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1、(10)申请公布号 CN 102986532 A (43)申请公布日 2013.03.27 CN 102986532 A *CN102986532A* (21)申请号 201210514553.X (22)申请日 2012.11.10 A01H 4/00(2006.01) (71)申请人 上饶师范学院 地址 334001 江西省上饶市志敏大道 85 号 (72)发明人 洪森荣 肖月土 尹明华 王艾平 (54) 发明名称 一种红芽芋微型块茎愈伤组织诱导、 分化和 植株再生方法 (57) 摘要 一种红芽芋微型块茎愈伤组织诱导、 分化和 植株再生方法， (1) 愈伤组织诱导 ： 选取红芽芋脱 毒苗微。
2、型块茎作为外植体， 在无菌条件切成小块， 接种于愈伤组织培养基上进行培养， 得到红芽芋 脱毒苗微型块茎的愈伤组织块 ； (2) 丛生芽诱导 ： 将诱导的愈伤组织块接种到丛生芽诱导培养基上 进行培养， 得到丛生芽组织块 ； (3) 丛生芽的增殖 培养 ： 将丛生芽组织块接种到丛生芽增殖培养基 上进行培养， 得到大量的红芽芋不定芽 ； (4) 不 定芽的生根成苗 ： 选取红芽芋不定芽接到生根培 养基上进行培养， 可获得红芽芋的小苗。 利用本发 明可在短期内形成大量优质的红芽芋试管苗， 可 进行规模化、 工厂化生产， 解决红芽芋农业生产中 所存在的问题。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 。
3、说明书 2 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 2 页 1/1 页 2 1. 本发明公开了一种红芽芋微型块茎愈伤组织诱导、 分化和植株再生方法， 其特征在 于有以下步骤 ： (1) 愈伤组织诱导 ： 选取红芽芋脱毒苗微型块茎作为外植体， 在无菌条件切 成小块， 接种于愈伤组织培养基 (MS+2.0 3.0mg/L 6-BA+0.1 0.5mg/L 2， 4-D+0.2 0.3 AC) 上进行培养 ； 培养基中蔗糖浓度为 30g/L， 琼脂浓度为 7.5g/L， 培养基 pH 值为 5.8 6.0， 培养条件为 ： 黑暗培养， 培养温度 2。
4、51， 培养 50 60d 后， 即可得到红芽芋 脱毒苗微型块茎的愈伤组织块 ； (2) 丛生芽诱导 ： 将诱导的愈伤组织块接种到丛生芽诱导 培养基 (MS+2.0 4.0mg/L KT+0.1 0.5mg/L NAA) 上进行培养， 培养基中蔗糖浓度为 30g/L， 琼脂浓度为 7.5g/L， 培养基 pH 值为 5.8 6.0， 培养条件为 ： 光照时间 14h/d， 光强 约 1500 2000lx， 培养温度 251， 培养 40 60d 后， 即可得到丛生芽组织块 ； (3) 丛生 芽的增殖培养 ： 将丛生芽组织块接种到丛生芽增殖培养基 (MS+1.0 2.0mg/L KT+0.1 。
5、0.2mg/L NAA) 上进行培养， 培养基中蔗糖浓度为 30g/L， 琼脂浓度为 7.5g/L， 培养基 pH 值 为 5.8 6.0， 培养条件为 ： 光照时间 14h/d， 光强约 1500 2000lx， 培养温度 251， 培 养3060d后， 即可得到大量的红芽芋不定芽 ； (4)不定芽的生根成苗 ： 选取红芽芋不定芽 接到生根培养基 (1/2MS+0.5 1.0mg/L NAA+0.5 1.0mg/L PP333) 上进行培养， 培养基 中蔗糖浓度为 30g/L， 琼脂浓度为 7.5g/L， 培养基 pH 值为 5.8 6.0， 培养条件为 ： 光照时 间 14h/d， 光强约。
6、 1500 2000lx， 培养温度 251， 培养 30 60d 后， 即可获得红芽芋的 小苗。 权 利 要 求 书 CN 102986532 A 2 1/2 页 3 一种红芽芋微型块茎愈伤组织诱导、 分化和植株再生方法 技术领域 ： 0001 本发明涉及一种植物种苗繁育方法， 特别是一种红芽芋微型块茎愈伤组织诱导、 分化和植株再生的方法。 背景技术 ： 0002 红芽芋是芋属天南星科多年生宿根性草本植物， 以地下球茎子芋为主要收获物的 蔬菜， 其食用部分球茎富含淀粉、 粗纤维、 粗脂肪、 蛋白质、 VC、 钙、 磷、 铁， 是芋中之珍品， 可 作蔬菜或主食， 具有无公害、 产量高、 商品价。
7、值高、 耐贮运等优点。红芽芋属生理碱性食物， 被推荐为功能食品。随着种植业结构调整和人们对无公害蔬菜及品种多样化的需求， 红芽 芋的身价也相对提高， 特别是优质、 反季节的芋头上市后倍受青睐， 一直是国内外市场上紧 俏的抢手货。目前， 随着生产不断发展， 植株无性繁殖积累病毒逐渐增多， 红芽芋品种普遍 出现早衰现象， 病害严重， 产量和品质下降。因而， 利用试管苗快速繁殖已成为红芽芋生产 急需解决的问题。 本研究以红芽芋微型块茎为试材， 通过植物组织培养技术， 获得愈伤组织 并再分化出大量丛生芽， 对充分发挥和利用我国红芽芋资源优势， 保护、 开发我国道地蔬菜 和丰富特色蔬菜种类有重要意义。 。
8、发明内容 ： 0003 本发明的目的是提供一种红芽芋微型块茎愈伤组织诱导、 分化和植株再生的方 法。实现本发明目的的技术方案是， (1) 愈伤组织诱导 ： 选取红芽芋微型块茎作为外植体， 在无菌条件切成小块， 接种于愈伤组织培养基(MS+2.03.0mg/L 6-BA+0.10.5mg/L 2， 4-D+0.20.3AC)上进行培养 ； 培养基中蔗糖浓度为30g/L， 琼脂浓度为7.5g/L， 培养基 pH 值为 5.8 6.0， 培养条件为 ： 黑暗培养， 培养温度 251， 培养 50 60d 后， 即可得到 红芽芋脱毒苗微型块茎的愈伤组织块 ； (2) 丛生芽诱导 ： 将诱导的愈伤组织块。
9、接种到丛生 芽诱导培养基(MS+2.04.0mg/L KT+0.10.5mg/L NAA)上进行培养， 培养基中蔗糖浓度 为 30g/L， 琼脂浓度为 7.5g/L， 培养基 pH 值为 5.8 6.0， 培养条件为 ： 光照时间 14h/d， 光 强约 1500 2000lx， 培养温度 251， 培养 40 60d 后， 即可得到丛生芽组织块 ； (3) 丛 生芽的增殖培养 ： 将丛生芽组织块接种到丛生芽增殖培养基(MS+1.02.0mg/L KT+0.1 0.2mg/L NAA) 上进行培养， 培养基中蔗糖浓度为 30g/L， 琼脂浓度为 7.5g/L， 培养基 pH 值 为 5.8 6。
10、.0， 培养条件为 ： 光照时间 14h/d， 光强约 1500 2000lx， 培养温度 251， 培 养 30 60d 后， 即可得到大量的红芽芋不定芽 ； ； (4) 不定芽的生根成苗 ： 选取红芽芋不定 芽接到生根培养基 (1/2MS+0.5 1.0mg/L NAA+0.5 1.0mg/L PP333) 上进行培养， 培养基 中蔗糖浓度为 30g/L， 琼脂浓度为 7.5g/L， 培养基 pH 值为 5.8 6.0， 培养条件为 ： 光照时 间 14h/d， 光强约 1500 2000lx， 培养温度 251， 培养 30 60d 后， 即可获得红芽芋的 小苗。本发明与现有技术比较具有。
11、成本低、 丛生芽繁殖数量多等优点。 具体实施方式 ： 说 明 书 CN 102986532 A 3 2/2 页 4 0004 结合下述实施例对本发明作进一步说明 ： 0005 (1) 红芽芋微型块茎愈伤组织的诱导 0006 选取红芽芋微型块茎作为外植体， 在无菌条件切成小块， 接种于愈伤组织培养基 (MS+2.0 3.0mg/L 6-BA+0.1 0.5mg/L 2， 4-D+0.2 0.3 AC) 上进行培养 ； 培养基中 蔗糖浓度为 30g/L， 琼脂浓度为 7.5g/L， 培养基 pH 值为 5.8 6.0， 培养条件为 ： 黑暗培养， 培养温度 251， 培养 50 60d 后， 即可。
12、得到红芽芋微型块茎的愈伤组织块。 0007 (2) 丛生芽诱导 0008 将诱导的愈伤组织块接种到丛生芽诱导培养基 (MS+2.0 4.0mg/L KT+0.1 0.5mg/L NAA) 上进行培养， 培养基中蔗糖浓度为 30g/L， 琼脂浓度为 7.5g/L， 培养基 pH 值 为 5.8 6.0， 培养条件为 ： 光照时间 14h/d， 光强约 1500 2000lx， 培养温度 251， 培 养 40 60d 后， 即可得到丛生芽组织块。 0009 (3) 丛生芽的增殖培养 0010 将丛生芽组织块接种到丛生芽增殖培养基 (MS+1.0 2.0mg/L KT+0.1 0.2mg/ LNA。
13、A) 上进行培养， 培养基中蔗糖浓度为 30g/L， 琼脂浓度为 7.5g/L， 培养基 pH 值为 5.8 6.0， 培养条件为 ： 光照时间14h/d， 光强约15002000lx， 培养温度251， 培养3060d 后， 即可得到大量的红芽芋不定芽。 0011 (4) 不定芽的生根成苗 0012 选取红芽芋不定芽接到生根培养基 (1/2MS+0.5 1.0mg/L NAA+0.5 1.0mg/ LPP333)上进行培养， 培养基中蔗糖浓度为30g/L， 琼脂浓度为7.5g/L， 培养基pH值为5.8 6.0， 培养条件为 ： 光照时间14h/d， 光强约15002000lx， 培养温度251， 培养3060d 后， 即可获得红芽芋的小苗， 可直接驯化移栽， 用于大田种植。 说 明 书 CN 102986532 A 4 。