[(3， 8- 二甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ]-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯 D6(0.070g) 的 DCM(2ml) 溶液中加入 TFA(0.5ml， 6.49mmol)， 并将生成的 混合物在室温下搅拌 4 小时。减压蒸发挥发物， 并将残余物通过 SCX(5g ； 用 3CV 的 MeOH， 然 后用 4CV 的 2M NH3/MeOH 洗脱 ) 纯化。将碱性级分合并到一起， 减压除去溶剂， 得到所需化 合物与在 3 位上没有甲基的化合物 (MW ＝ 229) 的混合物。将该混合物进行制备型 HPLC 色 谱法纯化。将由 HPLC 纯化得到的酸性溶液用 Na2CO3 碱化， 并用 DCM(3×5ml) 萃取， 通过分 相柱分离， 并减压蒸发， 得到类白色固体的标题化合物 D7(0.027g)。HPLC(walk-up) ： rt ＝ 1 1.95 分钟。 MS ： (ES/+)m/z ： 244(M+1)。 C15H21N3 理论值 243。 H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm ： 8.03-7.99(m， 1H)， 6.98-6.94(m， 1H)， 6.80-6.75(m， 1H)， 2.92-2.86(m， 1H)， 2.74-2.60(m， 3H)， 2.47-2.35(m， 7H)， 1.72-1.0(m， 6H)。
     描述 8 ： (2S)-2-[(8- 氟咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ]-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二 甲基乙基酯 (D8) ：
     将 (2S)-2-(3- 溴 -2- 氧代丙基 )-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯 D2(42.80g) 和 3- 氟 -2- 吡啶胺 (14.98g， 134mmol) 溶于无水 DMF(240ml) 中， 并将生成的溶液于 80 ℃ 搅拌 4 小时。将反应混合物冷却至 25 ℃， 并用饱和的 NaHCO3 水溶液 / 水 1/1(470ml) 稀释， 并用 Et2O(3×941ml) 萃取。合并有机层， 干燥 (Na2SO4)， 减压除去溶剂。将残余物通 过快速硅胶色谱法 (Biotage 75L 柱， Cy/EtOAc/MeOH 由 80/20/2.5 至 80/20/10) 纯化， 得 到 25.70g 其中含有 (contaminate)3- 氟 -2- 吡啶胺 (25％， 根据 NMR 分析 ) 的标题化合物 D8。将该物质溶于 DCM(650ml) 中。加入 Ps-TsCl[38g， 74.90mmol( 树脂容量 1.97mmol/g)] 并然后加入 DMAP(3g， 24.56mmol)。将生成的混合物在氩气氛下在室温下搅拌过夜， 过滤。 将滤液干燥 (Na2SO4)， 真空除去溶剂， 将粗产物通过快速硅胶色谱法 (Biotage 75L 柱， Cy/ EtOAc/MeOH 由 80/20/2 至 80/20/5) 纯化， 得到标题化合物 D8(23.56g)。C18H24FN3O2 理论值 333。1HNMR(400MHz， CDCl3) 7.40-7.57(bs， 1H)， 6.79-6.90(m， 1H)， 6.60-6.71(m， 1H)， 4.63-4.77(m， 1H)， 3.97-4.16(m， 1H)， 3.18-3.34(m， 1H)， 2.86-3.03(m， 2H)， 1.33-1.81(m， 6H)， 1.13-1.37(bs， 9H)。
     描述 9 ： 8- 氟 -2-[(2S)-2- 哌啶基甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶盐酸盐 (D9) ：
     将 (2S)-2-[(8- 氟咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ]-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二甲基 乙基酯 D8(23.56g) 溶于 DCM(35ml) 中， 并将生成的溶液在氩气氛下冷却至 10℃。滴加 4M
     HCl 的 1， 4- 二烷溶液 (148ml， 594mmol)， 将该反应温热至室温， 搅拌 2.15 小时。真空除 烷和 3- 氟 -2- 吡啶胺 ( 总的回收量高于理论量 )， 将其去挥发物， 并将残余物用 Et2O(2×250ml) 研磨， 得到标题化合物 D9(23.796g)， 为白色固体。 该物质含有一些残余的 1， 4- 二 不需进一步纯化用于下一步骤。MS ： (ES/+)m/z ： 234(M+1-HCl).C13H17FClN3 理论值 269。
     描述 10 ： 2- 氯 -5- 氟 -3- 甲基吡啶 (D10) ：
     向 在 -20 ℃ 冷 却 的 (2- 氯 -5- 氟 -3- 吡 啶 基 ) 甲 醇 (3.086g， 19.10mmol) 和 TEA(5.32ml， 38.20mmol) 在无水 DCM(180ml) 中的溶液中滴加 MsCl(2.233ml， 28.70mmol)， 并将生成的反应混合物于 0 ℃搅拌 30 分钟。减压蒸发挥发物， 得到所需的甲磺酸酯 (4.53g)， 将其不需进一步纯化用于下一步骤。 [ 甲磺酸酯数据 ： MS ： (ES/+)m/z ： 240(M+1) 和 242(M+1)。C7H7ClFNO3S 理论值 239]。向冰 - 冷却的粗的甲磺酸酯 (4.53g， 18.90mmol) 在 THF(180ml) 中的混合物中滴 加 LAH(18.90ml 的 1.0M 的 THF 溶液， 18.90mmol)， 并将该反应搅拌 1 小时。加入 2M HCl 水 溶液 (80ml)， 将生成的混合物搅拌 30 分钟， 然后加入 DCM(400ml)。分离有机层并蒸发， 得 到标题化合物 D10(2.28g)， 为白色固体。
     HPLC(walk-up) ： rt ＝ 3.56min。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm ： 8.31(d， 1H)， 7.86(dd， 1H)， 2.35(s， 3H)。
     描述 11 ： 5- 氟 -3- 甲基 -2- 吡啶胺 (D11) ：
     向 2- 氯 -5- 氟 -3- 甲基吡啶 D10(0.50g) 的无水甲苯 (12.5ml) 溶液中加入叔丁 醇 钠 (0.462g， 4.81mmol)、 Pd2(dba)3(0.315g， 0.344mmol)、 BINAP(0.642g， 1.031mmol) 和 二苯甲酮亚胺 (0.692ml， 4.12mmol)。将生成的混合物除气 (3× 用泵抽气 /N2)， 然后加热 至 80 ℃。搅拌 1 小时后， 将混合物冷却至室温， 用 Et2O(400ml) 稀释， 通过塞力特硅藻土 填料过滤。蒸发挥发物， 将生成的油状物溶于 THF(34ml) 中， 加入 HCl(1.408ml 的 2M 水 溶液， 2.82mmol)。将混合物在室温下搅拌 1.5 小时， 然后用饱和的 NaHCO3 水溶液中和， 用 DCM(200ml) 稀释。将无机层用 DCM(2×50m1) 反萃取。将收集的有机层干燥 (Na2SO4)， 过滤 并蒸发。将残余物通过快速硅胶色谱法 (Biotage SP412M 柱， Cy/EtOAc 60/40) 纯化。由收 集的级分得到标题化合物 D11(0.20g)， 为橙色固体。MS ： (ES/+)m/z ： 127(M+1)。C6H7FN2 理 1 论值 126。 H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm ： 7.73(d， 1H)， 7.23(dd， 1H)， 5.60(bs， 2H)， 2.04(s， 3H)。
     描述 12 ： 6- 氟 -8- 甲基 -2-[(2S)-2- 哌啶基甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ( 游离 碱 )(D12) ：
     向 (2S)-2-(3- 溴 -2- 氧代丙基 )-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯 D2(0.15g) 的 DMF(1ml) 溶液中加入 5- 氟 -3- 甲基 -2- 吡啶胺 D11(0.0709g)， 并将混合物于 80℃搅拌 1 小时。将反应混合物通过 SCX 柱洗脱。由收集的级分得到 0.137g 油状的含有标题化合物， 相应的 N-Boc 保护的衍生物以及一些残余的 5- 氟 -3- 甲基 -2- 吡啶胺的混合物。[N-Boc 衍生物数据 UPLC ： rt ＝ 0.56min， 观察到的峰 ： 348(M+1)。C19H26FN3O2 理论值 347]。将粗产 物溶于 DCM(2ml) 中， 并将生成的溶液冷却至 0 ℃。滴加 TFA(0.40ml)， 将该反应搅拌 1 小 时， 然后通过 SCX 柱洗脱。由收集的级分得到标题化合物， 为游离碱 D12(0.093g)， 其中含 有 5- 氟 -3- 甲基 -2- 吡啶胺。将该物质不需进一步纯化用于下一步骤中。MS ： (ES/+)m/z ： 248(M+1)。C14H18FN3 理论值 247。
     描述 13 ： 6- 氟 -8- 甲基 -2-[(2S)-2- 哌啶基甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶二盐酸盐 (D13) ：
     将 (2S)-2-(3- 溴 -2- 氧代丙基 )-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯 D2(0.94g， 根 据 D2 制备 (iii) 的方法制备 )、 5- 氟 -3- 甲基 -2- 吡啶胺 D11(0.41g) 和 NaHCO3(0.37g， 4.40mmol) 在甲苯 (4.70ml) 中的混合物于 90℃搅拌过夜。将混合物冷却至室温， 并将无机
     盐过滤除去。将该固体滤饼用甲苯 (2×0.94ml) 洗涤。将 5-6N HCl 的 IPA 溶液 (2.22ml， 11.10-13.32mmol) 加入到 5.18g 游离碱 D12 的甲苯溶液 ( 滤液， 5.46g) 中。将混合物加 热至 70 ℃， 并将生成的浆液在氮气氛下于该温度下搅拌 1 小时。将浆液在 70 ℃下保持 1 小时， 用 2 小时冷却至 40℃， 随后使其达到室温， 然后于该温度下搅拌过夜。将浆液冷却至 0℃， 并在该温度下保持 1 小时。将该固体通过过滤收集， 用 IPA(2×1.9ml) 洗涤， 于 40℃ 1 真空干燥 4 小时， 得到标题化合物 D13(0.53g)。 H NMR(600MHz， DMSO-d6)δppm ： 15.18(bs， 1H)， 9.21(bs， 1H)， 9.07(bs， 1H)， 8.99(s， 1H)， 8.14(s， 1H)， 7.83(bs， 1H)， 3.15-3.65(m， 4H)， 2.61(s， 3H)， 1.85(d， 1H)， 1.69-1.79(m， 2H)， 1.48-1.67(m， 2H)， 1.38-1.48(m， 1H)。 HPLC(walk-up， 3min 方法 ) ： rt ＝ 1.28min.
     描述 14 ： 2- 溴 -3， 5- 二甲基吡啶 (D14) ：
     向冷却至 0℃的 DMAE(0.563ml， 5.60mmol) 的己烷 (5ml) 溶液中滴加 1.6M BuLi 的 己烷溶液 (7.00ml， 11.20mmol)。 15 分钟后， 滴加 3， 5- 二甲基吡啶 (0.160ml， 1.400mmol) 的 己烷 (5ml) 溶液， 并在 0℃下将橙色溶液搅拌 1 小时。冷却至 -78℃后， 滴加 CBr4(2.321g， 7.00mmol) 的己烷 (10ml) 溶液。将反应混合物在 -78℃下保持 0.5 小时， 然后在室温下温 热。在 0℃下， 向该混合物中加入水 (25ml)， 并将溶液用 Et2O 萃取几次。分离两相， 并将有 机相经 Na2SO4 干燥。滤出该固体， 将溶剂真空除去。将粗产物通过快速硅胶色谱法 (Flash Master Personal， 50g 柱， 由 Cy 100％至 Cy 90％∶ EtOAc 10％洗脱 ) 纯化。将级分收集， 并将溶剂真空除去， 得到标题化合物 D14(0.110g)。 MS ： (ES/+)m/z ： 187(M+1)。 C7H8BrN 理论 1 值 186。 H NMR(400MHz， CDCl3)δppm ： 8.03-8.04(m， 1H)， 7.36(s， 1H)， 2.37(s， 3H)， 2.28(s， 3H)。
     描述 15 ： 3， 5- 二甲基 -2- 吡啶胺 (D15)
     向 2- 溴 -3， 5- 二 甲 基 吡 啶 D14(0.050g) 的 无 水 甲 苯 (1ml) 溶 液 中 加 入 叔 丁 醇 钠 (sodium terbutoxide)(0.036g， 0.376mmol)、 Pd2(dba)3(0.024g， 0.027mmol)、 BINAP(0.050g， 0.081mmol) 和二苯甲酮亚胺 (0.054ml， 0.322mmol)。将生成的混合物除气 (3x 用泵抽气 /N2)， 然后加热至 80 ℃。1.5 小时后， 将混合物冷却至室温， 用 Et2O(100ml)
     稀释， 通过塞力特硅藻土填料过滤。将溶剂蒸发， 将生成的油状物溶于 THF(20ml) 中， 加入 2M HCl 的水溶液 (0.269ml， 0.537mmol)， 并在室温下搅拌 3 小时。将溶液真空浓缩， 并将混 合物用饱和的 NaHCO3 水溶液中和， 加入 DCM， 分离两层， 将水层用 DCM(3×100ml) 萃取。将 收集的有机层通过分相器过滤并蒸发。将获得的红色油状物通过快速硅胶色谱法 (Flash Master personal， 10g 柱， 首先用 Cy 80％∶ EtOAc 20％， 然后用 2MNH3 的 MeOH 溶液进行 洗脱 ) 纯化。收集级分， 将溶剂真空除去， 得到标题化合物 D15(0.022g)。MS ： (ES/+)m/z ： 123(M+1)。C7H10N2 理论值 122。1H NMR(400MHz， CDCl3) 4.5-4.30(br.s， 2H)， 2.19(s， 3H)， 2.13(s， 3H)。307.15(s， 1H)，102325770 A CN 102325783
     说明书25/71 页描述 16 ： (2S)-2-[(6， 8- 二甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ]-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯 (D16) ：
     将 (2S)-2-(3- 溴 -2- 氧代丙基 )-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯 D2(0.0629g) 和 3， 5- 二甲基 -2- 吡啶胺 D15(20mg) 溶于 DMF(1.5ml) 中， 并于 70℃加热 3 小时。将溶剂除 去， 将粗产物通过快速色谱法 (Sp4， 25M NH 柱， 由 Cy 100％至 Cy 80％∶ EtOAc 20％洗脱 ) 纯化。将级分收集， 除去溶剂以得到标题化合物 D16(0.48g)。MS ： (ES/+)m/z ： 344(M+1)。 1 C20H29N3O2 理论值 343。H NMR(400MHz， CDCl3)δppm ： 7.68(s， 1H)， 7.30-7.25(m， 1H)， 6.78(s， 1H)， 4.78-4.53(m， 1H)， 4.21-3.88(m， 1H)， 3.27-3.09(m， 1H)， 3.04-2.79(m， 2H)， 2.57(s， 3H)， 2.25(s， 3H)， 1.78(s， 9H)， 1.75-1.03(m， 6H)。
     描述 17 ： 6， 8- 二甲基 -2-[(2S)-2- 哌啶基甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (D17) ：将 (2S)-2-[(6， 8- 二甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ]-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯 D16(0.046g) 溶于 DCM(4ml) 中， 并向该溶液中滴加 TFA(1ml)。将该反应 搅拌 2 小时。将溶剂真空除去， 并将残余物通过 SCX 柱过滤。将溶剂真空除去， 得到标题化 1 合物 D17(0.026g)。MS ： (ES/+)m/z ： 244(M+1)。C15H21N3 理论值 243。 H NMR(400MHz， CDCl3) δppm ： 7.73(s， 1H)， 7.32(s， 1H)， 6.80(s， 1H)， 3.09-2.59(m， 5H)， 2.57(s， 3H)， 2.28(s， 3H)， 1.83-1.21(m， 6H)。
     描述 18 ： (3- 溴 -4- 甲基 -2- 吡啶基 ) 亚氨基二甲酸二 (1， 1- 二甲基乙基 ) 酯 (D18) ：
     将 3- 溴 -4- 甲基 -2- 吡啶胺 (1g， 5.35mmol) 和 BOC- 酐 (3.72ml， 16.04mmol) 在 叔丁醇 (6ml) 中于 35℃下加热。3 小时后， 向该溶液中加入 DMAP(0.131g， 1.069mmol)， 并 将该反应搅拌过夜。将溶剂真空除去， 并将粗产物通过快速硅胶色谱法 (Flash Master Personal， 50g 柱， 用 DCM 100％洗脱 ) 纯化。 将溶剂真空除去， 得到标题化合物 D18(1.5g)。 MS ： (ES/+)m/z ： 389(M+1)。C16H23BrN2O4 理论值 387。
     31102325770 A CN 102325783
     1说明书26/71 页H NMR(400MHz， CDCl3)7.16-7.15(d， 2H)， 2.49(s，3H)， 2.17(s， 3H)， 1.43(s， 18H)。
     描 述 19 ： (3， 4- 二 甲 基 -2- 吡 啶 基 ) 亚 氨 基 二 甲 酸 二 (1， 1- 二 甲 基 乙 基 ) 酯 (D19) ：
     将 (3- 溴 -4- 甲 基 -2- 吡 啶 基 ) 亚 氨 基 二 甲 酸 二 (1， 1- 二 甲 基 乙 基 ) 酯 D18(0.600g) 溶于 DME(1.5ml) 中。向该溶液中加入甲基硼酸 (0.100g， 1.67mmol)、 四(三 苯基膦 ) 合钯 (0)(0.090g， 0.077mmol) 和 Cs2CO3(1.514g， 4.65mmol)。将混合物在微波中 于 90℃加热 (5×20 分钟 )。向该混合物中加入另外的甲基硼酸 (0.060g， 1.00mmol) 和四 ( 三苯基膦 ) 合钯 (0)(0.030g， 0.025mmol)， 并将悬浮液在微波中于 90 ℃加热 (3×20 分 钟 )。将混合物过滤， 并将溶剂真空除去。将粗产物通过快速色谱法 (Sp4， 25M 柱， 由 Cy 100％至 Cy80％∶ EtOAc 20％洗脱 ) 纯化。将级分收集， 将溶剂真空除去， 得到标题化合 1 物 D19(0.255g)。MS ： (ES/+)m/z ： 323(M+1)。C17H26N2O4 理论值 322。 HNMR(400MHz， CDCl3)
     δppm ： 8.24-8.23(d， 2H)， 7.08-7.07(d， 2H)， 2.35(s， 3H)， 2.17(s， 3H)， 1.44(s， 18H)。
     描述 20 ： 3， 4- 二甲基 -2- 吡啶胺 (D20) ：
     将 (3， 4- 二 甲 基 -2- 吡 啶 基 ) 亚 氨 基 二 甲 酸 二 (1， 1- 二 甲 基 乙 基 ) 酯 D19(0.0255g) 溶于 DCM(6ml) 中， 并在 0℃下加入 TFA(1ml)。将该反应在室温下搅拌 4 小 时。将溶剂真空除去， 并将残余物通过 SCX 柱过滤。将溶剂真空除去， 得到标题化合物 1 D20(0.088mg)。 MS ： (ES/+)m/z ： 123(M+1)。 C7H10N2 理论值 122. H NMR(400MHz， CDCl3)δppm ： 7.82-7.81(d， 1H)， 6.56-6.53(d， 1H)， 4.62-4.44(m， 2H)， 2.26(s， 3H)， 2.08(s， 3H)。
     描述 21 ： (2S)-2-[(7， 8- 二甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ]-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯 (D21) ：
     将 (2S)-2-(3- 溴 -2- 氧代丙基 )-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯 D2(0.0577g) 和 3， 4- 二甲基 -2- 吡啶胺 D20(0.020g) 溶于 DMF(1.5ml) 中， 并于 70℃加热 3 小时。将溶
     剂真空除去， 并将粗产物通过快速色谱法 (SP4， 25M NH 柱， 由 Cy100％至 Cy 80％∶ EtOAc 20 ％洗脱 ) 纯化。将级分收集， 除去溶剂， 得到标题化合物 D21(0.0499g)。MS ： (ES/+) 1 m/z ： 344(M+1)。C20H29N3O2 理 论 值 343。 H NMR(400MHz， CDCl3)δppm ： 7.81-7.76(d， 1H)， 7.34-7.27(m， 1H)， 6.56-6.51(d， 1H)， 4.75-4.59(m， 1H)， 4.17-3.95(m， 1H)， 3.25-3.17(m， 1H)， 3.03-2.79(m， 2H)， 2.54(s， 3H)， 2.33(s， 3H)， 1.86-1.12(m， 15H)。
     描述 22 ： 7， 8- 二甲基 -2-[(2S)-2- 哌啶基甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (D22) ：
     将 (2S)-2-[(7， 8- 二甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ]-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯 D21(0.0499g) 溶于 DCM(4ml) 中， 并滴加 TFA(1ml)。将该反应搅拌 2 小 时。将溶剂真空除去， 并将残余物通过 SCX 柱过滤， 得到标题化合物 D22(0.033mg)。MS ： 1 (ES/+)m/z ： 244(M+1)。 C15H21N3 理论值 243。H NMR(400MHz， CDCl3)δppm ： 7.85-7.80(d， 1H)， 7.34-7.31(s， 1H)， 6.59-6.54(d， 1H)， 3.11-2.87(m， 3H)， 2.78-2.70(m， 1H)， 2.69-2.59(m， 1H)， 2.54(s， 3H)， 2.33(s， 3H)， 1.86-1.21(m， 6H)。
     描述 23 ： (5- 溴 -4- 甲基 -2- 吡啶基 ) 亚氨基二甲酸二 (1， 1- 二甲基乙基 ) 酯(D23) ：
     将 5- 溴 -4- 甲基 -2- 吡啶胺 (0.300g， 1.604mmol)、 BOC- 酐 (0.819ml， 3.53mmol) 和 DMAP(0.0392g， 0.321mmol) 在叔丁醇 (4ml) 中于 35℃加热过夜。 将溶剂真空除去， 并将粗 产物通过快速硅胶色谱法 (Flash Master personal， 50g 柱， 用 DCM 100％洗脱 ) 纯化。 将溶 剂真空除去， 得到 (5- 溴 -4- 甲基 -2- 吡啶基 ) 氨基甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯 (0.200g) 和标 题化合物 D23(0.300g， 0.775mmol， 48.3％产率 )。MS ： (ES/+)m/z ： 388(M+1)。C16H23BrN2O4 理 论值 387.27。1H NMR(400MHz， CDCl3)δppm ： 8.52(s， 1H)， 7.17(s， 1H)， 2.43(s， 3H)， 1.49(s， 18H)。
     描述 24 ： (4， 5- 二甲基 -2- 吡啶基 ) 氨基甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯 (D24) ：
     向 除 气 的 (5- 溴 -4- 甲 基 -2- 吡 啶 基 ) 亚 氨 基 二 甲 酸 二 (1， 1- 二 甲 基 乙 基 ) 烷 (2ml) 中的溶液中加入 Pd2(dba)3(0.0118g， 0.013mmol)、33酯 D23(0.100g) 在 1， 4- 二102325770 A CN 102325783说明书28/71 页三 环 己 基 膦 (0.015g， 0.053mmol)、 三 甲 基 硼 氧 六 环 (trimethylboroxine)(0.054ml， 0.387mmol) 和 Cs2CO3(0.252g， 0.775mmol)。将混合物在微波中于 80℃加热 15 分钟。将混 合物用塞力特硅藻土填料过滤， 向该残余物中加入 H2O 和 DCM， 将水相用 DCM 洗涤几次。分 离两相， 并将有机相通过分相器过滤， 得到粗的标题化合物 D24(0.060g)。MS ： (ES/+)m/z ： 1 223(M+1)。C12H18N2O2 理论值 222。 H NMR(400MHz， CDCl3)δppm ： 7.79(s， 1H)， 7.76(s， 1H)， 2.28(s， 3H)， 2.19(s， 3H)， 1.55(s， 9H)。
     描述 25 ： 4， 5- 二甲基 -2- 吡啶胺 (D25) ：
     将 (4， 5- 二甲基 -2- 吡啶基 ) 氨基甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯 D24(0.090g) 溶于 DCM(5ml) 中， 向该溶液中加入 TFA(1ml)， 并将该反应搅拌 1.5 小时。将溶剂真空除去， 并将 残余物通过 SCX 柱 (10g) 过滤。真空浓缩溶液， 得到标题化合物 D25(0.0375g)。MS ： (ES/+) m/z ： 123(M+1)。C7H10N2 理论值 122。 1
     H NMR(400MHz ，CDCl 3 ) δ ppm ： 2.12(s ， 3H)2.19(s ， 3H)4.51-3.94(br.s. ， 2H)6.32-6.39(m， 1H)7.80(s， 1H)。
     描述 26 ： (2S)-2-[(6， 7- 二甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ]-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯 (D26) ：
     将 4， 5- 二甲基 -2- 吡啶胺 D25(0.0375g) 和 (2S)-2-(3- 溴 -2- 氧代丙基 )-1- 哌啶 甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯 D2(0.108g) 溶于 DMF(2ml) 中， 并于 75℃加热 2 小时。将溶剂真空 除去， 并将残余物通过快速色谱法 (Sp425g NH 柱， 由 Cy 100％至 Cy 80％∶ EtOAc 20％洗 脱 ) 纯化。 将级分收集， 并将溶剂真空除去， 得到标题化合物 D26(0.050g)。 MS ： (ES/+)m/z ： 1 344(M+1)。 C20H29N3O2 理论值 343。 H NMR(400MHz， CDCl3)δppm ： 0.75-1.53(m， 15H)， 2.22(s， 3H)， 2.34(s， 3H)， 2.78-3.00(m， 2H)， 3.04-3.19(m， 1H)， 3.88-4.17(m， 1H)， 4.51-4.72(m， 1H)， 7.25-7.30(m， 2H)， 7.78(s， 1H)。
     描述 27 ： 6， 7- 二甲基 -2-[(2S)-2- 哌啶基甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (D27) ：
     将 (2S)-2-[(6， 7- 二甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ]-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二 甲基乙基酯 D26(0.050g) 溶于 DCM(4ml) 中， 向该溶液中滴加 TFA(1ml)， 并将该溶液在室温 下搅拌 2 小时。将溶剂真空除去， 并将残余物通过 SCX 柱过滤， 首先用 MeOH、 然后用 2N NH3
     的 MeOH 溶液洗脱， 将级分收集， 并将溶剂蒸发， 得到标题化合物 D27(0.026g)。 MS ： (ES/+)m/ 1 z： 244(M+1)。 C15H21N3 理论值 243。 H NMR(400MHz， CDCl3)δppm ： 7.81(s， 1H)， 7.30-7.24(m， 2H)， 3.07-2.57(m， 5H)， 2.32(s， 3H)， 2.23(s， 3H)， 1.90-1.15(m， 6H)
     描述 28 ： (2S)-2-[(3- 氯 -8- 甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ]-1- 哌啶甲 酸 1， 1- 二甲基乙基酯 (D28) ：
     向 (2S)-2-[(8- 甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ]-1- 哌啶甲酸 1， 1- 二甲 基乙基酯 D3(0.18g) 的 DCM(4ml) 溶液中加入 NCS(0.082g， 0.62mmol)， 并将反应混合物在室 温下搅拌 30 分钟。 将溶剂蒸发， 得到标题化合物 D28(0.29g)， 为粗产物， 其不需任何进一步 的纯化用于下一步骤。MS ： (ES/+)m/z ： 364(M+1)。C19H26ClN3O2 理论值 363。
     描述 29 ： 3- 氯 -8- 甲基 -2-[(2S)-2- 哌啶基甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (D29) ：
     在 0℃下， 向 (2S)-2-[(3- 氯 -8- 甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基 ) 甲基 ]-1- 哌 啶甲酸 1， 1- 二甲基乙基酯 D28(0.29g) 的 DCM(6ml) 溶液中滴加 TFA(1.20ml)， 并将反应 混合物搅拌 1 小时。将溶剂蒸发， 并将残余物通过 SCX 柱洗脱。由收集的级分得到标题 化合物 D29(0.17g)， 为粗产物， 其不需任何进一步的纯化用于下一步骤。MS ： (ES/+)m/z ： 264(M+1)。C14H18ClN3 理论值 263。HPLC(walk-up) ： rt ＝ 2.20min。
     描述 30 ： 2-( 羟基甲基 )-6- 甲基 -4- 硝基 -3- 吡啶醇 (D30) ：
     将 冷 却 的 70 ％ HNO3(0.459ml) 和 H2SO4(0.575ml) 的 混 合 物 滴 加 到 冰 冷 却 的 2-( 羟基甲基 )-6- 甲基 -3- 吡啶醇 ( 购自 Sigma-Aldrich#144428)(1g， 7.19mmol) 在浓 H2SO4(4.5ml) 中的溶液中。 使混合物达到室温， 并搅拌 4 小时。 通过 UPLC/MS 显示存在起始物 料： MS ： (ES/+)m/z ： 140(M+1)。 将反应混合物再次冷却至 0-5℃， 并加入 70％ HNO3(0.918ml) 和 H2SO4(1.149ml) 的混合物， 将生成的混合物温热至室温， 并搅拌 2 小时。按照先前的比 例 (1 ∶ 1.5) 加入另外量 (2ml) 的 70％ HNO3 和 H2SO4 混合物， 并在室温下搅拌 1 小时。将 反应混合物冷却至 0℃， 滴加 NH4OH 直至 pH ～ 5， 然后将其用 DCM 萃取， 通过分相柱分离， 并 减压蒸发。将褐色油状物通过快速硅胶色谱法 (Biotage SP4， 25+M 柱， 用 10 体积的 DCM/
     MeOH， 49/1 洗脱 ) 纯化， 回收得到标题化合物 D30(0.290g) 和 6- 甲基 -2- 硝基 -3- 吡啶醇 (0.330g， 2.120mmol， 29.5 ％ 产 率 )。HPLC(walk-up) ： rt ＝ 1.86min.C7H8N2O4 理 论 值 184。 1 H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm ： 11.29-9.78(br.s， 1H)， 7.62(s， 1H)， 5.84-4.92(br.s， 1H)， 4.66(s， 2H)， 2.47-2.44(s， 3H)。
     描述 31 ： [3-( 乙氧基 )-6- 甲基 -2- 吡啶基 ] 甲醇 (D31) ：
     将 2-( 羟 基 甲 基 )-6- 甲 基 -3- 吡 啶 醇 ( 购 自 Sigma-Aldrich#144428)(1.50g， 10.78mmol)、 K2CO3(7.45g， 53.9mmol) 和碘乙烷 (1.724ml， 21.56mmol) 溶于 DMF(15ml) 中， 并将混合物在室温下搅拌过夜。向该溶液中加入 H2O 和 EtOAc。分离两层。将水层用 EtOAc 萃取几次。将合并的有机层用盐水 / 冰洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤出固体， 将溶剂真空除去， 1 得到标题化合物 D31(1.669g)， 为淡黄色固体。 H-NMR(400MHz， CDCl3)δppm ： 6.98-7.06(m， 2H)， 4.72(s， 2H)， 4.47(bs， 1H)， 4.05(q， 2H)， 2.50(s， 3H)， 1.43(t， 3H)。
     下面的式 (A) 化合物是使用类似于上述描述 31 中所述的方法制备的。每个化合 物是通过 2-( 羟基甲基 )-6- 甲基 -3- 吡啶醇或 2-( 羟基甲基 )-6- 甲基 -4- 硝基 -3- 吡啶 醇 D30 与合适的亲电子试剂的 O- 烷基化作用获得的。此只是用来帮助技术熟练的化学工 作者。起始物料不必由所述的批料制备。
     描述 37 ： 3-( 乙氧基 )-6- 甲基 -2- 吡啶甲酸 (D37) ：
     在 室 温 下， 向 [3-( 乙 氧 基 )-6- 甲 基 -2- 吡 啶 基 ] 甲 醇 D31(1.67g， 由 描 述 31中所获得的粗产物 ) 的乙腈 (50ml) 溶液中加入磷酸盐缓冲液 (38ml)、 TEMPO(0.218g， 1.397mmol)。将混合物温热至 35 ℃后， 用 1 小时， 同时加入 NaClO2(4.51g， 49.90mmol) 的 水 (10ml) 溶液和 NaClO(18.96ml， 39.90mmol)。于 35 ℃搅拌 4 小时后， 将水 (40ml) 加入 到反应混合物中， 然后通过加入 1M 的 NaOH 将 pH 调节至 8。将混合物倒入到冰 - 冷却的饱 和的硫代硫酸钠水溶液 (100ml) 中， 并继续搅拌 30 分钟。通过缓慢地加入 1M 的 HCl 将 pH 调节至 3， 并将水相用 DCM(6×200ml) 萃取。将合并的有机层用盐水 (2×200ml) 洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 并浓缩， 得到标题化合物 D37(1.64g)。MS ： (ES/+)m/z ： 182(M+1)。C9H11NO3 理论 1 6 值 181。 H-NMR(400MHz， DMSO d )δppm ： 12.90(bs， 1H)， 7.49(d， 1H)， 7.31(d， 1H)， 4.08(q， 2H)， 2.40(s， 3H)， 1.29(t， 3H)。
     下面的式 (B) 化合物是使用类似于上述描述 37 中所述的方法制备的。每个化合 物是通过相应的 2-( 烷氧基 )-6- 甲基 -3- 吡啶醇衍生物的伯醇氧化获得的。此只是用来 帮助技术熟练的化学工作者。起始物料不必由所述的批料制备。
     描述 43 ： 4- 氯 -3-( 乙氧基 )-6- 甲基 -2- 吡啶甲酸 (D43) ：
     向 3-( 乙氧基 )-6- 甲基 -4- 硝基 -2- 吡啶甲酸 D38(0.280g) 的 DCM(2ml) 溶液中加入 DMF(2μl， 0.026mmol) 和草酰氯 (0.130ml， 1.485mmol)， 并将生成的混合物在室温下搅 拌 1 小时。 取出少量样品， 并用无水 MeOH 稀释， MS 显示完全转化为甲酯。 将 MeOH(0.250ml， 6.19mmol) 滴加到该反应混合物中， 并搅拌 30 分钟。 向该反应混合物中加入 DCM(2ml) 和饱 和的 Na2CO3 水溶液 (2ml)， 将水层用 DCM(2×2ml) 萃取。 将有机相通过分相柱干燥， 并蒸发， 得到 4- 氯 -3-( 乙氧基 )-6- 甲基 -2- 吡啶甲酸甲酯 (0.107g)。回收该产物， 其不纯并且 不需进一步纯化而使用。MS ： (ES/+)m/z ： 230(M+1)。MS ： (ES/+)m/z ： 230(M+1)。C10H12ClNO3 理论值 229.
     将 4- 氯 -3-( 乙氧基 )-6- 甲基 -2- 吡啶甲酸甲酯 (0.107g) 溶于 THF(4ml) 中， 加入 MeOH(1.000ml)、 水 (1.000ml) 和 LiOH H2O(0.0176g， 0.419mmol)。将生成的混合物在 室温下搅拌 2 小时。向该溶液中加入 1M HCl 直至 pH 为 3， 并将混合物用 EtOAc 萃取几次。 将有机层经 Na2SO4 干燥， 减压除去溶剂以得到类褐色半固体的标题化合物 D43(0.109g)。 HPLC(walk-up) ： rt ＝ 2.71min.MS ： (ES/+)m/z ： 216(M+1)。C9H10ClNO3 理 论 值 215。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm ： 13.53(br.s.， 1H)， 7.62(d， 1H)， 4.06(m， 2H)， 2.44(s， 3H)， 1.27-1.35(m， 3H)。
     描述 44 ： 3- 羟基 -2- 吡啶甲酸甲酯 (D44) ：
     将 3- 羟基 -2- 吡啶甲酸 (1g， 7.19mmol) 溶于 DCM(20ml) 中， 在 N2 气氛下， 向该 溶液中滴加草酰氯 (1.510ml， 17.25mmol)， 并将该反应搅拌 1 小时。然后加入 MeOH(2ml， 49.4mmol)， 并在室温下再搅拌 2 小时。将溶剂真空除去， 并将残余物溶于 DCM 中， 并用饱和 的 NaHCO3 水溶液洗涤。分离两相， 并将有机相通过分相器过滤并蒸发。将粗产物通过快速 硅胶色谱法 (Flash Master Personal 50g 柱， 用 Cy 80％∶ EtOAc 20％洗脱 ) 纯化。将 级分收集， 并将溶剂真空除去， 得到标题化合物 D44(0.800g)， 为白色固体。MS ： (ES/+)m/z ： 1 154(M+1)。C7H7NO3 理论值 153。 H-NMR(400MHz， CDCl3)δppm ： 10.66(s， 1H)， 8.32-8.29(m， 1H)， 7.48-7.43(m， 2H)， 4.09(s， 3H)。
     描述 45 ： 6- 溴 -3- 羟基 -2- 吡啶甲酸甲酯 (D45) ：
     向 搅 拌 下 的 3- 羟 基 -2- 吡 啶 甲 酸 甲 酯 D44(0.100g) 的 水 (5ml) 溶 液 中 滴 加 Br2(0.045ml， 0.882mmol)， 并将溶液在室温下搅拌。产生沉淀。将混合物搅拌 30 分钟， 然 后加入 DCM， 并分离两相。将水层用 DCM 萃取。将有机层通过分相器过滤并蒸发。将粗产 物通过快速硅胶色谱法 (Flash Master Personal， 10g 柱， 用 Cy 90％ EtOAc 10％洗脱 ) 纯化。将级分收集， 并将溶剂真空除去， 得到标题化合物 D45(0.100g)。MS ： (ES/+)m/z ： 1 233(M+1)。 C7H6BrNO3 理论值 232。H-NMR(400MHz， CDCl3)δppm ： 10.69(s， 1H)， 7.61-7.51(d，
     1H)， 7.32-7.25(d， 1H)， 4.06(s， 3H)。
     描述 46 ： 6- 溴 -3-( 乙氧基 )-2- 吡啶甲酸甲酯 (D46) ：
     将 6- 溴 -3- 羟 基 -2- 吡 啶 甲 酸 甲 酯 D45(0.200g， 0.862mmol)、 K2CO3(0.596g， 4.31mmol) 和碘乙烷 (0.139ml， 1.724mmol) 溶于 DMF(3ml) 中。将混合物在室温下搅拌过 夜。向该溶液中加入 H2O 和 DCM。分离两层。将水层用 DCM 萃取几次。将有机层用盐水 / 冰洗涤， 通过分相器过滤并蒸发。 将粗产物通过快速硅胶色谱法 (Flash Master Personal， 20g 柱， 由 Cy 100 ％至 Cy 90 ％∶ EtOAc10 ％洗脱 ) 纯化。将级分收集， 得到标题化合物 1 D46(0.200g)。MS ： (ES/+)m/z ： 260(M+1)。C9H10BrNO3 理 论 值 259。 H-NMR(400MHz， CDCl3) δppm ： 7.55-7.53(d， 1H)， 7.25-7.23(d， 1H)， 4.18-4.10(m， 2H)， 3.96(s， 3H)， 1.50-1.43(m， 3H)。
     描述 47 ： 6- 乙烯基 -3-( 乙氧基 )-2- 吡啶甲酸甲酯 (D47) ：
     将 6- 溴 -3-( 乙氧基 )-2- 吡啶甲酸甲酯 D46(0.200g) 溶于 DMF(3ml) 中， 向该溶 液中加入三正丁基乙烯基锡 (vinyltri-N-butyltin)(0.271ml， 0.923mmol)， 并将其通过向 其中鼓入氮气 30 分钟来除气， 然后加入四 ( 三苯基膦 ) 合钯 (0)(0.089g， 0.077mmol)， 并 将混合物在微波中于 95℃加热 (3×20 分钟 )。将混合物通过塞力特硅藻土填料过滤， 并将 残余物通过快速色谱法 (Sp425M 柱， 由 Cy 100％至 Cy 80％∶ EtOAc 20％洗脱 ) 纯化。将 级分收集， 并将溶剂蒸发， 得到标题化合物 D47(0.119g)。HPLC(walk up) ： rt ＝ 3.95 分钟。 1 C11H13NO3 理 论 值 207。 H-NMR(400MHz， CDCl3)δppm ： 7.52-7.48(d， 1H)， 7.33-7.28(m， 1H)， 6.88-6.77(m， 1H)， 6.08-6.0(m， 1H)， 5.48-5.39(m， 1H)， 4.19-4.15(m， 2H)， 3.99(s， 3H)， 1.51-1.43(m， 3H)。
     描述 48 ： 6- 乙基 -3-( 乙氧基 )-2- 吡啶甲酸甲酯 (D48) ：向 6- 乙烯基 -3-( 乙氧基 )-2- 吡啶甲酸甲酯 D47(0.119g) 的 EtOH(5ml) 溶液中加 入 PtO2(0.013g， 0.057mmol)， 并将混合物在室温下在 1 大气压的 H2 下反应 15 分钟。 将悬浮 液通过塞力特硅藻土填料过滤， 将溶剂真空除去， 得到标题化合物 D48(0.109g， 0.519mmol， 90 ％ 产 率 )。HPLC(walk up) ： rt ＝ 3.68min.MS ： (ES/+)m/z ： 210(M+1)。C11H15NO3 理 论 1 值 209。 H-NMR(400MHz， CDCl3)δppm ： 7.30-7.27(m， 2H)， 4.15-4.0(m， 2H)， 3.98(s， 3H)，
     2.87-2.80(m， 2H)， 1.48-1.43(m， 2H)， 1.32-1.27(m， 3H)。
     描述 49 ： 6- 乙基 -3-( 乙氧基 )-2- 吡啶甲酸 (D49) ：
     将 6- 乙 基 -3-( 乙 氧 基 )-2- 吡 啶 甲 酸 甲 酯 D48(0.109g) 溶 于 THF(3ml)/ MeOH(0.750ml)/ 水 (0.750ml) 中， 向 该 溶 液 中 加 入 LiOH(0.0374g， 1.563mmol)， 并将混 合物在室温下搅拌 2 小时。向该溶液中加入 1M HCl 直至 pH ＝ 3， 并将混合物用 DCM 萃 取几次， 将其通过分相器过滤， 并将有机溶剂真空除去， 得到标题化合物 D49(0.081g)。 HPLC(walk up) ： rt ＝ 2.12min.MS ： (ES/+)m/z ： 196(M+1)。C10H13NO3 理 论 值 195。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm ： 13.1-12.74(br.s， 1H)， 7.55-7.46(m， 1H)， 7.35-7.27(m， 1H)， 4.14-4.01(m， 2H)， 2.74-2.60(m， 2H)， 1.38-1.24(m， 3H)， 1.24-1.14(m， 3H)。
     描 述 50 ： 2-({[(1， 1- 二 甲 基 乙 基 )( 二 甲 基 ) 甲 硅 烷 基 ] 氧 基 } 甲 基 )-6- 甲 基 -3- 吡啶醇 (D50) ：
     在 室 温 下， 在 搅 拌 下， 将 咪 唑 (7.71g， 113mmol) 和 叔 丁 基 二 甲 基 甲 硅 烷 基 氯 (6.82g， 45.3mmol) 加 入 到 2-( 羟 基 甲 基 )-6- 甲 基 -3- 吡 啶 醇 (5.25g， 37.7mmol) 的 无 水 DMF(150ml) 溶液中。然后将混合物在氮气下于 60℃搅拌过夜。将混合物用 DCM 稀释， 并用 NH4Cl 和盐水洗涤。将有机层蒸发， 并经 Na2SO4 干燥。将残余物通过快速硅胶色谱 法 (SP1， 40M 柱， 用 Cy/EtOAc ： 由 Cy 100 至 Cy/EtOAc 90/10 洗脱 ) 纯化， 得到标题化合物 1 D50(5.52g)， 为白色固体。 MS ： (ES/+)m/z ： 254(M+1)。 C13H23NO2Si 理论值 253。 H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm ： 9.5(s， 1H)， 7.03-7.06(m， 1H)， 6.95-6.98(m， 1H)， 4.67(s， 2H)2.33(s， 3H)， 0.87-0.85(m， 9H)， 0.06-0.04(m， 6H)。
     描述 51 ： 三氟甲磺酸 2-({[(1， 1- 二甲基乙基 )( 二甲基 ) 甲硅烷基 ] 氧基 } 甲 基 )-6- 甲基 -3- 吡啶基酯 (D51) ：
     在搅拌下， 向 2-({[(1， 1- 二甲基乙基 )( 二甲基 ) 甲硅烷基 ] 氧基 } 甲基 )-6- 甲 基 -3- 吡啶醇 D50(0.52g) 的无水 DCM(10ml) 溶液中滴加 DIPEA(1.075ml， 6.16mmol)。然后 将混合物冷却至 0℃， 并在搅拌下滴加三氟甲磺酸酐 (0.520ml， 3.08mmol)。将溶液温热至 室温， 在氮气下搅拌 4 小时。 将溶液用 DCM(10ml) 稀释， 并用水 (2×20ml) 洗涤。 然后将有机
     层经 Na2SO4 干燥， 并蒸发。将残余的褐色油状物通过快速硅胶色谱法 (Companion， 120g 柱， 用 Cy/EtOAc ： 由 Cy 100 至 Cy/EtOAc 80/20 洗脱 ) 纯化， 得到标题化合物 D51(0.62g)， 为黄 1 色油状物。MS ： (ES/+)m/z ： 386(M+1)。C14H22F3NO4SSi 理论值 385。 H NMR(400MHz， DMSO-d6) δppm ： 7.85-7.78(d， 1H)， 7.45-7.43(d， 1H)， 4.79(s， 2H)2.53-2.49(m， 3H)， 0.87-0.85(m， 9H)， 0.06-0.04(m， 6H)。
     描 述 52 ： 2-({[(1， 1- 二 甲 基 乙 基 )( 二 甲 基 ) 甲 硅 烷 基 ] 氧 基 } 甲 基 )-6- 甲 基 -3- 苯基吡啶 (D52) ：
     将氮气通入到三氟甲磺酸 2-({[(1， 1- 二甲基乙基 )( 二甲基 ) 甲硅烷基 ] 氧 基 } 甲 基 )-6- 甲 基 -3- 吡 啶 基 酯 D51(0.200g)、 苯 基 硼 酸 (0.127g， 1.038mmol) 和 无 水 K2CO3(0.108g， 0.778mmol) 在甲苯 (5ml) 中的悬浮液中 15 分钟。加入四 ( 三苯基膦 ) 合钯 (0)(0.060g， 0.052mmol)， 并将混合物于 85-90℃加热 5 小时。将反应混合物冷却至 25℃， 用 EtOAc(5ml) 稀释， 并依次用饱和的 NaHCO3 水溶液、 NH4Cl、 水和盐水洗涤。将有机相浓缩， 并将残余物通过快速硅胶色谱法 (Companion， 80g 柱， 用 Cy/EtOAc 由 Cy 100 至 Cy/EtOAc 80/20 洗脱 ) 纯化， 得到黄色油状的标题化合物 D52(0.114g)。MS ： (ES/+)m/z ： 314(M+1)。 C19H27NOSi 理 论 值 313。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 7.59(d， 1H)， 7.35-7.48(m， 5H)， 7.28(d， 1H)， 4.61(s， 2H)， 2.53-2.49(m， 3H)， 0.79-0.93(m， 9H)， -0.06--0.04(m， 6H)。
     描述 53 ： (6- 甲基 -3- 苯基 -2- 吡啶基 ) 甲醇 (D53) ：
     将 2-({[(1， 1- 二甲基乙基 )( 二甲基 ) 甲硅烷基 ] 氧基 } 甲基 )-6- 甲基 -3- 苯基 吡啶 D52(0.99g) 的 TBAF 溶液 (1.0M 的 THF 溶液 )(10ml， 10.00mmol) 在室温下搅拌 30 分 钟。将溶剂真空除去， 并将残余物溶于水 (15ml) 中。将生成的溶液用 DCM 洗涤。将合并的 有机层干燥 (Na2SO4) 并蒸发。将残余的黄色油状物通过快速硅胶色谱法 (Companion， 120g 柱， 使用 Cy/EtOAc 由 Cy 100 至 Cy70/30 洗脱 ) 纯化， 得到标题化合物 D53(0.53g)， 为白色固 1 体。HPLC(walk up) ： rt ＝ 2.31min.C13H13NO 199。 H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 7.60(d， 1H)， 7.34-7.51(m， 5H)， 7.27(d， 1H)， 5.12(m， 1H)， 4.33-4.45(m， 2H)， 2.54-2.49(m， 3H)。
     描述 54 ： 6- 甲基 -3- 苯基 -2- 吡啶甲酸 (D54) ：
     在 5-10 ℃下， 在剧烈搅拌下， 向 (6- 甲基 -3- 苯基 -2- 吡啶基 ) 甲醇 D53(0.2g) 的水 (3ml) 溶液中滴加 KMnO4(0.206g， 1.305mmol) 的水 (7ml) 溶液， 然后将反应混合物在 室温下搅拌过夜， 然后通过塞力特硅藻土填料 (plugh) 过滤 ( 除去 MnO2)。将滤液减压浓 缩。将未反应的物质通过用 DCM 萃取来除去。将水层的 pH 用 2N HCl 调节至 pH ＝ 5.5， 并 将产物用 DCM 萃取。收集有机层， 经 Na2SO4 干燥， 并蒸发， 得到标题化合物 D54(0.056g)， 为 1 白色固体。MS ： (ES/+)m/z ： 214(M+1)。C13H11NO2 理论值 213。 H NMR(400MHz， DMSO-d6)ppm 13.23(br.s.， 1H)， 7.78(d， 1H)， 7.50-7.35(m， 6H)， 2.53(s， 3H)。
     描述 55 ： 2- 甲基呋喃并 [3， 4-b] 吡啶 -5， 7- 二酮 (D55)
     向 100ml 圆底烧瓶中， 加入 6- 甲基 -2， 3- 吡啶二甲酸 (10g， 55.2mmol) 和乙酸酐 (26ml， 276mmol)， 并在氮气下于 100℃加热 5 小时。此后， 真空除去挥发物， 得到标题化合 1 DMSO-d6)δppm 8.41(d， 1H)， 7.82(d， 1H)， 物 D55(8.2g)， 为淡褐色固体。 H NMR(400MHz， 2.73(s， 3H)。
     描述 56 ： 6- 甲基 -2-[( 甲氧基 ) 羰基 ]-3- 吡啶甲酸 (D56)
     在 0℃下， 用 5 分钟， 将 2- 甲基呋喃并 [3， 4-b] 吡啶 -5， 7- 二酮 D55(3g) 分批加入 到搅拌下的 MeOH(20ml) 中。将混合物于 0℃搅拌 30 分钟， 然后在室温下再搅拌 2.5 小时。 将溶液减压蒸发， 并将残余物由甲苯 (50ml) 重结晶。过滤该固体， 并在高真空下干燥 30 分 钟， 得到第一批的标题化合物 D56(1.16g)， 为淡褐色固体。由甲苯溶液中沉淀出新的固体 ： 过滤该固体， 并在高真空下干燥 30 分钟， 得到第二批的标题化合物 D56(352mg)， 为淡黄色 固体。然后将甲苯溶液减压蒸发， 并将残余物再次由甲苯 (25ml) 重结晶。过滤该固体， 并 在高真空下干燥 30 分钟， 得到第三批的标题化合物 D56(615mg)， 为淡黄色固体。UPLC( 碱 性 GEN_QC) ： rt ＝ 0.23 分钟， 观察到的峰 ： 195(M+1)。C9H9NO4 理论值 196。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 13.61(br.s.， 1H)， 8.09-8.31(m， 1H)， 7.51(m， 1H)， 3.82(s， 3H)， 2.55(s， 3H)。
     描述 57 ： 3-({[(1， 1- 二甲基乙基 ) 氧基 ] 羰基 } 氨基 )-6- 甲基 -2- 吡啶甲酸甲 酯 (D57)
     将 6- 甲基 -2-[( 甲氧基 ) 羰基 ]-3- 吡啶甲酸 D56(1.15g) 悬浮于甲苯 (40ml) 中， 加入 DIPEA(1.25ml， 7.16mmol)， 使得该固体完全溶解。将该混合物在室温下搅拌 10 分钟， 然后以一份加入叠氮磷酸二苯酯 (1.35ml， 6.26mmol)， 并将混合物于回流下搅拌 1 小时。 将 溶液在室温下冷却， 以一份加入 t-BuOH(2.5ml， 26mmol)。然后将混合物于 70 ℃搅拌 1 小 时， 然后在室温下冷却， 加入 Et2O(50ml)， 并将生成的溶液用 NaHCO3 饱和溶液 (3×60ml) 洗 涤。将水相合并到一起， 用 Et2O(50ml) 反萃取。将两次的有机溶液合并到一起， 经 Na2SO4 干燥， 并减压蒸发， 得到粗的目标物质， 为淡黄色油状物。将该物质通过快速硅胶色谱法 (Biotage， EtOAc/Cy 由 10/90 至 70/30 ； Snap-100g 柱 ) 纯化。 得到标题化合物 D57(1.315g)， 为白色固体。UPLC( 碱性 GEN_QC) ： rt ＝ 0.68 分钟， 观察到的峰 ： 267(M+1)。C13H18N2O4 理 1 论值 266。 H NMR(400MHz， CDCl3)δppm 10.13(bs.， 1H)， 8.77(d， 1H)， 7.34(d， 1H)， 4.03(s， 3H)， 2.59(s， 3H)， 1.53-1.56(m， 9H)。
     描述 58 ： 3- 氨基 -6- 甲基 -2- 吡啶甲酸甲酯 (D58)将 3-({[(1， 1- 二 甲 基 乙 基 ) 氧 基 ] 羰 基 } 氨 基 )-6- 甲 基 -2- 吡 啶 甲 酸 甲 酯 D57(1.3g) 溶于 DCM(80ml) 中， 并将混合物于 0 ℃搅拌。用 3 分钟， 将 TFA(5ml， 64.9mmol) 的 DCM(10ml) 溶液滴加到该冷的混合物中。将生成的溶液于 0℃搅拌 30 分钟， 然后将混合 物在室温下放置过夜。用 3 分钟， 加入溶于 DCM(10ml) 中的 TFA(4ml， 51.9mmol)， 并将混合 物在室温下再次搅拌 5 小时。将溶液装填到 SCX-25g 柱上， 并将该柱首先用 DCM(100ml) 洗 脱， 然后用 MeOH(20ml) 洗脱。将该物质收集， 用 NH3(2M 的 MeOH 溶液， 100ml) 洗脱， 减压蒸 发氨溶液后， 得到标题化合物 D58(770mg)， 为白色固体。UPLC( 碱性 GEN_QC) ： rt ＝ 0.44 1 分钟， 观察到的峰 ： 167(M+1)。C8H10N2O2 理论值 166。 H NMR(400MHz， CDCl3)δppm 7.14(d， 1H)， 7.01(d， 1H)， 3.99(s， 3H)， 2.52(s， 3H)。
     描述 59 ： 3- 碘 -6- 甲基 -2- 吡啶甲酸甲酯 (D59)
     将 6M HCl 的水溶液 (4.5ml， 27.0mmol) 加入到 3- 氨基 -6- 甲基 -2- 吡啶甲酸甲 酯 D58(768mg) 中， 并将生成的淡黄色混合物依次用水 (4×5ml) 稀释， 并在 0℃ ( 内部温度 ) 下冷却 (chill)。用 1 分钟， 将亚硝酸钠 (480mg， 6.96mmol) 的水 (2ml) 溶液滴加到该混合物中。加 入后， 将混合物于 0℃搅拌 30 分钟， 然后用 1 分钟加入 KI(1.69g， 10.18mmol) 的水 (2ml) 溶 液， 从而形成深紫色的表层 (crust)( 放出适量的气体 )。将混合物搅拌 1 小时 ： 在此期间， 温度由 0℃至 +5℃。 然后将 EtOAc(50ml) 加入到搅拌的混合物中， 使得深色固体溶解。 加入 水 (50ml) 和 EtOAc(50ml)， 将全部混合物倒入到分液漏斗中。分离两相后， 将水相用 EtOAc 萃取。 将全部有机相合并到一起， 并用饱和的 NaHCO3 溶液洗涤 ； 通过加入先前所用的 NaHCO3 饱和溶液将酸性的水相中和。将生成的混合物用 EtOAc(2×50mls) 萃取。将所有的有机相 合并到一起， 经 Na2SO4 干燥， 并减压蒸发， 得到粗的目标物质， 为深褐色 / 紫色油状物。将该 物质通过硅胶色谱法 (Biotage SP4Snap-100g 柱， EtOAc/Cy 由 10/90 至 30/70) 纯化， 得到 淡褐色固体的标题化合物 D59(1.1g)。UPLC( 碱性 GEN_QC) ： rt ＝ 0.68 分钟， 观察到的峰 ： 1 278(M+1)。C8H8INO2 理论值 277。 H NMR(400MHz， CDCl3)δppm 8.12(d， 1H)， 7.01(d， 1H)， 4.01(s， 3H)， 2.58(s， 3H)。
     描述 60 ： 6- 甲基 -3-(2- 嘧啶基 )-2- 吡啶甲酸甲酯 (D60)
     在氮气下， 在室温下， 向搅拌下的 3- 碘 -6- 甲基 -2- 吡啶甲酸甲酯 D59(300mg)、 CsF(329mg， 2.166mmol) 和 Pd(Ph3P)4(50.0mg， 0.043mmol) 的 DMF(10ml) 悬 浮 液 中 加 入 2-( 三 丁 基 甲 锡 烷 基 ) 嘧 啶 (480mg， 1.299mmol)。 将 反 应 混 合 物 在 微 波 (Personal Chemistry) 下于 130℃搅拌 30 分钟。将反应混合物在 EtOAc 和 NaHCO3 饱和水溶液之间分 配， 将合并的有机相干燥， 得到粗产物， 将其通过硅胶色谱法 (SNAP KP-NH 55g ； Cy/EtOAc 15 倍柱体积， 由 100/0 至 70/30) 纯化。蒸发收集的级分， 得到白色固体的标题化合物 D60(101mg)。 UPLC( 碱性 GEN_QC) ： rt ＝ 0.56 分钟， 观察到的峰 ： 230(M+1)。 C12H11N3O2 理论值 1 229。 H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 8.92(d， 2H)， 8.49(d， 1H)， 7.44-7.63(m， 2H)， 3.75(s， 3H)， 2.57(s， 3H)。
     描述 61 ： 6- 甲基 -3-(2- 嘧啶基 )-2- 吡啶甲酸锂盐 (D61)
     向 6- 甲基 -3-(2- 嘧啶基 )-2- 吡啶甲酸甲酯 D60(100mg) 在 MeOH(4.5ml) 和水 (1.1ml) 中的溶液中加入 LiOH(13.58mg， 0.567mmol)， 将生成的混合物在 60℃下进行微波 辐射 85 分钟。此后， 减压除去溶剂， 得到白色固体的标题化合物 D61(100mg)。C11H8N3O2· Li+ 1 理论值 221。 H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 8.78(m， 2H)， 7.86(m， 1H)， 7.37(m， 1H)， 7.24(m， 1H)， 2.50(s， 3H)。
     描述 62 ： 3-(5， 5- 二甲基 -1， 3， 2- 二氧硼杂环己烷 -2- 基 )-6- 甲基 -2- 吡啶甲腈
     (D62)
     在氩气下将 2， 2， 6， 6- 四甲基哌啶 (3.49ml， 20.52mmol) 溶于无水 THF(25ml) 中， 并在 -30℃搅拌 ； 经 5 分钟加入 1.6M 的 BuLi 的己烷溶液 (13.33ml， 21.33mmol)( 温度不超 过 -25℃ )。将黄色溶液在 -30℃搅拌 20 分钟， 然后在 -78℃冷却， 并经 5 分钟加入硼酸三 (1- 甲基乙基 ) 酯 (4.38ml， 18.96mmol)( 温度不超过 -73℃ )。
     在 -78 ℃ 10 分 钟 后， 滴 加 6- 甲 基 -2- 吡 啶 甲 腈 (2.0g， 16.93mmol) 于 无 水 THF(14ml) 中的溶液 ( 经 20 分钟 )， 并维持内部温度低于 -73℃， 混合物成为深棕色。将混 合物在 -73 ℃搅拌 2 小时。将混合物通过在 -73 ℃滴加 AcOH(2.374ml， 41.5mmol) 来终止 ( 温度不超过 -60℃， 而且混合物变为亮橙色 )。撤去冷却浴， 并将混合物温热至室温 ： 在 此期间， 混合物变粘稠， 为了充分搅拌必须加入新的 THF(8ml)。将混合物在室温搅拌 10 分 钟， 然后一次性加入 2， 2- 二甲基 -1， 3- 丙二醇 (2.409g， 23.13mmol)， 并将混合物在室温搅 拌过夜。将溶剂蒸发， 并将橙色残余物用 DCM(100ml) 和 10％的 KH2PO4 水溶液 (100ml) 溶
     解。分离各相， 并将水相用 DCM(50ml) 反萃取。将合并的有机相用 10 ％的 KH2PO4 水溶液 (50ml) 洗涤。将 DCM 蒸发。将残余物溶于 Et2O(100ml)， 并用 0.05M NaOH(5×50ml， 在水相 中有硼酸酯 ) 萃取。将水相合并到一起， 并用 10％的 KH2PO4 水溶液 (50ml) 将 pH 调节至 pH ＝ 4 至 pH ＝ 5。将获得的黄色溶液用 AcOEt(3×200ml) 萃取。将合并的所有有机相干燥 (Na2SO4) 并蒸发， 得到标题化合物 D62(2.29g)， 其为黄色油状物， 其静置固化。C12H15BN2O2 理 1 论值 230。 H NMR(400MHz， CDCl3)δppm 7.97-8.15(m， 1H)， 7.31-7.36(m， 1H)， 3.85(m， 4H)， 2.52-2.73(s， 3H)， 0.97-1.10(m， 6H)。
     描述 63 ： 6- 甲基 -3-(2- 嘧啶基 )-2- 吡啶甲腈 (D63)
     A) 将异丙基氯化镁 -LiCl(37.9ml， 36.5mmol) 分批 ( 总共 10 分钟 ) 加入至冷却 至 -70℃ ( 内部温度 ) 的 3- 溴 -6- 甲基 -2- 吡啶甲腈 (4g， 20.30mmol) 在 THF(150ml) 中的 溶液中。将反应在该温度保持 15 分钟。然后经总共 1 小时将其慢慢温热至 -40℃。然后， 将其冷却至 -78℃并加入氯化锌 (3.32g， 24.36mmol)。将所得混合物在 1 小时内温热至室 温。 加入 Pd(Ph3P)4(2.346g， 2.030mmol)、 2- 氯嘧啶 (3g， 26.2mmol)， 并将混合物回流 ( 外部 温度 100℃ ) 直至起始氯嘧啶完全消耗 (3 小时 )。将反应混合物冷却至室温并倒入冷却至 10℃的水 (200ml) 中。然后将其用 EtOAc(5×200ml) 萃取。将收集的有机相 ( 含有大量胶 体物质和水 ) 用盐水 (200ml) 洗涤。 将水相经古氏 (goach) 滤器过滤， 并将固体物质用另外 的 EtOAc(2×300ml) 洗涤。 将收集的有机相经 Na2SO4 干燥过夜， 过滤并浓缩， 得到 (7g) 粗产 物， 将其纯化 (Biotage Sp1 在 240g Silica Anolgix 柱上， 用 25g 前置柱 (pre-column))，
     得到标题化合物 D63， 为黄色固体 (1.8g)。UPLC( 酸性 GEN_QC_SS) ： rt ＝ 0.58 分钟， 观察 到的峰 ： 197(M+1)。C11H8N4 理论值 196.
     B) 制备 D63 的另一个方法 ： 在氮气下在管形瓶中将 3-(5， 5- 二甲基 -1， 3， 2- 二 氧硼杂环己烷 -2- 基 )-6- 甲基 -2- 吡啶甲腈 D62(50.6mg) 溶于 1， 4- 二 烷 (1ml) 中， 然 后 依 次 加 入 2- 溴 嘧 啶 (42.0mg， 0.264mmol)、 CsF(67mg， 0.441mmol)、 Pd(Ph3P)4(12mg， 10.38μmol) 和 CuI(7mg， 0.037mmol)。然后将管形瓶盖上盖并在 65℃搅拌， 1 小时后在减 压下除去溶剂， 并将残余物在 AcOEt(10ml) 和 NaHCO3( 饱和溶液， 10ml) 之间分配。分离两 相， 并将水相用 AcOEt(2×10ml) 萃取。合并有机级分， 经 Na2SO4 干燥并在减压下蒸发， 获得 橙色油状残余物， 将其纯化 (Biotage， Snap 25g 硅胶柱， AcOEt/Cy ： 由纯 Cy 至 50 ∶ 50， 10 倍柱体积 )， 得到标题化合物 D63， 其为浅黄色固体 (27.6mg)。
     描述 64 ： 6- 甲基 -3-(2- 嘧啶基 )-2- 吡啶甲酸 (D64)
     A) 在 80℃， 将 6- 甲基 -3-(2- 嘧啶基 )-2- 吡啶甲腈 D63(0.8g) 在 6M 的 HCl 水溶 液 (40ml， 240mmol) 中反应 3 小时， 然后在真空下除去溶剂， 将所得粗产物纯化 (70g Varian C18 柱， 用 MeOH(120ml)， 然后用水 (120ml) 处理， 用水装填， 用水 (200ml) 清洗， 产物用 100 ％ MeOH 洗脱 )， 得到标题化合物 D64(0.6g)， 其为黄色固体。UPLC( 酸性 GEN_QC_SS) ： rt ＝ 0.30 分钟， 观察到的峰 ： 216(M+1)。C11H9N3O2 理论值 217。1H NMR(400MHz， DMSO-d6) δppm13.07(bs， 1H)， 8.78-9.01(m， 2H)， 8.39(m， 1H)， 7.39-7.67(m， 2H)， 2.56-2.67(s， 3H)。
     B) 制备 D64 的另一个方法如下所示 ： 将 6- 甲基 -3-(2- 嘧啶基 )-2- 吡啶甲腈 D63(0.481g) 悬 浮 于 EtOH(5ml) 中， 并 加 入 NaOH(0.490g， 12.26mmol) 在 水 (5ml) 中 的 溶 液。将黄色混合物在 100℃搅拌过夜。将黄色溶液冷却至 25℃， 并滴加 6M HCl(1.0ml) 直 至 pH ＝ 4.5。将溶剂除去， 得到黄色粉末， 将其在 50℃ / 真空干燥 1.5 小时， 得到标题化合 物 D64(1.242g)。
     描述 65 ： 6- 甲基 -3-(4- 甲基 -1， 3- 噻唑 -2- 基 )-2- 吡啶甲酸甲酯 (D65)
     将 4- 甲基 -2-( 三丁基甲锡烷基 )-1， 3- 噻唑 (150mg， 0.386mmol) 溶于 1， 4- 二烷 (2.5ml) 中。向该搅拌的溶液中加入 3- 碘 -6- 甲基 -2- 吡啶甲酸甲酯 D59(100mg)， 随后 加入 Pd(Ph3P)4(41.7mg， 0.036mmol)。
     将生成的橙色溶液在微波反应器中于 120℃加热 30 分钟。 将混合物装填到 SCX-5g 柱上， 并将该柱洗脱， 减压蒸发溶剂后， 得到无色油状的粗的目标物质， 然后将其通过快速 硅胶色谱法 (Biotage SNAP-10g 硅胶柱， EtOAc/Cy 25 ∶ 75) 纯化， 得到白色固体的标题化 合物 D65(74mg)。UPLC( 酸性 GEN_QC) ： rt ＝ 0.62 分钟， 观察到的峰 ： 249(M+1)。C12H12N2O2S理论值 248。1H NMR(400MHz， CDCl3)δppm 7.97(d， 1H)， 7.33(d， 1H)， 6.98(s， 1H)， 3.94(s， 3H)， 2.66(s， 3H)， 2.50(s， 3H)。
     描述 66 ： 6- 甲基 -3-(4- 甲基 -1， 3- 噻唑 -2- 基 )-2- 吡啶甲酸锂盐 (D66)
     在有盖的管形瓶中， 将 6- 甲基 -3-(4- 甲基 -1， 3- 噻唑 -2- 基 )-2- 吡啶甲酸甲酯 D65(73mg) 溶于 EtOH(1ml) 中， 然后将 LiOH(8.5mg， 0.355mmol) 的水 (0.5ml) 溶液以一份加 入。然后将混合物在室温下搅拌 3 小时。将溶剂减压蒸发， 得到淡黄色固体的标题化合物 D66(73mg)。UPLC( 碱性 GEN_QC) ： rt ＝ 0.36 分钟， 观察到的峰 ： 232(M-1).C11H9N2O2S Li+ 理 论值 233。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 8.04(d， 1H)， 7.22(d， 1H)， 7.08(d， 1H)， 2.39(s， 3H)， 2.42(s， 3H)。
     描述 67 ： 2- 氯 -6- 甲基 -3- 吡啶甲酸甲酯 (D67)
     在氮气下， 在室温下， 向搅拌下的 2- 氯 -6- 甲基 -3- 吡啶甲酸 (8g， 46.6mmol)( 购 自 Sigma-Aldrich#357847) 在 DCM(100ml) 和 MeOH(50.0ml) 中的溶液中加入 2M TMS- 重氮 甲烷的己烷溶液 (46.6ml， 93mmol)。将反应混合物在室温下搅拌 20 分钟。将溶剂除去， 得 1 到标题化合物 D67(7g)。MS ： (ES/+)m/z ： 186(M+1)。C8H8ClNO2 理论值 185。 H NMR(400MHz， CDCl3)δppm 8.10(d， 1H)， 7.18(d， 1H)， 3.96(s， 3H)， 2.61(s， 3H)。
     描述 68 ： 2- 乙烯基 -6- 甲基 -3- 吡啶甲酸甲酯 (D68)
     在 氮 气 下， 在 室 温 下， 向 搅 拌 下 的 2- 溴 -6- 甲 基 -3- 吡 啶 甲 酸 甲 酯 D67(2g)、 烷 (15ml) 溶液中以一份加入纯净的三丁基 ( 乙Pd(Ph3P)4(0.436g， 0.377mmol) 的 1， 4- 二烯基 ) 锡烷 (3.76g， 11.85mmol)。 将反应混合物在微波 Personal Chemistry 中于 100℃搅拌 30 分钟。 将溶剂除去， 得到粗的产物。 将其通过硅胶快速色谱法 (Companion ： 120g 柱， 由 Cy 至 Cy/EtOAc 1 ∶ 1 梯度洗脱 ) 纯化， 得到标题化合物 D68(1.9g)。UPLC( 碱性 GEN_QC) ： rt 1 ＝ 0.73 分钟。观察到的峰 ： 178(M+1)。C10H11NO2 理论值 177。 H NMR(400MHz， CDCl3)δppm 8.08(d， 1H)， 7.66(m， 1H)， 7.12(d， 1H)， 6.52(m， 1H)， 5.59(m， 1H)， 3.93(s， 3H)， 2.63(s， 3H)。
     描述 69 ： 2- 乙烯基 -6- 甲基 -3-(3- 甲基 -1， 2， 450二唑 -5- 基 ) 吡啶 (D69)102325770 A CN 102325783
     说明书45/71 页在氮气下， 在室温下， 向搅拌下的 60 ％ NaH 的油悬浮液 (0.903g， 22.57mmol) 和 4 分子筛在无水 THF(10ml) 中的悬浮液中加入乙酰胺肟 (0.836g， 11.29mmol)， 并将该反 应在室温下搅拌 30 分钟， 然后以一份加入 2- 乙烯基 -6- 甲基 -3- 吡啶甲酸甲酯 D68(1g) 在无水 THF(10ml) 中的溶液。 将反应混合物在微波 (Personal Chemistry) 下于 100℃加热 30 分钟。加入 NaHCO3 饱和的水溶液， 并将水层用 EtOAc 萃取， 将有机相通过疏水性玻璃料， 除去溶剂， 得到粗产物， 将其通过硅胶快速色谱法 (80g 柱， 由 Cy 至 Cy/EtOAc 40/60 梯度洗 脱 ) 纯化， 得到标题化合物 D69(308mg)。UPLC( 碱性 GEN_QC) ： rt ＝ 0.78 分钟。观察到的 1 峰： 202(M+1)。 C11H11N3O 理论值 201. H NMR(400MHz， CDCl3)δppm 8.21(d， 1H)， 7.83(m， 1H)， 7.22(d， 1H)， 6.65(m， 1H)， 5.69(m， 1H)， 2.67(s， 3H)， 2.52(s， 3H)。
     描述 70 ： 6- 甲基 -3-(3- 甲基 -1， 2， 4-二唑 -5- 基 )-2- 吡啶甲醛 (D70)
     在氮气下， 在室温下， 向搅拌下的 2- 乙烯基 -6- 甲基 -3-(3- 甲基 -1， 2， 4-二唑 -5- 基 ) 吡啶 D69(100mg) 在 THF(3ml) 和水 (4.5ml) 中的溶液中加入 4％ OsO4 的水溶液 (0.39ml， 0.05mmol)， 5 分钟后， 以一份加入高碘酸钠 (319mg， 1.491mmol)。将反应混合物在 室温下搅拌 2 小时。将混合物倒入到分液漏斗中， 用盐水洗涤， 将水层用 EtOAc 萃取， 在疏 水性玻璃料上分离两相， 将合并的有机溶剂除去， 得到粗的产物， 将其通过快速硅胶色谱法 (25g 柱， 由 Cy 至 Cy/EtOAc 80/20 梯度洗脱 ) 纯化， 得到标题化合物 D70(93mg)。UPLC( 碱 性 GEN_QC) ： rt 1 ＝ 0.50 分钟， rt 2 ＝ 0.55 分钟， 观察到的峰 ： 204(M+1)。C10H9N3O2 理论 1 值 203. H NMR(400MHz， CDCl3)δppm 10.55(s， 1H)， 8.21(m， 1H)， 7.53(m， 1H)， 2.78(s， 3H)， 2.52-2.56(m， 3H)。
     描述 71 ： 6- 甲基 -3-(3- 甲基 -1， 2， 4-二唑 -5- 基 )-2- 吡啶甲酸 (D71A/D71B)
     A) 在 0℃下， 向搅拌下的 6- 甲基 -3-(3- 甲基 -1， 2， 4-二唑 -5- 基 )-2- 吡啶甲醛 D70(90mg) 在 THF(3.00ml) 和水 (6ml) 中的溶液中加入固体 NaOH(17.72mg， 0.443mmol)， 10 分钟后， 以一份加入 KMnO4(140mg， 0.886mmol)。将反应混合物搅拌 10 分钟。当仍然冷 的时候， 将反应混合物在塞力特硅藻土 (celite) 上过滤， 并将塞力特硅藻土用 1M HCl 水溶 液和水洗涤。将 pH 为 1 的含水滤液通过 50g C18 柱 ( 用 MeOH、 水处理， 用水、 然后用 MeOH洗脱 )， 得到标题化合物 D71A(70mg)。MS ： (ES/-)m/z ： 218(M-1).C10H9N3O3 理论值 219。1H NMR(400MHz， CDCl3)δppm 8.02(d， 1H)， 7.60(d， 1H)， 2.77(s， 3H)， 2.55(s， 3H)。
     B) 制 备 D71 的 另 一 种 方 法 为 ：将 6- 甲 基 -3-(3- 甲 基 -1， 2， 4-二唑 -5- 基 )-2- 吡啶甲醛 D70(0.89mg) 溶于 DMSO(10ml) 和 pH ＝ 3 的缓冲液 (3ml) 的混合 该溶液变成淡黄色， 加入后， 物中， 并将溶液冷却至 0℃。加入 1M NaClO2 的水溶液 (16ml) ； 在室温下搅拌 2 小时。加入新的 pH ＝ 3 的缓冲液 (1.5ml)， 并继续搅拌 1 小时。将混合物 通过 70g C18 柱洗脱 ( 用 MeOH 并然后用水预先处理 ； 用水并然后用 MeOH 洗脱 )。将甲醇 级分合并， 并减压蒸发， 得到标题化合物 D71B(0.89g)。
     描述 72 ： 2- 氯 -N-(2- 羟基丁基 )-6- 甲基 -3- 吡啶甲酰胺 (D72)
     将 2- 氯 -6- 甲基 -3- 吡啶甲酸 (2.5g， 14.57mmol)( 购自 Sigma-Aldrich#357847) 溶 于 DMF(35ml) 中， 并 加 入 DIPEA(7.63ml， 43.7mmol)。 向 该 混 合 物 中 以 一 份 加 入 TBTU(5.15g， 16.03mmol)， 将 生 成 的 橙 色 溶 液 在 室 温 下 搅 拌 45 分 钟。 然 后 加 入 溶 于 DMF(5ml) 中的 1- 氨基 -2- 丁醇 (2.5g， 28.0mmol)， 将生成的混合物在室温下搅拌 90 分钟。 然后将混合物在冰箱中储存过周末。 将混合物在 NaHCO3 饱和溶液和 Et2O 之间分配 ； 将水层
     用 Et2O 萃取。然后将水层用 EtOAc 萃取。将由 Et2O 萃取液获得的有机相合并， 经 Na2SO4 干 燥， 并减压蒸发 ； 将油状残余物在 45℃下在高真空下干燥 2 小时， 得到第一批的粗产物， 将 其通过快速硅胶色谱法 (Biotage 100g 柱， EtOAc/Cy 由 30 ∶ 70 至 75 ∶ 25) 纯化。将由 Et2O 萃取液获得的有机相合并， 经 Na2SO4 干燥， 并减压蒸发 ； 将油状残余物在 45℃下在高真 空下干燥 1 小时， 得到第二批的粗产物， 通过快速硅胶色谱法 (Biotage 340g 柱， EtOAc/Cy 由 30 ∶ 70 至 75 ∶ 25) 纯化。 将进行两次纯化洗脱出来的级分合并到一起， 然后减压蒸发， 得到标题化合物 D72， 为淡黄色油状物 (3.62g)。UPLC( 碱性 GEN_QC) ： rt ＝ 0.45 分钟， 观 1 察到的峰 ： 243(M+1)。C11H15ClN2O2 理论值 242. H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 8.45(m， 1H)， 7.77(m， 1H)， 7.33(m， 1H)， 4.69(m， 1H)， 3.43-3.61(m， 1H)， 3.05-3.30(m， 2H)， 2.48(s， 3H)， 1.51(m， 1H)， 1.18-1.42(m， 1H)， 0.90(t， 3H)。
     描述 73 ： 2- 氯 -6- 甲基 -N-(2- 氧代丁基 )-3- 吡啶甲酰胺 (D73)
     将 2- 氯 -N-(2- 羟基丁基 )-6- 甲基 -3- 吡啶甲酰胺 D72(3.62g) 溶于 DCM(100ml) 中， 然后用 5 分钟， 向该搅拌的溶液中分批加入戴斯 - 马丁氧化剂 (6.75g， 15.91mmol)。将 混合物在室温下搅拌 45 分钟 ( 白色悬浮液 )。然后将混合物在 NaHCO3 饱和溶液和 DCM 之 间分配 ； 将水层用 DCM 萃取。将有机相合并， 经 Na2SO4 干燥， 并减压蒸发， 得到淡黄色固体 的粗的目标物质 (7.2g)。将该物质在冰箱中储存过夜， 通过快速硅胶色谱法 (Snap-340g柱， EtOAc/Cy 由 20 ∶ 80 至 80 ∶ 20) 纯 化， 得 到 标 题 化 合 物 D73(3.11g)， 为白色固 体。UPLC( 碱 性 GEN_QC) ： rt ＝ 0.50 分 钟。 观 察 到 的 峰 ： 241(M+1)。C11H13ClN2O2 理 论 值 1 240。 H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 8.82(m， 1H)， 7.81(m， 1H)， 7.37(m， 1H)， 4.09(d， 2H)， 3.30-3.35(s， 3H)， 2.53-2.59(m， 2H)， 0.97(t， 3H)。
     描述 74 ： 2- 氯 -3-(5- 乙基 -1， 3-唑 -2- 基 )-6- 甲基吡啶 (D74)将 2- 氯 -6- 甲基 -N-(2- 氧代丁基 )-3- 吡啶甲酰胺 D73(3.051g) 溶于 THF(100ml) 中， 并以一份加入 Burgess 试剂 (3.104g， 13.03mmol)。 将该淡黄色溶液在室温下搅拌 4.5 小 时， 然后加入新的 Burgess 试剂 (0.41g， 1.72mmol)， 并将混合物于 60℃搅拌 1.5 小时， 将溶 剂减压蒸发， 并将残余物在 NaHCO3 饱和溶液和 EtOAc 之间分配 ； 将水层用 EtOAc 萃取。 将有 机相合并， 并经 Na2SO4 干燥， 并减压蒸发， 得到粗的目标物质， 然后将其通过快速硅胶色谱 法 (Snap-100g 柱， EtOAc/Cy 由 20 ∶ 80 至 90 ∶ 10) 纯化。 减压蒸发后， 得到无色油状的标题 化合物 D74(1.7g)， 其在室温下静置慢慢固化， 和未反应的起始物料。UPLC( 碱性 GEN_QC) ： rt ＝ 0.77 分钟。观察到的峰 ： 223(M+1)。C11H11ClN2O 理论值 222。1H NMR(400MHz， CDCl3) δppm 8.21(d， 1H)， 7.21(d， 1H)， 6.96(s， 1H)， 2.80(m， 2H)， 2.62(s， 3H)， 1.35(t， 3H)。
     描述 75 ： 2- 乙烯基 -3-(5- 乙基 -1， 3-唑 -2- 基 )-6- 甲基吡啶 (D75)
     将 2- 氯 -3-(5- 乙 基 -1， 3-唑 -2- 基 )-6- 甲 基 吡 啶 D74(168mg)、0.061mmol)、 2- 乙 烯 基 -4， 4， 5， 5- 四 甲 基 -1， 3， 2- 二 氧 硼 杂 环 戊 烷 Pd(Ph3P)4(70mg， (dioxaborolane)(0.2ml， 1.179mmol) 和 K2CO3(209mg， 1.509mmol) 混合到一起， 然后加入 1， 4- 二 烷 (8ml) 和水 (3ml)。将混合物于 80℃搅拌 30 分钟。将混合物于 80℃再次搅拌 50 分钟。将溶剂减压蒸发， 并将残余物在 NaHCO3 饱和溶液和 Et2O 之间分配 ； 将水层用 Et2O 萃取。 将有机相合并， 并经 Na2SO4 干燥， 并减压蒸发， 得到粗的目标物质， 将其通过快速硅胶 色谱法 (Snap-25g 柱， EtOAc/Cy 由 5 ∶ 95 至 30 ∶ 70) 纯化， 得到白色固体的标题化合物 D75(135mg)。UPLC( 碱性 GEN_QC) ： rt ＝ 0.88 分钟， 观察到的峰 ： 215(M+1)。C13H14N2O 理论 1 值 214。 H NMR(400MHz， CDCl3)δppm 8.10(m， 1H)， 7.87(m， 1H)， 7.15(m 1H)， 6.92(s， 1H)， 6.56(m， 1H)， 5.61(m， 1H)， 2.68-2.87(m， 2H)， 2.63(s， 3H)， 1.34(t， 3H)。
     描述 76 ： 3-(5- 乙基 -1， 3-唑 -2- 基 )-6- 甲基 -2- 吡啶甲醛 (D76)将 2- 乙 烯 基 -3-(5- 乙 基 -1， 3-唑 -2- 基 )-6- 甲 基 吡 啶 D75(132mg) 溶 于THF(3ml) 和水 (3ml) 中。用 30 秒的时间， 向该搅拌的混合物中加入 4 ％ OsO4 的水溶液 (0.390ml， 0.050mmol)， 然后将生成的混合物在室温下搅拌 5 分钟。然后以一份加入高碘酸 钠 (329mg， 1.538mmol)， 将生成的混合物在室温下搅拌 70 分钟。然后将混合物在 NaHCO3 饱 和溶液和 Et2O 之间分配 ； 将水层用 Et2O 萃取。将有机相合并， 并经 Na2SO4 干燥， 并减压蒸 发， 得到褐色固体的标题化合物 D76(136mg)。UPLC( 碱性 GEN_QC) ： rt ＝ 0.65 分钟， 观察到 1 的峰 ： 217(M+1)。C12H12N2O2 理论值 216。 H NMR(400MHz， CDCl3)δppm10.75(s， 1H)， 8.25(d， 1H)， 7.45(d， 1H)， 6.98(s， 1H)， 2.76-2.91(m， 2H)， 2.74(s， 3H)， 1.35(t， 3H)。
     描述 77 ： 3-(5- 乙基 -1， 3-唑 -2- 基 )-6- 甲基 -2- 吡啶甲酸 (D77)
     将 3-(5- 乙 基 -1， 3-唑 -2- 基 )-6- 甲 基 -2- 吡 啶 甲 醛 D76(550mg) 溶 于DMSO(5ml) 和 pH ＝ 3 的柠檬酸缓冲液 (1.5ml) 中， 并将混合物在 0℃下冷却。用 10 分钟， 7.00mmol) 滴加到混合物中， 然后在室温下继续搅拌。依次 将 1M NaClO2 的水溶液 (7ml， 将新的 pH ＝ 3 的柠檬酸缓冲液 (1.5ml)、 新的 1M NaClO2 的水溶液 (3ml， 3.00mmol) 滴加 到混合物中， 然后将其在室温下再搅拌 30 分钟， 然后将全部混合物在冰箱中储存过夜。将 1MNaClO2 的水溶液 (1ml， 3.00mmol) 滴加到混合物中， 然后将其在室温下再搅拌 30 分钟。 将全部深色的混合物装填到 C18-70g 柱上 ( 用水然后用 MeOH 洗脱 )。减压蒸发甲醇级分 后， 得到粗的深褐色油状物， 其通过加入 Et2O(2ml) 固化。向该固体中加入丙酮 (2.5ml) 和 Et2O(3ml)。过滤该固体， 并在高真空下干燥 30 分钟， 得到深褐色固体 (23mg)。向该溶液中 加入 Et2O(8ml)， 并将所获得的混合物在冰箱中储存 70 分钟。过滤该固体， 并用 Et2O(3ml) 洗涤。将所有的有机溶液 ( 母液有机溶液和 Et2O 洗涤液 ) 合并， 减压蒸发， 并在 45℃下在 高真空下干燥 30 分钟， 得到褐色树胶状的标题化合物 D77(362mg)。 UPLC( 碱性 GEN_QC) ： rt 1 ＝ 0.35 分钟， 观察到的峰 ： 231(M-1).C12H12N2O3 理论值 232。 H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 8.20(d， 1H)， 7.50(d， 1H)， 7.05(s， 1H)， 2.61-2.82(m， 3H)， 2.55(s， 3H)， 1.23(m， 3H)。
     描述 78 ： 6- 甲基 -3-[( 三甲基甲硅烷基 ) 乙炔基 ]-2- 吡啶甲酸甲酯 (D78)
     在 10ml 圆底烧瓶中， 将 3- 碘 -6- 甲基 -2- 吡啶甲酸甲酯 D59(200mg)、 氯化双 ( 三苯基膦 ) 合钯 (II)(86mg， 0.123mmol)、 CuI(23.37mg， 0.123mmol) 和 DIPEA(0.391mL， 2.238mmol) 溶于 DMF(2ml) 中， 然后脱气。向该溶液中滴加三甲基甲硅烷基乙炔 (0.111ml， 0.794mmol)。于 23 ℃搅拌 30 分钟后， 加入水 (2ml)， 用 EtOAc 萃取， 将收集的有机层干燥 (Na2SO4)， 过滤， 并减压蒸发， 得到褐色油状物， 将其通过硅胶柱色谱法 (SNAP KP-Sil 10g ；
     用 Cy/EtOAc 15CV 由 1/0 至 8/2 洗脱 ) 纯化， 得到标题化合物 D78(178mg)， 为褐色油状物。 UPLC( 碱性 GEN_QC) ： rt ＝ 0.92 分钟。观察到的峰 ： 248(M+1)。C13H17NO2Si 理论值 247。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 7.92(d， 1H)， 7.46(d， 1H)， 3.88(s， 3H)， 0.10-0.34(m， 9H)。
     描述 79 ： 3- 乙炔基 -6- 甲基 -2- 吡啶甲酸甲酯 (D79)
     在 25ml 圆底烧瓶中， 将 6- 甲基 -3-[( 三甲基甲硅烷基 ) 乙炔基 ]-2- 吡啶甲 酸 甲 酯 D78(178mg) 溶 于 THF(4.8ml) 中， 并 在 0 ℃ 下 用 TBAF(1M 的 THF 溶 液 )(0.935ml， 0.935mmol) 处 理。 将 混 合 物 搅 拌 15 分 钟， 然 后 加 入 NaHCO3 饱 和 水 溶 液 (6ml) 和 EtOAc(10ml)。分离后， 将有机相用 NaHCO3 饱和水溶液洗涤。将收集的水层用 EtOAc 反萃 取， 将有机层与第一次的 EtOAc 合并到一起， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并减压蒸发。将得到的黑 色油状物通过硅胶色谱法 (SNAP KP-Sil 10g 柱 ； 用 Cy/EtOAc 15CV 由 1/0 至 8/2 洗脱 ) 纯 化。收集并蒸发级分， 得到固体的标题化合物 D79(83mg)。
     UPLC( 碱性 GEN_QC) ： rt ＝ 0.57 分钟。观察到的峰 ： 176(M+1)。C10H9NO2 理论值 1 175。 H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 7.96(d， 1H)， 7.49(d， 1H)， 4.55(s， 1H)， 3.32(s， 3H)， 2.55(s， 3H)。
     描述 80 ： 6- 甲基 -3-(3- 甲基 -5- 异唑基 )-2- 吡啶甲酸甲酯 (D80)将 (1z)-N- 羟基亚氨代乙酰氯 (ethanimidoyl chloride)(77mg， 0.822mmol) 的甲 苯 (2.2ml) 溶液冷却至 0 ℃， 加入 3- 乙炔基 -6- 甲基 -2- 吡啶甲酸甲酯 D79(60mg)， 随后 加入 TEA(0.119ml， 0.856mmol)。将生成的混合物于 130℃搅拌 1 小时。加入 EtOAc(10ml) 和 NH4Cl 饱和水溶液 (5ml)， 分离后， 将水相用 EtOAc 萃取。将收集的有机层干燥 (Na2SO4)， 过滤， 并减压蒸发， 得到褐色固体， 将其通过硅胶色谱法 (SNAP KP-Sil 25g ； 用 Cy/EtOAc 由 1 ∶ 0 至 6 ∶ 4 洗脱 ) 纯化。 由收集的级分得到标题化合物 D80(74mg)， 为白色固体。 UPLC( 碱 1 性 GEN_QC) ： rt ＝ 0.62 分钟。 观察到的峰 ： 233(M+1)。 C10H9NO2 理论值 232。 H NMR(500MHz， DMSO-d6)δppm 8.16(d， 1H)， 7.60(s， 1H)， 6.74(s， 1H)， 3.85(s， 3H)， 2.56(s， 3H)， 2.29(s， 3H)。
     描述 81 ： 6- 甲基 -3-(3- 甲基 -5- 异唑基 )-2- 吡啶甲酸锂盐 (D81)
     向 6- 甲 基 -3-(3- 甲 基 -5- 异唑 基 )-2- 吡 啶 甲 酸 甲 酯 D80(74mg) 在EtOH(3.5ml) 和水 (0.875ml) 中的溶液中加入 LiOH(9.92mg， 0.414mmol)， 将生成的混合 物于 23 ℃搅拌。6.5 小时后， 将溶剂减压除去， 得到白色固体的标题化合物 D81(86mg)。 UPLC( 碱 性 GEN_QC) ： rt ＝ 0.33 分 钟。 观 察 到 的 峰 ： 219(M+1)。C11H9N2O3-·Li+ 理 论 值 1 218。 H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 7.90(d， 1H)， 7.12(d， 1H)， 6.80(s， 1H)， 2.44(s， 3H)， 2.26(s， 3H)。
     描述 D82 ： 2- 氯 -N-(2- 羟基丙基 )-6- 甲基 -3- 吡啶甲酰胺 (D82)
     向 100ml 圆底烧瓶中， 加入 2- 氯 -6- 甲基 -3- 吡啶甲酸 (1g， 5.83mmol)， 并溶于 DMF(20ml) 中。向该溶液中加入 DIPEA(5.09ml， 29.1mmol) 和 TBTU(2.246g， 6.99mmol)， 并 将混合物在室温下搅拌 30 分钟。此后， 加入 1- 氨基 -2- 丙醇 (0.876g， 11.66mmol)， 并将 生成的溶液在室温下搅拌 14 小时。此后， 将反应混合物转移到含有盐水的分液漏斗中， 用 EtOAc 萃取。将合并的有机相干燥 (Na2SO4)， 并蒸发， 得到标题化合物 D82， 为粗的黄色油状 物 (2.1g)， 将其不需进一步纯化用于下一步骤。MS ： (ES/+)m/z ： 229(M+1)。C10H13ClN2O2 理 论值 228。
     描述 D83 ： 2- 氯 -6- 甲基 -N-(2- 氧代丙基 )-3- 吡啶甲酰胺 (D83)
     向 7ml 有盖的管形瓶中， 加入 2- 氯 -N-(2- 羟基丙基 )-6- 甲基 -3- 吡啶甲酰胺 D82(1.3g)、 DCM(2ml) 和戴斯 - 马丁氧化剂 (3.13g， 7.39mmol)， 将生成的混合物在室温 下搅拌 4 小时。此后， 除去溶剂， 并将粗产物通过硅胶柱色谱法 (DCM-MeOH ＝由 100/0 至 50/50) 纯化。由收集的级分得到粗的标题化合物 D83(1.1g)， 其不需进一步纯化而使用。 MS ： (ES/+)m/z ： 227(M+1)。C10H11ClN2O2 理论值 226.
     描述 D84 ： 2- 氯 -6- 甲基 -3-(5- 甲基 -1， 3-唑 -2- 基 ) 吡啶 (D84)
     在 7ml 螺旋盖管形瓶中， 将 2- 氯 -6- 甲基 -N-(2- 氧代丙基 )-3- 吡啶甲酰胺D83(1.1g) 溶于 THF(2ml) 中， 加入 Burgess 试剂 (1.041g， 4.37mmol)， 并将反应混合物于 50℃搅拌 2 小时。 此后， 真空除去挥发物， 并将粗产物通过硅胶柱色谱法 (flash master， 硅 胶 NH2 柱， Cy/EtOAc ＝由 100/0 至 80/20) 纯化， 得到标题化合物 D84(430mg)， 为灰白色固 体。MS ： (ES/+)m/z ： 209(M+1)。C10H9ClN2O 理论值 208.
     描述 D85 ： 2- 乙烯基 -6- 甲基 -3-(5- 甲基 -1， 3-唑 -2- 基 ) 吡啶 (D85)
     向 微 波 管 形 瓶 中， 加 入 2- 氯 -6- 甲 基 -3-(5- 甲 基 -1， 3-唑 -2- 基 ) 吡 啶D84(0.365g)、 Pd(Ph3P)4(0.091g， 0.079mmol)， 并溶于 1， 4- 二烷 (5ml) 中。将混合物除气， 并充入氮气， 然后加入三丁基 ( 乙烯基 ) 锡 (0.506ml， 1.732mmol)， 并将反应混合物于 95℃搅拌 1.5 小时。将混合物通过塞力特硅藻土填料 (pad) 过滤， 用 EtOAc(20ml) 洗涤， 真 空除去溶剂， 得到标题化合物 D85(1.15g)， 为深黄色油状物。该物质不需进一步纯化用于 下一步骤。UPLC( 碱性 GEN_QC) ： rt ＝ 0.79 分钟， 观察到的峰 ： 201(M+1)。C12H12N2O 理论值 200.
     描述 86 ： 6- 甲基 -3-(5- 甲基 -1， 3-唑 -2- 基 )-2- 吡啶甲醛 (D86)
     在 7ml 螺旋盖管形瓶中， 将 2- 乙烯基 -6- 甲基 -3-(5- 甲基 -1， 3-唑 -2- 基 )吡 啶 D85(1.15g) 溶 于 THF(10ml) 中， 加 入 水 (15ml)， 随 后 加 入 2.5 ％ wt 四 氧 化 锇 的 甲 基 -2- 丙 醇 溶 液 (3.61ml， 0.287mmol)。5 分 钟 后， 在 搅 拌 下 加 入 高 碘 酸 钠 (1.843g， 8.61mmol)， 并将混合物于室温下搅拌。将混合物与 EtOAc 和盐水转移到分液漏斗中， 并 将混合物用 EtOAc 萃取。将合并的有机相干燥 (Na2SO4)， 并真空蒸发， 得到标题化合物 D86(0.343g)， 为褐色的粗的油状物。UPLC( 碱性 GEN_QC) ： rt ＝ 0.55 分钟， 观察到的峰 ： 203(M+1)。C11H10N2O2 理论值 202.
     描述 D87 ： 6- 甲基 -3-(5- 甲基 -1， 3-唑 -2- 基 )-2- 吡啶甲酸 (D87A/D87B)
     A) 在 250ml 烧 瓶 中， 将 6- 甲 基 -3-(5- 甲 基 -1， 3-唑 -2- 基 )-2- 吡 啶 甲醛 D86(343mg) 溶于 THF(3.50ml) 和水 (7ml) 中， 向该混合物中加入氢氧化钠 (67.8mg， 1.696mmol) 和高锰酸钾 (536mg， 3.39mmol)， 并在室温下搅拌 5 分钟。 将有机溶剂真空除去，并将残余物用塞力特硅藻土填料 (pad) 过滤， 用 1M HCl 水溶液洗涤。 将水层装填到 Varian C18 柱 (50g， 用 5CV 的水洗涤， 并用 1CV 的 MeOH 洗脱 ) 上， 得到黄色油状物 (126mg)。 将其通 过硅胶色谱法 (KP-Sil 25g 柱 ； DCM/MeOH/AcOH 94/4/2) 纯化， 得到无色透明固体， 将其用 Et2O(1ml) 研磨， 得到标题化合物 D87A(30mg)， 为白色固体。 MS(ES-) 观察到的峰 217(M-1)， C11H10N2O3 理论值 218.HPLC walkup rt ＝ 4.40 分钟。
     B) 用 于 制 备 D87 的 另 一 种 方 法 为 ： 将 6- 甲 基 -3-(5- 甲 基 -1， 3-唑 -2- 基 )-2- 吡啶甲醛 D86(92mg， 0.455mmol) 溶于 DMSO(2ml) 中。将混合物在 0 ℃下冷 却， 并加入 pH ＝ 3 缓冲溶液 (3ml)， 然后在 5 分钟内滴加亚氯酸钠 (103mg， 1.137mmol) 的 水 (2.5ml) 溶液。使该反应达到室温， 并搅拌 1 小时。将该反应用水 (10ml) 稀释， 并用 EtOAc(10ml×10) 反萃取。只有少量的产物萃取到有机相中， 在水相中仍然残留有标题化 合物。将合并的有机相经 Na2SO4 干燥， 并蒸发， 得到橙色油状物。将水相装填到 C18 柱 ( 用 MeOH 并然后用 H2O 处理， 用水和 MeOH 洗脱 ) 上， 得到黄色油状物， 将其与先前由有机相获得 的橙色油状物合并到一起。将深色的油状物使用 C18 柱 (25g， 使用 MeOH 并然后用水处理， 用水和 MeOH 洗脱 ) 再次纯化， 得到深色的油状物， 将其再次溶于 Et2O 中。蒸发溶剂， 得到 粗的褐色固体， 将其用丙酮 (1ml) 和 Et2O(2ml) 的混合物研磨， 将橙色液体除去， 并将产物 真空干燥， 得到标题化合物 D87B(62mg)。MS ： (ES+)m/z ： 219(M+1)。C11H10N2O3 理论值 218。 H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 13.45(br.s.， 1H)， 8.18(m， 1H)， 7.49(m， 1H)， 7.03(m， 1H)， 2.54(s， 3H)， 2.34-2.39(m， 3H)。 实施例
     1实施例 1 ： 2-[((2S)-1-{[3-( 乙氧基 )-6- 甲基 -2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌啶基 ) 甲基 ]-6- 氟 -8- 甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶盐酸盐 (E1) ：在 氮 气 下， 在 室 温 下， 向 3-( 乙 氧 基 )-6- 甲 基 -2- 吡 啶 甲 酸 D37(0.0278g) 和 TBTU(0.0519g， 0.162mmol， 2.000) 的 无 水 DMF(1.5ml) 溶 液 中 加 入 DIPEA(56μl， 0.323mmol， 4.0equiv.)， 并将反应混合物搅拌 20 分钟。然后， 在氮气下， 加入 6- 氟 -8- 甲 基 -2-[(2S)-2- 哌啶基甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 D12(0.020g， 由描述 12 中获得的粗物 质 ) 的无水 DMF(1.5ml) 溶液， 并将反应混合物在室温下搅拌过夜。将该反应停止 ； 将溶剂 蒸发至干。加入 DCM 和 NH4Cl 饱和水溶液。将水层用 DCM 萃取 4 次。将有机层经 Na2SO4 干 燥， 并蒸发。 将粗的化合物通过 Fraction Lynx( 用碱性水相的方法， 使用水 /CH3CN 梯度 ) 纯 化。 得到标题化合物 E1 的游离碱， 为黄色薄膜状物质 (0.0278g)。 MS ： (ES/+)m/z ： 411(M+1)。 C23H27FN4O2 理论值 410。
     将 2-[((2S)-1-{[3-( 乙 氧 基 )-6- 甲 基 -2- 吡 啶 基 ] 羰 基 }-2- 哌 啶 基 ) 甲
     基 ]-6- 氟 -8- 甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (0.0248g) 溶于 2ml 的 DCM 中。将生成的透明溶 液冷却至 0℃。然后将 1M HCl 的 Et2O 溶液 (0.108mmol， 3equiv) 滴加到该溶液中。将反 应混合物于 0℃搅拌 10 分钟， 在室温下搅拌 30 分钟。该反应混合物的纯度通过 LC-MS( 在 流动的水相中的盐酸盐 (chlorydrate salt) 的水解 ) 检测。将溶剂除去。得到标题化 合物 E1(0.0234g)， 为黄色粉末。MS ： (ES/+)m/z ： 411(M-HCl+1)。C23H27FN4O2·HCl 理论值 1 446。 H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 8.46-8.60(m， 1H)， 7.79(s， 1H)， 7.01-7.43(m， 3H)， 5.01-5.19(m， 1H)， 3.72-4.08(m， 2H)， 2.84-3.27(m， 4H)， 2.15-2.43(m， 6H)， 1.26-1.93(m， 6H)， 1.07-1.28(m， 3H)。
     实施例 2 ： 6- 氟 -8- 甲基 -2-{[(2S)-1-({6- 甲基 -3-[(2- 甲基丙基 ) 氧基 ]-2- 吡 啶基 } 羰基 )-2- 哌啶基 ] 甲基 } 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (E2) ：
     将 6- 甲 基 -3-[(2- 甲 基 丙 基 ) 氧 基 ]-2- 吡 啶 甲 酸 D42(0.030g)、 6- 氟 -8- 甲 基 -2-[(2S)-2- 哌 啶 基 甲 基 ] 咪 唑 并 [1， 2-a] 吡 啶 D12/13(0.039g)、 TBTU(0.0506g， 0.158mmol) 和 DIPEA(0.050ml， 0.287mmol) 在无水 DMF(2ml) 中的溶液在室温下搅拌过夜。 将反应混合物蒸发至干， 用 DCM(2ml) 稀释， 并用饱和的 NaHCO3 水溶液 (2×3ml) 洗涤。 使用 分相管将有机层收集， 并浓缩。通过快速硅胶色谱法 (SPl， 25M 柱， 使用 DCM/MeOH) 纯化， 得 到标题化合物 E2(0.0375g)， 为黄色固体。 MS ： (ES/+)m/z ： 439(M+1)。 C25H31FN4O2 理论值 438。 1 H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm ： 8.57-8.52(m， 1H)， 7.76-7.82(s， 1H)， 7.36-7.41(d， 1H)， 7.18-7.22(d， 1H)， 7.11-7.14(m， 1H)， 5.06-5.11(m， 1H)， 3.48-3.81(m， 2H)， 2.87-3.25(m， 4H)， 2.49-2.48(s， 3H)， 2.34-2.41(s， 3H)， 1.89-1.20(m， 7H)， 0.81-0.91(d， 6H)。
     实施例 3 ： 6， 8- 二甲基 -2-{[(2S)-1-({6- 甲基 -3-[(2- 甲基丙基 ) 氧基 ]-2- 吡 啶基 } 羰基 )-2- 哌啶基 ] 甲基 } 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (E3) ：
     将 6- 甲基 -3-[(2- 甲基丙基 ) 氧基 ]-2- 吡啶甲酸 D42(0.0263g) 溶于 1ml 的 DMF 中， 向该溶液中加入 TBTU(0.0471g， 0.147mmol)、 DIPEA(0.110ml， 0.629mmol)， 并将溶液在室温下搅拌 30 分钟。然后在 0℃下， 加入溶于 1ml 的 DMF 中的 6， 8- 二甲基 -2-[(2S)-2- 哌 啶基甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 D17(0.0255g)， 并将该反应在室温下搅拌 2 小时。 将反应混 合物用饱和的 NaHCO3 水溶液稀释， 并用 DCM 洗涤， 将有机层用盐水 / 冰洗涤， 并通过分相器 过滤， 将溶剂真空除去。 将粗产物通过快速色谱法 (SP4， 25M NH 柱， 用 EtOAc 100％洗脱 ) 纯 化。 将溶剂真空除去， 得到标题化合物 E3(0.042g)。 MS ： (ES/+)m/z ： 435(M+1)。 C26H34N4O2 理 1 论值 434。 H NMR(400MHz， CDCl3)δppm ： 7.71-7.75(m， 1H)， 7.64(s， 1H)， 7.02-7.09(m， 2H)， 6.75-6.80(m， 1H)， 5.32-5.43(m， 1H)， 3.45-3.74(m， 2H)， 3.13-3.42(m， 3H)， 2.91-3.03(m， 1H)， 2.57(s， 3H)， 2.49(s， 3H)， 2.25(s， 3H)， 1.51-1.92(m， 7H)， 0.77-0.89(m， 6H)。
     实施例 4 ： 8- 甲基 -2-[((2S)-1-{[6- 甲基 -3-( 丙氧基 )-2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌 啶基 ) 甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (E4)
     将 6- 甲基 -3-( 丙氧基 )-2- 吡啶甲酸 D40(0.0234g) 溶于 1ml 的 DMF 中， 然后加 入 TBTU(0.049g， 0.153mmol) 和 DIPEA(0.114ml， 0.654mmol)， 并将该反应搅拌 40 分钟。在 每个反应中加入 8- 甲基 -2-[(2S)-2- 哌啶基甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 D4(0.025g)， 并 继续搅拌 2 小时。真空除去 DMF， 并将残余物溶于 2ml 的 DCM 中。将该有机溶液用 1ml 的 NaHCO3 饱和水溶液洗涤， 经无水 Na2SO4 干燥， 过滤， 并真空浓缩至干。将生成的粗产物通 过快速色谱法 (Biotage SP， NH 柱尺寸 25+M， 使用 EtOAc 作为洗脱剂 ) 纯化。回收得到标 题化合物 E4(0.040g)。MS ： (ES/+)m/z ： 407(M+1)。C24H30N4O2 理论值 406。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm ： 8.20-8.52(m， 1H) ， 7.77-7.90(m， 1H)， 6.54-7.45(m， 4H)， 5.06-5.21(m， 1H)， 3.66-3.96(m， 2H)， 2.89-3.26(m， 4H)， 2.38(s， 3H)， 2.08-2.27(m， 3H)， 1.13-1.88(m， 8H)， 0.80-0.95(m， 3H)。
     实施例 5 ： 2-{[(2S)-1-({3-[( 环 丙 基 甲 基 ) 氧 基 ]-6- 甲 基 -2- 吡 啶 基 } 羰 基 )-2- 哌啶基 ] 甲基 }-8- 甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (E5) ：
     按照类似于实施例 4 中所述的方法， 使 3-[( 环丙基甲基 ) 氧基 ]-6- 甲基 -2- 吡啶 甲酸 D41(0.0248g) 与 8- 甲基 -2-[(2S)-2- 哌啶基甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 D4(0.025g) 反应， 得到标题化合物 E5(0.035g)。MS ： (ES/+)m/z ： 419(M+1)。C25H30N4O2 理论值 418。1H
     NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm ： 8.33(d， 1H)， 7.80(s， 1H)， 7.40(d， 1H)， 7.21(d， 1H)， 6.99(d， 1H)， 6.75(t， 1H)， 5.09-5.18(m， 1H)， 3.74-3.87(m， 2H)， 3.18-3.29(m， 2H)， 2.88-3.11(m， 2H)， 2.48(s， 3H)， 2.32(s， 3H)， 1.31-1.90(m， 6H)， 1.04-1.15(m， 1H)， 0.44-0.54(m， 2H)， 0.21-0.32(m， 2H)。
     实施例 6 ： 8- 甲基 -2-{[(2S)-1-({6- 甲基 -3-[(1- 甲基乙基 ) 氧基 ]-2- 吡啶基 } 羰基 )-2- 哌啶基 ] 甲基 } 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (E6) ：
     按照类似于实施例 5 中所述的方法， 使 6- 甲基 -3-[(1- 甲基乙基 ) 氧基 ]-2- 吡 啶 甲 酸 D39(0.0234g) 与 8- 甲 基 -2-[(2S)-2- 哌 啶 基 甲 基 ] 咪 唑 并 [1， 2-a] 吡 啶 D4(0.025g) 反应， 得到标题化合物 E6(0.041g)。MS ： (ES/+)m/z ： 407(M+1)。C24H30N4O2 理论 1 值 406。 H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 8.30-8.36(m， 1H)， 7.80(s， 1H)， 7.36-7.46(m， 1H)， 7.21(d， 1H)， 6.97-7.03(m， 1H)， 6.72-6.80(m， 1H)， 5.08-5.20(m， 1H)， 4.54-4.65(m， 1H)， 2.85-3.29(m， 4H)， 2.40(s， 3H)， 2.33(s， 3H)， 1.31-1.85(m， 6H)， 1.11-1.27(m， 6H)
     实施例 7 ： 2-[((2S)-1-{[4- 氯 -3-( 乙氧基 )-6- 甲基 -2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌 啶基 ) 甲基 ]-8- 甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶盐酸盐 (E7) ：
     将 4- 氯 -3-( 乙 氧 基 )-6- 甲 基 -2- 吡 啶 甲 酸 D43(0.022g，由 描 述 43 中 所 获 得 的 粗 物 质 ) 溶 于 DMF(0.5ml) 中， 加 入 TBTU(0.0459g， 0.143mmol) 然 后 加 入 DIPEA(0.107ml， 0.613mmol)。将生成的混合物在室温下搅拌 30 分钟。向该溶液中加入 8- 甲基 -2-[(2S)-2- 哌啶基甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 D4(0.0234g) 的 DMF(0.5ml) 溶 液， 并搅拌过夜。加入 DCM(3ml) 和饱和的 NaHCO3 水溶液 (2ml)， 并将水相用 DCM(2×2ml) 萃取。将有机层通过分相柱过滤， 并蒸发， 得到黄色油状物， 将其通过快速色谱法 (Biotage SP4， NH 12+M 柱， 用 Cy/EtOAc 由 100/0 至 40/60 洗脱 ) 纯化， 得到类白色固体的标题化合 物 E7 的游离碱 2-[((2S)-1-{[4- 氯 -3-( 乙氧基 )-6- 甲基 -2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌啶
     基 ) 甲基 ]-8- 甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (0.018g)。MS ： (ES/+)m/z ： 427(M+1)。C23H27ClN4O2 1 理论值 426。 H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 8.28-8.37(m， 1H)， 7.81(s， 1H)， 7.50(s， 1H)， 6.95-7.03(m， 1H)， 6.71-6.77(m， 1H)， 5.10-5.19(m， 1H)， 3.74-3.96(m， 2H)， 2.86-3.28(m， 4H)， 2.43(s， 3H)， 2.30(s， 3H)， 1.31-1.89(m， 6H)， 1.09-1.19(m， 3H)。
     向 2-[((2S)-1-{[4- 氯 -3-( 乙氧基 )-6- 甲基 -2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌啶基 ) 甲 基 ]-8- 甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (0.015g) 的无水 DCM(1ml) 溶液中加入 1MHCl 的 Et2O 溶 液 (0.053ml， 0.053mmol)， 并搅拌 30 分钟。减压除去溶剂， 然后用无水 Et2O(1ml) 研磨， 将 溶剂通过抽吸除去， 将该固体在减压下干燥。得到类白色固体的标题化合物 E7(0.0155g)。 HPLC(walk-up) ： rt ＝ 4.18min。MS ： (ES/+)m/z ： 427(M-HCl+1)。C23H27ClN4O2·HCl 理 论 值 463。
     实施例 8 ： 7， 8- 二甲基 -2-{[(2S)-1-({6- 甲基 -3-[(2- 甲基丙基 ) 氧基 ]-2- 吡 啶基 } 羰基 )-2- 哌啶基 ] 甲基 } 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (E8) ：
     将 6- 甲基 -3-[(2- 甲基丙基 ) 氧基 ]-2- 吡啶甲酸 D42(0.034g) 溶于 1ml 的 DMF 中， 向该溶液中加入 TBTU(0.061g， 0.190mmol)、 DIPEA(0.142ml， 0.814mmol)， 并将溶液在室 温下搅拌 30 分钟。然后， 在 0℃下加入溶于 lml 的 DMF 中的 7， 8- 二甲基 -2-[(2S)-2- 哌啶 基甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 D22(0.033g)， 并将该反应在室温下搅拌 2 小时。将反应混 合物用饱和的 NaHCO3 水溶液稀释， 并用 DCM 洗涤， 将有机层用盐水 / 冰洗涤， 通过分相器过 滤， 将溶剂真空除去。将粗产物通过快速色谱法 (SP4， NH 25M 柱， 用 EtOAc 100％洗脱 ) 纯 化。将溶剂真空除去， 得到标题化合物 E8(0.0485g)。MS ： (ES/+)m/z ： 435(M+1)。C26H34N4O2 1 理 论 值 434。 H NMR(400MHz， CDCl3)δppm 7.80-7.85(m， 1H)， 7.64(s， 1H)， 6.95-7.17(m， 2H)， 6.48-6.56(m， 1H)， 5.33-5.42(m， 1H)， 3.54-3.75(m， 2H)， 2.93-3.42(m， 4H)， 2.53(s， 3H)， 2.49(s， 3H)， 2.31(s， 3H)， 1.50-1.91(m， 7H)， 0.77-0.90(m， 6H)。
     实施例 9 ： 2-{[(2S)-1-({3-[( 环 丙 基 甲 基 ) 氧 基 ]-6- 甲 基 -2- 吡 啶 基 } 羰 基 )-2- 哌啶基 ] 甲基 }-7， 8- 二甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶盐酸盐 (E9) ：
     将 3-[( 环丙基甲基 ) 氧基 ]-6- 甲基 -2- 吡啶甲酸 D41(0.0302g) 溶于 1ml 的 DMF 中， 向该溶液中加入 TBTU(0.0547g， 0.170mmol) 和 DIPEA(0.127ml， 0.730mmol)， 并将溶液 在室温下搅拌 1 小时。 然后， 在 0℃下加入溶于 DMF(1ml) 中的 7， 8- 二甲基 -2-[(2S)-2- 哌啶 基甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 D22(0.0296g)， 并将该反应在室温下搅拌 3 小时。 将溶剂真空 除去， 将粗产物通过快速色谱法 (NH 25M 柱， 由 Cy 80％ ： EtOAc 20％， 2CV， 至 EtOAc 100％ 洗脱 ) 纯化。 收集级分， 除去溶剂， 得到标题化合物 E9 的游离碱 2-{[(2S)-1-({3-[( 环丙基 甲基 ) 氧基 ]-6- 甲基 -2- 吡啶基 } 羰基 )-2- 哌啶基 ] 甲基 }-7， 8- 二甲基咪唑并 [1， 2-a] (ES/+)m/z ： 434(M-HCl+1)。C26H32N4O2l 吡啶 (0.044g)。HPLC(walk-up) ： rt ＝ 3.53min.MS ： 1 理论值 433。 H NMR(500MHz， DMSO-d6)δppm 8.20(d， 1H)， 7.70(s， 1H)， 7.11-7.41(m， 2H)， 6.67(d， 1H)， 5.02-5.20(m， 1H)， 3.71-3.87(m， 2H)， 2.82-3.31(m， 4H)， 2.18-2.50(m， 9H)， 1.00-1.88(m， 7H)， 0.45-0.53(m， 2H)， 0.18-0.31(m， 2H)。
     将 2-{[(2S)-1-({3-[( 环丙基甲基 ) 氧基 ]-6- 甲基 -2- 吡啶基 } 羰基 )-2- 哌啶 基 ] 甲基 }-7， 8- 二甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (0.042g) 溶于 Et2O(1ml) 中， 向该溶液中滴加 HCl 的 Et2O 溶液 (1ml， 1.000mmol)。 将混合物搅拌 15 分钟， 将溶剂除去， 并将残余物用 Et2O 洗涤几次。将该固体干燥， 得到标题化合物 E9(0.044mg)。HPLC(walk-up) ： rt ＝ 3.56min。 1
     MS ： (ES/+)m/z ： 434(M-HCl+1)。C26H32N4O2·HCl 理 论 值 469。 H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 14.23(br.s.， 1H)， 8.59-8.74(m， 1H)， 7.90-8.14(m， 1H)， 7.11-7.55(m， 3H) ， 5.14-5.32(m ， 1H) ， 2.55-3.88(m ， 6H) ， 2.30-2.53(m ， 9H) ， 0.93-2.07(m ， 7H) ， 0.11-0.68(m， 4H)。
     实施例 10 ： 2-[((2S)-1-{[3-( 乙氧基 )-6- 甲基 -2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌啶基 ) 甲基 ]-7， 8- 二甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶盐酸盐 (E10) ：
     将 3-( 乙氧基 )-6- 甲基 -2- 吡啶甲酸 D37(0.0264g) 溶于 1ml 的 DMF 中， 向该溶液中加入 TBTU(0.0547g， 0.170mmol) 和 DIPEA(0.127ml， 0.730mmol)， 并将溶液在室温下搅拌 1 小时。然后， 在 0℃下加入溶于 DMF(1ml) 中的 7， 8- 二甲基 -2-[(2S)-2- 哌啶基甲基 ] 咪 唑并 [1， 2-a] 吡啶 D22(0.0296g)， 并将该反应在室温下搅拌 3 小时。 将溶剂真空除去， 并将 残余物通过快速色谱法 (NH 25M 柱， 由 Cy 80％∶ EtOAc 20％， 2CV 至 EtOAc 100％洗脱 ) 纯 化。收集级分， 除去溶剂， 得到标题化合物 E10 的游离碱 2-[((2S)-1-{[3-( 乙氧基 )-6- 甲 基 -2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌啶基 ) 甲基 ]-7， 8- 二甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (0.0374g)。 HPLC(walk-up) ： rt ＝ 3.24min.MS ： (ES/+)m/z ： 408(M+1)。C24H30N4O2 理论值 407。 1
     H NMR(500MHz， DMSO-d6)δppm 8.20(d， 1H)， 7.68(s， 1H)， 7.12-7.43(m， 2H)， 6.65(d ， 1H) ， 5.06-5.14(m ， 1H) ， 3.93-4.06(m ， 2H) ， 2.83-3.25(m ， 4H) ， 2.39(s ， 3H) ， 2.19-2.29(m， 6H)， 1.29-1.85(m， 6H)， 1.20-1.26(m， 3H)。
     将 2-[((2S)-1-{[3-( 乙氧基 )-6- 甲基 -2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌啶基 ) 甲基 ]-7， 8- 二甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (0.0355g) 溶于 Et2O(1ml) 中， 滴加 HCl 的 Et2O 溶液 (1ml， 1.000mmol)， 并将混合物在室温下搅拌 15 分钟。然后将溶剂除去， 并将残余物用 Et2O 洗 涤几次。将该固体干燥， 得到标题化合物 E10(0.0371g)。HPLC(walk-up) ： rt ＝ 3.22min. 1 MS ： (ES/+)m/z ： 408(M-HCl+1)。C24H30N4O2·HCl 理 论 值 442。 H NMR(400MHz， DMSO-d6) δ ppm 14.21(br.s. ， 1H) ， 8.52-8.78(m ， 1H) ， 7.88-8.22(m ， 1H) ， 7.08-7.62(m ， 3H) ， 5.19-5.33(m， 1H)， 3.87-4.14(m， 2H)， 2.65-3.70(m， 4H)， 2.27-2.55(m， 9H)， 1.29-2.01(m， 6H)， 1.02-1.18(m， 3H)。
     实施例 11 ： 7， 8- 二甲基 -2-[((2S)-1-{[6- 甲基 -3-( 丙氧基 )-2- 吡啶基 ] 羰 基 }-2- 哌啶基 ) 甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶盐酸盐 (E11a， E11b， E11c) ：
     将 6- 甲 基 -3-( 丙 氧 基 )-2- 吡 啶 甲 酸 D40(0.307g) 溶 于 10ml 的 DMF 中， 向该 溶 液 中 加 入 TBTU(0.589g， 1.835mmol) 和 DIPEA(1.374ml， 7.87mmol)。 将 该 反 应 在 N2 气 氛下搅拌 1 小时， 然后加入 7， 8- 二甲基 -2-[(2S)-2- 哌啶基甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 D22(0.319g)， 并将该反应再搅拌 2 小时。 将溶剂真空除去， 将粗产物通过快速色谱法 (SP4， 40M NH 柱， 由 Cy 80％∶ EtOAc 20％至 EtOAc100％洗脱 ) 纯化。将级分收集， 并将溶剂真 空除去， 得到标题化合物 E11a 的游离碱 7， 8- 二甲基 -2-[((2S)-1-{[6- 甲基 -3-( 丙氧 基 )-2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌啶基 ) 甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (0.250g)。 HPLC(walk-up) ： 1 rt ＝ 4.5 分钟。 C25H32N4O2 理论值 420。 H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 8.21(d， 1H)， 7.69(s， 1H)， 7.12-7.45(m， 2H)， 6.67(d， 1H)， 5.07-5.16(m， 1H)， 3.71-3.99(m， 2H)， 2.81-3.27(m， 4H)， 2.20-2.46(m， 9H)， 1.21-1.89(m， 8H)， 0.83-0.95(m， 3H)。
     将其他级分分开收集， 除去溶剂后， 得到标题化合物 E11b 的游离碱 7， 8- 二甲 基 -2-[((2S)-1-{[6- 甲 基 -3-( 丙 氧 基 )-2- 吡 啶 基 ] 羰 基 }-2- 哌 啶 基 ) 甲 基 ] 咪 唑 并 [1， 2-a] 吡 啶 (0.223g)。HPLC(walk-up) ： rt ＝ 4.44min.C25H32N4O2 理 论 值 420。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 8.21(d， 1H)， 7.69(s， 1H)， 7.12-7.45(m， 2H)， 6.67(d， 1H)， 5.07-5.16(m， 1H)， 3.71-3.99(m， 2H)， 2.81-3.27(m， 4H)， 2.20-2.46(m， 9H)， 1.21-1.89(m， 8H)， 0.83-0.95(m， 3H)。
     将 7， 8- 二甲基 -2-[((2S)-1-{[6- 甲基 -3-( 丙氧基 )-2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌啶 基 ) 甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (0.250g， 0.594mmol) 溶于 Et2O(5ml) 中， 向该溶液中滴加 HCl 的 Et2O 溶液 (2ml， 2.000mmol)， 将混合物搅拌 30 分钟， 然后将溶剂真空除去， 并将残余 物用 Et2O 处理。将该固体在真空下干燥， 得到标题化合物 E11a(0.299g)。HPLC(walk-up) ： rt ＝ 4.44min。C25H32N4O2·HCl 理 论 值 457。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 14.21(br. s. ， 1H) ， 8.57-8.79(m ， 1H) ， 7.86-8.18(m ， 1H) ， 7.10-7.51(m ， 3H) ， 5.19-5.31(m ， 1H) ， 3.76-3.93(m， 2H)， 2.63-3.72(m， 4H)， 2.30-2.58(m， 9H)， 1.22-2.03(m， 8H)， 0.72-0.94(m， 3H)。
     将 7， 8- 二甲基 -2-[((2S)-1-{[6- 甲基 -3-( 丙氧基 )-2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌 向 啶基 ) 甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (0.223g， 0.530mmol) 溶于 Et2O(5ml) 和 DCM(1ml) 中， 该溶液中加入 HCl 的 Et2O 溶液 (2ml， 2.000mmol)， 并将混合物搅拌 30 分钟。将溶剂真空除 去， 并将残余物用 Et2O 洗涤几次。将该固体在真空下在 40℃下干燥过夜， 得到标题化合物 1 E11b(0.266g)。 HPLC(walk-up) ： rt ＝ 4.40min。 C25H32N4O2· HCl 理论值 457。 H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm14.21(br.s.， 1H)， 8.57-8.79(m， 1H)， 7.86-8.18(m， 1H)， 7.10-7.51(m， 3H)， 5.19-5.31(m， 1H)， 3.76-3.93(m， 2H)， 2.63-3.72(m， 4H)， 2.30-2.58(m， 9H)， 1.22-2.03(m， 8H)， 0.72-0.94(m， 3H)。
     将 7， 8- 二 甲 基 -2-[((2S)-1-{[6- 甲 基 -3-( 丙 氧 基 )-2- 吡 啶 基 ] 羰 基 }-2- 哌 啶 基 ) 甲 基 ] 咪 唑 并 [1， 2-a] 吡 啶 HCl 盐 E11b(0.266g) 加 入 到 7， 8- 二 甲 基 -2-[((2S)-1-{[6- 甲基 -3-( 丙氧基 )-2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌啶基 ) 甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 HCl 盐 E11a(0.299g) 中， 将该固体在真空下在 50℃下放置过夜以除去残余的 痕量溶剂， 得到标题化合物 E11c(0.540g)。HPLC(walk-up) ： rt ＝ 4.54min。C25H32N4O2· HCl 1 理 论 值 457。 H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm14.21(br.s.， 1H)， 8.57-8.79(m， 1H)， 7.86-8.18(m， 1H)， 7.10-7.51(m， 3H)， 5.19-5.31(m， 1H)， 3.76-3.93(m， 2H)， 2.63-3.72(m， 4H)， 2.30-2.58(m， 9H)， 1.22-2.03(m， 8H)， 0.72-0.94(m， 3H)。
     实施例 12 ： 8- 氟 -2-[((2S)-1-{[6- 甲基 -3-( 丙氧基 )-2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌 啶基 ) 甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶盐酸盐 (E12) ：
     将 6- 甲 基 -3-( 丙 氧 基 )-2- 吡 啶 甲 酸 D40(0.0217g) 溶 于 DMF(1ml) 中， 加入 TBTU(0.358g， 0.111mmol)， 然后加入 DIPEA(0.117ml， 0.670mmol)。将生成的混合物在室 温下搅拌 1 小时。向该溶液中加入 8- 氟 -2-[(2S)-2- 哌啶基甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 D9(0.026g， 由描述 9 中所获得的粗物质 ) 的 DMF(1ml) 溶液， 并搅拌 2.5 小时。加入 DCM 和饱和的 NaHCO3 饱和水溶液， 并将水相用 DCM 萃取。将有机层通过分相柱过滤， 并蒸发， 得到黄色油状物， 将其通过快速色谱法 (Biotage SP4， NH， 12+M 柱， 用 35CV 的 Cy/EtOAc 由 1/0 至 2/8， 然后用 15CV 的 Cy/EtOAc 2/8 洗脱 ) 纯化。得到标题化合物 E12 的游离碱 8- 氟 -2-[((2S)-1-{[6- 甲基 -3-( 丙氧基 )-2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌啶基 ) 甲基 ] 咪唑并
     [1， 2-a] 吡啶 (0.0332g)， 为白色固体。MS ： (ES/+)m/z ： 411(M+1)。C23H27FN4O2 理论值 410。 H NMR(500MHz， DMSO-d6)δppm 8.36(d， 1H)， 7.92-7.98(m， 1H)， 7.40(d， 1H)， 7.21(d， 1H)， 7.06-7.12(m， 1H)， 6.74-6.85(m， 1H)， 5.07-5.18(m， 1H)， 3.74-3.96(m， 2H)， 2.88-3.28(m， 4H)， 2.39(s， 3H)， 1.29-1.85(m， 8H)， 0.83-0.92(m， 3H)。
     向 8- 氟 -2-[((2S)-1-{[6- 甲 基 -3-( 丙 氧 基 )-2- 吡 啶 基 ] 羰 基 }-2- 哌 啶 基 ) 甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (0.031g) 的无水 DCM(1ml) 溶液中加入 1M HCl 的 Et2O 溶液 (0.152ml)， 将生成的混合物搅拌 30 分钟， 然后减压除去溶剂， 得到固体， 将其用 Et2O(1.000ml) 研磨。将溶剂通过抽吸除去， 得到标题化合物 E12(0.0383g)， 为白色固体。 HPLC(walk up) ： rt ＝ 3.26min.MS ： (ES/+)m/z ： 411(M-HCl+1)。 C23H27FN4O2· HCl 理论值 446。
     实施例 13 ： 8- 氟 -2-{[(2S)-1-({6- 甲基 -3-[(2- 甲基丙基 ) 氧基 ]-2- 吡啶基 } 羰基 )-2- 哌啶基 ] 甲基 } 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶盐酸盐 (E13) ：1
     按照类似于实施例 12 中所述的方法， 使 6- 甲基 -3-[(2- 甲基丙基 ) 氧基 ]-2- 吡 啶甲酸 D42(0.023g) 与 8- 氟 -2-[(2S)-2- 哌啶基甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 D9(0.026g， 由 描述 9 中所获得的粗物质 ) 反应， 得到标题化合物 E13 的游离碱 8- 氟 -2-{[(2S)-1-({6- 甲 基 -3-[(2- 甲 基 丙 基 ) 氧 基 ]-2- 吡 啶 基 } 羰 基 )-2- 哌 啶 基 ] 甲 基 } 咪 唑 并 [1， 2-a]
     吡 啶 (0.0229g)。UPLC ： rt ＝ 0.84min。 观 察 到 的 峰 ： 425(M+1)。C24H29FN4O2 理 论 值 1 424。 H NMR(500MHz， DMSO-d6)δppm 8.33-8.38(m， 1H)， 7.93-7.97(m， 1H)， 7.40(d， 1H)， 7.20(d， 1H)， 6.99-7.11(m， 1H)， 6.74-6.86(m， 1H)， 5.09-5.18(m， 1H)， 3.66-3.79(m， 2H)， 2.89-3.28(m， 4H)， 2.39(s， 3H)， 1.28-1.92(m， 7H)， 0.84-0.93(m， 6H)。
     按 照 类 似 于 实 施 例 12 中 所 述 的 方 法， 由 游 离 碱 8- 氟 -2-{[(2S)-1-({6- 甲 基 -3-[(2- 甲基丙基 ) 氧基 ]-2- 吡啶基 } 羰基 )-2- 哌啶基 ] 甲基 } 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (0.021g) 开始， 制备标题化合物 E13(0.0258g)。 HPLC(walk up) ： rt ＝ 3.58min.MS ： (ES/+) m/z ： 425(M-HCl+1)。C24H29FN4O2·HCl 理论值 460.97。
     实 施 例 14 ： 2-{[(2S)-1-({3-[( 环 丙 基 甲 基 ) 氧 基 ]-6- 甲 基 -2- 吡 啶 基 } 羰 基 )-2- 哌啶基 ] 甲基 }-8- 氟咪唑并 [1， 2-a] 吡啶盐酸盐 (E14) ：
     按照类似于实施例 12 中所述的方法， 使 3-[( 环丙基甲基 ) 氧基 ]-6- 甲基 -2- 吡 啶甲酸 D41(0.023g) 与 8- 氟 -2-[(2S)-2- 哌啶基甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 D9(0.026g， 由描述 9 中所获得的粗物质 ) 反应， 得到标题化合物 E14 的游离碱 (0.031g)。UPLC ： rt ＝ 1 0.79min. 观察到的峰 ： 423(M+1)。C24H27FN4O2 理论值 422。 H NMR(500MHz， DMSO-d6)δppm 8.36(d， 1H)， 7.93-7.97(m， 1H)， 7.38(d， 1H)， 7.19(d， 1H)， 6.98-7.11(m， 1H)， 6.74-6.84(m， 1H)， 5.09-5.17(m， 1H)， 3.72-3.85(m， 2H)， 2.91-3.30(m， 4H)， 2.38(s， 3H)， 1.04-1.87(m， 7H)， 0.44-0.55(m， 2H)， 0.20-0.30(m， 2H)。
     按照类似于实施例 12 中所述的方法， 由游离碱 2-{[(2S)-1-({3-[( 环丙基甲基 ) 氧基 ]-6- 甲基 -2- 吡啶基 } 羰基 )-2- 哌啶基 ] 甲基 }-8- 氟咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (0.029g， 0.069mmol) 开始， 制备标题化合物 E14(0.036.9g)。HPLC(walk up) ： rt ＝ 3.30min。MS ： (ES/+)m/z ： 423(M-HCl+1)。C24H27FN4O2·HCl 理论值 459。
     实施例 15 ： 6， 7- 二甲基 -2-{[(2S)-1-({6- 甲基 -3-[(2- 甲基丙基 ) 氧基 ]-2- 吡 啶基 } 羰基 )-2- 哌啶基 ] 甲基 } 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶盐酸盐 (E15) ：将 6- 甲基 -3-[(2- 甲基丙基 ) 氧基 ]-2- 吡啶甲酸 D42(0.0271g) 溶于 DMF(1ml) 中， 向该溶液中加入 TBTU(0.0486g， 0.151mmol) 和 DIPEA(0.113ml， 0.648mmol)。将该反 应搅拌 1 小时， 然后加入 6， 7- 二甲基 -2-[(2S)-2- 哌啶基甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 D27(0.0263g) 的 DMF(1ml) 溶液。将溶剂真空除去， 将粗产物通过快速色谱法 (SP4， 25M NH 柱， 由 Cy 80％ ： EtOAc 20 ％至 EtOAc 100 ％洗脱 ) 纯化。收集级分， 将溶剂真空除去， 得 到标题化合物 E15 的游离碱 6， 7- 二甲基 -2-{[(2S)-1-({6- 甲基 -3-[(2- 甲基丙基 ) 氧 基 ]-2- 吡啶基 } 羰基 )-2- 哌啶基 ] 甲基 } 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (0.041g)， 为淡黄色泡沫状 物质。 HPLC(walk up) ： rt ＝ 3.82min.MS ： (ES/+)m/z ： 335(M-HCl+1)。 C26H34N4O2 理论值 334。 1 HNMR(500MHz， DMSO-d6)δppm 8.20-8.24(m， 1H)， 7.58-7.64(m， 1H)， 7.08-7.43(m， 3H)， 5.04-5.12(m， 1H)， 3.59-3.81(m， 2H)， 2.75-3.24(m， 4H)， 2.39(s， 3H)， 2.27(s， 3H)， 2.18(s， 3H)， 1.25-1.94(m， 7H)， 0.90(d， 6H)。
     将 6， 7- 二甲基 -2-{[(2S)-1-({6- 甲基 -3-[(2- 甲基丙基 ) 氧基 ]-2- 吡啶基 } 羰基 )-2- 哌啶基 ] 甲基 } 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (0.039g， 0.090mmol) 溶于 HCl 的 Et2O 溶 液 (1ml， 1.000mmol) 中， 向该溶液中加入 HCl 的 Et2O 溶液 (1ml， 1.000mmol)， 并将混合物 搅拌 15 分钟。然后将溶剂真空除去， 并将残余物用 Et2O 洗涤几次， 干燥以得到标题化合物 E15(0.043g)。HPLC(walk up) ： rt ＝ 3.77min.
     C26H34N4O2·HCl 理 论 值 471。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 14.28(br.s.， 1H)， 8.71(s， 1H)， 8.03(s， 1H)， 7.74(s， 1H)， 7.12-7.49(m， 2H)， 5.14-5.24(m， 1H)， 2.71-3.90(m， 6H)， 2.24-2.59(m， 9H)， 1.24-2.07(m， 7H)， 0.71-0.94(m， 6H)。
     实施例 16 ： 3- 氯 -2-{[(2S)-1-({3-[( 环丙基甲基 ) 氧基 ]-6- 甲基 -2- 吡啶基 } 羰基 )-2- 哌啶基 ] 甲基 }-8- 甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶盐酸盐 (E16) ：
     将 3-[( 环丙基甲基 ) 氧基 ]-6- 甲基 -2- 吡啶甲酸 D41(0.017g) 溶于 DMF(1ml) 中， 并加入 TBTU(0.0375g， 0.117mmol)， 并然后加入 DIPEA(0.087ml， 0.500mmol)。将生成的 混合物在室温下搅拌 1 小时。向该溶液中加入 3- 氯 -8- 甲基 -2-[(2S)-2- 哌啶基甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 D29(0.022g， 由描述 29 中所获得的粗物质 ) 的 DMF(1ml) 溶液， 并搅 拌 2.5 小时。加入 DCM 和 NaHCO3 饱和水溶液， 并将水相用 DCM 萃取。将有机层通过分相 柱过滤， 并蒸发， 得到黄色油状物， 将其通过快速色谱法 ( 通过 Biotage SP4， NH， 12+M 柱， 用 Cy/EtOAc 由 100/0 至 30/70 洗脱 ) 纯化。得到类褐色固体的标题化合物 E16 的游离碱 3- 氯 -2-{[(2S)-1-({3-[( 环丙基甲基 ) 氧基 ]-6- 甲基 -2- 吡啶基 } 羰基 )-2- 哌啶基 ] 甲 基 }-8- 甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (0.012mg)。MS ： (ES/+)m/z ： 453(M+1)。C25H29ClN4O2 理论
     1 值 452。 H NMR(500MHz， DMSO-d6)δppm 8.04-8.10(m， 1H)， 7.27-7.33(m， 1H)， 6.89-7.22(m， 3H)， 4.47-4.56(m， 1H)， 3.68-3.93(m， 3H)， 2.82-3.17(m， 3H)， 2.34(s， 3H)， 2.05-2.18(m， 3H)， 0.78-1.92(m， 7H)， 0.43-0.56(m， 2H)， 0.19-0.35(m， 2H)。
     向 3- 氯 -2-{[(2S)-1-({3-[( 环 丙 基 甲 基 ) 氧 基 ]-6- 甲 基 -2- 吡 啶 基 } 羰 基 )-2- 哌啶基 ] 甲基 }-8- 甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (0.010g， 0.022mmol) 的无水 DCM(1ml) 溶液中加入 HCl(1M 的 Et2O 溶液 )(0.044ml)。将生成的混合物搅拌 30 分钟， 然后减压除去 溶剂， 得到固体， 将其用 Et2O(1ml) 研磨。将溶剂通过抽吸除去， 将该固体在真空下在 40℃ 下干燥， 得到类白色固体的标题化合物 E16(0.011g)。HPLC(walk up) ： rt ＝ 3.76min.MS ： (ES/+)m/z ： 453(M-HCl+1)。C25H29ClN4O2·HCl 理论值 489。
     实施例 17 ： 3- 氯 -2-[((2S)-1-{[3-( 乙氧基 )-6- 甲基 -2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌 啶基 ) 甲基 ]-8- 甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶盐酸盐 (E17) ：
     按 照 类 似 于 实 施 例 16 中 所 述 的 方 法， 使 3-( 乙 氧 基 )-6- 甲 基 -2- 吡 啶 甲 酸 D37(0.015g) 与 3- 氯 -8- 甲 基 -2-[(2S)-2- 哌 啶 基 甲 基 ] 咪 唑 并 [1， 2-a] 吡 啶 D29(0.022g， 由描述 29 中获得的粗物质 ) 反应， 得到类褐色固体的标题化合物 E17 的游 离 碱 3- 氯 -2-[((2S)-1-{[3-( 乙 氧 基 )-6- 甲 基 -2- 吡 啶 基 ] 羰 基 }-2- 哌 啶 基 ) 甲 基 ]-8- 甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (0.012g)。UPLC ： rt ＝ 0.81min. 观察到的峰 ： 427(M+1)。 C23H27ClN4O2 理论值 426。1H NMR(500MHz， DMSO-d6)δppm ： 8.05-8.09(m， 1H)， 7.25-7.32(m， 1H)， 7.06-7.23(m， 2H)， 6.92(t， 1H)， 4.46-4.54(m， 1H)， 3.75-4.08(m， 3H)， 2.80-3.28(m， 3H)， 2.34(s， 3H)， 2.05-2.18(m， 3H)， 1.32-1.90(m， 5H)， 1.13-1.29(m， 3H)， 0.87-1.08(m， 1H)。
     按照类似于实施例 16 中所述的方法， 由游离碱 3- 氯 -2-[((2S)-1-{[3-( 乙氧 基 )-6- 甲基 -2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌啶基 ) 甲基 ]-8- 甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (0.010g， 0.023mmol) 制备类白色固体的标题化合物 E17(0.010g)。
     HPLC(walk up) ： rt ＝ 3.49min.MS ： (ES/+)m/z ： 427(M-HCl+1)。C23H27ClN4O2·HCl 理论值 463.
     实 施 例 18 ： 2-{[(2S)-1-({3-[( 环 丙 基 甲 基 ) 氧 基 ]-6- 甲 基 -2- 吡 啶 基 } 羰 基 )-2- 哌啶基 ] 甲基 }-3， 8- 二甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶盐酸盐 (E18) ：
     将 3-[( 环丙基甲基 ) 氧基 ]-6- 甲基 -2- 吡啶甲酸 D41(0.021g) 溶于 DMF(0.5ml) 中， 加入 TBTU(0.046g， 0.144mmol)， 然后加入 DIPEA(0.054ml， 0.308mmol)。将生成的混合 物在室温下搅拌 30 分钟。向该溶液中加入 3， 8- 二甲基 -2-[(2S)-2- 哌啶基甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 D7(0.025g) 的 DMF(0.5ml) 溶液， 搅拌过夜。加入 DCM(3ml) 和饱和的 NaHCO3 水溶液 (2ml)， 并将水相用 DCM(2×2ml) 萃取。 将有机层通过分相柱过滤， 并蒸发， 得到橙色 油状物， 将其通过 Biotage SP4(NH， 12+M 柱 ； 用 40CV 的 Cy/EtOAc 由 1/0 至 3/7 洗脱 ) 纯化， 得到类白色固体的标题化合物 E18 的游离碱 2-{[(2S)-1-({3-[( 环丙基甲基 ) 氧基 ]-6- 甲 8- 二甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (0.029g)。 MS ： 基 -2- 吡啶基 } 羰基 )-2- 哌啶基 ] 甲基 }-3， 1 (ES/+)m/z ： 433(M+1)。C26H32N4O2 理论值 432。 H NMR(500MHz， DMSO-d6)δppm 7.95(d， 1H)， 7.28-7.35(m， 1H)， 7.10-7.23(m， 1H)， 6.89-7.05(m， 1H)， 6.70-6.76(m， 1H)， 4.45-4.56(m， 1H)， 3.65-3.96(m， 3H)， 2.74-3.24(m， 3H)， 2.48(s， 3H)， 2.32(s， 3H)， 2.12-2.24(m， 3H)， 0.89-1.93(m， 7H)， 0.41-0.57(m， 2H)， 0.18-0.36(m， 2H)。
     向 2-{[(2S)-1-({3-[( 环丙基甲基 ) 氧基 ]-6- 甲基 -2- 吡啶基 } 羰基 )-2- 哌啶 基 ] 甲基 }-3， 8- 二甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (27mg) 的无水 DCM(1ml) 溶液中加入 1M HCl 的 Et2O 溶液 (0.124ml， 0.124mmol)， 将生成的混合物搅拌 30 分钟。将溶剂减压蒸发， 并将 获得的白色固体用无水 MeOH(2 滴 ) 和无水 Et2O(1ml) 研磨， 通过抽吸过滤， 在减压下干燥， 得到类白色固体的标题化合物 E18(0.029g)。HPLC(walk up) ： rt ＝ 3.95 分钟。MS ： (ES/+) m/z ： 433(M-HCl+1)。C26H32N4O2·HCl 理论值 469。
     实施例 19 ： 2-[((2S)-1-{[6- 乙基 -3-( 乙氧基 )-2- 吡啶基 ] 羰基 }-2- 哌啶基 ) 甲基 ]-7， 8- 二甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶盐酸盐 (E19) ：
     将 6- 乙基 -3-( 乙氧基 )-2- 吡啶甲酸 D49(0.024g)、 TBTU(0.046g， 0.144mmol) 和 DIPEA(0.108ml， 0.616mmol) 在 DMF(1ml) 中在室温下在 N2 气氛下搅拌 1 小时。然后， 向该溶液中滴加溶于 DMF(1ml) 中的 7， 8- 二甲基 -2-[(2S)-2- 哌啶基甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡 啶 D22(0.025g)， 并将该反应在室温下搅拌过夜。将溶剂真空除去， 并将粗产物通过快速色 谱法 (Sp425M NH 柱， 由 Cy100％至 EtOAc 100％洗脱 ) 纯化。
     将 级 分 收 集， 得 到 标 题 化 合 物 E19 的 游 离 碱 2-[((2S)-1-{[6- 乙 基 -3-( 乙 氧 基 )-2- 吡 啶 基 ] 羰 基 }-2- 哌 啶 基 ) 甲 基 ]-7， 8- 二 甲 基 咪 唑 并 [1， 2-a] 吡 啶 (0.039g)。HPLC(walk up) ： rt ＝ 3.53min.MS ： (ES/+)m/z ： 421(M+1)。C25H32N4O2 理 论 值 1 420。 H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 8.15-8.27(m， 1H)， 7.63(s， 1H)， 7.09-7.47(m， 3H)， 5.02-5.15(m， 1H)， 3.84-4.13(m， 2H)， 2.80-3.25(m， 4H)， 2.55-2.76(m， 2H)， 2.13-2.30(m， 6H)， 1.31-1.86(m， 6H)， 1.08-1.29(m， 6H)。
     将 2-[((2S)-1-{[6- 乙 基 -3-( 乙 氧 基 )-2- 吡 啶 基 ] 羰 基 }-2- 哌 啶 基 ) 甲 基 ]-7， 8- 二甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (0.037g) 溶于 Et2O(1ml) 中， 然后将 HCl 的 Et2O 溶 液 (0.088ml， 0.088mmol) 加入到该溶液中。将混合物振荡 15 分钟， 将溶剂真空除去， 并将 残余物用 Et2O 洗涤几次， 得到标题化合物 E19(0.040g)。
     HPLC(walk up) ： rt ＝ 3.56min.MS ： (ES/+)m/z ： 421(M-HCl+1)。C25H32N4O2·HCl 理 1 论值。 H NMR(400MHz， DMSO-d6)d ppm 14.27(br.s.， 1H)， 7.11-8.76(m， 5H)， 5.14-5.26(m， 1H) ， 3.74-4.05(m ， 2H) ， 2.53-3.60(m ， 6H) ， 2.27-2.49(m ， 6H) ， 1.20-1.92(m ， 6H) ， 1.02-1.17(m， 6H)。
     实 施 例 20 ： 6- 氟 -8- 甲 基 -2-({(2S)-1-[(6- 甲 基 -3- 苯 基 -2- 吡 啶 基 ) 羰 基 ]-2- 哌啶基 } 甲基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 (E20) ：
     将 6- 甲基 -3- 苯基 -2- 吡啶甲酸 D54(0.056g)、 6- 氟 -8- 甲基 -2-[(2S)-2- 哌啶基 甲基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 D12/13(0.071g)、 TBTU(0.093g， 0.289mmol) 和 DIPEA(0.092ml， 0.525mmol) 的无水 DMF(2ml) 溶液在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩， 用 DCM 稀释， 并用 NaHCO3 饱和水溶液洗涤。将有机层使用分相管收集， 并浓缩。通过快速硅胶色谱法 (SPl， 25M 柱， 使用 DCM/MeOH， 由 DCM 100 至 DCM/MeOH 95/5 洗脱 ) 纯化， 得到 6- 氟 -8- 甲 基 -2-({(2S)-1-[(6- 甲基 -3- 苯基 -2- 吡啶基 ) 羰基 ]-2- 哌啶基 } 甲基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 E20(0.044g)， 为淡黄色固体。MS ： (ES/+)m/z ： 443(M+1)。C27H27FN4O 理论值 442。 1 H NMR(500MHz， DMSO-d6)δppm ： 8.44-8.56(m， 1H)， 7.69-7.82(m， 2H)， 7.25-7.53(m， 6H)， 7.01-7.16(m， 1H)， 4.91-5.03(m， 1H)， 2.74-3.10(m， 4H)， 2.47-2.53(m， 3H)， 2.33(s， 3H)， 0.89-1.73(m， 6H)。
     使用类似于实施例 20 中所述的方法制备下列化合物 ( 在一些实施例中， 使用溶剂 DCM 代替 DMF， 和 / 或试剂的加入顺序不同 )。每个化合物是通过相应的 [(2S)-2- 哌啶基甲
     基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶与合适的羧酸的酰胺偶合获得的。此只是用来帮助技术熟练的化 学工作者。起始物料不必由所述的批料制备。
     除了特定的游离碱没有用 HCl 溶液处理外， 都得到相应的 HCl 盐。
     实施例 28 ： 利用 FLIPR 测定拮抗剂对人食欲肽 -1 和 2 受体的亲和性
     细胞培养
     将稳定表达重组人食欲肽 -1 或人食欲肽 -2 受体的粘附的中国仓鼠卵巢 (CHO) 细 胞或稳定表达重组大鼠食欲肽 -1 或大鼠食欲肽 -2 受体的大鼠嗜碱性白血病细胞 (RBL) 在 培养基 Alpha Minimum Essential Medium (Gibco/Invitrogen， cat.no. ； 22571-020) 中 培养， 所述培养基补充有 10％去补体的 (decomplemented) 胎牛血清 (Life Technologies， cat.no.10106-078) 和 400μg/mL Geneticin G418(Calbiochem， cat.no.345810)。细胞在 95％∶ 5％空气∶ CO2 于 37℃生长为单层。
     该实施例中使用的人食欲肽 1， 人食欲肽 2， 大鼠食欲肽 1 和大鼠食欲肽 2 受体的
     序列如 Sakurai， T. 等人 (1998)Cell， 92 第 573-585 页所公开的。测试一些实施例化合物 ( 例如实施例 1-20 的化合物 ) 抗食欲肽 1 受体序列的效果， 所述食欲肽 1 受体序列公开在 如上的 Sakurai 等人的论文中， 除了在第 280 位上的氨基酸残基是丙氨酸而不是甘氨酸。 TM 2+
     利用 FLIPR 测量 [Ca ]i
     将细胞接种在黑色透明底 384- 孔板 ( 密度为 20,000 细胞 / 孔 ) 中的上述的培 养基中， 并保持过夜 (95％∶ 5％空气∶ CO2 在 37℃ )。在实验当天， 将培养基弃去， 并将细 胞使用添加有 2.5mM 丙磺舒的标准缓冲液 (NaCl， 145mM ； KCl， 5mM ； HEPES， 20mM ； Glucose， 5.5mM ； MgCl2， 1mM ； CaCl2， 2mM) 洗涤三次。然后将板于暗处在 37℃使用 2μM FLUO-4AM 染 料培养 60 分钟， 使细胞摄取 FLUO-4AM， 其随后通过细胞内酯酶转化为 FLUO-4， 其不能够离 开 (leave) 细胞。培养后， 细胞使用标准缓冲液洗涤三次以除去细胞外染料， 并在洗涤后在 各孔中剩余 30μL 缓冲液。
     本发明的化合物以最终试验浓度范围为 1.66×l0-5M 至 1.58×10-11M 进行测试。 将本发明的化合物以储备浓度 10mM 溶于二甲亚砜 (DMSO)。这些储备溶液使用 DMSO 系列 稀释， 并将 1μL 各稀释液转移至 384 孔化合物板中。将缓冲溶液 (50μl/ 孔 ) 加至该板 中后， 立即将化合物引入到细胞中。为了使得激动剂刺激细胞， 在使用前， 将含有人食欲肽 A(hOrexinA) 的溶液的储备板使用缓冲液稀释至最终浓度。该 hOrexinA 的最终浓度相当 于在此测试体系中对于 hOrexinA 激动剂效力计算的 EC80。该值通过在实验同一天测试 hOrexinA 的浓度响应曲线 ( 至少重复 16 次 ) 而获得。
     然 后 将 负 载 的 细 胞 在 37 ℃ 与 测 试 化 合 物 培 养 10 分 钟。 然 后 将 板 置 于 TM FLIPR (Molecular Devices， UK) 中 以 监 测 细 胞 荧 光 (λex ＝ 488nm， λEM ＝ 540nm) 2+ (Sullivan E， Tucker EM， Dale IL。[Ca ]i 的测量使用荧光成像板读数器 (FLIPR)。In ： Lambert DG(ed.)， Calcium Signaling Protocols.New Jersey ： Humana Press， 1999， 125-136)。 基线荧光读数经 5-10 秒时间读取， 且然后加入 10μL 的 EC80hOrexinA 溶液。 然 后经 4-5 分钟时间读取荧光。
     数据分析
     利用 FLIPR 测量功能响应为峰荧光强度减去基线荧光， 并且表示为在相同板 上非 - 抑制的食欲肽 -A- 诱导的响应的百分比。迭代曲线 - 拟合以及参数估计使用四 参数对数模型和 Microsoft Excel(Bowen WP， Jerman JC.Nonlinear regressionUsing spreadsheets.Trends Pharmacol.Sci.1995 ； 16 ： 413-417) 进 行。 使 用 改 良 的 Cheng-Prusoff 校 正 (Cheng YC， Prusoff WH.Relationship between the inhibition constant(K i)and the concentration of inhibitor which causes 50percent inhibition(IC50)of an enzymatic reaction.Biochem.Pharmacol.1973， 22 ： 3099-3108)， 将拮抗剂的亲和性值 (IC50) 转化为功能 pKi 值。
     其 中 [ 激 动 剂 ] 为 激 动 剂 浓 度， EC50 为 得 到 50 ％ 活 性 的 激 动 剂 浓 度， 其得自 于激动剂剂量响应曲线， 且 n ＝剂量响应曲线的斜率。当 n ＝ 1 时， 该公式更加类似于
     Cheng-Prusoff 公式。
     实施例 1-27 的化合物根据实施例 28 的方法进行了测试。所有化合物对人克隆的 食欲肽 -1 受体 ( 或者正如在上面 Sakurai 等人的论文中所公开的， 或者在第 280 位上具有 氨基酸残基丙氨酸而不是甘氨酸 ) 或人克隆的食欲肽 -2 受体之一或两者的 fpKi 值为 5.8 至 9.1。77