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1、(10)申请公布号 CN 104122367 A (43)申请公布日 2014.10.29 CN 104122367 A (21)申请号 201410392911.3 (22)申请日 2014.08.12 G01N 31/16(2006.01) (71)申请人 山东百盛生物科技有限公司 地址 272100 山东省济宁市兖州经济开发区 西安西路 6 号 (72)发明人 高军 孔凡强 (74)专利代理机构 济南泉城专利商标事务所 37218 代理人 李桂存 (54) 发明名称 一种液体淀粉蛋白质含量快速检测技术 (57) 摘要 一种液体淀粉蛋白质含量快速检测技术, 包 括步骤 :(1) 消解 : 。
2、先用移液管吸取 10 毫升搅拌 均匀的液体玉米淀粉, 移入 500 毫升凯氏烧瓶或 300 毫升定氮试管中, 依次加入 10 毫升硫酸铜、 硫酸钾混合催化剂和 25 毫升浓硫酸和 3 粒玻璃 珠 ;(2)蒸馏 : 待分解液冷却后, 用蒸馏水冲洗 玻璃漏斗及烧瓶瓶颈, 并稀释至 200 毫升, 将凯 氏烧瓶移于蒸馏架上, 在冷凝管下端接 500 毫升 锥形瓶作接收器 ;(3)滴定 : 将锥形瓶内的液体 用 0.1mol/L 硫酸标准溶液滴定, 使溶液由蓝绿 色变为灰紫色, 即为终点 ;(4) 同时做空白试验 ; (5) 计 算 : X=(V1-V0)C0.0146.25 / m(1-X1) 10。
3、0。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 3 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书3页 (10)申请公布号 CN 104122367 A CN 104122367 A 1/1 页 2 1. 一种液体淀粉蛋白质含量快速检测技术, 其特征是, 包括如下操作步骤 : (1) 消解 : 先用移液管吸取 10 毫升搅拌均匀的液体玉米淀粉, 移入 500 毫升凯氏烧瓶 或 300 毫升定氮试管中, 依次加入 10 毫升硫酸铜、 硫酸钾混合催化剂和 25 毫升浓硫酸和 3 粒玻璃珠, 轻轻摇动烧瓶, 使样品完全湿润 ; 然后将凯氏烧瓶以 45。
4、 度角斜放于支架上, 瓶口 盖以玻璃漏斗, 用电炉开始缓慢加热, 当泡沫消失后, 强热至沸 ; 待瓶壁不附有炭化物时, 且 瓶内液体为澄清浅绿色后, 继续加热 30 min, 使其完全分解, 以上操作应在通风橱内进行 ; (2) 蒸馏 : 待分解液冷却后, 用蒸馏水冲洗玻璃漏斗及烧瓶瓶颈, 并稀释至 200 毫升, 将凯氏烧瓶移于蒸馏架上, 在冷凝管下端接 500 毫升锥形瓶作接收器, 瓶内预先注入 2硼 酸溶液50.0毫升及混合指示液10滴 ; 将冷凝管的下口插入锥形瓶的液体中, 然后沿凯氏烧 瓶颈壁缓慢加入40氢氧化钠溶液70100毫升, 打开冷却水, 立即连接蒸馏装置, 轻轻摇 动凯氏烧。
5、瓶, 使溶液混合均匀, 加热蒸馏, 至馏出液为原体积的 3/5 时停止加热, 使冷凝管 下口离开锥形瓶, 用 20 毫升蒸馏水水冲洗冷凝管, 洗液并入锥形瓶中 ; (3) 滴定 : 将锥形瓶内的液体用 0.1 mol/L 硫酸标准溶液滴定, 使溶液由蓝绿色变为灰 紫色, 即为终点 ; (4) 同时做空白试验 ; (5) 计算 : X=(V1-V0 )C0.0146.25 /m(1-X1) 100 ; 式中 : X 为样品中蛋白质的含量, 单位为 ; V1为滴定样品时消耗 0.05 mol/L 硫酸标准溶液的体积, 单位为 mL ; V0为空白试验时消耗 0.05 mol/L 硫酸标准溶液的体积。
6、, 单位为 mL ; C 为硫酸标准溶液的浓度, 单位为 mol/L ; M 为样品质量, 单位为 g ; X1为样品的水分, 单位为 ; 6.25 为氮换算成蛋白质的系数 ; 0.014 为 1mL、 1mol/L 盐酸标准溶液, 相当于氮的质量, 单位为 g。 2. 根据权利要求 1 所述的一种液体淀粉蛋白质含量快速检测技术, 其特征是, 所述操 作中同一样品两次滴定所消耗硫酸溶液体积之差应小于 0.1 mL, 最终结果保留二位小数, 两次平行试样的平均值即为测量结果。 权 利 要 求 书 CN 104122367 A 2 1/3 页 3 一种液体淀粉蛋白质含量快速检测技术 技术领域 00。
7、01 本发明涉及一种蛋白质含量检测技术, 尤其涉及一种液体淀粉蛋白质含量快速检 测技术。 背景技术 0002 对于液体淀粉蛋白质含量的检测, 传统国标方法耗时长、 耗能高, 劳动强度大。 发明内容 0003 本发明的目的是提供一种耗时短、 耗能低、 劳动强度小的液体淀粉蛋白质含量快 速检测技术。 0004 为实现上述目的, 本发明采用的技术方案为 : 一种液体淀粉蛋白质含量快速检测技术, 其特征是, 包括如下操作步骤 : (1) 消解 : 先用移液管吸取 10 毫升搅拌均匀的液体玉米淀粉, 移入 500 毫升凯氏烧瓶 或 300 毫升定氮试管中, 依次加入 10 毫升硫酸铜、 硫酸钾混合催化剂。
8、和 25 毫升浓硫酸和 3 粒玻璃珠, 轻轻摇动烧瓶, 使样品完全湿润 ; 然后将凯氏烧瓶以 45 度角斜放于支架上, 瓶口 盖以玻璃漏斗, 用电炉开始缓慢加热, 当泡沫消失后, 强热至沸 ; 待瓶壁不附有炭化物时, 且 瓶内液体为澄清浅绿色后, 继续加热 30 min, 使其完全分解, 以上操作应在通风橱内进行 ; (2) 蒸馏 : 待分解液冷却后, 用蒸馏水冲洗玻璃漏斗及烧瓶瓶颈, 并稀释至 200 毫升, 将凯氏烧瓶移于蒸馏架上, 在冷凝管下端接 500 毫升锥形瓶作接收器, 瓶内预先注入 2硼 酸溶液50.0毫升及混合指示液10滴 ; 将冷凝管的下口插入锥形瓶的液体中, 然后沿凯氏烧 。
9、瓶颈壁缓慢加入40氢氧化钠溶液70100毫升, 打开冷却水, 立即连接蒸馏装置, 轻轻摇 动凯氏烧瓶, 使溶液混合均匀, 加热蒸馏, 至馏出液为原体积的 3/5 时停止加热, 使冷凝管 下口离开锥形瓶, 用 20 毫升蒸馏水水冲洗冷凝管, 洗液并入锥形瓶中 ; (3) 滴定 : 将锥形瓶内的液体用 0.1 mol/L 硫酸标准溶液滴定, 使溶液由蓝绿色变为灰 紫色, 即为终点 ; (4) 同时做空白试验 ; (5) 计算 : X=(V1-V0 )C0.0146.25 /m(1-X1) 100 ; 式中 : X 为样品中蛋白质的含量, 单位为 ; V1为滴定样品时消耗 0.05 mol/L 硫酸。
10、标准溶液的体积, 单位为 mL ; V0为空白试验时消耗 0.05 mol/L 硫酸标准溶液的体积, 单位为 mL ; C 为硫酸标准溶液的浓度, 单位为 mol/L ; M 为样品质量, 单位为 g ; X1为样品的水分, 单位为 ; 6.25 为氮换算成蛋白质的系数 ; 0.014 为 1mL、 1mol/L 盐酸标准溶液, 相当于氮的质量, 单位为 g。 说 明 书 CN 104122367 A 3 2/3 页 4 0005 根据所述的一种液体淀粉蛋白质含量快速检测技术, 其特征是, 所述操作中同一 样品两次滴定所消耗硫酸溶液体积之差应小于 0.1 mL, 最终结果保留二位小数, 两次平。
11、行 试样的平均值即为测量结果。 0006 本发明所述技术适用于液体玉米淀粉中蛋白质含量的测定, 在传统国标方法耗时 长、 耗能高的情况下, 经过多次创新, 研发出了本发明所述技术, 该技术耗时短、 能与国标传 统方法准确度达到一致, 节省了工作时间, 减轻了劳动强度, 能更好更快的提供数据, 指导 好生产。 具体实施方式 0007 下面结合具体实施例对本发明作进一步描述 : 一种液体淀粉蛋白质含量快速检测技术, 包括如下操作步骤 : (1) 消解 : 先用移液管吸取 10 毫升搅拌均匀的液体玉米淀粉, 移入 500 毫升凯氏烧瓶 或 300 毫升定氮试管中, 依次加入 10 毫升硫酸铜、 硫酸。
12、钾混合催化剂和 25 毫升浓硫酸和 3 粒玻璃珠, 轻轻摇动烧瓶, 使样品完全湿润 ; 然后将凯氏烧瓶以 45 度角斜放于支架上, 瓶口 盖以玻璃漏斗, 用电炉开始缓慢加热, 当泡沫消失后, 强热至沸 ; 待瓶壁不附有炭化物时, 且 瓶内液体为澄清浅绿色后, 继续加热 30 min, 使其完全分解, 以上操作应在通风橱内进行 ; (2) 蒸馏 : 待分解液冷却后, 用蒸馏水冲洗玻璃漏斗及烧瓶瓶颈, 并稀释至 200 毫升, 将凯氏烧瓶移于蒸馏架上, 在冷凝管下端接 500 毫升锥形瓶作接收器, 瓶内预先注入 2硼 酸溶液50.0毫升及混合指示液10滴 ; 将冷凝管的下口插入锥形瓶的液体中, 然。
13、后沿凯氏烧 瓶颈壁缓慢加入40氢氧化钠溶液70100毫升, 打开冷却水, 立即连接蒸馏装置, 轻轻摇 动凯氏烧瓶, 使溶液混合均匀, 加热蒸馏, 至馏出液为原体积的 3/5 时停止加热, 使冷凝管 下口离开锥形瓶, 用 20 毫升蒸馏水水冲洗冷凝管, 洗液并入锥形瓶中 ; (3) 滴定 : 将锥形瓶内的液体用 0.1 mol/L 硫酸标准溶液滴定, 使溶液由蓝绿色变为灰 紫色, 即为终点 ; (4) 同时做空白试验 ; (5) 计算 : X=(V1-V0 )C0.0146.25 /m(1-X1) 100 ; 式中 : X 为样品中蛋白质的含量, 单位为 ; V1为滴定样品时消耗 0.05 mo。
14、l/L 硫酸标准溶液的体积, 单位为 mL ; V0为空白试验时消耗 0.05 mol/L 硫酸标准溶液的体积, 单位为 mL ; C 为硫酸标准溶液的浓度, 单位为 mol/L ; M 为样品质量, 单位为 g ; X1为样品的水分, 单位为 ; 6.25 为氮换算成蛋白质的系数 ; 0.014 为 1mL、 1mol/L 盐酸标准溶液, 相当于氮的质量, 单位为 g。 0008 在本实施例中, 操作中同一样品两次滴定所消耗硫酸溶液体积之差应小于 0.1 mL, 最终结果保留二位小数, 两次平行试样的平均值即为测量结果。 0009 本发明公开了一种蛋白质快速检测实验技术, 使用的装置包括定氮。
15、仪或凯氏定 氮、 1 千瓦电炉或 8 孔消化炉、 10 毫升移液管或刻度吸管 (天玻 A 级) 、 500 毫升凯氏烧瓶或 说 明 书 CN 104122367 A 4 3/3 页 5 300 毫升定氮试管, 以及 500 毫升锥形瓶、 300 毫升冷凝管等仪器设备, 该技术所需设备少, 实验装置结构简单, 投资小, 能耗低, 检测结果稳定, 生产效率高, 经济效益显著。 0010 对于液体淀粉蛋白质含量的检测, 本发明所述技术与传统方法的对比表如下 : 注 : 电炉 + 干燥箱电耗 : 8kw3h+2.2kw1h=26.2kwh 从 上 表 可 以 得 出,传 统 方 法 每 个 实 验 消。
16、 耗 :电 炉 + 干 燥 箱 电 耗 : 1kw3h+2.2kw1h+0.18kw0.25h =5.245kwh0.75 元 / kwh=3.94 元。 0011 电炉 1000W, 用时 3.0h, 干燥箱 2200W, 用时 6min, 真空泵 180W, 用时 15min, 滤纸和 布氏漏斗消耗忽落不计。 0012 从上表还可以得出, 本发明所述新技术每个实验消耗 : 8 孔消化炉 + 定氮仪电耗 : 1.3kw/82.0h+2.1kw0.1h=0.535kwh, 0.535kwh0.75 元 /kwh=0.40 元 (按 8 个样品对 比) 。 0013 消化炉 1300W, 用时 2.0h, 定氮仪 2100W, 用时 6min, 实验消耗 0.03975 元, 人均功 效提高 50%。 0014 综合上述内容, 每年可节约 (3.94-0.4) 20330=23364.0 元 每天按20个样品计算, 人均功效提高1倍, 人均功效提高可节省0.25个工时/天=17.5 元, 每年可节约工时费 17.5 元 330=5775 元, 每个样品可节省工时费 : 17.5 元 20 个样 品 =0.675 元, 每 8 小时工资按 60 元计算, 每年可节约 23364.0 元 +5775 元 =29139 元。 说 明 书 CN 104122367 A 5 。