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1、(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201410644316.4 (22)申请日 2014.11.14 C12G 3/04(2006.01) A01G 1/04(2006.01) (71)申请人 杨霞 地址 102600 北京市大兴区康庄路口水晶城 十号楼三单元 202 (72)发明人 杨霞 (74)专利代理机构 北京恒都律师事务所 11395 代理人 李向东 (54) 发明名称 一种生长中蛹虫草酒的制备方法及蛹虫草酒 (57) 摘要 本发明提供一种生长中蛹虫草酒的制备方 法， 以及由所述生长中蛹虫草酒制备的蛹虫草酒 及其制备方法。 通过所述的改进的制备方法， 显著 提高了。
2、有效成分的含量， 更有效的降低了有害物 质含量。本发明还提供一种蛹虫草酒， 由生长中 蛹虫草酒以及在 42-70 酒精度的白酒中泡制的茯 苓、 连翘和甘蓝混合而成。本发明药味少、 制备方 法简单， 服用方便、 疗程短， 见效快、 不易复发、 无 副作用等优点。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书2页 说明书6页 (10)申请公布号 CN 104450434 A (43)申请公布日 2015.03.25 CN 104450434 A 1/2 页 2 1. 一种生长中蛹虫草酒的制备方法， 包括下列步骤 ： 1) 培养基准备将 （大米或小麦。
3、） 20g 30g、 蚕蛹或蚕蛹粉 0.4 1.0g、 培养基营养液 20 40ml 装入培养容器 ； 2) 高温灭菌将所述培养容器放入高压灭菌罐内， 加热温度控制为 100， 压力 1.0 1.2MPa， 蒸发 12 小时 ； 3) 接种、 暗培养高温灭菌后放入无菌间快速冷却， 温度降至 5 10； 采用液体接种方 式将得到的液体菌种放入培养容器接种 ； 接种后的培养容器送入避光室， 温度 22， 湿度 65 70， 经过 3-4 天， 培养基表面布满菌丝， 菌丝侵透培养基 ； 4) 从菌丝到子实体的生长将步骤 3) 的培养容器及其中的培养基放入虫草培养间进行 虫草菌丝见光培养， 控温 19。
4、 22， 空气相对湿度控制在 85 90， 在第 6-12 天， 光的强 度达到400LKS， 给光12小时/天 ； 12-18天， 光的强度达到1000-1200LKS， 给光增加到12-24 小时， 12 小时内 22-23 度生长， 另 12 小时内 16-18 度生长， 18 天以后 400-600LKS， 19-21 的温度下进行培养， 每日 12 小时光照， 通氧， 湿度 80%， 50-60 天左右采收， 培养容器中的虫 草子实体即可长到 10 公分左右， 子实体顶端出现小刺状子囊壳发生， 虫草的根与培养容器 底部长在一起 ； 5) 装酒用白酒冲洗掉培养容器内部的营养液残留， 将。
5、白酒装入正在生长中的蛹虫草培 养容器内， 密封容器 7 天以上。 2. 权利要求 1 的制备方法， 其中所述步骤 3) 中的液体接种方法具体过程如下 ： 接种菌的获得 ： 液体菌种用培养液 20ml 装入培养瓶封口， 将培养瓶加热到 120灭 菌 30 分钟， 超静台洁净、 灭菌后放入菌种 1mg， 摇床培养 ； 接种菌的稀释 ： 所述摇床培养 4 7 天后， 依据摇菌质量， 稀释 40 60 倍后用于接 种。 3. 权利要求 1 或 2 的制备方法， 其中所述培养基营养液配方如下 ： 蛋白胨 2 4g， KH2PO4 2 4g， MgSO4 1 3g， 复合维生素 B60 80mg， 水 1。
6、000 1200ml， 所述营养液 pH 值为 7.0 7.5。 4. 权利要求 1-3 任一所述的制备方法， 其中所述摇床培养的温度控制 21 23， 摇床 晃动速度控制在每分钟 60 180 次。 5. 权利要求 1-4 任一所述的制备方法， 其中所述液体菌种用培养液配方如下 ： 马铃薯 200 400g， 葡萄糖 20 40g， 蛋白胨 3 5g， KH2PO4 2 4g， MgSO4 1 3g， 复 合维生素 B60 80mg， 水 1000 1200ml， 所述营养液的 pH 值为 7.0-7.5。 6. 权利要求 1-5 任一所述的制备方法， 其中所述培养容器为透明的玻璃材料的酒容。
7、 器。 7. 一种蛹虫草酒， 是由生长中蛹虫草加白酒制成。 8. 根据权利要求 7 所述的蛹虫草酒， 由生长中蛹虫草以及在白酒中泡制的茯苓、 连翘 和甘蓝混合而成。 9. 根据权利要求 8 所述的蛹虫草酒， 由权利要求 1-6 中任一所述的生长中蛹虫草以及 在 42-70 酒精度的白酒中泡制的茯苓、 连翘和甘蓝混合而成， 其成分和重量份数如下 ： 生长中蛹虫草 ： 200-400 茯苓 ： 5-20 权 利 要 求 书 CN 104450434 A 2 2/2 页 3 枸杞子 ： 5-10 连翘 ： 5-10 甘蓝 ： 3-8 白酒 ： 80-200。 10. 权利要求 9 的蛹虫草酒的制备方。
8、法， 包括以下步骤 ： 将所述重量的茯苓、 连翘和甘 蓝盛入容器中， 用所述量的白酒浸泡 5-15 天， 然后将其与所述生长中蛹虫草酒分别进行过 滤， 合并滤液， 即可得到本发明的蛹虫草酒。 权 利 要 求 书 CN 104450434 A 3 1/6 页 4 一种生长中蛹虫草酒的制备方法及蛹虫草酒 0001 技术领域 ： 本发明涉及一种生长中蛹虫草酒的制备方法， 以及由所述生长中蛹虫草酒制备的蛹虫 草酒及其制备方法。 0002 背景技术 ： 冬虫夏草简称为虫草， 是一种动植物兼名的名贵药材。属于真菌门、 子囊菌亚门， 麦角 菌科， 与人参、 鹿茸列为三大补品。据 本草纲目拾遗 中记载， 虫草。
9、性甘、 温平， 具有较强的 滋补功能， 在中医药中常作重要引剂， 对肺肾两虚、 腰酸膝痛、 阳萎贫血等有较好的疗效。 虫 草除了药用外， 平常食用也大有裨益， 利用虫草制酒已被公众所知 . 作为人工培植的虫草替代品蛹虫草现己被人们利用。 蛹虫草， 又名北冬虫夏草。 其中的 虫草酸、 虫草素、 虫草多糖和 SOD 等多种生物活性物质的药用价值最为显著。虫草酸 ( 甘露 醇 ) 可以显著地降低颅压， 促进机体新陈代谢， 能使脑溢血和脑血栓病症得到缓解 ； 虫草素 是一种具有抗菌活性的核苷类物质， 对核多聚腺苷酸聚合酶有很强的抑制作用， 能抑制癌 细胞的生长， 并有降血糖的作用 ； 虫草多糖能促进淋。
10、巴细胞转化， 提高血清 IgG 的抗体含量 和机体的免疫功能， 可增强机体自身抗癌抑癌的能力 ； SOD 可以消除机体内超氧自由基， 具 有抗衰老、 抗癌抑癌的作用。此外， 蛹虫草还含有丰富的硒， 不仅可以明显地抑制癌细胞的 生长， 而且还是增强机体免疫和抗氧化能力所需的微量元素。蛹虫草的化学成分大体与冬 虫夏草相同。 冬虫夏草有低血清脂质、 促进心、 脑组织功能、 抗炎、 止咳祛痰、 镇静、 解痉等多 种功能， 可提高机体免疫功能， 是一种作用面较广的免疫增强剂 ； 同时还具有抗肿瘤作用。 0003 现有技术中存在的生长中蛹虫草酒的制备方法， 但是本发明人在实践中发现， 所 述方法存在着一定。
11、的缺陷， 造成了生长中蛹虫草酒中有效成分的含量有所损失， 因此， 本发 明人经过潜心研究， 对上述专利中的制备方法进行了改进， 从而大大提高了有效成分的含 量， 并极大地减少了有害物质。 0004 此外， 本发明人在实践中， 发现生长中蛹虫草酒与一定比例的其他中药的药酒混 合后联用， 可以极大的增强其作用， 由此完成本发明。 0005 发明内容 ： 本发明一个目的是提供生长中蛹虫草酒的制备方法， 包括下列步骤 ： 1)培养基准备将大米或小麦20g30g、 蚕蛹或蚕蛹粉0.41.0g、 培养基营养液20 40ml 装入培养容器 ； 2) 高温灭菌将所述培养容器放入高压灭菌罐内， 加热温度控制为 。
12、100， 压力 1.0 1.2MPa， 蒸发 12 小时 ； 3) 接种、 暗培养高温灭菌后放入无菌间快速冷却， 温度降至 5 10； 采用液体接种方 式将得到的液体菌种放入培养容器接种 ； 接种后的培养容器送入避光室， 温度 22， 湿度 65 70， 经过 3-4 天， 培养基表面布满菌丝， 菌丝侵透培养基 ； 4) 从菌丝到子实体的生长将步骤 3) 的培养容器及其中的培养基放入虫草培养间进行 虫草菌丝见光培养， 控温 19 22， 空气相对湿度控制在 85 90， 在第 6-12 天， 光的强 度达到400LKS， 给光12小时/天 ； 12-18天， 光的强度达到1000-1200LK。
13、S， 给光增加到12-24 说 明 书 CN 104450434 A 4 2/6 页 5 小时， 12 小时内 22-23 度生长， 另 12 小时内 16-18 度生长， 18 天以后 400-600LKS， 19-21 的温度下进行培养， 每日 12 小时光照， 通氧， 湿度 80%， 50-60 天左右采收， 培养容器中的虫 草子实体即可长到 10 公分左右， 子实体顶端出现小刺状子囊壳发生， 虫草的根与培养容器 底部长在一起 ； 5) 装酒用蒸馏水或纯水冲洗掉培养容器内部的营养液残留， 将高于 42的白酒装入 正在生长中的蛹虫草培养容器内， 密封容器口一个月。 0006 进一步地， 所。
14、述步骤 3) 中的液体接种方法具体过程如下 ： 接种菌的获得 ： 液体菌种用培养液 20ml 装入培养瓶封口， 将培养瓶加热到 120灭 菌 30 分钟， 超静台洁净、 灭菌后放入菌种 1mg， 摇床培养 ； 接种菌的稀释 ： 所述摇床培养 4 7 天后， 依据摇菌质量， 稀释 40 60 倍后用于接 种。 0007 进一步地， 所述培养基营养液配方如下 ： 蛋白胨 2 4g， KH2PO4 2 4g， MgSO4 1 3g， 复合维生素 B60 80mg， 水 1000 1200ml， 所述营养液 pH 值为 7.0 7.5。 0008 进一步地， 所述摇床培养的温度控制2123， 摇床晃动。
15、速度控制在每分钟60 180 次。 0009 进一步地， 所述液体菌种用培养液配方如下 ： 马铃薯 200 400g， 葡萄糖 20 40g， 蛋白胨 3 5g， KH2PO4 2 4g， MgSO4 1 3g， 复 合维生素 B60 80mg， 水 1000 1200ml， 所述营养液的 pH 值为 7.0-7.5。 0010 进一步地， 所述培养容器为透明的玻璃材料的酒容器。 0011 蛹虫草与野生冬虫夏草做比较， 除虫草酸、 腺苷、 虫草多糖、 SOD 酶和氨基酸等营养 成份量上具有相似性外， 最具精华的药效成份虫草素含量高出数倍， 具有天然冬虫夏草的 功效。现代科学论证蛹虫草不仅具有特。
16、殊的营养价值， 而且有明显的药用价值。其中尤以 虫草酸、 虫草素、 虫草多糖等多种生物活性物质的药用价值最为显著。 虫草酸可以显著地降 低颅压， 促进机体新陈代谢， 因而使脑溢血和脑血栓病症得到缓解。 虫草素是一种具有抗菌 活性的核苷类物质， 对核多聚腺苷酸聚合酶有很强的抑制作用。在 DNA 转录 mRNA 过程中使 mRNA成熟障碍， 抑制癌细胞的生长， 并有降血糖的作用。 虫草多糖是一种高度分枝的半乳甘 露聚糖， 它能促进淋巴细胞转化， 提高血清 IgG 的抗体含量和机体的免疫功能， 增强机体自 身抗癌抑癌的能力。本发明的改进方法显著提高了有效成分的含量， 更有效的降低了有害 物质含量。 。
17、0012 从上述可以看出， 申请人经过潜心研究， 对制备方法的具体参数进行了优化。 从下 面的对比试验可以看出， 取得了极大的进步， 因此取得了意想不到的技术效果。 特别是对于 加热温度、 避光室温度、 光照的控制， 本发明的方法是非常精确的。 从上述的改变来看， 这些 参数的改变并非通过简单的试验即可完成的。 0013 本发明一个目的是提供一种蛹虫草酒， 它是由上述生长中蛹虫草酒等制成。 0014 在一个更优选的实施方案中， 本发明提供一种蛹虫草酒， 它由上述生长中蛹虫草 酒以及在 42-70 酒精度的白酒中泡制的茯苓、 连翘和甘蓝混合而成。 0015 在一个更优选的实施方案中， 本发明提供。
18、一种蛹虫草酒， 它由上述生长中蛹虫草 酒以及在 42-70 酒精度的白酒中泡制的茯苓、 连翘和甘蓝混合而成， 其成分和重量份数如 说 明 书 CN 104450434 A 5 3/6 页 6 下 ： 生长中蛹虫草酒 ： 200-400 茯苓 ： 5-20 枸杞子 ： 5-10 连翘 ： 5-10 甘蓝 ： 3-8 白酒 ： 80-200。 0016 本发明的蛹虫草酒的制备方法， 包括以下步骤 ： 将所述重量的茯苓、 连翘和甘蓝盛 入容器中， 用所述量的白酒浸泡 5-15 天， 然后将其与所述生长中蛹虫草酒分别进行过滤， 合并滤液， 即可得到本发明的蛹虫草酒。 0017 患者可以根据自身的情况，。
19、 每日服用本发明的蛹虫草酒 1-3 次， 每次 5-30 ml， 但 一般不应超过每日 50 ml。 0018 与现有技术比较， 本发明的蛹虫草酒药味少、 制备方法简单， 服用方便、 疗程短， 见 效快、 不易复发、 无副作用等优点 ； 对高血压、 脑血栓等心脑血管疾病有缓解作用 ； 长期服 用能强身健体、 提高机体免疫力， 有防癌抗癌、 延年益寿的作用。 0019 具体实施方式 ： 以下用实施例对本发明进行进一步说明， 但本发明并不仅限于此。 0020 实施例 1 生长中蛹虫草酒的制备 1) 培养基封装将大米 25g， 蚕蛹或蚕蛹蛹粉 0.8g， 培养基营养液 20-40ml 装入培养容 器。
20、。 其中， 也可以使用其它粮食来替代大米或小麦 ； 培养容器优选为透明培养容器。 0021 所述培养基营养液配方如下 ： 蛋白胨 3g KH2PO4 3g MgSO4 2g 复合维生素 B 70 mg 水 1200 ml pH 7.0 2) 高温灭菌将密闭容器放入高压灭菌罐内， 加热温度控制为 100， 压力 1.0 1.2MPa， 蒸发 12 小时 ； 3) 接种、 暗培养高温灭菌后放入无菌间快速冷却， 温度降至 5 10。因液体接种生 长迅速， 将下述方法得到的液体菌种放入培养容器接种。 接种后的培养容器送入避光室， 温 度 22， 湿度 65 70， 经过 3-4 天， 培养基表面布满菌。
21、丝， 菌丝侵透培养基。 0022 采用液体接种方法如下 ： 接种菌的获得 ： 液体培养液配制封口 121灭菌 30 分钟超静台洁净、 灭菌后 接菌种摇床培养 ( 温度控制 21 23， 速度控制在每分钟 60 一 180 次 )， 4 7 天后供 接种培养容器。液体菌种用培养液配方 ： 马铃薯 300 g 葡萄糖 30 g 蛋白胨 4g 说 明 书 CN 104450434 A 6 4/6 页 7 KH2PO4 3g MgSO4 2g 复合维生素 B 70 mg 水 1200 ml pH 7.0 摇床速度相对固定、 可根据菌液生长情况， 如浓稠度、 接种需要适当调整摇床转速。 0023 接种菌。
22、的稀释 ： 液体培养的接种菌， 依据摇菌质量， 稀释4060倍后用于接种。 0024 4) 从菌丝到子实体的生长将步骤 3) 的接种后的虫草菌种接种培养容器放入虫 草培养间进行虫草菌丝培养， 按照虫草子实体的生长条件， 培养间给予适当的营养、 温度、 水分、 湿度、 空气、 酸碱度等条件， 培养容器口薄膜刺 3 6 个小孔， 增加通气量， 控温 19 22， 空气相对湿度控制在 85 90， 在第 6-12 天， 光的强度达到 400LKS， 给光 12 小时 / 天 ； 12-18 天， 光的强度达到 1000-1200LKS， 给光增加到 12-24 小时， 12 小时内 22-23 度生。
23、 长， 另 12 小时内 16-18 度生长， 18 天以后 400-600LKS， 19-21的温度下进行培养， 每日 12 小时光照， 通氧， 湿度80%， 50-60天左右采收， 培养容器中的虫草子实体即可长到10公分左 右， 子实体顶端出现小刺状子囊壳发生， 虫草的根与培养容器底部长在一起， 此时营养液也 基本用完。 0025 5) 装酒。因虫草培养间可保证接种培养容器的无菌污染， 所以长成虫草后的培养 容器无需再灭菌， 只需用白酒冲洗掉内部的营养液残留即可， 也可以使用蒸馏水或纯水进 行冲洗。将白酒装入培养容器内， 密封容器口 7 天以上。优选的， 选择高于 50的白酒进行 灌装 ；。
24、 优选地， 选择密封容器口两周以上。 0026 对比例 1 按相同的原料， 按照 ZL201310425772.5 的方法制备生长中蛹虫草酒 （对照品） ， 与实施 例 1 的生长中蛹虫草酒进行比较， 测定其中有效成分的含量。本发明对药效物质的检测方 法采用已知的方法， 如通过比色法 ( 高碘酸钾 ) 测定虫草酸的含量、 通过 HPLC 测定虫草素 的含量和虫草腺苷的含量等。 0027 表 1 ： 理化指标 指标实施例 1 对照品 虫草素， mg/L40.4633.25 虫草酸， mg/L200.56166.78 虫草腺苷， mg/L35.8726.15 氰化物 （按 HCN 计） ， mg/。
25、L5.897.94 铅 （按 Pb 计） ， mg/L0.150.34 甲醇， g/L0.250.42 从表 1 可以看出， 上述两种制备方法获得的蛹虫草配制酒其虫草素、 虫草酸和腺苷含 量均高于一般市售虫草保健酒， 然而， 经过本发明的改进， 尽管步骤不变， 只是在具体条件 上进行了调整， 但是起到了意想不到的技术效果。 有效物质虫草酸、 虫草素和虫草腺苷都有 了显著的提高， 而有害物质的含量也得到更显著的降低， 从而证明了本发明的改进的制备 方法的优越性。不但提高了产品的药用和营养价值， 更进一步增强了产品的安全性。 0028 实施例 2 实施例 1 的生长中蛹虫草酒 ： 200 g 说 。
26、明 书 CN 104450434 A 7 5/6 页 8 茯苓 ： 10 g 枸杞子 ： 5 g 连翘 ： 10 g 甘蓝 ： 5 g 58 度白酒 ： 100 g 将茯苓、 连翘和甘蓝盛入容器中， 用 100 g 白酒浸泡 10 天， 然后将其与 200 g 生长中蛹 虫草酒分别进行过滤， 合并滤液， 即可得到本发明的蛹虫草酒。 0029 实施例 3 实施例 1 的生长中蛹虫草酒 ： 300 g 茯苓 ： 10 g 枸杞子 ： 10 g 连翘 ： 5 g 甘蓝 ： 3 g 58 度白酒 ： 150 g 将茯苓、 连翘和甘蓝盛入容器中， 用 150 g 白酒浸泡 10 天， 然后将其与 300。
27、 g 生长中蛹 虫草酒分别进行过滤， 合并滤液， 即可得到本发明的蛹虫草酒。 0030 实施例 4 实施例 1 的生长中蛹虫草酒 ： 300 g 茯苓 ： 10 g 枸杞子 ： 5 g 连翘 ： 5 g 甘蓝 ： 5 g 58 度白酒 ： 200 g 将茯苓、 连翘和甘蓝盛入容器中， 用 200 g 白酒浸泡 10 天， 然后将其与 300 g 生长中蛹 虫草酒分别进行过滤， 合并滤液， 即可得到本发明的蛹虫草酒。 0031 实施例 4 张某， 2014 年 4 月开始出现乏力， 自汗、 头目眩晕、 面色萎黄， 时有畏寒， 自服西药， 未 见好转， 服用实施例1的蛹虫草酒20天后， 患者食欲大。
28、为改善， 精神好转， 自汗止， 脸色转红 润。 0032 实施例 5 郭女士， 30 岁， 2014 年 2 月产后， 开始出现虚弱， 面色萎黄， 自汗， 头目眩晕， 面色萎黄， 少气乏力及中虚胃痛， 便溏等症， 自服西药， 未见好转， 服用实施例 2 的蛹虫草酒 1 个月后， 患者精神好转， 自汗止， 红光满面， 中虚胃痛， 便溏症状已明显好转。 0033 实施例 6 姚某， 60岁， 2013年10月开始出现乏力， 自汗、 头目眩晕、 面色萎黄、 肾虚腰疼， 糖尿病， 不自服西药， 未见好转， 服用实施例 3 的蛹虫草酒 1 个月后， 患者食欲大为改善， 精神好转， 自汗止， 肾虚腰疼、 。
29、胃痛明显好转， 糖尿病也得到很好抑制， 脸色转红润。 0034 对比例 ： 取蛹虫草单用 ： 制备方法为将人工培养的蛹虫草 5 g 在容器中用 200g 的白酒浸泡 150 说 明 书 CN 104450434 A 8 6/6 页 9 天培养， 然后进行过滤， 得蛹虫草酒对比品 1。 0035 选取出现乏力、 自汗、 面色萎黄、 胃痛等症状患者 12 人， 分成两组， 每组 6 人， 分别 服用对比品1和实施例2的蛹虫草酒， 对照组在服用1个月后， 都只有1-2人症状有所缓解， 其他人在 2 个月后有所缓解 ； 实施例 2 组在服用 1 个月后 4 人均有缓解， 且在 2 个月后 4 人 均症状消失或基本消失， 由此可见本发明的蛹虫草酒比单用蛹虫草酒见效更快， 疗效更好。 说 明 书 CN 104450434 A 9 。