一种磁性纳米微粒及其制备方法.pdf

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摘要
申请专利号:

CN201410591977.5

申请日:

2014.10.29

公开号:

CN104306970A

公开日:

2015.01.28

当前法律状态:

撤回

有效性:

无权

法律详情:

发明专利申请公布后的视为撤回IPC(主分类):A61K 47/36申请公布日:20150128|||实质审查的生效IPC(主分类):A61K 41/00申请日:20141029|||公开

IPC分类号:

A61K41/00; A61K47/26; A61K47/04; A61P35/00; H01F1/42

主分类号:

A61K41/00

申请人:

华中科技大学同济医学院附属协和医院

发明人:

夏泽锋; 王国斌; 罗艳; 陶凯雄; 肖勇; 蔡开琳; 帅晓明; 王继亮; 翟荣林; 蔡明; 汪庚; 李桉树

地址:

430022 湖北省武汉市解放大道1277号

优先权:

专利代理机构:

武汉楚天专利事务所 42113

代理人:

雷速

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内容摘要

本发明提供了一种新型磁性纳米微粒的制备方法,该方法通过简单,快速的制备过程,获得有效粒径小、粒径分布窄以及磁响应性高的高性能磁性纳米微粒,该微粒能够较好的与质粒DNA相结合,起到基因或药物载体的作用,在外加磁场的导向下,可高度浓集、作用于肿瘤细胞,具有靶向治疗肿瘤的临床应用价值。

权利要求书

权利要求书
1.  一种磁性纳米微粒,其特征在于具有以下理化性质:微粒多呈球形或椭圆形,有效粒径为93.1±2.2nm,半峰宽为26.7±1.3nm,Zeta电位为正,分散度为0.083±0.011,在外加场强为104Oe、温度为18℃的条件下微粒的磁响应强度为26.0±1.1emu/g,撤除磁场时剩磁为零。

2.  权利要求1所述的磁性纳米微粒的制备方法,包括以下步骤:
步骤一:在通入氮气的同时,按水合氯化铁(FeCl3·6H2O):水合氯化亚铁(FeCl2·4H2O):葡聚糖T-10(Dextran T-10)质量比:63:25:400溶于20%葡聚糖溶液中;
步骤二:溶液经超声波,功率200瓦作用3分钟后,加大功率至325瓦,按体积比6%,逐滴滴入25%~30%氨水(NH3·H2O);
步骤三:调整超声波功率至300瓦,持续模式作用于反应液30分钟,脉冲模式作用30分钟;
步骤四:冷却后得到黑色胶体混悬液;
步骤五:将所得黑色胶体混悬液置于5×103高斯磁场中作用1h,即得葡聚糖四氧化三铁磁性纳米微粒。

说明书

说明书一种磁性纳米微粒及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种医药载体材料,更具体地说它是一种葡聚糖四氧化三铁磁性纳米材料,本发明还涉及这种磁性纳米材料的制备方法和效应鉴定。
背景技术
随着纳米技术、生物工程技术的不断进步,药物/核酸转运系统已经发展到靶向转运系统。该系统将能携带效应分子,主动或被动地转运到机体的靶部位发挥治疗作用,而对其它部位的毒副作用很低。其中,在四氧化三铁晶粒表面包附一层生物大分子(如蛋白质,脂质体,多糖等),能够得到良好的生物相容性和生物安全性。且这种磁性微球具有磁响应性,在外加梯度磁场作用下能够趋向运动,可以作为携带药物或核酸分子的载体骨架进行肿瘤的磁控靶向治疗。然而,由于相关的制备方法均较复杂、成本较高,不能较好地兼顾粒径的大小和磁响应性高低的关系,尚没有形成成熟统一的制备方法。因此,探讨简单易行、成本低廉的方法,开发粒径微小、磁响应性高的葡聚糖四氧化三铁磁性纳米材料。并将该磁性纳米微粒与基因分子相结合,在外加磁场的导向下,高度浓集、作用于肿瘤细胞,是一种有效的靶向治疗肿瘤的方法。
发明内容
本发明的任务是提供一种磁性纳米微粒及其制备方法,本发明要解决的技术问题是:克服传统磁性纳米材料造价昂贵,颗粒不足的缺点,研发磁响应性强、粒径小且分布均一的葡聚糖四氧化三铁磁性纳米材料。并系统总结提出该材料制备方法。同时给出其与DNA分子的结合效率,以及在磁场导向下转染肿瘤细胞的能力的检测方法。
实现本发明的技术方案是:
本发明提供的磁性纳米微粒具有以下理化性质:微粒多呈球形或椭圆形,有效粒径为93.1±2.2nm,半峰宽为26.7±1.3nm,Zeta电位为正,分散度为0.083±0.011,在外加场强为104Oe、温度为18℃的条件下微粒的磁响应强度为26.0±1.1emu/g,撤除磁场时剩磁为零。
本发明提供的磁性纳米微粒的制备方法包括以下步骤:
步骤一:在通入氮气的同时,按水合氯化铁(FeCl3·6H2O):水合氯化亚铁(FeCl2·4H2O):葡聚糖T-10(Dextran T-10)质量比:63:25:400溶于20%葡聚糖溶液中;
步骤二:溶液经超声波,功率200瓦作用3分钟后,加大功率至325瓦,按体积比6%,逐滴滴入25%~30%氨水(NH3·H2O);
步骤三:调整超声波功率至300瓦,持续模式作用于反应液30分钟,脉冲模式作用30分钟;
步骤四:冷却后得到黑色胶体混悬液;
步骤五:将所得黑色胶体混悬液置于5×103高斯磁场中作用1h,即得葡聚糖四氧化三铁磁性纳米微粒。
在制备完成后,通过电镜观察分析,磁场下运动测定以及生物医学抑制肿瘤效应等检测方法评估制备颗粒质量及实用效应:该微粒有效粒径小、粒径分布窄以及磁响应性高,微粒能够较好的与质粒DNA相结合,起到基因载体的作用。在外加磁场的作用下,其早期转染效率得到显著提高,见图1、图2。
本发明方法制备的磁性纳米微粒具有以下理化性质:微粒多呈球形或椭圆形,有效粒径为93.1±2.2nm,半峰宽为26.7±1.3nm,Zeta电位为正,分散度为0.083±0.011,在外加场强为104Oe、温度为18℃的条件下微粒的磁响应强度为26.0±1.1emu/g,撤除磁场时剩磁为零。
本发明葡聚糖四氧化三铁磁性纳米材料具有如下优点:制备方法简单,采用一步法即可制成,成本低廉,有利于推广。微粒有效粒径小、粒径分布窄以及磁响应性高。微粒能够较好的与质粒DNA相结合,起到基因载体的作用。在外加磁场的作用下,其早期转染效率得到显著提高。
附图说明
图1为制备成品葡聚糖四氧化三铁磁性纳米颗粒电镜成像图;
图2为制备成品葡聚糖四氧化三铁磁性纳米颗粒光镜成像图。
具体实施方式
实施例1
制备葡聚糖四氧化三铁磁性纳米微粒
①、在通入氮气的同时,按水合氯化铁(FeCl3·6H2O):水合氯化 亚铁(FeCl2·4H2O):葡聚糖T-10(Dextran T-10)质量比:63:25:400溶于20%葡聚糖溶液中;
②、溶液经超声波,功率200瓦作用3分钟后,加大功率至325瓦,按体积比6%,逐滴滴入25%~30%氨水(NH3·H2O);
③、调整超声波功率至300瓦,持续模式作用于反应液30分钟,脉冲模式作用30分钟;
④、冷却后得到黑色胶体混悬液;
⑤、将所得黑色胶体混悬液置于5×103高斯磁场中作用1h,即得本发明葡聚糖四氧化三铁磁性纳米微粒。
在制备完成后,通过电镜观察分析,磁场下运动测定以及生物医学抑制肿瘤效应等检测方法评估制备颗粒质量及实用效应:该微粒有效粒径小、粒径分布窄以及磁响应性高,微粒能够较好的与质粒DNA相结合,起到基因载体的作用。在外加磁场的作用下,其早期转染效率得到显著提高,见图1、图2。

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1、(10)申请公布号 CN 104306970 A (43)申请公布日 2015.01.28 CN 104306970 A (21)申请号 201410591977.5 (22)申请日 2014.10.29 A61K 41/00(2006.01) A61K 47/26(2006.01) A61K 47/04(2006.01) A61P 35/00(2006.01) H01F 1/42(2006.01) (71)申请人 华中科技大学同济医学院附属协和 医院 地址 430022 湖北省武汉市解放大道 1277 号 (72)发明人 夏泽锋 王国斌 罗艳 陶凯雄 肖勇 蔡开琳 帅晓明 王继亮 翟荣林 蔡。

2、明 汪庚 李桉树 (74)专利代理机构 武汉楚天专利事务所 42113 代理人 雷速 (54) 发明名称 一种磁性纳米微粒及其制备方法 (57) 摘要 本发明提供了一种新型磁性纳米微粒的制备 方法, 该方法通过简单, 快速的制备过程, 获得有 效粒径小、 粒径分布窄以及磁响应性高的高性能 磁性纳米微粒, 该微粒能够较好的与质粒 DNA 相 结合, 起到基因或药物载体的作用, 在外加磁场的 导向下, 可高度浓集、 作用于肿瘤细胞, 具有靶向 治疗肿瘤的临床应用价值。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 2 页 附图 1 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申。

3、请 权利要求书1页 说明书2页 附图1页 (10)申请公布号 CN 104306970 A CN 104306970 A 1/1 页 2 1. 一种磁性纳米微粒, 其特征在于具有以下理化性质 : 微粒多呈球形或椭圆形, 有效 粒径为93.12.2nm, 半峰宽为26.71.3nm, Zeta电位为正, 分散度为0.0830.011, 在外 加场强为 104Oe、 温度为 18的条件下微粒的磁响应强度为 26.01.1emu/g, 撤除磁场时 剩磁为零。 2. 权利要求 1 所述的磁性纳米微粒的制备方法, 包括以下步骤 : 步 骤 一 : 在 通 入 氮 气 的 同 时, 按 水 合 氯 化 铁。

4、 (FeCl36H2O) : 水 合 氯 化 亚 铁 (FeCl24H2O) : 葡聚糖 T-10(Dextran T-10) 质量比 : 63:25:400 溶于 20葡聚糖溶液中 ; 步骤二 : 溶液经超声波, 功率 200 瓦作用 3 分钟后, 加大功率至 325 瓦, 按体积比 6, 逐滴滴入 25 30氨水 (NH3H2O) ; 步骤三 : 调整超声波功率至 300 瓦, 持续模式作用于反应液 30 分钟, 脉冲模式作用 30 分钟 ; 步骤四 : 冷却后得到黑色胶体混悬液 ; 步骤五 : 将所得黑色胶体混悬液置于 5103高斯磁场中作用 1h, 即得葡聚糖四氧化三 铁磁性纳米微粒。。

5、 权 利 要 求 书 CN 104306970 A 2 1/2 页 3 一种磁性纳米微粒及其制备方法 技术领域 0001 本发明涉及一种医药载体材料, 更具体地说它是一种葡聚糖四氧化三铁磁性纳米 材料, 本发明还涉及这种磁性纳米材料的制备方法和效应鉴定。 背景技术 0002 随着纳米技术、 生物工程技术的不断进步, 药物 / 核酸转运系统已经发展到靶向 转运系统。 该系统将能携带效应分子, 主动或被动地转运到机体的靶部位发挥治疗作用, 而 对其它部位的毒副作用很低。其中, 在四氧化三铁晶粒表面包附一层生物大分子 ( 如蛋白 质, 脂质体, 多糖等 ), 能够得到良好的生物相容性和生物安全性。且。

6、这种磁性微球具有磁 响应性, 在外加梯度磁场作用下能够趋向运动, 可以作为携带药物或核酸分子的载体骨架 进行肿瘤的磁控靶向治疗。然而, 由于相关的制备方法均较复杂、 成本较高, 不能较好地兼 顾粒径的大小和磁响应性高低的关系, 尚没有形成成熟统一的制备方法。 因此, 探讨简单易 行、 成本低廉的方法, 开发粒径微小、 磁响应性高的葡聚糖四氧化三铁磁性纳米材料。并将 该磁性纳米微粒与基因分子相结合, 在外加磁场的导向下, 高度浓集、 作用于肿瘤细胞, 是 一种有效的靶向治疗肿瘤的方法。 发明内容 0003 本发明的任务是提供一种磁性纳米微粒及其制备方法, 本发明要解决的技术问题 是 : 克服传统。

7、磁性纳米材料造价昂贵, 颗粒不足的缺点, 研发磁响应性强、 粒径小且分布均 一的葡聚糖四氧化三铁磁性纳米材料。并系统总结提出该材料制备方法。同时给出其与 DNA 分子的结合效率, 以及在磁场导向下转染肿瘤细胞的能力的检测方法。 0004 实现本发明的技术方案是 : 0005 本发明提供的磁性纳米微粒具有以下理化性质 : 微粒多呈球形或椭圆形, 有效粒 径为93.12.2nm, 半峰宽为26.71.3nm, Zeta电位为正, 分散度为0.0830.011, 在外加 场强为 104Oe、 温度为 18的条件下微粒的磁响应强度为 26.01.1emu/g, 撤除磁场时剩 磁为零。 0006 本发明。

8、提供的磁性纳米微粒的制备方法包括以下步骤 : 0007 步骤一 : 在通入氮气的同时, 按水合氯化铁 (FeCl36H2O) : 水合氯化亚铁 (FeCl24H2O) : 葡聚糖 T-10(Dextran T-10) 质量比 : 63:25:400 溶于 20葡聚糖溶液中 ; 0008 步骤二 : 溶液经超声波, 功率 200 瓦作用 3 分钟后, 加大功率至 325 瓦, 按体积比 6, 逐滴滴入 25 30氨水 (NH3H2O) ; 0009 步骤三 : 调整超声波功率至300瓦, 持续模式作用于反应液30分钟, 脉冲模式作用 30 分钟 ; 0010 步骤四 : 冷却后得到黑色胶体混悬液。

9、 ; 0011 步骤五 : 将所得黑色胶体混悬液置于 5103高斯磁场中作用 1h, 即得葡聚糖四氧 化三铁磁性纳米微粒。 说 明 书 CN 104306970 A 3 2/2 页 4 0012 在制备完成后, 通过电镜观察分析, 磁场下运动测定以及生物医学抑制肿瘤效应 等检测方法评估制备颗粒质量及实用效应 : 该微粒有效粒径小、 粒径分布窄以及磁响应性 高, 微粒能够较好的与质粒 DNA 相结合, 起到基因载体的作用。在外加磁场的作用下, 其早 期转染效率得到显著提高, 见图 1、 图 2。 0013 本发明方法制备的磁性纳米微粒具有以下理化性质 : 微粒多呈球形或椭圆形, 有 效粒径为93。

10、.12.2nm, 半峰宽为26.71.3nm, Zeta电位为正, 分散度为0.0830.011, 在 外加场强为 104Oe、 温度为 18的条件下微粒的磁响应强度为 26.01.1emu/g, 撤除磁场 时剩磁为零。 0014 本发明葡聚糖四氧化三铁磁性纳米材料具有如下优点 : 制备方法简单, 采用一步 法即可制成, 成本低廉, 有利于推广。微粒有效粒径小、 粒径分布窄以及磁响应性高。微粒 能够较好的与质粒 DNA 相结合, 起到基因载体的作用。在外加磁场的作用下, 其早期转染效 率得到显著提高。 附图说明 0015 图 1 为制备成品葡聚糖四氧化三铁磁性纳米颗粒电镜成像图 ; 0016 。

11、图 2 为制备成品葡聚糖四氧化三铁磁性纳米颗粒光镜成像图。 具体实施方式 0017 实施例 1 0018 制备葡聚糖四氧化三铁磁性纳米微粒 0019 、 在 通 入 氮 气 的 同 时, 按 水 合 氯 化 铁 (FeCl36H2O) : 水 合 氯 化 亚 铁 (FeCl24H2O) : 葡聚糖 T-10(Dextran T-10) 质量比 : 63:25:400 溶于 20葡聚糖溶液中 ; 0020 、 溶液经超声波, 功率200瓦作用3分钟后, 加大功率至325瓦, 按体积比6, 逐 滴滴入 25 30氨水 (NH3H2O) ; 0021 、 调整超声波功率至 300 瓦, 持续模式作用。

12、于反应液 30 分钟, 脉冲模式作用 30 分钟 ; 0022 、 冷却后得到黑色胶体混悬液 ; 0023 、 将所得黑色胶体混悬液置于 5103高斯磁场中作用 1h, 即得本发明葡聚糖四 氧化三铁磁性纳米微粒。 0024 在制备完成后, 通过电镜观察分析, 磁场下运动测定以及生物医学抑制肿瘤效应 等检测方法评估制备颗粒质量及实用效应 : 该微粒有效粒径小、 粒径分布窄以及磁响应性 高, 微粒能够较好的与质粒 DNA 相结合, 起到基因载体的作用。在外加磁场的作用下, 其早 期转染效率得到显著提高, 见图 1、 图 2。 说 明 书 CN 104306970 A 4 1/1 页 5 图 1 图 2 说 明 书 附 图 CN 104306970 A 5 。

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